CN114574496B - 核苷类衍生物改性的核酸适体sgc8 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种核苷类衍生物改性的核酸适体sgc8，其序列包括如SEQ NO:1所示的序列，所述核酸适体的至少一个核苷酸由核苷类衍生物替换，和/或末端经核苷类衍生物连接修饰；所述的核苷类衍生物为胸腺嘧啶核苷衍生物或胞嘧啶核苷衍生物。
Description
技术领域
本发明属于生物技术和遗传工程技术领域，具体涉及一种核酸适体，其由核苷类衍生物改性，用于改善其稳定性，增加其成药性，以及改善其在体内应用是半衰期短以及肾清除等问题。
背景技术
核酸适体
核酸适体是一段单链的DNA或RNA，通常通过筛选(指数富集配体进化技术,SELEX)的方法得到，与配体具有强的亲和力和特异性[1,2]。当前已有数百条基于各种靶标的核酸适体，如器官，细胞，组织，蛋白，小分子等等。其中基于肿瘤细胞和肿瘤相关蛋白的也有上百条[3]。目前有很多核酸适体已经处于临床研究阶段，但FDA批准上市的目前只有一条靶向VEGF，用于老年黄斑性病变的核酸适体[4]。但是，稳定性和快速肾清除是核酸适体应用中的主要问题。
核酸适体的改性
当前核酸适体的改造方法有很多，主要包括末端修饰，糖环修饰，磷酸二酯键修饰，碱基修饰，镜像修饰，环化修饰，二聚化、多聚化修饰等。其中末端修饰包括生物素\荧光素等修饰，胆固醇\脂肪链修饰，PEG修饰等。糖环修饰包括2位置换，4位置换等，锁核酸等。磷酸二酯键的修饰包括磷酸化\甲基化修饰，三唑改性等。当前临床实验阶段的核酸适体往往采用多种修饰相结合的方式。如当前FDA批准的核酸适体Macuge进行了碱基2位F代修饰，末端倒T修饰，末端PEG修饰等[5]。
药物碱基
目前药物碱基有两种类型,一种是在原有碱基的基础上修饰药物,构成的药物碱基,另一种是将药物合成碱基类似物方便固相合成连接，例如5-FU(5氟脲嘧啶)，是尿嘧啶5位上的氢被氟取代；吉西他滨是在糖环上进行氟代修饰，形成了胞嘧啶的类似物。而后有文献报道将药物构建成碱基类似物从而固相合成至DNA链上。
核酸适体连接药物碱基后使核酸适体本身有了药物活性，而药物则有了核酸适体的靶向性。根据目前文献的报道，药物碱基并不影响核酸适体的结合能力和亲和力[6,7]。
核酸适体sgc8
核酸适体sgc8是2006年筛选得到，2008年鉴定其靶标为PTK7。当前已经被广泛的用于肿瘤靶向成像/光动力学治疗等科研项目中[8,9]。本专利拟通过药物碱基的修饰改善其稳定性，增加其成药性，改善其在体内应用半衰期短及肾清除等问题。
参考文献：
[1]Craig Tuerk,Larry Gold.Science,1990,249,505-510.
[2]Andrew D Ellingtom,Jack W.Szostak.Nature,1990,346,818-822.
[3]Parashar,Abhishek.Journal of Clinical and Diagnostic Research.2016
[4]Keith E Maier and Matthew Levy.Molecular Therapy Methods&ClinicalDevelopment.2016,5,16014
[5]Jayeeta Banerjee.Marit N Hamilton.J Mol Med 2013.
[6]Sorah Yoon,Jhon J.Rossi,el al.Mol Ther Nucleic Acids,2017,6,80-88.
[7]Sven Kruspe,Ulrich Hahn,2014,9,1998-2011.
[8]Dihua Shangguan,Ying Li,Zhiwen Tang,et.al.PNAS,2006,103,11838-11843.
[9]Dihua Shangguan,et.al.J Proteome Res,2008,2133-2139.
发明内容
本发明提供了一种核苷类衍生物改性的核酸适体，以改善核酸适体sgc8的稳定性、成药性，使其能够用于靶向性成像以及治疗等方面。
本发明涉及了一种核苷类衍生物改性的核酸适体，包括如SEQ NO:1所示的序列，所述核酸适体的至少一个核苷酸由核苷类衍生物替换，和/或末端经核苷类衍生物连接修饰。
优选地，所述的核苷类衍生物为胸腺嘧啶核苷衍生物或胞嘧啶核苷衍生物。
优选地，所述至少两个核苷酸由核苷类衍生物替换，优选地为两个核苷酸、四个核苷酸、六个核苷酸、八个核苷酸或十个核苷酸；优选地，所述替换发生在所述核酸适体的第9位-34位、和/或第1位-8位、和/或第35位-第41位；优选地，所述核酸适体的末端连接包括至少一个核苷类衍生物的核苷酸片段。
本发明的一个实施例中，所述核苷类衍生物为5-FU或其衍生物，以替换所述核酸适体的目标位置的胸腺嘧啶核苷酸；所述5-FU或其衍生物替换所述核酸适体的第2位、第4位、第8位、第11位、第27位、第30位、第32位、第37位或第38位的一个、两个或多个；优选地，所述5-FU或其衍生物替换所述核酸适体的第11位、第27位、第30位和第32位。
优选地，所述核酸适体的5’端连接包括至少一个5-FU或其衍生物的核苷酸片段，所述核苷酸片段的长度为至少5个核苷酸或其衍生物；优选地，所述核苷酸片段为5’-FFFFF-。
本发明的另外实施例中，所述核苷类衍生物为吉西他滨或其衍生物，其替换所述核酸适体的胞嘧啶核苷酸；所述吉西他滨或其衍生物替换所述核酸适体的第9位-34位、和/或第1位-8位的胞嘧啶核苷酸；更优选地，所述吉西他滨或其衍生物替换所述核酸适体的第10位、第13位、第15位、第16位、第18位、第19位、第29位、第34位的一个或多个胞嘧啶核苷酸；所述核酸适体5’段连接包括至少一个吉西他滨或其衍生物的核苷酸片段，所述核苷酸片段的长度为至少7个核苷酸或其衍生物；优选地，所述核苷酸片段为5’-T(Gem)T(Gem)T(Gem)-或5’-T(Gem)T(Gem)T(Gem)T-。
核苷类衍生物改性的核酸适体，所述核酸适体的核苷酸同时分别被5-FU或其衍生物和吉西他滨或其衍生物替换，和/或末端经核苷类衍生物连接修；所述5-FU或其衍生物替换所述核酸适体的第2位、第4位、第8位、第11位、第27位、第30位、第32位、第37位或第38位的一个、两个或多个；所述吉西他滨或其衍生物替换所述核酸适体的第10位、第13位、第15位、第16位、第18位、第19位、第29位、第34位的一个或多个胞嘧啶核苷酸。
本发明的具体实施例中，所述5-FU或其衍生物替换所述核酸适体的第11位、第27位、第30位、第32位，所述吉西他滨或其衍生物替换所述核酸适体的第10位、第13位、第15位、第16位、第18位、第19位、第29位；或者，所述5-FU或其衍生物替换所述核酸适体的第11位、第27位、第30位、第32位，所述吉西他滨或其衍生物替换所述核酸适体的第3位、第7位、第10位、第13位、第15位、第16位、第18位、第19位、第29位、第34位；或者，所述5-FU或其衍生物替换所述核酸适体的第2位、第4位、第8位、第11位、第27位、第30位、第32位、第37位和第38位，所述吉西他滨或其衍生物替换所述核酸适体的第10位、第13位、第15位、第16位、第18位、第19位、第29位；或者，所述5-FU或其衍生物替换所述核酸适体的第2位、第4位、第8位、第11位、第27位、第30位、第32位、第37位和第38位，所述吉西他滨或其衍生物替换所述核酸适体的第3位、第7位、第10位、第13位、第15位、第16位、第18位、第19位、第29位。
优选地，所述核酸适体的5’端和/或3’端修饰连接包括一个或多个核苷类衍生物的核苷酸片段。
本发明另涉及的核苷酸类衍生物改性的核酸适体，如上所述的核苷类衍生物改性的核酸适体，其末端由C18修饰、PEG修饰或倒T修饰(invert dT)。
本发明涉及的核苷类衍生物改性的核酸适体，用于肿瘤靶向成像或光动力学治疗中用于成像的用途，和/或用于制备治疗细胞增殖性疾病药物的用途。
附图说明
图1是未改性的序列sgc8；
图2是环部进行了4个5-FU取代的序列；
图3是全序列进行5-FU取代的序列；
图4是末端进行5个5-FU修饰并且环部进行了4个5-FU取代的序列；
图5是末端进行5个5-FU修饰的序列；
图6是环部进行了7个吉西他滨修饰的序列；
图7是序列进行全部吉西他滨取代胞嘧啶的序列；
图8是末端连接了3个吉西他滨的序列；
图9是全取代加末端修饰吉西他滨的序列；
图10是环部进行吉西他滨取代胞嘧啶的序列；
图11是吉西他滨全取代及环部5-FU取代的序列；
图12是本发明的一个实施例中5-FU和吉西他滨(Gem)改性的核酸适体。
图13是本发明一个实施例中的5-FU和吉西他滨(Gem)改性的核酸适体。
图14是本发明实施例涉及的改性核酸适体与细胞表面结合能力变化，此变化通过结合细胞表面的核酸适体的荧光强度。
图15是本发明实施例涉及的改性核酸适体的体外稳定性检测。
图16是本发明实施例涉及的改性核酸适体的体内稳定性检测。
图17是本发明实施例涉及的改性核酸适体用于体外药物活性检测的结果。
图18是本发明实施例涉及的改性核酸适体用于体内药物活性检测的结果。
具体实施方式
结合说明书附图和具体实施例对本发明做进一步描述，以便于更好地理解本发明，但不能因此理解为限定本发明。
本发明所涉及核酸适体首次记载在上述文献8中(Dihua Shangguan,Ying Li,Zhiwen Tang,et.al.PNAS,2006,103,11838-11843)，命名sgc8。此核酸适配体sgc8经cell-SELEX(指数富集的配体系统进化技术，Systematic Evolution of Ligands byExponential Enrichment)筛选得到；利用培养前体T细胞急性淋巴细胞白血病细胞系、CCRF-CEM细胞系用作核酸适配体的筛选，并且实验证实sgc8能够识别培养的白血病T细胞，不能识别正常CD3-阳性T细胞或其他正常骨髓细胞，同时能够识别其他T细胞急性淋巴细胞白血病细胞系，Sup-T1细胞系，Molt-4细胞系和Jurkat细胞系；所述核酸适体sgc8的结构如图1所示，其序列如下：
5’-ATCTAACTGCTGCGCCGCCGGGAAAATACTGTACGGTTAGA-3’(SEQ ID NO:1)。
本发明涉及利用核苷类衍生物改性的核酸适体，包括如SEQ NO:1所示的序列，其序列经核苷类衍生物改性以为了改善核酸适体sgc8的稳定性、增强sgc8的成药性、改善sgc8体内易于肾消除、半衰期短的问题。核苷类衍生物(或称为核苷类似物)，其结构或其代谢物与天然核苷酸十分相似，或者是经过修饰和改造的核苷类化合物，在合成代谢过程中掺入DNA中。本申请的具体实施例中，采用核苷类衍生物替换上述核酸适体的一个或多个核苷酸，例如某个具体实施例中，优选地为两个核苷酸、四个核苷酸、六个核苷酸、八个核苷酸或十个核苷酸。
本发明的具体实施方案中，所采用的核苷类衍生物为胸腺嘧啶核苷衍生物或胞嘧啶核苷衍生物。此类核苷类衍生物替换所述核酸适体特定位置上的胸腺嘧啶或胞嘧啶，例如核酸适体的第9位-34位、和/或第1位-8位、和/或第35位-第41位。本申请的某个具体实施方案中，核苷类衍生物为5-FU(5-氟尿嘧啶，缩写为F)或其衍生物，以能够替换上述核酸适体的胸腺嘧啶核苷酸；例如5-FU或其衍生物替换所述核酸适体的第2位、第4位、第8位、第11位、第27位、第30位、第32位、第37位或第38位的一个、两个或多个，例如图2-图5所示。在某些具体的实施方案中，所述5-FU或其衍生物替换所述核酸适体的第11位、第27位、第30位和第32位。
本申请的另外的实施方式中，上述的核苷类衍生物为胞嘧啶核苷衍生物。例如，本发明某个具体实施方式中，采用吉西他滨(化合物)或其衍生物(缩写为Gem)，替换上述核酸适体的胞嘧啶核苷酸，例如吉西他滨替换所述核酸适体第9位-34位、和/或第1位-8位的胞嘧啶核苷酸。在某些具体实施方式中，吉西他滨或其衍生物替换核酸适体的第10位、第13位、第15位、第16位、第18位、第19位、第29位、第34位的一个或多个胞嘧啶核苷酸，例如图6-图9。
本发明的某些实施例中，所述核酸适体sgc8的核苷酸在特定位置上分别被5-FU或其衍生物和吉西他滨或其衍生物分别替换或取代，和/或其末端经核苷类衍生物连接修饰。例如，所述5-FU或其衍生物替换所述核酸适体的第2位、第4位、第8位、第11位、第27位、第30位、第32位、第37位或第38位的一个、两个或多个；所述吉西他滨或其衍生物替换所述核酸适体的第10位、第13位、第15位、第16位、第18位、第19位、第29位、第34位的一个或多个胞嘧啶核苷酸。参照图10-图13所示，在发明某些具体实施例中，所述5-FU或其衍生物替换所述核酸适体的第11位、第27位、第30位、第32位，所述吉西他滨或其衍生物替换所述核酸适体的第10位、第13位、第15位、第16位、第18位、第19位、第29位；在其替换性实施例中，所述5-FU或其衍生物替换所述核酸适体的第11位、第27位、第30位、第32位，所述吉西他滨或其衍生物替换所述核酸适体的第3位、第7位、第10位、第13位、第15位、第16位、第18位、第19位、第29位、第34位；在另外替换性实施例中，所述5-FU或其衍生物替换所述核酸适体的第2位、第4位、第8位、第11位、第27位、第30位、第32位、第37位和第38位，所述吉西他滨或其衍生物替换所述核酸适体的第10位、第13位、第15位、第16位、第18位、第19位、第29位；在另外替换性实施例中，所述5-FU或其衍生物替换所述核酸适体的第2位、第4位、第8位、第11位、第27位、第30位、第32位、第37位和第38位，所述吉西他滨或其衍生物替换所述核酸适体的第3位、第7位、第10位、第13位、第15位、第16位、第18位、第19位、第29位。
本申请的某些特定的具体实施方式中，核酸适体或核苷类衍生物改性的核酸适体的末端可以经过修饰以进一步提高核酸适体sgc8的稳定性或成药性；例如，核酸适体的5’端连接包括至少一个5-FU或其衍生物的核苷酸片段，或者连接包括至少一个吉西他滨或其衍生物的核苷酸片段；所述核苷酸片段包括至少7个核苷酸或其衍生物，例如某些具体实施例中，核苷酸片段包括5个核苷酸或其衍生物；在另外的具体实施例中，核苷酸片段包括7个核苷酸或其衍生物。本申请的具体实施例中，此核苷酸片段可以为5’-FFFFF-。在另外具体实施例中，此核苷酸片段为5’-T(Gem)T(Gem)T(Gem)-。在又另外具体实施例中，此核苷酸片段为5’-T(Gem)T(Gem)T(Gem)-T-。
本申请另外的实施例中，为了能够提高本发明涉及的核酸适体的稳定性或使用性，利用稳定基团对核酸适体的末端进行修饰；例如核酸适体的末端由C18修饰、PEG修饰或倒T修饰。
下面结合具体的实施例对本申请做详细的说明。
通过固相合成技术，根据核酸适体sgc8的序列，合成过程中分别利用5-FU和吉西他滨替换核酸适体的部分胸腺嘧啶核苷酸和胞嘧啶核苷酸，并且5’端连接核苷酸片段。
实施例1
本实施例得到的5-FU改性的核酸适体，其序列如下，结构如图2所示，称为1-sgc8，
5’-ATCTAACTGC(5-FU)GCGCCGCCGGGAAAA(5-FU)AC(5-FU)G(5-FU)ACGGTTAGA-3’。
实施例2
本实施例得到的5-FU改性的核酸适体，其序列如下，结构如图3所示，称为2-sgc8，
5’-A(5-FU)C(5-FU)AAC(5-FU)GC(5-FU)GCGCCGCCGGGAAAA(5-FU)AC(5-FU)G(5-FU)ACGG(5-FU)(5-FU)AGA-3’。
实施例3
本实施例得到的5-FU改性的核酸适体，其序列如下，结构如图4所示，称为3-sgc8，
5’-(5-FU)(5-FU)(5-FU)(5-FU)(5-FU)ATCTAACTGC(5-FU)GCGCCGCCGGGAAAA(5-FU)AC(5-FU)G(5-FU)ACGGTTAGA-3’。
实施例4
本实施例得到的5-FU改性的核酸适体，序列如下，其结构如图5所示，称为4-sgc8，
5’-(5-FU)(5-FU)(5-FU)(5-FU)(5-FU)ATCTAACTGCTGCGCCGCCGGGAAAATACTGTACGGTTAGA-3’。
实施例5
本实施例得到的吉西他滨(Gem)改性的核酸适体，序列如下，其结构如图6所示，称为5-sgc8，
5’-ATCTAACTG(Gem)TG(Gem)G(Gem)(Gem)G(Gem)(Gem)GGGAAAATA(Gem)TGTACGGTTAGA-3’。
实施例6
本实施例得到的吉西他滨(Gem)改性的核酸适体，序列如下，其结构如图7所示，称为6-sgc8，
5’-AT(Gem)TAA(Gem)TG(Gem)TG(Gem)G(Gem)(Gem)G(Gem)
(Gem)GGGAAAATA(Gem)TGTA(Gem)GGTTAGA-3’。
实施例7
本实施例得到的吉西他滨(Gem)改性的核酸适体，序列如下，其结构如下图8所示，称为7-sgc8，
5’-T(Gem)T(Gem)T(Gem)ATCTAACTGCTGCGCCGCCGGGAAAATACTGTACGGTTAGA-3’。
实施例8
本实施例得到的吉西他滨(Gem)改性的核酸适体，序列如下，其结构如下图9所示，称为8-sgc8，
5’-T(Gem)T(Gem)T(Gem)TATCTAACTG(Gem)TG(Gem)G(Gem)(Gem)G(Gem)(Gem)GGGAAAATA(Gem)TGTACGGTTAGA-3’。
实施例9
本实施例得到的5-FU和吉西他滨(Gem)改性的核酸适体，序列如下，其结构如下图10所示，称为9-sgc8，
5’-ATCTAACTG(Gem)(5-FU)G(Gem)G(Gem)(Gem)G(Gem)(Gem)GGGAAAA(5-FU)A(Gem)(5-FU)G(5-FU)ACGGTTAGA-3’。
实施例10
本实施例得到的5-FU和吉西他滨(Gem)改性的核酸适体，序列如下，其结构如下图11所示，称为10-sgc8，
5’-AT(Gem)TAA(Gem)TG(Gem)(5-FU)G(Gem)G(Gem)(Gem)G(Gem)(Gem)GGGAAAA(5-FU)A(Gem)(5-FU)G(5-FU)ACGGTTAGA-3’。
实施例11
本实施例得到的5-FU和吉西他滨(Gem)改性的核酸适体，序列如下，其结构如下图12所示，称为11-sgc8，
5’-A(5-FU)C(5-FU)AAC(5-FU)G(Gem)(5-FU)G(Gem)G(Gem)(Gem)G(Gem)(Gem)GGGAAAA(5-FU)A(Gem)(5-FU)G(5-FU)ACGG(5-FU)(5-FU)AGA-3’。
实施例12
本实施例得到的5-FU和吉西他滨(Gem)改性的核酸适体，序列如下，其结构如下图13所示，称为12-sgc8，
5’-A(5-FU)(Gem)(5-FU)AA(Gem)(5-FU)G(Gem)(5-FU)G(Gem)G(Gem)(Gem)G(Gem)(Gem)GGGAAAA(5-FU)A(Gem)(5-FU)G(5-FU)ACGG(5-FU)(5-FU)AGA-3’。
实施例13靶向性
将经改性的核酸适体250nM与结肠癌细胞HCT116在200μl缓冲液体系中孵育30分钟，清洗后检测细胞表面核酸适体的荧光强度，考察改性后的核酸适体与细胞结合能力的变化(图14)，HCT116为空白对照，改性后的sgc8，例如1-sgc8、2-sgc8、3-sgc8、4-sgc8、5-sgc8、6-sgc8、7-sgc8、8-sgc8，保持与原sgc8相同的结合能力，或者高于sgc8的结合能力(尤其是，5-sgc8、6-sgc8、7-sgc8、8-sgc8)。
实施例14体外稳定性
将核酸适体sgc8和经改性的核酸适体2-sgc8、3-sgc8、6-sgc8、8-sgc8、9-sgc8，与培养液孵育0-72小时等不同的时间(0.5h、1h、3h、6h、10h、24h、48h、72h)，通过琼脂糖凝胶技术，检测所剩余的核酸的含量(图15)，改性后的核酸适体的稳定性较sgc8具有明显提高，都能够提高到10小时以上。
实施例15体内稳定性
将上述改性的核酸适体4-sgc8 20μM/100μl，通过尾静脉注射入结肠癌细胞HCT116的荷瘤小鼠体内，通过荧光成像仪对比单纯sgc8，观察小鼠肿瘤部位的荧光富集情况，及维持时间(0、0.5h、1h、2h、3h)。结果如图16所示，核酸适体4-sgc8具有不逊于单纯sgc8的稳定性。
实施例16体外药物活性
结肠癌细胞HCT116接种96孔板，将上述改性的核酸适体sgc8、2-sgc8、3-sgc8、6-sgc8、8-sgc8配置成1nM,10nM,100nM,500nM,1000nM,10000nM等不同浓度，加入各孔中，孵育48小时后加入CCK-8，检测细胞的存活情况，并统计细胞存活率，对比单纯sgc8及药物(5-FU和Gem)，评估改性后核酸适体的药效(图17a和图17b所示)，改性后2-sgc8和3-sgc8以及6-sgc8和8-sgc8能够表现抑制细胞生长的活性，其效果与药物5-FU和Gem相同和接近。
实施例17体内药物活性
构建结肠癌细胞HCT116的皮下移植瘤模型，通过尾静脉注射药物100μl(5-FU30mg/kg；2-sgc8、3-sgc8、4-sgc8：100mg/kg)，每周两次给药，观察肿瘤的生长曲线及小鼠的存活情况。评估改性后的核酸适体的药效(图18所示)，改性后的核酸适体sgc8相对于未改性的sgc8能更好地抑制肿瘤生长。
本发明虽然已以较佳实施例公开如上，但其并不是用来限定本发明，任何本领域技术人员在不脱离本发明的精神和范围内，都可以利用上述揭示的方法和技术内容对本发明技术方案做出可能的变动和修改，因此，凡是未脱离本发明技术方案的内容，依据本发明的技术实质对以上实施例所作的任何简单修改、等同变化及修饰，均属于本发明技术方案的保护范围。
序列表
<110> 上海交通大学医学院附属仁济医院
<120> 核苷类衍生物改性的核酸适体sgc8
<160> 1
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 41
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 1
atctaactgc tgcgccgccg ggaaaatact gtacggttag a 41
Claims (2)
1.核苷类衍生物改性的核酸适体，包括如SEQ NO 1所示的序列，其特征在于，所述核酸适体的至少一个核苷酸由核苷类衍生物替换，和/或末端经核苷类衍生物连接修饰；所述的核苷类衍生物为胸腺嘧啶核苷衍生物或胞嘧啶核苷衍生物：所述核苷类衍生物为吉西他滨(Gem)或其衍生物，其替换所述核酸适体的胞嘧啶核苷酸；所述核苷类衍生物为5-FU或其衍生物，其替换所述核酸适体的胸腺嘧啶核苷酸；所述核酸适体5’端连接包括至少一个吉西他滨或其衍生物的核苷酸片段，所述核苷酸片段的长度为至少7个核苷酸或其衍生物，所述核苷酸片段为5’-T(Gem)T(Gem)T(Gem)-或5’
-T(Gem)T(Gem)T(Gem)T-；所述改性的核酸适体选自以下序列中的一种：
5-sgc8：5’-ATCTAACTG(Gem)TG(Gem)G(Gem)(Gem)G(Gem)(Gem)GGGAAAATA(Gem)TGTACGGTTAGA-3’；6-sgc8：
5’-AT(Gem)TAA(Gem)TG(Gem)TG(Gem)G(Gem)(Gem)G(Gem)(Gem)GGGAAAATA(Gem)TGTA(Gem)GGTTAGA-3’；
7-sgc8：
5’-T(Gem)T(Gem)T(Gem)ATCTAACTGCTGCGCCGCCGGGAAAATACTGTACGGTTAGA-3；
8-sgc8：
5’-T(Gem)T(Gem)T(Gem)TATCTAACTG(Gem)TG(Gem)G(Gem)(Gem)G(Gem)(Gem)GGGAAAATA(Gem)TGTACGGT TAGA-3’；
9-sgc8：
5’-ATCTAACTG(Gem)(5-FU)G(Gem)G(Gem)(Gem)G(Gem)(Gem)GGGAAAA(5-FU)A(Gem)(5-FU)G(5-FU)ACGG TTAGA-3’。
2.如权利要求1所述的核苷类衍生物改性的核酸适体用于制备治疗结肠癌的药物中的用途。
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Families Citing this family (2)
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|---|---|---|---|---|
| CN114574495B (zh) * | 2020-12-01 | 2024-04-09 | 上海交通大学医学院附属仁济医院 | 核苷类衍生物改性的核酸适体r50 |
| CN116637185A (zh) * | 2023-03-16 | 2023-08-25 | 上海交通大学医学院附属仁济医院 | 一种适用于肿瘤靶向光动力治疗的核酸适体偶联药物及其制备方法和用途 |
Citations (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2011142798A2 (en) * | 2010-05-13 | 2011-11-17 | Albert Einstein College Of Medicine Of Yeshiva University | Methods of preparing targeted aptamer prodrugs |
| WO2017173247A1 (en) * | 2016-03-31 | 2017-10-05 | City Of Hope | Aptamer compositions and the use thereof |
| CN110559445A (zh) * | 2018-06-04 | 2019-12-13 | 中国科学院化学研究所 | 一种新型高效智能靶向载药体系 |
| CN110643609A (zh) * | 2019-09-20 | 2020-01-03 | 上海交通大学 | 一种核苷类似物药物分子构建的药物适配体及其制备方法和应用 |
| CN110760516A (zh) * | 2019-11-12 | 2020-02-07 | 赣南医学院 | 核酸适配体衍生物和氨基化的核酸适配体衍生物以及它们的应用和药物偶合物 |
| CN113186149A (zh) * | 2009-04-08 | 2021-07-30 | 加利福尼亚大学董事会 | Dna-细胞缀合物 |
| CN114574495A (zh) * | 2020-12-01 | 2022-06-03 | 上海交通大学医学院附属仁济医院 | 核苷类衍生物改性的核酸适体r50 |
| CN114681619A (zh) * | 2020-12-30 | 2022-07-01 | 上海交通大学医学院附属仁济医院 | 基于Biotin-SA的核酸适体复合物及其应用 |
| CN115197946A (zh) * | 2021-04-12 | 2022-10-18 | 上海交通大学医学院附属仁济医院 | 含三氟甲基碱基类似物的核酸适体与应用 |
| CN115607680A (zh) * | 2021-07-16 | 2023-01-17 | 上海交通大学医学院附属仁济医院 | 金团簇-核酸适体及其衍生物组装体的制备及应用 |
-
2020
- 2020-12-01 CN CN202011387309.2A patent/CN114574496B/zh active Active
Patent Citations (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN113186149A (zh) * | 2009-04-08 | 2021-07-30 | 加利福尼亚大学董事会 | Dna-细胞缀合物 |
| WO2011142798A2 (en) * | 2010-05-13 | 2011-11-17 | Albert Einstein College Of Medicine Of Yeshiva University | Methods of preparing targeted aptamer prodrugs |
| WO2017173247A1 (en) * | 2016-03-31 | 2017-10-05 | City Of Hope | Aptamer compositions and the use thereof |
| CN110559445A (zh) * | 2018-06-04 | 2019-12-13 | 中国科学院化学研究所 | 一种新型高效智能靶向载药体系 |
| CN110643609A (zh) * | 2019-09-20 | 2020-01-03 | 上海交通大学 | 一种核苷类似物药物分子构建的药物适配体及其制备方法和应用 |
| CN110760516A (zh) * | 2019-11-12 | 2020-02-07 | 赣南医学院 | 核酸适配体衍生物和氨基化的核酸适配体衍生物以及它们的应用和药物偶合物 |
| CN114574495A (zh) * | 2020-12-01 | 2022-06-03 | 上海交通大学医学院附属仁济医院 | 核苷类衍生物改性的核酸适体r50 |
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| CN115607680A (zh) * | 2021-07-16 | 2023-01-17 | 上海交通大学医学院附属仁济医院 | 金团簇-核酸适体及其衍生物组装体的制备及应用 |
Non-Patent Citations (7)
| Title |
|---|
| A basic insight into aptamer-drug conjugates (ApDCs);Wenjing Xuan等;Biomaterials;第182卷;摘要，第219页右栏第3段，第221页左栏最后1段, 第222页左栏第1段, * |
| Artificial Base-Directed In Vivo Formulation of Aptamer-Drug Conjugates with Albumin for Long Circulation and Targeted Delivery;Sun, Y等;PHARMACEUTICS;20221213;第14卷(第12期);文献号2781 * |
| Automated modular synthesis of aptamer-drug conjugates for targeted drug delivery;RuoWen Wang等;JOURNAL OF THE AMERICAN CHEMICAL SOCIETY;第136卷(第7期);第2731-2734页 * |
| Kruspe, S等. An Aptamer Intrinsically Comprising 5-Fluoro-2 '-deoxyuridine for Targeted Chemotherapy.ANGEWANDTE CHEMIE-INTERNATIONAL EDITION.2014,第53卷(第39期),全文. * |
| 化学修饰提高核酸适体结合亲和力的研究进展;刘珂等;高等学校化学学报(第11期);全文 * |
| 小分子修饰核酸适体应用于肿瘤靶向成像及治疗的研究;谭燕;中国博士学术论文全文数据库（电子期刊）工程科技Ⅰ辑(第5期);全文 * |
| 核酸适体-药物偶联物的设计、合成与抗肿瘤应用研究;何嘉轩;中国博士学位论文全文数据库（电子期刊）工程科技I辑;20220115(第1期);B016-426 * |
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