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CN116172893A - 一种抗衰组合物及其应用 - Google Patents

一种抗衰组合物及其应用 Download PDF

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CN116172893A
CN116172893A CN202310269483.4A CN202310269483A CN116172893A CN 116172893 A CN116172893 A CN 116172893A CN 202310269483 A CN202310269483 A CN 202310269483A CN 116172893 A CN116172893 A CN 116172893A
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CN
China
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parts
aging
skin
aging composition
cream
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Application number
CN202310269483.4A
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龚德明
冯川
李夏
席川
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Guangzhou Liujin Scientific Research Co ltd
Wuhan Twenty Four Bridge Biotechnology Co ltd
Original Assignee
Guangzhou Liujin Scientific Research Co ltd
Wuhan Twenty Four Bridge Biotechnology Co ltd
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Publication date
Application filed by Guangzhou Liujin Scientific Research Co ltd, Wuhan Twenty Four Bridge Biotechnology Co ltd filed Critical Guangzhou Liujin Scientific Research Co ltd
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Abstract

本发明提供了一种抗衰组合物及其应用，所述抗衰组合物包括甲基硅烷醇甘露糖醛酸酯、羟丙基四氢吡喃三醇和鼠李糖。本发明的抗衰组合物各组分配伍合理，具有协同增效作用，不仅可以提高肌肤自身抗氧化能力，还能更好的维持细胞稳态，增加肌肤弹性，促进胶原蛋白合成，明显改善皮肤衰老状况。

Description

一种抗衰组合物及其应用
技术领域
本发明属于化妆品技术领域，具体涉及一种抗衰组合物及其应用。
背景技术
衰老是生命过程中不可避免的自然规律，而皮肤作为人体的第一道屏障，皮肤时时刻刻都在衰老老化，其弹性慢慢降低，并变得越来越薄、越来越脆弱和松弛，同时皮肤老化也会影响消除活性氧的防护体系，从而使自由基、活性氧影响DNA准确复制，机体修复功能下降。因此为了追求护肤效果更加好，越来越多的抗衰老护肤品受到人们的青睐。
CN112716866A公开了一种抗衰组合物及其制备方法和应用，所述抗衰组合物包括车前草提取物、车轴草提取物、柽柳茎叶提取物、春黄菊提取物和甘牛至叶提取物。该发明通过原料之间的协同作用，制备得到的抗衰组合物具有良好的自由基清除能力、抗炎能力和保湿能力，还具有促进胶原蛋白的合成和抑制色素沉积的功效，可以从多个方面发挥抗衰作用，效果显著；制备方法简单高效，应用价值广泛。
CN110833520A公开了一种抗衰组合物，该组合物包括以下质量份数的组分：海岸松树皮提取物20-25份、白芨根提取物10-15份、何首乌提取物8-12份、溶剂17-25份。该发明通过采用海岸松树皮提取物、白芨根提取物与何首乌提取物互相协同配合，有利于更好地促进人体对抗衰组合物中有效成分的吸收，有利于更好地清除自由基，从而有利于更好地延缓皮肤衰老的速度，使得抗衰组合物的抗衰老效果更显著，见效更快。
然而上述抗衰老化妆品仅是能起到预防作用，抗衰老功效十分有限，且其不能从根本上解决皮肤衰老问题。因此，如何提供一种更有效的抗衰老产品，已成为目前亟待解决的问题之一。
发明内容
针对现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种抗衰组合物及其应用。
为达到此发明目的，本发明采用以下技术方案：
第一方面，本发明提供了一种抗衰组合物，所述抗衰组合物包括甲基硅烷醇甘露糖醛酸酯、羟丙基四氢吡喃三醇和鼠李糖。
本发明中，所述甲基硅烷醇甘露糖醛酸酯作为有机硅的硅烷醇和源自褐藻类的海藻酸的甘露糖醛酸(Mannuronic Acid)结合的物质能够促进细胞再生、结缔组织的重组、刺激细胞更新和胶原蛋白的生成；所述羟丙基四氢吡喃三醇是一种具有抗衰老功效的木糖衍生物，可以激活黏多糖合成，促进生成透明质酸和胶原蛋白，提高真皮与表皮间的粘合度，促进受损组织再生，帮助维持真皮的弹性，预防皮肤老化，能有效锁住水分，具有良好的保湿效果；所述鼠李糖以低聚糖或者糖胺聚糖形式存在于植物、原核单细胞生物中，在人体内尚未发现鼠李糖及其衍生物，其可促进表皮的层粘连蛋白的表达，还可以促进基底膜的结构蛋白胶原蛋白Ⅳ的合成，三者相互配合，具有协同增效作用，不仅可以提高肌肤自身抗氧化能力，还能更好的维持细胞稳态，增加肌肤弹性，促进胶原蛋白合成，明显改善皮肤衰老状况。
优选地，所述甲基硅烷醇甘露糖醛酸酯、羟丙基四氢吡喃三醇和鼠李糖的质量比为(1-3):(1-3):(0.01-1)。
其中第一个“1-3”可以为1.2、1.5、1.8、2、2.2、2.5或2.8等；
第二个“1-3”可以为1.2、1.5、1.8、2、2.2、2.5或2.8等；
“0.01-1”可以为0.05、0.08、0.1、0.3、0.5、0.7或0.9等。
作为本发明的优选技术方案，所述甲基硅烷醇甘露糖醛酸酯、羟丙基四氢吡喃三醇和鼠李糖的质量比控制在(1-3):(1-3):(0.01-1)的范围内时，可以使组合物抗衰效果更加优异。
上述各项数值范围内的具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。
第二方面，本发明提供了一种如第一方面所述的抗衰组合物在制备化妆品中的应用。
优选地，所述化妆品包括精华霜、化妆水、乳液、面霜或面膜。
优选地，所述抗衰组合物在所述化妆品中的质量百分含量为1-30％，例如可以是2％、4％、5％、7％、9％、10％、12％、15％、18％、20％、22％、25％、27％或29％等，上述数值范围内的具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。
第三方面，本发明提供了一种精华霜，所述精华霜包括如第一方面所述的抗衰组合物、去离子水。
优选地，所述精华霜还包括保湿剂、增稠剂、抗氧化剂、润肤剂或乳化剂中的任意一种或至少两种的组合。
优选地，所述精华霜按重量份数计包括如第一方面所述的抗衰组合物1-30份、保湿剂1-20份、增稠剂0.1-1份、抗氧化剂0.1-1份、乳化剂1-5份、润肤剂2-15份、去离子水。
本发明的精华霜中通过抗衰组合物与其他组分的配合，既能够增加肌肤的营养，深层滋润肌肤，还具有抗氧化、防止衰老、紧致肌肤的效果。
本发明的精华霜中所述抗衰组合物的添加量可以为2份、4份、5份、6份、8份、10份、12份、15份、18份、20份、22份、25份或28份等；
所述保湿剂的添加量可以为1份、3份、5份、7份、9份、10份、12份、15份、17份或19份等；
所述增稠剂的添加量可以为0.2份、0.3份、0.4份、0.5份、0.6份、0.7份、0.8份或0.9份等；
所述抗氧化剂的添加量可以为0.2份、0.3份、0.4份、0.5份、0.6份、0.7份、0.8份或0.9份等；
所述乳化剂的添加量可以为1.5份、2份、2.5份、3份、3.5份、4份或4.5份等；
所述润肤剂的添加量可以为3份、4份、5份、6份、7份、8份、9份、10份、11份、12份、13份或14份等。
优选地，所述保湿剂包括丁二醇、丙二醇、1,2-戊二醇或透明质酸钠中的任意一种或至少两种的组合。
优选地，所述增稠剂包括卡波姆和/或黄原胶。
优选地，所述抗氧化剂包括视黄醇棕榈酸酯、对羟基苯乙酮或生育酚乙酸酯中的任意一种或至少两种的组合。
优选地，所述乳化剂包括山梨醇硬脂酸酯、山梨坦异硬脂酸酯、聚甘油-10肉豆蔻酸酯、聚山梨醇酯-60、氢化卵磷脂或植物甾醇类中的任意一种或至少两种的组合。
优选地，所述润肤剂包括角鲨烷、鲸蜡醇乙基己酸酯、聚二甲基硅氧烷、二异硬脂醇苹果酸酯、植物甾醇澳洲坚果油酸酯、霍霍巴籽油、稻胚芽油中的任意一种或至少两种的组合。
优选地，所述精华霜还包括皮肤调理剂。
优选地，所述皮肤调理剂按质量百分比计为所述精华霜总量的1-14％，例如可以为2％、3％、4％、5％、6％、7％、8％、9％、10％、11％、12％或13％等。
优选地，所述皮肤调理剂为可溶性胶原、十四烷基氨基丁酰缬氨酰胺基丁酸脲三氟乙酸盐、棕榈酰三肽-5、酵母菌溶胞物、柑橘果皮提取物、二棕榈酰羟脯氨酸、小球藻/白羽扇豆蛋白发酵产物、卡瓦胡椒叶/根/茎提取物、肌肽、水解蜂王浆蛋白、甜橙提取物、番红花提取物、姜花根提取物、迷迭香叶提取物和乳酸杆菌发酵溶胞产物的一种或多种组合。
本发明中，所述皮肤调理剂可有效减少因外界环境导致的皮肤脆弱敏感的状态，使所述精华霜可以通过强化皮肤屏障功能、修护角质屏障、修护免疫屏障等方面对皮肤的炎症反应和不适症状进行快速调节舒缓，进而使皮肤维持稳定的健康状态。
优选地，所述精华霜还包括pH调节剂、防腐剂或芳香剂中的任意一种或至少两种的组合。
上述各项数值范围内的具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。
第四方面，本发明提供了一种如第三方面所述的精华霜的制备方法，所述制备方法包括：
将第一方面所述的抗衰组合物在去离子水中溶解后，混合搅拌，得到所述精华霜。
优选地，所述制备方法包括：
(1)将保湿剂和增稠剂加入去离子水，搅拌至完全溶解，得水相液；
(2)向步骤(1)所得水相液中依次加入乳化剂、抗氧化剂、润肤剂、如第一方面所述的抗衰组合物，混合均质后得到所述精华霜。
优选地，步骤(1)所述搅拌的温度为80-85℃，例如可以为80℃、81℃、82℃、83℃、84℃或85℃等。
优选地，步骤(1)所述溶解后还需进行静置，所述静置的时间为15-30min，例如可以为16min、18min、20min、22min、24min、26min或28min等。
优选地，步骤(2)所述混合均质的温度为75-85℃(例如可以为76℃、77℃、78℃、79℃、80℃、81℃、82℃、83℃或84℃等)，时间为5-10min(例如可以为5min、6min、7min、8min、9min或10min等)；
优选地，步骤(2)还包括加入皮肤调理剂、pH调节剂、防腐剂或芳香剂中的任意一种或至少两种的组合。
上述各项数值范围内的具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。
与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：
(1)本发明的抗衰组合物各组分配伍合理，具有协同增效作用，具有协同增效作用，不仅可以提高肌肤自身抗氧化能力，还能更好的维持细胞稳态，增加肌肤弹性，促进胶原蛋白合成，明显改善皮肤衰老状况。
(2)本发明的精华霜通过所述抗衰组合物与其他组分的配合，既能够增加肌肤的营养，深层滋润肌肤，还具有抗氧化、防止衰老、紧致肌肤的效果。
(3)本发明的精华霜可有效减少因外界环境导致的皮肤脆弱敏感的状态，通过皮肤调理剂可强化皮肤屏障功能、修护角质屏障、修护免疫屏障等方面对皮肤的炎症反应和不适症状进行快速调节舒缓，进而使皮肤维持稳定的健康状态。
具体实施方式
为更进一步阐述本发明所采取的技术手段及其效果，以下结合本发明的优选实施例来进一步说明本发明的技术方案，但本发明并非局限在实施例范围内。
本发明实施例中所述甲基硅烷醇甘露糖醛酸酯为购买自EXSYMOL SAM公司的ALGISIUMC；所述羟丙基四氢吡喃三醇为购买自广州同隽医药科技有限公司的
Figure BDA0004134155760000061
所述鼠李糖为购买自EXSYMOL SAM公司的SIRHAMNOSE。
其余原料只要购买自正规经销商均可使用。
实施例1
本实施例提供一种抗衰组合物，所述抗衰组合物由以下制备方法制备得到：将2份的甲基硅烷醇甘露糖醛酸酯、2份的羟丙基四氢吡喃三醇和0.5份的鼠李糖混合均质后得到所述抗衰组合物。
实施例2
本实施例提供一种抗衰组合物，所述抗衰组合物由以下制备方法制备得到：将1份的甲基硅烷醇甘露糖醛酸酯、3份的羟丙基四氢吡喃三醇和0.1份的鼠李糖混合均质后得到所述抗衰组合物。
实施例3
本实施例提供一种抗衰组合物，所述抗衰组合物由以下制备方法制备得到：将3份的甲基硅烷醇甘露糖醛酸酯、1份的羟丙基四氢吡喃三醇和0.8份的鼠李糖混合均质后得到所述抗衰组合物。
实施例4
本实施例提供一种抗衰组合物，所述抗衰组合物由以下制备方法制备得到：将3.5份的甲基硅烷醇甘露糖醛酸酯、0.5份的羟丙基四氢吡喃三醇和0.5份的鼠李糖混合均质后得到所述抗衰组合物。
实施例5
本实施例提供一种抗衰组合物，所述抗衰组合物由以下制备方法制备得到：将0.5份的甲基硅烷醇甘露糖醛酸酯、3.5份的羟丙基四氢吡喃三醇和0.5份的鼠李糖混合均质后得到所述抗衰组合物。
实施例6
本实施例提供一种抗衰组合物，所述抗衰组合物由以下制备方法制备得到：将1.5份的甲基硅烷醇甘露糖醛酸酯、1.5份的羟丙基四氢吡喃三醇和1.5份的鼠李糖混合均质后得到所述抗衰组合物。
对比例1
本实施例提供一种抗衰组合物，所述抗衰组合物由以下制备方法制备得到：将2.25份的甲基硅烷醇甘露糖醛酸酯和2.25份的羟丙基四氢吡喃三醇混合均质后得到所述抗衰组合物。
对比例2
本实施例提供一种抗衰组合物，所述抗衰组合物由以下制备方法制备得到：将3.6份的羟丙基四氢吡喃三醇和0.9份的鼠李糖混合均质后得到所述抗衰组合物。
对比例3
本实施例提供一种抗衰组合物，所述抗衰组合物由以下制备方法制备得到：将3.6份的甲基硅烷醇甘露糖醛酸酯和0.9份的鼠李糖混合均质后得到所述抗衰组合物。
应用例1
本应用例制备一种精华霜，其配方如下：
Figure BDA0004134155760000081
Figure BDA0004134155760000091
其制备方法为：
(1)将保湿剂、增稠剂加入去离子水，在83℃下搅拌至完全溶解，静置20min后得水相液；
(2)向步骤(1)所得水相液中加入乳化剂、抗氧化剂、实施例1得到的抗衰组合物、皮肤调理剂，在80℃下混合均质8min，即得所述精华霜。
应用例2-6
本应用例提供了五种精华霜，其配方与应用例1的区别仅在于将实施例1的抗衰组合物分别替换为添加量相同的实施例2-6的抗衰组合物，其他条件均保持不变，制备方法参照应用例1。
应用例7
本应用例提供了一种精华霜，其配方与应用例1的区别仅在于不包含皮肤调理剂，其减少量由去离子水补足，其他条件均保持不变。其制备方法参照应用例1。
对比应用例1-3
本应用例提供了三种精华霜，其配方与应用例1的区别仅在于将实施例1的抗衰组合物分别替换为添加量相同的对比例1-3的抗衰组合物，其他条件均保持不变。其制备方法参照应用例1。
对比应用例4
本应用例提供了一种精华霜，其配方与应用例1的区别仅在于不含有抗衰组合物这一成分，其减少量由去离子水补足，其他条件均保持不变。其制备方法参照应用例1。
试验例1抗衰老功效测试
测试样品：将实施例1-6提供的组合物和对比例1-3提供的组合物分别加入去离子水中，稀释至浓度为10％。
具体测试方法如下所示：
(1)对金属蛋白酶(MMP-1)表达的抑制率：
测试原理：皮肤老化的主要原因之一是真皮层的结构发生了改变。由于一些外界因素作用，激活体内的基质金属蛋白酶(MMPs)，可导致皮肤真皮中支撑皮肤结构的胶原蛋白和弹性蛋白被过度降解，从而使皮肤出现皱缩、无弹性等衰老症状。金属蛋白酶MMP-1又称胶原酶-1，可降解Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅶ和X型胶原明胶及蛋白多糖。通过测试样品对MMP-1的抑制率来评估这些样品的抗衰老效果；
测试方法：将成纤维细胞接种到12孔细胞培养板每个孔含有0.75×105个细胞，并且在无血清培养基中饥饿培养24h。用PBS冲洗经饥饿培养的细胞，并且用蓝光处理。然后，在48h内，向细胞中加入测试样品2次。用试剂盒(BIOTRAK，RPN2610)测量培养基中分离的MMP-1。通过计算MMP-1的表达抑制率来评估抗衰老功效的强弱；
计算公式如下：抑制率＝(M0-M1)/M0×100％；
其M0为未添加测试样品，但经蓝光照射后MMP-1的表达量，M1为添加测试样品并经蓝光照射后MMP-1的表达量；
(2)弹性蛋白酶活性抑制功效的测定
测试原理：皮肤老化的主要原因之一是真皮层的结构发生了改变。由于一些外界因素作用，激活体内的弹性蛋白酶，可导致皮肤真皮中支撑皮肤结构的胶原蛋白和弹性蛋白被过度降解，通过测试样品对弹性蛋白酶抑制率来评估这些样品的抗衰老效果；
测试方法：在96孔板在调制成10mg/L三羟甲基氨基甲烷盐酸盐缓冲液混合200μL的各测试样品及50μL的20μg/mL弹性蛋白酶-III型溶液。将250μM的EGCG作为阳性对照组来使用，并且作为阴性对照组的非处理组使用了蒸馏水，并且在25℃下反应15min。反应结束后，测定415nm波长下的吸光度。
计算公式如下：弹性蛋白酶活性抑制率(％)＝1-(C-D)/(A-B)×100％；
其A为没有添加试验物质，而添加酶时，在415nm波长下的吸光度，B为没有添加试验物质、酶时，在415nm波长下的吸光度，C为在添加试验物质、酶时，在415nm波长下的吸光度，D为在添加试验物质，而没有添加酶时，在415nm波长下的吸光度；
具体测试结果如下表1所示：
表1
Figure BDA0004134155760000111
Figure BDA0004134155760000121
由表1可知，实施例1-3制备得到的抗衰组合物对金属蛋白酶MMP-1表达的抑制率在67％以上，对弹性蛋白酶抑制率在83％以上。其中，实施例1的效果要高于对比例1-3，表明本发明所提供的组合物的配方是非显而易见的，所述甲基硅烷醇甘露糖醛酸酯、羟丙基四氢吡喃三醇和鼠李糖相辅相成，具有协同增效作用，三者协同配合抗衰老功效更优异；同时实施例1的抑制率要高于实施例4-6，表明甲基硅烷醇甘露糖醛酸酯、羟丙基四氢吡喃三醇和鼠李糖的配比关系也影响着组合物的抗衰老功效。
试验例2：红细胞溶血实验
红细胞溶血实验(Red blood cell haemolysis test,RBC)是兔眼刺激性实验的替代方法之一，基本原理是通过测定细胞血红蛋白溶出量及变性程度来评价化学品对眼组织细胞的损伤。RBC实验可用于评价化妆品的眼刺激性。
对应用例1-7制备的精华霜进行红细胞溶血实验。实验采用欧洲替代方法验证中心的RBC实验测试方法及判断标准，具体判断标准如表2所示，其中HD50为50％红细胞发生溶血时的样品浓度，DI为蛋白质变性指数，L/D为HD50与DI的比值。
表2
Figure BDA0004134155760000122
Figure BDA0004134155760000131
应用例1-7制备的各待测样品的刺激性结果如表3所示。
表3
样品 L/D 分级
应用例1 ＞100 无刺激性
应用例2 ＞100 无刺激性
应用例3 ＞100 无刺激性
应用例4 ＞100 无刺激性
应用例5 ＞100 无刺激性
应用例6 ＞100 无刺激性
应用例7 ＞100 无刺激性
由表3的样品刺激性结果可知，本发明应用例1-7所制备的精华霜的刺激性分级为无刺激性，说明本发明的抗衰组合物均具有温和无刺激的特点。
试验例3抗氧化功效研究——DPPH自由基清除实验
取1g应用例1-6及对比应用例1-4的精华霜，加入2mL无水乙醇，溶解完全后加入2mL的60μmol/L的DPPH溶液混匀，放置30min，以无水乙醇调零，在517nm处测得吸光度为Ai；同样的方法取2mL无水乙醇溶剂+2mL DPPH溶液混匀测定吸光度极为Ac；再取1g组合物基质溶解后加入2mL无水乙醇，再加入2mL无水乙醇溶剂混匀测定吸光度为Aj。
按下述公式计算其自由基清除率。
清除率(％)＝[1-(Ai-Aj)/Ac]×100％
其中，Aj反应样品自身对吸光度的贡献；Ai样品对DPPH作用后的吸光度数值；Ac为DPPH本身在测定波长的吸收。
DPPH自由基清除率一定程度上反映了其抗氧化能力，其清除率越高，表明其抗氧化程度越好，抗衰老效果也越好，所以可以通过组合物对清除DPPH自由基能力的研究来判断其抗衰老效果。结果如表4所示(每组样品平行测定5次，数据以平均值呈现)。
表4
样品名称 DPPH清除率(％)
应用例1 89.49
应用例2 87.13
应用例3 86.09
应用例4 83.42
应用例5 82.58
应用例6 83.47
对比应用例1 80.65
对比应用例2 77.14
对比应用例3 78.33
对比应用例4 62.76
由表4可知，应用例1-3制备得到的精华霜对DPPH具有较好的清除效果，清除率在86％以上，由应用例1和对比例应用例1-3的对比可知，本发明的抗衰组合物中甲基硅烷醇甘露糖醛酸酯、羟丙基四氢吡喃三醇和鼠李糖在抗氧化功效上具有协同增效作用，三者协同配合可使精华霜的抗氧化剂抗衰老功效更优异。
试验例4抗炎功效测试
测试样品：应用例1和7提供的精华霜；
测试方法如下所示：
(1)酶联免疫分析法(ELISA)检测：将血液样本与取等比例的血球分离液混合，在20℃离心40min，取人外周血单核细胞层，用缓冲溶液清洗细胞后，以培养基RPMI-1640悬浮细胞；然后用CD14+微球(MiniMACS system)纯化人外周血单核细胞中的CD14+单核细胞；以细胞激素IL-4及生长激素GM-CSF刺激细胞分化成树突状细胞，37℃、5％CO2培养6天，收集已分化的树突状细胞并将其接种于孔板中；分别将上述各测试样品稀释从2μg/mL的浓度加入孔板中，并设置加入等体积培养基的孔为空白对照，37℃、5％CO2共同培养48小时；收集细胞培养上清液。利用酶联免疫分析法(ELISA)检测白介素IL-10和IL-12在上清液中的含量，将空白对照组中抗炎细胞因子IL-10的含量定义为0、促炎细胞因子IL-12的含量定义为100％；
(2)NF-κB活性检测：利用NF-κB转录活性荧光素酶报告基因检测系统进行。pNF-κB-luc质粒上有4个NF-κB结合位点融合在荧光素酶基因的编码序列上。pNF-κB-luc质粒和PcDNA3.1质粒共转入293细胞中，通过0.6mg/mL的G418筛选出pNF-κB-luc-293克隆细胞。pNF-κB-luc-293克隆细胞经培养后以1×105/孔铺于96孔板中，同时给予各测试样品(乙酸乙酯部位，20μg/mL)处理15min后再用TNF-a(10ng/mL)孵育6h。裂解细胞，荧光素酶的表达水平分析通过荧光素酶检测系统进行检测。荧光检测仪器为Berthold DetectionSystems，蒸馏水替各测试样品做空白对照，罗格列酮做阳性对照，计算抑制率；
(3)对脂多糖(LPS)刺激RAW264.7细胞释放PGE2的影响，对照组(无血清培养基)，于LPS刺激18h后收集细胞上清液，按照ELISA试剂盒说明书要求进行PGE2检测，计算抑制率；
(4)抑制TNF-α表达：新鲜血液以EDTA为抗凝剂，Ficoll分离血细胞，重悬细胞于含有10％胎牛血清的RIMP 1640培养基中。在96孔板中加入100mL密度为1×105细胞/mL新分离的细胞，每孔细胞总数为104个，每个样品作3个孔；称取供试提取物，加无菌PBS溶液配制供试品母液(10mg/mL)，再使用无菌PBS稀释母液至相应工作浓度备用；在培养板孔中加入10mL相应工作浓度的供试药物溶液。培养板置于37℃，含5％ CO2的培养箱中保温15min；加入10mL浓度为100mg/mL的LPS，置于37℃含5％ CO2的培养箱中孵育16小时；培养板以1000rpm离心15min，将上清转移入新的培养板中，使用酶标仪测定培养上清液中TNF-α浓度；或冻藏于-20℃，避免反复冻融，并计算抑制率。
具体测试结果如下表5所示：
表5
Figure BDA0004134155760000161
由表5数据可知，培养基中为本发明实施例1提供的精华霜白介素的含量IL-10为130％，白介素IL-12水平在10％，且对NF-κB抑制率达到58％，对PGE2释放的抑制率达到74％，对TNF-a释放的抑制率达到80％，由应用例1和应用例7的对比充分说明本发明所述精华霜中添加皮肤调理剂，能够显著上调抗炎细胞因子白介素IL-10的水平，抑制促炎细胞因子白介素IL-12的表达水平，且可有效抑制多种炎症因子的释放、传递，能起到抗炎舒敏的作用，从而有效修复炎症肌肤。
试验例5人体重复性体外评价实验研究
将应用例1和对比应用例4制得的精华霜用于随机选取的30位自我报告肌肤敏感的志愿者(健康、皮肤正常，年龄30-45岁)，连续使用30天，并使用Visia面部检测仪等检测仪器追踪志愿者面部皮肤变化情况，以皮肤弹力、皱纹、光滑度为指标来评价本发明精华霜的抗衰老效果，以皮肤是否发生过敏现象评价刺激性效果。试验研究结果如表6所示。
表6
平均变化率(％) 应用例1 对比应用例4
皮肤弹性 +21.3％ +10.7％
皱纹 -13.8％ -7.3％
皮肤光亮度 +24.7％ +15.6％
皮肤过敏 0 0
由表6可知，30位志愿者在使用添加了本发明抗衰组合物的精华霜30天后，皮肤弹性平均增加21.3％，皱纹平均减少13.8％。皮肤光滑度平均提高24.7％，皮肤衰老情况明显改善；而使用未添加本发明抗衰组合物的精华霜后效果明显较差。并且观察30位志愿者在使用后的过敏状况，发现其全部人均未出现过敏现象，说明本发明所涉及的精华霜安全无刺激性。
申请人声明，本发明通过上述实施例来说明本发明的一种抗衰组合物及其应用，但本发明并不局限于上述实施例，即不意味着本发明必须依赖上述实施例才能实施。所属技术领域的技术人员应该明了，对本发明的任何改进，对本发明产品各原料的等效替换及辅助成分的添加、具体方式的选择等，均落在本发明的保护范围和公开范围之内。
以上详细描述了本发明的优选实施方式，但是，本发明并不限于上述实施方式中的具体细节，在本发明的技术构思范围内，可以对本发明的技术方案进行多种简单变型，这些简单变型均属于本发明的保护范围。
另外需要说明的是，在上述具体实施方式中所描述的各个具体技术特征，在不矛盾的情况下，可以通过任何合适的方式进行组合，为了避免不必要的重复，本发明对各种可能的组合方式不再另行说明。

Claims (10)

1.一种抗衰组合物，其特征在于，所述抗衰组合物包括甲基硅烷醇甘露糖醛酸酯、羟丙基四氢吡喃三醇和鼠李糖。
2.如权利要求1所述的抗衰组合物，其特征在于，所述甲基硅烷醇甘露糖醛酸酯、羟丙基四氢吡喃三醇和鼠李糖的质量比为(1-3):(1-3):(0.01-1)。
3.如权利要求1或2所述的抗衰组合物在化妆品中的应用。
4.如权利要求3所述的应用，其特征在于，所述化妆品包括精华霜、化妆水、乳液、面霜或面膜；
优选地，所述抗衰组合物在所述化妆品中的质量百分含量为1-30％。
5.一种精华霜，其特征在于，所述精华霜包括如权利要求1或2所述的抗衰组合物、去离子水。
6.如权利要求5所述的精华霜，其特征在于，所述精华霜还包括保湿剂、增稠剂、抗氧化剂、润肤剂或乳化剂中的任意一种或至少两种的组合；
优选地，所述精华霜按重量份数计包括如权利要求1或2所述的抗衰组合物1-30份、保湿剂1-20份、增稠剂0.1-1份、抗氧化剂0.1-1份、乳化剂1-5份、润肤剂2-15份、去离子水。
7.如权利要求6所述的精华霜，其特征在于，所述保湿剂包括丁二醇、丙二醇、1,2-戊二醇或透明质酸钠中的任意一种或至少两种的组合；
优选地，所述增稠剂包括卡波姆和/或黄原胶；
优选地，所述抗氧化剂包括视黄醇棕榈酸酯、对羟基苯乙酮或生育酚乙酸酯中的任意一种或至少两种的组合；
优选地，所述乳化剂包括山梨醇硬脂酸酯、山梨坦异硬脂酸酯、聚甘油-10肉豆蔻酸酯、聚山梨醇酯-60、氢化卵磷脂或植物甾醇类中的任意一种或至少两种的组合；
优选地，所述润肤剂包括角鲨烷、鲸蜡醇乙基己酸酯、聚二甲基硅氧烷、二异硬脂醇苹果酸酯、植物甾醇澳洲坚果油酸酯、霍霍巴籽油或稻胚芽油中的任意一种或至少两种的组合。
8.根据权利要求5-7中任一项所述的精华霜，其特征在于，所述精华霜还包括皮肤调理剂；
优选地，所述皮肤调理剂按质量百分比计为所述精华霜总量的1-14％；
优选地，所述皮肤调理剂为可溶性胶原、十四烷基氨基丁酰缬氨酰胺基丁酸脲三氟乙酸盐、棕榈酰三肽-5、酵母菌溶胞物、柑橘果皮提取物、二棕榈酰羟脯氨酸、小球藻/白羽扇豆蛋白发酵产物、卡瓦胡椒叶/根/茎提取物、肌肽、水解蜂王浆蛋白、甜橙提取物、番红花提取物、姜花根提取物、迷迭香叶提取物或乳酸杆菌发酵溶胞产物的任意一种或至少两种的组合；
优选地，所述精华霜还包括pH调节剂、防腐剂或芳香剂中的任意一种或至少两种的组合。
9.如权利要求5-8中任一项所述的精华霜的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括：将权利要求1或2所述抗衰组合物在去离子水中溶解后，混合搅拌，得到所述精华霜。
10.如权利要求9所述的精华霜的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括：
(1)将保湿剂和增稠剂加入去离子水，搅拌至完全溶解，得水相液；
(2)向步骤(1)所得水相液中依次加入乳化剂、抗氧化剂、润肤剂、如权利要求1或2所述的抗衰组合物，混合均质后得到所述精华霜；
优选地，步骤(1)所述搅拌的温度为80-85℃；
优选地，步骤(1)所述溶解后还需进行静置，所述静置的时间为15-30min；
优选地，步骤(2)所述混合均质的温度为75-85℃，时间为5-10min；
优选地，步骤(2)还包括加入皮肤调理剂、pH调节剂、芳香剂、防腐剂中的任意一种或至少两种的组合。
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