CN114984004B - 硫酸舒欣啶在制备抗脓毒症药物中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了硫酸舒欣啶在制备抗脓毒症药物中的应用，属于药物技术领域。该化合物式可用已知方法合成，制备工艺成熟，能够提供可靠的化合物来源，是一种理想的抗炎的化合物，可应用于制备预防、缓解和治疗内毒素血症引起的相关疾病的药物。所述疾病包括但不限于全身炎症反应综合征、脓毒症、重度脓毒症、脓毒性休克，以及脓毒症相关的急性肺损伤、急性呼吸窘迫综合征和多器官衰竭综合征。

Description

硫酸舒欣啶在制备抗脓毒症药物中的应用

技术领域

本发明属于制药领域，具体涉及硫酸舒欣啶在制备抗脓毒症药物中的应用。

背景技术

脓毒症是严重创伤、烧伤以及外科大手术后常见的并发症，可进一步发展为脓毒性休克、多器官功能障碍综合征(multiple organ dysfunction syndrome，MODS)。

脓毒症的并发症是脓毒症病理生理各阶段过程中的临床表现，常见的并发症包括休克、急性肺损伤(ALI)、急性呼吸窘迫综合征(ARDS)、深静脉血栓(DVT)形成、应激性溃疡、代谢性酸中毒、弥漫性血管内凝血(DIC)直至多器官功能障碍综合征 (MODS)。

脓毒症的发病机制较为复杂，涉及到全身炎症网络效应、基因多态性、免疫功能障碍、凝血功能异常、组织损伤以及宿主对不同感染病原微生物及其毒素的异常反应等多个方面，与机体多系统、多器官病理生理改变密切相关，脓毒症的发病机制仍需进一步阐明。

脓毒症可以由任何部位的感染引起，临床上常见于肺炎、腹膜炎、胆管炎、泌尿系统感染、脑膜炎、脓肿等。脓毒血症和感染性休克嘴常见的致病菌为革兰氏阴性细菌(主要包括大肠埃希菌，克雷伯菌和铜绿假胞杆菌)。脓毒症的基础治疗首先是利用抗生素控制感染源。

硫酸舒欣啶是钠、钙、钾多离子通道的抑制剂，一种具有抗心律失常活性的新结构类型药物，目前针对硫酸舒欣啶的研究主要集中在治疗心律失常方面。到目前为止，还未有对硫酸舒欣啶在抗炎方面的作用的报道。本发明通过细胞和动物实验，得出硫酸舒欣啶可以具有阻断脓毒症发病过程中过激的炎症反应，降低组织损伤，从而降低脓毒症死亡率。

发明内容

发明目的：本发明所要解决的技术问题是针对现有技术的不足，提供硫酸舒欣啶在制备抗内毒素血症所引起的疾病药物中的应用。

本发明还要解决的技术问题是提供一种药物组合物在制备抗内毒素血症所引起的疾病药物中的应用。

为了解决上述第一个技术问题，本发明公开了式I所示硫酸舒欣啶，或其药学上可接受的盐、立体异构体、互变异构体、溶剂合物或前药，或其代谢物，或以硫酸舒欣啶为基本母核且与糖类物质/具有糖类结构结合产生的苷类化合物，或它们的组合物在制备抗内毒素血症所引起的疾病药物中的应用。

在一些实施例中，所述硫酸舒欣啶可通过已知的方法制备所得，参考专利CN1299813 N-取代苄基或苯基芳香磺酰胺化合物及其用途。

在一些实施例中，所述应用为硫酸舒欣啶在制备抗内毒素血症所引起的疾病药物中的应用。

在一些实施例中，所述内毒素血症所引起的疾病为全身炎症反应综合征、脓毒症、重度脓毒症、脓毒性休克、脓毒症相关的急性肺损伤、急性呼吸窘迫综合征和多器官衰竭综合征中的任意一种或几种组合；在一些实施例中为脓毒症。

在一些实施例中，所述应用为硫酸舒欣啶在制备抗脓毒症药物中的应用。

为了解决上述第二个技术问题，本发明公开了一种药物组合物在制备抗内毒素血症所引起的疾病药物中的应用，所述药物组合物以下述物质为主要活性物质，增加制剂辅料；

硫酸舒欣啶，或其药学上可接受的盐、立体异构体、互变异构体、溶剂合物或前药，或其代谢物，或以硫酸舒欣啶为基本母核且与糖类物质/具有糖类结构结合产生的苷类化合物，或它们的组合物。

在一些实施例中，所述药物组合物的制剂为适用于舌下给药、口服给药、皮肤给药、注射给药或肺部吸入的单位剂型形式。

在一些实施例中，所述单位剂型为丸剂、胶囊剂、片剂、散剂、颗粒剂、口服液、注射剂、灌肠液和煎煮剂中的任意一种。

在一些实施例中，所述的胶囊剂的制备方法为将药物组合物中众成分称量，粉碎，过筛，制粒，干燥，整粒，总混，充填，分装，即得，公知的可向其中添加药物辅料。

在一些实施例中，所述的片剂的制备方法为将药物组合物中众成分粉碎，过筛，配料，制粒，干燥，整粒，总混，压片，包衣，分装，即得，公知的可向其中添加药物辅料。

在一些实施例中，所述散剂的制备方法为将药物组合物中众成分粉碎，过筛，混合，分剂量，包装，即得。

在一些实施例中，所述颗粒剂的制备方法为将药物组合物中众成分粉碎、过筛，配料，制粒，干燥，整粒，分剂量，内包装，即得，公知的可向其中添加药物辅料。

在一些实施例中，所述丸剂、口服液、注射剂、灌肠液和煎煮剂为将众成分粉碎，参考现有公知的方法制备所得，公知的可向其中添加药物辅料。

在一些实施例中，所述内毒素血症所引起的疾病为全身炎症反应综合征、脓毒症、重度脓毒症、脓毒性休克、脓毒症相关的急性肺损伤、急性呼吸窘迫综合征和多器官衰竭综合征中的任意一种或几种组合；在一些实施例中为脓毒症。

有益效果：与现有技术相比，本发明的优势如下：

(1)本发明研究的硫酸舒欣啶能够通过已知的方法合成，制备工艺成熟，能够提供可靠的化合物来源，具有物质来源可靠性、生产成本低、作用机制新颖、市场前景良好等优势。

(2)本发明通过LPS诱导单核细胞THP-1的炎症反应，和盲肠结扎穿孔(CLP) 诱导的小鼠脓毒症模型和大鼠脓毒症模型，从细胞水平和动物水平，观察硫酸舒欣啶的抗炎作用，发现硫酸舒欣啶能显著抑制LPS诱导的单核细胞的炎症反应，降低炎症因子的分泌，抑制脓毒症小鼠的死亡率，抑制脓毒症大鼠的炎症反应，降低血清炎症因子的水平，为脓毒症的治疗提供了新思路。

附图说明

下面结合附图和具体实施方式对本发明做更进一步的具体说明，本发明的上述和/ 或其他方面的优点将会变得更加清楚。

图1为硫酸舒欣啶对LPS诱导的THP-1细胞炎症因子的释放的影响。

图2为硫酸舒欣啶对CLP诱导的脓毒症小鼠存活率的影响。

图3为硫酸舒欣啶对CLP诱导的脓毒症大鼠血浆炎症因子水平的影响。

具体实施方式

下面结合具体实施例来进一步描述本发明，本发明的优点和特点将会随着描述而更为清楚。但实施例仅为示范性的，并不对本发明的范围构成任何限制。本领域技术人员应该理解的是，在不偏离本发明的精神和范围下可以对本发明的技术方案的细节和形式进行修改或替换，但这些修改和替换均落入本发明的保护范围内。

下述实施例中所述实验方法，如无特殊说明，均为常规方法；所述试剂和材料，如无特殊说明，均可从商业途径获得。

实施例1：硫酸舒欣啶抑制LPS诱导的THP-1细胞的炎症反应

1、试验目的

本实施例采用LPS诱导单核细胞THP-1的炎症反应，通过检测炎症因子的表达，在体外水平探究硫酸舒欣啶的抗炎作用。

2、受试药物

硫酸舒欣啶(SUL)，性状：白色粉末，批号：D17120401；提供单位：扬州中宝药业股份有限公司。贮存方式：室温避光。

3、其他试剂

LPS：Sigma。

TNF-α、IL-1β、IL-6和HMGB1 ELISA检测剂盒：ThermoFisher Scientific。

细胞培养试剂：RPMI 1640完全培养液、抗生素(100U/mL青霉素和100μg/mL链霉素)以及胎牛血清均购买自Gibco。

4、实验细胞

人单核细胞型淋巴瘤细胞株THP-1购买自中国科学院上海分院生物化学与细胞生物学研究所细胞库。

5、实验方法

将THP-1细胞以5×10^s/孔接种于12孔板中，当细胞密度达到80％时，硫酸舒欣啶(5、10、20μM)与THP-1细胞孵育1小时，然后与LPS(500ng/mL)共孵育12小时，无处理细胞为空白组，单独LPS处理为模型组。ELISA检测细胞上清中TNF-α、IL-1β、 IL-6和HMGB1水平。

实验结果如表1所示：LPS(500ng/mL)诱导THP-1细胞12小时候，细胞上清中释放的TNF-a、IL-1β、IL-6和HMGB1水平明显上升；而不同浓度硫酸舒欣啶(5、10、 20μM)处理细胞，能够剂量依赖性地抑制LPS引起的TNF-a、IL-1β、IL-6和HMGB1 的释放，结果具有显著性差异(图1)。

表1.硫酸舒欣啶对LPS诱导的THP-1炎症因子释放的影响(n＝6)

注：####p＜0.001，与空白组比较；**p＜0.01，***p＜0.001，与模型组比较。

实施例2：硫酸舒欣啶对脓毒症小鼠的生存率的影响

1、试验目的

本实施例采用盲肠结扎穿孔(CLP)诱导小鼠脓毒症模型，探究硫酸舒欣啶对脓毒症小鼠的生存率的作用。

2、受试药物

硫酸舒欣啶(SUL)，性状：白色粉末，批号：D17120401；提供单位：扬州中宝药业股份有限公司。贮存方式：室温避光。

3、实验动物

SPF级Balb/c小鼠，雄性，上海斯莱克实验动物有限责任公司，生产许可证号码：SCK(沪)2017-0005。

5、实验方法

小鼠80只，体重18～22g，动物适应性喂养1周，将动物分为4组，即正常组，模型组，硫酸舒欣啶静脉注射低剂量组(50mg/kg)，硫酸舒欣啶静脉注射低剂量高剂量组(100mg/kg)，每组20只小鼠。

小鼠造模前12小时禁食。称重后，按体重腹腔注射3％戊巴比妥钠(45mg/kg)进行麻醉。小鼠固定，剪去腹部被毛进行碘伏消毒后，在腹中线做1厘米左右的切口。找到盲肠后，在盲肠(距游离端)的2/3处结扎后用12号针头对穿远端盲肠体一次，形成盲肠漏后将肠内容物挤压出。假手术组仅开腹，不做结扎和穿刺。最后，将盲肠归位后逐层缝合切口，进行碘伏消毒，立即背部皮下注射1ml 37℃的生理盐水以补充手术所致的液体流失。

CLP脓毒症造模后8小时分别注射0.9％生理盐水(模型组)或硫酸舒欣啶注射液(硫酸舒欣啶静脉注射低剂量、高剂量组)，上述4组动物术后每8小时统计一次动物死亡情况。

实验结果如图2所示：CLP脓毒症模型小鼠死亡率显著增高，而注射高、低剂量的硫酸舒欣啶能够显著提高脓毒症小鼠的生存率。

实施例3：硫酸舒欣啶对脓毒症大鼠血清炎症因子水平的影响

1、试验目的

本实施例采用盲肠结扎穿孔(CLP)诱导大鼠脓毒症模型，探究硫酸舒欣啶对脓毒症大鼠的体内炎症反应的影响。

2、受试药物

硫酸舒欣啶(SUL)，性状：白色粉末，批号：D17120401；提供单位：扬州中宝药业股份有限公司。贮存方式：室温避光。

3、实验动物

SPF级SD鼠，雄性，上海斯莱克实验动物有限责任公司，生产许可证号码：SCK (沪)2017-0005。

5、实验方法

大鼠40只，体重200～250g，动物适应性喂养1周，将动物分为4组，即正常组，模型组，硫酸舒欣啶静脉注射低剂量(50mg/kg)、高剂量(100mg/kg)组，每组10 只大鼠。

大鼠称重后，按体重腹腔注射3％戊巴比妥钠(45mg/kg)进行麻醉。大鼠固定，剪去腹部被毛进行碘伏消毒后，在腹中线做1.5厘米左右的切口。找到盲肠后，在盲肠 (距游离端)的2/3处结扎后用16号针头对穿远端盲肠体一次，形成盲肠漏后将肠内容物挤压出。假手术组仅开腹，不做结扎和穿刺。最后，将盲肠归位后逐层缝合切口，进行碘伏消毒，立即背部皮下注射10ml 37℃的生理盐水以补充手术所致的液体流失。

CLP脓毒症造模后1小时分别注射0.9％生理盐水(模型组)或硫酸舒欣啶注射液(硫酸舒欣啶静脉注射低剂量、高剂量组)，6h后经眼眶采血，分离血浆，利用大鼠 ELISA检测试剂盒检测血浆中IL-1β、IL-6、TNF-α和HMGB1含量。

结果如表2和图3所示：CLP脓毒症模型大鼠血清中的TNF-α、IL-1β、IL-6和HMGB1水平明显上升；而尾静脉注射硫酸舒欣啶(50、100mg/kg)，能够剂量依赖性地降低 CLP脓毒症大鼠血浆中的TNF-α、IL-1β、IL-6和HMGB1水平，结果具有显著性差异。

表2.硫酸舒欣啶对CLP大鼠血浆炎症因子水平的影响(n＝10)

注：####p＜0.001，与空白组比较；*p＜0.05，**p＜0.01，***p＜0.001，与模型组比较。

本发明提供了硫酸舒欣啶在制备抗脓毒症药物中的应用的思路及方法，具体实现该技术方案的方法和途径很多，以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。本实施例中未明确的各组成部分均可用现有技术加以实现。

Claims (5)

1.硫酸舒欣啶，或其药学上可接受的盐，或它们的组合物在制备抗内毒素血症所引起的疾病药物中的应用；所述内毒素血症所引起的疾病为脓毒症。

2.一种药物组合物在制备抗内毒素血症所引起的疾病药物中的应用，其特征在于，所述药物组合物以下述物质为活性物质，增加制剂辅料；

硫酸舒欣啶，或其药学上可接受的盐，或它们的组合物；

所述内毒素血症所引起的疾病为脓毒症。

3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述药物组合物的制剂为适用于舌下给药、口服给药、皮肤给药、注射给药或肺部吸入的单位剂型形式。

4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述单位剂型为丸剂、胶囊剂、片剂、散剂、颗粒剂、口服液和注射剂中的任意一种。

5.根据权利要求1~4中任意一项所述的应用，其特征在于，所述内毒素血症所引起的疾病为重度脓毒症。