CN112457380A

CN112457380A - 调控植物果形和/或果汁含量的蛋白质及其相关生物材料和应用

Info

Publication number: CN112457380A
Application number: CN201910850131.1A
Authority: CN
Inventors: 李传友; 朱强; 邓磊; 蒋红玲; 黄婷婷; 李平
Original assignee: QINGDAO ACADEMY OF AGRICULTURAL SCIENCES; Institute of Genetics and Developmental Biology of CAS
Current assignee: QINGDAO ACADEMY OF AGRICULTURAL SCIENCES; Institute of Genetics and Developmental Biology of CAS
Priority date: 2019-09-09
Filing date: 2019-09-09
Publication date: 2021-03-09
Anticipated expiration: 2039-09-09
Also published as: CN112457380B

Abstract

本发明公开了调控植物果形和/或果汁含量的蛋白质及其相关生物材料和应用。本发明首先公开如下蛋白质在调控植物果形和/或果汁含量的应用：A1)由序列3所示的氨基酸序列组成的蛋白质；A2)序列3所示的蛋白质的N端或/和C端连接蛋白标签得到的融合蛋白；A3)将序列3所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的与A1)所示的蛋白质具有90％以上的同一性且功能相同的蛋白质。本发明进一步公开了培育圆形果和/或多汁果的转基因植物的方法。本发明将蛋白质S1FS8.1的编码基因导入到植物中，成功培育出圆形多汁果的植物，操作简单，成本低，加快了育种进程，具有广泛的应用前景。

Description

调控植物果形和/或果汁含量的蛋白质及其相关生物材料和应用

技术领域

本发明属于植物基因工程领域，具体涉及调控植物果形和/或果汁含量的蛋白质及其相关生物材料和应用。

背景技术

番茄是全球广泛种植的蔬菜和水果兼用类作物，深受各国消费者喜爱。番茄的果型是重要的经济性状。目前大部分鲜食番茄果实都是圆形多汁的果型，因为圆形是最受消费者喜欢的性状、多汁会使果实口感更佳。快速精准地改良番茄果型一直是中国育种的重要目标之一。

目前，在生产上主要是利用传统的杂交、回交的手段来实现矩形果到圆形果的转变，该法周期长，一般需要5-10年，且受连锁累赘等因素的限制。

发明内容

本发明要解决的技术问题为如何提供一种简单、高效的调控植物果形和/或果汁含量的方法。

为解决上述问题，本发明提供了一种蛋白质，所述蛋白质为蛋白质SlFS8.1，来源于番茄(Solanum lycopersicum)，是如下任一所示的蛋白质：

A1)由序列表中序列3所示的氨基酸序列组成的蛋白质；

A2)在序列表中序列3所示的氨基酸序列的N端或/和C端连接标签得到的融合蛋白；

A3)将序列表中序列3所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的与A1)所示的蛋白质具有90％以上的同一性且功能相同的蛋白质。

其中，序列3由315个氨基酸残基组成。

上述蛋白质可人工合成，也可先合成其编码基因，再进行生物表达得到。

上述蛋白质中，蛋白标签(protein-tag)是指利用DNA体外重组技术，与目的蛋白一起融合表达的一种多肽或者蛋白，以便于目的蛋白的表达、检测、示踪和/或纯化。所述蛋白标签可为Flag标签、His标签、MBP标签、HA标签、myc标签、GST标签和/或SUMO标签等。

上述蛋白质中，同一性是指氨基酸序列的同一性。可使用国际互联网上的同源性检索站点测定氨基酸序列的同一性，如NCBI主页网站的BLAST网页。例如，可在高级BLAST2.1中，通过使用blastp作为程序，将Expect值设置为10，将所有Filter设置为OFF，使用BLOSUM62作为Matrix，将Gap existence cost，Per residue gap cost和Lambda ratio分别设置为11，1和0.85(缺省值)并进行检索一对氨基酸序列的同一性进行计算，然后即可获得同一性的值(％)。

上述蛋白质中，所述90％以上的同一性可为至少91％、92％、95％、96％、98％、99％或100％的同一性。

本发明还提供蛋白质SlFS8.1的下述任一种中的应用：

B1)调控植物果形；

B2)制备调控植物果形的产品；

B3)使植物果形由矩形果转变成圆形果；

B4)制备使植物果形由矩形果转变成圆形果的产品；

B5)调控植物果汁含量；

B6)制备调控植物果汁含量的产品；

B7)使植物果汁含量由少汁果转变成多汁果；

B8)制备使植物果汁含量由少汁果转变成多汁果的产品；

B19)调控植物果形和果汁含量；

B10)制备调控植物果形和果汁含量的产品；

B11)使植物的果实由矩形少汁果转变成圆形多汁果；

B12)制备使植物的果实由矩形少汁果转变成圆形多汁果产品。

蛋白质SlFS8.1相关生物材料也在本发明的保护范围之内。

蛋白质SlFS8.1相关生物材料也属于本发明的保护范围，本发明还提供了与蛋白质SlFS8.1相关生物材料的新用途。

本发明蛋白质SlFS8.1相关生物材料的下述任一种中的应用：

B1)调控植物果形；

B2)制备调控植物果形的产品；

B3)使植物果形由矩形果转变成圆形果；

B4)制备使植物果形由矩形果转变成圆形果的产品；

B5)调控植物果汁含量；

B6)制备调控植物果汁含量的产品；

B7)使植物果汁含量由少汁果转变成多汁果；

B8)制备使植物果汁含量由少汁果转变成多汁果的产品；

B19)调控植物果形和果汁含量；

B10)制备调控植物果形和果汁含量的产品；

B11)使植物的果实由矩形少汁果转变成圆形多汁果；

B12)制备使植物的果实由矩形少汁果转变成圆形多汁果的产品。

上述应用中，所述相关生物材料为下述C1)-C10)中的任一种：

C1)编码蛋白质SlFS8.1的核酸分子；

C2)含有C1)所述核酸分子的表达盒；

C3)含有C1)所述核酸分子的重组载体、或含有C2)所述表达盒的重组载体；

C4)含有C1)所述核酸分子的重组微生物、或含有C2)所述表达盒的重组微生物、或含有C3)所述重组载体的重组微生物；

C5)含有C1)所述核酸分子的转基因植物细胞系、或含有C2)所述表达盒的转基因植物细胞系、或含有C3)所述重组载体的转基因植物细胞系；

C6)含有C1)所述核酸分子的转基因植物组织、或含有C2)所述表达盒的转基因植物组织、或含有C3)所述重组载体的转基因植物组织；

C7)含有C1)所述核酸分子的转基因植物器官、或含有C2)所述表达盒的转基因植物器官、或含有C3)所述重组载体的转基因植物器官；

C8)含有C1)所述核酸分子的转基因植株、或含有C2)所述表达盒的转基因植株、或含有C3)所述重组载体的转基因植株；

C9)由C8)所述转基因植株的可再生细胞产生的组织培养物；

C10)由C9)所述组织培养物产生的原生质体；

C11)表达出正常水平或较高蛋白质SlFS8.1含量和/或活性的核酸分子。

其中，所述核酸分子可以是DNA，如cDNA、基因组DNA或重组DNA；所述核酸分子也可以是RNA，如mRNA或hnRNA等。

上述相关生物材料中，C1)所述核酸分子为如下D1)或D2)或D3)或D4)所示：

D1)序列表中序列1所示的DNA分子；

D2)编码序列是序列表中序列2所示的DNA分子；

D3)转录序列表中序列5所示的RNA的DNA分子；

D4)在严格条件下与D1)或D2)或D3)限定的DNA分子杂交，且编码蛋白质SlFS8.1的DNA分子。

上述相关生物材料中，C11)所述核酸分子为如下E1)或E2)或E3)所示：

E1)序列表中序列5所示的RNA分子；

E2)转录序列表中序列5所示RNA的DNA分子；

E3)在严格条件下与E1)或E2)限定的核苷酸序列杂交，且具有相同功能的RNA分子或DNA分子。

其中，序列表中的序列1由1057个核苷酸组成，编码序列为序列2所示，由948个核苷酸组成，转录序列表中序列5所示RNA，编码序列3所示的蛋白质。

所述严格条件是在2×SSC，0.1％SDS的溶液中，在68℃下杂交并洗膜2次，每次5min，又于0.5×SSC，0.1％SDS的溶液中，在68℃下杂交并洗膜2次，每次15min。

上述相关生物材料中，C2)所述的表达盒是指能够在宿主细胞中表达蛋白质SlFS8.1的DNA，该DNA不但可包括启动SlFS8.1基因转录的启动子，还可包括终止SlFS8.1转录的终止子。进一步，所述表达盒还可包括增强子序列。可用于本发明的启动子包括但不限于：SlFS8.1基因自身的启动子，组成型启动子，组织、器官和发育特异的启动子和诱导型启动子。启动子的例子包括但不限于：花椰菜花叶病毒的组成型启动子35S；来自西红柿的创伤诱导型启动子，亮氨酸氨基肽酶("LAP"，Chao等人(1999)Plant Physiol 120：979-992)；来自烟草的化学诱导型启动子，发病机理相关1(PR1)(由水杨酸和BTH(苯并噻二唑-7-硫代羟酸S-甲酯)诱导)；西红柿蛋白酶抑制剂II启动子(PIN2)或LAP启动子(均可用茉莉酮酸曱酯诱导)；热休克启动子(美国专利5,187,267)；四环素诱导型启动子(美国专利5,057,422)；种子特异性启动子，如谷子种子特异性启动子pF128(CN101063139B(中国专利2007 10099169.7))，种子贮存蛋白质特异的启动子(例如，菜豆球蛋白、napin，oleosin和大豆beta conglycin的启动子(Beachy等人(1985)EMBO J.4：3047-3053)。它们可单独使用或与其它的植物启动子结合使用。此处引用的所有参考文献均全文引用。合适的转录终止子包括但不限于：SlFS8.1基因自身的终止子、农杆菌胭脂碱合成酶终止子(NOS终止子)、花椰菜花叶病毒CaMV 35S终止子、tml终止子、豌豆rbcS E9终止子和胭脂氨酸和章鱼氨酸合酶终止子(参见，例如：Odell等人(I⁹⁸⁵)Nature 313：810；Rosenberg等人(1987)Gene，56：125；Guerineau等人(1991)Mol.Gen.Genet，262：141；Proudfoot(1991)Cell，64：671；Sanfacon等人Genes Dev.，5：141；Mogen等人(1990)Plant Cell，2：1261；Munroe等人(1990)Gene，91：151；Ballad等人(1989)Nucleic Acids Res.17：7891；Joshi等人(1987)Nucleic AcidRes.，15：9627)。

上述相关生物材料中，C3)所述重组载体可含有序列表中序列1或序列2所示的用于编码蛋白质SlFS8.1的DNA序列。

可用现有的植物表达载体构建含有所述蛋白质SlFS8.1编码基因或所述蛋白质SlFS8.1编码基因表达盒的重组载体。所述植物表达载体可为Gateway系统载体或双元农杆菌载体等，如pGWB411、pGWB412、pGWB405、pBin438、pCAMBIA1302、pCAMBIA2300、pCAMBIA2301、pCAMBIA1301、pCAMBIA1300、pBI121、pCAMBIA1391-Xa或pCAMBIA1391-Xb。使用SlFS8.1构建重组载体时，在其转录起始核苷酸前可加上任何一种增强型、组成型、组织特异型或诱导型启动子，如花椰菜花叶病毒(CAMV)35S启动子、泛生素基因Ubiqutin启动子(pUbi)等，它们可单独使用或与其它的植物启动子结合使用；此外，使用本发明的基因构建植物表达载体时，还可使用增强子，包括翻译增强子或转录增强子，这些增强子区域可以是ATG起始密码子或邻接区域起始密码子等，但必需与编码序列的阅读框相同，以保证整个序列的正确翻译。所述翻译控制信号和起始密码子的来源是广泛的，可以是天然的，也可以是合成的。翻译起始区域可以来自转录起始区域或结构基因。

为了便于对转基因植物细胞或植物进行鉴定及筛选，可对所用植物表达载体进行加工，如加入可在植物中表达的编码可产生颜色变化的酶或发光化合物的基因(GUS基因、萤光素酶基因等)、具有抗性的抗生素标记物(庆大霉素标记物、卡那霉素标记物等)或是抗化学试剂标记基因(如抗除莠剂基因)等。

上述相关生物材料中，C4)所述重组微生物具体可为酵母、细菌、藻和真菌；如所述细菌可以为农杆菌LBA4404菌株。

上述相关生物材料中，C7)所述转基因植物器官可为转基因植物的根、茎、叶、花、果实和种子。

上述相关生物材料中，C9)所述组织培养物可来源于根、茎、叶、花、果实、种子、花粉、胚和花药。

上述相关生物材料中，所述转基因植物细胞系、转基因植物组织和转基因植物器官均不包括繁殖材料。

上述蛋白质SlFS8.1或其相关生物材料在培育圆形果和/或多汁果的转基因植物中的应用也在本发明的保护范围之内；上述蛋白质SlFS8.1或其相关生物材料在植物育种中的应用也在本发明的保护范围之内。

上述应用中，植物育种中的应用具体可为将含有所述蛋白质SlFS8.1或所述相关生物材料(如蛋白质SlFS8.1编码基因SlFS8.1)的植物与其它植物进行杂交以进行植物育种。

本发明还提供了一种改变植物果形或果汁含量的方法。

本发明改变植物果形和/或果汁含量的方法，包括改变目的植物中蛋白质SlFS8.1的表达和/或含量和/或活性，使目的植物的果形和/或果汁含量改变。

本发明进一步提供了改变植物果形和/或果汁含量的产品，所述产品含有上述蛋白质SlFS8.1或上述相关生物材料。

所述产品可以以上述蛋白质SlFS8.1或上述相关生物材料为其活性成分，还可将上述蛋白质SlFS8.1或上述相关生物材料与具有相同功能的物质组合在一起作为其活性成分。

本发明进一步还一种培育圆形果和/或多汁果的转基因植物的方法。

本发明培育圆形果和/或多汁果的转基因植物的方法，包括提高矩形果和/或少汁果的目的植物中蛋白质SlFS8.1的表达和/或含量和/或活性，得到转基因植物；所述转基因植物与所述目的植物相比，所述转基因植物为圆形果和/或多汁果。

上述方法中，所述提高矩形果和/或少汁果的目的植物中蛋白质SlFS8.1的表达和/或含量和/或活性的方法为在矩形果和/或少汁果的目的植物中表达或过表达蛋白质SlFS8.1。

上述方法中，所述表达或过表达的方法为将蛋白质SlFS8.1的编码基因导入矩形果和/或少汁果的目的植物。

上述将蛋白质SlFS8.1的编码基因导入目的植物可通过携带有本发明基因SlFS8.1的植物表达载体导入目的植物中。携带有本发明基因SlFS8.1的植物表达载体可通过使用Ti质粒、Ri质粒、植物病毒载体、直接DNA转化、微注射、电导、农杆菌介导等常规生物学方法转化植物细胞或组织，并将转化的植物细胞或组织培育成植株。

携带有本发明基因SlFS8.1的植物表达载体可为pCAMBIA1300-SlFS8.1。具体的，pCAMBIA1300-SlFS8.1利用限制性内切酶SalI和KpnI将序列4所示的DNA分子插入至pCAMBIA1300载体中得到的能够转录序列5所示mRNA的SlFS8.1基因表达载体pCAMBIA1300-SlFS8.1。

上述方法中，所述蛋白质SlFS8.1的编码基因的核苷酸序列是序列表中序列2所示的DNA分子。

本发明中，所述植物为双子叶植物或单子叶植物；

所述双子叶植物可为F1)-F4)中的任一种：

F1)管状花目植物；

F2)茄科植物；

F3)番茄属植物；

F4)番茄。

本发明通过利用转基因的方法将蛋白质SlFS8.1的编码基因导入到目的植物中，实现了矩形少汁果向圆形多汁果的转变，成功培育出圆形多汁果的植物。本发明可以在1年以内得到矩形少汁果转变成圆形多汁果的植物新品种。而利用传统育种手段需要连续回交、自交，至少需要3-4年时间，本发明的方法操作简单，成本低，大大加快了育种进程，具有广泛的应用前景。另外，将矩形少汁番茄转变为圆形多汁番茄虽然利用了转基因技术，但只是在品种间将已经广为应用的基因进行转化，完全没有安全问题。

附图说明

图1为矩形少汁果的野生型番茄M82、转空载体pCAMBIA1300的T₀代番茄植株与圆形多汁果的转基因纯合番茄的果实表型。

具体实施方式

以下的实施例便于更好地理解本发明，但并不限定本发明。下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。

下述实施例中所用到的番茄为矩形少汁品种番茄M82(下述也叫野生型番茄)和圆形多汁品种番茄AC(Ailsa Craig)，来源于美国番茄遗传资源中心(TGRC，http：//tgrc.ucdavis.edu/)。

下述实施例中所用到的载体pCAMBIA1300购于Addgene载体库(http：// www.addgene.org/)。

下述实施例中所用到的大肠杆菌Top10、农杆菌LBA4404菌株购自北京华越洋生物有限公司。

本发明发明人从圆形多汁果番茄AC中研究发现与番茄的果形和果汁含量等相关的基因SlFS8.1，该基因的序列如序列1所示，由1057个核苷酸组成，第393位到501位序列为内含子；编码序列为序列2所示，由948个核苷酸组成，编码序列3所示的蛋白，将所述蛋白命名为蛋白质SlFS8.1。

实施例1、利用转基因方法将矩形少汁果转变成圆形多汁果的番茄

一、重组载体的构建

利用正向引物(5′-GGGGTACCGTCCACTGAACTCACAGTGTCCC-3′)与反向引物(5′-ACGCGTCGACTCAGGTTTCGTCTTCCTTTATTTTGA-3′)组成的引物对对野生型番茄AC植株的基因组DNA进行PCR扩增，得到序列表中序列4的PCR产物，第9位到2862位为启动子，回收PCR产物，备用。

利用SalI和KpnI对上述PCR产物及载体pCAMBIA1300进行酶切，并利用T4连接酶连接，得到了连接产物。

将连接产物转化大肠杆菌Top10菌株感受态，提取质粒，测序，鉴定出序列正确的克隆，得到重组质粒pCAMBIA1300-SlFS8.1。该重组质粒pCAMBIA1300-SlFS8.1含有序列表中序列1所示的SlFS8.1基因，可转录序列表中序列5所示的mRNA，进一步表达序列表中序列3所示的蛋白质。

二、转基因番茄的获得与鉴定

一)、转基因番茄的获得：

将步骤一得到的重组质粒pCAMBIA1300-SlFS8.1导入农杆菌LBA4404菌株中，获得重组菌pCAMBIA1300-SlFS8.1/LBA4404。

将重组菌pCAMBIA1300-SlFS8.1/LBA4404的菌液侵染矩形少汁品种番茄M82外植体，然后在含1mg/L吲哚乙酸、1.75mg/L玉米素核苷、pH为5.8的MS固体培养基(北京华越洋生物)中，于25±1.5℃、光照强度100-200lx下共培养48小时；再转入含有1.0mg/L吲哚乙酸、1.75mg/L玉米素、200mg/L特美汀和75mg/L卡那霉素、pH为5.8的MS固体培养基中，于25±1.5℃、光照16h/d、黑暗8h/d、光照强度800-1200lx条件下培养至长出再生芽；待再生芽长至2-3cm时切下再生芽，转入含有200mg/L特美汀和50mg/L卡那霉素、pH为5.8的MS固体培养基中，在25±1.5℃、光照16h/d、黑暗8h/d、光照强度800-1200lx条件下培养至生根，即得到T₀代番茄植株。

二)转空载体番茄的获得

根据上述步骤一)的方法将重组质粒pCAMBIA1300-SlFS8.1替换为载体pCAMBIA1300重复上述步骤一)的步骤，获得转空载体pCAMBIA1300的T₀代番茄植株。

三)转基因番茄的鉴定：

在含150mg/L潮霉素的MS培养基上，能够生长出根的幼苗为转基因阳性苗。将T0代番茄和野生型番茄扦插在含150mg/L潮霉素的MS培养基，与野生型番茄相比，T0代番茄生长出了根而野生型番茄未生根，最终得了转入了SlFS8.1基因的转基因阳性番茄。

提取番茄叶片DNA，利用正向引物(5′-GCGGAGCATATACGCCCGGAG-3′)与反向引物(5′-TGCGGCCGATCTTAGCCAGACG-3′)组成的引物对进行PCR扩增，检测扩增出的436bp的DNA片段即为转基因番茄。对上述转基因阳性番茄和番茄M82进行检测，结果显示转基因阳性番茄扩增出了436bp的DNA片段，而番茄M82没有扩增出相应长度的DNA片段。

将转基因番茄种植于温室中，通过自交获得T₁代转基因番茄种子。将T₁代转基因番茄种子播种在含有800mg/L潮霉素的1/2MS培养基上，选择10棵生长正常的幼苗移栽到土里。单株收T₂代种子，各播30粒种子在800mg/L潮霉素的1/2MS培养基上，全部种子都具有抗性的单株为转基因纯合番茄材料。

四)、果实观察

待测植株为步骤三)得到的转基因纯合番茄材料、转空载体pCAMBIA1300的T₀代番茄植株以及野生型番茄M82(作为对照植株)。

将待测植株在温室中育苗，25℃、16h光照/8h黑暗条件下光照培养20d。转基因纯合番茄材料以及野生型番茄M82各挑选10棵长势一致的幼苗移栽到温室大棚中，株距、行距在60cm以上，两种材料随机分布。正常的水肥管理，保证所有植株水肥条件基本一致。果实完全变红以后观察比较转基因纯合番茄材料与对照植株M82的果实，并拍照记录。

结果如图1所示，与对照植株M82(野生型番茄M82)、转空载体pCAMBIA1300的T₀代番茄植株(图中以“转空载体T0代番茄”表示)相比，转基因纯合番茄材料的果实圆形多汁，转基因纯合番茄材料的单果的果汁的体积是野生型番茄M82或转空载体pCAMBIA1300的T₀代番茄植株的2倍左右。

以上表明SlFS8.1基因及其编码的蛋白质可以调控番茄的果形和果汁含量，可以使矩形少汁果的番茄材料转变成圆形多汁果的番茄材料。

以上对本发明进行了详述。对于本领域技术人员来说，在不脱离本发明的宗旨和范围，以及无需进行不必要的实验情况下，可在等同参数、浓度和条件下，在较宽范围内实施本发明。虽然本发明给出了特殊的实施例，应该理解为，可以对本发明作进一步的改进。总之，按本发明的原理，本申请欲包括任何变更、用途或对本发明的改进，包括脱离了本申请中已公开范围，而用本领域已知的常规技术进行的改变。按以下附带的权利要求的范围，可以进行一些基本特征的应用。

SEQUENCE LISTING

<110> 中国科学院遗传与发育生物学研究所，青岛市农业科学研究院

<120> 调控植物果形和/或果汁含量的蛋白质及其相关生物材料和应用

<130> GNC191936

<160> 5

<170> PatentIn version 3.5

<210> 1

<211> 1057

<212> DNA

<213> 番茄（Solanum lycopersicum）

<400> 1

atgcaatcag attatgaaat gggtgggatc catcaagagt gtgaagatga gcctagattc 60

atggtggaaa ataatgcttc cacttcttcc ccattttacc caaactatca cttccctccg 120

acgtctcatc ctattctcca acaaatccac agtttaccga ttactcaaca ttttttccct 180

tatcaacatg ctcattacag atctatgtca gaagaaataa gagtagatca gtctcagacg 240

gcggagttag tggcttttcc tgcaagtgaa ataagaggag gacaagaaga tgctttgatt 300

cgtgggagtg agcgatactg tacacagcct cgacaaactt gtgtagctgt ttggcaaaac 360

caagaagatt ctgctatgaa acaacctgtt tggtaatctt ttctgcactc aatcacatgt 420

aaatctctcc cgtacaccct accctattaa ttaatataaa tattaatatt ttattattat 480

tattattttt gatttatgta ggaaaggaga atattcaaat ggaaatgcaa ttgagaaaaa 540

caaacaagaa gaagatgagg aattgtatag tttagaagaa actaataaac gtagagtagt 600

attcggagag ttagaagcta tttgtattcg tggaattgca tctgaatctg ctgataattt 660

gccaaccaac cacaatgtca cttttcctga attggctctc aatgaagcca tggttaacaa 720

aatggataat actatgggta aatttcataa aaggaagaga gggaaagatg aatggggaag 780

atttttcaag tcattagtga agaaactggc gaaccaccaa gaagatctac aaagaagttt 840

gatggaaaca atggagagat tagatcaaga aagaaaagaa agagaagaat tatggagaga 900

gaaagaatta gaaaaactcc aaaatgaaga agctgctaga gcccatgaaa gaagattggc 960

ttcaactaga gaagctgctc ttgtttcttg cttagaaaaa ctcacaggtc agaaaattga 1020

ttttcaaaca ttcaaaataa aggaagacga aacctga 1057

<210> 2

<211> 948

<212> DNA

<213> 番茄（Solanum lycopersicum）

<400> 2

atgcaatcag attatgaaat gggtgggatc catcaagagt gtgaagatga gcctagattc 60

atggtggaaa ataatgcttc cacttcttcc ccattttacc caaactatca cttccctccg 120

acgtctcatc ctattctcca acaaatccac agtttaccga ttactcaaca ttttttccct 180

tatcaacatg ctcattacag atctatgtca gaagaaataa gagtagatca gtctcagacg 240

gcggagttag tggcttttcc tgcaagtgaa ataagaggag gacaagaaga tgctttgatt 300

cgtgggagtg agcgatactg tacacagcct cgacaaactt gtgtagctgt ttggcaaaac 360

caagaagatt ctgctatgaa acaacctgtt tggaaaggag aatattcaaa tggaaatgca 420

attgagaaaa acaaacaaga agaagatgag gaattgtata gtttagaaga aactaataaa 480

cgtagagtag tattcggaga gttagaagct atttgtattc gtggaattgc atctgaatct 540

gctgataatt tgccaaccaa ccacaatgtc acttttcctg aattggctct caatgaagcc 600

atggttaaca aaatggataa tactatgggt aaatttcata aaaggaagag agggaaagat 660

gaatggggaa gatttttcaa gtcattagtg aagaaactgg cgaaccacca agaagatcta 720

caaagaagtt tgatggaaac aatggagaga ttagatcaag aaagaaaaga aagagaagaa 780

ttatggagag agaaagaatt agaaaaactc caaaatgaag aagctgctag agcccatgaa 840

agaagattgg cttcaactag agaagctgct cttgtttctt gcttagaaaa actcacaggt 900

cagaaaattg attttcaaac attcaaaata aaggaagacg aaacctga 948

<210> 3

<211> 315

<212> PRT

<213> 番茄（Solanum lycopersicum）

<400> 3

Met Gln Ser Asp Tyr Glu Met Gly Gly Ile His Gln Glu Cys Glu Asp

1 5 10 15

Glu Pro Arg Phe Met Val Glu Asn Asn Ala Ser Thr Ser Ser Pro Phe

20 25 30

Tyr Pro Asn Tyr His Phe Pro Pro Thr Ser His Pro Ile Leu Gln Gln

35 40 45

Ile His Ser Leu Pro Ile Thr Gln His Phe Phe Pro Tyr Gln His Ala

50 55 60

His Tyr Arg Ser Met Ser Glu Glu Ile Arg Val Asp Gln Ser Gln Thr

65 70 75 80

Ala Glu Leu Val Ala Phe Pro Ala Ser Glu Ile Arg Gly Gly Gln Glu

85 90 95

Asp Ala Leu Ile Arg Gly Ser Glu Arg Tyr Cys Thr Gln Pro Arg Gln

100 105 110

Thr Cys Val Ala Val Trp Gln Asn Gln Glu Asp Ser Ala Met Lys Gln

115 120 125

Pro Val Trp Lys Gly Glu Tyr Ser Asn Gly Asn Ala Ile Glu Lys Asn

130 135 140

Lys Gln Glu Glu Asp Glu Glu Leu Tyr Ser Leu Glu Glu Thr Asn Lys

145 150 155 160

Arg Arg Val Val Phe Gly Glu Leu Glu Ala Ile Cys Ile Arg Gly Ile

165 170 175

Ala Ser Glu Ser Ala Asp Asn Leu Pro Thr Asn His Asn Val Thr Phe

180 185 190

Pro Glu Leu Ala Leu Asn Glu Ala Met Val Asn Lys Met Asp Asn Thr

195 200 205

Met Gly Lys Phe His Lys Arg Lys Arg Gly Lys Asp Glu Trp Gly Arg

210 215 220

Phe Phe Lys Ser Leu Val Lys Lys Leu Ala Asn His Gln Glu Asp Leu

225 230 235 240

Gln Arg Ser Leu Met Glu Thr Met Glu Arg Leu Asp Gln Glu Arg Lys

245 250 255

Glu Arg Glu Glu Leu Trp Arg Glu Lys Glu Leu Glu Lys Leu Gln Asn

260 265 270

Glu Glu Ala Ala Arg Ala His Glu Arg Arg Leu Ala Ser Thr Arg Glu

275 280 285

Ala Ala Leu Val Ser Cys Leu Glu Lys Leu Thr Gly Gln Lys Ile Asp

290 295 300

Phe Gln Thr Phe Lys Ile Lys Glu Asp Glu Thr

305 310 315

<210> 4

<211> 3929

<212> DNA

<213> 番茄（Solanum lycopersicum）

<400> 4

ggggtaccgt ccactgaact cacagtgtcc ccttatgaaa attattcctc tctagtatcc 60

gaggtttgat ttagaatatg acctcccagg gtaaaatgat ctcaatcacc agagtataga 120

taccaaaaac tccggtgtca gcgaaccact gaaaggcagt aaactacact tagaatacta 180

gatttagtag ttgaagaaga agtccatgaa ttctatatta aaatgagagg aaatccctca 240

atttatagaa aacaaagggt agtgcgaaaa agttcttatt gtgccttacc ggaaaggtca 300

cacaccttag gaaaagtcat aatcttttaa aaaggttgtc acctttcata aaagtcacaa 360

cttaccataa aattcacaat ttttcataaa actcgcaact tttcataaaa gttataactt 420

ttcataaaag tcccaacatt tcataaaagt cacaactctt tataaaagtt ataactcttc 480

atttttcgtt cacagctttt taaaaatcca acaatgacct cgagcttgag aaattcatca 540

aaagaaaaaa gaatgaacaa gagtgtgaac catatagaca aggttatggt tcaataagaa 600

gttgaagcaa tgtcttaacc acaacacaaa aactactaaa aaggacaaaa taatattaat 660

atgcaaaagg caagaaaagg accatgagga tcgtcacact aactcatcta caatatcaaa 720

atactttaaa caaatcatgt cattttgatt cgtattatat gttcatgttg tctatagaat 780

aacacgtggc tacttttgat tcatattata tatatatata tatatatata tatatatata 840

tatatatata attttttaag gtttttttat accctcctta atattttcga tatatatctt 900

tttaacatct catttaatta atgttgaact aataaaaaca ttaaaaaata tatacttctt 960

ttttttaaaa ataatctcgt actcatctaa aatgtcaaat tcggtaaaac aaagtgagtt 1020

atttttattc aaattatatg ttttaattga actcacctta aaaggacatt taatagtttc 1080

tatgaagaaa agtcacttaa ttataacact acaccaattg aaacaataag aaataagctt 1140

ctttttttta aaaaaaaaga aagataatct cattattcat ctaaattgtc aaatatttct 1200

aaatcaaaac aagttgtttt tatttatatt ctatattttt ttaaaagatt tttatactca 1260

atttaaataa aatagattta atattaattc tgacgtatat ctctttaaaa tctcatttaa 1320

ttaacactat attaacttaa tataataaga aatgtgtttt aatttgtttt aaaggtaatg 1380

tcttaactct tacacatcta aaatgtgaaa caaatgtagt tatcaaaaga attaatcttt 1440

aggatcaaag atagagtaga attaatggct tttattcata gaaatagaat tcaaaaagaa 1500

gatatagata gttgatgaag gtggtcctag acacaaaaat taatgaagat gagggtgggg 1560

gtgggggaca cacacatctg acataggagg aggacaatag cacacagtaa tacattcacg 1620

tgcacttctt caattgtatc cttccaaaat cctaatatca gaatgtccct acacccctac 1680

ccctcactta ctaaagtcag cacactgcaa ttttttttta acatacatct ctctctgtgt 1740

gtagcagcct tctcccacac gtgtcccttt gttctcttct gtattctcca atggtaatgc 1800

atctcagatc ttctgcacca gttatccttg ccttgttttt attaaatcca atctttgctt 1860

tggaatggca tctcctcttt gctatatgtt tatacctttc acactttcaa taatagggag 1920

tacatctcct gcatagacac atgcgtccta cgtaatgcat ttaaagcaac atgttatgaa 1980

acatacatta acatgtgtac gatgttatat tggatatatg tctttttatt taattttgta 2040

caaatttaaa tatgtgtttg tataaattca aagttgaaag gtgtaacgat gaaaacatat 2100

atatgtttga tcgaatgcta gttgacgcta cttctatcta attaatgata tgaagctacc 2160

aataaaggtt gtatgatgga ataatatagt agtccttcat tcttaatcaa aggtttcaga 2220

ttcggatata tatatgaagg ttagagttaa tgaaggaaat ctcaaggcaa ttggtgtaat 2280

catgtacatg atatagtgtt ctattgttgg ctgatgttaa ctaaaaatat ggtaaataag 2340

taaaatagaa aaagaaaatg tttgttggaa tttggggcat tcatattttt tcaaagtaac 2400

aatcttttta tttgaaaaaa aaaaaaccta tatataattt agtaacatta atgacattgt 2460

ggttggcaaa ataattctac cgttagaaac aaagtgatca caaatgtttt tagtccgtga 2520

ggcgctgcta ttattgttta gtattgattt taaatcatta caaaatgatg agaattaaga 2580

aatttagaag tataaataaa tacccaaaaa aaaaaagtat aaatagtacg ggtcatggat 2640

aatataaaag cgagtaaccc ggcccataac tctctttagc cgcacttcct gcttgctaag 2700

tagaacatac aattcatttt tcttttctct ctaaaacagt ttttgcccat ctttcaaact 2760

cctccgccaa aaaaaaacct cctttccttc tcattagggt ttcctttgaa aaagaaagta 2820

ttgattgata tgttgtagta tttctagatc tgaaacgaag ctatgcaatc agattatgaa 2880

atgggtggga tccatcaaga gtgtgaagat gagcctagat tcatggtgga aaataatgct 2940

tccacttctt ccccatttta cccaaactat cacttccctc cgacgtctca tcctattctc 3000

caacaaatcc acagtttacc gattactcaa cattttttcc cttatcaaca tgctcattac 3060

agatctatgt cagaagaaat aagagtagat cagtctcaga cggcggagtt agtggctttt 3120

cctgcaagtg aaataagagg aggacaagaa gatgctttga ttcgtgggag tgagcgatac 3180

tgtacacagc ctcgacaaac ttgtgtagct gtttggcaaa accaagaaga ttctgctatg 3240

aaacaacctg tttggtaatc ttttctgcac tcaatcacat gtaaatctct cccgtacacc 3300

ctaccctatt aattaatata aatattaata ttttattatt attattattt ttgatttatg 3360

taggaaagga gaatattcaa atggaaatgc aattgagaaa aacaaacaag aagaagatga 3420

ggaattgtat agtttagaag aaactaataa acgtagagta gtattcggag agttagaagc 3480

tatttgtatt cgtggaattg catctgaatc tgctgataat ttgccaacca accacaatgt 3540

cacttttcct gaattggctc tcaatgaagc catggttaac aaaatggata atactatggg 3600

taaatttcat aaaaggaaga gagggaaaga tgaatgggga agatttttca agtcattagt 3660

gaagaaactg gcgaaccacc aagaagatct acaaagaagt ttgatggaaa caatggagag 3720

attagatcaa gaaagaaaag aaagagaaga attatggaga gagaaagaat tagaaaaact 3780

ccaaaatgaa gaagctgcta gagcccatga aagaagattg gcttcaacta gagaagctgc 3840

tcttgtttct tgcttagaaa aactcacagg tcagaaaatt gattttcaaa cattcaaaat 3900

aaaggaagac gaaacctgag tcgacgcgt 3929

<210> 5

<211> 948

<212> RNA

<213> 番茄（Solanum lycopersicum）

<400> 5

augcaaucag auuaugaaau gggugggauc caucaagagu gugaagauga gccuagauuc 60

augguggaaa auaaugcuuc cacuucuucc ccauuuuacc caaacuauca cuucccuccg 120

acgucucauc cuauucucca acaaauccac aguuuaccga uuacucaaca uuuuuucccu 180

uaucaacaug cucauuacag aucuauguca gaagaaauaa gaguagauca gucucagacg 240

gcggaguuag uggcuuuucc ugcaagugaa auaagaggag gacaagaaga ugcuuugauu 300

cgugggagug agcgauacug uacacagccu cgacaaacuu guguagcugu uuggcaaaac 360

caagaagauu cugcuaugaa acaaccuguu uggaaaggag aauauucaaa uggaaaugca 420

auugagaaaa acaaacaaga agaagaugag gaauuguaua guuuagaaga aacuaauaaa 480

cguagaguag uauucggaga guuagaagcu auuuguauuc guggaauugc aucugaaucu 540

gcugauaauu ugccaaccaa ccacaauguc acuuuuccug aauuggcucu caaugaagcc 600

augguuaaca aaauggauaa uacuaugggu aaauuucaua aaaggaagag agggaaagau 660

gaauggggaa gauuuuucaa gucauuagug aagaaacugg cgaaccacca agaagaucua 720

caaagaaguu ugauggaaac aauggagaga uuagaucaag aaagaaaaga aagagaagaa 780

uuauggagag agaaagaauu agaaaaacuc caaaaugaag aagcugcuag agcccaugaa 840

agaagauugg cuucaacuag agaagcugcu cuuguuucuu gcuuagaaaa acucacaggu 900

cagaaaauug auuuucaaac auucaaaaua aaggaagacg aaaccuga 948

Claims

1.蛋白质在下述B1)-B12)任一种中的应用：

B1)调控植物果形；

B2)制备调控植物果形的产品；

B3)使植物果形由矩形果转变成圆形果；

B4)制备使植物果形由矩形果转变成圆形果的产品；

B5)调控植物果汁含量；

B6)制备调控植物果汁含量的产品；

B7)使植物果汁含量由少汁果转变成多汁果；

B8)制备使植物果汁含量由少汁果转变成多汁果的产品；

B19)调控植物果形和果汁含量；

B10)制备调控植物果形和果汁含量的产品；

B11)使植物的果实由矩形少汁果型转变成圆形多汁果型；

B12)制备使植物的果实由矩形少汁果型转变成圆形多汁果型产品；

所述蛋白质为如下A1)或A2)或A3)：

A1)由序列表中序列3所示的氨基酸序列组成的蛋白质；

A2)序列表中序列3所示的蛋白质的N端或/和C端连接蛋白标签得到的融合蛋白；

2.权利要求1所述蛋白质的相关生物材料在权利要求1中所述B1)-B12)任一种中的应用，所述相关生物材料为下述C1)-C11)中的任一种：

C1)编码权利要求1中所述蛋白质的核酸分子；

C2)含有C1)所述核酸分子的表达盒；

C9)由C8)所述转基因植株的可再生细胞产生的组织培养物；

C10)由C9)所述组织培养物产生的原生质体；

C11)表达出正常水平或较高权利要求1中所述的蛋白质的含量和/或活性的核酸分子。

3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：C1)所述核酸分子为如下D1)或D2)或D3)或D4)所示：

D1)序列表中序列1所示的DNA分子；

D2)编码序列是序列表中序列2所示的DNA分子；

D3)转录序列表中序列5所示的RNA的DNA分子；

D4)在严格条件下与D1)或D2)或D3)限定的DNA分子杂交，且编码权利按要求1所述蛋白质的DNA分子；

C11)所述核酸分子为如下E1)或E2)或E3)所示：

E1)序列表中序列5所示的RNA分子；

E2)转录序列表中序列5所示RNA的DNA分子；

4.权利要求1中所述蛋白质或权利要求2中所述相关生物材料在培育圆形果和/或多汁果的转基因植物中的应用。

5.权利要求1中所述蛋白质或权利要求2中所述相关生物材料在植物育种中的应用。

6.一种改变植物果形和/或果汁含量的方法，其特征在于：包括改变目的植物中权利要求1中所述蛋白质的表达和/或含量和/或活性，使目的植物的果形和/或果汁含量改变。

7.一种培育圆形果和/或多汁果的转基因植物的方法，其特征在于：包括提高矩形果和/或少汁果的目的植物中权利要求1中所述蛋白质的表达和/或含量和/或活性，得到转基因植物；所述转基因植物与所述目的植物相比，所述转基因植物为圆形果和/或多汁果。

8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于：所述提高矩形果和/或少汁果的目的植物中权利要求1中所述蛋白质的表达和/或含量和/或活性为在矩形果和/或少汁果的目的植物中表达或过表达权利要求1中所述蛋白质。

9.根据权利要求7所述的方法，其特征在于：所述表达或过表达的方法为将权利要求1中所述蛋白质的编码基因导入矩形果和/或少汁果的目的植物；具体的，所述权利要求1中所述蛋白质的编码基因的核苷酸序列是序列表中序列2所示的DNA分子。

10.根据权利要求1-5任一所述的应用，或，权利要求6-9任一所述的方法，其特征在于：所述植物可为双子叶植物或单子叶植物。