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CN113039181B - 作为血浆激肽释放酶抑制剂的杂芳族甲酰胺衍生物 - Google Patents

作为血浆激肽释放酶抑制剂的杂芳族甲酰胺衍生物 Download PDF

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CN113039181B
CN113039181B CN201980053216.5A CN201980053216A CN113039181B CN 113039181 B CN113039181 B CN 113039181B CN 201980053216 A CN201980053216 A CN 201980053216A CN 113039181 B CN113039181 B CN 113039181B
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Abstract

本发明涉及一种式(I)杂芳族甲酰胺，其中Y、R及X为如本说明书及申请专利范围中所定义，及其药学上可接受的盐，其可用于用于治疗可能受血浆激肽释放酶抑制影响的疾病的方法中。

Description

作为血浆激肽释放酶抑制剂的杂芳族甲酰胺衍生物
【技术领域】
本发明涉及作为血浆激肽释放酶抑制剂的新颖杂芳族甲酰胺衍生物及其药学上可接受的盐。另外，本发明涉及所述化合物合成的中间体，关于包含所述化合物的药物组合物及组合且关于其在用于治疗可能受血浆激肽释放酶抑制影响的疾病的方法中的用途。特定言之，本发明的药物组合物适用于预防及/或治疗糖尿病并发症、眼部疾病及水肿相关疾病，具体地糖尿病性黄斑部水肿、年龄相关的黄斑变性、脉络膜新生血管及遗传性血管性水肿。
【先前技术】
血浆激肽释放酶(PKK)为一种胰蛋白酶样丝氨酸蛋白酶，由肝脏中的肝细胞以非活性血浆前激肽释放酶形式分泌，非活性血浆前激肽释放酶在血浆中作为游离酶原或作为结合至高分子量激肽原的杂二聚体复合物循环，经过活化，得到活性PKK，该活性PKK除处理其他底物外亦可使激肽自激肽原释放。激肽为强力发炎介质，其经由G蛋白偶合受体，诸如缓激肽受体起作用。
据认为，PKK在多种发炎性病症中起作用，且可在病症中具有许多影响，所述病症诸如遗传性血管性水肿(HAE)、视网膜病或糖尿病性视网膜病、增生性及非增生性视网膜病、糖尿病性黄斑部水肿(DME)、临床上明显的黄斑部水肿(CSME)、囊样黄斑部水肿(CME)、白内障摘除后CME、由冷冻疗法诱发的CME、由眼色素层炎诱发的CME、内眼炎、血管闭塞(例如视网膜中央静脉闭塞、视网膜分支静脉闭塞或半视网膜静脉闭塞)后CME、视网膜水肿、与糖尿病性视网膜病中的白内障手术相关的并发症、高血压视网膜病、视网膜创伤、干性及湿性年龄相关的黄斑变性(AMD)、息肉状脉络膜血管病变(PCV)、脉络膜新生血管(CNV；例如非渗出性脉络膜新生血管)、后玻璃体脱落(PVD)、例如与组织及/或器官移植相关联的所有种类的情形下的缺血性再灌注损伤、手术诱发的脑损伤、局部大脑缺血、全脑缺血、神经胶质瘤相关水肿、脊髓损伤、疼痛、缺血、大脑局部缺血、神经及认知缺陷、深层静脉栓塞、中风、心肌梗塞、后天血管性水肿、药物相关(ACE-抑制剂)水肿、高海拔脑水肿、细胞毒性脑水肿、渗透性脑水肿、阻塞性脑积水、辐射诱发的水肿、淋巴水肿、创伤性脑损伤、出血性中风(例如大脑中风或蛛网膜下中风)、脑内出血、缺血性中风的出血性转化、与损伤或手术相关联的大脑创伤、大脑动脉瘤、动静脉畸形、在手术程序(例如心胸手术，诸如心肺绕通或冠状动脉绕通移植)期间的血液损耗的缩减、诸如血栓症的血液凝固病症、发痒、伴有发炎组分的病症(诸如多发性硬化症)、癫痫、脑炎、阿兹海默症(Alzheimer's disease)、过度日间嗜睡、原发性高血压、与糖尿病或高脂血症相关联的增加的血压、肾功能衰竭、慢性肾病、心脏衰竭、微白蛋白尿、白蛋白尿、蛋白尿、与增加的血管渗透性(例如增加的视网膜血管渗透性、增加的腿、足、脚踝血管渗透性)相关联的病症、大脑出血、深层静脉栓塞、纤维蛋白溶解治疗后凝血、绞痛症、血管性水肿、败血症、关节炎(例如类风湿性关节炎、骨关节炎、感染性关节炎)、狼疮、痛风、牛皮癣、发炎性肠道、糖尿病、糖尿病并发症、由代谢综合征引起的并发症、传染病、星形胶质细胞活化相关疾病(例如阿兹海默症或多发性硬化症)、帕金森氏病(Parkinson's disease)、肌萎缩性侧索硬化、库贾氏病(Creutzfeld-Jacob disease)、中风、癫痫及创伤(例如脑创伤)、例如长期过敏性窦炎或常年性鼻炎中的气流堵塞的过敏性水肿；急性哮喘中的气流堵塞；与全身性红斑性狼疮症(SLE)相关联的浆膜炎、急性呼吸窘迫综合征(ARDS)及其他疾病。
PKK抑制剂视为适用于治疗广泛范围的病症，尤其适用于治疗疾病中的水肿形成，例如与缺血性再灌注损伤相关的水肿形成、视网膜病或水肿相关疾病，诸如遗传性血管性水肿、黄斑部水肿及脑水肿。PKK抑制剂视为尤其适用于治疗视网膜病，例如与糖尿病及/或高血压相关联的视网膜病，且适用于治疗黄斑部水肿，例如与糖尿病及/或高血压相关联的黄斑部水肿。
适用于治疗用途的PKK抑制剂应强力地且伴以高选择性结合至PKK。其应为胃肠道充分吸收，具足够的代谢稳定性且具有有利的药物动力学特性。其应无毒且展现很少副作用。
本发明的化合物为PKK抑制剂且因此潜在地适用于治疗上文所提及的病症，尤其应适用作降低与糖尿病性视网膜病及糖尿病性黄斑部水肿视网膜病或水肿相关疾病相关联的视网膜血管渗透性的治疗。
诸如全部均与PKK相关联的脑溢血、肾病、心肌病及神经病的其他糖尿病并发症亦可视为PKK抑制剂的靶标。
低分子量PKK抑制剂为此项技术中已知的，例如WO 2013/111108、WO 2013/111107、WO 2014/188211、WO 2017/072020及WO 2017/072021中所公开的化合物。
【发明内容】
在第一方面中，本发明涉及式(I)化合物
其中
Y选自由以下组成的群Y-G1：
其中的每一者经1或2个独立取代基R1取代；
R选自由以下组成的群R-G1：
饱和4元至7元单环系统及饱和6元至12元双环系统，其含有作为环成员的1至3个N原子及选自由C＝O、O、S、S＝O及SO2组成的群的任选的1至2个环成员，
条件为所述环系统在环成员之间不含有任何杂原子-杂原子键，
其中所述环系统经由N原子与式(I)中的Y连接，且
其中所述环系统任选经1至6个F取代，任选经1个取代基R2取代，且任选经1或2个CH3基团取代。
X选自由以下组成的群X-G1：
5元杂芳基，其含有1至4个N原子或含有1个O或S原子或含有1至3个N原子及1个O或S原子；及9元杂芳基，其由稠合至6元环的5元环组成且含有1至5个N原子，
其中所述杂芳基经由该5元环的C原子与式(I)中的羰基连接且经由该5元环的非邻接C或N原子与式(I)中的CH2基团连接，且
其中所述杂芳基任选经1个取代基R3取代；
R1选自由以下组成的群R1-G1：
H、任选经1至5个F取代的C1-4烷基、任选经1个F或1个CH3基团取代的环丙基、CN、OH、任选经1至5个F取代的O-C1-3烷基、任选经选自由CN、OH及O-CH3组成的群的1个取代基取代的C1-3烷基；
R2选自由以下组成的群R2-G1：
Cl、任选经1至5个F取代的C1-4烷基、C3-4环烷基、C1-3亚烷基-OH、C1-3亚烷基-O-C1-4烷基、CN、COOH、NH2、NH-C1-3烷基、N(C1-3烷基)2、OH、任选经1至5个F取代的O-C1-4烷基、苯基；含有1个-NH-、-N<、-O-或-S-环成员及任选的额外1或2个＝N-环成员的5元杂芳基及含有1或2个＝N-环成员的6元杂芳基；
其中该苯基及所述5元及6元杂芳基在1或2个碳原子处彼此独立地任选经F、Cl、CH3、CF3、CN、OH及/或O-CH3取代，且
其中存在于这些环内的N-H基团任选经N-C1-3烷基替换；
R3选自由以下组成的群R3-G1：
F、Cl、Br、CN、COOH、任选经1至5个F取代的C1-4烷基、C3-5环烷基、C1-3亚烷基-OH、C1-3亚烷基-O-C1-4烷基、任选经1至5个F取代的O-C1-4烷基；含有1个-NH-、-O-或-S-环成员及任选的额外1或2个＝N-环成员的5元杂芳基及含有1或2个＝N-环成员的6元杂芳基；
其中所述5元及6元杂芳基在1或2个碳原子处彼此独立地任选经F、Cl、CH3、CF3、CN、OH及/或O-CH3取代，且
其中存在于这些环内的N-H基团任选经N-C1-3烷基替换；
其中在上文所提及的任何定义中且若未另外规定，则任何烷基或亚基可为直链或支链的，
其同种型、互变异构体、立体异构体、代谢物、前药、溶剂合物、水合物、共晶体及盐，特别是其药学上可接受的共晶体及盐，或其组合。
在第二方面中，本发明涉及包含如上文或下文所定义的一或多种式(I)化合物及/或其互变异构体或其药学上可接受的盐、任选以及一或多种惰性载剂及/或稀释剂的药物组合物。
在第三方面中，本发明涉及包含如上文或下文所定义的一或多种式(I)化合物及/或其互变异构体或其药学上可接受的盐及一或多种额外治疗剂、任选以及一或多种惰性载剂及/或稀释剂的药物组合物。
在第四方面中，本发明涉及用作药剂的如上文或下文所定义的式(I)化合物及/或其互变异构体或其药学上可接受的盐。
在第五方面中，本发明涉及用于治疗有需要的患者的可能受血浆激肽释放酶抑制影响的疾病或病况的方法，该方法的特征在于向患者给予如上文或下文所定义的一或多种式(I)化合物及/或其互变异构体或其药学上可接受的盐。
此外，本发明涉及如上文或下文所定义的一或多种式(I)化合物在制造用于治疗可能受血浆激肽释放酶抑制影响的疾病或病况的药剂中的用途。
此外，本发明涉及用于用于治疗有需要的患者的可能受血浆激肽释放酶抑制影响的疾病或病况的方法中的如上文或下文所定义的式(I)化合物及/或其互变异构体或其药学上可接受的盐。
在第六方面中，本发明涉及选自由以下组成的群的一或多种化合物：
其中PG为H或保护基，该保护基例如选自由以下组成的群：
任选经1至5个F或Cl取代且任选经选自Si(CH3)3、CN、SO2-C1-4烷基或SO2-苯基的1个基团取代的C1-4烷基；
任选经1或2个OCH3取代的CH2-苯基；
CH2-N(C1-4烷基)2、CH2-吡咯烷-1-基、CH2-NHCO-C1-4烷基、CH2-N(CH3)CO-C1-4烷基；
任选经1个CH3、1个Si(CH3)3或3个Cl取代的CH2-O-C1-4烷基；
任选经1或2个OCH3取代的CH2-O-CH2-苯基；四氢吡喃-2-基、四氢呋喃-2-基；
任选经1至5个F或Cl取代的CO-C1-4烷基；
CO-N(C1-4烷基)2、CO-吡咯烷-1-基；
任选经1个Si(CH3)3或3个Cl取代的CO-O-C1-4烷基；
任选经1或2个OCH3取代的CO-O-CH2-苯基；
任选经1至5个F或1至3个Cl取代的SO2(C1-4烷基)；
任选经选自Cl、Br、CH3、NO2及OC1-4烷基的1或2个基团取代的SO2-苯基；
SO2-N(C1-4烷基)2、SO2-吡咯烷-1-基；
经选自Cl、Br、NO2、OC1-4烷基及SO2C1-4烷基的1或2个基团取代的苯基；
或其盐，
其为式(I)化合物合成中的有价值中间体。
本发明的另外方面将直接自前述及以下描述及实施例而为本领域技术人员所清楚。
通用术语及定义
应赋予本文未具体地定义的术语以本领域技术人员依据本发明及上下文将对其赋予的含义。然而，如本说明书中所使用，除非相反规定，否则以下术语具有所指定的含义且将遵守以下惯例。
术语“本发明的化合物(compound(s)according to this invention/compound(s)of the invention)”、“式(I)化合物”及其类似形式指代本发明的式(I)化合物，包括其互变异构体、立体异构体及其混合物及其盐(具体地其药学上可接受的盐)以及所述化合物的溶剂合物、水合物及共晶体(具体地其药学上可接受的共晶体，包括所述其互变异构体、立体异构体及盐的溶剂合物、水合物及共晶体)。
此外，除非特定地指示，否则在整个本说明书及权利要求书中，给定化学式或名称应涵盖互变异构体及所有立体异构体、光学异构体及几何异构体(例如对映异构体、非对映异构体、E/Z异构体等)及其外消旋体以及呈不同比例的个别对映异构体的混合物、非对映异构体混合物或其中存在所述异构体及对映异构体之前述形式中的任一者的混合物以及其盐(包括其药学上可接受的盐)及溶剂合物(诸如水合物，包括游离化合物的溶剂合物或该化合物的盐的溶剂合物)及其共晶体(包括其药学上可接受的共晶体及游离化合物或其盐的共晶体)。
词组“药学上可接受的”在本文中用于指这样的化合物、材料、组合物及/或剂型，其在合理医学判断的范畴内适用于与人类及动物的组织接触而无过度毒性、刺激、过敏反应或其他问题或并发症，且与合理益处/风险比率相匹配。
如本文所使用，“药学上可接受的盐”为指所公开的化合物的衍生物，其中母化合物为通过制造其酸盐或碱盐而经修饰。药学上可接受的盐的实施例包括但不限于诸如胺的碱性残基的无机酸盐或有机酸盐；诸如羧酸的酸性残基的碱金属盐或有机盐；及其类似盐。
举例而言，所述盐包括来自以下的盐：苯磺酸、苯甲酸、柠檬酸、乙磺酸、反丁烯二酸、龙胆酸、氢溴酸、氢氯酸、马来酸、苹果酸、丙二酸、苦杏仁酸、甲磺酸、4-甲基-苯磺酸、磷酸、柳酸、琥珀酸、硫酸及酒石酸。
本发明的药学上可接受的盐可通过常规化学方法由含有碱性部分或酸性部分的母化合物合成。一般而言，所述盐可通过使这些化合物的游离酸或游离碱形式与足够量的于水中或于有机稀释剂中的适当碱或酸反应来制备，该有机稀释剂如醚、EtOAc、EtOH、异丙醇或ACN或其混合物。
除上文所提及的酸的盐以外的例如适用于纯化或分离本发明的化合物的酸的盐(例如三氟乙酸盐)亦包含本发明之一部分。
如本文所使用的“药学上可接受的共晶体”为指所公开的化合物的衍生物，其中母化合物为通过借助于一或多种共形成物制造其共晶体而经修饰。此外，涵盖所公开的化合物的溶剂合物及/或盐的共晶体。
举例而言，共形成物包括诸如羧酸的氢键供体及诸如胺及酰胺的氢键受体。
本发明的药学上可接受的共晶体可通过本领域技术人员已知的方法由母化合物合成，所述方法包括诸如固态研磨、熔融挤出及熔融结晶的基于固体的方法及诸如溶液结晶、溶剂蒸发、冷却结晶、超临界流体辅助结晶、超音波辅助结晶、喷雾干燥、液体辅助研磨及轨道式碾磨的基于液体的方法。
在本发明的化合物为以化学名称形式且以化学式形式描绘的情况下，在有任何分歧的情况下，将以化学式为准。
在下文所定义的基团(group/radical)或部分中，常常在基团之前规定碳原子数目，例如C1-6烷基是指具有1至6个碳原子的烷基。
可在亚式中使用星号来指示连接至如所定义的核心分子的键。在于亚式中超过一个连接点，亦即超过一个星号的情况下，星号可由核心分子的连接部分的加括号标识进一步规定。
取代基原子的记数始于最接近核心或连接有取代基的基团的原子。
举例而言，术语“3-羧丙基-基团”代表以下取代基：
其中羧基连接至丙基的第三个碳原子。术语“1-甲丙基-”、“2,2-二甲丙基-”或“环丙甲基-”代表以下基团：
如本文所使用的术语“经取代”是指在指定原子、基团或部分上的任何一或多个氢为经来自所指定的群的选择替换，条件为不超过原子的正常价，且取代产生稳定性可接受的化合物。
在基团的定义中，术语“其中各X、Y及Z基团任选经……取代”及其类似者指示各自作为独立基团或各自作为合成基团之一部分的各基团X、各基团Y及各基团Z可如所定义经取代。举例而言，定义“Rex指示H、C1-3烷基、C3-6环烷基、C3-6环烷基-C1-3烷基或C1-3烷基-O-，其中每一烷基任选经一或多个Lex取代。”或其类似者是指在包含术语烷基之前述基团中的每一者中，亦即在基团C1-3烷基、C3-6环烷基-C1-3烷基及C1-3烷基-O-中的每一者中，烷基部分可如所定义经Lex取代。
单独或与另一基团组合的其中n为1至n的整数的术语“C1-n烷基”指示具有1至n个C原子的非环状饱和支链或直链烃基。举例而言，术语C1-5烷基涵盖基团H3C-、H3C-CH2-、H3C-CH2-CH2-、H3C-CH(CH3)-、H3C-CH2-CH2-CH2-、H3C-CH2-CH(CH3)-、H3C-CH(CH3)-CH2-、H3C-C(CH3)2-、H3C-CH2-CH2-CH2-CH2-、H3C-CH2-CH2-CH(CH3)-、H3C-CH2-CH(CH3)-CH2-、H3C-CH(CH3)-CH2-CH2-、H3C-CH2-C(CH3)2-、H3C-C(CH3)2-CH2-、H3C-CH(CH3)-CH(CH3)-及H3C-CH2-CH(CH2CH3)-。
单独或与另一基团组合的其中n为选自2、3、4、5或6、优选4或6的整数的术语“C1-n亚烷基”指示含有1至n个碳原子的非环状直链或支链二价烷基。举例而言，术语C1-4亚烷基包括-CH2-、-CH2-CH2-、-CH(CH3)-、-CH2-CH2-CH2-、-C(CH3)2-、-CH(CH2CH3)-、-CH(CH3)-CH2-、-CH2-CH(CH3)-、-CH2-CH2-CH2-CH2-、-CH2-CH2-CH(CH3)-、-CH(CH3)-CH2-CH2-、-CH2-CH(CH3)-CH2-、-CH2-C(CH3)2-、-C(CH3)2-CH2-、-CH(CH3)-CH(CH3)-、-CH2-CH(CH2CH3)-、-CH(CH2CH3)-CH2-、-CH(CH2CH2CH3)-、-CH(CH(CH3))2-及-C(CH3)(CH2CH3)-。
单独或与另一基团组合的其中n为整数3至n的术语“C3-n环烷基”指示具有3至n个C原子的环状饱和非支链烃基。环基可为单环的、双环的、三环的或螺环的，最优选为单环的。所述环烷基的实施例包括环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、环辛基、环壬基、环十二烷基、双环[3.2.1.]辛基、螺[4.5]癸基、降蒎基、降冰片基、降蒈基、金刚烷基等。
单独或与另一基团组合的如本文所使用的术语“芳基”指示含有6个碳原子的碳环芳族单环基，其任选进一步稠合至第二个任选芳族、饱和或不饱和的五元或六元碳环基。术语“芳基”包括但不限于苯基、二氢茚基、茚基、萘基、蒽基、菲基、四氢萘基及二氢萘基。
术语“杂芳基”是指含有选自N、O或S(O)r的一或多个杂原子的单环或多环芳环系统，其中r＝0、1或2，所述单环或多环芳环系统为由5至14个环原子组成，其中杂原子中的至少一者为芳环的部分。术语“杂芳基”意欲包括所有可能性异构形式。
因此，术语“杂芳基”包括以下例示性结构；当每一形式任选经由共价键连接至任何原子时其不描绘为基团，只要维持适当价态即可：
术语“双环系统”是指由包括螺环、稠合及桥接环系统的2个接合环状亚结构组成的基团。
术语卤素一般指示氟、氯、溴及碘。
上文所给出的术语中的多者可反复用于定义化学式或基团，且在每一情况下彼此独立地具有上文所给出的含义中之一种。
如本文所使用的术语“治疗(treatment/treating)”涵盖治疗性(亦即治愈性及/或姑息性)治疗及预防性(亦即防治性)治疗两者。
治疗性治疗为指已罹患呈明显急性或慢性形式的所述病况中的一或多种的患者的治疗。治疗性治疗可为对症治疗以便减轻特定病症的症状，或可为病因治疗以便逆转或部分逆转病症的病况或阻止或减缓疾病发展。
预防性治疗(“预防”)为指对处于罹患所述病况中的一或多种的风险下的患者的治疗，该治疗为在疾病临床发作之前以便降低该风险。
术语“治疗”包括便于预防或延迟症状或并发症发作且预防或延迟罹患疾病、病况或病症及/或便于消除或控制疾病、病况或病症以及缓解与疾病、病况或病症相关联的症状或并发症的一或多种活性化合物的给予。
当本发明提及需要治疗的患者时，其主要关于哺乳动物，具体地人类中的治疗。
术语“治疗有效量”是指(i)治疗或预防特定疾病或病况、(ii)减轻、改善或消除特定疾病或病况的一或多个症状或(iii)预防或延迟本文所描述的特定疾病或病况的一或多个症状发作的本发明化合物的量。
【实施方式】
本发明公开新颖杂芳族甲酰胺衍生物，其为有效血浆激肽释放酶(PKK)抑制剂且具有合适药理学及药物动力学特性以使其用作用于治疗可能受PKK抑制影响的疾病及/或病况的药剂，所述疾病及/或病况包括但不限于糖尿病并发症、眼部疾病及水肿相关疾病，具体地糖尿病性黄斑部水肿、年龄相关的黄斑变性、脉络膜新生血管及遗传性血管性水肿。
本发明的化合物可提供若干优点，诸如增强的效力、高代谢及/或化学稳定性、高选择性、安全性及耐受性、增强的溶解度、增强的渗透性、所期望的血浆蛋白结合、增强的生物可用性、改善的药物动力学特征及稳定盐形成可能性。
本发明的化合物
在本发明的第一方面中，发现式(I)化合物
其中Y、R及X如上文及下文所定义，为强力PKK抑制剂且展现关于选择性、安全性及耐受性、代谢及/或化学稳定性、药物动力学及物理化学特征、溶解度、渗透性、血浆蛋白结合、生物可用性及/或稳定盐形成可能性的有利特性。具体地，其提供对人类PKK的高效力及例如对诸如人类组织激肽释放酶1(TK1)的各种丝氨酸蛋白酶的相当大选择性的有利组合。此外，展现诸如低致突变性潜在性及低基于机制的细胞色素P450 3A4抑制倾向的有利安全特点。
因此，预期如上文或下文所定义的式(I)化合物或其药学上可接受的盐适用于治疗可能受PKK抑制影响的疾病及/或病况。
因此，根据本发明之一个方面，提供式(I)化合物
其中Y、R及X如上文或下文所定义，
以及其同种型、互变异构体、立体异构体、代谢物、前药、溶剂合物、水合物、共晶体及盐，特别是其药学上可接受的共晶体及盐。
除非另外说明，否则基团、残基及取代基，特别是Y、R、X、R1、R2及R3如上文及下文所定义。下文给出取代基Y、R、X、R1、R2及R3以及式(I)化合物的立体化学的一些优选含义作为本发明的实施方案。这些定义及实施方案中的任一者及每一者可彼此组合。
Y：
根据一个实施方案，Y选自由以下组成的群Y-G1：
其中的每一者经1或2个独立取代基R1取代。
根据另一实施方案，Y选自由以下组成的群Y-G2：
其中的每一者经1或2个独立取代基R1取代且
其中具有星号的键指示式(I)的R与CH2基团的连接位点。
根据另一实施方案，Y选自由以下组成的群Y-G3：
其中的每一者经1个取代基R1取代且
其中具有星号及括号的键指示式(I)的R与CH2基团的连接位点。
根据另一实施方案，Y选自由以下组成的群Y-G4：
其中具有星号及括号的键指示式(I)的R与CH2基团的连接位点。
根据另一实施方案，Y选自由以下组成的群Y-G5：
其中具有星号及括号的键指示式(I)的R与CH2基团的连接位点。
根据另一实施方案，Y选自由以下组成的群Y-G6：
其中具有星号及括号的键指示式(I)的R与CH2基团的连接位点。
R：
根据一个实施方案，R选自由以下组成的群R-G1：
饱和4元至7元单环系统及饱和6元至12元双环系统，其含有作为环成员的1至3个N原子及选自由C＝O、O、S、S＝O及SO2组成的群的任选的1至2个环成员，
条件为所述环系统在环成员之间不含有任何杂原子-杂原子键，
其中所述环系统经由N原子与式(I)中的Y连接，且
其中所述环系统任选经1至6个F取代，任选经1个取代基R2取代，且任选经1或2个CH3基团取代。
根据另一实施方案，R选自由以下组成的群R-G2：
饱和4元至7元单环系统及饱和6元至12元双环系统，其含有作为环成员的1至2个N原子及选自由C＝O及O组成的群的任选的1个环成员，
条件为所述环系统在环成员之间不含有任何杂原子-杂原子键，
其中所述环系统经由N原子与式(I)中的Y连接，且
其中所述环系统任选经1至4个F取代，任选经1个取代基R2取代，且任选经1或2个CH3基团取代。
根据另一实施方案，R选自由以下组成的群R-G3：
氮杂环丁烷-1-基、5-氮杂-螺[2.3]己-5-基、2-氮杂-螺[3.3]庚-2-基、6-氧杂-2-氮杂-螺[3.4]辛-2-基、5-氧杂-2-氮杂-螺[3.4]辛-2-基、7-氧杂-2-氮杂-螺[3.5]壬-2-基、吡咯烷-1-基、2-氮杂-双环[2.1.1]己-2-基、3-氮杂-双环[3.1.0]己-3-基、5-氮杂-螺[2.4]庚-5-基、6-氮杂-螺[3.4]辛-6-基、3-氮杂-双环[3.2.0]庚-3-基、2-氧杂-7-氮杂-螺[4.4]壬-7-基、八氢-环戊二烯并[c]吡咯-1-基、六氢-吡咯并[3,4-c]吡咯-1-酮-5-基、六氢-呋喃并[3,4-c]吡咯-5-基、哌啶-1-基、3-氮杂-双环[4.1.0]庚-3-基、3-氮杂-双环[3.1.1]庚-3-基、6-氧杂-3-氮杂-双环[3.1.1]庚-3-基、3-氧杂-7-氮杂-双环[3.3.1]壬-7-基、氮杂环庚烷-1-基及4-氮杂-双环[5.1.0]辛-4-基，
其中的每一者任选经1或2个F取代，任选经1个取代基R2取代，且任选经1或2个CH3基团取代。
根据另一实施方案，R选自由以下组成的群R-G4：
氮杂环丁烷-1-基、5-氮杂-螺[2.3]己-5-基、2-氮杂-螺[3.3]庚-2-基、吡咯烷-1-基、3-氮杂-双环[3.1.0]己-3-基、5-氮杂-螺[2.4]庚-5-基、6-氮杂-螺[3.4]辛-6-基、3-氮杂-双环[3.2.0]庚-3-基、八氢-环戊二烯并[c]吡咯-1-基、3-氮杂-双环[4.1.0]庚-3-基、3-氮杂-双环[3.1.1]庚-3-基及氮杂环庚烷-1-基，
其中的每一者任选经1或2个F取代，任选经1个取代基R2取代，且任选经1或2个CH3基团取代。
根据另一实施方案，R选自由以下组成的群R-G5：
6-氧杂-2-氮杂-螺[3.4]辛-2-基、5-氧杂-2-氮杂-螺[3.4]辛-2-基、7-氧杂-2-氮杂-螺[3.5]壬-2-基、2-氮杂-双环[2.1.1]己-2-基、2-氧杂-7-氮杂-螺[4.4]壬-7-基、六氢-吡咯并[3,4-c]吡咯-1-酮-5-基、六氢-呋喃并[3,4-c]吡咯-5-基、哌啶-1-基、6-氧杂-3-氮杂-双环[3.1.1]庚-3-基、3-氧杂-7-氮杂-双环[3.3.1]壬-7-基及4-氮杂-双环[5.1.0]辛-4-基，
其中的每一者任选经1或2个F取代，任选经1个取代基R2取代，且任选经1或2个CH3基团取代。
根据另一实施方案，R选自由以下组成的群R-G6：
吡咯烷-1-基、
哌啶-1-基、氮杂环庚烷-1-基及
根据另一实施方案，R选自由以下组成的群R-G7：
根据另一实施方案，R选自由以下组成的群R-G8：
吡咯烷-1-基、
根据另一实施方案，R选自由以下组成的群R-G9：
哌啶-1-基、
根据另一实施方案，R选自由以下组成的群R-G10：
氮杂环庚烷-1-基及
X：
根据一个实施方案，X选自由以下组成的群X-G1：
5元杂芳基，其含有1至4个N原子或含有1个O或S原子或含有1至3个N原子及1个O或S原子；及9元杂芳基，其由稠合至6元环的5元环组成且含有1至5个N原子，
其中所述杂芳基经由该5元环的C原子与式(I)中的羰基连接且经由该5元环的非邻接C或N原子与式(I)中的CH2基团连接，且
其中所述杂芳基任选经1个取代基R3取代。
根据另一实施方案，X选自由以下组成的群X-G2：
5元杂芳基，其含有1至4个N原子或1个S原子；及9元杂芳基，其由稠合至6元环的5元环组成且含有1至3个N原子，
其中所述杂芳基经由该5元环的C原子与式(I)中的羰基连接且经由该5元环的非邻接C或N原子与式(I)中的CH2基团连接，且
其中所述杂芳基任选经1个取代基R3取代。
根据另一实施方案，X选自由以下组成的群X-G3：
其中的每一者任选经1个取代基R3取代且
其中具有星号及括号的键指示式(I)的基团C＝O与CH2的连接位点。
根据另一实施方案，X选自由以下组成的群X-G4：
其中的每一者任选经1个取代基R3取代且
其中具有星号及括号的键指示式(I)的基团C＝O与CH2的连接位点。
根据另一实施方案，X选自由以下组成的群X-G5：
其中的每一者任选经1个取代基R3取代且
其中具有星号及括号的键指示式(I)的基团C＝O与CH2的连接位点。
根据另一实施方案，X选自由以下组成的群X-G6：
其中的每一者任选经1个取代基R3取代且
其中具有星号及括号的键指示式(I)的基团C＝O与CH2的连接位点。
根据另一实施方案，X选自由以下组成的群X-G7：
其中的每一者任选经1个取代基R3取代且
其中具有星号及括号的键指示式(I)的基团C＝O与CH2的连接位点。
根据另一实施方案，X选自由以下组成的群X-G8：
其中的每一者任选经1个取代基R3取代且
其中具有星号及括号的键指示式(I)的基团C＝O与CH2的连接位点。
根据另一实施方案，X选自由以下组成的群X-G9：
其中具有星号及括号的键指示式(I)的基团C＝O与CH2的连接位点。
R1：
根据一个实施方案，R1选自由以下组成的群R1-G1：
H、任选经1至5个F取代的C1-4烷基、任选经1个F或1个CH3基团取代的环丙基、CN、OH、任选经1至5个F取代的O-C1-3烷基、任选经选自由CN、OH及O-CH3组成的群的1个取代基取代的C1-3烷基。
根据另一实施方案，R1选自由H、CH3、CN、CF3及CH2CH3组成的群R1-G2。
根据另一实施方案，R1选自由H、CH3及CN组成的群R1-G3。
根据另一实施方案，R1选自由H组成的群R1-G4。
根据另一实施方案，R1选自由CH3组成的群R1-G5。
根据另一实施方案，R1选自由CN组成的群R1-G6。
R2：
根据一个实施方案，R2选自由以下组成的群R2-G1：
Cl、任选经1至5个F取代的C1-4烷基、C3-4环烷基、C1-3亚烷基-OH、C1-3亚烷基-O-C1-4烷基、CN、COOH、NH2、NH-C1-3烷基、N(C1-3烷基)2、OH、任选经1至5个F取代的O-C1-4烷基、苯基；含有1个-NH-、-N<、-O-或-S-环成员及任选的额外1或2个＝N-环成员的5元杂芳基及含有1或2个＝N-环成员的6元杂芳基；
其中该苯基及所述5元及6元杂芳基在1或2个碳原子处彼此独立地任选经F、Cl、CH3、CF3、CN、OH及/或O-CH3取代，且
其中存在于这些环内的N-H基团任选经N-C1-3烷基替换。
根据另一实施方案，R2选自由以下组成的群R2-G2：
Cl、任选经1至3个F取代的C1-3烷基、CH2OH、CH2OCH3、CN、OH、O-CH3、苯基；含有1个-N<环成员及任选的额外1或2个＝N-环成员的5元杂芳基及含有1或2个＝N-环成员的6元杂芳基；
其中该苯基及所述5元及6元杂芳基在1个碳原子处任选经F或CH3取代。
根据另一实施方案，R2选自由以下组成的群R2-G3：
CH3、CH2CH3、CH(CH3)2、CH2F、CHF2、CF3、CH2OH、CN、OH、O-CH3、4-氟苯基及吡唑基。
根据另一实施方案，R2选自由以下组成的群R2-G4：
CF3、CH2OH、CN、OH及O-CH3。
根据另一实施方案，R2选自由以下组成的群R2-G5：
CH3、CH2CH3、CH(CH3)2、CH2F、CHF2、CF3及CN。
根据另一实施方案，R2选自由以下组成的群R2-G6：
CH2OH及OH。
根据另一实施方案，R2选自由以下组成的群R2-G7：
O-CH3、4-氟苯基及吡唑基。
R3：
根据一个实施方案，R3选自由以下组成的群R3-G1：
F、Cl、Br、CN、COOH、任选经1至5个F取代的C1-4烷基、C3-5环烷基、C1-3亚烷基-OH、C1-3亚烷基-O-C1-4烷基、任选经1至5个F取代的O-C1-4烷基；含有1个-NH-、-O-或-S-环成员及任选的额外1或2个＝N-环成员的5元杂芳基及含有1或2个＝N-环成员的6元杂芳基；
其中所述5元及6元杂芳基在1或2个碳原子处彼此独立地任选经F、Cl、CH3、CF3、CN、OH及/或O-CH3取代，且
其中存在于这些环内的N-H基团任选经N-C1-3烷基替换。
根据另一实施方案，R3选自由以下组成的群R3-G2：
F、Cl、CN、COOH、任选经1至3个F取代的C1-2烷基、C3-4环烷基、C1-3亚烷基-OH、C1-3亚烷基-O-CH3、任选经1至3个F取代的O-C1-2烷基及含有1个-NH-、-N(CH3)-、-O-或-S-环成员及任选的额外1或2个＝N-环成员的5元杂芳基；
其中所述5元杂芳基在1或2个碳原子处彼此独立地任选经F、CH3、CF3、CN、OH及/或O-CH3取代。
根据另一实施方案，R3选自由以下组成的群R3-G3：
F、Cl、CN、COOH、任选经1至3个F取代的C1-2烷基、C3-4环烷基、C1-3亚烷基-OH、C1-3亚烷基-O-CH3、任选经1至3个F取代的O-CH3及含有1个-NH-或-N(CH3)-环成员及任选的额外1或2个＝N-环成员的5元杂芳基。
根据另一实施方案，R3选自由以下组成的群R3-G4：
Cl、CN、COOH、任选经1至3个F取代的CH3、环丙基、C(CH3)2OH、CH2OCH3、OCH3及N-甲基-吡唑基。
根据另一实施方案，R3选自由以下组成的群R3-G5：
Cl、CN、CH3、CHF2、CF3及环丙基。
根据另一实施方案，R3选自由以下组成的群R3-G6：
COOH及C(CH3)2OH。
根据另一实施方案，R3选自由以下组成的群R3-G7：
CH2OCH3、OCH3及N-甲基-吡唑基。
立体化学：
根据一个实施方案，式(I)化合物的立体化学为根据式(I.1)
根据另一实施方案，式(I)化合物的立体化学为根据式(I.2)
式(I)化合物的进一步优选亚属实施方案在以下表1中阐述为实施方案(I-a)至(I-r)，其中使用上文所提及的取代基定义。举例而言，行R1及列(I-a)中的项-G1是指在实施方案(I-a)中，取代基R1为选自所指定的定义R1-G1。上述情况类似应用于并入通式中的其他变量。
表1：
尤其优选为那些亚属实施方案(I.1-a)至(I.1-r)，就Y、R、X、R1、R2及R3的定义而言，其对应于表1的亚属实施方案(I-a)至(I-r)，但其中该化合物的立体化学为根据式(I.1)。
根据另一优选实施方案，本发明的化合物的立体化学为根据式(I.1)，其中Y为选自群Y-G5。
根据另一优选实施方案，本发明的化合物的立体化学为根据式(I.1)，其中Y为选自群Y-G6。
尤其优选的化合物(包括其互变异构体、其盐或其任何溶剂合物、水合物或共晶体)为实施例及实验数据部分中所描述的化合物。
制备
使用本领域技术人员已知且描述于有机合成文献中的合成方法，例如使用描述于“Comprehensive Organic Transformations”,第2版,Richard C.Larock,John Wiley&Sons,2010及“March's Advanced Organic Chemistry”,第7版,Michael B.Smith,JohnWiley&Sons,2013中的方法，可获得根据本发明的化合物及其中间体。优选地，类似于下文更充分解释、具体地如实验部分中所描述的制备方法地获得该化合物。在一些情况下，在实施反应流程中所采用的序列可以变化。亦可使用熟练人员已知但此处未详细描述的这些反应的变化。基于研究以下流程，用于制备本发明的化合物之一般制程对于熟练人员将变得显而易见。起始化合物可商购，或可通过描述于文献或本文中的方法来制备，或可以类似或相似方式来制备。在实施反应之前，起始化合物中的任何对应官能基可使用常规保护基加以保护。此外，可在反应序列内在合适阶段使用熟练人员熟悉且描述于例如“ProtectingGroups”,第3版,Philip J.Kocienski,Theime,2005及“Protective Groups in OrganicSynthesis”,第4版,Peter G.M.Wuts,Theadora W.Greene,John Wiley and Sons,2006的文献中的方法裂解这些保护基团。
流程1：
PG＝H或例如CH2OCH2CH2SiMe3的保护基
流程1：式(I')化合物可通过以下来制备：在存在合适偶合剂(例如O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲脲鎓-六氟磷酸盐(HATU)、O-(苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲脲鎓四氟硼酸盐(TBTU)、(苯并三唑-1-基氧基)三吡咯烷鏻六氟磷酸盐(PyBOP)、碳化二亚胺试剂等)及碱(例如三乙胺、N,N-二异丙基-乙胺、吡啶等)的情况下，在合适溶剂(例如DCM、THF、1,4-二噁烷、DMF、N,N-二甲基乙酰胺及1-甲基-2-吡咯烷酮)中，使式(II)合适酸(呈游离酸或具有诸如Li+、Na+、K+等的合适金属阳离子的羧酸盐形式)与式(III)合适胺(呈游离胺或诸如盐酸盐、氢溴酸盐等的盐形式)反应以形成酰胺键；流程1中的Y、R及X具有如上文所定义的含义。可替代地，将羧酸转化成羧酸氯(使用例如于DCM中的草酰氯或亚硫酰氯)，且因此在存在合适碱(例如三乙胺、N,N-二异丙基-乙胺、吡啶等)的情况下与胺(III)偶合。在采用具有于吡唑环(PG不为H)上的保护基的胺(III)的情况下，之后通过应用有机化学文献中所报导的标准程序将此基团裂解掉。优选在具有例如于诸如DCM、1,4-二噁烷、异丙醇或EtOAC的溶剂中的TFA或氢氯酸的酸性条件下裂解2-三甲基硅烷基乙氧基甲基及叔丁酯。亦可通过使用于诸如THF的适合溶剂中的氟源(例如nBu4NF)移除2-三甲基硅烷基乙氧基甲基。可通过在存在诸如钯/碳的过渡金属的情况下使用氢移除苯甲氧基甲基。亦可在氧化性条件(例如具有硝酸铈铵(CAN)或2,3-二氯-5,6-二氰基醌(DDQ))或酸性条件(例如具有TFA或氢氯酸)下移除诸如苯环上的甲氧基的携带给电子基团的苯甲氧基甲基。
流程2：视R5的本质而定，其中Y、R及X具有如上文所定义的含义的式(II)酸优选经由水解或氢解由对应酯(IV)制备。优选通过在环境温度或高温下利用于水及合适可互溶溶剂(例如THF、MeOH、EtOH、1,4-二噁烷或这些物质混合物)的混合物中的诸如NaOH、LiOH或KOH的氢氧化物盐进行的水解来裂解诸如乙酯或甲酯的低碳烷酯。酸可分离为具有金属阳离子的盐或分离为游离酸。优选通过利用于合适溶剂(例如DCM、1,4-二噁烷、MeOH、EtOH、THF、水或这些物质混合物)中的酸(例如氢氯酸或TFA)进行的处理来裂解叔丁酯。优选通过在氢气氛围(优选1至5巴)下利用于合适溶剂(例如EtOH、MeOH、THF、DCM或EtOAC)中的合适催化剂(例如钯/碳)进行的氢解来裂解苄酯。
流程3
T1及T2彼此独立地为N、C-H或C-R3；或
T1及T2一起形成环化苯并环、吡啶并环或嘧啶并环，
其任选经R3单取代
T3＝CH、N；
R5＝C1-4烷基或苄基
流程3：化合物(II')中的一些可通过以下来制备：采用光延反应条件(例如与例如于诸如THF、1,4-二噁烷、甲苯等的溶剂中的偶氮二羧酸二乙酯(DEAD)、偶氮二羧酸二异丙酯(DIAD)或偶氮二羧酸二-叔丁酯(DBAD)组合的三苯膦或三-正丁基膦)使醇(V)与酯(VI)反应；流程3中的Y、R及R3具有如上文所定义的含义。醇(V)可携带杂芳环Y上的所需残基R或替代地离去基团以随后引入R。可替代地，化合物(II')中的一些可通过以下获得：在高温(20至120℃)下在存在于适合溶剂(例如ACN)中的刘易斯酸(Lewis acid)或布朗斯台德酸(acid)(例如4-甲苯磺酸)的情况下使醇(V)与酯(VI)反应。
流程4
T1及T2彼此独立地为N、C-H或C-R3；或
T1及T2一起形成环化苯并环、吡啶并环或嘧啶并环，
其任选经R3单取代
T3＝CH、N；
R5＝C1-4烷基或苄基
Hal＝诸如CI、Br、I、OSO2CH3的离去基团
流程4：化合物(II')中的一些亦可通过以下来制备：在存在于合适溶剂(例如THF、DMF)中的合适碱(例如氢化钠、碳酸铯、碳酸钾)的情况下使在杂芳基甲基位置处携带诸如Cl、Br或甲磺酰基氧基(mesyloxy/methanesulfonyloxy)的离去基团的化合物(VII)与酯(VI)反应；流程4中的Y、R及R3具有如上文所定义的含义。化合物(VII)可携带杂芳环Y上的所需残基R或替代地离去基团以随后引入R。
流程5
R5＝C1-4烷基或苄基
Hal＝诸如OH、CI、Br、I、OSO2CH3的离去基团
流程5：其中Y及R具有上文所定义的含义的一些式(II”)酯可通过以下来制备：用于DMF或另一合适溶剂中的叠氮化钠处理对应烷基卤化物(溴化物或氯化物)或式(VII)磺酸酯(例如甲磺酸酯)，得到式(VIII)中间体，随后在铜介导的催化条件下使其与合适丙炔酸酯(例如丙炔酸乙酯或丙炔酸叔丁酯与于水/叔丁醇中的催化硫酸铜及抗坏血酸钠)反应，得到化合物(II”)。可替代地，叠氮化物(VIII)可通过在存在于合适溶剂(例如THF或DMF)中的合适碱(诸如DBU)的情况下用叠氮磷酸二苯酯处理来由式(V)(Hal为OH)醇获得。化合物(VII)可携带杂芳环Y上的所需残基R或替代地离去基团以随后引入R。
流程6
流程6：其中Y、R及R3具有上文所定义的含义的式(II”')酯可通过采用文献中所报导的方法(在存在于诸如THF或EtOH的溶剂中的钯/碳的情况下利用例如三乙基硅烷及TFA或于DCM中的醚合三氟化硼或氢)用氢替换羟基而由醇(XII)来制备。醇(XII)可通过以下制备：将卤化镁(XI)添加至醛(IX)中，之后可通过在低温至环境温度下在惰性溶剂(例如THF或二乙醚)中进行氧化(例如戴斯-马丁氧化(Dess-Martin oxidation)或斯温氧化(Swernoxidation))而自其对应醇获得。卤化镁(XI)可在卤素金属交换反应之后在低温下使用任选与于THF中的氯化锂组合的异丙基氯化镁自对应(X)溴化物或碘化物获得。可替代地，将镁金属嵌入碳卤素键中，得到卤化镁(XI)。化合物(IX)及(XII)可携带杂芳环Y上的所需残基R或替代地离去基团以随后引入R。
流程7
流程7：其中Y、R及R3具有上文所定义的含义的式(II””)化合物可以与流程6中所描绘的化合物类似的方式使用异构卤化镁(XI')来制备。
流程8
LG＝诸如F、CI、Br、I的离去基团
A1、A2、A3独立地＝N或C-R1
Y＝CO2R5、CHO、CH2OH、
R5＝C1-4烷基或苄基
流程8：式(XV)中间体可经由杂芳环上的亲核取代反应或过渡金属催化的偶合反应由杂芳族化合物(XIII)及胺(XIV)来制备；流程8中的X及R具有上文所定义的含义。利用化合物(XIV)中的N进行的(XIII)中的杂芳环上的离去基团的亲核取代可在环境温度或高温下在存在于合适溶剂(例如THF、1,4-二噁烷、DMF、DMSO)中的合适碱(例如氢化钠、碳酸铯、碳酸钾、N,N-二异丙基-乙胺)的情况下进行。过渡金属催化的偶合反应优选以与有机化学文献中所报导的程序类似的报导来进行，该有机化学文献中所报导的程序称为乌尔曼或巴哈法/哈特维希偶合反应，其为在存在碱的情况下且在适合溶剂中使用任选与额外配位体组合的合适钯盐或铜盐或其络合物进行。
流程9
PG＝保护基，参见流程10，
例如CH2OCH2CH2SiMe3
流程9：式(III.1)及(III'.1)对映体纯胺可如流程9中所描绘分别由酮(XVI)及(XVI')来制备。可在有机化学文献(例如J.Am.Chem.Soc.1995,117,7562-3；Org.Lett.2010,12,1756-9；Org.Proc.Res.Dev.2006,10,949-958；Tetrahedron:Asymmetry 2003,14,2659-2681；Tetrahedron Lett.2014,55,3635-40；及其中所引用的参考文献)中所报导的各种条件下对映选择性地还原式(XVI)酮，得到式(XVII)或(XVII')(未示出)对映体纯或对映体富集醇，该化合物衍生自酮(XVI')。随后，可在光延或光延型反应(使用例如与于合适溶剂(例如THF、1,4-二噁烷、EtOAC、苯、甲苯等)中的偶氮二羧酸二甲酯、DEAD、DIAD、二(4-氯苄基)偶氮二羧酸酯、偶氮二羧酸二苄酯、DBAD、偶氮二羧酸双(二甲基酰胺)、偶氮二羧酸二哌啶或偶氮二羧酸二吗啉组合的三苯膦或三-正丁基膦)中使醇与诸如邻苯二甲酰亚胺或(tBu-OCO)2NH的足够酸性的含N-H分子反应，引起引入具有立构中心(->(XVIII))组态倒置的N残基。可替代地，可采用磷酰基叠氮化物(例如叠氮磷酸二苯酯)以在邻接碳原子组态倒置下用叠氮基替换(XVII)中的OH。可通过用例如于合适溶剂(例如EtOH、MeOH、ACN、THF、二噁烷、DMSO、N,N-二甲基乙酰胺、水或这些物质的混合物)中的肼、羟胺、甲胺、正丁胺或乙醇胺进行处理来自邻苯二甲酰亚氨基团释放氨基，且必要时进行加热，得到式(III.1)中间体。优选在酸性条件(使用例如TFA或氢氯酸)下移除tBu-O-CO，得到胺(III.1)。可在存在过渡金属(例如钯/碳、阮内镍(Raney-Ni)、PtO2等)或膦(例如三苯膦)的情况下用例如氢来使叠氮化物还原成胺(III.1)。在用诸如硼氢化钠的非手性还原剂还原化合物(XVI)后且在上文所描述的另一途径之后获得外消旋体(III)。
可替代地，可在环境温度或高温下在存在于溶剂(例如THF、DCM、甲苯或无杂质溶剂)中的醇化钛(例如Ti(OEt)4或Ti(OiPr)4)的情况下经由3步合成序列采用对映体纯叔丁烷亚磺酰胺自酮(XVI)以生成对应对映体纯叔丁基亚磺酰化亚胺，可使用于适合溶剂(视所用氢化物源而定，例如THF、甲苯、MeOH等)中的氢化物(例如硼氢化锂或硼氢化钠、三第二丁基硼氢化锂、二异丁基氢化铝等)非对映选择性地将其还原成对应叔丁基亚磺酰化胺，获得化合物(III.1)。可在环境温度或高温下使用于合适溶剂(例如甲苯、DCM、二噁烷、醇、水等)中的酸(例如TFA或氢氯酸)将叔丁基亚磺酰基裂解掉。
流程10
PG＝保护基，例如
任选经1至5个F或Cl取代且任选经选自Si(CH3)3、CN、SO2-C1-4烷基或SO2-苯基的1个基团取代的C1-4烷基；
任选经1或2个OCH3取代的CH2-苯基；
CH2-N(C1-4烷基)2、CH2-吡咯烷-1-基、CH2-NHCO-C1-4烷基、CH2-N(CH3)CO-C1-4烷基；
任选经1个CH3、1个Si(CH3)3或3个Cl取代的CH2-O-C1-4烷基；
任选经1或2个OCH3取代的CH2-O-CH2-苯基；四氢吡喃-2-基、四氢呋喃-2-基；
任选经1至5个F或Cl取代的CO-C1-4烷基；
CO-N(C1-4烷基)2、CO-吡咯烷-1-基；
任选经1个Si(CH3)3或3个Cl取代的CO-O-C1-4烷基；
任选经1或2个OCH3取代的CO-O-CH2-苯基；
任选经1至5个F或1至3个Cl取代的SO2(C1-4烷基)；
任选经选自Cl、Br、CH3、NO2及OC1-4烷基的1或2个基团取代的SO2-苯基；
SO2-N(C1-4烷基)2、SO2-吡咯烷-1-基；
经选自Cl、Br、NO2、OC1-4烷基及SO2C1-4烷基的1或2个基团取代的苯基；
其中在所述保护基中的每一者中，每一C1-4烷基独立于彼此且例如选自由甲基、乙基、异丙基及叔丁基组成的群。
流程10：可在由5或6个反应步骤组成的序列中自所报导的酯(XIX)(或对应高碳烷酯，例如乙酯、丙酯、异丙酯或叔丁酯)获得化合物(XVI)。化合物(XIX)可在其N原子中的一者上衍生有有机化学文献中所报导的宽范围的保护基。举例而言，化合物(XIX)可通过以下转化成化合物(XX)：用于适合溶剂(视所用碱的本质而定，例如苯、甲苯、DCM、THF、二噁烷、EtOAc、ACN、DMF、N,N-二甲基乙酰胺、N-甲基吡咯烷酮等)中的碱(例如，诸如氢化钠的氢化物、诸如氢氧化钠的氢氧化物、诸如碳酸钠或碳酸钾的碳酸盐、诸如甲醇锂或叔丁醇钾的醇化物、诸如三乙胺的有机胺、休尼格氏碱(Hünig's base)、DABCO、DBN或DBU、诸如P2Et磷氮烯的磷氮烯、诸如二异丙氨基锂或六甲基二硅烷氨基锂的酰胺)进行处理，且同时或随后与具有适合保护基的亲电体(携带离去基团的保护基，诸如氯、溴、碘、烷基或芳基磺酰基氧基、烷氧基、酰氧基等)(例如用于引入2-三甲基硅烷基乙氧基甲基作为保护基的2-三甲基硅烷基乙氧基甲氯)反应。可采用于适合溶剂(例如DCM、二氯乙烷、二噁烷、ACN、DMF等)中的对应卤素的适合亲电源(例如对于Cl的N-氯代二酰亚胺、对于Br的N-溴代琥珀酰亚胺或Br2、对于I的N-碘代琥珀酰亚胺、I2或ICl，任选在存在诸如银盐或酸的添加剂的情况下)氯化、溴化或碘化化合物(XX)。举例而言，可使用于ACN中的N-碘代琥珀酰亚胺及TFA引入碘，得到化合物(XXI)。随后，可采用1步或2步合成途径由对应卤化物(例如碘化物(XXI))制备化合物(XXII)，该1步或2步合成途径涵盖与丙烯醛二烷基缩醛(例如丙烯醛二甲缩醛)或丙烯酸酯(例如丙烯酸甲酯)的赫克偶合反应(Heck coupling reaction)(大致涵盖于例如Catalysts 2017,7,267及其中所引用的参考文献的有机化学文献中)；使用后一偶合配偶体需要还原所形成的烯烃键的额外步骤，该额外步骤可在存在于适合溶剂(例如DCM、二噁烷、THF、EtOAc、诸如MeOH的醇、水等)中的过渡金属催化剂(例如，诸如钯/碳的Pd、诸如阮内镍的Ni、诸如氧化铂的Pt、诸如铑/碳的Rh等)的情况下利用氢进行。可在于低温至增加的温度(视所采用的碱及溶剂而定，-78℃至100℃)下用于适合溶剂(视所用碱而定，例如苯、甲苯、二噁烷、THF、醇等)中的碱(例如，诸如氢化钠的氢化物、诸如甲醇锂或叔丁醇钾的醇化物、诸如DBU的有机胺、诸如P2Et磷氮烯的磷氮烯、诸如二异丙氨基锂、六甲基二硅烷氨基锂、六甲基二硅烷氨基钠或六甲基二硅烷氨基钾的酰胺等)处理化合物(XXII)后产生酮酯(XXIII)。化合物(XXIII)中的酯基水解、继而去羧基可通过在0至140℃下任选在存在碱(例如氢氧化钠)、卤化物盐(诸如碘化锂或氯化锂)或酸(例如氢氯酸)的情况下在溶剂(例如二噁烷、THF、ACN、DMF、N,N-二甲基乙酰胺、DMSO、醇、水等或这些物质的混合物)中搅拌化合物以得到酮(XVI)来达成。整个序列可类似地应用于异构性受保护的化合物(XX')以得到酮(XVI')，且不必依赖于使用保护基且因此可能在无保护基(PG＝H)的情况下进行。
式(I)化合物可分解成如下文所提及的其对映异构体及/或非对映异构体。因此，举例而言，顺式/反式混合物可分解成其顺式及反式异构体，且外消旋化合物可分离成其对映异构体。
顺式/反式混合物可例如通过色谱法分解成其顺式及反式异构体。可通过自身已知的方法将以外消旋体形式出现的式(I)化合物分离成其光学对映体，且可通过利用其不同物理化学特性使用例如色谱法及/或分步结晶法的自身已知的方法将通式(I)化合物的非对映异构体混合物分解成其非对映异构体；若其后获得的化合物为外消旋体，则可将其分解成如下文所提及的对映异构体。
优选通过于手性相上的管柱色谱法、或通过由光活性溶剂进行的结晶、或通过与光活性物质(其与外消旋化合物形成盐或诸如酯或酰胺的衍生物)反应来拆分外消旋体。可用用于碱性化合物的对映异构性纯酸及用用于酸性化合物的对映异构性纯碱形成盐。用例如酸、其经活化衍生物或醇的对映异构性纯辅助化合物形成非对映异构性衍生物。可通过利用例如溶解度差异的其不同物理化学特性来达成因此获得的盐或衍生物的非对映异构性混合物的分离；可通过合适试剂的作用自纯非对映异构性盐或衍生物释放游离对映体。常用于此类目的的光活性酸以及适用作辅助残基的光活性醇为本领域技术人员所知。
如上文所提及，式(I)化合物可转化成盐，尤其用于药物用途转化成药学上可接受的盐。如本文所使用的“药学上可接受的盐”为指所公开的化合物的衍生物，其中母化合物为通过制造其酸盐或碱盐而经修饰。
本发明的化合物亦宜使用于下实施例中所描述的方法来获得，所述方法亦可出于此目的与熟练人员自文献中已知的方法组合。
因此，根据本发明的另一方面，提供用于合成式(I)化合物的方法。
根据本发明的另一方面，提供式(I)化合物合成的中间体。
根据一个实施方案，本发明涉及如流程9及/或10中所描绘且描述的中间体。
根据另一实施方案，本发明涉及以下中间体中的一或多者：
其中PG为如上文或下文所定义。
药理活性
本发明化合物的活性可使用于下分析来证实：
生物方法
式(I)化合物抑制血浆激肽释放酶(PKK)、因子XIIa(FXIIa)、因子XIa(FXIa)、因子Xa(FXa)、因子IIa(α-凝血酶；FIIa)、纤维蛋白溶酶、胰蛋白酶、组织激肽释放酶1(TK1)、因子VIIa(FVIIa)或与组织因子复合的FVIIa、磷脂及CaCl2(FVIIa/TF/PL/CaCl2)的能力为在存在1％(v/v)DMSO的情况下使用于下生物化学分析在分析缓冲液(100mM Tris、150mMNaCL，用HCl调节至pH 7.8，且含有0.1％(w/v)BSA及0.05％(v/v)Tween20)中加以测定：
使用端点分析评估PKK抑制
在室温下将人类PKK(0.01U/mL；Enzyme Research Laboratories)或大鼠PKK(0.625nM；自制)与0.10μM荧光底物H-Pro-Phe-Arg-AMC(来自Bachem的I1295)及各种浓度的测试化合物在分析缓冲液中一起培育1h。随后，添加PPACK II(Calbiochem)作为停止溶液以达成1μM的最终浓度，且使用波长激发设定为355nm且波长发射设定为460nm的Envision读取器(PerkinElmer)测量荧光。
本发明化合物的IC50值示于下表中。化合物编号对应于实验部分中的实施例编号。
在经高岭土活化的人类PPP中评估PKK抑制
将自人类全血获得、经NA-Citrat抗凝的贫血小板血浆(PPP)与分析缓冲液中的各种浓度的测试化合物以及25、75、250或750μg/mL高岭土一起在37℃下培育20min，以使得对于每一所用高岭土剂量，获得测试化合物的浓度反应。之后，将0.25mM荧光底物H-Pro-Phe-Arg-AMC(来自Bachem的I1295)添加至混合物中，且使用具有以下350nm波长激发设定及450nm波长发射设定的Spectramax M5(Molecular Devices)以动力学间隔每2分钟执行测量达12分钟。自与GraphPad棱镜7.0(等式：log(激动剂)对反应--Find ECanything；使用全局拟合程序拟合所获得的测试化合物的四个浓度反应曲线(每一浓度反应曲线为使用不同高岭土剂量而获得)，得到共享pIC50或pIC90值)拟合的4个x/y-曲线图(x＝log M，化合物；y＝Δrfu/min)获得pIC50及pIC90值。
本发明化合物的IC90值示于下表中。化合物编号对应于实验部分中的实施例编号。
评估PKK抑制(Ki)
在24℃下将人类PKK(1.78nM或0.025U/mL；Enzyme Research Laboratories)与0.25μM荧光底物H-Pro-Phe-Arg-AMC(来自Bachem的I1295)及各种浓度的测试化合物在分析缓冲液中一起培育。使用具有以下350nm波长激发设定及450nm波长发射设定的Spectramax M5(Molecular Devices)以动力学间隔每2分钟执行测量达16分钟。
本发明化合物的Ki值示于下表中。化合物编号对应于实验部分中的实施例编号。
评估FXIIa抑制(Ki)
在24℃下将人类FXIIa(47.5nM或1.1U/mL；Enzyme Research Laboratories)与0.5mM显色底物S2302(Chromogenix)及各种浓度的测试化合物在分析缓冲液中一起培育。使用在405nm下测量吸光度的Spectramax M5(Molecular Devices)以动力学间隔每2分钟执行测量达16分钟。
评估FXIa抑制(Ki)
在24℃下将人类FXIa(0.5nM或0.016U/mL；Enzyme Research Laboratories)与0.25mM荧光底物Boc-Glu(OBzl)-Ala-Arg-AMC·HCl(来自Bachem的I1575)及各种浓度的测试化合物在分析缓冲液中一起培育。使用具有以下350nm波长激发设定及450nm波长发射设定的Spectramax M5(Molecular Devices)以动力学间隔每2分钟执行测量达16分钟。
评估FXa抑制(Ki)
在24℃下将人类FXa(0.86nM或0.01U/mL；Enzyme Research Laboratories)与0.5mM显色底物S2765(Chromogenix)及各种浓度的测试化合物在分析缓冲液中一起培育。使用在405nm下测量吸光度的Spectramax M5(Molecular Devices)以动力学间隔每2分钟执行测量达16分钟。
评估FIIa抑制(Ki)
在24℃下将人类FIIa(44.6nM或5U/mL；Enzyme Research Laboratories)与0.5mM显色底物S2238(Chromogenix)及分析缓冲液的各种浓度的测试化合物一起培育。使用在405nm下测量吸光度的Spectramax M5(Molecular Devices)以动力学间隔每2分钟执行测量达16分钟。
评估纤维蛋白溶酶抑制(Ki)
在24℃下将人类纤维蛋白溶酶(64.1nM或0.0275U/mL；Enzyme ResearchLaboratories)与0.3mM显色底物S2251(Chromogenix)及各种浓度的测试化合物在分析缓冲液中一起培育。使用在405nm下测量吸光度的Spectramax M5(Molecular Devices)以动力学间隔每2分钟执行测量达16分钟。
评估胰蛋白酶抑制(Ki)
在24℃下将人类胰蛋白酶(4.54nM或250U/mL；Calbiochem)与0.5mM显色底物S2222(Chromogenix)及各种浓度的测试化合物在分析缓冲液中一起培育。使用在405nm下测量吸光度的Spectramax M5(Molecular Devices)以动力学间隔每2分钟执行测量达16分钟。
评估TK1抑制(Ki)
在分析之前，人类TK1(R&D Systems)为通过在37℃下与人类胰蛋白酶(Calbiochem)以1:10,000比率一起培育15min而经活化。对于分析TK1抑制活性，在24℃下将经活化的TK1(31.25nM或1U/mL)与0.1mM荧光底物H-Pro-Phe-Arg-AMC(来自Bachem的I1295)及各种浓度的测试化合物在分析缓冲液中一起培育。使用具有以下350nm波长激发设定及450nm波长发射设定的Spectramax M5(Molecular Devices)以动力学间隔每2分钟执行测量达16分钟。
本发明化合物的Ki值示于下表中。化合物编号对应于实验部分中的实施例编号。
实施例 IC50(nM) 实施例 IC50(nM) 实施例 IC50(nM) 实施例 IC50(nM)
1 >10000 18 >10000 48 >10000 93 >10000
3 >10000 19 >10000 52 >10000 94 >10000
5 >10000 20 >10000 54 >10000 96 >10000
6 >10000 21 >10000 71 >10000 97 >10000
7 >10000 22 >10000 77 >10000 98 >10000
8 >10000 23 >10000 79 >10000 99 >10000
9 >10000 25 >10000 82 >10000 100 >10000
11 >10000 33 >10000 84 >10000 101 >10000
12 >10000 35 >10000 86 >10000 102 >10000
13 >10000 36 >10000 87 >10000 103 >10000
14 >10000 37 >10000 88 >10000 104 >10000
15 >10000 45 >10000 89 >10000 105 >10000
16 >10000 46 >10000 90 >10000 108 >10000
17 >10000 47 >10000 92 >10000 109 >10000
评估FVIIa抑制(Ki)
在24℃下将人类FVIIa(0.86nM或0.01U/mL；Enzyme Research Laboratories)与1.5mM显色FVIIa(Loxo)及各种浓度的测试化合物在分析缓冲液中一起培育。使用在405nm下测量吸光度的Spectramax M5(Molecular Devices)以动力学间隔每2分钟执行测量达16分钟。
评估FVIIa/TF/PL/CaCl2抑制(Ki)
在24℃下将人类FVIIa(300nM或585U/mL；Enzyme Research Laboratories)连同10mM CaCl2*2H2O及13.3％(v/v)(Siemens；OQUMI94E0002(5534)，其含有重组人类组织因子合成磷脂(凝血活酶))与1.5mM显色FVIIa(Loxo)及各种浓度的测试化合物在分析缓冲液中一起培育。使用在405nm下测量吸光度的Spectramax M5(Molecular Devices)以动力学间隔每2分钟执行测量达16分钟。
计算pIC50及pKi值
将分析开始之后的用于2至12min的时间间隔的平均Vmax(分别表示为用于使用显色底物进行的分析的ΔOD/min或用于使用荧光底物进行的分析的ΔRFU/min)相对于所评估的抑制剂化合物的Log浓度(以摩尔浓度为单位)加以绘制。随后，pIC50值为使用四参数拟合程序使用GraphPad棱镜(版本6；GraphPad Software,Inc.)加以拟合。各别Ki值为通过使用于下等式针对所用底物的各别KM值(参见表A的所用底物的所获得的KM值)校正IC50值而获得：
其中IC50为以摩尔浓度为单位且KM值为以mM为单位。
表A：所获得的用于酶分析中的底物的KM值
评估渗透性
在过滤器芯子(Costar transwell聚碳酸酯或PET过滤器，0.4μm孔径)上接种Caco-2细胞(1-2×105个细胞/1cm2区域)，且培养(DMEM)10至25天。
将化合物溶解于适当溶剂(如DMSO，1-20mM储备溶液)中。用HTP-4缓冲液(128.13mM NaCl、5.36mM KCl、1mM MgSO4、1.8mM CaCl2、4.17mM NaHCO3、1.19mM Na2HPO4×7H2O、0.41mM NaH2PO4×H2O、15mM HEPES、20mM葡萄糖，pH 7.2)稀释储备溶液以制备转运溶液(0.1-300μM化合物，最终DMSO<＝0.5％)。将转运溶液(TL)施用至顶端或底侧面供体侧以用于分别测量A-B或B-A渗透性(3个过滤器复制品)。接收器侧含有补充有2％ BSA的HTP-4缓冲液。在实验开始及最后时自供体且在至多2小时的各种时间间隔时亦自接收器侧收集样品以用于通过HPLC-MS/MS或闪烁计数来进行浓度测量。用新鲜接收器溶液替换经取样的接收器体积。
评估人类或大鼠肝微粒体中的代谢稳定性
在37℃下用所汇集的人类或大鼠肝微粒体分析测试化合物的代谢降解。100μl/时间点的最终培育体积含有在RT下的TRIS缓冲液pH 7.6(0.1M)、氯化镁(5mM)、微粒体蛋白(1mg/mL)及最终浓度为1μM的测试化合物。
在37℃下的短暂预培育期之后，通过添加还原形式的β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH，1mM)来引发反应，且通过在不同时间点之后将等分试样转移至溶剂中来终止反应。另外，在无NADPH的情况下培育时监测不依赖于NADPH的降解，且在最后时间点终止。通过离心(10000g，5min)来集结经淬灭的培育液。通过LC-MS/MS分析上清液的等分试样的母化合物量。通过浓度-时间曲线的半对数标绘图的斜率来测定半衰期(t1/2活体外)。
评估人类或大鼠肝细胞中的代谢稳定性
在肝细胞悬浮液中分析测试化合物的代谢降解。在含有5％物种血清的适当缓冲液系统(例如杜尔贝科氏改良伊格尔培养基(Dulbecco's modified eagle medium)加上3.5μg高血糖素/500mL、2.5mg胰岛素/500mL及3.75mg/500mL氢皮质酮)中培育肝细胞(通常冷冻保存)。
在培育箱(37℃，10％ CO2)中(通常)预培育30min之后，将5μL测试化合物溶液(80μM；自于经培养基1:25稀释的DMSO储备溶液中的2mM开始)添加至395μL肝细胞悬浮液(细胞密度介于0.25至5Mio细胞/mL范围内，通常1Mio细胞/mL；测试化合物的最终浓度为1μM，最终DMSO浓度为0.05％)中。
将细胞培育六小时(培育箱，回转式振荡器(orbital shaker))，且在0、0.5、1、2、4及6h时取出样品(25μL)。将样品转移至ACN中且通过离心(5min)集结。将上清液转移至新96深孔盘，在氮气下蒸发且再悬浮。
通过HPLC-MS/MS分析母化合物的衰减，CLint如下计算：CL_INTRINSIC＝剂量/AUC＝(C0/CD)/(AUD+clast/k)×1000/60.C0：培育液中的初始浓度[μM]，CD：活细胞的细胞密度[10e6细胞/mL]，AUD：资料下面积[μM×h]，clast：最后一个数据点的浓度[μM]，k：用于母体衰减的回归线的斜率[h-1]。
评估血浆蛋白结合
此平衡透析(ED)技术为用于测定测试化合物与血浆蛋白的近似活体外分步结合。使用Dianorm Teflon透析细胞(0.2微米)。每一细胞由供体及受体腔室组成，该供体及受体腔室为由具有5kDa分子量截止值的超薄半透膜间隔开。在DMSO中以1mM制备用于每一测试化合物的储备溶液且稀释至1.0μM的最终浓度。在来自雄性及雌性供体的经汇集的人类或大鼠血浆(具有NaEDTA)中制备后续透析溶液。将200μL透析缓冲液(100mM磷酸钾，pH 7.4)的等分试样分配至缓冲液腔室中。将200μL测试化合物透析溶液的等分试样分配至血浆腔室中。在旋转下在37℃下进行培育2小时。
在透析期结束时，将透析液转移至反应管中。用于缓冲液部分的套管含有0.2mLACN/水(80/20)。将25μL血浆透折液的等分试样转移至深孔盘中且与25μl ACN/水(80/20)、25μL缓冲液、25μL校准溶液及25μL内标溶液混合。通过添加200μL ACN进行蛋白质沉淀。
将50μL缓冲液透折液的等分试样转移至深孔盘中且与25μL空白血浆、25μL内标溶液及200μL ACN混合。
在HPLC-MS/MS-系统上测量样品且用Analyst-软件加以评估。
结合％用下式来计算：结合％＝(血浆浓度-缓冲液浓度/血浆浓度)×100
评估溶解度
测试化合物的水溶性为通过比较溶解于缓冲液中的量与溶解于ACN/水(1/1)溶液中的量来测定。以10mM DMSO储备溶液为起始物，分别用乙腈/水(1/1)或缓冲液稀释等分试样。在振荡24小时之后，将溶液过滤且通过LC-UV分析。比较溶解于缓冲液中的量与溶解于ACN溶液中的量。
通常在2.5％ DMSO浓度下测量的溶解度为0.001mg/mL至0.125mg/mL。若将超过90％的化合物溶解于缓冲液中，则该值由“>”标记。
评估啮齿动物中的药物动力学特征
将测试化合物静脉内给予至经喂养的大鼠或经口给予至经禁食的大鼠。在施用测试化合物后的若干时间点获取血液样品，抗凝且离心。
在血浆样品中定量分析物-所给予的化合物及/或代谢物-浓度。使用非室体模型方法计算PK参数。将AUC及Cmax标准化至1μmol/kg的剂量。
治疗方法
在本发明的另一方面中，发现式(I)化合物或其药学上可接受的盐可适用于治疗由哺乳动物中的不合需要的PKK活性介导的疾病或病况。
由不合需要的PKK活性介导的疾病及病况涵盖糖尿病并发症、糖尿病性视网膜病、增生性及非增生性视网膜病、糖尿病性黄斑部水肿(DME)、临床上明显的黄斑部水肿(CSME)、囊样黄斑部水肿(CME)、白内障摘除后CME、由冷冻疗法诱发的CME、由眼色素层炎诱发的CME、内眼炎、血管闭塞(例如视网膜中央静脉闭塞、视网膜分支静脉闭塞或半视网膜静脉闭塞)后CME、视网膜水肿、与糖尿病性视网膜病中的白内障手术相关的并发症、高血压视网膜病、视网膜创伤、干性及湿性年龄相关的黄斑变性(AMD)、息肉状脉络膜血管病变(PCV)、脉络膜新生血管(CNV；例如非渗出性脉络膜新生血管)、遗传性血管性水肿、急性呼吸窘迫综合征(ARDS)、中风后出血及水肿、血管性痴呆、阿兹海默症、纤维化疾病、结肠炎、关节炎及肾脏损伤。
因此，本发明的化合物及药物组合物尤其适用于治疗包括以下的眼部疾病：糖尿病性视网膜病、增生性及非增生性视网膜病、糖尿病性黄斑部水肿(DME)、视网膜静脉闭塞、年龄相关的黄斑变性(AMD)、息肉状脉络膜血管病变(PCV)及脉络膜新生血管(CNV；例如非渗出性脉络膜新生血管)。
另外，本发明的化合物及药物组合物尤其适用于治疗诸如遗传性血管性水肿的水肿。
具体地，本发明的化合物及药物组合物适用于治疗糖尿病性视网膜病、增生性及非增生性视网膜病、糖尿病性黄斑部水肿(DME)、年龄相关的黄斑变性(AMD)、息肉状脉络膜血管病变(PCV)、脉络膜新生血管(CNV)及遗传性血管性水肿。
本发明的化合物及药物组合物最尤其适用于治疗糖尿病性黄斑部水肿(DME)、湿性年龄相关的黄斑变性(AMD)、非渗出性脉络膜新生血管(CNV)及遗传性血管性水肿。
举例而言，其尤其适用于预防糖尿病性黄斑部水肿(DME)、湿性年龄相关的黄斑变性(AMD)及遗传性血管性水肿以及适用于预防自非渗出性脉络膜新生血管(neCNV)向渗出性脉络膜新生血管(eCNV)的转化。
每天施用的式(I)化合物的剂量范围通常为0.01mg/kg体重至10mg/kg体重。
当然，实际药学上有效的量或治疗剂量应视诸如患者的年龄及体重、给予途径及疾病严重程度的本领域技术人员已知的因素而定。在任何情况下，化合物或组合物应以允许基于患者的独特病况而传递治疗有效量的剂量及方式给予。
本发明的化合物、组合物(包括与一或多种额外治疗剂的任何组合)可通过经口、玻璃体内、经皮、吸入、非经肠或舌下途径给予。可能性给予方法中，经口或玻璃体内给予为优选的。在玻璃体内注射的情况下，优选剂量应不超过5毫克/只眼睛。
因此，在另一方面中，本发明提供新型式(I)化合物及其互变异构体，包括其药学上可接受的盐，其抑制血浆激肽释放酶且具有适用于治疗中的药理学及药物动力学特性，亦即适用作药剂。
在另一方面中，本发明提供新型式(I)化合物及其互变异构体，包括其药学上可接受的盐，其用于用于治疗可能以有益方式受血浆激肽释放酶抑制影响的疾病或病况的方法中。
在另一方面中，本发明提供新型式(I)化合物及其互变异构体或其药学上可接受的盐，其用于治疗诸如糖尿病性视网膜病、增生性及非增生性视网膜病、糖尿病性黄斑部水肿(DME)、年龄相关的黄斑变性(AMD)、息肉状脉络膜血管病变(PCV)及脉络膜新生血管(CNV)的眼部病症以及诸如遗传性血管性水肿的水肿相关疾病。
在另一方面中，本发明提供式(I)化合物及/或其互变异构体或其药学上可接受的盐在制造用于治疗疾病或病况的药剂中的用途，在该治疗中血浆激肽释放酶抑制为有益的。
在另一方面中，本发明提供式(I)化合物及其互变异构体或其药学上可接受的盐的用途，其用于制造用于治疗诸如糖尿病性视网膜病、增生性及非增生性视网膜病、糖尿病性黄斑部水肿(DME)、年龄相关的黄斑变性(AMD)、息肉状脉络膜血管病变(PCV)及脉络膜新生血管(CNV)的眼部病症以及诸如遗传性血管性水肿的水肿相关疾病的药剂。
因此，本发明涉及作为药剂的式(I)化合物。
此外，本发明涉及式(I)化合物在用于治疗患者(优选人类)的由不合需要的血浆激肽释放酶活性介导的疾病或病况的方法中的用途。
此外，本发明涉及式(I)化合物在用于治疗诸如糖尿病性视网膜病、增生性及非增生性视网膜病、糖尿病性黄斑部水肿(DME)、年龄相关的黄斑变性(AMD)、息肉状脉络膜血管病变(PCV)及脉络膜新生血管(CNV)的眼部病症以及诸如遗传性血管性水肿的水肿相关疾病的方法中的用途。
在又另一方面中，本发明涉及用于治疗哺乳动物的可能受血浆激肽释放酶抑制影响的疾病或病况的方法，该方法包括向需要该治疗的患者(优选人类)给予治疗有效量的本发明的化合物或药物组合物的步骤。
在另一方面中，本发明提供用于治疗个体的可能以有益方式受血浆激肽释放酶抑制影响的疾病或病况的方法，其包含向有需要的患者给予治疗有效量的式(I)化合物及/或其互变异构体或其药学上可接受的盐。
在另一方面中，本发明提供用于治疗患者的诸如糖尿病性视网膜病、增生性及非增生性视网膜病、糖尿病性黄斑部水肿(DME)、年龄相关的黄斑变性(AMD)、息肉状脉络膜血管病变(PCV)及脉络膜新生血管(CNV)的眼部病症以及诸如遗传性血管性水肿的水肿相关疾病的方法，其包含向有需要的患者给予治疗有效量的式(I)化合物或其药学上可接受的盐。
根据本发明的另一方面，提供用于治疗有需要的患者的糖尿病并发症、特别是与糖尿病性视网膜病及糖尿病性黄斑部水肿相关的视网膜血管渗透性的方法，其特征在于向患者给予治疗有效量的式(I)化合物及/或其互变异构体或其药学上可接受的盐。
药物组合物
在本发明的另一方面中，描述本发明的化合物或其药学上可接受的盐可用作药物组合物中的活性成分。
对于一般本领域技术人员而言，用于给予任选与一或多种另外治疗剂组合的本发明化合物的合适制剂将为显而易见的，且包括例如片剂、丸剂、胶囊、栓剂、口含片、糖衣片、溶液、糖浆剂、酏剂、药囊、可注射剂、吸入剂及散剂等。口服调配物，特别是诸如片剂或胶囊的固体形式为优选的。对于玻璃体内注射，溶液为优选的。药物活性化合物的含量有利地介于整体组合物的0.1重量％至90重量％，例如1重量％至70重量％范围内。
可例如通过将一或多种式(I)化合物与例如惰性稀释剂、载剂、崩解剂、佐剂、界面活性剂、黏合剂及/或润滑剂的已知赋形剂混合来获得合适的片剂。片剂亦可由若干层组成。熟练人员应基于其专业知识将熟悉适用于所需制剂的特定赋形剂、载剂及/或稀释剂。优选赋形剂、载剂及/或稀释剂为适用于所需特定调配物及给予方法的赋形剂、载剂及/或稀释剂。本发明的制剂或调配物可使用熟练人员熟悉的自身已知的方法来制备，诸如通过混合或组合至少一种本发明的式(I)化合物或此类化合物的药学上可接受的盐与一或多种赋形剂、载剂及/或稀释剂。
因此，根据本发明的另一方面，提供包含一或多种式(I)化合物及/或其互变异构体或其药学上可接受的盐、任选以及一或多种惰性载剂及/或稀释剂的药物组合物。
此外，提供包含上文所提及的化合物或其药学上可接受的盐、任选以及一或多种惰性载剂及/或稀释剂中的一或多者的药物组合物，其为用于用于治疗可能受血浆激肽释放酶抑制影响的疾病或病况的方法中。
具体地，本发明提供用于治疗诸如糖尿病性视网膜病、增生性及非增生性视网膜病、糖尿病性黄斑部水肿(DME)、年龄相关的黄斑变性(AMD)、息肉状脉络膜血管病变(PCV)及脉络膜新生血管(CNV)的眼部病症以及诸如遗传性血管性水肿的水肿相关疾病的方法中的本发明的药物组合物。
此外，本发明涉及本发明的药物组合物用于治疗患者(优选人类)的由不合需要的血浆激肽释放酶活性介导的疾病或病况的用途。
此外，本发明涉及本发明的药物组合物用于治疗患者(优选人类)的可能受血浆激肽释放酶抑制影响的疾病或病况的用途。
根据另一实施方案，提供包含一或多种式(I)化合物及/或其互变异构体或其药学上可接受的盐及一或多种额外治疗剂、任选以及一或多种惰性载剂及/或稀释剂的药物组合物。优选地，此组合物包含一种式(I)化合物及/或其互变异构体或其药学上可接受的盐及一或多种额外治疗剂。
组合疗法
本发明的化合物可进一步与一或多种、优选一种额外治疗剂组合。根据一个实施方案，额外治疗剂为选自适用于治疗上文所描述的尤其与代谢疾病或病况(诸如糖尿病、肥胖症、糖尿病并发症、高血压、高脂血症)相关联的疾病或病况的治疗剂或适用于治疗眼部疾病的治疗剂的群。适用于所述组合的额外治疗剂尤其包括例如强化就所提及的病症中的一者而言的一或多种活性物质的治疗作用及/或使一或多种活性物质的剂量减少的治疗剂。
因此，本发明的化合物可与选自由以下组成的群的一或多种额外治疗剂组合：抗糖尿病剂、用于治疗超重及/或肥胖的药剂；用于治疗高血压、心脏衰竭及/或动脉粥样硬化的药剂及用于治疗眼部疾病的药剂。
抗糖尿病剂例如为二甲双胍、磺酰脲、那格列奈(nateglinide)、瑞格列奈(repaglinide)、噻唑啶二酮、PPAR-(α、γ或α/γ)激动剂或调节剂、α-葡萄糖苷酶抑制剂、DPPIV抑制剂、SGLT2-抑制剂、胰岛素及胰岛素类似物、GLP-1及GLP-1类似物或淀粉素及淀粉素类似物、赛克洛瑟(cycloset)、11β-HSD抑制剂。其他合适的组合伴用药为蛋白酪氨酸磷酸酶1抑制剂、影响肝脏中的失调葡萄糖产生的物质(诸如葡萄糖-6-磷酸酶抑制剂或果糖-1,6-二磷酸酶抑制剂、肝糖磷酸化酶抑制剂、高血糖素受体拮抗剂及磷酸烯醇丙酮酸羧激酶抑制剂、肝糖合成酶激酶抑制剂或丙酮酸脱氢酶抑制剂、α2-拮抗剂、CCR-2拮抗剂或葡萄糖激酶活化剂。一或多种脂质降低剂亦适用作组合伴用药，诸如HMG-CoA-还原酶抑制剂、纤维酸酯、烟碱酸及其衍生物、PPAR-(α、γ或α/γ)激动剂或调节剂、PPAR-δ激动剂、ACAT抑制剂或胆固醇吸收抑制剂(诸如胆酸结合物质，诸如回肠胆酸运输抑制剂)、MTP抑制剂或HDL升高化合物(诸如CETP抑制剂或ABC1调节剂)。
用于治疗超重及/或肥胖的治疗剂例如为大麻素1受体拮抗剂、MCH-1受体拮抗剂、MC4受体激动剂、NPY5或NPY2拮抗剂、β3-激动剂、瘦素或瘦素模拟物、5HT2c受体激动剂。
用于治疗高血压、慢性心脏衰竭及/或动脉粥样硬化的治疗剂例如为A-II拮抗剂或ACE抑制剂、ECE抑制剂、利尿剂、β-阻挡剂、Ca-拮抗剂、中枢作用型抗高血压剂、α-2-肾上腺素激导性受体拮抗剂、中性内肽酶抑制剂、凝血细胞聚集抑制剂及其他合适治疗剂或其组合。常与诸如氢氯噻嗪的利尿剂组合的血管收缩素II受体拮抗剂优选用于治疗或预防高血压及糖尿病并发症。
用于治疗眼部疾病的治疗剂可包括例如经玻璃体内给予的皮质类固醇、经玻璃体内给予的抗VEGF治疗剂、抗Ang2抑制剂、双重抗VEGF/抗Ang2抑制剂、抗PDGF、双抗VEGF/抗PDGF、VAP-1(AOC3)抑制剂、补充抑制剂(例如补充因子3、5、B及D抑制剂)、缓激肽受体1拮抗剂、CCR-2拮抗剂。
针对眼部疾病的额外治疗可包括激光凝固疗法。
上文所提及的组合伴用药的剂量通常为正常所建议的最低剂量的1/5至正常所建议的剂量的1/1。
优选地，本发明化合物及/或包含任选与一或多种额外治疗剂组合的本发明化合物的药物组合物为结合运动及/或膳食给予。
因此，在另一方面中，本发明涉及与一或多种上文及下文所描述的额外治疗剂组合的本发明的化合物的用途，其用于治疗可能受不合需要的血浆激肽释放酶活性影响或由其介导的疾病或病况，具体地如上文及下文所描述的疾病或病况。
在另一方面中，本发明涉及用于治疗患者的可能受血浆激肽释放酶抑制影响的疾病或病况的方法，其包括向需要该治疗的患者给予与治疗有效量的一或多种额外治疗剂组合的治疗有效量的式(I)化合物及/或其互变异构体或其药学上可接受的盐的步骤。
在另一方面中，本发明涉及与一或多种额外治疗剂组合的式(I)化合物及/或其互变异构体或其药学上可接受的盐用于治疗有需要的患者的可能受血浆激肽释放酶抑制影响的疾病或病况的用途。
在又另一方面中，本发明涉及用于治疗患者的由不合需要的血浆激肽释放酶活性介导的疾病或病况的方法，其包括向需要该治疗的患者(优选人类)给予与治疗有效量的上文及下文中所描述的一或多种额外治疗剂组合的治疗有效量的本发明的化合物的步骤。
与额外治疗剂组合的本发明化合物的使用可同时或以错开时间发生。
本发明的化合物及一或多种额外治疗剂可两者一起存在于例如片剂或胶囊剂之一种调配物中，或分别存在于例如作为所谓的分部分的试剂盒的两种相同或不同调配物中。
因此，在另一方面中，本发明涉及包含本发明的化合物及上文及下文所描述的一或多种额外治疗剂、任选以及一或多种惰性载剂及/或稀释剂的药物组合物。
本发明的其他特点及优点将由以下更详细的实施例而变得清楚，所述实施例以举例方式说明本发明的原理。
实施例及实验数据
以下实施例仅出于说明本发明的目的且并不意欲以任何方式限制本发明的范畴。
缩写：
Ac 乙酰基
ACN 乙腈
AMC 7-氨基-4-甲基香豆素
Boc 叔丁基氧基羰基
BSA 牛血清白蛋白
Bzl 苄基
CAN 硝酸铈铵
CI 化学离子化
d 天
DABCO 1,4-二氮双环[2.2.2]辛烷
DAD 二极管数组侦测器
DBAD 偶氮二羧酸二-叔丁酯
DBU 1,8-二氮双环[5.4.0]十一-7-烯
DBN 1,5-二氮双环[4.3.0]壬-5-烯
DCM 二氯甲烷
DDQ 2,3-二氯-5,6-二氰基醌
DEAD 偶氮二羧酸二乙酯
DIAD 偶氮二羧酸二异丙酯
DIPEA N,N-二异丙基乙胺
DMEM 杜尔贝科氏改良伊格尔培养基
DMF N,N-二甲基甲酰胺
DMSO 二甲亚砜
EDTA 乙二胺四乙酸酯
EI 电子离子化
ESI 电喷雾离子化(在MS中)
EtOAc 乙酸乙酯
EtOH 乙醇
h 小时
HATU O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲脲鎓-六氟磷酸盐
HPLC 高效液相色谱法
HPLC-MS 高效液相色谱法-质谱法联用
LC 液相色谱法
LC-MS 液相色谱法-质谱法联用
LG 离去基团
M 摩尔浓度(mol/L)
MeOH 甲醇
min 分钟
MS 质谱法
NADPH 烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸
NMR 核磁共掁
PET 聚对苯二甲酸亚乙酯
PyBop (苯并三唑-1-基氧基)三吡咯烷基磷六氟磷酸盐
Rf 保留因子
RFU 相对荧光单位
RP 反相
rt 室温
tR 滞留时间(在HPLC/LC中)
SFC 超临界流体色谱法
TBTU O-(苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基脲四氟硼酸盐
TFA 四氟乙酸
THF 四氢呋喃
TLC 薄层色谱法
UV 紫外线
术语“环境温度”及“室温”可互换使用且指代约20℃的温度，例如15℃至25℃。
通常，已获得所制备的化合物的1H-NMR及/或质谱。
除非另外规定，否则含有手性中心的化合物具有所描绘的立体化学。立体化学的指定已通过使用具有已知立体化学的手性起始材料、通过具有已知立体化学的立体选择性合成或通过生物活动作出。
分析方法
合成中间体：
中间体1
3-甲基-2-{[2-(三甲基硅烷基)乙氧基]甲基}-2H,4H,5H,6H-环戊二烯并[c]二氢吡唑-6-酮
步骤1：5-甲基-1H-吡唑-3-甲酸甲酯
向于MeOH(450mL)中的5-甲基-1H-吡唑-3-甲酸(45g)的溶液中逐滴添加亚硫酰氯(58mL)。在添加之后，将混合物在室温下搅拌16h。在真空中浓缩混合物。将残余物溶解于EtOAC中，连续用饱和NaHCO3水溶液及盐水洗涤。在干燥(MgSO4)之后，在真空中浓缩混合物，得到标题化合物。
LC(方法1)：tR＝0.64min；质谱(ESI+)：m/z＝141[M+H]+。
步骤2：5-甲基-1-{[2-(三甲基硅烷基)乙氧基]甲基}-1H-吡唑-3-甲酸甲酯
将氢化钠(于矿物油中60％，16.8g)逐滴添加至DMF(470mL)中。将混合物搅拌10min，冷却至0℃且用于DMF(470mL)中的5-甲基-1H-吡唑-3-甲酸甲酯(46.9g)的溶液逐滴处理。在搅拌20min之后，逐滴添加[2-(氯甲氧基)乙基]三甲基硅烷(SEM-Cl，77.7mL)。将混合物搅拌2h，用EtOAC稀释且进行水及盐水连续洗涤。在干燥(MgSO4)之后，在真空中浓缩混合物，且用石油醚/EtOAC 2:1使残余物进行硅胶色谱。在真空中蒸发溶剂，得到标题化合物，其直接用于下一步骤中。
步骤3：4-碘基-5-甲基-1-{[2-(三甲基硅烷基)乙氧基]甲基}-1H-吡唑-3-甲酸甲酯
向于ACN(1.4L)中的5-甲基-1-{[2-(三甲基硅烷基)乙氧基]甲基}-1H-吡唑-3-甲酸甲酯(94.4g)的溶液中添加TFA(2.7mL)及N-碘代琥珀酰亚胺(94.2g)。将混合物搅拌48h，用EtOAC稀释且用水、饱和Na2S2O3水溶液及盐水连续洗涤。在干燥(MgSO4)之后，在真空中浓缩混合物，且用石油醚/EtOAC 2:1使残余物进行硅胶色谱。在真空中蒸发溶剂，得到标题化合物，其含有约15％区位异构4-碘基-3-甲基-1-{[2-(三甲基硅烷基)乙氧基]甲基}-1H-吡唑-5-甲酸甲酯。
LC(方法1)：tR＝1.17min；质谱(ESI+)：m/z＝397[M+H]+。
步骤4：4-[(1E)-3-甲氧基-3-氧代基丙-1-烯-1-基]-5-甲基-1-{[2-(三甲基硅烷基)乙氧基]甲基}-1H-吡唑-3-甲酸甲酯
将4-碘基-5-甲基-1-{[2-(三甲基硅烷基)乙氧基]甲基}-1H-吡唑-3-甲酸甲酯(44g)、丙烯酸甲酯(15mL)及N-甲基二环己胺(35mL)溶解于二甲基乙酰胺(430mL)及水(110mL)中。用氩气吹扫混合物10min。添加二氯双(三-邻甲苯基膦)钯(II)(PdCl2[P(o-Tol)3]2，2.6g)，且将混合物在85℃下搅拌2h。随后，将混合物用EtOAC稀释且用1M H3PO4水溶液及盐水连续洗涤。在干燥(MgSO4)之后，在真空中浓缩混合物，且使残余物进行硅胶色谱(石油醚/EtOAC 95:5→50:50)，得到标题化合物。
LC(方法1)：tR＝1.13min；质谱(ESI+)：m/z＝355[M+H]+。
步骤5：4-(3-甲氧基-3-氧代基丙基)-5-甲基-1-{[2-(三甲基硅烷基)乙氧基]甲基}-1H-吡唑-3-甲酸甲酯
将4-[(1E)-3-甲氧基-3-氧代基丙-1-烯-1-基]-5-甲基-1-{[2-(三甲基硅烷基)乙氧基]甲基}-1H-吡唑-3-甲酸甲酯(38.6g)及于EtOAC(580mL)中的10％钯/碳(5.8g)的混合物在氢气氛围(3巴)下在室温下振荡3h。过滤混合物，且浓缩滤液，得到标题化合物。
LC(方法1)：tR＝1.10min；质谱(ESI+)：m/z＝357[M+H]+。
步骤6：3-甲基-6-氧代基-2-{[2-(三甲基硅烷基)乙氧基]甲基}-2H,4H,5H,6H-环戊二烯并[c]吡唑-5-甲酸甲酯
将于THF中的4-(3-甲氧基-3-氧代基丙基)-5-甲基-1-{[2-(三甲基硅烷基)乙氧基]甲基}-1H-吡唑-3-甲酸甲酯(37.8g)的溶液冷却至0℃，用NaN(Si(CH3)3)2(于THF中40％，105mL)处理且搅拌15min。将混合物在冰冷却下倾倒且剧烈搅拌至1M H3PO4水溶液中。将有机相分离，用盐水洗涤且干燥(MgSO4)。在真空中蒸发溶剂，得到标题化合物。
LC(方法1)：tR＝1.06min；质谱(ESI+)：m/z＝325[M+H]+。
步骤7：3-甲基-2-{[2-(三甲基硅烷基)乙氧基]甲基}-2H,4H,5H,6H-环戊二烯并[c]二氢吡唑-6-酮
将于1,4-二噁烷(350mL)及水(9mL)中的3-甲基-6-氧代基-2-{[2-(三甲基硅烷基)乙氧基]甲基}-2H,4H,5H,6H-环戊二烯并[c]吡唑-5-甲酸甲酯(34.9g)的溶液在回流下加热12h。在真空中蒸发溶剂，且使残余物进行硅胶色谱(石油醚/EtOAC 80:20→40:60)，得到标题化合物。
LC(方法1)：tR＝1.05min；质谱(ESI+)：m/z＝267[M+H]+。
中间体2
3-甲基-2-{[2-(三甲基硅烷基)乙氧基]甲基}-2H,4H,5H,6H-环戊二烯并[c]吡唑-6-胺
步骤1：3-甲基-2-{[2-(三甲基硅烷基)乙氧基]甲基}-2H,4H,5H,6H-环戊二烯并[c]吡唑-6-醇
在冰冷却下向于EtOH(5mL)中的3-甲基-2-{[2-(三甲基硅烷基)乙氧基]甲基}-2H,4H,5H,6H-环戊二烯并[c]二氢吡唑-6-酮(1g)的溶液中添加NaBH4(80mg)。将混合物在室温下搅拌4h。随后，用1M H3PO4水溶液缓慢地稀释混合物。在搅拌10min之后，用EtOAC萃取混合物。将有机相用盐水洗涤且干燥(MgSO4)。在真空中蒸发溶剂，得到标题化合物。
LC(方法1)：tR＝0.98min；质谱(ESI+)：m/z＝269[M+H]+。
步骤2：6-叠氮基-3-甲基-2-{[2-(三甲基硅烷基)乙氧基]甲基}-2H,4H,5H,6H-环戊二烯并[c]吡唑
在氩气下将DBU(2mL)添加至于甲苯(20mL)中的3-甲基-2-{[2-(三甲基硅烷基)乙氧基]甲基}-2H,4H,5H,6H-环戊二烯并[c]吡唑-6-醇(950mg)的溶液中。将混合物冷却至0℃，且在1小时内逐滴添加二苯基磷酰基叠氮化物(2mL)。将混合物搅拌12h，同时升温至室温。随后，将混合物用水洗涤，干燥(MgSO4)且在真空中浓缩。使残余物进行Al2O3(DCM)色谱化，得到标题化合物。
LC(方法1)：tR＝1.15min；质谱(ESI+)：m/z＝294[M+H]+。
步骤3：3-甲基-2-{[2-(三甲基硅烷基)乙氧基]甲基}-2H,4H,5H,6H-环戊二烯并[c]吡唑-6-胺
将6-叠氮基-3-甲基-2-{[2-(三甲基硅烷基)乙氧基]甲基}-2H,4H,5H,6H-环戊二烯并[c]吡唑(770mg)、于EtOH(10mL)中的10％钯/碳(140mg)的混合物在氢气氛围(3巴)下在室温下振荡12h。过滤混合物，且浓缩滤液，得到标题化合物。
LC(方法1)：tR＝0.81min；质谱(ESI+)：m/z＝268[M+H]+。
中间体3
3-甲基-1H,4H,5H,6H-环戊二烯并[c]吡唑-6-胺二盐酸盐
将于4N HCl中于1,4-二噁烷(1mL)中的3-甲基-2-{[2-(三甲基硅烷基)乙氧基]甲基}-2H,4H,5H,6H-环戊二烯并[c]吡唑-6-胺(25mg)的溶液在室温下搅拌48h。在真空中蒸发溶剂，得到标题化合物。
LC(方法2)：tR＝0.57min；质谱(ESI+)：m/z＝138[M+H]+。
中间体4
(6R)-3-甲基-2-{[2-(三甲基硅烷基)乙氧基]甲基}-2H,4H,5H,6H-环戊二烯并[c]吡唑-6-胺
步骤1：(6S)-3-甲基-2-{[2-(三甲基硅烷基)乙氧基]甲基}-2H,4H,5H,6H-环戊二烯并[c]吡唑-6-醇
在0℃下向于DCM(260mL)中的三乙胺(27mL)的溶液中添加甲酸(11mL)。使混合物升温至室温，且添加3-甲基-2-{[2-(三甲基硅烷基)乙氧基]甲基}-2H,4H,5H,6H-环戊二烯并[c]二氢吡唑-6-酮(26g)。在用氩气吹扫10min之后，添加[N-[(1S,2S)-2-(氨基-κN)-1,2-二苯基乙基]-4-甲基苯磺酰胺根基-κN]氯[(1,2,3,4,5,6-η)-1,3,5-三甲基苯]-钌(RuCl[(S,S)-TsDPEN](均三甲苯)；0.5g)，且将混合物在室温下搅拌48h。随后，在剧烈搅拌下用1M NaHCO3水溶液处理混合物。分离各相且用DCM萃取水相。用水及盐水洗涤合并有机相。在干燥(MgSO4)之后，在真空中蒸发溶剂，且使残余物进行硅胶色谱(DCM/MeOH 98:2→90:10)，得到具有84％对映异构性过量(ee)的标题化合物。
LC(方法1)：tR＝0.99min；质谱(ESI+)：m/z＝269[M+H]+。
步骤2：(6R)-6-叠氮基-3-甲基-2-{[2-(三甲基硅烷基)乙氧基]甲基}-2H,4H,5H,6H-环戊二烯并[c]吡唑
在氩气下将DBU(16mL)添加至于甲苯(250mL)中的(6S)-3-甲基-2-{[2-(三甲基硅烷基)乙氧基]甲基}-2H,4H,5H,6H-环戊二烯并[c]吡唑-6-醇(25.5g)的溶液中。将混合物冷却至0℃，且在1h内逐滴添加二苯基磷酰基叠氮化物(22mL)。将混合物搅拌12h，同时升温至室温。随后，添加MeOH(25mL)且将混合物搅拌1h。将混合物用水洗涤两次，干燥(MgSO4)且在真空中浓缩。使残余物进行Al2O3(DCM)色谱化，得到标题化合物。
LC(方法1)：tR＝1.15min；质谱(ESI+)：m/z＝294[M+H]+。
步骤3：(6R)-3-甲基-2-{[2-(三甲基硅烷基)乙氧基]甲基}-2H,4H,5H,6H-环戊二烯并[c]吡唑-6-胺
将(6R)-6-叠氮基-3-甲基-2-{[2-(三甲基硅烷基)乙氧基]甲基}-2H,4H,5H,6H-环戊二烯并[c]吡唑(19.7g)及于EtOH(200mL)中的10％钯/碳(3g)的混合物在氢气氛围(3巴)下在室温下振荡12h。过滤混合物，且浓缩滤液，得到标题化合物。
LC(方法1)：tR＝0.80min；质谱(ESI+)：m/z＝268[M+H]+。
中间体5
3-甲基-1H,4H,5H,6H-环戊二烯并[c]吡唑-6-胺
将于DCM(2mL)中的3-甲基-2-{[2-(三甲基硅烷基)乙氧基]甲基}-2H,4H,5H,6H-环戊二烯并[c]吡唑-6-胺(225mg)的溶液冷却至0℃，用TFA(970μL)处理，且搅拌12h，同时升温至室温。在真空中蒸发溶剂，且将残余物溶解于DCM及MeOH中。添加于EtOH中的1M KOH直至达到pH 10为止。在真空中蒸发溶剂，且使残余物进行Al2O3(DCM/MeOH/(于MeOH中的1MNH3)97:1:2→80:18:2)色谱化，得到标题化合物。
LC(方法1)：tR＝0.18min；质谱(ESI+)：m/z＝121[M-NH3+H]+。
中间体6
(6S)-3-甲基-1H,4H,5H,6H-环戊二烯并[c]吡唑-6-胺
在进行手性相SFC分离后自外消旋混合物获得标题化合物(管柱：Chiralpak IC,5μm,250mm×20mm；洗脱剂：scCO2/(20mM NH3 in MeOH)80:20,40℃,200bar,60mL/min)；tR＝5.9min
中间体7
(6R)-3-甲基-1H,4H,5H,6H-环戊二烯并[c]吡唑-6-胺
在进行手性相SFC分离后自外消旋混合物获得标题化合物(管柱：Chiralpak IC，5μm，250mm×20mm；洗脱剂：scCO2/(于MeOH中的20mM NH3)80:20，40℃，200巴，60mL/min)；tR＝5.2min
中间体8
1-[(6-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲基]-1H-吡唑-4-甲酸
步骤1：6-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-甲醛
将6-氯-2-甲基吡啶-3-甲醛(15g)、3-氮杂双环[3.1.0]己烷盐酸盐(14g)及KHCO3(22.5g)悬浮于DMSO(70mL)中且加热至60℃达12h。将混合物冷却，分配于水与DCM之间，且分离各相。用DCM萃取水相三次，且用盐水洗涤合并有机相。在干燥(MgSO4)之后，在真空中蒸发溶剂，得到标题化合物。
LC(方法1)：tR＝0.59min；质谱(ESI+)：m/z＝203[M+H]+。
步骤2：(6-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲醇
在冰冷却下向于EtOH(300mL)中的6-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-甲醛(19.5g)的溶液中添加NaBH4(4g)。将混合物在室温下搅拌2h。在冷却至0℃之后，用4M HCl水溶液(72mL)缓慢地处理混合物且搅拌15min。随后，通过添加4M NaOH水溶液碱化混合物。在真空中蒸馏出EtOH。用DCM萃取残余物。将有机相用盐水洗涤且干燥(MgSO4)。在真空中蒸发溶剂，得到标题化合物。
LC(方法1)：tR＝0.55min；质谱(ESI+)：m/z＝205[M+H]+。
步骤3：1-[(6-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲基]-1H-吡唑-4-甲酸乙酯
将(6-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲醇(19.2g)溶解于THF(150mL)中且冷却至0℃。添加1H-吡唑-4-甲酸乙酯(14.5g)及三丁基膦(30mL)。缓慢地逐份添加二-叔丁基-偶氮二甲酸酯(26g)，且将混合物搅拌45min。添加饱和NaHCO3水溶液，将混合物剧烈搅拌10min，且随后用EtOAC萃取。将有机相用盐水洗涤，干燥(MgSO4)且在真空中浓缩。使残余物进行硅胶色谱(石油醚/EtOAC 80:20→50:50)，得到标题化合物。
LC(方法1)：tR＝0.73min；质谱(ESI+)：m/z＝327[M+H]+。
步骤4：1-[(6-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲基]-1H-吡唑-4-甲酸
将1-[(6-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲基]-1H-吡唑-4-甲酸乙酯(15.5g)、于EtOH(100mL)及THF(250mL)中的1M KOH的混合物在50℃下搅拌48h。在冷却至室温之后，添加乙酸(5.5mL)且在真空中蒸发溶剂。将残余物分配于水与DCM/异丙醇9:1之间。将有机相用盐水洗涤且干燥(MgSO4)。在真空中蒸发溶剂且由ACN结晶残余物，得到标题化合物。
LC(方法1)：tR＝0.60min；质谱(ESI+)：m/z＝299[M+H]+。
中间体9
1-[(6-{6,6-二氟-3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲基]-1H-吡唑-4-甲酸
步骤1：6-{6,6-二氟-3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-甲醛
将6-氯-2-甲基吡啶-3-甲醛(19.6g)、6,6-二氟-3-氮杂双环[3.1.0]己烷盐酸盐(19.6g)及KHCO3(58g)悬浮于DMSO(70mL)中且加热至75℃达48h。将混合物冷却，分配于水与EtOAC之间，且分离各相。用盐水洗涤有机相。在干燥(MgSO4)之后，在真空中蒸发溶剂，得到标题化合物。
LC(方法1)：tR＝0.66min；质谱(ESI+)：m/z＝239[M+H]+。
步骤2：(6-{6,6-二氟-3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲醇
在冰冷却下向于EtOH(600mL)中的6-{6,6-二氟-3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-甲醛(41.6g)溶液中添加NaBH4(9g)。将混合物在室温下搅拌12h。在冷却至0℃之后，用4M HCl水溶液(150mL)缓慢地处理混合物且搅拌15min。随后，通过添加4M NaOH水溶液碱化混合物。在真空中蒸馏出EtOH。用DCM萃取残余物。将有机相用盐水洗涤且干燥(MgSO4)。在真空中蒸发溶剂，且由二异丙醚湿磨残余物，得到标题化合物。
LC(方法1)：tR＝0.54min；质谱(ESI+)：m/z＝241[M+H]+。
步骤3：1-[(6-{6,6-二氟-3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲基]-1H-吡唑-4-甲酸乙酯
将(6-{6,6-二氟-3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲醇(24.4g)溶解于THF(500mL)中且冷却至0℃。添加1H-吡唑-4-甲酸乙酯(15.3g)及三丁基膦(28mL)。缓慢地逐份添加二-叔丁基-偶氮二甲酸酯(24.6g)且将混合物搅拌45min。添加饱和NaHCO3水溶液，将混合物剧烈搅拌10min，且随后用EtOAC萃取。将有机相用盐水洗涤，干燥(MgSO4)且在真空中浓缩。使残余物进行硅胶色谱(环己烷/EtOAC 50:50→20:80)，得到标题化合物。
LC(方法1)：tR＝0.75min；质谱(ESI+)：m/z＝363[M+H]+。
步骤4：1-[(6-{6,6-二氟-3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲基]-1H-吡唑-4-甲酸
将1-[(6-{6,6-二氟-3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲基]-1H-吡唑-4-甲酸乙酯(24.5g)、4M NaOH水溶液(30mL)及EtOH(220mL)的混合物在60℃下搅拌4h。在冷却至室温之后，添加4M HCl水溶液(30mL)且在真空中蒸发溶剂。使残余物溶解于水中。通过过滤分离沉淀物，得到标题化合物。
LC(方法1)：tR＝0.61min；质谱(ESI+)：m/z＝335[M+H]+。
中间体10
1-[(6-{6,6-二氟-3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲基]-N-[(6R)-3-甲基-2-{[2-(三甲基硅烷基)乙氧基]甲基}-2H,4H,5H,6H-环戊二烯并[c]吡唑-6-基]-1H-吡唑-4-甲酰胺
向于DMF(10mL)中的1-[(6-{6,6-二氟-3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲基]-1H-吡唑-4-甲酸(1g)的溶液中添加DIPEA (700μL)及O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基脲鎓-六氟磷酸盐(HATU，1.3g)，且将混合物搅拌5min。添加(6R)-3-甲基-2-{[2-(三甲基硅烷基)乙氧基]甲基}-2H,4H,5H,6H-环戊二烯并[c]吡唑-6-胺(750mg)且将混合物搅拌1h。将混合物分配于水与EtOAC之间。将有机相用盐水洗涤且干燥(MgSO4)。在真空中蒸发溶剂，得到标题化合物。
LC(方法1)：tR＝0.93min；质谱(ESI+)：m/z＝584[M+H]+。
中间体11
4-[(6-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲基]噻吩-2-甲酸
步骤1：4-碘噻吩-2-甲酸甲酯
在微波小瓶中在氩气下将4-溴噻吩-2-甲酸甲酯(1g)、铜-I-碘化物(43mg)、(1R,2R)-N,N'-二甲基-环己烷-1,2-二胺(64mg)及碘化钠(1.4g)悬浮于1,4-二噁烷(5mL)中，且加热至120℃达2h。将混合物冷却，分配于水与EtOAC之间且分离各相。用EtOAC萃取水相且用盐水洗涤合并有机相。在干燥(MgSO4)之后，在真空中蒸发溶剂。使残余物进行硅胶色谱(环己烷/EtOAC 100:0→95:5)，得到标题化合物。
LC(方法1)：tR＝1.02min。
步骤2：4-[(6-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)(羟基)甲基]噻吩-2-甲酸甲酯
在-80℃下向于THF(15mL)中的4-碘噻吩-2-甲酸甲酯(940mg)的溶液中逐滴添加异丙基氯化镁-氯化锂络合物(iPrMgCl×LiCl，2.8mL于THF中的1.3M溶液)。将混合物搅拌1h，且随后用于THF(4.5mL)中的6-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-甲醛(730mg)的溶液逐滴处理。在搅拌1.5h之后，通过添加10％ NH4Cl水溶液淬灭反应物。分离各相且用EtOAC萃取水相。将合并有机相干燥(MgSO4)且在真空中浓缩。使残余物进行硅胶色谱(环己烷/EtOAC 85:15→30:70)，得到标题化合物。
LC(方法1)：tR＝0.75min；质谱(ESI+)：m/z＝345[M+H]+。
步骤3：4-[(6-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲基]噻吩-2-甲酸甲酯
将4-[(6-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)(羟基)甲基]噻吩-2-甲酸甲酯(1.15g)溶解于1,2-二氯乙烷(15mL)中且冷却至0℃。添加三乙基硅烷(2.1mL)及TFA(900μL)且将混合物搅拌4h，同时升温至室温。随后，将混合物在50℃下搅拌12h。在冷却至室温之后，添加三乙基硅烷(1mL)及TFA(350μL)且将混合物在50℃下搅拌4h。将混合物冷却至室温且小心地分配于饱和NaHCO3水溶液与DCM之间。分离各相且用DCM萃取水相两次。将合并有机相干燥(MgSO4)且在真空中浓缩。使残余物进行硅胶色谱(石油醚/EtOAC 100:0→75:25)，得到标题化合物。
LC(方法1)：tR＝0.79min；质谱(ESI+)：m/z＝329[M+H]+。
步骤4：4-[(6-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲基]噻吩-2-甲酸
将4-[(6-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲基]噻吩-2-甲酸甲酯(515mg)、4M NaOH水溶液(784μL)、THF(5mL)及MeOH(5mL)的混合物在50℃下搅拌2.5h。在冷却至室温之后，添加EtOAC。在真空中蒸发有机溶剂，且用4M HCl水溶液(800μL)处理残余物。用EtOAC萃取水相两次。将合并有机相干燥(MgSO4)且在真空中浓缩，得到标题化合物。
LC(方法1)：tR＝0.71min；质谱(ESI+)：m/z＝315[M+H]+。
中间体12
4-[(6-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲基]-1-{[2-(三甲基硅烷基)乙氧基]甲基}-1H-吡咯-2-甲酸
步骤1：4-碘基-1-{[2-(三甲基硅烷基)乙氧基]甲基}-1H-吡咯-2-甲酸甲酯
在氩气下将4-碘基-1H-吡咯-2-甲酸甲酯(1g)溶解于DMF(8mL)中，冷却至0℃且用NaH(199mg，于矿物油中60％)处理。将混合物搅拌20min，且随后用2-(三甲基硅烷基)乙氧基甲基氯(SEM-Cl，742μL)逐滴处理。将混合物在0℃下搅拌20min，在室温下搅拌20min，且随后分配于水与EtOAC之间。添加4M HCl水溶液直至达到6至7的pH为止。分离各相且用EtOAC萃取水相。将合并有机相干燥(MgSO4)且在真空中浓缩。使残余物进行硅胶色谱(石油醚/EtOAC 100:0→90:10)，得到标题化合物。
LC(方法1)：tR＝1.23min；质谱(ESI+)：m/z＝404[M+Na]+。
步骤2：4-[(6-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)(羟基)甲基]-1-{[2-(三甲基硅烷基)乙氧基]甲基}-1H-吡咯-2-甲酸甲酯
在-80℃下向于THF(15mL)中的4-碘基-1-{[2-(三甲基硅烷基)乙氧基]甲基}-1H-吡咯-2-甲酸甲酯(1.18g)的溶液中逐滴添加异丙基氯化镁-氯化锂络合物(iPrMgCl×LiCl，2.5mL于THF中的1.3M溶液)。将混合物搅拌1h，且随后用于THF(6mL)中的6-{3-氮杂双环-[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-甲醛(644mg)的溶液逐滴处理。在搅拌1.5h之后，通过添加10％ NH4Cl水溶液淬灭反应物。分离各相且用EtOAC萃取水相。将合并有机相干燥(MgSO4)且在真空中浓缩，得到标题化合物。
LC(方法3)：tR＝0.90min；质谱(ESI+)：m/z＝548[M+H]+。
步骤3：4-[(6-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲基]-1-{[2-(三甲基硅烷基)乙氧基]-甲基}-1H-吡咯-2-甲酸甲酯
将4-[(6-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)(羟基)甲基]-1-{[2-(三甲基硅烷基)乙氧基]-甲基}-1H-吡咯-2-甲酸甲酯(1.56g)溶解于DCM(20mL)中且冷却至0℃。添加三乙基硅烷(3mL)及BF3xOEt2(1.17mL)，且将混合物搅拌40min，同时升温至室温。将混合物小心地分配于饱和NaHCO3水溶液与DCM之间。分离各相且用DCM萃取水相。将合并有机相干燥(MgSO4)且在真空中浓缩。使残余物进行硅胶色谱(石油醚/(EtOAC/MeOH 8:2)100:0→80:20)，得到标题化合物。
LC(方法1)：tR＝0.94min；质谱(ESI+)：m/z＝442[M+H]+。
步骤4：4-[(6-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲基]-1-{[2-(三甲基硅烷基)乙氧基]甲基}-1H-吡咯-2-甲酸
将4-[(6-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲基]-1-{[2-(三甲基硅烷基)-乙氧基]甲基}-1H-吡咯-2-甲酸甲酯(965mg)、4M NaOH水溶液(1.64mL)、THF(10mL)及MeOH(10mL)的混合物在45℃下搅拌22h。添加4M NaOH水溶液(0.55mL)且将混合物在60℃下搅拌5h。在冷却至室温之后，添加4M HCl水溶液(2.2mL)，且将混合物分配于EtOAC与盐水之间。分离各相且用EtOAC萃取水相两次。将合并有机相干燥(MgSO4)且在真空中浓缩，得到标题化合物。
LC(方法1)：tR＝0.88min；质谱(ESI+)：m/z＝428[M+H]+。
中间体13
4-[(6-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲基]-5-氰基噻吩-2-甲酸
步骤1：4-溴-5-氯噻吩-2-甲酸甲酯
将4,4-二溴-2-甲酸甲酯(2g)溶解于THF(25mL)中，冷却至-25℃且用异丙基氯化镁(iPrMgCl，3.3mL于THF中的2M溶液)缓慢地处理。将混合物搅拌30min，冷却至-60℃且用N-氯琥珀酰亚胺(0.89g)处理。随后，将混合物搅拌30min，同时升温至室温。将混合物分配于10％ NH4Cl水溶液与EtOAC之间。分离各相且用EtOAC萃取水相两次。将合并有机相干燥(MgSO4)且在真空中浓缩。用MeOH湿磨残余物。通过过滤收集标题化合物。
LC(方法1)：tR＝1.16min。
步骤2：4-[(6-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)(羟基)甲基]-5-氯噻吩-2-甲酸甲酯
在-20℃下向于THF(20mL)中的4-溴-5-氯噻吩-2-甲酸甲酯(900mg)的溶液中逐滴添加异丙基氯化镁-氯化锂络合物(iPrMgCl×LiCl，2.7mL于THF中的1.3M溶液)。将混合物搅拌30min，且随后用于THF(20mL)中的6-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-甲醛(712mg)的溶液逐滴处理。在于-20℃下搅拌30min且于室温下搅拌15min之后，通过添加1M HCl水溶液淬灭反应物。用DCM萃取水相。将有机相干燥(MgSO4)且在真空中浓缩，得到标题化合物。
LC(方法1)：tR＝0.79min；质谱(ESI+)：m/z＝379/381(Cl)[M+H]+。
步骤3：4-[(6-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲基]-5-氯噻吩-2-甲酸甲酯
将4-[(6-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)(羟基)甲基]-5-氯噻吩-2-甲酸甲酯(1.17g)溶解于DCM(20mL)中且冷却至0℃。添加三乙基硅烷(0.99mL)及BF3xOEt2(1.90mL)，且将混合物在室温下搅拌2h。再次添加三乙基硅烷(1.98mL)及BF3xOEt2(3.80mL)，且将混合物在室温下搅拌12h。将混合物小心地分配于饱和NaHCO3水溶液与DCM之间。分离各相且用DCM萃取水相。将合并有机相干燥(MgSO4)且在真空中浓缩。用EtOAC湿磨残余物，且通过过滤收集标题化合物。
LC(方法1)：tR＝0.84min；质谱(ESI+)：m/z＝363/265(Cl)[M+H]+。
步骤4：4-[(6-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲基]-5-氰基噻吩-2-甲酸甲酯
在氩气下将4-[(6-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲基]-5-氯噻吩-2-甲酸甲酯(150mg)、Zn(CN)2(27mg)、锌(5.1mg)及双(三-叔丁基膦)钯(0)(11mg)溶解于二甲基乙酰胺(1mL)中且加热至100℃达1h。在冷却至室温之后，将混合物分配于水与EtOAC之间。将有机相干燥(MgSO4)且在真空中浓缩。使残余物进行硅胶色谱(石油醚/EtOAC80:20)，得到标题化合物。
LC(方法1)：tR＝0.80min；质谱(ESI+)：m/z＝354[M+H]+。
步骤5：4-[(6-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲基]-5-氰基噻吩-2-甲酸
将4-[(6-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲基]-5-氰基噻吩-2-甲酸甲酯(58mg)、4M NaOH水溶液(100μL)、THF(1mL)及MeOH(1mL)的混合物在室温下搅拌30min。添加4M HCl水溶液(110μL)，将混合物搅拌10min，且随后在真空中蒸发，得到粗产物，其直接用于下一步骤中。
LC(方法1)：tR＝0.74min；质谱(ESI+)：m/z＝340[M+H]+。
中间体14
2-[(6-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲基]-2H-1,2,3,4-四唑-5-甲酸
步骤1：2-[(6-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲基]-2H-1,2,3,4-四唑-5-甲酸乙酯
将(6-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲醇(350mg)溶解于THF(20mL)中且冷却至0℃。添加1H-1,2,3,4-四唑-5-甲酸乙酯(244mg)及三苯膦(539mg)。逐滴添加二-异丙基-偶氮二甲酸酯(404μL)，且将混合物搅拌15min，且随后升温至室温。将混合物分配于水与EtOAC之间。将有机相干燥(MgSO4)且在真空中浓缩。使残余物进行硅胶色谱(石油醚/EtOAC 98:2→80:20)，得到标题化合物。
LC(方法1)：tR＝0.73min；质谱(ESI+)：m/z＝329[M+H]+。
步骤2：2-[(6-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲基]-2H-1,2,3,4-四唑-5-甲酸
将2-[(6-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲基]-2H-1,2,3,4-四唑-5-甲酸乙酯(60mg)、4M NaOH水溶液(200μL)及THF(1mL)及EtOH(1mL)的混合物在室温下搅拌1h。添加4M HCl水溶液(210μL)且在真空中蒸发溶剂。用EtOH湿磨残余物，得到标题化合物，其直接用于下一步骤中。
LC(方法1)：tR＝0.55min；质谱(ESI+)：m/z＝301[M+H]+。
中间体15
2-[(6-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲基]-2H-1,2,3-三唑-4-甲酸
步骤1：2-[(6-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲基]-2H-1,2,3-三唑-4-甲酸甲酯
将(6-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲醇(250mg)溶解于THF(20mL)中且冷却至0℃。添加1H-1,2,3-三唑-4-甲酸甲酯(156mg)及三苯膦(385mg)。逐滴添加二-异丙基-偶氮二甲酸酯(289μL)，且将混合物搅拌15min，且随后升温至室温。将混合物分配于水与EtOAC之间。将有机相干燥(MgSO4)且在真空中浓缩。使残余物进行硅胶色谱(石油醚/EtOAC 98:2→80:20)，得到标题化合物。
LC(方法1)：tR＝0.69min；质谱(ESI+)：m/z＝314[M+H]+。
步骤2：2-[(6-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲基]-2H-1,2,3-三唑-4-甲酸
将2-[(6-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲基]-2H-1,2,3-三唑-4-甲酸甲酯(120mg)、4M NaOH水溶液(2mL)及THF(3mL)及MeOH(3mL)的混合物在室温下搅拌1h。添加4M HCl水溶液(2.1mL)且在真空中蒸发溶剂，得到粗产物，其直接用于下一步骤中。
LC(方法1)：tR＝0.63min；质谱(ESI+)：m/z＝300[M+H]+。
中间体16
(6-{5-氮杂螺[2.3]己-5-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲醇
步骤1：6-{5-氮杂螺[2.3]己-5-基}-2-甲基吡啶-3-甲醛
将6-氯-2-甲基吡啶-3-甲醛(0.5g)、三氟乙酸5-氮杂螺[2.3]己烷(1.1g)及KHCO3(1.6g)悬浮于DMSO(70mL)中且加热至80℃达16h。将混合物冷却，分配于水与EtOAC之间且分离各相。用盐水洗涤有机相。在干燥(MgSO4)之后，在真空中蒸发溶剂。使残余物进行硅胶色谱(石油醚/EtOAC 99:1→50:50)，得到标题化合物。
LC(方法1)：tR＝0.59min；质谱(ESI+)：m/z＝203[M+H]+。
步骤2：(6-{5-氮杂螺[2.3]己-5-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲醇
在冰冷却下向于EtOH(6mL)中的6-{5-氮杂螺[2.3]己-5-基}-2-甲基吡啶-3-甲醛(487mg)的溶液中添加NaBH4(110mg)。将混合物在室温下搅拌1h。将混合物用2M NaHCO3水溶液缓慢地处理且用EtOAC萃取。将有机相用盐水洗涤且干燥(MgSO4)。在真空中蒸发溶剂，得到标题化合物。
LC(方法1)：tR＝0.62min；质谱(ESI+)：m/z＝205[M+H]+。
中间体17
(2-{6,6-二氟-3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-4-甲基嘧啶-5-基)甲醇
步骤1：2-{6,6-二氟-3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-4-甲基嘧啶-5-甲酸乙酯
将乙基-2-氯-4-甲基嘧啶-5-甲酸酯(5.0g)、6,6-二氟-3-氮杂双环[3.1.0]己烷盐酸盐(4.26g)及K2CO3(10.3g)悬浮于DMF(50mL)中且加热至90℃达1h。将混合物冷却，分配于水与EtOAC之间且分离各相。用盐水洗涤有机相。在干燥(MgSO4)之后，在真空中蒸发溶剂，得到标题化合物。
LC(方法1)：tR＝1.065min；质谱(ESI+)：m/z＝284[M+H]+。
步骤2：(2-{6,6-二氟-3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-4-甲基嘧啶-5-基)甲醇
向于THF(20mL)中的2-{6,6-二氟-3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-4-甲基嘧啶-5-甲酸乙酯(7.15g)溶液中添加LiBH4(16.62mL；于THF中的2M溶液)。将混合物搅拌20min，添加MeOH(2.0mL)且在室温下继续搅拌16h。在冷却至0℃之后，将混合物用水缓慢地处理且搅拌10min。随后，用EtOAC萃取混合物且在真空中蒸发溶剂，得到标题化合物。
LC(方法1)：tR＝0.64min；质谱(ESI+)：m/z＝242[M+H]+。
中间体18
(2-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-4-甲基嘧啶-5-基)甲醇
步骤1：2-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-4-甲基嘧啶-5-甲酸乙酯
将乙基-2-氯-4-甲基嘧啶-5-甲酸酯(1.0g)、3-氮杂双环[3.1.0]己烷盐酸盐(0.66g)及K2CO3(2.1g)悬浮于DMF(15mL)中且加热至100℃达1h。将混合物冷却，分配于水与EtOAC之间且分离各相。用盐水洗涤有机相。在干燥(MgSO4)之后，在真空中蒸发溶剂，得到标题化合物。
LC(方法1)：tR＝1.04min；质谱(ESI+)：m/z＝248[M+H]+。
步骤2：(2-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-4-甲基嘧啶-5-基)甲醇
将于THF(10mL)中的2-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-4-甲基嘧啶-5-甲酸乙酯(1.2g)的溶液在冰/丙酮浴中冷却，且添加二异丁基氢化铝(10mL；于THF中的1M溶液)。将混合物在冷却下搅拌1h。将混合物用水(0.75mL)及4MNaOH水溶液(0.75mL)缓慢地处理，搅拌30min且经由硅藻土垫过滤。在干燥(MgSO4)之后，在真空中浓缩混合物，且使残余物进行硅胶色谱(EtOAC/MeOH 100:0→50:50)。在真空中蒸发溶剂，得到标题化合物。
LC(方法1)：tR＝0.58min；质谱(ESI+)：m/z＝206[M+H]+。
中间体19
(2-{5-氮杂螺[2.3]己-5-基}-4-甲基嘧啶-5-基)甲醇
与中间体18类似地制备中间体19。
起始材料步骤1：DMF(10mL)中的乙基-2-氯-4-甲基嘧啶-5-甲酸酯(1g)、三氟乙酸5-氮杂螺[2.3]己烷(1.1g)、K2CO3(1.45g)。
LC(方法1)：tR＝1.00min；质谱(ESI+)：m/z＝248[M+H]+。
起始材料步骤2：5mL THF中的2-{5-氮杂螺[2.3]己-5-基}-4-甲基嘧啶-5-甲酸乙酯(0.659g)、二异丁基氢化铝(7mL于THF中的1M溶液)。
LC(方法1)：tR＝0.60min；质谱(ESI+)：m/z＝206[M+H]+。
中间体20
7-[(6-{6,6-二氟-3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-5-甲酸甲酯
将(6-{6,6-二氟-3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲醇(150mg)溶解于THF(8mL)中且冷却至-10℃。添加7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-5-甲酸甲酯(120mg)、三丁基膦(585μL)。缓慢地逐份添加二-叔丁基-偶氮二甲酸酯(480mg)，且在室温下搅拌混合物直至反应完成为止。添加水，且用EtOAC萃取混合物。将有机相用盐水洗涤，干燥(MgSO4)且在真空中浓缩。使残余物进行硅胶色谱(石油醚/EtOAC 80:20→0:100)，得到标题化合物。
LC(方法1)：tR＝0.67min；质谱(ESI+)：m/z＝400[M+H]+。
与中间体20类似地制备中间体21-40：
中间体40b
3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1H-吡唑-4-甲酸甲酯
将3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1H-吡唑-4-甲酸(1g)溶解于MeOH(50mL)中。添加亚硫酰氯(3mL)，将混合物在50℃下搅拌16h，且随后在真空中浓缩。将残余物溶解于MeOH中，经由PL-HCO3 MP SPE滤筒过滤，用MeOH洗涤且在真空中浓缩，得到标题化合物。
LC(方法1)：tR＝0.73min；质谱(ESI+)：m/z＝207[M+H]+。
中间体41
1-[(6-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲基]-3-氯-1H-吡唑-4-甲酸
将1-[(6-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲基]-3-氯-1H-吡唑-4-甲酸乙酯(124mg)、于水中的1M NaOH(2mL)、EtOH(2mL)及1,4-二噁烷(5mL)混合物在50℃下搅拌～2h。在冷却至室温之后，添加4M HCl水溶液(0.5mL)且在真空中蒸发溶剂，得到标题化合物(含有NaCl)。
LC(方法1)：tR＝0.71min；质谱(ESI+)：m/z＝333/335(Cl)[M+H]+。
与中间体41类似地制备中间体42-61：
中间体62
1-[(6-{5-氮杂螺[2.3]己-5-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲基]-1H-吡唑-4-甲酸
步骤1：1-[(6-氟-2-甲基吡啶-3-基)甲基]-1H-吡唑-4-甲酸乙酯
将(6-氟-2-甲基吡啶-3-基)甲醇(4.12g)溶解于THF(50mL)中且冷却至-10℃。添加1H-吡唑-4-甲酸乙酯(4.43g)及三丁基膦(9mL)。缓慢地逐份添加二-叔丁基-偶氮二甲酸酯(7.4g)，将混合物在室温下搅拌45min且在真空中浓缩。使残余物进行硅胶色谱(环己烷/EtOAC)，得到标题化合物。
LC(方法2)：tR＝0.88min；质谱(ESI+)：m/z＝264[M+H]+。
步骤2：1-[(6-{5-氮杂螺[2.3]己-5-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲基]-1H-吡唑-4-甲酸
将1-[(6-氟-2-甲基吡啶-3-基)甲基]-1H-吡唑-4-甲酸乙酯(0.5g)溶解于DMSO(2mL)中。添加三氟乙酸5-氮杂螺[2.3]己烷(1.2g)及DIPEA(2mL)，且将混合物在100℃下搅拌16h且在120℃下再搅拌5h。在冷却至室温之后，移除N,N-二异丙基-乙基胺相，添加4MNaOH(4mL)且在60℃下搅拌2h。添加4M HCl水溶液(4mL)，且通过HPLC反相(ACN、水)纯化混合物，得到标题化合物。
LC(方法1)：tR＝0.68min；质谱(ESI+)：m/z＝299[M+H]+。
中间体63
7-[(2-{5-氮杂螺[2.3]己-5-基}-4-甲基嘧啶-5-基)甲基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-5-甲酸
步骤1：(2-氯-4-甲基嘧啶-5-基)甲醇
将2-氯-4-甲基嘧啶-5-甲酸(7g)溶解于二甲氧基乙烷(200mL)中，且添加N-甲基吗啉(4.2mL)。将混合物冷却至0℃，添加氯甲酸异丁酯(5.1mL)，且将混合物在0℃下搅拌30min。随后，将混合物经由硅藻土过滤，冷却至0℃，添加于水(20mL)中的NaBH4(1.6g)的溶液，且将混合物搅拌15min。添加水，且用EtOAC萃取混合物。将有机相用盐水洗涤，干燥(MgSO4)且在真空中浓缩。使残余物进行硅胶色谱(DCM/MeOH 97:3→50:50)，得到标题化合物。
LC(方法1)：tR＝0.50min；质谱(ESI+)：m/z＝159/161(Cl)[M+H]+。
步骤2：7-[(2-氯-4-甲基嘧啶-5-基)甲基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-5-甲酸甲酯
将(2-氯-4-甲基嘧啶-5-基)甲醇(475mg)溶解于THF(10mL)及DMSO(2mL)中且冷却至-10℃。添加7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-5-甲酸甲酯(530mg)、三丁基膦(890μL)。缓慢地逐份添加二-叔丁基-偶氮二甲酸酯(750mg)，且将混合物在室温下搅拌约30min。通过HPLC反相(ACN、水)纯化混合物，得到标题化合物。
LC(方法1)：tR＝0.80min；质谱(ESI+)：m/z＝318/320(Cl)[M+H]+。
步骤3：7-[(2-{5-氮杂螺[2.3]己-5-基}-4-甲基嘧啶-5-基)甲基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-5-甲酸
将7-[(2-氯-4-甲基嘧啶-5-基)甲基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-5-甲酸甲酯(200mg)溶解于DMSO(2mL)中。添加三氟乙酸5-氮杂螺[2.3]己烷(250mg)及DIPEA(0.35mL)，且将混合物在80℃下搅拌6h。在冷却至室温之后，添加4M NaOH(1mL)且在60℃下搅拌2h。添加4M HCl水溶液(1mL)，且通过HPLC反相(ACN、水)纯化混合物，得到标题化合物。
LC(方法1)：tR＝0.72min；质谱(ESI+)：m/z＝351[M+H]+。
中间体64
1-[(6-氟-2-甲基吡啶-3-基)甲基]-N-[(6R)-3-甲基-2-{[2-(三甲基硅烷基)乙氧基]甲基}-2H,4H,5H,6H-环戊二烯并[c]吡唑-6-基]-1H-吡唑-4-甲酰胺
步骤1：1-[(6-氟-2-甲基吡啶-3-基)甲基]-1H-吡唑-4-甲酸
将1-[(6-氟-2-甲基吡啶-3-基)甲基]-1H-吡唑-4-甲酸乙酯(9.1g)溶解于THF(150mL)中，添加于水(15mL)中的LiOH(1.7g)的溶液，且将混合物在60℃下搅拌3d。添加乙酸(3.8mL)，且在真空中浓缩混合物。添加水，且用DCM/异丙醇9:1萃取混合物。将有机相用盐水洗涤，干燥(MgSO4)且在真空中浓缩，得到标题化合物。
LC(方法1)：tR＝0.72min；质谱(ESI+)：m/z＝236[M+H]+。
步骤2：1-[(6-氟-2-甲基吡啶-3-基)甲基]-N-[(6R)-3-甲基-2-{[2-(三甲基硅烷基)乙氧基]甲基}-2H,4H,5H,6H-环戊二烯并[c]吡唑-6-基]-1H-吡唑-4-甲酰胺
向于DMF(10mL)中的1-[(6-氟-2-甲基吡啶-3-基)甲基]-1H-吡唑-4-甲酸(1g)的溶液中添加DIPEA(900μL)及O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基脲鎓-六氟磷酸盐(HATU，1.8g)，且将混合物搅拌5min。添加(6R)-3-甲基-2-{[2-(三甲基硅烷基)乙氧基]-甲基}-2H,4H,5H,6H-环戊二烯并[c]吡唑-6-胺(1.15g)，且将混合物搅拌1h。将混合物分配于水与EtOAC之间。将有机相用盐水洗涤，干燥(MgSO4)且在真空中蒸发溶剂。使残余物进行硅胶色谱(DCM/MeOH 98:2)，得到标题化合物。
LC(方法1)：tR＝1.08min；质谱(ESI+)：m/z＝485[M+H]+。
中间体65
1-[(2-{6,6-二氟-3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-4-甲基嘧啶-5-基)甲基]-1H-吡唑-4-甲酸，锂盐
步骤1：1-[(2-{6,6-二氟-3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-4-甲基嘧啶-5-基)甲基]-1H-吡唑-4-甲酸乙酯
将2-{6,6-二氟-3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-4-甲基嘧啶-5-基)甲醇(100mg)溶解于THF(2mL)中且冷却至0℃。添加1H-吡唑-4-甲酸乙酯(58mg)及三苯膦(120mg)。添加二-叔丁基-偶氮二甲酸酯(105mg)，且将混合物搅拌3h，同时升温至室温。添加饱和NaHCO3水溶液，将混合物剧烈搅拌10min，且随后用EtOAC萃取。将有机相用盐水洗涤，干燥(MgSO4)且在真空中浓缩。使残余物进行硅胶色谱(环己烷/EtOAC 50:50→0:100)，得到标题化合物。
LC(方法1)：tR＝0.94min；质谱(ESI+)：m/z＝364[M+H]+。
步骤2：1-[(2-{6,6-二氟-3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-4-甲基嘧啶-5-基)甲基]-1H-吡唑-4-甲酸，锂盐
将1-[(2-{6,6-二氟-3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-4-甲基嘧啶-5-基)甲基]-1H-吡唑-4-甲酸乙酯(74mg)、THF(2mL)、水(0.5mL)、MeOH(1mL)及LiOH(7.3mg)的混合物在50℃下搅拌12h。在真空中蒸发溶剂，得到标题化合物。
LC(方法1)：tR＝0.77min；质谱(ESI+)：m/z＝336[M-Li+2H]+。
中间体66
1-[(2-{6,6-二氟-3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-4-甲基嘧啶-5-基)甲基]-1H-1,2,3-三唑-4-甲酸
步骤1：3-[5-(叠氮基甲基)-4-甲基嘧啶-2-基]-6,6-二氟-3-氮杂双环[3.1.0]己烷
在氩气下将DBU(1.5mL)添加至于甲苯(15mL)及ACN(15mL)中的(2-{6,6-二氟-3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-4-甲基嘧啶-5-基)甲醇(2g)的溶液中。将混合物冷却至0℃，且在1h内逐滴添加二苯基磷酰基叠氮化物(1.9mL)。将混合物搅拌12h，同时升温至室温。随后，将混合物分配于EtOAC与5％NaHCO3水溶液之间。将有机相用盐水洗涤，干燥(MgSO4)且在真空中浓缩。使残余物进行硅胶色谱(环己烷/EtOAC 70:30→50:50)，得到标题化合物。
LC(方法1)：tR＝0.90min；质谱(ESI+)：m/z＝267[M+H]+。
步骤2：1-[(2-{6,6-二氟-3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-4-甲基嘧啶-5-基)甲基]-1H-1,2,3-三唑-4-甲酸乙酯
将3-[5-(叠氮基甲基)-4-甲基嘧啶-2-基]-6,6-二氟-3-氮杂双环[3.1.0]己烷(1.45g)、丙炔酸乙酯(0.42mL)、CuSO4(88mg)及L-抗坏血酸钠盐(656mg)溶解于叔丁醇(20mL)及水(20mL)中，且在室温下搅拌12h。添加丙炔酸乙酯(0.42mL)、CuSO4(88mg)及L-抗坏血酸钠盐(656mg)，且将混合物再搅拌12h。随后，将混合物分配于DCM与半饱和NaHCO3水溶液之间。将有机相用盐水洗涤，干燥(MgSO4)且在真空中浓缩，得到标题化合物。
LC(方法2)：tR＝0.92min；质谱(ESI+)：m/z＝365[M+H]+。
步骤3：1-[(2-{6,6-二氟-3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-4-甲基嘧啶-5-基)甲基]-1H-1,2,3-三唑-4-甲酸
将1-[(2-{6,6-二氟-3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-4-甲基嘧啶-5-基)甲基]-1H-1,2,3-三唑-4-甲酸乙酯(1.45g)、THF(10mL)、水(10mL)、MeOH(5mL)及LiOH(251mg)的混合物在室温下搅拌48h。将混合物冷却至0℃，且用1MHCl水溶液(6mL)处理。通过过滤收集所沉淀的产物且在真空中干燥。
LC(方法1)：tR＝0.76min；质谱(ESI+)：m/z＝337[M+H]+。
中间体67
1-[(6-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲基]-1H-1,2,3-三唑-4-甲酸
步骤1：3-[5-(叠氮基甲基)-6-甲基吡啶-2-基]-3-氮杂双环[3.1.0]己烷
在氩气下将DBU(0.5mL)添加至于甲苯(5mL)及ACN(5mL)中的(6-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲醇(500mg)的溶液中。将混合物冷却至0℃，且在1h内逐滴添加二苯基磷酰基叠氮化物(0.5mL)。将混合物搅拌2h，同时升温至室温。随后，将混合物分配于EtOAC与饱和Na2CO3水溶液之间。将有机相用盐水洗涤，干燥(MgSO4)且在真空中浓缩。使残余物进行硅胶色谱(环己烷/EtOAC 90:10→40:60)，得到标题化合物。
LC(方法1)：tR＝0.70min；质谱(ESI+)：m/z＝230[M+H]+。
步骤2：1-[(6-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲基]-1H-1,2,3-三唑-4-甲酸乙酯
将3-[5-(叠氮基甲基)-6-甲基吡啶-2-基]-3-氮杂双环[3.1.0]己烷(350mg)、丙炔酸乙酯(0.18mL)、CuSO4(80mg)及L-抗坏血酸钠盐(306mg)溶解于叔丁醇(6mL)及水(6mL)中，且在室温下搅拌6h。添加丙炔酸乙酯(0.1mL)、CuSO4(40mg)及L-抗坏血酸钠盐(200mg)，且将混合物再搅拌12h。随后，将混合物分配于DCM与水之间。将有机相用盐水洗涤，干燥(MgSO4)且浓缩。使残余物进行硅胶色谱(环己烷/EtOAC 90:10→0:100)，得到标题化合物。
LC(方法1)：tR＝0.69min；质谱(ESI+)：m/z＝328[M+H]+。
步骤3：1-[(6-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲基]-1H-1,2,3-三唑-4-甲酸
将1-[(6-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲基]-1H-1,2,3-三唑-4-甲酸乙酯(40mg)、EtOH(2mL)及1M NaOH水溶液(400μL)的混合物在室温下搅拌16h。在添加1M HCl水溶液(400μL)之后，在真空中蒸发溶剂，得到粗产物，其直接用于下一步骤中。
LC(方法1)：tR＝0.57min；质谱(ESI+)：m/z＝300[M+H]+。
中间体68
1-[(6-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲基]-N-[(6R)-3-甲基-2-{[2-(三甲基硅烷基)乙氧基]甲基}-2H,4H,5H,6H-环戊二烯并[c]吡唑-6-基]-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺
向于DMF(1mL)中的1-[(6-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲基]-1H-1,2,3-三唑-4-甲酸(32mg)的溶液中添加DIPEA(28μL)及O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基脲鎓-六氟磷酸盐(HATU，20mg)，且将混合物搅拌10min。添加(6R)-3-甲基-2-{[2-(三甲基硅烷基)乙氧基]甲基}-2H,4H,5H,6H-环戊二烯并[c]吡唑-6-胺(14.3mg)，且将混合物搅拌12h。将混合物分配于水与EtOAC之间。将有机相用盐水洗涤且干燥(MgSO4)。在真空中蒸发溶剂，得到标题化合物。
LC(方法1)：tR＝0.95min；质谱(ESI+)：m/z＝549[M+H]+。
中间体69
1-[(2-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-4-甲基嘧啶-5-基)甲基]-1H-1,2,3-三唑-4-甲酸
步骤1：3-[5-(叠氮基甲基)-4-甲基嘧啶-2-基]-3-氮杂双环[3.1.0]己烷
在氩气下将DBU(11.2mL)添加至于甲苯(80mL)及ACN(80mL)中的(2-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-4-甲基嘧啶-5-基)甲醇(3.88g)的溶液中。将混合物冷却至0℃，且在1h内逐滴添加二苯基磷酰基叠氮化物(14.7mL)。将混合物搅拌12h，同时升温至室温。随后，将混合物分配于EtOAC与半饱和NaHCO3水溶液之间。用EtOAC萃取水相三次。用盐水洗涤合并有机相。添加MgSO4及硅胶，且将混合物搅拌30min。将固体过滤出，且在真空中蒸发溶剂，得到标题化合物。
LC(方法1)：tR＝0.75min；质谱(ESI+)：m/z＝231[M+H]+。
步骤2：1-[(2-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-4-甲基嘧啶-5-基)甲基]-1H-1,2,3-三唑-4-甲酸乙酯
将3-[5-(叠氮基甲基)-4-甲基嘧啶-2-基]-3-氮杂双环[3.1.0]己烷(15.8g)、丙炔酸乙酯(6.2mL)、CuSO4(1.8g)及L-抗坏血酸钠盐(11.1g)溶解于叔丁醇(200mL)及水(200mL)中，且在室温下搅拌5d。随后，将混合物分配于DCM与饱和NaHCO3水溶液之间。用DCM萃取水相两次，且将合并有机相用盐水洗涤，干燥(MgSO4)且浓缩。使残余物进行硅胶色谱(环己烷/EtOAC/MeOH 30:70:0→0:90:10)，得到标题化合物。
LC(方法1)：tR＝0.79min；质谱(ESI+)：m/z＝329[M+H]+。
步骤3：1-[(2-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-4-甲基嘧啶-5-基)甲基]-1H-1,2,3-三唑-4-甲酸
将1-[(2-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-4-甲基嘧啶-5-基)甲基]-1H-1,2,3-三唑-4-甲酸乙酯(16.1g)、EtOH(150mL)及4M NaOH水溶液(15mL)的混合物在50℃下搅拌12h。在真空中浓缩混合物。在添加4M HCl水溶液(15mL)之后，将混合物搅拌1h。通过过滤收集沉淀物，用水洗涤且在真空中干燥，得到标题化合物。
LC(方法1)：tR＝0.65min；质谱(ESI+)：m/z＝301[M+H]+。
中间体70
1-[(2-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-4-甲基嘧啶-5-基)甲基]-N-[(6R)-3-甲基-2-{[2-(三甲基硅烷基)乙氧基]甲基}-2H,4H,5H,6H-环戊二烯并[c]吡唑-6-基]-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺
向于DMF(0.5mL)中的1-[(2-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-4-甲基嘧啶-5-基)甲基]-1H-1,2,3-三唑-4-甲酸(50mg)的溶液中添加DIPEA(60μL)及O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基脲鎓-六氟磷酸盐(HATU，66mg)，且将混合物搅拌5min。添加(6R)-3-甲基-2-{[2-(三甲基硅烷基)乙氧基]甲基}-2H,4H,5H,6H-环戊二烯并[c]吡唑-6-胺(47mg)，且将混合物搅拌6h。通过HPLC反相(ACN、水)纯化混合物，得到标题化合物。
LC(方法2)：tR＝1.16min；质谱(ESI+)：m/z＝550[M+H]+。
中间体71
1-[(6-{5-氮杂螺[2.3]己-5-基}-2-甲基嘧啶-3-基)甲基]-1H-咪唑-4-甲酸乙酯
将(2-{5-氮杂螺[2.3]己-5-基}-4-甲基嘧啶-5-基)甲醇(100mg)及1H-咪唑-4-甲酸乙酯(85mg)溶解于ACN(10mL)中，添加对甲苯磺酸(55mg)，且在90℃下搅拌混合物直至反应完成(～5h)为止。通过HPLC反相(ACN、水)纯化混合物，得到标题化合物。
LC(方法2)：tR＝0.85min；质谱(ESI+)：m/z＝328[M+H]+。
与中间体71类似地制备中间体72-76：
与中间体41类似地制备中间体77-82：
中间体83
1-({6-[(1R,5S,6R)-6-(羟甲基)-3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基]-2-甲基吡啶-3-基}甲基)-N-[(6R)-3-甲基-2-{[2-(三甲基硅烷基)乙氧基]甲基}-2H,4H,5H,6H-环戊二烯并[c]吡唑-6-基]-1H-吡唑-4-甲酰胺
将1-[(6-氟-2-甲基吡啶-3-基)甲基]-N-[(6R)-3-甲基-2-{[2-(三甲基硅烷基)乙氧基]甲基}-2H,4H,5H,6H-环戊二烯并[c]吡唑-6-基]-1H-吡唑-4-甲酰胺(60mg)、[(1R,5S,6R)-3-氮杂双环[3.1.0]-己-6-基]甲醇盐酸盐(参见：Bioorg.Med.Chem.Lett.2010,4741-4744；80mg)及于DMSO(1mL)中的DIPEA(100μL)的混合物加热4h至60℃。添加[(1R,5S,6R)-3-氮杂双环[3.1.0]己-6-基]甲醇盐酸盐(60mg)及DIPEA(75μL)，且将混合物搅拌24h至110℃。将混合物用EtOAC稀释且用水及盐水连续洗涤。将有机相干燥(MgSO4)且在真空中浓缩。使残余物进行色谱化Al2O3(DCM/MeOH 95:5→85:15)，得到标题化合物。
LC(方法1)：tR＝0.98min；质谱(ESI+)：m/z＝578[M+H]+。
中间体84
[(1R,5S,6S)-3-[5-(羟甲基)-6-甲基吡啶-2-基]-3-氮杂双环[3.1.0]己-6-基]甲醇
类似于中间体16制备中间体84。
起始材料步骤1：DMSO(5mL)中的6-氯-2-甲基吡啶-3-甲醛(280mg)、[(1R,5S,6S)-3-氮杂双环[3.1.0]己-6-基]甲醇盐酸盐(444mg)、K2CO3(400mg)。
LC(方法2)：tR＝0.76min；质谱(ESI+)：m/z＝233[M+H]+。
起始材料步骤2：EtOH(4mL)及THF(1.5mL)中的6-[(1R,5S,6S)-6-(羟甲基)-3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基]-2-甲基吡啶-3-甲醛(74mg)、硼氢化钠(18mg)。
LC(方法2)：tR＝0.71min；质谱(ESI+)：m/z＝235[M+H]+。
中间体85
{2-甲基-6-[(1R,5S,6S)-6-甲基-3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基]吡啶-3-基}甲醇
类似于中间体16制备中间体85。
起始材料步骤1：DMF(5mL)中的6-氯-2-甲基吡啶-3-甲醛(283mg)、(1R,5S,6R)-6-甲基-3-氮杂双环[3.1.0]己烷盐酸盐(200mg)、K2CO3(500mg)。
LC(方法2)：tR＝1.01min；质谱(ESI+)：m/z＝217[M+H]+。
起始材料步骤2：EtOH(4mL)及THF(1mL)中的2-甲基-6-[(1R,5S,6S)-6-甲基-3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基]吡啶-3-甲醛(217mg)、硼氢化钠(93mg)。
LC(方法2)：tR＝0.91min；质谱(ESI+)：m/z＝219[M+H]+。
中间体86
(2-{5-氮杂螺[2.3]己-5-基}-4-甲基嘧啶-5-基)甲醇
类似于中间体17制备中间体86。
起始材料步骤1：DMF(5mL)中的乙基-2-氯-4-甲基嘧啶-5-甲酸酯(350mg)、(1R,5S,6R)-6-甲基-3-氮杂双环[3.1.0]己烷盐酸盐(200mg)、K2CO3(500mg)。
LC(方法2)：tR＝1.12min；质谱(ESI+)：m/z＝262[M+H]+。
起始材料步骤2：THF(5mL)中的2-{5-氮杂螺[2.3]己-5-基}-4-甲基嘧啶-5-甲酸乙酯(0.659g)、LiBH4(49mg)及MeOH(0.2mL)。
LC(方法2)：tR＝0.83min；质谱(ESI+)：m/z＝220[M+H]+。
与中间体71类似地制备中间体87-93：
与中间体41类似地制备中间体94-100：
中间体101
1-[(6-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲基]-3-(2-羟基丙-2-基)-1H-吡唑-4-甲酸
步骤1：1-[(6-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲基]-3-溴-1H-吡唑-4-甲酸乙酯
将[6-(3-氮杂-双环[3.1.0]己-3-基)-2-甲基-吡啶-3-基]-甲醇(612mg)溶解于THF(20mL)中且冷却至-10℃。添加5-溴-1H-吡唑-4-甲酸乙酯(690mg)及三丁基膦(667μL)。缓慢地逐份添加二-叔丁基-偶氮二甲酸酯(759mg)，且在室温下搅拌混合物直至反应完成为止。通过HPLC反相(ACN、水)纯化混合物，得到标题化合物。
LC(方法2)：tR＝1.14min；质谱(ESI+)：m/z＝405/407(Br)[M+H]+。
步骤2：1-[(6-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲基]-3-(丙-1-烯-2-基)-1H-吡唑-4-甲酸乙酯；三氟乙酸
在惰性氛围下将1-[(6-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲基]-3-溴-1H-吡唑-4-甲酸乙酯(122mg)、4,4,5,5-四甲基-2-(丙-1-烯-2-基)-1,3,2-二氧硼(100mg)及Cs2CO3(195mg)溶解于1,4-二噁烷(5mL)及水(1mL)中。
添加1,1'-双(二苯膦基)二茂铁钯(II)二氯化物DCM(7.4mg)，将混合物在100℃下搅拌2h。通过HPLC反相(TFA、ACN、水)纯化混合物，得到标题化合物。
LC(方法1)：tR＝0.85min；质谱(ESI+)：m/z＝367[M+H]+。
步骤3：1-[(6-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲基]-3-(2-羟基丙-2-基)-1H-吡唑-4-甲酸；三氟乙酸
将1-[(6-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲基]-3-(丙-1-烯-2-基)-1H-吡唑-4-甲酸乙酯；三氟乙酸(135mg)溶解于HCl水溶液(20mL；4M)中，在50℃下搅拌16h且在真空中浓缩。将残余物溶解于MeOH(5mL)及NaOH水溶液(3mL；1M)中，且在室温下搅拌1h。将混合物用HCl水溶液中和且通过HPLC反相(TFA、ACN、水)纯化，得到标题化合物。
LC(方法1)：tR＝0.72min；质谱(ESI+)：m/z＝357[M+H]+。
中间体102
1-[(6-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲基]-N-[(6R)-3-甲基-2-{[2-(三甲基硅烷基)乙氧基]甲基}-2H,4H,5H,6H-环戊二烯并[c]吡唑-6-基]-1H-1,2,4-三唑-3-甲酰胺
步骤1：1-[(6-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲基]-1H-1,2,4-三唑-3-甲酸甲酯
将(6-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲醇(100mg)及1H-1,2,4-三唑-3-甲酸甲酯(85mg)溶解于ACN(10mL)中，添加对甲苯磺酸(55mg)，且将混合物在85℃下搅拌12h。通过HPLC反相(ACN、水)纯化混合物，得到标题化合物。
LC(方法1)：tR＝0.63min；质谱(ESI+)：m/z＝314[M+H]+。
步骤2：1-[(6-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲基]-1H-1,2,4-三唑-3-甲酸
将1-[(6-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲基]-1H-1,2,4-三唑-3-甲酸甲酯(53mg)溶解于THF(1mL)及EtOH(1mL)中。添加4M KOH水溶液(106μL)，且将混合物在50℃下搅拌2h。随后，添加4M HCl水溶液(106μL)，且在真空中蒸发溶剂，得到标题化合物，其直接用于下一步骤中。
LC(方法1)：tR＝0.55min；质谱(ESI+)：m/z＝300[M+H]+。
步骤3：1-[(6-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲基]-N-[(6R)-3-甲基-2-{[2-(三甲基硅烷基)乙氧基]甲基}-2H,4H,5H,6H-环戊二烯并[c]吡唑-6-基]-1H-1,2,4-三唑-3-甲酰胺
向于DMF(0.5mL)中的1-[(6-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲基]-1H-1,2,4-三唑-3-甲酸(67mg)的溶液中添加DIPEA(86μL)及O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基脲鎓-六氟磷酸盐(HATU，32mg)，且将混合物搅拌10min。添加(6R)-3-甲基-2-{[2-(三甲基硅烷基)乙氧基]甲基}-2H,4H,5H,6H-环戊二烯并[c]吡唑-6-胺(23mg)，且将混合物搅拌2h。将混合物分配于水与EtOAC之间。用EtOAC萃取水相。干燥(MgSO4)合并有机相，且在真空中蒸发溶剂，得到标题化合物，其直接用于下一步骤中。
LC(方法1)：tR＝0.91min；质谱(ESI+)：m/z＝549[M+H]+。
中间体103
1-[(6-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲基]-3-{[(6R)-3-甲基-2-{[2-(三甲基硅烷基)乙氧基]甲基}-2H,4H,5H,6H-环戊二烯并[c]吡唑-6-基]胺甲酰基}-1H-吲哚-5-甲酸甲酯
步骤1：5-溴-1H-吲哚-3-甲酸甲酯
向于MeOH(50mL)中的5-溴-1H-吲哚-3-甲酸(5.2g)的溶液中逐滴添加亚硫酰氯(3.15mL)。将混合物在室温下搅拌12h。在真空中蒸发溶剂，且用二乙醚湿磨残余物。通过过滤收集沉淀物，得到标题化合物。
LC(方法1)：tR＝0.94min；质谱(ESI+)：m/z＝254/256(Br)[M+H]+。
步骤2：1-[(6-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲基]-5-溴-1H-吲哚-3-甲酸甲酯
将(6-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲醇(50mg)溶解于THF(2mL)中且冷却至0℃。添加5-溴-1H-吲哚-3-甲酸甲酯(65mg)及三丁基膦(85μL)。缓慢地逐份添加二-叔丁基-偶氮二甲酸酯(70mg)，且将混合物搅拌12h。添加饱和NaHCO3水溶液，将混合物剧烈搅拌10min，且随后用EtOAC萃取。将有机相用盐水洗涤，干燥(MgSO4)且在真空中浓缩。使残余物进行硅胶色谱(DCM/MeOH 95:5→80:20)，得到标题化合物。
LC(方法1)：tR＝0.95min；质谱(ESI+)：m/z＝440/442(Br)[M+H]+。
步骤3：1-[(6-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲基]-5-溴-1H-吲哚-3-甲酸
将1-[(6-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲基]-5-溴-1H-吲哚-3-甲酸甲酯(33mg)、于EtOH(150μL)及THF(2mL)中的1M KOH溶液的混合物在90℃下搅拌12h。随后，添加1M NaOH水溶液(150μL)，且将混合物在90℃下搅拌12h。将混合物用水稀释，通过添加乙酸来中和，且用DCM/异丙醇9:1萃取三次。将合并有机相用盐水洗涤，干燥(MgSO4)且在真空中蒸发，得到标题化合物，其直接用于下一步骤中。
LC(方法1)：tR＝0.86min；质谱(ESI+)：m/z＝426/428(Br)[M+H]+。
步骤4：1-[(6-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲基]-5-溴-N-[(6R)-3-甲基-2-{[2-(三甲基硅烷基)乙氧基]甲基}-2H,4H,5H,6H-环戊二烯并[c]吡唑-6-基]-1H-吲哚-3-甲酰胺
向于DMF(3mL)中的1-[(6-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲基]-5-溴-1H-吲哚-3-甲酸(30mg)的溶液中添加DIPEA(35μL)及O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基脲鎓-六氟磷酸盐(HATU,40mg)，且将混合物搅拌5min。添加(6R)-3-甲基-2-{[2-(三甲基硅烷基)乙氧基]甲基}-2H,4H,5H,6H-环戊二烯并[c]吡唑-6-胺(22mg)，且将混合物搅拌1h。将混合物分配于水与EtOAC之间。用乙酸乙酯萃取水相。干燥(MgSO4)合并有机相，且在真空中蒸发溶剂。使残余物进行硅胶色谱(DCM/MeOH 98:2→90:10)，得到标题化合物。
LC(方法1)：tR＝1.02min；质谱(ESI+)：m/z＝675/677(Br)[M+H]+。
步骤5：1-[(6-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲基]-3-{[(6R)-3-甲基-2-{[2-(三甲基硅烷基)乙氧基]甲基}-2H,4H,5H,6H-环戊二烯并[c]吡唑-6-基]胺甲酰基}-1H-吲哚-5-甲酸甲酯
用氩气吹扫1-[(6-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲基]-5-溴-N-[(6R)-3-甲基-2-{[2-(三甲基硅烷基)乙氧基]甲基}-2H,4H,5H,6H-环戊二烯并[c]吡唑-6-基]-1H-吲哚-3-甲酰胺(25mg)及于MeOH(10mL)中的三乙胺(50μL)的溶液达10min。添加1,1'-双(二苯膦基)二茂铁-钯(II)二氯化物(10mg)，且将混合物在100℃下在一氧化碳氛围(8巴)下搅拌20h。随后，在真空中蒸发溶剂，且使残余物进行硅胶色谱(石油醚/EtOAC 90:10→0:100)，得到标题化合物。
LC(方法1)：tR＝0.97min；质谱(ESI+)：m/z＝655[M+H]+。
中间体104
(6R)-3-甲基-1H,4H,5H,6H-环戊二烯并[c]吡唑-6-胺二盐酸盐
将于MeOH(20mL)中的(6R)-3-甲基-2-{[2-(三甲基硅烷基)乙氧基]甲基}-2H,4H,5H,6H-环戊二烯并[c]吡唑-6-胺(1.58g)的溶液用于1,4-二噁烷中的4N HCl(6mL)处理且搅拌12h。在真空下浓缩反应混合物，且将残余物溶解于浓盐酸(10mL)中。将混合物音波处理10min且在真空下浓缩。将残余物溶解于水及ACN中，且通过冷冻干燥移除溶剂，得到标题化合物，其直接用于下一步骤中。
质谱(ESI+)：m/z＝138[M+H]+。
中间体105
5-[(6-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲基]-1H-吡咯-2-甲酸
步骤1：5-溴-1-{[2-(三甲基硅烷基)乙氧基]甲基}-1H-吡咯-2-甲酸乙酯
将5-溴-1H-吡咯-2-甲酸乙酯(1g)溶解于THF(15mL)中，用三乙胺(767μL)处理且搅拌10min。添加2-(三甲基硅烷基)乙氧基甲基氯(SEM-Cl,846μL)，且将混合物搅拌1h。添加三乙胺(140μL)及2-(三甲基硅烷基)乙氧基甲基氯(SEM-Cl，160μL)，且继续搅拌45min。将混合物分配于水与EtOAC之间。用EtOAC萃取水相，且干燥(MgSO4)合并有机相。在真空中蒸发溶剂，且使残余物进行硅胶色谱(石油醚/EtOAC 100:0→95:5)，得到标题化合物。
LC(方法1)：tR＝1.30min；质谱(ESI+)：m/z＝370[M+Na]+。
步骤2：5-[(6-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)(羟基)甲基]-1-{[2-(三甲基硅烷基)乙氧基]甲基}-1H-吡咯-2-甲酸乙酯
在0℃下向于THF(9mL)中的5-溴-1-{[2-(三甲基硅烷基)乙氧基]甲基}-1H-吡咯-2-甲酸乙酯(750mg)的溶液中逐滴添加异丙基氯化镁-氯化锂络合物(iPrMgCl×LiCl，1.71mL于THF中的1.3M溶液)。将混合物在0℃下搅拌30min，且随后使其升温至室温。添加异丙基氯化镁-氯化锂络合物(iPrMgCl×LiCl，170μL于THF中的1.3M溶液)，将混合物搅拌10min，且随后用于THF(4.5mL)中的6-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-甲醛(450mg)的溶液处理。将混合物搅拌12h，且随后分配于饱和NH4Cl水溶液与EtOAC之间。用EtOAC萃取水溶液，且干燥(MgSO4)合并有机相。在真空中蒸发溶剂，且通过HPLC反相(ACN、水)纯化残余物，得到标题化合物。
LC(方法1)：tR＝0.98min；质谱(ESI+)：m/z＝472[M+H]+。
步骤3：5-[(6-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲基]-1-{[2-(三甲基硅烷基)乙氧基]甲基}-1H-吡咯-2-甲酸乙酯
将5-[(6-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)(羟基)甲基]-1-{[2-(三甲基硅烷基)乙氧基]-甲基}-1H-吡咯-2-甲酸乙酯(520mg)溶解于1,2-二氯乙烷(8mL)中且冷却至0℃。添加三乙基硅烷(711μL)及TFA(300μL)，且将混合物搅拌2h，同时升温至室温。添加三乙基硅烷(360μL)及TFA(150μL)，且将混合物再搅拌2h。将混合物小心地分配于饱和NaHCO3水溶液与DCM之间。分离各相且用DCM萃取水相。将合并有机相干燥(MgSO4)且在真空中浓缩，得到标题化合物。
LC(方法1)：tR＝1.04min；质谱(ESI+)：m/z＝456[M+H]+。
步骤4：5-[(6-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲基]-1H-吡咯-2-甲酸乙酯
将5-[(6-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲基]-1-{[2-(三甲基硅烷基)乙氧基]-甲基}-1H-吡咯-2-甲酸乙酯(520mg)、DCM(6mL)及TFA(3mL)的混合物在室温下搅拌3.5h。在真空中蒸发溶剂，将残余物溶解于于MeOH中的7M NH3中，且将混合物在室温下搅拌18h。在真空中蒸发溶剂，且通过HPLC反相(ACN、水)纯化残余物，得到标题化合物。
LC(方法1)：tR＝0.81min；质谱(ESI+)：m/z＝326[M+H]+。
步骤5：5-[(6-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲基]-1H-吡咯-2-甲酸
将5-[(6-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲基]-1H-吡咯-2-甲酸乙酯(150mg)、4M NaOH水溶液(500μL)、THF(2mL)及MeOH(2mL)的混合物在85℃下搅拌12h。在冷却至室温之后，添加4M HCl水溶液(500μL)，且将混合物分配于EtOAC与盐水之间。分离各相且用EtOAC萃取水相三次。将合并有机相干燥(MgSO4)且在真空中浓缩，得到标题化合物。
LC(方法1)：tR＝0.70min；质谱(ESI+)：m/z＝298[M+H]+。
与中间体71类似地制备中间体108-109：
与中间体41类似地制备中间体110-111：
中间体113
1-[(6-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-氰基吡啶-3-基)甲基]-1H-吡唑-4-甲酸乙酯
步骤1：2-溴-3-{[(叔丁基二甲基硅烷基)氧基]甲基}吡啶
在20℃下在氮气下向(2-溴吡啶-3-基)甲醇(25.0g)及于DMF(300mL)中的咪唑(18.1g)的混合物中添加叔丁基-二甲基-硅烷基氯(23.9g)，且随后将混合物在20℃下搅拌1h。将混合物用水(500mL)稀释且用EtOAC萃取。将合并有机层用盐水洗涤，干燥(NaSO4)，过滤且在减压下浓缩。通过硅胶色谱法(石油醚/EtOAC 50:1→10:1)纯化残余物，得到标题化合物。
TLC：Rf＝0.8(二氧化硅；石油醚/EtOAC 2:1)。
步骤2：3-{[(叔丁基二甲基硅烷基)氧基]甲基}吡啶-2-甲腈
用氮气吹扫2-溴-3-{[(叔丁基二甲基硅烷基)氧基]甲基}吡啶(8.0g)及于DMF(100mL)中的Zn(CN)2(6.2g)的混合物达5min。在20℃下在氮气下分批添加Pd(PPh3)4(1.5g)，且随后将混合物加热至120℃且搅拌4h。过滤混合物，且在减压下浓缩滤液。通过硅胶色谱法(石油醚/EtOAC 100:1→10:1)纯化残余物，得到标题化合物。
TLC：Rf＝0.4(二氧化硅；石油醚/EtOAC 5:1)。
步骤3：3-{[(叔丁基二甲基硅烷基)氧基]甲基}-2-氰基吡啶-1-鎓-1-醇盐
在20℃下在氮气下向于CHCl3(50mL)中的3-{[(叔丁基二甲基硅烷基)氧基]甲基}吡啶-2-甲腈(4.5g)的混合物中分批添加3-氯过苯甲酸(4.67g)。将混合物加热至70℃且搅拌16h。将饱和NaHCO3水溶液(10mL)添加至反应混合物中。将混合物用水(100mL)稀释及用DCM萃取三次。将合并有机层用盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤且在减压下浓缩。通过硅胶色谱法(石油醚/EtOAC 50:1→5:1)纯化残余物，得到标题化合物。
TLC：Rf＝0.1(二氧化硅；石油醚/EtOAC 5:1)。
步骤4：6-氯-3-(氯甲基)吡啶-2-甲腈
将于POCl3(30mL)中的3-{[(叔丁基二甲基硅烷基)氧基]甲基}-2-氰基吡啶-1-鎓-1-醇盐(3.5g)的混合物在80℃下搅拌1小时且在减压下浓缩。将混合物添加至饱和NaHCO3水溶液(10mL)中，且随后用水(100mL)稀释且用DCM萃取三次。将合并有机层用盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤且在减压下浓缩。通过硅胶色谱法(石油醚/EtOAC 50:1→2:1)纯化残余物，得到标题化合物。
质谱(ESI+)：m/z＝187/189(Cl)[M+H]+。
步骤5：1-[(6-氯-2-氰基吡啶-3-基)甲基]-1H-吡唑-4-甲酸乙酯
将6-氯-3-(氯甲基)吡啶-2-甲腈(37mg)及1H-吡唑-4-甲酸乙酯(30mg)溶解于THF(2mL)中，添加Cs2CO3(100mg)，且将混合物在室温下搅拌8h。通过HPLC反相(ACN、水)纯化混合物，得到标题化合物。
LC(方法2)：tR＝0.94min；质谱(ESI+)：m/z＝291/293(Cl)[M+H]+。
步骤6：1-[(6-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-氰基吡啶-3-基)甲基]-1H-吡唑-4-甲酸乙酯
将1-[(6-氯-2-氰基吡啶-3-基)甲基]-1H-吡唑-4-甲酸乙酯(30mg)、3-氮杂双环[3.1.0]己烷盐酸盐(25mg)及KHCO3(60mg)悬浮于DMSO(1mL)中，且在50℃下搅拌16h且在70℃下再搅拌8h。通过HPLC反相(ACN、水)纯化混合物，得到标题化合物。
LC(方法2)：tR＝1.05min；质谱(ESI+)：m/z＝338(Cl)[M+H]+。
中间体114
(6-{5-氮杂螺[2.3]己-5-基}吡啶-3-基)甲醇
步骤1：6-{5-氮杂螺[2.3]己-5-基}吡啶-3-甲酸甲酯
将6-氟吡啶-3-甲酸甲酯(155mg)、5-氮杂螺[2.3]己烷三氟乙酸酯(300mg)及于DMF(5mL)中的K2CO3(500mg)的混合物在室温下搅拌12h。将混合物过滤，在真空中浓缩且通过HPLC反相(ACN、水)纯化，得到标题化合物。
LC(方法1)：tR＝0.69min；质谱(ESI+)：m/z＝219[M+H]+。
步骤2：(6-{5-氮杂螺[2.3]己-5-基}吡啶-3-基)甲醇
向于THF(3mL)中的6-{5-氮杂螺[2.3]己-5-基}吡啶-3-甲酸甲酯(172mg)溶液中添加LiBH4(27mg)及MeOH(100μL)。将混合物在60℃下搅拌12h。添加LiBH4(5mg)，且将混合物在60℃下搅拌2h。添加LiBH4(5mg)，且将混合物在60℃下搅拌1h。将混合物冷却至室温，用1M HCl水溶液(1.5mL)处理，在真空中浓缩且通过HPLC反相(ACN、水)纯化，得到标题化合物。
LC(方法2)：tR＝0.76min；质谱(ESI+)：m/z＝191[M+H]+。
中间体115
6-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}吡啶-3-基)甲醇
步骤1：6-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}吡啶-3-甲酸甲酯
将6-氟吡啶-3-甲酸甲酯(6g)、3-氮杂双环[3.1.0]己烷盐酸盐(4.7g)及于DMF(60mL)中的K2CO3(14g)的混合物在室温下搅拌12h。用水稀释混合物。通过过滤收集沉淀物，用水洗涤且在真空中干燥，得到标题化合物。
LC(方法1)：tR＝0.66min；质谱(ESI+)：m/z＝219[M+H]+。
步骤2：6-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}吡啶-3-基)甲醇
向于THF(60mL)中的6-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}吡啶-3-甲酸甲酯(8g)溶液中添加LiBH4(20mL于THF中的2M溶液)及MeOH(3mL)。将混合物在60℃下搅拌12h。添加LiBH4(5mL于THF中的2M溶液)，且将混合物在60℃下搅拌2h。将混合物冷却至室温，用水(5mL)处理，在真空中浓缩且分配于水与EtOAC之间。用EtOAC萃取水相，且干燥(MgSO4)合并有机相。将残余物溶解于DCM中且经硅胶过滤，将其用DCM进一步冲洗。在真空中浓缩合并有机相，得到标题化合物。
LC(方法2)：tR＝0.79min；质谱(ESI+)：m/z＝191[M+H]+。
实施例合成：
实施例1
1-[(6-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲基]-N-{3-甲基-1H,4H,5H,6H-环戊二烯并[c]吡唑-6-基}-1H-吡唑-4-甲酰胺
将1-[(6-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲基]-1H-吡唑-4-甲酸(17mg)、DIPEA (40μL)及于DMF(2mL)中的O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基脲鎓-六氟磷酸盐(HATU，22mg)的溶液搅拌5min。添加3-甲基-1H,4H,5H,6H-环戊二烯并[c]吡唑-6-胺二盐酸盐(10mg)，且将混合物搅拌1h。通过HPLC反相(ACN、水)纯化混合物，得到标题化合物。
LC(方法2)：tR＝0.94min；质谱(ESI+)：m/z＝418[M+H]+。
实施例2
1-[(6-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲基]-N-[(6S)-3-甲基-1H,4H,5H,6H-环戊二烯并[c]吡唑-6-基]-1H-吡唑-4-甲酰胺
在进行手性相SFC分离后自外消旋混合物获得标题化合物(管柱：CHIRALAmylose SA，5μm，250mm×20mm；洗脱剂：scCO2/(于MeOH中的20mM NH3)70:30，40℃，120巴，10mL/min)；tR＝4.1min。
LC(方法1)：tR＝0.66min；质谱(ESI+)：m/z＝418[M+H]+。
实施例3
1-[(6-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲基]-N-[(6R)-3-甲基-1H,4H,5H,6H-环戊二烯并[c]吡唑-6-基]-1H-吡唑-4-甲酰胺
在进行手性相SFC分离后自外消旋混合物获得标题化合物(管柱：CHIRALAmylose SA，5μm，250mm×20mm；洗脱剂：scCO2/(于MeOH中的20mM NH3)70:30，40℃，120巴，10mL/min)；tR＝3.5min。
LC(方法1)：tR＝0.66min；质谱(ESI+)：m/z＝418[M+H]+。
实施例4
1-[(6-{6,6-二氟-3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲基]-N-[(6S)-3-甲基-1H,4H,5H,6H-环戊二烯并[c]吡唑-6-基]-1H-吡唑-4-甲酰胺
将1-[(6-{6,6-二氟-3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲基]-1H-吡唑-4-甲酸(24mg)、DIPEA(40μL)及于DMF(2mL)中的O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基脲鎓-六氟磷酸盐(HATU，30mg)的溶液搅拌5min。添加(6S)-3-甲基-1H,4H,5H,6H-环戊二烯并[c]吡唑-6-胺(10mg)，且将混合物搅拌3h。通过HPLC反相(ACN、水)纯化混合物，得到标题化合物。
LC(方法2)：tR＝0.92min；质谱(ESI+)：m/z＝454[M+H]+。
实施例5
1-[(6-{6,6-二氟-3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲基]-N-[(6R)-3-甲基-1H,4H,5H,6H-环戊二烯并[c]吡唑-6-基]-1H-吡唑-4-甲酰胺
将1-[(6-{6,6-二氟-3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲基]-1H-吡唑-4-甲酸(24mg)、DIPEA(40μL)及于DMF(2mL)中的O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基脲鎓-六氟磷酸盐(HATU,30mg)的溶液搅拌5min。添加(6R)-3-甲基-1H,4H,5H,6H-环戊二烯并[c]吡唑-6-胺(10mg)，且将混合物搅拌3h。通过HPLC反相(ACN、水)纯化混合物，得到标题化合物。
LC(方法2)：tR＝0.92min；质谱(ESI+)：m/z＝454[M+H]+。
可替代地，在裂解掉保护基2-(三甲基硅烷基)乙基氧基甲基后，在环境温度下使用于DCM中的TFA自1-[(6-{6,6-二氟-3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲基]-N-[(6R)-3-甲基-2-{[2-(三甲基硅烷基)乙氧基]甲基}-2H,4H,5H,6H-环戊二烯并[c]吡唑-6-基]-1H-吡唑-4-甲酰胺获得该化合物。
实施例6
4-[(6-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲基]-N-[(6R)-3-甲基-1H,4H,5H,6H-环戊二烯并[c]吡唑-6-基]噻吩-2-甲酰胺
将4-[(6-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲基]噻吩-2-甲酸(50mg)、DIPEA(82μL)及于DMF(1.5mL)中的O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基脲鎓-六氟磷酸盐(HATU，67mg)的溶液搅拌15min。向其中添加于DMF(1mL)中的(6R)-3-甲基-1H,4H,5H,6H-环戊二烯并[c]吡唑-6-胺(23mg)的溶液，且将混合物搅拌1.5h。通过HPLC反相(ACN、水)纯化混合物，得到标题化合物。
LC(方法2)：tR＝1.06min；质谱(ESI+)：m/z＝434[M+H]+。
实施例7
4-[(6-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲基]-N-[(6R)-3-甲基-的各别KM值(参见表A的所用底物的所获得的KM值)校正IC50值而获得：
将4-[(6-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲基]-1-{[2-(三甲基硅烷基)乙氧基]甲基}-1H-吡咯-2-甲酸(50mg)、DIPEA(60μL)及于DMF(1.5mL)中的O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基脲鎓-六氟磷酸盐(HATU，49mg)的溶液搅拌15min。向其中添加于DMF(1mL)中的(6R)-3-甲基-1H,4H,5H,6H-环戊二烯并[c]吡唑-6-胺(16mg)的溶液，且将混合物搅拌1.5h。将混合物分配于水与二乙醚之间。分离各相且用二乙醚萃取水相。将合并有机相干燥(MgSO4)且在真空中浓缩。将残余物溶解于DCM(3mL)及TFA(1.5mL)中。在搅拌1.5h之后，在真空中蒸发溶剂，且将残余物溶解于MeOH(2mL)、4M NaOH水溶液(0.3mL)及THF(2mL)中。将混合物搅拌30min，且随后通过HPLC反相(ACN、水)纯化，得到标题化合物。
LC(方法1)：tR＝1.01min；质谱(ESI+)：m/z＝417[M+H]+。
可替代地，在上文所描述的偶合程序之后，自4-[(6-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲基]-1H-吡咯-2-甲酸及(6R)-3-甲基-1H,4H,5H,6H-环戊二烯并[c]吡唑-6-胺直接获得该化合物。
实施例8
4-[(6-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲基]-5-氰基-N-[(6R)-3-甲基-1H,4H,5H,6H-环戊二烯并[c]吡唑-6-基]噻吩-2-甲酰胺
将4-[(6-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲基]-5-氰基噻吩-2-甲酸(45mg)、DIPEA(91μL)及于DMF(2mL)中的O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基脲鎓-六氟磷酸盐(HATU，42mg)的溶液搅拌15min。添加(6R)-3-甲基-1H,4H,5H,6H-环戊二烯并[c]吡唑-6-胺(15mg)，且将混合物搅拌30min。将混合物用MeOH稀释且通过HPLC反相(ACN、水)纯化，得到标题化合物。
LC(方法1)：tR＝0.75min；质谱(ESI+)：m/z＝459[M+H]+。
实施例9
2-[(6-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲基]-N-[(6R)-3-甲基-1H,4H,5H,6H-环戊二烯并[c]吡唑-6-基]-2H-1,2,3,4-四唑-5-甲酰胺
将2-[(6-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲基]-2H-1,2,3,4-四唑-5-甲酸(40mg)、DIPEA(114μL)及于DMF(2mL)中的O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基脲鎓-六氟磷酸盐(HATU，53mg)的溶液搅拌15min。添加(6R)-3-甲基-1H,4H,5H,6H-环戊二烯并[c]吡唑-6-胺(18mg)，且将混合物搅拌30min。将混合物分配于水与EtOAC之间。用EtOAC萃取水相三次。干燥(Na2SO4)且浓缩合并有机相。通过HPLC反相(ACN、水)纯化残余物，得到标题化合物。
LC(方法1)：tR＝0.67min；质谱(ESI+)：m/z＝420[M+H]+。
实施例10
2-[(6-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲基]-N-[(6R)-3-甲基-1H,4H,5H,6H-环戊二烯并[c]吡唑-6-基]-2H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺
将2-[(6-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲基]-2H-1,2,3-三唑-4-甲酸(45mg)、DIPEA(128μL)及于DMF(2mL)中的O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基脲鎓-六氟磷酸盐(HATU，60mg)的溶液搅拌15min。添加(6R)-3-甲基-1H,4H,5H,6H-环戊二烯并[c]吡唑-6-胺(21mg)，且将混合物搅拌30min。将混合物分配于水与EtOAC之间。用EtOAC萃取水相三次。干燥(Na2SO4)且浓缩合并有机相。通过HPLC反相(ACN、水)纯化残余物，得到标题化合物。
LC(方法1)：tR＝0.68min；质谱(ESI+)：m/z＝419[M+H]+。
实施例11
1-[(6-{5-氮杂螺[2.3]己-5-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲基]-N-[(6R)-3-甲基-1H,4H,5H,6H-环戊二烯并[c]吡唑-6-基]-1H-吡唑-4-甲酰胺
向1-[(6-{5-氮杂螺[2.3]己-5-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲基]-1H-吡唑-4-甲酸(41mg)及于DMF(2mL)中的(6R)-3-甲基-1H,4H,5H,6H-环戊二烯并[c]吡唑-6-胺(40mg)的溶液中添加DIPEA(50μL)及O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基脲鎓-六氟磷酸盐(HATU，40mg)，且将混合物搅拌1h。通过HPLC反相(ACN、水)纯化混合物，得到标题化合物。
LC(方法2)：tR＝0.91min；质谱(ESI+)：m/z＝418[M+H]+。
实施例12
1-[(6-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲基]-3-氯-N-[(6R)-3-甲基-1H,4H,5H,6H-环戊二烯并[c]吡唑-6-基]-1H-吡唑-4-甲酰胺
向1-[(6-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲基]-3-氯-1H-吡唑-4-甲酸(20mg)及于DMF(2mL)中的(6R)-3-甲基-2-{[2-(三甲基硅烷基)乙氧基]甲基}-2H,4H,5H,6H-环戊二烯并[c]吡唑-6-胺(16mg)的溶液中添加DIPEA(40μL)及O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基脲鎓-六氟磷酸盐(HATU，22.8mg)。将混合物搅拌2h且在真空中蒸发溶剂。用TFA(1mL)处理残余物且搅拌16h。通过HPLC反相(ACN、水)纯化混合物，得到标题化合物。
LC(方法6)：tR＝0.82min；质谱(ESI+)：m/z＝452/454(Cl)[M+H]+。
类似于实施例12制备实施例13-33：
实施例34
N-[(6R)-3-甲基-2H,4H,5H,6H-环戊二烯并[c]吡唑-6-基]-1-{[2-甲基-6-(哌啶-1-基)吡啶-3-基]甲基}-1H-吡唑-4-甲酰胺
将1-[(6-氟-2-甲基吡啶-3-基)甲基]-N-[(6R)-3-甲基-2-{[2-(三甲基硅烷基)乙氧基]甲基}-2H,4H,5H,6H-环戊二烯并[c]吡唑-6-基]-1H-吡唑-4-甲酰胺(24mg)溶解于TFA中，在室温下搅拌1h且在真空中浓缩。将残余物溶解于DMSO(0.5mL)中，添加哌啶(17mg)及DIPEA(75μL)，且将混合物在80℃下搅拌16h且在110℃下再搅拌3d。在冷却至室温之后，通过HPLC反相(ACN、水)纯化混合物，得到标题化合物。
LC(方法6)：tR＝0.77min；质谱(ESI+)：m/z＝420[M+H]+。
类似于实施例34制备实施例35-53：
实施例54
1-[(6-{2-氮杂螺[3.3]庚-2-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲基]-N-[(6R)-3-甲基-2H,4H,5H,6H-环戊二烯并[c]吡唑-6-基]-1H-吡唑-4-
将1-[(6-氟-2-甲基吡啶-3-基)甲基]-N-[(6R)-3-甲基-2-{[2-(三甲基硅烷基)乙氧基]甲基}-2H,4H,5H,6H-环戊二烯并[c]吡唑-6-基]-1H-吡唑-4-甲酰胺(24mg)溶解于DMSO(0.5mL)中。添加2-氮杂螺[3.3]庚烷半草酸盐(30mg)及DIPEA(75μL)，且将混合物在85℃下搅拌16h，在95℃下搅拌8h且在105℃下再搅拌16h，且随后在真空中浓缩。将残余物溶解于TFA中，在室温下搅拌16h，且通过HPLC反相(ACN、水)纯化混合物，得到标题化合物。
LC(方法7)：tR＝0.73min；质谱(ESI+)：m/z＝432[M+H]+。
类似于实施例54制备实施例55-83：
实施例84
1-[(2-{6,6-二氟-3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-4-甲基嘧啶-5-基)甲基]-N-[(6R)-3-甲基-2H,4H,5H,6H-环戊二烯并[c]吡唑-6-基]-1H-吡唑-4-甲酰胺,TFA盐
向1-[(2-{6,6-二氟-3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-4-甲基嘧啶-5-基)甲基]-1H-吡唑-4-甲酸,锂盐(8.8mg)及于DMF(2mL)中的(6R)-3-甲基-2-{[2-(三甲基硅烷基)乙氧基]甲基}-2H,4H,5H,6H-环戊二烯并[c]吡唑-6-胺(7.4mg)的溶液中添加DIPEA(13.4μL)及O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基脲鎓-六氟磷酸盐(HATU，10.5mg)，且将混合物搅拌2h。在真空中蒸发溶剂，将残余物用TFA(0.5mL)处理且搅拌1h。通过HPLC反相(ACN、水)纯化混合物，得到标题化合物。
LC(方法8)：tR＝0.51min；质谱(ESI+)：m/z＝455[M+H]+。
实施例85
1-[(2-{6,6-二氟-3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-4-甲基嘧啶-5-基)甲基]-N-[(6R)-3-甲基-1H,4H,5H,6H-环戊二烯并[c]吡唑-6-基]-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺
将1-[(2-{6,6-二氟-3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-4-甲基嘧啶-5-基)甲基]-1H-1,2,3-三唑-4-甲酸(10mg)及于DMF(1mL)中的O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基脲鎓-六氟磷酸盐(HATU，11mg)的溶液搅拌10min。添加DIPEA(20μL)及(6R)-3-甲基-1H,4H,5H,6H-环戊二烯并[c]吡唑-6-胺(4.1mg)，且将混合物搅拌12h。随后，通过HPLC反相(ACN、水)纯化混合物，得到标题化合物。
LC(方法2)：tR＝0.90min；质谱(ESI+)：m/z＝456[M+H]+。
实施例86
1-[(6-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲基]-N-[(6R)-3-甲基-1H,4H,5H,6H-环戊二烯并[c]吡唑-6-基]-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺
向于水(300μL)中的1-[(6-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲基]-N-[(6R)-3-甲基-2-{[2-(三甲基硅烷基)乙氧基]甲基}-2H,4H,5H,6H-环戊二烯并[c]吡唑-6-基]-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺(140mg)的混合物中添加浓HCl水溶液(300μL)，且将混合物在室温下搅拌12h。蒸发溶剂，且将残余物溶解于水中。添加1M NaOH水溶液直至达到pH 14为止。通过过滤收集沉淀物且在真空中干燥。由ACN再结晶粗产物，得到标题化合物。
LC(方法1)：tR＝0.68min；质谱(ESI+)：m/z＝419[M+H]+。
实施例87
1-[(2-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-4-甲基嘧啶-5-基)甲基]-N-[(6R)-3-甲基-1H,4H,5H,6H-环戊二烯并[c]吡唑-6-基]-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺
向于DCM(2mL)中的1-[(2-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-4-甲基嘧啶-5-基)甲基]-N-[(6R)-3-甲基-2-{[2-(三甲基硅烷基)乙氧基]甲基}-2H,4H,5H,6H-环戊二烯并[c]吡唑-6-基]-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺(81mg)的溶液中添加TFA(300μL)，且将混合物在室温下搅拌48h。将混合物用MeOH稀释，用于MeOH中的7M NH3处理直至达到pH 8为止，且随后通过HPLC反相(ACN、水)纯化，得到标题化合物。
LC(方法7)：tR＝0.67min；质谱(ESI+)：m/z＝420[M+H]+。
类似于实施例12制备实施例88-93：
实施例94
1-({6-[(1R,5S,6R)-6-(羟甲基)-3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基]-2-甲基吡啶-3-基}甲基)-N-[(6R)-3-甲基-1H,4H,5H,6H-环戊二烯并[c]吡唑-6-基]-1H-吡唑-4-甲酰胺
向于DCM(2mL)中的1-({6-[(1R,5S,6R)-6-(羟甲基)-3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基]-2-甲基吡啶-3-基}甲基)-N-[(6R)-3-甲基-2-{[2-(三甲基硅烷基)乙氧基]甲基}-2H,4H,5H,6H-环戊二烯并[c]吡唑-6-基]-1H-吡唑-4-甲酰胺(24mg)的溶液中添加TFA(1mL)，且将混合物在室温下搅拌12h。蒸发溶剂，且将残余物溶解于MeOH中。添加于EtOH中的1MKOH(55μL)，且将混合物搅拌30min。在真空中蒸发溶剂，且通过HPLC反相(ACN、水)纯化残余物，得到标题化合物。
LC(方法2)：tR＝0.80min；质谱(ESI+)：m/z＝448[M+H]+。
实施例95
1-({6-[(1R,5S,6R)-6-(氟甲基)-3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基]-2-甲基吡啶-3-基}甲基)-N-[(6R)-3-甲基-2H,4H,5H,6H-环戊二烯并[c]吡唑-6-基]-1H-吡唑-4-甲酰胺
将于DCM(1mL)中的1-({6-[(1R,5S,6R)-6-(羟甲基)-3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基]-2-甲基吡啶-3-基}甲基)-N-[(6R)-3-甲基-2-{[2-(三甲基硅烷基)乙氧基]甲基}-2H,4H,5H,6H-环戊二烯并[c]吡唑-6-基]-1H-吡唑-4-甲酰胺(10mg)的溶液冷却至0℃，且用二乙氨基-硫-三氟化物(DAST，4μL)处理。将混合物搅拌12h，同时升温至室温。在真空中蒸发溶剂，且将残余物溶解于DCM(1mL)及TFA(0.5mL)中。将混合物在室温下搅拌12h，且随后在真空中浓缩。将残余物用4M NaOH水溶液处理15min，且随后通过HPLC反相(ACN、水)纯化，得到标题化合物。
LC(方法2)：tR＝0.91min；质谱(ESI+)：m/z＝450[M+H]+。
类似于实施例12制备实施例96-105：
实施例106
1-[(6-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲基]-3-(2-羟基丙-2-基)-N-[(6R)-3-甲基-2H,4H,5H,6H-环戊二烯并[c]吡唑-6-基]-1H-吡唑-4-甲酰胺
向1-[(6-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲基]-3-(2-羟基丙-2-基)-1H-吡唑-4-甲酸；TFA(24mg)及于DMF(1mL)中的(6R)-3-甲基-2-{[2-(三甲基硅烷基)乙氧基]甲基}-2H,4H,5H,6H-环戊二烯并[c]吡唑-6-胺(13mg)的溶液中添加DIPEA(40μL)及O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基脲鎓-六氟磷酸盐(HATU，19mg)，且将混合物搅拌15min。在真空中蒸发溶剂，将残余物用TFA(0.25mL)处理且搅拌1h。添加盐酸(1mL；于水中32％)，将混合物在室温下搅拌16h，且随后在真空中浓缩。通过HPLC反相(ACN、水)纯化残余物，得到标题化合物。
LC(方法2)：tR＝1.01min；质谱(ESI+)：m/z＝476[M+H]+。
实施例107
1-[(6-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲基]-N-[(6R)-3-甲基-2H,4H,5H,6H-环戊二烯并[c]吡唑-6-基]-1H-1,2,4-三唑-3-甲酰胺
向于DCM(2mL)中的1-[(6-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲基]-N-[(6R)-3-甲基-2-{[2-(三甲基硅烷基)乙氧基]甲基}-2H,4H,5H,6H-环戊二烯并[c]吡唑-6-基]-1H-1,2,4-三唑-3-甲酰胺(94mg)的溶液中添加TFA (1mL)，且将混合物在室温下搅拌12h。在真空中蒸发溶剂，且通过HPLC反相(ACN、水)纯化残余物，得到标题化合物。
LC(方法6)：tR＝0.70min；质谱(ESI+)：m/z＝419[M+H]+。
实施例108
1-[(6-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲基]-3-{[(6R)-3-甲基-2H,4H,5H,6H-环戊二烯并[c]吡唑-6-基]胺甲酰基}-1H-吲哚-5-甲酸
向于DCM(2mL)中的1-[(6-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲基]-3-{[(6R)-3-甲基-2-{[2-(三甲基硅烷基)乙氧基]甲基}-2H,4H,5H,6H-环戊二烯并[c]吡唑-6-基]胺甲酰基}-1H-吲哚-5-甲酸甲酯(12mg)的溶液中添加TFA(1mL)，且将混合物在室温下搅拌12h。在真空中蒸发溶剂，将残余物溶解于THF(2mL)中且用于EtOH中的1MKOH溶液(100μL)处理。将混合物在50℃下搅拌12h。随后，将混合物用THF稀释且通过HPLC反相(ACN、水)纯化，得到标题化合物。
LC(方法1)：tR＝0.70min；质谱(ESI+)：m/z＝511[M+H]+。
实施例109
5-[(6-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲基]-N-[(6R)-3-甲基-1H,4H,5H,6H-环戊二烯并[c]吡唑-6-基]-1H-吡咯-2-甲酰胺
将5-[(6-{3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基}-2-甲基吡啶-3-基)甲基]-1H-吡咯-2-甲酸(30mg)、DIPEA(84μL)及于DMF(1mL)中的O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基脲鎓-六氟磷酸盐(HATU，43mg)的溶液搅拌20min。添加(6R)-3-甲基-1H,4H,5H,6H-环戊二烯并[c]吡唑-6-胺二盐酸盐(22mg)，且将混合物在室温下搅拌1h且在40℃下搅拌1.5h。添加(6R)-3-甲基-1H,4H,5H,6H-环戊二烯并[c]吡唑-6-胺二盐酸盐(25mg)、DIPEA(34μL)及O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基脲鎓-六氟磷酸盐(HATU，30mg)，且将混合物在室温下搅拌12h。用DMF及MeOH稀释混合物。添加4M HCl水溶液直至获得溶液为止。随后，通过HPLC反相(ACN、水)纯化混合物，得到标题化合物。
LC(方法1)：tR＝0.71min；质谱(ESI+)：m/z＝417[M+H]+。

Claims (15)

1.一种式(I)化合物，
其中
Y选自由以下组成的群：
及
其中的每一者经1个取代基R1取代且
其中具有星号及括号的键指示式(I)的R与CH2基团的连接位点；
R选自由以下组成的群：
吡咯烷-1-基、 哌啶-1-基、 氮杂环庚烷-1-基和
X选自由以下组成的群：
及
其中的每一者任选经1个取代基R3取代且
其中具有星号及括号的键指示式(I)的基团C＝O与CH2的连接位点；
R1选自由H、CH3、CN、CF3及CH2CH3组成的群R1-G2；以及
R3选自由Cl、CN、COOH、任选经1至3个F取代的CH3、环丙基、C(CH3)2OH、CH2OCH3、OCH3及N-甲基-吡唑基组成的群R3-G4；
或其互变异构体，
或其盐。
2.如权利要求1的化合物，其中Y选自由以下组成的群：
其中所述具有星号和括号的键指示式(I)中R和CH2基团的连接位点；
并且
R1选自由H、CH3和CN组成的群；
或其互变异构体，
或其盐。
3.如权利要求1的化合物，其中R3选自由以下组成的群：Cl、CN、CH3、CHF2、CF3和环丙基；
或其互变异构体，
或其盐。
4.如权利要求1的化合物，其中R选自由以下组成的群：
或其互变异构体，
或其盐。
5.如权利要求1的化合物，其中R选自由以下组成的群：
吡咯烷-1-基、
或其互变异构体，
或其盐。
6.如权利要求1的化合物，其中R选自由以下组成的群：
哌啶-1-基、
或其互变异构体，
或其盐。
7.如权利要求1的化合物，其中R选自由以下组成的群：
氮杂环庚烷-1-基和或其互变异构体，
或其盐。
8.如权利要求1的化合物，
其中该化合物的立体化学为根据式(I.1)
或其互变异构体，
或其盐。
9.如权利要求1的化合物，其中所述化合物选自由以下组成的群：
或其互变异构体，
或其盐。
10.一种如权利要求1-9中任一项的化合物或其互变异构体的药学上可接受的盐。
11.一种药物组合物，其包含如权利要求1-9中任一项的一或多种化合物或其互变异构体、或如权利要求10的药学上可接受的盐，任选以及一或多种惰性载剂及/或稀释剂。
12.如权利要求1-9中任一项的一或多种化合物或其互变异构体、或如权利要求10的药学上可接受的盐，其用于制备血浆激肽释放酶抑制剂。
13.如权利要求1-9中任一项的化合物或其互变异构体、或如权利要求10的药学上可接受的盐在制备用于治疗眼部疾病的药物中的用途。
14.如权利要求1-9中任一项的化合物或其互变异构体、或如权利要求10的药学上可接受的盐在制备用于治疗糖尿病性黄斑部水肿、年龄相关的黄斑变性或脉络膜新生血管的药物中的用途。
15.一种化合物，其选自由以下组成的群：
其中PG为H或保护基，该保护基选自由以下组成的群：
1个Si(CH3)3取代的CH2-O-C1-4烷基；
或其互变异构体，
或其盐。
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