CN113521093A - 骨髓抑制的治疗 - Google Patents

Abstract

本发明提供了通过给药与PF4相互作用的类肝素来减弱治疗方案的骨髓抑制副作用、促进血小板生成和中性粒细胞的产生以及增加治疗方案疗效的方法。

Description

骨髓抑制的治疗

本申请是基于申请日为2013年03月13日，申请号为201810295102.9，发明名称为：“骨髓抑制的治疗”的专利申请的分案申请。

1.相关申请的交叉参考

本申请基于35 U.S.C.§119(e)要求美国临时申请61/724,836(于2012年11月9日提交)；61/702,207(于2012年9月17日提交)；61/678,053(于2012年7月31日提交)；61/668,709(于2012年7月6日提交)；61/664,611(于2012年6月26日提交)；61/653,362(于2012年5月30日提交)；61/648,043(于2012年5月16日提交)；61/644,623(于2012年5月9日提交)；和61/644,556(于2012年5月9日提交)的权益，其全部内容引入本文作为参考。

2.背景技术

血小板在凝血机制中发挥关键作用。血小板减少到低于一定水平将导致血小板减少症(thrombocytopenia)，其可由一系列的临床病症或障碍触发，并可从轻微延伸至危及生命的程度。

血小板减少症可由影响骨髓的疾病或病症触发，其中血小板前体在进入血流之前出现；由影响肝脏的疾病或病症触发，其产生血小板生成素，其为刺激血小板产生的激素；由血小板的隔离而触发；由血小板增加的破坏而触发；并由各种其它原因触发。特别地，血小板减少症是一些治疗方案的普遍副作用，例如涉及抗肿瘤药物的癌症治疗方案。化学治疗诱导的或辐射诱发的血小板减少症可导致治疗延迟和/或迫使治疗剂量降低，因而其可导致疗效降低。

因为严重的血小板减少症将使患者有失控的出血的风险，因此针对安全且有效的治疗血小板减少症的研发是非常迫切的。尽管显然非常需要这种治疗，但是，基本上不存在这种治疗。已经证明，尝试研发人类血小板生成素的重组形式是失败的。尽管重组的人类血小板生成素早期看上去是希望的，但是当在患者中进行测试时，其显示出诱导自身抗体发展的趋势。目前，针对血小板减少症(例如免疫介导的血小板减少症)的标准疗法包括用皮质类固醇、利妥昔单抗和/或血小板生成素受体激动剂进行治疗、脾切除和输注血小板。但是，每种疗法均有缺点，包括不完全响应、治疗副作用的产生以及任何形式的外科手术伴随的风险。对于化学治疗诱导的血小板减少症，仅有一种治疗药物，白介素-11，已证明是足够有效的，而值得监管部门的批准，但是医生很少开该药物的处方，因为其具有严重的副作用。对于辐射诱发的血小板减少症，尚没有获批的缓解血小板减少症的治疗药物。因此，仍然迫切需要能够缓解由于不同的病因引起的血小板减少症(包括免疫介导的血小板减少症、药物诱导的血小板减少症，尤其是化学治疗诱导的血小板减少症和辐射诱发的血小板减少症)的药物。

中性粒细胞，也称为多形核白细胞，是粒细胞中为数最多的血细胞。中性粒细胞，正如其他血细胞，由骨髓产生。中性粒细胞是天然免疫的一种重要组分。当中性粒细胞水平低于正常水平时，便发生了称为中性粒细胞减少症(neutropenia)的病症，增加了感染的风险。中性粒细胞减少症可由多种不同的原因引起，从先天性缺陷到病毒感染，但是在本文中通常出现的中性粒细胞减少症是治疗方案的副作用。中性粒细胞减少症在用抗肿瘤药物治疗癌症的患者中是常见的副作用，使患者有发生严重甚至危及生命的感染的风险并使治疗延迟和/或迫使降低治疗剂量，导致疗效降低。

已测试了多种药物或治疗来抵抗中性粒细胞减少症，并获得不同程度的成功。给药糖皮质类固醇、雄激素类固醇和维生素以刺激骨髓产生更多的中性粒细胞尚未被证明是成功的。目前，仅有两种药物--粒细胞集落刺激因子(G-CSF)和粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)--被广泛用于治疗具有严重的中性粒细胞减少症的患者，其最通常是用在密集的癌症化疗和/或骨髓移植之后。这些药物均呈现出不良反应，例如骨痛、肝功能障碍以及胸膜和心包积液这些异常。因此，需要能够安全且有效地治疗中性粒细胞减少症并促进中性粒细胞产生的化合物。

3.发明内容

在第一个方面，提供了减弱患者治疗方案的骨髓抑制副作用的方法。该方法包括辅助性地给药所述患者治疗有效量的与血小板因子4相互作用的类肝素(heparinoid)(之后称为“与PF4相互作用的类肝素”)。如本文所提供，骨髓抑制副作用为发生血小板减少症和/或中性粒细胞减少症，且有骨髓抑制副作用的患者治疗方案是诱导作为副作用的血小板减少症或中性粒细胞减少症中的一个或二者的治疗方案。在多种实施方式中，本方面提供与PF4相互作用的类肝素，例如，ODSH，在减弱患者治疗方案的骨髓抑制副作用中的用途。

许多患者的治疗方案都有骨髓抑制副作用，所述治疗方案包括抗肿瘤的治疗方案(例如化学治疗和放射治疗)、抗体治疗(包括用于治疗癌症和/或自身免疫疾病的治疗方案)和移植操作(例如骨髓或干细胞移植)。在一些实施方式中，所述患者的治疗方案包括化学治疗和/或放射治疗和/或抗体治疗。在示例性的实施方式中，所述患者的治疗方案为化疗方案，其包括吉西他滨和白蛋白结合型紫杉醇(nab-paclitaxel)。在示例性的实施方式中，所述患者的治疗方案为化疗方案，其包括异环磷酰胺、卡铂和依托泊苷，任选地包括利妥昔单抗。在一些实施方式中，所述患者的治疗方案包括适用于治疗被诊断为急性骨髓性或髓细胞性白血病(“AML”)的受试者的一种或多种治疗方案。在示例性的实施方式中，适用于治疗被诊断为AML的受试者的治疗方案包括适用于诱导AML减轻的化疗方案(在本领域中已知为诱导化学疗法)、用于防止AML复发(remission)的化疗方案(在本领域中已知为巩固性化疗)，或诱导疗法和巩固性化疗二者。任选地，适用于治疗被诊断为AML的受试者的治疗方案还可包括一种或多种不以化疗为基础的用以防止AML复发的治疗方案，其可用于代替巩固性化疗或与巩固性化疗组合。这些不以化疗为基础的治疗方案包括干细胞移植，例如异体干细胞移植和免疫疗法。其它患者的治疗方案描述于第5.1.1节。

在多种实施方式中，所述方法用于治疗被诊断患有癌症的受试者，例如胰腺癌、实体瘤(包括骨肉瘤、成神经细胞瘤)或AML。接受治疗的受试者可为成年患者或儿童患者。在一些实施方式中，所述受试者被诊断为癌症，其中PF4水平在血小板或在血液中是升高的(下文表示为“PF4-阳性癌症”)。PF4-阳性癌症的实例包括胰腺癌和结肠直肠癌。更多适用的受试者描述于第5.1.2节。

在一些实施方式中，所述方法还可包括辅助性地给药一种或多种额外药物或治疗，所述额外药物或治疗为促血小板生成的、抗血小板减少的、抗中性粒细胞减少的、促粒细胞生成的和/或抗凝血的。可进一步用于辅助性给药的合适的药物或治疗描述于第5.1.3节。在一些实施方式中，给予两种或更多种药物和/或治疗。所述两种或更多种药物可具有相同活性(例如，抗血小板减少的)、不同活性(例如，第一药物是促血小板生成的而第二药物是抗中性粒细胞减少的)或重叠活性(例如，第一药物是促粒细胞生成的和抗凝血的而第二药物是抗凝血的)。

与PF4相互作用的类肝素和任何辅助施用的额外药物或治疗，可与所述患者的治疗方案同时施用、相继施用或独立施用。合适的给药途径和方式在第5.8节提供。

在第二方面，提供了促进受试者血小板生成的方法。所述方法包括给药有效量的与PF4相互作用的类肝素至所述受试者。所述受试者可以是血小板减少的或非血小板减少的，如第5.2节所述。在多种实施方式中，所述方法包括治疗疾病或病症导致的骨髓抑制，所述疾病或病症降低了受试者的血小板计数。在示例性的实施方式中，所述受试者被诊断为全身炎症反应综合征(SIRS)、脓毒症或败血症。任选地，所述受试者具有升高的PF4血清水平或血浆水平。在一些实施方式中，所述方法还包括辅助性地给予一种或多种额外药物或治疗，所述额外药物或治疗是促血小板生成的、抗血小板减少的、抗中性粒细胞减少的、促粒细胞生成的和/或抗凝血的。用于进一步辅助性施用的合适的药物和治疗描述于第5.2.1节。

在第三方面，提供了用于促进受试者中性粒细胞产生的方法。该方法包括给药有效量的与PF4相互作用的类肝素至所述受试者。所述受试者可以是中性粒细胞减少的或非中性粒细胞减少的，如第5.3节所述。在多种实施方式中，该方法包括治疗由疾病或病症导致的骨髓抑制，所述疾病或病症降低了受试者的中性粒细胞计数。任选地，所述受试者具有升高的PF4血清或血浆水平。在一些实施方式中，该方法还包括辅助性地给予一种或多种额外药物或治疗，所述额外药物或治疗为促血小板生成的、抗血小板减少的、抗中性粒细胞减少的、促粒细胞生成的和/或抗凝血的。可进一步用于辅助性施用的合适的药物或治疗描述于本文第5.3.1节。

在第四方面，提供了用于提高有骨髓抑制副作用的患者治疗方案的疗效的方法。所述方法包括给药治疗有效量的与PF4相互作用的类肝素至所述受试者患者，用于辅助所述有骨髓抑制副作用的患者治疗方案，而相比于对照治疗的给予或治疗周期，所述方法无需降低所述患者的治疗方案的剂量和/或给药频率。

在一些实施方式中，所述方法还包括给药一定剂量，该剂量高于不存在辅助给药与PF4相互作用的类肝素时通常用于该给药或治疗周期中的给药剂量。

在一些实施方式中，所述方法还包括测定在患者血样中的初始血小板计数，并给药有效量的与PF4相互作用的类肝素，以提高所述患者的血小板计数高于阈水平，而低于该阈水平使用有骨髓抑制副作用的患者治疗方案进行的治疗是禁忌的。在多种实施方式中，给药足够量的与PF4相互作用的类肝素以维持血小板水平高于指示3级(严重)或4级(危及生命)血小板减少症的水平。任选地，所述方法还可包括给药一种或多种药剂或治疗以辅助与PF4相互作用的类肝素，所述药剂或治疗为抗血小板减少的、抗中性粒细胞减少的、抗凝血的或具有一些其它的治疗活性。在一些实施方式中，所述方法包括其它步骤：给药有骨髓抑制副作用的患者治疗方案至所述患者，该患者的血小板计数高于禁止这样的治疗的阈水平。任选地，可增加所述患者治疗方案的剂量和/或频率。

在一些实施方式中，所述方法包括测定患者血样中的初始中性粒细胞计数并给药有效量的与PF4相互作用的类肝素以提高所述患者的中性粒细胞计数至高于阈水平，而低于该阈水平使用有骨髓抑制副作用的患者治疗方案进行的治疗是禁忌的。在多种实施方式中，给药足够量的与PF4相互作用的类肝素以维持中性粒细胞水平高于指示3级或4级中性粒细胞减少症的水平，即，分别高于约1000个中性粒细胞/μl的血液以及高于约500个中性粒细胞/μl的血液。任选地，所述方法还可包括给药作为与PF4相互作用的类肝素的辅助的一种或多种药剂或治疗，所述药剂或治疗是抗中性粒细胞减少的、抗血小板减少的、抗凝血的或具有一些其它的治疗活性。在一些实施方式中，所述方法包括其它步骤：给药有骨髓抑制副作用的患者治疗方案至所述患者，该患者的中性粒细胞计数高于禁止这样的治疗的水平。任选地，可增加所述患者治疗方案的剂量和/或频率。

本发明中的与PF4相互作用的类肝素是指能够与PF4相互作用且能够阻止PF4抑制血小板和中性粒细胞产生的能力的类肝素。与PF4相互作用的类肝素结合PF4和/或与PF4竞争结合骨髓细胞系中的祖细胞，例如，巨核细胞。优选地，与PF4相互作用的类肝素具有大于约8kDa的平均分子量，例如平均分子量在约8kDa至约15kDa之间，更优选地在约11kDa至13kDa之间。所述与PF4相互作用的类肝素优选部分脱硫酸。在一些实施方式中，所述与PF4相互作用的类肝素基本上在6-O和/或N位脱硫酸。示例性的与PF4相互作用的类肝素，其适用于本文所述的方法，基本上是2-O、3-O脱硫酸，在本文中称为ODSH。另请参见5.6节。

本公开还提供了包含与PF4相互作用的类肝素的药物组合物和单位剂型，其适用于本文所述的方法，既可以单独施用或者辅助患者的治疗方案和/或一种或多种额外药物或治疗。可将所述药物组合物配制用于胃肠外给药，例如静脉或皮下给药。对于静脉给药，可将药物组合物配制用于快速推注给药或连续输注给药。

在本文公开的方法中使用的药物组合物包含足以允许给药有效剂量的与PF4相互作用的类肝素的量，其描述于第5.9节。

在一些实施方式中，含有与PF4相互作用的类肝素的药物组合物适用于静脉给药，其对于输注的剂量范围在约0.1mg/kg/hr至约2.5mg/kg/hr，而对于推注剂量的范围在约1mg/kg至约25mg/kg。在一些实施方式中，含有与PF4相互作用的类肝素的药物组合物适用于皮下给药，并将其以约25mg至约400mg的剂量范围进行配制用于给药，每注射部位的体积为2.0ml或更少。

4.附图简述

图1提供的图显示了在人胰腺癌的体内小鼠异种移植模型中的8个不同的治疗方案对肿瘤重量的影响，如在实施例1和表1中进一步说明：载体对照(组1，●)；单独ODSH(组2，○)；奥沙利铂/吉西他滨/白蛋白结合型紫杉醇(组3，■)；单独吉西他滨(组4，□)；奥沙利铂/吉西他滨/白蛋白结合型紫杉醇与ODSH(组5，▲)；吉西他滨与ODSH(组6，△)；奥沙利铂/吉西他滨(组7，×)；和奥沙利铂/吉西他滨与ODSH(组8，☆)。

图2提供的图显示了实施例1使用的且在图1中所示的治疗方案的亚组(subset)对肿瘤重量的影响：载体对照(组1，●)；单独ODSH(组2，○)；单独吉西他滨(组4，□)；和吉西他滨与ODSH(组6，△)。

图3提供的图显示了实施例1使用的8个不同的治疗方案对体重的影响：载体对照(组1，●)；单独ODSH(组2，○)；奥沙利铂/吉西他滨/白蛋白结合型紫杉醇(组3，■)；单独吉西他滨(组4，□)；奥沙利铂/吉西他滨/白蛋白结合型紫杉醇与ODSH(组5，▲)；吉西他滨与ODSH(组6，△)；奥沙利铂/吉西他滨(组7，×)；和奥沙利铂/吉西他滨与ODSH(组8，☆)。

图4提供的图显示了在人卵巢癌的体内小鼠异种移植模型中的4个不同的治疗方案对肿瘤重量的影响，如在实施例2中进一步说明：载体对照(组1，●)；单独ODSH(组2，◆)；卡铂(组3，■)；和卡铂与ODSH(组4，▲)。

图5提供的图显示了在研究的第1-21天中图4所示的治疗方案对肿瘤重量的影响。

图6提供的图显示了实施例2使用的4个不同的治疗方案对小鼠体重的影响：载体对照(组1，●)；单独ODSH(组2，◆)；卡铂(组3，■)；和卡铂与ODSH(组4，▲)，如实施例2中进一步描述。

图7提供的图显示了在研究的第1-21天中图6所示的治疗方案对小鼠体重的影响。

图8提供了进入实施例3所述的临床试验的患有转移性胰腺癌的患者的血小板计数(以X10³血小板/μL)图，其在取自所示的各化疗周期的第1天、第8天和第15天的样品中测量(C1D1＝周期1，第1天；C2D8＝周期2，第8天等)。水平线标记的是正常血小板计数的下限(LLN)和指示等级的血小板减少症的下限(LL)。

图9提供了中性粒细胞计数(以X10³中性粒细胞/μL)的图，其在所示的各化疗周期的第1天、第8天和第15天在取自描述于图8中的相同个体的样品中测量(C1D1＝周期1，第1天；C2D8＝周期2，第8天等)。水平线标记的是正常中性粒细胞计数的下限(LLN)和指示等级的中性粒细胞减少症的下限(LL)。

图10A-10B提供了在各指示周期的指定天，所有样品的血小板计数的平均值和中位数(图10A)以及绝对中性粒细胞计数的平均值和中位数(图10B)。

图11A-F提供了在实施例3所述的临床试验中参与的特定患者中胰腺的和转移性的病变大小的图表，所述患者具有稳定的疾病并接受辅助性给予ODSH和化学治疗剂。图11A显示了在基线和周期4结束时，在患者2001中两个肺转移瘤的大小。图11B-C显示了对于患者6002，相对于治疗开始时(基线)，在治疗周期2结束时，肝和淋巴结中的转移性病变的肿瘤大小(图11B)和在周期5结束时，胰腺、肝和淋巴结中的病变的肿瘤大小(图11C)。图11D显示了患者6003在基线和在周期6结束时的两个肺转移瘤的大小。图11E显示了患者6006在基线和在周期4结束时的胰腺肿瘤和转移性肝肿瘤的大小。图11F显示了患者8001在基线和在周期2结束时的胰腺肿瘤的大小。

图12A-F提供的图表显示的是接受辅助给药ODSH和化学治疗的患者的肿瘤响应。图12A提供了的图表总结了在化疗开始前的转移性疾病的位置、CA19-9在基线时和在多个化疗周期后的水平以及各指定患者的肿瘤响应。图12B-12F提供了患者6004、6007、7001、7002和9001的肿瘤大小的图表，其表明相对于基线，在治疗周期4或5结束时的部分响应。

图13A-B提供的图表显示的是在指定周期的第1天和第15天，用吉西他滨、白蛋白结合型紫杉醇和ODSH(“ODSH组患者”)治疗的患者和用吉西他滨和白蛋白结合型紫杉醇(“对照组患者”)治疗的患者的血小板计数。图13A提供的图表显示了在周期1第1天(任何化疗之前)和在周期1第15天(给予两个化疗之后)，在5个ODSH组患者和5个对照组患者中的血小板计数。也显示了在第1天和第15天对照组和ODSH组的血小板计数的中位数和平均值。图13B提供的图表显示了在周期1至6的第1天和第15天对照组患者和ODSH组患者的血小板计数中位数。

5.发明详述

已经发现，能够与血小板因子4相互作用的类肝素(后称之为“与PF4相互作用的类肝素”)可减弱各种病因引起的血小板减少症和中性粒细胞减少症。还发现，与PF4相互作用的类肝素诱导或脱抑制血小板生成和粒细胞生成。不受限于理论，认为这些作用是由该类肝素降低PF4水平和/或阻碍PF4对巨核细胞生成和粒细胞生成的抑制作用的能力所介导的。

5.1减弱治疗方案的骨髓抑制副作用的方法

如下实施例3所述，被诊断为转移性胰腺癌的患者，其辅助性地用示例性的与PF4相互作用的类肝素治疗，该类肝素本文指的是ODSH(一种类肝素，其基本上是在2-O和3-O位脱硫酸的，在第5.6节进一步描述)，在已知具有严重的骨髓抑制副作用的化疗方案的第一个4周周期结束时，所述患者的血小板计数增加。这些作用持续到相连的治疗周期，且结果表明辅助性地给药ODSH减弱了接受具有骨髓抑制副作用的化疗方案的患者的血小板减少症和中性粒细胞减少症。

因此，在第一个方面，提供了减弱患者治疗方案的骨髓抑制副作用的方法。本方法包括给药治疗有效量的与PF4相互作用的类肝素至所述受试者患者，用于辅助所述具有骨髓抑制副作用的患者的治疗方案。因此，本文提供的是与PF4相互作用的类肝素，任选地ODSH，在减弱患者治疗方案的骨髓抑制副作用中的用途，如本文进一步描述。词组“辅助地给予”，“辅助施用”或“辅助性地给药”在本文中可互换使用，表示以与有骨髓抑制副作用的治疗方案治疗有效的邻近时间(temporal proximity)给药与PF4相互作用的肝素类似物。通过辅助性地给药与PF4相互作用的类肝素(以单独给药或与其它辅助药物或治疗组合给药)至接受有骨髓抑制副作用的治疗方案的患者，申请人已发现可减弱该治疗方案的骨髓抑制副作用。

适用于本方法的与PF4相互作用的类肝素描述于下文第5.6节。在示例性的实施方式中，所述与PF4相互作用的类肝素为ODSH。合适的给药方式和给药方案在下文第5.8节进一步描述。与PF4相互作用的类肝素的有效剂量和治疗有效量在下文第5.9节进行进一步描述。

5.1.1.有骨髓抑制副作用的治疗方案

如本文所用，骨髓抑制副作用是指出现血小板减少症和/或中性粒细胞减少症。因此，在多种实施方式中，由于副作用，所述治疗方案会导致患者发生血小板减少症(低血小板计数)、中性粒细胞减少症(低中性粒细胞计数)或即出现血小板减少症又出现中性粒细胞减少症。所述患者治疗方案在本文中也称为有骨髓抑制性的治疗方案。

在一些实施方式中，该治疗方案导致血小板减少症。在多种实施方式中，该治疗方案导致血液中血小板计数小于约150,000个血小板每微升血液。在具体实施方式中，该治疗方案导致所述患者的血小板计数的范围从约150,000至约75,000个血小板每微升血液，相当于轻微或1级血小板减少症；血小板计数的范围为小于约75,000至约50,000个血小板每微升血液，相当于中度或2级血小板减少症；血小板计数的范围从小于约50,000至约25,000个血小板每微升血液，相当于严重或3级血小板减少症；和血小板计数小于约25,000个血小板每微升血液，相当于危及生命或4级血小板减少症。因此，在多种实施方式中，所述患者的治疗方案中的副作用将诱导轻微、中度、严重或危及生命的血小板减少症。

在一些实施方式中，该治疗方案导致中性粒细胞减少症。在多种实施方式中，该治疗方案导致患者血液中的绝对中性粒细胞计数小于约2000个中性粒细胞每微升血液。在具体实施方式中，所述治疗方案导致患者的中性粒细胞计数的范围从约2000至约1500个中性粒细胞每微升血液，相当于轻微或1级中性粒细胞减少症；绝对中性粒细胞计数的范围从小于约1500至约1000个中性粒细胞每微升血液，相当于中度或2级中性粒细胞减少症；绝对中性粒细胞计数的范围从小于约1000至约500个中性粒细胞每微升血液，相当于严重或3级中性粒细胞减少症；和绝对中性粒细胞计数小于约500个中性粒细胞每微升血液，相当于危及生命或4级中性粒细胞减少症。因此，在多种实施方式中，所述患者的治疗方案中的副作用将诱导轻微、中度、严重或危及生命中性粒细胞减少症。

在多种实施方式中，所述患者的治疗方案为抗肿瘤治疗方案。在一些实施方式中，所述抗肿瘤治疗方案为化学治疗。在一些实施方式中，所述抗肿瘤治疗方案为放射治疗。

在化学治疗的实施方式中，所述患者的治疗方案包括给予一种或多种化学治疗剂。

在示例性的实施方式中，所述一种或多种化学治疗剂中至少一种选自：叶酸拮抗剂，包括甲氨喋呤和培美曲塞；嘌呤拮抗剂，包括克拉屈滨、氯法拉滨、氟达拉滨、6-巯基嘌呤、奈拉滨、喷司他丁；嘧啶拮抗剂，包括卡培他滨、阿糖胞苷、5-氟尿嘧啶、吉西他滨、羟基脲；生物反应调节剂，包括干扰素-α；博来霉素；DNA烷化剂，包括亚硝基脲(nitrosureas)、卡莫司汀、罗莫司丁；DNA交联药物和烷化剂，包括苯达莫司汀、苯丁酸氮芥、环磷酰胺、异环磷酰胺、双氯乙基甲胺(mechlorethamine)(氮芥)、美法仑、达卡巴嗪、替莫唑胺、丙卡巴肼；天冬酰胺酶；抗生素，包括丝裂霉素；铂复合物，包括卡铂、顺铂、奥沙利铂；蛋白体抑制剂，包括硼替佐米(bortezomib)；纺锤体抑制剂，例如紫杉烷类(包括多西紫杉醇、紫杉醇、白蛋白结合型紫杉醇

)和长春药属(包括长春碱，长春新碱，长春瑞滨)；拓扑异构酶抑制剂，例如蒽环类药物(包括柔红霉素、道诺霉素、多柔比星、表柔比星)、喜树碱类(包括依立替康，托泊替康)、鬼臼毒素类(包括依托泊苷、替尼泊苷和米托蒽醌)；酪氨酸激酶抑制剂(包括厄洛替尼(rlotinib)(Tarceva)、吉非替尼(gefitinib)、伊马替尼(imatinib)、拉帕替尼(lapatinib)、帕唑帕尼，索拉非尼(sorafenib)，舒尼替尼(sunitinib))；和异环磷酰胺。

在多种实施方式中，使用了一种或多种其它化学治疗剂。

在一些示例性的实施方式中，所述有骨髓抑制性的化疗治疗方案包括将紫杉烷(例如多西紫杉醇)或紫杉酚(taxol)(例如紫杉醇(例如，白蛋白结合型紫杉醇，

))与一种或多种其它化学治疗剂组合给药，所述其它化学治疗剂包括但不限于上述的任何药物。在一些实施方式中，所述患者治疗方案包括将紫杉烷(例如多西紫杉醇)或紫杉酚(例如紫杉醇(例如，白蛋白结合型紫杉醇，

))与一种或多种叶酸盐、嘌呤或嘧啶拮抗剂、DNA烷化剂、铂复合物、长春药属、蒽环类药物、喜树碱、鬼臼毒素和/或酪氨酸激酶抑制剂组合给药。在特定的实施方式中，所述患者治疗方案包括将紫杉烷(例如多西紫杉醇)、紫杉醇(例如，白蛋白结合型紫杉醇，

)与一种或多种选自以下的药物组合给药：吉西他滨、长春瑞滨、卡铂、顺铂、奥沙利铂、替莫唑胺和米非司酮。在示例性的实施方式中，给药两种或更多种化学治疗剂，所述两种或更多种化学治疗剂选自：顺铂和依托泊苷；卡铂和依托泊苷；顺铂和依立替康；卡铂和依立替康；环磷酰胺，多柔比星(阿霉素)和长春新碱；环磷酰胺/多柔比星/长春新碱(已知为CAV方案)；吉西他滨与长春瑞滨或紫杉醇或白蛋白结合型紫杉醇

；吉西他滨或卡培他滨与奥沙利铂；顺铂或卡铂加上另一化学治疗剂；5-氟尿嘧啶与甲酰四氢叶酸(leuvocorin)、奥沙利铂、依立替康中的一种或多种。

在多种实施方式中，所述有骨髓抑制性的患者治疗方案包括根据具体命名的方案给药化学治疗剂。在示例性的实施方式中，所述患者的化疗方案包括一种或多种以下具体的方案：5FU Mayo、5FU Roswell Park、LVFU2、FOLFOX4、FOLFOX6、bFOL、FUFOX、IFL、XELOX、XELIRI和CAPIRI，其在Chau等人，2009，Br.J.Cancer 100:1704-19；和Field等人，2007，World J.Gastroenterol.13:3806-15中进行进一步详述，两篇均引入本文作为参考。另一特殊命名的方案为CHOP，其将环磷酰胺、羟基柔红霉素(或多柔比星或阿霉素)、长春新碱(或安可平)与泼尼松或泼尼松龙组合，通常用于治疗患有非霍奇金淋巴癌的患者。在一些实施方式中，例如，其中所治疗的患者有心血管疾病病史，在治疗方案中除去多柔比星，然后将其命名为COP或CVP。任选地，所述CHOP方案还可与利妥昔单抗(Rituxan)组合，然后称其为R-CHOP或CHOP-R。其它组合也有可能。另一特殊命名的方案为ICE，将化学治疗剂异环磷酰胺、卡铂和依托泊苷组合。参见Habermann，2012，Hematology 17补充1:S93-7，将其引入本文作为参考。

包括放射治疗的患者的抗肿瘤治疗方案也显示出具有骨髓抑制副作用，有时称其为辐射诱发的血小板减少症和辐射诱发的中性粒细胞减少症。在各种放射实施方式中，所述患者的治疗方案包括放射治疗，其选自用X射线、γ射线、中子、质子和其它来源进行的放射治疗、外放射线治疗和内照射治疗，例如近距离放射疗法。

在本文中称为抗体治疗的患者治疗方案也可能有骨髓抑制副作用，在该治疗方案中给药具有细胞毒性效应的一种或多种抗体，该治疗方案根据本文所述的方法，有效地通过辅助给药与PF4相互作用的类肝素而处理。因此，在一些实施方式中，所述有骨髓抑制副作用的治疗方案包括抗体治疗。在一些实施方式中，所述抗体治疗包括结合了毒素的一种或多种抗体，其中所述抗体结合靶肿瘤细胞和/或被靶肿瘤细胞内在化，从而使得所述毒素杀死该细胞。在示例性的实施方式中，所述患者治疗方案包括给药具有骨髓抑制副作用的一种或多种抗体，例如阿昔单抗(ReoPro)、利妥昔单抗(Rituxan)、结合了双异烟肼(T-DM1)的曲妥单抗(Herceptin)和英夫利昔单抗(Remicade)。在一些实施方式中，所述患者的治疗方案包括给药一种或多种以下药物：曲妥单抗(Herceptin)、西妥昔单抗、贝伐单抗(Avastin)、替加珠单抗(tigatuzumab)。

在多种实施方式中，具有骨髓抑制副作用并可根据本文所述方法通过辅助给药有与PF4相互作用的类肝素而有效处理的患者治疗方案包括化学治疗、放射治疗和/或抗体治疗的组合。在一些实施方式中，所述患者的治疗方案包括化学治疗(例如用一种或多种本文所述的药物)和放射治疗；或化学治疗(例如用一种或多种本文所述的药物)和抗体治疗(例如用一种或多种本文所述的抗体)；放射治疗和抗体治疗(例如用一种或多种本文所述的抗体)；或本文所述的任何两种、三种、四种、五种或更多种药剂或治疗。在示例性的实施方式中，例如患有非霍奇金淋巴癌的患者，所述患者治疗方案包括使用Rituxan的抗体治疗和使用CHOP的化学治疗(也称之为R-CHOP)、使用Rituxan的抗体治疗和使用COP的化学治疗、使用Rituxan的抗体治疗和使用CVP的化学治疗，或使用Rituxan的抗体治疗和使用ICE的化学治疗(也称之为R-ICE)。参见Habermann，2012，Hematology 17 Suppl 1:S93-97。

包括移植，例如骨髓移植或干细胞移植的患者治疗方案，也可具有骨髓抑制副作用。因此，在一些实施方式中，所述患者治疗方案包括自体的或异体的骨髓或干细胞移植。

在多种实施方式中，所述患者治疗方案包括给予有血小板减少症副作用的一种或多种药物的治疗方案。在示例性的实施方式中，所述一种或多种有血小板减少症副作用的药物选自：丙戊酸、质子泵抑制剂、干扰素(例如干扰素-α)、异维甲酸、帕比司他(panobinostat)、噻嗪类利尿药、孟鲁司特钠(顺尔宁)、奎尼丁、奎宁、金(gold)、磺胺类、头孢噻吩、保泰松、苯妥英、洋地黄毒苷和吩噻嗪镇静剂和肝素。

在多种实施方式中，所述患者治疗方案包括给予一种或多种有中性粒细胞减少症副作用的药物的治疗方案。在示例性的实施方式中，所述一种或多种有中性粒细胞减少症副作用的药物选自：环磷酰胺、精神治疗药物和抗惊厥剂，例如氯氮平和奥氮平、硫酰胺(thionamides)、噻氯匹啶、卡比马唑、氨苯砜、安乃近、甲巯咪唑、青霉素G、普鲁卡因胺、丙硫氧嘧啶、甲氧苄啶、氯霉素、青霉素类、头孢菌素类、氨基糖甙类、四环素类、硝基咪唑、呋喃妥因、氟胞嘧啶、利福平、异烟肼、乙胺丁醇、氨苯砜、磺胺抗生素、氯米帕明(clomiprimine)、氨硫脲、安乃近、柳氮磺吡啶、美沙拉秦、环丙沙星、氯喹(chloroquin)、甲苯达唑、特苯达芬(terbendafine)、乙胺嘧啶、左旋咪唑、瑞斯西丁素、灰黄霉素、酚噻嗪类、苯并二氮杂

(benzodiazepines)、阿莫沙平、甲丙氨酯、巴比妥类、利哌利酮、米帕明、地昔帕明、替沃噻吨、氟派啶醇、丙戊酸、乙内酰脲、琥珀酰亚胺、三甲双酮、卡马西平、普鲁卡因胺、奎尼丁、普罗帕酮、卡托普利、普萘洛尔、肼屈嗪、甲基多巴、布洛芬、吲哚美辛、舒林酸、托美汀、阿司匹林、氨基比林、保泰松、二氟尼酸、苯噁洛芬、别嘌醇、秋水仙碱、丙硫氧嘧啶、硫脲嘧啶、甲巯咪唑、卡比马唑、硫氰酸盐、高氯酸钾、西米替丁、雷尼替丁(ranatadine)、曲吡那敏、美沙芬林、西那利定、米安色林、溴苯那敏(bromopheneramine)、奎宁、羟氯喹、喹纳克林、二氮嗪、二氢吡啶类、维斯纳利酮、阿普林定、亚胺培南/西司他丁、齐多夫定、氟达拉滨、阿昔洛维、特比奈芬(turbinafine)、氨鲁米特、法莫替丁、苯扎贝特、氟他米特、它莫西芬、青霉胺、维甲酸、甲氧氯普胺、芬宁东(phenindone)、二硝基苯酚、依他尼酸、萝芙木碱(rauwolfia)、乙醇、氯磺丙脲、甲苯磺丁脲、噻嗪类、螺内酯、醋甲唑胺、乙酰唑胺、左旋多巴和其组合。参见，Oyesanme等人，1999，Psychosomatics，40:5at p.414421；其公开内容引入本文作为参考。

在一些实施方式中，所述有骨髓抑制性的患者治疗方案包括一种或多种治疗方案，其适用于治疗被诊断为急性骨髓性或髓细胞性白血病(“AML”)的受试者。用于治疗AML的治疗方案通常由两个阶段组成，初始阶段倾向于诱导缓解，称之为诱导阶段，而第二阶段倾向于预防复发或再发，称之为巩固阶段。在诱导阶段给予的治疗称为诱导治疗方案，而巩固阶段给予的治疗称之为巩固治疗方案。标准的诱导治疗方案包括化学治疗，称为诱导化学疗法且在本领域是已知的。在诱导化学疗法的示例性实施方式中，所述化疗方案由以下组成：连续静脉给药阿糖胞苷(araC)7天以及连续给药蒽环类药物(例如，柔红霉素或伊达比星)3天。参见Tallman，2005，Hematology2005:143-150；Robak等人，2009，Clin.Therap.31:2349-70。巩固治疗方案可包括化学治疗、免疫疗法、骨髓移植或其组合。在一些实施方式中，巩固性化疗由以下组成：在诱导阶段使用的相同化疗方案的一或多个周期。在其它实施方式中，巩固性化疗由一或多个高剂量化学治疗周期组成。巩固性化疗的示例性的实施方式包括两个、三个、四个、五个或更多个用上述阿糖胞苷和蒽环类方案进行治疗的周期。在一些实施方式中，巩固化疗方案包括在诱导阶段使用的高剂量的一种或多种化学治疗剂。巩固阶段还可包括使用一种或多种药物的免疫疗法，所述药物例如，但不限于，二盐酸组胺和白介素-2。在一些实施方式中，该巩固治疗方案包括异体干细胞移植。在多种实施方式中，对于诱导和/或巩固治疗方案辅助性地给予与PF4相互作用的类肝素。在示例性的实施方式中，对于诱导和/或巩固治疗方案辅助性地给予ODSH。

5.1.2.治疗受试者

待治疗的受试者(本文中可与“患者”互换使用)可为任何动物，例如哺乳动物，优选为人类。在一些实施方式中，所述受试者为成人。在一些实施方式中，所述受试者为儿童，例如被诊断为儿科癌症的儿童。

在一些实施方式中，合适的受试者是被诊断患有癌症并需要抗肿瘤或细胞毒性治疗方案的患者。所述癌症可以是在器官或组织中的实体肿瘤癌症，包括胰腺癌、卵巢癌、子宫癌、乳腺癌，包括转移性乳腺癌和对化学治疗抵抗的乳腺癌(例如，在进行辅助性化学治疗6个月内复发的乳腺癌，所述化学治疗含有或不含蒽环类药物)、头和颈癌、膀胱癌、泌尿道上皮癌、肺癌(包括非小细胞肺癌)、结肠直肠癌、胃癌、食道癌、成神经细胞瘤、肝癌、黑素瘤、前列腺癌、骨肉瘤并可以是血液性癌症，例如淋巴癌(包括复发的、霍奇金型和非霍奇金淋巴癌)和白血病(包括急性骨髓性白血病或AML和儿童急性淋巴细胞白血病)。

本文所述的方法尤其用于在血小板或血液中PF4水平升高的癌症。因此，在一些实施方式中，所述受试者已被诊断为患有血小板或血液中PF4水平升高的癌症。在一些实施方式中，所述癌症为胰腺癌、结肠直肠癌、骨肉瘤或白血病(包括急性骨髓性白血病和儿童急性淋巴细胞白血病)。

适于治疗的受试者还包括患有疾病或病症的受试者，推荐具有骨髓抑制副作用的治疗方案来治疗所述疾病或病症，包括在上文第5.1.1节所述的任何治疗方案。

在多种实施方式中，合适的受试者为血液或血小板中具有升高水平的PF4的受试者，包括在血液或血小板中具有升高水平PF4的上述各种癌症以及非癌病症；患有自身免疫性疾病的受试者，其可用含有一种或多种具有骨髓抑制副作用的药物的治疗方案进行治疗，该自身免疫性疾病例如类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮、多发性硬化症、克罗恩氏病、溃疡性结肠炎、炎性肠病；或具有降低的血小板生成素水平的受试者，例如肝癌、病毒性肝炎、肝硬化或肝功能受损的患者。

在多种实施方式中，合适的受试者为以下受试者：其没有免疫介导的血小板减少症、没有由于自身免疫病症导致的血小板减少症、没有由于增加的血小板损伤而导致血小板减少症或没有肝素诱导的血小板减少症。

在所述与PF4相互作用的肝素部分脱硫酸(例如2-O、3-O脱硫酸的肝素)的实施方式中，肝素诱导的血小板减少症的风险降低，即使当与作为抗凝血药物的肝素(未分级肝素或低分子量肝素)组合施用。参见U.S.Pat.No.7,468,358。因此，在一些实施方式中，所述患者可以为有针对肝素-PF4复合物的抗体且有肝素诱导的血小板减少症风险的受试者。

5.1.3.其它的辅助药物和治疗

所述与PF4相互作用的类肝素既可以作为单独的药物给药,用以辅助有骨髓抑制副作用的患者治疗方案，也可以与一种或多种其它药剂或治疗组合。

因此，在多种实施方式中，所述方法还包括辅助性地给予一种或多种其它药剂或治疗，所述其它药剂或治疗也能够减弱血小板减少和/或促进血小板生成、减弱中性粒细胞减少和/或促进粒细胞生成。在一些实施方式中，所述方法还包括辅助性地给予抗凝血类肝素。在一些实施方式中，施用两种或更多种这样的药物和/或治疗。所述两种或更多种这样的药物可具有相同活性(例如，抗血小板减少的)、不同活性(例如，第一药物是促血小板生成的而第二药物是抗中性粒细胞减少的)或重叠活性(例如，第一药物是促粒细胞生成的和抗凝血的而第二药物是抗凝血的)。

减弱血小板减少症和/或促进血小板生成的合适的额外治疗或药物包括作用是增加血小板计数的药剂或治疗。因此，在一些实施方式中，所述一种或多种额外药物或治疗选自输注血小板、脾切除、皮质类固醇(例如，泼尼松和地塞米松)、血小板清除抑制剂(例如，达那唑)、血小板生成素、血小板生成素模拟物(例如，

，艾曲波帕(eltrombopag)

)、血小板生成素受体激动剂(例如，罗米司亭(romiplostim)和艾曲波帕)、白细胞介素，例如重组人类白细胞介素(包括白介素-1、白介素-3、白介素-6、白介素-11(例如，

))、碳酸锂和叶酸盐(folate)。

减弱中性粒细胞减少和/或促进粒细胞生成的合适的额外治疗或药物包括作用是增加中性粒细胞计数的药物。因此，在一些实施方式中，所述一种或多种额外药物或治疗选自重组人粒细胞集落刺激因子(“G-CSF”)(非格司亭(Neupogen)、培非格司亭(Neulasta))和重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(“GM-CSF”)(沙格司亭(Leukine)).

在一些临床表现中，所述患者可受益于抗凝血治疗。因此，在一些实施方式中，该方法包括给药与PF4相互作用的类肝素与一种或多种抗凝血药物(例如一种或多种抗凝血的类肝素)的组合，优选地以提供抗凝血作用又不会诱导或引发肝素诱导的血小板减少症的量或比率。在示例性的实施方式中，抗凝血药物选自肝素，例如未分级肝素(unfractionated heparin)和低分子量肝素，例如达肝素(dalteparin)、依诺肝素、磺达肝素(fondaparinux)、瑞维肝素和亭扎肝素(tinzaperin)。通常，所述与PF4相互作用的类肝素和抗凝血药物以一定比率给药，其中与PF4相互作用的类肝素的摩尔量或重量大于抗凝血药物的摩尔量或重量。在一些实施方式中，与PF4相互作用的类肝素与抗凝血肝素的摩尔比的范围为约1:2至约10:1。也可以采用当量比。在一些实施方式中，与PF4相互作用的类肝素与抗凝血肝素的重量比的范围为约1:1至约4:1。

在多种实施方式中，所述一种或多种其它辅助性的药物或治疗和与PF4相互作用的类肝素同时给药、相继给药或单独给药。在一些实施方式中，所述一种或多种其它药剂或治疗和与PF4相互作用的类肝素既采取同时给药又采取相继给药的方式。

5.2.促进血小板生成的方法

现已发现，与PF4相互作用的类肝素可提高人类患者的血小板计数。如下文实施例3中所述，用ODSH治疗的患者在用有严重骨髓抑制副作用的化疗方案治疗胰腺癌的第一个4周周期结束时，血小板计数增加。该作用持续至接下来的周期，在用ODSH和化疗方案进行辅助性给药两周期、三周期甚至是四周期之后，患者表现出的血小板计数水平均高于筛选时可见的血小板计数水平(即，用ODSH治疗前)。因此，在另一方面，提供了促进受试者血小板生成的方法。该方法包括给药有效量的与PF4相互作用的类肝素至所述受试者。用于该方法中的与PF4相互作用的类肝素描述于下文第5.6节。在示例性的实施方式中，所述与PF4相互作用的类肝素为ODSH。合适的给药方式和给药方案进一步描述于下文第5.8节。与PF4相互作用的类肝素的有效剂量和治疗有效量进一步描述于下文第5.9节。

该方法可在血小板减少症受试者或非血小板减少症受试者中实施。

在所述受试者为血小板减少症的实施方式中，该血小板减少症可由不同病因引起。因此，在多种实施方式中，所述血小板减少症为(1)由有骨髓抑制副作用的治疗方案引起的血小板减少症，如上文第5.1.1节所述，且所述受试者可包括在上文第5.1.2节所述的受试者，(2)由于骨髓削弱的血小板产生导致的血小板减少症，(3)由于脾中血小板的隔离导致的血小板减少症(脾肿大)或(4)由于外周循环中血小板的破坏增加导致的血小板减少症，任选地由于自身免疫病症。

在多种实施方式中，所述受试者的血小板计数的减少是疾病或病症所导致的血小板减少症(任选地)的结果。因此，在一些实施方式中，所述受试者受到感染。在一些实施方式中，该感染导致败血病，伴有或未伴有弥散性血管内凝血。在一些实施方式中，受试者具有升高的PF4血浆水平，例如，大于约5ng/ml、大于约6ng/ml、大于约7ng/ml、大于约8ng/ml、大于约9ng/ml、大于约10ng/ml、大于约11ng/ml、大于约12ng/ml、大于约15ng/ml、大于约17ng/ml、大于约20ng/ml、大于约22ng/ml、大于约25ng/ml、大于约27ng/ml、大于约30ng/ml、大于约40ng/ml、高至约45ng/ml、高至约50ng/ml或更高。Lorenz等人，1988，Infection16(5):273-6和其中的PF4测定。在一些实施方式中，所述受试者出现血小板减少症，其并不是肝素诱导的血小板减少症。

在示例性的实施方式中，所述血小板减少症选自辐射诱发的血小板减少症；药物诱导的血小板减少症；消耗型血小板减少症(consumption thrombocytopenia)；免疫介导的血小板减少症，包括同种免疫血小板减少症和自身免疫血小板减少症，包括免疫性血小板减少症性紫癜(或ITP)；传染性周期性血小板减少症；由于骨髓肿瘤入侵导致的骨髓痨血小板减少症；表面诱导的血小板减少症；疫苗诱导的血小板减少症；肝、骨髓或干细胞移植诱导的血小板减少症；和自身免疫性疾病(例如，类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮)或淋巴增生性障碍(例如，慢性淋巴细胞白血病)伴随的血小板减少症。在一些实施方式中，所述血小板减少症不是或不同于：免疫介导的血小板减少症、归因于自身免疫病症的血小板减少症或由于增加的血小板破坏导致的血小板减少症。在一些实施方式中，所述血小板减少症不同于肝素诱导的血小板减少症。

在多种实施方式中，所述促进血小板生成的方法用于治疗患有辐射诱发的血小板减少症的受试者，所述血小板减少症由放射治疗或非治疗性暴露于电离辐射而导致，例如由于放射性或核事故或攻击导致的辐射中毒或放射病的受试者。

在多种实施方式中，合适的受试者包括可从增加的血小板计数获益的患者，例如需要手术、输液、用有骨髓抑制副作用的治疗方案进行的治疗或其它可降低血小板计数或增加凝血需要的操作或治疗的患者。在示例性的实施方式中，所述受试者被诊断为癌症，和/或所述受试者需要手术、输液或用有骨髓抑制副作用的治疗方案进行的治疗。在一些实施方式中，所述受试者有发生归因于放射治疗或非治疗性暴露于电离辐射的辐射诱发的血小板减少症的风险，例如由放射性或核事故或攻击导致的辐射诱发的血小板减少症。

5.2.1.额外药物和治疗

在促进血小板生成的方法中，所述与PF4相互作用的类肝素可作为单一药物给药或辅助性地与一种或多种其它药剂或治疗组合给药。在一些实施方式中，所述一种或多种额外药物或治疗能够促进血小板生成。在多种实施方式中，所述一种或多种额外药物或治疗是抗凝血的。

促进血小板生成的合适的额外治疗或药物包括表现为增加血小板计数的药剂或治疗。在示例性的实施方式中，所述一种或多种额外药物或治疗选自输注血小板、脾切除、皮质类固醇(例如，泼尼松和地塞米松)、血小板清除抑制剂(例如，达那唑)、血小板生成素、血小板生成素模拟物、血小板生成素受体激动剂(例如，罗米司亭和艾曲波帕)、白细胞介素，例如重组人类白细胞介素(包括白介素-1、白介素-3、白介素-6、白介素-11)、碳酸锂和叶酸盐。其它的额外药物和治疗描述于第5.1.3节。

在一些临床表现中，尽管所述患者需要血小板生成，其可能仍需要抗凝血治疗。因此，在一些实施方式中，给予所述与PF4相互作用的类肝素作为一种或多种抗凝血药物的辅助，优选没有诱导或引发肝素诱导的血小板减少症的风险的药物。抗凝血药物包括肝素，例如未分级肝素和低分子量肝素，例如达肝素、依诺肝素、磺达肝素、瑞维肝素、亭扎肝素。通常，所述与PF4相互作用的类肝素和抗凝血药物可以一定比率进行给药，其中与PF4相互作用的类肝素的量高于抗凝血药物的量。与PF4相互作用的类肝素和抗凝血肝素的摩尔比的范围是约1:2至约10:1。也考虑用当量比。

5.3.促进中性粒细胞产生的方法

已发现，与PF4相互作用的类肝素可增加人类患者的中性粒细胞计数。正如下文实施例3中所述，用ODSH治疗的患者尽管同时接受有骨髓抑制副作用的化疗方案的治疗，但在第一个4周周期结束时，中性粒细胞计数增加，且相对于周期中的中性粒细胞计数，在连续4周周期结束时显示增加的中性粒细胞计数。在一些情况下，在用ODSH和化疗方案进行辅助性给药两周期、三周期甚至是四周期之后，患者表现出的中性粒细胞计数水平均高于筛选时可见的中性粒细胞计数水平(即，用ODSH治疗前)。因此，在另一方面，提供了促进受试者中性粒细胞生成的方法。该方法包括给药有效量的与PF4相互作用的类肝素至所述受试者，其描述于下文第5.6节。在示例性的实施方式中，所述与PF4相互作用的类肝素为ODSH。合适的给药方式和给药方案进一步描述于下文第5.8节。与PF4相互作用的类肝素的有效剂量和治疗有效量进一步描述于下文第5.9节。

该方法可在中性粒细胞减少症的受试者或非中性粒细胞减少症的受试者中实施。所述受试者可为成人或儿童。在多种实施方式中，所述受试者包括在上文第5.1.2中所述的受试者。

在待治疗的受试者为中性粒细胞减少症的受试者的实施方式中，该中性粒细胞减少症可以是慢性的或急性的。在多种实施方式中，所述中性粒细胞减少症为先天性的(例如，由Kostmann综合征引起的)、周期性的或自发性的。在一些实施方式中，所述中性粒细胞减少症继发于另一病症，例如癌症、病毒感染(例如，获得性免疫缺陷综合征(AIDS))。在一些实施方式中，所述中性粒细胞减少症是自身免疫性的。在一些实施方式中，中性粒细胞减少症是由以下引起的：由于白血病、骨髓瘤、淋巴癌或转移性实体瘤，例如，乳腺癌或前列腺癌导致骨髓的浸润和破坏。在一些实施方式中，所述中性粒细胞减少症是辐射诱发的中性粒细胞减少症，由蓄意的或非治疗性暴露于电离辐射引发，例如放射性或核事故或攻击导致的。

中性粒细胞减少症可以是药物或操作的副作用。因此，在一些实施方式中，中性粒细胞减少症是由有骨髓抑制副作用的治疗方案引起的，例如，化学治疗、癌症的放射治疗、与癌症治疗相关的骨髓移植，且如上文第5.1.1所述。

在一些实施方式中，中性粒细胞减少症是免疫介导的，包括自身免疫性的或同种免疫的(例如，由非自身抗原导致的，该抗原刺激抗体形成并诱发过敏反应)。

在多种实施方式中，所述促进中性粒细胞产生的方法适用于治疗被诊断为辐射诱发的中性粒细胞减少症的受试者，所述辐射诱发的中性粒细胞减少症是由放射治疗或非治疗性暴露于电离辐射导致的，例如是放射性或核事故或攻击所引起的。

促进中性粒细胞产生的方法还用于治疗非中性粒细胞减少症的受试者。合适的受试者包括上文第5.1.2所述的受试者。该方法尤其适用于那些可从增加的中性粒细胞计数中获益的受试者。在示例性的实施方式中，所述受试者已被诊断为癌症，和/或需要手术或需要用有骨髓抑制副作用的治疗方案进行的治疗。在一些实施方式中，所述受试者处于辐射诱发的中性粒细胞减少症的风险中，该辐射诱发的中性粒细胞减少症归因于放射治疗或非治疗性暴露于电离辐射，例如是由放射性或核事故或攻击导致的。在一些实施方式中，所述受试者受感染的风险增加。

5.3.1.额外药物和治疗

在促进中性粒细胞产生的方法中，所述与PF4相互作用的类肝素可以作为单一药物进行给药或可与一种或多种其它药剂或治疗进行辅助性组合给药。在一些实施方式中，所述一种或多种额外药物或治疗能够促进中性粒细胞的产生。在多种实施方式中，所述一种或多种其它药剂或治疗是抗凝血的。

促进中性粒细胞产生的合适的治疗或药物包括作用是增加绝对中性粒细胞计数的药物。在示例性的实施方式中，所述一种或多种额外药物选自重组人粒细胞集落刺激因子(“G-CSF”)(非格司亭(Neupogen)、培非格司亭(Neulasta))和重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(“GM-CSF”)(沙格司亭(Leukine))。

在一些临床情况下，所述患者可能需要抗凝血治疗。因此，在一些实施方式中，给予与PF4相互作用的类肝素以辅助一种或多种抗凝血药物，优选不诱导或引发肝素诱导的血小板减少症的药物。用于该实施方式的抗凝血药物包括，例如，肝素，例如未分级肝素和低分子量肝素，例如达肝素、依诺肝素、磺达肝素、瑞维肝素、亭扎肝素。在多种实施方式中，所述与PF4相互作用的类肝素和抗凝血药物以一定比率进行给药，其中与PF4相互作用的类肝素的量高于抗凝血药物的量。与PF4相互作用的类肝素和抗凝血肝素的摩尔比的范围是约1:2至约10:1。也可以考虑使用当量比。

其它合适的额外药物或治疗上述第5.1.3节。

5.4.增加有骨髓抑制副作用的治疗方案的疗效的方法

由患者治疗方案引起的骨髓抑制副作用(例如血小板减少症和中性粒细胞减少症)可为剂量限制性的，其限制剂量、给药频率，或这两者，因此，降低了所述患者治疗方案的疗效。减弱该骨髓抑制副作用将使得该剂量和/或治疗频率保持不变或提高，因而使得所述患者治疗方案实现更好的疗效。如下实施例3所示，与PF4相互作用的类肝素----ODSH，减弱了由针对胰腺癌的抗肿瘤治疗方案引起的骨髓抑制副作用；特别地，给药ODSH以辅助化学治疗使血小板和中性粒细胞计数增加至高于治疗前的血小板和中性粒细胞计数。因此，给药与PF4相互作用的类肝素以辅助该治疗方案应当能使治疗剂量和/或频率保持不变或增加，从而提高所述患者治疗方案的疗效。

因此，在另一方面，提供了增加有骨髓抑制效应的治疗方案的疗效的方法。该方法包括给药治疗有效量的与PF4相互作用的类肝素至所述受试者患者以辅助有骨髓抑制副作用的所述患者的治疗方案，例如ICE方案，而无需降低有骨髓抑制性的患者治疗的剂量和/或给药频率，所述治疗依照的是对照治疗的给药或治疗周期。在一些实施方式中，所述对照治疗的给药或周期是首个治疗给药或治疗周期。在多种实施方式中，所述患者治疗方案的对照治疗给药或治疗周期在在首个治疗给药或治疗周期之后。

在一些实施方式中，所述方法还包括给药一定剂量，该剂量高于通常用于未辅助给予与PF4相互作用的类肝素的这类给药或周期中的剂量。

在一些实施方式中，所述方法还包括测定患者血样中的初始血小板和/或中性粒细胞计数。

在多种实施方式中，给药有效量的所述与PF4相互作用的类肝素以提高所述患者的血小板和/或中性粒细胞计数至高于预先确定的阈水平。在一些实施方式中，预先确定的阈水平是指低于该水平给予所述有骨髓抑制副作用的患者治疗方案是禁忌的。合适的给药方式和给药方案在下文第5.8节进一步描述。与PF4相互作用的类肝素的有效剂量和治疗有效量在下文第5.9节进一步描述。

在一些实施方式中，所述方法包括测定患者样品中的初始血小板计数，然后给药有效量的与PF4相互作用的类肝素以提高所述患者的血小板计数至高于阈水平，而低于该阈水平使用有骨髓抑制副作用的患者治疗方案进行的治疗是禁忌。在多种实施方式中，给药足够量的与PF4相互作用的类肝素以维持血小板水平高于显示4级或3级血小板减少症的水平。在多种实施方式中，给药足够量的与PF4相互作用的类肝素以维持血小板水平高于显示2级或1级血小板减少症的水平。任选地，所述方法还包括给予一种或多种药剂或治疗以辅助与PF4相互作用的类肝素，所述药剂或治疗是抗血小板减少的、抗中性粒细胞减少的、抗凝血的或具有一些其它的治疗活性。在一些实施方式中，所述方法包括另外一步：给予有骨髓抑制副作用的患者治疗方案至患者，该患者的血小板计数高于禁止该治疗的水平。任选地，所述患者治疗方案的给药量和/或频率可增加。

在一些实施方式中，所述方法包括测定患者血样中的初始中性粒细胞计数并给药有效量的与PF4相互作用的类肝素以提高所述患者的中性粒细胞计数至高于阈水平，而低于该阈水平使用有骨髓抑制副作用的患者治疗方案进行的治疗是禁忌。在多种实施方式中，给予足够量与PF4相互作用的类肝素以维持中性粒细胞水平高于显示4级或3级中性粒细胞减少症的水平，即，高于约1000个中性粒细胞每微升血液和高于约500个中性粒细胞每微升血液。在多种实施方式中，给药足够量的与PF4相互作用的类肝素以维持中性粒细胞水平高于显示2级或1级中性粒细胞减少症的水平。任选地，所述方法还可包括给予一种或多种药剂或治疗以辅助与PF4相互作用的类肝素，所述药剂或治疗为抗中性粒细胞减少的、抗血小板减少的、抗凝血的或具有一些其它的治疗活性。在一些实施方式中，所述方法包括另一步：给药有骨髓抑制副作用的患者治疗方案至患者，该患者的中性粒细胞计数高于禁止该治疗的水平。任选地，所述患者治疗方案的给药量和/或频率可增加。

5.5.提高抗肿瘤患者的治疗方案疗效的方法

已经发现，辅助性地给药ODSH，一种与PF4相互作用的类肝素，提高了抗肿瘤治疗方案抑制肿瘤生长的能力。如下文实施例1和2所示，相比于单独给药ODSH或单独给药化学疗法，辅助性地给药ODSH导致在小鼠胰腺癌和卵巢癌的异种移植模型中对肿瘤生长更高的抑制。因此，在另一方面，本文提供了提高抗肿瘤治疗方案的疗效的方法。所述方法包括给药治疗有效量的与PF4相互作用的类肝素至受试患者，作为抗肿瘤治疗方案的辅助。

抗肿瘤治疗方案是用于治疗癌症的患者治疗方案。合适的抗肿瘤治疗方案包括化疗方案(包括诱导化学疗法和巩固性化疗)、抗体治疗方案及其组合，如上文第5.1.1节中进一步描述。

待治疗的受试者可为任何动物，例如哺乳动物，优选人类。在一些实施方式中，所述受试者是成人。在一些实施方式中，所述受试者是儿童。待治疗的受试者为需要抗肿瘤治疗的患者，特别是患有或被诊断为癌症的患者。该癌症可在任何器官或组织中，包括胰腺癌、卵巢癌、子宫癌、乳腺癌，包括转移性乳腺癌和对化学治疗抵抗的乳腺癌(例如，在用或不用蒽环类药物的辅助性化疗6个月内以旧病复发的乳腺癌)、头和颈癌、膀胱癌、泌尿道上皮癌、肺癌(包括非小细胞肺癌)、结肠直肠癌、胃癌、食道癌、淋巴癌(包括复发型、霍奇金型和非霍奇金淋巴癌)、肝癌、黑素瘤、前列腺癌、骨肉瘤和白血病(包括急性骨髓性白血病和儿童急性淋巴细胞白血病)。

本文中所述的方法尤其用于其中PF4水平在血小板或血液中升高的癌症。因此，在一些实施方式中，所述受试者已被诊断为其中PF4水平在血小板或血液中是升高的癌症。在一些实施方式中，所述癌症为胰腺癌、结肠直肠癌、骨肉瘤或白血病(包括急性骨髓性白血病和儿童急性淋巴细胞白血病)。

适用于所述方法的与PF4相互作用的类肝素描述于下文第5.6节。在示例性的实施方式中，所述与PF4相互作用的类肝素为ODSH。合适的给药方式和给药方案在下文第5.8节进一步描述。与PF4相互作用的类肝素的有效剂量和治疗有效量在下文第5.9节进一步描述。

5.6.与PF4相互作用的类肝素

本文所描述的用于所述方法的类肝素是指能够与PF4相互作用且能够阻碍PF4抑制血小板和中性粒细胞产生的能力的类肝素。如本文所用，与PF4相互作用的类肝素包括与PF4结合的类肝素以及在骨髓细胞系，例如，巨核细胞中与PF4竞争结合祖细胞的类肝素。对类肝素结合PF4的具体测定提供于Joglekar等人，2012，Thromb Haemost 107(4):717-725，其公开内容并入本文作为参考。在一些实施方式中，与PF4相互作用的类肝素为与未分级肝素竞争结合PF4的类肝素，如竞争测定法所测定的，参见例如，Stringer等人，1997，J.Biol.Chem.272(33)20508-20514，其公开内容并入本文作为参考。

与PF4相互作用的类肝素为线性糖胺聚糖聚合物，其由交替或重复的艾杜糖醛酸以及带有O-硫酸基(O-sulfate)、N-硫酸基(N-sulfate)和N-乙酰基取代的葡糖胺单元组成。优选地，用于本文所述的方法中的与PF4相互作用的类肝素是具有至少约8kDa平均分子量的聚合物，例如具有约8kDa至约15kDa的平均分子量。在一些实施方式中，所述与PF4相互作用的类肝素具有大于约8kDa的平均分子量。更优选地，用于本文所述的方法的与PF4相互作用的类肝素具有大小范围在约11kDa至约13kDa的平均分子量。类肝素的分子量可用本领域已知的高效尺寸排阻色谱测定。参见，例如，Lapierre等人，1996，Glycobiology 6(3):355-366，at page 363；Fryer等人，1997，J.Pharmacol.Exp.Ther.282：208-219，第209页。

任选地，所述与PF4相互作用的类肝素不会引起血小板的激活以及肝素诱导的血小板减少症(HIT)，因此其可用于治疗有肝素诱导的血小板减少症风险的受试者，包括具有针对PF4/肝素复合物的抗体的受试者。因此，在多种实施方式中，所述与PF4相互作用的类肝素不会引发血小板的激活，该激活导致肝素诱导的血小板减少症；血小板的激活可使用血清素释放测定法进行测定，其描述于U.S.Pat.No.7,468,358和Sheridan等人，1986，Blood67:27-30。在一些实施方式中，所述与PF4相互作用的类肝素结合PF4，但不会被抗-肝素-PF4复合物的抗体识别，即使是当所述类肝素与PF4复合时。

在多种优选的实施方式中，所述与PF4相互作用的类肝素基本上是非抗凝血的。抗凝血活性可使用本领域已知的测定法来确定，所述测定法例如，活化部分凝血活酶时间(aPTT)、凝血酶原时间、抗-X_a凝血和酰胺水解试验。参见，例如，U.S.Pat.No.5,668,118,实施例IV；Fryer等人，1997，J.Pharmacol.Exp.Ther.282：208-219，第209页；Rao等人，2010，Am.J.Physiol.299:C97-C110，第C98页；United States Pharmacopeial Convention 1995(USP抗凝血试验和酰胺水解试验).

在典型的实施方式中，所述与PF4相互作用的类肝素为部分脱硫酸的。优选地，所述与PF4相互作用的类肝素基本上是在α-L-艾杜糖醛酸的2-O位(本文表示为“2-O位”)脱硫酸和/或在D-葡糖胺-N-硫酸(D-glucosamine-N-sulfate)(6-硫酸(6-sulfate))的3-O位(本文表示为“3-O位”)脱硫酸。在一些实施方式中，所述与PF4相互作用的类肝素在2-O位至少85％、至少90％、至少95％或至少99％脱硫酸。在一些优选的实施方式中，所述与PF4相互作用的类肝素在2-O位至少99％脱硫酸。在一些实施方式中，所述与PF4相互作用的类肝素在3-O位至少85％、至少90％、至少95％或至少99％脱硫酸。在一些优选的实施方式中，所述与PF4相互作用的类肝素在3-O位至少99％脱硫酸。在一些实施方式中，所述与PF4相互作用的类肝素在2-O位和3-O位至少85％、至少90％、至少95％、至少99％脱硫酸。在一些优选的实施方式中，所述与PF4相互作用的类肝素在2-O位和3-O位至少99％脱硫酸。

在典型的实施方式中，所述与PF4相互作用的类肝素包括基本上N-硫酸化的和6-O硫酸化的D-葡糖胺。在一些实施方式中，在与PF4相互作用的类肝素的α-L-艾杜糖醛酸糖上的羧酸基(carboxylates)本上保持不变。

示例性的与PF4相互作用的类肝素基本上是2-O、3-O脱硫酸的肝素，本文指的是ODSH。用于上述方法的ODSH可由牛或猪的肝素制备。在从猪的肝素制备ODSH的示例性方法中，ODSH是通过用冷的碱水解USP猪肠肝素合成的，其消除了2-O和3-O硫酸基，保留D-葡糖胺糖上的N-和6-O硫酸基且α-L-艾杜糖醛酸糖上的羧酸基本上保持不变。Fryer，A.等人，1997，J.Pharmacol.Exp.Ther.282：208-219。使用这个方法，可制备平均分子量为约11.7±0.3kDa的ODSH。

相比于未分级肝素，ODSH基本上是非抗凝血的：给药至受试者的剂量与未分级肝素的全抗凝血的剂量相等，在aPTT试验中测定的凝血时间不超过45秒且通常在正常范围的上部区间，其中正常的凝血时间的范围为约27至35秒。经比较，以全抗凝血剂量向受试者给予的未分级肝素导致在aPTT试验中凝血时间的范围为约60至约85秒。对ODSH的抗凝血活性的另一测定是测定其抗-X_a活性，该活性可在一个试验中进行测定，该试验是用Russell蝮蛇蛇毒处理的血浆实现的。在具体实例中，ODSH在USP抗凝血试验中呈现小于9U的抗凝血活性/mg(例如，7±0.3U)、小于5U的抗-X_a活性/mg(例如，1.9±0.1U/mg)和小于2U的抗-II_a活性/mg(例如，1.2±0.1U/mg)(相比于未分级肝素，其在全部三种试验中均具有165-190U/mg的活性)。参见Rao等人，2010，Am.J.Physiol.299:C97-C110，第C101页。类肝素是否基本上是非抗凝血的可使用上述任意试验进行测定。此外，ODSH对抗凝血酶III具有低亲和力(Kd约339μM或4mg/ml，而未分级肝素1.56μM或22μg/ml)，其与观测到的如Rao等人，同上，C98页中所述测得的低水平抗凝血活性相一致。

制备2-O、3-O脱硫酸的肝素的方法还可见于，例如，美国专利号5,668,118、5,912,237和6,489,311，以及WO 2009/015183，其全部内容并入本文，并可见于美国专利号5,296,471、5,969,100和5,808,021。

5.7.药物组合物和单位剂型

在典型的实施方式中，将以药物制剂或组合物的形式给药所述与PF4相互作用的类肝素。适用于给药至受试者的药物组合物可任选地包括其它活性药物和/或治疗药物，正如本领域已知的。参见Remington：The Science和Practice of Pharmacy，第21版(2005)，Lippincott Williams&Wilkins，并入本文作为参考。所述制剂通常将包括一种或多种药学上可接受的载体、赋形剂或稀释剂。所用的具体载体、赋形剂和/或稀释剂将取决于所需的给药方式。

在多种实施方式中，所述药物组合物是无菌、无热源、液体组合物的形式。

可将所述药物组合物配制用于各种途径给药至受试者，包括鼻内给药、吸入给药、肌内给药、腹膜内给药和胃肠外给药，包括静脉给药或皮下给药。可将药物组合物配制成适用于推注、连续输注或皮下给药的体积和浓度。

药物组合物可方便的存在于含预测定量的与PF4相互作用的类肝素的单位剂型中。在多种实施方式中，与PF4相互作用的类肝素的单位剂型含有1mg至1g或5mg至500mg的与PF4相互作用的类肝素。

5.8.给药方式

与PF4相互作用的类肝素可通过各种上述途径，用本文所述的方法进行给药。在目前优选的实施方式中，所述与PF4相互作用的类肝素由静脉给药，可通过一或多次推注、连续输注或一或多次推注然后连续输注进行给药。

在多种实施方式中，给药与PF4相互作用的类肝素1天至无限天的时间段、1周至6个月的时间段、3个月至5年的时间段、6个月至1或2年的时间段等。任选地，将与PF4相互作用的类肝素重复给药；例如，在一些实施方式中，给药与PF4相互作用的类肝素每日一次、每日两次、每日三次、每日四次、每日五次、每隔一天一次、每隔两天一次、每隔四天一次、每周一次、每两周一次、每月一次、每隔一个月一次、每半年一次或每年一次。在一些实施方式中，以有序的时间间隔给药与PF4相互作用的类肝素持续数周，然后休息一段时间，休息期间不给予与PF4相互作用的类肝素。例如，在一些实施方式中，给药与PF4相互作用的类肝素一周、两周、三周或更多周，然后一周、两周、三周或更多周不施用与PF4相互作用的类肝素。该重复给药可以相同剂量给药或以不同剂量给药。所述与PF4相互作用的类肝素可以一或多次静脉推注、一或多次输注或在一或多次静脉推注之前或之后进行输注给药。

在以下实施方式中，其中给予与PF4相互作用的类肝素以辅助有骨髓抑制性的患者治疗方案和/或辅助一种或多种其它具有抗血小板减少、促血小板生成、抗中性粒细胞减少和/或促粒细胞生成活性的药物或治疗的给药，该与PF4相互作用的肝素类似物以与有骨髓抑制副作用的治疗方案和/或额外的药物或治疗治疗上有效的邻近时间(temporalproximity)给药。与PF4相互作用的类肝素可与所述有骨髓抑制副作用的患者治疗方案或其它药物或治疗同时给药(在相同时间)、相继给药(不同时但是在同一天，例如，在相同的患者就诊期间)或单独给药(在不同天)。在多种实施方式中，辅助性施用的与PF4相互作用的类肝素可与所述具有骨髓抑制副作用的患者治疗方案或其它施用的药物或治疗同时给药、相继给药和/或单独给药。当采用相继给药或单独给药时，与PF4相互作用的类肝素可在其它治疗之前、之后或即在之前又在之后给药。

在辅助性地施用与PF4相互作用的类肝素的实施方式中，可通过与在邻近时间给予的其它治疗相同或不同的途径给药与PF4相互作用的类肝素。在多种实施方式中，通过相同途径将与PF4相互作用的类肝素同时或相继给药。例如，在一些实施方式中，将与PF4相互作用的类肝素和其它治疗同时或相继地进行静脉给药。任选地，作为治疗方案的一部分，所述与PF4相互作用的类肝素还可与其他治疗通过不同途径，例如皮下单独给药(在不同天)。在具体的实施方式中，与PF4相互作用的类肝素和其它治疗在同一天由静脉进行给药，在同一时间(同时)、不同时间(相继)，或者既同时又相继进行给药，且当所述患者未接受其它治疗时，也可在一或多天进行皮下给药。在多种实施方式中，与PF4相互作用的类肝素通过不同途径同时或相继给药。任选地，作为治疗方案的一部分，所述与PF4相互作用的类肝素还可以与其它治疗通过相同或不同途径单独给药(在不同天)。

在一个实施方式中，与PF4相互作用的类肝素在28天的化疗周期的第1、8和15天以初始推注的方式进行给药，然后连续输注48小时。治疗过程还包括在与PF4相互作用的类肝素之前或之后相继给药一种或多种化学治疗剂。任选地，与PF4相互作用的类肝素在第21天和/或第2、3、4、5、6、7、9、10、11、12、13、14、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26和27天中的一天、数天或所有天经皮下给药。

5.9.有效剂量

给药足够量或有效量的与PF4相互作用的类肝素至所述受试者以提供治疗益处，即，治疗有效量。所述治疗有效量取决于所寻求的治疗益处--例如，减弱骨髓抑制副作用例如血小板减少症和中性粒细胞减少症，和/或促进血小板生成、和/或促进粒细胞生成、和/或增强抗肿瘤作用。

在给药与PF4相互作用的类肝素以减弱患者治疗方案的骨髓抑制副作用的方法中，给药骨髓保护量的与PF4相互作用的类肝素，在典型的实施方式中，相比于在未辅助性给药与PF4相互作用的类肝素的相同患者治疗方案中的历史数据，该骨髓保护量为足以达到以下的一种或多种的量：

(a)血小板减少症提高至少1级(例如，从4级提高至3、2、1或0级；从3级提高至2、1或0级；从2级提高至1或0级；或从1级提高至0级)；

(b)血小板计数增加至少10％、至少20％、至少30％、至少40％、至少50％、至少100％、至少200％；

(c)血小板计数增加至少5,000、至少10,000、至少15,000、至少20,000、至少25,000、至少30,000个血小板每微升血液；

(d)中性粒细胞减少症提高至少1级(例如，从4级提高至3、2、1或0级；从3级提高至2、1或0级；从2级提高至1或0级；或从1级提高至0级)；

(f)绝对中性粒细胞计数增加至少10％、至少20％、至少30％、至少40％、至少50％、至少100％、至少200％；

(d)绝对中性粒细胞计数增加至少500、至少1000、至少1500、至少2000、至少2500、至少3000个中性粒细胞每微升血液。

在具体实施方式中，相比于治疗前水平，给药足够量的与PF4相互作用的类肝素以实现一种或多种上述效果。

在给药与PF4相互作用的类肝素以促进血小板生成的方法中，血小板生成有效量的与PF4相互作用的类肝素，在典型的实施方式中指的是相比于治疗前水平，有效引起受试者血小板计数达到可测量提高的量。

在给药与PF4相互作用的类肝素以促进中性粒细胞的产生的方法中，粒细胞生成有效量的与PF4相互作用的类肝素，在典型的实施方式中指的是相比于治疗前水平，有效引起受试者的绝对中性粒细胞计数达到可测量提高的量。

在给药与PF4相互作用的类肝素以提高抗肿瘤治疗方案的疗效的方法中，治疗有效量的与PF4相互作用的类肝素是指有效或足够提供治疗益处的量。在增强抗肿瘤治疗方案疗效的上下文中，在多种实施方式中，治疗益处是指实现以下的一种或多种：停止或减缓肿瘤生长、降低患者肿瘤的大小和/或肿瘤数、延长预期寿命、降低抗肿瘤治疗体质上的副作用(例如，体重减轻、食欲不振、恶心、呕吐、乏力)、允许降低抗肿瘤治疗方案的给药剂量或频率而不降低疗效，和/或提高患者生活质量。完全治愈，虽然期望，但不是实现治疗益处所必需的。在一些情况下，根据本领域一般技术人员的知识，治疗益处可与一种或多种替代指标相关。举例而非限制，提高抗肿瘤治疗方案的疗效可在体内进行测量。用于测量对肿瘤生长的抑制的示例性体内试验描述于下文实施例1和实施例2的两种不同的癌症和两种不同的抗肿瘤治疗方案中。

给予与PF4相互作用的类肝素的量取决于多种因素，包括所述受试者是否是血小板减少症的和/或中性粒细胞减少症的、该血小板减少症和/或中性粒细胞减少症的严重性、对患者治疗方案是否辅助性地给药与PF4相互作用的类肝素，以及待治疗的受试者的年龄和病症。本领域技术人员可容易地确定合适剂量。在实践中，医生将确定使用的合适剂量。这个剂量可按照通常合适的剂量重复。该剂量的量和/或频率可根据受试者的反应并按照标准临床实践进行改变、增加或降低。适当的剂量和治疗方案可使用本领域已知的常规技术，通过监测治疗进程而确立。

在一些实施方式中，与PF4相互作用的类肝素静脉推注给予的剂量或量为每千克患者体重约1mg/kg至约25mg/kg，而静脉输注给予的剂量或量为约0.1mg/kg/hr至约2.5mg/kg/hr。在具体实施方式中，与PF4相互作用的类肝素以约4mg/kg的剂量静脉推注给药，任选地之后以约0.375mg/kg/hr的剂量静脉输注与PF4相互作用的类肝素持续48小时。在典型的实施方式中，推注剂量经不超过1分钟、约1分钟、约2分钟、约3分钟、约4分钟或约5分钟而给予。对于皮下给药，与PF4相互作用的类肝素可以剂量范围为约25mg至约400mg的剂量进行给药，每个注射部位注射2.0mL或更少的体积。

与PF4相互作用的类肝素的药物组合物可以一定量进行配制，该量允许静脉推注给药和/或连续静脉输注。在一个实施方式中，所述药物组合物包含以50mg/mL浓度在无菌小瓶中的与PF4相互作用的类肝素。当将药物组合物配制用于皮下给药，则该药物组合物可含有浓度范围为50mg/ml至350mg/ml的与PF4相互作用的类肝素，其适用于给药的剂量范围在约25至约400mg，每个注射部位注射2.0mL或更少的体积。

6.实施例

6.1实施例1:ODSH，一种与PF4相互作用的类肝素，提高了吉西他滨在人类胰腺癌的体内小鼠异种移植模型中的疗效，并证明了当将其单独给药时的抗肿瘤效果

这个实验证明，辅助性给药ODSH提高了吉西他滨对抗作为无胸腺裸鼠的异种移植物的人胰腺肿瘤的疗效，并证明了当单独给药ODSH时，ODSH抑制肿瘤生长。

材料&方法在该实验中所测的化合物如下。ODSH由Pyramid Laboratories，Inc.(Costa Mesa，CA)制造。ODSH以50mg/ml的储存浓度提供并在室温储存直至使用。将ODSH于0.9％NaCl溶液(B.Braun Medical Inc.，Irvine，CA)中稀释至2.4mg/ml的浓度，使得当静脉给药时，以10ml/kg的剂量体积递送24mg/kg。配制4.8mg/ml的浓度，使得当皮下给药时，以5ml/kg剂量体积递送24mg/kg剂量。ODSH是在每次给药之前现配的。

化学治疗剂奥沙利铂、吉西他滨和白蛋白结合型紫杉醇也被测定。奥沙利铂是由Sanofi-Aventis(Bridgewater，NJ)制造的并于0.9％NaCl溶液中稀释1mg/ml的浓度，以10ml/kg的剂量体积递送10mg/kg。吉西他滨是由Eli Lilly and Co.(Indianapolis，IN)制造的并于0.9％NaCl溶液稀释至8mg/ml的浓度，以10ml/kg的剂量体积递送80mg/kg。白蛋白结合型紫杉醇是由Abraxis BioScience LLC(Bridgewater，NJ)制造的并于0.9％NaCl溶液中稀释至1.5mg/ml的浓度，以10ml/kg的剂量体积递送15mg/kg。所有标准药物制剂在给药前现配。

得到BxPC-3细胞并按如下制备。BxPC-3胰腺肿瘤细胞系获自美国标准生物品收藏中心(American Type Culture Collection)(ATCC，Manassas，VA)。将培养物在RPMI 1640培养基(Hyclone，Logan，UT)中培养，该培养基中补充有5％胎牛血清。将该细胞安置在5％CO₂气氛中。将该培养物在组织培养瓶中以1:3的分流比进行扩增直至获得足够量的细胞。

所有的实验均是在雌性无胸腺裸鼠中进行的(Hsd:Athymic Nude-Foxn1nu)，其由Harlan(Indianapolis，IN)提供。收到了在四周龄、12-15克重的小鼠，并在操作前驯化7天。将小鼠安置于饲育盒(Lab Products，Seaford，DE)中，并在特定的无病原体的条件下饲养。所有的操作均按照合适的动物保健常用指南进行。

BxPC-3人类胰腺肿瘤异种移植模型：向在每种治疗条件下的雌性无胸腺裸鼠的右侧腹皮下接种0.1ml的50％RPMI 1640/50％Matrigel^TM(BD Biosciences，Bedford，MA)的混合物，其含有BxPC-3肿瘤细胞(大约5x10⁶细胞/小鼠)的混悬液。

接种七天后，使用测径器对肿瘤进行测量，并使用动物研究管理软件StudyDirector V.1.7.54k(Study Log)计算肿瘤重量。参见Britten CD，等人，"Enhancedantitumor activity of 6-hydroxymethylacylfulvene in combination withirinotecan and 5-fluorouracil in the HT29 human colon tumor xenograft model",Cancer Res 59:1049-1053,1999。通过随机平衡的方式，将肿瘤大小为93-172mg的80只小鼠置于8组，每组10只(第1天)。当小鼠随机分配后，记录体重，并在之后每周测定两次体重并伴有肿瘤测量，肿瘤测量在第1、4、8、11、15、18、22、26、30、33和36天进行。

根据表1中所述的给药方案施用ODSH、载体对照(0.9％NaCl溶液，称为盐水)、奥沙利铂、吉西他滨和白蛋白结合型紫杉醇。在第36天，当载体对照达到1500mg的终点时，研究停止。下表1提供了8个治疗组的更多细节。

*药物以以下三种途径中的一种进行给药：静脉(IV)、皮下(SC)或腹膜内(IP)。

由于治疗所引起的不良反应，7和8组的治疗在第8天停止。由于尾部肿胀和瘀伤，在第12天将ODSH的给药途径由静脉给药修改为皮下给药。在第26天，将吉西他滨和白蛋白结合型紫杉醇引入第3组和第5组的给药方案中。

按如下进行数据和统计分析。肿瘤生长抑制的(TGI)平均值是利用下式A计算的(死亡未包括在该TGI的计算中)。进行TGI计算，来比较第26天和第1天的肿瘤重量(在添加吉西他滨和白蛋白结合型紫杉醇至各组之前采集该数据)以及比较第36天(研究最后一天)和第1天的肿瘤重量。

式A:

在异种移植研究中的所有统计分析均是用GraphPad

v4软件进行的。使用方差分析(ANOVA)和土其多重对比测试(Tukey’s Multiple Comparison Test)证实了第26天和第36天肿瘤重量的差异。

结果.评价ODSH作为单一药物进行给药或与奥沙利铂、吉西他滨和白蛋白结合型紫杉醇中的一种或多种组成不同组合进行给药的抗肿瘤效果。

所记录的实验治疗组1至8的肿瘤重量提供于下表2至9中。也参见图1.

*:ODSH静脉给药，第1-11天；皮下给药，第12天至结束

*:ODSH静脉给药，第1-11天；皮下给药，第12天至结束

^:起始于第26天，第3组和第5组停止初始给药方案和开始以下给药方案:

第3组：吉西他滨(80mg/kg IP，Q3dx4，起始于第26天)+白蛋白结合型紫杉醇(15mg/kg IV，每周2x，起始于第26天)

第5组：ODSH(24mg/kg，IV BID)+吉西他滨(80mg/kg IP，Q3dx4起始于第26天)+白蛋白结合型紫杉醇(15mg/kg IV，每周2x，起始于第26天)

^:起始于第26天，第3组和第5组停止初始给药方案和开始以下给药方案:

第3组：吉西他滨(80mg/kg IP，Q3dx4起始于第26天)+白蛋白结合型紫杉醇(15mg/kg IV，每周2x，起始于第26天)

第5组：ODSH(24mg/kg，IV BID)+吉西他滨(80mg/kg IP，Q3dx4起始于第26天)+白蛋白结合型紫杉醇(15mg/kg IV，每周2x，起始于第26天)

*：ODSH静脉给药，第1-11天；皮下给药，第12天至结束

MS＝垂死处死(Moribund Sacrifice)

FD＝发现死亡(Found Dead)

*：ODSH静脉给药，第1-11天；皮下给药，第12天至结束

MS＝垂死处死

FD＝发现死亡

FD＝发现死亡

MS＝垂死处死

*：ODSH静脉给药，第1-11天；皮下给药，第12天至结束

^:起始于第26天，第3组和第5组停止初始给药方案和开始以下给药方案:

第3组：吉西他滨(80mg/kg IP，Q3dx4起始于第26天)+白蛋白结合型紫杉醇(15mg/kg IV，每周2x，起始于第26天)

第5组：ODSH(24mg/kg，IV BID)+吉西他滨(80mg/kg IP，Q3dx4起始于第26天)+白蛋白结合型紫杉醇(15mg/kg IV，每周2x，起始于第26天)

下表10-13显示了经过该实验过程所记录的治疗组1-8的体重。也参见图3。

^:起始于第26天，第3组和第5组停止初始给药方案和开始以下给药方案:

第3组：吉西他滨(80mg/kg IP，Q3dx4起始于第26天)+白蛋白结合型紫杉醇(15mg/kg IV，每周2x，起始于第26天)

第5组：ODSH(24mg/kg，IV BID)+吉西他滨(80mg/kg IP，Q3dx4起始于第26天)+白蛋白结合型紫杉醇(15mg/kg IV，每周2x，起始于第26天)

*:ODSH静脉给药，第1-11天；皮下给药，第12天至结束

^:起始于第26天，第3组和第5组停止初始给药方案和开始以下给药方案:

第3组：吉西他滨(80mg/kg IP，Q3dx4起始于第26天)+白蛋白结合型紫杉醇(15mg/kg IV，每周2x，起始于第26天)

第5组：ODSH(24mg/kg，IV BID)+吉西他滨(80mg/kg IP，Q3dx4起始于第26天)+白蛋白结合型紫杉醇(15mg/kg IV，每周2x，起始于第26天)

*:ODSH静脉给药，第1-11天；皮下给药，第12天至结束

^:起始于第26天，第3组和第5组停止初始给药方案和开始以下给药方案:

第3组：吉西他滨(80mg/kg IP，Q3dx4起始于第26天)+白蛋白结合型紫杉醇(15mg/kg IV，每周2x，起始于第26天)

第5组：ODSH(24mg/kg，IV BID)+吉西他滨(80mg/kg IP，Q3dx4起始于第26天)+白蛋白结合型紫杉醇(15mg/kg IV，每周2x，起始于第26天)

*:ODSH静脉给药，第1-11天；皮下给药，第12天至结束

^:起始于第26天，第3组和第5组停止初始给药方案和开始以下给药方案:

第3组：吉西他滨(80mg/kg IP，Q3dx4起始于第26天)+白蛋白结合型紫杉醇(15mg/kg IV，每周2x，起始于第26天)

第5组：ODSH(24mg/kg，IV BID)+吉西他滨(80mg/kg IP，Q3dx4起始于第26天)+白蛋白结合型紫杉醇(15mg/kg IV，每周2x，起始于第26天)

*:ODSH静脉给药，第1-11天；皮下给药，第12天至结束

通过比较第26天和第36天的肿瘤重量相对于第1天的肿瘤重量来评估疗效。在添加吉西他滨和白蛋白结合型紫杉醇至第3组和第5组之前，选择第26天来评估数据。第36天作为研究最后一天进行评价。

下表14和15显示了在第26天和第36天所有治疗组相对于第1组(载体对照组)的肿瘤重量以及肿瘤生长抑制百分比(％TGI)。也参见图1和图2。

¹施用该治疗直至第26天

²在第26天或之前总的死亡

¹施用该治疗直至第35天

²在第36天或之前总的死亡

在第26天，载体对照组(第1组)的平均肿瘤重量达到679.8mg，且在第36天达到1524.2mg。在10个肿瘤中，有6个肿瘤出现一定程度的坏死；但是，这是由于该肿瘤异种移植模型的正常进展。在第30天首次观测到肿瘤坏死。在第15天观测到了3.6％的最大体重减轻。小鼠在第26天恢复了体重。10只小鼠中的两只出现尾部轻度瘀伤(bruised)，在第11天首次观察到。

以24mg/kg接受ODSH的组(第2组)的平均肿瘤重量在第26天达到616.2mg且在第36天达到1270.1mg。相对于第1天，该治疗在第26天实现11.5％的TGI且在第36天实现18.2％的TGI。在第26天，未观测到第2组与载体对照组显著的肿瘤重量差异，但是到第36天，观测到了第2组相对于载体对照组显著的肿瘤重量差异。在10个肿瘤中，有3个肿瘤出现一定程度的坏死；但是，这是由于该肿瘤异种移植模型的正常进程。在第30天首次观测到肿瘤坏死。在第11天观测到了2.7％的最大体重减轻。小鼠在第22天恢复了体重。该组中10只小鼠全部在其注射部位的尾部或腹部出现瘀伤。在第8天首次观察到尾部瘀伤，在第15天首次观察到腹部瘀伤。这10只小鼠中的1只还出现尾部肿胀，其是在第11天首次观察到的。

奥沙利铂10mg/kg或吉西他滨80mg/kg和白蛋白结合型紫杉醇15mg/kg(第3组)：在添加吉西他滨和白蛋白结合型紫杉醇至给药方案之前，单独使用奥沙利铂的初始治疗方案在第26天达到635.0mg的平均肿瘤重量。相比于载体对照，该组在第26天产生8.0％的TGI。在第26天，未观测到与载体对照组显著的肿瘤重量差异。1只小鼠出现尾部瘀伤，在第11天首次观察到。在10个肿瘤中，有3个肿瘤出现一定程度的坏死；但是，这是由于该肿瘤异种移植模型的正常进程。肿瘤坏死在第26天被首次观测到。

继第26天收集完数据之后，开始吉西他滨和白蛋白结合型紫杉醇的组合治疗方案。该方案在初始的奥沙利铂单独治疗之后被证明是有毒的。对于这种三重组合没有可报告的功效数据。

在第26天，吉西他滨80mg/kg(第4组)达到594.7mg的平均肿瘤重量并在第36天达到1288.8mg。该治疗相比于载体对照，在第26天产生15.3％的TGI，并在第36天产生16.8％的TGI。在第26天或第36天，未观测到与载体对照组显著的肿瘤重量差异。在10个肿瘤中，有4个肿瘤出现一定程度的坏死；但是，这是由于该肿瘤异种移植模型的正常进程。肿瘤坏死在第26天被首次观测到。在第11天观达到8.7％的最大体重减轻。小鼠在第18天恢复了体重。

ODSH 24mg/kg和奥沙利铂10mg/kg或ODSH 24mg/kg、吉西他滨80mg/kg和白蛋白结合型紫杉醇15mg/kg(第5组)：ODSH和奥沙利铂的初始治疗组合在第26天达到586.6mg的平均肿瘤重量。该治疗相比于载体对照，在第26天产生16.7％的TGI。在第26天，未观测到与载体对照、ODSH(第2组)或奥沙利铂(第3组)之间的显著肿瘤重量差异。该组中10只小鼠全部在其注射部位的尾部或腹部出现增加的瘀伤。在第4天首次观察到尾部瘀伤，在第15天首次观察到腹部瘀伤。这10只小鼠中的2只还出现尾部肿胀，其是在第4天首次观察到的。这10只小鼠中的3只出现一些皮肤变色，在第11天首次观察到。

ODSH、吉西他滨和白蛋白结合型紫杉醇的三重组合起始于第26天，其在初始的ODSH和奥沙利铂治疗方案之后，导致毒性增加。在第36天没有进行任何统计分析，因为到第36天，这一组仅剩1只小鼠，其肿瘤大小为827.5mg(TGI＝51.4％)。

ODSH 24mg/kg和吉西他滨80mg/kg(第6组)在第26天达到508.9mg的平均肿瘤重量且在第36天达到993.9mg的平均肿瘤重量。该治疗相比于载体对照在第26天产生30.7％的TGI，且在第36天产生37.9％的TGI。在第26天，未观测到与载体对照组、ODSH(第2组)或吉西他滨(第4组)显著的肿瘤重量差异。在第36天，相比于载体对照组，观察到了肿瘤重量的显著降低(P<0.05)；但是，相比于ODSH(第2组)或吉西他滨(第4组)，未观察到肿瘤重量的显著差异。在10个肿瘤中，有1个肿瘤出现一定程度的坏死；但是，这是由于该肿瘤异种移植模型的正常进程。肿瘤坏死在第30天被首次观测到。在第11天达到了13.4％的最大体重减轻。小鼠在第22天恢复了体重。该组中10只小鼠全部在其注射部位出现尾部或腹部瘀伤。在第4天首次观察到尾部瘀伤，在第15天首次观察到腹部瘀伤。10只小鼠中的2只还出现尾部肿胀，其是在第4天首次观察到的。这10只小鼠中的1只出现皮肤变色，在第9天首次观察到。10只小鼠中的2只出现干皮，在第9天首次观察到。

奥沙利铂10mg/kg和吉西他滨80mg/kg(第7组)在第26天达到612.4mg的平均肿瘤重量并在第36天达到1227.7mg的平均肿瘤重量。该组相比于载体对照在第26天产生15.5％的TGI(n＝3)，且在第36天产生22.5％的TGI(n＝3)。在第26天，未观测到与载体对照组、奥沙利铂(第3组)或吉西他滨(第4组)显著的肿瘤重量差异。在第36天，相比于载体对照组或吉西他滨(第4组)，未观察到肿瘤重量的显著差异。在10个肿瘤中，有1个肿瘤出现一定程度的坏死；这是由于该肿瘤异种移植模型的正常进程。肿瘤坏死在第30天被首次观测到。在第8天观测到了16.6％的最大体重减轻。小鼠在停止吉西他滨治疗后第15天恢复了体重。该治疗方案被证明是有毒的。小鼠在第10、11和14天被发现死亡，和在第11和12天垂死处死。在该组中的10只小鼠中的2只出现尾部瘀伤。其在第4天被首次观察到。

由于奥沙利铂和吉西他滨的给药造成的该治疗方案的毒性，使得无法评估ODSH24mg/kg、奥沙利铂10mg/kg和吉西他滨80mg/kg(第8组)的疗效。

尽管在注射部位出现一些瘀伤和肿胀，但是单独使用ODSH的治疗是耐受性良好的。因此，给药途径在第12天改为皮下注射。ODSH和吉西他滨以及ODSH和奥沙利铂的组合治疗是耐受的。相反，包括吉西他滨与奥沙利铂或吉西他滨与白蛋白结合型紫杉醇的组合治疗方案造成毒性。

ODSH和吉西他滨的组合在第26天和第36天产生最大疗效。在这两个对照天，相比于单独使用吉西他滨，ODSH和吉西他滨的组合显著降低肿瘤重量。在第36天，用ODSH和吉西他滨处理的小鼠的肿瘤重量统计学上显著低于对照组(单独使用盐水)的肿瘤重量。参见图2。

在研究的第26天，将吉西他滨和白蛋白结合型紫杉醇加至第3组和第5组的奥沙利铂治疗方案中，出现了严重的毒性，该毒性导致许多动物死亡。尚不清楚这些毒性是由于奥沙利铂、吉西他滨和白蛋白结合型紫杉醇的组合治疗引起的还是由于与施用奥沙利铂有关的残留毒性引起的。

6.2实施例2：ODSH，一种与PF4相互作用的类肝素，增强了卡铂在人类卵巢癌的小鼠体内异种移植模型中的疗效

这个实施例证明了辅助给药ODSH提高了卡铂对抗无胸腺裸鼠中作为异种移植物生长的人类卵巢肿瘤的疗效。

材料&方法ODSH(50mg/mL的储存浓度)由Pyramid Laboratories，Inc.制备并在室温储存直至使用。如下文进一步所述，既可以48mg/kg的剂量和10mL/kg的体积静脉(IV)给药ODSH，也可以24mg/kg的剂量和5mL/kg的体积皮下(SC)给药ODSH。从临床供应商获得的卡铂在4℃储存直至使用。以80mg/kg的剂量和10mL/kg的体积通过腹膜内注射(IP)施用卡铂。盐水溶液(0.9％NaCl)用作ODSH的载体对照，并以与ODSH相同的途径和相同体积给予。

人类卵巢癌细胞系A2780用于如下鼠的异种移植实验。大约每只小鼠使用5X10⁶A2780细胞，将于0.1mL的50％Matrigel/50％培养基中的5X10⁶A2780细胞皮下注射至右侧腹。当肿瘤达到90-130mg大小时，研究开始。使用40只小鼠，每个治疗方案10只。该小鼠是通常的无胸腺雌鼠，6-7周龄，安置于饲育盒中，并在无病原体的条件下饲养。每周测量三次肿瘤和体重。

根据下表所述给药方案施用ODSH、奥沙利铂和载体对照(0.9％NaCl)。研究四个治疗组。

*IV＝静脉，SC＝皮下，IP＝腹膜内。

结果如图4所示，ODSH不会降低或阻碍卡铂的抗肿瘤作用。相反，相比于在仅接受卡铂(图4，正方形)的小鼠中观察到的肿瘤重量的减轻，联合卡铂辅助性给药ODSH(图4，三角形)导致人类卵巢癌细胞的肿瘤重量的显著减轻。此外，作为卡铂的辅助用ODSH治疗的小鼠相比于仅接受卡铂的小鼠体重增加。参见图6，三角形对正方形。因此，ODSH不仅增强了卡铂的疗效，还有助于增加体重，显示了其对在化疗治疗方案中常见的体质上的副作用(例如，食欲不振，体重减轻)的积极作用。

所记录的实验治疗组1至4的小鼠肿瘤重量(mg)提供于下表中。如表中所示，在第1、4、6、8、11、14、18、21、25和28天对肿瘤重量进行测量。

FD＝发现死亡

TS＝终末期处死

所记录的实验治疗组1至4的小鼠体重(g)提供于下表中。如表中所示，在第1、4、6、8、11、14、18、21、25和28天对体重进行测量。

FD＝发现死亡

TS＝终末期处死

6.3实施例3：ODSH，一种与PF4相互作用的类肝素，缓解血小板减少症和中性粒细胞减少症，诱导血小板生成和中性粒细胞的产生并减少接受有骨髓抑制副作用的化疗方案的患者的全身症状

在非盲临床试验(unblinded clinical trial)中，将被诊断为转移性胰腺癌的患者用ODSH进行治疗，其作为的吉西他滨和白蛋白结合型紫杉醇(

白蛋白结合的紫杉醇)的辅助治疗。

入选标准患有组织学确认的转移性腺癌的18至75岁的男性和非妊娠、非哺乳期的女性患者，参与该实验。其它入选标准为：存在至少一种转移性肿瘤(为常规技术或CT扫描可测量的)，血清CA 19-9测量值大于正常上限的2倍、在参加该实验六个月内未进行针对局部晚期疾病的放射性治疗或化学治疗、绝对中性粒细胞计数至少为1.5X10⁹/L、血小板计数至少100,000/mm³(或100X10⁹/L)、血红蛋白水平至少9g/dL、筛选时，凝血酶原和部分凝血活酶时间在正常范围(+/-15％)之内、美国东部癌症临床研究合作组织(EasternCooperative Oncology Group)的表现情况为1或更高。此外，对患者血液化学水平进行筛选，包括在正常范围内的血清肌酸肝水平、2.5或高于正常上限的血清转氨酶水平以及1.5倍的正常胆红素水平上限或更高。

给药方案治疗由一系列的28天周期所组成，其中一个周期的最后一天(例如，第28天，第1周期)紧挨着下一周期的第一天(例如，第1天，第2周期)。在各28天的治疗周期中，在第1、8和15天(给药三周，随后休息一周)，按如下对患者进行给药。首先，静脉输注给药125mg/m²的白蛋白结合型紫杉醇，持续30分钟。接着，静脉输注给药1000mg/m²的吉西他滨，持续30分钟。白蛋白结合型紫杉醇和吉西他滨的治疗在

和

的处方信息中给出了描述。也参见，Von Hoff等人，2011，J.Clinical Oncology29:1-7)。

在给药吉西他滨后立即按如下给药ODSH：以4mg/kg的推注剂量给药起始负荷剂量，经5分钟，然后以0.375mg/kg/hr的剂量连续静脉输注，持续48小时。这些剂量分别为常规上在临床环境中用于赋予完全的抗凝血作用的未分级肝素的推注剂量和维持剂量(推注量为0.44mg/kg，维持量为0.1mg/kg/hr)的9倍和3.75倍。作为基本上是非抗凝血的类肝素，ODSH可以高于未分级肝素的完全抗凝血剂量的量进行给药而无需考虑抗凝血作用，如下文结果中所示。

进行初始的磨合期(run-in period)，其中10名患者用上文所述的吉西他滨、白蛋白结合型紫杉醇和ODSH的治疗方案进行治疗。在这10名患者全部完成了至少一个28天的周期之后，对数据进行检查并开始开放标签的随机研究，其具有两个组(ODSH组和对照组)。在ODSH组中，给药方案与磨合期时的给药方案(吉西他滨、白蛋白结合型紫杉醇和ODSH)一致。在对照组中，患者给予与磨合期相同的吉西他滨和白蛋白结合型紫杉醇进行治疗，但是没有ODSH。

检测在各28天周期的第1、8和15天给药治疗前，进行抽血。进行血小板计数、总的白细胞计数和绝对中性粒细胞计数。根据以下标准对血小板减少症和/或中性粒细胞减少症进行分级：

*(非中性粒细胞减少症)

在各治疗周期的第一天还要检测血样中的血清CA19-9水平(糖抗原19-9)，其为用于评价化学治疗药物在治疗胰腺癌中疗效的标记物。参见，例如，Maeda，2011，Int.J.Clin.Oncol.16(5):539-45。血清CA19-9水平的降低是化学疗法对胰腺癌的疗效的指示。根据实体瘤的反应评估标准(Response Evaluation Criteria in Solid Tumors)(RECIST)指南1.1版.Eur.J.Cancer，2009，45:228-247来测定肿瘤反应和疾病状态。靶病变(在筛选过程中存在的可测量的病变，每个有关的器官中最多存在2个病变)的直径总和降低至少30％，则将其评定为部分响应。当靶病变直径的最小总和既不降低也不充分增加使其成为部分响应或进行性疾病时，则将患者评定为具有稳定疾病。

在第1治疗周期的第1、3、10和17天，通过监测输注ODSH过程中的部分凝血活酶时间(aPTT)来验证抗凝血作用的缺失(通过ODSH)。aPTT的正常范围是约27-35秒+/-15％。

还评估了患者由化学治疗造成的其它副作用，包括乏力、感觉神经病变、恶心和呕吐，各副作用根据其严重性进行分级。级别为：0级(正常)、1级(轻微)、2级(中度)、3级(严重)和4级(危及生命)。

结果血小板计数如下表16所示。示于“筛查”栏中的计数是在进入临床试验方案之前的计数。

在已完成化学治疗的第一周期且也已在第二周期开始时进行抽血的10名患者中的10个，在第二周期开始时的血小板计数全都高于其在第一周期开始时在给予任何化学治疗之前的血小板计数。在已完成化学治疗的第二周期且也已在第三周期开始时进行抽血的9名患者中，有8名患者在第三周期开始时的血小板计数高于在第一周期开始时在给予任何化学治疗之前的血小板计数。这个趋势是稳健的，并持续到化学治疗的后续周期。例如，在已完成化学治疗的第三周期且也已在第四周期开始时进行抽血的10名患者中，有9名患者在第四周期开始时的血小板计数高于在第一周期开始时在给予任何化学治疗之前的血小板计数。

图8显示的是单个患者的血小板计数图，所测定的是在指定周期(C1＝第1周期；C2＝第2周期等)的指定天(D1＝第1天，D8＝第8天和D15＝第15天)的治疗之前采集的样品。在各连续的治疗周期开始时，存在明显的血小板计数增加的趋势，该增加不仅是相对于在前一周期的两周治疗之后的血小板计数，还是相对于初始治疗周期开始时，即给予任何治疗之前的血小板计数。在第二周期开始时没有患者出现血小板减少症，且在第三周期开始时8名患者中仅有1名患者出现血小板减少症。

表17显示的是给药ODSH辅助吉西他滨和白蛋白结合型紫杉醇的治疗两次(第15天，第一周期)之后或给药ODSH辅助吉西他滨和白蛋白结合型紫杉醇的治疗五次或更多次(第二周期的第15天或第三周期的第1天)之后出现血小板减少症的患者的百分比。在表17第3行还显示了历史数据，该历史数据显示的是出现不同等级血小板减少症的患者的百分比，所述患者已用与本文所述的相同量和相同给药方案的吉西他滨和白蛋白结合型紫杉醇进行治疗，但未辅助给药ODSH。第3行所示数据复制自Von Hoff等人，2011，J.ClinicalOncology 29:1-7中的表3，其提供了在整个实验中表现出选定的不良事件的患者的总数和百分数。各类患者总数如括号中所示。

如上所示，在给予两次治疗后，40％的用ODSH进行辅助治疗的患者未出现血小板减少症且90％的所述患者具有不超过轻微血小板减少症的症状。在给予五次治疗后(第2周期的第15天)，10名患者中的7人未出现血小板减少症。

表18显示的是在连续的治疗周期(例如，第1、2、3治疗周期等)的第一天，各患者的血小板计数。如在第2周期和第3周期开始时所见，即使是在接受吉西他滨和白蛋白结合型紫杉醇的一或两个完整周期(相当于给药3或6次)之后，仅有一名患者出现血小板减少症，表现出轻微(1级)血小板减少症。而所有其他的患者显示的血小板计数远高于正常值的下限。这一趋势持续到患者2001、6002、6003、6004、6006、6007、7001、8001和9001的第4周期。总之，这10名患者在第2周期开始时的血小板计数全部高于其在第1周期开始时的血小板计数，且在9名患者中，有6名患者在第3周期开始时的血小板计数高于其在第2周期开始时的血小板计数。

还如图10A所示，即使是当第1治疗周期的第15天所有样品的血小板计数平均值和中位数小于150,000，这些数值在第2治疗周期和第3治疗周期的第一天也始终高于150,000。事实上，在第2治疗周期和第3治疗周期，血小板计数的平均值和中位数在第15天–预期其为血小板计数最低值–仍保持在正常范围内。此外，在第3周期开始时的血小板计数平均值和中位数高于在第2周期开始时的血小板计数平均值和中位数，且在第2周期开始时的血小板计数平均值和中位数高于在筛选测量时以及在第一周期开始时(在给予任何化学治疗之前)的血小板计数平均值和中位数。

在该实验的随机阶段，检测该研究中的ODSH组和对照组之间在血小板计数上的统计学显著差异，如下表19所示，其表明，ODSH减弱了与骨髓抑制的治疗方案有关的血小板减少症。

下表20提供了用ODSH进行辅助治疗的患者的绝对中性粒细胞计数。完成了第一个治疗周期的10名患者中，有8名患者在第二治疗周期的第一天显示正常的中性粒细胞计数。在完成第一周期的10名患者中，相比于在第一周期的第一天(化学治疗之前)的中性粒细胞计数，其中5名患者在第二治疗周期的第一天也具有增加的或不变的中性粒细胞计数。此外，9名患者中的8名在第三治疗周期开始时显示出正常的中性粒细胞计数，且10名患者在第4治疗周期开始时全部显示出正常的中性粒细胞计数。

图9显示的是单个患者的中性粒细胞计数图，所测定的是在指定周期(C1＝第1周期；C2＝第2周期等)的指定天(D1＝第1天，D8＝第8天和D15＝第15天)的治疗之前采集的样品。在第二治疗周期开始时，存在明显的中性粒细胞计数增加的趋势，该增加是相对于在初始治疗周期的开始时(即给予任何治疗之前)的中性粒细胞计数。

表21显示的是给药ODSH辅助吉西他滨和白蛋白结合型紫杉醇的治疗两次(第15天，第一周期)之后或给药ODSH辅助吉西他滨和白蛋白结合型紫杉醇的治疗五次或更多次(第二周期的第15天或第三周期的第15天)之后出现中性粒细胞减少症的患者的百分比。在表21第3行还显示了历史数据，该历史数据显示的是出现不同等级中性粒细胞减少症的患者的百分比，所述患者已用与本文所述的相同量和相同给药方案的吉西他滨和白蛋白结合型紫杉醇进行治疗，但未给药ODSH。第3行所示数据复制自Von Hoff等人，2011，J.ClinicalOncology 29:1-7中的表3，其提供了在整个实验中表现出选定的不良事件的患者的总数和百分数。各类患者总数如括号中所示。

如上所示，在给予两次治疗后，44％的用ODSH进行辅助治疗的患者出现不超过轻微中性粒细胞减少症的症状。在给予5次治疗后(第2周期的第15天)或给予8次治疗(第3周期第15天)后，10名患者中的7人具有不超过轻微中性粒细胞减少症的症状。还如图10B所示，即使是当之前治疗周期的第15天所有样品的绝对中性粒细胞计数的平均值和中位数小于2,000，这些数值在第2治疗周期和第3治疗周期的第一天也始终高于2,000。在第1周期最低点具有3级中性粒细胞减少症的患者，在接下来的周期且不减少剂量的情况下，在第2周期或第3周期具有不超过1级或2级的中性粒细胞减少症(参见患者6004，6004和7001)。在10名患者中，仅有一名患者(7001)用G-CSF治疗，在第一周期接受单次给药。

在该实验的随机阶段，检测该研究中的ODSH组和对照组之间在中性粒细胞计数上的统计学显著差异，如下表22所示，其表明，ODSH减弱了与骨髓抑制的治疗方案有关的中性粒细胞减少症。

如下表23所示，总的白细胞计数与中性粒细胞计数一致。

对乏力、感觉神经病变、恶心和呕吐的评估表明，用ODSH进行辅助治疗的患者表现出轻微至中度的症状，其中大于50％的患者表现出不超过1级的副作用，其中所述乏力、感觉神经病变、恶心和呕吐全部为化学治疗尤其是Von Hoff等人描述的吉西他滨-白蛋白结合型紫杉醇的治疗方案的常见副作用。下表24提供了表现出不同等级的各副作用的患者的百分数，其与Von Hoff等人，2011，J.Clinical Oncology 29:1-7中所报告的百分数相比较。

在10名患者中，有8名患者的血清CA19-9水平降低，所述血清CA19-9水平是与肿瘤程度有关且因此与化疗方案的疗效有关的标记，所述降低表明，ODSH减弱血小板减少症和中性粒细胞减少症并诱导血小板生成和中性粒细胞产生的能力并不会干扰化学治疗的疗效(通过血清CA19-9水平的降低进行指示)，该结果与实施例1中描述的胰腺异种移植动物模型所得到的结果一致。参见下表25。

尽管在临床试验开始时存在广泛的转移性疾病，但是这10名患者全部表现了对治疗的响应：5名患者表现出部分响应且5名患者表现出稳定的疾病，其使用RECIST标准进行测量。参见图12A。三或四个完整治疗周期后，没有患者出现任何进行性疾病的临床或放射学迹象。截止到第4治疗周期，患者2001和6002还表现出降低的肝和肺的大小或降低的结节转移。如图11A所示，尽管CA19-9水平上升，但是患者2001的肝转移消失且肺病变大小降低，且伴随着转移性疾病最小的临床症状。患者6002显示出稳定的疾病且显示出在肝和淋巴结中转移性病变大小的降低。参见图11B-C。患者6003，其表现出肺转移，也表现稳定的疾病，如图11D所示。患者6006显示稳定的疾病且显示出肝中的胰腺和转移性病变大小的一些降低。参见图11E。患者8001在第2周期结束时表现出稳定的疾病且胰腺肿瘤大小降低。参见图11F。图12B-F显示，患者6004、6007、7001、7002和9001具有部分响应。在该实验8周之后(在第3治疗周期第1天)，在7名可评估的患者中，东部肿瘤协作组(Eastern CooperativeOncology Group)(ECOG)体力状态是稳定的或改善的。

该治疗方案在体重方面还表现出具有最小的不良作用，因为大多数患者都会出现最小的体重减轻，甚至一些患者出现体重增加。参见下表26。

如下表27所示，输注ODSH并没有引起抗凝血，如在所述患者中通过部分凝血活酶时间(aPTT)所测定的。

在磨合期之后开始的开放标签的随机实验中，观察到了ODSH组和对照组(无ODSH)之间的血小板计数的显著差异，如图13A和13B所示。在化学治疗第1周期的第15天(在给予三次化学治疗之后)，接受ODSH以及吉西他滨和白蛋白结合型紫杉醇的患者的血小板计数的中位数和平均值显著高于未接受ODSH的患者的血小板计数的中位数和平均值(p＝0.013，使用非成对t检验(unpaired t-test)，各治疗组5名患者)。参见图13A。在之后的第2周期至第6周期中，该效果不变(在6个周期之后，非成对t检验p＝0.0003)。参见图13B和下表28。此外，ODSH的辅助给药提高了下一周期第1天前的血小板的恢复。图13B和下表28(比较对照组患者各周期第1天和ODSH组患者各周期第1天，6周期后p＝0.0004，非成对t检验)。

总而言之，ODSH减弱了吉西他滨/白蛋白结合型紫杉醇方案的骨髓抑制副作用(相比于Von Hoff等人，2011，J.Clinical Oncology 29:1-7中所报道的患者以及相比于随机接受单独的吉西他滨/白蛋白结合型紫杉醇的患者，在该实验的随机部分)和提高了患者血小板和中性粒细胞计数，使之高于治疗前所见的水平，同时保留了化疗方案的疗效。此外，也观测到了副作用的降低，该副作用表现为机体症状，例如乏力、恶心和呕吐。ODSH和其它与PF4相互作用的类肝素减弱了与化学治疗有关的机体症状。

总而言之，该观察到的效果可使得强化化疗方案，且具有改善的抗肿瘤功效。

6.4实施例4：ODSH缓解与治疗急性骨髓性白血病(AML)有关的血小板减少症

进行临床试验是为了确认辅助诱导性治疗和巩固性治疗以及辅助后续治疗急性骨髓性白血病(AML)中的异体的或自体的骨髓移植所给予的ODSH的治疗优势。包括在该实验中的受试者是被诊断为AML的受试者，其正在接受诱导和巩固治疗。受试者被随机分配到对照组(仅接受诱导和巩固治疗)或治疗组(接受辅助性给予ODSH)。ODSH通过连续输注进行给药(0.375mg/kg/hr)。评价该实验各组中的受试者的血小板计数以及对血小板输注的需要。所评估的其它参量包括测量PF4的循环水平以及粒细胞恢复率。

得到结果，该结果证明，添加ODSH至标准诱导和巩固治疗减轻了血小板减少症。

进行第二临床试验是为了确认在治疗AML中，辅助诱导和巩固性化疗所给予的ODSH的治疗优势。该实验是开放标签的初步研究，其中10名患者为被新确诊为AML且之前未治疗AML的患者。患者治疗方案如下。在诱导阶段，以100mg/m²/天持续静脉输注给药阿糖胞苷7天(第1天-第7天)并在第1天、第2天和第3天以12mg/m²/天静脉注射伊达比星。在第一天给药伊达比星后立即静脉推注4mg/kg的ODSH，然后在第1天至第7天以0.25mg/kg/hr的剂量进行连续静脉输注给药。对于60岁以下的患者，诱导期之后是至多4个周期的巩固性化疗，各周期由以下组成：在5天周期的第1、3和5天，每12小时，经3小时给药3g/m²的阿糖胞苷。在巩固阶段，在第一天给药阿糖胞苷之后立即静脉推注给药4mg/kg的ODSH，然后在第1天至第5天以0.25mg/kg/hr的剂量连续静脉输注给药。巩固性化疗的起始不早于诱导化学疗法开始后的第28天。评估受试者血小板减少症程度和持续时间，其基于血小板计数和对输血的需求。

得到结果，该结果证明，添加ODSH至标准诱导和巩固性治疗减轻了血小板减少症。

出于所有目的，将所有的出版物、专利、专利申请和本申请中所引用的其他文件全部引入本文作为参考，程度相当于将每篇单独的出版物、专利、专利申请或其他文件出于所有目的单独地引入本文作为参考。

虽然已经对各种具体的实施方案进行了说明和描述，但可以理解，在不偏离本发明的精神和范围可作出各种改变。

综上，本发明涉及以下方面：

11.减弱患者治疗方案的骨髓抑制副作用的方法，包括：

向患者辅助给药治疗有效量的与PF4相互作用的类肝素。

12.如实施方案1的方法，其中所述骨髓抑制副作用为血小板减少症。

13.如实施方案2的方法，其中所述患者被诊断为1、2、3或4级血小板减少症。

14.如实施方案1的方法，其中所述骨髓抑制副作用为中性粒细胞减少症。

15.如实施方案4的方法，其中所述患者被诊断为1、2、3或4级中性粒细胞减少症。

16.如实施方案1的方法，其中所述骨髓抑制副作用为血小板减少症和中性粒细胞减少症。

17.如实施方案6的方法，其中所述患者被诊断为1、2、3或4级血小板减少症和1、2、3或4级中性粒细胞减少症。

18.如实施方案1的方法，其中所述患者的治疗方案包括抗肿瘤的治疗方案。

19.如实施方案8的方法，其中所述抗肿瘤治疗方案包含一种或多种化学治疗剂。

20.如实施方案9的方法，其中所述一种或多种化学治疗剂选自叶酸拮抗剂，甲氨喋呤和培美曲塞；嘌呤拮抗剂，克拉屈滨、氯法拉滨、氟达拉滨、6-巯基嘌呤、奈拉滨、喷司他丁；嘧啶拮抗剂，卡培他滨、阿糖胞苷、5-氟尿嘧啶、吉西他滨、羟基脲；生物反应调节剂，干扰素-α；博来霉素；DNA烷化剂，亚硝基脲、卡莫司汀、罗莫司丁；DNA交联药物，DNA烷化剂、苯达莫司汀、苯丁酸氮芥、环磷酰胺、异环磷酰胺、双氯乙基甲胺、美法仑、达卡巴嗪、替莫唑胺、丙卡巴肼；天冬酰胺酶；抗生素，丝裂霉素；铂复合物，卡铂、顺铂、奥沙利铂；蛋白体抑制剂，硼替佐米；纺锤体抑制剂，紫杉烷、多西紫杉醇、紫杉醇、白蛋白结合型紫杉醇、长春药属、长春碱、长春新碱、长春瑞滨；拓扑异构酶抑制剂，蒽环类药物、柔红霉素、道诺霉素、多柔比星、表柔比星、喜树碱、依立替康、托泊替康、鬼臼毒素、依托泊苷、替尼泊苷、米托蒽醌；酪氨酸激酶抑制剂，厄洛替尼、吉非替尼、伊马替尼、拉帕替尼、索拉非尼、舒尼替尼；和异环磷酰胺。

21.如实施方案10的方法，其中所述一种或多种化学治疗剂中的一个为吉西他滨。

22.如实施方案10或11的方法，其中所述一种或多种化学治疗剂中的一个为紫杉烷。

23.如实施方案12的方法，其中所述紫杉烷为紫杉酚。

24.如实施方案12的方法，其中所述紫杉烷为紫杉醇。

25.如实施方案13或14的方法，其中所述紫杉醇为白蛋白结合型紫杉醇。

26.如实施方案12-15中任一项的方法，其中将一种或多种其它化学治疗剂给药至所述患者。

27.如实施方案12-15中任一项的方法，其中将一种或多种治疗性抗体给药至所述患者。

28.如实施方案12-17中任一项的方法，其中所述受试者患有乳腺癌，任选地为转移性乳腺癌。

29.如实施方案12-17中任一项的方法，其中所述受试者患有复发性乳腺癌。

30.如实施方案12-17中任一项的方法，其中所述受试者患有胰腺癌，任选地为转移性胰腺癌。

31.如实施方案19的方法，其中在乳腺癌复发6个月内，将包含一种或多种化学治疗剂的抗肿瘤治疗方案给药至所述患者。

32.如实施方案21的方法，其中在乳腺癌复发6个月内给药至所述患者的抗肿瘤治疗方案包含蒽环类药物。

33.如实施方案9或实施方案10的方法，其中将两种或更多种化学治疗药物给药至所述患者，其中所述两种或更多种药物选自顺铂和依托泊苷；卡铂和依托泊苷；顺铂和依立替康；卡铂和依立替康；环磷酰胺、多柔比星(阿霉素)和长春新碱；环磷酰胺/多柔比星/长春新碱；吉西他滨与长春瑞滨或与紫杉醇或与白蛋白结合型紫杉醇

；吉西他滨或卡培他滨与奥沙利铂；顺铂或卡铂加上另一化学治疗剂；甲酰四氢叶酸、奥沙利铂、依立替康中的一种或多种与5-氟尿嘧啶。

34.如实施方案9或实施方案10的方法，其中所述两种或更多种化学治疗药物是根据选自以下的具体方案进行给药的：5FU Mayo、5FU Roswell Park、LVFU2、FOLFOX4、FOLFOX6、bFOL、FUFOX、IFL、XELOX、XELIRI、CAPIRI和ICE。

35.如实施方案8的方法，其中所述抗肿瘤治疗方案包括放射治疗。

36.如实施方案25的方法，其中所述放射治疗选自X射线辐射、γ射线辐射、中子放射、质子辐射、外放射线治疗和近距离放射疗法。

37.如实施方案25或26的方法，其中所述抗肿瘤治疗方案还包含一种或多种化学治疗剂。

38.如实施方案27的方法，其中所述放射治疗选自X射线辐射、γ射线辐射、中子放射、质子辐射、外放射线治疗和近距离放射疗法，且所述一种或多种化学治疗剂选自叶酸拮抗剂，甲氨喋呤和培美曲塞；嘌呤拮抗剂，克拉屈滨、氯法拉滨、氟达拉滨、6-巯基嘌呤、奈拉滨、喷司他丁；嘧啶拮抗剂，卡培他滨、阿糖胞苷、5-氟尿嘧啶、吉西他滨、羟基脲；生物反应调节剂，干扰素-α；博来霉素；DNA烷化剂，亚硝基脲、卡莫司汀、罗莫司丁；DNA交联药物，DNA烷化剂、苯达莫司汀、苯丁酸氮芥、环磷酰胺、异环磷酰胺、双氯乙基甲胺、美法仑、达卡巴嗪、替莫唑胺、丙卡巴肼；天冬酰胺酶；抗生素，丝裂霉素；铂复合物，卡铂、顺铂、奥沙利铂；蛋白体抑制剂，硼替佐米；纺锤体抑制剂，紫杉烷、多西紫杉醇、紫杉醇、白蛋白结合型紫杉醇、长春药属、长春碱、长春新碱、长春瑞滨；拓扑异构酶抑制剂，蒽环类药物、柔红霉素、道诺霉素、多柔比星、表柔比星、喜树碱、依立替康、托泊替康、鬼臼毒素、依托泊苷、替尼泊苷、米托蒽醌；酪氨酸激酶抑制剂，厄洛替尼、吉非替尼、伊马替尼、拉帕替尼、索拉非尼和舒尼替尼。

39.如实施方案25或26的方法，其中所述患者的治疗方案还包括骨髓移植。

40.如实施方案29的方法，其中所述骨髓抑制为自体的或异体的。

41.如实施方案25或26的方法，其中所述患者的治疗方案还包括干细胞移植。

42.如实施方案31的方法，其中所述干细胞移植为自体的或异体的。

43.如实施方案1的方法，其中所述患者的治疗方案包括抗体治疗。

44.如实施方案33的方法，其中将选自阿昔单抗和利妥昔单抗的一种或多种抗体给药至所述患者。

45.如实施方案33或34的方法，其中所述患者的治疗方案还包括化学治疗。

46.如实施方案35的方法，其中给药至所述患者的一种或多种化学治疗剂选自叶酸拮抗剂，甲氨喋呤和培美曲塞；嘌呤拮抗剂，克拉屈滨、氯法拉滨、氟达拉滨、6-巯基嘌呤、奈拉滨、喷司他丁；嘧啶拮抗剂，卡培他滨、阿糖胞苷、5-氟尿嘧啶、吉西他滨、羟基脲；生物反应调节剂，干扰素-α；博来霉素；DNA烷化剂，亚硝基脲、卡莫司汀、罗莫司丁；DNA交联药物，DNA烷化剂、苯达莫司汀、苯丁酸氮芥、环磷酰胺、异环磷酰胺、双氯乙基甲胺、美法仑、达卡巴嗪、替莫唑胺、丙卡巴肼；天冬酰胺酶；抗生素，丝裂霉素；铂复合物，卡铂、顺铂、奥沙利铂；蛋白体抑制剂，硼替佐米；纺锤体抑制剂，紫杉烷、多西紫杉醇、紫杉醇、白蛋白结合型紫杉醇、长春药属、长春碱、长春新碱、长春瑞滨；拓扑异构酶抑制剂，蒽环类药物、柔红霉素、道诺霉素、多柔比星、表柔比星、喜树碱、依立替康、托泊替康、鬼臼毒素、依托泊苷、替尼泊苷、米托蒽醌；酪氨酸激酶抑制剂，厄洛替尼、吉非替尼、伊马替尼、拉帕替尼、索拉非尼和舒尼替尼。

47.如实施方案33或34的方法，其中所述患者的治疗方案还包括放射治疗。

48.如实施方案37的方法，其中所述放射治疗为X射线辐射、γ射线辐射、中子放射、质子辐射、外放射线治疗或近距离放射疗法。

49.如实施方案1的方法，其中所述患者的治疗方案包括移植。

50.如实施方案39的方法，其中所述移植为肝脏移植、骨髓移植或干细胞移植。

51.如实施方案40的方法，其中所述移植为自体的或异体的骨髓移植。

52.如实施方案40的方法，其中所述移植为自体的或异体的干细胞移植。

53.如实施方案1的方法，其中所述患者的治疗方案包含一种或多种药物，所述药物选自丙戊酸、质子泵抑制剂、干扰素、干扰素-α、异维甲酸、帕比司他、噻嗪类利尿药、孟鲁司特钠(顺尔宁)、奎尼丁、奎宁、金、磺胺类、头孢噻吩、保泰松、苯妥英、洋地黄毒苷和吩噻嗪镇静剂、肝素及其组合。

54.如实施方案1的方法，其中所述患者的治疗方案包含一种或多种药物，所述药物选自环磷酰胺、精神治疗药物、抗惊厥剂、氯氮平、奥氮平、硫酰胺、噻氯匹啶、卡比马唑、氨苯砜、安乃近、甲巯咪唑、青霉素G、普鲁卡因胺、丙硫氧嘧啶、甲氧苄啶、氯霉素、青霉素类、头孢菌素类、氨基糖甙类、四环素类、硝基咪唑、呋喃妥因、氟胞嘧啶、利福平、异烟肼、乙胺丁醇、氨苯砜、磺胺抗生素、氯米帕明、氨硫脲、安乃近、柳氮磺吡啶、美沙拉秦、环丙沙星、氯喹、甲苯达唑、特苯达芬、乙胺嘧啶、左旋咪唑、瑞斯西丁素、灰黄霉素、酚噻嗪类、苯并二氮杂

、阿莫沙平、甲丙氨酯、巴比妥类、利哌利酮、米帕明、地昔帕明、替沃噻吨、氟派啶醇、丙戊酸、乙内酰脲、琥珀酰亚胺、三甲双酮、卡马西平、普鲁卡因胺、奎尼丁、普罗帕酮、卡托普利、普萘洛尔、肼屈嗪、甲基多巴、布洛芬、吲哚美辛、舒林酸、托美汀、阿司匹林、氨基比林、保泰松、二氟尼酸、苯噁洛芬、别嘌醇、秋水仙碱、丙硫氧嘧啶、硫脲嘧啶、甲巯咪唑、卡比马唑、硫氰酸盐、高氯酸钾、西米替丁、雷尼替丁、曲吡那敏、美沙芬林、西那利定、米安色林、溴苯那敏、奎宁、羟氯喹、喹纳克林、二氮嗪、二氢吡啶类、维斯纳利酮、阿普林定、亚胺培南/西司他丁、齐多夫定、氟达拉滨、阿昔洛维、特比奈芬、氨鲁米特、法莫替丁、苯扎贝特、氟他米特、它莫西芬、青霉胺、维甲酸、甲氧氯普胺、芬宁东、二硝基苯酚、依他尼酸、萝芙木碱、乙醇、氯磺丙脲、甲苯磺丁脲、噻嗪类、螺内酯、醋甲唑胺、乙酰唑胺、左旋多巴和其组合。

55.如前述任一实施方案所述的方法，其还包括辅助给予一种或多种额外药物或治疗。

56.如实施方案45的方法，其中所述一种或多种额外药物或治疗中的至少一种是抗血小板减少的、抗中性粒细胞减少的、促血小板生成的、促中性粒细胞生成的或抗凝血的。

57.如实施方案46的方法，其中一种或多种额外药物或治疗是抗血小板减少的、促血小板生成的或这两者。

58.如实施方案47的方法，其中一种或多种额外药物或治疗选自：血小板输注、脾切除、皮质类固醇、泼尼松、地塞米松、血小板清除抑制剂、达那唑、血小板生成素、血小板生成素模拟物、艾曲波帕、血小板生成素受体激动剂、罗米司亭、白细胞介素、重组人白细胞介素-1、重组人白细胞介素-3、重组人白细胞介素-6、重组人白细胞介素-11、碳酸锂和叶酸盐。

59.如实施方案46的方法，其中一种或多种额外药物或治疗是抗中性粒细胞减少的、促粒细胞生成的，或这两者。

60.如实施方案49的方法，其中一种或多种额外药物或治疗选自：重组人粒细胞集落刺激因子、非格司亭、培非格司亭、重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子和沙格司亭。

61.如实施方案46的方法，其中所述一种或多种额外药物是抗凝血药物。

62.如实施方案51的方法，其中所述抗凝血药物是未分级肝素或低分子量肝素。

63.如实施方案52的方法，其中所述低分子量肝素选自：达肝素、依诺肝素、磺达肝素、瑞维肝素和亭扎肝素。

64.如前述实施方案任一项所述的方法，其中所述与PF4相互作用的类肝素通过胃肠外给药。

65.如实施方案54的方法，其中所述与PF4相互作用的类肝素由静脉给药。

66.如实施方案55的方法，其中所述与PF4相互作用的类肝素以一或多次推注给药。

67.如实施方案56的方法，其中所述一或多次推注以约1mg/kg至约25mg/kg、约1mg/kg至约10mg/kg、约1mg/kg至约5mg/kg、约2mg/kg至约4mg/kg的剂量给药。

68.如实施方案55的方法，其中所述与PF4相互作用的类肝素通过连续输注进行给药。

69.如实施方案58的方法，其中所述连续输注以约0.1mg/kg/hr至约2.5mg/kg/hr、约0.2mg/kg/hr至约2mg/kg/hr、约0.3mg/kg/hr至约1.5mg/kg/hr或约0.3mg/kg/hr至约0.5mg/kg/hr的剂量进行给药。

70.如实施方案55的方法，其中所述与PF4相互作用的类肝素以推注给药，之前或之后是通过连续输注给药。

71.如实施方案60的方法，其中所述推注是以约1mg/kg至约25mg/kg、约1mg/kg至约10mg/kg、约1mg/kg至约5mg/kg、约2mg/kg至约4mg/kg的剂量给药，且所述连续输注以约0.1mg/kg/hr至约2.5mg/kg/hr、约0.2mg/kg/hr至约2mg/kg/hr、约0.3mg/kg/hr至约1.5mg/kg/hr或约0.3mg/kg/hr至约0.5mg/kg/hr的剂量给药。

72.如实施方案58或60的方法，其中所述连续输注持续约0.5小时、约1小时、约2小时、约3小时、约4小时、约5小时、约6小时、约7小时、约8小时、约9小时、约10小时、约12小时、约16小时、约20小时、约24小时、约36小时、约48小时、约1天、约2天或约3天。

73.如实施方案54的方法，其中所述与PF4相互作用的类肝素经皮下给药。

74.如前述实施方案任一项所述的方法，其中所述与PF4相互作用的类肝素与所述患者的治疗方案同时给药。

75.如实施方案1-63中任一项的方法，其中所述与PF4相互作用的类肝素与所述患者的治疗方案相继给药或单独给药。

76.如实施方案65的方法，其中所述与PF4相互作用的类肝素在所述患者的治疗方案之前、之后，或既在其之前又在其之后相继给药。

77.如实施方案65的方法，其中所述与PF4相互作用的类肝素在所述患者的治疗方案之前、之后，或既在其之前又在其之后单独给药。

78.如实施方案65-67中任一项所述的方法，还包括同时给药所述与PF4相互作用的类肝素及所述患者的治疗方案。

79.在人类受试者中促进血小板生成的方法，其包括:

给药有效量的与PF4相互作用的类肝素至所述受试者。

80.如实施方案69的方法，其中所述受试者是血小板减少的。

81.如实施方案70的方法，其中所述受试者被诊断为血小板减少症，其选自免疫介导的血小板减少症、药物诱导的血小板减少症或辐射诱发的血小板减少症。

82.如实施方案71的方法，其中所述受试者被诊断为免疫性血小板减少性紫癜。

83.如实施方案71的方法，其中所述受试者被诊断为辐射诱发的血小板减少症。

84.如实施方案73的方法，其中所述辐射诱发的血小板减少症是由于暴露于电离辐射，任选地是非治疗性地暴露于电离辐射所导致的。

85.如实施方案69的方法，其中所述受试者是非血小板减少的。

86.在人类受试者中促进中性粒细胞产生的方法，其包括:

给药有效量的与PF4相互作用的类肝素至所述受试者。

87.如实施方案76的方法，其中所述受试者是中性粒细胞减少的。

88.如实施方案77的方法，其中所述受试者被诊断为中性粒细胞减少症，其选自免疫介导的中性粒细胞减少症、药物诱导的中性粒细胞减少症或辐射诱发的中性粒细胞减少症。

89.如实施方案78的方法，其中所述受试者被诊断为辐射诱发的中性粒细胞减少症。

90.如实施方案79的方法，其中所述辐射诱发的中性粒细胞减少症是由于暴露于电离辐射，任选地非治疗性地暴露于电离辐射所导致的。

91.如实施方案76的方法，其中所述受试者是非中性粒细胞减少的。

92.增加具有骨髓抑制效应的患者治疗方案的疗效的方法，其包括：

给药治疗有效量的与PF4相互作用的类肝素至患者用于辅助有骨髓抑制副作用的患者治疗方案，相比于对照治疗，其没有降低患者治疗方案的剂量和/或给药频率。

93.如实施方案82的方法，其还包括给药一定剂量的所述患者的治疗方案，该剂量高于当所述患者治疗方案在不存在与PF4相互作用的类肝素的辅助给药的情况下而给药的给药剂量。

94.如实施方案82或83的方法，其还包括给药足够量的与PF4相互作用的类肝素以维持血小板水平高于指示3级或4级血小板减少症的水平。

95.如实施方案82或83的方法，其还包括：

测定人类患者血样中的初始血小板计数并给药有效量的与PF4相互作用的类肝素以提高该患者的血小板计数至高于阈水平，而低于该阈水平使用有骨髓抑制副作用的患者治疗方案进行的治疗是禁忌的。

96.如实施方案82或83的方法，其还包括：

给药足够量的与PF4相互作用的类肝素以维持中性粒细胞水平高于指示3级或4级中性粒细胞减少症的水平。

97.如实施方案82或83的方法，其还包括：

测定人类患者血样中的初始中性粒细胞计数，并给药有效量的与PF4相互作用的类肝素以提高所述患者的中性粒细胞计数至高于阈水平，而低于该阈水平使用有骨髓抑制副作用的患者治疗方案进行的治疗是禁忌的。

98.如实施方案92-97中任一项的方法，其还包括给药一种或多种药物或治疗作为与PF4相互作用的类肝素的辅助，其中所述药物或治疗是抗中性粒细胞减少的、抗血小板减少的或抗凝血的。

99.如前述实施方案任一项所述的方法，其中所述与PF4相互作用的类肝素能够结合PF4。

100.如前述实施方案任一项所述的方法，其中所述与PF4相互作用的类肝素具有约8kDa至约15kDa、约11kDa至约14kDa或约11kDa至约13kDa的平均分子量。

101.如前述实施方案任一项所述的方法，其中所述与PF4相互作用的类肝素基本上是非抗凝血的。

102.如前述实施方案任一项所述的方法，其中所述与PF4相互作用的类肝素基本上在2-O位或3-O位是脱硫酸的。

103.如前述实施方案任一项所述的方法，其中所述与PF4相互作用的类肝素基本上是2-O、3-O脱硫酸的。

104.如前述实施方案任一项所述的方法，其中所述患者是哺乳动物。

105.如实施方案104的方法，其中所述哺乳动物是人类。

106.如实施方案105的方法，其中所述人类为成人或儿童。

107.如实施方案94-96中任一项所述的方法，其中所述患者被诊断为患有癌症。

108.如实施方案107的方法，其中所述癌症为胰腺癌、卵巢癌、乳腺癌、结肠直肠癌、食道癌、淋巴癌、肝癌、骨肉瘤或白血病。

109.如实施方案107的方法，其中所述患者具有升高的血小板因子4(PF4)水平。

110.如实施方案109的方法，其中血清中的所述PF4水平升高。

111.如实施方案109的方法，其中血小板中的所述PF4水平升高。

112.如实施方案109的方法，其中所述癌症为胰腺癌、结肠直肠癌、骨肉瘤或白血病。

113.如实施方案94-96中任一项所述的方法，其中所述患者被诊断为自身免疫性疾病。

114.如实施方案113的方法，其中所述自身免疫性疾病选自类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮和多发性硬化症。

115.如实施方案94-96中任一项所述的方法，其中所述患者患有导致肝功能受损的病症或疾病。

116.如实施方案115的方法，其中所述患者被诊断为肝癌、病毒性肝炎或肝硬化。

117.如实施方案94-96中任一项所述的方法，其中所述患者具有升高水平的PF4。

118.如实施方案117的方法，其中在血清中的所述PF4水平升高。

119.如实施方案117的方法，其中在血小板中的所述PF4水平升高。

120.如实施方案94-96中任一项所述的方法，其中所述患者具有针对肝素-PF4复合物的抗体。

121.治疗癌症患者的方法，其包括：

给药至所述患者ODSH以辅助有骨髓抑制性的化学治疗的治疗方案。

122.如实施方案121的方法，其中所述有骨髓抑制性的化学治疗的治疗方案包括紫杉烷。

123.如实施方案122的方法，其中所述紫杉烷为紫杉酚。

124.如实施方案123的方法，其中所述紫杉酚为紫杉醇。

125.如实施方案124的方法，其中所述紫杉醇为白蛋白结合型紫杉醇。

126.如实施方案111-115中任一项所述的方法，其中所述患者患有胰腺癌、卵巢癌、子宫癌、乳腺癌、转移性乳腺癌、复发性乳腺癌、头和颈癌、膀胱癌、泌尿道上皮癌、肺癌、结肠直肠癌、胃癌、食道癌、淋巴癌、肝癌、黑素瘤、前列腺癌、骨肉瘤、白血病、急性骨髓性白血病或儿童急性淋巴细胞白血病。

127.在通过给药一种或多种具有骨髓抑制副作用的化学治疗剂治疗癌症的方法中，所述改善包括：

辅助性地给药有效量的与PF4相互作用的类肝素至有此需要的患者。

128.如实施方案127的方法，其中所述一种或多种化学治疗剂包括紫杉烷。

129.如实施方案128的方法，其中所述紫杉烷为紫杉酚。

130.如实施方案129的的方法，其中所述紫杉酚为紫杉醇。

131.如实施方案130的方法，其中所述紫杉醇为白蛋白结合型紫杉醇。

132.如实施方案117-121中任一项所述的方法，其中所述患者患有胰腺癌、卵巢癌、子宫癌、乳腺癌、转移性乳腺癌、复发性乳腺癌、头和颈癌、膀胱癌、泌尿道上皮癌、肺癌、结肠直肠癌、胃癌、食道癌、淋巴癌、肝癌、黑素瘤、前列腺癌、骨肉瘤、白血病、急性骨髓性白血病或儿童急性淋巴细胞白血病。

133.如实施方案117-122中任一项所述的方法，其中所述与PF4相互作用的类肝素为ODSH。

134.如实施方案111的方法，其中所述骨髓抑制的治疗方案为适用于治疗急性骨髓性白血病(AML)的方案。

135.如实施方案124的方法，其中所述适用于治疗AML的方案包括诱导化学疗法。

136.如实施方案124或125的方法，其中所述适用于治疗AML的方案包括巩固性化疗。

137.如实施方案124、125和126中任一项的方法，其中所述骨髓抑制的治疗方案包括阿糖胞苷以及，任选地，蒽环类药物。

138.如实施方案111和124-127中任一项所述的方法，其中所述患者患有AML。

139.如实施方案117的方法，其中所述一种或多种具有骨髓抑制效应的化学治疗剂是治疗AML方案中的一部分。

140.如实施方案129的方法，其中所述治疗AML的方案包括诱导化学疗法。

141.如实施方案129或130的方法，其中所述治疗AML的方案包括巩固性化疗。

142.如实施方案129-131中任一项所述的方法，其中所述治疗AML的方案包括阿糖胞苷。

143.如实施方案129或130的方法，其中所述治疗AML的方案包括蒽环类药物。

134.如实施方案128-133中任一项的方法，其中所述与PF4相互作用的类肝素为ODSH。

Claims (10)

1.减弱患者治疗方案的骨髓抑制副作用的方法，包括：

向患者辅助给药治疗有效量的与PF4相互作用的类肝素。

2.如权利要求1的方法，其中所述骨髓抑制副作用为血小板减少症。

3.如权利要求2的方法，其中所述患者被诊断为1、2、3或4级血小板减少症。

4.如权利要求1的方法，其中所述骨髓抑制副作用为中性粒细胞减少症。

5.如权利要求4的方法，其中所述患者被诊断为1、2、3或4级中性粒细胞减少症。

6.如权利要求1的方法，其中所述骨髓抑制副作用为血小板减少症和中性粒细胞减少症。

7.如权利要求6的方法，其中所述患者被诊断为1、2、3或4级血小板减少症和1、2、3或4级中性粒细胞减少症。

8.如权利要求1的方法，其中所述患者的治疗方案包括抗肿瘤的治疗方案。

9.如权利要求8的方法，其中所述抗肿瘤治疗方案包含一种或多种化学治疗剂。

10.如权利要求9的方法，其中所述一种或多种化学治疗剂选自叶酸拮抗剂，甲氨喋呤和培美曲塞；嘌呤拮抗剂，克拉屈滨、氯法拉滨、氟达拉滨、6-巯基嘌呤、奈拉滨、喷司他丁；嘧啶拮抗剂，卡培他滨、阿糖胞苷、5-氟尿嘧啶、吉西他滨、羟基脲；生物反应调节剂，干扰素-α；博来霉素；DNA烷化剂，亚硝基脲、卡莫司汀、罗莫司丁；DNA交联药物，DNA烷化剂、苯达莫司汀、苯丁酸氮芥、环磷酰胺、异环磷酰胺、双氯乙基甲胺、美法仑、达卡巴嗪、替莫唑胺、丙卡巴肼；天冬酰胺酶；抗生素，丝裂霉素；铂复合物，卡铂、顺铂、奥沙利铂；蛋白体抑制剂，硼替佐米；纺锤体抑制剂，紫杉烷、多西紫杉醇、紫杉醇、白蛋白结合型紫杉醇、长春药属、长春碱、长春新碱、长春瑞滨；拓扑异构酶抑制剂，蒽环类药物、柔红霉素、道诺霉素、多柔比星、表柔比星、喜树碱、依立替康、托泊替康、鬼臼毒素、依托泊苷、替尼泊苷、米托蒽醌；酪氨酸激酶抑制剂，厄洛替尼、吉非替尼、伊马替尼、拉帕替尼、索拉非尼、舒尼替尼；和异环磷酰胺。

Images