[go: up one dir, main page]

CN116057066A - 包含肽醛的液体组合物 - Google Patents

包含肽醛的液体组合物 Download PDF

Info

Publication number
CN116057066A
CN116057066A CN202180057243.7A CN202180057243A CN116057066A CN 116057066 A CN116057066 A CN 116057066A CN 202180057243 A CN202180057243 A CN 202180057243A CN 116057066 A CN116057066 A CN 116057066A
Authority
CN
China
Prior art keywords
group
component
propanediol
liquid composition
detergent
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN202180057243.7A
Other languages
English (en)
Inventor
S·许弗
S·库贝尔贝克
G·本内曼
K-S·蒂金
G·拜尔
S·耶内维因
S·费舍尔
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
BASF SE
Original Assignee
BASF SE
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by BASF SE filed Critical BASF SE
Publication of CN116057066A publication Critical patent/CN116057066A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06008—Dipeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/06017—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C07K5/06026—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing 0 or 1 carbon atom, i.e. Gly or Ala
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06008—Dipeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/06017—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C07K5/06034—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing 2 to 4 carbon atoms
    • C07K5/06052—Val-amino acid
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
    • C11D—DETERGENT COMPOSITIONS; USE OF SINGLE SUBSTANCES AS DETERGENTS; SOAP OR SOAP-MAKING; RESIN SOAPS; RECOVERY OF GLYCEROL
    • C11D3/00—Other compounding ingredients of detergent compositions covered in group C11D1/00
    • C11D3/16—Organic compounds
    • C11D3/20—Organic compounds containing oxygen
    • C11D3/2003—Alcohols; Phenols
    • C11D3/2041—Dihydric alcohols
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
    • C11D—DETERGENT COMPOSITIONS; USE OF SINGLE SUBSTANCES AS DETERGENTS; SOAP OR SOAP-MAKING; RESIN SOAPS; RECOVERY OF GLYCEROL
    • C11D3/00—Other compounding ingredients of detergent compositions covered in group C11D1/00
    • C11D3/16—Organic compounds
    • C11D3/20—Organic compounds containing oxygen
    • C11D3/2003—Alcohols; Phenols
    • C11D3/2041—Dihydric alcohols
    • C11D3/2044—Dihydric alcohols linear
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
    • C11D—DETERGENT COMPOSITIONS; USE OF SINGLE SUBSTANCES AS DETERGENTS; SOAP OR SOAP-MAKING; RESIN SOAPS; RECOVERY OF GLYCEROL
    • C11D3/00—Other compounding ingredients of detergent compositions covered in group C11D1/00
    • C11D3/16—Organic compounds
    • C11D3/20—Organic compounds containing oxygen
    • C11D3/2093—Esters; Carbonates
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
    • C11D—DETERGENT COMPOSITIONS; USE OF SINGLE SUBSTANCES AS DETERGENTS; SOAP OR SOAP-MAKING; RESIN SOAPS; RECOVERY OF GLYCEROL
    • C11D3/00—Other compounding ingredients of detergent compositions covered in group C11D1/00
    • C11D3/16—Organic compounds
    • C11D3/26—Organic compounds containing nitrogen
    • C11D3/33—Amino carboxylic acids
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
    • C11D—DETERGENT COMPOSITIONS; USE OF SINGLE SUBSTANCES AS DETERGENTS; SOAP OR SOAP-MAKING; RESIN SOAPS; RECOVERY OF GLYCEROL
    • C11D3/00—Other compounding ingredients of detergent compositions covered in group C11D1/00
    • C11D3/16—Organic compounds
    • C11D3/38—Products with no well-defined composition, e.g. natural products
    • C11D3/386—Preparations containing enzymes, e.g. protease or amylase
    • C11D3/38636—Preparations containing enzymes, e.g. protease or amylase containing enzymes other than protease, amylase, lipase, cellulase, oxidase or reductase
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
    • C11D—DETERGENT COMPOSITIONS; USE OF SINGLE SUBSTANCES AS DETERGENTS; SOAP OR SOAP-MAKING; RESIN SOAPS; RECOVERY OF GLYCEROL
    • C11D3/00—Other compounding ingredients of detergent compositions covered in group C11D1/00
    • C11D3/16—Organic compounds
    • C11D3/38—Products with no well-defined composition, e.g. natural products
    • C11D3/386—Preparations containing enzymes, e.g. protease or amylase
    • C11D3/38663—Stabilised liquid enzyme compositions
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
    • C11D—DETERGENT COMPOSITIONS; USE OF SINGLE SUBSTANCES AS DETERGENTS; SOAP OR SOAP-MAKING; RESIN SOAPS; RECOVERY OF GLYCEROL
    • C11D3/00—Other compounding ingredients of detergent compositions covered in group C11D1/00
    • C11D3/43—Solvents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/14—Hydrolases (3)
    • C12N9/48—Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
    • C12N9/50—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25)
    • C12N9/64—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25) derived from animal tissue
    • C12N9/6421—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25) derived from animal tissue from mammals
    • C12N9/6424—Serine endopeptidases (3.4.21)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Y—ENZYMES
    • C12Y304/00—Hydrolases acting on peptide bonds, i.e. peptidases (3.4)
    • C12Y304/21—Serine endopeptidases (3.4.21)
    • C12Y304/21062—Subtilisin (3.4.21.62)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
    • C11D—DETERGENT COMPOSITIONS; USE OF SINGLE SUBSTANCES AS DETERGENTS; SOAP OR SOAP-MAKING; RESIN SOAPS; RECOVERY OF GLYCEROL
    • C11D2111/00—Cleaning compositions characterised by the objects to be cleaned; Cleaning compositions characterised by non-standard cleaning or washing processes
    • C11D2111/10—Objects to be cleaned
    • C11D2111/12—Soft surfaces, e.g. textile
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
    • C11D—DETERGENT COMPOSITIONS; USE OF SINGLE SUBSTANCES AS DETERGENTS; SOAP OR SOAP-MAKING; RESIN SOAPS; RECOVERY OF GLYCEROL
    • C11D2111/00—Cleaning compositions characterised by the objects to be cleaned; Cleaning compositions characterised by non-standard cleaning or washing processes
    • C11D2111/10—Objects to be cleaned
    • C11D2111/14—Hard surfaces

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Detergent Compositions (AREA)
  • Enzymes And Modification Thereof (AREA)

Abstract

本发明涉及一种液体组合物，包含组分(a)：至少一种肽醛，优选选自式(PA)化合物的三肽醛，其中R1和R2是使得NH‑CHR1‑CO和/或NH‑CHR2‑CO是非极性氨基酸，优选相互独立地选自Ala、Val、Gly和Leu的L或D‑氨基酸残基的基团，R3是使得NH‑CHR3‑CO是Tyr、Phe、Val、Ala或Leu的L或D‑氨基酸残基的基团；以及N‑末端保护基团Z选自苄氧羰基(Cbz)、对甲氧苄基羰基(MOZ)、苄基(Bn)、苯甲酰基(Bz)、对甲氧苄基(PMB)、对甲氧苯基(PMP)、甲酰基、乙酰基(Ac)、甲氧基、烷氧羰基、甲氧羰基、芴基甲氧羰基(Fmoc)或叔丁氧羰基(Boc)；组分(b)：至少两种有机溶剂，其中一种溶剂为1,2‑丙二醇并且至少一种其他有机溶剂选自“二醇(1,2‑丙二醇除外)”，1,2‑丙二醇:“二醇(1,2‑丙二醇除外)”的重量比为25:1‑1:4。

Description

包含肽醛的液体组合物
通常使用酶稳定剂来稳定液体产品中的酶。为了暂时抑制酶活性，可以使用可逆酶抑制剂，后者在酶的最终应用中释放，但是在储存条件下保持与酶结合。
要求提供在约20℃的温度和约101.3kPa的常压下均匀的液体产品。均匀是指该液体组合物不显示可见颗粒或浊度。具体而言，一个挑战是要提供包含在水和/或水溶混性有机溶剂中具有有限溶解性的酶稳定剂的含水产品。
该要求扩展到所述均匀产品的储存稳定性。储存稳定性/储存稳定就该产品的均匀性而言是指该液体组合物在4℃，30℃或37℃下储存之后该液体组合物不显示可见颗粒或浊度。
具体而言，需要提供包含至少一种水解酶的液体组合物。甚至更优选的要求涉及提供均匀的液体含酶产品，其中所包含的水解酶是储存稳定的。储存稳定性/储存稳定就水解酶稳定性而言是指包含在含水解酶产品中的至少一种水解酶在升高的温度30℃或37℃下储存28天或更长时间之后显示出足够的酶活性。足够的酶活性通常是指在液体含酶产品储存之后与在储存之前可用的初始酶催活性相比较时有足够的残留酶催活性。
该目的一方面是要找到一种溶剂体系，它允许将至少一种在水和/或水溶混性有机溶剂中具有有限溶解性的酶稳定剂溶解于含水的水解酶产品中。本发明的另一目的是要提供一种均匀液体组合物，其包含适合与至少一种水解酶组合的至少一种在水和/或水溶混性有机溶剂中具有有限溶解性的酶稳定剂。
本发明提供了液体组合物，包含：
组分(a)：至少一种酶稳定剂，优选肽醛，甚至更优选三肽醛，和组分(b)：至少两种有机溶剂的混合物，其中优选至少一种有机溶剂是1,2-丙二醇。
本发明组合物在20℃和101.3kPa下是液体。
本发明的液体组合物在环境温度下是均匀的并且在4℃，30℃或37℃下储存≥50天的过程中保持均匀性。
在一个实施方案中，本发明的液体组合物以与至少一种水解酶(组分(c))的组合提供，后者优选包含具有本文所公开的模体丝氨酸-组氨酸-天冬氨酸的催化三联体。
优选液体组合物就均匀性和残留酶活性而言是储存稳定的。
在一个方面，将液体组合物的各组分作为组合物或者单独加入至少一种洗涤剂组分中以提供液体洗涤剂配制剂，其中该液体洗涤剂配制剂优选包含至少一种水解酶(组分(c))，后者优选包含具有本文所公开的模体丝氨酸-组氨酸-天冬氨酸的催化三联体，并且其中所述洗涤剂配制剂是储存稳定的。
因此，本发明一方面涉及一种洗涤剂配制剂，包含：
组分(a)：至少一种酶稳定剂，优选肽醛，甚至更优选三肽醛，和组分(b)：至少两种有机溶剂的混合物，其中优选至少一种有机溶剂是1,2-丙二醇，以及
组分(c)：至少一种选自水解酶(EC 3)的酶，该酶优选包含具有本文所公开的模体丝氨酸-组氨酸-天冬氨酸的催化三联体，
以及至少一种洗涤剂组分。
在一个实施方案中，该洗涤剂配制剂是液体。
本发明的液体洗涤剂配制剂优选是储存稳定的。就包含至少一种水解酶(组分(c)，优选包含具有本文所公开的模体丝氨酸-组氨酸-天冬氨酸的催化三联体)的液体洗涤剂配制剂而言储存稳定性(在本文中可以称为洗涤剂内储存稳定性)涉及该水解酶在30℃或37℃下的储存稳定性，这意味着在储存之后与在储存之前可用的初始酶催活性相比较时有足够的残留酶催活性。
详细说明
本发明提供了一种均匀液体组合物，包含：
组分(a)：至少一种酶稳定剂，优选肽醛，甚至更优选三肽醛，组分(b)：至少两种有机溶剂的混合物，其中优选至少一种有机溶剂是1,2-丙二醇。
本发明组合物在20℃和101.3kPa下是液体。
组分(a)
组分(a)包含至少一种酶稳定剂。
至少一种酶稳定剂选自含硼化合物和肽稳定剂。
含硼化合物可以选自硼酸或其衍生物以及有机硼酸或其衍生物如芳基硼酸或其衍生物，其盐及其混合物。硼酸在本文中可以称为原硼酸。在一个实施方案中，含硼化合物选自也称为苯基硼酸(PBA)的苯硼酸(BBA)、其衍生物及其混合物。优选苯基硼酸衍生物选自4-甲酰基苯基硼酸(4-FPBA)、4-羧基苯基硼酸(4-CPBA)、4-羟甲基苯基硼酸(4-HMPBA)和对甲苯基硼酸(p-TBA)。优选本发明的液体组合物包含4-甲酰基苯基硼酸(4-FPBA)。
在一个实施方案中，本发明的液体组合物不含含硼化合物。
在一个实施方案中，组分(a)包含至少一种肽稳定剂，本文是指肽醛。至少一种肽醛选自二-、三-或四肽醛和醛类似物(如下中的任一种：形式B1-BO-R，其中R是H、CH3、CX3、CHX2或CH2X(X＝卤素)，BO是单一氨基酸残基(在一个实施方案中具有任选取代的脂族或芳族侧链)；以及B1由一个或多个任选包含N-末端保护基团的氨基酸残基(在一个实施方案中为1、2或3个)构成，或者如WO 09/118375和WO 98/13459所述，或者蛋白质类型的蛋白酶抑制剂如RASI、BASI、WASI(稻、大麦和小麦的双官能α-淀粉酶/枯草溶菌素抑制剂)或CI2或SSI)。
在优选实施方案中，该肽醛是三肽醛，优选选自式(PA)化合物或其盐或其亚硫酸氢盐加合物：
Figure BDA0004113429470000031
式(PA)中的R1、R2、R3和Z如下所定义：
R1是使得NH-CHR1-CO是Gly、Ala、Val、Leu、Ile、Met、Pro、Phe、Trp、Ser、Thr、Asp、Gln、Tyr、Cys、Lys、Arg、His、Asn、Glu、间酪氨酸、3,4-二羟基苯基丙氨酸、Nva或Nle的L或D-氨基酸残基的基团。优选R1是使得NH-CHR1-CO是Ala、Val、Gly、Arg、Leu、Phe、Ile、His或Thr的L或D-氨基酸残基的基团。更优选R1是使得NH-CHR1-CO是Ala、Val、Gly、Arg、Leu、Ile或His的L或D-氨基酸残基的基团。
R2是使得NH-CHR2-CO是Gly、Ala、Val、Leu、Ile、Met、Pro、Phe、Trp、Ser、Thr、Asp、Gln、Tyr、Cys、Lys、Arg、His、Asn、Glu、间酪氨酸、3,4-二羟基苯基丙氨酸、Nva或Nle的L或D-氨基酸残基的基团。优选R2是使得NH-CHR2-CO是Ala、Cys、Gly、Pro、Ser、Thr、Val、Nva或Nle的L或D-氨基酸残基的基团。更优选R2是使得NH-CHR2-CO是Ala、Gly、Pro或Val的L或D-氨基酸残基的基团。
R3是使得NH-CHR3-CO是Tyr、间酪氨酸、3,4-二羟基苯基丙氨酸、Phe、Val、Ala、Met，Nva、Leu、Ile或Nle或带有烷基的其他非天然氨基酸的L或D-氨基酸残基的基团。优选R3是使得NH-CHR3-CO是Tyr、Phe、Val、Ala或Leu的L或D-氨基酸残基的基团。
R1和R2可以是使得NH-CHR1-CO和/或NH-CHR2-CO是非极性氨基酸残基—在本文中包括包含脂族或芳族R基团的氨基酸—的基团。非极性氨基酸在本文中具体包括Gly、Ala、Val、Leu、Ile、Met、Pro、Phe和Trp。
在一个实施方案中，R1和R2是使得NH-CHR1-CO和/或NH-CHR2-CO是非极性氨基酸，优选相互独立地选自Ala、Val、Gly和Leu的L或D-氨基酸残基的基团。R3是使得NH-CHR3-CO是Tyr、Phe、Val、Ala或Leu的L或D-氨基酸残基的基团。
在一个实施方案中，R1是使得NH-CHR1-CO是Gly或Val的L或D-氨基酸残基的基团，R2是使得NH-CHR2-CO是Ala的L或D-氨基酸残基的基团以及R3是使得NH-CHR3-CO是Tyr、Ala或Leu的L或D-氨基酸残基的基团。
在一个实施方案中，选自R1、R2和R3中的至少两个是使得NH-CHR1-CO和/或NH-CHR2-CO和/或NH-CHR3-CO是非极性氨基酸残基，优选相互独立地选自Ala、Val、Gly和Leu的L或D-氨基酸残基的基团。
在一个实施方案中，R1是使得NH-CHR1-CO是Val的L或D-氨基酸残基的基团，R2是使得NH-CHR2-CO是Ala的L或D-氨基酸残基的基团以及R3是使得NH-CHR3-CO是Leu的L或D-氨基酸残基的基团。
在该肽醛中包含的非极性氨基酸越多，则在水和/或水溶混性溶剂如1,2-丙二醇和MPEG(甲氧基聚乙二醇)中增溶该肽稳定剂存在更大挑战。
式PA中的Z选自氢、N-末端保护基团以及一个或多个任选包含N-末端保护基团的氨基酸残基。优选Z是N-末端保护基团。
若Z是一个或多个包含N-末端保护基团的氨基酸残基，则该N-末端保护基团优选是小脂族基团，例如甲酰基、乙酰基、芴基甲氧羰基(Fmoc)、叔丁氧羰基(Boc)、甲氧羰基(Moc)、甲氧乙酰基(Mac)、氨基甲酸甲酯或甲氨基羰基/甲基脲基团。在三肽的情况下，该N-末端保护基团优选是庞大的芳族基团如苯甲酰基(Bz)、苄氧羰基(Cbz)、对甲氧苄基羰基(MOZ)、苄基(Bn)、对甲氧苄基(PMB)或对甲氧苯基(PMP)。
其他合适的N-末端保护基团描述于Greene’s Protective Groups in OrganicSynthesis，第5版，Peter G.M.Wuts，2014年由John Wiley&Sons，Inc出版以及Isidro-Llobet等，Amino Acid-Protecting Groups，Chem.Rev.2009 109(6)，2455-2504中。
在优选实施方案中，本发明的液体组合物包含至少一种选自式(PA)化合物的肽醛(组分(a))，其中
·R1是使得NH-CHR1-CO是Gly或Val的L或D-氨基酸残基的基团，R2是使得NH-CHR2-CO是Ala的L或D-氨基酸残基的基团以及R3是使得NH-CHR3-CO是Tyr、Ala或Leu的L或D-氨基酸残基的基团；以及
·N-末端保护基团Z选自苄氧羰基(Cbz)、对甲氧苄基羰基(MOZ)、苄基(Bn)、苯甲酰基(Bz)、对甲氧苄基(PMB)、对甲氧苯基(PMP)、甲酰基、乙酰基(Ac)、甲氧基、烷氧羰基、甲氧羰基、芴基甲氧羰基(Fmoc)或叔丁氧羰基(Boc)，
并且其中相对于该液体组合物的总重量以在约0.05-0.8重量％范围内的量包含至少一种肽醛，其中该量涉及100％活性物含量。优选以在约0.1-0.6重量％，约0.12-0.5重量％，约0.15-0.4％或约0.2-0.35重量％范围内的量包含该肽醛，全部相对于该液体组合物的总重量。
在更优选的实施方案中，至少一种肽醛选自式(PA)化合物，其中
·R1是使得NH-CHR1-CO是Val的L或D-氨基酸残基的基团，R2是使得NH-CHR2-CO是Ala的L或D-氨基酸残基的基团以及R3是使得NH-CHR3-CO是Leu的L或D-氨基酸残基的基团。
甚至更优选该肽醛的N-末端保护基团Z是苄氧羰基(Cbz)。
组分(b)
组分(b)包含至少两种二醇，优选二者均具有≥130℃的沸点。
在一个实施方案中，组分(b)包含1,2-丙二醇(即MPG，单丙二醇)和至少一种沸点≥170℃或≥190℃的“二醇(1,2-丙二醇除外)”。更优选该第二有机溶剂的沸点≥205℃。沸点在本文中是指在101.3kPa下的那些。
包含在组分(b)中的至少一种“二醇(1,2-丙二醇除外)”优选是水溶混性的。
“水溶混性/水溶混性的”就此而言是指“二醇(1,2-丙二醇除外)”以对本发明相关的在水中的那些比例混合形成均匀溶液的性能。“水溶混性/水溶混性的”优选涉及在环境温度至该第二有机溶剂的熔点的温度范围内的该性能。
优选沸点≥170℃的“二醇(1,2-丙二醇除外)”选自“α-ω二醇”、1,2-丁二醇、1,3-丁二醇、1,2-戊二醇和1,2-己二醇。在一个实施方案中，至少一种“二醇(1,2-丙二醇除外)”选自1,2-戊二醇和1,2-己二醇。在另一实施方案中，至少一种“二醇(1,2-丙二醇除外)”选自“α-ω二醇”。
“α-ω二醇”是指带有两个各自位于线性分子的一端的羟基的化合物(HO-R-OH)。优选α-ω二醇在约55℃或50℃的温度和101.3kPa的压力下是液体。
α-ω二醇优选选自式HO-R-OH的化合物，其中R是C3-C7亚烷基或CH2CH2-O-CH2CH2或CH2CH(CH3)-O-CH(CH3)-CH2，如1,3-丙二醇、1,4-丁二醇、1,6-己二醇、二甘醇和二丙二醇。更优选该α-ω二醇选自1,6-己二醇和二甘醇。最优选该α-ω二醇是1,6-己二醇。
本发明的液体组合物优选包含总量为约40-70重量％，优选约45-65重量％的组分(b)。例如，本发明的液体组合物中组分(b)的总量可以为约40重量％，约45重量％，约50重量％，约55重量％，约60重量％，约65重量％或约70重量％，全部相对于该液体组合物的总重量。
在一个实施方案中，液体组合物以在约10-60重量％，约20-55重量％，约20-60重量％，约30-55重量％，约20-30重量％范围内的量包含1,2-丙二醇，全部相对于该液体组合物的总重量。
当该“二醇(1,2-丙二醇除外)”选自1,2-戊二醇和1,2-己二醇时，MPG:“二醇(1,2-丙二醇除外)”重量比优选在4:1-1:4范围内，优选在组分(b)在液体组合物中的总量相对于该液体组合物的总重量为40-55重量％下。
优选液体组合物在组分(b)在液体组合物中的总量为40-50重量％下以在约10-40重量％范围内的量包含1,2-戊二醇或1,2-己二醇。按重量计是指相对于该液体组合物的总重量。
在一个实施方案中，MPG:1,2-戊二醇重量比在约2.5:1-1:4范围内。优选该液体组合物以前面所示量包含1,2-戊二醇。
在一个实施方案中，MPG:1,2-己二醇重量比在约4:1-1:1.5范围内。优选该液体组合物相对于该液体组合物的总重量以在约10-30重量％范围内的量包含1,2-己二醇。
当该“二醇(1,2-丙二醇除外)”选自“α-ω二醇”时，MPG:“二醇(1,2-丙二醇除外)”重量比优选在25:1-4:1范围内，优选在组分(b)在液体组合物中的总量相对于该液体组合物的总重量为50-60重量％下。
优选至少一种“α-ω二醇”以在约1-10重量％范围内的量包含在本发明的液体组合物中，优选在组分(b)在液体组合物中的总量为50-60重量％下，全部相对于该液体组合物的总重量。
“α-ω二醇”优选选自1,6-己二醇和二甘醇。
在一个实施方案中，MPG:1,6-己二醇重量比在约25:1-4.5:1，更优选12:1-4.5:1范围内。优选该液体组合物以在约1-10重量％范围内的量包含1,6-己二醇，优选在组分(b)在液体组合物中的总量为50-60重量％下。按重量计是指相对于该液体组合物的总重量。
在一个实施方案中，MPG:二甘醇重量比在约10:1范围内。优选该液体组合物以在约1-10重量％范围内，优选约5重量％的量包含二甘醇。优选所述量在组分(b)在液体组合物中的总量为约55重量％下适用。按重量计是指相对于该液体组合物的总重量。
在一个实施方案中，当“二醇(1,2-丙二醇除外)”选自1,2-戊二醇和1,2-己二醇时，“二醇(1,2-丙二醇除外)”:组分(a)重量比在约100:1-50:1范围内，优选以前面段落中所示的其他比例、量、组合和总量。
在一个实施方案中，当“二醇(1,2-丙二醇除外)”选自“α-ω二醇”，优选选自1,6-己二醇和二甘醇时，“二醇(1,2-丙二醇除外)”:组分(a)重量比在约40:1-10:1范围内，优选以前面段落中所示的其他比例、量、组合和总量。
在一个实施方案中，在本发明液体组合物中1,6-己二醇:组分(a)重量比在约30:1-10:1，优选25:1-20:1范围内，优选以前面段落中所示的其他比例、量、组合和总量。
在一个优选实施方案中，液体组合物以约12:1-7:1的重量比包含1,2-丙二醇和1,2-戊二醇；优选相对于该液体组合物的总重量以约30-35重量％的量包含1,2-丙二醇；优选以前面段落中所示的其他比例、量、组合和总量。
在一个实施方案中，本发明的液体组合物不含表面活性剂。“不含表面活性剂”是指相对于该液体组合物的总重量小于约10重量％，小于约8％，小于约6％，小于约4％，小于约2％的表面活性剂或者基本没有表面活性剂包含在液体组合物中。“表面活性剂”就本发明的液体组合物而言是指包含的全部表面活性剂。
本发明的液体组合物优选不含非磷酸盐基助洗剂。“不含非磷酸盐基助洗剂”是指相对于该液体组合物的总重量小于约3％，优选小于约2％，更优选小于约1重量％的非磷酸盐基助洗剂或者基本没有非磷酸盐基助洗剂包含在液体组合物中。“非磷酸盐基助洗剂”就本发明的液体组合物而言是指包含的非磷酸盐基助洗剂的总量。非磷酸盐基助洗剂优选选自如本文所公开的氨基羧酸盐、柠檬酸盐和膦酸盐。“基本没有非磷酸盐基助洗剂“是指非磷酸盐助洗剂的量小于0.1重量％，优选0重量％，全部相对于该液体组合物的总重量。
在一个实施方案中，本发明的液体组合物不含表面活性剂且不含非磷酸盐基助洗剂。
在一个实施方案中，液体组合物包含至少一种防腐剂。优选防腐剂是指为保存的目的加入液体组合物中的物质，更优选是指包含在生产方法所形成的液体组合物中的已知具有保存特征的化合物排除在术语防腐剂之外。在一个实施方案中，至少一种防腐剂选自2-苯氧基乙醇、戊二醛、2-溴-2-硝基-1,3-丙二醇和酸形式的甲酸或其盐以及4,4’-二氯-2-羟基二苯基醚。本发明的液体组合物相对于该液体组合物的总重量通常以小于10ppm的量，如以2ppm-5重量％的量包含至少一种防腐剂。在一个实施方案中，液体组合物不含防腐剂，意味着以小于1ppm的量包含防腐剂。
组分(c)
在优选实施方案中，液体组合物进一步包含至少一种水解酶(组分(c))。组分(c)包含至少一种水解酶(EC 3)。优选的酶选自作用于酯键的酶(E.C.3.1)、糖基化酶(E.C.3.2)和肽酶(E.C.3.4)。作用于酯键的酶(E.C.3.1)下文也称为脂酶和脱氧核糖核酸酶。糖基化酶(E.C.3.2)下文也称为淀粉酶、纤维素酶或甘露聚糖酶。肽酶(E.C.3.4)下文也称为蛋白酶。
包含在组分(c)中的水解酶由多肽序列(本文也称为氨基酸序列)标识。多肽序列规定了包括酶的“活性部位”在内的三维结构，后者又决定了该酶的催化活性。多肽序列可以由SEQ ID NO标识。根据世界知识产权局(WIPO)标准ST.25(1998)，本文中的氨基酸使用首字母大写的三字母码或相应的单字母表示。
包含在本发明组分(c)中的任何酶涉及：
·亲本多肽(序列)或氨基酸序列和/或
·变体亲本多肽(序列)或氨基酸序列，
这二者均具有酶催活性。具有酶催活性的蛋白或多肽是酶促活性的或者产生酶催转化，这意味着酶作用于底物上并将这些转化为产物。术语“酶”在本文中不包括酶的无活性变体。
(亲本蛋白或多肽，也称为“亲本酶”的)“亲本”序列是用于对该序列引入变化(例如通过引入一种或多种氨基酸替代、插入、缺失或其组合)，从而得到亲本序列的“变体”的起始序列。术语亲本酶(或亲本序列)包括野生型酶(序列)和合成产生的序列(酶)，它们用作引入(其他)变化的起始序列。
术语“酶变体”或“序列变体”或“变体酶”涉及在其氨基酸序列上一定程度不同于其亲本酶的酶。若无相反指明，具有“酶催活性”的变体酶是指该变体酶与相应亲本酶具有相同类型的酶催活性。
在描述酶变体中，与亲本序列相比较时通常出现替代、缺失和插入。本文使用本领域熟练技术人员已知的命名。氨基酸替代通常按如下描述：提供原始氨基酸，随后是在该氨基酸序列中的位置编号，随后是被替代的氨基酸。氨基酸缺失通常按如下描述：提供原始氨基酸，随后是在该氨基酸序列中的位置编号，随后是*。氨基酸插入通常按如下描述：提供原始氨基酸，随后是在该氨基酸序列中的位置编号，随后是原始氨基酸和额外的氨基酸。当在某一位置可以引入不同的改变时，这些不同的改变由逗号隔开。
酶变体通常由其与亲本酶相比较时的序列同一性定义。序列同一性通常以“％序列同一性”或“％同一性”提供。为了计算序列同一性，在第一步中必须产生序列比对。根据本发明，必须产生成对总体比对，这意味着两个序列必须在其完整长度上比对，这通常使用称为比对算法的数学方法产生。
根据本发明，比对通过使用Needleman和Wunsch的算法(J.Mol.Biol.(1979)48，第443-453页)产生。优选使用程序默认参数(缺口开启＝10.0，缺口延伸＝0.5和矩阵＝EBLOSUM62)将程序“NEEDLE”(The European Molecular Biology Open Software Suite(EMBOSS))用于本发明的目的。
根据本发明，应用％同一性的下列计算：％同一性＝(相同的残基/在其完整长度上显示本发明相应序列的比对区域的长度)*100。
根据本发明酶变体描述为至少n％与相应亲本酶的氨基酸序列相同的氨基酸序列，其中“n”为10-100的整数。在一个实施方案中，当与亲本酶的全长度氨基酸序列相比较时，变体酶至少85％，至少86％，至少87％，至少88％，至少89％，至少90％，至少91％，至少92％，至少93％，至少94％，至少95％，至少96％，至少97％，至少98％或至少99％相同，其中该酶变体具有酶催活性。
“酶催活性”是指酶所施加的催化效果，通常表示为单位/毫克酶(比活性)，后者涉及每分子酶每分钟转化的底物分子数(分子活性)。
当所述酶变体显示出相应亲本酶的酶催活性的至少90％，至少95％或100％时，变体酶根据本发明具有酶催活性。优选酶变体显示出相应亲本酶的酶催活性的至少100％。
在本发明的一个方面，包含在组分(c)中的至少一种酶是液体酶浓缩物的一部分。“液体”就酶浓缩物而言涉及在20℃和101.3kPa下的物理外观。该液体酶浓缩物通常由发酵得到。发酵是指在允许重组宿主细胞生长并表达所需蛋白的合适水基营养培养基中培养表达所需酶的重组细胞的过程。在发酵结束时，通常收集发酵液并将液体级分与固体级分分离。取决于该酶是否已分泌到液体级分中，可以由发酵液的液体级分或者由细胞裂解液回收所需蛋白或酶。所需酶的回收使用本领域熟练技术人员已知的方法。适合由发酵液回收蛋白或酶的方法包括但不限于收集、离心、过滤、萃取和沉淀。
液体酶浓缩物通常包含至多40重量％或至多30重量％或至多25重量％量的酶，全部相对于该酶浓缩物的总重量。
由发酵得到的酶浓缩物包含水和潜在的其他残留组分如源自发酵培养基的盐、源自生产宿主细胞的细胞碎片、在发酵过程中由生产宿主细胞产生的代谢产物。在一个实施方案中，残留组分以小于20重量％，小于10重量％或小于5重量％的量包含在液体酶浓缩物中，全部相对于该酶浓缩物的总重量。
在一个实施方案中，组分(c)包含至少一种包含氨基酸天冬氨酸、组氨酸和丝氨酸作为催化三联体的水解酶。在一个实施方案中，组分(c)包含至少一种包含具有选自天冬氨酸-组氨酸-丝氨酸和丝氨酸-组氨酸-天冬氨酸的模体的催化三联体的水解酶，其中这些氨基酸的相对顺序从氨基端基读取到羧基端基。
在优选实施方案中，该水解酶(组分(c))包含具有模体丝氨酸-组氨酸-天冬氨酸的催化三联体，其中这些氨基酸的相对顺序从氨基端基读取到羧基端基。优选所述水解酶(组分(c))选自蛋白酶和脂酶。
蛋白酶
在一个实施方案中，组分(c)包含至少一种蛋白酶。
在一个实施方案中，至少一种蛋白酶选自丝氨酸内肽酶(EC 3.4.21)，最优选胰凝乳蛋白酶相关的蛋白酶(3.4.21.1)和枯草溶菌素类型蛋白酶(EC3.4.21.62)。
在一个实施方案中，组分(c)包含至少一种包含具有选自天冬氨酸-组氨酸-丝氨酸和丝氨酸-组氨酸-天冬氨酸的模体的催化三联体的蛋白酶，其中这些氨基酸的相对顺序从氨基端基读取到羧基端基。
枯草溶菌素和胰凝乳蛋白酶相关的丝氨酸蛋白酶二者均具有包含天冬氨酸、组氨酸和丝氨酸的催化三联体。在枯草溶菌素相关的蛋白酶中，这些氨基酸的相对顺序从氨基端基到羧基端基读取为天冬氨酸-组氨酸-丝氨酸。然而，在胰凝乳蛋白酶相关的蛋白酶，该相对顺序为组氨酸-天冬氨酸-丝氨酸。
优选至少一种蛋白酶包含含有氨基酸天冬氨酸-组氨酸-丝氨酸的催化三联体，其中这些氨基酸的相对顺序从氨基端基读取到羧基端基。更优选至少一种蛋白酶是枯草溶菌素相关的蛋白酶。
在本发明的一个实施方案中，组分(c)包含至少一种选自下列的蛋白酶：来自解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)BPN'的枯草溶菌素(由Vasantha等(1984)J.Bacteriol.，第159卷，第811-819页和JA Wells等(1983)在Nucleic Acids Research，第11卷，第7911-7925页中所述)；来自地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)的枯草溶菌素(枯草溶菌素Carlsberg；公开于EL Smith等(1968)，J.Biol Chem，第243卷，第2184-2191页和Jacobs等(1985)，Nucl.Acids Res，第13卷，第8913-8926页中)；枯草溶菌素PB92(碱性蛋白酶PB92的原始序列描述于EP 283075A2中)；WO 89/06279中所公开的枯草溶菌素147和/或309(分别为
Figure BDA0004113429470000131
)；如WO 91/02792所公开的来自迟缓芽孢杆菌(Bacillus lentus)的枯草溶菌素，如来自WO 95/23221中所述迟缓芽孢杆菌DSM 5483或迟缓芽孢杆菌DSM5483的变体的枯草溶菌素；DE 10064983中所公开的来自嗜碱芽孢杆菌(Bacillus alcalophilus)(DSM 11233)的枯草溶菌素；WO 2003/054184中所公开的来自吉氏芽孢杆菌(Bacillus gibsonii)(DSM 14391)的枯草溶菌素；WO 2003/056017中所公开的来自芽孢杆菌属(Bacillus sp.)(DSM 14390)的枯草溶菌素；WO 2003/055974中所公开的来自芽孢杆菌属(DSM 14392)的枯草溶菌素；WO 2003/054184中所公开的来自吉氏芽孢杆菌(DSM 14393)的枯草溶菌素；如WO 2005/063974中所述具有SEQ ID NO:4的枯草溶菌素；如WO 2005/103244中所述具有SEQ ID NO:4的枯草溶菌素；如WO 2005/103244中所述具有SEQ ID NO:7的枯草溶菌素；以及如申请DE 102005028295.4中所述具有SEQ ID NO:2的枯草溶菌素。
在一个实施方案中，组分(c)至少包含在WO 89/06279的表I中作为序列a)公开的枯草溶菌素309(本文可以称为Savinase)或者至少80％与其相似和/或相同并且具有蛋白水解活性的其变体。
按照本发明有用蛋白酶的实例包括如EP 1921147中所述衍生于SEQ ID NO:22的枯草溶菌素蛋白酶的变体(为来自迟缓芽孢杆菌DSM 5483的成熟碱性蛋白酶的序列)，在下列位置中的一个或多个中具有氨基酸替代：3，4，9，15，24，27，33，36，57，68，76，77，87，95，96，97，98，99，100，101，102，103，104，106，118，120，123，128，129，130，131，154，160，167，170，194，195，199，205，206，217，218，222，224，232，235，236，245，248，252和274(根据BPN'编号)，它们具有蛋白水解活性。在一个实施方案中，该蛋白酶在位置Asp32、His64和Ser221(根据BPN'编号)处不突变。
组分(c)优选包含至少一种当与上面所公开的亲本酶的全长度多肽序列相比较时蛋白水解活性至少85％，至少90％，至少91％，至少92％，至少93％，至少94％，至少95％，至少96％，至少97％，至少98％或至少99％相同的蛋白酶变体。
在一个实施方案中，包含在组分(c)中的至少一种蛋白酶具有EP1921147中所述的SEQ ID NO:22，或者为至少80％与其相同并且具有蛋白水解活性的蛋白酶。在一个实施方案中，所述蛋白酶的特征在于在位置101(根据BPN'编号)处至少具有氨基酸谷氨酸(E)，或天冬氨酸(D)，或天门冬酰胺(N)，或谷氨酰胺(Q)，或丙氨酸(A)，或甘氨酸(G)，或丝氨酸(S)并且具有蛋白水解活性。在一个实施方案中，所述蛋白酶包含一个或多个其他替代：(a)在位置3处的苏氨酸(3T)、(b)在位置4处的异亮氨酸(4I)、(c)在位置63处的丙氨酸、苏氨酸或精氨酸(63A，63T或63R)、(d)在位置156处的天冬氨酸或谷氨酸(156D或156E)、(e)在位置194处的脯氨酸(194P)、(f)在位置199处的蛋氨酸(199M)、(g)在位置205处的异亮氨酸(205I)、(h)在位置217处的天冬氨酸、谷氨酸或甘氨酸(217D，217E或217G)、(i)两种或更多种根据(a)-(h)的氨基酸的组合。
在一个实施方案中，包含在组分(c)中的至少一种蛋白酶与EP 1921147中所述的SEQ ID NO:22至少80％相同并且特征在于与氨基酸101E、101D、101N、101Q、101A、101G或101S(根据BPN'编号)一起包含一种氨基酸(根据(a)-(h))或根据(i)的组合且具有蛋白水解活性。在一个实施方案中，所述蛋白酶的特征在于包含突变(根据BPN'编号)R101E或S3T+V4I+V205I，或R101E和S3T，V4I和V205I，或S3T+V4I+V199M+V205I+L217D并且具有蛋白水解活性。
在一个实施方案中，组分(c)包含至少一种与EP 1921147中所述的SEQ ID NO:22至少80％相同并且包含氨基酸替代R101E和S156D和/或L262E以及任选至少一个选自I104T、H120D、Q137H、S141H、R145H和S163G(根据BPN'编号)的其他突变的蛋白酶。
在一个实施方案中，包含在组分(c)中的至少一种蛋白酶与EP 1921147中所述的SEQ ID NO:22至少80％相同并且至少具有突变S3T+V4I+R101E+V205I或S9R+A15T+V68A+N218D+Q245R，任选至少一个选自S3T、V4I、D99S、R101S、A103S和I104V或R101E+S156D+L262E的其他突变以及任选至少一个选自I104T、H120D、Q137H、S141H、R145H和S163G的其他突变，所有编号根据BPN'编号。
在一个实施方案中，根据EP 1921147中所述的SEQ ID NO:22的蛋白酶的特征在于包含突变(根据BPN'编号)S3T+V4I+S9R+A15T+V68A+D99S+R101S+A103S+I104V+N218D并且具有蛋白水解活性。在一个实施方案中，包含在组分(c)中的至少一种蛋白酶是与EP1921147中所述的SEQ ID NO:22 80％相同且具有R101E(根据BPN'编号)的蛋白酶。优选包含在组分(c)中的至少一种蛋白酶是与EP 1921147中所述的SEQ ID NO:22 100％相同并且具有R101E(根据BPN'编号)的蛋白酶。
根据本发明，组分(c)在一个实施方案中包含至少两种蛋白酶，优选选自丝氨酸内肽酶(EC 3.4.21)，更优选选自枯草溶菌素类型蛋白酶(EC 3.4.21.62)的蛋白酶的组合—全部如上所公开。
蛋白酶在本文中是发挥“蛋白酶活性”或“蛋白水解活性”的活性蛋白。蛋白水解活性涉及蛋白酶或蛋白水解酶在规定的时间内降解蛋白质的速率。分析蛋白水解活性的方法在文献中是众所周知的(例如见Gupta等(2002)，Appl.Microbiol.Biotechnol.60:381-395)。在本文中蛋白水解活性通过使用琥珀酰-Ala-Ala-Pro-Phe-对硝基苯胺(Suc-AAPF-pNA，简称AAPF；例如见DelMar等(1979)，Analytical Biochem 99，316-320)作为底物测定。pNA通过蛋白水解裂解与该底物分子分离，导致释放出黄色的游离pNA，后者通过测量OD405而量化。
蛋白水解活性通常以单位/克酶提供。例如，1U蛋白酶通常定义为在pH 8.0和37℃下(酪蛋白作为底物)每分钟释放1μmol福林阳性氨基酸和肽(作为酪氨酸)的蛋白酶量。
脂酶
在一个实施方案中，组分(c)包含至少一种脂酶。
“脂酶”、“脂解酶”、“类脂酯酶”全部涉及EC类别3.1.1的酶(“羧酸酯水解酶”)。脂酶是指具有脂酶活性(或脂解活性；三酰甘油脂酶，EC 3.1.1.3)、角质酶活性(EC3.1.1.74；具有角质酶活性的酶在本文可以称为角质酶)、甾醇酯酶活性(EC 3.1.1.13)和/或蜡酯水解酶活性(EC 3.1.1.50)的活性蛋白。
优选至少一种脂酶包含含有氨基酸天冬氨酸-组氨酸-丝氨酸的催化三联体，其中这些氨基酸的相对顺序从氨基端基读取到羧基端基。
测定脂解活性的方法在文献中是众所周知的(例如见Gupta等(2003)，Biotechnol.Appl.Biochem.37，第63-71页)。例如，脂酶活性(脂解活性)可以通过在底物棕榈酸对硝基苯酯(pNP棕榈酸酯，C:16)中酯键水解并且释放pNP而测量，后者为黄色并且可以在405nm下检测。
在一个实施方案中，组分(c)包含至少一种选自真菌三酰甘油脂酶(EC类别3.1.1.3)的脂酶。真菌三酰甘油脂酶选自疏绵状嗜热丝孢菌(Thermomyces lanuginosa)脂酶。在一个实施方案中，疏绵状嗜热丝孢菌脂酶选自当与US 5869438的SEQ ID NO:2的氨基酸1-269的全长度多肽序列相比较时至少90％，至少91％，至少92％，至少93％，至少94％，至少95％，至少96％，至少97％，至少98％或至少99％相同的多肽。
疏绵状嗜热丝孢菌脂酶与US 5869438的特征在于具有氨基酸T231R和N233R的SEQID NO:2至少80％相同。所述疏绵状嗜热丝孢菌脂酶优选进一步包含下列氨基酸交换中的一种或多种：Q4V，V60S，A150G，L227G，P256K。
组分(c)一方面包含至少一种如上所公开的蛋白酶和/或至少一种如上所公开的脂酶。
在一个实施方案中，该液体组合物以约15:1-35:1，例如约16:1，20:1，28:1，30:1，34:1的重量比包含组分(a)和组分(c)。
在一个实施方案中，该液体组合物以约3-8重量％，约4-7％或约4.5-6％的量包含组分(c)。
在一个实施方案中，在本发明的液体组合物中组分(a)与组分(c)的摩尔比在1:1-20:1范围内。优选组分(a)与组分(c)以约1:1-10:1的摩尔比存在于本发明的液体组合物中。在一个实施方案中，该摩尔比为1:1-7:1。例如，该摩尔比可以为约7:1，约5:1，约4:1，约3:1，约2:1或约1:1。
组分(c)包含在包含组分(a)和组分(b)的液体组合物中并且其比例、量和总量如上面在有关组分(a)和组分(b)的章节中所定义。
组分(d)
在一个实施方案中，本发明的液体组合物包含至少一种水溶性盐(组分(d))。至少一种水溶性盐相对于该液体组合物的总重量优选以在0.1-0.5重量％范围内的量包含在该液体组合物中。
在一个实施方案中，组分(d)包含至少一种选自NaCl、KCl、乳酸或甲酸的碱金属盐及其混合物的化合物。
在一个实施方案中，本发明的液体组合物在成品组合物中包含锌(II)、钙(II)和/或镁(II)离子的水溶性源—其对酶提供该类离子，以及其他金属离子(例如钡(II)、钪(II)、铁(II)、锰(II)、铝(III)、锡(II)、钴(II)、铜(II)、镍(II)和氧钒(IV))。
在一个实施方案中，组分(d)包含CaCl2，优选以其水合形式。
本发明的液体组合物优选包含约0.2-0.4重量％，更优选0.25-0.35重量％的组分(d)，全部相对于该液体组合物的总重量。
组分(d)包含在进一步包含组分(a)、组分(b)和组分(c)的液体组合物中并且其比例、量和总量如上面在有关组分(a)、组分(b)和组分(c)的章节中所定义。
在一个实施方案中，本发明的液体组合物包含：
组分(a)：0.05-0.8重量％的至少一种三肽醛，和
组分(b)：40-70重量％的重量比为25:1-4:1的1,2-丙二醇和至少一种“α-ω
二醇”的混合物，和
组分(c)：至少一种蛋白酶(优选枯草溶菌素类型蛋白酶(EC 3.4.21.62))和/或至少一种脂酶(优选选自疏绵状嗜热丝孢菌脂酶)，和组分(d)：0.1-0.5重量％的至少一种水溶性盐(优选CaCl2)，以及达到100重量％的水
其中组分(a)与组分(c)的摩尔比在1:1-20:1范围内，以及
其中重量％相对于该液体组合物的总重量。
优选所述液体组合物不含表面活性剂且不含非磷酸盐基助洗剂。
其他组分
在一个实施方案中，本发明的液体组合物除了包含具有本文所公开的模体丝氨酸-组氨酸-天冬氨酸的催化三联体的水解酶(组分(c))外包含至少一种选自淀粉酶、纤维素酶、甘露聚糖酶和脱氧核糖核酸酶的其他水解酶。液体组合物还可以包含至少一种选自果胶裂解酶和糖苷水解酶(dispersin)的其他有用酶。
淀粉酶
在一个实施方案中，本发明的液体组合物包含至少一种淀粉酶。本发明的“淀粉酶”(α和/或β)包括细菌或真菌来源的那些(分别为EC 3.2.1.1和3.2.1.2)。优选本发明的液体组合物包含至少一种α-淀粉酶(EC 3.2.1.1)。化学改性或蛋白质工程突变体包括在内。
包括在本发明液体组合物中的淀粉酶具有涉及多糖中葡糖苷键的(内)水解的“淀粉分解活性”或“淀粉酶活性”。α-淀粉酶活性可以通过本领域熟练技术人员已知的测量α-淀粉酶活性的分析确定。测量α-淀粉酶活性的分析的实例为：
α-淀粉酶活性可以通过一种使用亚乙基-4-硝基苯基-α-D-麦芽七糖苷(EPS)的方法测定。D-麦芽七糖苷是可以通过内-淀粉酶裂解的封闭寡糖。在裂解之后，包括在试剂盒中的α-葡糖苷酶将底物消化而释放游离PNP分子，后者具有黄色并且因此可以通过可见分光光度法在405nm下测量。时间依赖性吸收曲线的斜率与所述α-淀粉酶在给定的一组条件下的比活性(每mg酶的活性)成正比。
包含在本发明液体组合物中的至少一种淀粉酶优选选自下列：
·具有WO 95/10603中所述的SEQ ID NO:2的来自地衣芽孢杆菌的淀粉酶。在下列位置包含一个或多个替代的具有淀粉分解活性的合适变体描述于WO 95/10603中：15，23，105，106，124，128，133，154，156，178，179，181，188，190，197，201，202，207，208，209，211，243，264，304，305，391，408和444。变体描述于WO 94/02597，WO 94/018314，WO 97/043424和WO 99/019467的SEQ ID NO:4中。
·具有WO 02/10355中所公开的SEQ ID NO:6的来自嗜热脂肪芽孢杆菌(B.stearothermophilus)的淀粉酶或任选在野生型序列上具有C-末端截断的淀粉酶。SEQID NO:6的合适变体包括在位置181和/或182包含缺失和/或在位置193包含替代的那些。
·具有WO 99/19467中所公开的SEQ ID NO:6的来自芽孢杆菌属707的淀粉酶。SEQNO:6的优选变体是在下列位置的一个或多个中具有替代、缺失或插入的那些：R181，G182，H183，G184，N195，I206，E212，E216和K269。
·具有WO 96/23872中所述的SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:7的来自崛越氏芽孢杆菌(Bacillus halmapalus)的淀粉酶，本文中也描述为SP-722。优选的变体描述于WO 97/3296、WO 99/194671和WO 2013/001078中。
·具有WO 00/22103中所公开的SEQ ID NO:4的来自芽孢杆菌属DSM 12649的淀粉酶。
·具有WO 2009/061380中所公开的SEQ ID NO:2的来自芽孢杆菌属菌株TS-23的淀粉酶。
·具有WO 2013/184577中所公开的SEQ ID NO:1的来自噬纤维菌属(Cytophagasp.)的淀粉酶。
·具有WO 2010/104675中所公开的SEQ ID NO:1的来自巨大芽孢杆菌(Bacillusmegaterium)DSM 90的淀粉酶。
·包含WO 00/60060中所述的SEQ ID NO:2的氨基酸1-485的来自芽孢杆菌属的淀粉酶。
·来自解淀粉芽孢杆菌的淀粉酶或其变体，优选选自根据WO 2016/092009中所述的SEQ ID NO:3的淀粉酶。
·具有WO 2006/002643中所述的SEQ ID NO:12的淀粉酶或在所述SEQ ID NO:12内包含替代Y295F和M202LITV的淀粉酶变体。
·具有WO 2011/098531中所述的SEQ ID NO:6的淀粉酶或在所述SEQ ID NO:6内的一个或多个选自如下的位置处包含替代的淀粉酶变体：193[G,A,S,T或M]，195[F,W,Y,L,I或V]，197[F,W,Y,L,I或V]，198[Q或N]，200[F,W,Y,L,I或V]，203[F,W,Y,L,I或V]，206[F,W,Y,N,L,I,V,H,Q,D或E]，210[F,W,Y,L,I或V]，212[F,W,Y,L,I或V]，213[G,A,S,T或M]和243[F,W,Y,L,I或V]。
·具有WO 2013/001078中所述的SEQ ID NO:1的淀粉酶或在所述SEQ ID NO:1内的两个或更多个(几个)对应于位置G304，W140，W189，D134，E260，F262，W284，W347，W439，W469，G476和G477的位置处包含改变的淀粉酶变体。
·具有WO 2013/001087中所述的SEQ ID NO:2的淀粉酶或在所述SEQ ID NO:2内包含位置181+182或182+183或183+184的缺失的淀粉酶变体，任选在所述SEQ ID NO:2内对应于W140，W159，W167，Q169，W189，E194，N260，F262，W284，F289，G304，G305，R320，W347，W439，W469，G476和G477的位置中的任一个中包含一个或两个或更多个修饰。
·为来自例如WO 2006/066594中所述的上述淀粉酶的杂交α-淀粉酶的淀粉酶；
·根据WO 2014/183920的杂交淀粉酶，具有与WO 2014/183920的SEQ ID NO:2具有至少90％相似性和/或同一性的A和B域以及与WO 2014/183920的SEQ ID NO:6具有至少90％相似性和/或同一性的C域，其中该杂交淀粉酶具有淀粉分解活性；优选该杂交α-淀粉酶与WO 2014/183920的SEQ ID NO:23至少95％相似和/或相同并且具有淀粉分解活性；
·根据WO 2014/183921的杂交淀粉酶，具有与WO 2014/183921中所公开的SEQ IDNO:2，SEQ ID NO:15，SEQ ID NO:20，SEQ ID NO:23，SEQ ID NO:29，SEQ ID NO:26，SEQ IDNO:32和SEQ ID NO:39具有至少75％相似性和/或同一性的A和B域以及与WO 2014/183921的SEQ ID NO:6具有至少90％相似性和/或同一性的C域，其中该杂交淀粉酶具有淀粉分解活性；优选该杂交α-淀粉酶与WO 2014/183921中所公开的SEQ ID NO:30至少95％相似和/或相同并且具有淀粉分解活性。
·根据WO 2021/032881的杂交淀粉酶，包含源自来自芽孢杆菌属A 7-7(DSM12368)的α-淀粉酶的A和B域以及源自来自蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)的α-淀粉酶的C域，其中该杂交淀粉酶具有淀粉分解活性；优选该A和B域由SEQ ID NO:42表示且C域由SEQID NO:44表示—这两个序列如WO 2021/032881所公开；更优选该杂交淀粉酶具有根据WO2021/032881中所公开的SEQ ID NO:54的序列。
根据本发明，本发明的液体组合物在一个实施方案中包含至少两种如上所公开的淀粉酶的组合。
纤维素酶
在一个实施方案中，本发明的液体组合物包含至少一种纤维素酶。“纤维素酶”、“纤维素酶酶”或“纤维素分解酶”是在线纹素水解中涉及的酶。至少一种纤维素酶选自纤维二糖水解酶(1,4-β-葡聚糖纤维二糖水解酶，EC 3.2.1.91)、内切-1,4-β-葡聚糖酶(内切-1,4-β-D-葡聚糖4-葡糖水解酶，EC3.2.1.4)和β-葡糖苷酶(EC 3.2.1.21)。优选该液体组合物包含至少一种糖基水解酶家族7(GH7，pfam00840)的纤维素酶，优选选自内切葡聚糖酶(EC3.2.1.4)。
测量“纤维素酶活性”或“纤维素分解活性”的分析方法对本领域熟练技术人员而言是已知的。例如，纤维素分解活性可以借助纤维素酶将羧甲基纤维素水解成还原性碳水化合物—其还原能力借助铁氰化物反应比色测定根据Hoffman，W.S.，J.Biol.Chem.120，51(1937)测定—这一事实测定。
在一个实施方案中，本发明的液体组合物包含至少一种选自缺少CBD(碳水化合物结合域)的糖基水解酶家族7(GH7，pfam00840)，优选选自缺少CBD(碳水化合物结合域)的内切葡聚糖酶(EC 3.2.1.4)的纤维素酶。
在一个实施方案中，至少一种纤维素酶选自包含纤维素结合域的纤维素酶。在一个实施方案中，至少一种纤维素酶选自仅包含催化畴的纤维素酶，这意味着该纤维素酶缺乏纤维素结合域。
在一个实施方案中，本发明的液体组合物包含至少一种源自特异腐质霉(Humicola insolens)DSM 1800、芽孢杆菌属、太瑞斯梭孢壳霉(Thielavia terrestris)、尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)、粪生粪壳菌(Sordaria fimicola)和里氏木霉(Trichoderma reesei)的纤维素酶。
在一个实施方案中，本发明的液体组合物包含至少一种具有在WO 2018/224544的SEQ ID NO:2的位置21-435中公开的氨基酸序列的特异腐质霉DSM 1800内切葡聚糖酶(EC3.2.1.4)以及优选与其至少95％相同的变体。
在一个实施方案中，本发明的液体组合物至少包含芽孢杆菌属纤维素酶(EC3.2.1.4)，后者选自与WO 2004/053039的SEQ ID NO:2的位置1-773的氨基酸序列至少80％相似和/或相同的多肽或其催化活性碎片。在一个实施方案中，至少一种纤维素酶是与根据WO 2018/224544的SEQ ID NO:1的氨基酸序列至少95％相同的成熟多肽。
在一个实施方案中，本发明的液体组合物至少包含太瑞斯梭孢壳霉纤维素酶(EC3.2.1.4)，后者具有与WO 2004/053039的SEQ ID NO:4的位置1-299的氨基酸序列至少80％相似和/或相同的多肽或其催化活性碎片。在一个实施方案中，至少一种纤维素酶是与根据WO 2018/224544的SEQ ID NO:4的氨基酸序列至少95％相同的成熟多肽。
在一个实施方案中，至少一种纤维素酶是与根据WO 2018/224544的SEQ ID NO:5的氨基酸序列至少95％相同的成熟粪生粪壳菌纤维素酶。
根据本发明，本发明的液体组合物在一个实施方案中包含至少两种纤维素酶，优选选自如上所公开的内切葡聚糖酶(EC 3.2.1.4)的纤维素酶的组合。
甘露聚糖酶
在一个实施方案中，本发明的液体组合物包含至少一种甘露聚糖酶。“甘露聚糖酶”根据本发明是选自β-甘露糖苷酶(EC 3.2.1.25)、内切-1,4-β-甘露糖苷酶(EC3.2.1.78)和1,4-β-甘露二糖苷酶(EC 3.2.1.100)的甘露聚糖降解酶。优选至少一种甘露聚糖降解酶选自内切-1,4-β-甘露糖苷酶(EC3.2.1.78)，这是一组在本文中可以称为内切-β-1,4-D-甘露聚糖酶、β-甘露聚糖酶或甘露聚糖酶的酶。
甘露聚糖降解活性可以根据本领域已知的标准测试程序测定，如使用如McCleary，B.V.(1978)，Carbohydrate Research，67(1)，213-221所述用Remazol亮蓝染色的角豆半乳甘露聚糖。另一测试甘露聚糖降解活性的方法使用在用瓜尔胶或刺槐豆胶温育时还原性糖的检测—参考见Miller，G.L.Use of Dinitrosalicylic Acid Reagent forDetermination of Reducing Sugars.Analytical Chemistry 1959；31:426-428。
在一个实施方案中，本发明的液体组合物包含至少一种选自家族5或26的碱性甘露聚糖酶的甘露聚糖酶。术语“碱性甘露聚糖酶”意欲包括在7-12，优选7.5-10.5范围内的给定pH下具有酶催活性的甘露聚糖酶。
包含在本发明液体组合物中的至少一种甘露聚糖酶可以选自GH5家族甘露聚糖酶。在一个实施方案中，至少一种甘露聚糖酶源自克劳氏芽孢杆菌(Bacillus clausii)(Man6，SEQ ID NO:12，WO 2018/184767)或至少90％与其相同的变体。在一个实施方案中，至少一种甘露聚糖酶源自半解纤维芽孢杆菌(Bacillus hemicellulosilyticus)(Man7，WO2018/184767的SEQ ID NO:16)及其变体，例如如WO 2018/220274所公开。在一个实施方案中，至少一种甘露聚糖酶源自Virgibacillus soli(Man14，WO 2018/184767的SEQ ID NO:20)以及至少90％与其相同的变体。优选至少一种甘露聚糖酶具有与WO 2018/184767的SEQID NO:20的多肽序列95％相同的多肽序列，优选具有至少一个选自A101V、E405G和Y459F的替代。
在一个实施方案中，包含在本发明液体组合物中的至少一种甘露聚糖酶选自WO2009/074685以及至少90％与其相同的变体。
在一个实施方案中，包含在本发明液体组合物中的至少一种甘露聚糖酶选自源自木霉菌属(Trichoderma)生物体的甘露聚糖酶，如WO 93/24622和WO 2008/009673中所公开的。
在一个实施方案中，包含在本发明液体组合物中的至少一种甘露聚糖酶选自具有根据WO 2005/003319的SEQ ID NO:388的位置31-490的序列的甘露聚糖酶以及优选与其至少90％相同的变体。
根据本发明，本发明的液体组合物在一个实施方案中包含至少两种甘露聚糖酶的组合，优选它们中的一种为碱性甘露聚糖酶；至少一种甘露聚糖酶选自如上面所公开的内切-1,4-β-甘露糖苷酶(EC 3.2.1.78)。
脱氧核糖核酸酶
在一个实施方案中，本发明的液体组合物包含至少一种脱氧核糖核酸酶。脱氧核糖核酸酶催化DNA中的磷酸二酯键的水解裂解。脱氧核糖核酸酶例如分类为E.C.3.1.11，E.C.3.1.12，E.C.3.1.15，E.C.3.1.16，E.C.3.1.21，E.C 3.1.22，E.C 3.1.23，E.C 3.1.24和E.C.3.1.25以及EC 3.1.21.X，其中X＝1，2，3，4，5，6，7，8或9。
脱氧核糖核酸酶活性可以通过使用脱氧核糖核酸酶AlertTMKit(11-02-01-04，IDTIntegrated DNA Technologies)根据供应商手册测定。简要地讲，将95μl脱氧核糖核酸酶样品与5μl底物在微滴定板中混合并使用例如来自BMG Labtech的Clariostar微滴定读数仪(536nm激发，556nm发射)立即测量荧光。
在一个实施方案中，包含在本发明液体组合物中的至少一种脱氧核糖核酸酶选自具有与WO 2019/081724和WO 2019/081721的SEQ ID NO:1-24和SEQ ID NO:27-28至少80％相同的氨基酸序列的多肽。变体脱氧核糖核酸酶包含WO 2019/081724的模体SEQ ID NO:25和WO 2019/081724的模体SEQ ID NO:26之一或二者。
在一个实施方案中，至少一种脱氧核糖核酸酶选自包含WO 2017/060493的模体SEQ ID NO:73、WO 2017/060493的模体SEQ ID NO:74和WO 2017/060493的模体SEQ ID NO:75中的一种或多种的多肽。
根据本发明，本发明的液体组合物在一个实施方案中包含至少两种脱氧核糖核酸酶的组合。
显然该液体配制剂除了该至少一种淀粉酶、该至少一种纤维素酶、该至少一种甘露聚糖酶和/或该至少一种脱氧核糖核酸酶外进一步包含组分(a)、(b)、(c)和(d)，后者以上面在有关组分(a)、组分(b)、组分(c)和组分(d)的章节中限定的其比例、量和总量存在于液体组合物中。
其他酶
在一个实施方案中，本发明的液体组合物包含至少一种选自裂解酶和糖苷水解酶的酶。
在一个实施方案中，本发明的液体组合物包含至少一种裂解酶，优选至少一种作用于多糖的碳-氧裂解酶。“裂解酶”可以是衍生于芽孢杆菌属，特别是地衣芽孢杆菌(B.licheniformis)或粘琼脂芽孢杆菌(B.agaradhaerens)的果胶裂解酶(EC 4.2.2.2)或者衍生于这些中任一种的变体，例如如US 6,124,127，WO 99/027083，WO 99/027084，WO2002/006442，WO 2002/092741，WO 2003/095638所述。
在一个实施方案中，本发明的液体组合物包含至少一种具有氨基己糖苷酶活性的多肽(EC 3.2.1.52)如糖苷水解酶。糖苷水解酶包括但不限于β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶(dispersin B)(DspB)，后者通常被描述为属于糖苷水解酶20家族(GH20)的β-Ν-乙酰氨基葡萄糖苷酶。优选包含在本发明液体组合物中的至少一种糖苷水解酶于WO 2017/186943所公开的SEQ ID NO:10至少80％相同。
柠檬酸三烷基酯
在一个实施方案中，本发明的液体组合物包含至少一种式(A)化合物：
Figure BDA0004113429470000251
其中式(A)中的各变量如下所定义：
R1、R2和R3选自H、线性C1-C8烷基和支化C3-C8烷基，其中R1、R2和R3中至少一个不为H。线性C1-C8烷基的实例是甲基、乙基、正丙基、正丁基、正戊基等。支化C3-C8烷基的实例是2-丙基、2-丁基、仲丁基、叔丁基、2-戊基、3-戊基、异戊基等。优选R1、R2、R3是乙基。
在一个实施方案中，组分(c):式(A)化合物的重量比为约1:10，优选约1:6，更优选约1:4。
在一个实施方案中，液体组合物以2:1-12:1的重量比包含组分(b)和式(A)化合物。
优选包含至少一种式(A)化合物的液体组合物包含总量在约40-75重量％，约50-70重量％或约60-70重量％范围内的组分(b)，全部涉及该液体组合物的总重量。
优选组分(b)包含至少一种优选选自1,6-己二醇和二甘醇的“α-ω二醇”。
在一个实施方案中，本发明的液体组合物不含式(A)化合物。
本发明的液体组合物通常是碱性的或者呈现中性或稍微酸性pH值，如5.0-10.0，5.2-9.0，5.4-8.0或5.6-7.0。在一个实施方案中，液体组合物具有约6的pH。
在一个实施方案中，液体组合物包含的水量为将该液体组合物的总重量加至100％。优选以在20-50重量％或25-45重量％或30-40重量％范围内的量包含水，全部相对于该液体组合物的总重量。
液体组合物的储存稳定性
在一个实施方案中，包含组分(a)、(b)、任选(c)和任选(d)的液体组合物在环境温度和约101.3kPa的常压下是均匀的。均匀是指液体组合物不显示出可见颗粒或浊度。优选该液体组合物至少包含组分(a)-(c)。
在一个实施方案中，液体组合物在约4℃，30℃和/或37℃的温度下储存的过程中保持均匀性。优选液体组合物在至少高达50天或至少高达200天的时段内保持均匀性。“保持均匀性”在本文中等同于“保持均匀”。
优选“储存稳定性/储存稳定”涉及液体组合物的均匀性和在该含酶液体组合物内的(足够)残留酶活性二者。
为了测定酶催活性随时间的变化，通常在时间为零时(即在储存之前)在限定条件下测量酶的“初始酶催活性”并在随后的某一时间点(即在储存之后)测量“储存后的酶催活性“。
储存后的酶催活性除以初始酶催活性乘以100得到“残留酶催活性“(a％)。
在一个实施方案中，本发明的液体组合物就水解酶活性，优选蛋白水解活性和/或脂解活性是而言储存稳定的。本发明的水解酶(组分(c))的储存稳定性涉及液体组合物在约30℃或约37℃的升高温度下储存至少高达28天之后与储存之前可用的初始酶催活性相比较时残留酶催活性为至少60％，至少70％或至少80％。在优选实施方案中，至少一种水解酶选自包含氨基酸天冬氨酸、组氨酸和丝氨酸作为催化三联体的水解酶，优选如上所公开的蛋白酶和脂酶。
优选该水解活性是蛋白水解活性。更优选蛋白水解活性涉及至少一种枯草溶菌素蛋白酶(EC 3.4.21.62)，优选根据EP 1921147中所述的SEQ IDNO:22的蛋白酶或具有蛋白水解活性的其变体，优选与EP 1921147中所述的SEQ ID NO:22 80％相同的至少具有R101E的蛋白酶的活性。
本发明涉及一种通过在一个或多个步骤中加入组分(a)和组分(b)以及任选组分(d)的步骤而稳定作为组分(c)公开的至少一种水解酶的方法，其中组分(a)、(b)、(c)和(d)是上面公开的那些，每种液体组合物的其比例、量和总量及其优选范围也在前面详细公开。优选组分(c)包含至少一种包含氨基酸天冬氨酸、组氨酸和丝氨酸作为催化三联体的水解酶。优选至少一种水解酶选自如上所公开的蛋白酶和脂酶。
优选组分(c)包含至少一种枯草溶菌素蛋白酶(EC 3.4.21.62)，优选根据EP1921147中所述的SEQ ID NO:22的蛋白酶或具有蛋白水解活性的其变体，优选与EP1921147中所述的SEQ ID NO:22 80％相同的具有R101E的蛋白酶。
“二醇(1,2-丙二醇除外)”的用途
本发明一方面涉及至少一种选自α-ω二醇、1,2-丁二醇、1,3-丁二醇、1,2-戊二醇和1,2-己二醇的“二醇(1,2-丙二醇除外)”从至少包含1,2-丙二醇和式(PA)的三肽醛的液体组合物去除浊度和/或溶解颗粒的用途。
本发明一方面涉及“二醇(1,2-丙二醇除外)”增加本文作为组分(a)公开的肽醛，优选至少一种三肽醛的溶解度的用途。“溶解度增加”在本文中是指通过加入至少一种“二醇(1,2-丙二醇除外)”而降低或去除浊度和/或存在于液体组合物中的颗粒。优选当在1,2-丙二醇中提供根据本发明的至少一种肽醛并加入组分“二醇(1,2-丙二醇除外)”时发生所述肽醛的溶解度增加。
在一个实施方案中，与缺少至少一种“二醇(1,2-丙二醇除外)”的液体组合物的均匀性相比，至少一种“二醇(1,2-丙二醇除外)”的加入增加了至少包含1,2-丙二醇和至少一种本文所公开的肽醛的液体组合物的均匀性。
优选至少一种肽醛是式(PA)的三肽醛，其特征在于R1和R2是使得NH-CHR1-CO和/或NH-CHR2-CO是非极性氨基酸，优选选自Ala、Val、Gly和Leu的L或D-氨基酸残基的基团。R3优选是使得NH-CHR3-CO是Tyr、Phe、Val、Ala或Leu的L或D-氨基酸残基的基团。
在一个实施方案中，R1是使得NH-CHR1-CO是Gly或Val的L或D-氨基酸残基的基团，R2是使得NH-CHR2-CO是Ala的L或D-氨基酸残基的基团以及R3是使得NH-CHR3-CO是Tyr、Ala或Leu的L或D-氨基酸残基的基团。
在一个实施方案中，选自R1、R2和R3中的至少两个是使得NH-CHR1-CO和/或NH-CHR2-CO和/或NH-CHR3-CO是非极性氨基酸残基，优选相互独立地选自Ala、Val、Gly和Leu的L或D-氨基酸残基的基团。
在一个实施方案中，R1是使得NH-CHR1-CO是Val的L或D-氨基酸残基的基团，R2是使得NH-CHR2-CO是Ala的L或D-氨基酸残基的基团以及R3是使得NH-CHR3-CO是Leu的L或D-氨基酸残基的基团。
优选至少一种“二醇(1,2-丙二醇除外)”选自α-ω二醇1,2-丁二醇、1,3-丁二醇、1,2-戊二醇和1,2-己二醇。更优选至少一种“二醇(1,2-丙二醇除外)”选自“α-ω二醇”，1,2-戊二醇和1,2-己二醇。“二醇(1,2-丙二醇除外)”如本文在涉及组分(b)的章节中所公开。
“α-ω二醇”优选选自1,3-丙二醇，1,4-丁二醇、1,6-己二醇、二甘醇和二丙二醇。最优选至少一种α-ω二醇选自1,6-己二醇和二甘醇。甚至更优选使用1,6-己二醇。
该液体组合物的单个组分的浓度、其比例、量和总量如上所公开。
在一个实施方案中，当与缺乏至少一种“二醇(1,2-丙二醇除外)”的液体组合物相比较时，使用如上所公开的至少一种“二醇(1,2-丙二醇除外)”导致本发明液体组合物的均匀性增加。均匀性在一方面涉及该产品在约20℃的温度和约101.3kPa的常压下是清澈溶液。“清澈溶液“涉及均匀性，因为不存在浊度和/或可见颗粒。
溶剂体系提供储存稳定液体组合物的用途
本发明一方面涉及组分(b)溶解至少一种肽醛(本文所公开的组分(a))，优选至少一种三肽醛以提供优选储存稳定的均匀液体组合物的用途。
在一个实施方案中，本发明涉及本文所公开的组分(b)提供包含至少一种肽醛(本文所公开的组分(a))和至少一种水解酶(本文所公开的组分(c))的储存稳定液体组合物的用途。
在优选实施方案中，至少一种水解酶(组分(c))选自包含氨基酸天冬氨酸、组氨酸和丝氨酸作为催化三联体的水解酶，优选如上所公开的蛋白酶和脂酶。
在一个实施方案中，至少一种水解酶(组分(c))是枯草溶菌素蛋白酶(EC3.4.21.62)，优选根据EP 1921147中所述的SEQ ID NO:22的蛋白酶或具有蛋白水解活性的其变体，优选与EP 1921147中所述的SEQ ID NO:22 80％相同的具有R101E的蛋白酶。
优选“储存稳定性/储存稳定”涉及液体组合物的均匀性和在该含酶液体组合物内的足够残留酶活性二者。
组分(a)、(b)和(c)如本文所公开。
液体组合物的制备
本发明涉及一种制备本发明液体组合物的方法，所述方法包括在一个或多个步骤中以任何顺序混合液体组合物的各组分的步骤。
在一个实施方案中，至少将组分(a)和(b)以及任选(c)和(d)与水在一个或多个步骤中以任何顺序混合。所有组分是上面公开的那些。
在一个实施方案中，包含在组分(c)中的至少一种酶是液体酶浓缩物的一部分。
在一个实施方案中，在一个或多个步骤中至少将组分(a)和(b)以及任选(c)和(d)以任何顺序在加入水之前一起混合。
在一个实施方案中，在加入水之前将组分(a)与组分(b)混合，然后在一个或多个步骤中加入组分(c)和(d)。
在一个实施方案中，通过在一个或多个步骤中将1,2-丙二醇与至少一种“二醇(1,2-丙二醇除外)”混合而制备组分(b)，然后在一个或多个步骤中加入组分(a)和(c)以及组分(d)和水。优选在加入组分(c)和(d)以及水之前将组分(a)与组分(b)混合。优选最后一步是加入水。
在一个实施方案中，将部分组分(b)与组分(a)混合并将剩余组分(b)与组分(c)一起加入，然后在一个或多个步骤中加入组分(d)和水。
在一个实施方案中，至少将组分(a)和(b)在至多65℃，至多60℃，至多55℃或至多50℃的混合温度下混合。优选混合温度在环境温度(本文是指室温，优选15-30℃)至其中至少一种“二醇(1,2-丙二醇除外)”为液体的温度范围内。例如，混合温度在环境温度至65℃，环境温度至60℃，环境温度至55℃，环境温度至50℃范围内。
在一个实施方案中，该制备本发明的液体组合物的方法包括下列步骤：
i)将组分(a)与部分1,2-丙二醇混合，
ii)将组分(c)与部分1,2-丙二醇混合，
iii)通过将部分1,2-丙二醇与至少一种“二醇(1,2-丙二醇除外)”混合而制备组分(b)，
iv)将步骤i)的混合物加入步骤iii)的混合物中，
v)将步骤ii)的混合物加入步骤iv)的混合物中，
vi)加入至少一种水溶性盐和水。
优选在环境温度至55℃或40-50℃范围内的混合温度下制备步骤iii)的混合物。或者将至少一种“二醇(1,2-丙二醇除外)”在熔点之上加热以使其在与1,2-丙二醇混合之前液化。
在一个实施方案中，混合步骤i)和/或iv)在环境温度下实施。
在一个实施方案中，混合步骤ii)和/或v)和/或vi)在4℃至环境温度范围内的温度下实施。优选包含在组分(c)中的至少一种酶是液体酶浓缩物的一部分。
混合步骤优选在搅拌下进行。搅拌进行至液体组合物为清澈溶液(即可见性均匀；均匀度就此而言是指液体组合物不显示可见颗粒或浊度)。
各组分的量如本文所公开。将水加入直到100重量％液体组合物。
优选在加入水之前调节pH。
组分(a)、(b)、(c)和(d)以及任选其他组分如本文所公开。
洗涤剂配制剂
本发明一方面涉及一种洗涤剂配制剂，包含：
组分(a)：至少一种肽醛，优选三肽醛，
组分(b)：至少两种有机溶剂的混合物，其中优选至少一种有机溶剂是1,2-丙二醇，
组分(c)：至少一种选自水解酶(EC 3)的酶，后者优选包含具有本文所公开的模体丝氨酸-组氨酸-天冬氨酸的催化三联体，
以及至少一种洗涤剂组分。
在一个实施方案中，该洗涤剂配制剂为液体。本发明的液体洗涤剂配制剂包括溶液、乳液和分散体、凝胶等，只要该液体是流体并且可倾倒。本发明的洗涤剂配制剂优选具有在约500-20,000mPa*s范围内的动态粘度，这根据Brookfield在25℃下测定，例如以3号锭子在20rpm下用Brookfield粘度计LVT-II进行。
在优选实施方案中，包含在该洗涤剂配制剂中的至少一种水解酶(组分(c))选自具有含有选自天冬氨酸-组氨酸-丝氨酸和丝氨酸-组氨酸-天冬氨酸的模体的催化三联体的那些，其中这些氨基酸的相对顺序从氨基端基读取到羧基端基。在优选实施方案中，该水解酶具有含有模体丝氨酸-组氨酸-天冬氨酸的催化三联体，其中这些氨基酸的相对顺序从氨基端基读取到羧基端基。更优选所述水解酶选自如上所公开的蛋白酶和脂酶。
在一个实施方案中，本发明的洗涤剂配制剂包含本发明液体组合物和至少一种洗涤剂组分，其中该液体组合物中的组分(c)优选包含至少一种蛋白酶和/或至少一种脂酶。
在另一实施方案中，除了至少一种蛋白酶和/或至少一种脂酶外，该洗涤剂配制剂额外包含至少一种选自全部如本文所公开的淀粉酶、纤维素酶、甘露聚糖酶和脱氧核糖核酸酶的水解酶。该洗涤剂配制剂还可以包含至少一种在清洁方法中有用的其他酶，选自裂解酶，优选果胶裂解酶(EC4.2.2.2)和糖苷水解酶。
本发明还涉及一种制备本发明洗涤剂配制剂的方法，包括至少将组分(a)、(b)和(c)和/或任选(d)和/或至少一种选自全部如本文所公开的淀粉酶、纤维素酶、甘露聚糖酶和脱氧核糖核酸酶的其他水解酶与至少一种洗涤剂在一个或多个步骤中以任何顺序混合的步骤。
在一个实施方案中，该制备洗涤剂配制剂的方法包括将本发明的液体组合物与至少一种洗涤剂组分在一个或多个步骤中以任何顺序混合的步骤。
组分(a)、(b)、(c)和/或(d)和/或“其他组分“应使得它们在液体组合物中的量符合上面在有关组分(a)、组分(b)、组分(c)和组分(d)的章节中所定义的其比例、量和总量，并且因此该洗涤剂配制剂以将该液体组合物用于该洗涤剂配制剂中产生的该量和比例包含那些组分。
本发明一方面涉及本发明的液体组合物作为洗涤剂配制剂如用于洗衣和硬表面清洁的I&I和家庭护理配制剂的洗涤剂组分的用途。
“洗涤剂配制剂“或”清洁配制剂“在本文中是指指定用于清洁污损材料的配制剂。清洁优选是指洗衣或硬表面清洁。本发明的污损材料包括纺织品和/或硬表面。
洗涤剂组分在洗涤剂配制剂中取决于所需应用如洗涤白色纺织品、彩色纺织品和羊毛而在类型和/或量上变化。选取的组分进一步取决于洗涤剂配制剂的物理形式(液体、固体、凝胶，以小袋或作为片剂提供等)。例如对于洗衣配制剂选取的组分进一步取决于本身与像所用洗涤温度、洗衣机机械(垂直对水平轴机器)、每个洗涤循环的耗水量等方面以及地域特性如水的平均硬度有关的区域性习俗。
各洗涤剂组分和在洗涤剂配制剂中的使用对本领域熟练技术人员而言是已知的。合适的洗涤剂组分尤其包含表面活性剂、助洗剂、聚合物、碱、漂白体系、荧光增白剂、抑泡剂和稳定剂、水溶助长剂和缓蚀剂。其他实例例如描述于“complete Technology Book onDetergents with Formulations(Detergent Cake，Dishwashing Detergents，Liquid&Paste Detergents，Enzyme Detergents，Cleaning Powder&Spray Dried WashingPowder)”，Engineers India Research Institute(EIRI)，第6版(2015)中。对本领域熟练技术人员而言另一参考书可以是“Detergent Formulations Encyclopedia“，SolverchemPublications，2016。
应理解的是洗涤剂组分此外也是包含本发明液体组合物中的组分。若包含在本发明液体组合物中的组分也是洗涤剂组分，则它可以为需要调节以使得该组分对该洗涤剂配制剂所希望的目的而言有效的浓度。
洗涤剂组分可以在洗涤剂配制剂的最终应用中具有不止一种功能，因此在本文中就特定功能而言提到的任何洗涤剂组分也可以在洗涤剂配制剂的最终应用中具有另一功能。特定洗涤剂组分在洗涤剂配制剂的最终应用中的功能通常取决于其在该洗涤剂配制剂中的量，即洗涤剂组分的有效量。
术语“有效量”包括提供有效去污和/或有效清洁条件(例如pH、发泡量)的各组分的量，有效提供光学益处(例如光学增亮、染料转移抑制)的某些组分的量和/或有效帮助加工的某些组分的量(在加工、储存和使用过程中维持物理特性；例如粘度改性剂、水溶助长剂、干燥剂)。
在一个实施方案中，洗涤剂配制剂为不止两种洗涤剂组分的配制剂，其中至少一种组分在去污上有效，至少一种组分在提供最佳清洁条件上有效并且至少一种组分在维持该洗涤剂的物理特性上有效。
本发明的洗涤剂配制剂一方面包含本发明的液体组合物，其中该液体组合物与洗涤剂组分物理分离。
在一个实施方案中，物理分离通过使用多隔室容器，优选多隔室小袋而发生。该类小袋优选由水溶性聚合物膜形成。小袋可以具有任何形式、形状和适合容纳配制剂的材料，例如不允许所述配制剂在接触水之前从该小袋释放。小袋可以在不同隔室中包含固体配制剂和/或液体配制剂。用于液体组分的隔室可以在配方上与含有固体的隔室不同(例如见EP2014756)。
在另一实施方案中，物理隔离通过微囊包封而发生。微囊包封的目的一方面是将液芯配制剂与其周围环境隔离，另一方面是在使用时释放该芯配制剂(必须及时释放该液芯配制剂)。胶囊内容物通常通过熔融该壁或者通过在特定条件下将其溶解而释放。在其他体系中，通过溶剂作用、酶攻击、化学反应、水解或缓慢崩解使该壁破裂。最显著的是在洗涤剂配制剂中的适合性的限制因素是该芯配制剂在将洗涤剂配制剂在水中稀释时的快速释放，但确保在洗涤剂配制剂中储存的过程中不释放该芯配制剂。微胶囊优选分散于液体配制剂，任选通过加入增稠剂借助例如流变改性而稳定该类分散体。分散体的稳定化通常通过补充分散剂实现。微囊包封液体配制剂在干燥微胶囊之后可以是固体洗涤剂配制剂的一部分。
在一个实施方案中，至少一部分本发明的洗涤剂配制剂作为液体提供。取决于水溶性包装是否包封该液体洗涤剂配制剂，该液体洗涤剂配制剂包含水或基本不含水。
本发明的洗涤剂配制剂包含至少一种选自表面活性剂、助洗剂、聚合物、香料和染料的化合物。
本发明的洗涤剂配制剂包含至少一种选自非离子表面活性剂、两性表面活性剂、阴离子表面活性剂和阳离子表面活性剂的表面活性剂。
在一个实施方案中，洗涤剂配制剂包含2-30重量％阴离子表面活性剂和/或2-30重量％非离子表面活性剂，全部相对于该洗涤剂配制剂的总重量。洗衣用洗涤剂通常比自动洗餐具用洗涤剂包含更高量的表面活性剂。
在一个实施方案中，本发明的洗涤剂配制剂包含至少一种选自烷氧基化醇，氧化乙烯和氧化丙烯的二-和多嵌段共聚物以及脱水山梨糖醇与氧化乙烯或氧化丙烯的反应产物，烷基聚糖苷(APG)，羟烷基混合醚类和氧化胺的非离子表面活性剂。
在一个实施方案中，本发明的洗涤剂配制剂包含至少一种通式(NIS-I)的非离子表面活性剂：
Figure BDA0004113429470000341
其中在式(NIS-I)中下列情况适用：
R1选自C1-C23烷基和C2-C23链烯基，其中烷基和/或链烯基是线性(直链；n-)或支化的；实例是n-C7H15、n-C9H19、n-C11H23、n-C13H27、n-C15H31、n-C17H35、i-C9H19、i-C12H25。
R2选自H、C1-C20烷基和C2-C20链烯基，其中烷基和/或链烯基是线性(直链；n-)或支化的。
R3和R4各自独立地选自C1-C16烷基，其中烷基是线性(直链；n-)或支化的；实例是甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、异戊基、仲戊基、新戊基、1,2-二甲基丙基、异戊基、正己基、异己基、仲己基、正庚基、正辛基、2-乙基己基、正壬基、正癸基、异癸基。
R5选自H和C1-C18烷基，其中烷基是线性(直链；n-)或支化的。
通式(NIS-I)的整数如下所定义：m在0-200，优选1-80，更优选3-20范围内；n和o各自独立地在0-100范围内；n优选在1-10，更优选1-6范围内；o优选在1-50，更优选4-25范围内。m、n和o之和至少为1，优选m、n和o之和在5-100，更优选9-50范围内。
通式(NIS-I)的非离子表面活性剂可以具有任何结构—嵌段或无规结构，并且不限于式(NIS-I)的所示顺序。
在优选实施方案中，洗涤剂配制剂包含至少一种选自通式(NIS-I)的化合物的非离子表面活性剂，其中所述非离子表面活性剂的特征在于R1是n-C13H27，R2和R5是H，m为3-20，n和o＝0。
在优选实施方案中，洗涤剂配制剂包含至少一种选自通式(NIS-I)的化合物的非离子表面活性剂，其中所述非离子表面活性剂的特征在于R1是线性或支化C10烷基，R2和R5是H，m为3-14，n和o＝0。
在优选实施方案中，洗涤剂配制剂包含至少两种选自通式(NIS-I)的化合物的非离子表面活性剂，其中所述非离子表面活性剂之一的特征在于R1是n-C15H31，R2和R5是H，m为11-80，n和o＝0并且其他表面活性剂的特征在于R1是n-C17 H35，R2和R5是H，m为11-80，n和o＝0。
在优选实施方案中，洗涤剂配制剂包含至少两种选自通式(NIS-I)的化合物的非离子表面活性剂，其中所述非离子表面活性剂之一的特征在于R1是n-C12H25，R2和R5是H，m为3-30，优选7，n和o＝0并且其他表面活性剂的特征在于R1是n-C14H29，R2和R5是H，m为3-30，优选7，n和o＝0。
在优选实施方案中，洗涤剂配制剂包含至少两种选自通式(NIS-I)的化合物的非离子表面活性剂，其中所述非离子表面活性剂之一的特征在于R1是n-C11H23，R2和R5是H，m为4-10，n和o＝0并且其他表面活性剂的特征在于R1选自n-C11H23和n-C17H35，R2和R5是H，m为4-10，n和o＝0。
在优选实施方案中，洗涤剂配制剂包含至少两种选自通式(NIS-I)的化合物的非离子表面活性剂，其中所述非离子表面活性剂之一的特征在于R1是n-C9H19，R2和R5是H，m为5-7，n和o＝0并且其他表面活性剂的特征在于R1是n-C17H35，R2和R5是H，m为5-7，n和o＝0。
在优选实施方案中，洗涤剂配制剂包含至少两种选自通式(NIS-I)的化合物的非离子表面活性剂，其中所述非离子表面活性剂之一的特征在于R1是n-C11H23，R5是H，m为7，n和o＝0并且其他表面活性剂的特征在于R1是C13H27，R5是H，m为7，n和o＝0。
在一个实施方案中，包含至少一种式(NIS-I)的非离子表面活性剂，优选上面所公开的那些的洗涤剂配制剂是洗衣用洗涤剂。
在一个实施方案中，本发明的洗涤剂配制剂包含至少一种通式(NIS-II)的非离子表面活性剂：
Figure BDA0004113429470000361
其中在式(NIS-II)中下列情况适用：
AO是相同或不同的氧化烯，选自CH2-CH2-O、(CH2)3-O、(CH2)4-O、CH2CH(CH3)-O、CH(CH3)-CH2-O-和CH2CH(n-C3H7)-O。
R1选自线性(直链；n-)或支化C4-C30烷基和具有至少一个C-C双键的直链或支化C4-C30亚烷基。R1优选选自直链或支化C4-C30烷基、n-C4-C30烷基、n-C7-C15烷基或n-C10-C12烷基。
R2选自线性(直链；n-)或支化C1-C30烷基和具有至少一个C-C双键的直链或支化C2-C30亚烷基。R2优选选自直链或支化C6-C20烷基，优选直链或支化C8-C12烷基，更优选直链或支化C10-C12烷基。
通式(NIS-II)的整数x优选为在5-70，10-60，15-50或20-40范围内的数。
在优选实施方案中，本发明的洗涤剂配制剂包含至少一种式(NIS-II)的非离子表面活性剂，其中R1是n-C3-C17烷基，R2是线性或支化C8-C14烷基。优选AO选自-(CH2CH2O)x2-(CH2CH(CH3)-O)x3、-(CH2CH2O)x2-(CH(CH3)CH2-O)x3和-(CH2CH2O)x4，其中x2和x4为在15-50范围内的数且x3为在1-15范围内的数。
在优选实施方案中，本发明的洗涤剂配制剂包含至少一种式(NIS-II)的非离子表面活性剂，其中R1是n-C8烷基，R2是支化C11烷基，AO是CH2-CH2-O并且x为22。
在优选实施方案中，本发明的洗涤剂配制剂包含至少一种式(NIS-II)的非离子表面活性剂，其中R1是n-C8烷基，R2是n-C8-C10烷基，AO是CH2-CH2-O并且x为40。
在优选实施方案中，本发明的洗涤剂配制剂包含至少一种式(NIS-II)的非离子表面活性剂，其中R1是n-C8烷基，R2是n-C10烷基，AO选自-(CH2CH2O)x2-(CH2CH(CH3)-O)x3、-(CH2CH2O)x2-(CH(CH3)CH2-O)x3，其中x2为22且x3为1。
在一个实施方案中，包含至少一种式(NIS-II)的非离子表面活性剂，优选上面所公开的那些的洗涤剂配制剂是自动洗餐具洗涤剂。优选自动洗餐具洗涤剂包含在约0.3-10重量％，约0.5-5重量％或约1-3％范围内的至少一种式(NIS-II)化合物，全部相对于洗涤剂配制剂的总重量。在一个实施方案中，至少一种非离子表面活性剂是式(NIS-II)化合物，其中R1是n-C8烷基，R2是支化C11烷基，AO是CH2-CH2-O并且x为22。
在一个实施方案中，本发明的洗涤剂配制剂包含至少一种选自如下的阴离子表面活性剂：C8-C18烷基硫酸的碱金属盐和铵盐，C8-C18脂肪醇聚醚硫酸的碱金属盐和铵盐，乙氧基化C4-C12烷基酚(乙氧基化：1-50mol氧化乙烯/mol)的硫酸半酯的碱金属盐和铵盐，C12-C18磺基脂肪酸烷基酯的碱金属和铵盐，例如C12-C18磺基脂肪酸甲酯的碱金属盐和铵盐，此外还有C12-C18烷基磺酸和C10-C18烷基芳基磺酸的碱金属和铵盐。优选上述化合物的碱金属盐，特别优选钠盐。其他合适阴离子表面活性剂的非限制性实例包括支化烷基苯磺酸盐(BABS)，苯基链烷磺酸盐，α-烯烃磺酸盐(AOS)，烯烃磺酸盐，链烯烃磺酸盐，链烷烃-2,3-二基二(硫酸盐)，羟基链烷磺酸盐和二磺酸盐，仲链烷磺酸盐(SAS)，石蜡磺酸盐(PS)，磺化脂肪酸甘油酯，烷基-或链烯基琥珀酸，氨基酸的脂肪酸衍生物，磺基琥珀酸的二酯和单酯。
在一个实施方案中，本发明的洗涤剂配制剂包含至少一种通式(AS-I)的阴离子表面活性剂：
Figure BDA0004113429470000381
其中在式(AS-I)中下列情况适用：
R1选自C1-C23烷基(如1-、2-、3-、4-C1-C23烷基)和C2-C23链烯基，其中烷基和/或链烯基是线性(直链；n-)或支化的，并且其中2-、3-或4-烷基；
实例是n-C7H15、n-C9H19、n-C11H23、n-C13H27、n-C15H31、n-C17H35、i-C9H19、i-C12H25。
R2选自H、C1-C20烷基和C2-C20链烯基，其中烷基和/或链烯基是线性(直链；n-)或支化的。
R3和R4各自独立地选自C1-C16烷基，其中烷基是线性(直链；n-)或支化的；
实例是甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、异戊基、仲戊基、新戊基、1,2-二甲基丙基、异戊基、正己基、异己基、仲己基、正庚基、正辛基、2-乙基己基、正壬基、正癸基、异癸基。
A-选自-RCOO-、-SO3 -和RSO3 -，其中R选自线性(直链；n-)或支化C1-C8烷基和C1-C4羟烷基，其中烷基是。当A-是SO3 -时，化合物可以称为(脂肪)醇/烷基(乙氧基/醚)硫酸盐[(F)A(E)S]，当A-是-RCOO-时，化合物可以称为(脂肪)醇/烷基(乙氧基/醚)羧酸盐[(F)A(E)C]。
M+选自H和成盐阳离子。成盐阳离子通常是一价或多价的；因此M+等于1/v Mv+。实例包括但不限于钠、钾、镁、钙、铵以及单-、二-和三乙醇胺的铵盐。
通式(AS-I)的整数如下所定义：m在0-200，优选1-80，更优选3-20范围内；n和o各自独立地在0-100范围内；n优选在1-10，更优选1-6范围内；o优选在1-50，更优选4-25范围内。m、n和o之和至少为1，优选m、n和o之和在5-100，更优选9-50范围内。
通式(AS-I)的阴离子表面活性剂可以具有任何结构—嵌段共聚物或无规共聚物。
在优选实施方案中，本发明的洗涤剂配制剂包含至少一种式(AS-I)的阴离子表面活性剂，其中R1是n-C11H23，R2是H，A-是SO3 -，m、n和o为0。M+优选是NH4 +。该类化合物在本文中可以称为月桂基硫酸铵(ALS)。
在优选实施方案中，本发明的洗涤剂配制剂包含至少一种式(AS-I)的阴离子表面活性剂，其中R1是n-C11H23，R2选自H，A-是SO3 -，m为2-5，优选3，并且n和o为0。M+优选是Na+。该类化合物在本文中可以称为月桂醚硫酸盐(LES)，优选月桂醚硫酸钠(SLES)。
在一个实施方案中，洗涤剂配制剂包含至少两种选自通式(AS-I)的化合物的阴离子表面活性剂，其中所述阴离子表面活性剂之一的特征在于R1是C11，R2是H，m为2，n和o＝0，A-是SO3 -，M+是Na+并且其他表面活性剂的特征在于R1是C13，R2是H，m为2，n和o＝0，A-是SO3 -，M+是Na+。
洗衣用洗涤剂配制剂通常包含式AS-I化合物。
在一个实施方案中，洗涤剂配制剂包含至少一种选自通式(AS-II)的化合物的阴离子表面活性剂：
Figure BDA0004113429470000391
其中式(AS-II)中的R1是C10-C13烷基。本发明的洗涤剂配制剂在一个实施方案中包含式(AS-II)化合物的盐，优选钠盐。
在优选实施方案中，本发明的洗涤剂配制剂包含至少两种选自通式(AS-II)的化合物的阴离子表面活性剂，其中所述阴离子表面活性剂之一的特征在于R1是C10并且其他表面活性剂的特征在于R1是C13。像这样的化合物在本文中可以称为LAS(线性烷基苯磺酸盐)。
洗衣用洗涤剂配制剂通常包含式AS-II化合物。
在一个实施方案中，洗涤剂配制剂包含至少一种选自AS-I和AS-II的阴离子表面活性剂以及至少一种皂。在一个实施方案中，皂选自饱和和不饱和C12-C18脂肪酸，如月桂酸、肉豆蔻酸、棕榈酸、硬脂酸、山萮酸、油酸、(水合)芥酸的盐(M+)。M+选自成盐阳离子。成盐阳离子可以是一价或多价的；因此，M+等于1/v Mv+。实例包括但不限于钠、钾、镁、钙、铵以及单-、二-和三乙醇胺的铵盐。合适皂的其他非限制性实例包括衍生于天然脂肪酸如牛脂、椰子油、棕榈仁油、月桂油、橄榄油或芥花油的皂混合物。该类皂混合物以不同量包含月桂酸和/或肉豆蔻酸和/或棕榈酸和/或硬脂酸和/或油酸和/或亚油酸的皂，这取决于皂所衍生的天然脂肪酸。
在一个实施方案中，本发明的洗涤剂配制剂包含至少一种通式(AMS-I)的两性表面活性剂，其可以称为改性氨基酸(蛋白原性和非蛋白原性)：
Figure BDA0004113429470000401
通式(AMS-I)中的各变量如下所定义：
R8选自H、C1-C4烷基、C2-C4链烯基，其中烷基和/或链烯基是线性(直链；
n-)或支化的。
R9选自C1-C22烷基、C2-C22链烯基、C10-C22烷基羰基和C10-C22链烯基羰基，
R10选自H、甲基、-(CH2)3NHC(NH)NH2、-CH2C(O)NH2、-CH2C(O)OH、-(CH2)2C(O)NH2、-(CH2)2C(O)OH、(咪唑-4-基)甲基、-CH(CH3)C2H5、-CH2CH(CH3)2、-(CH2)4NH2、苄基、羟甲基、-CH(OH)CH3、(吲哚-3-基)甲基、(4-羟基苯基)甲基、异丙基、-(CH2)2SCH3和-CH2SH。
Rx选自H和C1-C4烷基。
在一个实施方案中，本发明的洗涤剂配制剂包含至少一种通式(AMS-IIa)、(AMS-IIb)或(AMS-IIc)的两性表面活性剂，它们可以称为甜菜碱和/或磺基甜菜碱：
Figure BDA0004113429470000402
Figure BDA0004113429470000411
通式(AMS-IIa)、(AMS-IIb)和(AMS-IIc)中的各变量如下所定义：
R11选自线性(直链；n-)或支化C7-C22烷基和线性(直链；n-)或支化C7-C22链烯基。
R12各自独立地选自线性(直链；n-)C1-C4烷基。
R13选自C1-C5烷基和C1-C5羟烷基；例如2-羟基丙基。
A-选自羧酸根和磺酸根。
通式(AMS-IIa)、(AMS-IIb)和(AMS-IIc)中的整数r在2-6范围内。
在一个实施方案中，本发明的洗涤剂配制剂包含至少一种通式(AMS-III)的两性表面活性剂，其可以称为烷基两性羧酸盐：
Figure BDA0004113429470000412
通式(AMS-III)中的各变量如下所定义：
R11选自C7-C22烷基和C7-C22链烯基，其中烷基和/或链烯基是线性(直链；
n-)或支化的，优选线性的。
R14选自-CH2C(O)O-M+、-CH2CH2C(O)O-M+和-CH2CH(OH)CH2SO3 -M+。R15选自H和-CH2C(O)O-。
通式(AMS-III)中的整数r在2-6范围内。
其他合适烷基两性羧酸盐的非限制性实例包括椰油酰两性基乙酸钠、月桂酰两性基乙酸钠、辛酰两性基乙酸钠、椰油酰两性基二乙酸二钠、月桂酰两性基二乙酸二钠、辛基两性基二乙酸二钠、辛酰基两性基二乙酸二钠、椰油酰两性基二丙酸二钠、月桂酰两性基二丙酸二钠、辛基两性基二丙酸二钠和辛酰两性基二丙酸二钠。
在一个实施方案中，本发明的洗涤剂配制剂包含至少一种通式(AMS-IV)的两性表面活性剂，其可以称为氧化胺(AO)：
Figure BDA0004113429470000421
通式(AMS-IV)中的各变量如下所定义：
R16选自C8-C18烷基、C8-C18羟烷基、酰胺基丙基和C8-C18烷基苯基；其中烷基和/或链烯基是线性(直链；n-)或支化的。
R17选自C2-C3亚烷基、C2-C3羟基亚烷基及其混合物。
R18：各残基可以独立地选自C1-C3烷基和C1-C3羟烷基；基团R15可以相互连接，例如通过氧或氮原子，从而形成环结构。
通式(AMS-IV)中的整数x在0-5，优选0-3范围内，最优选0。
其他合适氧化胺的非限制性实例包括C10-C18烷基二甲基氧化胺和C8-C18烷氧基乙基二羟乙基氧化胺。该类物质的实例包括二甲基辛基氧化胺、二乙基癸基氧化胺、二(2-羟基乙基)十二烷基氧化胺、二甲基十二烷基氧化胺、二丙基十四烷基氧化胺、甲基乙基十六烷基氧化胺、十二烷基酰胺基丙基二甲基氧化胺、鲸蜡基二甲基氧化胺、硬脂基二甲基氧化胺、牛脂基二甲基氧化胺和二甲基-2-羟基十八烷基氧化胺。
合适氧化胺的另一实例是椰油酰胺基丙基二甲基氧化胺，有时也称为椰油酰胺基丙基氧化胺。
在一个实施方案中，两种或更多种不同两性表面活性剂的混合物包含在本发明的洗涤剂配制剂中。手动洗餐具洗涤剂通常包含至少一种两性表面活性剂。
在一个实施方案中，本发明的液体洗涤剂配制剂包含至少一种两性表面活性剂，其中两性表面活性剂的总量优选在0.01-10重量％，0.1-5重量％或0.5-1重量％范围内，全部相对于该洗涤剂配制剂的总重量。优选至少一种两性表面活性剂选自式AMS-IIa、AMS-IIb、AMS-IIc和AMS-IV化合物。
在一个实施方案中，本发明的洗涤剂配制剂包含一种或多种配位剂(螯合剂、多价螯合剂)、沉淀剂和/或离子交换化合物，它们通常与钙和镁形成水溶性配合物。该类化合物在本文中可以称为“助洗剂”或“助洗试剂”，这并不意欲将该类化合物在洗涤剂配制剂的最终应用中限制于该功能。
本发明的非磷酸盐基助洗剂包括葡糖酸钠、柠檬酸盐、硅酸盐、碳酸盐、膦酸盐、氨基羧酸盐、聚羧酸盐、聚磺酸盐和聚膦酸盐。
在优选实施方案中，本发明的洗涤剂配制剂包含一种或多种柠檬酸盐。术语“柠檬酸盐”包括柠檬酸的单-和二碱金属盐以及尤其是单-和优选三钠盐，柠檬酸的铵或取代铵盐以及柠檬酸本身。柠檬酸盐可以作为无水化合物或者作为水合物使用，例如作为二水合柠檬酸钠使用。在一个实施方案中，柠檬酸作为与甲酸盐的混合物提供，例如柠檬酸钠:甲酸钠＝9:1。
在一个实施方案中，本发明的洗涤剂配制剂包含至少一种膦酸盐，其优选选自聚膦酸如二膦酸的衍生物，如HEDP的钠盐，氨基聚膦酸如氨基亚烷基膦酸如DTPMP的衍生物。优选以在0.1-5.0重量％，0.5-3.0重量％或1.0-2.0重量％范围内的量包含所述膦酸盐，全部相对于该洗涤剂配制剂的总重量。
在一个实施方案中，本发明的洗涤剂配制剂包含至少一种氨基羧酸盐，其优选选自乙二胺四乙酸(EDTA)、二亚乙基三胺五乙酸(DTPA)、甲基甘氨酸二乙酸盐(MGDA)和谷氨酸二乙酸盐(GLDA)，它们全部可以用碱(部分)中和。优选以在0-30.0重量％，0.5-25.0重量％，1-20重量％，2-15％，2.5-10重量％，3-8重量％或2.5-5重量％范围内的量包含所述氨基羧酸盐，全部相对于该洗涤剂配制剂的总重量。
在本发明的一个实施方案中，本发明配制剂不含磷酸盐和聚磷酸盐，磷酸氢盐包括在内，例如不含磷酸三钠、三聚磷酸五钠和偏磷酸六钠。就磷酸盐和聚磷酸盐而言，在本发明上下文中“不含”应理解为指磷酸盐和聚磷酸盐的含量总共在10ppm至0.2重量％范围内，这通过重量分析测定并且相对于该洗涤剂配制剂的总重量。
在本发明的一个实施方案中，液体洗涤剂配制剂包含一种或多种粘度改性剂。取决于所需粘度，本发明的液体洗涤剂配制剂通常包含一种或多种流变改性剂，其在本领域中也已知为增稠剂。在一个实施方案中，本发明的洗涤剂配制剂相对于该洗涤剂配制剂的总重量以在0.1-约5重量％或者甚至约0.2-0.5重量％范围内的量包含至少一种天然聚合物结构剂，优选选自多糖衍生物如黄原胶。
在一个实施方案中，本发明的液体洗涤剂配制剂不含漂白剂，例如不含无机过氧化物化合物或含氯漂白剂如次氯酸钠，这意味着本发明的液体洗涤剂配制剂总共包含0.8重量％，0.5重量％，0.1重量％或0.01重量％或更少的无机过氧化物化合物和含氯漂白剂，在每种情况下相对于该液体洗涤剂配制剂的总重量。
通常以液体组合物:洗涤剂配制剂的重量比为约1:1000，1:500，1:100，1:50，1:30，1:25，1:20或1:10将本发明的液体组合物加入洗涤剂配制剂，优选液体洗涤剂配制剂中。
因此，液体洗涤剂配制剂包含不同量的液体组合物的组分(a)、(b)和(c)，例如下表中所列的那些(重量是指相对于该液体洗涤剂的总重量)：
Figure BDA0004113429470000441
该“二醇(1,2-丙二醇除外)”如有关组分(b)的章节中所公开。
优选组分(c)包含至少一种包含氨基酸天冬氨酸、组氨酸和丝氨酸作为催化三联体的水解酶。优选至少一种水解酶是枯草溶菌素蛋白酶(EC3.4.21.62)，优选根据EP1921147中所述的SEQ ID NO:22的蛋白酶或具有蛋白水解活性的其变体，优选与EP1921147中所述的SEQ ID NO:22 80％相同的具有R101E的蛋白酶。
1,2-丙二醇(MPG)在液体洗涤剂配制剂，优选包含在由水溶性聚合物膜制成的容器中的那些中的总重量可以加至35重量％，相对于该洗涤剂配制剂的总重量。“加至”就此而言是指除了本发明液体组合物中所包含的MPG外，在该最终洗涤剂配制剂中加入MPG至这里所公开的值。优选将MPG在液体洗衣用洗涤剂中的总重量加至30重量％，25重量％，20重量％，15重量％，10重量％，8重量％，7重量％或6重量％。1,2-丙二醇在液体洗涤剂配制剂中的总量优选在约0.05-30重量％，约0.5-20重量％，约1-10重量％，约2-8重量％，约3-7重量％或约4-6重量％范围内，全部相对于该液体洗涤剂配制剂的总重量。
在一个实施方案中，本发明的液体洗涤剂配制剂包含至少一种如上所公开的式(A)的溶剂，优选柠檬酸三乙酯。在一个实施方案中，将柠檬酸三乙酯在液体洗涤剂配制剂中的总重量加至3重量％。优选柠檬酸三乙酯在液体洗涤剂配制剂中的总量在约0.0025-2.5重量％范围内。更优选液体洗涤剂配制剂包含至多1重量％柠檬酸三乙酯。按重量计在这里是指相对于液体洗涤剂配制剂的总重量。
包含本发明液体组合物的各组分的液体洗涤剂配制剂优选选自液体洗衣用洗涤剂、液体手动洗餐具洗涤剂和液体自动洗餐具洗涤剂。
在一个实施方案中，包含本发明液体组合物的各组分的洗涤剂配制剂是液体洗衣用洗涤剂。洗衣用洗涤剂通常包含相对大量的表面活性剂，优选选自至少一种式(NIS-I)的非离子表面活性剂和/或至少一种式(AS-I)的阴离子表面活性剂和/或至少一种式(AS-II)的阴离子表面活性剂。优选本发明的液体洗衣用洗涤剂包含至少一种式(NIS-I)的非离子表面活性剂和至少一种式(AS-I)的阴离子表面活性剂以及至少一种式(AS-II)的阴离子表面活性剂。在一个实施方案中，液体洗衣用洗涤剂包含2-25重量％，优选4-12重量％阴离子表面活性剂，所有重量％相对于该洗涤剂配制剂的总重量。在一个实施方案中，液体洗衣用洗涤剂配制剂包含2-15重量％，优选3-10重量％非离子表面活性剂，所有重量％相对于该洗涤剂配制剂的总重量。
本发明的液体组合物优选以约1:1000，1:500，1:100，1:50，1:30，1:25，1:20或1:10的液体组合物:洗涤剂重量比包含在液体洗衣用洗涤剂中。
在一个实施方案中，本发明的液体洗衣用洗涤剂包含至少一种如本文所公开的水解酶(组分(c)，后者优选包含具有本文所公开的模体丝氨酸-组氨酸-天冬氨酸的催化三联体)。优选通过加入本发明液体组合物而使至少一种如本文所公开的蛋白酶与一种或多种洗涤剂组分组合。优选以约0.005-0.15重量％，更优选约0.01-0.1重量％的量包含至少一种蛋白酶，全部相对于该洗涤剂配制剂的总重量。
在一个实施方案中，液体洗衣用洗涤剂额外包含至少一种如本文所公开的脂酶，优选以约0.001-0.005％，更优选0.001-0.002重量％的量，全部相对于该洗涤剂配制剂的总重量。至少一种脂酶选自真菌三酰甘油脂酶后者选自如本文所公开的疏绵状嗜热丝孢菌脂酶及其变体。
在一个实施方案中，液体洗衣用洗涤剂额外包含至少一种如本文所公开的α-淀粉酶，优选以约0.001-0.015％，更优选0.002-0.015重量％的量，全部相对于该洗涤剂配制剂的总重量。
在一个实施方案中，液体洗衣用洗涤剂额外包含至少一种如本文所公开的纤维素酶，优选以约0.001-0.01％，更优选0.002-0.009重量％的量，全部相对于该洗涤剂配制剂的总重量。至少一种纤维素酶选自如本文所公开的内切葡聚糖酶(EC 3.2.1.4)，优选具有WO 91/17244图14A-E中所公开的氨基酸序列的那些及其变体。
在一个实施方案中，液体洗衣用洗涤剂额外包含至少一种如本文所公开的甘露聚糖酶，优选以约0.0005-0.005％，更优选0.0005-0.002重量％的量，全部相对于该洗涤剂配制剂的总重量。至少一种甘露聚糖酶选自如本文所公开的内切-1,4-β-甘露糖苷酶(EC3.2.1.78)。
在一个实施方案中，液体洗衣用洗涤剂以在1-10重量％，1.5-7重量％或2-5重量％范围内的量包含至少一种选自全部如上所公开的乙二胺四乙酸(EDTA)、二亚乙基三胺五乙酸(DTPA)、甲基甘氨酸二乙酸盐(MGDA)和谷氨酸二乙酸盐(GLDA)的氨基羧酸盐，全部相对于该液体洗衣用洗涤剂的总重量。
在一个实施方案中，液体洗衣用洗涤剂以在0.1-10重量％，0.5-8重量％，1-5重量％或2-4重量％范围内的量包含柠檬酸，全部相对于该洗涤剂配制剂的总重量；在一个实施方案中，该柠檬酸作为与甲酸盐的混合物提供，例如柠檬酸钠:甲酸钠＝9:1。
在一个实施方案中，液体洗衣用洗涤剂以在0.5-3.0重量％或1.0-2.5重量％范围内的量包含至少一种如本文所公开的膦酸盐，优选选自HEDP和DTPMP，全部相对于该洗涤剂配制剂的总重量。
在一个实施方案中，液体洗衣用洗涤剂包含至少一种基于聚乙烯核和聚氧乙烯壳的乙氧基化聚乙烯亚胺聚合物。优选聚乙烯亚胺核分子是平均分子量MW在500-5000g/mol范围内的聚乙烯亚胺。更优选分子量为500-1000g/mol，甚至更优选MW为600-800g/mol。该乙氧基化聚合物平均具有5-50个，优选10-30个，甚至更优选15-25个EO(乙氧基化物)基团/-NH基团，导致平均分子量MW在5,000-20,0000，优选8,000-100,000，更优选8,000-50,000，甚至更优选10,000-30,000，最优选10,000-20,000g/mol范围内。优选以在约0.5-5重量％，约1-4％或约1.5-3重量％范围内的量包含至少一种乙氧基化聚乙烯亚胺聚合物，全部相对于该液体洗衣用洗涤剂的总重量。
在一个实施方案中，液体洗衣用洗涤剂包含至少一种乙氧基化六亚甲基二胺聚合物，其优选季铵化并且—任选但优选—硫酸化，优选平均分子量Mw在2000-10,000，更优选3,000-8,000，最优选4,000-6,000g/mol范围内。优选季铵化并且—任选但优选—硫酸化的乙氧基化六亚甲基二胺聚合物平均含有10-50个，优选15-40个，甚至更优选20-30个EO(乙氧基化物)基团/-NH基团，导致平均分子量MW在2,000-10,000，更优选3,000-8,000，最优选4,000-6,000g/mol范围内。在优选实施方案中，该乙氧基化六亚甲基二胺季铵化并且也硫酸化，优选带有2个阳离子铵基和2个阴离子硫酸根基团。优选以在约0.5-5重量％，约1-4％或约1.5-3重量％范围内的量包含至少一种乙氧基化六亚甲基二胺聚合物，全部相对于该液体洗衣用洗涤剂的总重量。
在一个实施方案中，包含本发明液体组合物的各组分的洗涤剂配制剂是液体手动洗餐具洗涤剂。本发明的液体组合物优选以约1:500或1:100的液体组合物:洗涤剂重量比包含在液体手动洗餐具洗涤剂中。
液体手动洗餐具洗涤剂优选包含至少一种选自如下的表面活性剂：乙氧基化或丙氧基化脱水山梨糖醇酯，氧化胺或烷基聚糖苷，尤其是线性C4-C18烷基聚葡糖苷和支化C8-C18烷基聚糖苷如平均通式(APG)的化合物同样合适。基于格尔伯特醇的APG也合适。
在一个实施方案中，液体手动洗餐具洗涤剂包含至少一种式(AMS-IIc)的两性表面活性剂，其中优选R11是C11，r＝3，R12和R13是C1烷基并且A-是羧基。优选该两性表面活性剂以在1-10重量％，2-8重量％或3-6重量％范围内的量包含在液体手动洗餐具洗涤剂中，全部相对于该液体手动洗餐具洗涤剂的总重量。
在一个实施方案中，液体手动洗餐具洗涤剂包含至少一种式(AMS-IV)的两性表面活性剂，其中优选R18是C1烷基，x为0且R16是C12。优选该两性表面活性剂以在0.5-5重量％，1-4重量％或1.5-3重量％范围内的量包含在液体手动洗餐具洗涤剂，全部相对于该液体手动洗餐具洗涤剂的总重量。
在一个实施方案中，液体手动洗餐具洗涤剂包含至少两种选自通式(AS-I)的化合物的阴离子表面活性剂，其中所述阴离子表面活性剂之一的特征在于R1是C11，R2是H，m为2，n和o＝0，A-是SO3 -，M+是Na+并且其他表面活性剂的特征在于R1是C13，R2是H，m为2，n和o＝0，A-是SO3 -，M+是Na+。优选该阴离子表面活性剂混合物以在4-12重量％，5-11重量％或6-10重量％范围内的量包含在液体手动洗餐具洗涤剂中，全部相对于该液体手动洗餐具洗涤剂的总重量。
在一个实施方案中，本发明的液体手动洗餐具洗涤剂包含至少一种如本文所公开的水解酶(组分(c)，其优选包含具有本文所公开的模体丝氨酸-组氨酸-天冬氨酸的催化三联体)。优选通过加入本发明的液体组合物而使至少一种如本文所公开的蛋白酶与一种或多种洗涤剂组分组合。优选以约0.002-0.25重量％，更优选约0.005-0.2重量％的量包含至少一种蛋白酶，全部相对于该洗涤剂配制剂的总重量。
在一个实施方案中，液体手动洗餐具洗涤剂额外包含至少一种如本文所公开的α-淀粉酶，优选以约0.001-0.005％，更优选0.001-0.004重量％的量，全部相对于该洗涤剂配制剂的总重量。
在一个实施方案中，液体手动洗餐具洗涤剂包含至少一种基于聚乙烯核和聚氧乙烯壳的乙氧基化聚乙烯亚胺聚合物。优选聚乙烯亚胺核分子是平均分子量MW在500-5000g/mol范围内的聚乙烯亚胺。更优选分子量为500-1000g/mol，甚至更优选MW为600-800g/mol。该乙氧基化聚合物平均具有5-50个，优选10-30个，甚至更优选15-25个EO(乙氧基化物)基团/-NH基团，导致平均分子量MW在5,000-20,0000，优选8,000-100,000，更优选8,000-50,000，甚至更优选10,000-30,000，最优选10,000-20,000g/mol范围内。优选以在约0.1-3重量％，约0.5-2.5％或约1-2重量％范围内的量包含至少一种乙氧基化聚乙烯亚胺聚合物，全部相对于该液体手动洗餐具洗涤剂的总重量。
在一个实施方案中，包含本发明液体组合物的各组分的洗涤剂配制剂是液体自动洗餐具洗涤剂。本发明的液体组合物优选以约1:1000，1:500，1:100，1:50，1:30，1.25，1:20或1:10的液体组合物:洗涤剂重量比包含在液体自动洗餐具洗涤剂中。
自动洗餐具洗涤剂通常不包含阴离子表面活性剂。优选本发明的自动洗餐具洗涤剂包含至少一种式(NIS-II)的非离子表面活性剂，更优选其中R1是n-C8烷基，R2是支化C11烷基，AO是CH2-CH2-O并且x为22。自动洗餐具洗涤剂优选以在约0.3-10重量％，约0.5-5重量％或约1-3％范围内的量包含该类化合物，全部相对于该液体自动洗餐具洗涤剂的总重量。
在一个实施方案中，液体自动洗餐具洗涤剂相对于该洗涤剂配制剂的总重量以5-15重量％的量包含至少一种如上所公开的氨基羧酸盐。
优选自动洗餐具洗涤剂包含助洗剂体系，后者包含：
·如上所公开的乙二胺四乙酸(EDTA)和/或二亚乙基三胺五乙酸(DTPA)和/或甲基甘氨酸二乙酸盐(MGDA)和/或谷氨酸二乙酸盐(GLDA)，其量在0.1-15重量％，1-10重量％，3-8重量％或2.5-5重量％范围内，全部相对于该洗涤剂配制剂的总重量；
·任选地，柠檬酸，其量在0.1-10重量％，0.5-8重量％，1-5重量％或2-4重量％范围内，全部相对于该洗涤剂配制剂的总重量；该柠檬酸在一个实施方案中作为与甲酸盐的混合物提供，例如柠檬酸钠:甲酸钠＝9:1；
·任选地，至少一种膦酸盐，优选选自聚膦酸如二膦酸的衍生物如HEDP的钠盐以及氨基聚膦酸如氨基亚烷基膦酸的衍生物如DTPMP，其量在0.1-5重量％，0.5-3重量％或1-2重量％范围内，全部相对于该洗涤剂配制剂的总重量；
·任选地，至少一种聚羧酸盐，选自重复单体是相同的不饱和羧酸的均聚物，如聚丙烯酸(PAA)和重复单体是至少两种不同的不饱和羧酸的共聚物，如丙烯酸与甲基丙烯酸的共聚物、丙烯酸或甲基丙烯酸和马来酸和/或富马酸的共聚物，其量在0-10重量％，0.5-7重量％，1-5重量％或2.5-5重量％范围内，全部相对于该洗涤剂配制剂的总重量；聚丙烯酸的所述均聚物可以部分中和或磺化。
在一个实施方案中，本发明的液体自动洗餐具洗涤剂包含至少一种如本文所公开的水解酶(组分(c)，其优选包含具有本文所公开的模体丝氨酸-组氨酸-天冬氨酸的催化三联体)。通过加入本发明的液体组合物而使至少一种如本文所公开的蛋白酶与一种或多种洗涤剂组分组合。优选以约0.10-0.25重量％，更优选约0.12-0.21重量％的量包含至少一种蛋白酶，全部相对于该洗涤剂配制剂的总重量。
在一个实施方案中，液体自动洗餐具洗涤剂额外包含至少一种如本文所公开的α-淀粉酶，优选以约0.002-0.015％，更优选0.004-0.01重量％的量，全部相对于该洗涤剂配制剂的总重量。
在一个实施方案中，液体自动洗餐具洗涤剂包含至少一种锌盐。锌盐优选选自水溶性和水不溶性锌盐。就此而言，在本发明上下文中水不溶性用来指在25℃的蒸馏水中具有的溶解度为0.1g/l或更小的那些锌盐。在水中具有更高溶解度的锌盐在本发明上下文中相应地称为水溶性锌盐。
该锌盐可以选自苯甲酸锌、葡糖酸锌、乳酸锌、甲酸锌、ZnCl2、ZnSO4、乙酸锌、柠檬酸锌、Zn(NO3)2、Zn(CH3SO3)2和没食子酸锌，优选ZnCl2、ZnSO4、乙酸锌、柠檬酸锌、Zn(NO3)2、Zn(CH3SO3)2和没食子酸锌。
在本发明的另一实施方案中，锌盐选自ZnO、ZnO·aq、Zn(OH)2和ZnCO3。优选ZnO·aq。
在本发明的一个实施方案中，锌盐选自平均粒径(重均)在10nm-100μm范围内的氧化锌。
锌盐中的阳离子可以以络合形式存在，例如与氨配体或水配体络合，尤其是以水合形式存在。为了简化标记符，在本发明上下文中若配体为水配体，则通常将其省略。
取决于如何调节本发明混合物的pH，可以改变锌盐。因此，例如可以使用乙酸锌或ZnCl2来制备本发明配制剂，但这在pH为8或9下在含水环境中转化为ZnO、Zn(OH)2或ZnO·aq，后者可以以非络合或络合形式存在。
锌盐优选以溶解或胶体形式存在于液体洗涤剂配制剂中。
在本发明的一个实施方案中，本发明的自动洗餐具配制剂总共包含在0.05-0.4重量％范围内的锌盐，在每种情况下基于所述配制剂的固体含量。在本文中锌盐的比例以锌或锌离子给出。由此可以计算抗衡离子比例。
在洗涤剂配制剂中的酶稳定化
在本发明的一个方面，组分(c)在本发明的液体洗涤剂配制剂中是储存稳定的(在本文中可以称为洗涤剂内储存稳定性)。优选本发明的液体洗涤剂配制剂包含至少一种如上所公开的表面活性剂。在优选实施方案中，该洗涤剂配制剂是选自洗衣用洗涤剂、自动洗餐具洗涤剂和手动洗餐具洗涤剂的配制剂。所述洗涤剂配制剂的具体特征如上所公开。
涉及洗涤剂配制剂内的水解酶活性，优选蛋白水解活性和/或脂解活性的储存稳定性(在本文中可以称为洗涤剂内储存稳定性)优选是指在约30℃或37℃的升高温度下储存至多28天，至多42天或至多84天之后的残留水解活性当与储存之前可用的初始水解活性比较时为至少60％，至少65％，至少70％，至少75％，至少80％或至少85％。优选组分(c)包含至少一种包含氨基酸天冬氨酸、组氨酸和丝氨酸作为催化三联体的水解酶。优选至少一种水解酶是枯草溶菌素蛋白酶(EC 3.4.21.62)，优选根据EP 1921147中所述的SEQ ID NO:22的蛋白酶或具有蛋白水解活性的其变体，优选与EP 1921147中所述的SEQ ID NO:2280％相同的具有R101E的蛋白酶。
在一个实施方案中，至少一种蛋白酶(优选至少一种枯草溶菌素类型蛋白酶(EC3.4.21.62))的洗涤剂内储存稳定性涉及在包含本发明液体组合物和相对于该洗涤剂配制剂的总重量为5-15重量％的至少一种氨基羧酸盐(优选MGDA)的本发明洗涤剂配制剂中的残留蛋白水解活性。优选所述洗涤剂配制剂进一步包含相对于该洗涤剂配制剂的总重量为至多5重量％的至少一种NIS-II(优选约2重量％的至少一种NIS-II)和/或相对于该洗涤剂配制剂的总重量为0.1-5.0重量％的至少一种膦酸盐(优选HEDP)。在所述洗涤剂配制剂中在37℃下储存28天之后的残留蛋白水解活性当与储存之前可用的初始蛋白水解活性比较时优选为至少40％或至少50％或至少60％或至少65％或至少70％或至少75％。
在一个实施方案中，至少一种蛋白酶(优选至少一种枯草溶菌素类型蛋白酶(EC3.4.21.62))的洗涤剂内储存稳定性涉及在包含本发明液体组合物和至少一种阴离子表面活性剂如AS-I和/或AS-II和/或皂—优选与至少一种非离子表面活性剂一起的本发明洗涤剂配制剂中的残留蛋白水解活性。优选相对于该洗涤剂配制剂的总重量以在4-12重量％范围内的量包含阴离子表面活性剂。优选所述洗涤剂配制剂进一步包含相对于该洗涤剂配制剂的总重量为2-5重量％的至少一种氨基羧酸盐(优选MGDA)。在所述洗涤剂配制剂中在30℃下储存28天之后的残留蛋白水解活性当与储存之前可用的初始蛋白水解活性比较时优选为至少40％或至少50％或至少60％或至少65％或至少70％或至少75％或至少80％或至少85％。
在本发明的一个方面，至少一种包含在本发明液体洗涤剂配制剂中的水解酶的洗涤剂内储存稳定性，优选蛋白酶和/或脂酶的洗涤剂内储存稳定性当与在缺乏所述化合物的液体洗涤剂中的洗涤剂内稳定性比较时在至少一种式(A)化合物，优选柠檬酸三乙酯存在下提高。优选至少一种式(A)化合物，优选柠檬酸三乙酯以约0.2-1重量％，0.3-0.9重量％，0.4-0.8重量％或0.5-0.7重量％的量存在，全部相对于该洗涤剂配制剂的总重量。
在一个实施方案中，在包含柠檬酸三乙酯的本发明液体洗涤剂配制剂中在约30℃或37℃的升高温度下储存至多42天之后的残留水解活性，优选蛋白水解活性和/或脂解活性当与储存之前可用的初始酶催活性比较时为至少95％。在柠檬酸三乙酯存在下储存稳定性的提高优选是指当与缺乏柠檬酸三乙酯的液体洗涤剂配制剂比较时储存之后的残留酶催活性提高至少30％，至少25％，至少20％，至少15％或至少10％。
在一个实施方案中，在包含柠檬酸三乙酯的本发明液体洗涤剂配制剂中在约30℃或37℃的升高温度下储存至多84天之后的残留水解活性，优选蛋白水解活性和/或脂解活性当与储存之前可用的初始酶催活性比较时为至少85％。
在洗涤剂配制剂中的洗涤性能
本发明涉及本发明的液体洗涤剂配制剂从待清洁表面如纺织品和硬表面除去污渍和/或脏污，优选蛋白质污渍的用途。
洗涤性能涉及在相关清洁条件下除去污渍和/或脏污的能力。
术语“洗涤“涉及家用洗涤和工业洗涤二者并且是指用包含本发明洗涤剂配制剂的溶液处理纺织品的方法。该洗涤方法通常通过使用工业装置如家用或工业洗衣机进行。替换地，该洗涤方法可以用手完成。
术语“纺织品”是指任何纺织材料，包括纱线(用于针织或编织的由天然或合成纤维制成的线)、纱线中间体、纤维、非织造材料、天然材料、合成材料以及由这些材料制成的织物(通过编织、针织或毡制纤维制成的纺织品)如衣物(由纺织品制成的任何服装制品)、布料和其他制品。
术语“纤维”包括天然纤维、合成纤维及其混合物。天然纤维的实例是植物(如亚麻、黄麻和棉)或动物来源的，包含蛋白质如胶原蛋白、角蛋白和蚕丝蛋白(例如蚕丝、绵羊毛、安哥拉山羊毛、马海毛、山羊绒)。合成来源的纤维实例是聚氨酯纤维如
Figure BDA0004113429470000531
或
Figure BDA0004113429470000532
聚酯纤维，聚烯烃如弹性纤维蛋白或聚酰胺纤维如尼龙。纤维优选包括单纤维或纺织品如针织物、机织物或非织造材料的一部分。
术语“硬表面清洁”在本文中定义为硬表面的清洁，其中硬表面包括家庭中的任何硬表面，如地板、家具、墙壁、卫生陶瓷、玻璃、包括餐具或盘子在内的金属表面。术语“硬表面清洁“在一方面是指”餐具洗涤“，后者涉及所有形式的餐具洗涤，例如手洗或自动洗餐具(ADW)。餐具洗涤包括但不限于清洁所有形式的陶器如盘、杯、玻璃、碗，所有形式的餐具如勺、餐刀、餐叉和服务器具以及陶瓷制品，塑料如蜜胺，金属，瓷器，玻璃和丙烯酸系材料。
本发明洗涤和/或清洁方法在10-90℃范围内的温度下进行。在其中本发明清洁方法作为洗涤方法进行的实施方案中，优选在10-60℃，更优选20-40℃范围内的温度下进行。在其中本发明清洁方法作为自动洗餐具方法进行的实施方案中，优选在45-65℃，更优选50-60℃范围内的温度下进行。所述温度涉及用于本发明方法中的洗涤和/或清洁水的温度。
在一个实施方案中，当与缺乏至少一种如本文在有关组分(c)的章节中所公开的蛋白酶的洗涤剂配制剂比较时，优选当与缺乏本发明液体组合物的各组分的洗涤剂配制剂比较时，使用本发明的洗涤剂配制剂提高了对包含诸如血、蛋和/或奶的材料的蛋白质污渍和/或脏污的洗涤性能。
当与缺乏至少一种如本文在有关组分(c)的章节中所公开的蛋白酶的洗涤剂配制剂比较时，优选当与缺乏本发明液体组合物的各组分的洗涤剂配制剂比较时，优选使用本发明自动洗餐具洗涤剂提高了对焦糖布丁的洗涤性能，更优选当附着于瓷表面时。
实施例
本发明由下列工作实施例进一步说明。
一般性说明：百分数为重量百分数，除非另有具体说明。
I.液体组合物在4℃下的储存稳定性—产品均匀性
液体组合物(LC)通过混合下列成分生产：
Figure BDA0004113429470000541
实施例中所用肽醛是式(PA)化合物，其中Z＝Cbz，R1是使得NH-CHR1-CO是Val的基团，R2是使得NH-CHR2-CO是Ala的基团以及R3是使得NH-CHR3-CO是Leu的基团。该三肽醛的量涉及100％活性物含量。
MPG＝1,2-丙二醇；表中所示量对应于100％活性物含量。
实施例(LC-…)中所用水解酶：EP 1921147中所述的具有突变R101E(根据BPN'编号)的SEQ ID NO:22。水解酶以上面和下面的表中所示…重量％的量加入，其中该含量涉及100％酶活性。
在4℃下储存LC-I、LC-II、LC-III和LC-IV。目测结果是在72小时内观察到浊度和可见颗粒。
Figure BDA0004113429470000542
以0.3重量％的量加入CaCl2 2H2O。以重量计的量涉及该液体组合物的总重量。加入水直至100％。
°“二醇(1,2-丙二醇除外)”；表中所示量对应于100％活性物含量。
在4℃下储存之后的光学评价结果—实施例中所用方案：
-：浊度和/或相分离
+：保持清澈，10-50天无相分离
++：保持清澈，>50天(至多199天)无相分离
Figure BDA0004113429470000551
Figure BDA0004113429470000552
Figure BDA0004113429470000553
Figure BDA0004113429470000554
Figure BDA0004113429470000561
LC-… LC-XXXV LC-XXXVI
重量％，在配制剂中
肽醛 0.28 0.28
MPG 20 50
二甘醇° 30 5
水解酶 5 5
光学评价 - ++
总有机溶剂含量 50 55
II.在洗涤剂配制剂中的酶稳定性
将I.的液体组合物加入根据表3的洗涤剂配制剂(DF)中。
表3：液体洗涤剂配制剂
Figure BDA0004113429470000562
*…如实施例部分I中的表中所公开
PAA，聚丙烯酸Mw 5.000g/mol(均聚丙烯酸)
溶剂：G＝甘油；MPG＝1,2-丙二醇
表面活性剂：
S1：式(NIS-II)的非离子表面活性剂，其中R1是n-C8烷基，R2是支化C11烷基，AO是CH2-CH2-O并且x为22。
S2：式(AS-II)的线性烷基苯磺酸盐，其中所述阴离子表面活性剂之一的特征在于R1是C10并且其他表面活性剂的特征在于R1是C13。
S3：Edenor椰油脂肪酸(C12-C18)。
S4：两种式(NIS-I)的非离子表面活性剂的混合物，其中所述非离子表面活性剂之一的特征在于R1是n-C12H25，R2和R5是H，m为3-30，优选7，n和o＝0并且其他表面活性剂的特征在于R1是n-C14H29，R2和R5是H，m为3-30，优选7，n和o＝0。
S5：两种式(AS-I)的阴离子表面活性剂的混合物，其中所述阴离子表面活性剂之一的特征在于R1是C11，R2是H，m为2，n和o＝0，A-是SO3 -，M+是Na+并且其他表面活性剂的特征在于R1是C13，R2是H，m为2，n和o＝0，A-是SO3 -，M+是Na+。
将液体洗涤剂配制剂在30℃或37℃的温度下储存≥28天。
通过测量对肽底物Suc-AAPF-pNA的反应性分析在储存之前和之后的蛋白酶活性(在本文中可以称为蛋白水解活性)。在这里使用100mM TRIS缓冲液在30℃，pH 8.6下使pNA与底物分子分裂。可以通过测量OD405—在405nm下的光密度而由该溶液中游离pNA的黄色增加测定与蛋白酶活性成正比的分裂速率。
在37℃下对液体组合物LC-XXV测试蛋白酶在洗涤剂配制剂DF-I中的储存稳定性28天。在储存28天之后测量的残留蛋白水解活性当与储存之前的初始酶催活性比较时为75％。
在37℃下对液体组合物LC-XXV测试蛋白酶在包含0.9％柠檬酸三乙酯(另一组分)的洗涤剂配制剂DF-I.中的储存稳定性42天和84天。在储存42天之后的残留蛋白水解活性当与储存之前的初始酶催活性比较时为99％。在储存84天之后的残留酶催活性当与储存之前的初始酶催活性比较时为88％。
在30℃下对液体组合物LC-XXIV、LC-XXVIII和LC-XXIX测试蛋白酶在包含0.2重量％脂酶产品
Figure BDA0004113429470000584
100L、0.1重量％甘露聚糖酶产品
Figure BDA0004113429470000582
200L、0.2重量％纤维素酶产品
Figure BDA0004113429470000583
5000L和0.2重量％淀粉酶产品
Figure BDA0004113429470000581
Prime 100L(其他组分；所有酶来自Novozymes)的洗涤剂配制剂DF-II.b中的储存稳定性28天。在所有三种情况下，在储存28天之后测量的残留蛋白水解活性当与储存之前的初始酶催活性比较时为约85％。
III.在洗涤剂配制剂中的洗涤性能
根据来自the German Cosmetic，Toiletry，Parfumery and DetergentAssociation(IKW)的洗碗机洗涤剂清洁性能质量评定的推荐进行该测试。
性能测试在家用相关Miele GSL2洗碗机中在21±1°dH(3.7±0.2mmol(Ca+Mg)/升)水硬度下通过使用“R50℃/3min/Kl55℃”程序(正常程序)在压载污碴存在下进行。在主洗循环过程中的最大温度为50℃且将该机器的软水器设定为不工作。
在主洗循环开始时施加的50g压载污碴存在下进行洗涤：
重量％
植物油 31.6
全蛋 15.8
搅打奶油，30％ 9.4
人造奶油，猪油，油炸脂肪(部分液体)，牛奶(3.5％)，番茄酱，芥末 各6.3
土豆淀粉 2.2
肉汁 1.7
小麦粉 0.6
夸克粉 0.6
苯甲酸>99.9％ 0.3
将植物油和全蛋合并并彻底混合(约30分钟)。加入番茄酱和芥末，仍然剧烈搅拌。熔化脂肪，将其冷却至约40℃，然后该混合物中并充分共混。搅入奶油和牛奶。加入粉状固体成分并将所有东西混合成调匀的面糊。以每份50g冷冻。
与25ml液体洗涤剂同时加入50g冷冻压载污碴。
测试下列蛋白酶敏感性脏污类型：
肉糜 甜品盘，瓷器 目测评估
蛋黄 不锈钢板 重力评估
焦糖蛋奶冻 甜品盘，瓷器 目测评估
根据来自the German Cosmetic，Toiletry，Parfumery and DetergentAssociation(IKW)的洗碗机洗涤剂清洁性能质量评定的推荐准备并评估污损物品。
借助代表从0(非常差)到10(非常好)的10分等级的照片目录目测评估确定除去的脏污。通过称重而重力评估确定除去的脏污。
性能指标：
性能指标 定义 目测评分 重力评分
0* 无清洁 0 0％
100 完全清洁 10 100％
*通过目测分级评估的脏污达到10的最低性能指标

Claims (15)

1.一种液体组合物，包含：
组分(a)：至少一种肽醛，优选选自式(PA)化合物的三肽醛：
Figure FDA0004113429460000011
其中
R1和R2是使得NH-CHR1-CO和/或NH-CHR2-CO是非极性氨基酸，优选相互独立地选自Ala、Val、Gly和Leu的L或D-氨基酸残基的基团；
R3是使得NH-CHR3-CO是Tyr、Phe、Val、Ala或Leu的L或D-氨基酸残基的基团；以及
N-末端保护基团Z选自苄氧羰基(Cbz)、对甲氧苄基羰基(MOZ)、苄基(Bn)、苯甲酰基(Bz)、对甲氧苄基(PMB)、对甲氧苯基(PMP)、甲酰基、乙酰基(Ac)、甲氧基、烷氧羰基、甲氧羰基、芴基甲氧羰基(Fmoc)或叔丁氧羰基(Boc)；
组分(b)：至少两种有机溶剂，其中一种溶剂为1,2-丙二醇并且至少一种其他有机溶剂选自“二醇(1,2-丙二醇除外)”，1,2-丙二醇:“二醇(1,2-丙二醇除外)”的重量比为25:1-1:4。
2.根据权利要求1的组合物，其中至少一种“二醇(1,2-丙二醇除外)”选自α-ω二醇、1,2-丁二醇、1,3-丁二醇、1,2-戊二醇和1,2-己二醇。
3.根据前述权利要求中任一项的组合物，其中在组分(b)中以25:1-4.5:1，优选12:1-4.5:1的比例存在1,2-丙二醇和至少一种“二醇(1,2-丙二醇除外)”。
4.根据权利要求3的组合物，其中至少一种“二醇(1,2-丙二醇除外)”选自α-ω二醇，优选1,6-己二醇。
5.根据前述权利要求中任一项的组合物，其中“二醇(1,2-丙二醇除外)”与组分(a)的量为约40:1-15:1的重量比。
6.根据前述权利要求中任一项的组合物，其中所述组合物额外包含：组分(c)：至少一种包含氨基酸天冬氨酸、组氨酸和丝氨酸作为催化三联体的水解酶，优选枯草溶菌素类型蛋白酶(EC 3.4.21.62)，更优选与EP1921147中所述的SEQ ID NO:22至少80％相同的蛋白酶，
其中优选以约1:1-20:1的摩尔比包含组分(a):组分(c)。
7.根据前述权利要求中任一项的组合物，其中相对于所述液体组合物的总重量以约45-65重量％的总量包含组分(b)。
8.根据前述权利要求中任一项的组合物，其中组分(b)相对于所述液体组合物的总重量以约10-60重量％的量包含1,2-丙二醇。
9.一种液体洗涤剂配制剂，包含根据权利要求1-8中任一项的液体组合物和至少一种选自表面活性剂和/或非磷酸盐基助洗剂的洗涤剂组分。
10.根据权利要求9的配制剂，其中所述洗涤剂配制剂包含至少一种式(A)化合物：
Figure FDA0004113429460000021
其中式(A)中的各变量如下所定义：
R1、R2和R3选自H、线性C1-C8烷基和支化C3-C8烷基，其中R1、R2和R3中至少一个不为H。线性C1-C8烷基的实例是甲基、乙基、正丙基、正丁基、正戊基等。支化C3-C8烷基的实例是2-丙基、2-丁基、仲丁基、叔丁基、2-戊基、3-戊基、异戊基等。优选R1、R2、R3是乙基。
11.根据权利要求9或10的配制剂，其中当在30℃下储存至少28天时所包含的至少一种水解酶当与储存之前可用的初始水解活性比较时具有至少60％的残留水解活性。
12.至少一种选自α-ω二醇、1,2-丁二醇、1,3-丁二醇、1,2-戊二醇和1,2-己二醇的“二醇(1,2-丙二醇除外)”增加三肽醛在1,2-丙二醇中的溶解度的用途，其中所述三肽醛选自式(PA)化合物：
Figure FDA0004113429460000031
其中
R1和R2是使得NH-CHR1-CO和/或NH-CHR2-CO是非极性氨基酸，优选相互独立地选自Ala、Val、Gly和Leu的L或D-氨基酸残基的基团；R3是使得NH-CHR3-CO是Tyr、Phe、Val、Ala或Leu的L或D-氨基酸残基的基团；以及
N-末端保护基团Z选自苄氧羰基(Cbz)、对甲氧苄基羰基(MOZ)、苄基(Bn)、苯甲酰基(Bz)、对甲氧苄基(PMB)、对甲氧苯基(PMP)、甲酰基、乙酰基(Ac)、甲氧基、烷氧羰基、甲氧羰基、芴基甲氧羰基(Fmoc)或叔丁氧羰基(Boc)。
13.根据权利要求12的用途，其中所得液体产物在环境温度下均匀并且优选在4℃，30℃或37℃下储存至少高达50天时保持均匀。
14.根据权利要求9-11中任一项的洗涤剂配制剂当与使用缺乏根据权利要求1-8中任一项的液体组合物的组分的洗涤剂配制剂比较时提高对蛋白质污渍的洗涤性能的用途。
15.至少一种选自α-ω二醇、1,2-丁二醇、1,3-丁二醇、1,2-戊二醇和1,2-己二醇的“二醇(1,2-丙二醇除外)”从至少包含1,2-丙二醇和式(PA)的三肽醛的液体组合物去除浊度和/或溶解颗粒的用途：
Figure FDA0004113429460000032
其中
R1和R2是使得NH-CHR1-CO和/或NH-CHR2-CO是非极性氨基酸，优选相互独立地选自Ala、Val、Gly和Leu的L或D-氨基酸残基的基团；R3是使得NH-CHR3-CO是Tyr、Phe、Val、Ala或Leu的L或D-氨基酸残基的基团；以及
N-末端保护基团Z选自苄氧羰基(Cbz)、对甲氧苄基羰基(MOZ)、苄基(Bn)、苯甲酰基(Bz)、对甲氧苄基(PMB)、对甲氧苯基(PMP)、甲酰基、乙酰基(Ac)、甲氧基、烷氧羰基、甲氧羰基、芴基甲氧羰基(Fmoc)或叔丁氧羰基(Boc)。
CN202180057243.7A 2020-09-22 2021-09-17 包含肽醛的液体组合物 Pending CN116057066A (zh)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP20197482.1 2020-09-22
EP20197482 2020-09-22
PCT/EP2021/075659 WO2022063698A1 (en) 2020-09-22 2021-09-17 Liquid composition comprising peptide aldehyde

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN116057066A true CN116057066A (zh) 2023-05-02

Family

ID=72615600

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202180057243.7A Pending CN116057066A (zh) 2020-09-22 2021-09-17 包含肽醛的液体组合物

Country Status (5)

Country Link
US (1) US20240052270A1 (zh)
EP (1) EP4217367A1 (zh)
CN (1) CN116057066A (zh)
BR (1) BR112023005106A2 (zh)
WO (1) WO2022063698A1 (zh)

Family Cites Families (59)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
ES2134186T3 (es) 1987-02-27 1999-10-01 Genencor Int Clonaje molecular y expresion de genes que codifican enzimas proteoliticas.
DK6488D0 (da) 1988-01-07 1988-01-07 Novo Industri As Enzymer
DK0493398T3 (da) 1989-08-25 2000-05-22 Henkel Research Corp Alkalisk, proteolytisk enzym og fremgangsmåde til fremstilling deraf
DK115890D0 (da) 1990-05-09 1990-05-09 Novo Nordisk As Enzym
US5869438A (en) 1990-09-13 1999-02-09 Novo Nordisk A/S Lipase variants
FI931193A0 (fi) 1992-05-22 1993-03-17 Valtion Teknillinen Mannanasenzymer, gener som kodar foer dem och foerfaranden foer isoleringav generna samt foerfarande foer blekning av lignocellulosahaltig massa
ATE444356T1 (de) 1992-07-23 2009-10-15 Novozymes As Mutierte -g(a)-amylase, waschmittel und geschirrspülmittel
NZ262623A (en) 1993-02-11 1998-03-25 Genencor Int Alpha-amylase mutant, dna and vectors encoding such and detergent compositions thereof
CN1189558C (zh) 1993-10-08 2005-02-16 诺沃奇梅兹有限公司 淀粉酶变体
JP3922391B2 (ja) 1994-02-24 2007-05-30 ヘンケル コマンディットゲゼルシャフト アウフ アクティーン 改良酵素とこれを含有する洗剤
CA2211380A1 (en) 1995-02-02 1996-08-08 Stichting Centraal Laboratorium Van De Bloedtransfusiedienst Van Het Ned Erlandse Rode Kruis Enrichment of hematopoietic stem cells from blood or bone marrow
DE19524959C2 (de) 1995-07-08 1997-04-24 Hohmann Joerg Meßeinrichtung für die Dehnung eines mittels einer Mutter gespannten Gewindebolzens oder einer Schraube
US5763385A (en) 1996-05-14 1998-06-09 Genencor International, Inc. Modified α-amylases having altered calcium binding properties
ATE227769T1 (de) 1996-09-24 2002-11-15 Procter & Gamble Flüssige reinigungsmittel, die proteolytisches enzyme, peptidaldehyd und kalziumionen enthalten
DK2206768T3 (en) 1997-10-13 2015-06-29 Novozymes As Alfa-amylasemutanter
JP4246386B2 (ja) 1997-11-24 2009-04-02 ノボザイムス アクティーゼルスカブ 新規なペクチン酸リアーゼ
US6124127A (en) 1997-11-24 2000-09-26 Novo Nordisk A/S Pectate lyase
WO1999027083A1 (en) 1997-11-24 1999-06-03 Novo Nordisk A/S PECTIN DEGRADING ENZYMES FROM $i(BACILLUS LICHENIFORMIS)
AU6078899A (en) 1998-10-13 2000-05-01 Novozymes A/S A modified polypeptide with reduced immune response
AU781258B2 (en) 1999-03-31 2005-05-12 Novozymes A/S Polypeptides having alkaline alpha-amylase activity and nucleic acids encoding same
MXPA03000435A (es) 2000-07-19 2004-04-02 Novozymes As Variantes de enzimas que degradan la pared celular.
EP1370648A2 (en) 2000-08-01 2003-12-17 Novozymes A/S Alpha-amylase mutants with altered properties
DE10064983A1 (de) 2000-12-23 2002-07-18 Henkel Kgaa Neue Alkalische Protease aus Bacillus alcalophilus (DSM 11233)
EP1389228B1 (en) 2001-05-14 2009-03-11 Novozymes A/S Detergent compositions comprising bacillus subtilis pectate lyases
DE10162728A1 (de) 2001-12-20 2003-07-10 Henkel Kgaa Neue Alkalische Protease aus Bacillus gibsonii (DSM 14393) und Wasch-und Reinigungsmittel enthaltend diese neue Alkalische Protease
DE10163883A1 (de) 2001-12-22 2003-07-10 Henkel Kgaa Neue Alkalische Protease aus Bacillus sp. (DSM 14390) und Wasch- und Reinigungsmittel enthaltend diese neue Alkalische Protease
DE10163884A1 (de) 2001-12-22 2003-07-10 Henkel Kgaa Neue Alkalische Protease aus Bacillus sp. (DSM 14392) und Wasch- und Reinigungsmittel enthaltend diese neue Alkalische Protease
US7601529B2 (en) 2002-05-14 2009-10-13 Novozymes A/S Pectate lyase variants
BRPI0317124B1 (pt) 2002-12-11 2016-05-17 Novozymes As composição detergente, e, processos para lavar um tecido e uma superfície dura
EP2404929B1 (en) 2003-07-02 2014-06-18 BP Corporation North America Inc. Glucanases, nucleic acids encoding them and methods for making and using them
DE10360805A1 (de) 2003-12-23 2005-07-28 Henkel Kgaa Neue Alkalische Protease und Wasch- und Reinigungsmittel, enthaltend diese neue Alkalische Protease
DE102004019751A1 (de) 2004-04-23 2005-11-17 Henkel Kgaa Neue Alkalische Proteasen und Wasch- und Reinigungsmittel, enthaltend diese neuen Alkalischen Proteasen
BRPI0512776A (pt) 2004-07-05 2008-04-08 Novozymes As variante de uma alfa-amilase tipo termamil originária, construto de dna, vetor de expressão recombinante, célula, composição, aditivo de detergente, composição detergente, composição de lavagem de roupa manual ou automática, uso de uma variante de alfa-amilase ou composição, e, método de produzir uma variante
CA2593920A1 (en) 2004-12-23 2006-06-29 Novozymes A/S Alpha-amylase variants
CA2657884C (en) 2006-07-18 2016-07-12 Direvo Industrial Biotechnology Gmbh Mannanases
ES2364193T3 (es) 2007-07-02 2011-08-26 THE PROCTER & GAMBLE COMPANY Composición para bolsa de múltiples compartimentos para el lavado de ropa.
JP5520828B2 (ja) 2007-11-05 2014-06-11 ダニスコ・ユーエス・インク 改変される特徴を有するバシルス種（Ｂａｃｉｌｌｕｓｓｐ．）ＴＳ‐２３アルファ‐アミラーゼ変異体
BRPI0819896B1 (pt) 2007-12-12 2019-03-19 Novozymes A/S Processo para converter um material vegetal derivado de um aracaceae sp. contendo manana em um álcool
JP5973166B2 (ja) 2008-03-26 2016-08-23 ノボザイムス アクティーゼルスカブ 安定化された液体酵素組成物
WO2010104675A1 (en) 2009-03-10 2010-09-16 Danisco Us Inc. Bacillus megaterium strain dsm90-related alpha-amylases, and methods of use, thereof
EP2343310A1 (en) * 2010-01-08 2011-07-13 Novozymes A/S Serine hydrolase formulation
EP3404087A1 (en) 2010-02-10 2018-11-21 Novozymes A/S Alpha-amylase variants with high stability in presence of a chelating agent
AU2012277729B2 (en) 2011-06-30 2016-12-08 Novozymes A/S Method for screening alpha-amylases
EP3798303A1 (en) 2011-06-30 2021-03-31 Novozymes A/S Alpha-amylase-variants
EP2726590B1 (en) * 2011-07-01 2017-10-18 Novozymes A/S Liquid detergent composition
EP4026902B1 (en) 2012-06-08 2025-04-16 Danisco US Inc. Variant alpha amylases with enhanced activity on starch polymers
US20160083703A1 (en) 2013-05-17 2016-03-24 Novozymes A/S Polypeptides having alpha amylase activity
US20160083704A1 (en) 2013-05-17 2016-03-24 Novozymes A/S Polypeptides having alpha amylase activity
DE102014018149A1 (de) 2014-12-10 2016-06-16 Henkel Ag & Co. Kgaa Festes Wasch- und Reinigungsmittel mit Amylase
CN108350441B (zh) 2015-10-07 2022-09-27 诺维信公司 多肽
EP3448978B1 (en) 2016-04-29 2020-03-11 Novozymes A/S Detergent compositions and uses thereof
CA3043443A1 (en) * 2016-12-01 2018-06-07 Basf Se Stabilization of enzymes in compositions
DK3385361T3 (da) 2017-04-05 2019-06-03 Ab Enzymes Gmbh Detergentsammensætninger omfattende bakterielle mannanaser
DK3409768T3 (da) 2017-05-30 2020-05-18 Ab Enzymes Oy Mannanase-varianter
WO2018224544A1 (en) 2017-06-08 2018-12-13 Novozymes A/S Compositions comprising polypeptides having cellulase activity and amylase activity, and uses thereof in cleaning and detergent compositions
CN119432814A (zh) 2017-10-27 2025-02-14 诺维信公司 Dna酶变体
US20200291330A1 (en) * 2017-11-01 2020-09-17 Novozymes A/S Polypeptides and Compositions Comprising Such Polypeptides
BR112021005954A2 (pt) * 2018-10-05 2021-06-29 Basf Se preparação enzimática, processo para produzir uma preparação enzimática estável, métodos para reduzir perda de atividade lipolítica de pelo menos uma lipase, para preparar uma formulação de detergente, para remover manchas e para aumentar a estabilidade de armazenagem de uma formulação de detergente líquido, usos de um composto e da preparação enzimática, e, formulação de detergente.
CN114364795A (zh) 2019-08-22 2022-04-15 巴斯夫欧洲公司 淀粉酶变体

Also Published As

Publication number Publication date
WO2022063698A1 (en) 2022-03-31
BR112023005106A2 (pt) 2023-04-18
US20240052270A1 (en) 2024-02-15
EP4217367A1 (en) 2023-08-02

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US11214777B2 (en) Method for using lipase enzymes for cleaning
CN105073971A (zh) 使用多酶组合物的工业洗涤和机构洗涤
CN102421893A (zh) 碱性蛋白酶变体
WO2021074430A1 (en) Storage-stable hydrolase containing liquids
JP2023520312A (ja) 炭水化物結合モジュールバリアント
US20210395651A1 (en) Compounds stabilizing hydrolases in liquids
US11732250B2 (en) Lipase enzymes
KR20240027620A (ko) 개선된 회색화방지 성능 및/또는 보풀방지 성능을 갖는 세정 조성물
KR20240027617A (ko) 폴리에스테라제 활성을 갖는 지질분해 효소를 포함하는 세정 조성물
JP2023544111A (ja) 第二の酵素を含む、プロテアーゼとプロテアーゼ阻害薬との改善された組合せ
US11512268B2 (en) Storage-stable enzyme preparations, their production and use
US20210395650A1 (en) Compounds stabilizing hydrolases in liquids
US20220112479A1 (en) Compounds stabilizing amylases in liquids
CN116057066A (zh) 包含肽醛的液体组合物
JP2022095573A (ja) 液体抗バイオフィルム組成物
JP2023538740A (ja) ファミリー４４キシログルカナーゼの変異体
WO2019211143A1 (en) Amylase enzymes
RU2783163C2 (ru) Стабильные при хранении ферментные препараты, их получение и применение
WO2020229480A1 (en) Compounds stabilizing hydrolases in liquids
EP4015629A1 (en) Polymer mixtures for increasing stability and performance of hydrolase-containing detergents
CN119731315A (zh) 包含淀粉酶的酶组合物
EP3677676A1 (en) Compounds stabilizing amylases in liquids

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination