CN116171166A - 水包油乳液佐剂的冷过滤 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及在低温过滤乳液的方法。具体来说，讨论了疫苗生产中乳液佐剂的冷过滤。
Description
交叉引用
本申请要求2020年6月30提交的美国临时专利申请号63,045,949的权益，其整个内容在此引入作为参考。
技术领域
本发明属于生产疫苗用水包油乳液的领域。本公开涉及在降低的温度下过滤水包油乳液的方法。此外，还讨论了用于疫苗生产的水包油乳液的低温过滤。
背景技术
增加对抗原的免疫反应的药物或免疫试剂对于疫苗制造很重要(Rogers等人(2010)BioPharm International Supplement，Issue 1:1-4)。可用作佐剂的水包油乳液是增强免疫反应的试剂的一个例子(Rogers等人(2010)
BioPharm International Supplement，Issue 1:1-4)。在疫苗制剂中使用这些佐剂是有利的，因为疫苗制剂中的佐剂增强、加速和延长疫苗效力(Rogers等人(2010)BioPharm International Supplement，Issue 1:1-4；Onraedt等人(2010)BioPharmInternational Supplement，Issue 8)。佐剂也被描述为节省剂量，因为它们在疫情疫情期间引发更快和更广泛的反应(Onraedt等人(2010)BioPharm International Supplement，Issue 8)。例如，水包油乳液和脂质体佐剂作为一种符合成本效益的机制，正在被全球疫苗制造商所采用，以满足全球疫苗需求(Rogers等人(2010)BioPharm InternationalSupplement，Issue 1:1-4)。
之前已将乳液描述为热力学不稳定的(Raposo等人(2013)Pharm Dev Technol 1-13)。潜在的稳定剂包括多功能赋形剂，如表面活性剂、助乳化剂、聚合物、生物分子和胶体颗粒(Raposo等人(2013)Pharm Dev Technol1-13；Tamilvanan等人(2010)J.Excipientsand Food Chem 1(1):11-29)。
一种这样的水包油佐剂被称为
(WO90/14837；Podda&Del Giudice(2003)Expert Rev Vaccines 2:197-203；Podda(2001)Vaccine 19:2673-2680)。
是角鲨烯、聚山梨酯80(也称为吐温80(Tween 80))和脱水山梨醇三油酸酯(也称为司盘85(Span80))的亚微米水包油乳液。它还可以包括柠檬酸根离子，例如10mM柠檬酸钠缓冲液(Vaccine Design:The Subunit and Adjuvant Approach(eds.Powell&Newman)PlenumPress 1995(ISBN 0-306-44867-X；Vaccine Adjuvants:Preparation Methods andResearch Protocols(Volume 42of Methods in Molecular Medicine series).ISBN:1-59259-083-7.Ed.O’Hagan；New Generation Vaccines(eds.Levine等人).3rd edition,2004.ISBN 0-8247-4071-8)。乳液的组成按体积计可以是约5％角鲨烯、约0.5％吐温80和约0.5％司盘85(Vaccine Design:The Subunit and Adjuvant Approach(eds.Powell&Newman)Plenum Press 1995(ISBN 0-306-44867-X；Vaccine Adjuvants:PreparationMethods and Research Protocols(Volume 42of Methods in Molecular Medicineseries).ISBN:1-59259-083-7.Ed.O’Hagan；New Generation Vaccines(eds.Levine等人).3rd edition,2004.ISBN 0-8247-4071-8)。
通过将司盘85分散在角鲨烯相中，将吐温80分散在水相中，然后高速混合形成粗乳液，从而以商业规模生产
(O’Hagan(2007)Expert Rev Vaccines 6(5):699-710)。然后将该粗乳液反复通过微流化器以产生具有均匀油滴大小的乳液(O’Hagan(2007)Expert Rev Vaccines 6(5):699-710)。然后通过0.22μm的膜过滤微流化的乳液以除去大油滴，并且所得乳液的平均液滴大小在4℃下至少3年保持不变(New Generation Vaccines(eds.Levine等人)，3rd edition，2004.ISBN 0-8247-4071-8)。然后测量最终乳液中角鲨烯的含量(EP-B-2029170)。
在典型的过滤应用中，水包油乳液通过膜的通过量可受许多因素影响，包括膜结构、佐剂悬浮液的粘度、佐剂颗粒尺寸、佐剂颗粒浓度和过滤材料的阻力(Rogers等人(2010)BioPharm International Supplement，Issue1:1-4))。滤器的总通过量由流量(flux)和容量(capacity)决定(Rogers等人(2010)BioPharm International Supplement，Issue 1:1-4)。流量由驱动力(如入口压力)、流体性质(粘度)和膜结构(如孔径大小、不对称性)决定(Rogers等人(2010)BioPharm International Supplement，Issue 1:1-4)。流量降低会显著影响加工时间(Rogers等人(2010)BioPharm International Supplement，Issue 1:1-4)。容量由膜结构和工艺流的性质决定，如佐剂颗粒负载量(Rogers等人(2010)BioPharm International Supplement，Issue 1:1-4)。在先已经将不对称膜和增加的压力与增强膜容量相关联(Rogers等人(2010)BioPharm International Supplement，Issue 1:1-4)。
关于粘度，悬浮液通常在较高温度下粘度较小，但在所有温度下，粘度都高于水的粘度(Rogers等人(2010)BioPharm International Supplement，Issue 1:1-4)。更粘稠溶液的流量高于水溶液的流量(Rogers等人(2010)BioPharm International Supplement，Issue 1:1-4)。
膜堵塞是乳液过滤过程中值得考虑的另一个因素。由于颗粒堵塞膜和佐剂的颗粒特性，过滤开始后流量通常会迅速下降(Rogers等人(2010)BioPharm InternationalSupplement，Issue 1:1-4)。因此，膜孔堵塞是滤器能力的一个重要因素，也是流量衰减的主要机制(Rogers等人(2010)BioPharm International Supplement，Issue 1:1-4)。之前，已经将较小颗粒的流动与膜容量增加相关联(Rogers等人(2010)BioPharm InternationalSupplement，Issue 1:1-4)。
在乳液的膜过滤过程中，外来污染物如细菌的保留是另一个关键考虑因素。多种因素与影响细菌滞留有关，包括佐剂、细菌和膜之间的相互作用；膜堵塞；佐剂表面张力；膜特性；温度；和操作压力(Onraedt等人(2010)BioPharm International Supplement，Issue8)。用乳液包裹细菌与不太牢固的保留有关，因为具有膜孔堵塞和低的佐剂表面张力(Onraedt等人(2010)BioPharm International Supplement，Issue 8)。温度升高与滞留量增加有关(Onraedt等人(2010)BioPharm International Supplement，Issue 8)。
现有技术中公开的用于避免与乳液的膜过滤相关的许多问题的机制之一包括在过滤前加热乳液(Tamilvanan等人.(2010)J.Excipients and Food Chem 1(1):11-29)。提高乳液温度与增强过滤有关，但会显著破坏乳液的完整性及其在疫苗中的后续性能。
水包油乳液(如
)的制备通常涉及多级过滤，如生物负荷降低过滤、无菌过滤、粒度过滤等。在制造过程中，这些过滤步骤使用了大量的过滤膜。鉴于此，需要改进过滤方法和系统。
发明内容
本公开提供了在低温下经受膜过滤的乳液佐剂。
本发明还提供了在低温下过滤乳液佐剂的方法。
附图说明
图1描绘了SHF膜在5℃、30℃和40℃温度下的通过量。
图2描绘了SHC膜在5℃、30℃和40℃下的通过量。
图3描绘了ECV膜在5℃和40℃的通过量。
发明详述
受益于前述说明和相关附图中的教导，本发明所属领域的技术人员将会想到本发明的许多修改和其他实施方案。因此，应当理解，本公开不限于所公开的具体实施方案，并且修改和其他实施方案旨在包括在所附权利要求的范围内。尽管这里使用了特定的术语，但是它们仅用于一般的和描述性的意义，而不是为了限制的目的。
如本文所用，单数形式“一个”、“一种”和“该”预期包括复数形式，除非上下文另有明确规定。
此外，就在发明详述和/或权利要求中使用的术语“包括”、“包含”、“具有”、“有”或其变体而言，这些术语旨在以与术语“包括”相同的方式包含在内。
术语“包含”、“具有”和“包括”是开放式连接动词。这些动词中的一个或多个的任何形式或时态，诸如“包含”、“具有”、和“包括”也是开放式的。例如，“包含”、“具有”或“包括”一个或多个步骤的任何方法不限于仅拥有那些一个或多个步骤，并且还可以涵盖其他未列出的步骤。类似地，“包含”、“具有”或“包括”一个或多个特征的任何组合物不限于仅拥有那些一个或多个特征，并且可以涵盖其他未列出的特征。关于本文中的某些实施方案提供的任何和所有实例或示例性语言(例如，“诸如”)的使用仅旨在更好地阐明本公开并且不对以其他方式要求保护的本公开的范围构成限制。
水包油乳液佐剂
本发明的方法用于制造水包油乳液。这些乳液包括三种核心成分:油；水性组分；和表面活性剂。
已发现水包油乳液适合用作流感病毒疫苗中的佐剂。各种这样的乳液是已知的，它们通常包括至少一种油和至少一种表面活性剂，其中所述油(一种或多种)和表面活性剂(一种或多种)是可生物降解的(可代谢的)和生物相容的。乳液中的油滴通常直径小于5μm，甚至可以具有亚微米直径，这些小尺寸是用微流化器获得的，以提供稳定的乳液。尺寸小于220nm的液滴是优选的，因为它们可以经受过滤灭菌。
油可以来自动物(如鱼)或植物来源。因为乳液用于药物用途，所以油通常是可生物降解的(可代谢的)和生物相容的。植物油的来源包括坚果、种籽和谷物。最常见的花生油、大豆油、椰子油和橄榄油是坚果油的示例。也可使用获自(例如)霍霍巴豆的霍霍巴油。种籽油包括红花油、棉花籽油、葵花籽油、芝麻籽油等。在谷物油中，最常见的是玉米油，但也可以使用其它谷类的油，如小麦、燕麦、黑麦、稻、画眉草(teff)、黑小麦等。尽管甘油和1,2-丙二醇的6-10碳脂肪酸酯不是种籽油中天然产生的，但可以从坚果和种籽油开始，通过对合适原料进行水解、分离和酯化而制备。来自哺乳动物乳汁的脂肪和油可代谢并因而可以用于本发明。获得动物来源纯油所必需的分离、纯化、皂化和其它方法的过程为本领域熟知。通过生化途径用5-碳异戊二烯单位合成许多支链油，其总称为萜类。鲨鱼肝油含有一种称为角鲨烯的支链不饱和萜类化合物，2,6,10,15,19,23-六甲基-2,6,10,14,18,22-二十四碳六烯。角鲨烷是角鲨烯的饱和类似物，是油的另一个例子。本发明的油可以包含油的混合物(或组合)，例如包含角鲨烯和至少一种另外的油。鱼油，包括角鲨烯和角鲨烷，容易从商业来源获得，或者可以通过本领域已知的方法获得。
其他有用的油为生育酚，特别是和角鲨烯联合。当乳液的油相包含生育酚时，可采用α、β、γ、δ、ε或ξ生育酚中的任何一种，但优选α-生育酚。可采用D-α-生育酚和DL-α-生育酚二者。优选的α-生育酚是DL-α-生育酚。生育酚可取多种形式，例如不同的盐和/或异构体。盐包括有机盐，例如琥珀酸盐、乙酸盐、烟酸盐等。如果采用这种生育酚的盐，那么优选的盐是琥珀酸盐。可使用包括角鲨烯和生育酚(如DL-α-生育酚)的油组合。
所述水性组分可为淡水(如w.f.i.)或可包括其他组分如溶质。例如，可包含盐以形成缓冲液，例如柠檬酸或磷酸盐，例如钠盐。典型缓冲剂包括：磷酸盐缓冲剂；Tris缓冲剂；硼酸盐缓冲剂；琥珀酸盐缓冲剂；组氨酸缓冲剂；或柠檬酸盐缓冲剂。包含的缓冲剂一般是5-20mM。
表面活性剂优选是可生物降解(可代谢)和生物相容性的。可通过‘HLB’(亲水/亲脂平衡)对表面活性剂分类，其中1-10范围内的HLB表示表面活性剂比起水更易溶于油，而10-20范围内的HLB表示比起油更易溶于水。乳液优选包含至少一种HLB为至少10，例如至少15或优选至少16的表面活性剂。
可以与本发明一起使用的表面活性剂包括但不限于：聚氧乙烯脱水山梨醇酯表面活性剂(通常称为吐温(Tweens))，特别是聚山梨酯20和聚山梨酯80；以商品名DOWFAXTM出售的环氧乙烷(EO)、环氧丙烷(PO)和/或环氧丁烷(BO)的共聚物，如直链EP/PO嵌段共聚物；重复的乙氧基(氧基-1,2-乙二基)的数目不同的辛苯聚醇，特别感兴趣的是辛苯聚醇9(Triton X-100，或叔辛基苯氧基聚乙氧基乙醇)；(辛基苯氧基)聚乙氧基乙醇(IGEPAL CA-630/NP-40)；磷脂如磷脂酰胆碱(卵磷脂)；衍生自十二烷醇、十六烷醇、十八烷醇和油醇的聚氧乙烯脂肪醚(称为Brij表面活性剂)，如三乙二醇单月桂基醚(Brij30)；聚氧乙烯-9-月桂醚以及脱水山梨醇酯(通常称为司盘(SPANs))，如脱水山梨醇三油酸酯(司盘85)和脱水山梨醇单月桂酸酯。乳液中包含的优选表面活性剂是聚山梨酯80(吐温80；聚氧乙烯脱水山梨醇单油酸酯)、司盘85(脱水山梨醇三油酸酯)、卵磷脂和Triton X-100。
所述乳液中可包括这些表面活性剂的混合物，如吐温80/司盘85混合物或吐温80/Triton-X100混合物。聚氧乙烯脱水山梨醇酯如聚氧乙烯脱水山梨醇单油酸酯(吐温80)和辛苯聚醇如叔辛基苯氧基-聚乙氧基乙醇(Triton X-100)的组合也适用。另一种有用的组合包含月桂醇聚醚-9+聚氧乙烯脱水山梨醇酯和/或辛苯聚醇。有用的混合物可包含HLB值为10-20的表面活性剂(如吐温80，其HLB为15.0)和HLB值为1-10的表面活性剂(如司盘85，其HLB为1.8)。
表面活性剂的合适量(重量％)为:聚氧乙烯脱水山梨醇酯(如吐温80)0.01-1％，特别是约0.1％；辛基-或壬基苯氧基聚氧乙醇(如Triton X-100，或Triton系列中的其它洗涤剂)0.001至0.1％，特别是0.005至0.02％；聚氧乙烯醚(如月桂醇聚醚9)0.1-20％，优选0.1-10％，特别是0.1-1％或约0.5％。
无论选择何种油(一种或多种)和表面活性剂(一种或多种)，所包含的表面活性剂(一种或多种)都超过乳化所需的量，使得游离表面活性剂保留在水相中。最终乳液中的游离表面活性剂可以通过各种分析来检测。例如，可以使用蔗糖梯度离心法从水相中分离乳液液滴，然后可以分析水相。离心可用于分离两相，油滴聚结并升至表面，之后可测定水相的表面活性剂含量，例如使用HPLC或任何其它合适的分析技术。
根据本公开的具体水包油乳液佐剂包括，但不限于，以下:
·角鲨烯、吐温80和司盘85的亚微米乳液。乳液的组成按体积计可以是约5％角鲨烯、约0.5％聚山梨酯80和约0.5％司盘85。以重量计，这些比例变成4.3％角鲨烯、0.5％聚山梨酯80和0.48％司盘85。这种佐剂被称为
乳液有利地包括柠檬酸根离子，例如10mM柠檬酸钠缓冲液。在一些实施方案中，水包油型洗脱佐剂是含有9.75mg角鲨烯的水包角鲨烯乳液佐剂。
·角鲨烯、生育酚和吐温80的乳液。乳液可以包括磷酸盐缓冲盐水。它还可以包括司盘85(例如，1％)和/或卵磷脂。这些乳液可以含有2-10％角鲨烯、2-10％生育酚和0.3-3％吐温80，角鲨烯∶生育酚的重量比优选≤1，因为这提供了更稳定的乳液。角鲨烯和吐温80可以以约5∶2的体积比存在。一种这样的乳液可以通过将吐温80溶解在PBS中得到2％的溶液，然后将90mL该溶液与混合物(5g DL-α-生育酚和5mL角鲨烯)混合，然后微流化该混合物来制备。所得乳液可具有亚微米油滴，例如平均直径在100至250纳米之间，优选约180纳米。
·角鲨烯、生育酚和Triton洗涤剂(如Triton X-100)的乳液。乳剂还可以包括3d-MPL。乳液可以含有磷酸盐缓冲液。
·包含聚山梨酯(例如聚山梨酯80)、Triton洗涤剂(例如Triton X-100)和生育酚(例如α-生育酚琥珀酸酯)的乳液。乳液可以包括质量比为约75∶11∶10的这三种成分(例如，750μg/mL的聚山梨酯80、110μg/mL的Triton X-100和100μg/mL的α-生育酚琥珀酸酯)，并且这些浓度应当包括来自抗原的这些成分的任何贡献。该乳液还可以包含角鲨烯。乳剂还可以包括3d-MPL。水相可包含磷酸盐缓冲液。
·角鲨烷、聚山梨酯80和泊洛沙姆401(“PluronicTM L121”)的乳液。该乳液可以在pH 7.4的磷酸盐缓冲盐水中配制。这种乳液是胞壁酰二肽的一种有用的递送载体，并且已经在“SAF-1”佐剂(0.05-1％Thr-MDP，5％角鲨烷，2.5％Pluronic L121和0.2％聚山梨酯80)中与苏氨酰-MDP一起使用。它也可以在没有Thr-MDP的情况下使用，如在“AF”佐剂中(5％角鲨烷、1.25％Pluronic L121和0.2％聚山梨酯80)那样。
·一种乳液，含有0.5-50％的油、0.1-10％的磷脂和0.05-5％的非离子表面活性剂。优选的磷脂组分是磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰丝氨酸、磷脂酰肌醇、磷脂酰甘油、磷脂酸、鞘磷脂和心磷脂。亚微米液滴尺寸是有利的。
·非代谢性油(如轻矿物油)和至少一种表面活性剂(如卵磷脂、吐温80 或司盘80)的亚微米水包油乳液。可以包括添加剂，例如QuilA皂角苷、胆固醇、皂角苷-亲脂缀合物(例如GPI-0100，通过葡糖醛酸的羧基将脂族胺加成到去酰基皂角苷上制备)、二甲基双十八烷基溴化铵和/或N,N-双十八烷基-N,N-双(2-羟乙基)丙二胺。
·一种乳液，其中皂角苷(如QuilA或QS21)和固醇(如胆固醇)以螺旋胶束的形式缔合在一起。
乳液的形成
可混合乳液组分形成乳液。
乳液中油滴的平均尺寸可以是5000nm或更少例如4000nm或更少，3000nm或更少，2000nm或更少，1200nm或更少，1000nm或更少，例如平均尺寸为800至1200nm或300nm至800nm。
乳液中尺寸>1.2μm的油滴数可以是5x1011/ml或更少，例如5x1010/ml或更少或5x109/ml或更少。
可通过将第一乳液的组分在匀浆器中混合得到乳液的平均油滴尺寸。可以垂直和/或水平方式操作匀浆器。为了方便在商业配置中使用，优选直列式(in-line)匀浆器。
对于商业规模的生产，匀浆器理想地应具有至少300L/hr的流速，例如≥400L/hr，≥500L/hr，≥600L/hr，≥700L/hr，≥800L/hr，≥900L/hr，≥1000L/hr，≥2000L/hr，≥5000L/hr，或甚至≥10000L/hr。合适的高容量匀浆器为可商购的。
优选的匀浆器提供3x105至1x106s-1的剪切速率，例如3x105至7x105s-1，4x105至6x105s-1，例如约5x105s-1。
在一些实施方式中，可对乳液成分匀浆多次(例如2、3、4、5、6、7、8、9、10、20、30、40、50或更多次)。为了避免对一长串容器和匀浆器的需求，也可循环乳液成分。具体地，可将第一乳液组分循环通过某一匀浆器多次(例如2、3、4、5、6、7、8、9、10、20、30、40、50、100次等)来形成乳液。然而，太多次循环可能不利，因为可能产生重凝结(Jafari等人.(2008)Food Hydrocolloids 22:1191-1202)。因此，如果使用匀浆器循环，可监控油滴尺寸，以检查是否达到所需液滴大小和/或不发生重凝结。
循环通过匀浆器是有利的，因为可以减少乳液中的油滴平均尺寸。循环是有利的，还因为可以减少第一乳液中尺寸>1.2μm的油滴的数量。第一乳液中这些平均液滴尺寸和>1.2μm的液滴数量的减少可在下游过程中提供益处。具体地，乳液组分循环通过匀浆器可实现改良的微流化过程，其本身可提供改良的滤过性能。改善的滤过性能可使得过滤期间内含物损失更少，例如当水包油乳液是
时，角鲨烯、吐温80和司盘85的损失。
本发明的方法可以更大规模使用。因此，该方法涉及制备第一乳液，其体积大于1升，例如≥5升，≥10升，≥20升，≥50升，≥100升，≥250升等。
微流化
乳液在形成后可进行微流化，以降低其平均油滴尺寸和/或减少尺寸>1.2μm的油滴的数量。
微流化设备通过几何学固定的通道以高压和高速推动输入流组分来降低油滴平均尺寸。交互作用室入口处的压力(也称作“第一压力”)可以在至少85％，例如至少87％、至少90％、至少95％，至少99％或100％的时间内基本稳定(即±15％；例如±10％、±5％、±2％)，该时间内组分被加入微流化机。
微流化装置通常包括至少一个强化泵(优选两个泵，可同步)和交互作用室。强化泵理想的是电力-液压驱动的，提供高压(即第一压力)以迫使乳液进入并通过交互作用室。可用强化泵的同步性质提供上述乳液基本恒定的压力，这意味着乳液液滴在微流化过程中都接触基本相同水平的剪切力。
乳液中平均油滴尺寸的减少和尺寸>1.2μm的油滴数目的减少可提高滤过性能。改善的滤过性能可使得过滤期间内含物损失更少，例如当乳液是
时，角鲨烯、吐温80和司盘85的损失更少。
优选的微流化装置在170-2750巴(大约2500psi-40000psi)，例如约345巴、690巴、1380巴、2070巴等的压力下操作。
优选的微流化装置具有剪切速率超过1x106 s-1例如≥2.5x106 s-1、≥5x106s-1、≥107s-1等的交互作用室。
微流化装置可包括多个平行使用的交互作用室，例如包括2、3、4、5或更多个，但更有用的是包括单一交互作用室。
微流化的产物可为水包油乳液，其中油滴的平均尺寸为500nm或更小。该平均尺寸特别有用，因为它能促进乳液的过滤除菌。其中至少80％数量的油滴具有500nm或更小，例如400nm或更小，300nm或更小，200nm或更小或165nm或更小平均尺寸的乳液特别有用。另外，乳液中尺寸>1.2μm的油滴数目为5x 1010/ml或更少，例如5x 109/ml或更少，5x108/ml或更少或2x 108/ml或更少。
微流化装置中的乳液容器可保持在惰性气体下，例如高达0.5巴的氮气。这防止乳液组分氧化，如果乳液组分之一是角鲨烯则特别有利。这使得乳液的稳定性提高。
本发明的方法可以更大规模使用。因此，该方法涉及对大于1升，例如≥5升、≥10升、≥20升、≥50升、≥100升、≥250升等的体积进行微流化。
过滤
微流化后，过滤乳液。过滤除去任何可能经受匀浆和微流化过程后仍存在的大油滴。虽然总数目很少，但这些油滴体积可能很大且可用作聚集的成核位点，导致储存过程中乳液降解。另外，过滤可实现过滤除菌。
制造过程中水包油乳液的过滤可包括一个或多个级别和/或类型的过滤步骤。其中一些可以包括减少生物负荷的过滤、无菌过滤、粒度过滤等。因此，在各种实施方案中，本发明描述了用于改善乳液优选水包油乳液的过滤的方法。在一个或多个优选的方面，本发明实施的过滤类型包括但不限于生物负荷减少过滤、无菌过滤和粒度过滤。
适用于过滤的具体的颗粒滤膜由乳液的液体特性和所需过滤程度而定。滤器特征可影响其过滤微流化乳液的适用性。例如，滤器孔径和表面特征是重要的，尤其在过滤基于角鲨烯的乳液时。
用于本发明的膜孔径应允许所需液滴通过，而保留不需要的液滴。例如，其应当保留尺寸≥1μm的液滴而允许<200nm的液滴通过。0.2μm或0.22μm的滤器是理想的，而且也能实现过滤。
可将乳液预先过滤通过例如0.45μm滤器。可用已知的双层滤器一步实现预过滤和过滤，所述滤器包括具有较大孔的第一膜层和具有较小孔的第二膜层。双层滤器对于本发明特别有用。第一层理想上具有>0.3μm的孔径，例如0.3-2μm或0.3-1μm，或0.4-0.8μm，或0.5-0.7μm。优选第一层中的孔径≤0.75μm。因此，第一层的孔径为例如0.6μm或0.45μm。第二层理想上孔径小于第一层孔径的75％(理想地小于一半)，例如为第一层的孔径的25-70％或25-49％，如30-45％，例如第一层孔径的1/3或4/9。因此，第二层可具有<0.3μm的孔径,例如0.15-0.28μm或0.18-0.24μm，如0.2μm或0.22μm的孔径。在一个实施例中，具有较大孔的第一膜层提供0.45μm滤器，而具有较小孔的第二膜层提供0.22μm滤器。
滤膜和/或预过滤膜可以是不对称的。不对称膜是其中滤膜一侧与另一侧尺寸不同的膜，例如其中进入面的孔径大于离开面的孔径。不对称膜的一侧称为“粗糙有孔表面”，而不对称膜的另一侧称为“精细有孔表面”。在双层滤器中，两层之一或(理想地)两个层都可以是不对称的。
滤膜可以是多孔或均匀的。均匀膜通常是10-200μm的致密膜。多孔膜具有多孔结构。在一个实施方式中，滤膜是多孔的。在双层滤器中，两层都可以是多孔的，两层都可以是均匀的，或可以是一层多孔、一层均匀。优选的双层滤器是其中一层为多孔的。
在一个实施方式中，将乳液预先过滤通过不对称的亲水多孔膜，然后过滤通过另一孔径小于预过滤膜的不对称亲水多孔膜。这可用双层滤器。
滤膜可在使用前高压灭菌，以确保其无菌。
滤膜通常用聚合物支撑材料制备，例如PTFE(聚四氟乙烯)、PES(聚醚砜)、PVP(聚乙烯吡咯烷酮)、PVDF(聚偏二氟乙烯)、尼龙(聚酰胺)、PP(聚丙烯)、纤维素(包括纤维素酯)、PEEK(聚乙醚乙醚酮)、硝基纤维素等。这些具有不同性质，一些载体本身是疏水的(例如PTFE)，其它本身是亲水的(例如乙酸纤维素)。然而，可通过处理膜表面改变这些固有特性。例如，已知通过用其它材料(例如其它聚合物、石墨、聚硅氧烷等)涂覆膜表面处理来制备亲水性或疏水性膜(WO90/04609)。在双层滤器中，所述两层膜可用不同材料或(理想地)用相同材料制备。
用于本发明的理想滤器具有亲水表面，而非疏水(聚砜)表面(Baudner等人.(2009)Pharm Res.26(6):1477-85；Dupuis等人.(1999)Vaccine 18:434-9；Dupuis等人.(2001)Eur J Immunol 31:2910-8；Burke等人.(1994)J Infect Dis170:1110-9)。可用亲水材料或通过使疏水材料亲水化来形成具有亲水表面的滤器，优选用于本发明的滤器是亲水聚醚砜膜。已知多种不同方法将疏水PES膜转化成亲水PES膜。这通常是通过在膜上涂覆亲水聚合物实现。为了使得亲水聚合物永久结合于PES上，通常使亲水涂覆层进行交联反应或接枝。一种改变具有可官能化链末端的疏水聚合物的表面性质的方法包括使聚合物接触接头部分的溶液以形成共价连接，然后使反应的疏水聚合物与改性剂的溶液接触(WO90/04609)。另外使用一种通过直接膜涂覆使PES膜亲水化的方法包括预先用醇湿润，然后浸入含有亲水性单体、多官能单体(交联剂)的水溶液中并使用聚合引发剂(US-4,618,533)。用热或UV引发的聚合使单体和交联剂聚合，从而在膜表面形成交联亲水聚合物的涂层(US-4,618,533)。类似方法包括通过以下方法涂覆PES膜：将其浸入亲水聚合物(聚环氧烷)和至少一种多官能单体(交联剂)的水溶液中，然后使单体聚合以提供不能提取的亲水涂层(US-6,193,077；US-6,495,050)。然后可通过接枝反应来使PES膜亲水化，其中PES膜经历低温氦等离子体处理，然后将亲水性单体N-乙烯基-2-吡咯烷酮(NVP)接枝到膜表面(Chen等人(1999)Journal of Applied Polymer Science，72:1699-1711)。
在不依赖于涂层的方法中，PES可溶于溶剂，与可溶性亲水添加剂混合，然后用混合溶液铸造亲水膜，例如通过沉淀或引发共聚(US-4,943,374；US-6,071,406；US-4,705,753；US-5,178,765；US-6,495,043；US-6,039,872；US-5,277,812)。例如，可使用一种制备亲水性电荷改性的膜的方法，该膜可提取物少，能够允许超纯水电阻率的快速恢复，具有形成的交联、相互渗透聚合物网络结构，制得PES、PVP、聚乙烯亚胺和脂族二缩水甘油醚的共混物的聚合物溶液，形成该溶液的薄膜，并沉淀所述薄膜作为膜(US-5,277,812；US-5,531,893)。
可使用杂化方法，其中亲水添加剂存在于膜形成过程中并还在随后作为涂层添加(US-4,964,990)。
也可通过低温等离子体处理实现PES膜的亲水化，包括通过低温CO2-等离子体处理对PES膜进行亲水改性(Wavhal&Fisher(2002)Journal of Polymer Science Part B:Polymer Physics 40:2473-88)。
还可通过氧化所述实现PES膜的亲水化(WO2006/044463)。该方法涉及用具有低表面张力的液体预润湿疏水PES膜，使湿PES膜接触氧化剂水溶液，然后加热(WO2006/044463)。
还可使用相转化法(Espinoza-Gomez等人(2003)Revista de la SociedadQuimica de Mexico 47:53-57)。
可通过用PVP(亲水性)处理PES(疏水性)获得理想的亲水PES膜。发现用PEG(亲水性)代替PVP处理得到容易积垢的亲水PES膜(特别是在用含角鲨烯的乳液时)，而且在高压灭菌期间不利地释放甲醛。
优选的双层滤器具有第一亲水PES膜和第二亲水PES膜。
已知的亲水膜包括Bioassure(来自Cuno)；EverLUXTM聚醚砜；STyLUXTM聚醚砜(都来自Meissner)；Millex GV，Millex HP，Millipak60，Millipak 200和Durapore CVGL01TP3膜(来自Millipore)；FluorodyneTMEX EDF膜，SuporTMEAV；SuporTMEBV，SuporTMECV，SuporTMEKV(都来自Pall)；SartoporeTM(来自Sartorius)；Sterlitech的亲水性PES膜；和Wolftechnik的WFPES PES膜。
过滤期间，乳液可维持在40℃或更低的温度，例如30℃或更低，例如20℃或更低，例如10℃或更低，例如2-8℃或更低，例如5℃或更低，以促进成功无菌过滤。一些乳液可能在超过40℃的温度时不能通过无菌滤器。
有利的是在产生第二乳液的24小时内，例如在18小时内，12小时内，6小时内，2小时内，30分钟内进行过滤步骤，因为这段时间以后可能无法使第二乳液通过无菌滤器而不使其堵塞(Lidgate等人(1992)
Pharmaceutical Research 9(7):860-863)。
本发明的方法可以更大规模使用。因此，该方法涉及的过滤体积大于1升，例如≥5升，≥10升，≥20升，≥50升，≥100升，≥250升等。
在一个或多个方面，如本文所述，适用于降低生物负荷的膜可用于本文所述的方法。这些膜可以包括但不限于:Millipore Milliguard，Pall Supor EAV，Pall FluorodyneII DBL，Sartorius Sartoguard等。
在另外的方面，如本文所述，适用于无菌过滤的膜可用于本文所述的方法中。这些膜可以包括但不限于:Millipore Durapore、Millipore Express SHC、Millipore ExpressSHF、Pall Supor EBV、Pall Supor ECV、Pall Supor EKV、Pall Emflon II、PallFluorodyne II、Pall Fluorodyne EDF、Sartorius Sartopore 2、Sartorius Sartopore2XLG、Sartorius Sartopore Platinum等。
在进一步的方面，如本文所述，适用于粒度过滤的膜可用于本文所述的方法中。这些膜可以包括但不限于:Millipore Milliguard、Pall Supor EAV、Pall Fluorodyne IIDBL、Pall HDC、Pall Posidyne、Pall PreFlow、Sartorius Sartoguard、SartoriusSartoclear，等。
最终乳液
微流化和过滤结果得到水包油乳液，其中油滴的平均尺寸可小于220nm，例如155±20nm，155±10nm或155±5nm，其中尺寸>1.2μm的油滴数目可以为5x 108/ml或更少，例如5x 107/ml或更少，5x 106/ml或更少，2x 106/ml或更少或5x 105/ml或更少。
本文所述乳液的平均油滴尺寸通常不小于50nm。
本发明的方法可以更大规模使用。因此，该方法涉及制备最终乳液的体积大于1升，例如≥5升，≥10升，≥20升，≥50升，≥100升，≥250升等。
一旦形成水包油乳液，其可转移到无菌玻璃瓶内。玻璃瓶的大小可以是5、8、或10升。或者，水包油可以转移到无菌柔性袋(柔性袋)内。柔性袋的大小可以是50、100、或250升等。另外，柔性袋可接上一个或多个无菌接头以连接柔性袋与系统。与玻璃瓶相比，使用装有无菌接头的柔性袋是有利的，因为柔性袋比玻璃瓶更大，意味着不需要更换柔性袋来储藏单一批次中制备的全部乳液。这可为乳液制备提供无菌的密闭系统，从而可减少存在于最终乳液中的杂质几率。如果最终乳液用于药物学目的(例如如果最终乳液是
佐剂)，这就特别重要。
最终乳液中油的含量(体积％)优选为2-20％，例如约10％。约5％或约10％的角鲨烯含量特别有用。30-50mg/ml的角鲨烯含量(w/v)是有用的，例如35-45mg/ml，36-42mg/ml，38-40mg/ml等。
最终乳液中表面活性剂的优选量(重量％)为：聚氧乙烯脱水山梨醇酯(例如吐温80)0.02-2％，特别是约0.5％或约1％；脱水山梨醇酯(例如司盘85)0.02-2％，特别是约0.5％或约1％；辛基-或壬基苯氧基聚氧乙醇(例如Triton X-100)0.001-0.1％，特别是0.005-0.02％；聚氧乙烯醚(例如月桂醇聚醚9)0.1-20％，优选0.1-10％，特别是0.1-1％或约0.5％。聚山梨酯80含量(w/v)在4-6mg/ml时有用，例如4.1-5.3mg/ml。脱水山梨醇三油酸酯含量(w/v)在4-6mg/ml时有用，例如4.1-5.3mg/ml。
该方法对于制备任何下列水包油乳液都是特别有用的：
·含有角鲨烯、聚山梨酯80(吐温80)和脱水山梨醇三油酸酯(司盘85)的乳液。该乳液的组成按体积计可以是约5％角鲨烯、约0.5％聚山梨酯80和约0.5％脱水山梨醇三油酸酯。以重量计，这些含量变为4.3％角鲨烯、0.5％聚山梨酯80和0.48％脱水山梨醇三油酸酯。这种佐剂称为
乳液有利地包含柠檬酸根离子，如10mM柠檬酸钠缓冲液。
·包含角鲨烯、α-生育酚(理想的是DL-α-生育酚)和聚山梨酯80的乳液。这些乳液可具有(重量计)2-10％角鲨烯，2-10％α生育酚和0.3-3％聚山梨酯80，例如4.3％角鲨烯、4.7％α-生育酚、1.9％聚山梨酯80。角鲨烯：生育酚的重量比优选≤1(例如0.90)，因为这提供了更稳定的乳液。角鲨烯和聚山梨酯80的体积比可以约为5:2，或者重量比约为11:5。可通过以下方法制备一种这类乳液：将聚山梨酯80溶解于PBS产生2％溶液，然后将90ml该溶液与混合物(5g DL-α-生育酚和5ml角鲨烯)相混合，然后使该混合物微流体化。得到的乳液可含有尺寸为例如100-250nm，优选约180nm的亚微米油滴。
·角鲨烯、生育酚和Triton去污剂(如Triton X-100)的乳液。该乳液也可含有3-O-脱酰化单磷酰脂质A(‘3d-MPL’)。所述乳液可包含磷酸盐缓冲液。
·含有角鲨烯、聚山梨酯(如聚山梨酯80)、Triton去污剂(如Triton X-100)和生育酚(如琥珀酸α-生育酚)的乳液。该乳液可包含这三种组分，其质量比约为75:11:10(如750μg/ml聚山梨酯80、110μg/ml Triton X-100和100μg/ml琥珀酸α-生育酚)，且这些浓度应包括抗原中这些组分的任何贡献。该乳液也可包含3d-MPL。该乳液也可包含皂苷，如QS21。所述水相可包含磷酸盐缓冲液。
·含有角鲨烯、水性溶剂、聚氧乙烯烷基醚亲水性非离子型表面活性剂(如聚氧乙烯鲸蜡硬脂醚)和疏水性非离子型表面活性剂(如脱水山梨醇酯或二缩甘露醇酯，如脱水山梨醇单油酸酯或‘司盘80’)的乳液。该乳液优选为热可逆的和/或其中至少90％油滴(以体积计)的尺寸小于200nm(US-2007/0014805)。该乳液也可含有以下一种或多种物质：糖醇；低温保护剂(例如，糖，如十二烷基麦芽苷和/或蔗糖)；和/或烷基聚糖苷。也可包含TLR4激动剂，如化学结构不含糖环的TLR4激动剂(WO2007/080308)。这类乳液可冻干。
如上以百分数表示的这些乳液的组成可通过稀释或浓缩来改变(例如可以改变整数倍，如2或3倍，或改变分数倍，例如2/3或3/4)，其中其比例保持不变。例如，2倍浓缩的
可具有约10％角鲨烯，约1％聚山梨酯80和约1％脱水山梨醇三油酸酯。可稀释浓缩形式(例如用抗原溶液)，得到所需的乳液终浓度。
本发明的乳液理想地储存在2℃-8℃。其不应冷冻。它们理想地应避直射光保存。特别是本发明含角鲨烯的乳液和疫苗应当受到保护以避免角鲨烯的光化学分解。如果储存本发明的乳液，那么优选在惰性气体，例如氮气(N2)或氩气中。
疫苗
虽然可将水包油乳液佐剂本身给予患者(如为单独给予患者的抗原提供佐剂效应)，但更常见的是将佐剂与抗原混合后形成免疫原性组合物例如疫苗，然后给予患者。可以在使用前临时或者在装填前在疫苗生产过程中混合乳液和抗原。本发明的方法可用于两种情况。
因此，本发明方法还可包括将乳液与抗原组分混合的工艺步骤。或者，还可包括将佐剂与抗原组分一起包装到试剂盒中作为试剂盒组分的步骤。
因此，综上所述，制备混合的疫苗时或制备包含准备要混合的抗原和佐剂的试剂盒时，可使用本发明。如果在生产过程中混合，那么所混合的散装抗原和乳液的体积一般大于1升，例如≥5升、≥10升、≥20升、≥50升、≥100升、≥250升等。如果在使用时混合，那么所混合的体积一般小于1毫升，例如≤0.6ml、≤0.5ml、≤0.4ml、≤0.3ml、≤0.2ml等。在这两种情况下，通常混合的乳液和抗原溶液的体积基本相等，即基本上为1:1(例如1.1:1-1:1.1，优选1.05:1-1:1.05，更优选1.025:1-1:1.025)。然而，在一些实施方式中，可采用过量的乳液或过量的抗原(WO2007/052155)。当一种组分的使用体积过量时，过量通常为至少1.5:1，例如≥2:1、≥2.5:1、≥3:1、≥4:1、≥5:1等。
抗原和佐剂作为试剂盒中的单独组分提供时，它们在试剂盒内物理上相互分离，这种分离可通过多种方式实现。例如，组分可以装在分开的容器，如药瓶中。需要时，可通过(例如)取出一个药瓶的内容物并将其加入另一个药瓶，或者分别取出两个药瓶的内容物并在第三个容器中将它们混合在一起，来混合两个药瓶的内容物。
在另一种配置中，试剂盒的一种组分在注射器中，另一种组分在容器如药瓶中。可使用该注射器(例如装有针头的注射器)将其内含物注入药瓶中混合，然后将该混合物抽回注射器中。然后，一般通过新的无菌针头将该注射器中的混合内容物给予患者。将一种组分包装到注射器中则无需用单独注射器对患者给药。
在另一优选配置中，这两种试剂盒组分在同一注射器中但分开保存，例如双室注射器(WO2005/089837；US 6,692,468；WO00/07647；
WO99/17820；US 5,971,953；US 4,060,082；EP-A-0520618；
WO98/01174)。操作注射器时(例如给予患者过程中)，将这两室中的内容物混合。这种配置在使用时无需单独的混合步骤。
不同试剂盒组件的内容物通常均为液体形式。在一些配置中，组分(一般是抗原组分而非乳液组分)是干燥形式(例如冻干形式)，而另一组分是液体形式。可将这两种组分混合，以再次激活干燥组分，得到给予患者的液体组合物。冻干组分一般置于药瓶中，而非注射器中。干燥组分可包含稳定剂，例如乳糖、蔗糖或甘露醇，及其混合物，如乳糖/蔗糖混合物、蔗糖/甘露醇混合物等。一种可能的配置使用预填装注射器中的液态乳液组分和药瓶中的冻干抗原组分。
如果疫苗还含有乳液和抗原以外的组分，那么这些其它组分可包含在这两种试剂盒组分之一或二者中，或者可以是第三试剂盒组分的一部分。
适用于本发明混合疫苗或单独试剂盒组分的容器包括药瓶和一次性注射器。这些容器应无菌。
当组合物/组分装在药瓶中时，药瓶优选由玻璃或塑料材料制成。在将组合物加入药瓶之前，优选对其进行灭菌。为了避免胶乳过敏患者可能产生的问题，药瓶优选用无胶乳塞子密封，且优选所有包装材料均不含胶乳。在一个实施方式中，药瓶具有丁基橡皮塞。药瓶可包含单一剂量的疫苗/组分，或者可以包含一个以上剂量('多剂量'药瓶)，如10个剂量。在一个实施方式中，药瓶包含10x0.25ml剂量的乳液。优选的药瓶由无色玻璃制成。
药瓶可以有适合的帽(如鲁尔(Luer)锁)，以便将预填装注射器插入该帽，可以将注射器的内容物推入药瓶(例如，为了在其中重建冻干物质)，可以将药瓶的内容物移回注射器中。从药瓶中拔出注射器后，可连上针头并将该组合物给予患者。该帽优选位于封口或盖子内侧，以便在封口或盖子打开后才能接触到该帽。
将组合物/组分包装到注射器中时，注射器通常不会连接有针头，但可提供注射器单独的针头以组装和使用。优选安全性针头。一般是1-英寸23号、1-英寸25号和5/8-英寸25号针头。可提供有剥离标签的注射器，其上可打印上内含物的批号、流感季节和过期日期，以帮助记录保存。注射器的活塞优选带有防脱装置，以防止活塞在吸出时偶然脱出。注射器可以有胶乳橡胶帽和/或活塞。一次性注射器含有单一剂量的疫苗。注射器通常带有顶帽，以在连接针头前密封顶端，所述顶帽优选由丁基橡胶制成。如果注射器和针头分开包装，则针头优选装有丁基橡胶护罩。
可用缓冲液稀释乳液，然后包装入药瓶或注射器。常用缓冲剂包括：磷酸盐缓冲剂；Tris缓冲剂；硼酸盐缓冲剂；琥珀酸盐缓冲剂；组氨酸缓冲剂；或柠檬酸盐缓冲剂。稀释可降低佐剂组分的浓度，同时维持其相对比例，例如提供“半强度”佐剂。
容器可标注有半剂量体积，以例如利于递送给儿童。例如，含有0.5ml剂量的注射器可标有0.25ml体积的标记。
采用玻璃容器(如注射器或药瓶)时，优选采用由硼硅酸盐玻璃，而非碱石灰玻璃制成的容器。
各种抗原均可用于水包油乳液，包括但不限于：病毒抗原，如病毒表面蛋白；细菌抗原，如蛋白质和/或糖抗原；真菌抗原；寄生物抗原；和肿瘤抗原。本发明特别可用于针对以下的疫苗：流感病毒、HIV、钩虫、乙肝病毒、单纯疱疹病毒、狂犬病病毒、呼吸道合胞病毒、巨细胞病毒、金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)、衣原体、SARS冠状病毒、水痘-带状疱疹病毒、肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae)、脑膜炎奈瑟氏菌(NeisseriaMeningitidis)、结核分支杆菌(Mycobacterium tuberculosis)、炭疽杆菌(Bacillusanthracis)、EB病毒(Epstein Barr virus)、人乳头瘤病毒等。例如：
·流感病毒抗原。抗原可以采取活病毒或者灭活病毒的形式。采用灭活病毒时，该疫苗可包含全病毒、裂解病毒颗粒或纯化的表面抗原(包括血凝素，通常也包括神经氨酸酶)。流感抗原也可以病毒体形式出现。所述抗原可具有选自下组的任何血凝素亚型：H1、H2、H3、H4、H5、H6、H7、H8、H9、H10、H11、H12、H13、H14、H15和/或H16。疫苗可包括来自一种或多种(例如1、2、3、4或更多种)流感病毒株包括甲型流感病毒和/或乙型流感病毒的抗原，例如单价A/H5N1或A/H1N1疫苗或三价A/H1N1+A/H3N2+B疫苗。流感病毒可以是重配株，并可通过逆向遗传学技术获得(Hoffmann等人.(2002)Vaccine 20:3165-3170；Subbarao等人.
(2003)Virology 305:192-200；Liu等人.(2003)Virology 314:580-590；Ozaki等人.(2004)J.Virol.78:1851-1857；Webby等人.(2004)Lancet 363:1099-1103)。因此，该病毒可包含来自A/PR/8/34病毒(一般是来自A/PR/8/34的6个节段，其中HA和N节段来自疫苗株，即6:2重配株)的一个或多个RNA节段。可以在鸡蛋(如含胚鸡蛋)或细胞培养物上培养用作抗原来源的病毒。使用细胞培养物时，细胞底物一般是哺乳动物细胞系，如MDCK；CHO；293T；BHK；Vero；MRC-5；PER.C6；WI-38；等。用于培养流感病毒的哺乳动物细胞系优选包括：MDCK细胞(WO97/37000；Brands等人.(1999)Dev Biol Stand 98:93-100；Halperin等人.(2002)Vaccine 20:1240-7；Tree等人.(2001)Vaccine 19:3444-50)，衍生自马达二氏(Madin Darby)犬肾；Vero细胞(Istner等人.(1998)Vaccine 16:960-8；Kistner等人.(1999)Dev Biol Stand 98:101-110；Bruhl等人.(2000)Vaccine 19:1149-58)，衍生自非洲绿猴肾；或PER.C6细胞(Pau等人.(2001)Vaccine 19:2716-21)，衍生自人胚视网膜母细胞。在哺乳动物细胞系上培养病毒时，该组合物宜不含鸡蛋蛋白质(如卵清蛋白和卵类粘蛋白)和鸡DNA，从而降低变应原性。通常参照血凝素(HA)含量(通常用SRID测定)标准化疫苗的单位剂量。现有的疫苗一般含有约15μg HA/株，但也可使用更低的剂量，特别是使用佐剂时。采用了分数剂量如'A(即7.5μgHA/株)、'A和Vs(WO01/22992；Hebe等人.(2004)VirusRes.103(1-2):163-71)，以及较高剂量(如3x或9x剂量(Treanor等人(1996)J Infect Dis173:1467-70；Keitel等人(1996)Clin Diagn Lab Immunol 3:507-10))。因此，疫苗可包含0.1-150μg HA/流感株，优选0.1-50μg，例如0.1-20μg、0.1-15μg、0.1-10μg、0.1-7.5μg、0.5-5μg等。具体剂量包括例如，每株约15、约10、约7.5、约5、约3.8、约3.75、约1.9、约1.5μg等。
·人免疫缺陷病毒，包括HIV-1和HIV-2。该抗原一般是包膜抗原。
·乙肝病毒表面抗原。该抗原优选通过重组DNA方法获得，例如在酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)中表达后获得。与天然病毒HBsAg不同，重组酵母表达的抗原是非糖基化抗原。它可以是基本呈球形的颗粒形式(平均直径约为20nm)，包括含有磷脂的脂质基质。不像天然HBsAg颗粒，酵母表达的颗粒可能包含磷脂酰肌醇。HBsAg可来自以下任何亚型：ayw1、ayw2、ayw3、ayw4、ayr、adw2、adw4、adrq-和adrq+。
·钩虫，特别是犬中发现的钩虫(犬钩虫(Ancylostoma caninum))。这种抗原可以是重组Ac-MTP-1(虾红素样金属蛋白酶)和/或天冬氨酸血红蛋白酶(Ac-APR-1)，它可以在杆状病毒/昆虫细胞系统中表达为分泌蛋白(Williamson等人(2006)Infection andImmunity 74:961-7；Loukas等人
(2005)PLoS Med 2(10)：e295),
·单纯疱疹病毒抗原(HSV)。用于本发明的优选HSV抗原是膜糖蛋白gD。优选使用HSV-2株的gD('gD2'抗原)。该组合物可使用C-末端膜锚定区缺失的gD形式(EP-A-0139417)，如包含天然蛋白的氨基酸1-306且C-末端加入天冬酰胺和谷胺酰胺的截短的gD。这种蛋白质形式包括信号肽，信号肽被切割后产生成熟的283个氨基酸的蛋白质。缺失锚定物使得该蛋白制备成可溶形式。
·人乳头瘤病毒抗原(HPV)。用于本发明的优选HPV抗原是L1衣壳蛋白，该蛋白可组装形成称为病毒样颗粒(VLP)的结构。可通过在酵母细胞(例如酿酒酵母(S.cerevisiae))或昆虫细胞(例如夜蛾(Spodoptera)细胞，如草地贪夜蛾(S.frugiperda)或果蝇(Drosophila)细胞)中重组表达L1产生VLP。在酵母细胞中，质粒载体可携带L1基因；在昆虫细胞中，杆状病毒载体可携带L1基因。更优选地，该组合物包含来自HPV-16和HPV-18株的L1VLP。已证明这种二价组合非常有效(Harper等人(2004)Lancet364(9447):1757-65)。除了HPV-16和HPV-18株外，也可能包含来自HPV-6和HPV-11株的L1VLP。也可能采用致癌性HPV株。疫苗可包含每HPV株20-60μg/ml(如约40μg/ml)的L1。
·炭疽抗原。炭疽是由炭疽杆菌(Bacillus anthracis)引起的。合适的炭疽杆菌抗原包含A组分(致死因子(LF)和水肿因子(EF))，二者共有称为保护性抗原(PA)的B组分)(J Toxicol Clin Toxicol(2001)39:85-100；Demicheli等人(1998)Vaccine 16:880-884；Stepanov等人(1996)J Biotechnol 4AΛ55A60)。任选地，可使抗原脱毒(J Toxicol ClinToxicol(2001)39:85-100；Demicheli等人(1998)Vaccine 16:880-884；Stepanov等人(1996)J Biotechnol4AΛ55A60)。
·金黄色葡萄球菌(S.aureus)抗原。已知各种金黄色葡萄球菌抗原。合适的抗原包括荚膜糖(例如5型和/或8型菌株)和蛋白(例如IsdB,Hla,等)。荚膜糖抗原理想地与载体蛋白偶联。
·肺炎链球菌(S.pneumoniae)抗原。已知各种肺炎链球菌抗原。合适的抗原包括荚膜糖(例如来自血清型1、4、5、6B、7F、9V、14、18C、19F、和/或23F)和蛋白质(例如肺炎球菌溶血素、脱毒的肺炎球菌溶血素、聚组氨酸三聚体蛋白D(PhtD)等)。荚膜糖抗原理想地与载体蛋白偶联。
·癌抗原。已知各种肿瘤特异性抗原。本发明可被用于引发针对肺癌、黑素瘤、乳腺癌、前列腺癌等的免疫治疗性应答的抗原。
抗原溶液通常与乳液以例如1:1的体积比混合。该混合可以由疫苗生产商在装填前进行，或可在使用时由健康护理工作者进行。
药物组合物
抗原溶液通常与乳液以例如1:1的体积比混合。该混合可以由疫苗生产商在装填前进行，或可在使用时由健康护理工作者进行。
用本发明方法制备的组合物是药学上可接受的。它们可包含除了所述乳液和所述可任选抗原以外的组分。
组合物可含有防腐剂，如硫柳汞或2-苯氧乙醇。然而，疫苗优选应基本不含(即小于5μg/ml)含汞物质，如不含硫柳汞(Banzhoff(2000)
Immunology Letters 71:91-96；WO02/097072)。更优选无汞的疫苗和组分。
组合物的pH通常为5.0-8.1，更常为6.0-8.0，例如6.5-7.5。因此，本发明方法可包括在包装前调整疫苗pH的步骤。
该组合物优选无菌。该组合物优选无热原，如每剂量含有<1EU(内毒素单位，标准量度)，优选每剂量<0.1EU。该组合物优选不含谷蛋白。
该组合物可含有用于单一免疫的物质，或者可含有用于多次免疫的物质(即‘多剂量’试剂盒)。多剂量配置优选含有防腐剂。
疫苗的给药剂量体积一般为约0.5ml，但可将一半剂量(即约0.25ml)给予儿童。
治疗方法和疫苗的给予
疫苗的给药剂量体积一般为约0.5ml，但可将一半剂量(即约0.25ml)给予儿童。
本发明提供用本发明方法制备的试剂盒和组合物。根据本发明的方法制备的组合物适合给予人类患者，本发明提供了在患者中产生免疫应答的方法，包括将这种组合物给予患者的步骤。
本发明也提供用作药物的这些试剂盒和组合物。
本发明也提供以下应用：(i)抗原的水性制剂；和(ii)按照本发明制备的水包油乳液在制备引起患者中免疫应答的药物中的用途。
这些方法和应用引起的免疫应答通常包括抗体应答，优选保护性抗体应答。
可以各种方式给予该组合物。最优选的免疫途径是肌肉内注射(如注射到上肢或下肢)，但其它可用的途径包括皮下注射、鼻内(Greenbaum等人(2004)Vaccine 22:2566-77；Zurbriggen等人(2003)Expert Rev Vaccines2:295-304；Piascik(2003)J Am PharmAssoc(Wash DC).43:728-30)、口服(Mann等人(2004)Vaccine 22:2425-9)、皮内(Halperin等人(1979)Am JPublic Health 69:1247-50；Herbert等人(1979)J Infect Dis 140:234-8)、经皮、透皮(Chen等人(2003)Vaccine 21:2830-6)等。
按照本发明制备的疫苗可用于治疗儿童和成年人。患者可以小于1岁、1-5岁、5-15岁、15-55岁或至少55岁。患者可以是老年人(如≥50岁，优选≥65岁)、青少年(如<5岁)、住院患者、健康护理人员、军队服役人员和军人、怀孕妇女、慢性疾病患者、免疫缺陷患者和去国外旅行的人。然而所述疫苗不仅适用于这些人群，还可用于更广泛的群体。
可在与其它疫苗基本相同的时间(例如在向健康护理专业人员的同一次医疗咨询或就诊期间)将本发明疫苗给予患者。
中间过程
本发明还提供了制备水包油乳液的方法，包括微流化第一乳液形成第二乳液，然后过滤第二乳液。第一乳液具有如上所述的特征。
本发明还提供了制备水包油乳液的方法，包括过滤第二乳液，即微流化乳液。所述微流化乳液具有如上所述的特征。
本发明还提供了一种生产疫苗的方法，包括将乳液与抗原结合，其中所述乳液具有上述特征。
具体实施方案
以下段落总结了本发明的某些优选实施方案。该列表是示例性的，并未穷尽本公开提供的所有实施方案。
实施方案1.改善水包油乳液过滤通过膜滤器的方法，包括在小于或等于10℃的温度将水包油乳液过滤通过膜滤器，其中相比于在大于10℃的温度过滤水包油乳液，所述滤器通过量增加。
实施方案2.制备水包油乳液的方法，包括在小于或等于10℃的温度将水包油乳液过滤通过膜滤器，其中相比于大于10℃的温度，所述滤器通过量增加。
实施方案3.制备水包油乳液的方法，包括将水包油乳液过滤通过膜滤器，其在低于10℃的温度下的滤器通过量大于在高于10℃的温度下的滤器通过量。
实施方案4.制备水包油乳液佐剂的方法，包括将水包油乳液佐剂过滤通过膜滤器，其在5℃温度的佐剂通过量大于在高于10℃的温度的佐剂通过量。
实施方案5.制备水包油乳液的方法，包括将油、水性组分和表面活性剂混合以形成水包油乳液；将该混合物微流化以减小水包油乳液的平均液滴尺寸；且在小于或等于10℃的温度将该微流化水包油乳液过滤通过膜滤器，其中相比于在大于10℃的温度过滤水包油乳液，所述滤器通过量增加。
概要
本发明还提供了制备疫苗的方法，包括组合乳液和抗原，其中乳液具有上述特征。
术语“包含”涵盖“含有”以及“由……组成”，例如“包含”X的组合物可仅由X组成或可含有其它物质，例如X+Y。
词语“基本上”不排除“完全”，如“基本上不含”Y的组合物可能完全不含Y。在必要时，词语“基本上”可从本发明的定义中省略。
与数值x相关的术语“约”是任选的并表示例如x±10％。
除非另有说明，包括混合两种或多种组分的步骤的过程不要求任何特定的混合顺序。因此，组分可以任何顺序混合。有三种组分时，可将两种组分相互合并，然后可将合并物再与第三种组分混合等。
将动物(且具体是牛)材料用于培养细胞时，其应获自未患传染性海绵状脑病(TSE)，具体是未患牛海绵状脑病(BSE)的来源。总之，优选在完全不含动物来源材料的情况下培养细胞。
权利要求列表中的所有权利要求作为附加实施方案通过引用整体并入说明书。
实施例
实施例1：确定用于
过滤的滤器
在
过滤期间，测试了包括Express SHC、Express SHF、Durapore 0.22μm和Durapore 0.45/0.22μm在内的几种滤器，以确定在水包油乳液佐剂的分级和无菌过滤期间提高滤器能力的最佳滤器。测试的滤器描述如下表1所示。
表1.在
分级过滤试验中测试的滤器
在各种温度:5℃、30℃和40℃下测量上述滤器针对
的过滤Vmax(L/m2)。所有滤器在43psi恒定压力下解耦运行。低压为22psi，高压为50psi。
简而言之，用于Vmax过滤的方案包括首先将滤器装置安装至压力容器，该压力容器在滤器上游具有止动锁。接下来，向压力容器中加入进料，使得可以过滤1000L/m2。将装置排气以充分去除空气，并将容器加压。
一旦开始过滤，就定期记录时间和体积。在所有材料耗尽或观察到>75％的流量衰减后，试验结束。
对于在5℃下进行的试验，将研究材料保存在冷室中，然后取出，并在环境温度下立即过滤。对于在30℃和40℃下进行的试验，研究材料在水浴中加热，然后取出，并在环境温度下立即过滤。
Vmax研究的结果如下表2所示。
表2.
过滤研究中的Vmax结果
Vmax研究的结果表明，灭菌级滤器能够在43psi的压降下过滤高达～30L/m2的
与30℃和40℃相比，SHF、SHC和Durapore过滤器在5℃时有所改进。SHF的过滤能力最高，其次是SHC。SHF在低温下表现稍好。SHF和SHC之间的批间差异相当低。数据表明，增加压力会增加过滤能力。例如，当压力从42.9psi增加到49.9psi时，SHC的能力显示有约1.5倍改善。
结论
大体上，
的过滤表现出高灭菌级过滤器结垢率和剪切稀化性能。在所有测试的灭菌级滤器中，Express SHF表现出最有利的滤器水力学性能。Express SHC HighArea为处理一批330升的
提供了最低的安装，因为高面积设备(high area device)在类似的性能下为每个筒提供了两倍的面积。
单独的过滤研究还表明，在较冷温度下使用各种膜进行过滤时，通过量显著增加，如下表3和4以及图1-3所示。
表3:涉及ECV的额外通过量结果
表4:涉及Sartopore 2的额外通过量结果
下表5还表明，在较冷温度(例如10℃)下，增加压力可进一步提高通过量。
表5:Sartopore 2灭菌滤器通过量汇总
1对数趋势线无法准确建立，所以使用线性趋势线。实际的V80通过量可能更高。
参考文献
所有提及的参考文献均通过引用整体并入本文。
Claims (31)
1.改善水包油乳液过滤通过膜滤器的方法，包括在小于或等于10℃的温度将水包油乳液过滤通过膜滤器，其中相比于在大于10℃的温度过滤水包油乳液，所述滤器通过量增加。
2.制备水包油乳液的方法，包括在小于或等于10℃的温度将所述水包油乳液过滤通过膜滤器，其中相比于大于10℃的温度，所述滤器通过量增加。
3.根据权利要求1-2任一项的方法，其中过滤所述水包油乳液减少了水包油乳液中的生物负荷量。
4.根据权利要求1-2任一项的方法，其中过滤所述水包油乳液包括无菌过滤该水包油乳液。
5.根据权利要求1-2任一项的方法，其中过滤所述水包油乳液包括粒度减小地过滤该水包油乳液。
6.根据权利要求1-5任一项的方法，包括在2-8℃的温度将所述水包油乳液过滤通过膜滤器。
7.根据权利要求1-6任一项所述的方法制备的水包油乳液。
8.根据权利要求7的水包油乳液，其中所述水包油乳液为佐剂。
9.根据权利要求7-8任一项的水包油乳液，其中所述水包油乳液包含角鲨烯。
10.根据7-9权利要求任一项的水包油乳液，其中所述水包油乳液包括亚微米水包油乳液，其包含(a)角鲨烯、聚山梨酯80和脱水山梨醇三油酸酯，或(b)角鲨烯、生育酚和聚山梨酯80。
11.根据权利要求7-10任一项的水包油乳液，其中所述水包油乳液为
12.疫苗组合物，其包含根据权利要求1-6任一项所述的方法制备的水包油乳液。
13.权利要求12的疫苗组合物，其中所述疫苗组合物特异性靶向流感病毒。
14.根据权利要求12-13任一项的疫苗组合物，其中所述水包油乳液为
15.制备水包油乳液佐剂的方法，包括将所述水包油乳液佐剂过滤通过膜滤器，其在5℃温度的佐剂通过量大于在高于10℃的温度的佐剂通过量。
16.根据权利要求15所述的方法制备的水包油乳液佐剂。
17.根据权利要求16的水包油乳液佐剂，其中所述水包油乳液佐剂为
18.疫苗组合物，其包含根据权利要求15所述的方法制备的水包油乳液佐剂。
19.根据权利要求18的疫苗组合物，其中所述疫苗组合物特异性靶向流感病毒。
20.根据权利要求18-19任一项的疫苗组合物，其中所述水包油乳液佐剂为
21.制备水包油乳液的方法，包括：
将油、水性组分和表面活性剂混合以形成水包油乳液；
将该混合物微流化以减小水包油乳液的平均液滴尺寸；和
在小于或等于10℃的温度将该微流化水包油乳液过滤通过膜滤器，其中相比于在大于10℃的温度过滤水包油乳液，所述滤器通过量增加。
22.根据权利要求21的方法，其中所述水包油乳液包含角鲨烯。
23.根据权利要求21-22任一项的方法，其中将油、水性组分和表面活性剂混合包括将所述组分均质化。
24.根据权利要求21-23任一项所述的方法制备的水包油乳液。
25.权利要求24的水包油乳液，其中所述水包油乳液为
26.疫苗组合物，其包含根据权利要求21-23任一项所述的方法制备的水包油乳液。
27.根据权利要求26的疫苗组合物，其中所述疫苗组合物特异性靶向流感病毒。
28.根据权利要求26-27任一项的疫苗组合物，其中所述水包油乳液为
29.根据权利要求1-23任一项的方法，进一步包括将水包油乳液与抗原化合物混合。
30.根据权利要求29的方法，其中所述抗原化合物为流感病毒抗原。
31.根据权利要求29-30任一项的方法，进一步包括将水包油乳液与抗原组分一起包装在试剂盒中。
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Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN118059227A (zh) * | 2024-04-22 | 2024-05-24 | 江苏瑞科生物技术股份有限公司 | 一种水包油乳剂在制备狂犬病免疫套装中的应用 |
Family Cites Families (36)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4060082A (en) | 1976-08-16 | 1977-11-29 | Mpl, Inc. | Dual-ingredient medication dispenser |
| NZ209308A (en) | 1983-08-30 | 1991-08-27 | Genentech Inc | Vaccine against hsv involving a truncated membrane-free derivative of a membrane-bound protein |
| US4705753A (en) | 1984-06-08 | 1987-11-10 | Gregor Harry P | Biologically active acrylonitrile-based copolymeric membrane |
| US4618533A (en) | 1984-11-30 | 1986-10-21 | Millipore Corporation | Porous membrane having hydrophilic surface and process |
| US4964990A (en) | 1987-05-20 | 1990-10-23 | Gelman Sciences, Inc. | Filtration membranes and method of making the same |
| US4943374A (en) | 1988-04-21 | 1990-07-24 | Gessner & Co., Gmbh | Use of a microporous membrane constructed of polyether sulfon and hydrophilization agent for the filtration of beer |
| EP0520979B1 (en) | 1988-10-17 | 1999-01-13 | Hemasure, Inc. | Process for the covalent surface modification of hydrophobic polymers and articles made therefrom |
| CA2017507C (en) | 1989-05-25 | 1996-11-12 | Gary Van Nest | Adjuvant formulation comprising a submicron oil droplet emulsion |
| JPH0614756Y2 (ja) | 1991-06-26 | 1994-04-20 | 株式会社アルテ | 組み立て式の２室式容器兼用注射器 |
| US5178765A (en) | 1991-09-18 | 1993-01-12 | Gelman Sciences Inc. | Hydrophilic membranes prepared from polyethersulfone/poly-2-oxazoline/polyvinylpyrrolidone blend |
| US5277812A (en) | 1993-02-12 | 1994-01-11 | Gelman Sciences Inc. | Inter-penetrating network charge modified microporous membrane |
| US5531893A (en) | 1993-02-12 | 1996-07-02 | Gelman Sciences Inc. | Inter-penetrating network charge modified microporous membrane |
| US5496284A (en) | 1994-09-27 | 1996-03-05 | Waldenburg; Ottfried | Dual-chamber syringe & method |
| DE19612966B4 (de) | 1996-04-01 | 2009-12-10 | Novartis Vaccines And Diagnostics Gmbh & Co. Kg | MDCK-Zellen und Verfahren zur Vermehrung von Influenzaviren |
| AU3186297A (en) | 1996-07-05 | 1998-02-02 | Debiotech S.A. | Dual-chamber syringe for mixing two substances prior to injection |
| JP4451931B2 (ja) | 1996-11-12 | 2010-04-14 | ホアットマン，インコーポレーテッド | 親水性のポリマー状の相転換メンブレン |
| US5971953A (en) | 1998-01-09 | 1999-10-26 | Bachynsky; Nicholas | Dual chamber syringe apparatus |
| AU9785598A (en) | 1997-10-03 | 1999-04-27 | Texas Pharmaceuticals, Inc. | Improved dual chamber syringe apparatus |
| US6039872A (en) | 1997-10-27 | 2000-03-21 | Pall Corporation | Hydrophilic membrane |
| WO1999050189A1 (fr) | 1998-03-30 | 1999-10-07 | Ebara Corporation | Procede et dispositif de traitement des eaux riches en manganese |
| GB9808689D0 (en) | 1998-04-23 | 1998-06-24 | Kalsep Ltd | Improved membrane |
| DE19835749C1 (de) | 1998-08-07 | 2000-02-03 | Dieter Perthes | Fertig-Spritze für nicht-stabile Arzneimittel |
| US6193077B1 (en) | 1999-02-08 | 2001-02-27 | Osmonics, Inc. | Non-cracking hydrophilic polyethersulfone membranes |
| GB9923176D0 (en) * | 1999-09-30 | 1999-12-01 | Smithkline Beecham Biolog | Novel composition |
| TWI228420B (en) | 2001-05-30 | 2005-03-01 | Smithkline Beecham Pharma Gmbh | Novel vaccine composition |
| EP1728528B1 (en) | 2004-03-23 | 2013-06-19 | Nipro Corporation | Pre-filled syringe |
| BRPI0515961A (pt) | 2004-10-13 | 2008-08-12 | 3M Innovative Properties Co | método de manufatura de membrana de polietersulfona hidrofìlica |
| US8703095B2 (en) | 2005-07-07 | 2014-04-22 | Sanofi Pasteur S.A. | Immuno-adjuvant emulsion |
| NZ594482A (en) | 2005-11-04 | 2012-11-30 | Novartis Vaccines & Diagnostic | Influenza vaccines with reduced amount of oil-in-water emulsion as adjuvant |
| FR2896162B1 (fr) | 2006-01-13 | 2008-02-15 | Sanofi Pasteur Sa | Emulsion huile dans eau thermoreversible |
| EP2422810B1 (en) * | 2006-07-17 | 2014-10-22 | GlaxoSmithKline Biologicals s.a. | Influenza vaccine |
| GB0622282D0 (en) | 2006-11-08 | 2006-12-20 | Novartis Ag | Quality control methods |
| PL2343052T3 (pl) * | 2009-12-03 | 2013-11-29 | Novartis Ag | Hydrofilowa filtracja podczas produkcji adiuwantów do szczepionek |
| DE102009056884B4 (de) * | 2009-12-03 | 2021-03-18 | Novartis Ag | Impfstoff-Adjuvantien und verbesserte Verfahren zur Herstellung derselben |
| AU2013202690B2 (en) * | 2009-12-03 | 2016-02-11 | Seqirus UK Limited | Hydrophilic filtration during manufacture of vaccine adjuvants |
| EP3119430A1 (en) * | 2014-03-17 | 2017-01-25 | GlaxoSmithKline Biologicals S.A. | Oil/surfactant mixtures for self-emulsification |
-
2021
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Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN118059227A (zh) * | 2024-04-22 | 2024-05-24 | 江苏瑞科生物技术股份有限公司 | 一种水包油乳剂在制备狂犬病免疫套装中的应用 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP2023532944A (ja) | 2023-08-01 |
| WO2022003560A1 (en) | 2022-01-06 |
| US20230218526A1 (en) | 2023-07-13 |
| EP4171514A1 (en) | 2023-05-03 |
| AU2021302954A1 (en) | 2023-02-16 |
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