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CN111084780A - 老鹳草素在制备治疗骨质疏松合并骨折的药物中的用途 - Google Patents

老鹳草素在制备治疗骨质疏松合并骨折的药物中的用途 Download PDF

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CN111084780A
CN111084780A CN202010023863.6A CN202010023863A CN111084780A CN 111084780 A CN111084780 A CN 111084780A CN 202010023863 A CN202010023863 A CN 202010023863A CN 111084780 A CN111084780 A CN 111084780A
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CN
China
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fracture
geraniin
osteoporosis
bone
treatment
Prior art date
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Application number
CN202010023863.6A
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陈鹏
沈志强
杨仁华
李璠
何波
张莉
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Kunming Medical University
Original Assignee
Kunming Medical University
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Publication date
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    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
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    • A—HUMAN NECESSITIES
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    • A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
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Abstract

本发明提供老鹳草素在制备治疗骨质疏松合并骨折的药物中的用途，属于生物医药技术领域，老鹳草素能促进合并骨折的愈合，改善骨质疏松症的骨密度，提高骨折断力、骨灰重和骨钙含量，降低再次发生骨折的风险的。本发明还提供一种用于治疗骨质疏松合并骨折的药物，包含老鹳草素；该药物按照每日1‑200mg/kg老鹳草素的量施用，每天1次或分为2‑4次施用，以摄取9‑12周或更久的方式施用。

Description

老鹳草素在制备治疗骨质疏松合并骨折的药物中的用途
技术领域
本发明属于生物医药技术领域，具体涉及老鹳草素在制备治疗骨质疏松合并骨折的药物中的用途。
背景技术
骨质疏松症(ostcoporosis，OP)是一种全身性骨组织结构退变性疾病，老年人是该病的易发人群。OP是骨折高危因素，60岁以上人口OP合并骨折发生率约12.2％，我国人口老龄化步伐不断加快，OP引发的骨折例数逐年上升，严重威胁老年人生命健康，给家庭、社会带来沉重负担。因OP是一种进行性疾病，若得不到有效控制治疗，即使骨折愈合后，再次骨折的风险仍较高。目前对于骨质疏松症的防治主要有以下几方面：预防儿童期、少年期、育龄妊娠期等特殊人群的膳食缺钙及维生素D3，控制发病的危险因素；通过血清骨源性磷酸酶、骨钙素等生化检查及骨影像学检查做到对本病的早期诊断；对于确诊患者通过改变生活习惯、饮食控制补充足够的钙及维生素D3以及应用药物进行治疗；对于骨形态、结构已破坏的患者进行手术治疗。其中，药物治疗是最主的方法，目前以双膦酸盐类、雌激素类、甲状旁腺素类、降钙素类和维生素D3类药物单用或联合使用进行治疗，有较好的疗效，但也存在毒副作用大和有些药使用不便等缺陷，在一定程度上限制了这些药物的应用。
老鹳草素提取自大戟科植物叶下珠(Phyllanthus urinaria L.)，化学结构见图1，近年的研究表明老鹳草素具有多种药理活性：(1)抗氧化，体内外的实验均表明老鹳草素可清除氧自由基、羟自由基和超氧自由基等。(2)抗肿瘤：老鹳草素可以抑制转化生长因子等活性，会吓死肿瘤的迁移、侵袭、抗凋亡能力减弱，抑制肿瘤生长，甚至加速肿瘤细胞凋亡。(3)抗病毒及抗菌活性。老鹳草素应用于治疗骨质疏松合并骨折尚未见报道。
发明内容
本发明的目的在于一种老鹳草素在制备治疗骨质疏松合并骨折的药物中的用途，老鹳草素能促进合并骨折的愈合，改善骨质疏松症的骨密度，提高骨折断力、骨灰重和骨钙含量，降低再次发生骨折的风险的。
本发明为实现上述目的所采取的技术方案为：
老鹳草素在制备治疗骨质疏松合并骨折的药物中的用途。老鹳草素对骨质疏松合并骨折的治疗作用强，不仅能促进合并骨折的愈合，而且能改善骨质疏松症的骨密度，提高骨折断力、骨灰重和骨钙含量，降低再次发生骨折的风险，且疗骨质疏松合并骨折患者对老鹳草素不良反应小，本发明充分挖掘传统医学在防治疾病中的重要应用，为骨质疏松合并骨折的治疗寻找了一条新途径。
根据本发明一实施方式，老鹳草素为老鹳草素单体和/或老鹳草素盐。
本发明的又一目的，在于提供一种用于治疗骨质疏松合并骨折的药物，包含，老鹳草素。
根据本发明一实施方式，药物还包含选自以下的一种或多种药剂：维生素C、维生素A、维生素D、维生素B1、维生素B2、维生素B6、泛酸、叶酸、钙和镁。优选，药物还包含维生素D和钙。
根据本发明一实施方式，药物还包含药学上能够接受的载体和/或赋形剂和/或稀释剂。
根据本发明一实施方式，药物为经口组合物。
本发明的又一目的，在于提供一种用于治疗骨质疏松合并骨折的药物的用法，其特征在于：按照每日1-200mg/kg老鹳草素的量施用所述药物。优选的，每天1次或分为2-4次施用。
根据本发明一实施方式，药物以摄取9-12周或更久的方式施用。
本发明的有益效果为：老鹳草素对骨质疏松合并骨折的治疗作用强，不仅能促进合并骨折的愈合，而且能改善骨质疏松症的骨密度，提高骨折断力、骨灰重和骨钙含量，降低再次发生骨折的风险，且疗骨质疏松合并骨折患者对老鹳草素不良反应小，本发明充分挖掘传统医学在防治疾病中的重要应用，为骨质疏松合并骨折的治疗寻找了一条新途径。
附图说明
图1为本发明老鹳草素的化学结构式；
图2为本发明实施例4中各组动物X平片。
具体实施方式
本发明允许各种修改及变形，其特定实施例进行了举例，下面进行详细说明。但并非要把本发明限定于公开的特别形态之意，相反，本发明包括与由权利要求项所定义的本发明思想一致的所有修改、均等及替代。
这些实施例只用于更具体地说明本发明，根据本发明的要旨，本发明的范围并非限定于这些实施例，这是所属技术领域的技术人员不言而喻的。
本发明一实施方式提供了一种老鹳草素在制备治疗骨质疏松合并骨折的药物中的用途。骨质疏松多发于老年人，骨质疏松骨折的发生与骨密度及骨量降低有关。骨质疏松骨折患者一旦发生再骨折，通常需卧床休养，可能继发栓塞性疾病，甚至造成患者死亡。老鹳草素对骨质疏松合并骨折的治疗作用强，不仅能促进合并骨折的愈合，而且能改善骨质疏松症的骨密度，提高骨折断力、骨灰重和骨钙含量，降低再次发生骨折的风险，且疗骨质疏松合并骨折患者对老鹳草素不良反应小，本发明充分挖掘传统医学在防治疾病中的重要应用，为骨质疏松合并骨折的治疗寻找了一条新途径。
于本发明一实施方式中，老鹳草素为老鹳草素单体或老鹳草素盐。
于本发明一实施方式中，老鹳草素来自大戟科植物叶下珠(Phyllanthusurinaria L.)的活性提取成分。
于本发明一实施方式中，老鹳草素通过如下方法获得：
1)料液比为1:10-20将叶下珠粉中加入含有质量浓度为0.3-1.5％的乳酸、浓度为20-25％的硫酸铵和质量浓度为17-23％的乙醇的提取液中，在150-180W超声波下提取40-50min，以8000-15000r/min离心5-12min，上清液在分液漏斗中静置分层，经0.45μm微孔滤膜滤过，得提取液；老鹳草素为可水解鞣质，用加热回流的方法提取容易被分解为没食子酸、六羟基联苯二甲酸、鞣花酸、柯里拉京、云实酸和云实素，而利用超声波产生的强烈振动、高的加速度、强烈的空化效应、搅拌作用等，可加速植物材料中的有效成分进入溶剂，从而增加有效成分的提取率，缩短提取时间，还可避免高温对提取成分的影响；同时，该提取液在较低的乙醇浓度下也能较好地破坏酚类物质与基质的作用力增加，有利于酚类物质的溶出，且该提取液对酚类物质选择性强，利于叶下珠粉中酚类物质的提取，使得叶下珠粉中酚类物质的提取率至少可达8.4％；
2)按体积比0.3-0.7:5-15:0.1-0.3:0.04-0.0.08:18-25将石油醚、乙酸乙酯、甲醇、柠檬酸铵、水配制溶剂系统，置于分液漏斗中，摇匀后静置分层，待平衡1-4h后，将上相和下相分开，取上相作为固定相，下相作为流动相；
3)将固定相以10-15mL/min的流量灌满高速逆流色谱仪的管柱，然后以700-800r/min的转速正向运转高速逆流色谱仪的主机，同时以0.5-1.5mL/min的流速泵入流动相，待流动相开始流出色谱柱时，将按1-10mg/mL的质量浓度溶于流动相的提取液由进样阀进样，进入样品分离状态，同时设置紫外检测波长为280nm，然后根据检测器紫外谱图，收集老鹳草素馏分。高速逆流色谱法(HSCCC)是目前分离性质相近、容易变性的化合物的一种较好的方法，老鹳草素在本实施方式用溶剂系统中分配系数合适，能够实现老鹳草素的较好分离，提高老鹳草素馏分的纯度和回收率，经HPLC检测，老鹳草素馏分的纯度至少可达94％，回收率至少可达90％。老鹳草素馏分进一步提纯可得到99％以上的纯品老鹳草素。
本发明一实施方式还提供了一种老鹳草素和杨梅素在制备治疗骨质疏松合并骨折的药物中的用途。其中，老鹳草素和杨梅素的重量比为1:0.05-0.3。老鹳草素和杨梅素配的伍呈协同增强作用，能够协同治疗去卵巢日本长耳大白兔骨质疏松合并骨折症状，协同促进合并骨折的愈合，协同提高骨密度、骨折断力、骨灰重和骨钙含量，大大降低再次发生骨折的风险。
本发明一实施方式还提供了一种老鹳草素和绿原酸在制备治疗骨质疏松合并骨折的药物中的用途。其中，老鹳草素和绿原酸的重量比为1:0.1-0.25。老鹳草素和绿原酸的配伍呈协同增强作用，能够协同治疗去卵巢日本长耳大白兔骨质疏松合并骨折症状，协同促进合并骨折的愈合，协同提高骨密度、骨折断力、骨灰重和骨钙含量，大大降低再次发生骨折的风险。
本发明一实施方式还提供了一种用于治疗骨质疏松合并骨折的药物，包含老鹳草素和/或杨梅素，或者，包含老鹳草素和/或绿原酸。
于本发明一实施方式中，药物还包含选自以下的一种或多种药剂：维生素C、维生素A、维生素D、维生素B1、维生素B2、维生素B6、泛酸、叶酸、乳酸钙、钙和镁。优选，药物还包含维生素D和乳酸钙。
于本发明一实施方式中，药物还包含药学上能够接受的载体和/或赋形剂和/或稀释剂。可以包含的载体、赋形剂及稀释剂有乳糖、葡萄糖、蔗糖、山梨糖醇、甘露醇、木糖醇、赤藓糖醇、麦芽糖醇、淀粉、阿拉伯胶、藻酸盐、明胶、磷酸钙、硅酸钙、纤维素、甲基纤维素、微晶纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、水、羟基苯甲酸甲酯、羟基苯甲酸丙酯、滑石粉、硬脂酸镁和矿物油等。
于本发明一实施方式中，药物为经口组合物。药物的形式为粉状、丸状、颗粒状、片状、胶囊状、混悬状、液状、乳状或糖浆状等。固体状药物中混合至少一种以上的赋形剂，例如淀粉、碳酸钙、蔗糖、乳糖、明胶等而制造。而且，除了简单的赋形剂以外，也使用如硬脂酸镁、滑石粉等润滑剂。液状药物除了常用的简单稀释剂，例如水、液状石蜡以外，可以包含多种赋形剂，例如湿润剂、甜味剂、芳香剂、保存剂等。
本发明一实施方式还提供了上述药物的用法，。
本发明一实施方式还提供了上述药物的用法，按照每日1-200mg/kg老鹳草素的量施用所述药物。优选，每天1次或分为2-4次施用。
于本发明一实施方式中，药物以摄取9-12周或更久的方式施用。
以下结合实施例对本发明作进一步详细描述：
实施例1：
老鹳草素通过如下方法获得：
1)料液比为1:14将叶下珠粉中加入含有质量浓度为0.8％的乳酸、22％的硫酸铵和质量浓度为19％的乙醇的提取液中，在160W超声波下提取45min，以10000r/min离心8min，上清液在分液漏斗中静置分层，经0.45μm微孔滤膜滤过，得提取液，酚类物质的提取率为8.83％；
2)按体积比0.5:10:0.2:0.05:20将石油醚、乙酸乙酯、甲醇、柠檬酸铵、水配制溶剂系统，置于分液漏斗中，摇匀后静置分层，待平衡2h后，将上相和下相分开，取上相作为固定相，下相作为流动相；
3)将固定相以12mL/min的流量灌满高速逆流色谱仪的管柱，然后以750r/min的转速正向运转高速逆流色谱仪的主机，同时以1.0mL/min的流速泵入流动相，待流动相开始流出色谱柱时，将按3mg/mL的质量浓度溶于流动相的提取液由进样阀进样，进入样品分离状态，同时设置紫外检测波长为280nm，然后根据检测器紫外谱图，收集老鹳草素馏分。经HPLC检测，老鹳草素馏分的纯度为95.2％，回收率为90.8％。
实施例2：
老鹳草素通过如下方法获得：
1)料液比为1:14将叶下珠粉中加入含有质量浓度为0.8％的乳酸、22％的硫酸铵和质量浓度为19％的乙醇的提取液中，在160W超声波下提取45min，以10000r/min离心8min，上清液在分液漏斗中静置分层，经0.45μm微孔滤膜滤过，得提取液，酚类物质的提取率至少可达5.44％；
2)按体积比0.5:10:0.2:20将石油醚、乙酸乙酯、甲醇、水配制溶剂系统，置于分液漏斗中，摇匀后静置分层，待平衡2h后，将上相和下相分开，取上相作为固定相，下相作为流动相；
3)将固定相以12mL/min的流量灌满高速逆流色谱仪的管柱，然后以750r/min的转速正向运转高速逆流色谱仪的主机，同时以1.0mL/min的流速泵入流动相，待流动相开始流出色谱柱时，将按3mg/mL的质量浓度溶于流动相的提取液由进样阀进样，进入样品分离状态，同时设置紫外检测波长为280nm，然后根据检测器紫外谱图，收集老鹳草素馏分。
对比实施例1和实施例2可知，实施例1中多酚的提取率高于实施例2，这说明实施例1用提取液能够提高多酚的提取率。
实施例3：
老鹳草素通过如下方法获得：
1)料液比为1:14将叶下珠粉中加入含有质量浓度为0.8％的乳酸、22％的硫酸铵和质量浓度为19％的乙醇的提取液中，在160W超声波下提取45min，以10000r/min离心8min，上清液在分液漏斗中静置分层，经0.45μm微孔滤膜滤过，得提取液；
2)按体积比0.5:10:0.2:20将石油醚、乙酸乙酯、甲醇、水配制溶剂系统，置于分液漏斗中，摇匀后静置分层，待平衡2h后，将上相和下相分开，取上相作为固定相，下相作为流动相；
3)将固定相以12mL/min的流量灌满高速逆流色谱仪的管柱，然后以750r/min的转速正向运转高速逆流色谱仪的主机，同时以1.0mL/min的流速泵入流动相，待流动相开始流出色谱柱时，将按3mg/mL的质量浓度溶于流动相的提取液由进样阀进样，进入样品分离状态，同时设置紫外检测波长为280nm，然后根据检测器紫外谱图，收集老鹳草素馏分。经HPLC检测，老鹳草素馏分的纯度为89.7％，回收率为82.5％。
对比实施例1和实施例2可知，老鹳草素在实施例1用溶剂系统中分配系数合适，能够实现老鹳草素的较好分离，提高老鹳草素馏分的纯度和回收率。
实施例4：
老鹳草素对骨质疏松合并骨折的日本长耳大白兔骨密度及骨折愈合的影响
1.实验动物：
健康清洁级雌性日本长耳大白兔，体重2-2.5kg，由昆明医学院实验动物中心提供[实验动物实验生产许可证号：SCXK(滇)2015-0002]。饲养条件：室温22±5℃，相对温度60-70％，单笼单只饲养，喂食全价饮料，150g/天，每天投喂一次，使用自动饮水器自由饮水。
2.造模
2.1骨质疏松模型复制：以实验兔双侧卵巢摘除复制骨质疏松模型，模拟人绝经期后的骨质疏松症。实验兔适应性饲养三周后，按1ml/kg体重耳静脉注射3％戊巴比妥钠麻醉动物，正仰卧位固定，腹部下2/3沿腹中线两侧各3cm去毛，以碘伏消毒手术区域并用酒精脱碘两次，沿腹中线做3cm长的切口切开皮肤及腹膜。术者手伸进骨盆前口处找到子宫，沿子宫向前找到两侧子宫角并牵引到创口，顺子宫角提起输卵管即可找到卵巢。钝性分离卵巢悬韧带，将卵巢提至腹壁切口外。在靠近卵巢血管的卵巢系膜上开一小孔，用3把止血钳夹信卵巢及其周围组织，其中一把靠近卵巢，另两把远离卵巢，然后在卵巢远端止血钳外侧2mm处用缝线结扎，切断卵巢系膜及血管，摘除卵巢。观察有无出血，若出血则需在刚刚钳夹位置做第二结扎以止血；无出血则将鸟巢放回腹腔。正常对照组不摘除卵巢，只切除卵巢周围部分脂肪组织，其余手术方式一致。双侧卵巢均摘除后闭合切口，用圆针、7号手术线缝合腹膜及腹壁肌肉；三角针、7号线缝合皮肤。碘伏消毒后手术完成，术后注意观察动物反应，如出现感染可腹腔注射头孢曲松抗感染。
2.2骨折模型复制：实验动物按1ml/kg体重耳静脉注射3％戊巴比妥钠麻醉，以伏卧位固定，除去左侧前肢饶骨部位的毛，切开皮肤，分离饶骨，应用骨线锯切除部分饶骨，形成宽2mm，深1/2饶骨直径的饶骨骨折，形成骨质疏松合并骨折动物模型。关闭切口，分别缝合骨膜和皮肤。模型组与治疗组切开皮肤并做骨折模型，正常对照组仅切开皮肤和分离饶骨而不做骨折。
3.实验分组与治疗
30只日本长耳大白兔随机分为正常对照组、骨质疏松合并骨折模型组、骨质疏松合并骨折+10mg/kg·d老鹳草素治疗组共3组，每组10只。骨质疏松症模型及10mg/kg·d老鹳草素治疗组动物采用手术除去卵巢的方法复制骨质疏松症动物模型，正常对照组手术切除卵巢周围的脂肪组织进行假手术。骨质疏松模型复制后3个月，去除卵巢的动物出现骨质疏松症，骨密度与正常对照有明显差异时，对10mg/kg·d老鹳草素模型组和治疗组进行骨折模型复制，形成骨质疏松合并骨折模型。术后立即对治疗组开始每日给予10mg/kg老鹳草素治疗，喂食10周后进行血清生化指标检测、X光检测、骨质恢复指标检测。
4.结果分析
4.1血清生化指标检测
血清钙、磷、碱性磷酸酶是评价骨形成和骨转换的常用指标。血清碱性磷酸酶、血清钙及磷浓度采用全自动生化分析仪测定，结果如表1，与假手术组比较，模型对照组、治疗组血清中碱性磷酸酶、血清钙和血清磷水平升高，且治疗组升高明显，说明老鹳草素的干预对骨折愈合的质量有促进作用。
表1骨质疏松合并骨折各组动物血清生化指标
组别 碱性磷酸酶(U/L) 血清钙(mmol/L) 血清磷(mmol/L)
正常对照组 81.94±7.19 2.70±0.21 1.57±0.15
模型对照组 83.08±7.03 2.23±0.18 2.00±0.14
治疗组 83.76±8.47<sup>ab</sup> 2.43±0.26<sup>ab</sup> 2.07±0.14<sup>ab</sup>
注：a表示与正常对照组有统计学差异(P<0.05)，b表示与模型对照组有统计学差异(P<0.05)。
4.2X光检测
骨质疏松症合并骨折大鼠骨折愈合情况采用X平片观察(如图2所示，其中A为正常对照组，B为模型对照组，C为老鹳草素治疗组)，从图2中可以看出，10mg/kg·d老鹳草素治疗10周后，治疗组骨折愈合明显，骨折愈合评分明显增加，但仍能看到骨折线。并按表2所示评分表进行骨折愈合评分，评分结果如表3，可以看出10mg/kg·d老鹳草素治疗10周后，骨质疏松症合并骨折大鼠骨折愈合评分较高，与模型对照组比较，差异具有统计学意义。
表2骨折愈合评分表
X光表现 评分值
X线片上未发现骨痂阴影 0
X线片上可见到骨痂阴影，骨折线比较模糊 1
有明显骨痂生长，骨折线显著模糊 2
有丰富骨痂生长，骨折线接近消失 3
骨折线消失，完全连接，接近骨化 4
表3骨质疏松症合并骨折大鼠骨折愈合评分
组别 骨折愈合评分
正常对照组 0
模型对照组 3.160±0.259
治疗组 4.390±0.197<sup>b</sup>
注：a表示与正常对照组有统计学差异(P<0.05)，b表示与模型对照组有统计学差异(P<0.05)。
4.3骨质恢复指标检测
骨密度是反映骨骼强度的一个重要指标，骨密度采用双能X线骨密度测定仪进行测定；饶骨折断力采用骨强度仪进行三点折断方测定；骨灰重采用马弗炉800℃灰化2h后测得；骨灰分以盐酸溶解后测定其上清液中的钙、镁浓度，计算出骨内相应的钙、镁含量。骨质疏松合并骨折各组动物骨质恢复指标如表4所示，10mg/kg·d老鹳草素治疗10周后，左桡骨折断力、左桡骨灰重、骨钙含量和骨密度均明显增加，与模型对照组比较，差异具有统计学意义，这表明老鹳草素干预后骨密度增加。
表4骨质疏松合并骨折各组动物骨质恢复指标
Figure BDA0002361748370000091
Figure BDA0002361748370000101
注：a表示与正常对照组有统计学差异(P<0.05)，b表示与模型对照组有统计学差异(P<0.05)。
实施例5：
老鹳草素和杨梅素对骨质疏松合并骨折的日本长耳大白兔骨密度及骨折愈合的影响
1.实验动物：如实施例4。
2.造模：如实施例4。
3.实验分组与治疗
日本长耳大白兔随机分为正常对照组、骨质疏松合并骨折模型组、骨质疏松合并骨折+10mg/kg·d老鹳草素治疗1组、骨质疏松合并骨折+2.0mg/kg·d杨梅素治疗治疗2组、骨质疏松合并骨折+10mg/kg·d老鹳草素+2.0mg/kg·d杨梅素治疗3组共5组，每组10只。骨质疏松症模型、治疗1组、治疗2组、治疗3组动物采用手术除去卵巢的方法复制骨质疏松症动物模型，正常对照组手术切除卵巢周围的脂肪组织进行假手术。骨质疏松模型复制后3个月，去除卵巢的动物出现骨质疏松症，骨密度与正常对照有明显差异时，对10mg/kg·d老鹳草素模型组和治疗组进行骨折模型复制，形成骨质疏松合并骨折模型。术后立即对治疗1组开始每日给予10mg/kg老鹳草素治疗，对治疗2组开始每日给予2.0mg/kg·d杨梅素治疗，对治疗3组开始每日给予10mg/kg老鹳草素+2.0mg/kg·d杨梅素治疗，喂食10周后进行血清生化指标检测、X光检测、骨质恢复指标检测。
4.配伍计算方法
依据金氏公式计算q值，q＝EA+B/(EA+EB-EA×EB)，用于判断两药物配伍使用后的效果是否优于单独给药。若q<0.55，两药作用为显著拮抗；0.55≤q<0.85，两药作用为拮抗；0.85≤q<1.15，两药作用为单纯相加；1.15≤q<20，两药作用为协同增强；q≥20，两药作用为显著增强。
5.结果分析
5.1血清生化指标检测
血清碱性磷酸酶、血清钙及磷浓度的测定结果如表5，与模型对照组比较，治疗1组、治疗3组血清中碱性磷酸酶、血清钙和血清磷水平升高，且治疗3组升高明显，说明老鹳草素的干预对骨折愈合的质量有促进作用，治疗3组中老鹳草素和杨梅素的联合用药的作用更好。
表5骨质疏松合并骨折各组动物血清生化指标
组别 碱性磷酸酶(U/L) 血清钙(mmol/L) 血清磷(mmol/L)
正常对照组 81.94±7.19 2.70±0.21 1.57±0.15
模型对照组 83.08±7.03 2.23±0.18 2.00±0.14
治疗1组 83.76±8.47<sup>ab</sup> 2.43±0.26<sup>ab</sup> 2.07±0.14<sup>ab</sup>
治疗2组 82.24±5.35<sup>ab</sup> 2.25±0.19<sup>ab</sup> 1.93±0.12<sup>ab</sup>
治疗3组 86.55±8.47<sup>ab</sup> 2.56±0.26<sup>ab</sup> 2.24±0.14<sup>ab</sup>
注：a表示与正常对照组有统计学差异(P<0.05)，b表示与模型对照组有统计学差异(P<0.05)。
5.2X光检测
骨质疏松症合并骨折大鼠骨折愈合情况采用X平片观察，并按表2所示评分表进行骨折愈合评分，评分结果如表6，可以看出治疗10周后，与模型对照组比较，治疗1组、治疗2组、治疗3组骨质疏松症合并骨折大鼠骨折愈合评分较高，且治疗3组的效果最佳，这说明治疗3组中老鹳草素和杨梅素的配伍能够协同治疗去卵巢日本长耳大白兔骨质疏松合并骨折症状，协同促进合并骨折的愈合。
表6骨质疏松症合并骨折大鼠骨折愈合评分
Figure BDA0002361748370000111
Figure BDA0002361748370000121
注：a表示与正常对照组有统计学差异(P<0.05)，b表示与模型对照组有统计学差异(P<0.05)。
4.3骨质恢复指标检测
治疗10周后，骨质疏松合并骨折各组动物骨质恢复指标如表7所示，与模型对照组相比，治疗1组、治疗2组、治疗3组桡骨骨密度分别增加了16.91％、4.83％、26.57％，依据金氏公式，q＝26.57％/(16.91％+4.83％-16.91％×4.83％)＝1.27(如表7)，符合1.15≤q<20，表明老鹳草素和杨梅素的配伍对增加桡骨骨密度为协同增强作用。同时，从表7中可以看出，与模型对照组相比，治疗1组、治疗2组、治疗3组桡骨的左桡骨折断力、左桡骨灰重、骨钙含量和L3腰椎骨密度均增加明显，治疗3组的左桡骨折断力、左桡骨灰重、骨钙含量和L3腰椎骨密度的q分别为1.20、1.65、1.29、2.10，均符合1.15≤q<20，这表明治疗3组中老鹳草素和杨梅素的配伍呈协同增强作用，协同提高骨密度、骨折断力、骨灰重和骨钙含量，大大降低再次发生骨折的风险。
表7骨质疏松合并骨折各组动物骨质恢复指标
Figure BDA0002361748370000122
注：a表示与正常对照组有统计学差异(P<0.05)，b表示与模型对照组有统计学差异(P<0.05)。
实施例6：
老鹳草素和绿原酸对骨质疏松合并骨折的日本长耳大白兔骨密度及骨折愈合的影响
1.实验动物：如实施例4。
2.造模：如实施例4。
3.实验分组与治疗
日本长耳大白兔随机分为正常对照组、骨质疏松合并骨折模型组、骨质疏松合并骨折+10mg/kg·d老鹳草素治疗1组、骨质疏松合并骨折+1.8mg/kg·d绿原酸治疗治疗2组、骨质疏松合并骨折+10mg/kg·d老鹳草素+1.8mg/kg·d绿原酸治疗3组共5组，每组10只。骨质疏松症模型、治疗1组、治疗2组、治疗3组动物采用手术除去卵巢的方法复制骨质疏松症动物模型，正常对照组手术切除卵巢周围的脂肪组织进行假手术。骨质疏松模型复制后3个月，去除卵巢的动物出现骨质疏松症，骨密度与正常对照有明显差异时，对10mg/kg·d老鹳草素模型组和治疗组进行骨折模型复制，形成骨质疏松合并骨折模型。术后立即对治疗1组开始每日给予10mg/kg老鹳草素治疗，对治疗2组开始每日给予1.8mg/kg·d绿原酸，对治疗3组开始每日给予10mg/kg老鹳草素治疗+1.8mg/kg·d绿原酸，喂食10周后进行血清生化指标检测、X光检测、骨质恢复指标检测。
4.配伍计算方法：如实施例5。
5.结果分析
5.1血清生化指标检测
血清碱性磷酸酶、血清钙及磷浓度的测定结果如表8，与模型对照组比较，治疗1组、治疗3组血清中碱性磷酸酶、血清钙和血清磷水平升高，且治疗3组升高明显，说明老鹳草素的干预对骨折愈合的质量有促进作用，治疗3组中老鹳草素和绿原酸的联合用药的作用更好。
表8骨质疏松合并骨折各组动物血清生化指标
Figure BDA0002361748370000131
Figure BDA0002361748370000141
注：a表示与正常对照组有统计学差异(P<0.05)，b表示与模型对照组有统计学差异(P<0.05)。
5.2X光检测
骨质疏松症合并骨折大鼠骨折愈合情况采用X平片观察，并按表2所示评分表进行骨折愈合评分，评分结果如表9，可以看出治疗10周后，与模型对照组比较，治疗1组、治疗2组、治疗3组骨质疏松症合并骨折大鼠骨折愈合评分较高，且治疗3组的效果最佳，这说明治疗3组中老鹳草素和绿原酸的配伍能够协同治疗去卵巢日本长耳大白兔骨质疏松合并骨折症状，协同促进合并骨折的愈合。
表9骨质疏松症合并骨折大鼠骨折愈合评分
组别 骨折愈合评分
正常对照组 0
模型对照组 3.160±0.259
治疗1组 4.390±0.197<sup>b</sup>
治疗2组 3.243±0.156<sup>b</sup>
治疗3组 4.690±0.163<sup>b</sup>
注：a表示与正常对照组有统计学差异(P<0.05)，b表示与模型对照组有统计学差异(P<0.05)。
4.3骨质恢复指标检测
治疗10周后，骨质疏松合并骨折各组动物骨质恢复指标如表10所示，与模型对照组相比，治疗1组、治疗2组、治疗3组桡骨骨密度分别增加了16.91％、2.41％、24.25％，依据金氏公式，q＝24.25％/(16.91％+2.41％-16.91％×2.41％)＝1.28(如表10)，符合1.15≤q<20，表明老鹳草素和绿原酸的配伍对增加桡骨骨密度为协同增强作用。同时，从表10中可以看出，与模型对照组相比，治疗1组、治疗2组、治疗3组桡骨的左桡骨折断力、左桡骨灰重、骨钙含量和L3腰椎骨密度均增加明显，治疗3组的左桡骨折断力、左桡骨灰重、骨钙含量和L3腰椎骨密度的q分别为1.25、1.88、1.62、1.63，均符合1.15≤q<20，这表明治疗3组中老鹳草素和绿原酸的配伍呈协同增强作用，协同提高骨密度、骨折断力、骨灰重和骨钙含量，大大降低再次发生骨折的风险。
表10骨质疏松合并骨折各组动物骨质恢复指标
Figure BDA0002361748370000151
注：a表示与正常对照组有统计学差异(P<0.05)，b表示与模型对照组有统计学差异(P<0.05)。
上述实施例中的常规技术为本领域技术人员所知晓的现有技术，故在此不再详细赘述。
以上实施方式仅用于说明本发明，而并非对本发明的限制，本领域的普通技术人员，在不脱离本发明的精神和范围的情况下，还可以做出各种变化和变型。因此，所有等同的技术方案也属于本发明的范畴，本发明的专利保护范围应由权利要求限定。

Claims (8)

1.老鹳草素在制备治疗骨质疏松合并骨折的药物中的用途。
2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于：所述老鹳草素为老鹳草素单体和/或老鹳草素盐。
3.一种用于治疗骨质疏松合并骨折的药物，包含，权利要求1所述老鹳草素。
4.根据权利要求3所述的药物，其特征在于：所述药物还包含选自以下的一种或多种药剂：维生素C、维生素A、维生素D、维生素B1、维生素B2、维生素B6、泛酸、叶酸、钙和镁。
5.根据权利要求3所述的药物，其特征在于：所述药物还包含药学上能够接受的载体和/或赋形剂和/或稀释剂。
6.根据权利要求3所述的药物，其特征在于：所述药物为经口组合物。
7.权利要求3所述的药物的用法，其特征在于：按照每日1-200mg/kg老鹳草素的量施用所述药物。优选，每天1次或分为2-4次施用。
8.根据权利要求7所述的用法，其特征在于：所述药物以摄取9-12周或更久的方式施用。
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Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN114984326A (zh) * 2022-06-02 2022-09-02 中国科学院大学宁波华美医院 一种多重交联的可注射骨修复水凝胶制备材料及其制备方法

Citations (16)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1378858A (zh) * 2002-04-23 2002-11-13 中国科学院昆明植物研究所 一种预防或治疗骨质疏松症的药物及其制备方法和应用
US20030139354A1 (en) * 2000-06-02 2003-07-24 Herwig Buccholz Composition for the treatment and/or the prevention of osteoporosis and/or inflammatory joint diseases
JP2004244327A (ja) * 2003-02-12 2004-09-02 Ichimaru Pharcos Co Ltd 美白剤及び美白化粧料
CN1720040A (zh) * 2002-12-05 2006-01-11 宝生物工程株式会社 治疗剂
KR20070093226A (ko) * 2006-03-13 2007-09-18 한국 한의학 연구원 혼합 생약재 추출물을 포함하는 골다공증 및 골절 예방 및치료용 조성물
CN101522183A (zh) * 2006-08-02 2009-09-02 秋久俊博 骨病预防及/或治疗用医药组合物、含有该组合物的功能性食品或健康食品、以及以该组合物为有效成分的医药制剂
US20110038960A1 (en) * 2008-04-21 2011-02-17 Herbonis Ag Preparation and use of a plant extract from solanum glaucophyllum with an enriched content of 1,25-dihydroxyvitamin d3 glycosides and quercetin glycosides
US20110076345A1 (en) * 2007-04-02 2011-03-31 Alfredo Avila Herbal Formulation for the Treatment of Bone Fractures and Osseous Defects
CN102065914A (zh) * 2008-04-15 2011-05-18 埃泰克斯公司 使用磷酸钙组合的骨接合剂的脊椎骨最小侵入性治疗(mitv)
CN103211855A (zh) * 2013-03-29 2013-07-24 北京本草通汇科技中心 杜仲木质部在制备保健品中的应用
CN103989694A (zh) * 2014-05-29 2014-08-20 中国人民解放军第四军医大学 杨梅苷防治骨质疏松的应用
CN105939721A (zh) * 2013-12-02 2016-09-14 塞尔巴有限公司 用于治疗皮肤疾病的草药组合
CN107115568A (zh) * 2017-02-23 2017-09-01 温州生物材料与工程研究所 具有抗菌性和生物相容性的自组装溶菌酶多层膜制备方法
BR102018003389A2 (pt) * 2018-02-21 2019-09-10 Universidade Federal Do Ceará preparações fitoterápicas com atividade anti- inflamatória e antiviral a partir de extrato padronizado de spondias mombin l.
CN110691630A (zh) * 2017-08-02 2020-01-14 巴斯夫美容护理法国公司 红毛丹果皮提取物在皮肤和/或粘膜保湿中的用途
CN111526735A (zh) * 2017-12-27 2020-08-11 三得利控股株式会社 肠道屏障功能改善用组合物

Patent Citations (16)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20030139354A1 (en) * 2000-06-02 2003-07-24 Herwig Buccholz Composition for the treatment and/or the prevention of osteoporosis and/or inflammatory joint diseases
CN1378858A (zh) * 2002-04-23 2002-11-13 中国科学院昆明植物研究所 一种预防或治疗骨质疏松症的药物及其制备方法和应用
CN1720040A (zh) * 2002-12-05 2006-01-11 宝生物工程株式会社 治疗剂
JP2004244327A (ja) * 2003-02-12 2004-09-02 Ichimaru Pharcos Co Ltd 美白剤及び美白化粧料
KR20070093226A (ko) * 2006-03-13 2007-09-18 한국 한의학 연구원 혼합 생약재 추출물을 포함하는 골다공증 및 골절 예방 및치료용 조성물
CN101522183A (zh) * 2006-08-02 2009-09-02 秋久俊博 骨病预防及/或治疗用医药组合物、含有该组合物的功能性食品或健康食品、以及以该组合物为有效成分的医药制剂
US20110076345A1 (en) * 2007-04-02 2011-03-31 Alfredo Avila Herbal Formulation for the Treatment of Bone Fractures and Osseous Defects
CN102065914A (zh) * 2008-04-15 2011-05-18 埃泰克斯公司 使用磷酸钙组合的骨接合剂的脊椎骨最小侵入性治疗(mitv)
US20110038960A1 (en) * 2008-04-21 2011-02-17 Herbonis Ag Preparation and use of a plant extract from solanum glaucophyllum with an enriched content of 1,25-dihydroxyvitamin d3 glycosides and quercetin glycosides
CN103211855A (zh) * 2013-03-29 2013-07-24 北京本草通汇科技中心 杜仲木质部在制备保健品中的应用
CN105939721A (zh) * 2013-12-02 2016-09-14 塞尔巴有限公司 用于治疗皮肤疾病的草药组合
CN103989694A (zh) * 2014-05-29 2014-08-20 中国人民解放军第四军医大学 杨梅苷防治骨质疏松的应用
CN107115568A (zh) * 2017-02-23 2017-09-01 温州生物材料与工程研究所 具有抗菌性和生物相容性的自组装溶菌酶多层膜制备方法
CN110691630A (zh) * 2017-08-02 2020-01-14 巴斯夫美容护理法国公司 红毛丹果皮提取物在皮肤和/或粘膜保湿中的用途
CN111526735A (zh) * 2017-12-27 2020-08-11 三得利控股株式会社 肠道屏障功能改善用组合物
BR102018003389A2 (pt) * 2018-02-21 2019-09-10 Universidade Federal Do Ceará preparações fitoterápicas com atividade anti- inflamatória e antiviral a partir de extrato padronizado de spondias mombin l.

Non-Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
RONG PING ZHOU，等: "Chlorogenic Acid Prevents Osteoporosis by Shp2/PI3K/Akt Pathway in Ovariectomized Rats", PLOS ONE, vol. 11, no. 12, pages 1 - 3 *
张小超，等: "老鹳草素调控家兔骨质疏松性骨折关键基因Cbfα1 的表达", 《昆明医科大学学报》 *
张小超，等: "老鹳草素调控家兔骨质疏松性骨折关键基因Cbfα1 的表达", 《昆明医科大学学报》, vol. 39, no. 8, 15 August 2018 (2018-08-15), pages 1 *
张小超，等: "老鹳草素调控家兔骨质疏松性骨折关键基因Cbfα1 的表达", 昆明医科大学学报, vol. 39, no. 8, pages 1 *
甘宁，等: "杨梅素减轻去卵巢大鼠骨质疏松", 第三军医大学学报, vol. 38, no. 6, pages 614 - 618 *

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN114984326A (zh) * 2022-06-02 2022-09-02 中国科学院大学宁波华美医院 一种多重交联的可注射骨修复水凝胶制备材料及其制备方法
CN114984326B (zh) * 2022-06-02 2023-12-05 中国科学院大学宁波华美医院 一种多重交联的可注射骨修复水凝胶制备材料及其制备方法

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