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CN111621438B - 分离自猪场氧化塘的魏德曼尼芽孢杆菌lm-lz及其应用 - Google Patents

分离自猪场氧化塘的魏德曼尼芽孢杆菌lm-lz及其应用 Download PDF

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CN111621438B
CN111621438B CN202010498911.7A CN202010498911A CN111621438B CN 111621438 B CN111621438 B CN 111621438B CN 202010498911 A CN202010498911 A CN 202010498911A CN 111621438 B CN111621438 B CN 111621438B
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bacillus
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wiedmannii
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Jiangxi Heyi Biotechnology Co Ltd
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Abstract

本发明公开了一种分离自猪场氧化塘底泥的魏德曼尼芽孢杆菌(Bacillus Wiedmannii)LM‑LZ，为魏德曼尼芽孢杆菌Bacillus Wiedmannii，保藏编号：CGMCC No.18768。本发明还同时公开了该菌株的用途：处理含氮废水。该菌株属于异养硝化‑好氧反硝菌，可有效去除废水中的总氮。

Description

分离自猪场氧化塘的魏德曼尼芽孢杆菌LM-LZ及其应用
技术领域
本发明涉及一株分离自沼液氧化塘底泥的异养硝化-好氧反硝菌株魏德曼尼芽孢杆菌(Bacillus Wiedmannii)LM-LZ及其在含氮废水处理中的应用。
背景技术
随着社会发展和人们生产活动强度的加剧，大量含污染物的废水未经处理便排入自然水体，导致水体富营养化和一系列环境问题日益突出。其中氮素是水体富营养化形成的一类重要营养型污染物，如何处理去除废水中的氮素，对消除因氮素导致的水体富营养化，保护水环境意义重大。
氮素是污水中普遍存在的污染物，水体中氮以有机氮和无机氮的形式存在，具体形态包括蛋白氮、氨氮、有机氮、亚硝酸盐氮和硝酸盐氮，如何高效、快速去除水中氮素是当今水污染防治技术研究领域的一个重要课题和热点。传统理论认为反硝化脱氮过程是严格的厌氧过程，但从20世纪80年代以来，好氧反硝化细菌不断被报道，科研人员开始关心好氧反硝化菌脱氮潜力及其作用机理。研究发现好氧反硝化细菌含有好氧反硝化酶体系，包括存在于细菌细胞里的两种硝酸盐还原酶，分别是膜内硝酸盐还原酶及与细胞膜相结合和周质硝酸盐还原酶，膜内硝酸盐还原酶好氧时其不起作用，周质硝酸盐还原酶在很高溶解氧浓度下仍然能够发生作用；亚硝酸盐还原酶，分布于细胞膜外周质中，包括一种是细胞色素cd1型亚硝酸盐还原酶，另一种是含铜离子型亚硝酸盐还原酶；一氧化氮还原酶，结合于细胞膜上，催化NO还原成N2O；一氧化二氮还原酶，位于膜外周质空间内，为可溶解性含铜离子酶，将N2O还原为N2。协同呼吸是好氧反硝化的重要机理，即反硝化菌可以将电子从被还原的物质传递给氧气，同时也可以传递给硝酸盐。传统生物脱氮技术是基于微生物的硝化作用和反硝化作用，存在较多缺陷，脱氮过程存在不连续性和效率低下问题，好氧反硝化菌的发现，为污水脱氮处理技术的升级和克服传统生物脱氮技术缺陷，建立新型污水脱氮技术提供了理论支撑。
目前已知的可用于污水脱氮处理的相近属微生物主要为其它芽孢杆菌，已有研究表明，部分其它芽孢杆菌表现出较强的反硝化作用(李兵，林炜铁，水生态学杂志，2009，2(3)：48-52；郭强，太原理工大学硕士论文，2015；Fan LF,Shieh WY,Wu WF,et al，2006,Coastal and Shelf Science,69:543-553；Joong KK,Kyoung JP,Kyoung SC,et al，2005,Bioresource Technology,96:1897-1906)，其可有效脱除水体中的氮，可作为污水脱氮处理的备选微生物。至于魏德曼尼芽孢杆菌对污水脱氮潜力的研究，国内外均未见报道。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一种能够用于含氮废水处理的异养硝化-好氧反硝菌株魏德曼尼芽孢杆菌(Bacillus Wiedmannii)LM-LZ及其应用。
为了解决上述技术问题，本发明提供一种分离自猪场氧化塘底泥(生猪养殖场沼液氧化塘底泥)的异养硝化-好氧反硝菌株魏德曼尼芽孢杆菌(Bacillus Wiedmannii)LM-LZ，为魏德曼尼芽孢杆菌Bacillus Wiedmannii，保藏编号：CGMCC No.18768。
作为本发明的魏德曼尼芽孢杆菌(Bacillus Wiedmannii)LM-LZ的改进：该菌株16S rDNA基因序列如SEQ ID NO.1所示。
本发明还同时提供了上述魏德曼尼芽孢杆菌(Bacillus Wiedmannii)LM-LZ的用途：处理含氮废水(富含氮的废水)。
作为本发明的魏德曼尼芽孢杆菌(Bacillus Wiedmannii)LM-LZ的用途的改进：去除废水中的氮；属于异养硝化-好氧反硝菌，可有效去除废水中的总氮。
本发明菌株的保藏信息如下：
保藏名称：魏德曼尼芽孢杆菌Bacillus Wiedmannii，保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，保藏编号：CGMCC No.18768，保藏日期：2019年10月30日。
该菌株的菌落特征如下：为短杆菌，表面粗糙，有菌毛，不产胞子，具有小的荚膜，革兰氏阳性，菌体大小为(1.2～1.7)μm×(0.4～0.7)μm，在固体培养基上，菌落呈圆形，表面凸起、光滑，边缘完整，呈白色，不透明。
该菌株16S rDNA基因序列如SEQ ID NO.1所示：
本发明菌株由采集自江西省新余市渝水区水北镇生猪养殖场沼液氧化塘底泥中筛选获得，根据Sherlock MIS软件系统对菌株LM-LZ定性和定量的分析生成的脂肪酸图谱，对比Library数据库，初步鉴定菌LM-LZ为魏德曼尼芽孢杆菌(Bacillus Wiedmannii)，相似指数SI(similarity index)为0.991；用16S rDNA测序鉴定方法也证明该菌株为魏德曼尼芽孢杆菌(Bacillus Wiedmannii)，相似指数SI(similarity index)为100。
将本发明菌株接种至含氮废水中，在15～35℃、150～200r·min-1的好氧条件下进行培养2～3d，可有效去除废水中的总氮、氨氮、硝态氮和亚硝态氮。
本发明所述的含氮废水，其总氮浓度为60～600mg·L-1、氨氮浓度为20～200mg·L-1、硝态氮总磷浓度为20～250mg·L-1和亚硝态氮氨氮浓度为20～200mg·L-1。
该菌株能用于生猪养殖废水的处理，在好氧条件下，pH7.0、温度(25～30)℃，OD415nm0.2，含氮废水中总氮为593.0mg·L-1、氨氮为194.8mg·L-1、硝态氮为202.2mg·L-1和亚硝态氮为196.0mg·L-1，转速180r·min-1的条件下，培养3天，过滤，废水中总氮、氨氮、硝态氮和亚硝态氮的去除率分别为96.71％、97.42％、95.93％和96.78％，可达到城镇污水处理厂污染物排放标准(GB18918-2002)一级B限量标准(总氮浓度为20mg·L-1和氨氮浓度为8mg·L-1)排放。
异养硝化-好氧反硝菌株魏德曼尼芽孢杆菌(Bacillus Wiedmannii)LM-LZ及其在含氮废水处理中的应用，属于首次发现。
综上所述，本发明经筛选获得了一株用于含氮废水处理的异养硝化-好氧反硝菌株魏德曼尼芽孢杆菌(Bacillus Wiedmannii)LM-LZ，其具有高效处理含氮废水的潜力。为控制含氮废水排放对环境的影响提供了技术基础，应用前景广阔。
附图说明
下面结合附图对本发明的具体实施方式作进一步详细说明。
图1为魏德曼尼芽孢杆菌(Bacillus Wiedmannii)LM-LZ(放大10000倍)；
图2为16S rDNA PCR扩增结果(LZ：菌株LM-LZ；Marker：DNA标准分子量)；
图3为基于16S rDNA序列的菌株LM-LZ系统发育树。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明进行进一步描述，但本发明的保护范围并不仅限于此：
实施例1、降解菌株的筛选与鉴定
1材料与方法
1.1培养基和试剂
富集培养基：硝酸钾(2、5、10、20或30g，逐步提高加入进行驯化富集)，CaCl2·6H2O0.1g，MgCl2 0.25g，K2HPO4 1.5g，NH4Cl 1g，蛋白胨9g，H2O 1000mL，pH＝6.5～7.0；
基础培养基：NH4NO31.00g，MgSO4·7H2O 0.5g，(NH4)2SO4 0.5g，KH2PO4 0.5g，NaCl0.5g，K2HPO4 1.5g，H2O 1000mL，pH4.0；
每1000ml基础培养基中加入30g硝酸钾，得含30g·L-1硝酸钾的液体基础培养基；
每1000ml基础培养基中加入30g硝酸钾和15g琼脂，得含30g·L-1硝酸钾的固体基础培养基；
所有培养基使用前需要进行高温灭菌(为常规的高温灭菌，一般为在1.1个大气压，121℃下灭菌20min)，此为常识。
含氮废水：由20.48g·L-1乙酸钠、1.44g·L-1硝酸钾、0.98g·L-1亚硝酸钠、0.94g·L-1硫酸铵、0.5g·L-1K2HPO4·3H2O和0.03g·L-1MgSO4·7H2O制备而成，pH7.0。其中总氮593.0mg·L-1、氨氮194.8mg·L-1、硝态氮202.2mg·L-1、亚硝态氮196.0mg·L-1。
1.2菌株对含氮废水处理效能的测定
将纯化后的单个纯化菌株经基础培养基扩繁，具体为：将纯化菌株，取一接种环接种至100mL基础基础中，30℃、180r·min-1摇床上培养7天；所得培养液按照10％(体积％)接种量转接到1000mL的液体基础培养基中，继续培养3天，培养条件同上；得扩繁菌液。以菌量OD415nm＝0.2接种到装有100mL上述含氮废水(由20.48g·L-1乙酸钠、1.44g·L-1硝酸钾、0.98g·L-1亚硝酸钠、0.94g·L-1硫酸铵、0.5g·L-1K2HPO4·3H2O和0.03g·L-1MgSO4·7H2O制备而成，pH7.0)250mL三角瓶中，即，取上述扩繁菌液(约10ml)接种到装有100mL含氮废水的250mL三角瓶中，此时废水中的菌量OD415nm＝0.2；以不接菌的含氮废水作对照，在30℃、180r·min-1的恒温摇床上振荡好氧培养3天。培养结束后，用0.20μm膜过滤，除去菌丝体，滤液用于相应总氮、氨氮、硝态氮、亚硝态氮的测定(方法见：国家环境保护总局水和废水监测分析方法编委会，水和废水监测分析方法(第四版)，2002，中国环境科学出版社)。
去除率(％)＝(对照样品残留量-处理样品残留量)×100/对照样品残留量。
1.3优势降解菌株选育
1.3.1菌株来源
采集江西省新余市渝水区水北镇生猪养殖场沼液氧化塘底泥。
1.3.2降解菌株的分离、纯化和筛选
从每份生猪养殖场沼液氧化塘底泥中取10g，在无菌的条件下，分别加到装有100mL无菌液体富集培养基的250mL三角瓶中.在30℃下180r·min-1摇床上培养7天后，按10％接种量转移到下一批富集培养基上(硝酸钾梯度依次为2、5、10、20或30g·L-1)，同条件驯化培养7天。以此类推，得硝酸钾浓度为30g·L-1富集培养基对应的培养液。
将上述培养液按10％接种量转接到含30g·L-1硝酸钾的液体基础培养基中，继续培养7天，连续转接2次后；取0.1mL所得的发酵液于含30g·L-1硝酸钾的固体基础培养基上反复进行平板划线分离、纯化，直到筛选得到单个菌落，将纯菌落接种到斜面上，于4℃冰箱内保存。
将筛选所得的菌株，按照上文告知的对含氮废水处理效能的测定方法进行检测，选择对含氮废水处理效果最佳的菌株作为本发明的菌株。
1.3.3菌株鉴定
菌株鉴定采用美国MIDI公司的Sherlock microbial identity system(MIS)软件系统，该系统将基础培养基上纯化的单菌落按照MIDI公司的操作规范进行脂肪酸的提取和分析，定性(种类)和定量(含量)地分析微生物的脂肪酸成份并生成脂肪酸图谱，将生成的图谱和数据库(Library)进行比对，根据相似指数SI(similarity index)鉴定未知菌种，相似指数SI大于0.9就基本可确定是某种微生物。该系统是一相对快速和具有丰富菌库的微生物鉴定系统，已得到较广泛的应用(吴愉萍，徐建明，汪海珍等.SherlockMIS系统应用于土壤细菌鉴定的研究.土壤学报，2006，43(4):642-647)。
此外，同时用16S rDNA鉴定方法进行验证，与Sherlock microbial identitysystem(MIS)进行比较。以LM-LZ菌株总DNA为模板，用16S rDNA基因的通用引物进行PCR扩增，得到的扩增片段经回收、测序可明确其大小，再将测序结果用BLAST软件与GenBank中的序列进行同源性比较。
1.3.4菌株形态特征观察及生理生化特性测定
将菌株接种在含30g·L-1硝酸钾的固体基础培养基中，48h后电镜观察菌株形态特征；取纯化的菌株生长的对数期进行革兰氏、结晶紫简单荚膜等染色；生理生化特性测定参照《常见细菌系统鉴定手册》(东秀珠，蔡妙英)。
2.结果
2.1菌株的分离与筛选
经分离、纯化、筛选获得1株能有效处理含氮废水的细菌，命名为LM-LZ，其它在30g·L-1硝酸钾的固体固体基础培养基上能生长的菌株(例如LM-LZq和LM-LZs等)降解力都不同程度地衰退，培养3天，发现LM-LZ对含氮废水中污染物总氮、氨氮、硝态氮和亚硝态氮的去除率分别为96.71％、97.42％、95.93％和96.78％。
2.2菌株的鉴定
2.2.1菌株LM-LZ基本形态及生理生化特征
为短杆菌，表面粗糙，有菌毛，不产胞子，具有小的荚膜，革兰氏阳性，菌体大小为(1.2～1.7)μm×(0.4～0.7)μm，在固体培养基上，菌落呈圆形，表面凸起、光滑，边缘完整，呈白色，不透明。乙酰甲基甲醇生成试验(v-p)反应阳性，吲哚实验阳性，能液化明胶，其他生理生化特性见表1。
表1、魏德曼尼芽孢杆菌(Bacillus Wiedmannii)LM-LZ的生理生化特性
Figure BDA0002523965150000051
Figure BDA0002523965150000061
注：+阳性反应；-阴性反应
2.2.2菌株LM-LZ鉴定
(1)Sherlock MIS系统对LM-LZ的鉴定
根据Sherlock MIS软件系统对菌LM-LZ脂肪酸定性和定量的分析生成的脂肪酸图谱，对比Library数据库，初步鉴定菌LM-LZ为魏德曼尼芽孢杆菌(Bacillus Wiedmannii)，相似指数SI(similarity index)为0.993。
(2)16S rDNA鉴定方法对LM-LZ的验证
I.DNA提取结果
以LM-LZ菌株总DNA为模板，用16S rDNA基因的通用引物进行PCR扩增，得到1条约为1kb的片段(图2)。扩增片段经回收、测序明确其大小为1375bp(SEQ ID NO.1)。
II.16S rDNA基因PCR扩增和序列分析
将测序结果用BLAST软件与GenBank中的序列进行同源性比较发现，LM-LZ菌株与魏德曼尼芽孢杆菌(Bacillus Wiedmannii)具有很高的同源性，同源性接近100％，遗传距离非常近。
综合LM-LZ的生理生化性质、Sherlock MIS(MIDI鉴定系统)及16S rDNA系统进化分析可以看出，该菌属于魏德曼尼芽孢杆菌(Bacillus Wiedmannii)。
3结论
从江西省新余市渝水区水北镇生猪养殖场沼液氧化塘底泥分离得到1株能够能有效处理含氮废水的高效菌株LM-LZ(CGMCC No.18768)，经Sherlock MIS系统和16S rDNA鉴定为魏德曼尼芽孢杆菌(Bacillus Wiedmannii)。
将LM-LZ进行了保藏，保藏信息如下：
保藏名称：魏德曼尼芽孢杆菌Bacillus Wiedmannii，保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，保藏编号：CGMCC No.18768，保藏日期：2019年10月30日。
实施例2、菌株对含氮废水处理性能检测
1材料与方法
1.1培养基和试剂
基础培养基：同实施例1。
含氮废水：由20.48g·L-1乙酸钠、1.44g·L-1硝酸钾、0.98g·L-1亚硝酸钠、0.94g·L-1硫酸铵、0.5g·L-1K2HPO4·3H2O和0.03g·L-1MgSO4·7H2O制备而成，pH7.0。其中总氮593.0mg·L-1、氨氮194.8mg·L-1、硝态氮202.2mg·L-1、亚硝态氮196.0mg·L-1。
1.2菌株对对含氮废水处理性能
将纯化后的单个魏德曼尼芽孢杆菌(Bacillus Wiedmannii)LM-LZ菌株经基础培养基扩繁，具体为：将魏德曼尼芽孢杆菌(Bacillus Wiedmannii)LM-LZ，取一接种环接种至100mL基础培养基中，30℃下180r·min-1摇床上培养7天；所得培养液按照10％(体积％)接种量转接到1000mL基础培养基中，继续培养3天，培养条件同上；得菌液。
以菌量OD415nm＝0.2接种到100mL含氮废水中，即，取上述扩繁魏德曼尼芽孢杆菌(Bacillus Wiedmannii)LM-LZ菌液(约10mL)接种到装有100mL含氮废水的250mL三角瓶中，此时废水中的菌量OD415nm＝0.2；以不接菌的含氮废水作对照，在30℃,180r·min-1的恒温摇床上振荡好氧培养3天。培养结束后，按照实施例1方法测定菌株LM-LZ对含氮废水中总氮、氨氮、硝态氮和亚硝态氮的去除率。
2.结果
菌株LM-LZ在pH7.0、OD415nm0.2、转速180r·min-1及好氧环境条件下，对含氮废水总氮、氨氮、硝态氮和亚硝态氮的去除率分别为96.71％、97.42％、95.93％和96.78％。总氮、氨氮、硝态氮和亚硝态氮残余浓度分别为19.56mg·L-1、5.02mg·L-1、8.23mg·L-1和6.31mg·L-1，可达到城镇污水处理厂污染物排放标准(GB18918-2002)一级B限量标准(总氮浓度为20mg·L-1和氨氮浓度为8mg·L-1)排放，表明本发明分离、筛选的魏德曼尼芽孢杆菌(Bacillus Wiedmannii)是一株可有效处理含氮废水的高效菌株，对控制含氮废水对环境的影响具有一定的应用潜力。
对比实验：
将本发明筛选过程中获得的其余菌株以及目前现有的其他一定反硝化作用的芽孢杆菌(如下表2所述)，替代LM-LZ后，按照实施例2所述方法进行检测，所得结果与LM-LZ的结果对比如下表2所述。可见本发明所发现的魏德曼尼芽孢杆菌(Bacillus Wiedmannii)LM-LZ是一株可有效处理含氮废水的高效菌株，可同时高效去除废水中的总氮、氨氮、硝态氮和亚硝态氮，对控制含氮废水对环境的影响具有一定的应用潜力，而其他相近属却没有该能力或者能力较弱。
表2
Figure BDA0002523965150000081
实施例3：菌株对养猪场含氮废水处理性能检测
1材料与方法
1.1培养基和试剂
基础培养基：同实施例1。
养猪场产生的含氮废水：pH6.8、总氮570.0mg·L-1、氨氮414.0mg·L-1、硝态氮110.0mg·L-1、亚硝态氮46.0mg·L-1。
此为养猪场水冲栏养殖方式水泡粪方式下浸出的废水。
1.2菌株对养猪场产生的含氮废水的处理性能
以“养猪场产生的含氮废水”替代实施例2中的“含氮废水”，其余等同于实施例2。
2.结果
菌株LM-LZ在pH6.8、OD415nm0.2、转速180r·min-1及好氧环境条件下，对养猪场含氮废水总氮、氨氮、硝态氮和亚硝态氮的去除率分别为98.33％、98.73％、97.26％和97.29％。废水总氮、氨氮、硝态氮和亚硝态氮残余浓度分别为9.52mg·L-1、5.26mg·L-1、3.01mg·L-1和1.25mg·L-1，可达到城镇污水处理厂污染物排放标准(GB18918-2002)一级B限量标准(总氮浓度为20mg·L-1和氨氮浓度为8mg·L-1)排放，表明本研究分离、筛选的魏德曼尼芽孢杆菌(Bacillus Wiedmannii)是一株可有效处理养猪场含氮废水的高效菌株，对控制养猪场含氮废水对环境的影响具有一定的应用潜力。
实施例4、菌株对合成药厂含氮废水处理性能检测
1材料与方法
1.1培养基和试剂
基础培养基：同实施例1。
合成药厂产生的含氮废水：pH7.0、总氮427.0mg·L-1、氨氮173.0mg·L-1、硝态氮237.0mg·L-1、亚硝态氮17.0mg·L-1。
1.2菌株对合成药厂含氮废水处理性能
以“合成药厂产生的含氮废水”替代实施例2中的“含氮废水”，其余等同于实施例2。
2.结果
菌株LM-LZ在pH7.0、OD415nm0.2、转速180r·min-1及好氧环境条件下，对合成药厂含氮废水总氮、氨氮、硝态氮和亚硝态氮的去除率分别为96.49％、96.83％、96.27％和96.3％。总氮、氨氮、硝态氮和亚硝态氮的残余浓度分别为14.95mg·L-1、5.48mg·L-1、8.84mg·L-1和0.63mg·L-1，可达到城镇污水处理厂污染物排放标准(GB18918-2002)一级B限量标准(总氮浓度为20mg·L-1和氨氮浓度为8mg·L-1)排放，表明本发明分离、筛选的魏德曼尼芽孢杆菌(Bacillus Wiedmannii)是一株可有效处理合成药厂含氮废水的高效菌株，对控制养合成药厂含氮废水对环境的影响具有一定的应用潜力。
最后，还需要注意的是，以上列举的仅是本发明的若干个具体实施例。显然，本发明不限于以上实施例，还可以有许多变形。本领域的普通技术人员能从本发明公开的内容直接导出或联想到的所有变形，均应认为是本发明的保护范围。
序列表
<110> 新余禾一生物科技有限公司
<120> 分离自猪场氧化塘的魏德曼尼芽孢杆菌LM-LZ及其应用
<160> 1
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 1375
<212> DNA
<213> 2 Ambystoma laterale x Ambystoma jeffersonianum
<400> 1
cccaccgact tcgggtgtta aaactctcgt ggtgtgacgg gcggtgtgta caaggcccgg 60
gaacgtattc accgcggcat gctgatccgc gattactagc gattccagct tcatgtaggc 120
gagttgcagc ctacaatccg aactgagaac ggttttatga gattagctcc acctcgcggt 180
cttgcagctc tttgtaccgt ccattgtagc acgtgtgtag cccaggtcat aaggggcatg 240
atgatttgac gtcatcccca ccttcctccg gtttgtcacc ggcagtcacc ttagagtgcc 300
caacttaatg atggcaacta agatcaaggg ttgcgctcgt tgcgggactt aacccaacat 360
ctcacgacac gagctgacga caaccatgca ccacctgtca ctctgctccc gaaggagaag 420
ccctatctct agggttttca gaggatgtca agacctggta aggttcttcg cgttgcttcg 480
aattaaacca catgctccac cgcttgtgcg ggcccccgtc aattcctttg agtttcagcc 540
ttgcggccgt actccccagg cggagtgctt aatgcgttaa cttcagcact aaagggcgga 600
aaccctctaa cacttagcac tcatcgttta cggcgtggac taccagggta tctaatcctg 660
tttgctcccc acgctttcgc gcctcagtgt cagttacaga ccagaaagtc gccttcgcca 720
ctggtgttcc tccatatctc tacgcatttc accgctacac atggaattcc actttcctct 780
tctgcactca agtctcccag tttccaatga ccctccacgg ttgagccgtg ggctttcaca 840
tcagacttaa gaaaccacct gcgcgcgctt tacgcccaat aattccggat aacgcttgcc 900
acctacgtat taccgcggct gctggcacgt agttagccgt ggctttctgg ttaggtaccg 960
tcaaggtgcc agcttattca actagcactt gttcttccct aacaacagag ttttacgacc 1020
cgaaagcctt catcactcac gcggcgttgc tccgtcagac tttcgtccat tgcggaagat 1080
tccctactgc tgcctcccgt aggagtctgg gccgtgtctc agtcccagtg tggccgatca 1140
ccctctcagg tcggctacgc atcgttgcct tggtgagccg ttacctcacc aactagctaa 1200
tgcgacgcgg gtccatccat aagtgacagc cgaagccgcc tttcaatttc gaaccatgca 1260
gttcaaaatg ttatccggta ttagccccgg tttcccggag ttatcccagt cttatgggca 1320
ggttacccac gtgttactca cccgtccgcc gctaacttca taagagcaag ctctt 1375

Claims (4)

1.分离自猪场氧化塘底泥的魏德曼尼芽孢杆菌（Bacillus Wiedmannii）LM-LZ，其特征在于：为魏德曼尼芽孢杆菌Bacillus Wiedmannii，保藏编号：CGMCC No. 18768。
2.根据权利要求1所述的魏德曼尼芽孢杆菌（Bacillus Wiedmannii）LM-LZ，其特征在于：该菌株16S rDNA基因序列如SEQ ID NO.1所示。
3. 如权利要求1或2所述的魏德曼尼芽孢杆菌（Bacillus Wiedmannii）LM-LZ的用途，其特征在于：处理含氮废水。
4. 根据权利要求3所述的魏德曼尼芽孢杆菌（Bacillus Wiedmannii）LM-LZ的用途，其特征在于：属于异养硝化-好氧反硝菌，可有效去除废水中的总氮。
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