CN114728082A - 用于使生物组织和流体成像的三亚苯衍生物 - Google Patents

Abstract

一种用于使生物组织或流体成像的组合物，其包含式(A)的化合物和生物学上可接受的稀释剂或载体，

其中X表示氮原子、氧原子、硫原子、磷原子或硒原子中的一种；R表示芳族基团和/或脂族基团；p是1至2的整数；q和s独立地是1、2、3或4的整数；Y¹、Y²和Y³独立地表示氢原子、氘原子、氟原子、氯原子、溴原子、取代或未取代的烷基基团、取代或未取代的芳基基团、聚二醇基团、氧原子、氮原子、氰基基团、硝基基团；和/或其中Y¹、Y²和Y³中的两个或更多个可以组合在一起形成稠环。

Description

用于使生物组织和流体成像的三亚苯衍生物

本发明涉及包含发光化合物的组合物以及使用所述化合物的方法。特别地，本发明涉及发光化合物用于使生物组织和流体成像的用途。

光学成像用于使包括动物和人的生物有机体内的内部组织和器官可视化。组织成像的目的可以是用于实验室研究，以在不实施手术或其他侵入性技术的情况下了解内部结构。另外，光学成像可以用于医学中以检测内部组织和器官中的疾病和其他异常。

一种类型的组织成像是荧光成像，其中使用荧光染料、标签或探针来标记细胞或分子结构。然后，通过用照明光激发荧光染料、标签或探针，使它们发射波长不同于照明光波长的荧光，从而使它们成像。然后，发射的光可以被显微镜或照相机捕获。

在一些技术中，使用与生物体中的特异性靶标结合的荧光探针。例如，免疫荧光涉及使用与对靶抗原具有特异性的抗体化学缀合的荧光分子。在其他技术中，对生物体进行遗传修饰，以使其表达用荧光标记物标记的蛋白质，所述荧光标记物的最常见实例是绿色荧光蛋白(GFP)。然而，需要标记活组织中的结构而不影响细胞生物学且不修饰生物体的基因组。还需要不相互串扰并且能被仅几个激光器激发的荧光染料的组合。

考虑到这些问题而设计出本发明。

根据本发明的第一方面，提供了一种用于使生物组织或流体成像的组合物，其包含通式(A)的发光化合物和生物学上可接受的稀释剂或载体，

(A)

其中X表示氮原子、氧原子、硫原子、磷原子或硒原子中的一种；

R表示芳族基团和/或脂族基团；

p是1至2的整数；

q和s独立地是1、2、3或4的整数；

Y¹、Y²和Y³独立地表示氢原子、氘原子、氟原子、氯原子、溴原子、取代或未取代的烷基基基团、取代或未取代的芳基基团、聚二醇基团(例如包含聚乙二醇部分的基团)、氧原子(例如羟基基团或形成烷氧基基团的烷基化氧原子)、氮原子(例如伯胺、仲胺或叔胺基团)、氰基基团、硝基基团；和/或

其中Y¹、Y²和Y³中的两个或更多个可以组合在一起形成稠环(例如稠合芳环)。

本发明人已经观察到通式(A)的化合物在灌注到离体人肝中时被肝细胞有效地吸收。令人惊奇的是，观察到与肝细胞相比，被T细胞明显更大程度地吸收。不受理论束缚，认为所述化合物在T细胞中的优先积累具有医学效用，诸如使得炎症部位能够被鉴定和/或监测。

此外，观察到所述化合物在肝细胞和T细胞中保留数小时，使得能够实现肝静脉的可视化。这在以前并没有实现，因为现有的荧光团从细胞快速泄漏到血液中。因此，本发明的组合物有利地使得能够明晰组织的结构。

因此，在一些实施方案中，所述发光化合物能够穿过细胞膜。所述细胞可以是动物细胞，诸如人细胞。

在一些实施方案中，所述发光化合物能够在细胞内保留至少1分钟、至少5分钟、至少10分钟、至少30分钟、至少1小时或至少2小时。

在一些实施方案中，所述发光化合物优先在淋巴细胞如T细胞中积累。换句话说，当发光化合物与包括T细胞的两种或更多种细胞类型的混合物接触时，所述化合物被T细胞吸收的量大于被一种或多种其他细胞吸收的量。

因此，本文所述的化合物、组合物和方法可以用于确定生物组织的结构，例如用于研究目的。本文所述的化合物、组合物和方法也可以用于评估生物组织的健康。例如，所述组合物和方法可以用于评估用于移植的离体器官的活力。可选地，所述化合物、组合物和方法可以用于检测异常或疾病。

本发明的组合物包含在生物学上可接受的稀释剂或载体中的通式(A)的发光化合物。合适的生物学上可接受的稀释剂和载体包括但不限于生理学上可接受的缓冲溶液、缓冲盐水例如磷酸盐缓冲盐水、盐水、平衡的晶体液、去离子水、血液、细胞培养基(例如极限必需培养基或CO₂非依赖性培养基)、血浆等。所述生物学上可接受的稀释剂或载体可以是生理学上或药学上可接受的。

所述一种或多种发光化合物可以溶解在稀释剂或载体中。可选地，所述发光化合物可以分散或悬浮在稀释剂或载体中，或与稀释剂或载体混合。

所述组合物还可以包含适当选择的赋形剂、填充剂、粘合剂、润湿剂、润滑剂、表面活性剂、分散剂、缓冲剂、防腐剂、佐剂、防腐剂、止痛剂、稳定剂和/或等渗剂。

所述组合物可以通过将发光化合物与生物学上可接受的稀释剂或载体混合来制备。在混合之前，可以将发光化合物溶解在溶剂如DMSO、THF或2-甲基THF中。

在一些实施方案中，所述组合物包含两种或更多种不同的发光化合物，其中至少一种具有通式(A)。所述两种或更多种不同的发光化合物可以以不同的浓度或以相同的浓度存在于所述组合物中。

所述(或每种)发光化合物可以以0.1至20μg/ml、0.5至10μg/ml或1至5μg/ml的浓度存在于所述组合物中。

例如，所述组合物可以包含通式(A)的第一发光化合物以及不同于第一发光化合物的第二发光化合物。在实施方案中，所述组合物还可以包含不同于第一发光化合物和第二发光化合物的第三发光化合物。

在实施方案中，第二发光化合物和/或第三发光化合物可以是不同于由通式(A)表示的发光化合物的化合物。换句话说，第二发光化合物和/或第三发光化合物具有不依照通式(A)的结构。例如，第二发光化合物和/或第三发光化合物可以是多环芳烃化合物，例如，选自荧光素、曙红、罗丹明或其类似物中的一种。

在替代实施方案中，第二发光化合物由通式(A)表示并且不同于第一发光化合物的结构。在一些实施方案中，第三发光化合物由通式(A)表示并且不同于第一发光化合物和第二发光化合物的结构。

有利地，使用例如由通式(A)表示的不同的第一发光化合物、第二发光化合物和/或第三发光化合物的不同组合和/或浓度提供定制的和/或不同的吸收和/或发射光谱。

方便地，所述组合物可以包含多种发光化合物，其能够吸收大致相同波长的光，但是发射不同波长的光。换句话说，化合物的λ_max是不同的。这是有利的，因为它使得能够使用单个激光器来激发化合物。

在一些实施方案中，所述组合物包含发射第一波长(即具有第一λ_max)的光的式(A)的第一发光化合物和发射高于所述第一波长的第二波长(即具有第二λ_max)的光的式(A)的第二发光化合物，其中所述第一化合物和所述第二化合物两者都能够吸收低于所述第一波长和所述第二波长两者的第三波长的光。

在一些实施方案中，第二波长(第二λ_max)比第一波长(第一λ_max)高至少5％、至少10％或至少15％。这使得能够容易地区分第一化合物和第二化合物的两种发射。

在一些实施方案中，第一化合物和第二化合物两者都能够吸收具有355nm的波长的光。在另外的实施方案中，第一化合物和第二化合物中仅有一种能够吸收具有405nm的波长的光。

具有上述特性的发光化合物对的实例是：

TpOx-Ph-pOMe(图3的化合物编号45)和TpOx-Ph-pCN(化合物编号12)；

TpOx-Ph-pOMe(化合物编号45)和TpOx-2-Nap(化合物编号3)；以及

TpOx-Ph-pNMe₂(化合物编号22)和TpOx-2-Nap(化合物编号3)。

在一些实施方案中，式(A)的发光化合物与另外分子如蛋白质、化学部分或核酸缀合。当与发光标记缀合时，此类分子然后可以用作检测特定靶标的探针。例如，所述组合物可以包含与对靶蛋白具有特异性的抗体缀合的发光化合物。然后，所述组合物可以用于检测生物组织或流体中的靶蛋白。

在一些实施方案中，所述组合物包含与第一抗体缀合的第一发光化合物和不同于所述第一发光化合物的第二发光化合物。所述第二发光化合物可以与不同于所述第一抗体的第二抗体缀合，例如第一抗体和第二抗体靶向不同的蛋白质。

在一些实施方案中，所述组合物包含已经用所述发光化合物染色的细胞。应理解，根据“染色”，发光化合物可以已经穿过细胞膜并留在细胞的细胞质内，或者发光化合物可以例如经由缀合的抗体或化学部分结合至细胞膜或细胞表面受体。

所述细胞可以包括红细胞和/或白细胞。所述白细胞可以是嗜中性粒细胞、嗜酸性粒细胞(嗜酸细胞)、嗜碱性粒细胞、淋巴细胞(例如B细胞和/或T细胞)和/或单核细胞。在一些实施方案中，所述组合物包含已经用发光化合物染色的T细胞。这种组合物可以用于监测受试者中T细胞积累的一个或多个位置。T细胞可以从打算对其施用组合物的受试者获得。

根据本发明的第二方面，提供了式I的发光化合物或本发明第一方面的组合物在获得生物组织或流体的图像的方法中的用途。

所述图像可以通过荧光成像，例如荧光显微术获得。

在一些实施方案中，所述生物组织或流体是体内的。

因此，在本发明的第三方面，提供了一种获得受试者中体内生物组织或流体的图像的方法，所述方法包括：

-使用荧光显微术获得所述受试者的图像，其中所述受试者已经施用了式(A)的发光化合物或本发明第一方面的组合物。

在一些实施方案中，所述受试者先前已经施用了所述发光化合物或所述组合物。

在一些替代实施方案中，所述方法还包括在获得所述图像之前，向所述受试者施用式(A)的发光化合物或本发明第一方面的组合物。

在一些实施方案中，所述方法用于分析所述受试者中的健康生物组织或流体。所述发光化合物或组合物可以在靠近目标部位的位置施用至受试者的身体。例如，在其中所述方法用于获得受试者肝脏的图像的实施方案中，所述方法可以包括将所述化合物或组合物施用到接近肝脏的血管。

在一些替代实施方案中，所述生物组织或流体是体外或离体的。

在本发明的第四方面，提供了一种获得先前从受试者获得的生物组织或流体的图像的方法，所述方法包括：

-向所述生物组织或流体施用式(A)的发光化合物或本发明第一方面的组合物或使所述生物组织或流体与式(A)的发光化合物或本发明第一方面的组合物接触；以及

-使用荧光显微术获得所述生物组织或流体的图像。

可以就在获得所述图像之前施用所述化合物或组合物。可选地，在施用所述化合物或组合物的步骤和获得所述图像的步骤之间可以存在时间延迟。例如，所述图像可以在施用所述化合物或组合物后至少5分钟、至少10分钟、至少30分钟或至少1小时获得。这种时间延迟可以有益于使得所述一种或多种发光化合物能够被细胞吸收。

使用荧光显微术获得图像可以包括使用光源照射受试者或组织或流体，以及记录电磁波谱的UV、可见和/或近红外范围内的发射光谱。

所述光源可以发射适合激发所述一种或多种发光化合物的波长。所述波长可以在100nm至700nm、200nm至600nm或300nm至500nm的范围内。

所述发射光谱可以在100nm至1000nm、100nm至700nm、200nm至600nm或300nm至500nm的范围内记录。

所述一种或多种发光化合物可以发射可见或近红外光谱中的光，即380nm和750nm之间的光，和/或可以展现出在8000cm^-1至25,000cm^-1之间，例如在15,000cm^-1至25,000cm^-1之间的斯托克斯位移。

在一些实施方案中，所述一种或多种发光化合物可以展现出5.0x10^-13S cm^-1和1.5x10^-11S cm^-1之间，例如在6x10^-12S cm^-1和1.5x10^-11S cm^-1之间的导电率值。

当在350nm下照射时，所述一种或多种发光化合物可以展现出在1.5x10^-10S cm^-1和1x10^-3S cm^-1之间，例如在1x10^-8S cm^-1和1x10^-3cm^-1之间的光电导率。

在一些实施方案中，所述荧光显微术是多光子显微术。如本领域已知的，在多光子显微术(也称为双光子显微术)中，对于每次激发，吸收两个光子的光。此技术不同于激发波长短于发射波长的传统荧光显微术。双光子激发显微术通常使用近红外激发光。在一些实施方案中，多光子显微术通过使用发射在500nm至1000nm、600nm至900nm或700nm至800nm范围内的波长的光源照射受试者、组织或流体来进行。多光子显微术的使用是有利的，因为它使用较低能量的光，因此对生物样品的损害较小。多光子显微术也不太可能光漂白染料，并且进一步穿透组织。

所述生物组织可以是任何类型的组织，诸如结缔组织、肌肉组织(包括腱、韧带和肌肉)、神经组织、上皮组织、脉管系统组织(包括动脉、静脉和毛细血管)、淋巴组织(包括淋巴管和淋巴结)、内分泌系统的组织、腺体或器官。

所述器官可以是舌、食管、胃、小肠(十二指肠、空肠或回肠)、结肠、肝、胆囊、胰腺、心脏、肺、膈、肾、膀胱、卵巢、子宫、脑、眼、皮肤或脾。

所述腺体可以是胸腺、垂体、松果体、甲状旁腺、甲状腺、唾液腺或肾上腺。

在一些实施方案中，所述流体是血液。

所述一种或多种化合物或组合物可以经局部、口服或胃肠外施用，例如通过注射或滴注施用。对于口服施用，所述一种或多种化合物或组合物可以配制成胶囊、食品、饮料。胶囊可以通过用所述一种或多种化合物或组合物单独或与一种或多种辅助成分混合填充胶囊壳，然后以通常的方式密封它们来制备。用于口服施用的制剂可以呈在诸如水性或非水性液体的载体流体中的溶液剂、混悬剂或分散体，或乳剂的形式。

在一些实施方案中，所述化合物或组合物通过例如经静脉内、肌内、皮下或动脉内注射施用。

适于局部施用的制剂可以例如作为凝胶剂、溶液剂、混悬剂或分散体(例如以滴剂或喷雾剂的形式)、霜剂或软膏剂提供。

在一些实施方案中，所述一种或多种化合物或组合物通过灌注施用。“灌注”是指流体通过循环系统(例如血流)或淋巴系统到达器官或组织。例如，在使生物组织如离体器官成像的方法中，可以将所述化合物灌注到在生物学上可接受的载体流体中的器官中，例如通过将包含所述化合物的载体流体注射到与所述器官相关的血管中。

在一些实施方案中，所述方法包括向所述受试者、所述生物组织或流体施用两种或更多种不同的发光化合物。所述化合物可以同时或依序施用。在一些实施方案中，所述化合物通过不同的施用模式施用。

在另一方面，本发明提供了一种用于使生物组织或流体成像的试剂盒，所述试剂盒包括：

-式(A)的发光化合物；以及

-使用说明书。

所述试剂盒还可以包含如上所述的生物学上可接受的稀释剂或载体。可选地或另外地，所述试剂盒可以包含一种或多种另外组分，诸如赋形剂、填充剂、粘合剂、润湿剂、润滑剂、表面活性剂、分散剂、缓冲剂、防腐剂、佐剂、防腐剂、止痛剂和/或等渗剂。

所述试剂盒可以包含两种或更多种不同的发光化合物，其中至少一种具有通式(A)。

在所述试剂盒中，所述一种或多种发光化合物的储存状态不受限制。例如，所述一种或多种化合物可以以液体(例如溶液、悬浮液或分散体)或固体(例如粉末、颗粒或冻干)形式储存。技术人员可以根据所述一种或多种化合物的稳定性和预期用途来选择储存状态。

在本发明的另一方面，提供了一种式(A)的发光化合物或如权利要求1所述的组合物，其用于诊断受试者的疾病或疾患的方法中。

所述疾病或疾患可以是但不限于：癌症(包括胃肠道癌症、生殖器官癌症(例如子宫癌、卵巢癌和宫颈癌)、肝癌、肾癌、乳腺癌、肺癌、头癌、口腔癌、颈癌、脑癌和血癌(例如白血病、多发性骨髓瘤)、炎症、水肿、心血管病症(诸如动脉粥样硬化)、局部缺血、自身免疫性疾病(例如类风湿性关节炎、糖尿病、溃疡性结肠炎或克罗恩病)、感染(例如细菌、病毒、真菌或寄生虫感染)、皮肤病(包括皮肤癌)、眼病(例如黄斑变性、糖尿病性视网膜病)、神经病症(例如阿尔茨海默病、中风)或损伤。

所述诊断方法可以包括向所述受试者施用式(A)的发光化合物或本发明第一方面的组合物；以及使用荧光显微术获得所述受试者的图像。

可选地，所述诊断方法可以包括将所述式(A)的发光化合物或本发明第一方面的组合物施用到先前从所述受试者获得的生物组织或流体；以及使用荧光显微术获得所述生物组织或流体的图像。

在一些实施方案中，所述诊断方法还包括将所述受试者、生物组织或流体的图像与参考图像进行比较。所述参考图像可以已经从健康受试者获得，或者它可以先前从正被诊断的受试者获得。

在本发明的又另一个方面，提供了一种用于确定受试者接受的治疗或疗法的有效性的方法。

所述受试者可以正在接受治疗或疗法，或者他(它)们可以已经完成治疗或疗法。

用于确定治疗或疗法的有效性的方法可以包括使用荧光显微术获得受试者的图像，其中所述受试者已经施用了式(A)的发光化合物或本发明第一方面的组合物。

在一些实施方案中，所述受试者先前施用了所述发光化合物或所述组合物。在一些替代实施方案中，所述方法还包括在获得所述图像之前，向所述受试者施用式(A)的发光化合物或本发明第一方面的组合物。

可选地，所述方法可以包括使用荧光显微术获得从所述受试者获得的生物组织或流体的图像。所述方法还可以包括向所述生物组织或流体施用式(A)的发光化合物或本发明第一方面的组合物或使所述生物组织或流体与式(A)的发光化合物或本发明第一方面的组合物接触。

所述方法还可以包括将获得的图像与参考图像进行比较。所述参考图像可以在治疗或疗法开始之前或在治疗或疗法期间的较早期从受试者获得。

因此，本发明提供了一种监测疾病或治疗的进展的方法。

所述受试者可以是动物。所述动物可以是小鼠、大鼠、豚鼠、兔、狗、猫、绵羊、山羊、猪、牛、马、灵长类动物或人。在一些实施方案中，所述受试者是人。

在实施方案中，所述一种或多种发光化合物(A)可以由以下通式表示：

其中X表示氮原子、氧原子、硫原子、磷原子或硒原子中的一种；

R独立地表示芳族基团和/或脂族基团；

Y⁴、Y⁵、Y⁶、Y⁷、Y⁸、Y⁹、Y¹⁰、Y¹¹、Y¹²、Y¹³独立地表示氢原子、氘原子、氟原子、氯原子、溴原子、取代或未取代的烷基基团、取代或未取代的芳基基团、聚二醇基团(例如包含聚乙二醇部分的基团)、氧原子(例如羟基基团或形成烷氧基基团的烷基化氧原子)、氮原子(例如伯胺、仲胺或叔胺基团)、氰基基团、硝基基团；和/或

其中Y⁴、Y⁵、Y⁶、Y⁷、Y⁸、Y⁹、Y¹⁰、Y¹¹、Y¹²、Y¹³中的两个或更多个组合在一起形成稠环(例如稠合芳环)。

在实施方案中，所述一种或多种发光化合物可以是三亚苯衍生物。在替代实施方案中，所述一种或多种发光化合物可以包含含有六个6元环的稠合多环芳烃。

在实施方案中，Y⁸表示氧原子，并且Y⁹表示氮原子，Y⁸和Y⁹键合形成噁唑部分，所述噁唑部分包含选自芳族基团和/或脂族基团的R基团。

在实施方案中，Y⁵和Y⁶表示组合在一起形成稠环(例如稠合芳环)的碳原子。

在实施方案中，所述一种或多种发光化合物可以由以下通式表示：

其中X表示氮原子、氧原子、硫原子、磷原子或硒原子中的一种；

R独立地表示芳族基团和/或脂族基团；

q独立地是1至3的整数；

s独立地是1至4的整数；

t独立地是1至4的整数；

Y²、Y³和Y¹⁴以及J独立地表示氢原子、氘原子、氟原子、氯原子、溴原子、取代或未取代的烷基基团、取代或未取代的芳基基团、聚二醇基团(例如包含聚乙二醇部分的基团)、氧原子(例如羟基基团或形成烷氧基基团的烷基化氧原子)、氮原子(例如伯胺、仲胺或叔胺基团)、氰基基团、硝基基团；和/或

其中Y¹、Y²和Y¹⁴中的两个或更多个可以组合在一起形成稠环(例如稠合芳环)。

在实施方案中，所述一种或多种发光化合物可以由以下通式表示：

其中X表示氮原子、氧原子、硫原子、磷原子或硒原子中的一种；

R独立地表示芳族基团和/或脂族基团；

Y¹⁵、Y¹⁶、Y¹⁷、Y¹⁸、Y¹⁹、Y²⁰、Y²¹、Y²²、Y²³、Y²⁴、Y²⁵、Y²⁶独立地表示氢原子、氘原子、氟原子、氯原子、溴原子、取代或未取代的烷基基团、取代或未取代的芳基基团、聚二醇基团(例如包含聚乙二醇部分的基团)、氧原子(例如羟基基团或形成烷氧基基团的烷基化氧原子)、氮原子(例如伯胺、仲胺或叔胺基团)、氰基基团、硝基基团；和/或

其中Y¹⁵、Y¹⁶、Y¹⁷、Y¹⁸、Y¹⁹、Y²⁰、Y²¹、Y²²、Y²³、Y²⁴、Y²⁵、Y²⁶中的两个或更多个组合在一起形成稠环(例如稠合芳环)。

在实施方案中，Y²¹表示氧原子，并且Y²²表示氮原子，Y²¹和Y²²键合形成噁唑部分，所述噁唑部分包含选自芳族基团和/或脂族基团的R基团。

在实施方案中，所述一种或多种发光化合物由以下通式表示：

其中X表示氮原子、氧原子、硫原子、磷原子或硒原子中的一种；

R独立地表示芳族基团和/或脂族基团；

A独立地表示氢原子、芳基基团、包含1至20个碳(例如1至15个碳，或1至10个碳，或10、9、8、7、6、5、4、3、2或1个碳)的烷基基团(例如烷基醚)；

J¹、J²、J³、J⁴、J⁵独立地表示氢原子、氘原子、氟原子、氯原子、溴原子、取代或未取代的烷基基团、取代或未取代的芳基基团、聚二醇基团(例如包含聚乙二醇部分的基团)、氧原子(例如羟基基团或形成烷氧基基团的烷基化氧原子)、氮原子(例如伯氨基、仲氨基或叔氨基基团)、氰基基团、硝基基团；和/或

其中J¹和J²可以组合在一起形成稠环(例如稠合芳环)。

在实施方案中，A独立地包含烷基例如直链烷基或由其组成。在实施方案中，A独立地选自CH₃、C₂H₅、C₃H₇、C₄H₉、C₅H11、C₆H₁₃、C₇H₁₅、OC₈H₁₇、C₉H₁₉或C₁₀H₂₁基团中的一种或多种。在实施方案中，A可以独立地表示C₅H₁₁和/或C₄H₉。在实施方案中，A可以独立地表示C₅H₁₁和/或C₄H₉。

在实施方案中，A可以独立地表示聚乙二醇(PEG)基团(例如C₂H₄OC₂H₄OC₂H₄OCH₃)。

在实施方案中，A可以独立地表示包含反应性官能团FG的烷基，例如，A可以独立地表示包含羧酸部分、酯、叠氮化物、胺、马来酰亚胺和/或硫醇部分的烷基基团或聚醚基团。在实施方案中，A独立地表示(CH₂CH₂O)₂CH₂CH₂FG部分，其中FG选自羧酸部分、酯、叠氮化物、胺、马来酰亚胺和/或硫醇部分中的一种。

在实施方案中，X表示氧原子。在实施方案中，X表示硫原子。

在实施方案中，J¹、J²、J³、J⁴、J⁵独立地表示氢原子或氘原子。

在实施方案中，R表示脂族基团或部分。在实施方案中，R表示芳族基团或部分。

在实施方案中，所述三亚苯衍生物可以不是如下化合物，其中A是C₅H₁₁，J是H且R是C₄H₉。

在实施方案中，所述一种或多种发光化合物由以下通式表示：

其中X表示氮原子、氧原子、硫原子、磷原子或硒原子中的一种；

R¹和R²独立地表示芳族基团和/或脂族基团；

p和q独立地是1至2的整数；

s是1至4的整数；

Y¹、Y²和Y³独立地表示氢原子、氘原子、氟原子、氯原子、溴原子、取代或未取代的烷基基团、取代或未取代的芳基基团、聚二醇基团(例如包含聚乙二醇部分的基团)、氧原子(例如羟基基团或形成烷氧基基团的烷基化氧原子)、氮原子(例如伯胺、仲胺或叔胺基团)、氰基基团、硝基基团；和/或

其中Y¹、Y²和Y³中的两个或更多个可以组合在一起形成稠环(例如稠合芳环)。

在实施方案中，所述一种或多种发光化合物由以下通式表示：

其中X表示氮原子、氧原子、硫原子、磷原子或硒原子中的一种；

R¹和R²独立地表示芳族基团或脂族基团；

A独立地表示氢原子、芳基基团、包含1至20个碳(例如1至15个碳，或1至10个碳，或10、9、8、7、6、5、4、3、2或1个碳)的烷基基团(例如烷基醚)；

J¹、J²、J³、J⁴独立地表示氢原子、氘原子、氟原子、氯原子、溴原子、取代或未取代的烷基基团、取代或未取代的芳基基团、聚二醇基团(例如包含聚乙二醇部分的基团)、氧原子(例如羟基基团或形成烷氧基基团的烷基化氧原子)、氮原子(例如伯胺、仲胺或叔胺基团)、氰基基团、硝基基团；和/或

其中J¹和J²可以组合在一起形成稠环(例如稠合芳环)。

在所有实施方案中，术语“稠环”旨在定义键合在一起形成环(例如芳环和/或杂环)的基团，所述环形成发光化合物的核的一部分，即，使三亚苯核膨胀。

在实施方案中，A可以独立地表示C₅H₁₁和/或C₄H₉。在实施方案中，A可以独立地表示聚乙二醇(PEG)基团(例如C₂H₄OC₂H₄OC₂H₄OCH₃)。在实施方案中，A可以独立地表示包含反应性官能团FG的烷基基团，例如，A可以独立地表示包含羧酸部分、酯、叠氮化物、胺、马来酰亚胺和/或硫醇部分的烷基基团。在实施方案中，A独立地表示-(CH₂CH₂O)₂CH₂CH₂FG或(CH₂CH₂O)₂CH₂FG部分，其中FG选自羧酸部分、酯、叠氮化物、胺、马来酰亚胺和/或硫醇部分中的一种。

在实施方案中，所述一种或多种发光化合物由以下通式表示：

其中X表示氮原子、氧原子、硫原子、磷原子或硒原子中的一种；

R¹、R²、R³独立地表示芳族基团或脂族基团；

p、q和s各自独立地是1至2的整数；

Y¹、Y²和Y³独立地表示氢原子、氘原子、氟原子、氯原子、溴原子、取代或未取代的烷基基团、取代或未取代的芳基基团、聚二醇基团(例如包含聚乙二醇部分的基团)、氧原子(例如羟基基团或形成烷氧基基团的烷基化氧原子)、氮原子(例如伯胺、仲胺或叔胺基团)、氰基基团、硝基基团；和/或

其中Y¹、Y²和Y³中的两个或更多个可以组合在一起形成稠环(例如稠合芳环)。

在实施方案中，所述一种或多种发光化合物由以下通式表示：

其中X表示氮原子、氧原子、硫原子、磷原子或硒原子中的一种；

R¹、R²、R³独立地表示芳族基团和/或脂族基团；

A独立地表示氢原子、芳基基团、包含1至20个碳(例如1至15个碳，或1至10个碳，或10、9、8、7、6、5、4、3、2或1个碳)的烷基基团(例如烷基醚)；

J独立地表示氢原子、氘原子、氟原子、氯原子、溴原子、取代或未取代的烷基基团、取代或未取代的芳基基团、聚二醇基团(例如包含聚乙二醇部分的基团)、氧原子(例如羟基基团或形成烷氧基基团的烷基化氧原子)、氮原子(例如伯氨基、仲氨基或叔氨基)、氰基基团、硝基基团；和/或

其中J可以组合在一起形成稠环(例如稠合芳环)。

在实施方案中，X表示氧原子。在实施方案中，X表示硫原子。

在实施方案中，A独立地包含烷基基团例如直链烷基基团或由烷基基团例如直链烷基基团组成。在实施方案中，A独立地选自CH₃、C₂H₅、C₃H₇、C₄H₉、C₅H_11、C₆H₁₃、C₇H₁₅、OC₈H₁₇、C₉H₁₉或C₁₀H₂₁基团中的一种或多种。

在实施方案中，J、J¹、J²、J³、J⁴、J⁵独立地表示氢原子。

在实施方案中，J、J¹、J²、J³、J⁴、J⁵独立地表示氘原子。

在实施方案中，J、J¹、J²、J³、J⁴、J⁵独立地表示杂原子(例如氮原子、氧原子、卤素，例如F、Cl、Br、I)。

在实施方案中，A包含其他官能团，例如，A还可以包含氟原子、氯原子、氰基基团、硝基基团、二醇、烷氧基、硫代烷氧基、聚乙二醇、氨基、乙酸酯、羧酸、酰胺、硫代酰胺、硫酯、偶氮和/或甲硅烷基基团。在实施方案中，A包含能够与第二分子例如生物分子或小分子例如药物分子形成共价键的官能团。所述官能团可以选自例如羧酸、酯、叠氮化物、胺、马来酰亚胺、硫醇、异硫氰酸酯、醛和/或脂族醇。在实施方案中，所述官能团可以位于一个或多个A的末端。

在实施方案中，J包含或表示芳基基团，例如酚基基团。另外地或可选地，J包含卤素原子，例如氟、氯、溴或碘。

在实施方案中，R、R¹、R²和/或R³可以是烷基基团，例如直链或支链烷基链。在实施方案中，R、R¹、R²、R³中的至少一个可以是甲基、乙基、丙基、丁基基团。

在R、R¹、R²和/或R³是芳族基团的实施方案中，所述芳族基团可以是芳族烃基和/或芳族杂环基团中的一种或组合。

在R、R¹、R²和/或R³是芳族烃基的实施方案中，所述芳族烃基可以包含苯环和/或取代的苯环中的一种或组合。在所述苯环上可以存在一个、两个、三个、四个或五个另外的取代基。所述取代基直接键合至所述苯环，并且可以是以下基团中的一种或组合：氟、氯、溴、碘、羟基基团、胺基、硝基基团、烷氧基基团、羧酸、酰胺、氰基基团、三氟甲基、酯、烯烃、炔烃、叠氮化物、偶氮、异氰酸酯、酮、醛、由烃链或烃环组成的烷基基团、由其他杂原子如氟、氯、溴、碘、氧、氮和/或硫组成的烷基基团。所述烷基基团可以包含例如羟基基团、胺基、硝基基团、醚基、羧酸、酰胺、氰基基团、三氟甲基、酯、烯烃、炔烃、叠氮化物、偶氮、异氰酸酯、酮、醛。所述取代基可以是另一芳族基团，例如，R可以包含被另一苯环取代的苯基。在实施方案中，R基团可以是被第二苯环取代的苯环，所述第二苯环又被第三苯环取代。在实施方案中，R、R¹、R²或R³可以表示对氟苯基基团、间氟苯基基团、邻氟苯基基团、噻吩基、氰基苯基部分(例如对氰基苯基部分)、三氟甲基苯基部分(例如对三氟甲基苯基部分)、碘苯基部分(例如邻碘苯基部分)、氯苯基部分(例如邻氯苯基部分)、溴苯基部分(例如邻溴苯基部分)、氨基苯基部分(例如单取代或二取代或三取代的氨基苯基部分)、硝基苯基部分(例如对硝基苯基部分)、苯酚部分。

在R、R¹、R²和/或R³是芳族基团的实施方案中，所述芳族基团可以是多环芳烃，例如萘、蒽、菲、并四苯、苣、三亚苯、芘、并五苯、苯并[a]芘、碗烯、苯并[ghi]苝、晕苯、卵苯、富勒烯和/或苯并[c]芴。R基团可以通过所述多环芳烃的任何异构体例如1-萘、2-萘、2-蒽、9-蒽键合至三亚苯衍生物。多环芳族烃基可以被其他部分如芳基基团、烷基基团、杂原子和/或其他吸电子或给电子基团取代。

在R、R¹、R²或R³是芳族杂环基的实施方案中，所述杂环基可以是三元环、四元环、五元环、六元环、七元环、八元环、九元环、十元环或稠环。在实施方案中，所述杂环基团可以是呋喃、苯并呋喃、异苯并呋喃、吡咯、吲哚、异吲哚、噻吩、苯并噻吩、苯并[c]噻吩、咪唑、苯并咪唑、嘌呤、吡唑、吲唑、噁唑、苯并噁唑、异噁唑、苯并异噁唑、噻唑、苯并噻唑、吡啶、喹啉、异喹啉、吡嗪、喹喔啉、吖啶、嘧啶、喹唑啉、哒嗪、噌啉、酞嗪、1,2,3-三嗪、1,2,4-三嗪、1,3,5-三嗪、吡啶或噻吩。

在R、R¹、R²或R³是脂族基团的实施方案中，所述脂族基团可以是以下基团中的一种或组合：正烷基链、支链烷基链、包含不饱和部分的烷基链、包含杂原子例如氟、氯、溴、碘、氧、硫、氮的烷基链。所述烷基链可以包含不饱和部分(包括烯烃)或芳族部分。所述烷基链可以包含用于多环芳烃(例如三亚苯)衍生物进一步衍生化的官能团。例如，官能团可以是叠氮化物、羰基基团、醇、卤素、烯烃或硫代乙酸酯中的一种或多种。

在实施方案中，R、R¹、R²或R³包含冠醚。

所述发光化合物可以是图3中所示的结构中的任一种。

在一些实施方案中，所述发光化合物是化合物(2)(TpOx-Ph)：

在一些实施方案中，所述发光化合物是化合物(3)(TpOx-2-Nap)：

在本申请的范围内，明确的意图是在前面的段落中、在权利要求中和/或在下面的描述和附图中阐述的各个方面、实施方案、实施例和替代方案，且特别地，其单独特点可以被独立地或以任何组合来采用。也就是说，所有实施方案和/或任何实施方案的特点都可以任何方式和/或组合来组合，除非此类特点不相容。为了避免疑惑，术语“可以”、“和/或”、“例如(e.g.)”和/或“例如(for example)”以及如本文所用的任何类似术语应当被解释为非限制性的，从而不需要存在任何如此描述的特点。实际上，在不背离本发明的范围的情况下，可以明确地设想任选的特点的任何组合，而无论这些特征是否被明确地要求保护。本申请人保留改变任何原始提交的权利要求或提交任何新权利要求的权利，包括修改任何原始提交的权利要求以从属于和/或并入任何其他权利要求的任何特点(尽管没有以这种方式提出原始权利要求)的权利。

现在将通过举例并参考附图来描述本发明的实施方案，其中：

图1是灌注了包含荧光团TpOx-2-Nap的组合物的人肝脏的离体多光子显微图像；

图2是灌注了包含荧光团TpOx-Ph的组合物的人肝脏的离体多光子显微图像；

图3是列出可以用于本发明的实施方案中的发光化合物的化学结构的表；以及

图4A和图4B显示用于合成图3的发光化合物的前体化合物的结构。

用于本发明的化合物根据以下方案合成。所有化合物名称都使用ChemDraw(RTM)软件产生。

合成方法

合成化合物1的方法

使用以下方法由前体1合成化合物1。

前体1根据N.Boden等人，J.Mater.Chem.,1995,5,2275中所述的方法制造。

将前体1(100mg；0.13mmol)在邻二甲苯(8mL)中的溶液添加到烧瓶中。然后将其加热并在175℃下保持16小时，得到化合物1(51％产率)。

在替代方案中，使用以下方法合成化合物1。在N₂气氛下，将前体1(100mg；0.13mmol)在无水PhMe(8mL)中的溶液添加到含有辛酸铑二聚体(8mg；0.01mmol)的烧瓶中。然后将其加热并保持回流20小时。将反应物冷却至室温，然后真空蒸发至干，然后将固体经由快速柱色谱法(二氧化硅；95％正己烷:5％乙酸乙酯)纯化，得到为白色固体的化合物1(96mg，99％)。

化合物1的名称是8-丁基-2,3,6,11,12-五(戊氧基)三亚苯并[1,2-d]噁唑。

化合物1具有以下表征数据：¹ΗΝΜR(300ΜΗz,CDCl₃)δ_Η:10.01(1H,s),7.94(1H,s),7.90(1H,s),7.88(1H,s),7.85(1H,s),4.42(2H,t,J 6.7Hz),4.37(2H,t,J 6.7Hz)4.29–4.23(6H,m),3.09(2H,t,J 7.5Hz),2.05–1.92(10H,m),1.62–1.43(24H,m),1.06–0.96(18H,m)ppm。¹³C NMR(100MHz,CDCl₃)δ_C:165.6,149.5,149.1,148.7,148.3,142.9,140.1,139.8,124.6,123.9,123.5,123.3,116.3,111.0,108.3,106.9,106.8,102.6,69.9,69.6,69.5,68.8,29.2,29.0,28.8,28.4,28.3,22.6,22.4,14.2,13.9ppm。ES+MS m/z:756.5([M⁺H]⁺15％),778.5([M⁺Na]⁺100％)。IRλ^-1(纯):3112w(C-H),2953m(C-H),1617w(C＝N),1517w(苯环),1259s(C-O),1177s(C-O),1159s(C-O)cm-1。元素分析实测值：C,76.09；H,9.17；N,1.95％。C₄₈H₆₉NO₆需要C,76.25；H,9.20；N,1.85％。

合成化合物2的方法

使用以下方法由前体2合成化合物2。

前体2根据N.Boden等人，J.Mater.Chem.,1995,5,2275中所述的方法制造。

将苯甲酸(160mg；1.31mmol)、二乙酸钯(0.005mmol)和二乙酸碘苯(0.16mmol)在PhMe(5mL)中的浆液在N₂下在70℃下加热20分钟。添加在PhMe(2mL)中的前体2(100mg，0.13mmol)，并且将反应物加热并保持回流72小时。将混合物冷却至室温并用CH₂Cl₂(20mL)稀释。用1M NaOH(2x20mL)洗涤混合物并且真空干燥有机相。将粗黑色固体经由快速柱色谱法(40％CH₂Cl₂:60％正己烷:)纯化，得到为白色固体的化合物2(35mg；34％)。

化合物2的名称是2,3,6,11,12-五(戊氧基)-8-苯基三亚苯并[1,2-d]噁唑。

化合物2具有以下表征数据：¹ΗΝΜR(300ΜΗz,CDCl₃)δ_Η:10.13(1H,s),8.40–8.37(2H,m),7.92(1H,s),7.88(1H,s),7.87(1H,s),7.77(1H,s),7.57-7.55(1H,m),4.48–4.43(4H,m),4.30–4.23(6H,m),2.12–1.92(10H,m),1.69–1.54(12H,m),1.53–1.45(12H,m),1.04–0.96(18H,m)ppm。¹³C NMR(100MHz,CDCl₃)δ_C:161.4,149.5,149.0,148.7,148.3,142.9,140.5,140.2,131.2,128.9,127.5,127.1,124.7,123.8,123.4,123.3,116.4,110.9,108.2,106.8,106.6,103.8,69.8,69.5,68.9,29.2,29.0,28.4,28.3,22.6,22.6,14.1ppm。ES+MS m/z:775.5([M]⁺22％),776.5([M+H]⁺37％),798.5([M+Na]+100％)。元素分析实测值：C,77.46；H,8.44；N,1.75％。C₅₀H₆₅NO₆需要C,77.38；H,8.44；N,1.80％。

合成化合物3的方法

化合物3使用以下方法合成。将2-萘羧酸(225mg，1.31mmol)、二乙酸钯(0.005mmol)和二乙酸碘苯(0.157mmol)在PhMe(5mL)中的溶液在N₂下在70℃下加热20分钟。添加前体2(100mg；0.131mmol)在PhMe(2mL)中的溶液，并加热回流48-72小时，同时搅拌。将溶液冷却至室温并用CH₂Cl₂(20mL)稀释。将有机相用NaOH水溶液(1M；2×20mL)洗涤，分离，并且真空干燥有机相。将粗黑色固体通过快速柱色谱法(二氧化硅；40％CH₂Cl₂:60％正己烷)纯化，得到为黄色固体的化合物3(35mg；32％)。

化合物3的名称是8-(萘-2-基)-2,3,6,11,12-五(戊氧基)三亚苯并[1,2-d]噁唑。

化合物3具有以下表征数据：¹ΗΝΜR(300ΜΗz,CDCl₃)δ_Η:10.22(1H,s),8.89(1H,s),8.49(1H,dd,J 8.6,1.7Hz),8.05–7.99(2H,m),7.96-7.91(5H,m),7.62–7.59(2H,m),4.54(2H,t,J 6.8Hz),4.51(2H,t,J 6.8Hz),4.32–4.25(6H,m),2.17–1.93(10H,m),1.76–1.42(20H,m),1.06–0.97(15H,m)ppm。¹³C NMR(100MHz,CDCl₃)δ_C:161.7,149.8,149.3,149.0,148.6,143.2,140.9,140.6,135.0,133.4,129.3,128.9,128.3,128.0,127.9,127.4,127.2,125.0,125.0,124.4,124.2,123.7,123.6,116.7,111.2,108.5,107.1,107.0,103.9,70.2,70.1,69.8,69.2,29.6,29.5,28.9,28.8,28.7,23.1,23.0,14.6,14.5ppm。MALDI+m/z:825.5([M]⁺100％)。IRλ-1(纯)：元素分析实测值：C,78.95；H,8.02；N,1.83％。C₅₄H₆₇NO₆需要C,78.51；H,8.17；N,1.70％。

合成化合物4的方法

化合物4使用以下方法合成。将1-萘羧酸(225mg，1.31mmol)、二乙酸钯(0.005mmol)和二乙酸碘苯(0.157mmol)在PhMe(5mL)中的溶液在N₂下在70℃下加热20分钟。添加前体2(100mg；0.131mmol)在PhMe(2mL)中的溶液，并加热回流48-72小时，同时搅拌。将溶液冷却至室温并用CH₂Cl₂(20mL)稀释。将有机相用NaOH水溶液(1M；2×20mL)洗涤，分离，并且真空干燥有机相。将粗黑色固体通过快速柱色谱法(二氧化硅；40％CH₂Cl₂:60％正己烷)纯化，得到为黄色固体的化合物4(24mg，22％)。

化合物4的名称是8-(萘-1-基)-2,3,6,11,12-五(戊氧基)三亚苯并[1,2-d]噁唑。

化合物4具有以下表征数据：¹ΗΝΜR(300ΜΗz,CDCl₃)δ_Η:10.15(1H,s),9.82(1H,d,J 8.3Hz),8.59(1H,dd,J 7.3,1.2Hz),8.08(1H,d,J8.3Hz),8.01-7.98(3H,m),7.94(2H,m),7.71-7.61(3H,m),4.54-4.45(4H,m),4.32-4.26(6H,m),2.10-1.94(10H,m),1.70-1.35(20H,m),1.04–0.87(15H,m)ppm。¹³C NMR(100MHz,CDCl₃)δ_C:161.3,149.9,149.6,149.1,148.8,143.2,141.0,139.9,134.5,132.4,131.0,129.6,129.2,127.8,127.5,126.9,126.7,125.5,125.0,124.2,124.1,123.8,117.0,111.0,108.6,107.3,107.2,104.4,70.2,69.9,69.1,29.6,29.5,29.0,28.8,28.7,23.0,14.5ppm。MALDI+m/z:826.7([M+H]⁺100％)。元素分析实测值：C,78.49；H,8.23；N,1.73％。C₅₄H₆₇NO₆需要C,78.51；H,8.17；N,1.70％。

合成化合物5的方法

化合物5使用以下方法合成。将2-蒽羧酸(290mg，1.31mmol)、二乙酸钯(0.005mmol)和二乙酸碘苯(0.157mmol)在PhMe(5mL)中的溶液在N₂下在70℃下加热20分钟。添加前体2(100mg；0.131mmol)在PhMe(2mL)中的溶液，并加热回流48-72小时，同时搅拌。将溶液冷却至室温并用CH₂Cl₂(20mL)稀释。将有机相用NaOH水溶液(1M；2×20mL)洗涤，分离，并且真空干燥有机相。将粗黑色固体通过快速柱色谱法(二氧化硅；40％CH₂Cl₂:60％正己烷)纯化，得到为黄色固体的化合物5(22mg，20％)。

化合物5的名称是8-(蒽-2-基)-2,3,6,11,12-五(戊氧基)三亚苯并[1,2-d]噁唑。

化合物5具有以下表征数据：¹ΗΝΜR(300ΜΗz,CDCl₃)δ_Η:10.20(1H,s),9.00(1H,s),8.58(1H,s),8.47(1H,s),8.39(1H,dd,J 8.9,1.6Hz),8.13-8.10(2H,m),8.07-8.02(2H,m),7.93(1H,s),7.90-7.89(3H,m),4.57-4.47(4H,m),4.31-4.24(6H,m),2.19-1.96(10H,m),1.76 1.44(20H,m),1.08–0.97(15H,m)ppm。¹³C NMR(100MHz,CDCl₃)δ_C:161.8,149.8,149.4,149.0,148.6,143.2,141.0,140.6,133.1,132.6,132.3,131.2,129.2,128.7 128.6,128.2 127.4,126.8,126.6,126.3,125.0,124.4,124.2,123.8,123.6,116.7,111.3,108.5,107.1,107.0,104.0,70.2,70.1,69.8,69.2,30.1,29.6,29.5,28.9,28.8,28.7,23.1,23.0,14.7,14.5ppm。MALDI+m/z:876.5([M+H]⁺100％)。元素分析实测值：C,79.49；H,7.88；N,1.51％。C₅₈H₆₉NO₆需要C,79.51；H,7.94；N,1.60％。

合成化合物6的方法

化合物6使用以下方法合成。将9-蒽羧酸(290mg；1.31mmol)、二乙酸钯(0.005mmol)和二乙酸碘苯(0.157mmol)在邻二甲苯(5mL)中的溶液在N₂下加热至70℃，持续20分钟。添加前体2(100mg，0.131mmol)在邻二甲苯(2mL)中的溶液，并加热至140℃，持续72小时。将混合物冷却至室温并用CH₂Cl₂(20mL)稀释。用1M NaOH(2x20mL)洗涤混合物并且真空干燥有机相。将粗黑色固体通过快速柱色谱法(二氧化硅；40％CH₂Cl₂:60％正己烷)纯化，得到为黄色固体的化合物6(13mg，11％)。

化合物6的名称是8-(蒽-9-基)-2,3,6,11,12-五(戊氧基)三亚苯并[1,2-d]噁唑。

化合物6具有以下表征数据：¹ΗΝΜR(300ΜΗz,CDCl₃)δ_Η:10.18(1H,s),8.70(1H,s),8.49-8.44(2H,m),8.15-8.09(2H,m),8.03(1H,s),8.02(1H,s)7.95(1H,s),7.94(1H,s)7.58-7.52(4H,m),4.50(2H,t,J 6.7Hz),4.33-4.27(6H,m),4.17(2H,t,J 6.7Hz),2.05-1.93(8H,m),1.79(2H,p,J 6.7,1.0Hz),1.66-1.37(20H,m),1.03–0.92(15H,m)ppm。¹³C NMRδ_C:(100MHz,CDCl₃)160.6,150.0,149.6,149.2,148.8,143.5,141.0,140.7,131.9,131.7,131.3,129.1,127.7,127.6,126.4,125.9 124.2,123.8,121.1,117.1,111.3,108.7,107.3,107.2,104.6,70.4,70.3,69.9,69.2,29.6,29.5,29.0,28.8,28.7,28.6,28.5,23.0,22.9,22.6,14.5,14.4,14.3ppm。MALDI⁺m/z:876.5([M+H]⁺100％)。元素分析实测值：C,79.13；H,7.83；N,1.77％。C₅₈H₆₉NO₆需要C,79.51；H,7.94；N,1.60％。

合成化合物7的方法

化合物7使用以下方法合成。将4-氟苯甲酸(187mg；1.31mmol)、二乙酸钯(0.005mmol)和二乙酸碘苯(0.157mmol)在邻二甲苯(5mL)中的溶液在N₂下加热至70℃，持续20分钟。添加前体2(100mg，0.131mmol)在邻二甲苯(2mL)中的溶液，并加热至140℃，持续72小时。将混合物冷却至室温并用CH₂Cl₂(20mL)稀释。用1M NaOH(2x20mL)洗涤混合物并且真空干燥有机相。将粗黑色固体通过快速柱色谱法(二氧化硅；40％CH₂Cl₂:60％正己烷)纯化，得到为黄色固体的化合物7(13mg，9％)。

化合物7的名称是8-(4-氟苯基)-2,3,6,11,12-五(戊氧基)三亚苯并[1,2-d]噁唑。

化合物7具有以下表征数据：¹ΗΝΜR(300ΜΗz；CDCl₃)δ_Η:10.03(1H,s),8.36–8.30(2H,m),7.97–7.75(4H,m),7.28–7.15(3H,m),4.41(4H,t,J 6.6Hz),4.26(6H,m),2.06–1.90(9H,m),1.55(22H,m),1.05–0.95(15H,m)ppm。¹³C NMR(100MHz；CDCl₃)δ_C:166.0,163.5,160.6,149.7,149.1,148.9,148.5,143.0,140.5,140.3,129.8,129.7,127.3,124.8,123.9,123.8,123.5,116.5,116.3,116.1,111.1,108.4,107.0,106.8,103.7,69.9,69.8,69.7,69.5,68.9,29.7,29.2,29.0,28.5,28.4,28.3,22.6,14.2,14.1ppm。¹⁹F NMR(282MHz,CDCl₃)δ_F:-108.0ppm。MALDI+m/z:793.6([M]⁺100％),794.6([M+H]⁺55％),795.6([M+H+1]⁺15％)。IRλ^-1(纯):2952m(C-H),2926m(C-H),2858m(C-H),1616w(C＝N),1517s(苯环),1499m(苯环),1433m(苯环),1261m(C-O),1174s(C-O)cm^-1。

合成化合物8的方法

化合物8使用以下方法合成。将3-氟苯甲酸(182mg；1.30mmol)、二乙酸钯(0.005mmol)和二乙酸碘苯(0.157mmol)在邻二甲苯(5mL)中的溶液在N₂下加热至70℃，持续20分钟。添加前体2(100mg，0.131mmol)在邻二甲苯(2mL)中的溶液，并加热至140℃，持续72小时。将混合物冷却至室温并用CH₂Cl₂(20mL)稀释。用1M NaOH(2x20mL)洗涤混合物并且真空干燥有机相。将粗黑色固体通过快速柱色谱法(二氧化硅；40％CH₂Cl₂:60％正己烷)纯化，得到为黄色固体的化合物8(13mg，11％)。

化合物8的名称是8-(3-氟苯基)-2,3,6,11,12-五(戊氧基)三亚苯并[1,2-d]噁唑。

化合物8具有以下表征数据：¹ΗΝΜR(300ΜΗz；CDCl₃)δ_Η:10.06(1H,s),8.15(1H,d,J 7.9Hz),8.05(1H,dd,J 9.0,1.9Hz,7.89(4H,m),7.53(m,1H),7.36–7.16(4H,m),4.45(4H,m),4.33–4.21(6H,m),2.16–1.90(11H,m),1.71–1.39(24H,m),1.06–0.93(15H,mppm。¹³C NMR(100MHz；CDCl₃)δ_C:164.3,161.8,160.1,160.1,149.6,149.1,148.8,148.4,142.9,140.3,140.3,130.6,130.5,129.6,129.6,127.3,124.8,123.7,123.4,123.4,123.2,123.2,118.3,118.1,116.4,114.6,114.3,110.9,108.2,106.8,106.7,103.9,69.9,69.8,69.6,69.0,29.4,29.3,29.2,28.6,28.5,28.4,22.8,14.3ppm。19F NMR(282MHz；CDCl₃)δ_F:-111.8ppm。ES+MS m/z:794.5([M]⁺55％),816.5([M+Na]⁺100％),817.5([M+H⁺Na]⁺50％)。IRλ-1(纯)：2952m(C-H)，2925m(C-H)，2856m(C-H)，1617w(C＝N)，1518s(苯环)，1434s(苯环)，1262s(C-O)，1174s(C-O)cm-1。元素分析实测值：C,75.62；H,8.25；N,1.78％。C₅₀H₆₄FNO₆需要C,75.63；H,8.12；N,1.76％。

合成化合物9的方法

化合物9使用以下方法合成。将2-氟苯甲酸(41.86mg；0.26mmol)、二乙酸钯(0.005mmol)和二乙酸碘苯(0.157mmol)在邻二甲苯(5mL)中的溶液在N₂下加热至70℃，持续20分钟。添加前体2(100mg，0.131mmol)在邻二甲苯(2mL)中的溶液，并加热至140℃，持续72小时。将混合物冷却至室温并用CH₂Cl₂(20mL)稀释。用1M NaOH(2x20mL)洗涤混合物并且真空干燥有机相。将粗黑色固体通过快速柱色谱法(二氧化硅；40％CH₂Cl₂:60％正己烷)纯化，得到为黄色固体的化合物9(7mg，10％)。

化合物9的名称是8-(2-氟苯基)-2,3,6,11,12-五(戊氧基)三亚苯并[1,2-d]噁唑。

化合物9具有以下表征数据：¹ΗΝΜR(300ΜΗz；CDCl₃)δ_Η:10.16(1H,s),8.38(1H,m),7.92(4H,m),7.63–7.47(1H,m),7.43–7.28(2H,m),4.47(4H,m),4.27(5H,m),2.13–1.91(9H,m),1.69–1.39(21H,m),1.00(14H,m)ppm。13C NMR(100MHz；CDCl₃)δ_C:162.4,159.8,157.6,157.5,149.7,149.3,148.8,148.4,142.9,140.6,140.5,139.9,132.9,132.8,130.3,127.3,124.8,124.5,123.9,123.4,123.4,117.4,117.2,116.7,116.0,115.9,110.9,108.3,107.0,106.9,104.4,69.8,69.5,68.9,29.2,29.0,28.4,28.3,22.6,22.6,14.1ppm。19F NMR(282MHz；CDCl₃)δ_F:-109.1ppm。MALDI+m/z:793.6([M]⁺100％),794.6([M+H]⁺65％),795.6([M+1+H]⁺20％)。IRλ-1(纯):2952m(C-H),2925m(C-H),2856m(C-H),1617w(C＝N),1518m(苯环),1434m(苯环),1261s(C-O),1176s(C-O)cm-1。元素分析实测值：C,75.92；H,8.26；N,1.74％。C₅₀H₆₄FNO₆需要C,75.63；H,8.12；N,1.76％。

合成化合物10的方法

化合物10使用以下方法合成。在N₂气氛下，将前体2(100mg；0.01mmol)、二乙酸碘苯(51mg；0.16mmol)和二乙酸钯(1mg；0.005mmol)在PhMe(5mL)和乙酸(1mL)在PhMe(5mL)中的混合物中的浆液加热并保持回流72小时。然后将反应物冷却至室温，并且用1MNaOH(1M；2×10mL)洗涤。将有机相真空蒸发至干。然后，将固体经由快速柱色谱法(40％CH₂Cl₂:60％正己烷)纯化，得到为白色固体的化合物10(64mg；66％)。

化合物10的名称是8-甲基-2,3,6,11,12-五(戊氧基)三亚苯并[1,2-d]噁唑。

化合物10具有以下表征数据：¹ΗΝΜRδ_H:(400MHz,CDCl₃)9.94(1H,s),7.94(1H,s),7.90(1H,s),7.89(1H,s),7.85(1H,s),4.42(2H,t,J6.7Hz),4.38(2H,t,J 6.8),4.30–4.24(6H,m),2.81(3H,s),1.99(10H,m),1.65–1.53(10H,m),1.52–1.44(10H,m),1.03–0.96(15H,m)ppm。¹³C NMRδ_C:(100MHz,CDCl₃)162.4,149.9,149.4,149.1,148.8,143.2,140.8,140.2,127.2,125.0,124.2,123.9,123.7,116.7,111.6,108.8,107.3,107.2,102.9,70.3,70.2,69.88,69.40,29.60,29.5,29.3,28.8,28.8,28.6,23.0,15.2,14.5ppm。MALDI m/z:714.5([M]⁺100％)。

合成化合物11的方法

化合物11使用以下方法合成。将前体2(200mg，0.263mmol)和三甲胺(0.2mL，1.44mmol)在PhMe(7mL)中的溶液在N₂下加热回流10分钟。添加2-噻吩甲酰氯(0.3mL，2.62mmol)，并加热回流90分钟。将溶液冷却至室温且用1M HCl(30mL)洗涤，并且将有机相用EtOAc(2×30mL)萃取。将有机相真空干燥，并且将所得黑色固体在240℃下加热10分钟，然后冷却至室温。将粗黑色固体通过快速柱色谱法(二氧化硅；40％CH₂Cl₂:60％正己烷)纯化，得到为黄色固体的化合物11(136mg，64％)。

化合物11的名称是2,3,6,11,12-五(戊氧基)-8-(噻吩-2-基)三亚苯并[1,2-d]噁唑。

化合物11具有以下表征数据：¹ΗΝΜRδ_H:(300MHz,CDCl₃)10.03(1H,s),7.99(1H,dd,J 3.7,1.2Hz),7.92(1H,s),7.89(1H,s),7.88(1H,s),7.88(1H,s),7.58(1H,dd,J 5.0,1.2),7.25-7.22(1H,dd,J 5.0,3.7Hz),4.48-4.43(4H,m),4.31-4.23(6H,m),2.14-1.93(10H,m),1.71-1.42(20H,m),1.04-0.97(15H,m)ppm。¹³C NMRδ_C:(100MHz,CDCl₃)157.8,149.8,149.4,149.0,148.6,143.0,140.7,140.1,130.6,130.1,129.7,128.5,127.5,125.0,124.1,123.7,123.6,116.6,111.1,108.5,107.1,107.1,104.0,70.2,70.2,70.1,69.8,69.1,29.6,29.5,29.4,28.9,28.8,28.8,28.6,23.0,23.0,14.6,14.5ppm。MALDI m/z:781.5([M]⁺100％)。

合成化合物12的方法

化合物12使用以下方法合成。在N₂下将前体2(100mg，0.132mmol)、4-氰基苯甲酰氯(109mg，0.658mmol)和N,N-二异丙基乙胺(0.1mL，0.574mmol)在PhMe(5mL)中的溶液加热至并保持回流18小时。将反应物冷却至室温，然后真空蒸发至干。然后在N₂下加热固体并在240℃下保持15分钟。然后将粗黑色固体冷却至室温并且经由快速柱色谱法(二氧化硅；40％CH₂Cl₂:60％正己烷)纯化，得到为黄色固体的化合物12(40mg，38％)。

化合物12的名称是4-(2,3,6,11,12-五(戊氧基)三亚苯并[1,2-d]噁唑-8-基)苯甲腈。

化合物12具有以下表征数据：¹ΗΝΜRδH:(300MHz,CDCl₃)9.96(1H,s),8.43-8.40(2H,d,J 8.55Hz),7.90(1H,s),7.89(1H,s),7.88(1H,s),7.87(1H,s),7.83-7.80(2H,d,J8.55),4.43-4.38(4H,m),4.30-4.23(6H,m),2.12-1.93(10H,m),1.67-1.42(20H,m),1.04-0.97(15H,m)ppm。¹³C NMRδ_C:(100MHz,CDCl₃)159.3,150.0,149.3,149.1,148.8,143.1,140.6,140.4,132.7,131.4,127.8,127.6,125.0,123.7,123.7,123.4,118.7,116.6,114.4,111.0,108.4,106.9,106.7,104.4,70.2,70.0,69.9,69.8,69.2,29.6,29.5,29.4,28.8,28.8,28.8,28.7,23.0,14.6,14.5ppm。MALDI m/z:800.4([M]⁺100％)。

合成化合物13的方法

化合物13使用以下方法合成。将4-(三氟甲基)苯甲酸羧酸(248mg，1.31mmol)、二乙酸钯(0.005mmol)和二乙酸碘苯(0.157mmol)在PhMe(5mL)中的溶液在N₂下在60℃下加热30分钟。添加前体2(100mg，0.132mmol)在PhMe(2mL)中的溶液，并加热回流48-72小时，同时搅拌。将溶液冷却至室温并用CH₂Cl₂(20mL)稀释。将有机相用NaOH水溶液(1M；2×20mL)洗涤，分离，并且真空干燥有机相。将粗黑色固体通过快速柱色谱法(二氧化硅；40％CH₂Cl₂:60％正己烷)纯化，得到为黄色固体的化合物13(6mg，5％)。

化合物13的名称是2,3,6,11,12-五(戊氧基)-8-(4-(三氟甲基)苯基)三亚苯并[1,2-d]噁唑。

化合物13具有以下表征数据：¹ΗΝΜRδ_H:(300MHz,CDCl₃)10.04(1H,s),8.48-8.46(2H,d,J 8.50),7.92(1H,s),7.90(1H,s),7.89(1H,s),7.88(1H,s),7.83-7.80(2H,d,J 8.50),4.47-4.45(4H,t,J 6.74),4.31-4.24(6H,m),2.14-1.94(10H,m),1.70-1.43(20H,m),1.05-0.98(15H,m)ppm。¹⁹F NMRδ_F:(300MHz,CDCl₃)62.9(s)ppm。¹³C NMRδ_C:(100MHz,CDCl₃)159.3,150.0,149.3,149.1,148.8,143.1,140.6,140.4,132.7,131.4,127.8,127.6,125.0,123.7,123.7,123.4,118.7,116.6,114.4,111.0,108.4,106.9,106.7,104.4,70.2,70.0,69.9,69.8,69.2,29.6,29.5,29.4,28.8,28.8,28.8,28.7,23.0,14.6,14.5ppm。MALDI m/z:844.5([M+H]⁺100％)。

合成化合物14的方法

化合物14使用以下方法合成。在N₂下将前体2(100mg，0.132mmol)、2-碘苯甲酰氯(175mg，0.658mmol)和N,N-二异丙基乙胺(0.1mL，0.574mmol)在PhMe(5mL)中的溶液加热至并保持回流18小时。将反应物冷却至室温，然后真空蒸发至干。然后在N₂下加热固体并在240℃下保持15分钟。然后将粗黑色固体冷却至室温，并经由快速柱色谱法(二氧化硅，40％CH₂Cl₂:60％正己烷)纯化，得到为黄色固体的化合物14(39.9mg，35％)。

化合物14的名称是8-(2-碘苯基)-2,3,6,11,12-五(戊氧基)三亚苯并[1,2-d]噁唑。

化合物14具有以下表征数据：¹ΗΝΜRδH:(300MHz,CDCl₃)10.07(1H,s),8.20-8.16(1H,dd,J 7.90,1.60Hz),8.18-8.15(1H,dd,J7.90,1.25Hz),7.95(1H,s),7.94(1H,s),7.91(2H,m),7.58-7.53(1H,td,J 7.66,7.63,1.25Hz),7.26-7.20(1H,td,J 7.66,7.63,1.60Hz),4.52-4.44(4H,m),4.31-4.25(6H,m),2.06-1.94(10H,m),1.67-1.41(20H,m),1.03-0.92(15H,m)ppm。¹³C NMRδ_C:(100MHz,CDCl₃)160.9,149.9,149.6,149.2,149.1,143.3,142.0,140.6,140.4,132.5,132.1,132.1,128.5,127.6,125.1,124.1,124.0,123.7,117.2,111.9,108.6,107.3,107.1,104.9,95.0,70.4,70.2,70.2,70.1,69.9,29.6,29.6,29.5,29.4,28.9,28.8,28.7,23.0,23.0,14.5ppm。MALDI m/z:901.6([M]⁺14％)。

合成化合物15的方法

化合物15使用以下方法合成。在N₂下将前体2(100mg，0.132mmol)、2-氯苯甲酰氯(175mg，0.658mmol)和N,N-二异丙基乙胺(0.1mL，0.574mmol)在PhMe(5mL)中的溶液加热至并保持回流18小时。将反应物冷却至室温，然后真空蒸发至干。然后在N₂下加热固体并在240℃下保持15分钟。然后将粗黑色固体冷却至室温，并经由快速柱色谱法(二氧化硅，40％CH₂Cl₂:60％正己烷)纯化，得到为黄色固体的化合物15(52.4mg，49％)。

化合物15的名称是8-(2-氯苯基)-2,3,6,11,12-五(戊氧基)三亚苯并[1,2-d]噁唑。

化合物15具有以下表征数据：¹ΗΝΜRδ_H:(300MHz,CDCl₃)10.06(1H,s),8.39-8.34(1H,m),7.92-7.90(4H,m),7.66(1H,m),7.51-7.44(2H,m),4.49-4.41(4H,m),4.30-4.25(6H,m),2.06-1.95(10H,m),1.67-1.43(20H,m),1.03-0.92(15H,m)ppm。¹³C NMRδ_C:(100MHz,CDCl₃)158.8,149.6,149.4,148.9,148.5,142.9,140.4,139.9,133.5,131.7,131.6,127.3,127.0,126.2,124.8,123.9,123.4,116.8,110.9,108.2,106.9,104.6,70.1,70.0,69.9,69.6,69.1,29.8,29.3,29.3,29.2,28.5,28.4,22.7,14.3ppm。MALDI m/z:809.7([M]⁺95％)。

合成化合物16的方法

化合物16使用以下方法合成。在N₂下将前体2(100mg，0.132mmol)、2-溴苯甲酰氯(144mg，0.658mmol)和N,N-二异丙基乙胺(0.1mL，0.574mmol)在PhMe(5mL)中的溶液加热至并保持回流18小时。将反应物冷却至室温，然后真空蒸发至干。然后在N₂下加热固体并在240℃下保持15分钟。然后将粗黑色固体冷却至室温，并经由快速柱色谱法(二氧化硅，40％CH₂Cl₂:60％正己烷)纯化，得到为黄色固体的化合物16(25.8mg，21％)。

化合物16的名称是8-(2-溴苯基)-2,3,6,11,12-五(戊氧基)三亚苯并[1,2-d]噁唑。

化合物16具有以下表征数据：¹ΗΝΜRδH:(300MHz,CDCl₃)10.03(1H,s),8.31-8.28(1H,dd,J 7.91,1.75Hz),7.91-7.89(4H,m),7.86-7.83(1H,dd,J 7.91,1.23Hz),7.54-7.49(1H,td,J 7.70,7.60,1.23Hz),7.42-7.37(1H,td,J 7.70,7.57,1.75Hz)4.49-4.39(4H,m),4.31-4.23(6H,m),2.06-1.95(10H,m),1.64-1.43(20H,m),1.03-0.95(15H,m)ppm。¹³C NMRδ_C:(100MHz,CDCl₃):159.5,149.7,149.4,148.9,148.6,142.9,140.3,135.0,132.2,131.8,128.3,127.6,127.4,124.8,123.9,123.6,123.5,122.0,116.9,111.1,108.2,107.0,104.7,70.1,70.0,69.9,69.6,69.4,29.3,29.3,29.2,28.6,28.5,28.4,22.7,14.3ppm。MALDI m/z:855.7([M]⁺31％)

合成化合物17的方法

化合物17使用以下方法合成。将5-溴戊酸(773mg，4.27mmol)、二乙酸钯(0.005mmol)和二乙酸碘苯(0.512mmol)在PhMe(10mL)中的溶液在N₂下在70℃下加热20分钟。添加前体2(325mg；0.428mmol)在PhMe(10mL)中的溶液，并加热回流48-72小时，同时搅拌。将溶液冷却至室温并用CH₂Cl₂(20mL)稀释。将有机相用NaOH水溶液(1M；2×20mL)洗涤，分离，并且真空干燥有机相。将粗黑色固体通过快速柱色谱法(二氧化硅；40％CH₂Cl₂:60％正己烷)纯化，得到为白色固体的化合物17(109mg，31％)。

化合物17的名称是8-(4-溴丁基)-2,3,6,11,12-五(戊氧基)三亚苯并[1,2-d]噁唑。

化合物17具有以下表征数据：¹ΗΝΜRδ_H:(300MHz,CDCl₃)9.95(1H,s),7.92(1H,s),7.90(1H,s),7.89(1H,s),7.84(1H,s),4.43-4.34(4H,m),4.30-4.24(6H,m),3.55-3.50(2H,t,J 6.29Hz),3.15-3.10(2H,t,J 7.05Hz),2.35(3H,s),2.25-1.94(12H,m),1.64-1.45(24H,m),1.03-0.97(15H,m)ppm。¹³C NMRδ_C:(100MHz,CDCl₃)164.6,149.6,149.1,148.8,148.4,142.9,140.1,139.7,127.0,124.7,123.8,123.5,123.4,116.3,111.0,108.4,107.0,102.7,70.0,69.9,69.6,69.6,68.9,33.0,31.9,29.3,29.2,29.2,29.1,28.6,28.5,28.4,28.3,22.7,25.3,22.7,22.6,14.3,14.2,14.1ppm。ES+m/z:834.4([M+H]⁺95％),836.4([M+H]⁺100％)。

合成化合物18的方法

化合物18使用以下方法合成。将化合物17(66mg，0.079mmol)在丙酮(10mL)中的溶液加热至50℃并在N₂下搅拌，向其中添加叠氮化钠(7mg，0.111mmol)在H₂O(5mL)中的溶液并在N₂下搅拌4小时。此后，形成沉淀物，并且减压去除溶剂，然后将沉淀物真空过滤并干燥，得到为灰白色固体的化合物18(59mg，94％)。

化合物18的名称是8-(4-叠氮基丁基)-2,3,6,11,12-五(戊氧基)三亚苯并[1,2-d]噁唑。

化合物18具有以下表征数据：¹ΗΝΜRδ_H:(300MHz,CDCl₃)9.96(1H,s),7.94(1H,s),7.90(1H,s),7.90(1H,s),7.87(1H,s),4.45-4.40(2H,t,J 6.70Hz),4.39-4.35(2H,t,J6.67Hz),4.30-4.24(6H,m),3.55-3.51(2H,t,J 6.31Hz),3.17-3.12(2H,t,J 7.11Hz),2.28-1.93(12H,m),1.65-1.41(24H,m),1.03-0.97(15H,m)ppm。¹³C NMRδ_C:(100MHz,CDCl₃)165.0,149.6,149.9,149.4,149.1,148.7,143.2,140.4,140.0,127.3,125.0,124.1,123.8,123.7,116.7,111.3,108.7,107.3,103.0,70.3,70.3,69.9,69.9,69.2,33.3,32.3,29.6,29.5,29.5,29.4,28.9,28.8,28.7,28.6,28.0,25.6,23.1,23.0,14.6,14.5,14.5ppm。ES+m/z:819.5([M+Na]⁺100％)。

合成化合物19的方法

化合物19使用以下方法合成。将化合物17(21mg，0.025mmol)溶解在无水THF(4mL)中，向此混合物中添加硫代乙酸钾(12mg，0.1mmol)，并在N₂下搅拌6小时。然后将有机相用DCM(10mL)萃取并用水(2×10mL)洗涤。然后将有机相真空干燥，并且将固体用DCM:MeOH(1mL:5mL)重结晶。抽吸过滤所得沉淀物，并且将固体用甲醇洗涤，得到为灰白色固体的化合物19(4mg，19％)。

化合物19的名称是硫代乙酸S-(4-(2,3,6,11,12-五(戊氧基)三亚苯并[1,2-d]噁唑-8-基)丁酯)。

化合物19具有以下表征数据：¹ΗΝΜRδ_H:(300MHz,CDCl₃)9.97(1H,s),7.94(1H,s),7.90(1H,s),7.89(1H,s),7.86(1H,s),4.45-4.35(4H,m),4.30-4.24(6H,m),3.14-3.09(2H,t,J 7.44Hz),3.02-2.97(2H,t,J 7.21Hz),2.35(3H,s),2.18-1.80(12H,m),1.65-1.42(24H,m),1.03-0.97(15H,m)ppm。¹³C NMRδ_C:(100MHz,CDCl₃)196.0,165.2,149.9,149.4,149.1,148.7,143.2,140.4,140.0,127.2,125.0,124.2,123.8,123.6,116.7,111.4,108.7,107.3,103.1,70.3,70.2,69.9,69.9,69.2,31.0,30.1,29.6,29.5,29.5,29.4,29.4,29.1,28.9,28.8,28.7,28.6,28.5,26.2,23.0,23.0,14.6,14.5,14.5,14.5ppm。MALDI m/z:829.5([M]⁺100％)。

合成化合物20的方法

化合物22使用以下方法合成。在N₂下将化合物17(260mg，0.311mmol)、叔丁醇钠(90mg，0.934mmol)、碘化钾(40mg，0.311mmol)和乙二醇(193mg，3.11mmol)在MeCN(15mL)中的溶液加热至并保持回流48小时。将反应物冷却至室温，然后真空蒸发至干。将粗固体用CH₂Cl₂(20mL)溶解。将有机相用NaOH水溶液(1M；2×20mL)洗涤，然后用HCl(1M，2×20mL)洗涤，分离，并且真空干燥有机相。然后将粗黑色固体冷却至室温，且经由快速柱色谱法(二氧化硅，40％CH₂Cl₂:60％正己烷)纯化，得到为黄色固体的化合物16(84mg，36％)。

化合物20的名称是8-(丁-3-烯-1-基)-2,3,6,11,12-五(戊氧基)三亚苯并[1,2-d]噁唑。

化合物20具有以下表征数据：¹ΗΝΜRδH:(300MHz,CDCl₃)10.00(1H,s),7.92(1H,s),7.90(1H,s),7.89(1H,s),7.84(1H,s),6.14-6.00(1H,ddt,J 16.95,10.20,6.45Hz),5.22(1H,dd,J 16.95,1.60Hz),5.10(1H,dd,J 10.20,1.60Hz),4.43-4.35(4H,m),4.30-4.24(6H,m),3.22-3.17(2H,t,J 7.55Hz),3.17-3.12(2H,t,J 7.11Hz),2.86-2.78(2H,m),2.08-1.94(10H,m),1.62-1.45(20H,m),1.03-0.97(15H,m)ppm。¹³C NMRδ_C:(100MHz,CDCl₃)165.0,149.8,149.4,149.1,148.7,143.2,140.4,140.0,137.0,127.2,125.0,124.2,123.8,123.6,116.7,116.3,111.4,108.7,107.3,107.2,103.0,70.3,70.2,69.9,69.8,69.2,30.9,29.6,29.5,29.4,29.3,28.9,28.8,28.7,28.6,28.5,23.0,22.9,14.6,14.5,14.5ppm。ES+m/z:754.5([M+H]⁺100％)。

合成化合物21的方法

化合物21使用以下方法合成。将癸酸(0.132mg，0.236mmol)、二乙酸钯(0.005mmol)和二癸酸碘苯(0.235mmol)在PhMe(10mL)中的溶液在N₂下在70℃下加热20分钟。添加前体2(100mg；0.132mmol)在PhMe(10mL)中的溶液，并加热回流48-72小时，同时搅拌。将溶液冷却至室温并用CH₂Cl₂(20mL)稀释。将有机相用NaOH水溶液(1M；2×20mL)洗涤，分离，并且真空干燥有机相。将粗黑色固体通过快速柱色谱法(二氧化硅；40％CH₂Cl₂:60％正己烷)纯化，得到为白色固体的化合物21(42mg，39％)。

化合物21的名称是8-壬基-2,3,6,11,12-五(戊氧基)三亚苯并[1,2-d]噁唑。

化合物21具有以下表征数据：¹ΗΝΜRδH:(300MHz,CDCl₃)10.02(1H,s),7.93(1H,s),7.90(1H,s),7.89(1H,s),7.84(1H,s),4.43-4.36(4H,m),4.30-4.24(6H,m),3.11-3.06(2H,t,J 7.52Hz),2.10-1.94(12H,m),1.63-1.29(32H,m),1.02-0.97(15H,m)0.91-0.87(3H,m)ppm。¹³C NMRδ_C:(100MHz,CDCl₃)165.9,149.8,149.3,149.0,148.6,143.2,140.4,140.1,127.1,124.9,124.2,123.8,123.6,123.6,116.6,111.3,108.6,107.2,107.1,102.9,70.2,69.9,69.8,69.1,32.3,29.9,29.8,29.7,29.6,29.5,29.4,29.0 28.9,28.8,28.6,27.1 23.1,23.0,14.6,14.5ppm。ES+m/z:826.6([M+H]⁺100％)。

合成化合物22的方法

化合物22使用以下方法合成。在N₂下将前体2(100mg，0.132mmol)、4-(二甲基氨基)苯甲酰氯(175mg，0.658mmol)和N,N-二异丙基乙胺(0.1mL，0.574mmol)在PhMe(5mL)中的溶液加热至并保持回流18小时。将反应物冷却至室温，然后真空蒸发至干。然后在N₂下加热固体并在240℃下保持15分钟。然后将粗黑色固体冷却至室温，并经由快速柱色谱法(二氧化硅，40％CH₂Cl₂:60％正己烷)纯化，得到为黄色固体的化合物22(19mg，18％)。

化合物22的名称是N,N-二甲基-4-(2,3,6,11,12-五(戊氧基)三亚苯并[1,2-d]噁唑-8-基)苯胺。

化合物22具有以下表征数据：¹ΗΝΜRδ_H:(300MHz,CDCl₃)10.20(1H,s),8.27-8.24(2H,d,J 8.60Hz),7.94(1H,s),7.90-7.85(3H,m),6.89-6.86(2H,d,J 8.60Hz),4.56-4.45(4H,m),4.31-4.24(6H,m),3.11(6H,s),2.16-1.94(10H,m),1.71-1.42(20H,m),1.04-0.97(15H,m)ppm。¹³C NMRδ_C:(100MHz,CDCl₃)162.8,152.2,149.7,149.3,148.5,143.1,141.4,140.2,129.3,127.4,124.9,124.5,124.0,123.6,116.5,112.4,111.5,108.6,107.3,107.2,103.4,70.2,70.2,69.9,69.2,40.9,29.6,29.6,29.5,29.4,29.0,28.9,28.8,28.7,23.0,23.0,14.7,14.5ppm。ES+m/z:819.7([M]⁺100％)。

合成化合物23的方法

化合物23使用以下方法合成。将4-硝基苯甲酸(1g，6mmol)、二乙酸钯(0.005mmol)和(二乙酰氧基碘)苯(51mg，0.157mmol)在PhMe(10mL)中的溶液在N₂下在70℃下加热20分钟。添加前体2(100mg；0.132mmol)在PhMe(10mL)中的溶液，并加热回流48-72小时，同时搅拌。将溶液冷却至室温并用CH₂Cl₂(20mL)稀释。将有机相用NaOH水溶液(1M；2×20mL)洗涤，分离，并且真空干燥有机相。将粗黑色固体通过快速柱色谱法(二氧化硅；40％CH₂Cl₂:60％正己烷)纯化，得到为灰白色固体的化合物23(74mg，69％)。

化合物23的名称是8-(4-硝基苯基)-2,3,6,11,12-五(戊氧基)三亚苯并[1,2-d]噁唑。

化合物23具有以下表征数据：¹ΗΝΜRδ_H:(300MHz,CDCl₃)9.66(1H,s),8.14-8.05(4H,m),7.74(1H,s),7.73(1H,s),7.70(1H,s),7.67(1H,s),4.30-4.19(10H,m),2.04-1.94(10H,m),1.63-1.47(20H,m),1.05-1.00(15H,m)ppm。¹³C NMRδ_C:(100MHz,CDCl₃)158.9,150.0,149.3,149.1,148.8,143.0,140.6,140.4,132.8,127.8,127.5,125.0,124.0,123.6,123.5,123.3,116.5,110.8,108.3,106.8,106.4,104.3,70.2,69.9,69.8,69.7,69.1,29.7,29.6,29.5,29.4,28.9,28.8,28.8,28.7,23.0,14.6,14.5ppm。MALDI m/z:820.5([M]⁺100％)。

合成化合物24的方法

化合物24使用以下方法合成。将(二乙酰氧基碘)苯(51mg，0.157mmol)和乙酰水杨酸(550mg，3.031mmol)在甲苯(4mL)中的溶液加热至80℃并在N₂下搅拌10分钟。然后添加前体2(100mg，0.131mmol)以形成黑色溶液，然后将其再搅拌10分钟。将二乙酸钯(1mg，5摩尔％)和乙酰水杨酸(553mg，3.197mmol)在甲苯(4mL)中的溶液加热至110℃，并在N₂下搅拌10分钟，然后与黑色溶液合并。在N₂气氛下在110℃下搅拌所得溶液72小时。将粗黑色溶液真空干燥并通过快速柱色谱法(二氧化硅；40％CH₂Cl₂:60％正己烷)纯化。然后将粗物质真空蒸发至干，然后溶解于MeCN(10mL)和1M NaOH(10mL)的混合物中。将溶液加热至80℃，持续2小时。冷却至室温后，将产物使用1M HCl(20mL)酸化并萃取到CH₂Cl₂(3×10mL)中。将合并的有机层真空蒸发至干，得到为白色固体的化合物24(2mg，2％)。

化合物24的名称是2-(2,3,6,11,12-五(戊氧基)三亚苯并[1,2-d]噁唑-8-基)酚。

化合物24具有以下表征数据：¹ΗΝΜRδ_H:(300MHz,CDCl₃)11.42(1H,s),9.35(1H,s),8.20-8.17(1H,dd,J 8.01,1.67Hz),7.90(1H,s),7.89(1H,s),7.88(1H,s),7.87(1H,s),7.52-7.46(1H,ddd,J 8.51,7.22,1.67Hz),7.18-7.14(1H,dd,J 8.51,1.08Hz),7.08-7.05(1H,ddd,J 8.01,7.22,1.08Hz),4.47-4.42(2H,t,J 6.65Hz),4.39-4.35(2H,t,J6.71Hz),4.30-4.19(6H,m),2.09-1.94(10H,m),1.71-1.43(20H,m),1.05-0.98(15H,m)ppm。MALDI m/z:791([M]⁺100％)。

合成化合物25的方法

化合物25使用以下方法由前体3合成。

前体3根据N.Boden等人，J.Mater.Chem.,1995,5,2275中所述的方法制造。将2,3,6,7,10,11-六丁氧基-1-硝基三亚苯(1.70g，2.79mmol)、硼氢化钠(1.70g，45.1mmol)和六水合氯化镍(II)(4.45g，18.7mmol)在MeOH和THF的50/50混合物(40mL)中的溶液在N₂下在室温下搅拌5小时。然后将粗黑色固体过滤并用CHCl₃洗涤，并且将滤液真空蒸发至干，得到为棕色固体的前体3(1.6g，85％)。

前体3的名称是2,3,6,7,10,11-六丁氧基三亚苯-1-胺。

前体3具有以下表征数据：¹ΗΝΜRδ_H:(300MHz,CDCl₃)8.82(1H,s),7.83(1H,s),7.80(1H,s),7.78(1H,s),7.37(1H,s),4.57(2H,s),4.29-4.09(12H,m),2.01-1.81(12H,m),1.67-1.52(12H,m),1.13-0.94(18H,m)ppm。¹³C NMRδ_C:(100MHz,CDCl₃)151.0,149.5,148.9,148.0,147.6,138.4,135.6,127.0,124.7,124.5,124.1,124.0,114.0,110.3,108.5,108.2,107.1,97.4,72.9,69.7,69.4,69.1,68.4,32.7,31.8,31.7,31.6,31.5,19.7,19.6,19.5,19.4,14.1ppm。MALDI m/z:675.8([M]⁺100％)。

将前体3(100mg，0.148mmol)、2-萘甲酰氯(141mg，0.658mmol)和N,N-二异丙基乙胺(0.1mL，0.574mmol)在PhMe(5mL)中的溶液加热至并在N₂下保持回流18小时。将反应物冷却至室温，然后真空蒸发至干。然后在N₂下加热固体并在240℃下保持15分钟。然后将粗黑色固体冷却至室温，并经由快速柱色谱法(二氧化硅，40％CH₂Cl₂:60％正己烷)纯化，得到为黄色固体的化合物25(21mg，19％)。

化合物25的名称是2,3,6,11,12-五丁氧基-8-(萘-2-基)三亚苯并[1,2-d]噁唑。

化合物25具有以下表征数据：¹ΗΝΜRδ_H:(300MHz,CDCl₃)10.01(1H,s),8.68(1H,s),8.31-8.27(1H,dd,J 8.57,1.65Hz),7.96-7.87(3H,m),7.80-7.79(3H,m),7.70(1H,s),7.58-7.55(2H,m),4.45-4.40(2H,t,J 7.01Hz),4.38-4.34(2H,t,J 6.67Hz),4.28-4.19(6H,m),2.15-1.91(10H,m),1.79-1.59(10H,m),1.18-1.07(15H,m)ppm。¹³CNMRδ_C:(100MHz,CDCl₃)161.6,149.7,149.3,149.0,148.5,143.1,140.8,140.4,134.9,133.4,129.2,128.3,127.8,127.3,127.1,125.0,124.9,124.4,124.1,123.7,123.6,116.6,111.3,108.4,107.1,106.9,103.7,69.8,69.6,69.5,68.9,31.9,31.8,19.9,19.8,19.7,14.5,14.4,14.3ppm。MALDI m/z:755.1([M]⁺100％)。

合成化合物26的方法

化合物26使用以下方法由前体4(2,3,6,7,10,11-六(戊氧基)-1,8-三亚乙基二胺)合成。

前体4使用N.Boden等人，J.Mater.Chem.,1995,5,2275中所述的方法由二硝基三亚苯衍生物合成，所述二硝基三亚苯衍生物作为用于合成单硝基三亚苯衍生物的方法中的副产物形成。可以使用快速柱色谱法在比单硝基中间体早的级分中分离出二硝基三亚苯衍生物。

将前体4(135mg，0.174mmol)和二乙酸钯(0.0005mmol)在PhMe(7mL)中的溶液在N₂下加热回流10分钟。添加2-氟苯甲酰氯(0.02mL，0.174mmol)，并加热回流40小时。将溶液冷却至室温并真空干燥，并且将所得黑色固体在240℃下加热10分钟，然后冷却至室温。将粗黑色固体通过快速柱色谱法(二氧化硅；40％CH₂Cl₂:60％正己烷)纯化，得到为灰白色固体的化合物26(6mg，4％)。

化合物26的名称为2,9-双(2-氟苯基)-4,7,12,13-四(戊氧基)三亚苯并[1,2-d:8,7-d']双(噁唑)。

化合物26具有以下表征数据：¹ΗΝΜRδ_H:(300MHz,CDCl₃)10.09(2H,s),8.38-8.32(2H,td,J 7.56,7.52,1.78Hz),7.82(2H,m),7.58(2H,m),7.36-7.31(2H,m),7.29-7.25(2H,m),4.48-4.39(8H,m),2.16-1.96(8H,m),1.70-1.44(16H,m),1.05-1.00(12H,m)ppm。¹⁹F NMRδ_F:(300MHz,CDCl₃)108.9(s)ppm。MALDI m/z:842.5([M]⁺100％)。

合成化合物27的方法

化合物27使用以下方法合成。在N₂下将4'-羧基苯并-15-冠-5(600mg，1.92mmol)、草酰氯(2.0mL，23.6mmol)和二甲基甲酰胺(0.01ml，0.129mmol)的溶液加热并保持回流10分钟。将反应物冷却至室温，然后真空蒸发至干。添加前体2(100mg，0.132mmol)和N,N-二异丙基乙胺(0.1mL，0.574mmol)在PhMe(5mL)中的溶液。然后在N₂下加热反应物并保持回流72小时。将反应物冷却至室温，然后真空蒸发至干。然后在N₂下加热固体并在240℃下保持15分钟。然后将粗黑色固体冷却至室温，并经由快速柱色谱法(二氧化硅，10％EtOAc:90％正己烷)纯化，得到为棕色固体的化合物27(22mg，17％)。

化合物27的名称是8-(2,3,5,6,8,9,11,12-八氢苯并[b][1,4,7,10,13]五氧杂环十五因-15-基)-2,3,6,11,12-五(戊氧基)三亚苯并[1,2-d]噁唑。

化合物27具有以下表征数据：¹ΗΝΜRδ_H:(300MHz,CDCl₃)10.10(1H,s),8.04-7.80(6H,m),6.99(1H,d,J 8.35Hz),4.53-4.38(4H,m),4.33-4.17(10H,m),4.06-3.90(4H,m),3.89-3.73(8H,m),2.10-1.88(10H,m),1.69-1.44(20H,m),1.07 0.92(15H,m)ppm。¹³CNMRδ_C:(100MHz,CDCl₃)161.6,152.1,149.6,149.1,148.9,148.4,142.9,140.7,140.1,127.2,124.7,124.0,123.6,123.4,121.7,120.5,116.4,113.2,112.9,111.1,108.3,107.0,103.4,71.3,70.6,70.5,70.0,70.0,69.9,69.6,69.5,69.2,68.9,68.7,29.8,29.4,29.3,29.2,28.7,28.5,28.4,22.8,22.7,14.4,14.3ppm。MALDI m/z:965.9([M]⁺100％)。

合成化合物28的方法

化合物28使用以下方法合成。在氮气吹扫的2颈烧瓶中在氮气气氛下在-20℃下搅拌化合物2(60mg，0.077mmol)在脱气的二氯甲烷(5mL)中的溶液。经由注射器经Suba-Seal(RTM)添加三溴化硼(1M的CH₂Cl₂溶液，387μL，0.385mmol，5eq)，并且在室温下搅拌深黄色溶液24小时。添加水(40mL)以猝灭反应物，并且将产物用二氯甲烷(10mL)萃取，用水(2×20mL)洗涤，并经MgSO₄干燥。将有机相蒸发至干，并通过柱色谱法(二氧化硅：5％乙酸乙酯:己烷)纯化，得到为棕色固体的化合物28(10mg，6％)。

化合物28的名称是2,3,11,12-四(戊氧基)-8-苯基三亚苯并[1,2-d]噁唑-6-醇。

化合物28具有以下表征数据：¹ΗΝΜR(300ΜΗz,CDCl₃)δ_Η:10.09(1Η,s),8.48(2H,dd,J 6.86,2.85Hz),7.94(1H,s),7.90(1H,s),7.88(1H,s),7.83(1H,s),7.59–7.56(3H,m),5.95(1H,s br),4.48(2H,t,J 6.60Hz),4.33(2H,t,J 6.51Hz),4.26–4.24(4H,m),2.06–1.93(8H,m),1.64–1.43(16H,m),1.01–0.97(12H,m)ppm。ES⁺MS m/z:728.4([M+Na]⁺25％),707.4([M+H+1]⁺30％),706.4([M+H]⁺85％)。

合成化合物29的方法

化合物29使用以下方法合成。将化合物2(250mg，0.322mmol)溶解在无水CH₂Cl₂(10mL)中，并在N₂气氛下在0℃下搅拌。然后在2小时内添加Br₂在CH₂Cl₂中的0.01M溶液(144mL，1.449mmol)(4×36mL)，并通过TLC监测。通过添加饱和焦亚硫酸氢钠溶液(100mL)猝灭反应物。将产物用二氯甲烷(30mL)萃取，用水(3×30mL)洗涤，经MgSO₄干燥并蒸发至干。然后将粗产物通过柱色谱法(二氧化硅，40％CH₂Cl₂:正己烷)纯化，产生为黄色固体的化合物29(170mg，62％)。

化合物29的名称是1-溴-2,3,6,11,12-五(戊氧基)-8-苯基三亚苯并[1,2-d]噁唑。

化合物29具有以下表征数据：¹ΗΝΜR(300ΜΗz,CDCl₃)δ_Η:10.06(1Η,s),8.71(1H,s),8.56(1H,s),8.34–8.31(2H,m),7.60–7.58(4H,m),4.59(2H,t,J 6.5Hz),4.41(2H,t,J 6.8Hz),4.26–4.20(6H,m),2.06–1.90(10H,m),1.64–1.42(20H,m),1.02–0.94(15H,m)ppm。

合成化合物30的方法

化合物30使用以下方法合成。在氮气气氛下将化合物29(170mg，0.199mmol)、K₂CO₃(410mg，2.97mmol)和Pd(PPh₃)₄(30mg，0.026mmol)溶解在脱气的5:1THF:H₂O混合物(4mL)中。然后添加(4-羟基苯基)硼酸(140mg，1.02mmol)，并在N₂下将反应物加热至回流，持续24小时。将产物用二氯甲烷(30mL)萃取，用水(3×30mL)洗涤并蒸发至干。将粗产物通过柱色谱法(二氧化硅，CH₂Cl₂:正己烷)纯化，产生为棕色固体的非纯化合物30。

化合物30的名称是4-(2,3,6,11,12-五(戊氧基)-8-苯基三亚苯并[1,2-d]噁唑-1-基)苯酚。

化合物30具有以下表征数据：TOF LD⁺m/z:869.49([M+1]⁺70％),868.52([M]⁺70％)。

合成化合物31的方法

化合物31使用以下方法合成。将化合物10(50.7mg，0.071mmol)添加到2颈圆底烧瓶中，将其用N₂吹扫15分钟。然后经由注射器经Suba-Seal(RTM)添加无水CH₂Cl₂(20mL)，并且将棕色搅拌溶液冷却至-78℃。经由注射器经Suba-Seal(RTM)添加三溴化硼(1M的CH₂Cl₂溶液，391μL，0.391mmol，5.5eq)，并且将反应物搅拌4小时。将反应混合物倾倒在碎冰上并搅拌直至冰完全融化，添加4滴盐酸(1M)，并且将产物用乙酸乙酯萃取，用水(2×20mL)洗涤，且经MgSO₄干燥并蒸发至干。粗产物不经进一步纯化而使用。

化合物31的名称是8-甲基三亚苯并[1,2-d]噁唑-2,3,6,11,12-戊醇。

化合物31具有以下表征数据：ES⁺MS m/z:503.26([M+2(OC₅H₁₁)]⁺50％),433.17([M+(OC₅H₁₁)]⁺100％),363.08([M]⁺10％)。

合成化合物32的方法

将粗化合物31(26mg，0.071mmol)、碳酸钾(74mg，0.533mmol)、碘化钾(6mg，0.036mmol)溶解在无水MeCN(35mL)。然后经由移液管添加1(-2-溴乙氧基)-2-(2-甲氧基乙氧基)乙烷(132μL，0.533mmol)，并且将反应物加热至回流，并在CaCl₂干燥管下搅拌20小时。将反应物冷却至室温，并且将产物用乙酸乙酯(20mL)萃取，用水(3×20mL)、盐水(2×20mL)洗涤，并经MgSO₄干燥，产生为棕色固体的粗化合物32。

化合物32的名称是2,3,6,12-四(2-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)乙氧基)-8-甲基-11-(戊氧基)三亚苯并[1,2-d]噁唑。

化合物32具有以下表征数据：ES⁺MS m/z:1017.5([M]⁺100％)。

有利地，化合物32是水溶性的。

合成化合物33的方法

化合物33按以下方法由前体5合成。形成前体5的起始材料使用J.Mater.Chem.C,2017,5,669-682(DOI:10.1039/C6TC04530H)中所述的方法获得。

将5,6-二甲氧基-2,3,8,9,12,13-六(戊氧基)二苯并[fg,op]并四苯(681mg，0.775mmol)溶解在二乙醚(20ml)中，然后添加乙酸(1.33ml，23.24mmol，30当量)，并且将混合物在室温下在氮气气氛下搅拌10分钟，然后添加发烟硝酸(65μL，1.55mmol，2当量)。在氮气下搅拌反应混合物20分钟，然后再添加硝酸(30μL，0.715mmol，0.92eq)，并且将反应混合物在室温下搅拌20分钟。然后用水(10ml)猝灭混合物，并且将有机相用NaOH(1M，2×30mL)洗涤，然后真空干燥，提供为黑色固体的前体5(680mg，95％)。其不经进一步纯化而用于下一步骤。

前体5的名称是5,6-二甲氧基-1-硝基-2,3,8,9,12,13-六(戊氧基)二苯并[fg,op]并四苯。

前体5具有以下表征数据：¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ_H 9.16(1H,s),9.01(1H,s),7.95(1H,s),7.84(1H,s),7.58(1H,s),4.53(2H,t,J 6.7Hz),4.32(2H,t,J 5.1Hz),4.29(2H,t,J 5.3Hz),4.18–4.14(2H,m),4.14(3H,s),4.13(3H,s),3.95(2H,t,J 6.8Hz),3.95(2H,t,J 7.0Hz),2.11–1.82(12H,m),1.69–1.29(24H,m),1.08–0.84(18H,m)。¹³C NMR(101MHz,CDCl₃)δ_C 151.9,149.6,149.3,148.7,148.1,147.9,144.4,143.2,141.5,124.9,124.8,124.7,124.4,123.1,123.1,122.3,119.4,118.6,116.0,109.5,109.3,107.6,107.3,104.9,76.3,74.5,74.0,69.5,68.9,68.8,55.8,30.3,30.3,29.9,29.2,29.0,28.8,28.4,28.3,28.2,28.1,22.6,22.6,22.6,14.1,14.0,14.0。MALDI⁺m/z:924.82([M+H]⁺30％)。

前体6按以下方法合成。将前体5(680mg，0.736mmol)和NiCl₂.6H₂O(552mg，2.33mmol，3当量)溶解在THF:MeOH(20mL，5:4比率)中，制成黄色溶液，然后在15分钟内添加NaBH₄(586mg，15.5mmol，20当量)。将黑色反应混合物在N₂气氛下搅拌40分钟，然后将其用氯仿稀释，并且重力过滤沉淀物，留下棕色有机相，然后将其真空干燥，提供为棕色固体的前体6(614mg，93％)。

前体6的名称是5,6-二甲氧基-2,3,8,9,12,13-六(戊氧基)二苯并[fg,op]并四苯-1-胺。

前体6具有以下表征数据：¹H NMR(300MHz,CDCl3)δ_H 9.09(1H,s),8.98(1H,s),8.67(1H,s),7.97(1H,s),7.90(1H,s),4.76(2H,s),4.40(2H,t,J 6.8Hz),4.34(2H,t,J6.5Hz),4.28(2H,t,J 6.6Hz),4.20(2H,t,J 6.6Hz),4.11(3H,s),4.08(3H,s),3.99(2H,t,J 7.0Hz),3.93(2H,t,J 7.0Hz),2.07–1.88(12H,m),1.66–1.34(24H,m),1.06–0.88(18H,m,J 22.0,12.0,7.1Hz)。¹³C NMR(101MHz,CDCl₃)δ_C 151.2,148.5,148.2,148.0,146.8,143.8,139.8,136.9,125.4,125.0,124.5,124.4,123.6,123.5,122.6,120.5,113.9,111.8,110.0,109.4,108.6,108.4,104.3,73.9,73.8,69.7,69.2,69.0,55.7,30.4,30.3,29.7,29.3,29.1,29.0,28.5,28.4,28.3,22.7,22.6,22.6,14.1,14.0。MALDI⁺m/z:893.8([M+H]⁺100％)。

前体7按以下方法合成。将前体6(147mg，0.181mmol)溶解在无水CH₂Cl₂(20mL)和无水MeCN(20mL)中。在N₂气氛下将溶液冷却至0℃，然后添加亚硝酸叔丁酯(34μL，0.309mmol，1.7当量)和TMSN₃(36μL，0.273mmol，1.5当量)，并且将反应混合物在0℃下搅拌10分钟，然后在室温下搅拌20分钟。然后将溶液真空干燥，并经由快速柱色谱法(二氧化硅，30％DCM，70％正己烷)纯化，提供为白色固体的前体7(120mg，72％)。

前体7的名称是1-叠氮基-5,6-二甲氧基-2,3,8,9,12,13-六(戊氧基)二苯并[fg,op]并四苯。

前体7具有以下表征数据：¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ_H 9.12(1H,s),9.03(1H,s),8.98(1H,s),8.01(1H,s),7.89(1H,s),4.45(2H,t,J 6.7Hz),4.38–4.32(2H,m),4.29(2H,t,J＝6.0Hz),4.11(3H,s),4.09(3H,s),4.01(2H,m),3.94(2H,t,J 6.6Hz),2.13–1.84(12H,m,),1.69–1.32(24H,m),1.04–0.87(18H,m)。¹³C NMR(101MHz,CDCl₃)δ_C 151.6,148.9,148.0,148.0,147.9,147.9,146.3,144.1,127.3,125.4,124.8,124.0,123.9,123.3,123.2,122.8,120.2,119.4,117.6,112.6,109.4,109.1,107.5,104.7,75.3,74.4,74.0,69.6,69.1,69.0,55.8,30.4,30.3,29.5,29.3,29.1,28.9,28.5,28.3,28.2,28.1,22.7,22.6,22.5,14.1,14.0。

化合物33使用以下方法合成。在N₂气氛下，将前体7(100mg；0.13mmol)溶解在无水PhMe(5mL)中，添加到含有辛酸铑二聚体(5mg；0.01mmol)的烧瓶中。然后将此混合物加热至回流并搅拌20小时。将反应物冷却至室温，然后真空干燥，然后将固体经由快速柱色谱法(二氧化硅；95％正己烷:5％乙酸乙酯)纯化，提供为白色固体的化合物33(58mg，50％)。

化合物33的名称是2-丁基-12,13-二甲氧基-5,6,9,10,15-五(戊氧基)二苯并[4,5:9,10]芘并[1,2-d]噁唑。

化合物33具有以下表征数据：¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ_H 10.08(1H,s),9.28(1H,s),9.15(1H,s),8.16(1H,s),8.02(1H,s),4.42(2H,t,J6.0Hz),4.37(2H,d,J＝5.8Hz),4.35–4.29(4H,m,J 6.7,3.3Hz),4.12(3H,s),4.11(3H,s),3.98(2H,t,J＝6.9Hz),3.18(2H,t,J＝7.5Hz),2.09–1.92(10H,m),1.67–1.36(24H,m),1.07–0.90(18H,m)。¹³C NMR(101MHz,CDCl₃)δ_C 166.1,151.3,149.5,148.8,147.8,147.7,144.0,142.4,138.4,137.1,125.5,124.9,124.1,124.0,123.7,123.5,123.0,119.9,118.8,116.1,111.3,109.6,109.4,107.1,104.8,74.5,74.0,69.8,69.0,68.8,55.8,55.7,30.3,30.1,29.3,29.1,28.9,28.7,28.5,28.4,28.3,28.2,22.6,22.5,22.3,14.1,14.0,13.8。MALDI⁺m/z:889.2([M+H]⁺100％)。

合成化合物34的方法

将前体6(47mg；0.053mmol)、苯甲酰氯(30μL，0.265mmol，5当量)和二异丙基乙胺(46μL，0.265mmol，5当量)溶解在无水PhMe(5mL)中，并且在N₂气氛下将混合物加热至回流。将反应混合物搅拌1小时，此时将混合物真空干燥，然后将固体加热至240℃，持续10分钟。将反应物冷却至室温，然后将固体经由快速柱色谱法(二氧化硅；40％CH₂Cl₂，60％正己烷)纯化，得到为白色固体的化合物34(16mg，33％)。

化合物34的名称是12,13-二甲氧基-5,6,9,10,15-五(戊氧基)-2-苯基二苯并[4,5:9,10]芘并[1,2-d]噁唑。

化合物34具有以下表征数据：¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ_H 9.29(1H,s),9.19(1H,s),8.48–8.43(2H,m),8.17(1H,s),8.03(1H,s),7.65–7.59(3H,m),4.53(2H,t,J＝6.9Hz),4.44–4.33(6H,m),4.14(3H,s),4.12(3H,s),3.99(2H,t,J＝6.9Hz),2.15–1.90(10H,m),1.71–1.36(24H,m),1.06–0.80(18H,m)。¹³C NMR(101MHz,CDCl₃)δ_C 166.6,161.8,151.4,149.5,148.9,147.9,147.9,144.1,142.5,138.5,137.7,132.9,131.5,129.5,129.0,128.4,127.6,127.4,125.6,124.8,124.3,124.0,123.8,123.5,123.3,119.8,119.7,116.4,111.3,109.7,109.4,106.9,104.8,74.7,74.1,69.8,69.0,64.5,55.8,55.7,30.4,30.2,29.7,29.3,29.1,28.9,28.5,28.5,28.4,25.6,22.6,22.5,14.2,14.1,14.1,14.1,14.0。ES⁺m/z:910.5([M+H]⁺100％)。

合成化合物35的方法

将前体6(100mg；0.111mmol)、4-氰基苯甲酰氯(92mg，0.555mmol，5当量)和二异丙基乙胺(90μL，0.555mmol，5当量)溶解在无水甲苯(5mL)中，并且将混合物在氮气气氛下加热回流。将反应混合物搅拌1小时，此时将混合物真空干燥，然后将固体加热至240℃，持续10分钟。将反应物冷却至室温，然后将固体经由快速柱色谱法(二氧化硅；40％DCM，60％正己烷)纯化，得到为白色固体的化合物35(17mg，16％)。

化合物35的名称是4-(12,13-二甲氧基-5,6,9,10,15-五(戊氧基)二苯并[4,5:9,10]芘并[1,2-d]噁唑-2-基)苯甲腈。

化合物35具有以下表征数据：¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ10.02(s,1H),9.27(s,1H),9.15(s,1H),8.43(d,J＝8.3Hz,2H),8.13(s,1H),7.99(s,1H),7.84(d,J＝8.3Hz,2H),4.45(t,J＝6.8Hz,2H),4.36(dt,J＝13.0,6.4Hz,6H),4.14(s,3H),4.12(s,3H),3.97(t,J＝6.9Hz,2H),2.12–1.90(m,10H),1.65–1.38(m,24H),1.06–0.88(m,18H)。¹³C NMR(100MHz,CDCl₃)δ159.8,151.9,149.9,149.5,148.5,148.3,144.6,143.0,138.6,137.6,133.0,131.5,128.0,125.8,124.8,124.4,123.9,123.8,123.8,121.1,119.9,118.6,117.0,114.7,111.5,110.1,109.8,107.1,105.2,75.1,74.4,70.1,69.3,56.2,56.1,30.7,30.5,30.0,29.6,29.5,29.3,28.9,28.8,28.7,28.7,23.0,22.9,22.9,14.6,14.5,14.4。MALDI⁺m/z:934.55([M+H]⁺100％)。

合成化合物36的方法

化合物1使用以下方法合成。在N₂下将前体1(100mg，0.132mmol)、苯甲酰氯(92mg，0.658mmol)和N,N-二异丙基乙胺(0.1mL，0.574mmol)在PhMe(5mL)中的溶液加热至并保持回流18小时。将反应物冷却至室温，然后真空蒸发至干，经由快速柱色谱法(二氧化硅，60％CH₂Cl₂:40％正己烷)纯化，得到为棕色固体的中间体(19mg，18％)。

所述中间体具有以下表征数据：¹ΗΝΜRδ_H:(300MHz,CDCl₃)8.55(1H,s),8.45(1H,s),8.07(2H,d,J 7.5Hz),7.78(1H,s),7.74(1H,s),7.72(1H,s),7.71(1H,s),7.59(1H,d,J 7.0Hz),7.54(2H,t,J 7.4Hz),4.28–4.12(10H,m),3.67-3.54(2H,m),2.00–1.85(8H,m),1.70–1.37(20H,m),1.34–1.06(8H,m),1.02–0.90(12H,m),0.83(3H,t,J 7.0),0.75(3H,t,J 7.1)ppm。¹³C NMRδ_C:(100MHz,CDCl₃)174.6,151.0,149.7,148.7,148.4,148.4,144.0,135.1,131.7,130.9,128.5,127.9,126.6,124.7,124.2,123.0,122.6,122.0,110.3,108.1,107.7,106.8,106.7,73.4,70.1,70.0,69.5,69.3,68.8,32.1,30.1,29.9,29.6,29.4,29.3,28.7,28.5,28.5,28.1,22.9,22.7,22.6,14.3,14.3,14.1ppm。MALDI m/z:863.3([M]+100％)。

在N₂下将中间体(100mg，0.116mmol)和劳森试剂(175mg，0.658mmol)在PhMe(5mL)中的溶液加热至并保持回流48小时。将反应物冷却至室温，然后真空蒸发至干。然后在N₂下加热固体并在240℃下保持15分钟。然后将粗黑色固体冷却至室温，并经由快速柱色谱法(二氧化硅，40％CH₂Cl₂:60％正己烷)纯化，得到为绿色固体的化合物36(17mg，19％)。

化合物36的名称是2,3,6,11,12-五(戊氧基)-8-苯基三亚苯并[1,2-d]噻唑。

化合物36具有以下表征数据：¹ΗΝΜRδ_H:(300MHz,CDCl₃)10.51(1H,s),8.24-8.22(2H,m),7.92-7.89(3H,m),7.76(1H,s),7.53-7.52(3H,m),4.43-4.26(10H,m),2.10-1.95(10H,m),1.66-1.57(10H,m),1.53-1.47(10H,m),1.03-1.00(15H,m)ppm。¹³C NMRδ_C:(100MHz,CDCl₃)166.4,152.5,151.5,150.2,149.3,148.3,134.7,130.9,130.0,129.3,127.6,125.7,125.4,124.7,123.8,119.0,112.4,108.9,107.2,106.9,100.9,70.3,70.2,69.7,69.2,69.1,29.7,29.6,29.6,29.5,29.4,28.8,28.8,28.8,23.1,23.0,23.0,23.023.0,14.5,14.5,14.5,14.5ppm。MALDI m/z:791.6([M]+100％)。

合成化合物37的方法

化合物37使用以下方法合成。在N₂下将前体1(100mg，0.132mmol)、4-氰基苯甲酰氯(109mg，0.658mmol)和N,N-二异丙基乙胺(0.1mL，0.574mmol)在PhMe(5mL)中的溶液加热至并保持回流18小时。将反应物冷却至室温，然后真空蒸发至干。在N₂下将粗棕色固体添加到劳森试剂(175mg，0.658mmol)在PhMe(5mL)中的溶液中，加热至并保持回流48小时。将反应物冷却至室温，然后真空蒸发至干。然后在N₂下加热固体并在240℃下保持15分钟。然后将粗黑色固体冷却至室温，并经由快速柱色谱法(二氧化硅，40％CH₂Cl₂:60％正己烷)纯化，得到为黄色固体的化合物37(5mg，5％)。

化合物37的名称是4-(2,3,6,11,12-五(戊氧基)三亚苯并[1,2-d]噻唑-8-基)苯甲腈。

化合物37具有以下表征数据：¹ΗΝΜRδ_H:(300MHz,CDCl₃)10.38(1H,s),8.31(2H,d,J 8.4),7.97-7.88(4H,m),7.79(1H,d,J 8.5),4.41-4.26(10H,m),2.06-1.95(10H,m),1.61-1.55(10H,m),1.51-1.44(10H,m),1.03-0.97(15H,m)ppm。MALDI m/z:816.9([M]+90％),817.9([M+H]⁺100％)。

合成化合物38的方法

化合物38按以下方法由前体8合成。

前体8使用以下方法合成。将化合物3(8-(萘-2-基)-2,3,6,11,12-五(戊氧基)三亚苯并[1,2-d]噁唑)(150mg，0.18mmol，1eq)溶解在CH₂Cl₂(10mL)中，将其在装有Subaseal(RTM)的2颈烧瓶中干燥并脱气10分钟，并且用N₂吹扫10分钟。在N₂下在-10℃下搅拌绿色溶液10分钟，并且经由注射器经Subaseal(RTM)添加三溴化硼(1M的CH₂Cl₂溶液)(0.2mmol，1.1eq)。在N₂下在-10℃下搅拌黑色溶液2小时，然后倾倒在碎冰上并搅拌直到所有冰融化。然后将产物用乙酸乙酯(20mL)萃取，用水(3×50mL)洗涤并蒸发至干，产生棕色固体。然后将产物通过快速柱色谱法(20％EtOAc:正己烷，二氧化硅)纯化，产生为黄色固体的8-(萘-2-基)-2,3,6,12-四(戊氧基)三亚苯并[1,2-d]噁唑-11-醇(31mg，23％)。

前体8的名称是8-(萘-2-基)-2,3,6,12-四(戊氧基)三亚苯并[1,2-d]噁唑-11-醇。

前体8具有以下表征数据。¹ΗΝΜRδ_H:(300MHz,CDCl₃)10.06(1H,s),8.83(1H,s),8.50(1H,dd,J 8.6,1.7),8.05-8.03(1H,m),7.79(1H,d,J 8.7),7.91-7.89(1H,m),7.84(1H,s),7.79(1H,s),7.78(1H,s),7.74(1H,s),7.58-7.56(2H,m),5.97(1H,s),4.42(2H,t,J 6.7),4.29-4.20(6H,m),2.05-1.93(8H,m),1.63-1.45(16H,m),1.05-0.98(12H,m)ppm。¹³C NMRδ_C:(100MHz,CDCl₃)161.7,149.4,148.9,146.0,145.3,143.0,140.9,140.2,134.8,133.2,129.1,128.66,128.0,127.9,127.6,127.2,126.8,124.8,124.7,124.7,124.0,123.6,123.4,116.4,112.7,108.1,107.1,103.7,103.6,69.9,69.8,69.7,69.1,29.3,29.3,29.2,28.6,28.5,28.4,22.8,22.7,14.3,14.2ppm。MALDI m/z:755.65([M]⁺100％),756.66([M+H]⁺70％),757.67([M+1+H]⁺25％)。

将前体8(100mg，0.13mmol)和K₂CO₃(114mg，0.83mmol)在DMF(5mL)中的浆液在用CaCl₂干燥管的情况下加热回流0.5小时，然后添加2-(2-(2-氯乙氧基)乙氧基)乙酸甲酯(114mg，0.40mmol)和KI(75mg，0.5mmol)。将所得浆液进一步加热回流3小时。使反应混合物冷却至室温，并经由抽滤滤出沉淀物。从滤液中真空蒸发溶剂至干，并且将粗固体通过经由快速柱色谱法(二氧化硅，25％EtOAc:75％正己烷)纯化来纯化，得到为黄色固体的化合物38(36mg，30％)。

化合物38的名称是2-(2-(2-((8-(萘-2-基)-2,3,6,12-四(戊氧基)三亚苯并[1,2-d]噁唑-11-基)氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸甲酯。

化合物38具有以下表征数据：¹ΗΝΜRδ_H:(300MHz,CDCl₃)10.16(1H,s),8.83(1H,s),8.50(1H,dd,J 8.6,1.7),8.05-8.03(2H,m),7.91-7.81(5H,m),7.58-7.56(2H,m),4.60(2H,t,J 5.5),4.42(2H,t,J6.7),4.29-4.21(6H,m),4.20(3H,s),3.85-3.65(8H,m),2.05-1.93(8H,m),1.63-1.45(16H,m),1.05-0.98(12H,m)ppm。¹³C NMRδ_C:(100MHz,CDCl₃)173.9,161.7,149.4,148.9,145.9,145.3,142.0,140.8,140.4,134.8,133.1,129.1,128.7,128.0,127.9,127.6,127.2,126.8,124.8,124.7,124.6,124.0,123.6,123.3,116.5,112.7,108.1,107.1,103.7,103.6,71.8,71.4,71.2,70.4,69.8,69.8,69.7,69.0,68.5,29.4,29.3,29.2,28.6,28.5,28.4,22.8,22.7,14.3,14.2ppm。MALDI m/z:915.7([M]⁺100％),916.7([M+H]⁺90％)。元素分析实测值：C,73.41；H,7.56；N,1.54％。C₅₆H₆₉NO₁₀需要C,73.42；H,7.59；N,1.53％。

合成化合物39的方法

化合物39使用以下方法合成。将NaOH(3mg，0.08mmol)在H₂O(1mL)中的溶液添加到化合物38(35mg，0.04mmol)在MeOH(5mL)中的溶液中。将所得溶液加热回流5小时。使反应混合物冷却至室温，并且添加1M HCl水溶液的等分试样，直到不再形成沉淀物。通过抽滤收集沉淀物，得到黄色固体(24mg，70％)。

化合物39的名称是2-(2-(2-((8-(萘-2-基)-2,3,6,12-四(戊氧基)三亚苯并[1,2-d]噁唑-11-基)氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸。

化合物39具有以下表征数据：¹ΗΝΜRδ_H:(300MHz,CDCl₃)10.16(1H,s),8.83(1H,s),8.50(1H,dd,J 8.6,1.6),8.05-8.03(2H,m),7.91-7.81(5H,m),7.58-7.56(2H,m),4.60(2H,t,J 5.5Hz),4.42(2H,t,J 6.7Hz),4.29-4.21(6H,m),3.85-3.65(8H,m),2.05-1.93(8H,m),1.63-1.45(16H,m),1.05-0.98(12H,m)ppm。¹³C NMRδ_C:(100MHz,CDCl₃)175.7,149.4,148.9,145.9,145.3,142.0,140.8,140.4,134.8,133.1,129.1,128.7,128.0,127.9,127.6,127.2,126.8,124.8,124.7,124.6,124.0,123.6,123.3,116.5,112.7,108.1,107.1,103.7,103.6,71.8,71.4,71.2,70.4,69.8,69.8,69.7,69.0,68.5,29.4,29.3,29.2,28.6,28.5,28.4,22.8,22.7,14.3,14.2ppm。MALDI m/z:901.5([M]⁺100％),902.5([M+H]⁺70％)。元素分析实测值：C,73.24；H,7.52；N,1.54％。C₅₅H₆₇NO₁₀需要C,73.23；H,7.55；N,1.55％。

合成化合物40的方法

化合物40使用以下方法合成。将前体8(100mg，0.13mmol)和K₂CO₃(37mg，0.26mmol)在MeCN(5mL)中的浆液在用CaCl₂干燥管的情况下加热回流0.5小时，然后添加4-甲基苯磺酸2-(2-(2-叠氮基乙氧基)乙氧基)乙酯(87mg，0.26mmol)。将所得浆液进一步加热回流24小时。使反应混合物冷却至室温，并经由抽滤滤出沉淀物。从滤液中真空蒸发溶剂至干，并且将粗固体通过经由快速柱色谱法(二氧化硅，25％EtOAc:75％正己烷)纯化来纯化，得到为黄色固体的化合物38(18mg，15％)。

化合物40的名称是11-(2-(2-(2-叠氮基乙氧基)乙氧基)乙氧基)-8-(萘-2-基)-2,3,6,12-四(戊氧基)三亚苯并[1,2-d]噁唑。

化合物40具有以下表征数据：¹ΗΝΜRδ_H:(300MHz,CDCl₃)10.14(1H,s),8.82(1H,s),8.51(1H,dd,J 8.6,1.7),8.06-8.03(2H,m),7.91-7.80(5H,m),7.57-7.55(2H,m),4.59(2H,t,J 5.5Hz),4.41(2H,t,J 6.7Hz),4.29-4.20(6H,m),4.15-4.10(2H,m),3.87-3.82(2H,m),3.69-3.57(4H,m),3.30-3.21(2H,m),2.05-1.93(8H,m),1.63-1.45(16H,m),1.05-0.98(12H,m)ppm。¹³C NMRδ_C:(100MHz,CDCl₃)161.7,149.4,148.8,145.9,145.4,142.9,140.8,140.2,134.7,133.2,129.1,128.7,128.0,127.9,127.6,127.1,126.9,124.8,124.7,124.6,124.0,123.6,123.4,116.4,112.7,108.1,107.2,103.7,103.6,72.5,70.7,70.4,70.1,69.9,69.8,69.7,69.0,50.6,29.32,29.30,29.17,28.54,28.46,28.43,22.75,22.71,14.27,14.21ppm。MALDI m/z:912.9([M]⁺100％),913.9([M+H]⁺90％)。元素分析实测值：C,73.36；H,7.55；N,6.12％。C₅₅H₆₈N₄O₈需要C,73.34；H,7.51；N,6.14％。

合成化合物41的方法

化合物41使用以下方法合成。将前体8(100mg，0.13mmol)和K₂CO₃(37mg，0.26mmol)在MeCN(5mL)中的浆液在用CaCl₂干燥管的情况下加热回流0.5小时，然后添加4-甲基苯磺酸2-(2-(2-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1H-吡咯-1-基)乙氧基)乙氧基)乙酯(101mg，0.26mg)。将所得浆液进一步加热回流24小时。使反应混合物冷却至室温，并经由抽滤滤出沉淀物。从滤液中真空蒸发溶剂至干，并且将粗固体通过经由快速柱色谱法(二氧化硅，二氧化硅，50％EtOAc:50％正己烷)纯化，得到为黄色固体的化合物38(15mg，13％)。

化合物41的名称是2-(2-(2-((8-(萘-2-基)-2,3,6,12-四(戊氧基)三亚苯并[1,2-d]噁唑-11-基)氧基)乙氧基)乙氧基)乙-1-胺。

化合物41具有以下表征数据：¹ΗΝΜRδ_H:(300MHz,CDCl₃)10.13(1H,s),8.82(1H,s),8.50(1H,dd,J 8.6,1.7),8.07-8.03(2H,m),7.91-7.81(5H,m),7.57-7.57(2H,m),4.58(2H,t,J 5.5Hz),4.43(2H,t,J 6.7Hz),4.28-4.20(6H,m),4.14-4.10(2H,m),3.86-3.82(2H,m),3.69-3.57(4H,m),3.17-3.19(2H,m),2.04-1.92(8H,m),1.63-1.44(16H,m),1.04-0.97(12H,m)ppm。¹³C NMRδ_C:(100MHz,CDCl₃)161.7,149.4,148.8,145.9,145.4,142.9,140.8,140.2,134.7,133.2,129.1,128.7,128.0,127.9,127.6,127.1,126.9,124.8,124.7,124.6,124.0,123.6,123.4,116.4,112.7,108.1,107.2,103.7,103.6,72.3,70.6,70.3,70.0,69.9,69.8,69.7,69.0,42.5,29.4,29.3,29.2,28.5,28.5,28.4,22.75,22.7,14.3,14.2ppm。MALDI m/z:886.5([M]⁺100％),887.6([M+H]⁺70％)。

合成化合物44的方法

化合物44使用以下方法合成。在N₂下将前体2(100mg，0.132mmol)、3-氟苯甲酰氯(92mg，0.658mmol)和N,N-二异丙基乙胺(0.1mL，0.574mmol)在PhMe(5mL)中的溶液加热至并保持回流18小时。将反应物冷却至室温，然后真空蒸发至干，经由快速柱色谱法(二氧化硅，60％CH₂Cl₂:40％正己烷)纯化，得到为棕色固体的中间体(19mg，18％)。

将中间体(3-氟-N-(2,3,6,7,10,11-六(戊氧基)三亚苯-1-基)苯甲酰胺)(100mg，0.11mmol)溶解在二甲苯(10mL)中，并将伍林试剂(Woollins reagent)(117.8mg，0.22mmol)添加到烧瓶中。将反应物在回流下搅拌24小时，然后冷却至室温，导致形成灰色沉淀物。将烧瓶的内容物通过滤纸过滤并回收滤液。将滤液蒸发至干，并且通过柱色谱法(二氧化硅，40％二氯甲烷:己烷)和(二氧化硅，1％丙酮:己烷)纯化，产生为黄色固体的8-(3-氟苯基)-2,3,6,11,12-五(戊氧基)三亚苯并[1,2-d][1,3]硒唑(1.8mg)。

化合物44的名称是8-(3-氟苯基)-2,3,6,11,12-五(戊氧基)三亚苯并[1,2-d][1,3]硒唑。

化合物44具有以下表征数据：¹H NMRδ_H(500MHz,CDCl₃)10.40(1H,s),8.00(1H,s),7.97(1H,d,J 9.8Hz),7.95(1H,s),7.92(1H,s),7.90(1H,d,J 7.8Hz),7.87(1H,s),7.49(1H,dd,J 14.1,8.5Hz),7.24-7.21(1H,m),4.45(2H,t,J 6.8Hz),4.42(2H,t,J 6.7Hz),4.28(6H,dt,J 13.4,6.6Hz),2.06-1.94(10H,m),1.61-1.44(20H,m),1.03-0.93(15H,m)ppm。TOF LD⁺m/z＝860.4([M+2+H]⁺30％),859.4([M+2]⁺60％),858.4([M+H]⁺90％),857.4([M]⁺100％),856.4([M-2+H]⁺40％),855.4([M-2]⁺60％),854.4([M-3]⁺30％),825.5([TpOxPhmF+MeOH]⁺),793.4([TpOxPhmF]⁺)。

合成化合物45的方法

化合物45使用以下方法合成。将前体2(190mg，0.25mmol，1eq)和4-甲氧基苯甲酰氯(213mg，1.25mmol，5eq)溶解在无水甲苯(7mL)中，并且添加N,N-二异丙基乙胺(0.2mL，1.25mmol，5eq)。将溶液搅拌并在CaCl₂干燥管下加热至回流2小时。然后将溶液蒸发至干，并且将粗固体加热至240℃，持续10分钟。将粗产物重结晶(二氯甲烷:己烷，1:5)，然后通过二氧化硅塞(60％二氯甲烷:己烷)纯化，产生为灰白色固体的8-(4-甲氧基苯基)-2,3,6,11,12-五(戊氧基)三亚苯并[1,2-d]噁唑(53mg，26％)。

化合物45的名称是8-(4-甲氧基苯基)-2,3,6,11,12-五(戊氧基)三亚苯并[1,2-d]噁唑。

化合物45具有以下表征数据：¹ΗΝΜRδ_H:(300MHz,CDCl₃)10.15(1H,s),8.32(2H,d,J 8.9Hz),7.93–7.87(4H,m),7.06(2H,d,J8.9Hz),4.46(4H,t,J 7.0Hz),4.28–4.24(6H,m),3.93(3H,s),2.12–1.94(10H,m),1.65–1.43(20H,m),1.03–0.96(15H,m)ppm。MALDI m/z:804.9([M]⁺100％),805.9([M+H]⁺70％),806.9([M+1+H]⁺25％)。

合成化合物46的方法

化合物46使用以下方法合成。在N₂下将前体1(100mg，0.132mmol)、苯甲酰氯(92mg，0.658mmol)和N,N-二异丙基乙胺(0.1mL，0.574mmol)在PhMe(5mL)中的溶液加热至并保持回流18小时。将反应物冷却至室温，然后真空蒸发至干，经由快速柱色谱法(二氧化硅，60％CH₂Cl₂:40％正己烷)纯化，得到为棕色固体的中间体(19mg，18％)。

中间体具有以下表征数据：¹ΗΝΜRδ_H:(300MHz,CDCl₃)8.55(1H,s),8.45(1H,s),8.07(2H,d,J 7.5Hz),7.78(1H,s),7.74(1H,s),7.72(1H,s),7.71(1H,s),7.59(1H,d,J7.0Hz),7.54(2H,t,J 7.4Hz),4.28–4.12(10H,m),3.67-3.54(2H,m),2.00–1.85(8H,m),1.70–1.37(20H,m),1.34–1.06(8H,m),1.02–0.90(12H,m),0.83(3H,t,J 7.0Hz),0.75(3H,t,J 7.1Hz)ppm。¹³C NMRδ_C:(100MHz,CDCl₃)174.6,151.0,149.7,148.7,148.4,148.4,144.0,135.1,131.7,130.9,128.5,127.9,126.6,124.7,124.2,123.0,122.6,122.0,110.3,108.1,107.7,106.8,106.7,73.4,70.1,70.0,69.5,69.3,68.8,32.1,30.1,29.9,29.6,29.4,29.3,28.7,28.5,28.5,28.1,22.9,22.7,22.6,14.3,14.3,14.1ppm。MALDI m/z:863.3([M]+100％)。

在N₂下将中间体(100mg，0.116mmol)和劳森试剂(175mg，0.658mmol)在PhMe(5mL)中的溶液加热至并保持回流48小时。将反应物冷却至室温，然后真空蒸发至干。然后在N₂下加热固体并在240℃下保持15分钟。然后将粗黑色固体冷却至室温，并经由快速柱色谱法(二氧化硅，40％CH₂Cl₂:60％正己烷)纯化，得到为绿色固体的化合物46(17mg，19％)。

化合物46的名称是2,3,6,11,12-五(戊氧基)-8-苯基三亚苯并[1,2-d]噻唑。

化合物46具有以下表征数据：¹ΗΝΜRδ_H:(300MHz,CDCl₃)10.51(1H,s),8.24-8.22(2H,m),7.92-7.89(3H,m),7.76(1H,s),7.53-7.52(3H,m),4.43-4.26(10H,m),2.10-1.95(10H,m),1.66-1.57(10H,m),1.53-1.47(10H,m),1.03-1.00(15H,m)ppm。¹³C NMRδ_C:(100MHz,CDCl₃)166.4,152.5,151.5,150.2,149.3,148.3,134.7,130.9,130.0,129.3,127.6,125.7,125.4,124.7,123.8,119.0,112.4,108.9,107.2,106.9,100.9,70.3,70.2,69.7,69.2,69.1,29.7,29.6,29.6,29.5,29.4,28.8,28.8,28.8,23.1,23.0,23.0,23.023.0,14.5,14.5,14.5,14.5ppm。MALDI m/z:791.56([M]+100％)。

合成化合物47的方法

化合物47使用以下方法合成。在N₂下将前体1(100mg，0.132mmol)、4-氰基苯甲酰氯(109mg，0.658mmol)和N,N-二异丙基乙胺(0.1mL，0.574mmol)在PhMe(5mL)中的溶液加热至并保持回流18小时。将反应物冷却至室温，然后真空蒸发至干。在N₂下将粗棕色固体添加到劳森试剂(175mg，0.658mmol)在PhMe(5mL)中的溶液中，加热至并保持回流48小时。将反应物冷却至室温，然后真空蒸发至干。然后在N₂下加热固体并在240℃下保持15分钟。然后将粗黑色固体冷却至室温，并经由快速柱色谱法(二氧化硅，40％CH₂Cl₂:60％正己烷)纯化，得到为黄色固体的化合物47(5mg，5％)。

化合物47的名称是4-(2,3,6,11,12-五(戊氧基)三亚苯并[1,2-d]噻唑-8-基)苯甲腈。

化合物47具有以下表征数据：¹ΗΝΜRδ_H:(300MHz,CDCl₃)10.38(1H,s),8.31(2H,d,J 8.4Hz),7.97-7.88(4H,m),7.79(1H,d,J 8.5Hz),4.41-4.26(10H,m),2.06-1.95(10H,m),1.61-1.55(10H,m),1.51-1.44(10H,m),1.03-0.97(15H,m)ppm。MALDI m/z:816.9([M]+90％),817.9([M+H]+100％)。

现在参考表1，显示了化合物1至6的发光数据。

现在参考表2至4，提供了能够在相同波长下吸收而在不同波长下发射的化合物对的发光数据。

表2：对1的发光数据

表3：对2的发光数据

表4：对3的发光数据

实施例1：使人肝脏可视化

体外测试

为了测试四氢呋喃(THF)对肝细胞的相对毒性，将Huh-7细胞(用于肝细胞模型的肝癌细胞系)用CMFDA(CellTracker Green，在DMSO中，Invitrogen)标记，然后用半对数浓度的THF(0.1％、0.3％、1％、3％)处理1小时。然后使用Zeiss primovert荧光显微镜对细胞进行活体成像。

细胞图像表明，在0.1％THF和0.3％THF下，与参照相比，细胞培养物没有差异。在1％THF和3％THF下，记录到的死细胞数增加。

离体测试

所有荧光团都是使用先前被排斥用于移植的所捐献的人组织来测试的。将所有试剂在预热的杜尔贝科改良的伊格尔培养基(DMEM)或CO₂非依赖性培养基(都来自Invitrogen)中稀释至工作浓度，然后灌注到肝片中，持续45分钟。同时使用膜和核染料来使肝脏内的其他细胞结构可视化。然后使用多光子显微术(825nm)对组织进行成像。所有荧光团都以1μg/ml使用(得到0.1％的媒介物，为DMSO或THF)。使用DMSO作为溶剂进行TpOx-2-Nap(绿色荧光团)的测试。尽管这产生有限的溶解度，但是绿色荧光仍然可见。使用市售红色细胞膜染料(CMFDA)进行比较，已经将其灌注通过来自相同供体的单独组织块。当使用TpOx-Ph(蓝色荧光团)时，使用THF作为溶剂，产生更亮且更少的点状荧光。

图1显示灌注了TpOx-2-Nap的离体肝脏的多光子显微图像(10)。发现绿色荧光团有效地灌注到整个人组织中并进入细胞中。在肝细胞的细胞质内观察到扩散绿色荧光(12)，所述细胞质由被市售染料染成红色的细胞膜(14)界定。图像中的亮绿色斑点(16)表明T细胞中荧光团的显著吸收。组织在数小时内保持荧光，表明荧光团没有从细胞中泄漏出来。

图2A和图2B显示灌注了TpOx-Ph(蓝色荧光团)的离体肝脏的多光子显微图像。亮区表明荧光团已被肝细胞吸收的位置。在图像的中心可以看到黑色区域(22)。此区域(22)是肝静脉，由于静脉内完全缺乏荧光团，其在图像中显示为黑色区域。荧光团保留在肝细胞内提供静脉与肝组织之间的良好对比，使得能够在数小时内观察静脉。

这些结果证实，本文所述的化合物适于活组织成像，因为它们很好地渗透到组织中，能够穿过细胞膜，并提供亮发射。

Claims (25)

1.一种用于使生物组织或流体成像的组合物，其包含式(A)的化合物和生物学上可接受的稀释剂或载体，

(A)

其中X表示氮原子、氧原子、硫原子、磷原子或硒原子中的一种；

R表示芳族基团和/或脂族基团；

p是1至2的整数；

q和s独立地是1、2、3或4的整数；

Y¹、Y²和Y³独立地表示氢原子、氘原子、氟原子、氯原子、溴原子、取代或未取代的烷基基团、取代或未取代的芳基基团、聚二醇基团(例如包含聚乙二醇部分的基团)、氧原子(例如羟基基团或形成烷氧基基团的烷基化氧原子)、氮原子(例如伯胺、仲胺或叔胺基团)、氰基基团、硝基基团；和/或

其中Y¹、Y²和Y³中的两个或更多个可以组合在一起形成稠环(例如稠合芳环)。

2.如权利要求1所述的组合物，其中所述发光化合物能够穿过细胞膜。

3.如权利要求1或权利要求2所述的组合物，其中所述发光化合物能够在细胞内保留至少10分钟。

4.如权利要求1至3中任一项所述的组合物，其中所述发光化合物优先在T细胞中积累。

5.如任一前述权利要求所述的组合物，其中所述生物学上可接受的稀释剂或载体包含磷酸盐缓冲盐水、盐水、去离子水、血液、细胞培养基或血浆。

6.如任一前述权利要求所述的组合物，其中所述发光化合物以0.1μg/ml至20μg/ml的浓度存在于所述组合物中。

7.如任一前述权利要求所述的组合物，其中所述组合物包含两种或更多种不同的发光化合物，其中至少一种具有所述通式(A)。

8.如任一前述权利要求所述的组合物，其中所述组合物包含发射第一波长的光的式(A)的第一发光化合物和发射高于所述第一波长的第二波长的光的式(A)的第二发光化合物，其中所述第一化合物和所述第二化合物两者都能够吸收低于所述第一波长和所述第二波长两者的第三波长的光。

9.如任一前述权利要求所述的组合物，其中所述式(A)的发光化合物缀合至另一分子。

10.如任一前述权利要求所述的组合物，其中所述组合物包含已经用所述发光化合物染色的细胞。

11.式(A)的化合物或如权利要求1至10中任一项所述的组合物在使用荧光显微术获得生物组织或流体的图像的方法中的用途。

12.如权利要求11所述的用途，其中所述生物组织或流体是体内的。

13.如权利要求11所述的用途，其中所述生物组织或流体是体内或离体的。

14.一种获得受试者中体内生物组织或流体的图像的方法，所述方法包括使用荧光显微术获得所述受试者的图像，其中所述受试者已经施用了式(A)的发光化合物或如权利要求1至10中任一项所述的组合物。

15.如权利要求14所述的方法，其还包括在获得所述图像之前，向所述受试者施用式(A)的化合物或如权利要求1至10中任一项所述的组合物。

16.如权利要求14或15所述的方法，其中所述方法用于分析所述受试者中的健康生物组织或流体。

17.如权利要求14至16中任一项所述的方法，其中所述发光化合物或组合物经局部、口服或肠胃外施用。

18.一种获得先前从受试者获得的生物组织或流体的图像的方法，所述方法包括：

-向所述生物组织或流体施用式(A)的发光化合物或如权利要求1至10中任一项所述的组合物或使所述生物组织或流体与式(A)的发光化合物或如权利要求1至10中任一项所述的组合物接触；以及

-使用荧光显微术获得所述生物组织或流体的图像。

19.如权利要求11至13中任一项所述的用途或如权利要求14至18中任一项所述的方法，其中所述荧光显微术是多光子显微术。

20.如权利要求11至13中任一项所述的用途或如权利要求14至19中任一项所述的方法，其中所述流体是血液。

21.如权利要求11至13中任一项所述的用途或如权利要求14至20中任一项所述的方法，其中所述生物组织是结缔组织、肌肉组织、神经组织、上皮组织、脉管系统组织、淋巴组织、内分泌系统的组织、腺体或器官。

22.一种式(A)的发光化合物或如权利要求1至10中任一项所述的组合物，其用于诊断受试者的疾病或疾患的方法，其中所述疾病或疾患选自：癌症、炎症、水肿、心血管病症、局部缺血、自身免疫性疾病、感染、皮肤病、眼病、神经病症或损伤。

23.一种用于确定受试者接受的治疗或疗法的有效性的方法，所述方法包括：

(i)使用荧光显微术获得受试者的图像，其中所述受试者已经施用了式(A)的发光化合物或本发明第一方面的组合物；或

(ii)使用荧光显微术获得从所述受试者获得的生物组织或流体的图像，所述方法还包括向所述生物组织或流体施用式(A)的发光化合物或本发明第一方面的组合物或使所述生物组织或流体与式(A)的发光化合物或本发明第一方面的组合物接触。

24.根据权利要求22使用的发光化合物或组合物或如权利要求23所述的方法，其中所述方法还包括将获得的图像与参考图像进行比较。

25.一种用于使生物组织或流体成像的试剂盒，所述试剂盒包括：

-式(A)的发光化合物或如权利要求1至10中任一项所述的组合物；以及

-使用说明书。

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