CN112226478A

CN112226478A - 小麦肽及其制备方法和应用

Info

Publication number: CN112226478A
Application number: CN202011339152.6A
Authority: CN
Inventors: 冯凤琴
Original assignee: Hangzhou Kangyuan Food Science And Technology Co ltd
Current assignee: Hangzhou Kangyuan Food Science And Technology Co ltd
Priority date: 2020-06-11
Filing date: 2020-11-25
Publication date: 2021-01-15

Abstract

本申请公开一种小麦肽及其制备方法和应用，所述小麦肽的水解度为5.0～8.0％；相对分子量排布为：＜1000Da45～60％；1000～5000Da15～25％；5000～10000Da10～15％；＞10000Da8～20％。本申请的小麦肽具有缓解疲劳和改善便秘的作用。可应用于制备缓解疲劳或改善便秘的功能食品或保健食品中。

Description

小麦肽及其制备方法和应用

技术领域

本申请涉及一种蛋白肽的应用，具体涉及一种小麦肽及其制备方法和应用。

背景技术

生命的本质是蛋白质，蛋白质(包括酶)的化学组成是肽，肽有着人体健康开关之称。自1902年，德国科学家合成世界上第一个多肽类物质，荣获诺贝尔奖以来，科学界对肽的研究已经持续了117年，肽与诺贝尔结下了不解之缘。期间肽相关研究发现一共获得17次诺贝尔奖，诞生了27位诺贝尔奖获得者。肽在改善与调节人们的健康方面有着巨大作用。给现代人因饮食和生活方式不当引起的“富贵病”开了一副良方。

小麦蛋白质约占小麦的13％，主要由清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白和麦谷蛋白组成。小麦谷朊蛋白(谷朊粉)主要含有麦醇溶蛋白和麦谷蛋白，占小麦蛋白的80％。谷朊蛋白(谷朊粉)能与水形成网络结构，具有优良的黏弹性、延伸性、吸水性、吸脂乳化性、薄膜成型特性等独特的物理特性。但谷朊蛋白(谷朊粉)水溶性差、易结团，口感不好，净利用率低。

生物活性肽是对生物机体的生命活动有益或是具有生理作用的肽类化合物，是一类相对分子量小于5000Da、具有多种生物学功能(抑制、激活、促进和修复)的多肽或寡肽。小麦肽是以小麦蛋白(谷朊粉)为原料，经生物酶解、精制、喷雾干燥而制成，市场上类似产品主要有小麦低聚肽，水解度一般控制在12％以上，分子量≤1000Da的占比≥85％，口感较苦，有明显的水解腥味、焦味等。

发明内容

本申请提供一种水解度及分子量均不同于现有小麦肽的全新小麦肽，以及其在缓解疲劳和缓解便秘中的应用。

小麦肽，所述小麦肽为谷朊蛋白的酶解物，所述小麦肽的水解度为5.0～8.0％；其中相对分子量小于1000Da的肽占比为45～60％。

可选的，所述小麦肽中肽的相对分子量分布为：

可选的，其中肽的相对分子量分布为：

本申请的小麦肽产品，显著改善了谷朊粉的不良风味，带有淡淡的麦香味口感不苦。

可选的，所述小麦肽中的谷氨酰胺含量大于20％。

可选的，所述小麦肽为固体粉末状。

可选的，所述小麦肽为喷雾干燥得到的粉末。

本申请还提供一种包括所述小麦肽的食品组合物。

可选的，所述小麦肽在食品组合物中的重量百分比含量≥30％。

本申请还提供一种所述的小麦肽在制备缓解疲劳食品中的用途。

可选的，所述缓解疲劳的判定为：显著增加小鼠负重游泳力竭时间，且获得选自以下的至少二种功效：

(1)降低血清尿酸氮含量；

(2)降低血清乳酸含量；

(3)增加肌肉肌糖原含量。

本申请还提供一种所述的小麦肽在制备缓解便秘的食品中的用途。

可选的，所述缓解便秘的判定为：试验小鼠6h内排粪便重量和粪便粒数任一项结果为阳性，同时小肠运动实验和排便时间任一项结果为阳性，且获得选自以下的至少一种功效：

(1)增加胃动素含量；

(2)增加胃泌素含量；

(3)增加P物质含量；

(4)降低内皮素含量；

(5)降低生长抑素含量；

(6)降低血管活性肠肽含量。

本申请还提供一种小麦肽的制备方法，包括以下步骤：

将小麦谷朊蛋白(谷朊粉)和水混合，得到料液；

调节料液的pH值，再往料液中添加蛋白酶进行酶解反应，待水解度达到5.0～8.0％，终止酶解。

可选的，谷朊粉与水的质量比为1：9～1：4。

可选的，调节料液pH值至8.0±0.2。

可选的，所述蛋白酶为碱性蛋白酶和中性蛋白酶。

可选的，添加碱性蛋白酶酶解35～45min，结束后添加中性蛋白酶酶解25～35min。进一步地，添加碱性蛋白酶酶解40min，结束后添加中性蛋白酶酶解30min。

可选的，碱性蛋白酶的投加量为料液总重量的0.5～1.0％；中性蛋白酶的投加量为料液总重量的0.5～1.0％。

可选的，还包括对酶解液依次进行的风味改善、灭酶、浓缩和干燥。

与市场类似产品小麦低聚肽相比，本申请至少具有如下效果：

(1)本申请的小麦肽，水解度低，具有特定的相对分子量分布，口感好。

(2)本申请的小麦肽缓解疲劳的效果显著增强。

(3)本申请的小麦肽能够很好地缓解便秘。

附图说明

图1为本申请小麦肽的制备工艺流程图；

图2为实施4中的实验设计流程图。

图3为实施例4中15天内粪便重量的变化结构图。

图4为实施例4中15天内粪便含水量随时间的变化图。

图5为实施例4中6小时首粒黑便排除的时间图。

图6为实施例4中6小时黑便的排出数量结果图。

图7为实施例4中6小时排出黑便的重量结果图。

图8为实施例4中6小时粪便的水分含量的结果图。

图9是实施例4中小鼠体重的变化结果图。

图10是实施例4中摄食量的变化结果图。

图11是实施例4中小肠推进实验结果图。

图12是实施例4中血清中胃动素检测结果图。

图13是实施例4中血清中胃泌素检测结果图。

图14是实施例4中血清中P物质检测结果图。

图15是实施例4中血清中生长抑素检测结果图。

图16是实施例4中血清中血管活性肠肽检测结果图。

图17是实施例4中血清中内皮素1检测结果图。

具体实施方式

下面将结合本申请实施例中的附图，对本申请实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本申请一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本申请中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本申请保护的范围。

除非另有定义，本文所使用的所有的技术和科学术语与属于本申请的技术领域的技术人员通常理解的含义相同。本文中在本申请的说明书中所使用的术语只是为了描述具体的实施例的目的，不是旨在于限制本申请。

现有市场上常见的小麦肽类似产品为小麦低聚肽，是以小麦谷朊粉为原料，经调浆、蛋白酶酶解、分离、过滤、喷雾干燥等工艺制成。其相对分子量质量小于1000Da的蛋白质酶解物所占比例(％)≥85。水解度在12％以上。

蛋白的水解度(DH)是指蛋白质中被水解的肽键占总肽键的百分比。计算公式如下：

本申请所说水解度均是指采用OPA(邻苯二甲醛)法测定的水解度。

一、小麦肽：

本申请的小麦肽水解度为5.0～8.0％。

本申请的小麦肽中，其中相对分子量小于1000Da的肽占比为45～60％。

一种实施方式中，小麦肽的肽的相对分子量排布为：

＜1000Da：45.0～60.0％；

1000～5000Da：15～25％；

5000～10000Da：10～15％；

＞10000Da：8～20％。

相对分子量的分布采用GB/T 22729-2008中附录A方法确定。

一种更具体的分子量分布情况及对应的水解度如表1：

表1

本申请的谷朊蛋白酶解的谷氨酰胺(Gln)的含量(％)见表2：

表2

表2为不同批次试剂盒法测得的Gln含量，由表2结果可知本申请的谷朊蛋白酶解物中谷氨酰胺均在20％以上。

二、小麦肽具有缓解疲劳的作用：

疲劳是机体活动到达一定程度后产生的一种自我保护的生理机制，可以防止威胁生命的过度机能衰竭。疲劳的产生是由于能源物质消耗、代谢产物堆积、内环境稳定性失调、自由基影响等原因引起的。

缓解体力疲劳功效评价必做实验项目：动物体重、负重游泳试验、血乳酸、血清尿素氮、肝糖原或肌糖原。

结果判断：负重力竭游泳试验结果阳性，血乳酸、血清尿素氮、肝糖原/肌糖原三项生化指标中任两项指标阳性，可判定该受试样品具有缓解体力疲劳功能的作用。

血尿素氮(BUN)是体内蛋白质代谢的最终产物，主要在肝细胞中生成。对运动时蛋白质分解代谢强度常以血浆尿素氮浓度以及汗液、尿液中排出的尿素氮量来估计。生理条件下BUN维持稳定，蛋白质的分解代谢没有显著增强。进行长时间运动时，体力消耗则导致蛋白质分解代谢增强，BUN浓度呈坡型升高。体内缺乏糖原时，就利用蛋白质的分解来弥补糖的不足。故BUN可作为评价运动性疲劳强度的重要指标。

无氧运动时，乳酸(LA)的堆积会刺激神经末梢，引起肌肉痉挛、疼痛，肌肉运动能力下降。同时，由乳酸引起的酸中毒也可以使肌细胞膜等膜结构的通透性出现不同程度的增高，从而影响正常功能的运行。

在力竭运动之后，作为运动供能物质的肌糖原下降严重，需要肝糖原(HG)分解为机体提供能量。肝脏不断输出葡萄糖，是血液中葡萄糖最重要的调节器官，内源性的葡萄糖有75％左右来自肝糖原分解，其余25％来自糖异生作用。因此，肝糖原存储量可视为疲劳程度的评价指标。

(1)小麦肽作为缓解疲劳食品的用途

作为缓解疲劳食品用途时，食品组合物可以是小麦肽与各类蛋白质、氨基酸、维生素、植物提取物等混合制备得到的产品；各种蛋白质可以是乳清蛋白、大豆分离蛋白等，氨基酸可以是肌酸、亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸等，维生素可以是维生素B₁、维生素B₂、维生素B₆等，植物提取物可以是咖啡因、绿茶提取物等。食品组合物的形式可以是液体、半液体或固体形式的制备物。

小麦肽在缓解疲劳的食品组合物中的质量百分比为≥30％。

三、本申请的小麦肽具有缓解便秘的作用：

便秘是临床常见的复杂症状，主要是指排便次数减少、粪便量减少、粪便干结、排便费力等。

与便秘相关的测定指标：

(a)每日排便次数、排便量及粪便水分含量。

(b)血清和结肠组织中便秘相关胃肠调节肽如胃动素(MTL)、胃泌素(Gas)、P物质(SP)、内皮素(ET-1)、生长抑素(SS)和血管活性肠肽(VIP)。

动物实验改善便秘的结果评价标准如下：

(a)小肠运动实验

在模型成立的前提下，实验组与模型对照组比较，墨汁推进率显著增加，可判定该结果阳性。

(b)排便时间、粪便粒数和粪便重量的测定

小鼠便秘模型成立的前提下，受试物组小鼠的首粒排黑便时间明显短于模型对照组，可判定该项指标结果阳性；6h内排便粒数明显高于模型对照组，可判定该项结果阳性；6h内排便总重量明显高于模型对照组，可判定该项指标结果阳性。

结果判定：

6h内排粪便粒数和粪便总重量任一项结果阳性，同时小肠运动试验和排便时间任一项结果阳性，可判定该项试验结果阳性，且具有选自以下的至少一种功效，即具有改善便秘的功效：

(1)增加胃动素含量；

(2)增加胃泌素含量；

(3)增加P物质含量；

(4)降低内皮素含量；

(5)降低生长抑素含量；

(6)降低血管活性肠肽含量。

(1)小麦肽作为缓解便秘食品的用途

作为缓解便秘食品时，可以是小麦肽与各种蛋白质、糖类、脂质、益生菌、益生元等混合制备得到的产品，各种蛋白质可以是牛奶蛋白、椰奶等，糖类可以是麦芽糖醇、异麦芽酮糖、甜菊糖苷、罗汉果苷等，脂质可以是中链脂肪酸甘油三酯、椰子油等，益生菌可以是乳酸杆菌、双歧杆菌等，益生元可以是低聚果糖、低聚木糖、抗性糊精等。食品组合物的形式可以是液体、半液体或固体形式的制备物。

小麦肽在改善便秘的食品组合物中的质量百分比为≥30％。

例如，其中一种具体的改善便秘的组合物中：小麦肽、麦芽糖醇、抗性糊精、初榨椰子油微胶囊粉、浓缩牛奶蛋白粉、羧甲基纤维素钠的质量比为50:15:15:10:7:3。

四、得到本申请特定水解度和分子量分布的其中一种制备方法包括：

(1)投料步骤：在反应釜中加入水和小麦蛋白；谷朊粉与水的质量比为1:9-1:5。

(2)酶解步骤：调节料液的pH值至8.0±0.2后往料液中添加碱性蛋白酶酶解35～45min，结束后添加中性蛋白酶酶解25～35min。

(3)对酶解液依次进行的风味改善、灭酶、浓缩和干燥成型步骤。

一种具体的制备工艺如图1所示：

(1)投料：往反应釜中加入水，打开剪切泵，缓慢加入小麦蛋白(谷朊粉)，调节料液的pH至8.0±0.2。

(2)酶解：投料结束后，调节料液pH至8.0±0.2后添加碱性蛋白酶酶解40min，结束后添加中性蛋白酶酶解30min；碱性蛋白酶的投加量为料液总重量的1.0％；中性蛋白酶的投加量为料液总重量的1.0％。

(3)调味：酶解结束后用风味蛋白酶作用30min。

(4)灭酶：100℃进行作用30min。

(5)浓缩：将料液糖度浓缩至30°。

(6)喷雾成型：喷雾成型为现有成熟工艺。

(7)包装。

五、本申请的小麦肽的缓解疲劳实验设计如下：

以下缓解疲劳实验均采用保健食品功能评价方法：以一定剂量灌胃小鼠30天后，测定游泳能力以及血液、肝脏和肌肉相关指标，综合所有指标得出评价结论。

实施例1

(1)实验动物

昆明种雄性小鼠60只，体重20±2g，自由进食标准颗粒饲料及饮水，保持环境温度25±2℃，光照周期12h:12h条件下适应性饲养一周后使用。

(2)实验分组

将小鼠随机分为6组，每组10只，每5只一笼，6个实验组分别为：

蛋白肽低剂量、高剂量两个剂量组，另以无菌水代替蛋白肽作为阴性对照组，用无菌水配制蛋白肽低、高剂量配制浓度。每日根据体重状况给予小鼠相应剂量的受试物，每日一次，连续灌胃30d，于固定日期测小鼠体重并记录。

表3

表1中的小麦肽组是指给予小鼠本申请小麦肽；小麦低聚肽组是指现有的市场上小麦低聚肽。通过市场购买途径获得，其水解度在≥12％，相对分子量＜1000Da的蛋白酶解物占≥85％。水解乳清蛋白是浓缩乳清蛋白经蛋白酶水解后得到的产物，通过市场购买途径获得，其水解度在8％左右。

(3)缓解疲劳试验

(3.1)负重游泳试验

给予小鼠受试物喂养30d，于末次灌胃30min后，用肥皂水洗去小鼠体表油脂，然后在小鼠尾部捆绑重量为体重5％的铁丝或铅皮，于25℃恒温水浴缸中游泳，水深≥30cm，迫使其在恒温水缸中负重游泳，记录小鼠头部没入水中7s不再上浮为力竭游泳时间。

(3.2)定时游泳试验

给予小鼠受试物喂养30d，末次灌胃30min后，于25℃恒温水浴缸中游泳，水深≥30cm，自由游泳30min。

(A)血液标本

游泳30min后立即处死大鼠，进行眼球静脉丛取血，室温静置2h后，于4℃下，4000r/min离心15min，吸取上层淡黄色的液体即为血清，放置-20℃冰箱待用。

(B)组织标本

游泳30min后立即处死大鼠，取肝脏、肌肉，并在冰浴上用生理盐水洗去浮血冻存备用。组织匀浆制备：剪取组织，称取1g组织，在冰生理盐水中漂洗以除去血液，然后与9mL生理盐水一起放入烧杯中，剪刀尽快剪碎组织块，倒入匀浆器中研磨成10％组织匀浆液后，用低温离心机3000r/min离心15min后，取上清液放置于-20℃冰箱待用。

(3.3)指标的测定

(A)体重变化：每隔4天称重一次，记录数据；

(B)缓解疲劳试验测试指标：尿素氮、乳酸和肌糖原

(B-1)小鼠负重5％的铅块的力竭游泳时间(min)；

(B-2)血液和组织指标。

(4)实验结果

数据处理：组间差异在α＝0.05水平上采用One-Way ANOVA检验。P<0.05为差异有统计学意义(与空白对照组比较，*P<0.05)。

(4.1)体重数据如表4：

表4

(4.2)缓解疲劳结果如表5：

表5

从上述结果可以得出以下结论：

(A)从力竭游泳时间的指标可以看出，小麦肽均呈阳性，小麦低聚肽未能延长时间，反而呈阴性，降低了游泳时间，有负面作用；

(B)在力竭游泳时间阳性的前提下，小麦肽组的血尿酸、血乳糖、肝糖原均具有显著性阳性效果。

(C)结合两个数据，可以得出，小麦肽组具有缓解疲劳的效果且明显优于市场上常规小麦低聚肽。

实施例2

(1)实验动物

昆明种雄性小鼠30只，体重20±2g，自由进食标准颗粒饲料及饮水，保持环境温度25±2℃，光照周期12h:12h条件下适应性饲养一周后使用。

(2)实验分组

将小鼠随机分为3组，每组10只，每5只一笼，3个实验组分别为：

表6

组别	灌胃剂量(mg/g,bw/d)
		空白对照组	同等剂量的蒸馏水
小麦肽组	2
		浓缩乳清蛋白组	2

表6中的小麦肽组是指给予小鼠本申请小麦肽；浓缩乳清蛋白，通过市场购买途径获得，蛋白质含量≥80％。

(3)缓解疲劳试验

该步骤参见实施例1.

(4)实验结果

(4.1)小鼠负重5％铅块的力竭游泳时间、小鼠肌肉中肌糖原的含量、小鼠血清中乳酸的含量和小鼠血清中尿酸氮含量结果见表7：

表7

由表8的结果结合判断标准，综合判断可知，本申请的小麦肽具有显著的缓解体力疲劳作用。

(4.2)右后腿肌肉/体重百分比及肌肉脂肪含量如表8：

表8

组别	肌肉比率(％)	肌肉脂肪含量(％)
			阴性对照组	1.74±0.27	3.45±0.49
乳清蛋白组	2.15±0.26<sup>*</sup>	2.06±0.88<sup>*</sup>
			小麦肽组	2.51±0.49<sup>*</sup>	2.29±0.37<sup>*</sup>

由表9结果可知本申请小麦肽能显著促进肌肉增长，且显著降低肌肉中脂肪含量。

(4.3)超氧化物歧化酶活力(肝组织)、丙二醛含量(肝组织)和谷胱甘肽过氧化酶(肝组织)测定结果如表9：

表9

组别	T-SOD(U/mg prot)	MDA(nmol/mg prot)	GSH-Px酶活力(U/mg prot)
				阴性对照	105.14±4.55	2.47±0.14	104.55±4.54
乳清蛋白	120.19±6.57<sup>*</sup>	2.06±0.14<sup>*</sup>	127.48±7.24<sup>*</sup>
				小麦肽	126.74±10.46<sup>*</sup>	1.90±0.12<sup>*</sup>	135.70±11.70<sup>*</sup>

从表9结果可知，本申请的小麦肽具有显著抗氧化能力。氧化产生的自由基是引起疲劳的原因之一。

实施例3

小麦肽人体试食案例：

应用案例1：

姓名：A先生，职业：公职人员，每天晚上坚持游泳1小时后食用小麦肽，食用量15g，与奶粉按照1:1比例混合，用300mL水冲泡后食用，坚持2个月后，腹部明显缩减，手臂肌肉明显增加。

应用案例2：

姓名：B先生，职业：厨师，每日食用量15g/次，直接用300mL水冲泡后食用，坚持1个月后，食用前每天都需午休，食用后不用午睡也不会疲惫。

六、本申请的小麦肽缓解小鼠便秘的实验设计如下：

实施例4

(1)实验动物

健康雄性BALB/C小鼠72只，体重20±2g，自由饮食，保持环境温度25±2℃，光照周期12h:12h条件下适应性饲养1周后开始实验。

(2)样品来源及配置

小麦肽：选自表1，例如序号2。

芦荟制片：商业途径购买。

墨汁的配置(5％的活性碳粉、10％阿拉伯树胶)：准确称取阿拉伯树胶10g，加水80mL，煮沸至溶液透明，称取活性碳粉5g加至上述溶液煮沸3次，待溶液晾干后加水定容至100ml，于冰箱中4℃保存，用前摇匀。

盐酸洛哌丁胺胶囊，每粒含量2mg，小鼠灌胃剂量为10mg/kg.bw，小鼠灌胃体积0.1ml/10g，即浓度为1mg/ml，临用前配置。

(3)便秘动物实验设计

按照体重将小鼠随机分为6组(表10)：正常对照组，便秘模型组，阳性对照组，小麦肽低剂量组，中剂量组和高剂量组，每组12只。实验周期为15天，空白组每天先给予灌胃生理盐水，其他组每天先给予小鼠灌胃盐酸洛哌丁胺胶囊0.1ml/10g.bw(10mg/kg.bw)。0.5h后，空白组和模型组给予小鼠灌胃蒸馏水，阳性对照组灌胃芦荟制片，样品组灌胃小麦肽溶液。实验期间记录老鼠的摄食量和体重。实验第0、3、6、9、12、15天定时收集粪便样本，记录每只小鼠的粪便湿重，烘干后计算粪便含水量。

表10实验分组和灌胃物

(3.1)小鼠排便实验

小鼠灌胃的最后一天(第14天)进行小鼠排便实验。检测方法如下：实验第13天晚上给予小鼠禁食不禁水16h，实验第14天，各组均灌胃盐酸洛哌丁胺胶囊0.1ml/10g.bw(10mg/kg.bw)，对照组灌胃同等体积的蒸馏水。0.5h后，空白组和模型对照组用墨汁灌胃，样品组灌胃含有对应内容物的墨汁溶液，并开始计时。将小鼠放置代谢笼中，立即恢复正常饮食。观察并记录每只小鼠首粒排黑便时间，6h内排便粒数、粪便总重量(湿重)和粪便含水量。

(3.2)小肠运动试验

实验第14天晚上开始禁食，不禁水16h，以排空肠道。禁食16h后各组均灌胃盐酸洛哌丁胺胶囊0.1ml/10g.bw(10mg/kg.bw)，对照组灌胃同等体积的蒸馏水。30min后，空白组和模型对照组用墨汁灌胃，样品组灌胃含有对应内容物的墨汁溶液，并开始计时。30min后颈椎脱臼处死小鼠，摘取眼球取血，分离出血清。然后将小鼠脱颈处死并打开腹腔，剪取完整的胃肠(上端自幽门，下端至回盲肠的肠管)，并将小肠系膜剪断，使小肠慢慢伸直，在撒有生理盐水的玻璃板上，拉直小肠，经自然回缩后，用1m钢直尺测量从幽门到墨汁前沿的距离(墨汁糊推进长度)和从幽门到回盲肠起始处的距离(小肠总长度)，计算小肠推进率。

(a)血清中便秘相关胃肠调节肽如胃动素(MTL)、胃泌素(Gas)、P物质(SP)、内皮素(ET-1)、生长抑素(SS)和血管活性肠肽(VIP)的测定；

(b)收集小鼠粪便粪便；

(3.3)实验设计流程

实验设计流程如图2所示。

(4)实验结果

数据处理说明：组间比较采用单因素方差分析，P＜0.05为差异显著，P＜0.01为差异及显著。和空白组下相比，P＜0.05为*，P＜0.01为**；和模型组相比，P＜0.05为^#，P＜0.01为^##。

(4.1)粪便湿重和含水量随时间的变化如图3和图4所示。随着时间的变化，模型组的粪便湿重和含水量在逐渐减少，粪便重量由第0天的170mg降至56mg，含水量由第0天的60％左右降到35％，说明造模成功。小麦肽低、中、高剂量组在第6天有显著作用，阳性对照组也在第6天有作用，但数据规律性不强。

(4.2)6h排便实验结果如图5～图8所示：

(a)与空白组相比，模型组小鼠的首颗黑便出现时间差异极显著，说明模型造模成功；与模型组相比较，除去小麦肽高剂量组差异不显著外，其余各组差异均达到极显著。然而小麦肽高剂量组在15天的观察实验中是有显著效果的，可能的原因是由于本次实验所用的小麦肽高剂量的配置浓度太大，加上墨汁后浓度更大，有一定粘度，使得样品在小肠中的推进速率降低。

(b)和模型组相比，除去小麦肽高剂量组差异不显著外，其余各组均达到极显著；

(c)和模型组相比，各组的粪便重量均差异显著；

(d)和模型组相比，各组的粪便含水量均差异显著。

(e)综合上面的结果，小麦肽低、中剂量对于改善盐酸哌洛丁胺胶囊致小鼠便秘模型具有一定的改善作用。

(4.3)小鼠体重和摄食量变化如图9和图10所示。

(a)小鼠体重增加：在15天的实验期间，空白组的小鼠体重增加均高于其他组；模型组的体重增加在9天时，除去小麦肽高剂量组，均低于其他组；在第15天时，模型组的体重增加均低于其他组。说明盐酸洛哌丁胺胶囊致小鼠便秘后，有降低小鼠体重的趋势。

(b)小鼠摄食量变化：在15天的实验期间，空白组的小鼠摄食量处于稳定状态，其他组的摄食量均有变化；在15天的实验期间，模型组的摄食量均小于其他组(除去第15天时小麦肽高剂量组)。

(4.3)小肠推进实验结果如图11所示。

和模型组相比，阳性对照组和样品组均无显著性差异。结合造模小鼠的首颗黑便出现的时间，空白组出现时间为50min，模型组的时间为164min(约2.5h)，小麦肽低剂量和中剂量的出现时间为107min(约1.5h)和120min(约2h)，说明在本次所使用的盐酸哌洛丁胺胶囊的剂量下，在1.5h时样品才会有效果，而小肠推进实验是在灌胃墨汁后0.5h即将小鼠处死，此时样品作用可能还没体现。

(4.4)血清胃肠调节肽指标如图12～图17所示。

阳性组和小麦肽高、中、低剂量组都符合兴奋性递质(胃动素、胃泌素和P物质)的分泌大于模型组而小于空白对照组，抑制性递质(生长抑素、血管活性肠肽和内皮素1)的分泌小于模型组。这说明盐酸洛哌丁胺胶囊致小鼠便秘，导致小鼠血清兴奋性递质分泌量下降，而抑制性递质分泌量上升；小麦肽处理后，兴奋性递质的分泌和抑制性递质的分泌趋于正常。

实施例5

小麦肽人体试食案例：

应用案例3：

姓名：A女士，职业：办公室职员，每日食用量15g/次，早餐与豆浆一起食用，用300mL水冲泡后食用，坚持15天后，肠道功能明显改善，减少了便秘。

应用案例4：

姓名：B女士，职业：教师，每日食用量15g/次，直接用300mL水冲泡后食用，坚持7天后，便秘明显改善，从3-4天/次到1-2次/天。

以上所述实施例仅表达了本申请的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本申请构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本申请的保护范围。因此，本申请专利的保护范围应以所附权利要求为准。

Claims

1.小麦肽，所述小麦肽为谷朊蛋白的酶解物，其特征在于，所述小麦肽的水解度为5.0～8.0％；其中相对分子量小于1000Da的肽占比为45～60％。

2.根据权利要求1所述小麦肽，其特征在于，所述小麦肽中肽的相对分子量分布为：

3.根据权利要求2所述的小麦肽，其特征在于，其中肽的相对分子量分布为：

4.根据权利要求1所述的小麦肽，其特征在于，所述小麦肽中的谷氨酰胺含量大于20％。

5.根据权利要求1所述的小麦肽，其特征在于，所述小麦肽为喷雾干燥得到的粉末。

6.一种包括权利要求1-5任一所述小麦肽的食品组合物。

7.根据权利要求6所述的食品组合物，其特征在于，所述小麦肽在食品组合物中的重量百分比含量≥30％。

8.根据权利要求1-5任一所述的小麦肽在制备缓解疲劳食品中的用途。

9.根据权利要求1-5任一所述的小麦肽在制备缓解便秘食品中的用途。

10.根据权利要求1所述的小麦肽的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

将小麦谷朊蛋白和水混合，得到料液；

调节料液的pH值，再往料液中添加蛋白酶进行酶解反应，待水解度达到5.0-8.0％，终止酶解。

11.根据权利要求10的制备方法，其特征在于，调节料液的pH值至8.0±0.2。

12.根据权利要求10所述的小麦肽的制备方法，其特征在于，所述蛋白酶为碱性蛋白酶和中性蛋白酶。

13.根据权利要求12所述的小麦肽的制备方法，其特征在于，添加碱性蛋白酶酶解35～45min，结束后添加中性蛋白酶酶解25～35min。

14.根据权利要求10所述的小麦肽的制备方法，其特征在于，还包括对酶解液进行风味改善、灭酶、浓缩和干燥。