CN1147815A

CN1147815A - 腺苷衍生物

Info

Publication number: CN1147815A
Application number: CN95192979A
Authority: CN
Inventors: F·加迪恩; B·L·K·曼戈; J·R·福扎德; M·法拉沙德; P·K·卡帕
Original assignee: Sandoz AG
Current assignee: Sandoz AG
Priority date: 1994-05-10
Filing date: 1995-05-09
Publication date: 1997-04-16
Also published as: CA2186847A1; JPH09512823A; NO964735L; CZ327896A3; AU2546195A; WO1995030683A1; FI964468A0; HU9603105D0; FI964468A; BR9507683A; SK146096A3; NO964735D0; PL316985A1; EP0759925A1; HUT75338A

Abstract

式I化合物用作止痛剂，其中R₁是羟基烷基的式I化合物是新的。可以在四丁基铵硫酸氢盐和非极性溶剂存在下，在2′位置进行烷基化来制造式I的化合物。式中：R₁是几种含意之一，包括环烷基和羟基环烷基；R₂是氢、(C_1-4)烷基、氨基、(C_3-5)环烷基或原子序数为9～35的卤素，以及R₃是(C_1-4)烷基。

Description

腺苷衍生物

本发明涉及腺苷衍生物，更具体地说是提出A₁受体激动剂的新应用。

本发明具体涉及式(I)化合物的新应用。

I

式中，R₁是氢、(C_1～4)烷基、烯丙基；甲代烯丙基；直链或支链的(C_3-7)炔基，(C_3～8)环烷基，羟基(C_4～8)环烷基，被原子序数为9～35的卤素、(C_1～4)烷基、(C_1～4)烷氧基或CF₃单取代或彼此独立地双取代的苯基；或苯基(C_1～4)烷基，其中的苯环是未被取代的、或者被原子序数9～35的卤素、(C_1～4)烷基、(C_1～4)烷氧基或CF₃单取代或彼此独立地双取代；具有至少一个羟基或至少两个苯基的(C_1～4)烷基，双环烷基比如内或外双环〔2，2，1〕庚基、萘基(C_1～4)烷基、苊基(C_1～4)烷基或式A或式B的基团

或

其中，

Z是氢、羟基或(C_1～4)烷氧基，

Q是氢或羟基，

A是-CH₂-、-O-、-S-或一直接相连的键，

Y是-(CH₂)_n或一直接相连的键，

n是1～3的整数，

式A中的虚线表示一个可有可无的键，R₂是氢、(C_1～4)烷基、氨基、(C_3～5)环烷基或原子序数9-35的卤素，以及R₃是(C_1～4)烷基。

某些这类化合物，比如式中R₁不是羟基环烷基的化合物是已知的，并公开在比如已公布的英国专利申请2,226,027A和欧洲专利申请EP-O-378,518和EP-0-269,574以及USP4,843,066和4,985,049中。

在其中所述的式子中，四氢呋喃环的2′、3′、4′和5′取代基具有如在腺苷中一样的构型。

在如式1的一组化合物中，R₁不是羟基环烷基。在另一组式1的化合物中，R₁是羟基(C_4～8)环烷基。

优选的式1化合物是6-环己基-2′-O-甲基-腺苷，后文中称之为化合物M。

一般可按下面方法测定优选的式1化合物的A₁腺苷活性：

腺苷受体亲和力

如H.Bruns等人在分子药理学(Molecular Pharmacology)29(1986)p331-344中曾叙述过的方法制备猪纹状体膜。

用一种非选择性腺苷受体激动剂³H-NECA来标记A₁和A₂受体。通过对Langmuir方程进行加权非线性最小二乘法曲线拟合由替代曲线得到IC₅₀值，并计算出pK_D值。表：腺苷受体配位体对A₁和A₂受体的亲和力A₁ A₂ A₁∶A₂(K_D；nM) (K_D；nM) 选择性 nCPA 0.74±0.08 930+110 1260 6CV1808 2460±757 269±70 0.1 5CGS21680 4360±1080 18.6±4 0.004 4化合物M 23±2 24500±5160 1090 51.5H₂OCPA＝环戊基腺苷CV1808＝2-苯氨基腺苷(碳水化合物.81卷.1974)ref91898

K)CGS21680＝2-〔对(2-羧乙基)苯乙氨基〕-5′-N-乙基甲酰

氨基腺苷(FASEBJ，1989，3(4)Refs.4770/3)

按照该文献，证实CPA是对A₁受体的有效及高选择性的结合替代剂，CV1808是一种较弱的但是是有选择性的A₂受体配位体，而CGS21680对A₂受体表现出高效和选择性。

1.5水合物形式的化合物M对于A₁受体比对于A₂受体表现出更好的亲和力和高选择性。

已知的式I化合物作为抗高血压药及冠状动脉血管舒张剂是已知的。

另外还知道，式I的化合物通过抑制血小板凝聚及活化白细胞来保护血管内膜。它们也降低血脂浓度。再有，式I化合物对于由高血压如充血性心力衰竭、心肌梗塞或突发性心肌坏死及肾功能不全所引起的疾病有预防作用(见欧洲专利申请EP-0-378518和EP-0-269574)。

还已知这类化合物用于治疗神经变性疾病、外周神经疾病如糖尿病型神经疾病以及治疗与外周血管疾病有关的疾病和/或与神经元变性、高甘油三酯血/低HDL胆固醇含量、脂类机能障碍、高游离脂肪酸或I型及II型糖尿病，包括非胰岛素依赖型糖尿病、心律失常，特别是阵发性室上心动过速和心动过速性房颤有关的疾病以及预防心肌梗塞。

本申请人发现，对于比如治疗如急性或慢性疼痛，式I化合物是特别有意义的止痛剂。

在标准动物试验中，比如在炎性和神经疾病模型中，如减少持续性炎症机械过度止痛〔试验a)和b)〕及持续性神经性热过度止痛〔试验c)〕表示的慢性神经痛的止痛活性表现出式I化合物有止痛活性。

炎性痛觉过敏

试验a)弗洛伊德氏佐剂诱发痛觉过敏

在鼠的一个膝关节上进行关节内注射完全Freund氏佐剂(100微升)。在该腿部鼠的可忍受负荷减小，直到第5天以前一直在下降。这个效果表明了机械痛觉过敏，而且对NSAID氏制剂和鸦片制剂有反应。通过注射，最好是口服，以约3～60μg/kg动物体重施用式I的化合物。测量在注射侧能忍受的负荷增加量，确定痛觉过敏的逆转点。

当在大约1小时作用期间，经口服3～60μg/kg剂量时，化合物M显示出特别有意义的活性。在3、30和60μg/kg剂量之间没有反映出有明显差异，这表明在3～30μg/kg剂量已达到最大效果。

试验b)松节油诱发机械痛觉过敏

在鼠爪(左后腿)上进行足底内局部注射松节油/液体石蜡，造成局部炎症反应，使对于机械刺激(爪压)的缩回阈减小(减少340g)。在注射后3天，以口服或皮下以约1～100μg/kg的剂量给药，在1～3小时以后再取此阈值读数，表明式I化合物是有活性的。

以剂量30和60μg/kg口服化合物M表现出明显的活性，而且在30μg/kg就显示出最大效果。在此试验中，吗啡的ED₅₀值是1.2mg/kg(皮下注射)。

神经疾病性痛觉过敏

试验c)神经性热痛觉过敏(根据Z.Seltzer等人在痛，1990，43，205-218中所述原理)

对坐骨神经进行单侧部分结扎，消除了通向鼠爪神经系统的神经纤维。该鼠就产生了对机械和热刺激的痛觉过敏，而且不用引起肢体分离就会使部分去神经的爪力感觉异常(allodynia)。将该动物放入置于薄玻璃板上的有机玻璃盒子中，一个鳄鱼夹形的热刺激器放到爪的足底表面上。测量对于缩爪的滞后时间。在神经结扎后12～15天以约1～约100μg/kg的剂量皮下注射，最好口服给药表明式I化合物是有活性的。对于抗热致疼痛过敏，化合物M特别有活性。在30和60μg/kg的剂量，化合物M显示出明显活性，在30μg/kg有最佳效果。ED₅₀大约为60μg/kg(口服)。当皮下给药时，在此试验中吗啡的ED₅₀大约为3mg/kg。

临床试验

临床试验可按如下进行：

对于经受疼痛、术后痛或带状疱疹后神经痛的动物，经静脉注射以0.02～5mg的剂量给予式I化合物，特别是化合物M。观察到了疼痛减轻。

因此，本发明化合物可用作止痛剂，比如抗急性或慢性疼痛，如慢性神经痛。

所以在一个方面，本发明提供一种治疗疼痛的方法，这包括给需要进行这种治疗的对象施用治疗有效量的如前面所定义的式I化合物。

在另一方面，本发明提供如前面所定义的式I化合物在制备适于治疗疼痛的药物时作为止痛剂的应用。

在再一个方面，本发明提供了用于治疗疼痛的如前面所定义的式I化合物。

在又一个方面，本发明提供了含有如前面所定义的式I化合物为止痛剂，与药物可接受的载体或稀释剂一起使用的止痛组合物。

适应症包括疼痛，比如与组织损伤及炎症有关的急性疼痛(如术后痛、烧伤痛、外伤痛等)、慢性炎症疼痛(如关节炎)和慢性神经症疼痛(如糖尿病神经疾病、疱疹后神经痛、多发性硬化症、灼性神经痛等)。

在如上所指出的本发明的应用中，所用化合物的剂量当然随所用化合物的种类、疾病严重程度、宿主状况、病人体重、给药方式以及化合物的相对效果不同而发生变化。然而一般说来，3天剂量由约1～约100μg/kg动物体重在动物可显示得到满意的结果，比如3～60，像10～60μg/kg。对于大动物，比如人，需要的日剂量为约0.1～约10mg，一般以单位剂量约0.02～约5mg的方式服用，一天内可服用多于1次的这样单位剂量，比如每日2、3、4、5或6次，但优选每日1次或2次。

在上面的试验a)中，NSAID布洛芬的ED₅₀为约4mg/kg(口服)，而消炎痛为13mg/kg(口服)。而化合物M的活性高约300倍。对于化合物M，优选的剂量为约0.1mg日～约10mg/日，比如对于一个70kg体重的成年人为3～30μg/kg，这与适应症的严重程度和服药频度有关。

对于人，在单剂高达5mg(口服)后，化合物M未显示严重的副作用。

此处使用“药物可接受的”一词包括对人兽都适用的物质。

本发明化合物可通过任何适当的途径进行配合以利施用，优选的途径取决于需要治疗的疾病，优选单剂形或者病人可以自己以单剂形施用的形式。该组合物最好适合于口服、经直肠、局部、非胃肠道、静脉内或肌肉内给药。

本发明的组合物可以呈片剂、胶囊、香袋(sachet)、小瓶、粉末、颗粒、锭剂、栓剂、可现冲配粉末或液体制剂的形式，比如口服的或灭菌的注射用溶液或悬浮液。如果合适也可设计成局部给药制剂。

为了得到给药的稳定效果，优选以单位剂量的形式施用本发明组合物。

对于口服的单位剂型可以是含有0.02～5mg本发明化合物的片剂和胶囊，它可含有常用的赋形剂，像粘合剂，如糖浆、阿拉伯胶、明胶、山梨糖醇、黄蓍胶或聚乙烯基吡咯烷酮；填料如乳糖、蔗糖、玉米淀粉、磷酸钙、山梨糖醇或甘氨酸；压片润滑剂，如硬脂酸镁；崩解剂，如淀粉、交联聚乙烯基吡咯烷酮、淀粉乙醇酸钠或微晶纤维素；或药物可接受的润滑剂，如月桂基硫酸钠。

用通常的掺混、充填、压片等方法可制备固态口服组合物。使用重复掺混的操作可以在使用大量填料时使活性物分布在整个组合物中。

在现有技术中这些操作当然都是通用的。可按照在通常制药实践中已知的方法，特别是用肠溶糖衣给片剂包涂糖衣。

口服液体制剂可以呈乳剂、糖浆或酏剂的形式，或者是干粉，在服用前用水或其它载体重新冲配。这样的液体制剂可含有常用的添加剂，比如悬浮剂，像山梨糖醇、糖浆、甲基纤维素、明胶、羟乙基纤维素、羧甲基纤维素、硬脂酸铝凝胶、加氢食用油脂；乳化剂，像卵磷脂、单油酸山梨糖醇酯或阿拉伯胶；非水性载体(可包括食用油)如杏仁油、分馏椰子油、油酯，如甘油、丙二醇或乙醇的酯；防腐剂，如对羟基苯甲酸甲酯或丙酯或山梨酸；而且如有需要可含有常用的矫味剂或着色剂。

固体口服组合物如片剂和胶囊的例子如下：

由具有相应剂量的胶囊颗粒压成片剂。使用3^*黄色胶囊包囊化合物M，对于0.1和5mg剂量的配方分别如下所示。

0.1mg片囊 5.0mg片/囊化合物M 0.1 5.0微晶纤维素 76.92 74.96水合乳糖 87.63^* 84.69^*聚乙烯基吡咯烷酮7.4 7.4交联聚维酮 7.4 7.4硬脂酸镁 0.925 0.925保湿剂 4.625 4.6253^#胶囊 50 50理论胶囊填充量重量或片重 185 185理论胶囊重 235 235

^*调整乳糖的数量用来补偿药物中的水份含量

该化合物也可以以缓释剂型给药，以提供长效的作用。可采用通常的给药体系提供缓释剂型，比如带糖衣的丸剂或推挽渗透系统。

对于经非胃肠道给药，使用该化合物和灭菌载体制备流体单剂剂型，根据使用的浓度不同，可制成悬浮液也可溶于载体。在制备溶液时，该化合物可溶于聚乙二醇或乙醇中，并用注射用水稀释，并在装入适当的玻璃瓶或安瓿之前将内容物过滤灭菌，装入后进行密封。在载体中最好溶有助剂，如局部麻醉剂、防腐剂和缓冲剂。经非胃肠道服用悬浮剂以基本相同的方法制备，不同之处是该化合物是悬浮而非溶解在载体中，而且不能通过过滤的方法来灭菌。可以在悬浮剂灭菌载体中以前将该化合物暴露于环氧乙烷中进行灭菌。在组合物中最好包括有表面活性剂或润湿剂，以使化合物能均匀分布。

根据施用方法不同，该组合物可含有约0.1至约99％(wt)，优选10～60％(wt)的活性物质。

本发明的化合物M，或其水合物或与其它溶剂的加合物，或者其盐也可以与通常的局部用赋形剂一起作为局部用制剂来给药。

局部制剂可以是比如软膏、霜剂或洗剂、浸渍敷料、凝胶、胶贴、气雾剂和气溶胶，它们可含有适当的常用添加剂，如防腐剂、溶剂以帮助药物渗透，以及在软膏及霜剂中的软化剂。该制剂中可含有常用的相容载体，如霜质软膏基、洗剂的乙醇或油醇。

可用于式I化合物或其水合物，或其与其它溶剂加合物，或其盐的适宜霜剂、洗剂、凝胶、软膏、气雾剂或气溶胶配方在现有技术中是公知的通用的配方，比如，如在制药和化妆的标准教科书中所述，比如Leonard Hill Books出版社出版的Harry′s美容学、Remington′s药物科学和英国药典及美国药典。

在另一方面，本发明提供式Ia的腺苷衍生物Ia

式中：R₁′是羟基取代的(C_4～8)环烷基，R₂是如前面所定义的或优选氢、(C_1～4)烷基或原子序数为9～35的卤素，以及R₃如前面所定义。

式Ia的化合物可以以对映体或非对映混合物的形式存在。

在式Ia中，原子序数为9～35的卤素是氟、氯或溴；(C_1～4)烷基是甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、特别是甲基；(C_4～8)环烷基是环丁基、环戊基、环己基、环庚基或环辛基，特别是环己基或环戊基。

可以由如下方法制备式Ia的化合物，该方法的特征在于，式IIa的化合物与式IIIa的化合物反应，

IIa

式中

R₂和R₃具有如前面给出的意义，而且

X是氯或溴，

R₁′-NH₂ IIIa

式中

R₁′具有如前面给出的定义。

通常是在溶剂如二噁烷存在下，将式IIa的化合物与式IIIa的化合物一起加热到80～120℃，最好加热到沸点来实施上述的方法。

在此方法中用作原料的式IIa化合物中，X特别是氯。在已公布的欧洲专利申请269574中叙述了式IIa的化合物以及其制法。

制备式Ia的又一个方法包括将式IVa的化合物用三水合四丁基氟化铵处理，式中R₁′、R₂和R₃具有如前面所给出的定义IVa

可以在有机溶剂如四氢呋喃中，在室温和搅拌下实施上述反应。在碱性溶剂如吡啶中用1，3-二氯-1，1，3，3-四异丙基二硅氧烷处理式IIa的化合物，将如此得到的式Va化合物与式IIIa化合物反应可得到式IVa的化合物，式Va中的X、R₂和R₃具有如前面所定义的意义。

Va

在下面的实施例1～8中，所有的温度都是摄氏度且未经校正。

实施例1：6-〔(反)-4-羟基环己基〕-2′-O-甲基腺苷

在室温下将1g 6-〔(反)-4-羟基环己基〕-9-嘌呤基-2′-O-甲基-3′，5′-O-(1，1，3，3-四异丙基二硅氧-1，3-二基)-D-核糖和2g三水合四甲基氟化铵在20ml四氢呋喃中一起搅拌15分钟。然后将混合物蒸发至干，在硅胶上用醋酸乙酯/甲醇(85∶15)混合物洗脱残渣。在甲醇/醋酸乙酯中结晶提纯的产物。用1当量甲醇使标题化合物结晶，熔点121～124℃。[α]_D ²⁰＝-50.2°(c＝1，在DMF中)。

该化合物也可以用乙醇重结晶，并在放置于潮湿空气中后，用1当量水进行结晶。熔点114～117℃。[α]_D ²⁰＝-46.9°(c＝1，DMF)。

可以按如下方法制造在上述方法中作为原料使用的6-〔(反)-4-羟基环己基〕-9-嘌呤基-2′-O-甲基-3′，5′-O-(1，1，3，3-四异丙基二硅氧-1，3-二基)-D-核糖；

在105℃的油浴中将2g6-氯-9-嘌呤基-2′-O-甲基-3′，5′-O-(1，1，3，3-四异丙基二硅氧-1，3-二基)-D-核糖与1.32g反-4-羟基环己胺和1.4m1N-乙基-二异丙胺在80ml二噁烷中一起搅拌6小时。然后将该混合物冷却至室温，过滤并将滤液浓缩至干。为了进行提纯，将如此得到的混合物在硅胶上先用己烷/醋酸乙酯(7∶3)混合物，后用醋酸乙酯/甲醇(95∶5)的混合物洗脱。如此提纯的油状化合物Rf＝0.3(醋酸乙酯/甲醇，95∶5)。

实施例2：6-〔(顺)-4-羟基环己基〕-2′-O-甲某腺苷

与实施例1相似，用顺-4-羟基环己胺代替反-4-羟基环己胺得到标题命名的化合物。

用半当量醋酸乙酯将如此得到标题命名化合物结晶，熔点110～111℃。[α]_D ²⁰＝-48.6°(c＝1，在DMF中)。

实施例3：6-〔(1 S，反)-2-羟基环戊基〕-2′-O-甲基腺苷

与实施例1相似，用1S，反-2-羟基环戊胺代替反-4-羟基环己胺，得到标题命名的化合物。如此得到的标题命名化合物有如下特征：泡沫状，在醋酸乙酯/乙醇75∶25中的Rf＝0.44，[α]_D ²⁰＝-25.5°(c＝1，在DMF中)。

实施例4：6-〔(1R，反)-2-羟基环戊基〕-2′-O-甲基腺苷

与实施例1相似，用1R，反-2-羟基环戊胺代替反-4-羟基环己胺，得到标题命名的化合物。如此得到的化合物具有如下特征：熔点：164-166℃，在醋酸乙酯/乙醇75∶25中的Rf＝0.44，[α]_D ²⁰＝-80.2°(c＝1，在DMF中)。

实施例5：6-〔(1S，反)-2-羟基环己基〕-2′-O-甲基腺苷

与实施例1相似，用1S，反-2-羟基环己胺代替反-4-羟基环己胺，得到标题命名的化合物。如此得到的化合物具有如下特征：泡沫状，在醋酸乙酯/乙醇75∶25中的Rf＝0.42，[α]_D ²⁰＝-26.2°(c＝1，在DMF中)。

实施例6：6-〔(反)-4-羟基环己基〕-2′-O-乙基腺苷类似于实施例5进行制备。得到0.4水合物，熔点98℃(液化)。[α]_D ²⁰＝-58°(c＝1，在DMF中)。

实施例7：6-〔1S，(反)-2-羟基环己基〕-2′-O-乙基腺苷

类似于实施例5中的叙述进行制备。

实施例8：6-〔(1R，反)-2-羟基环己基〕-2′-O-甲基腺苷

类似于实施例1，用1R，反-2-羟基环己胺代替反-4-羟基环己胺，得到标题所命名的化合物。如此得到的如标题所命名的化合物具有如下特征：泡沫状；在醋酸乙酯/乙醇75∶25中的Rf＝0.42；[α]_D ²⁰＝-69.5°(c＝1，在DMF中)。

按照本发明的化合物具有有意义的药理性能。因此，它们可用作药物。为此，可以以水合物或与有机溶剂如甲醇、乙醇或醋酸乙酯的加合物的方式使用本发明的化合物。最有意义的式Ia化合物是在上面实施例1中的化合物，在下文中它被命名为1号化合物。

作为如上所述的止痛剂，式Ia化合物是有意义的，对于其它活性它们也是有意义的。在这些其它活性当中，如在下面研究的结果中所指出的，本发明化合物具有抗高血压活性。

使用R.F.BRUNS、G.H.LU和T.A.PUGSLEY在分子药理学(MOLEC.PHARMACOL.)29，331-346(1986)中叙述的方法，在由鼠皮质或由猪脑皮质或纹状体制的膜中测量了对腺苷A₁和A₂受体的结合。在分离并灌注的鼠肾中对下列参数进一步测试了该化合物的活性：

——血管紧张肽原酶分泌

——肾血动力学

——按照P.M.VANHOUTTE，D.BROWNING，E.COEN，T.J.VERBEUREN，L.ZONNEKEYEN和M.G.COLLIS在高血压4，251-256(1982)中叙述的方法测定在肾神经受电刺激后从神经末端释放去甲肾上腺素的抑制作用

——按照J.F.M.SMITS和J.M.BRODY在Am.J.Physiol.247，R1003-R1008(1984)中叙述的方法，以输注或快速浓注方式给予本发明的化合物后，用植入腹主动脉和腔静脉中的插管，测量清醒鼠在排出NaCl和充满NaCl时，正常血压或自发高血压时的血压、心率、产尿量及血浆中血管紧张肽原酶活性。

由实验结果可以得出结论，无论是对血管紧张肽原酶分泌的抑制还是对从神经末端释放去甲肾上腺素的抑制，以及对于血管舒张都涉及到式Ia化合物的抗高血压活性。与血压降低相反，产尿量和电解质分泌仍然不变。由此得出结论，式Ia的化合物不仅可用作抗高血压药而且还有舒张冠脉的效果。再有，它们通过抑制血小板聚凝和激活白细胞来保护血管内皮。它们还降低血脂浓度。

对于上述适应症，在式Ia的化合物中，优选实施例1的化合物，优选保护血管和止痛的适应症。

另外，正如同在下文中试验a)中所陈述的，式Ia的化合物在治疗心律不齐方面也是有活性的，这正如其腺苷A₁受体的激动剂活性所示，与其对抗A₂受体活性相比它是有选择性的，以及比如在下文中试验b)中所指出的它延长通过心脏房室(A-V)结传导的能力。因此，它们在室上性心动过速，特别是阵发性室上心动过速时可恢复窦性节律，在心律不齐性房颤时可降低心律，以及恢复由于对正常节律的β肾上腺素刺激所诱发的室性心律不齐。

式Ia的化合物摹拟所谓的“预调理”(preconditioning)效果，该过程主要是由于短时间的缺血使心脏能够耐受以后由于缺血而造成的梗死。因此，在不稳定的绞痛期，可用它们并且同时进行或不进行辅助的血小板治疗来防止心脏发生心肌梗塞，或者防止经受比如冠状动脉架桥手术、血管成形术、心脏移植术或非心脏手术的病人受到缺血性损害。

式Ia的化合物特别可用来给有心肌梗死倾向的对象服用，比如经诊断或曾经有过心肌梗死病史的人。

式Ia的化合物还可降低血浆中胰岛素含量而不会影响葡萄糖耐受性。它能增强胰岛素的增加葡萄糖摄入的效果，并降低在多脂肪组织内的脂肪分解，从而降低血浆中游离脂肪酸的浓度，请见下文中试验d)的叙述。降低血浆中游离脂肪酸的浓度进而导致降低甘油三酯，从而增加HDL胆固醇。

减少胰岛素效应和/或降低游离脂肪酸的作用使得式Ia的化合物可用于治疗I型糖尿病和II型即非胰岛素依赖型糖尿病。

式Ia化合物降低血浆甘油三酯和游离脂肪酸(见下文试验e))和升高HDL胆固醇，因此可用来治疗脂机能障碍，以及那些与游离脂肪酸和甘油三酯升高有关和希望增加HIL胆固醇的疾病。

式Ia的化合物显示出良好的代谢稳定性。

在另一方面，本发明提供了式Ia的化合物用于治疗疼痛或制备治疗疼痛的药物的应用。

在另一方面，本发明提供了一种如前面所定义的用于治疗疼痛的式Ia化合物。

在又一方面，本发明提供一种包含了如前面定义的式Ia化合物，同时含有药物可接受的载体或稀释剂的止痛组合物。本申请人打算在如前面为式I化合物所述的适应症中使用式Ia化合物。

如下的药理试验说明了式Ia化合物的上述活性。

a)对于腺苷受体的亲和性

如H.Bruns等人在分子药理学29(1986)p331-344中所述的方法制备猪纹状体膜。用一种非选择性膜苷受体激动剂³H-NECA来标记A₁和A₂受体。通过对Langmuir方程进行加权非线性最小二乘法曲线拟合，由替代曲线得到IC₅₀值，再计算出pK_D值。

式Ia化合物显示对A₁受体亲合力比如在1～500nM的范围。

b)心律失常

通过测定为P-R间隔增大，腺苷A₁受体激活降低了比如阵发性室上心动过速、心动过速性房颤和其它由于通过心脏的房室(AV)结传导减慢所致的心律失常的发病率。测试方法包括记录下清醒的成年恒河猴的ECG改变。在参考C.Clarke等人在药学杂志244，595-597(1990)中叙述的试验中，式Ia化合物可以约0.1～1000mg/kg口服，或0.03～30mg/kg静脉注射。比如说在此试验中，1号化合物延长了表面心电图(ECG)上的P-R间隔，表现为在0.1、0.3和0.6mg/kg口服剂量下，通过房室结的传导减慢。如同在上面所注意到的，这样的作用导致结束了房室结折返性心动过速，在心动过速性房颤时降低心律。

c)通过预调节(preconditioning)防止梗死

预调节(5分钟缺血跟着10分钟恢复)使心脏对以后的缺血(30分钟)和再灌注(3h)产生的梗死有较好的耐受性。在G.S.Lin等人的1991-循环(84)，1，350-356和J.D.Thornton等人在1992-循环(85)，659-665的文章中公布了测试方法。给兔以约0.01～10mg/kg的剂量通过静脉注射式Ia化合物。在此试验中，给予100μg/kg1号化合物的兔受到保护和经受冠状动脉闭合30分钟诱发的梗死产生的内源性预调节达到接近相同的程度。

d)鼠脂肪细胞的葡萄糖转运和脂解作用

i)通过用胶原酶消化由正常经口喂养的鼠的附睾脂肪体中分离的脂肪细胞。用腺苷脱氨酶(1U/ml)和用测试化合物，如1号化合物，以及其它如指出的添加物来预培养细胞(最终浓度为2％V/V)，在37℃测量葡萄糖转运。

30分钟后加入〔3-³H〕葡萄糖(最终浓度50μM，0.5μCi/ml)。再继续培养60分钟。用5ml甲苯基质闪烁剂来抽提细胞悬浮液(0.5ml)，然后对液体闪烁剂计数来估计由〔3-³H〕葡萄糖结合到脂肪细胞中的放射性。(葡萄糖转运的一种度量)；水溶性代谢产物和残留的〔3-³H〕葡萄糖仍留在水相，无法检测到。

用常用的方法测定脂解作用。在一种方法中，先用或不用1μM的异丙肾上腺素来培养细胞，然后继续培养60分钟。通过含邻苯二甲酸二壬酯进行离心之后，从细胞中分离上层清液，通过用酶测定释放剂清液中的甘油量来估计脂解作用。

当浓度在0.1～1000nM时，式Ia的化合物是有活性的。

当浓度在0.1～100nM时，1号化合物减弱鼠脂肪细胞中的脂解作用。

在有腺苷脱氨酶存在时(1U/m1)，1号化合物对于在无胰岛素时〔3-³H〕葡萄糖结合到脂肪细胞中的放射性没有明显的影响，只是在有最大刺激的胰岛素浓度(8nM)存在时才会有边际效果，但当胰岛素浓度在0.1～50nM时对结合放射性的刺激作用明显地以依存于浓度的方式而增大。这些观察表明，该化合物加大葡萄糖转运对胰岛素的敏感度。在近于最大有效浓度的1号化合物存在时，〔3-³H〕葡萄糖结合到脂肪中对胰岛素刺激的EC₅₀要降低2至3倍在有腺苷脱氨酶和1μM的异丙肾上腺素存在下，10～50nM的1号化合物既增加对胰岛素的敏感性也增大响应程度；对胰岛素的EC₅₀降至1/5，在最大胰岛素浓度的刺激也明显增大。

ii)在正常禁食18hr鼠的脂肪和葡萄糖

在控制的温度为22℃及12/12hr昼夜循环的房间中保持重约250g的2～3月龄鼠7天。

任意喂养Purina鼠食和水。在禁食18小时后，给每组5只小鼠管饲在0.5％CMC中的试验化合物。剂量为1.0ml/100g动物体重。服药后3小时。用CO₂将鼠麻醉，通过心脏穿刺采血。收集血清，用于葡萄糖、游离脂肪酸和β羟基丁酸酯测定。用乙酰COA过氧化酶热量计酶试验法测量游离脂肪酸，用葡萄糖氧化酶法(YSI Model27，Yellow Spring，Oh)测定葡萄糖，用β-羟基丁酸酯脱氢酶交联酶试验(Sigma Kit310-A，St.Louis，Mo.)测定β-羟基丁酸酯。在约1～约5000μg/kg的剂量下，式Ia的化合物是有活性的。

降低游离脂肪酸的1号化合物剂量(对脂肪细胞影响的初步结果)的2hr后剂量为5～100μg/kg。这造成剂量随着β-羟基丁酸酯和血糖含量减少而减少。

iii)在非胰岛素依赖型糖尿病(NIDD)鼠的效果

在NIDD筛选试验中，给200～220g的鼠自由地喂养高脂肪食物。在进食状态下，通过尾静脉注射40mg链脲霉素/kg体重。一周以后，将这些鼠看作是患有糖尿病，其喂食后血糖属于200mg/dl，在禁食一夜后进行口服葡萄糖耐受试验时，试验后3小时血糖浓度为40～80mg/dl。四天以后，对动物进行检查看血糖浓度是否高于180mg/dl。用YSI葡萄糖分析仪测血糖。按如下方式进行长期筛选试验：

在第一天，在早晨9：00将食物从鼠旁移开，在通过尾尖取得初始血糖读数后，口服载体(对照组)或化合物(每次9只鼠)。6小时后测定血糖浓度，在此之后立即给鼠恢复喂食。

在连续11天时间内每天一次给相同的鼠服载体或药物。在第4、8和11天在给药后0时和6小时禁食后测定血糖。对于11天100μg/kg的式Ia化合物如1号化合物会导致血浆游离脂肪酸明显下降，这使血糖产生明显的减少。

e)以高血清甘油三酯为特征的脂血症

一些研究表明血清甘油三酯浓度(和与此相关联的HDL胆固醇含量减少)与心脏冠状动脉疾病(CHD)风险之间有确定的相互关系(见Grundy的胆固醇和动脉粥样硬化与诊断和治疗Lippincott，Philadelphia(1990))。降低高甘油三酯浓度作为减少CHD发生风险的一种方法，其价值在Helsinki的心脏研究所里见到，该方法中，在用了二甲苯氧庚酸治疗后，最大限度地降低了IIB型高血脂病人的严重冠脉疾病的发生，在这些病人身上，LDL胆固醇和血清总甘油三酯浓度都升高，而HDL胆固醇的浓度一般是降低的。当剂量为约0.03～30(比如0.1～30)mg/kg(静脉注射)和0.1～100(比如O.1～10)mg/kg(口服)时在恒河猴中式Ia的化合物是有活性的。1号化合物当剂量为0.03～0.6mg/kg(静脉注射)和0.1～1.2mg/kg(口服)时可使恒河猴的血浆游离脂肪酸和甘油三酯产生与剂量有关的长期的下降，当剂量为0.6mg/kg(口服)时，1号化合物有代表性的结果表明，在300分钟后与对照组相比，游离脂肪酸下降约60％，而甘油三酯下降40％。

在麻醉鼠对平均动脉血压、心动过缓和外周血管舒张的试验中，式Ia的化合物也是有活性的。

按照Salzmann等人的方法(心血管药理学杂志(J.Cardiovasc.Pharmaco1.)12，451-460，1988)用硫喷妥麻醉(120mg/kg腹膜内)的体重300～350g雄Wistar鼠进行试验。将插管安插在右颈静脉和右股静脉中，在左心室(通过右颈动脉插入)、左股动脉和主动脉(通过右股动脉插入)中。测量或计算出如下的参数：收缩期、舒张期及平均动脉血压(mmHg；左股动脉，Statham血压换能器P23Gb)、脉压(mmHg)、心律(跳/分钟，由血压曲线触发)、左室压升速(dp/dt_max，mmHg/s；Statham血压换能器P23Gb)、心输出量(ml/min/100g体重，热稀释法，右颈静脉和主动脉)、总外周阻力(dyness.cm^-5/100g体重)、表面心电图。用Schwarzer多波图连续记录动脉血压、左心室压、dp/dt_max、心律和心电图。在给测试物前30、20、10和2分以及向右股静脉注射药物后1、5、10及15分钟时测定参数。式Ia化合物的注射剂量约为0.001～约10mg/kg动物体重。在累积剂量0.003、0.010和0.03mg/kg时测定1号化合物，每种剂量使用3个动物。1号化合物导致血压(ED₅₀＝49μg/kg静脉注射)和心律下降，系统血管传导性上升。

在上述适应症中使用的式Ia化合物的剂量将以一般的方式随着疾病的严重程度、患者体重和该化合物的相对效能不同而变化。然而，作为一个通用的指导，适用的单位剂量可以是0.1～1000mg，像0.1～10、0.5～200、0.5～100或0.5～10mg，比如0.1、0.5、1、2、3、4或5mg；此单位剂量可以一天服用一次以上，比如一天2、3、4、5或6次，但优选每天1次或2次，这样，对于一个70kg重的包括人在内的哺乳动物，一天的总剂量为约0.1～1000mg(比如口服)或0.003～300mg(静脉注射)，即在约0.001～20mg/kg/日的范围，像0.007～3、0.007～1.4、0.007～0.14、或0.01～0.5mg/kg/日；比如0.01、0.02、0.04、0.05、0.06、0.08、0.1或0.2mg/kg/日；这样的治疗可持续数周或数月。对于1号化合物，对本发明的所有适应症，对于70kg的成人的优选剂量为0.1mg/日-10mg/日。对于优选适应症，非胰岛素依赖型糖尿病和高甘油三酯症，对于人的适应剂量为0.2～2mg/日(口服)，对于治疗心力衰竭和其它心脏疾病为0.2～10mg/日，具体对于心律不齐，比如心动过速性房颤为0.5～5mg/日(口服)或0.25～5mg(静脉注射)。

式Ia化合物可以通过任何适当的途径进行配方以利服用，优选的途径取决于需要治疗的疾病，最好以单位剂量或者病人自己可以以单剂量服用的形式服用。该组合物最好如上面所述在用于止痛时要适合于口服、直肠、局部、非胃肠道、静脉内或肌肉内给药。

适合口服的单位剂型可以是片剂和胶囊，它们含有0.05～20mg式Ia的化合物。

按照本发明的化合物或它的水合物或者它与有机溶剂的加合产物将适合与制剂重量的约0.5～约20％，优选约1～约10％，比如2～5％。

给温血动物比如鼠、狗和人，在施用式中R₁为(C_4～8)环烷基、R₃是烷基的式I化合物时，检出作为代谢产物的式中R₁′为羟基(C_4～8)环烷基、R₃为烷基的式Ia化合物。

因此，施用化合物M导致产生羟基环己基-2′-O-甲基腺苷。

在又一个方面，本发明提供一种给温血动物施用N⁶-环己基- 2′-O-甲基腺苷以产生N⁶-羟基环己基-2′-O-甲基腺苷的方法。

在另一方面，本发明提供纯净的比如高于95％纯度的N⁶-羟基环烷基-2′-O-烷基腺苷。本文所述的例子化合物符合该标准。

在再一个方面，本发明提供不含有环己基-2′-O-甲基腺苷的N⁶-羟基环己基-2′-O-烷基腺苷。

在另一方面，本发明提供一种制造2′-O-烷基腺苷的一种方法，这包括在相转移催化剂存在下用适当的硫酸烷基酯处理腺苷。

2′-O-烷基腺苷优选任何前面定义的化合物。

在再一个方面，本发明提供一种制造如前面所定义的式I化合物的方法，这包括使式VI

VI的化合物与式(R₃)₂SO₄化合物的碱性溶液在四丁基铵硫酸氢盐存在下和非极性溶剂中反应，再通过重结晶将产物提纯。

如有必要可暂时将反应性基团保护起来。

硫酸烷基酯优选是硫酸二(C_1～4)烷基酯。

相转移催化剂优选四丁基铵硫酸氢盐。

优选在如下面叙述的非极性溶剂中进行此反应。

定义一组式I的化合物，其中R₁是(C_3～8)环烷基、R₂是氢或(C_1～4)烷基，R₃是(C_1～4)烷基。

至今为止，制备式I化合物一般要经过6步，这包括制备2′，3′，5′-三乙酰肌苷；氯化和水解6-氯-9-β-D-呋喃核糖基-9H-嘌呤；用四异丙基二硅氧烷(TIPDS-CL₂)保护3′-O-位及5′-O-位；2′-O-烷基化并用硅胶色谱提纯；将3′-O-和5′-O-位解保护；和与R₁NH₂反应并重结晶，得到式I化合物。

本申请人发现，无需进行3′-O-和5′-O-二硅氧烷保护和解保护，也不用硅胶色谱就能以很好的产率和纯度制备式I化合物。本申请人发现，可以最好用辛脂的2′，3′，5′-三丙酸肌苷代替现有技术方法的原料2′，3′，5′-三乙酸肌苷，这样使产量翻番并除去有害的吡啶溶剂。

在本发明中，按照如下反应式在相转变催化剂条件下制备式I化合物：

VII

式中R₁、R₂和R₃如前面所定义

可以在四丁基铵硫酸氢盐和水不相溶有机溶剂存在下，通过式(VI)化合物的碱性水溶液与硫酸二(C_1-4)烷基酯反应制备式I化合物。用于制备碱性水溶液的碱最好是碱金属氢氧化物，如NaOH或KOH。此溶剂可以是任何与水不相容或基本不相容的、而式I的化合物在其中又是可溶的溶剂，如二氯甲烷或叔戊醇。反应最好在约-20～约50℃之间，特别是在室温下进行。反应时间并不关键，最好在约5～10小时之内进行，特别在约7～8小时内进行。通过蒸发，然后与1∶1的水和惰性溶剂(优选甲苯)的混合物一起在室温下搅拌5～7小时，再过滤和干燥来分离式I化合物粗品。用分步结晶，最好通过如下步骤来得到纯化合物：

1)用惰性溶剂如甲苯进行重结晶，将化合物粗品溶于80℃溶剂，在大约55℃加热约1hr，冷却至室温，用纯化合物引晶，并过滤；

2)重复步骤1)的重结晶操作，但在冷却至室温前在约65℃加热；以及

3)用100％乙醇重结晶，在回流下溶解，用水稀释、引晶，然后过滤和干燥。

许多式VI的化合物是已知的，可以用在比如前述的USP4,843,066和USP4,985,409等文献中叙述的方法制备。式VI化合物，最好也可以如上面所指出的，按照如下优选的反应式制备：

VII VII

IX

这里R₁和R₂如前所定义。

用丙酸酐酰化式VII的肌苷以形成在2′-O-、3′-O-和5′-O-位保护的式VIII化合物，用亚硫酰氯卤化式VIII化合物形成了式IX中间体；以及同时氨化和水解式IX化合物，从而可制备式VI的化合物。肌苷酰化反应最好在100～110℃的温度下，在甲苯、三丁胺和4-二甲氨基吡啶的混合物中进行4～5小时。通过用庚烷沉淀来分离式VIII化合物。式VIII化合物的卤化反应最好在60～70℃的温度下，在甲苯和N，N-二甲基甲酰胺的混合物中进行3～4hrs，式IX化合物的溶液可在用水及盐水洗涤后使用。最好通过加入胺R₁NH₂和在100～110℃的温度下反应15～20hr来氨化并同时水解式IX的中间体。在室温下过滤分离式VI化合物，并经重结晶提纯。

通过如下各实施例说明本发明的方法。

方法定施例1：N⁶-环己基-2′-O-甲基腺苷步骤A.2′，3′，5′-三丙酸肌苷

将271.2g肌苷、966ml三丁胺、3.30g 4-二甲氨基吡啶和600ml甲苯的混合物加热到内温为104～105℃，在35分钟内以保持内温在104～105℃的速度加入453ml丙酸酐。在此温度下再搅拌4hr后，用冰浴将此混合物冷却至5～10℃，加入1000ml庚烷。在室温(20～22℃)下搅拌得到的悬浮液30分钟，然后在比如Bucbner漏斗上过滤。用总量450ml，每次150ml(三等份的庚烷洗涤固体，并在25mmHg下于45～50℃干燥过夜(14hr)，得到425.9g白色固体状2′，3′，5′-三丙酸肌苷(m.p171～172℃；产率96.5％)。步骤B.N⁶-环己基腺苷

将270.6g 2′，3′，5′-三丙酸肌苷、240ml N.N-二甲基甲酰胺和600ml甲苯的混合物加热到65℃，并在1小时内以保持内温在62～65℃的速度加入67.84ml亚硫酰氯。在此温度下将混合物再搅拌2.5hr，然后用冰浴冷却至10℃。加入在冰浴中预冷至10～15℃的600ml冷水，加入速度使得保持温度低于20℃，然后分离出有机层，并用总量800ml，分成4等份每份200ml的10％NaCl水溶液洗涤。在2小时内，在搅拌下将含有6-氯-9-(2，3，5-三-O-丙酰基-β-呋喃核糖基)-9H-嘌呤粗品的有机层加到加热到105℃的620ml环己胺中，加入速度控制在保持内温为105℃。在此温度下将此混合物再搅拌17hr后，在大约2小时内通过充分搅拌将其降到室温(25℃)，然后用比如Buchner漏斗吸滤。用总量460ml分成4等份，每份115ml的甲苯洗涤含有N⁶-环己基腺苷和环己胺盐酸盐的固体，然后趁湿转移到装有机械搅拌的5L烧瓶中。在加入2L饱和NaHCO₃水溶液和2.5L醋酸乙酯之后，搅拌该混合物直至所有固体都溶解(大约10～15分钟)。分离有机层，用1.5L的醋酸乙酯分1L和500ml两份分别萃取水层。

合并有机层，蒸发(在40℃，100～200mbar)直至除去约3L醋酸乙酯。向残液中加入500m1庚烷，搅拌得到的混合物30分钟。用Buchner漏斗分离固体，用总量300ml的庚烷，分成3等份每份100ml进行洗涤。然后在45～50℃和30～35mbar干燥该固体大约3hr，得到148g白色固体N⁶-环己基腺苷粗品。将其转移到装有机械搅拌的1L圆底烧瓶中，加入175ml95％的乙醇。将此悬浮液搅拌15～20分钟，加入175ml叔丁基乙基醚。搅拌5分钟后，在冰浴中冷却此悬浮液并再搅拌15分钟。在Buchner漏斗上过滤此悬浮液并用总量50ml的叔丁基甲基醚分成两份每份25ml进行洗涤。

在45～50℃和30～35mbar下干燥过滤的固体14小时，得到130g白色固体N⁶-环己基腺苷。(m.p185-187℃；产率60.0％)

步骤C.N⁶-环己基-2′-O-甲基腺苷

在室温(24～25℃)搅拌94.33g N⁶环己基腺苷和720g5％的NaOH水溶液的悬浮液，直至所有固体都溶解(大约5分钟)。用加料漏斗加入850ml二氯甲烷和5.5g四丁铵硫酸氢盐，然后在5～10分钟内加入61.3g硫酸二甲酯，此时维持内温在24～25℃。再用50ml二氯甲烷洗涤加料漏斗，将洗涤液加到反应容器中。在24～25℃(内温)将此两相混合物搅拌7.5hr后，分离有机层，并在40℃和270～290mbar下蒸发。直至没有溶剂馏出为止。将残留物溶于200ml甲苯，并在45-50℃和30mmHg下蒸发，直至再也没有溶剂馏出为止。

在室温下将上述粗产物和2470ml甲苯的混合物搅拌10分钟，然后在22分钟内加入2470ml的水。在室温下再搅拌得到的悬浮液6小时，用比如Buchner漏斗吸滤收集固体产物。在用114ml甲苯和总量285ml，分成3等份，每份95ml的水洗涤固体之后，在48-50℃和25mmHg下干燥固体过夜(14hr)，得到53.0g白色固体。在搅拌下将此固体在397m1甲苯中的悬浮液加热至80℃，形成清澈溶液，在45分钟内将其冷却至56℃并用10mg纯物质引晶。在55～56℃下搅拌此混合物45分钟，然后在1小时内冷却至室温。在此温度下再搅拌1小时以后，用比如Buchner漏斗吸滤收集固体产物。用总量75ml，分为3等份每份25ml的甲苯洗涤固体，得到60g白色固体。再将此固体于159ml甲苯中的悬浮液加热至80℃，在65～66℃进行上面的引晶操作。

在1小时内冷却至室温，并在同一温度下再搅拌1hr以后，过滤固体，并用42ml，分成3等份每份14ml的甲苯洗涤，并在48～50℃及25mmHg下干燥过夜(14hr)，得到57.7g白色固体。在搅拌下将此固体和122ml100％乙醇回流加热，得到清澈的溶液，在25分钟内加入288ml预先温热至55℃的水。将此混合物冷却至55℃，用20mg纯物质引晶。在1小时内将此混合物冷却至室温，并在此温度下搅拌过夜(16hr)。用Buchner漏斗吸滤收集固体，用总量57ml，分成3等份每份19m1的100％乙醇和水混合物(1∶2.36v/v)洗涤。在室温和29mmHg下干澡此固体，得到62.2g白色固体状1.5水合产物(m.p88-91℃，产率42.5％)。

方法实施例2

按上面的操作，只是使用等当量的N⁶-环戊基腺苷，得到N⁶-环戊基-2′-O-甲基腺苷。

方法实施例3

按照方法实施例1的各步骤，只是在步骤c)中用叔戊醇代替二氯甲烷，并随后用乙醇/水初步结晶之后，产物用乙醇和水进行重结晶。得到32.1g纯度超过98％的N⁶-环己基-2′-O-甲基腺苷，产率大约30％。

本发明的方法在时间和成本上都比迄今所知的各种方法更为经济。该方法提供了在相转变条件下对N⁶-环己基腺苷进行选择性甲基化的方便的方法以及提纯2′-O-甲基衍生物的方法。避免使用昂贵的保护基团，也避免了使用色谱。

Claims

1.式1化合物在制造适于治疗疼痛用药物中作为止痛剂的应用，

I

其中R₁是氢、(C_1～4)烷基、烯丙基、甲基烯丙基；直链或支链的(C_3～7)炔基，(C_3～8)环烷基，羟基(C_4～8)环烷基，被1个或相互独立的两个原子序数为9～35的卤素、(C_1～4)烷基、(C_1～4)烷氧基或CF₃取代的苯基；或苯基(C_1～4)烷基，其中的苯环是未被取代的、或者被1个或相互独立的两个原子序数为9～35的卤素、(C_1～4)烷基、(C_1～4)烷氧基或CF₃取代的；具有至少一个羟基或至少两个苯基的(C_1～4)烷基，双环烷基如内或外双环〔2，2，1〕庚基、萘基(C_1～4)烷基、苊基(C_1～4)烷基或式A或式B的基团或

其中，Z是氢、羟基或(C_1～4)烷氧基，Q是氢或羟基，A是-CH₂-、-O-、-S-或直接相连的键，

Y是-(CH₂)_n-或直接相连的键，

n是1～3的整数，

且(A)中的虚线表示一可有或可无的键，R₂是氢、(C_1～4)烷基、氨基、(C_3～5)环烷基或原子序数为9-35的卤素，以及R₃是(C_1～4)烷基。

2.如权利要求1的应用，其中式I化合物选自6′-羟基(C_4～8)环烷基-2′-O-甲基腺苷。

3.如权利要求1的应用，其中R₁不是羟基环烷基。

4.如权利要求3的应用，其中式I化合物是6-环己基-2′-O-甲基-腺苷。

5.如前面任一权利要求的应用，用于治疗急性疼痛。

6.如前面任一权利要求的应用，用于治疗慢性神经疾病性疼痛。

7.如前面任一权利要求所定义的化合物在治疗前面任一权利要求所定义的疼痛方面的应用，或者如前面任一权利要求中所定义的疼痛治疗方法，这包括给需要进行这样治疗的对象施用在前面任一权利要求中所定义的化合物；或者含有在前面任一权利要求中所定义的化合物为止痛剂与药物载体或稀释剂的止痛组合物。

8.式Ia化合物

Ia

式中R₁表示羟基取代的(C_4～8)环烷基，R₂及R₃如权利要求1中所定义。

9.如权利要求8中的化合物，其中R₂是氢、(C_1～4)烷基或原子序数为9-35的卤素。

10.选自下面的一种化合物：

6-〔(反)-4-羟基环己基〕-2′-O-甲基腺苷

6-〔(顺)-4-羟基环己基〕-2′-O-甲基腺苷

6-〔(1S，反)-2-羟基环戊基〕-2′-O-甲基腺苷

6-〔(1R，反)-2-羟基环戊基〕-2′-O-甲基腺苷

6-〔(1S，反)-2-羟基环己基〕-2′-O-甲基腺苷

6-〔(1R，反)-2-羟基环己基〕-2′-O-甲基腺苷

6-〔(反)-4-羟基环己基〕-2′-O-乙基腺苷，以及

6-〔(1 S，反)-2-羟基环己基〕-2′-O-乙基腺苷。

11.纯度为95％的如权利要求8、9或10的化合物。

12.不含有N⁶-环烷基-2′-O-甲基腺苷的如权利要求8、9或10的化合物。

13.在权利要求8～12的任一项中所定义的式Ia化合物在制备适于治疗疼痛、防治高血压、作为冠脉舒张剂、用于抑制血小板聚集或激活白细胞、用于降低血脂浓度、对抗充血性心力衰竭、心肌梗死、突发性心脏坏死、肾机能不全，以及治疗高甘油三酯/低HDL胆固醇浓度、脂机能障碍、高游离脂肪酸和/或I型及II型糖尿病、心律不齐或预防心肌梗死的药物的应用。

14.一种药物组合物，它含有治疗有效量的如权利要求8～12中任一项所定义的式Ia化合物和药物可接受载体或稀释剂。

15.如权利要求8～12的任一项的化合物，用于治疗疼痛、高血压、冠状动脉收缩、血小板凝聚、高血脂、充血性心力衰竭、突发性心脏坏死、肾机能不全，高甘油三酯/低HDL胆固醇、脂机能障碍、高游离脂肪酸或I型或II型糖尿病、心律不齐及预防心肌梗死。或使用此化合物的方法，这包括给需要此治疗的对象施用式Ia化合物。

16.制造2′-O-烷基腺苷的方法，包括在相转移催化剂存在下用适当的硫酸烷基酯处理腺苷。

17.如权利要求16的方法，用于制造如权利要求1所定义的式I化合物。

18.如权利要求16或17所要求的方法，其中制造的化合物是N-环烷基-2′-O-甲基腺苷。

19.由权利要求16、17或18的方法制造的化合物。

20.给温血动物施用N⁶-环己基-2′-O-甲基腺苷以产生N⁶-羟基环己基-2′-O-甲基腺苷的方法。