CN114026097B - 取代的吡唑并喹唑啉酮化合物及其应用 - Google Patents

Abstract

式I的化合物，或其立体异构体、互变异构体、N‑氧化物、水合物、同位素取代的衍生物、溶剂化物或其可药用盐，或其混合物，或其前药。式I的化合物是激酶抑制剂，可用于治疗因为DDR功能缺陷而引起的临床病症，例如癌症。

Description

取代的吡唑并喹唑啉酮化合物及其应用

技术领域

本发明属于药物化学领域。本发明特别涉及取代的吡唑并[1，5-c]喹唑啉-2(3H)-酮和相关化合物，及其作为激酶抑制剂，包括ATM蛋白激酶抑制剂，和抗癌药物的应用。

背景技术

哺乳类细胞每日面临大量造成DNA损伤的外部及内部的挑战，这包括DNA碱基的突变。这些突变轻者造成细胞功能上的改变包括导致恶性肿瘤的发生，重者直接造成细胞死亡。因此哺乳类细胞进化出了一套精细的DNA损伤修复机制(DNA damage response，DDR)来应对这些挑战。这个机制通过简短的细胞周期停顿来检测和修复DNA损伤以保障基因组的稳定从而细胞的存活。

DDR和癌症的发生有着难解难分的关系。科学研究发现DDR修复机制上的缺陷在多层面可导致癌症的发生，比如DDR基因的碱基突变已被发现导致多种癌症的发生，这包括携带BRCA1或BRCA2基因碱基突变的妇女患乳腺癌和卵巢癌的风险要比没有突变的人群高得多。而BRCA1和BRCA2正是DDR中基于同源重组修复DNA双链断裂的重要组成部分。研究也发现在多种恶性肿瘤细胞DDR中调节细胞周期的关键蛋白的缺失或功能丧失，这包括p53，ATM，ATR，BRCA1/2等等。

近年来随着科学的发展和对细胞DDR机制的理解，针对DDR组成蛋白的突变及功能的丧失开发新型抗癌靶向治疗药物引起人们极大的兴趣。比如PARP抑制剂通过抑制DNA损伤单链修复机制可针对性地杀死有BRCA1/2突变的癌细胞。这个作用机制称作“合成致死”。

ATM激酶是DDR的重要组成蛋白之一，属于PI3K-相关的丝胺酸/苏胺酸蛋白激酶家族。ATM激酶基因是在1995年研究毛细血管扩张性共济失调综合症时克隆的。ATM基因位于人染色体11q22-23上，是一个包括66个外显子及9168个碱基的编码序列。ATM激酶是一个约350kDa分子量的大蛋白质。ATM激酶是DDR的重要组成部分之一。ATM激酶当DNA损伤引起双链断裂时被激活。其功能通过磷酸化下游蛋白而达到细胞周期转变点停顿，通过同源重组对损伤的DNA进行修复或进入细胞凋亡机制(Weber和Ryan，2016)。

ATM激酶信号传导可粗分为两种机制：典型机制由DNA双链断裂激活。当细胞检测到DNA双链断裂时，ATM激酶被转运到断裂部位并激活。虽然详细的激活机制还不是很清楚，但是激活过程包括了从同源二聚体拆分为有活性的单体(Bakkenist等人，2003)，Ser1981位点及其他位点的自磷酸化，以及乙酰化。激活后的ATM激酶进一步磷酸化下游底物，这包括细胞周期检查点蛋白(比如Chk1和Chk2)，DNA修复蛋白(BRCA1和RAD51)或细胞凋亡通路蛋白(p53)。研究表明，DNA双链断裂后所导致被磷酸化的蛋白有700种以上(Choi，Kipps和Kurzrock，2016)。此外，ATM还参与不直接和DNA损伤相关的功能，比如代谢，应对压力等，这些功能通常被称为非典型机制(Cremona等人，2013)。

以ATM激酶为药物靶标研发抗癌新药主要依赖两方面的考虑。通常基于DNA损伤因而对分化快的癌细胞造成毒性的放疗或细胞毒类化疗药物，比如拓扑异构酶抑制剂、DNA甲基化药物等由于DDR的存在使其造成的细胞毒性大大降低。因此联合抑制DDR组成蛋白功能的抑制剂，比如PARP抑制剂，ATM抑制剂可极大地增强这类药物的药效。Gilardini MontaniMS等人(J Exp Clin Cancer Res，2013，32：95)的研究表明降低ATM表达可增强乳腺癌细胞对PARP抑制剂的敏感性，为联合使用ATM抑制剂和PARP抑制剂治疗乳腺癌的可能性提供了理论基础。此外，Kubota E等人(Cell Cycle，2014，13(13)：2129-2137)则发现胃癌细胞中ATM蛋白表达水平对PARP抑制剂奥拉帕尼的敏感性有显著的相关性，应用小分子ATM抑制剂增强了p53失活的胃癌细胞对奥拉帕尼的敏感性。因此联合使用ATM抑制剂和PARP抑制剂有可能用于治疗胃癌。另外，对有DDR功能缺陷的癌细胞，通过合成致死机制ATM激酶抑制剂可单独使用，针对特定患者人群开发成靶向抗癌药物，具有药效好，毒性低的特点。

Degorce SL等人(J Med Chem，2016，59：6281-6292)报道了一系列3-喹啉甲酰胺作为ATM激酶抑制剂，而且在动物模型中观察到ATM激酶抑制剂与伊立替康(irinotecan)联合用药的良好药效。

遗传和药理学证据表明，减少ATM激酶活性可以减轻变异亨廷顿蛋白(mHTT，mutant huntington)在亨廷顿氏疾病(HD，Huntington′disease)细胞和动物模型中的毒性，提示选择性抑制ATM可为治疗HD提供一种新的临床干预手段。Leticia TS等人(J MedChem，2019，62：2988-3008)报道了一种可通过血脑屏障的ATM抑制剂，显示了良好的与小鼠大脑中的ATM激酶抑制作用相一致的药效动力学(PD)效应，且其药代动力学/药效动力学(PK/PD)关系显而易见。

WO2012034526公开了稠合的杂芳基化合物作为PI3K激酶抑制剂。其中A¹是N或CH；A⁴和A⁵独立地为N或CR²，R²独立地选自氢、烷基、烯基、炔基和芳基等；A²、A³和B环一起形成含有1-4个选自N、O和S的杂原子的五元杂芳基或五元杂环基；表示单键或双键；R¹是杂芳基。

WO2015170081公开了咪唑并喹啉酮作为ATM激酶抑制剂。其中Q是环丁基或环戊基或氧杂丁环基、四氢呋喃基或氧杂环己基；R¹是甲基；R²是氢或甲基；或R¹与R²共同形成吖丁啶基、吡咯啶基或哌啶基；R³是氢或氟；R⁴是氢或甲基；以及R⁵是氢或氟。

WO2018127195和WO2018153365公开了取代的稠合杂芳基化合物作为ATM激酶抑制剂。

发明内容

本发明提供结构如式I、式IIa、式IIb和式III所示的新颖的取代的稠合杂芳基化合物作为激酶抑制剂，特别是ATM激酶抑制剂。

本发明还提供了包含有效量的式I、式IIa、式IIb或式III化合物的药用组合物，用来治疗癌症。

在一具体实施例中，所述药用组合物还可含有一种或多种可药用载体或稀释剂，用来治疗癌症。

在一具体实施例中，所述药用组合物还可含有至少一种已知的抗癌药物或所述抗癌药物的可药用盐，用来治疗癌症。

本发明也涉及到结构式I、式IIa、式IIb和式III的新颖化合物的制备方法。

具体实施方式

本发明发现式I所示的取代的稠合杂芳基化合物具有激酶抑制活性，可用作激酶特别是ATM激酶的抑制剂。

应理解的是，本文所述的各实施方案的特征可任意组合，形成本文的技术方案；本文对各基团的定义适用于本文所述任一实施方案，例如，本文对烷基的取代基的定义适用于本文所述任一实施方案，除非该实施方案已清楚定义了烷基的取代基。

具体来说，本发明提供下式I所示的化合物、其立体异构体、互变异构体、N-氧化物、水合物、同位素取代的衍生物、溶剂化物或其可药用盐，或其混合物，或其前药：

其中，A₁，A₂和A₃各自独立为N、或CR₄、CR₅和CR₆；

B₁，B₂，B₃和B₄各自独立为N、或CR₇、CR₈、CR₉和CR₁₀；

R₁是可被任选取代的烷基、可被任选取代的烷氧基、可被任选取代的氨基、可被任选取代的碳环基、可被任选取代的杂环基、可被任选取代的芳基或可被任选取代的杂芳基；

R₂是氢或可被任选取代的烷基；

R₃是氢、烷氧基、氨基、碳环基、杂环基、芳基或杂芳基；其中，所述烷氧基、氨基、碳环基、杂环基、芳基和杂芳基各自可被任选取代；

R₄-R₁₀各自独立为氢、卤素、烷基、烷氧基、烯基、炔基、氨基、硝基、氰基、酰氨基、酰氧基、羟基、巯基、烷硫基、叠氮基或羧基；其中，所述烷基、烷氧基、烯基、炔基、氨基、酰氨基、酰氧基、羟基、巯基、烷硫基和羧基各自可被任选取代。

在式I化合物的一个或多个实施方案中，A₁，A₂和A₃分别为CR₄、CR₅和CR₆，其中，R₄-R₆各自独立为氢、卤素、C_1-4烷基、C_1-4烷氧基或卤代C_1-4烷基。优选的R₄和R₅各自独立为氢或C_1-4烷基，更优选为氢。优选的R₆为氢、卤素或C_1-4烷氧基。

在式I化合物的前述一个或多个实施方案中，R₂为C_1-10烷基，优选为C_1-6烷基，更优选为甲基。

在式I化合物的前述一个或多个实施方案中，当被取代时，R₁上的取代基选自卤素、羟基、C_1-6烷基、C_1-6烷氧基和卤代C_1-6烷基，优选为C_1-6烷基；其中，取代基的数量为1-4个。优选地，当R₁为6元杂芳基或杂环基如吗啉基、哌嗪基或哌啶基时，取代基的位置为间位和/或对位；取代基的数量可以是2个或3个。例如，R₁可以是间位和对位被两个或三个C_1-4烷基取代的杂环基。

在式I化合物的前述一个或多个实施方案中，R₁为任选被取代的C_1-6烷基、任选被1-4个C_1-6烷基取代的杂环基或杂芳基；优选地，R₁选自C_1-4烷基、任选被1-4个C_1-6烷基取代的四氢吡喃基、任选被1-4个C_1-6烷基取代的哌啶基、任选被1-4个C_1-6烷基取代的吗啉基和任选被1-4个C_1-6烷基取代的哌嗪基。在某些实施方案中，R₁选自异丙基、四氢吡喃基、哌啶基、任选被1-2个C_1-4烷基取代的吗啉基和任选被1-3个选自C_1-4烷基取代的哌嗪基。优选的R₁选自任选被取代的C_1-6烷基和任选被1-3个选自C_1-4烷基的取代基取代的杂环基，包括：

在式I化合物的前述一个或多个实施方案中，含B₁-B₄的环为可被任选取代的吡啶环或可被任选取代的苯环。优选地，所述式I化合物含B₁-B₄的环为可被任选取代的苯环或可被任选取代的B₂为N的吡啶环。所述取代基可如R₇-R₁₀所示。

在式I化合物的前述一个或多个实施方案中，R₇-R₁₀各自独立选自H、C_1-6烷基、卤素和卤代C_1-6烷基；优选地，R₇-R₁₀各自独立为卤素和卤代C_1-4烷基。

在式I化合物的前述一个或多个实施方案中，B₂为N或CR₈，其中，R₈为氢、卤素、C_1-4烷基或卤代C_1-4烷基。在一些实施方案方案中，B₁为CH，B₂为N，B₃为CH，和B₄为CH；在某些实施方案中，B₁为CH，B₂为CR₈，B₃为CH，B₄为CH；其中，R₈为氢、卤素、C_1-4烷基或卤代C_1-4烷基。

在式I化合物的前述一个或多个实施方案中，R₃选自任选取代的C_1-6烷氧基和任选取代的杂环基。取代基的数量可以是1-2个，优选1个。

在式I化合物的前述一个或多个实施方案中，当被取代时，R₃上的取代基可选自-NR₁₁R₁₂，其中，R₁₁和R₁₂各自独立选自氢或C_1-6烷基；或者R₁₁和R₁₂与N一起形成可被任选取代的4元至8元杂环基，优选5元至8元杂环基，如哌啶基，优选地，被取代时，该杂环基上的取代基为1-2个C_1-4烷基。

在式I化合物的前述一个或多个实施方案中，R₃选自：氢，任选被-NR₁₁R₁₂取代的C_1-6烷氧基和任选被-NR₁₁R₁₂取代的杂环基(如哌啶基)；其中，R₁₁和R₁₂各自独立选自氢和C_1-6烷基。优选的R₃包括：

本发明优选化合物的其中一组表示为式IIa和IIb化合物、其立体异构体、互变异构体、N-氧化物、水合物、同位素取代的衍生物、溶剂化物或其可药用盐，或其混合物，或其前药：

其中，A₁-A₃，B₁，B₃-B₄，R₁，R₃和R₇-R₁₀如式I所定义。

在式IIa和IIb化合物的一个或多个实施方案中，所述A₁-A₃，B₁，B₃-B₄，R₁，R₃和R₇-R₁₀分别如前述任一个式I的实施方案所述。

在式IIa或IIb化合物的前述一个或多个实施方案中，A₁、A₂和A₃分别为CR₄、CR₅和CR₆，其中，R₄-R₆各自独立为氢、卤素、C_1-4烷基、C_1-4烷氧基或卤代C_1-4烷基；优选的R₄和R₅各自独立为氢或C_1-4烷基，更优选为氢。优选的R₆为氢、卤素或C_1-4烷氧基。

在式IIa化合物的前述一个或多个实施方案中，B₁、B₃和B₄分别是CR₇、CR₉和CR₁₀；R₇，R₉和R₁₀各自独立为氢、卤素、C_1-4烷基或卤代C_1-4烷基。

在式IIb化合物的一个或多个实施方案中，R₈为氢、卤素、C_1-4烷基和卤代C_1-4烷基；优选地，R₈为卤素和卤代C_1-4烷基。优选地，R₇、R₉和R₁₀各自独立为氢、卤素、C_1-4烷基或卤代C_1-4烷基，优选为氢。

在式IIa或IIb化合物的前述一个或多个实施方案中，R₁为任选被取代的C_1-6烷基、任选被1-4个C_1-6烷基取代的杂环基或杂芳基；优选地，R₁选自C_1-4烷基、任选被1-4个C_1-6烷基取代的四氢吡喃基、任选被1-4个C_1-6烷基取代的哌啶基、任选被1-4个C_1-6烷基取代的吗啉基和任选被1-4个C_1-6烷基取代的哌嗪基。在某些实施方案中，R₁选自异丙基、四氢吡喃基、哌啶基、任选被1-2个C_1-4烷基取代的吗啉基和任选被1-3个选自C_1-4烷基取代的哌嗪基。优选的R₁选自任选被取代的C_1-6烷基和可被1-3个选自C_1-4烷基的取代基任选取代的杂环基，包括：

在式IIa化合物的前述一个或多个实施方案中，含B₁、B₃-B₄的环为可被取代的吡啶环。应理解，本文中，除R₃外，该含B₁、B₃-B₄的环上的取代基还可包括R₇、R₉和R₁₀。优选的R₇、R₉和R₁₀各自独立可选自卤素、C_1-4烷基和卤代C_1-4烷基。

在式IIa或IIb化合物的前述一个或多个实施方案中，R₃选自任选取代的C_1-6烷氧基和任选取代的杂环基。取代基的数量可以是1-2个，优选1个。优选的取代基包括-NR₁₁R₁₂，其中，R₁₁和R₁₂各自独立选自氢或C_1-6烷基；或者R₁₁和R₁₂与N一起形成可被任选取代的4元至8元杂环基，优选5元至8元杂环，如哌啶基，优选地，被取代时，该杂环基上的取代基为1-2个C_1-4烷基。

在式IIa或IIb化合物的前述一个或多个实施方案中，R₃选自：氢，任选被-NR₁₁R₁₂取代的C_1-6烷氧基或任选被-NR₁₁R₁₂取代的杂环基(如哌啶基)；其中，R₁₁和R₁₂独立选自氢或C_1-6烷基；或者R₁₁和R₁₂与N一起形成可被任选取代的4元至8元杂环基，优选5元至8元杂环，如哌啶基，优选地，被取代时，该杂环基上的取代基为1-2个C_1-4烷基。优选的R₃包括：

在式I、IIa和IIb的前述一个或多个实施方案中，R₁所述的可被任选取代的烷基、烷氧基、氨基、碳环基、杂环基、芳基或杂芳基可被选自本文所述的烷基、烷氧基、氨基、碳环基、杂环基、芳基或杂芳基的取代基中的一个或多个取代基取代。

在式I、IIa和IIb的前述一个或多个实施方案中，R₃所述的可被任选取代的烷氧基，氨基，碳环基，杂环基，芳基或杂芳基可被选自本文所述的烷氧基，氨基，碳环基，杂环基，芳基或杂芳基的取代基中的一个或多个取代基取代。

在式I、IIa和IIb的前述一个或多个实施方案中，R₄-R₁₀所述的可被取代的烷基、烷氧基、烯基、炔基、氨基、酰氨基、酰氧基、羟基、巯基、烷硫基或羧基的取代基选自本文所述的烷基、烷氧基、烯基、炔基、氨基、酰氨基、酰氧基、羟基、巯基、烷硫基或羧基的取代基中的一个或多个。

在式IIb的前述一个或多个实施方案中，R₇-R₁₀所述的可被取代的烷基、烷氧基、烯基、炔基、氨基、酰氨基、酰氧基、羟基、巯基、烷硫基或羧基的取代基选自本文所述的烷基、烷氧基、烯基、炔基、氨基、酰氨基、酰氧基、羟基、巯基、烷硫基或羧基的取代基中的一个或多个。

在式I、IIa和IIb的一个或多个优选实施方案中：A₁、A₂和A₃分别为CR₄、CR₅和CR₆，其中，R₄-R₆各自独立为氢、卤素、C_1-4烷基、C_1-4烷氧基或卤代C_1-4烷基，优选各自独立为氢、卤素和C_1-4烷基；含B₁-B₄的环(式I)或含B₁、B₃和B₄的环(式IIa)为可被任选取代的吡啶环和可被任选取代的苯环，其中，R₇-R₁₀各自独立选自H、C_1-6烷基、卤素和卤代C_1-6烷基，优选各自独立为卤素和卤代C_1-4烷基；R₁为任选被取代的C_1-6烷基、任选被1-4个C_1-6烷基取代的杂环基或杂芳基，优选选自C_1-4烷基、任选被1-4个C_1-6烷基取代的四氢吡喃基、任选被1-4个C_1-6烷基取代的哌啶基、任选被1-4个C_1-6烷基取代的吗啉基和任选被1-4个C_1-6烷基取代的哌嗪基；R₂为C_1-6烷基，优选为甲基；R₃选自氢，任选被-NR₁₁R₁₂取代的C_1-6烷氧基和或任选被-NR₁₁R₁₂取代的杂环基，其中，R₁₁和R₁₂各自独立选自氢或C_1-6烷基；或者R₁₁和R₁₂与N一起形成可被任选被1或2个C_1-4烷基取代的4元至8元杂环基，优选5元至8元杂环，如哌啶基。

在式I的一个或多个优选实施方案中，所述化合物具有下式III所示的结构：

式中，

B₂为CR₈，其中，R₈为卤素或卤代C_1-4烷基；A₃为CH；R₁为杂环基(如四氢吡喃基)或C_1-4烷基；R₂为C_1-4烷基；R₃为-NR₁₁R₁₂取代的C_1-6烷氧基或哌啶基，其中，R₁₁和R₁₂各自独立为H或C_1-4烷基，或者R₁₁和R₁₂与N一起形成可被任选被1或2个C_1-4烷基取代的4元至8元杂环基；或

B₂为CR₈，其中，R₈为卤素或卤代C_1-4烷基；A₃为CH；R₁为四氢吡喃基；R₂为C_1-4烷基；R₃为-NR₁₁R₁₂取代的C_1-6烷氧基或哌啶基，其中，R₁₁和R₁₂各自独立为H或C_1-4烷基；或

B₂为CR₈，其中，R₈为卤素或卤代C_1-4烷基；A₃为CH；R₁为C_1-4烷基；R₂为C_1-4烷基；R₃为-NR₁₁R₁₂取代的C_1-6烷氧基或哌啶基，其中，R₁₁和R₁₂各自独立为H或C_1-4烷基，或者R₁₁和R₁₂与N一起形成可被任选被1或2个C_1-4烷基取代的4元至8元杂环基(如哌啶基)；或

B₂为N；A₃为CR₆；R₁为C_1-4烷基；R₂为杂环基或C_1-4烷基；R₃为-NR₁₁R₁₂取代的C_1-6烷氧基或哌啶基，其中，R₆为H或卤素；R₁₁和R₁₂各自独立为H或C_1-4烷基；或者R₁₁和R₁₂与N一起形成可被任选被1或2个C_1-4烷基取代的4元至8元杂环基。

在前述一个或多个实施方案中，式I、式IIa、式IIb和式III优选的化合物实施例包括但不限于：

9-(6-(3-(二甲氨基)丙氧基)吡啶-3-基)-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)吡唑并[1，5-c]喹唑啉-2(3H)-酮(实施例1)；

9-(6-(3-(二甲氨基)丙氧基)吡啶-3-基)-3-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)吡唑并[1，5-c]喹唑啉-2(3H)-酮(实施例2)；

9-(6-(3-(哌啶-1-基)丙氧基)吡啶-3-基)-3-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)吡唑并[1，5-c]喹唑啉-2(3H)-酮(实施例3)；

9-(6-(3-(二甲氨基)丙氧基)吡啶-3-基)-8-氟-3-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)吡唑并[1，5-c]喹唑啉-2(3H)-酮(实施例4)

9-(4-(3-(二甲氨基)丙氧基)-3-(三氟甲基)苯基)-3-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)吡唑并[1，5-c]喹唑啉-2(3H)-酮(实施例5)；

9-(4-(4-(二甲氨基)哌啶-1-基)-3-氟苯基)-3-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)吡唑并[1，5-c]喹唑啉-2(3H)-酮(实施例6)；

9-(4-(4-(二甲氨基)哌啶-1-基)-3-氯苯基)-3-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)吡唑并[1，5-c]喹唑啉-2(3H)-酮(实施例7)；

9-(4-(4-(二甲氨基)哌啶-1-基)-3-(三氟甲基)苯基)-3-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)吡唑并[1，5-c]喹唑啉-2(3H)-酮(实施例8)；

9-(4-(4-氨基哌啶-1-基)-3-(三氟甲基)苯基)-3-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)吡唑并[1，5-c]喹唑啉-2(3H)-酮(实施例9)；

9-(4-(4-(甲氨基)哌啶-1-基)-3-(三氟甲基)苯基)-3-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)吡唑并[1，5-c]喹唑啉-2(3H)-酮(实施例10)；

9-(4-(4-(乙氨基)哌啶-1-基)-3-(三氟甲基)苯基)-3-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)吡唑并[1，5-c]喹唑啉-2(3H)-酮(实施例11)；

9-(6-(3-(二甲氨基)丙氧基)吡啶-3-基)-3-甲基-1-吗啉基吡唑并[1，5-c]喹唑啉-2(3H)-酮(实施例12)；

9-(6-(3-(二甲氨基)丙氧基)吡啶-3-基)-3-甲基-1-((2S，6R)-2，6-二甲基吗啉基)吡唑并[1，5-c]喹唑啉-2(3H)-酮(实施例13)；

9-(6-(3-(二甲氨基)丙氧基)吡啶-3-基)-3-甲基-1-(哌啶-1-基)吡唑并[1，5-c]喹唑啉-2(3H)-酮(实施例14)；

9-(6-(3-(二甲氨基)丙氧基)吡啶-3-基)-3-甲基-1-(4-甲基哌嗪-1-基)吡唑并[1，5-c]喹唑啉-2(3H)-酮(实施例15)

9-(6-(3-(二甲氨基)丙氧基)吡啶-3-基)-3-甲基-1-((3S，5R)-3，5-二甲基哌嗪-1-基)吡唑并[1，5-c]喹唑啉-2(3H)-酮(实施例16)；

9-(6-(3-(二甲氨基)丙氧基)吡啶-3-基)-3-甲基-1-((3S，5R)-3，4，5-三甲基哌嗪-1-基)吡唑并[1，5-c]喹唑啉-2(3H)-酮(实施例17)；

9-(6-(3-(二甲氨基)丙氧基)吡啶-3-基)-1-((3S，5R)-4-乙基-3，5-二甲基哌嗪-1-基)-3-甲基吡唑并[1，5-c]喹唑啉-2(3H)-酮(实施例18)；

9-(6-(3-(二甲氨基)丙氧基)吡啶-3-基)-1-异丙基-3-甲基吡唑并[1，5-c]喹唑啉-2(3H)-酮(实施例19)；

9-(6-(3-(哌啶-1-基)丙氧基)吡啶-3-基)-1-异丙基-3-甲基吡唑并[1，5-c]喹唑啉-2(3H)-酮(实施例20)；

9-(4-(4-(二甲氨基)哌啶-1-基)-3-氟苯基)-1-异丙基-3-甲基吡唑并[1，5-c]喹唑啉-2(3H)-酮(实施例21)；

9-(3-氯-4-(4-(二甲氨基)哌啶-1-基)苯基)-1-异丙基-3-甲基吡唑并[1，5-c]喹唑啉-2(3H)-酮(实施例22)；

9-(4-(4-(二甲氨基)哌啶-1-基)-3-(三氟甲基)苯基)-1-异丙基-3-甲基吡唑并[1，5-c]喹唑啉-2(3H)-酮(实施例23)；

9-(4-(3-(二甲氮基)丙氧基)-3-氟苯基)-1-异丙基-3-甲基吡唑并[1，5-c]喹唑啉-2(3H)-酮(实施例24)；

9-(4-(3-(二甲氨基)丙氧基)-3-(三氟甲基)苯基)-1-异丙基-3-甲基吡唑并[1，5-c]喹唑啉-2(3H)-酮(实施例25)；

9-(6-(3-(二甲氨基)丙氧基)吡啶-3-基)-3-乙基-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)吡唑并[1，5-c]喹唑啉-2(3H)-酮(实施例26)；

9-(6-(4-(二甲氨基)哌啶-1-基)吡啶-3-基)-1-((2S，6R)-2，6-二甲基吗啉基)-3-甲基吡唑并[1，5-c]喹唑啉-2(3H)-酮(实施例27)；

9-(3-氟-4-(3-(哌啶-1-基)丙氧基)苯基)-1-异丙基-3-甲基吡唑并[1，5-c]喹唑啉-2(3H)-酮(实施例28)；

或其立体异构体、互变异构体、N-氧化物、水合物、同位素取代的衍生物、溶剂化物或其可药用盐，或其混合物，或其前药。

本文所用“氢(H)”包括其同位素D和T。

本文所用“烷基”是指烷基本身或是直链或支链基团，碳链长度可达十个碳原子。有用的烷基包括直链或支链C_1-10烷基，优选C_1-6烷基，例如C_1-4烷基。典型的C_1-10烷基包括甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、仲丁基、叔丁基、3-戊基、己基和辛基。烷基可任选地被一个或多个本文所定义的取代基取代。

本文所用“烯基”是指直链或支链的链中至少具有一个双键的基团，其碳链长度通常为2-10个碳原子。典型的烯基包括乙烯基、1-丙烯基、2-丙烯基、2-甲基-1-丙烯基、1-丁烯基和2-丁烯基。

本文所用“炔基”是指直链或支链的链中至少具有一个三键的基团，其碳链长度通常为2-10个碳原子。典型的炔基包括乙炔基、1-丙炔基、1-甲基-2-丙炔基、2-丙炔基、1-丁炔基和2-丁炔基。

有用的烷氧基包括被上述C_1-10烷基其中之一取代的氧基，例如C_1-6烷氧基或C_1-4烷氧基。烷氧基中的烷基可被任意取代。烷氧基的取代基包括但不限于卤素、吗啉基、氨基(包括烷氨基和二烷氨基)以及羧基(包括其酯基)。

有用的烷硫基包括被上述C_1-10烷基其中之一取代的硫基，烷硫基中的烷基可被任意取代。同时还包括这类烷硫基的亚砜和砜。

有用的氨基包括-NR₁₁R₁₂，其中R₁₁和R₁₂各自独立是氢或可被任选取代的C_1-10烷基(如C_1-6烷基或C_1-4烷基)，可被任选取代的环烷基，芳基，可被任选取代的杂芳基或可被任选取代的氨基。或者R₁₁和R₁₂与N一起形成可被任选取代的4-8元杂环、优选5-8元杂环(例如哌啶)，或者R₆和R₇与N以及与其它N或O一起形成可被任选取代的5-8元杂环(例如哌嗪)。所述烷基和杂环可被任意取代。

有用的卤素或卤素基团包括氟、氯、溴和碘。

本文所用“芳基”是指芳基本身或是作为其它基团的一部分，其为含有6到14个碳原子的单环、双环或三环芳族基团。

有用的芳基包括C_6-14芳基，优选的是C_6-10芳基。典型的C_6-14芳基包括苯基、萘基、菲基、蒽基、茚基、薁基、联苯、亚联苯基和茀基。

本文所用“杂芳基”是指含有4-14个环原子，优选5-14个环原子，并且有6个，10个或14个π电子在环体系上共用，而且所含环原子是碳原子和从氧、氮、硫中任选的1-3个杂原子的基团。

有用的杂芳基包括噻吩基(苯硫基)、苯并[d]异噻唑-3-基、苯并[b]噻吩基、萘并[2，3-b]噻吩基、噻蒽基、呋喃基、吡喃基、异苯并呋喃基、色烯基、夹氧蒽基、噻吩恶基(phenoxanthiinyl)、吡咯基、咪唑基、吡唑基、吡啶基、包括但不限制于2-吡啶基、3-吡啶基和4-吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、哒嗪基、吲嗪基、异吲哚基、3H-吲哚基、吲哚基、吲唑基、嘌呤基、4H-喹嗪基、异喹啉基、喹啉基、酞嗪基、萘啶基、喹唑啉基、噌啉基、蝶啶基、咔唑基、β-咔啉基、菲啶基、吖啶基、萘嵌间二氮(杂)苯基、菲咯啉基、吩嗪基、异噻唑基、吩噻嗪基、异恶唑基、呋咱基、吩恶嗪基、1，4-二氢喹喔啉-2，3-二酮、7-氨基异香豆素、吡啶并[1，2-a]嘧啶-4-酮、四氢化五员[c]吡唑-3-基、吡唑[1，5-a]嘧啶基、吡咯并吡啶基如吡咯[2，3-b]吡啶基、苯并异恶唑基如1，2-苯并异恶唑-3-基、苯并咪唑基、2-羟吲哚基、噻重氮基和2-氧代苯并咪唑基。当杂芳基在环中含有氮原子时，这样的氮原子可以呈N-氧化物形式，例如吡啶基N-氧化物、吡嗪基N-氧化物和嘧啶基N-氧化物。

本文所用“碳环(碳环基)”包括环烷基和部分饱和的碳环基团。有用的环烷基是C_3-8环烷基。典型的环烷基包括环丙基、环丁基、环戊基、环己基和环庚基。

有用的部分饱和的碳环基团包括环烯基，例如环戊烯基、环庚烯基和环辛烯基。

本文所用“杂环(杂环基)”是指饱和或部分饱和的3-8元单环，或7-10元双环体系，其环原子由碳原子和1-4个选自O、N和S的杂原子组成，其中杂原子氮和硫都可以被任意氧化，氮也可以任意季铵化，并且包括双环体系中上述定义的任意杂环与苯环的融合。如果产生的化合物是稳定的话，那么杂环的碳原子或氮原子可被取代。

有用的饱和或部分饱和杂环基团包括四氢呋喃基、四氢吡喃基、吡喃基，哌啶基、哌嗪基、吡咯烷基、咪唑烷基、咪唑啉基、二氢吲哚基、异二氢吲哚基、奎宁环基、吗啉基、异色满基、色满基、吡唑烷基、吡唑啉基、tetronoyl和tetramoyl，这些基团可被任意取代。

本文中，当被取代时，芳基、杂芳基、碳环基和杂环基可被一个或多个(例如1、2、3或4个)选自以下基团的取代基取代：卤素、羟基、羧基、氨基、硝基、氰基、C_1-6酰氨基、C_1-6酰氧基、C_1-6烷氧基、芳氧基、烷硫基、C_1-6烷基、C_6-10芳基、C_3-8环烷基、C_2-6链烯基、C_2-6炔基、C_6-10芳基(C_2-6)链烯基、C_6-10芳基(C_2-6)炔基、饱和和不饱和的杂环基或杂芳基、亚甲基二氧基、卤代C_1-6烷基、C_6-10芳基(C_1-6)烷基、C_1-6羟烷基、脲基、巯基、叠氮基、羰基、二(C_1-10烷基)氨基、烷磺酰基、氨磺酰基、二烷基氨磺酰基和烷基亚磺酰基等。其中取代基本身也可任选地被本文所述的相应取代基取代。

本文中，当被取代时，烷基、烷氧基、烷硫基、烯基、炔基和环烷基可被一个或多个(例如1、2、3或4个)选自以下基团的取代基取代：卤素、羟基、羧基、氨基、硝基、氰基、C_1-6酰氨基、C_1-6酰氧基、C_1-6烷氧基、芳氧基、烷硫基、C_1-6烷基、C_6-10芳基、C_3-8环烷基、C_2-6链烯基、C_2-6炔基、C_6-10芳基(C_2-6)链烯基、C_6-10芳基(C_2-6)炔基、饱和和不饱和的杂环基或杂芳基、亚甲基二氧基、C_1-6卤代烷基、C_6-10芳基(C_1-6)烷基、C_1-6羟烷基、脲基、巯基、叠氮基、羰基、二(C_1-10烷基)氨基、烷磺酰基、氨磺酰基、二烷基氨磺酰基和烷基亚磺酰基等。其中取代基本身也可任选地被本文所述的相应取代基取代。

在优选的实施方案中，当被取代时，烷基、烷氧基、烷硫基、烯基、炔基、环烷基、羰基、碳环基、芳基、杂芳基和杂环基可被一个或多个(例如1、2、3或4个)选自以下基团的取代基取代：卤素、羟基、羧基、氨基、硝基、氰基、C_1-6酰氨基、C_1-6酰氧基、C_1-6烷氧基、芳氧基、烷硫基、C_1-6烷基、C_6-10芳基、C_3-8环烷基、C_2-6链烯基、C_2-6炔基、C_6-10芳基(C_2-6)链烯基、C_6-10芳基(C_2-6)炔基、饱和和不饱和的杂环基或杂芳基。

应理解，当作为取代基时，芳基或含芳基的取代基、杂芳基或含杂芳基的取代基、杂环基或含杂环基的取代基的数量通常为1个。

本文所用“芳基烷基”包括被任一上述C_6-14芳基取代的C_1-10烷基。优选的芳基烷基是苄基、苯乙基或萘甲基。

本文所用“芳基烯基”包括被任一上述C_6-14芳基取代的C2-10烯基。

本文所用“芳基炔基”包括被任一上述C_6-14芳基取代的C2-10炔基。

本文所用“芳氧基”包括被任一上述C_6-14芳基取代的氧基，其芳基可被任意取代。有用的芳氧基包括苯氧基和4-甲基苯氧基。

本文所用“芳基烷氧基”包括被任一上述芳基取代的C_1-10烷氧基，其芳基可被任意取代。有用的芳基烷氧基包括苄氧基和苯基乙氧基。

有用的卤代烷基包括被一个或多个选自氟、氯、溴和碘原子的卤素取代的C_1-10烷基，优选的是被一个或多个选自氟、氯、溴和碘原子的卤素取代的C_1-6烷基，例如氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、五氟乙基、1，1-二氟乙基、氯甲基、氯氟甲基和三氯甲基。

有用的酰基氨基(酰氨基)是连接在氨基氮上的任何C_1-6酰基(烷酰基)，例如乙酰氨基、丙酰氨基、丁酰氨基、戊酰氨基和已酰氨基，以及芳基取代的C_1-6酰基氨基，例如苯甲酰氨基。有用的酰基包括C_1-6酰基，如乙酰基。酰基本身可任选地被取代，例如可任选地被一个或几个(如6个以内)选自芳基和卤素的取代基取代，其中芳基可被任选取代。例如，被取代的酰氨基的例子包括氯乙酰氨基和五氟苯甲酰氨基。

有用的酰氧基是连接在氧(-O-)上的任何C_1-6酰基(烷酰基)，例如甲酰氧基、乙酰氧基、丙酰氧基、丁酰氧基、戊酰氧基和己酰氧基。同样地，酰氧基中的酰基本身可任选地被取代，例如可任选地别一个或几个(如6个以内)选自芳基和卤素的取代基取代。

一些本发明化合物可能作为立体异构体，包括旋光异构体存在。本发明包括所有立体异构体和这样的立体异构体的外消旋混合物，以及可以根据本领域技术人员众所周知的方法分离出来的单独的对映体。

可药用盐的例子包括无机和有机酸盐，例如盐酸盐、氢溴酸盐、磷酸盐、硫酸盐、柠檬酸盐、乳酸盐、酒石酸盐、马来酸盐、富马酸盐、扁桃酸盐和草酸盐；以及与碱例如钠羟基、三(羟基甲基)氨基甲烷(TRIS，氨丁三醇)和N-甲基葡糖胺形成的无机和有机碱盐。

本发明化合物的前药的实施例包括含有羧酸的化合物的简单酯(例如依据本领域已知方法通过与C_1-4醇缩合而获得的酯)；含有羟基的化合物的酯(例如依据本领域已知方法通过与C_1-4羧酸、C_3-6二酸或其酸酐例如琥珀酸酐和富马酸酐缩合而获得的酯)；含有氨基的化合物的亚胺(例如依据本领域已知方法通过与C_1-4醛或酮缩合而获得的亚胺)；含有氨基的化合物的氨基甲酸酯，例如Leu等人(J Med Chem.1999，42：3623-3628)和Greenwald等人(J Med Chem 1999，42：3657-3667)描述的那些酯；含有醇的化合物的醛缩醇或酮缩醇(例如依据本领域已知方法通过与氯甲基甲基醚或氯甲基乙基醚缩合而获得的那些缩醇)。

本发明还包括本发明化合物或其药物上可接受的盐的所有适当的同位素变化。本发明化合物或其药物上可接受的盐的同位素变化是指至少一个原子被具有相同原子序数但原子质量与通常在自然界中发现的原子质量不同的原子取代。可被引入本发明化合物或其药物上可接受的盐的同位素包括但不限于H，C，N和O，例如²H，³H，¹¹C，¹³C，¹⁴C，¹⁵N，¹⁷O，¹⁸O，³⁵S，¹⁸F，³⁶Cl和¹²⁵I。本发明的化合物或其药物上可接受的盐的适当的同位素衍生物可通过使用适当试剂的适当同位素衍生物的常规技术制备。

本发明化合物可使用本领域技术人员已知的方法或本发明新方法制得。具体来说，具有式I、式IIa、式IIb或式III的本发明化合物可如反应方案1中的反应实施例所示制得。2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酸和浓硫酸在甲醇中加热反应，得产物2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酸甲酯。2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酸甲酯和异丙基胺基锂在无水四氢呋喃，在低温下反应，随后加入5-溴-2-硝基苯甲醛的无水四氢呋喃溶液，在室温下反应，得产物3-(5-溴-2-硝基苯基)-3-羟基-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)丙酸甲酯。3-(5-溴-2-硝基苯基)-3-羟基-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)丙酸甲酯和重铬酸吡啶盐在二氯甲烷中加热反应，得产物3-(5-溴-2-硝基苯基)-3-氧代-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)丙酸甲酯。3-(5-溴-2-硝基苯基)-3-氧代-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)丙酸甲酯和水合肼加热反应，得到产物5-(5-溴-2-硝基苯基)-4-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮。5-(5-溴-2-硝基苯基)-4-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮和二水氯化亚锡在乙醇中加热还原，得产物5-(2-氨基-5-溴苯基)-4-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮。5-(2-氨基-5-溴苯基)-4-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮，原甲酸三甲酯和对甲苯磺酸在四氢呋喃中加热反应，得产物9-溴-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)吡唑并[1，5-c]喹唑啉-2(3H)-酮。9-溴-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)吡唑并[1，5-c]喹唑啉-2(3H)-酮，(6-(3-(二甲氨基)丙基)吡啶-3-基)硼酸频哪醇酯，碳酸铯和[1，1′-双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯在二氧六环和水中加热反应，得到目标化合物9-(6-(3-(二甲氨基)丙氧基)吡啶-3-基)-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)吡唑并[1，5-c]喹唑啉-2(3H)-酮。

反应方案1

本发明化合物可如反应方案2中的反应实施例所示制得。5-(5-溴-2-硝基苯基)-4-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮，DIPEA和二碳酸二叔丁酯的二氯甲烷溶液在甲醇中室温反应，得产物5-(5-溴-2-硝基苯基)-3-氧代-4-(四氢-2H-吡喃-4-基)-2，3-二氢-1H-吡唑-1-甲酸叔丁基酯。5-(5-溴-2-硝基苯基)-3-氧代-4-(四氢-2H-吡喃-4-基)-2，3-二氢-1H-吡唑-1-甲酸叔丁基酯和碘甲烷在DMF中加热反应，得到产物5-(5-溴-2-硝基苯基)-2-甲基-3-氧代-4-(四氢-2H-吡喃-4-基)-2，3-二氢-1H-吡唑-1-甲酸叔丁基酯。5-(5-溴-2-硝基苯基)-2-甲基-3-氧代-4-(四氢-2H-吡喃-4-基)-2，3-二氢-1H-吡唑-1-甲酸叔丁基酯和HCI二氧六环在二氧六环中室温反应，得产物5-(5-溴-2-硝基苯基)-2-甲基-4-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮盐酸盐。5-(5-溴-2-硝基苯基)-2-甲基-4-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮盐酸盐在Zn和NH₄Cl存在下在甲醇和水的混合溶液中，室温反应，得到产物5-(2-氨基-5-溴苯基)-2-甲基-4-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮。5-(2-氨基-5-溴苯基)-2-甲基-4-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮，TsOH·H2O和原甲酸三甲酯在THF中加热反应，得到产物9-溴-3-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)吡唑并[1，5-c]喹唑啉-2(3H)-酮。9-溴-3-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)吡唑并[1，5-c]喹唑啉-2(3H)-酮，(6-(3-(二甲氨基)丙基)吡啶-3-基)硼酸频哪醇酯，碳酸铯和[1，1′-双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯在二氧六环和水中加热反应，得到目标化合物9-(6-(3-(二甲氨基)丙氧基)吡啶-3-基)-3-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)吡唑并[1，5-c]喹唑啉-2(3H)-酮。

反应方案2

其它相关化合物可用类似方法制得。例如，用N，N-二甲基-3-(4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧硼戊环-2-基)-2-(三氟甲基)苯氧基)丙烷-1-胺替代(6-(3-(二甲氨基)丙基)吡啶-3-基)硼酸频哪醇酯，可制得目标化合物9-(4-(3-(二甲氨基)丙氧基)-3-(三氟甲基)苯基)-3-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)吡唑并[1，5-c]喹唑啉-2(3H)-酮。用1-(2-氟-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧硼戊环-2-基)苯基)-N，N-二甲基哌啶-4-胺替代(6-(3-(二甲氨基)丙基)吡啶-3-基)硼酸频哪醇酯，可制得目标化合物9-(4-(4-(二甲氨基)哌啶-1-基)-3-氟苯基)-3-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)吡唑并[1，5-c]喹唑啉-2(3H)-酮。用5-(5-溴-2-硝基苯基)-4-异丙基-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮替代5-(5-溴-2-硝基苯基)-4-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮，可制得目标化合物9-(6-(3-(二甲氨基)丙氧基)吡啶-3-基)-1-异丙基-3-甲基吡唑并[1，5-c]喹唑啉-2(3H)-酮。用2-(3-(哌啶-1-基)丙氧基)-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧硼戊环-2-基)吡啶替代(6-(3-(二甲氨基)丙基)吡啶-3-基)硼酸频哪醇酯，可制得目标化合物9-(6-(3-(哌啶-1-基)丙氧基)吡啶-3-基)-1-异丙基-3-甲基吡唑并[1，5-c]喹唑啉-2(3H)-酮。用1-(2-三氟甲基-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧硼戊环-2-基)苯基)-N，N-二甲基哌啶-4-胺替代(6-(3-(二甲氨基)丙基)吡啶-3-基)硼酸频哪醇酯，可制目标化合物9-(4-(4-(二甲氨基)哌啶-1-基)-3-(三氟甲基)苯基)-1-异丙基-3-甲基吡唑并[1，5-c]喹唑啉-2(3H)-酮。用碘乙烷替代碘甲烷，可制得目标化合物9-(6-(3-(二甲氨基)丙氧基)吡啶-3-基)-3-乙基-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)吡唑并[1，5-c]喹唑啉-2(3H)-酮。

本发明的一个重要方面是发现了式I、式IIa、式IIb和式III的化合物是激酶抑制剂，特别是ATM激酶抑制剂。因此，这些化合物可用于治疗或预防多种因为DDR功能缺陷而引起的临床病症或受益于激酶活性被抑制的疾病，这些疾病也称为DDR介导的疾病或激酶介导的疾病。因此，本发明提供式I、式IIa、式IIb和式III的化合物在制备治疗或预防因为DDR功能缺陷而引起的临床病症或受益于激酶活性被抑制的疾病的药物中的应用。

本发明还包括DDR介导的疾病或激酶介导的疾病的治疗或预防方法，所述方法包括给予对象有效量的式I、式IIa、式IIb或式III化合物，或其立体异构体、互变异构体、N-氧化物、水合物、同位素取代的衍生物、溶剂化物或其可药用盐，或其混合物，或其前药或含有有效量的式I、式IIa、式IIb或式III化合物或其立体异构体、互变异构体、N-氧化物、水合物、同位素取代的衍生物、溶剂化物或其可药用盐，或其混合物，或其前药的药物组合物。

本发明中，因为DDR功能缺陷而引起的临床病症或受益于激酶活性被抑制的疾病，或DDR介导或激酶介导的疾病包括但不限于癌症，包括但不限于肝癌、黑素瘤、霍奇金病、非霍奇金淋巴瘤、急性淋巴白血病、慢性淋巴白血病、多发性骨髓瘤、成神经细胞瘤、乳腺癌、卵巢癌、肺癌、维尔姆斯瘤、子宫颈癌、睾丸癌、软组织肉瘤、原发性巨球蛋白血症、膀胱癌、慢性粒细胞白血病、原发性脑癌、恶性黑素瘤、小细胞肺癌、胃癌、结肠癌、恶性胰腺胰岛瘤、恶性类癌性癌症、绒毛膜癌、蕈樣肉芽腫、头颈癌、骨原性肉瘤、胰腺癌、急性粒细胞白血病、毛细胞白血病、横纹肌肉瘤、卡波西肉瘤、泌尿生殖系统肿瘤病、甲状腺癌、食管癌、恶性高钙血症、子宫颈增生症、肾细胞癌、子宫内膜癌、真性红细胞增多症、特发性血小板增多症、肾上腺皮质癌、皮肤癌、前列腺癌和亨廷顿氏疾病。本发明中，激酶包括ATM(共济失调-毛细血管扩张突变基因)激酶；因此，在一些实施方案中，本发明所述的癌症是ATM激酶介导的癌症，优选是受益于ATM激酶活性被抑制的癌症。

在实施本发明治疗方法时，给有一种或多种这些症状的病人施用有效量的药物制剂。所述药物制剂含有有效治疗浓度的式I、式IIa、式IIb或式III化合物或其立体异构体、互变异构体、N-氧化物、水合物、同位素取代的衍生物、溶剂化物或其可药用盐，或其混合物，或其前药，被配制成用于口服、静脉注射、局部或外用给药的形式，用于治疗癌症和其他疾病。给药量是有效地改善或消除一个或多个病症的药量。对于特定疾病的治疗，有效量是足以改善或以某些方式减轻与疾病有关的症状的药量。这样的药量可作为单一剂量施用，或者可依据有效的治疗方案给药。给药量也许可治愈疾病，但是给药通常是为了改善疾病的症状。一般需要反复给药来实现所需的症状改善。

在另一个实施方案中提供了一种药用组合物，其中含有激酶抑制剂的式I或其可药用盐与可药用载体。

本发明另一个实施方案涉及能有效地治疗癌症的药用组合物，其中包含激酶抑制剂的式I、式IIa、式IIb或式III化合物，或其立体异构体、互变异构体、N-氧化物、水合物、同位素取代的衍生物、溶剂化物或其可药用盐，或其混合物，或其前药，与至少一种已知的抗癌药物或抗癌药物的可药用盐联合共用。特别是和其他与DNA损伤和修复机理有关的抗癌药物的联合共用，包括PARP抑制剂奥拉帕尼、Niraparib、Rucaparib、Talazoparib和Senaparib；HDAC抑制剂伏立诺他、罗咪地辛、帕比司他和贝利司他；等等。以及和其他与细胞分裂检测点有关的抗癌药物的联合共用，包括Chk1/2抑制剂，CDK4/6抑制剂如帕博西尼，ATR抑制剂，Wee1抑制剂，DNA-PK抑制剂等等。其他可用于抗癌联合治疗的已知抗癌药物包括但不限于烷化剂例如白消安、马法兰、苯丁酸氮芥、环磷酰胺、异环磷酰胺、替莫唑胺、苯达莫司汀、顺铂、丝裂霉素C、博莱霉素和卡铂；拓扑异构酶I抑制剂例如喜树碱、伊立替康和托泊替康；拓扑异构酶II抑制剂例如阿霉素、表阿霉素、阿克拉霉素、米托蒽醌、甲基羟基玫瑰树碱和铭托泊普；RNA/DNA抗代谢物例如5-氮杂胞苷、吉西他滨、5-氟尿嘧啶、卡培他滨和甲氨蝶呤；DNA抗代谢物例如5-氟-2′-去氧尿苷、氟达拉滨，奈拉滨、阿糖胞苷、普拉曲沙、培美曲塞、羟基脲和硫代鸟嘌呤；抗有丝分裂剂例如秋水仙碱、长春碱、长春新碱、长春瑞滨、紫杉醇，伊沙匹隆、卡巴他赛和多西他赛；抗体例如单抗，帕尼单抗、耐措妥珠单抗、纳武单抗、派姆单抗、雷莫芦单抗、贝伐珠单抗、帕妥珠单抗、曲妥珠单抗、西妥昔单抗、奥滨尤妥珠单抗、奥法木单抗、利妥昔单抗、阿仑单抗、替伊莫单抗、托西莫单抗、本妥昔单抗、达雷木单抗、埃罗妥珠单抗、T-DM1、Ofatumumab、Dinutuximab、Blinatumomab、易普利姆玛、阿瓦斯丁、赫赛汀和美罗华；激酶抑制剂例如伊马替尼、吉非替尼、厄洛替尼、奥斯替尼、阿法替尼、赛立替尼、艾乐替尼、克唑替尼、埃罗替尼、拉帕替尼、索拉非尼、瑞格非尼、维罗非尼、达拉非尼、阿柏西普、舒尼替尼、尼罗替尼、达沙替尼、博舒替尼、普拉替尼、依鲁替尼、卡博替尼、乐伐替尼、凡德他尼、曲美替尼、卡比替尼、阿昔替尼、替西罗莫司、Idelalisib、帕唑帕尼、特癌适和依维莫司。其他可用于抗癌组合治疗的已知抗癌药物包括他莫昔芬、来曲唑、氟维司群、米托胍腙、奥曲肽、视黄酸、砒霜、唑来膦酸、硼替佐米、卡非佐米、Ixazomib、维莫德吉、索尼德吉、狄诺塞麦、萨力多胺、来那度胺、Venetoclax、Aldesleukin(重组人白介素-2)和Sipueucel-T(前列腺癌治疗疫苗)。

在实施本发明的方法时，本发明化合物与至少一种已知的抗癌药物可作为单一的药用组合物一起给药。另外，本发明化合物也可与至少一种已知抗癌药分开给药。在一个实施方案，本发明化合物和至少一种已知的抗癌药差不多同时给药，即所有的药物同时施用或陆续施用，只要化合物在血液中同时达到治疗浓度即可。在另外一个实施方案，本发明的化合物和至少一种已知的抗癌药根据各自的剂量方案给药，只要化合物在血液中达到治疗浓度即可。

本发明的另一个实施方案，是一种由所述化合物组成的能有效的抑制肿瘤的，作为激酶抑制剂的生物耦合物。这个能抑制肿瘤的生物耦合物由所述化合物与至少一种已知的有医疗作用的抗体，如赫赛汀或美罗华，或生长素，如EGF或FGF，或细胞激素，如白细胞介素2或4，或任意能与细胞表面结合的分子组成。该抗体与其他分子能把所述化合物递送到其靶点，使之成为有效的抗癌药物。此生物耦合物也可以提高有医疗作用的抗体，如赫赛汀或美罗华的抗癌效果。

本发明的另一实施例涉及一种能有效的抑制肿瘤的药用组合物，包含激酶抑制剂的式I、式IIa、式IIb或式III化合物，或其立体异构体、互变异构体、N-氧化物、水合物、同位素取代的衍生物、溶剂化物或其可药用盐，或其混合物，或其前药，与放射疗法联合治疗。在此实施例，本发明化合物与放射治疗可在相同时间或不同时间给药。

本发明的另一实施例涉及一种能有效的用于癌症手术后治疗的药用组合物，包含激酶抑制剂的式I、式IIa、式IIb或式III化合物，或其立体异构体、互变异构体、N-氧化物、水合物、同位素取代的衍生物、溶剂化物或其可药用盐，或其混合物，或其前药。本发明还涉及用手术切除肿瘤，然后用本发明的药用组合物治疗该哺乳动物的癌症的治疗方法。

本发明的药用组合物包括所有本发明化合物的含有量能有效地实现其预期目标的药品制剂。虽然每个人的需求各不相同，本领域技术人员可确定药品制剂中每个部分的最佳剂量。一般情况下，所述化合物，或其可用药盐，对哺乳动物每天口服给药，药量按照约0.0025到50毫克/公斤体重。但最好是每公斤口服给药约0.01到10毫克/公斤。如果也施用一个已知的抗癌药物，其剂量应可有效地实现其预期的目的。这些已知的抗癌药物的最佳剂量是本领域技术人员所熟知的。

单位口服剂量可以包括约0.01到50毫克，最好是约0.1到10毫克的本发明化合物。单位剂量可给予一次或多次，每天为一片或多片，每片含有约0.1到50毫克，合宜地约0.25到10毫克的本发明化合物或其溶剂化物。

在外用制剂中，本发明化合物的浓度可以是每克载体约0.01到100毫克。

本发明化合物可作为未加工药品给药。本发明化合物也可以作为含有可药用载体(包括辅料和助剂)的一个合适的药物制剂的一部分给药。这些可药用载体有利于把化合物加工成可药用的药物制剂。优选的药物制剂，特别是那些口服的和优选的给药方式类型，如片剂，锭剂和胶囊，以及适合于注射或口服的溶液，包含约0.01％到99％，最好从约0.25％到75％的活性化合物以及辅料。

本发明的范围也包括本发明化合物的无毒性可药用盐。酸加成盐由混合一个无毒性可药用酸溶液和本发明的化合物溶液而形成。所述酸例如盐酸，富马酸，马来酸，琥珀酸，乙酸，柠檬酸，酒石酸，碳酸，磷酸，草酸等。碱加成盐由混合一个无毒性可药用碱溶液和本发明的化合物溶液而形成。所述碱例如氢氧化钠，氢氧化钾，氢胆碱，碳酸钠，三羟甲基氨基甲烷，N-甲基葡萄糖胺等。

本发明的药物制剂可以给予任何哺乳动物，只要他们能获得本发明化合物的治疗效果。在这些哺乳动物中最为重要的是人类和兽医动物，虽然本发明不打算如此受限。

本发明的药物制剂可通过任何途径给药以达到其预期目的。例如，可以通过肠外，皮下，静脉，肌肉，腹腔内，透皮，口腔，鞘内，颅内，鼻腔或外用途径给药。作为替代或并行地，可以通过口服给药。药的剂量将根据病人的年龄，健康与体重，并行治疗的种类，治疗的频率，以及所需治疗效益来决定。

本发明的药物制剂可用已知的方式制造。例如，由传统的混合，制粒，制锭，溶解，或冷冻干燥过程制造。制造口服制剂时，可结合固体辅料和活性化合物，选择性研磨混合物。如果需要或必要时加入适量助剂后，加工颗粒混合物，获得片剂或锭剂芯。

合适的辅料特别是填料，例如糖类如乳糖或蔗糖，甘露醇或山梨醇；纤维素制剂和/或钙磷酸盐，例如磷酸三钙或磷酸氢钙；以及粘结剂，例如淀粉糊，包括玉米淀粉，小麦淀粉，大米淀粉，马铃薯淀粉，明胶，黄芪胶，甲基纤维素，羟丙基甲基纤维素，羧甲基纤维素钠，和/或聚乙烯吡咯烷酮。如果需要，可增加崩解剂，比如上面提到的淀粉，以及羧甲基淀粉，交联聚乙烯吡咯烷酮，琼脂，或褐藻酸或其盐，如海藻酸钠。辅助剂特别是流动调节剂和润滑剂，例如，硅石，滑石，硬脂酸或其盐，如硬脂酸镁或硬脂酸钙，和/或聚乙二醇。如果需要，可以给锭剂核芯提供可以抵抗胃液的合适包衣。为此，可以应用浓缩糖类溶液。这个溶液可以含有阿拉伯树胶，滑石，聚乙烯吡咯烷酮，聚乙二醇和/或二氧化钛，漆溶液和合适的有机溶剂或溶剂混合物。为了制备耐胃液的包衣，可使用适当的纤维素溶液，例如醋酸纤维素邻苯二甲酸或羟丙基甲基纤维素邻苯二甲酸。可向药片或锭剂核芯的包衣加入染料或色素。例如，用于识别或为了表征活性成分剂量的组合。

其他可口服的药物制剂包括明胶制成的压接式胶囊，以及用明胶和甘油或山梨醇等增塑剂制成的密封软胶囊。该压接式胶囊可含有颗粒形式的活性化合物，与填料例如乳糖；粘结剂例如淀粉；和/或润滑剂例如滑石粉或硬脂酸镁，以及稳定剂混合而成。在软胶囊，活性化合物最好是溶解或悬浮在适当的液体例如油脂或液体石蜡中，其中可加入稳定剂。

合适于肠外给药的制剂包括活性化合物的水溶液，如水溶性盐的溶液和碱性溶液。此外，可施用适当的活性化合物的油性注射悬浮液。合适的亲脂性溶剂或载体包括油脂例如香油，合成脂肪酸酯例如油酸乙酯或甘油三酯或聚乙二醇400，或氢化蓖麻油，或环糊精。水性注射悬浮液可含有增加悬浮液黏度的物质，例如羧甲基纤维素钠，山梨醇，和/或葡聚糖。也可以含有悬浮稳定剂。

按照本发明的一个方面，本发明的化合物采用外用和肠外配方，并用于治疗皮肤癌。

本发明的外用制剂可通过优选合适的载体来制成油剂，霜剂，乳液剂，药膏等。合适的载体包括植物或矿物油，白矿油(白软石蜡)，支链脂肪或油脂，动物脂肪和高分子醇(大于C₁₂)。优选的载体是活性成分能溶解在其中的那些载体。也可包括乳化剂，稳定剂，保湿剂和抗氧化剂，以及如果需要的话，给予颜色或香味的试剂。此外，这些外用制剂可包含透皮渗透增强剂。这种增强剂的例子可参见美国专利号3,989,816和4,444,762。

霜剂优选用矿物油，自乳化蜂蜡和水的混合物配制，与溶解于少量油例如杏仁油的活性成分混合而成。一个典型的霜剂例子包括约40份水，20份蜂蜡，40份矿物油和1份杏仁油。

药膏可以这样配制，将含有活性成分的植物油例如杏仁油和温热的软石蜡混合，然后使该混合物冷却。一个典型的药膏例子包括约30％重量的杏仁油和70％重量的白软石蜡。

下列实施例是举例说明，而不是限制本发明的方法和制剂。其他对于本领域技术人员来说是显而易见的，和在临床治疗中通常会遇到的对各种条件和参数的适当修改和改进，都在本发明的精神和范围内。

实施例

一般性说明

所用试剂均是商品品质，溶剂均按照标准方法干燥纯化。使用电喷雾的单四级杆质谱仪(平台II，安捷伦6110)分析质谱样品。使用Brücker Ascend 400核磁仪在400MHz记录¹H NMR光谱，化学位移记录为以TMS作为内标(0.00ppm)从低场始以ppm为单位，耦合常数J值以Hz为单位。

实施例1

9-(6-(3-(二甲氨基)丙氧基)吡啶-3-基)-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)吡唑并[1，5-c]喹唑啉-2(3H)-酮

a)2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酸甲酯的制备：将2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酸(800mg，5.35mmol)溶于甲醇(10mL)中，加入浓硫酸(0.5mL)。反应体系在50℃下搅拌过夜。反应液冷却至室温，减压浓缩，残留物用乙酸乙酯(20mL)溶解，用饱和碳酸氢钠洗，再用饱和食盐水洗，分液，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到粗产物(900mg，黄色油状物)。

b)3-(5-溴-2-硝基苯基)-3-羟基-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)丙酸甲酯的制备：将2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酸甲酯(2.3g，14.3mmol)溶于无水四氢呋喃(30mL)中，-78℃滴加二异丙基胺基锂(LDA，9.8mL，19.56mmol)，加完在-78℃下反应0.5h。在-78℃下，将5-溴-2-硝基苯甲醛(3.0g，13.04mmol)的无水四氢呋喃溶液滴加到反应体系中，加完后慢慢升温至室温反应2h。反应液用水淬灭，分出有机相，水相用乙酸乙酯(100mL×2)萃取。合并有机相，用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到粗产物(5.3g，黄色固体)。LC-MS(ESI)：m/z(M+H)⁺/(M+2+H)⁺388.15/390.15。

c)3-(5-溴-2-硝基苯基)-3-氧代-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)丙酸甲酯的制备：将3-(5-溴-2-硝基苯基)-3-羟基-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)丙酸甲酯(3.0g，7.73mmol)，重铬酸吡啶盐(PDC，5.8g，15.46mmol)加入二氯甲烷(100mL)中，反应液在60℃下搅拌反应16hrs。反应液降到室温后过滤，减压浓缩，粗产物用硅胶柱(EA∶PE＝1∶1)纯化的到目标产物(2.0g，收率67％，浅黄色固物)。LC-MS(ESI)：m/z(M+H)⁺/(M+2+H)⁺386.05/388.05。

d)5-(5-溴-2-硝基苯基)-4-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮的制备：将3-(5-溴-2-硝基苯基)-3-氧代-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)丙酸甲酯(1.5g，3.88mmol)加入到水合肼(5mL)中，反应液在50℃下搅拌4hrs。将乙酸乙酯(100mL)和水(100mL)加入到反应体系中，分出有机相，水相用乙酸乙酯(50mL×2)萃取。合并有机相，用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到粗产物(1.1g，收率77％，浅黄色固体)。LC-MS(ESI)：m/z(M+H)⁺/(M+2+H)⁺368.10/370.10。

e)5-(2-氨基-5-溴苯基)-4-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮的制备：将5-(5-溴-2-硝基苯基)-4-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮(1.1g，3.0mmol)，二水氯化亚锡(1.4g，6.0mmol)加入到乙醇(30mL)中，在80℃下反应2hrs，反应液降到室温后用硅胶柱(乙酸乙酯)纯化，得到产物(700mg，收率69％，黄色固体)。LC-MS(ESI)：m/z(M+H)⁺/(M+2+H)⁺338.10/340.10。

f)9-溴-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)吡唑并[1，5-c]喹唑啉-2(3H)-酮的制备：将5-(2-氨基-5-溴苯基)-4-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮(650mg，1.92mmol)，原甲酸三甲酯(0.42mL，3.84mmol)，对甲苯磺酸(35mg，0.2mmol)溶于四氢呋喃(20mL)中，反应液回流搅拌3hrs，用硅胶柱(乙酸乙酯)纯化，得到产物(150mg，收率22％，黄色固体)。LC-MS(ESI)：m/z(M+H)⁺/(M+2+H)⁺348.10/350.10。

g)9-(6-(3-(二甲氨基)丙氧基)吡啶-3-基)-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)吡唑并[1，5-c]喹唑啉-2(3H)-酮的制备：将9-溴-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)吡唑并[1，5-c]喹唑啉-2(3H)-酮(120mg，0.34mmol)，(6-(3-(二甲氨基)丙基)吡啶-3-基)硼酸频哪醇酯(126mg，0.41mmol)，碳酸铯(221mg，0.68mmol)，[1，1′-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(Pd(dppf)Cl₂，24mg，0.03mmol)，1，4-二氧六环(9mL)和水(1mL)依次加入到反应瓶中，混合反应液在氮气保护下80℃搅拌4hrs，冷却至室温，将乙酸乙酯(50mL)和水(50mL)加入到反应体系中，分出有机相，水相用乙酸乙酯(50mL×2)萃取。合并有机相，用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到粗产物。粗品用制备液相色谱(C18柱，0-100％乙腈/水为流动相)分离纯化，得到目标化合物(13mg，8％收率，白色固体)。LC-MS(ESI)：m/z(M+H)⁺448.31。¹HNMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ8.96(s，1H)，8.61(d，J＝2.6Hz，1H)，8.33-8.29(m，2H)，8.14(dd，J＝8.6，2.6Hz，1H)，7.95(dd，J＝8.5，1.9Hz，1H)，7.88(d，J＝8.5Hz，1H)，6.98(d，J＝8.6Hz，1H)，4.36(t，J＝6.6Hz，2H)，4.00-3.96(m，2H)，3.58-3.50(m，4H)，2.39-2.35(m，2H)，2.23-2.19(m，1H)，2.16(s，6H)，1.91-1.86(m，2H)，1.73-1.68(m，2H)。

实施例2

9-(6-(3-(二甲氨基)丙氧基)吡啶-3-基)-3-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)吡唑并[1，5-c]喹唑啉-2(3H)-酮

a)5-(5-溴-2-硝基苯基)-3-氧代-4-(四氢-2H-吡喃-4-基)-2，3-二氢-1H-吡唑-1-甲酸叔丁基酯的制备：在10-15℃下，向5-(5-溴-2-硝基苯基)-4-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮(6g，14.32mmol)和DIPEA(3.70g，28.64mmol，4.99mL)的甲醇(120mL)溶液中逐滴加入二碳酸二叔丁酯(Boc20，4.69g，21.48mmol，4.94mL)的二氯甲烷(120mL)溶液。反应混合物在10-20℃下搅拌反应12hrs后，减压浓缩得到粗产物，经柱层析(SiO₂，PE∶EA＝1/0-0∶1)纯化，得到产物(3.1g，42.71％收率，黄色胶状物)。LC-MS(ESI)：m/z(M+H)⁺/(M+2+H)⁺368.0/370.0。

b)5-(5-溴-2-硝基苯基)-2-甲基-3-氧代-4-(四氢-2H-吡喃-4-基)-2，3-二氢-1h-吡唑-1-甲酸叔丁基酯的制备：在10℃下，向5-(5-溴-2-硝基苯基)-3-氧代-4-(四氢-2H-吡喃-4-基)-2，3-二氢-1H-吡唑-1-甲酸叔丁基酯(3.0g，5.92mmol)的DMF(15mL)溶液中一次性加入碘甲烷(1.68g，11.84mmol，737.00uL)。将混合物缓慢加热到50℃后在该温度下搅拌反应12hrs。反应液倒入水(50mL)中用乙酸乙酯(100mL×3)萃取。合并有机相，用食盐水(50mL)洗，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到粗产物，经柱层析(SiO₂，PE∶EA＝1/0-1∶1)纯化，得到产物(0.7g，21.73％收率，黄色固体)。LC-MS(ESI)：m/z(M+H)⁺/(M+2+H)⁺382.1/384.1。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)：δ8.10(d，J＝8.8Hz，1H)，7.82(dd，J＝8.8Hz，1H)，7.59(d，J＝2.4Hz，1H)，3.89(d，J＝11.6Hz，2H)，3.57(s，3H)，3.29-3.27(m，2H)，2.43-2.30(m，1H)，1.86-1.72(m，3H)，1.42-1.34(m，2H)，1.18-1.28(m，10H)。

c)5-(5-溴-2-硝基苯基)-2-甲基-4-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮盐酸盐的制备：向5-(5-溴-2-硝基苯基)-2-甲基-3-氧代-4-(四氢-2H-吡喃-4-基)-2，3-二氢-1H-吡唑-1-甲酸叔丁基酯(200mg，367.50umol)的二氧六环(5mL)溶液中加入4MHCI二氧六环(5mL)溶液，反应液在30℃下搅拌12hrs。反应混合物减压浓缩后得到粗产物(150mg，97.49％收率，棕色油状物)。LC-MS(ESI)：m/z(M+H)⁺/(M+2+H)⁺382.0/384.0。

d)5-(2-氨基-5-溴苯基)-2-甲基-4-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮的制备：在25℃下，向5-(5-溴-2-硝基苯基)-2-甲基-4-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮盐酸盐(0.05g，119.43μmol)和甲醇(7mL)和水(0.6mL)的混合溶液中加入NH₄Cl(95.82mg，1.79mmol)和Zn(62.47mg，955.41μmol)，搅拌反应2hrs。将反应混合物过滤，减压浓缩，残留物用THF(10mL)溶解，用三乙胺将其pH调至9，然后过滤，有机相减压浓缩得到粗产物(0.04g，棕色固体)。LC-MS(ESI)：m/z(M+H)⁺/(M+2+H)⁺352.0/354.0。

e)9-溴-3-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)吡唑并[1，5-c]喹唑啉-2(3H)-酮的制备：向5-(2-氨基-5-溴苯基)-2-甲基-4-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1，2-二氢-3H-吡唑-3-酮(0.04g，113.56μmol)的THF(10mL)溶液中加入TsOH·H2O(4.32mg，22.71μmol)和原甲酸三甲酯(36.15mg，340.69μmol)。反应混合物在80℃下搅拌12hrs。将反应混合物过滤，减压浓缩得到的残留物，经制备薄板层析(SiO₂，DCM∶MeOH＝10∶1)纯化，得到产物(33mg，80.22％收率，黄色固体)。LC-MS(ESI)：m/z(M+H)⁺/(M+2+H)⁺361.8/363.8。

f)9-(6-(3-(二甲氨基)丙氧基)吡啶-3-基)-3-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)吡唑并[1，5-c]喹唑啉-2(3H)-酮的制备：9-溴-3-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)吡唑并[1，5-c]喹唑啉-2(3H)-酮(23mg，63.50μmol)，(6-(3-(二甲氨基)丙基)吡啶-3-基)硼酸频哪醇酯(27.35mg，89.32μmol)，碳酸铯(38.81mg，119.12μmol)和[1，1′-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(Pd(dppf)Cl₂，8.72mg，11.92μmol)在二氧六环(10mL)和水(0.5mL)中的混合物，用氮气置换三次，然后反应液在90℃下在氮气的保护下搅拌反应2hrs。反应混合物用ACN(10mL)稀释，过滤，减压浓缩，残留物用制备薄板层析(SiO₂，DCM∶MeOH＝5∶1)纯化，再经制备-HPLC(色谱柱：Waters Xbridge 150*25mm*5um；流动相：[water(10mM NH₄HCO₃)-ACN]；B％：7％-37％，10min)进一步纯化，得到目标化合物(5mg，16.45％收率，黄色油状物)。

实施例3-28应用类似于所描述的实施例2的合成方法制得，也可由本领域技术人员按已知方法合成制得。

实施例29

应用体外ATM激酶检测法测定9-(6-(3-(二甲氨基)丙氧基)吡啶-3-基)-3-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)吡唑并[1，5-c]喹唑啉-2(3H)-酮与其相似物对ATM的体外抑制作用

ATM酶活性的检测是采用Cisbio的HTRF试剂，在384孔板(Greiner，#784075)中进行。加入2.5μL经缓冲液稀释的梯度浓度化合物工作液到384孔板中，再依次加入2.5μL的120nM的p53底物(Eurofins，#14-952)和2.5μL的2ng/μL的ATM酶(Eurofins，14-933)，最后加入2.5μL的含有240μM ATP、20mM Mg(AcO)2和20mM MnCl2的混合物溶液，1000rpm转速离心1分钟，在室温避光反应30分钟。之后加入5μL的EDTA终止液(250mM)终止反应。在每孔中最后加入5μL的检测混合物(Anti-phospho-p53(ser15)-K(Cisbio，#61P08KAE，0.084ng/μL)和Anti-GST-d2(Cisbio，#61GSTDLA，5.00ng/μL))后，于室温培育过夜，在Envision 2104仪器上检测665nm和615nm的荧光值。实验各试剂的终浓度为12.5mM HEPES(pH8.0)，0.5％甘油，0.005％Brij-35，0.625mM DTT，0.0125％BSA，15nM p53，0.25ng/μL ATM，30μM ATP，2.5mM Mg(AcO)2，2.5mM MnCl₂，62.5mM EDTA，0.021ng/μL Anti-phospho-p53，1.25ng/μLAnti-GST-d2。

计算相对荧光比值：Ratio_665nm/615nm-Ratio_背景，并计算抑制率％＝(1-(待测化合物孔的相对荧光比值-阳性对照孔的相对荧光比值)/(阴性对照孔的相对荧光比值-阳性对照孔的相对荧光比值))×100，使用软件GraphPad Prism6.0分析数据，以曲线方程：Y＝Bottom+(Top-Bottom)/(1+10^((LogIC₅₀-X)*HillSlope))进行拟合，计算IC₅₀值。表1汇总了部分化合物的ATM激酶活性的抑制效应(抑制率％)。

表1

因此，经ATM激酶检测法测定，9-(6-(3-(二甲氨基)丙氧基)吡啶-3-基)-3-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)吡唑并[1，5-c]喹唑啉-2(3H)-酮(实施例2)与其相似物对ATM激酶有很好的抑制效应。

实施例30

应用MTT检测法测定9-(6-(3-(二甲氨基)丙氧基)吡啶-3-基)-3-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)吡唑并[1，5-c]喹唑啉-2(3H)-酮与其相似物联合CPT-11对人结肠癌细胞SW620增长的抑制作用

将新复苏的人结肠癌细胞SW620细胞培养传代至生长状态良好，当融合度达90％左右时，用于实验。用胰酶消化SW620细胞，800rpm转速离心5min，弃上清，用新鲜培基(RPMI1640培养基+10％FBS)重悬，并计数，以合适的细胞孔密度接种至96孔细胞培养板中，置于37℃5％CO₂培养箱培养过夜。待测化合物和参考化合物AZD0156母液用DMSO按1∶3和1∶10比例分别进行连续系列稀释至8个浓度：第一个浓度为1μM或0.333μM，最后一个浓度为DMSO阴性对照(0μM，DMSO终浓度为1‰)。每个浓度取5μL加入到120μL培基(25倍稀释)，振荡混匀。取培养过夜的细胞，除去培养基，每孔加入195μL含205nM CPT-11的新鲜培养基，再分别加入5μL稀释好的含相应浓度受试物的培基，随后将培养板置于37℃5％CO₂培养箱培养5d。除去原液，每孔加100μL含MTT(0.5mg/mL)的新鲜无血清DMEM培基后，继续培养。4h后除去原液，每孔加入100μL DMSO，避光震荡10min，置于多功能读数仪读取552/690nm波长的吸光值。用软件Graph Pad Prism 6.0分析数据，化合物对细胞增殖的抑制活性以细胞存活率对化合物浓度对数为坐标绘图。细胞存活率％＝(OD_化合物-OD_背景)/(OD_DMSO-OD_背景)×100。IC₅₀值以S形剂量反应曲线方程拟合，曲线方程为：Y＝100/(1+10^(LogC-LogIC₅₀))，其中C是化合物浓度。

表2汇总了部分化合物联合CPT-11对人结肠癌细胞SW620增长的抑制作用数据(IC₅₀)。

表2

实施例	1	2	3	5	6	7	8	10	11
										IC50(nM)	＞1000	9.80	6.22	1.52	2.69	3.16	2.10	1.46	4.82
实施例	19	20	21	22	23	24	25	26	AZD0156
										IC50(nM)	5.67	3.48	10.46	26.1	8.49	47.63	13.44	141.6	9.77

因此，经MTT检测法测定，9-(6-(3-(二甲氨基)丙氧基)吡啶-3-基)-3-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)吡唑并[1，5-c]喹唑啉-2(3H)-酮(实施例2)与其相似物对SW620细胞增长有很好的抑制作用。

实施例32

应用MTT检测法测定9-(6-(3-(二甲氨基)丙氧基)吡啶-3-基)-3-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)吡唑并[1，5-c]喹唑啉-2(3H)-酮与其相似物对人乳腺癌细胞MDA-MB-468增长的抑制作用

将新复苏的人乳腺癌细胞MDA-MB-468细胞培养传代至生长状态良好，当融合度达90％左右时，用于实验。用胰酶消化MDA-MB-468细胞，800rpm转速离心5min，弃上清，用新鲜培基(RPMI 1640培养基+10％FBS)重悬，并计数，以合适的细胞孔密度接种至96孔细胞培养板，置于37℃5％CO₂培养箱培养过夜。待测化合物或参考化合物AZD0156母液用DMSO按1∶3和1∶10比例分别进行连续系列稀释至8个浓度：第一个浓度为1μM或0.333HM，最后一个浓度为DMSO阴性对照(0μM，DMSO终浓度为1‰)。每个浓度取5μL加入到120μL培基(25倍稀释)，振荡混匀。取培养过夜的细胞，除去培养基，每孔加入195μL新鲜培养基(RPMI 1640+5％FBS)，再分别加入5μL稀释好的含相应浓度受试物的培基，随后将培养板置于37℃ 5％CO₂培养箱培养7d(其中第4天换药一次继续培养)。除去原液，每孔加100μL含MTT(0.5mg/mL)的新鲜无血清DMEM培基后，继续培养。4h后除去原液，每孔加入100μLDMSO，避光震荡10min，置于多功能读数仪读取552/690nm波长的吸光值。用软件Graph Pad Prism 6.0分析数据，化合物对细胞增殖的抑制活性以细胞存活率对化合物浓度对数为坐标绘图。细胞存活率％＝(OD_化合物-OD_背景)/(OD_DMSO-OD_背景)×100。IC₅₀值以S形剂量反应曲线方程拟合，曲线方程为：Y＝100/(1+10^(LogC-LogIC₅₀))，其中C是化合物浓度。

表3汇总了部分化合物对人乳腺癌细胞MDA-MB-468增长的抑制作用数据(IC₅₀)。

表3

实施例	1	2	3	5	6	7	8	10	11
										IC50(nM)	231.2	9.50	6.00	2.38	2.71	3.79	2.65	2.27	3.55
实施例	19	20	21	22	23	24	25	26	AZD0156
										IC50(nM)	5.55	2.21	7.22	22.88	6.76	43.84	13.53	123.3	9.87

因此，经MTT检测法测定，9-(6-(3-(二甲氨基)丙氧基)吡啶-3-基)-3-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)吡唑并[1，5-c]喹唑啉-2(3H)-酮(实施例2)与其相似物对MDA-MB-468细胞增长有很好的抑制作用。

虽然已经充分地描述了本发明，但是本领域技术人员应当理解，可在不影响本发明范围或其任何实施方案的情况下，在广泛且等同的条件、制剂和其它参数范围内进行相同实施。本文所引用的所有专利、专利申请和出版物都全文引入本文以供参考。

Claims (19)

1.式I的化合物，其立体异构体或可药用盐，或其混合物：

其中：

A₁、A₂和A₃各自为CR₄、CR₅和CR₆；

B₁为CH，B₂为N，B₃为CH，和B₄为CH；或者，B₁为CH，B₂为CR₈，B₃为CH，B₄为CH；

R₁为C_1-4烷基或任选被1-4个C_1-6烷基取代的四氢吡喃基；

R₂是C_1-6烷基；

R₃是被-NR₁₁R₁₂取代的C_1-6烷氧基，其中，R₁₁和R₁₂各自独立选自氢或C_1-6烷基，或者R₁₁和R₁₂与N一起形成可被任选取代的4元至8元杂环基；或者R₃为被-NR₁₁R₁₂取代的哌啶基，其中，R₁₁和R₁₂各自独立选自氢或C_1-6烷基；

R₄-R₆均为氢；

R₈为氢、卤素、C_1-4烷基或卤代C_1-4烷基其中，所述式I的化合物不包括9-(6-(3-(二甲氨基)丙氧基)吡啶-3-基)-3-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)吡唑并[1,5-c]喹唑啉-2(3H)-酮。

2.权利要求1所述的化合物，其立体异构体或可药用盐，或其混合物，其特征在于，R₂为C_1-4烷基。

3.权利要求1的化合物，其立体异构体或可药用盐，或其混合物，其特征在于，R₁为：

4.权利要求1的化合物，其立体异构体或可药用盐，或其混合物，其特征在于，R₈为卤素或卤代C_1-4烷基。

5.权利要求1的化合物，其立体异构体或可药用盐，或其混合物，其特征在于，R₃选自：

6.权利要求1的化合物，其为式IIa或式IIb的化合物，其立体异构体或可药用盐，或其混合物：

其中，A₁-A₃、B₁、B₃、B₄、R₁、R₃和R₈如权利要求1所定义，R₇、R₉和R₁₀为氢。

7.权利要求6的化合物，其立体异构体或可药用盐，或其混合物，其特征在于，式IIb中，R₈为卤素或卤代C_1-4烷基。

8.权利要求6的化合物，其立体异构体或可药用盐，或其混合物，其特征在于，式IIa和IIb中，R₁各自独立选自：

9.权利要求6的化合物，其立体异构体或可药用盐，或其混合物，其特征在于，R₃选自：

10.权利要求1的化合物，其中所述化合物选自：

9-(6-(3-(哌啶-1-基)丙氧基)吡啶-3-基)-3-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)吡唑并[1,5-c]喹唑啉-2(3H)-酮；

9-(4-(3-(二甲氨基)丙氧基)-3-(三氟甲基)苯基)-3-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)吡唑并

[1,5-c]喹唑啉-2(3H)-酮；

9-(4-(4-(二甲氨基)哌啶-1-基)-3-氟苯基)-3-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)吡唑并[1,5-c]喹唑啉-2(3H)-酮；

9-(4-(4-(二甲氨基)哌啶-1-基)-3-氯苯基)-3-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)吡唑并[1,5-c]喹唑啉-2(3H)-酮；

9-(4-(4-(二甲氨基)哌啶-1-基)-3-(三氟甲基)苯基)-3-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)吡唑并[1,5-c]喹唑啉-2(3H)-酮；

9-(4-(4-(甲氨基)哌啶-1-基)-3-(三氟甲基)苯基)-3-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)吡唑并

[1,5-c]喹唑啉-2(3H)-酮；

9-(4-(4-(乙氨基)哌啶-1-基)-3-(三氟甲基)苯基)-3-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)吡唑并

[1,5-c]喹唑啉-2(3H)-酮；

9-(6-(3-(二甲氨基)丙氧基)吡啶-3-基)-1-异丙基-3-甲基吡唑并[1,5-c]喹唑啉-2(3H)-酮；9-(6-(3-(哌啶-1-基)丙氧基)吡啶-3-基)-1-异丙基-3-甲基吡唑并[1,5-c]喹唑啉-2(3H)-酮；

9-(4-(4-(二甲氨基)哌啶-1-基)-3-氟苯基)-1-异丙基-3-甲基吡唑并[1,5-c]喹唑啉-2(3H)-酮；

9-(3-氯-4-(4-(二甲氨基)哌啶-1-基)苯基)-1-异丙基-3-甲基吡唑并[1,5-c]喹唑啉-2(3H)-酮；

9-(4-(4-(二甲氨基)哌啶-1-基)-3-(三氟甲基)苯基)-1-异丙基-3-甲基吡唑并[1,5-c]喹唑啉-2(3H)-酮；

9-(4-(3-(二甲氨基)丙氧基)-3-氟苯基)-1-异丙基-3-甲基吡唑并[1,5-c]喹唑啉-2(3H)-酮；

9-(4-(3-(二甲氨基)丙氧基)-3-(三氟甲基)苯基)-1-异丙基-3-甲基吡唑并[1,5-c]喹唑啉-2(3H)-酮；

9-(6-(3-(二甲氨基)丙氧基)吡啶-3-基)-3-乙基-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)吡唑并[1,5-c]喹唑啉-2(3H)-酮；或其立体异构体或其药用盐，或其混合物。

11.权利要求1～10中任一项所述的化合物或其可药用盐在制备治疗或预防由于DDR功能缺陷而引起的疾病或受益于激酶活性被抑制的药物中的用途。

12.权利要求11的用途，其特征在于，所述疾病是癌症。

13.权利要求12的用途，其中所述癌症是肝癌、黑素瘤、霍奇金病、非霍奇金淋巴瘤、急性淋巴白血病、多发性骨髓瘤、成神经细胞瘤、乳腺癌、卵巢癌、肺癌、维尔姆斯瘤、子宫颈癌、睾丸癌、软组织肉瘤、慢性淋巴细胞白血病、原发性巨球蛋白血症、膀胱癌、慢性粒细胞白血病、原发性脑癌、胃癌、结肠癌、恶性胰腺胰岛瘤、恶性类癌性癌症、绒毛膜癌、蕈樣肉芽腫、头或颈癌、骨原性肉瘤、胰腺癌、急性粒细胞白血病、毛细胞白血病、横纹肌肉瘤、卡波西肉瘤、泌尿生殖系统肿瘤、甲状腺癌、食管癌、恶性高钙血症、子宫颈增生症、肾细胞癌、子宫内膜癌、真性红细胞增多症、特发性血小板增多症、肾上腺皮质癌、皮肤癌、前列腺癌或亨廷顿氏疾病。

14.权利要求12的用途，其中所给药物还包括至少一种已知的抗癌药物，或所述抗癌药物的可药用盐。

15.权利要求14的用途，其中所述药物包括至少一种选自下组的抗癌药物：白消安、马法兰、苯丁酸氮芥、环磷酰胺、异环磷酰胺、替莫唑胺、苯达莫司汀、顺铂、丝裂霉素C、博莱霉素、卡铂、喜树碱、伊立替康、托泊替康、阿霉素、表阿霉素、阿克拉霉素、米托蒽醌、甲基羟基玫瑰树碱、依托泊甙、5-氮杂胞苷、吉西他滨、5-氟尿嘧啶、卡培他滨、甲氨蝶呤、5-氟-2'-去氧尿苷、氟达拉滨、奈拉滨、阿糖胞苷、阿拉诺新、普拉曲沙、培美曲塞、羟基脲，硫代鸟嘌呤、秋水仙碱、长春碱、长春新碱、长春瑞滨、紫杉醇、伊沙匹隆、卡巴他赛、多西他赛、单抗、帕尼单抗、Ofatumumab、阿瓦斯丁、赫赛汀、美罗华、伊马替尼、吉非替尼、埃罗替尼、拉帕替尼、索拉非尼、舒尼替尼、尼罗替尼、达沙替尼、帕唑帕尼、特癌适、依维莫司、伏立诺他、罗咪酯肽、他莫昔芬、来曲唑、氟维司群、米托胍腙、奥曲肽、视黄酸、砒霜、唑来膦酸、硼替佐米、萨力多胺、来那度胺、Venetoclax、Aldesleukin、Sipueucel-T、帕博西尼、奥拉帕尼、Niraparib、Rucaparib、Talazoparib或Senaparib。

16.权利要求12的用途，其中所述药物与放射治疗联用。

17.一种药用组合物，含有权利要求1～10中任一项所述的化合物或其可药用盐与可药用载体。

18.权利要求17的药用组合物，其中所述组合物还含有至少一种已知的抗癌药物，或所述抗癌药物的可药用盐。

19.权利要求18的药用组合物，其中所述组合物还含有至少一种选自下组的抗癌药物：白消安、马法兰、苯丁酸氮芥、环磷酰胺、异环磷酰胺、替莫唑胺、苯达莫司汀、顺铂、丝裂霉素C、博莱霉素、卡铂、喜树碱、伊立替康、托泊替康、阿霉素、表阿霉素、阿克拉霉素、米托蒽醌、甲基羟基玫瑰树碱、依托泊甙、5-氮杂胞苷、吉西他滨、5-氟尿嘧啶、卡培他滨、甲氨蝶呤、5-氟-2'-去氧尿苷、氟达拉滨、奈拉滨、阿糖胞苷、阿拉诺新、普拉曲沙、培美曲塞、羟基脲、硫代鸟嘌呤、秋水仙碱、长春碱、长春新碱、长春瑞滨、紫杉醇、伊沙匹隆、卡巴他赛、多西他赛、单抗、帕尼单抗、Ofatumumab、阿瓦斯丁、赫赛汀、美罗华、伊马替尼、吉非替尼、埃罗替尼、拉帕替尼、索拉非尼、舒尼替尼、尼罗替尼、达沙替尼、帕唑帕尼、特癌适、依维莫司、伏立诺他、罗咪酯肽、他莫昔芬、来曲唑、氟维司群、米托胍腙、奥曲肽、视黄酸、砒霜、唑来膦酸、硼替佐米、萨力多胺、来那度胺、Venetoclax、Aldesleukin、Sipueucel-T、帕博西尼、奥拉帕尼、Niraparib、Rucaparib、Talazoparib或Senaparib。