CN110785420B

CN110785420B - 作为pi3-激酶活性抑制剂的氧杂䓬并吡唑衍生物

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Publication number: CN110785420B
Application number: CN201880040561.0A
Authority: CN
Inventors: A.巴克斯特; S.M.伯特兰; M.坎贝尔; K.D.唐; C.D.哈夫纳; J.N.汉布林; Z.A.亨利; W.H.米勒; E.P.A.塔尔博特; J.A.泰勒
Original assignee: GlaxoSmithKline Intellectual Property Development Ltd
Current assignee: GlaxoSmithKline Intellectual Property Development Ltd
Priority date: 2017-04-18
Filing date: 2018-04-16
Publication date: 2022-04-26
Anticipated expiration: 2038-04-16
Also published as: US11555040B2; ES2906956T3; CA3058969A1; WO2018192864A1; JP2020517610A; BR112019021709A2; US20220324875A1; JP7080900B2; CN110785420A; GB201706102D0; UY37681A; TW201902899A; AR111474A1; EP3612536A1; EP3612536B1

Abstract

本发明涉及式(I)的化合物及其盐

Description

作为PI3-激酶活性抑制剂的氧杂䓬并吡唑衍生物

发明领域

本发明涉及作为激酶活性抑制剂的化合物、包含所述化合物的药物组合物和所述化合物或所述组合物在各种病症的治疗中的用途。更具体地，本发明的化合物是磷酸肌醇3'OH激酶家族（下文称为PI3-激酶），例如PI3Kδ、PI3Kα、PI3Kβ和/或PI3Kγ的活性或功能的抑制剂。

发明背景

细胞膜代表可征募到各种信号转导通路中的大量第二信使。关于效应酶在磷脂信号传导通路中的功能和调节，I类PI3-激酶（例如PI3Kδ）由膜磷脂库（phospholipid pools）生成第二信使。I类PI3K将膜磷脂PI(4,5)P₂转化成充当第二信使的PI(3,4,5)P₃。PI和PI(4)P也是PI3K的底物并可分别磷酸化和转化成PI3P和PI(3,4)P₂。此外，这些磷酸肌醇可被5'-特异性和3'-特异性磷酸酶转化成其它磷酸肌醇。因此，PI3K酶活性直接或间接导致生成在细胞内信号转导通路中充当第二信使的两种3'-磷酸肌醇亚型（Trends Biochem. Sci. 22(7)，第267-72页(1997), Vanhaesebroeck等人；Chem. Rev. 101(8)，第2365-80页(2001),Leslie等人；Annu. Rev. Cell Dev. Biol. 17，第615-75页(2001), Katso等人；和Cell.Mol. Life Sci. 59(5)，第761-79页(2002), Toker）。迄今已经识别8种哺乳动物PI3K，基于序列同源性、结构、结合伴侣（binding partners）、作用模式和底物偏好性分成三大类（I、II和III）。在体外，I类PI3K可将磷脂酰肌醇（PI）、磷脂酰肌醇-4-磷酸（PI4P）和磷脂酰肌醇-4,5-二磷酸（PI(4,5)P₂）磷酸化以分别产生磷脂酰肌醇-3-磷酸（PI3P）、磷脂酰肌醇-3,4-二磷酸（PI(3,4)P₂）和磷脂酰肌醇-3,4,5-三磷酸（PI(3,4,5)P₃）。II类PI3K可将PI和PI4P磷酸化。III类PI3K只能将PI磷酸化（Vanhaesebroeck等人(1997)，见上文；Vanhaesebroeck等人Exp. Cell Res. 253(1)，第239-54 (1999)页；和Leslie等人(2001)，见上文）。

I类PI3K是由p110催化亚基和调节亚基构成的异源二聚体，并且该家族基于调节伴侣（regulatory partners）和调节机制进一步分成Ia类和Ib类酶。Ia类酶由与五种不同的调节亚基（p85α、p55α、p50α、p85β和p55γ）二聚的三种不同的催化亚基（p110α、p110β和p110δ）构成，所有催化亚基能与所有调节亚基相互作用以形成各种异源二聚体。通常响应受体酪氨酸激酶的生长因子刺激通过调节亚基SH2结构域与活化受体或衔接蛋白如IRS-1的特异性磷酸酪氨酸残基的相互作用来活化Ia类PI3K。小GTPase（ras作为一个实例）也与受体酪氨酸激酶活化一起参与PI3K的活化。p110α和p110β在所有细胞类型中组成性表达，而p110δ表达更局限于白细胞种群（leukocyte populations）和一些上皮细胞。与此相比，单个Ib类酶由与p101调节亚基相互作用的p110γ催化亚基构成。此外，Ib类酶响应G-蛋白偶联受体（GPCR）系统活化并且其表达看起来仅限于白细胞。

如上述方案A中所示，磷酸肌醇3-激酶（PI3K）将肌醇环的第三个碳的羟基磷酸化。磷酸肌醇的磷酸化以生成PtdIns(3,4,5)P₃、PtdIns(3,4)P₂和PtdIns(3)P产生用于各种信号转导通路的第二信使，包括对细胞增殖、细胞分化、细胞生长、细胞尺寸、细胞存活、细胞凋亡、粘附、细胞运动、细胞迁移、趋化性、侵袭、细胞骨架重排、细胞形状变化、囊泡运输和代谢通路而言至关重要的那些（Katso等人(2001)，见上文；和Mol. Med. Today 6(9)第347-57 (2000)页, Stein等人）。

负责生成这些磷酸化信号传导产物的PI3-激酶的活性最初被认为与病毒癌蛋白和将磷脂酰肌醇(PI)磷酸化的生长因子受体酪氨酸激酶及其在肌醇环的3'-羟基处的磷酸化衍生物有关（Panayotou等人Trends Cell Biol. 2第358-60页(1992)）。但是，更新的生物化学研究已经揭示，I类PI3-激酶（例如IA类同种型PI3Kδ）是双重特异性激酶，意味着它们表现出脂质激酶（磷酸肌醇的磷酸化）以及蛋白激酶活性，这已表明能将其它蛋白质作为底物磷酸化，包括自磷酸化作为分子内调节机制（EMBO J. 18(5)第1292-302页(1999),Vanhaesebroeck等人）。其中PI3K起到关键作用的细胞过程包括细胞凋亡的抑制、肌动蛋白骨架的重组、心肌细胞生长、通过胰岛素刺激糖原合成酶、TNFα介导的中性粒细胞启动和超氧化物生成，和白细胞迁移和粘附到内皮细胞。

相信PI3-激酶活化参与多种多样的细胞响应，包括细胞生长、分化和凋亡（Parker, Current Biology 5(6)第577-79页(1995)；和Yao等人Science 267(5206)第2003-06页(1995)）。PI3-激酶看起来参与许多白细胞活化方面。p85相关的PI3-激酶已表明与CD28的胞质结构域物理相关，CD28是对响应抗原活化T细胞而言重要的共刺激分子（Pagès等人Nature 369第327-29页(1994)；和Rudd, Immunity 4第527-34页(1996)）。通过CD28活化T细胞降低通过抗原活化的阈值并提高增殖反应的量级和持续时间。这些效应与许多基因的转录提高相关联，包括白细胞介素-2 (IL2)，一种重要的T细胞生长因子（Fraser等人Science 251(4991)第313-16页(1991)）。

PI3Kγ已被认为是JNK活性的Gβ-γ依赖性调节的中介物，且Gβ-γ是异源三聚体G蛋白的亚基（Lopez-Ilasaca等人J. Biol. Chem. 273(5)第2505-8页(1998)）。最近，(Laffargue等人Immunity 16(3)第441-51页(2002))已经描述了PI3Kγ通过各种G(i)偶联受体传递炎性信号并且对肥大细胞功能、白细胞环境中的刺激和免疫学，包括例如细胞因子、趋化因子、腺苷、抗体、整联蛋白、凝集因子、生长因子、病毒或激素至关重要（J. CellSci. 114 (Pt 16)第2903-10页(2001), Lawlor等人；Laffargue等人(2002)，见上文；和Curr. Opinion Cell Biol. 14(2)第203-13页(2002), Stephens等人）。

对酶家族的个别成员的特异性抑制剂提供用于破译各酶的功能的珍贵工具。已经广泛使用两种化合物LY294002和渥曼青霉素（见下文）作为PI3-激酶抑制剂。这些化合物是非特异性PI3K抑制剂，因为它们不区分I类PI3-激酶的四个成员。例如，渥曼青霉素对各种I类PI3-激酶的每一种的IC₅₀值在1-10 nM的范围内。类似地，LY294002对这些PI3-激酶的每一种的IC₅₀值为大约15-20 μM（Fruman等人Ann. Rev. Biochem. 67第481-507页(1998)），对CK2蛋白激酶为5-10 microM并且对磷脂酶也有一定的抑制活性。渥曼青霉素是一种真菌代谢物，其通过共价键合到这种酶的催化结构域上而不可逆抑制PI3K活性。通过渥曼青霉素抑制PI3K活性消除随后对细胞外因子的细胞反应。例如，中性粒细胞通过刺激PI3K和合成PtdIns (3,4,5)P₃而响应趋化因子fMet-Leu-Phe (fMLP)。这种合成与参与入侵微生物的中性粒细胞破坏的呼吸爆发的激活相关联。用渥曼青霉素处理中性粒细胞防止fMLP诱发的呼吸爆发反应（Thelen等人Proc. Natl. Acad. Sci. USA 91第4960-64页(1994)）。确实，使用渥曼青霉素的这些实验，以及其它实验证据表明，造血系的细胞，特别是中性粒细胞、单核细胞和其它类型的白细胞中的PI3K活性参与许多与急性和慢性炎症相关的非记忆免疫反应。

基于使用渥曼青霉素的研究，有证据表明，经由G蛋白偶联受体的白细胞信号传导的一些方面也需要PI3-激酶功能（Thelen等人(1994)，见上文）。还已经表明，渥曼青霉素和LY294002阻断中性粒细胞迁移和超氧化物释放。

现在很好理解的是，癌基因和肿瘤抑制基因的失调有助于形成恶性肿瘤，例如通过增加的细胞生长和增殖或增加的细胞存活。现在还已知，通过PI3K家族介导的信号传导通路在许多细胞过程，包括增殖和存活中起到核心作用，并且这些通路的失调是多种多样的人类癌症和其它疾病的致病因素（Katso等人Annual Rev. Cell Dev. Biol. (2001) 17第615-675页和Foster等人J. Cell Science (2003) 116(15)第3037-3040页）。PI3K效应蛋白通过经由与PtdIns(3,4,5)P3特异性相互作用的保守Pleckstrin同源（PH）结构域移位到质膜而引发信号传导通路和网络（Vanhaesebroeck等人Annu. Rev. Biochem. (2001)70第535-602页）。经由PtdIns(3,4,5)P3和PH结构域传导信号的效应蛋白包括丝氨酸/苏氨酸(Ser/Thr)激酶、酪氨酸激酶、Rac或Arf GEF（鸟苷酸交换因子）和Arf GAP（GTPase活化蛋白）。

在B和T细胞中，PI3K通过活化Tec家族的蛋白质酪氨酸激酶（其包括B细胞中的布鲁顿氏酪氨酸激酶（BTK）和T细胞中的白介素-2诱导型T细胞激酶（ITK））而具有重要作用。在PI3K活化后，BTK或ITK移位到质膜，在此它们随后被Src激酶磷酸化。活化的ITK的主要靶点之一是磷脂酶C-γ（PLCγ1），其将PtdIns(4,5)P2水解成Ins(3,4,5)P3并引发钙水平和可在活化的T细胞中活化蛋白激酶C的二酰甘油（DAG）的细胞内增加。

不同于IA类p110α和p110β，p110δ以组织受限方式表达。其在淋巴细胞和淋巴组织中的高表达水平表明在免疫系统中的PI3K介导信号传导中的作用。p110δ激酶失活敲入（dead knock-in）小鼠也可存活并且它们的表型限于免疫信号传导中的缺陷（Okkenhaug等人Science (2002) 297第1031-4页）。这些转基因小鼠已提供对PI3Kδ在B细胞和T细胞信号传导中的功能的理解。特别地，p110δ是在CD28和/或T细胞受体(TCR)信号传导下游的PtdIns(3,4,5)P3形成所需的。在TCR下游的PI3K信号传导的关键作用是活化Akt，其将抗凋亡因子以及用于细胞因子生成的各种转录因子磷酸化。因此，具有无活性p110δ的T细胞在增殖和Th1和Th2细胞因子分泌中具有缺陷。通过CD28活化T细胞降低通过抗原活化TCR的阈值并提高增殖反应的量级和持续时间。这些效应通过许多基因的PI3Kδ依赖性转录提高介导，所述基因包括IL2，一种重要的T细胞生长因子。

因此，PI3K抑制剂预计通过其在调节与呼吸系统疾病如哮喘、COPD和囊性纤维化相关的T细胞介导炎性反应中的作用提供治疗效益。此外，有迹象表明，T细胞定向治疗可提供皮质类固醇节省（corticosteroid sparing）性质（Alexander等人Lancet (1992) 339第324-8页），表明其可独立或与吸入或口服糖皮质类固醇结合地在呼吸系统疾病中提供有用的治疗。PI3K抑制剂也可能在哮喘中与其它常规疗法如长效β-激动剂（LABA）或白三烯拮抗剂一起使用。

在脉管系统中，PI3Kδ由内皮细胞表达并通过响应TNFα调节这些细胞的粘附前状态（proadhesive state）而参与中性粒细胞运输（Puri等人Blood (2004) 103(9)第3448-56页）。Akt磷酸化和PDK1活性的药理学抑制证实PI3Kδ在TNFα诱发的内皮细胞信号传导中的作用。此外，PI3Kδ经由VEGF通路牵涉在血管通透性和气道组织水肿中（Lee等人J.Allergy Clin. Immunol. (2006) 118(2)第403-9页）。这些观察结果表明PI3Kδ抑制在哮喘中的额外益处——通过与哮喘相关的白细胞外渗和血管通透性的联合降低。此外，PI3Kδ活性在体外和体内都是肥大细胞功能所需的（Ali等人Nature (2004) 431第1007-11页；和Ali等人J. Immunol. (2008) 180(4)第2538-44页），进一步表明PI3K抑制对过敏性适应症，如哮喘、过敏性鼻炎和特应性皮炎应具有治疗效益。

PI3Kδ在B细胞增殖、抗体分泌、B细胞抗原和IL-4受体信号传导、B细胞抗原呈递功能中的作用也已非常确实（Okkenhaug等人(2002)，见上文；Al-Alwan等人J. Immunol.(2007) 178(4)第2328-35页；和Bilancio等人Blood (2006) 107(2)第642-50页）并表明在自身免疫病如类风湿性关节炎或系统性红斑狼疮（SLE）中的作用。因此PI3K抑制剂也有益于这些适应症。

药理抑制PI3Kδ抑制了在ICAM涂布的琼脂糖基质整合素依赖性biased系统上的fMLP依赖性中性粒细胞趋化性（Sadhu等人, J. Immunol. (2003) 170(5)第2647-54页）。PI3Kδ的抑制调节中性粒细胞活化、粘附和迁移而不影响中性粒细胞介导的吞噬作用和对金黄色葡萄球菌的杀菌活性（Sadhu等人Biochem. Biophys. Res. Commun. (2003) 308(4)第764-9页）。总体而言，数据表明PI3Kδ抑制不应全面抑制先天免疫防御所需的中性粒细胞功能。PI3Kδ在中性粒细胞中的作用提供用于治疗涉及组织重建的炎性疾病如COPD或类风湿性关节炎的进一步范围。

PI3Kδ抑制也可通向癌症免疫疗法。例如，PI3Kδ在调节性T细胞（Treg）中具有关键的信号传导作用，这使它们能够扩增（expansion）（Patton等人PLoS One. 2011；6(3):e17359）。Treg的活化是允许癌细胞建立免疫耐受性和逃避免疫监视的关键过程之一。PI3Kδ抑制剂可能在其中起作用的癌症免疫的另一方面是如在培养的气道上皮细胞中所示的上调PD-L1（程序性细胞死亡1配体1）的表达（Kan-O等人Biochem Biophys Res Commun.2013；435(2):195-201）。在各种细胞类型如T和B淋巴细胞、NK和DC细胞或上皮细胞上表达的PD-L1参与抑制T细胞依赖性免疫，如细胞毒性CD8 T细胞的活化。靶向PD-L1的中和抗体目前正作为癌症免疫治疗剂开发。因此，PI3Kδ抑制可提供增强抗肿瘤响应的新颖方式。类似原理也可能适用于抗感染免疫，其中Treg和CD8的平衡已知在免疫反应的后果，如病毒感染中起到重要作用。

中枢神经系统（CNS）也富含PI3Kδ表达（Eickholt等人PLoS One 2007 11；2(9):e869）。更新的报告进一步揭示PI3Kδ与具有精神分裂症迹象的CNS中的神经调节蛋白NRG-1和ErbB4受体之间的联系（Law等人Proc Natl Acad Sci U S A. 2012；109(30):12165-70）。之前已知的是，含有细胞质部分Cyt1的ErbB4的剪接变体的提高的表达导致PI3K通路的活化以及提高的精神分裂症风险。Law等人的出版物指出，精神分裂症基因相关Cyt1优先耦合到PI3Kδ同种型。此外，PI3Kδ选择性抑制剂IC87114在苯丙胺诱发的精神病的小鼠模型中表现出显著效力（Law等人Proc Natl Acad Sci U S A. 2012；109(30):12165-70）。因此，PI3Kδ抑制剂有潜力构成新型精神分裂症治疗方法的基础。

此外，也有良好证据表明IA类PI3K酶也直接或间接有助于多种多样的人类癌症中的肿瘤发生（Vivanco和Sawyers, Nature Reviews Cancer (2002) 2(7)第489-501页）。例如，PI3Kδ的抑制可能对恶性血液病如急性髓性白血病的治疗具有治疗作用（Billottet等人Oncogene (2006) 25(50)第6648-59页）。此外，激活p110α内的突变（PIK3CA基因）已经与各种其它肿瘤，如结肠和乳腺和肺的肿瘤相关联（Samuels等人Science (2004) 304(5670)第554页）。

还已经表明，PI3K参与建立痛苦的炎性病况中的中枢敏化（Pezet等人The J. ofNeuroscience (2008) 28 (16)第4261-4270页）。

作为防止病毒感染期间的宿主细胞死亡和最终利用宿主细胞合成机制进行其复制的方式，多种多样的逆转录病毒和DNA基病毒激活PI3K通路（Virology 344(1)第131-8页(2006), Vogt等人；和Nat. Rev. Microbiol. 6(4)第265-75页(2008), Buchkovich等人）。因此PI3K抑制剂除更明确的溶瘤和抗炎适应症外还可能具有抗病毒性质。这些抗病毒作用在病毒诱发的炎症加重中带来令人感兴趣的前景。例如，普通感冒人鼻病毒（HRV）对多于50%的呼吸道感染负责，但在某些人群中这些感染的并发症显著。在呼吸系统疾病，如哮喘或慢性阻塞性肺病（COPD）中情况特别如此。上皮细胞的鼻病毒感染导致PI3K依赖性细胞因子和趋化因子分泌（J. Biol. Chem. (2005) 280(44)第36952页, Newcomb等人）。这种炎性反应与感染过程中呼吸道症状的恶化相关联。因此PI3K抑制剂可抑制对原本良性病毒的过大免疫反应。大多数HRV菌株通过最初结合到ICAM-1受体上感染支气管上皮细胞。然后通过内吞作用进一步内化HRV-ICAM-1复合物并且已经表明这一事件需要PI3K活性（J.Immunol. (2008) 180(2)第870-880页, Lau等人）。因此，PI3K抑制剂也可通过抑制病毒进入宿主细胞来阻断病毒感染。

PI3K抑制剂可用于减轻其它类型的呼吸道感染，包括真菌感染曲霉病（MucosalImmunol. (2010) 3(2)第193-205页, Bonifazi等人）。此外，PI3Kδ缺陷小鼠对原生动物寄生虫硕大利士曼原虫（J. Immunol. (2009) 183(3)第1921-1933页, Liu等人）或胞内菌李斯特菌属（Pearce等人J. Immunol. (2015) 195(7)第3206-17页）的感染更有抵抗力。与对病毒感染的效果一起，这些报告表明PI3K抑制剂可用于治疗多种多样的感染。

已发表的报告指出PI3Kδ抑制剂在预防常见气道细菌性病原体肺炎链球菌的感染中具有潜在效益（Fallah等人, Mech. Ageing Dev. 2011；132(6-7): 274-86）。在这一报告中显示PI3Kδ在老年人中减少对肺炎链球菌作出有效抗体应答所需的巨噬细胞源性细胞因子。PI3Kδ抑制剂的抗菌效益因此可用于治疗细菌性呼吸道感染，和呼吸病况和肺损伤如哮喘、COPD和囊性纤维化的细菌性加重，和肺炎。

PI3K抑制也已表明促进调节性T细胞分化（Proc. Natl. Acad. Sci. U S A(2008) 105(22)第7797-7802页, Sauer等人），暗示PI3K抑制剂可能通过诱导对自体抗原或变应原的免疫耐受性在自身免疫或过敏性适应症中起到治疗目的。PI3Kδ同种型也已与吸烟诱发的糖皮质激素不敏感联系在一起（Am. J. Respir. Crit. Care Med. (2009)179(7)第542-548页, Marwick等人）。这一观察结果表明原本对皮质类固醇反应不佳的COPD患者可能获益于PI3K抑制剂与皮质类固醇的组合。

PI3K也已参与其它呼吸病况，如特发性肺纤维化（IPF）。IPF是肺功能逐渐下降并且由呼吸衰竭造成的死亡率提高的纤维化疾病。在IPF中，借助趋化因子受体CXCR4将循环的纤维细胞送往肺。CXCR4的信号传导和表达都需要PI3K（Int. J. Biochem. and CellBiol. (2009) 41第1708-1718页, Mehrad等人）。因此，通过降低CXCR4表达和阻断其效应子功能，PI3K抑制剂应该抑制纤维细胞招募到肺并因此减慢作为IPF（一种需求远未满足的疾病）的基础的纤维化过程。

已经尝试制备抑制PI3-激酶活性的化合物并且在本领域中已经公开了许多这样的化合物。但是，考虑到PI3-激酶介导的病理反应的数量，仍然需要可用于治疗各种病况的PI3-激酶抑制剂。

本发明人已经发现作为激酶活性，特别是PI3-激酶活性的抑制剂的化合物。作为PI3-激酶抑制剂的化合物可用于治疗与不适当的激酶活性，特别是不适当的PI3-激酶活性相关的病症，例如治疗和预防由PI3-激酶机制介导的病症。这样的病症包括呼吸系统疾病，包括哮喘、慢性阻塞性肺病（COPD）和特发性肺纤维化（IPF）；纤毛病（ciliopathy），包括原发性纤毛运动障碍、多囊肝病和肾消耗病；细菌感染，包括细菌性呼吸道感染，例如被肺炎链球菌、流感嗜血杆菌、卡他莫拉菌和/或分枝杆菌如结核分枝杆菌感染，和呼吸病况和肺损伤如哮喘、COPD和囊性纤维化的细菌性加重；病毒感染，包括病毒性呼吸道感染，例如被流感病毒、鼻病毒、呼吸道合胞病毒（RSV）、人副流感病毒（HPIV）、腺病毒和/或冠状病毒感染，和呼吸病况和肺损伤如哮喘、COPD和囊性纤维化的病毒性加重；其它非病毒性呼吸道感染，包括曲霉病和利什曼病；变应性疾病，包括过敏性鼻炎；自身免疫病，包括强直性脊柱炎、Churg-Strauss综合征、克罗恩氏病、肾小球肾炎、亨-舍二氏紫癜、特发性血小板减少性紫癜（ITP）、间质性膀胱炎、天疱疮、原发性硬化性胆管炎、牛皮癣、类风湿性关节炎、肉样瘤病、Sjogren's综合征、1型糖尿病、溃疡性结肠炎、血管炎、白癜风和韦格纳肉芽肿；炎性病症，包括炎性肠病、特应性皮炎、湿疹和牛皮癣；糖尿病；心血管疾病，包括血栓形成、动脉粥样硬化和高血压；恶性血液病；神经退行性疾病；胰腺炎；多器官衰竭；肾病；血小板聚集；癌症；精子活力（sperm motility）；移植排斥（transplantation rejection）；移植物排斥（graft rejection）；肺损伤；疼痛，包括与类风湿性关节炎或骨关节炎相关的疼痛、背痛、一般炎性痛、肝后神经痛（post hepatic neuralgia）、糖尿病性神经病、炎性神经性疼痛（创伤）、三叉神经痛和中枢痛；纤维化疾病；抑郁；精神障碍，包括精神分裂症；支气管扩张；和活化PI3Kδ综合征（APDS）。

在一个实施方案中，本发明的化合物可表现出相对于其它激酶对PI3-激酶的选择性。

在另一实施方案中，本发明的化合物可以是PI3Kδ的强效抑制剂。

在另一实施方案中，本发明的化合物可表现出相对于其它PI3-激酶对PI3Kδ的选择性。

在进一步实施方案中，本发明的化合物可具有使它们特别适合口服给药的性质。

发明概述

本发明涉及某些新型化合物。具体地，本发明涉及式(I)的化合物及其盐

其中R¹和R²如下文定义。

该化合物是激酶活性，特别是PI3-激酶活性的抑制剂。作为PI3-激酶抑制剂的化合物可用于治疗与不适当的PI3-激酶活性相关的病症。因此，本发明还涉及包含式(I)的化合物或其可药用盐和一种或多种可药用赋形剂的药物组合物。本发明还涉及治疗由不适当的PI3-激酶活性介导的障碍的方法，其包括给予需要其的患者安全和有效量的式(I)的化合物或其可药用盐。

发明详述

在一个实施方案中，本发明涉及式(I)的化合物及其盐（下文称为“本发明的化合物”）

其中

R¹是5-或6-元杂芳基，其中所述杂芳基含有1至3个独立地选自氧和氮的杂原子并被一个或两个独立地选自卤素、氰基、C_1-6烷氧基、-NHSO₂C_1-6烷基、-XR³和C_1-6烷基的取代基取代，其中所述C_1-6烷基任选被卤素取代；

R²是-OR⁴、-CONHR⁵或5-或6-元杂芳基，其中所述杂芳基含有1至3个独立地选自氧和氮的杂原子并被一个或两个独立地选自卤素、氰基、C_1-6烷氧基、-NHSO₂C_1-6烷基、-CONR⁶R⁷、-YR⁸和C_1-6烷基的取代基取代，其中所述C_1-6烷基任选被一个或两个独立地选自羟基和-NR⁹R¹⁰的取代基取代；

R³是5-或6-元杂环基，其中所述杂环基含有一个或两个独立地选自氧和氮的杂原子并任选被1至3个独立地选自C_1-6烷基的取代基取代；

R⁴是任选被C_3-6环烷基或含有一个或两个选自氧和氮的杂原子的5-或6-元杂环基取代的C_1-6烷基，其中所述C_3-6环烷基任选被-NHCO₂C_1-6烷基取代且所述杂环基任选被1至3个独立地选自卤素、-COC_1-6烷基、-CO₂C_1-6烷基和任选被-OR¹¹取代的C_1-6烷基的取代基取代；

R⁵是氢或任选被6-元杂环基取代的C_1-6烷基，其中所述杂环基含有氧原子或氮原子并任选被C_1-6烷基取代；

R⁶和R⁷，与它们所连接的氮原子一起，连接形成5-或6-元杂环基，其中所述杂环基任选含有氧原子或另外的氮原子并任选被C_1-6烷基取代；

R⁸是5-至9-元杂环基，其中所述杂环基含有一个或两个独立地选自氧和氮的杂原子并被1至3个独立地选自氧代、羟基、卤素、-COC_1-6烷基和任选被-OR¹²取代的C_1-6烷基的取代基取代；

R⁹、R¹⁰、R¹¹和R¹²各自独立地是氢或C_1-6烷基；

X和Y各自独立地是-CH₂-或-CH(CH₃)-。

在一个实施方案中，R¹是5-或6-元杂芳基，其中所述杂芳基含有一个或两个氮原子并被一个或两个独立地选自卤素、氰基、C_1-6烷氧基、-NHSO₂C_1-6烷基、-XR³和C_1-6烷基的取代基取代，其中所述C_1-6烷基任选被卤素取代。在另一实施方案中，R¹是5-或6-元杂芳基，其中所述杂芳基含有一个或两个氮原子并被一个或两个独立地选自卤素、C_1-6烷氧基、-XR³和C_1-6烷基的取代基取代。在另一实施方案中，R¹是5-元杂芳基，其中所述杂芳基含有一个或两个氮原子并被-XR³取代。在另一实施方案中，R¹是被-XR³取代的吡唑基。在另一实施方案中，R¹是6-元杂芳基，其中所述杂芳基含有一个或两个氮原子并被一个或两个独立地选自卤素、C_1-6烷氧基和C_1-6烷基的取代基取代。在另一实施方案中，R¹是被两个独立地选自卤素、C_1-6烷氧基和C_1-6烷基的取代基取代的吡啶基。在另一实施方案中，R¹是被C_1-6烷氧基取代的吡啶基。在进一步实施方案中，R¹是被甲氧基取代的吡啶基。

在一个实施方案中，R²是-OR⁴或5-或6-元杂芳基，其中所述杂芳基含有1至3个独立地选自氧和氮的杂原子并被一个或两个独立地选自卤素、氰基、C_1-6烷氧基、-NHSO₂C_1-6烷基、-CONR⁶R⁷、-YR⁸和C_1-6烷基的取代基取代，其中所述C_1-6烷基任选被一个或两个独立地选自羟基和-NR⁹R¹⁰的取代基取代。在另一实施方案中，R²是5-或6-元杂芳基，其中所述杂芳基含有一个或两个氮原子并被一个或两个独立地选自卤素、氰基、C_1-6烷氧基、-NHSO₂C_1-6烷基、-CONR⁶R⁷、-YR⁸和C_1-6烷基的取代基取代，其中所述C_1-6烷基任选被一个或两个独立地选自羟基和-NR⁹R¹⁰的取代基取代。在另一实施方案中，R²是5-或6-元杂芳基，其中所述杂芳基含有一个或两个氮原子并被一个或两个独立地选自卤素、C_1-6烷氧基、-YR⁸和C_1-6烷基的取代基取代。在另一实施方案中，R²是5-元杂芳基，其中所述杂芳基含有一个或两个氮原子并被-YR⁸取代。在另一实施方案中，R²是被-YR⁸取代的吡唑基。在另一实施方案中，R²是6-元杂芳基，其中所述杂芳基含有一个或两个氮原子并被一个或两个独立地选自卤素、C_1-6烷氧基和C_1-6烷基的取代基取代。在进一步实施方案中，R²是被一个或两个独立地选自卤素、C_1-6烷氧基和C_1-6烷基的取代基取代的吡啶基。

在一个实施方案中，R³是6-元杂环基，其中所述杂环基含有一个或两个氮原子并任选被1至3个独立地选自C_1-6烷基的取代基取代。在进一步实施方案中，R³是被1至3个独立地选自C_1-6烷基的取代基取代的哌啶基。

在一个实施方案中，R⁴是任选被含有一个或两个选自氧和氮的杂原子的5-或6-元杂环基取代的C_1-6烷基，其中所述杂环基任选被1至3个独立地选自卤素、-COC_1-6烷基、-CO₂C_1-6烷基和任选被-OR¹¹取代的C_1-6烷基的取代基取代。在进一步实施方案中，R⁴是被含有氮原子的5-或6-元杂环基取代的甲基，其中所述杂环基任选被1至3个独立地选自卤素、-COC_1-6烷基、-CO₂C_1-6烷基和任选被-OR¹¹取代的C_1-6烷基的取代基取代。

在一个实施方案中，R⁵是氢。

在一个实施方案中，R⁶和R⁷，与它们所连接的氮原子一起，连接形成任选被C_1-6烷基取代的哌嗪基。

在一个实施方案中，R⁸是5-或6-元杂环基，其中所述杂环基含有一个或两个独立地选自氧和氮的杂原子并被1至3个独立地选自氧代、羟基、卤素、-COC_1-6烷基和任选被-OR¹²取代的C_1-6烷基的取代基取代。在另一实施方案中，R⁸是5-或6-元杂环基，其中所述杂环基含有一个或两个独立地选自氧和氮的杂原子并被1至3个独立地选自C_1-6烷基的取代基取代。在另一实施方案中，R⁸是被1至3个独立地选自C_1-6烷基的取代基取代的哌啶基。在另一实施方案中，R⁸是被C_1-6烷基取代的哌啶基。在进一步实施方案中，R⁸是被甲基取代的哌啶基。

在一个实施方案中，R⁹和R¹⁰各自独立地为C_1-6烷基。在进一步实施方案中，R⁹和R¹⁰各自是甲基。

在一个实施方案中，R¹¹是氢。

在一个实施方案中，R¹²是氢。

在一个实施方案中，X和Y各自独立地为-CH₂-。在进一步实施方案中，Y是-CH(CH₃)-。

要理解的是，本发明涵盖上述取代基的所有组合。

本发明的化合物包括实施例1至296的化合物及其盐。

在一个实施方案中，本发明的化合物是：

1-(1-(((2R,4r,6S)-2,6-二甲基哌啶-4-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)-3-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑；

3-(1-(((2R,4r,6S)-2,6-二甲基哌啶-4-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)-1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑；

N-(2-甲氧基-5-(3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲磺酰胺；

1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑；

N-(2-甲氧基-5-(1-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)吡啶-3-基)甲磺酰胺；

1-(2-甲氧基嘧啶-5-基)-3-(1-((1-甲基哌啶-4-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑；

3-(1-((1-异丙基哌啶-4-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)-1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑；

3-(1-((1-异丙基哌啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)-1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑；

1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-3-(1-((1-甲基哌啶-4-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑；

1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-3-(1-((1-甲基哌啶-4-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑；

1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-3-(1-((1-异丙基哌啶-4-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑；

N-(2-甲氧基-5-(3-(1-((1-甲基哌啶-4-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲磺酰胺；

2-甲氧基-5-(3-(1-((1-甲基哌啶-4-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-1-基)烟腈；

5-(3-(1-((1-异丙基哌啶-4-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-1-基)-2-甲氧基烟腈；

1-(5-(氟甲基)-6-甲氧基吡啶-3-基)-3-(1-((1-甲基哌啶-4-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑；

1-(5-(氟甲基)-6-甲氧基吡啶-3-基)-3-(1-((1-异丙基哌啶-4-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑；

N-(5-(3-(1-((1-异丙基哌啶-4-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-1-基)-2-甲氧基吡啶-3-基)甲磺酰胺；

3-(5-((4-异丙基哌嗪-1-基)甲基)噁唑-2-基)-1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑；

1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-甲酰胺；

1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-N-((1-甲基哌啶-3-基)甲基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-甲酰胺；

1-(3-((4-(1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)吡咯烷-1-基)-2-甲基丙-2-醇；

(R)-1-(3-((4-(1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)吡咯烷-1-基)-2-甲基丙-2-醇；

(S)-1-(3-((4-(1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)吡咯烷-1-基)-2-甲基丙-2-醇；

3-(1-乙基-5-甲基-1H-吡唑-4-基)-1-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑；

1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-3-(1-((1-甲基吡咯烷-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑；

(R)-1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-3-(1-((1-甲基吡咯烷-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑；

(S)-1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-3-(1-((1-甲基吡咯烷-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑；

3-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-1-(1-((1-甲基哌啶-4-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑；

2-(4-((4-(1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)哌啶-2-基)丙-2-醇；

5-(3-(1-((1-异丙基哌啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-1-基)-2-甲氧基烟腈；

3-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-1-(1-(哌啶-4-基甲基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑；

3-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-1-(1-((1-异丙基哌啶-4-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑；

1-(1-((1-异丙基哌啶-4-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)-3-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑；

1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-3-(1-((1-异丙基吡咯烷-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑；

(S)-1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-3-(1-((1-异丙基吡咯烷-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑；

(R)-1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-3-(1-((1-异丙基吡咯烷-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑；

1-(3-((4-(1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)吡咯烷-1-基)-2-甲基丙-2-醇；

(R)-1-(3-((4-(1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)吡咯烷-1-基)-2-甲基丙-2-醇；

(S)-1-(3-((4-(1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)吡咯烷-1-基)-2-甲基丙-2-醇；

3-(1-((1-异丙基吡咯烷-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)-1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑；

4-((4-(1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)-1-甲基哌啶-4-醇；

3-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-1-(1-((1-甲基哌啶-4-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑；

3-(1-((4-氟-1-甲基哌啶-4-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)-1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑；

(2R)-1-(3-((4-(1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-醇；

(R)-1-((R)-3-((4-(1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-醇；

(R)-1-((S)-3-((4-(1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-醇；

(2S)-1-(3-((4-(1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-醇；

(S)-1-((R)-3-((4-(1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-醇；

(S)-1-((S)-3-((4-(1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-醇；

1-(3-((4-(1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)吡咯烷-1-基)丙-1-酮；

(R)-1-(3-((4-(1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)吡咯烷-1-基)丙-1-酮；

(S)-1-(3-((4-(1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)吡咯烷-1-基)丙-1-酮；

7-((4-(1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)-1,1-二甲基四氢-1H-噁唑并[3,4-a]吡啶-3(5H)-酮；

1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-3-(1-(((2R,4r,6S)-1,2,6-三甲基哌啶-4-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑；

1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-3-(3-甲基-1H-吡唑-5-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑；

1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-3-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑；

3-(1,3-二甲基-1H-吡唑-5-基)-1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑；

1-(二甲基氨基)-3-(4-(1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)-1H-吡唑-1-基)丙-2-醇；

3-(1-((3-氟-1-异丙基哌啶-4-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)-1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑；

3-(1-(((3R,4S)-3-氟-1-异丙基哌啶-4-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)-1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑；

5-(3-(1-((1-异丙基吡咯烷-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-1-基)-2-甲氧基烟腈；

1-(4-((4-(1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)哌啶-1-基)丙-1-酮；

1-(1-(((2R,4r,6S)-2,6-二甲基哌啶-4-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)-3-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑；

N-(5-(3-(1-(((2R,6S)-2,6-二甲基四氢-2H-吡喃-4-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-1-基)-2-甲氧基吡啶-3-基)甲磺酰胺；

3-(1-(((2R,4r,6S)-2,6-二甲基哌啶-4-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)-1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑；

3-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-1-(1-(((2R,4r,6S)-1,2,6-三甲基哌啶-4-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑；

1-(1-((1-异丙基哌啶-4-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)-3-(6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑；

1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-3-(1-(((2R,4r,6S)-1,2,6-三甲基哌啶-4-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑；

N-(5-(3-(2-(4-(2-羟基丙-2-基)哌啶-1-基)乙氧基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-1-基)-2-甲氧基吡啶-3-基)甲磺酰胺；

2-(1-(2-((1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)氧基)乙基)哌啶-4-基)丙-2-醇；

2-(1-(2-((1-(5-(氟甲基)-6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)氧基)乙基)哌啶-4-基)丙-2-醇；

2-(1-(2-((1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)氧基)乙基)哌啶-4-基)丙-2-醇；

5-(3-(2-(4-(2-羟基丙-2-基)哌啶-1-基)乙氧基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-1-基)-2-甲氧基烟腈；

2-(1-(2-((1-(2-甲氧基嘧啶-5-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)氧基)乙基)哌啶-4-基)丙-2-醇；

4-(((1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)氧基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯；

1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-3-(哌啶-4-基甲氧基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑；

3-((1-异丙基哌啶-4-基)甲氧基)-1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑；

3-(((1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)氧基)甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯；

3-(((1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)氧基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯；

1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-3-(哌啶-3-基甲氧基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑；

(S)-3-(((1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)氧基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯；

(S)-1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-3-(哌啶-3-基甲氧基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑；

(S)-1-(3-(((1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)氧基)甲基)哌啶-1-基)-2-甲基丙-2-醇；

(R)-1-((S)-3-(((1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)氧基)甲基)哌啶-1-基)丙-2-醇；

(S)-1-((S)-3-(((1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)氧基)甲基)哌啶-1-基)丙-2-醇；

(R)-3-(((1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)氧基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯；

(S)-1-(2-(((1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)氧基)甲基)吗啉代)-2-甲基丙-2-醇；

3-((1-异丙基吡咯烷-3-基)甲氧基)-1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑；

1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-3-((1-甲基吡咯烷-3-基)甲氧基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑；

1-(3-(((1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)氧基)甲基)吡咯烷-1-基)乙酮；

((1R,2S)-2-(((1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)氧基)甲基)环丙基)氨基甲酸叔丁酯；

3-氟-3-(((1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)氧基)甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯；

4,4-二氟-3-(((1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)氧基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯；

3-((1,3-二甲基哌啶-3-基)甲氧基)-1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑；

1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-3-((1-(2-甲氧基乙基)-3-甲基吡咯烷-3-基)甲氧基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑；

1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-3-((吡咯烷-3-基)甲氧基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑；

1-(6-甲氧基吡啶-3-基)-3-(2-(1-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基)吡啶-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑；

1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-3-(2-(1-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基)吡啶-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑；

1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-3-(2-(1-(4-异丙基哌嗪-1-基)乙基)吡啶-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑；

1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-3-(2-(1-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基)吡啶-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑；

3-(2-(1-(4-异丙基哌嗪-1-基)乙基)吡啶-4-基)-1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑；

1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-3-(2-(1-((3S,5R)-3,4,5-三甲基哌嗪-1-基)乙基)吡啶-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑；

1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-3-(1-((3-氟哌啶-4-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑；

1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-3-(1-(((3R,4S)-3-氟哌啶-4-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑；

(S)-2-(((1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)氧基)甲基)吗啉-4-甲酸叔丁酯；

(S)-1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-3-(吗啉-2-基甲氧基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑；

(4-异丙基哌嗪-1-基)(2-(1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)噁唑-5-基)甲酮；

4-((4-(1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)哌啶-4-醇；

3-(1-((4-氟哌啶-4-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)-1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑；

1-(6-甲氧基吡啶-3-基)-3-(2-((S)-1-((3S,5R)-3,4,5-三甲基哌嗪-1-基)乙基)吡啶-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑；

1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-3-(2-((S)-1-((3S,5R)-3,4,5-三甲基哌嗪-1-基)乙基)吡啶-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑；

(S)-1-(6-甲氧基吡啶-3-基)-3-(2-(1-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基)吡啶-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑；

(S)-1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-3-(2-(1-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基)吡啶-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑；

(S)-1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-3-(2-(1-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基)吡啶-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑；

1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-3-(1-(1-(1-甲基哌啶-4-基)乙基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑；

(S)-1-(1-(4-(1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)吡啶-2-基)乙基)-3-甲基咪唑烷-2-酮；

3-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-1-(1-(1-(1-甲基哌啶-4-基)乙基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑；

(S)-3-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-1-(1-(1-(1-甲基哌啶-4-基)乙基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑；

(R)-3-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-1-(1-(1-(1-甲基哌啶-4-基)乙基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑；

(S)-1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-3-(1-(1-(1-甲基哌啶-4-基)乙基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑；

(R)-1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-3-(1-(1-(1-甲基哌啶-4-基)乙基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑；

(R)-1-(6-甲氧基吡啶-3-基)-3-(1-(1-(1-甲基哌啶-4-基)乙基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑；

3-(6-甲氧基吡啶-3-基)-1-(1-(1-(1-甲基哌啶-4-基)乙基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑；

(S)-3-(6-甲氧基吡啶-3-基)-1-(1-(1-(1-甲基哌啶-4-基)乙基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑；

(R)-3-(6-甲氧基吡啶-3-基)-1-(1-(1-(1-甲基哌啶-4-基)乙基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑；

1-(1-(1-(1-异丙基哌啶-4-基)乙基)-1H-吡唑-4-基)-3-(6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑；

(S)-1-(1-(1-(1-异丙基哌啶-4-基)乙基)-1H-吡唑-4-基)-3-(6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑；

(R)-1-(1-(1-(1-异丙基哌啶-4-基)乙基)-1H-吡唑-4-基)-3-(6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑；

3-(6-甲氧基吡啶-3-基)-1-(2-(1-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基)吡啶-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑；

(S)-3-(6-甲氧基吡啶-3-基)-1-(2-(1-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基)吡啶-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑；或

(R)-3-(6-甲氧基吡啶-3-基)-1-(2-(1-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基)吡啶-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑；

或其盐。

在另一实施方案中，本发明的化合物是：

4-((4-(1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)哌啶-4-醇；或

或其盐。

在另一实施方案中，本发明的化合物是：

1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-3-(2-(1-((3S,5R)-3,4,5-三甲基哌嗪-1-基)乙基)吡啶-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑；或

或其盐。

在另一实施方案中，本发明的化合物是：

或其盐。

在进一步实施方案中，本发明的化合物是：

或其盐。

术语和定义

“烷基”是指具有指定成员原子数的饱和烃链。例如，C_1-6烷基是指具有1至6个成员原子，例如1至4个成员原子的烷基。烷基可以是直链或支链的。代表性的支链烷基具有一个、两个或三个分支。烷基可任选被一个或多个如本文中定义的取代基取代。烷基包括甲基、乙基、丙基（正丙基和异丙基）、丁基（正丁基、异丁基和叔丁基）、戊基（正戊基、异戊基和新戊基）和己基。烷基也可以是其它基团，例如C_1-6烷氧基的一部分。

“环烷基”是指具有指定成员原子数的饱和烃环。环烷基是单环环系。例如，C_3-6环烷基是指具有3至6个成员原子的环烷基。环烷基包括环丙基、环丁基、环戊基和环己基。

“对映体富集”是指对映体过量大于0的产物。例如，对映体富集是指对映体过量大于50% ee、大于75% ee和大于90% ee的产物。

“对映体过量”或“ee”是作为百分比计的一种对映体超过另一对映体的过量。因此，由于两种对映体等量存在于外消旋混合物中，对映体过量为0（0% ee）。但是，如果一种对映体富集以使其构成产物的95%，则对映体过量为90% ee（富集对映体的量95%减去另一对映体的量5%）。

“对映体纯”是指对映体过量为99% ee或更大的产物。

“半衰期”是指一半量的物质在体外或体内转化成另一化学上不同的物类所需的时间。

“卤代（halo）”是指卤素基团氟、氯、溴或碘。

“杂原子”是指氮或氧原子。

除非另行规定，“杂环基”是指在环中具有指定成员原子数并含有1或2个杂原子作为成员原子的饱和环。杂环基可任选被一个或多个如本文中定义的取代基取代。杂环基在本文中是具有4-、5-或6-个成员原子的单环环系或双环环系。单环杂环基包括吡咯烷基、哌啶基、四氢吡喃基、哌嗪基和吗啉基。

除非另行规定，“杂芳基”是指含有1至3个杂原子作为成员原子的芳基。含有多于一个杂原子的杂芳基可含有不同杂原子。杂芳基可任选如本文中所述取代。杂芳基在本文中是单环环系。单环杂芳基包括吡唑基、咪唑基、噁唑基、吡啶基和嘧啶基。

“成员原子”是指形成链或环的一个或多个原子。当在链中和在环内存在多于一个成员原子时，各成员原子与该链或环中的相邻成员原子共价键合。构成链或环上的取代基的原子不是该链或环中的成员原子。

“任选取代”是指基团可以是未取代的或被一个或多个如本文中定义的取代基取代。

关于基团的“取代的”是指替代连接在基团内的成员原子上的氢原子。应该理解的是，术语“取代的”包括这样的取代符合被取代的原子和取代基的容许化合价并且该取代产生稳定化合物（即不例如通过重排、环化或消除自发发生转化的化合物）的隐含规定。在某些实施方案中，单个原子可被多于一个取代基取代，只要这样的取代符合该原子的容许化合价。合适的取代基如本文中对各取代或任选取代的基团定义。

“可药用”是指在合理医学判断的范围内适合与人类和动物的组织接触使用而没有过度毒性、刺激或其它问题或并发症、与合理的效益/风险比相称的那些化合物、盐、材料、组合物和剂型。

如本文所用，这些方法、方案和实施例中所用的符号和惯例与当代科学文献，例如the Journal of the American Chemical Society或the Journal of Biological Chemistry中所用的那些相符。通常使用标准单字母或三字母缩写指示氨基酸残基，除非另行指明，假设它们为L-构型。除非另行指明，所有原材料获自商业供应商并且不经进一步提纯使用。具体而言，在实施例中和在说明书通篇可使用下列缩写：

ACN 乙腈

AcOH 乙酸

BF₃OEt₂ (二乙基氧鎓)三氟硼酸盐((diethyloxonio)trifluoroborate)

Boc 叔丁氧基羰基

BuLi 丁基锂

CDCl₃ 氘代氯仿

Cs₂CO₃ 碳酸铯

CHCI₃ 氯仿

MeCN 乙腈

DCM 二氯甲烷

DIBAL-H 二异丁基氢化铝

DIPEA 二异丙基乙基胺

DMAP 4-二甲基氨基吡啶

DMEDA N ¹ ,N ² -二甲基乙烷-1,2-二胺

DMF N,N-二甲基甲酰胺

DMSO 二甲亚砜

DMSO-d₆ 氘化二甲亚砜

EDTA 2,2',2'',2'''-(乙-1,2-二基双(氮烷三基))四乙酸

Et₃N 三乙胺

Et₂0 乙醚

EtOH 乙醇

EtOAc 乙酸乙酯

GC 气相色谱法

h 小时

HATU 六氟磷酸N-[(二甲基氨基)-1H-1,2,3-三唑并-[4,5-b]吡啶-1-基亚甲基]-N-甲基甲铵N-氧化物

HCI 盐酸

HCO₂H 甲酸

HPLC 高效液相色谱法

IPA 异丙醇

K₂CO₃ 碳酸钾

LCMS 液相色谱法-质谱法

LiCI 氯化锂

LiOH 氢氧化锂

M 摩尔（浓度）

MeCN 乙腈

Mel 碘甲烷

MeOD 氘化甲醇

MeOH 甲醇

2-MeTHF 2-甲基四氢呋喃

MDAP 质量导向自动制备色谱法

MgSO₄ 硫酸镁

min 分钟

MS 质谱法

Na₂CO₃ 碳酸钠

NaH 氢化钠

NaHCO₃ 碳酸氢钠

Na(OAc)₃BH 三乙酰氧基硼氢化钠

NaOH 氢氧化钠

Na₂SO₄ 硫酸钠

NBS N-溴代琥珀酰亚胺

NEt₃ 三乙胺

NH₃ 氨

NH₄Cl 氯化铵

NMP N-甲基-2-吡咯烷酮

NMR 核磁共振

PdCl₂(dppf)DCM [1,1′-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)DCM加合物

PdCl₂(dtbpf) [1,1′-双(二叔丁基膦基)二茂铁]二氯钯(II)

PPh₃ 三苯基膦

ppm 百万分之份数

RuCl[(R,R)-Tsdpen](p-cymene) [N-[(1R,2R)-2-(氨基-κN)-1,2-二苯基乙基]-4-甲基苯磺酰胺合-κN]氯[(1,2,3,4,5,6-η)-1-甲基-4-(1-甲基乙基)苯]-钌

SCX 强阳离子交换

SPE 固相萃取

STAB 三乙酰氧基硼氢化钠

TBAF 四正丁基氟化铵

TBDPS 叔丁基二苯基甲硅烷基

TEA 三乙胺

TFA 三氟乙酸

THF 四氢呋喃

TMEDA 四甲基乙二胺

TMS 三甲基甲硅烷基

TMSCI 三甲基氯硅烷

T₃P 2,4,6-三丙基-1,3,5,2,4,6-三氧杂三磷杂环己烷2,4,6-三氧化物

UPLC 超高效液相色谱法

Xphos 2-二环己基膦基-2′,4′,6′-三异丙基联苯

Xphos Pd G2 氯(2-二环己基膦基-2′,4′,6′-三异丙基-1,1′-联苯基)[2-(2′-氨基-1,1′-联苯基)]钯(II)。

在“本发明的化合物”的范围内包括式(I)的化合物及其盐的所有多晶型物、放射性标记衍生物、立体异构体和旋光异构体。

本发明的化合物可以固体或液体形式存在。在固态下，本发明的化合物可以结晶或非晶形式或作为其混合物存在。对结晶形式的本发明的化合物而言，技术人员会认识到，可能形成可药用溶剂化物，其中溶剂分子在结晶过程中并入晶格中。本发明的化合物可以溶剂化和非溶剂化形式存在。溶剂化物可能涉及非水溶剂，如乙醇、异丙醇、DMSO、乙酸、乙醇胺和EtOAc，或它们可能包含水作为并入晶格中的溶剂。其中以水为并入晶格中的溶剂的溶剂化物通常被称作“水合物”。水合物包括化学计量水合物以及含有可变量的水的组合物。

技术人员会进一步认识到，以结晶形式存在的某些本发明的化合物，包括其各种溶剂化物，可能表现出多晶型现象（即以不同晶体结构存在的能力）。这些不同的结晶形式通常被称为“多晶型物”。本发明包括所有这样的多晶型物。多晶型物具有相同化学组成，但结晶固态的堆积、几何排列和其它描述性性质不同。多晶型物因此可具有不同物理性质，如形状、密度、硬度、可变形性、稳定性和溶出性质。多晶型物通常表现出不同的熔点、IR光谱和X-射线粉末衍射图，这些可用于识别。技术人员会认识到可以例如通过改变或调节用于制备该化合物的反应条件或试剂来制备不同的多晶型物。例如，温度、压力或溶剂的改变可能产生多晶型物。此外，一种多晶型物可能在某些条件下自发转化成另一多晶型物。

本发明还包括同位素标记的化合物，其与本发明的化合物相同，只是事实上一个或多个原子被具有与自然界中最常存在的原子质量或质量数不同的原子质量或质量数的原子替代。可并入本发明的化合物中的同位素的实例包括氢、碳、氮、氧和氟的同位素，例如²H、³H、¹¹C、¹⁴C和¹⁸F。

本发明的化合物可含有一个或多个不对称中心（也称为手性中心）并因此可作为独立的对映体、非对映体或其它立体异构形式或作为其混合物存在。手性中心，如手性碳原子，也可能存在于取代基如烷基中。如果没有指明本发明的化合物中或本文例示的任何化学结构中存在的手性中心的立体化学，该结构意在包含任何立体异构体及其所有混合物。因此，含有一个或多个手性中心的本发明的化合物可作为外消旋混合物、对映体富集混合物或作为对映体纯的独立立体异构体使用。

可通过本领域技术人员已知的方法拆分含有一个或多个不对称中心的本发明的化合物的独立立体异构体。例如，这样的拆分可如下进行：(1) 通过形成非对映异构体盐、配合物或其他衍生物；(2) 通过与立体异构体特异性试剂选择性反应，例如通过酶促氧化或还原；或(3) 通过在手性环境中，例如在手性载体如具有结合的手性配体的二氧化硅上或在手性溶剂存在下的气液或液相色谱法。技术人员会认识到如果通过上述分离程序之一将所需立体异构体转化成另一化学实体，需要进一步的步骤以释放所需形式。或者，可以通过使用光学活性试剂、底物、催化剂或溶剂的不对称合成或通过经不对称转化将一种对映体转化成另一种来合成特定的立体异构体。

本发明的化合物也可含有几何不对称中心。如果没有指明本发明的化合物中或本文例示的任何化学结构中存在的几何不对称中心的立体化学，该结构意在包含反式几何异构体、顺式几何异构体和它们的所有混合物。同样地，也包括所有互变异构形式，无论这样的互变异构体平衡存在还是主要以一种形式存在。

要理解的是，在本文中提到式(I)的化合物及其盐涵盖作为游离酸或游离碱或作为其盐，例如作为其可药用盐的式(I)的化合物。因此，在一个实施方案中，本发明涉及作为游离酸或游离碱的式(I)的化合物。在另一实施方案中，本发明涉及式(I)的化合物或其盐。在进一步的实施方案中，本发明涉及式(I)的化合物或其可药用盐。

技术人员会认识到，可以制备根据式(I)的化合物的可药用盐。实际上，在本发明的某些实施方案中，根据式(I)的化合物的可药用盐可能优于各自的游离碱或游离酸，因为这样的盐可能为该分子提供更高的稳定性或溶解度，由此有利于配制成剂型。

本文所用的术语“可药用盐”是指保持本化合物的所需生物活性并表现出最低不想要的毒理效应的盐。这些可药用盐可在该化合物的最终分离和提纯过程中原位制备或通过单独地使纯化的化合物以其游离酸或游离碱形式，或不可药用盐形式分别与合适的碱或酸反应来制备。

具有不可药用的抗衡离子或相关溶剂的盐和溶剂化物在本发明的范围内，例如，用作其它式(I)的化合物和它们的可药用盐的制备中的中间体。因此本发明的一个实施方案包含式(I)的化合物及其盐。

在某些实施方案中，根据式(I)的化合物可含有酸性官能团。合适的可药用盐包括这样的酸性官能团的盐。代表性的盐包括可药用金属盐，如钠、钾、锂、钙、镁、铝和锌盐；可药用金属阳离子如钠、钾、锂、钙、镁、铝和锌的碳酸盐和碳酸氢盐；可药用有机伯胺、仲胺和叔胺，包括脂族胺、芳胺、脂族二胺和羟烷基胺，如甲基胺、乙基胺、2-羟乙基胺、二乙基胺、TEA、乙二胺、乙醇胺、二乙醇胺和环己基胺。

在某些实施方案中，根据式(I)的化合物可含有碱性官能团并因此能够通过用合适的酸处理形成可药用酸加成盐。合适的酸包括可药用无机酸和可药用有机酸。代表性的可药用酸加成盐包括盐酸盐、氢溴酸盐、硝酸盐、甲基硝酸盐、硫酸盐、硫酸氢盐、氨基磺酸盐、磷酸盐、乙酸盐、羟基乙酸盐、苯基乙酸盐、丙酸盐、丁酸盐、异丁酸盐、戊酸盐、马来酸盐、羟基马来酸盐、丙烯酸盐、富马酸盐、苹果酸盐、酒石酸盐、柠檬酸盐、水杨酸盐、对氨基水杨酸盐、乙醇酸盐、乳酸盐、庚酸盐、邻苯二甲酸盐、草酸盐、琥珀酸盐、苯甲酸盐、邻乙酰氧基苯甲酸盐、氯苯甲酸盐、甲基苯甲酸盐、二硝基苯甲酸盐、羟基苯甲酸盐、甲氧基苯甲酸盐、萘甲酸盐、羟基萘甲酸盐、扁桃酸盐、丹宁酸盐、甲酸盐、硬脂酸盐、抗坏血酸盐、棕榈酸盐、油酸盐、丙酮酸盐、双羟萘酸盐、丙二酸盐、月桂酸盐、戊二酸盐、谷氨酸盐、丙酸酯十二烷基硫酸盐（estolate）、甲磺酸盐（mesylate）、乙磺酸盐（esylate）、2-羟基乙磺酸盐、苯磺酸盐（besylate）、对氨基苯磺酸盐、对甲苯磺酸盐（tosylate）和萘-2-磺酸盐。

化合物制备

本发明的化合物可通过各种方法制备，包括标准化学。除非另行指明，任何先前定义的变量仍然具有先前定义的含义。下面给出示例性的通用合成方案，然后在实施例部分中制备本发明的具体化合物。

方案1

步骤1可通过如下进行：在合适的溶剂混合物如MeOH和二氧杂环己烷，与合适的碱例如Cs₂CO₃存在下，在合适的温度如110℃下，用对甲苯磺酰肼和合适的炔如4-乙炔基-1-甲基-1H-吡唑处理合适的时期如15小时，然后使用合适的方法如柱色谱法分离，溶解在合适的溶剂如二氧杂环己烷中，和用合适的路易斯酸如(二乙基氧鎓)三氟硼酸盐处理和搅拌合适的时期如4小时。

步骤2可通过如下进行：在合适的溶剂如无水MeCN中用合适的硼酸或合适的硼酸酯如N-(2-甲氧基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)吡啶-3-基)甲磺酰胺和乙酸铜(II)和DMAP处理，暴露在空气中在合适的温度如50℃下加热合适的时间如15小时。

方案2

步骤1可通过如下进行：在合适的溶剂混合物如MeOH和二氧杂环己烷与合适的碱，例如Cs₂CO₃存在下，在合适的温度如110℃下，用对甲苯磺酰肼和乙炔基三甲基甲硅烷处理合适的时期如15小时。

步骤2可通过如下进行：在合适的溶剂如二氧杂环己烷存在下用(二乙基氧鎓)三氟硼酸盐处理合适的时期如4小时。

步骤3可通过如下进行：在合适的溶剂如MeCN中，在合适的温度如25℃下，用合适的溴化剂如NBS处理合适的时期如4小时。

步骤4可通过如下进行：在合适的碱如DMAP和乙酸铜(II)和合适的溶剂如MeCN存在下用芳基硼酸如(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)硼酸或芳基硼酸酯如1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)-1H-吡唑处理，暴露在空气中在合适的温度如40℃下加热合适的时期如整夜。

步骤5可通过如下进行：在合适的钯催化剂和膦配体（如果需要）如氯-[2'-(二甲基氨基)-2-联苯基]-(二降冰片基膦)-钯或XphosPd G2存在下，在合适的碱如磷酸三钾存在下，在合适的溶剂或溶剂混合物如水和二氧杂环己烷中用芳基硼酸如(1-(叔丁氧基羰基)-3-甲基-1H-吡唑-5-基)硼酸或芳基硼酸酯如N-(2-甲氧基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)吡啶-3-基)甲磺酰胺或3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)-1H-吡唑处理，和使用合适的加热方法如微波在合适的温度如80℃或100℃下加热合适的时期如60分钟或120分钟。

步骤5’可通过如下进行：在合适的溶剂如THF存在下在合适的温度如-78℃下用Negishi偶联配对物（coupling partner）如4-溴-1-乙基-5-甲基-1H-吡唑（其已单独用nBuLi的己烷溶液处理）处理合适的时期如30分钟，然后使其经合适的时期如30分钟升温到室温，然后在合适的钯催化剂和膦配体（如果需要）如PdCl₂(PPh₃)₂存在下用ZnCl₂在合适的溶剂如THF中的溶液处理，和在合适的温度如80℃下加热合适的时期如7.5小时。

步骤6可通过如下进行：在合适的碱如NaH在矿物油上的60%分散体存在下，在合适的溶剂如THF中在合适的温度如室温下用合适的甲基化试剂如MeI处理合适的时期如2小时。

方案3

步骤1可通过如下进行：在合适的溶剂混合物如MeOH和二氧杂环己烷与合适的碱例如Cs₂CO₃存在下，在合适的温度如110℃下用对甲苯磺酰肼处理合适的时期如15小时。

步骤3可通过如下进行：在DMAP和乙酸铜(II)和合适的溶剂如MeCN存在下用芳基硼酸如(2-甲氧基嘧啶-5-基)硼酸或(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)硼酸或(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)硼酸或芳基硼酸酯如3-(氟甲基)-2-甲氧基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)吡啶、N-(2-甲氧基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)吡啶-3-基)甲磺酰胺或2-甲氧基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)烟腈或N-(2-甲氧基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)吡啶-3-基)甲磺酰胺处理，暴露在空气中在合适的温度如室温或40℃下加热合适的时期如整夜至四天。

步骤4可通过如下进行：在合适的溶剂如DCM存在下用合适的酸如TFA处理，使用加热方法如微波在合适的温度如70℃下加热合适的时期如3至6小时。

方案4

步骤1可通过如下进行：在合适的溶剂如MeCN存在下，在乙酸铜(II)存在下，在合适的温度如室温下或在80℃下加热下用芳基硼酸如(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)硼酸或芳基硼酸酯如1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)-1H-吡唑处理合适的时期如4小时或整夜。

步骤2可通过如下进行：在合适的钯催化剂和膦配体（如果需要）如Xphos Pd G2存在下，在合适的碱如磷酸三钾存在下，在合适的溶剂混合物如水和二氧杂环己烷中用1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)-1H-吡唑处理，和在合适的温度如80℃下加热合适的时期如3小时。

步骤2’可通过如下进行：在合适的碱如磷酸钾存在下，在合适的溶剂或溶剂混合物如EtOH和水中用合适的硼酸酯如3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)-1H-吡唑和合适的钯催化剂和配体体系如添加了二环己基(2',4',6'-三异丙基-[1,1'-联苯]-2-基)膦的XPhos Pd G2处理，在合适的温度如100℃下加热合适的时期如整夜。

步骤3可通过如下进行：在合适的溶剂如MeOH中，在合适的温度如室温下用合适的酸如HCl处理合适的时期如整个周末。

方案5

步骤1可通过如下进行：在合适的钯催化剂和膦配体（如果需要）如Xphos Pd G2存在下，在合适的碱如磷酸三钾存在下，在合适的溶剂混合物如水和二氧杂环己烷中用芳基硼酸如(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)硼酸或芳基硼酸酯处理，和在合适的温度如80℃下加热合适的时期如2小时。

步骤1’可通过如下进行：在DMAP和乙酸铜(II)和合适的溶剂或溶剂混合物如无水MeCN和EtOH存在下，在粉状分子筛存在下用1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)-1H-吡唑处理，暴露在空气中在合适的温度如80℃下加热合适的时期如最多72小时。

步骤2可通过如下进行：在DMAP和乙酸铜(II)和合适的溶剂如无水MeCN或合适的溶剂混合物如IPA和MeCN存在下用1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)-1H-吡唑处理，暴露在空气中在合适的温度如40℃下加热合适的时期如48小时。

步骤2’可通过如下进行：在合适的钯催化剂和膦配体（如果需要）如Xphos Pd G2存在下，在合适的碱如磷酸三钾存在下，在合适的溶剂混合物如水和二氧杂环己烷中用芳基硼酸如(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)硼酸或芳基硼酸酯处理，和在合适的温度如80℃下加热合适的时期如2小时。

步骤3可通过如下进行：在合适的溶剂如MeOH存在下在合适的温度如室温下用合适的酸如2 M HCl水溶液处理合适的时期如整个周末。

方案6

步骤1可通过如下进行：在合适的碱如NaH在矿物油上的60%悬浮液或碳酸钾存在下，在合适的溶剂如DMF存在下，在合适的温度如室温下或在50℃下加热下用合适的烷基化剂如4-(溴甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯或3-(溴甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯或3-(溴甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯或3-(溴甲基)-1-异丙基吡咯烷处理合适的时期如3小时或整个周末。

步骤2可通过如下进行：在合适的溶剂如DCM存在下，在合适的温度如室温或70℃下用合适的酸如TFA处理合适的时期如30分钟至15小时或静置最多5天。

步骤3a可通过如下进行：在合适的溶剂如DMF中，在合适的温度如室温下或在60℃下加热下用合适的醛或酮，分别例如甲醛或丙酮处理合适的时间量如30分钟至整个周末，然后加入合适的还原剂如STAB，和在存在或不存在合适的碱如DIPEA的情况下在合适的温度如室温下保持搅拌合适的时期如2小时或整夜。

步骤3b可通过如下进行：在合适的碱如DIPEA和合适的酰胺偶联试剂如HATU存在下，在合适的溶剂如DMF中，在合适的温度如室温下用合适的羧酸如丙酸处理合适的时期如3小时。或者，步骤3b可通过如下实现：在合适的碱如三乙胺存在下，在合适的溶剂如DCM中，在合适的温度如室温下用合适的酰基氯如丙酰氯处理合适的时期如整夜。

步骤3c可通过如下进行：在合适的溶剂如EtOH中，在合适的碱如DIPEA存在下，在合适的温度如在70℃或90℃加热下用合适的环氧化物如2,2-二甲基环氧乙烷、(R)-2-甲基环氧乙烷或(S)-2-甲基环氧乙烷处理合适的时间量如1小时或3小时。

步骤3d可通过如下进行：在合适的碱如Cs₂CO₃存在下，在合适的溶剂如DMF中用合适的卤甲基环氧乙烷如2-(氯甲基)环氧乙烷处理，使用加热方法如微波加热到合适的温度如60℃持续合适的时间量如1小时45分钟，然后用合适的胺如二甲胺在THF中的2M溶液处理，和加热到合适的温度如70℃持续合适的时间量如7小时。

方案7

步骤1可通过如下进行：在合适的碱如NaH或碳酸钾存在下，在合适的溶剂如DMF存在下，在合适的温度如室温下或在50℃下加热下用合适的烷基化剂如4-(溴甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯或3-(溴甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯或3-(溴甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯或3-溴吡咯烷-1-甲酸叔丁酯处理合适的时期如3至24小时。

步骤2可通过如下进行：在合适的溶剂如DCM存在下用合适的酸如TFA处理，使用合适的加热方法如微波在合适的温度如70℃下加热合适的时期如15分钟进行。

步骤3可通过如下进行：在合适的溶剂如DMF中，在合适的温度如室温下或在60℃下加热下用合适的醛或酮，分别例如甲醛或丙酮处理合适的时间量如30分钟至整个周末，然后加入合适的还原剂如STAB和在存在或不存在合适的碱如DIPEA的情况下在合适的温度如室温下保持搅拌合适的时期如4小时或整夜。

方案8

步骤1可在合适的碱如DIPEA与合适的胺如1-异丙基哌嗪存在下，在合适的溶剂如THF存在下，使用合适的酰胺偶联试剂如T3P，在合适的温度如室温下用合适的杂芳基羧酸如噁唑-5-甲酸进行合适的时间，如整夜。

步骤2可通过如下进行：在合适的碱如碳酸钾存在下，在合适的溶剂如甲苯存在下用特戊酸、合适的钯催化剂和膦配体如氯化钯(II)和Xphos处理，和在密封容器如微波小瓶中在合适的温度如110℃下加热合适的时期如96小时。

步骤3可通过如下进行：在合适的溶剂如THF存在下，在合适的温度如-78℃下用合适的还原剂如DIBAL-H处理合适的时期如5小时，和允许升温到合适的温度如室温整夜。

方案9

步骤1可通过如下进行：在合适的溶剂如DMSO中，在合适的温度如室温下处理2-重氮乙酸乙酯和吡咯烷合适的时间如16小时。

步骤2可通过如下进行：在合适的碱如吡啶存在下，在合适的溶剂如DCM中，在合适的温度如室温下用乙酸铜(II)和合适的芳基硼酸如(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)硼酸或合适的硼酸酯处理合适的时期如5小时。

步骤3可通过如下进行：在合适的溶剂混合物如甲苯和THF中用双(三甲基甲硅烷基)氨基钠处理，和在合适的温度如70℃下加热，然后用合适的胺如(1-甲基哌啶-3-基)甲胺处理合适的时间量如16小时。

步骤4可通过如下进行：在合适的碱如DIPEA和合适的酰胺偶联试剂如HATU存在下，在合适的溶剂如DMF中，在合适的温度如室温下用合适的胺如(1-甲基哌啶-3-基)甲胺处理合适的时期如16小时。

方案10

步骤1可通过如下进行：在合适的溶剂如水存在下，在合适的温度如室温下用合适的氧化剂如高锰酸钾处理合适的时期如1小时。

步骤2可通过如下进行：在合适的溶剂或溶剂混合物如MeOH和甲苯存在下，在合适的温度如室温下用合适的烷基化剂如TMS-重氮甲烷处理合适的时期如1小时。

步骤3可在合适的溶剂如AcOH和合适的氢化催化剂如氧化铂(IV)存在下，在氢存在下，在合适的温度如室温和合适的压力如4巴下进行合适的时期如4小时。

步骤4可通过如下进行：在合适的碱如碳酸钾存在下，在合适的溶剂如MeCN中，在合适的温度如室温下用例如烷基化剂如苄基溴处理合适的时期如整夜。

步骤5可通过如下进行：在合适的溶剂如THF存在下，在合适的温度如室温下用合适的还原剂如硼氢化锂处理合适的时期如3小时。

步骤6可通过如下进行：在合适的碱如TEA和合适的溶剂如THF存在下，在合适的温度如室温下用甲磺酰氯处理合适的时期如2小时。

步骤7可通过如下进行：在合适的碱如NaH存在下，在合适的溶剂如DMF中，在合适的温度如室温下用合适的烷基化配对物如1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-3-(1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑处理合适的时期如15小时。

步骤8可在合适的溶剂或溶剂混合物如MeOH和EtOAc和合适的氢化催化剂如氧化氢氧化钯（palladium hydroxide oxide）存在下，使用合适的氢化设备如H-Cube连续流氢化反应器，在氢存在下在合适的温度如25℃和合适的压力如50巴下进行。

方案11

步骤1可通过如下进行：在合适的碱如碳酸铯存在下，在合适的溶剂如DMF中，在合适的温度如使用合适的加热方法如微波在100℃下加热下，用合适的环氧化物如1-氧杂-6-氮杂螺[2.5]辛烷-6-甲酸叔丁酯处理合适的时期如1至1.5小时。

步骤2可通过如下进行：在合适的溶剂如DCM存在下，在合适的温度如室温下用合适的酸如TFA处理合适的时期如15小时。

步骤2’可通过如下进行：在合适的溶剂如DCM存在下，在合适的温度如-78℃下用合适的氟化试剂如Deoxo-Fluor®在合适的溶剂如THF中的溶液处理合适的时期如24小时。

步骤3可通过如下进行：在合适的溶剂如DMF中，在合适的温度如室温下用合适的醛如甲醛处理合适的时间量如1小时、然后加入合适的还原剂如STAB，和在合适的温度如室温下保持搅拌合适的时期如3小时。

方案12

步骤1可通过如下进行：在合适的溶剂如无水EtOH中用水合肼和合适的碱如三乙胺处理，和在合适的温度如80℃下加热合适的时期如2.5小时。

步骤2可通过如下进行：在合适的溶剂如DCM中，在合适的温度如室温下用氯三异丙基甲硅烷处理合适的时期如1小时。

步骤3可通过如下进行：在合适的碱如DMAP存在下，在合适的溶剂如MeCN中用乙酸铜(II)和合适的芳基硼酸如(6-甲氧基-5-(N-(4-甲氧基苄基)甲基磺酰胺基)吡啶-3-基)硼酸酯、(5-氰基-6-甲氧基吡啶-3-基)硼酸或(2-甲氧基嘧啶-5-基)硼酸或合适的硼酸酯如3-(氟甲基)-2-甲氧基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)吡啶、3-氟-2-甲氧基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)吡啶或2-甲氧基-3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)吡啶处理，暴露在空气中在合适的温度如室温或40℃下搅拌合适的时期如18小时。

步骤4可通过如下进行：用TBAF在合适的溶剂如THF中的溶液处理和搅拌合适的时期如90分钟。

步骤5可通过如下进行：在合适的溶剂如甲苯存在下用合适的Mitsunobu偶联试剂如2-(三丁基正膦亚基)乙腈和合适的醇如2-(1-(2-羟乙基)哌啶-4-基)丙-2-醇、4-(羟甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯、(1-异丙基哌啶-4-基)甲醇、3-(羟甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯、(S)-2-(羟甲基)吗啉-4-甲酸叔丁酯或(1-异丙基吡咯烷-3-基)甲醇处理，使用合适的加热方法如微波或常规加热在合适的温度如100℃或120℃下加热合适的时期如1小时至4小时。

步骤6可通过如下进行：在合适的溶剂如DCM存在下用合适的酸如TFA处理，和在合适的温度如室温下搅拌合适的时期如30分钟。

步骤7可通过如下进行：在合适的碱如DIPEA和合适的溶剂如EtOH存在下用合适的烷基化剂如1-氯-2-甲基丙-2-醇、(R)-2-甲基环氧乙烷、(S)-2-甲基环氧乙烷或1-氯-2-甲基丙-2-醇处理，和使用合适的加热方法如微波在合适的温度如90℃下加热合适的时期如1小时至8小时。

步骤8可通过如下进行：在合适的溶剂如DCM存在下用合适的酸如TFA处理，和使用合适的加热方法如微波在合适的温度如60℃下加热合适的时期如105分钟。

方案13

步骤1可使用合适的手性HPLC提纯条件、使用合适的手性柱进行以分离成成分对映体或非对映体，如30 mm x 25 cm Chiralpak IC柱或Chiralpak AD-H柱，用合适的溶剂体系如40% EtOH (+0.2%异丙基胺)/庚烷(+0.2%异丙基胺)以合适的流速如30 mL/min洗脱。

方案14

步骤1可通过如下进行：在氢气存在下在合适的压力如70 psi下，在合适的催化剂如在氧化铝上的Rh存在下，在合适的溶剂如EtOH中，在合适的酸如AcOH存在下搅拌合适的时期如48小时。

步骤2可通过如下进行：在合适的碱如Na₂CO₃存在下，在合适的溶剂或溶剂混合物如二氧杂环己烷和水中，在合适的温度如80℃下用二碳酸二叔丁酯处理合适的时期如24小时。

步骤3可通过如下进行：在合适的溶剂如DCM中用合适的溴化试剂混合物如三苯基膦和CBr₄处理合适的时期如4小时。

步骤4可通过如下进行：在合适的溶剂如MeCN中在合适的碱如Cs₂CO₃存在下用4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)-1H-吡唑处理，和在合适的温度如60℃下搅拌合适的时期如16小时。

方案15

步骤1可通过如下进行：在合适的溶剂如EtOH中，在合适的温度如0℃下用合适的还原剂如NaBH₄处理，然后允许经合适的时期如1小时升温到室温。

步骤2可通过如下进行：在合适的溶剂如DCM中用合适的溴化剂如PBr₃处理，和在合适的温度如室温下搅拌合适的时期如4小时。

步骤3可通过如下进行：在合适的溶剂如MeCN中用合适的碱如Cs₂CO₃处理，在合适的温度如80℃下加热合适的时间量如24小时。

方案16

步骤1可通过如下进行：用合适的酸或酸性溶液如HCl在二氧杂环己烷中的4M溶液处理合适的时期如16小时。

步骤2可通过如下进行：在合适的溶剂如MeCN中，在合适的温度如室温下用合适的醛或酮，分别例如甲醛或丙酮处理合适的时间量如15分钟，然后加入合适的还原剂如STAB，和在合适的温度如室温保持搅拌合适的时期如16小时。

方案17

步骤1可通过如下进行：在合适的碱如DMAP或三乙胺存在下用乙酸铜(II)和合适的硼酸酯如(2R,4r,6S)-2,6-二甲基-4-((4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯或1-异丙基-4-((4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)哌啶处理，暴露在空气中在合适的溶剂如MeCN或溶剂混合物如EtOH和MeCN中在合适的温度如40℃或80℃下搅拌合适的时期如整夜至4天。

步骤2可通过如下进行：在合适的钯催化剂和配体体系如XPhos Pd G2存在下，在合适的溶剂或溶剂混合物如1,4-二氧杂环己烷和水中用合适的硼酸如(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)硼酸或(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)硼酸和合适的碱如磷酸钾处理，使用合适的加热方法如微波在合适的温度如100℃下加热合适的时间量如1小时。

步骤3可通过如下进行：在合适的溶剂如DCM存在下，在合适的温度如室温下用合适的酸如TFA处理合适的时期如15小时。

步骤4可通过如下进行：用适当的烷基化剂、酮或醛如甲醛的37重量%水溶液处理，搅拌适当时期如1小时，然后用适当的还原剂如STAB处理，和搅拌合适的时期如3小时。

方案18

步骤1可通过如下进行：在合适的碱如DMAP存在下用乙酸铜(II)和合适的硼酸如(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)硼酸处理，暴露在空气中在合适的溶剂如MeCN中在合适的温度如80℃下搅拌合适的时期如4小时。

步骤2可通过如下进行：在合适的钯催化剂和配体体系如XPhos Pd G2存在下，使用合适的碱如磷酸钾，在合适的溶剂或溶剂混合物如1,4-二氧杂环己烷和水中用合适的硼酸酯如(2R,4r,6S)-2,6-二甲基-4-((4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯处理，使用合适的加热方法如微波在合适的温度如100℃下加热合适的时间量如30分钟。

步骤4可通过如下进行：用适当的烷基化剂、酮或醛如甲醛的37重量%水溶液处理，搅拌适当时期如1小时，然后用适当的还原剂如STAB处理和搅拌合适的时期如3小时。

方案19

步骤1可通过如下进行：在合适的溶剂如1,4-二氧杂环己烷中，使用合适的加热方法如微波在合适的温度如100℃下用双(频哪醇合)二硼、PdCl₂(dppf)-DCM和乙酸钾处理合适的时期如1小时。

步骤2可通过如下进行：在合适的钯催化剂和配体体系如XPhos Pd G2存在下，使用合适的碱如磷酸三钾，在合适的溶剂或溶剂混合物如EtOH和水中用合适的溴化物如3-溴-1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑处理，使用合适的加热方法如微波在合适的温度如100℃下加热合适的时间量如30分钟。

步骤3可通过如下进行：在合适的溶剂如THF中在室温下用合适的胺如1-甲基哌嗪和异丙醇钛(IV)和乙酸处理，接着用合适的还原剂如三乙酰氧基硼氢化钠处理和使用合适的加热方法如微波在氮气气氛下在合适的温度如100℃下加热合适的时期如1小时。

方案20

步骤1可通过如下进行：在合适的溶剂如DMF和合适的烷基化剂如TBDPS-Cl中用咪唑处理，在合适的温度如室温下搅拌合适的时间如整夜。

步骤2可通过如下进行：在合适的溶剂如乙醚中，在合适的温度如-78℃下用无水TMEDA处理，然后用合适的碱如仲丁基锂处理和搅拌合适的时间如2小时，接着用丙酮处理和搅拌合适的时间如2小时。

步骤3可通过如下进行：在合适的溶剂或溶剂混合物如DCM和THF中加入TBAF和在合适的温度如室温下搅拌合适的时间如2小时。

步骤4可通过如下进行：在合适的碱如吡啶存在下和在合适的溶剂如DCM中，在合适的温度如室温下用甲磺酰氯处理合适的时间如8小时。

步骤5可通过如下进行：在合适的溶剂如DMF中，在合适的温度和时间下用合适的碱如氢化钠处理，如室温3小时，然后60℃ 1小时。

因此，在一个实施方案中，本发明提供制备式(I)的化合物或其盐的方法，其包括：

a) 使式(II)的化合物或其盐与合适的硼酸或硼酸酯反应

其中R^1’是如上文定义的R¹或可转化成R¹的基团，且Z¹是卤素，例如溴，

b) 使式(III)的化合物或其盐与合适的硼酸或硼酸酯反应

其中R^2’是如上文定义的R²或可转化成R²的基团，且Z²是卤素，例如溴，

c) 当R²是-OR⁴时，使式(IV)的化合物或其盐与式R⁴-OH的醇反应，

其中R¹如上文定义，或

d) 当R²是-CONHR⁵时，使式(V)的化合物或其盐与式R⁵-NH₂的胺反应

。

使用方法

本发明的化合物是激酶活性，特别是PI3-激酶活性的抑制剂。作为PI3-激酶抑制剂的化合物可用于治疗其中基础病理学（至少部分）归因于不适当的PI3-激酶活性的病症，如哮喘和慢性阻塞性肺病（COPD）。“不适当的PI3-激酶活性”是指偏离在特定患者中预期的正常PI3-激酶活性的任何PI3-激酶活性。不适当的PI3-激酶可为例如活性异常提高或PI3-激酶活性的定时和或控制失常的形式。这样的不适当活性因此可能例如源自PI3-激酶的过度表达或突变，以造成不适当或不受控制的活化。相应地，在另一方面中，本发明涉及治疗这样的病症的方法。

这样的病症包括呼吸系统疾病，包括哮喘、慢性阻塞性肺病（COPD）和特发性肺纤维化（IPF）；纤毛病（ciliopathy），包括原发性纤毛运动障碍、多囊肝病和肾消耗病；细菌感染，包括细菌性呼吸道感染，例如被肺炎链球菌、流感嗜血杆菌、卡他莫拉菌和/或分枝杆菌如结核分枝杆菌感染，和呼吸病况和肺损伤如哮喘、COPD和囊性纤维化的细菌性加重；病毒感染，包括病毒性呼吸道感染，例如被流感病毒、鼻病毒、呼吸道合胞病毒（RSV）、人副流感病毒（HPIV）、腺病毒和/或冠状病毒感染，和呼吸病况和肺损伤如哮喘、COPD和囊性纤维化的病毒性加重；其它非病毒性呼吸道感染，包括曲霉病和利什曼病；变应性疾病，包括过敏性鼻炎；自身免疫病，包括强直性脊柱炎、Churg-Strauss综合征、克罗恩氏病、肾小球肾炎、亨-舍二氏紫癜、特发性血小板减少性紫癜（ITP）、间质性膀胱炎、天疱疮、原发性硬化性胆管炎、牛皮癣、类风湿性关节炎、肉样瘤病、Sjogren's综合征、1型糖尿病、溃疡性结肠炎、血管炎、白癜风和韦格纳肉芽肿；炎性病症，包括炎性肠病、特应性皮炎、湿疹和牛皮癣；糖尿病；心血管疾病，包括血栓形成、动脉粥样硬化和高血压；恶性血液病；神经退行性疾病；胰腺炎；多器官衰竭；肾病；血小板聚集；癌症；精子活力（sperm motility）；移植排斥；移植物排斥；肺损伤；疼痛，包括与类风湿性关节炎或骨关节炎相关的疼痛、背痛、一般炎性痛、肝后神经痛（post hepatic neuralgia）、糖尿病性神经病、炎性神经性疼痛（创伤）、三叉神经痛和中枢痛；纤维化疾病；抑郁；精神障碍，包括精神分裂症；支气管扩张；和活化PI3Kδ综合征（APDS）。

这样的纤维化疾病可包括特发性肺纤维化、间质性肺病、非特异性间质性肺炎（NSIP）、普通型间质性肺炎（UIP）、心内膜心肌纤维化、纵隔纤维化、骨髓纤维化、腹膜后纤维化、进行性大块纤维化（煤工尘肺的并发症）、肾源性全身纤维化、克罗恩氏病、陈旧性心肌梗死、硬皮病/系统性硬化症、神经纤维瘤病、Hermansky-Pudlak综合征、糖尿病性肾病、肾纤维化、肥厚型心肌病（HCM）、高血压相关性肾病、局灶性节段性肾小球硬化（FSGS）、放射性纤维化、子宫肌瘤（纤维瘤）、酒精性肝病、肝脂肪变性、肝纤维化、肝硬化、丙型肝炎病毒（HCV）感染、慢性器官移植排斥、皮肤纤维化状况、瘢痕疙瘩疤痕、杜普伊特伦挛缩、Ehlers-Danlos综合征、营养不良性大疱性表皮松解、口腔粘膜下纤维化和纤维增生性病症。

在一个实施方案中，该病症是哮喘。在进一步实施方案中，该病症是COPD。

在本发明背景内，本文所用的描述适应症的下列术语在American PsychiatricAssociation发表的Diagnostic and Statistical Manual of Mental Disorders，第4版(DSM-IV)和/或the International Classification of Diseases，第10版(ICD-10)中分类。本文中提到的病症的各种亚型被视为本发明的一部分。下列疾病后的括号中的数字是指DSM-IV中的分类代码。

在本发明背景内，术语“精神障碍”包括精神分裂症，包括亚型偏执型(295.30)、无序型 (295.10)、紧张型(295.20)、未分化型(295.90)和残余型(295.60)；精神分裂症样精神障碍(295.40)；分裂情感性障碍(295.70)，包括亚型双相型和抑郁型；妄想型障碍(297.1)，包括亚型情爱妄想型、自大妄想型（Grandiose Type）、嫉妒妄想型、被迫害妄想型、身体妄想型、混合型和未分类型；短时精神障碍(298.8)；共有型精神障碍(297.3)；由一般医疗状况引起的精神障碍，包括亚型伴妄想（With Delusions）和伴幻觉（WithHallucinations）；物质诱发型精神障碍，包括亚型伴妄想（With Delusions）(293.81)和伴幻觉（With Hallucinations）(293.82)；和其它未注明的精神障碍（Psychotic DisorderNot Otherwise Specified）(298.9)。

在本发明背景内，术语“抑郁”包括抑郁和心境障碍，包括重性抑郁发作、躁狂发作、混合发作和轻躁狂发作；抑郁障碍，包括重性抑郁障碍、心境恶劣障碍(300.4)、其它未注明的抑郁障碍(311)；双相障碍，包括I型双相障碍、II型双相障碍（复发性重度抑郁发作伴轻躁狂发作）(296.89)、循环情感性精神障碍(301.13)和其它未注明的双相障碍(296.80)；其它心境障碍，包括由一般医疗状况引起的心境障碍(293.83)（其包括亚型伴抑郁特征、伴重性抑郁样发作、伴躁狂特征和伴混合特征）、物质诱发型心境障碍（包括亚型伴抑郁特征、伴躁狂特征和伴混合特征）和其它未注明的心境障碍(296.90)。

本发明的治疗方法包括给予需要其的患者安全和有效量的式(I)的化合物或其可药用盐。本发明的独立实施方案包括通过给予需要其的患者安全和有效量的式(I)的化合物或其可药用盐来治疗上文提到的任一种病症的方法。

如本文所用，关于病症的“治疗”是指：(1) 改善或预防该病症或该病症的一种或多种生物表现，(2) 干扰(a) 通往该病症或对该病症负责的生物级联中的一个或多个点或(b) 该病症的一种或多种生物表现，(3) 改善与该病症相关的一种或多种症状或效应，或(4) 减慢该病症或该病症的一种或多种生物表现的进展。

式(I)的化合物或其可药用盐也可用于预防病症。技术人员会认识到，“预防”不是绝对术语。在医药学中，“预防”被理解为是指预防性给药以显著降低病症或其生物表现的概率或严重程度，或延迟此类病症或其生物表现的发作。本发明的独立实施方案包括通过给予需要其的患者安全和有效量的式(I)的化合物或其可药用盐来预防上文提到的任一种病症的方法。

在一个实施方案中，本发明的方法涉及治疗病症。在另一实施方案中，本发明的方法涉及预防病症。

如本文所用，关于式(I)的化合物或其可药用盐或其它药物活性剂的“安全和有效量”是指在合理医学判断的范围内足以治疗患者的病况但低到足以避免严重副作用（在合理的效益/风险比下）的化合物的量。化合物的安全和有效量会随所选特定化合物（例如考虑化合物的效能、效力和半衰期）；所选给药途径；治疗的病症；治疗的病症的严重程度；治疗的患者的年龄、体型、体重和身体状况；治疗的患者的病史；治疗持续时间；同步治疗的性质；所需疗效；和类似因素而变，但可由技术人员例行决定。

如本文所用，“患者”是指人类（包括成年人和儿童）或其它动物。在一个实施方案中，“患者”是指人类。

式(I)的化合物或其可药用盐可通过任何合适的给药途径给药，包括全身给药和局部给药。全身给药包括口服给药、肠胃外给药、透皮给药和直肠给药。肠胃外给药是指非肠内或透皮的给药途径，并通常通过注射或输注。肠胃外给药包括静脉内、肌肉内和皮下注射或输注。局部给药包括施加于皮肤以及眼内、耳内、阴道内、吸入和鼻内给药。吸入是指给药到患者肺内，无论经口还是经鼻腔通道吸入。在一个实施方案中，式(I)的化合物或其可药用盐可口服给药。在另一实施方案中，式(I)的化合物或其可药用盐可通过吸入给药。在进一步的实施方案中，式(I)的化合物或其可药用盐可鼻内给药。

式(I)的化合物或其可药用盐可一次给药或根据给药方案给药，其中在给定的时期内以不同时间间隔给予许多剂量。例如，可每天一次、两次、三次或四次给予剂量。在一个实施方案中，每天一次给予剂量。在进一步的实施方案中，每天两次给予剂量。可以给予剂量直至实现所需疗效或无限期给药以保持所需疗效。式(I)的化合物或其可药用盐的合适给药方案取决于该化合物的药代动力学性质，如吸收、分布和半衰期，这可由技术人员决定。此外，式(I)的化合物或其可药用盐的合适给药方案，包括给予这些方案的持续时间在技术人员的知识和专业技能内取决于治疗的病症、治疗的病症的严重程度、治疗的患者的年龄和身体状况、治疗的患者的病史、同步治疗的性质、所需疗效和类似因素。这些技术人员会进一步理解的是，合适的给药方案可能需要调整——考虑个体患者对给药方案的响应或随时间经过在个体患者需要改变时。

典型的日剂量可随所选的特定给药途径而变。用于口服给药的典型日剂量为0.001mg至50mg/千克总体重，例如1mg至10mg/千克总体重。例如，用于口服给药的日剂量可为每个患者0.5mg至2g，如每个患者10mg至1g。

另外，式(I)的化合物可作为前药给药。如本文所用，式(I)的化合物的“前药”是该化合物的功能衍生物，其在给药于患者后最终在体内释放式(I)的化合物。式(I)的化合物作为前药给药使得技术人员能够实施下列一项或多项：(a) 改变该化合物的体内活性起效；(b) 改变该化合物的体内作用持续时间；(c) 改变该化合物的体内运输或分布；(d) 改变该化合物的体内溶解度；和(e) 克服该化合物遇到的副作用或其它困难。用于制备前药的典型功能衍生物包括在体内可化学或酶促裂解的该化合物的改性。这样的改性，包括制备磷酸盐、酰胺、酯、硫代酸酯、碳酸盐和氨基甲酸盐，是本领域技术人员公知的。

在一个方面中，本发明因此提供治疗由不适当的PI3-激酶活性介导的病症的方法，其包括给予需要其的患者安全和有效量的式(I)的化合物或其可药用盐。在一个实施方案中，本发明提供治疗由不适当的PI3-激酶活性介导的病症的方法，其包括给予需要其的患者安全和有效量的(R)-1-(6-甲氧基吡啶-3-基)-3-(1-(1-(1-甲基哌啶-4-基)乙基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑或其可药用盐。

在一个实施方案中，由不适当的PI3-激酶活性介导的病症选自呼吸系统疾病（包括哮喘、慢性阻塞性肺病（COPD）和特发性肺纤维化（IPF））；纤毛病（ciliopathy）（包括原发性纤毛运动障碍、多囊肝病和肾消耗病）；细菌感染（包括细菌性呼吸道感染，例如被肺炎链球菌、流感嗜血杆菌、卡他莫拉菌和/或分枝杆菌如结核分枝杆菌感染）和呼吸病况和肺损伤（如哮喘、COPD和囊性纤维化）的细菌性加重；病毒感染（包括病毒性呼吸道感染，例如被流感病毒、鼻病毒、呼吸道合胞病毒（RSV）、人副流感病毒（HPIV）、腺病毒和/或冠状病毒感染）和呼吸病况和肺损伤（如哮喘、COPD和囊性纤维化）的病毒性加重；其它非病毒性呼吸道感染（包括曲霉病和利什曼病）；变应性疾病（包括过敏性鼻炎）；自身免疫病（包括强直性脊柱炎、Churg-Strauss综合征、克罗恩氏病、肾小球肾炎、亨-舍二氏紫癜、特发性血小板减少性紫癜（ITP）、间质性膀胱炎、天疱疮、原发性硬化性胆管炎、牛皮癣、类风湿性关节炎、肉样瘤病、Sjogren's综合征、1型糖尿病、溃疡性结肠炎、血管炎、白癜风和韦格纳肉芽肿）；炎性病症（包括炎性肠病、特应性皮炎、湿疹和牛皮癣）；糖尿病；心血管疾病（包括血栓形成、动脉粥样硬化和高血压）；恶性血液病；神经退行性疾病；胰腺炎；多器官衰竭；肾病；血小板聚集；癌症；精子活力（sperm motility）；移植排斥；移植物排斥；肺损伤；疼痛（包括与类风湿性关节炎或骨关节炎相关的疼痛、背痛、一般炎性痛、肝后神经痛（post hepaticneuralgia）、糖尿病性神经病、炎性神经性疼痛（创伤）、三叉神经痛和中枢痛）；纤维化疾病；抑郁；精神障碍（包括精神分裂症）；支气管扩张；和活化PI3Kδ综合征（APDS）。

在一个实施方案中，由不适当的PI3-激酶活性介导的病症是呼吸系统疾病。在另一实施方案中，由不适当的PI3-激酶活性介导的病症是哮喘。在进一步的实施方案中，由不适当的PI3-激酶活性介导的病症是慢性阻塞性肺病（COPD）。

在一个方面中，本发明提供用于药物治疗的式(I)的化合物或其可药用盐。在一个实施方案中，本发明提供用于药物治疗的(R)-1-(6-甲氧基吡啶-3-基)-3-(1-(1-(1-甲基哌啶-4-基)乙基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑或其可药用盐。

在另一方面中，本发明提供用于治疗由不适当的PI3-激酶活性介导的病症的式(I)的化合物或其可药用盐。在一个实施方案中，本发明提供用于治疗由不适当的PI3-激酶活性介导的病症的(R)-1-(6-甲氧基吡啶-3-基)-3-(1-(1-(1-甲基哌啶-4-基)乙基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑或其可药用盐。

在再一方面中，本发明提供式(I)的化合物或其可药用盐在制备用于治疗由不适当的PI3-激酶活性介导的病症的药物中的用途。在一个实施方案中，本发明提供(R)-1-(6-甲氧基吡啶-3-基)-3-(1-(1-(1-甲基哌啶-4-基)乙基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑或其可药用盐在制备用于治疗由不适当的PI3-激酶活性介导的病症的药物中的用途。

已经观察到PI3Kδ中的许多不同的遗传变异体（Jou等人，International Journalof Immunogenetics, 2006, 33, 361至369）。在负责催化功能的结构域中的高度保守位置观察到的一种突变（c.3061G>A，对应于mRNA中的m.3256G>A，其中核苷酸编号基于GenBank:NM_005026中的序列数据）导致谷氨酸置换为赖氨酸（glutamic acid to lysinesubstitution）（E1021K）。据信这种突变可能导致患者特别容易发生呼吸道感染和/或呼吸道感染的加重，和气道壁、大和小气道和肺实质的损伤（Angulo等人, Science DOI:10.1125/science. 1243292）。在PIK3CD基因中识别并导致免疫缺陷的功能突变的其它后果包括氨基酸残基取代N334K或E525K（Lucas等人Nat. Immunol. (2014) 15第88–97页）。导致PIK3R1外显子10的异常剪接和p85α蛋白质的截短的突变导致提高的PI3Kδ活性和与PIK3CD基因中的功能突变的后果类似的症状（Deau等人J. Clin. Invest. (2014) 124(9)第3923-8页）。

因此，在一个方面中，本发明因此提供在具有PI3Kδ突变或提高的PI3Kδ表达或活性的患者中治疗或预防呼吸道感染、治疗气道损伤（airway damage）和/或预防气道受损（airway injury）的方法，其包括给予需要其的患者安全和有效量的式(I)的化合物或其可药用盐。

在一个实施方案中，本发明因此提供在活化PI3Kδ综合征（APDS）患者中治疗或预防呼吸道感染、治疗气道损伤（例如支气管扩张）和/或预防气道受损的方法，其包括给予需要其的患者安全和有效量的式(I)的化合物或其可药用盐。

在一个实施方案中，本发明提供用于在具有PI3Kδ突变或提高的PI3Kδ表达或活性的患者中治疗或预防呼吸道感染、治疗气道损伤和/或预防气道受损的式(I)的化合物或其可药用盐。

在另一实施方案中，本发明提供式(I)的化合物或其可药用盐在制备用于在具有PI3Kδ突变或提高的PI3Kδ表达或活性的患者中治疗或预防呼吸道感染、治疗气道损伤和/或预防气道受损的药物中的用途。

在另一实施方案中，本发明提供用于在患者中治疗或预防呼吸道感染、治疗气道损伤和/或预防气道受损的式(I)的化合物或其可药用盐，其包括：

a) 检测来自患者的样本，

b) 确定患者是否具有PI3Kδ突变或提高的PI3Kδ表达或活性，和

c) 如果患者具有PI3Kδ突变或提高的PI3Kδ表达或活性，给予患者治疗有效量的式(I)的化合物或其可药用盐。

在另一实施方案中，本发明提供用于在被归类为应答者的患者中治疗或预防呼吸道感染、治疗气道损伤和/或预防气道受损的式(I)的化合物或其可药用盐，其中应答者以存在PI3Kδ突变或提高的PI3Kδ表达或活性为特征。

在另一实施方案中，本发明提供式(I)的化合物或其可药用盐在制备用于在被归类为应答者的患者中治疗或预防呼吸道感染、治疗气道损伤和/或预防气道受损的药物中的用途，其中应答者以存在PI3Kδ突变或提高的PI3Kδ表达或活性为特征。

在进一步的实施方案中，本发明提供评估使用式(I)的化合物或其可药用盐的疗法的方法，其包括：

a) 获得来自患者的样本，

b) 测试PI3Kδ突变或提高的PI3Kδ表达或活性，和

c) 如果存在PI3Kδ突变或提高的PI3Kδ表达或活性，确定患者是否应该经历使用式(I)的化合物或其可药用盐的疗法。

这样的呼吸道感染可能归因于细菌感染，包括例如被肺炎链球菌、流感嗜血杆菌、卡他莫拉菌和/或分枝杆菌如结核分枝杆菌感染；病毒感染，包括例如被流感病毒、鼻病毒、呼吸道合胞病毒（RSV）、人副流感病毒（HPIV）、腺病毒和/或冠状病毒感染；和其它非病毒性呼吸道感染，包括曲霉病和/或利什曼病。在一个实施方案中，具有PI3Kδ突变的患者特别容易由于肺炎链球菌、流感嗜血杆菌和/或卡他莫拉菌的细菌感染发生呼吸道感染和/或呼吸道感染的加重。

本文所用的术语“气道损伤”是指在患者开始治疗时存在的气道壁、大和小气道和/或肺实质的损伤。气道损伤，如炎症、瘢痕和/或重塑可能由例如具有PI3Kδ突变的患者的反复呼吸道感染造成。

本文所用的术语“气道受损”是指如果不进行治疗在患者中可能发展的对气道壁、大和小气道和/或肺实质的损伤或进一步损伤。

本文所用的术语“应答者”是指（使用特定的试验或方法）被认定为更可能响应治疗获得益处（例如对药物的正响应、不良事件的减少等）的人。要理解的是，并非所有被认定为应答者的人都一定获得益处，但作为患者分类，他们更可能如此。例如，在未测试的总患病人群中，该人群的大约80%获得来自药物的益处，但在“应答者”组（即已经过测试并根据设定标准被认定为应答者的那些个体）中，大约99%获得益处。

本文所用的术语“评估疗法”是指测定使用式(I)的化合物或其可药用盐的疗法是否有益于患者。

具有PI3Kδ突变的患者特别容易发生呼吸道感染的加重。本文所用的术语“呼吸道感染的加重”是指以潜在的持续呼吸道感染，包括细菌感染、病毒感染和/或其它非病毒性呼吸道感染的恶化为特征的呼吸道感染。在一个实施方案中，本发明因此提供治疗或预防具有PI3Kδ突变的患者的呼吸道感染的加重的方法，其包括给予需要其的患者安全和有效量的式(I)的化合物或其可药用盐。

在一个实施方案中，PI3Kδ突变导致谷氨酸取代赖氨酸。在另一实施方案中，PI3Kδ突变导致谷氨酸取代密码子1021处的赖氨酸（E1021K）。

在一个实施方案中，PI3Kδ突变导致mRNA中的单碱基对错义突变m.3256G>A（其中核苷酸编号基于GenBank: NM_005026中的序列数据）。

在一个实施方案中，PI3Kδ突变是c.3061G>A。

组合物

式(I)的化合物及其可药用盐通常，但不一定，在给药于患者前配制成药物组合物。

相应地，在一个方面中，本发明涉及包含式(I)的化合物或其可药用盐和一种或多种可药用赋形剂的药物组合物。在一个实施方案中，本发明涉及包含(R)-1-(6-甲氧基吡啶-3-基)-3-(1-(1-(1-甲基哌啶-4-基)乙基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑或其可药用盐和一种或多种可药用赋形剂的药物组合物。

在另一方面中，本发明涉及包含0.05至1000mg的式(I)的化合物或其可药用盐和0.1至2g的一种或多种可药用赋形剂的药物组合物。

在再一方面中，本发明涉及用于治疗或预防由不适当的PI3-激酶活性介导的病症的药物组合物，其包含式(I)的化合物或其可药用盐。

本发明的药物组合物可以以散装形式制备和包装，其中可取出安全和有效量的式(I)的化合物或其可药用盐，然后给予患者，如以粉末或糖浆形式。或者，本发明的药物组合物可以以单位剂型制备和包装，其中各物理独立单位含有式(I)的化合物或其可药用盐。在以单位剂型制备时，本发明的药物组合物通常可含有例如0.5mg至1g，或1mg至700mg，或5mg至100mg的式(I)的化合物或其可药用盐。

本发明的药物组合物通常含有一种式(I)的化合物或其可药用盐。

本文所用的“可药用赋形剂”是指涉及为药物组合物提供形式或稠度的可药用材料、组合物或媒介物。各赋形剂必须在混合时与药物组合物的其它成分相容，以避免在给药于患者时显著降低式(I)的化合物或其可药用盐的效力的相互作用和产生不可药用的药物组合物的相互作用。此外，各赋形剂当然必须可药用，例如具有足够高的纯度。

式(I)的化合物或其可药用盐和一种或多种可药用赋形剂通常配制成适合通过所需给药途径给药于患者的剂型。例如，剂型包括适合下列途径的那些：(1) 口服给药，如片剂、胶囊剂、囊片、丸剂、口含片（troche）、粉剂、糖浆、酏剂、混悬剂、溶液、乳剂、囊剂（sachet）和扁囊剂；(2) 肠胃外给药，如无菌溶液、混悬剂和重构用粉剂；(3) 透皮给药，如透皮贴剂；(4) 直肠给药，如栓剂；(5) 吸入，如气雾剂、溶液和干粉；和(6) 局部给药，如乳膏剂、软膏剂、洗剂、溶液、糊剂、喷雾剂、泡沫和凝胶。

合适的可药用赋形剂随所选的特定剂型而变。此外，可基于它们在组合物中可发挥的特定功能选择合适的可药用赋形剂。例如，可基于它们有利于生产均匀剂型的能力选择某些可药用赋形剂。可基于它们有利于生产稳定剂型的能力选择某些可药用赋形剂。可基于它们有利于将给药于患者的一种或多种式(I)的化合物或其可药用盐从身体的一个器官或部位运载或传送至身体的另一器官或部位的能力选择某些可药用赋形剂。可基于它们提高患者依从性的能力选择某些可药用赋形剂。

合适的可药用赋形剂包括下列类型的赋形剂：稀释剂、填料、粘合剂、崩解剂、润滑剂、助流剂、成粒剂、包衣剂、润湿剂、溶剂、助溶剂、悬浮剂、乳化剂、甜味剂、调味剂、掩味剂、着色剂、防结块剂、湿润剂、螯合剂、增塑剂、增粘剂、抗氧化剂、防腐剂、稳定剂、表面活性剂和缓冲剂。技术人员会认识到，某些可药用赋形剂可发挥多于一种功能并可根据制剂中存在多少赋形剂和制剂中存在哪些其它赋形剂而发挥备选功能。

技术人员拥有本领域的知识和技能，使得他们能够选择适用在本发明中的量的合适的可药用赋形剂。此外，技术人员可获得许多描述了可药用赋形剂并有助于选择合适的可药用赋形剂的资源。实例包括Remington's Pharmaceutical Sciences (MackPublishing Company)、The Handbook of Pharmaceutical Additives (GowerPublishing Limited)和The Handbook of Pharmaceutical Excipients (the AmericanPharmaceutical Association and the Pharmaceutical Press)。

使用本领域技术人员已知的技术和方法制备本发明的药物组合物。在Remington' s Pharmaceutical Sciences (Mack Publishing Company)中描述了本领域中常用的一些方法。

相应地，在另一方面中，本发明涉及制备包含式(I)的化合物或其可药用盐和一种或多种可药用赋形剂的药物组合物的方法，其包括混合各成分。可以通过例如在环境温度和大气压下混合来制备包含式(I)的化合物或其可药用盐的药物组合物。

在一个实施方案中，将式(I)的化合物或其可药用盐配制为口服给药。在另一实施方案中，将式(I)的化合物或其可药用盐配制为吸入给药。在进一步的实施方案中，将式(I)的化合物或其可药用盐配制为鼻内给药。

在一个方面中，本发明涉及包含安全和有效量的式(I)的化合物或其可药用盐和稀释剂或填料的固体口服剂型，如片剂或胶囊。合适的稀释剂和填料包括乳糖、蔗糖、右旋糖、甘露糖醇、山梨糖醇、淀粉（例如玉米淀粉、马铃薯淀粉和预胶凝淀粉）、纤维素及其衍生物（例如微晶纤维素）、硫酸钙和磷酸氢钙。口服固体剂型可进一步包含粘合剂。合适的粘合剂包括淀粉（例如玉米淀粉、马铃薯淀粉和预胶凝淀粉）、明胶、阿拉伯树胶、藻酸钠、藻酸、黄蓍胶、瓜尔胶、聚维酮和纤维素及其衍生物（例如微晶纤维素）。口服固体剂型可进一步包含崩解剂。合适的崩解剂包括交聚维酮、淀粉乙醇酸钠、交联羧甲基纤维素（croscarmelose）、藻酸和羧甲基纤维素钠。口服固体剂型可进一步包含润滑剂。合适的润滑剂包括硬脂酸、硬脂酸镁、硬脂酸钙和滑石。

如果适当，用于口服给药的单位剂型可以微囊化。也可例如通过包衣或将微粒材料包埋在聚合物、蜡等中来制备该组合物以延长或维持释放。

式(I)的化合物或其可药用盐也可与作为可靶向药物载体的可溶性聚合物偶联。此类聚合物可包括聚乙烯吡咯烷酮、吡喃共聚物、聚羟丙基甲基丙烯酰胺-酚、聚羟乙基天冬酰胺酚或被棕榈酰残基取代的聚环氧乙烷聚赖氨酸。此外，式(I)的化合物或其可药用盐可偶联到可用于实现药物控释的一类可生物降解的聚合物，例如聚乳酸、聚ε己内酯、聚羟基丁酸、聚原酸酯、聚缩醛、聚二氢吡喃、聚氰基丙烯酸酯和水凝胶的交联或两亲性嵌段共聚物上。

在另一方面中，本发明涉及液体口服剂型。口服液，如溶液、糖浆和酏剂可以单位剂型制备以使给定量含有预定量的式(I)的化合物或其可药用盐。可通过将式(I)的化合物或其可药用盐溶解在适当调味的水溶液中制备糖浆，而酏剂通过使用无毒醇类媒介物制备。可通过将式(I)的化合物或其可药用盐分散在无毒媒介物中配制混悬剂。也可加入增溶剂和乳化剂，如乙氧基化异硬脂醇和聚氧乙烯山梨糖醇醚、防腐剂、调味添加剂如薄荷油或天然甜味剂或糖精或其它人造甜味剂等。

在另一方面中，本发明涉及适合通过吸入给药于患者的剂型，例如作为干粉、气雾剂、混悬剂或溶液组合物。在一个实施方案中，本发明涉及适合以干粉形式通过吸入给药于患者的剂型。在进一步的实施方案中，本发明涉及适合借助喷雾器通过吸入给药于患者的剂型。

通过吸入递送到肺的干粉组合物通常包含与细碎粉末形式的一种或多种可药用赋形剂一起的细碎粉末形式的式(I)的化合物或其可药用盐。特别适用于干粉的可药用赋形剂是本领域技术人员已知的并包括乳糖、淀粉、甘露糖醇和单-、二-和多糖。可以通过例如微粉化和研磨制备细碎粉末。通常，尺寸较小的（例如微粉化的）化合物可通过大约1至大约10微米的D₅₀值（例如使用激光衍射测得）定义。

干粉可借助具有适合储存多个（未计量剂量）干粉形式的药剂的储器的储器干粉吸入器（RDPI）给药于患者。RDPI通常包括用于将各药剂剂量从储器计量到递送位置的工具。例如，该计量工具可包括计量杯，其可从第一位置（在此该杯可装载来自储器的药剂）移动到第二位置（在此计量的药剂剂量可供患者吸入）。

或者，干粉可在用于多剂量干粉吸入器（MDPI）的胶囊（例如明胶或塑料）、药筒或泡罩包装中提供。MDPI是其中药剂包含在多剂量包装内的吸入器，所述多剂量包装含有（或以其它方式载有）多个指定剂量（或其部分）的药剂。当干粉作为泡罩包装提供时，其包含多个用于容纳干粉形式的药剂的泡罩。泡罩通常以规则方式排列以易于从中释放药剂。例如，泡罩可以大致圆形方式排列在盘形泡罩包装上，或泡罩可为细长形式，例如包含条或带。各胶囊、药筒或泡罩可以例如含有20μg-10mg的式(I)的化合物或其可药用盐。

可通过将式(I)的化合物或其可药用盐悬浮或溶解在液化抛射剂中形成气雾剂。合适的抛射剂包括卤烃、烃和其它液化气体。代表性的抛射剂包括：三氯氟甲烷（抛射剂11）、二氯氟甲烷（抛射剂12）、二氯四氟乙烷（抛射剂114）、四氟乙烷（HFA-134a）、1,1-二氟乙烷（HFA-152a）、二氟甲烷（HFA-32）、五氟乙烷（HFA-12）、七氟丙烷（HFA-227a）、全氟丙烷、全氟丁烷、全氟戊烷、丁烷、异丁烷和戊烷。包含式(I)的化合物或其可药用盐的气雾剂通常借助定量吸入器（MDI）给药于患者。这样的装置是本领域技术人员已知的。

气雾剂可含有通常用于MDI的另外的可药用赋形剂，如表面活性剂、润滑剂、助溶剂和其它赋形剂以改进该制剂的物理稳定性，改进阀性能，改进溶解度或改进味道。

因此作为本发明的另一方面提供包含任选与表面活性剂和/或助溶剂结合的式(I)的化合物或其可药用盐和作为抛射剂的氟碳化合物或含氢的氯氟烃的药用气雾剂制剂。

根据本发明的另一方面，提供一种药用气雾剂制剂，其中抛射剂选自1,1,1,2-四氟乙烷、1,1,1,2,3,3,3-七氟-正丙烷及其混合物。

可以通过添加合适的缓冲剂缓冲本发明的制剂。

可以配制用在吸入器或吹药器中的例如由明胶制成的胶囊和药筒，其含有式(I)的化合物或其可药用盐和合适的粉末基料如乳糖或淀粉的吸入用粉末混合物。各胶囊或药筒通常可含有20μg至10mg式(I)的化合物或其可药用盐。或者，式(I)的化合物或其可药用盐可不用赋形剂如乳糖呈递。

式(I)的活性化合物或其可药用盐在根据本发明的局部组合物中的比例取决于要制备的制剂的确切类型，但通常在0.001至10重量%的范围内。通常，对于大多数类型的制剂，所用比例在0.005至1%，例如0.01至0.5%的范围内。但是，在用于吸入或吹入的粉剂中，所用比例通常在0.1至5%的范围内。

优选设置气雾剂制剂以使每计量剂量或“每口（puff）”的气雾剂含有20μg至10mg，优选20μg至2000μg，更优选大约20μg至500μg的式(I)的化合物。给药可以每天一次或每天数次，例如2、3、4或8次，每次给予例如1、2或3剂。随气雾剂的总日剂量在100μg至10mg，优选200μg至2000μg的范围内。通过吸入器或吹药器中的胶囊和药筒递送的总日剂量和计量剂量通常是用气雾剂制剂递送的量的两倍。

在混悬型气雾剂制剂的情况下，微粒（例如微粉化）药物的粒度应该能在气雾剂制剂给药时将基本所有药物吸入肺中并因此小于100微米，合意地小于20微米，特别是1至10微米，如1至5微米，更优选2至3微米。

本发明的制剂可通过在适当的容器中例如借助声处理或高剪切混合器将药剂和式(I)的化合物或其可药用盐分散或溶解在所选抛射剂中制备。该方法理想地在受控湿度条件下进行。

根据本发明的气雾剂制剂的化学和物理稳定性和药物可接受性可通过本领域技术人员公知的技术测定。因此，例如，可以通过HPLC检测法测定组分的化学稳定性，例如在产物长期储存后。可从其它常规分析技术获得物理稳定性数据，例如通过泄漏试验、通过阀递送检测（每次致动的平均喷射重量）、通过剂量可再现性检测（每次致动的活性成分）和喷雾分布分析。

根据本发明的混悬型气雾剂制剂的稳定性可通过常规技术测量，例如通过使用背光散射仪测量絮凝粒度分布或通过使用级联撞击或“二级碰撞器（twin impinger）”分析法测量粒度分布。如本文所用，提到“二级碰撞器”检测是指如British Pharmacopaeia 1988,第A204-207页, 附录XVII C中定义的"Determination of the deposition of theemitted dose in pressurised inhalations using apparatus A"。这样的技术能够计算气雾剂制剂的“可吸入分数”。用于计算“可吸入分数”的一种方法是参考“细粒分数”，其是使用上述二级碰撞器法每次致动收集在下方撞击室中的活性成分的量，表示为每次致动递送的活性成分总量的百分比。

术语“定量吸入器”或MDI是指包括罐、覆盖罐的密封盖和位于盖中的制剂计量阀的单元。MDI系统包括合适的沟道装置。合适的沟道装置包括例如阀致动器和圆柱形或锥形通道，经其可借助计量阀将药剂从填充罐递送到患者的鼻或口，如管嘴致动器。

MDI罐通常包括能够承受所用抛射剂的蒸气压的容器，如塑料或涂塑玻璃瓶或优选金属罐，例如铝或其合金，其可任选阳极化、涂漆和/或涂塑（例如经此引用并入本文的WO96/32099，其中用任选与一种或多种非氟碳聚合物结合的一种或多种氟碳聚合物涂布一部分或所有内表面），该容器用计量阀关闭。可以经由超声焊接、螺旋接头或卷边将盖固定到罐上。本文中教导的MDI可通过业内方法制备（例如参见上述Byron和WO96/32099）。该罐优选配备盖组件，其中药物计量阀位于盖中，并将所述盖卷曲就位。

在本发明的一个实施方案中，用含氟聚合物（更优选与非含氟聚合物共混）涂布该罐子的金属内表面。在本发明的另一实施方案中，用聚四氟乙烯（PTFE）和聚醚砜（PES）的聚合物共混物涂布该罐子的金属内表面。在本发明的进一步实施方案中，用聚四氟乙烯（PTFE）和聚醚砜（PES）的聚合物共混物涂布该罐子的整个金属内表面。

计量阀被设计成每次致动递送计量量的制剂并包含垫圈以防止抛射剂经阀漏出。该垫圈可包含任何合适的弹性体材料，例如低密度聚乙烯、氯丁基橡胶、溴丁基橡胶、EPDM、黑色和白色丁二烯-丙烯腈橡胶、丁基橡胶和氯丁橡胶。合适的阀可购自气雾剂工业中众所周知的制造商，例如购自Valois, France（例如DF10、DF30、DF60）、Bespak plc, UK（例如BK300、BK357）和3M-Neotechnic Ltd, UK（例如Spraymiser^TM）。

在各种实施方案中，MDI也可与其它结构联合使用，所述其它结构例如但不限于用于储存和容纳MDI的外包装，包括美国专利Nos. 6,119,853；6,179,118；6,315,112；6,352,152；6,390,291；和6,679,374中描述的那些，以及剂量计数装置，例如但不限于美国专利Nos. 6,360,739和6,431,168中描述的那些。

药用气雾剂制造领域的技术人员众所周知的常规批量制造方法和机械可用于制备用于商业生产填充罐的大规模批次。因此，例如，在用于制备混悬型气雾剂制剂的一种批量制造方法中，将计量阀压接到铝罐上以形成空罐。将微粒药剂添加到装料容器中并将液化抛射剂与任选赋形剂一起经装料容器压力灌装到制造容器中。在再循环到灌装机之前混合药物混悬剂，然后经计量阀将药物混悬剂的等分试样灌装到罐中。在用于制备溶液型气雾剂制剂的一种示例性批量制造方法中，将计量阀压接到铝罐上以形成空罐。将液化抛射剂与任选赋形剂和溶解的药剂一起经装料容器压力灌装到制造容器中。

在另一方法中，在足够冷以确保制剂不汽化的条件下将液化制剂的等分试样添加到敞开的罐中，然后将计量阀压接到罐上。

通常，在为制药用途制备的批次中，将各填充罐检查称重，用批号编码并包装到托盘中以供在发布测试之前储存。

包含式(I)的化合物或其可药用盐的混悬剂和溶液也可借助喷雾器给药于患者。用于雾化的溶剂或悬浮剂可以是任何可药用液体，如水、盐水、醇或二醇，例如乙醇、异丙醇、甘油、丙二醇、聚乙二醇等，或其混合物。盐水溶液采用在给药后几乎或完全没有表现出药理活性的盐。有机盐，如碱金属或铵卤素盐，例如氯化钠、氯化钾或有机盐，如钾、钠和铵盐或有机酸，例如抗坏血酸、柠檬酸、乙酸、酒石酸等都可用于这一用途。

可将其它可药用赋形剂添加到该混悬剂或溶液中。可通过添加无机酸，例如盐酸、硝酸、硫酸和/或磷酸；有机酸，例如抗坏血酸、柠檬酸、乙酸和酒石酸等，络合剂，如EDTA或柠檬酸及其盐；或抗氧化剂，如抗氧化剂如维生素E或抗坏血酸来稳定式(I)的化合物或其可药用盐。这些可独自或一起使用以稳定式(I)的化合物或其可药用盐。可以加入防腐剂，如苯扎氯铵或苯甲酸及其盐。特别可加入表面活性剂以改进混悬剂的物理稳定性。这些包括卵磷脂、二辛基磺基琥珀酸二钠、油酸和山梨糖醇酐酯。

在另一方面中，本发明涉及适合鼻内给药的剂型。

给药于鼻的制剂可包括通过加压泵向鼻给药的加压气雾剂制剂和水性制剂。不加压并适合局部给药于鼻腔的制剂特别有意义。合适的制剂含有水作为用于此用途的稀释剂或载体。可用常规赋形剂，如缓冲剂、张力改性剂等提供给药于肺或鼻的水性制剂。水性制剂也可通过雾化给药于鼻。

式(I)的化合物或其可药用盐可配制为流体制剂以从流体分配器，例如具有分配喷嘴或分配孔（在使用者向流体分配器的泵机构施力时经其分配计量剂量的流体制剂）的流体分配器递送。这样的流体分配器通常带有多个计量剂量的流体制剂的储器，可在相继泵制动时分配这些剂量。分配喷嘴或孔可配置成插入使用者的鼻孔以将流体制剂喷雾分配到鼻腔中。上述类型的流体分配器描述和例示在WO05/044354中，其整个内容经此引用并入本文。该分配器具有外壳，其容纳具有安装在用于容纳流体制剂的容器上的压缩泵的流体排放装置。该外壳具有至少一个可用手指操作的侧杆，其可相对于外壳向内移动以借助凸轮在外壳中向上推动容器以使泵压缩并经由外壳的鼻喷嘴从泵杆中泵出计量剂量的制剂。在一个实施方案中，流体分配器具有WO05/044354的图30-40中例示的一般类型。

其中载体为固体的适合鼻内给药的药物组合物包括具有例如20至500微米的粒度的粗粉，其通过经鼻腔通道从靠近鼻子放置的粉剂容器中快速吸入给药。其中载体为液体的适合作为鼻喷剂或鼻滴剂给药的组合物包括式(I)的化合物或其可药用盐的水溶液或油溶液。

适合透皮给药的药物组合物可作为要与患者的表皮保持长时间密切接触的独立贴剂提供。例如，可以大致如Pharmaceutical Research, 3(6), 318 (1986)中所述通过离子电渗从贴剂递送活性成分。

适合局部给药的药物化合物可配制为软膏剂、乳膏剂、混悬剂、洗剂、粉剂、溶液、糊剂、凝胶剂、喷雾剂、气雾剂或油。

软膏剂、乳膏剂和凝胶剂可以例如在添加合适的增稠剂和/或胶凝剂和/或溶剂的情况下用水性或油性基料配制。此类基料因此可以例如包括水和/或油，如液体石蜡或植物油，如花生油或蓖麻油，或溶剂，如聚乙二醇。可根据基料的性质使用的增稠剂和胶凝剂包括软石蜡、硬脂酸铝、鲸蜡硬脂醇、聚乙二醇、羊毛脂、蜂蜡、聚羧乙烯（carboxypolymethylene）和纤维素衍生物，和/或单硬脂酸甘油酯和/或非离子乳化剂。

洗剂可用水性或油性基料配制并通常还含有一种或多种乳化剂、稳定剂、分散剂、悬浮剂或增稠剂。

外用粉剂可以借助任何合适的粉末基料，例如滑石、乳糖或淀粉形成。滴剂可用水性或非水基料配制，其还包含一种或多种分散剂、增溶剂、悬浮剂或防腐剂。

局部制剂可以通过每天一次或多次施用给药于受影响的区域；在皮肤区域上可以有利地使用封闭敷料。可以通过粘合型储库（adhesive reservoir）系统实现连续或延长的递送。

为了治疗眼睛或其它外部组织，例如口腔和皮肤，该组合物可以局部软膏剂或乳膏剂的形式施加。当配制成软膏剂时，式(I)的化合物或其可药用盐可与石蜡族或水混溶性软膏基料一起使用。或者，式(I)的化合物或其可药用盐可与水包油乳膏基料或油包水基料一起配制在乳膏剂中。

适合肠胃外给药的药物组合物包括可含有抗氧化剂、缓冲剂、抑菌剂和溶质的水性和非水无菌注射液，其使该制剂与预期接受者的血液等渗；和可包含悬浮剂和增稠剂的水性和非水无菌混悬剂。该组合物可在单剂或多剂容器，例如密封安瓿和小瓶中提供并可以冷冻干燥（冻干）状态储存，只需在临使用前添加无菌载液，例如注射用水。可由无菌粉剂、颗粒剂和片剂制备临时注射溶液和混悬剂。

根据本发明的化合物和药物制剂可与一种或多种其它治疗剂组合使用或包括一种或多种其它治疗剂，例如选自抗炎药、抗胆碱能药、β₂-肾上腺素能受体激动剂、白三烯拮抗剂（如孟鲁司特、扎鲁司特或普仑司特）、抗感染药、抗组胺药、抗原免疫疗法、皮质类固醇（如丙酸氟替卡松、糠酸氟替卡松、二丙酸倍氯米松、布地奈德、环索奈德、糠酸莫米松、去炎松或氟尼缩松）、iNOS抑制剂、类胰蛋白酶抑制剂、IKK2抑制剂、p38抑制剂、Syk抑制剂、弹性蛋白酶抑制剂、β-2整联蛋白拮抗剂、腺苷a2a激动剂、趋化因子拮抗剂如CCR3拮抗剂或CCR4拮抗剂、介质释放抑制剂（如色甘酸钠）、5-脂肪氧合酶抑制剂（zyflo）、DP1拮抗剂、DP2拮抗剂、PDE4抑制剂、PI3-激酶抑制剂、PI4-激酶抑制剂、ITK抑制剂、LP（溶血磷脂酸）抑制剂、FLAP（5-脂肪氧合酶活化蛋白）抑制剂（如3-(3-(叔丁基硫基)-1-(4-(6-乙氧基吡啶-3-基)苄基)-5-((5-甲基吡啶-2-基)甲氧基)-1H-吲哚-2-基)-2,2-二甲基丙酸钠）、DMARD（改善病情的抗风湿药）（如氨甲蝶呤、来氟米特或硫唑嘌呤）、单克隆抗体疗法（如抗TSLP、抗IgE、抗TNF、抗IL-5、抗IL-6、抗IL-12或抗IL-1）、受体疗法（如依那西普）和/或抗原非特异性免疫疗法（如干扰素或其它细胞因子/趋化因子、细胞因子/趋化因子受体调节剂、细胞因子激动剂或拮抗剂，或TLR激动剂）。

本发明因此在另一方面中提供包含式(I)的化合物或其可药用盐以及一种或多种其它治疗活性剂的组合产品，所述其它治疗活性剂例如选自抗炎药、抗胆碱能药、β₂-肾上腺素能受体激动剂、白三烯拮抗剂、抗感染药、抗组胺药、抗原免疫疗法、皮质类固醇、iNOS抑制剂、类胰蛋白酶抑制剂、IKK2抑制剂、p38抑制剂、Syk抑制剂、弹性蛋白酶抑制剂、β-2整联蛋白拮抗剂、腺苷a2a激动剂、趋化因子拮抗剂、介质释放抑制剂、5-脂肪氧合酶抑制剂、DP1拮抗剂、DP2拮抗剂、PDE4抑制剂、PI3-激酶抑制剂、PI4-激酶抑制剂、ITK抑制剂、LP（溶血磷脂酸）抑制剂、FLAP（5-脂肪氧合酶活化蛋白)抑制剂、DMARD、单克隆抗体疗法、受体疗法和/或抗原非特异性免疫疗法。

在一个实施方案中，本发明包含治疗由不适当的PI3-激酶活性介导的病症的方法，其包括给予安全和有效量的包含式(I)的化合物或其可药用盐以及一种或多种治疗活性剂的组合产品。

本发明的某些化合物可表现出相对于其它PI3-激酶对PI3Kδ的选择性。本发明因此在另一方面中提供包含对PI3Kδ具有选择性的式(I)的化合物或其可药用盐以及对另一PI3-激酶例如PI3Kγ具有选择性的化合物或其可药用盐的组合产品。

本发明的一个实施方案包括包含一种或两种其它治疗剂的组合产品。

本领域技术人员清楚的是，如果适当，所述其它治疗成分可以盐，例如作为碱金属或胺盐或作为酸加成盐，或前药的形式使用或作为酯，例如低级烷基酯，或作为溶剂化物，例如水合物使用以优化治疗成分的活性和/或稳定性和/或物理特性，如溶解度。还清楚的是，如果适当，治疗成分可以光学纯的形式使用。

在一个实施方案中，本发明包括包含式(I)的化合物或其可药用盐与β₂-肾上腺素能受体激动剂的组合产品。

β₂-肾上腺素能受体激动剂的实例包括沙美特罗（其可以是外消旋物或单一对映体，如R-对映体）、沙丁胺醇（其可以是外消旋物或单一对映体，如R-对映体）、福莫特罗（其可以是外消旋物或单一非对映体，如R,R-非对映体）、沙甲胺醇、非诺特罗、卡莫特罗、依坦特罗、那明特罗、克仑特罗、吡布特罗、flerbuterol、瑞普特罗、班布特罗、茚达特罗、特布他林及其盐，例如沙美特罗的昔萘酸盐（1-羟基-2-萘甲酸盐）、沙丁胺醇的硫酸盐或游离碱或福莫特罗的富马酸盐。在一个实施方案中，长效β₂-肾上腺素受体激动剂，例如提供大约12小时或更久的有效支气管扩张的化合物是优选的。

其它β₂-肾上腺素能受体激动剂包括WO 02/066422、WO 02/070490、WO 02/076933、WO 03/024439、WO 03/072539、WO 03/091204、WO 04/016578、WO 2004/022547、WO2004/037807、WO 2004/037773、WO 2004/037768、WO 2004/039762、WO 2004/039766、WO01/42193和WO03/042160中描述的那些。

β₂-肾上腺素能受体激动剂的实例包括：

3-(4-{[6-({(2R)-2-羟基-2-[4-羟基-3-(羟甲基)苯基]乙基}氨基)己基]氧基}丁基)苯磺酰胺；

3-(3-{[7-({(2R)-2-羟基-2-[4-羟基-3-羟甲基]苯基}乙基)氨基]庚基}氧基)丙基)苯磺酰胺；

4-{(1R)-2-[(6-{2-[(2,6-二氯苄基)氧基]乙氧基}己基)氨基]-1-羟乙基}-2-(羟甲基)酚；

4-{(1R)-2-[(6-{4-[3-(环戊基磺酰基)苯基]丁氧基}己基)氨基]-1-羟乙基}-2-(羟甲基)酚；

N-[2-羟基-5-[(1R)-1-羟基-2-[[2-4-[[(2R)-2-羟基-2-苯基乙基]氨基]苯基]乙基]氨基]乙基]苯基]甲酰胺；

N-2{2-[4-(3-苯基-4-甲氧基苯基)氨基苯基]乙基}-2-羟基-2-(8-羟基-2(1H)-喹啉酮-5-基)乙基胺；和

5-[(R)-2-(2-{4-[4-(2-氨基-2-甲基-丙氧基)-苯基氨基]-苯基}-乙基氨基)-1-羟基-乙基]-8-羟基-1H-喹啉-2-酮。

β₂-肾上腺素能受体激动剂可以是用选自硫酸、盐酸、富马酸、羟基萘甲酸（例如1-或3-羟基-2-萘甲酸）、肉桂酸、取代肉桂酸、三苯基乙酸、氨基磺酸、对氨基苯磺酸、萘丙烯酸、苯甲酸、4-甲氧基苯甲酸、2-或4-羟基苯甲酸、4-氯苯甲酸和4-苯基苯甲酸的可药用酸形成的盐形式。

在一个实施方案中，本发明包括包含式(I)的化合物或其可药用盐与白三烯拮抗剂的组合产品。合适的白三烯拮抗剂包括例如孟鲁司特。

合适的抗炎药包括皮质类固醇。可与式(I)的化合物或其可药用盐组合使用的合适的皮质类固醇是具有抗炎活性的那些口服和吸入型皮质类固醇和它们的前药。实例包括甲基强的松龙、强的松龙、地塞米松、丙酸氟替卡松、6α,9α-二氟-11β-羟基-16α-甲基-17α-[(4-甲基-1,3-噻唑-5-羰基)氧基]-3-氧代-雄甾-1,4-二烯-17β-硫代甲酸S-氟甲基酯、6α,9α-二氟-17α-[(2-呋喃基羰基)氧基]-11β-羟基-16α-甲基-3-氧代-雄甾-1,4-二烯-17β-硫代甲酸S-氟甲基酯（糠酸氟替卡松）、6α,9α-二氟-11β-羟基-16α-甲基-3-氧代-17α-丙酰氧基-雄甾-1,4-二烯-17β-硫代甲酸S-(2-氧代-四氢-呋喃-3S-基)酯、6α,9α-二氟-11β-羟基-16α-甲基-3-氧代-17α-(2,2,3,3-四甲基环丙基羰基)氧基-雄甾-1,4-二烯-17β-硫代甲酸S-氰基甲基酯和6α,9α-二氟-11β-羟基-16α-甲基-17α-(1-甲基环丙基羰基)氧基-3-氧代-雄甾-1,4-二烯-17β-硫代甲酸S-氟甲基酯、倍氯米松酯（例如17-丙酸酯或17,21-二丙酸酯）、布地奈德、氟尼缩松、莫米松酯（例如糠酸莫米松）、曲安奈德、罗氟奈德、环索奈德（16α,17-[[(R)-环己基亚甲基]双(氧基)]-11β,21-二羟基-孕甾-1,4-二烯-3,20-二酮）、丙酸布替可特、RPR-106541和ST-126。优选的皮质类固醇包括丙酸氟替卡松、6α,9α-二氟-11β-羟基-16α-甲基-17α-[(4-甲基-1,3-噻唑-5-羰基)氧基]-3-氧代-雄甾-1,4-二烯-17β-硫代甲酸S-氟甲基酯、6α,9α-二氟-17α-[(2-呋喃基羰基)氧基]-11β-羟基-16α-甲基-3-氧代-雄甾-1,4-二烯-17β-硫代甲酸S-氟甲基酯、6α,9α-二氟-11β-羟基-16α-甲基-3-氧代-17α-(2,2,3,3-四甲基环丙基羰基)氧基-雄甾-1,4-二烯-17β-硫代甲酸S-氰基甲基酯和6α,9α-二氟-11β-羟基-16α-甲基-17α-(1-甲基环丙基羰基)氧基-3-氧代-雄甾-1,4-二烯-17β-硫代甲酸S-氟甲基酯。在一个实施方案中，皮质类固醇是6α,9α-二氟-17α-[(2-呋喃基羰基)氧基]-11β-羟基-16α-甲基-3-氧代-雄甾-1,4-二烯-17β-硫代甲酸S-氟甲基酯。

皮质类固醇的实例可包括WO2002/088167、WO2002/100879、WO2002/12265、WO2002/12266、WO2005/005451、WO2005/005452、WO2006/072599和WO2006/072600中描述的那些。

对反式阻抑的选择性高于反式激活并可用于组合疗法的具有糖皮质激素激动作用的非甾体化合物包括下列专利中涵盖的那些：WO03/082827、WO98/54159、WO04/005229、WO04/009017、WO04/018429、WO03/104195、WO03/082787、WO03/082280、WO03/059899、WO03/101932、WO02/02565、WO01/16128、WO00/66590、WO03/086294、WO04/026248、WO03/061651和WO03/08277。在WO2006/000401、WO2006/000398和WO2006/015870中包含另外的非甾体化合物。

抗炎药的实例包括非甾体抗炎药（NSAID's）。

NSAID's的实例包括色甘酸钠、奈多罗米钠、磷酸二酯酶（PDE）抑制剂（例如茶碱、PDE4抑制剂或混合PDE3/PDE4抑制剂）、白三烯拮抗剂、白三烯合成抑制剂（例如孟鲁司特）、类胰蛋白酶和弹性蛋白酶抑制剂、β-2整联蛋白拮抗剂和腺苷受体激动剂或拮抗剂（例如腺苷2a激动剂）、细胞因子拮抗剂或细胞因子合成的抑制剂或5-脂肪氧合酶抑制剂。

在一个实施方案中，本发明提供式(I)的化合物与磷酸二酯酶4（PDE4）抑制剂组合的用途，尤其是在适合吸入的制剂的情况下。可用于本发明的这一方面的PDE4特异性抑制剂可以是已知抑制PDE4酶或被发现充当PDE4抑制剂、并且只是PDE4抑制剂而非抑制PDE家族的其它成员如PDE3和PDE5以及PDE4的化合物的任何化合物。

化合物包括顺式-4-氰基-4-(3-环戊氧基-4-甲氧基苯基)环己烷-1-甲酸、2-甲氧羰基-4-氰基-4-(3-环丙基甲氧基-4-二氟甲氧基苯基)环己-1-酮和顺式-[4-氰基-4-(3-环丙基甲氧基-4-二氟甲氧基苯基)环己-1-醇]。还有顺式-4-氰基-4-[3-(环戊氧基)-4-甲氧基苯基]环己烷-1-甲酸（也称为西洛司特）及其盐、酯、前药或物理形式，其描述在1996年9月3日颁发的美国专利5,552,438中；这一专利及其公开的化合物全部经此引用并入本文。

其它化合物包括来自Elbion的AWD-12-281（Hofgen, N.等人15th EFMC Int SympMed Chem (Sept 6-10, Edinburgh) 1998, Abst P.98；CAS参考编号247584020-9）；命名为NCS-613 (INSERM)的9-苄基腺嘌呤衍生物；来自Chiroscience和Schering-Plough的D-4418；被标作CI-1018 (PD-168787)并属于Pfizer的苯二氮䓬 PDE4抑制剂；Kyowa Hakko在W099/16766中公开的苯并间二氧杂环戊烯衍生物；来自Kyowa Hakko的K-34；来自Napp的V-11294A（Landells, L.J.等人Eur Resp J [Annu Cong Eur Resp Soc (Sept 19-23,Geneva) 1998] 1998, 12 (Suppl. 28): Abst P2393）；罗氟司特（CAS 参考编号162401-32-3）和来自Byk-Gulden的pthalazinone（WO99/47505，其公开内容经此引用并入本文）；普马芬群（Pumafentrine），(-)-p-[(4aR*,10bS*)-9-乙氧基-1,2,3,4,4a,10b-六氢-8-甲氧基-2-甲基苯并[c][1,6]萘啶-6-基]-N,N-二异丙基苯甲酰胺，其是Byk-Gulden，如今为Altana已制备并公开的混合PDE3/PDE4抑制剂；Almirall-Prodesfarma正在开发的阿罗茶碱；来自Vernalis的VM554/UM565；或T-440 (Tanabe Seiyaku；Fuji, K.等人J PharmacolExp Ther, 1998, 284(1): 162)和T2585。

在公开的国际专利申请WO04/024728 (Glaxo Group Ltd)、WO04/056823 (GlaxoGroup Ltd)和WO04/103998 (Glaxo Group Ltd)（例如其中公开的实施例399或544）中公开了另外的化合物。在都为Glaxo Group Limited名下的WO2005/058892、WO2005/090348、WO2005/090353和WO2005/090354中公开了另外的化合物。

抗胆碱能药的实例是充当毒蕈碱受体上的拮抗剂的那些化合物，特别是作为M₁或M₃受体的拮抗剂、M₁/M₃或M₂/M₃受体的双重拮抗剂或M₁/M₂/M₃受体的泛-拮抗剂的那些化合物。通过吸入给药的示例性化合物包括异丙托铵（例如作为溴化物，CAS 22254-24-6，以Atrovent为名出售）、氧托品（例如作为溴化物，CAS 30286-75-0）和噻托溴铵（tiotropium）（例如作为溴化物，CAS 136310-93-5，以Spiriva为名出售）。同样有用的是瑞伐托酯（例如作为氢溴酸盐，CAS 262586-79-8）和WO01/04118中公开的LAS-34273。口服给药的示例性化合物包括哌仑西平（CAS 28797-61-7）、达非那新（CAS 133099-04-4或CAS 133099-07-7，作为氢溴酸盐，以Enablex为名出售）、奥昔布宁（CAS 5633-20-5，以Ditropan为名出售）、特罗地林（CAS 15793-40-5）、托特罗定（CAS 124937-51-5或CAS 124937-52-6，作为酒石酸盐，以Detrol为名出售）、奥替溴铵（例如作为溴化物，CAS 26095-59-0，以Spasmomen为名出售）、曲司氯铵（CAS 10405-02-4）和索非那新（CAS 242478-37-1或CAS 242478-38-2，作为琥珀酸盐，也称为YM-905并以Vesicare为名出售）。

在经此引用并入本文的WO 2005/037280、WO 2005/046586和WO 2005/104745中公开了另外的化合物。本发明的组合产品包括但不限于：

(3-内)-3-(2,2-二-2-噻吩基乙烯基)-8,8-二甲基-8-氮鎓双环[3.2.1]辛烷碘化物；

(3-内)-3-(2-氰基-2,2-二苯基乙基)-8,8-二甲基-8-氮鎓双环[3.2.1]辛烷溴化物；

4-[羟基(二苯基)甲基]-1-{2-[(苯基甲基)氧基]乙基}-1-氮鎓双环[2.2.2]辛烷溴化物；和

(1R,5S)-3-(2-氰基-2,2-二苯基乙基)-8-甲基-8-{2-[(苯基甲基)氧基]乙基}-8-氮鎓双环[3.2.1]辛烷溴化物。

其它抗胆碱能药包括美国专利申请60/487981中公开的化合物，包括例如：

(3-内)-3-(2,2-二-2-噻吩基乙烯基)-8,8-二甲基-8-氮鎓双环[3.2.1]辛烷溴化物；

(3-内)-3-(2,2-二苯基乙烯基)-8,8-二甲基-8-氮鎓双环[3.2.1]辛烷溴化物；

(3-内)-3-(2,2-二苯基乙烯基)-8,8-二甲基-8-氮鎓双环[3.2.1]辛烷4-甲基苯磺酸盐；

(3-内)-8,8-二甲基-3-[2-苯基-2-(2-噻吩基)乙烯基]-8-氮鎓双环[3.2.1]辛烷溴化物；和/或

(3-内)-8,8-二甲基-3-[2-苯基-2-(2-吡啶基)乙烯基]-8-氮鎓双环[3.2.1]辛烷溴化物。

其它抗胆碱能药包括美国专利申请60/511009中公开的化合物，包括例如：

(内)-3-(2-甲氧基-2,2-二-噻吩-2-基-乙基)-8,8-二甲基-8-氮鎓双环[3.2.1]辛烷碘化物；

3-((内)-8-甲基-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基)-2,2-二苯基-丙腈；

(内)-8-甲基-3-(2,2,2-三苯基-乙基)-8-氮杂双环[3.2.1]辛烷；

3-((内)-8-甲基-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基)-2,2-二苯基-丙酰胺；

3-((内)-8-甲基-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基)-2,2-二苯基-丙酸；

(内)-3-(2-氰基-2,2-二苯基-乙基)-8,8-二甲基-8-氮鎓双环[3.2.1]辛烷碘化物；

(内)-3-(2-氰基-2,2-二苯基-乙基)-8,8-二甲基-8-氮鎓双环[3.2.1]辛烷溴化物；

3-((内)-8-甲基-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基)-2,2-二苯基-丙-1-醇；

N-苄基-3-((内)-8-甲基-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基)-2,2-二苯基-丙酰胺；

(内)-3-(2-氨基甲酰基-2,2-二苯基-乙基)-8,8-二甲基-8-氮鎓双环[3.2.1]辛烷碘化物；

1-苄基-3-[3-((内)-8-甲基-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基)-2,2-二苯基-丙基]-脲；

1-乙基-3-[3-((内)-8-甲基-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基)-2,2-二苯基-丙基]-脲；

N-[3-((内)-8-甲基-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基)-2,2-二苯基-丙基]-乙酰胺；

N-[3-((内)-8-甲基-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基)-2,2-二苯基-丙基]-苯甲酰胺；

3-((内)-8-甲基-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基)-2,2-二-噻吩-2-基-丙腈；

(内)-3-(2-氰基-2,2-二-噻吩-2-基-乙基)-8,8-二甲基-8-氮鎓双环[3.2.1]辛烷碘化物；

N-[3-((内)-8-甲基-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基)-2,2-二苯基-丙基]-苯磺酰胺；

[3-((内)-8-甲基-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基)-2,2-二苯基-丙基]-脲；

N-[3-((内)-8-甲基-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基)-2,2-二苯基-丙基]-甲磺酰胺；和/或

(内)-3-{2,2-二苯基-3-[(1-苯基-甲酰氧基)-氨基]-丙基}-8,8-二甲基-8-氮鎓双环[3.2.1]辛烷溴化物。

另外的化合物包括：

(内)-3-(2-氰基-2,2-二-噻吩-2-基-乙基)-8,8-二甲基-8-氮鎓双环[3.2.1]辛烷碘化物；和/或

在一个实施方案中，本发明提供包含式(I)的化合物或其可药用盐与H1拮抗剂的组合产品。H1拮抗剂的实例包括但不限于amelexanox、阿司咪唑、阿扎他定、氮卓斯汀、阿伐斯汀、溴苯那敏、西替利嗪、左西替利嗪、乙氟利嗪、氯苯那敏、氯马斯汀、苯甲嗪、卡瑞斯汀、赛庚啶、卡比沙明、脱碳乙氧基氯雷他定（descarboethoxyloratadine）、多西拉敏、吡啶茚胺、依巴斯汀、依匹斯汀、乙氟利嗪、非索非那定、羟嗪、酮替芬、氯雷他定、左卡巴斯汀、咪唑斯汀、美喹他嗪、米安色林、诺柏斯汀、美克洛嗪、诺司咪唑、奥洛他定、哌香豆司特（picumast）、吡拉明、异丙嗪、特非那定、曲吡那敏、替美斯汀、异丁嗪和曲普利啶，特别是西替利嗪、左西替利嗪、乙氟利嗪和非索非那定。在进一步的实施方案中，本发明提供包含式(I)的化合物或其可药用盐与H3拮抗剂（和/或反向激动剂）的组合产品。H3拮抗剂的实例包括例如WO2004/035556和WO2006/045416中公开的那些化合物。可与本发明的化合物组合使用的其它组胺受体拮抗剂包括H4受体的拮抗剂（和/或反向激动剂），例如Jablonowski等人, J. Med. Chem. 46:3957-3960 (2003)中公开的化合物。

在一个实施方案中，本发明提供包含式(I)的化合物或其可药用盐与抗感染药的组合产品。抗感染药可以是抗生素、抗病毒药或抗真菌药。合适的抗生素的实例可包括阿莫西林/克拉维酸、氟氯西林、头孢氨苄、头孢克肟、红霉素、环丙沙星和妥布霉素。合适的抗病毒药的实例可包括奥司他韦、扎那米韦和利巴韦林。合适的抗真菌药的实例可包括氟康唑和伊曲康唑。

在一个实施方案中，包含式(I)的化合物或其可药用盐与抗感染药的组合产品可通过吸入给药。特别适合吸入的抗感染药的实例包括可吸入或雾化的那些，例如抗生素如妥布霉素或环丙沙星，和抗病毒药如扎那米韦或利巴韦林。

在一个实施方案中，本发明提供包含式(I)的化合物或其可药用盐以及具有与式(I)的化合物相容的作用持续时间的抗感染药的组合产品。本文所用的术语“相容的作用持续时间”是指该作用持续时间使得这两种化合物可给药以治疗特定患者，例如，它们可每天给药相同次数，如每天一次或2、3、4或8次。

本发明因此在另一方面中提供包含式(I)的化合物或其可药用盐与PDE4抑制剂的组合产品。

本发明因此在另一方面中提供包含式(I)的化合物或其可药用盐与β₂-肾上腺素能受体激动剂的组合产品。

本发明因此在另一方面中提供包含式(I)的化合物或其可药用盐与白三烯拮抗剂的组合产品。

本发明因此在另一方面中提供包含式(I)的化合物或其可药用盐与皮质类固醇的组合产品。

本发明因此在另一方面中提供包含式(I)的化合物或其可药用盐与非甾体GR激动剂的组合产品。

本发明因此在另一方面中提供包含式(I)的化合物或其可药用盐与抗胆碱能药的组合产品。

本发明因此在另一方面中提供包含式(I)的化合物或其可药用盐与抗组胺药的组合产品。

本发明因此在另一方面中提供包含式(I)的化合物或其可药用盐与PDE4抑制剂和β₂-肾上腺素能受体激动剂的组合产品。

本发明因此在另一方面中提供包含式(I)的化合物或其可药用盐与抗胆碱能药和PDE-4抑制剂的组合产品。

本发明因此在另一方面中提供包含式(I)的化合物或其可药用盐与抗感染药的组合产品。

上文提到的组合可方便地以药物组合物的形式供使用，因此包含如上文定义的组合产品以及可药用稀释剂或载体的药物组合物代表本发明的另一方面。

这种组合产品的各化合物可在分开或组合的药物制剂中相继或同时给药。在一个实施方案中，各化合物在组合药物制剂中同时给药。本领域技术人员容易认识到已知治疗剂的适当剂量。

本发明因此在另一方面中提供包含式(I)的化合物或其可药用盐与另一治疗活性剂的组合产品的药物组合物。

本发明因此在另一方面中提供包含式(I)的化合物或其可药用盐与PDE4抑制剂的组合产品的药物组合物。

本发明因此在另一方面中提供包含式(I)的化合物或其可药用盐与β₂-肾上腺素能受体激动剂的组合产品的药物组合物。

本发明因此在另一方面中提供包含式(I)的化合物或其可药用盐与白三烯拮抗剂的组合产品的药物组合物。

本发明因此在另一方面中提供包含式(I)的化合物或其可药用盐与皮质类固醇的组合产品的药物组合物。

本发明因此在另一方面中提供包含式(I)的化合物或其可药用盐与非甾体GR激动剂的组合产品的药物组合物。

本发明因此在另一方面中提供包含式(I)的化合物或其可药用盐与抗胆碱能药的组合产品的药物组合物。

本发明因此在另一方面中提供包含式(I)的化合物或其可药用盐与抗组胺药的组合产品的药物组合物。

本发明因此在另一方面中提供包含式(I)的化合物或其可药用盐与PDE4抑制剂和β₂-肾上腺素能受体激动剂的组合产品的药物组合物。

本发明因此在另一方面中提供包含式(I)的化合物或其可药用盐与抗胆碱能药和PDE4抑制剂的组合产品的药物组合物。

本发明因此在另一方面中提供包含式(I)的化合物或其可药用盐与抗感染药的组合产品的药物组合物。

现在通过下列非限制性实施例例示本发明。

实施例

下列实施例例示本发明。这些实施例无意限制本发明的范围，而是为技术人员提供制备和使用本发明的化合物、组合物和方法的指导。尽管描述了本发明的特定实施方案，但技术人员会认识到，可以作出各种变动和修改而不背离本发明的精神和范围。

使用将结构与名称匹配的化合物命名程序（例如ACD/Name Batch v 9.0）获得实施例的名称。

当在化合物或试剂的名称后给出商业供应商的名称时，这意味着该化合物可获自商业供应商，如所述商业供应商。如果在本文中没有提到，该化合物或试剂可购自标准供应商，如Sigma Aldrich、Lancaster、Fluorochem、TCI等。

一般实验细节

提到的所有温度按℃计。

下列化合物的名称使用ChemBioDraw Ultra v12.0.2d812生成。

LCMS方法

方法A

LC条件

在Acquity UPLC BEH C18柱（50 mm x 2.1 mm，内径1.7 μm填充直径）上在40℃下进行UPLC分析。所用溶剂为：

A = 0.1 % v/v甲酸的水溶液

B = 0.1 % v/v甲酸的乙腈溶液

所用梯度为：

时间(min)	流速(mL/min)	%A	%B
				0	1	97	3
1.5	1	5	95
				1.9	1	5	95
2.0	1	97	3

UV检测是来自210 nm至350 nm的波长的总和信号。

MS条件

MS:WatersZQ

电离模式:交替扫描正和负电喷雾

扫描范围:100至1000AMU

扫描时间:0.27sec

扫描间延迟:0.10sec。

方法B

LC条件

在Acquity UPLC BEH C18柱（50 mm x 2.1 mm，内径1.7 μm填充直径）上在35℃下进行UPLC分析。所用溶剂为：

A = 0.05 % v/v甲酸的水溶液

B = 0.05 % v/v甲酸的乙腈溶液

所用梯度为：

时间(min)	流速(mL/min)	%A	%B
				0	0.6	97	3
0.4	0.6	97	3
				3.2	0.6	2	98
3.8	0.6	2	98
				4.2	0.6	97	3
4.5	0.6	97	3

UV: 190 nm至400 nm。

质谱法:

MS: Waters SQD - 3100质量检测器

电离模式 : 电喷雾电离(ESI)

极性切换: 正/负

扫描范围: 100-1000

扫描时间: 0.5 (secs)

扫描间延迟: 0.1 (secs)。

方法C

LC条件

在Acquity UPLC BEH C18柱（50 mm x 2.1 mm，内径1.7 μm填充直径）上在40℃下进行UPLC分析。

所用溶剂为：

A = 10 mM碳酸氢铵/水，调节至pH 10氨溶液

B = 乙腈

所用梯度为：

时间(min)	流速(mL/min)	%A	%B
				0	1	97	3
1.5	1	5	95
				1.9	1	5	95
2.0	1	97	3

UV检测是来自210 nm至350 nm的波长的总和信号。

MS条件

MS:WatersZQ

电离模式:交替扫描正和负电喷雾

扫描范围:100至1000AMU

扫描时间:0.27sec

扫描间延迟:0.10sec。

方法D

LC条件

在Acquity BEH C18（50 mm x 2.1 mm，内径1.7 µm填充直径）上在35℃下进行UPLC分析。

所用溶剂为：

A = 0.1 % v/v甲酸的水溶液

B = 0.1 % v/v甲酸的乙腈溶液

所用梯度为：

UV: 190 nm至400 nm。

质谱法:

MS: Waters SQD - 3100质量检测器

电离模式 : 电喷雾电离(ESI)

极性切换: 正/负

扫描范围: 100-1000

扫描时间: 0.5 (secs)

扫描间延迟: 0.1 (secs)。

方法E

LC条件

在Acquity UPLC CSH C18柱（50 mm x 2.1 mm，内径1.7 μm填充直径）上在40℃下进行UPLC分析。所用溶剂为：

A = 0.1 % v/v TFA的水溶液

B = 0.1 % v/v TFA的乙腈溶液

所用梯度为：

时间(min)	流速(mL/min)	%A	%B
				0	1	97	3
1.5	1	5	95
				1.9	1	5	95
2.0	1	97	3

UV检测是来自210 nm至350 nm的波长的总和信号。

MS条件

MS:Waters Acquity QDa质量检测器

电离模式:交替扫描正和负电喷雾

扫描范围:100至1000 AM U

定向取样

频率:8 Hz。

方法F

LC条件

在Acquity UPLC CSH C18（100 mm x 2.1 mm，内径1.7 µm填充直径）上在50℃下进行UPLC分析。

所用溶剂为：

A = 0.1 % v/v甲酸的水溶液

B = 0.1 % v/v甲酸的乙腈溶液

所用梯度为：

UV检测是来自210 nm至350 nm的波长的总和信号。

MS条件

MS: Waters Acquity QDa质量检测器

电离模式 : 电喷雾电离(ESI)

极性切换: 正/负

扫描范围: 90-1000

扫描时间: 0.2 (secs)

扫描间延迟: 0.05 (secs)。

质量导向自动制备HPLC条件和洗脱剂

下面描述用于提纯化合物的质量导向自动制备HPLC的方法。使用经最多25分钟的时期0至99%溶剂B/溶剂A的溶剂洗脱梯度。

方法A:

柱: Xselect CSH C18柱（150 mm x 30 mm，内径5 μm填充直径），在环境温度下

所用溶剂为：

A = 10 mM碳酸氢铵，用氨水调节到pH 10

B = MeCN.

流速: 40 mL/min.

或者:

方法B:

所用溶剂为：

A = 0.1% v/v甲酸的水溶液

B = 0.1% v/v甲酸的MeCN溶液

流速: 40 mL/min.

或者:

方法C:

柱: CSH C18柱（150 x 30 mm，内径5 μm填充直径），在环境温度下

所用溶剂为：

A = 0.1% v/v TFA的水溶液

B = 0.1% v/v TFA的MeCN溶液

扫描范围: 300至1200 AMU

或者:

方法D:

柱: XSelect CSH C18柱（30 x 150 mm，内径5 μm）.

所用溶剂为：

A = 0.1% v/v甲酸的水溶液

B = 0.1% v/v甲酸的MeCN溶液

流速: 20 mL/min。

对于方法A和B:

进样体积 : 1 mL或3 mL

对于所有方法（除非另行指明）：

DAD检测为210 nm至350 nm。

MS条件

MS : Waters ZQ

电离模式 : 交替扫描正/负电喷雾

扫描范围 : 100至1000 AMU

扫描时间 : 0.2s或0.50 s

扫描间延迟 : 0.1s或0.2 s。

制备手性SFC柱、条件和洗脱剂

下面描述用于提纯化合物的手性SFC的方法：

方法A:

柱/尺寸 : Chiralcel OX-H (30 x 250 mm )，5μm

% CO2 : 65.0%

%助溶剂 : 35.0% (0.5%二乙胺/乙醇)

总流量 : 100.0 g/min

背压 : 90.0巴

UV : 214 nm

叠加时间（Stack time） : 8.0 min

加载量/进样（Load/Inj） : 60.0mg

溶解性: 80 ml甲醇

进样次数: 60

方法B:

柱/尺寸 : Chiralpak AD-H (30 x 250 mm )，5μm

% CO2 : 70.0%

%助溶剂 : 30.0% (100%乙醇)

总流量 : 100.0 g/min

背压 : 90.0巴

UV : 214 nm

叠加时间（Stack time） : 7.0 min

加载量/进样（Load/Inj） : 22.0 mg

溶解性: 20 ml甲醇

进样次数: 25。

制备HPLC柱、条件和洗脱剂

下面描述用于提纯化合物的制备HPLC的方法：

方法A:

在Kromasil C18（250 mm x 25 mm，5 µm填充直径）上在室温下进行制备HPLC。

所用溶剂为：

A = 10 mM碳酸氢铵/水，调节至pH 10氨溶液

B = 乙腈

所用梯度为：

方法B:

在CSH C18柱（150 mm x 30 mm，内径5 μm填充直径）上在室温下进行制备HPLC。

所用溶剂为：

A = 0.1% v/v甲酸的水溶液

B = 0.1% v/v甲酸的乙腈溶液

所用梯度为：

方法C:

在Kromasil C18（150 mm x 25 mm，10 µm填充直径）上在室温下进行制备HPLC。

所用溶剂为：

A = 10 mM碳酸氢铵/水，调节至pH 10氨溶液

B = 乙腈

所用梯度为：

NMR

在400或600 MHz NMR机器上在302 K下或对于VT谱在392至393 K下运行光谱。

中间体1. 3-(三甲基甲硅烷基)-8-氧杂-1,2-二氮杂螺[4.5]癸-1,3-二烯

在室温下和在氩气气氛下用四氢-4H-吡喃-4-酮（6.27 mL, 67.9 mmol）处理对甲苯磺酰肼（12.64 g, 67.9 mmol）在MeOH（300 mL）中的搅拌溶液。反应混合物在密封管中在室温下搅拌5分钟并在减压下浓缩。粗物质在室温下和在氩气气氛下用二氧杂环己烷（400mL）、碳酸铯（33.2 g, 102 mmol）和乙炔基三甲基甲硅烷（10 g, 102 mmol）处理。反应混合物在110℃下加热15小时，然后使其冷却到25℃。反应混合物用水（100 mL）稀释并用EtOAc（150 mL）分相。分离有机层，水层用EtOAc（150 mL）再萃取。合并的有机层用盐水（100 mL）洗涤并经Na₂SO₄干燥，过滤并在减压下浓缩。粗产物通过硅胶色谱法提纯，用30% EtOAc/己烷溶液洗脱以产生白色固体形式的标题化合物（4.0 g, 26%）。

LCMS (方法B): Rt = 2.38 min, MH⁺ 211。

中间体2. 3-(三甲基甲硅烷基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑

3-(三甲基甲硅烷基)-8-氧杂-1,2-二氮杂螺[4.5]癸-1,3-二烯（4.0 g, 19.02mmol）在二氧杂环己烷（60 mL）中的搅拌溶液在室温下用(二乙基氧鎓)三氟硼酸盐（2.89mL, 22.82 mmol）处理。将反应混合物搅拌4小时，然后用NaHCO₃的饱和水溶液（200 mL）淬灭并用EtOAc（2x 150 mL）萃取。合并的有机层用盐水（120 mL）洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并在减压下浓缩以产生粗产物。粗物质用乙醚（200 mL）研制并在减压下干燥以产生白色固体形式的标题化合物（3.0 g）。

LCMS (方法B): Rt = 1.75 min, MH⁺ 211。

粗物质不经进一步提纯进行下一反应步骤。

中间体3. 3-溴-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑

用在MeCN（40 mL）中的N-溴代琥珀酰亚胺（1.69 g, 9.51 mmol）处理3-(三甲基甲硅烷基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（2.0 g, 9.51 mmol）在MeCN（40 mL）中的搅拌溶液并在25℃下搅拌4小时。反应混合物在减压下浓缩并在DCM（200 mL）和碳酸氢钠的饱和水溶液（150 mL）之间分相。分离有机层，经过疏水玻璃料并在减压下浓缩以提供浅黄色固体形式的标题化合物（2.0 g）。

LCMS (方法B): Rt = 1.92 min, MH⁺ 219。

粗物质不经进一步提纯进行下一反应步骤。

中间体4. 3-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c] 吡唑

3-溴-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（500 mg, 2.303 mmol）、(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)硼酸（764 mg, 4.58 mmol）、Xphos Pd G2（129 mg, 0.164 mmol）和磷酸三钾（982 mg, 4.63 mmol）的混合物在氮气气氛下在隔氧下用脱气1,4-二氧杂环己烷（15 mL）和脱气水（3.00 mL）处理。反应混合物在搅拌下在80℃下加热2小时。使反应混合物冷却到室温并用水（20 mL）处理。反应混合物用EtOAc（15 mL）分相并分离有机层。水层用EtOAc（3 x 15 mL）再萃取，合并的有机层经过疏水玻璃料并在减压下浓缩以产生粗产物（1.232 g）。粗产物通过硅胶柱色谱法提纯，用50至100%梯度的EtOAc/环己烷洗脱以产生标题化合物（400 mg, 60%）。

LCMS (方法C): Rt = 0.85 min, MH⁺ 260。

中间体5. ((2R,4r,6S)-2,6-二甲基哌啶-4-基)甲醇

(2,6-二甲基吡啶-4-基)甲醇（9 g, 65.6 mmol）在EtOH（100 mL）中的溶液用Rh/氧化铝（3.37 g, 32.8 mmol）和氢气在70 psi下处理。将反应混合物搅拌48小时。反应混合物经Celite®垫过滤并在减压下浓缩以获得粗产物。粗产物在Parr摇振器中用EtOH（100mL）、接着新鲜Rh/氧化铝（3.37 g, 32.8 mmol）和AcOH（5 mL）和氢气在70 psi下处理。将反应混合物摇振48小时并经Celite®垫过滤并在减压下浓缩以产生粗制标题化合物(6 g)。

粗制化合物不经进一步提纯进行下一反应步骤。

中间体6. (2R,4r,6S)-4-(羟甲基)-2,6-二甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯

((2R,4r,6S)-2,6-二甲基哌啶-4-基)甲醇（7 g, 48.9 mmol）在1,4-二氧杂环己烷（70 mL）和水（14 mL）中的溶液用Na₂CO₃（7.77 g, 73.3 mmol）、接着二碳酸二叔丁酯（11.35 mL, 48.9 mmol）处理。反应混合物在80℃下搅拌24小时，然后用水（50 mL）稀释并用DCM（100 mL x 2）萃取。合并的有机层用饱和盐水（50 mL x 2）洗涤，经硫酸钠干燥，然后过滤并在减压下浓缩以产生无色油形式的粗产物(5 g)。

粗制化合物通过中性氧化铝色谱法提纯，用15% EtOAc/己烷溶液洗脱以产生无色液体形式的标题化合物（4 g, 33%）。

中间体7. (2R,4r,6S)-4-(溴甲基)-2,6-二甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯

(2R,4r,6S)-4-(羟甲基)-2,6-二甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯（4 g, 16.44 mmol）在DCM（40 mL）中的溶液用三苯基膦（5.17 g, 19.73 mmol）和CBr₄（5.45 g, 16.44 mmol）处理。将反应混合物搅拌4小时，然后用水（50 mL）稀释并用DCM（50 mL x 3）萃取。有机相用饱和盐水溶液（25 mL）洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩以产生黄色油形式的粗产物(4.8 g)。

粗产物使用中性氧化铝柱色谱法提纯，用15% EtOAc/己烷溶液洗脱以产生无色液体形式的标题化合物（4 g, 79%）。

中间体8. (2R,4r,6S)-2,6-二甲基-4-((4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯

4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)-1H-吡唑（2 g, 10.31 mmol）在MeCN（20 mL）中的搅拌溶液在氮气气氛下用Cs₂CO₃（5.04 g, 15.46 mmol）、接着(2R,4r,6S)-4-(溴甲基)-2,6-二甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯（3.79 g, 12.37 mmol）处理。反应混合物在60℃下搅拌16小时。

反应混合物用水（50 mL）稀释并用EtOAc（50 mL x 3）萃取。合并的有机层经硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩以产生粗产物（3.2 g），其通过硅胶柱色谱法提纯，用石油醚洗脱以产生白色固体形式的标题化合物（2.65 g, 60%）。

LCMS (方法B): Rt = 2.76 min, MH⁺ 420。

通用Suzuki偶联程序

中间体9. (2R,4r,6S)-4-((4-(3-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢- 1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-1-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)-2,6-二甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯

(2R,4r,6S)-4-((4-(3-溴-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-1-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)-2,6-二甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯（100 mg, 0.197 mmol）、(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)硼酸（67.2 mg, 0.393 mmol）、磷酸钾（83 mg, 0.393 mmol）和Xphos Pd G2（10.83 mg, 0.014 mmol）的混合物用1,4-二氧杂环己烷（0.4 ml）和水（0.100 ml）处理。将反应混合物置于氮气气氛下并使用微波在100℃下加热1小时。反应混合物在氮气流下浓缩，残留物通过MDAP（方法A）提纯以产生橙色油形式的标题化合物（85 mg, 78%）。

LCMS (方法C): Rt = 1.37 min, MH⁺ 555。

中间体10. 3-(1-(4-甲氧基苄基)-1H-吡唑-4-基)-8-氧杂-1,2-二氮杂螺[4.5] 癸-1,3-二烯

在氩气气氛下和在室温下用四氢-4H-吡喃-4-酮（6.53 mL, 70.7 mmol）处理对甲苯磺酰肼（13.2 g, 70.7 mmol）在MeOH（300 mL）中的搅拌溶液。将反应混合物搅拌5分钟，在减压下浓缩，然后用二氧杂环己烷（300 mL）、碳酸铯（34.5 g, 106 mmol）和4-乙炔基-1-(4-甲氧基苄基)-1H-吡唑（15 g, 70.7 mmol，Chaplin, Jason Hugh等人之前在PCT国际申 请2006084338中描述了合成）处理。反应混合物在氩气气氛下在110℃下加热15小时。

反应混合物用水（200 mL）稀释并用EtOAc（300 mL）萃取。分离有机层，水层用EtOAc（300 mL）再萃取。合并的有机层用盐水（100 mL）洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并在减压下浓缩以提供粗产物。该物质通过硅胶色谱法使用70% EtOAc/己烷溶液提纯以产生浅黄色固体形式的标题化合物（10.0 g, 36%）。

LCMS (方法B): Rt = 1.89 min, MH⁺ 325。

中间体11. 3-(1-(4-甲氧基苄基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并 [4,5-c]吡唑

3-(1-(4-甲氧基苄基)-1H-吡唑-4-基)-8-氧杂-1,2-二氮杂螺[4.5]癸-1,3-二烯（9.8 g, 30.2 mmol）在二氧杂环己烷（100 mL）中的搅拌溶液在室温下用(二乙基氧鎓)三氟硼酸盐（4.59 mL, 36.3 mmol）处理。反应混合物在室温下搅拌4小时，然后用NaHCO₃的饱和水溶液（100 mL）淬灭并用EtOAc（500 mL）分相。分离有机层，水层用EtOAc（500 mL）萃取，合并的有机层用盐水（250 mL）洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并在减压下浓缩以产生粗产物（11.0 g）。该物质通过硅胶柱色谱法提纯（3% MeOH/DCM）以产生浅黄色固体形式的标题化合物（5.3 g, 52%）。

LCMS (方法B): Rt = 1.72 min, MH⁺ 325。

中间体12. 3-(1-(4-甲氧基苄基)-1H-吡唑-4-基)-2-(2-甲氧基嘧啶-5-基)-4, 5,7,8-四氢-2H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑和3-(1-(4-甲氧基苄基)-1H-吡唑-4-基)-1-(2-甲氧基嘧啶-5-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑

(2-甲氧基嘧啶-5-基)硼酸（48 mg, 0.315 mmol）、3-(1-(4-甲氧基苄基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（100 mg）和DMAP（75 mg, 0.617 mmol）的混合物合并在MeCN（1 mL）中并用乙酸铜(II)（84 mg, 0.462 mmol）处理。反应混合物暴露在空气中在40℃下搅拌3天，然后使其冷却到室温。

将该物质与已类似地使用(2-甲氧基嘧啶-5-基)硼酸（131 mg, 0.848 mmol）、3-(1-(4-甲氧基苄基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（250 mg,0.771 mmol）、DMAP（188 mg, 1.541 mmol）和乙酸铜(II)（210 mg, 1.156 mmol）在MeCN（5mL）中制备的批料混合。

合并的反应混合物用氢氧化铵（10 mL）、水（10 mL）处理并用EtOAc（15 mL）分相。分离有机层，水层用EtOAc（2 x 15 mL）再萃取。合并的有机层用盐水（15 mL）洗涤，经过疏水玻璃料并在减压下浓缩，然后在MeOH（4 mL）中加载到已用MeOH预调节的SCX-SPE柱上。SCX-SPE柱用MeOH（3 x 15 mL）洗脱且合并的洗脱液在减压下浓缩以产生标题化合物的粗制混合物 (308 mg)。

LCMS (方法C): Rt = 0.97 min, MH⁺ 433。

粗物质不经进一步提纯进行下一反应步骤。

中间体13. 2-(2-甲氧基嘧啶-5-基)-3-(1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-2H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑和1-(2-甲氧基嘧啶-5-基)-3-(1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑

3-(1-(4-甲氧基苄基)-1H-吡唑-4-基)-2-(2-甲氧基嘧啶-5-基)-4,5,7,8-四氢-2H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑和3-(1-(4-甲氧基苄基)-1H-吡唑-4-基)-1-(2-甲氧基嘧啶-5-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（308 mg）在DCM（2 mL）中的粗制混合物用TFA（2 mL, 26.0 mmol）处理，然后使用微波在70℃下加热6小时。使用碳酸氢钠将反应混合物中和到pH 7，用水（10 mL）稀释并用EtOAc（15 mL）萃取。分离有机层，水层用EtOAc（2 x 15mL）再萃取。合并的有机层用盐水（10 mL）洗涤，经过疏水玻璃料并在减压下浓缩以产生标题化合物的粗制混合物(232 mg)。

LCMS (方法C): Rt = 0.67 min, MH⁺ 313。

粗物质不经进一步提纯进行下一反应步骤。

中间体14. 4-((4-(2-(2-甲氧基嘧啶-5-基)-4,5,7,8-四氢-2H-氧杂䓬并[4,5- c]吡唑-3-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯和4-((4-(1-(2-甲氧基嘧啶-5- 基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯

将2-(2-甲氧基嘧啶-5-基)-3-(1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-2H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑和1-(2-甲氧基嘧啶-5-基)-3-(1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（232 mg）的粗制混合物溶解在DMF（2 mL）中并置于氮气气氛下。该混合物用NaH（17 mg, 0.423 mmol，在矿物油中的60%悬浮液）处理并搅拌30分钟，然后用4-(溴甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯（86 mg, 0.310 mmol）处理并搅拌另外24小时。使用2 M HCl溶液将反应混合物酸化到pH 5并用水（25 mL）稀释，然后用EtOAc（25 mL）分相。分离有机层，水层用EtOAc（25 mL）再萃取。合并的有机层用LiCl（5%水溶液，2 x 25 mL）和盐水（25 mL）洗涤，经过疏水玻璃料，然后在减压下浓缩以产生标题化合物的粗制混合物(90 mg)。

LCMS (方法A): Rt = 1.08 min, MH⁺ 510。

粗物质不经进一步提纯进行下一反应步骤。

中间体15. 2-(2-甲氧基嘧啶-5-基)-3-(1-(哌啶-4-基甲基)-1H-吡唑-4-基)-4, 5,7,8-四氢-2H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑和1-(2-甲氧基嘧啶-5-基)-3-(1-(哌啶-4-基甲基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑

将4-((4-(1-(2-甲氧基嘧啶-5-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯和4-((4-(2-(2-甲氧基嘧啶-5-基)-4,5,7,8-四氢-2H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯（90mg）的混合物溶解在DCM（2 mL）中。将反应混合物置于氮气气氛下并用TFA（0.068 mL,0.883 mmol）处理，然后搅拌1小时。该反应混合物用饱和碳酸钠水溶液（5 mL）处理并用EtOAc（15 mL）分相。分离有机层，水层用EtOAc（2 x 15 mL）再萃取。合并的有机层用盐水（5mL）洗涤，经过疏水玻璃料并在减压下浓缩以产生标题化合物的粗制混合物(82 mg)。

LCMS (方法C): Rt = 0.74 min和0.77 min, MH⁺ 410。

粗物质不经提纯进行下一反应步骤。

中间体16. 3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑

二氢-2H-吡喃-4(3H)-酮（134 mg, 1.342 mmol）在MeOH（6 mL）中的溶液用4-甲基苯磺酰肼（250 mg, 1.342 mmol）处理，将反应混合物搅拌5分钟，然后浓缩。将粗物质溶解在无水二氧杂环己烷（6 mL）中，反应混合物用4-乙炔基-1-甲基-1H-吡唑（214 mg, 2.014mmol）和碳酸铯（656 mg, 2.014 mmol）处理。反应混合物在110℃下加热15小时。反应混合物用水（10 mL）稀释并用EtOAc（20 mL）分相。分离有机层，水层用EtOAc（2 x 20 mL）再萃取。粗制中间体通过硅胶柱色谱法提纯，用70至100%梯度的EtOAc/环己烷溶液洗脱。将分离的物质溶解在二氧杂环己烷（6 mL）中并用(二乙基氧鎓)三氟硼酸盐（0.097 mL, 0.79mmol）处理，将反应混合物搅拌4小时。反应混合物用NaHCO₃溶液（20 ml）处理并用EtOAc（50mL）分相。分离有机层，水层用EtOAc（2 x 50 mL）再萃取。物质通过硅胶柱色谱法提纯，用100% EtOAc洗脱以产生标题化合物（172 mg, 59%）。

LCMS (方法A): Rt = 0.58 min, MH⁺ 219。

中间体17. 3-溴-1-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5- c]吡唑

1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)-1H-吡唑（96 mg,0.461 mmol）、3-溴-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（50 mg, 0.230 mmol）和DMAP（56 mg, 0.461 mmol）的混合物合并在MeCN（1 mL）中。反应混合物用乙酸铜(II)（63 mg,0.346 mmol）处理并暴露在空气中在40℃下搅拌整夜。使反应混合物冷却到室温并用氢氧化铵（2 mL）处理，用水（5 mL）稀释并用EtOAc（5 mL）分相。分离有机层，水层用EtOAc（2 x 5mL）再萃取。合并的有机层用盐水（5 mL）洗涤，经过疏水玻璃料并在减压下浓缩。粗产物通过MDAP（方法B）提纯以产生标题化合物（10 mg, 15%）。

LCMS (方法A): Rt = 0.81 min, MH⁺ 297/299。

中间体18. 3-溴-1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并 [4,5-c]吡唑

6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)硼酸（185 mg, 1.106 mmol）、3-溴-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（200 mg, 0.921 mmol）和DMAP（225 mg, 1.843 mmol）和乙酸铜(II)（251 mg, 1.302 mmol）在MeCN（2 mL）中的混合物在开放空气中在80℃下搅拌4小时。反应混合物用5重量% TMEDA水溶液（20 mL）处理并用EtOAc（30 mL）分相。分离有机层，水层用EtOAc（2 x 30 mL）再萃取。合并的有机层经过疏水玻璃料，然后在减压下浓缩以提供绿色油。粗物质用EtOAc（20 mL）处理并用1 M HCl水溶液（2 x 20 mL）洗涤。分离有机层并在减压下浓缩以产生棕色油形式的粗制标题化合物(191 mg)。

LCMS (方法C): Rt = 1.17 min, MH⁺ 338/340。

粗物质不经提纯进行下一反应步骤。

中间体19. 3-溴-1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并 [4,5-c]吡唑和3-溴-2-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-2H-氧杂䓬并[4,5- c]吡唑

将(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)硼酸（308 mg, 1.843 mmol）、3-溴-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（400 mg, 1.843 mmol）和DMAP（450 mg, 3.69 mmol）和乙酸铜(II)（502 mg, 2.76 mmol）的混合物添加到MeCN（6 mL）中。反应混合物暴露在空气中在40℃下搅拌整夜，然后使其冷却到室温。反应混合物用氢氧化铵（20 mL）和水（20 mL）处理，然后用EtOAc（25 mL）分相。分离有机层，水层用EtOAc（2 x 25 mL）再萃取。合并的有机层用盐水（25 mL）洗涤并经过疏水玻璃料，然后在减压下浓缩。将粗物质溶解在MeOH（2 mL）中并加载到已用MeOH预调节的SCX-SPE柱(5 g)上。该柱用MeOH（20 mL）洗脱，洗脱液在减压下浓缩以产生标题化合物的粗制混合物(535 mg)。

LCMS (方法C): Rt = 1.15 min, MH⁺ 338/340。

粗物质不经进一步提纯进行使用。

中间体20. 1-(5-(氟甲基)-6-甲氧基吡啶-3-基)-3-(1-(4-甲氧基苄基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑]

将乙酸铜(II)（53 mg, 0.292 mmol）、3-(1-(4-甲氧基苄基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（82 mg, 0.253 mmol）、3-(氟甲基)-2-甲氧基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)吡啶（72 mg, 0.270 mmol）和DMAP（65mg, 0.532 mmol）的混合物溶解在MeCN（2 mL）中。反应混合物暴露在空气中搅拌1.5小时，然后在40℃下加热整夜。反应混合物用MeOH（1 mL）处理并在40℃下加热4小时，并允许在室温下静置4天。

单独地，将乙酸铜(II)（123 mg, 0.678 mmol）、3-(1-(4-甲氧基苄基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（200 mg, 0.617 mmol）、3-(氟甲基)-2-甲氧基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)吡啶（181 mg, 0.678 mmol）和DMAP（151 mg, 1.233 mmol）的混合物溶解在MeCN（5 mL）中并用MeOH（1 mL）处理。反应混合物暴露在空气中在40℃下搅拌24小时。

合并这两种反应混合物并用5重量% DMEDA水溶液（25 mL）稀释并用EtOAc（25 mL）分相。分离有机层，水层用EtOAc（2 x 25 mL）再萃取。合并的有机层经过疏水玻璃料并在减压下浓缩以产生棕色油形式的粗产物(560 mg)。粗产物通过MDAP（方法A）提纯以产生标题化合物（191 mg, 64%）。

LCMS (方法C): Rt = 1.16 min, MH⁺ 464。

中间体21. N-(2-甲氧基-5-(3-(1-(4-甲氧基苄基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲磺酰胺

将3-(1-(4-甲氧基苄基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（209 mg, 0.644 mmol）添加到N-(2-甲氧基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)吡啶-3-基)甲磺酰胺（238 mg, 0.725 mmol）、乙酸铜(II)（126 mg, 0.694mmol）、DMAP（157 mg, 1.289 mmol）在MeCN（5 mL）中的溶液中。反应混合物暴露在空气中在室温下搅拌整夜，然后用乙酸铜(II)（126 mg, 0.694 mmol）处理。反应混合物暴露在空气中在40℃下加热8小时。反应混合物用TMEDA水溶液（5重量%，25 mL）和EtOAc（25 mL）分相。分离有机层，水层用EtOAc（2 x 25 mL）再萃取。合并的有机层经过疏水玻璃料并在减压下浓缩。一半粗物质通过使用C18柱的反相柱色谱法提纯，用15至55%梯度的MeCN/碳酸氢铵水溶液（用氨水调节到pH 10）洗脱，而另一半通过MDAP（方法B）提纯以产生米色固体形式的标题化合物(164 mg)。

LCMS (方法C): Rt = 0.75、MH⁺ 525。

中间体22. (2R,4r,6S)-4-((4-(3-溴-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑- 1-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)-2,6-二甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯

(2R,4r,6S)-2,6-二甲基-4-((4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯（1159 mg, 2.76 mmol）、3-溴-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（500 mg, 2.303 mmol）、CuOAc（628 mg, 3.46 mmol）和DMAP（536 mg, 4.61 mmol）在MeCN（5 mL）中的搅拌混合物暴露在空气中在80℃下加热42小时。

反应混合物用5重量% TMEDA溶液（150 mL）淬灭并用EtOAc（100 mL）分相。分离有机层并用5重量% TMEDA溶液（150 mL）洗涤。水层用EtOAc（500 mL）萃取。合并的有机层经过疏水玻璃料并在减压下浓缩。粗产物通过使用0至100%梯度的EtOAc/环己烷的硅胶柱色谱法提纯以产生白色固体形式的标题化合物(190 mg)。

LCMS (方法C): Rt = 1.33 min, MH⁺ 508/510。

部分纯化产物进行下一合成步骤。

中间体23. 2-甲氧基-5-(3-(1-(4-甲氧基苄基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢- 1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-1-基)烟腈和2-甲氧基-5-(3-(1-(4-甲氧基苄基)-1H-吡唑-4- 基)-4,5,7,8-四氢-2H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-2-基)烟腈

将乙酸铜(II)（140 mg, 0.771 mmol）、2-甲氧基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)烟腈（266 mg, 1.023 mmol）、3-(1-(4-甲氧基苄基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（250 mg, 0.771 mmol）和DMAP（188 mg, 1.541mmol）的混合物溶解在MeCN（6 mL）中并在室温下搅拌3小时。反应混合物然后在40℃下加热整夜。

反应混合物用5重量% DMEDA水溶液（30 mL）稀释并用3等分的EtOAc（各30 mL）萃取。有机相经过疏水玻璃料并在减压下浓缩以产生棕色胶质粗产物(660 mg)。

粗产物通过使用0至40%梯度的EtOAc和环己烷、然后100% EtOAc的硅胶柱色谱法提纯以产生白色结晶固体形式的标题化合物的混合物(205 mg)。

部分纯化产物进行下一合成步骤。

LCMS (方法C): Rt = 1.09 min和1.10 min, MH⁺ 457。

中间体24. 3-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-1-(1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢- 1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑

用TFA（20 mL）处理在DCM（30 mL）中的3-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-1-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（1.8 g,4.40 mmol）。反应混合物在室温下搅拌5小时。反应混合物在减压下浓缩并用碳酸氢铵溶液（50 mL）中和，然后用10% MeOH/DCM（100 mL）萃取。有机层经硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩以产生灰白色泡沫形式的标题化合物(1.5 g)。

LCMS (方法B): Rt = 2.04 min, MH⁺ 326。

中间体25. 3-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-1-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑

3-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（260mg, 1.003 mmol）在无水MeCN（10 mL）中的溶液用乙酸铜(II)（273 mg, 1.504 mmol）、1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)-1H-吡唑（416mg, 1.496 mmol）和DMAP（243 mg, 1.989 mmol）处理。反应混合物暴露在空气中在40℃下搅拌5小时，然后用几滴IPA处理。反应混合物在40℃下加热整夜，然后用1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)-1H-吡唑（206 mg, 0.714mmol）处理并在60℃下加热整夜。将反应混合物加热另外6小时，然后用1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)-1H-吡唑（194 mg, 0.697mmol）处理。反应混合物在60℃下加热1天并用5重量% TMEDA水溶液（10 mL）处理。反应混合物用EtOAc（10 mL）分相并分离有机层。水层用EtOAc（3 x 10 mL）再萃取，合并的有机层用HCl水溶液（1 M，20 mL）洗涤，然后经过疏水玻璃料并在减压下浓缩以产生粗产物（139 mg）。粗产物通过MDAP（方法A）提纯以产生标题化合物（44 mg, 8%）。

LCMS (方法C): Rt = 1.11 min, MH⁺ 410。

中间体26. 5-(3-溴-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-1-基)-2-甲氧基烟腈

含有分子筛（3 Ǻ、600 mg）的微波小瓶在真空炉中干燥整夜。向小瓶装载3-溴-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（200 mg, 0.921 mmol）、2-甲氧基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)烟腈（394 mg, 1.515 mmol）、乙酸铜(II)（180 mg,0.991 mmol）、三乙胺（0.257 mL, 1.843 mmol）、无水MeCN（2mL）和无水EtOH（0.100 mL）。反应混合物在80℃下加热5小时。反应混合物经过10 g Celite®筒，其用甲醇（80 mL）洗涤并在减压下浓缩以产生粗产物（432 mg）。

粗产物使用硅胶柱色谱法部分提纯，用0至100%梯度的EtOAc和环己烷洗脱以产生标题化合物(67 mg)。

LCMS (方法A): Rt = 1.09 min, MH⁺ 349/351。

部分纯化的化合物进行下一反应步骤。

中间体27. 2-甲氧基-5-(3-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8- 四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-1-基)烟腈

将5-(3-溴-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-1-基)-2-甲氧基烟腈（67mg）、1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)-1H-吡唑（80 mg, 0.288 mmol）、磷酸钾（61 mg, 0.287 mmol）和Xphos Pd G2（8 mg, 10.17 µmol）的混合物添加到微波小瓶中。将小瓶加盖并用氮气吹扫。小瓶用二氧杂环己烷（1.2ml）和水（0.3 ml）处理并在微波中在90℃下加热90分钟。

反应混合物经过2.5 g Celite®筒并用甲醇洗涤并在减压下浓缩。残留物用EtOAc（10 mL）和水（10 mL）分相。水层用另外的EtOAc（3 x 10 mL）萃取，合并的有机层经过疏水玻璃料并在减压下浓缩以产生粗制标题化合物(104 mg)。粗产物通过MDAP（方法A）部分提纯以产生标题化合物（49 mg）。

LCMS (方法C): Rt = 1.04 min, MH⁺ 421。

部分纯化的化合物进行下一反应步骤。

中间体28. 1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-3-(1-(4-甲氧基苄基)-1H-吡唑-4- 基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑

乙酸铜(II)（560 mg, 3.08 mmol）、3-(1-(4-甲氧基苄基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（1000 mg, 3.08 mmol）、(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)硼酸（515 mg, 3.08 mmol）、DMAP（753 mg, 6.17 mmol）和MeCN（30 mL）的混合物暴露在空气中在室温下搅拌整个周末。反应混合物用5重量% DMEDA水溶液（25 mL）处理，并在减压下部分浓缩。混合物用EtOAc（30 mL）分相并分离有机层。水层用EtOAc（2 x 30 mL）萃取，合并的有机层经过疏水玻璃料并在减压下浓缩以提供粗产物（大约2 g）。

一部分粗产物（340 mg）使用在30 g柱上的 C18硅胶色谱法提纯，用MeCN和0.1%碳酸氢铵水溶液的混合物（30至85%梯度）洗脱，保持梯度在35% MeCN，然后在40% MeCN以使区域异构体的分离最大化。

其余粗产物使用在120 g柱上的C18硅胶色谱法提纯，用MeCN和0.1%碳酸氢铵水溶液的混合物（30至85%梯度）洗脱，保持梯度在35% MeCN，然后在40% MeCN以使区域异构体的分离最大化。

合并来自这两个提纯批次的级分以产生标题化合物（595 mg, 40%）。

LCMS (方法C): Rt = 1.16 min, MH⁺ 446。

中间体29. 1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-3-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑

将微波小瓶中的1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)-1H-吡唑（314 mg, 1.130 mmol）、Xphos Pd G2（31.1 mg, 0.040 mmol）和磷酸钾（240 mg, 1.130 mmol）的混合物置于氮气气氛下并用3-溴-1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（191 mg, 0.565 mmol）在二氧杂环己烷（4 ml）中的溶液、接着水（1.000 ml）处理。反应混合物在80℃下加热3小时并在减压下浓缩以提供棕色胶质。粗产物通过使用C18柱的反相色谱法提纯以提供棕色固体形式的标题化合物（102 mg, 39%）。

LCMS (方法C): Rt = 1.09 min, MH⁺ 410。

中间体30. 1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-3-(1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢- 1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑

方法1

1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-3-(1-(4-甲氧基苄基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（595 mg, 1.336 mmol）在DCM（6 mL）中的溶液小心地用TFA（6.00 mL）处理并使用微波在70℃下加热3小时，然后在70℃下加热另外3小时。将反应混合物冷却到0℃并用碳酸氢钠的饱和水溶液（6 mL）处理。

将反应混合物剧烈搅拌整夜，同时允许升温到室温。反应混合物用另外的碳酸氢钠饱和水溶液（6 mL）处理并用DCM（20 mL）分相。分离有机层，水层用DCM（2 x 20 mL）萃取。合并的有机层经过疏水玻璃料并在减压下浓缩以提供粗产物。

粗产物通过硅胶色谱法提纯，用EtOH和EtOAc的混合物（0至50%梯度）洗脱以产生标题化合物（269 mg, 56%）。

LCMS (方法C): Rt = 0.86 min, MH⁺ 326。

方法2

1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-3-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（102 mg, 0.249 mmol）在MeOH（2 ml）中的溶液用2 M HCl溶液（0.125 ml、0.249 mmol）处理并将反应在室温下搅拌5小时，然后允许静置整个周末。

反应混合物在氮气流下浓缩并用碳酸氢钠的饱和水溶液（10 mL）处理并用EtOAc（15 mL）分相。分离有机层，水层用EtOAc（2 x 15 mL）再萃取。合并的有机层经过疏水玻璃料并在减压下浓缩以产生白色固体形式的粗制标题化合物(56 mg)。

LCMS (方法C): Rt = 0.87 min, MH⁺ 326。

水层用DCM（3 x 20 mL）再萃取，合并的有机层经过疏水玻璃料并在减压下浓缩以提供白色固体形式的标题化合物的第二粗制批料（18 mg）。

LCMS (方法C): Rt = 0.87 min, MH⁺ 326。

粗制化合物进行下一反应步骤。

中间体31. 1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-3-(1-(4-甲氧基苄基)-1H-吡唑-4- 基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑

在圆底烧瓶中装载3-(1-(4-甲氧基苄基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（203 mg, 0.626 mmol）、(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)硼酸（120 mg,0.702 mmol）、DMAP（153 mg, 1.252 mmol）和MeCN（6 mL）。反应混合物然后用乙酸铜(II)（114 mg, 0.626 mmol）处理并暴露在空气中在室温下搅拌2小时。

反应混合物用5重量% TMEDA水溶液（25 ml）稀释并用EtOAc（25 ml）分相。分离有机层，水相用另外2等分的EtOAc（25 ml）洗涤。合并的有机层经过疏水玻璃料并在减压下浓缩以产生棕色油形式的粗产物(360 mg)。粗产物通过MDAP（方法A）提纯以产生黄色胶质形式的标题化合物（138 mg, 44%）。

LCMS (方法C): Rt = 1.13 min, MH⁺ 450。

中间体32. 1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-3-(1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢- 1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑

1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-3-(1-(4-甲氧基苄基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（138 mg）在DCM（2 mL）中的溶液用TFA（0.237 mL, 3.07mmol）处理，反应混合物使用微波在70℃下加热1小时。反应混合物用TFA（0.237 mL, 3.07mmol）处理并使用微波在70℃下加热1小时。反应混合物用TFA（0.237 mL, 3.07 mmol）处理并使用微波在70℃下加热1小时。反应混合物用另一份TFA（0.237 mL, 3.07 mmol）处理并使用微波在70℃下加热1小时。反应混合物用另一份TFA（0.237 mL, 3.07 mmol）处理并使用微波在70℃下加热1小时。

反应混合物用碳酸氢钠的饱和水溶液（20 mL）逐滴处理到pH 9。分离所得固体，用水（10 mL）洗涤并溶解在DCM和MeOH的2:1混合物（40 mL）中，然后在减压下浓缩以产生一批产物。碱化的水层用DCM和MeOH的2:1混合物（30 mL）分相。分离有机层，水层用DCM和MeOH的2:1混合物（2 x 30 mL）再萃取。合并的有机层经过疏水玻璃料并在减压下浓缩以产生第二批产物。通过溶解在DCM和MeOH的2:1混合物中并在氮气流下浓缩，合并这两批产物以产生米色固体形式的粗制标题化合物(105 mg)。

LCMS (方法C): Rt = 0.82 min, MH⁺ 330。

粗制化合物不经进一步提纯进行下一反应步骤。

中间体33. N-(5-(3-(1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑- 1-基)-2-甲氧基吡啶-3-基)甲磺酰胺

N-(2-甲氧基-5-(3-(1-(4-甲氧基苄基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲磺酰胺（140 mg）在DCM（1 mL）中的溶液用TFA（1 mL）处理，混合物使用微波在70℃下加热总共3小时。反应混合物使用碳酸氢钠的饱和水溶液（20 mL）淬灭至pH 9。反应混合物用MeOH和DCM的1:1混合物（3 x 20 mL）萃取并分离有机层，经过疏水玻璃料并在减压下浓缩以产生粗制标题化合物(85 mg)。

水层在减压下浓缩以除去大部分有机溶剂，然后经过Isolute 103 Cartridge，用水（两个柱体积）和MeOH（两个柱体积）洗涤。在减压下浓缩溶剂，并将物质与前一批合并以产生粗制标题化合物(137 mg)。

LCMS (方法C): Rt = 0.53 min, MH⁺ 405。

粗制化合物不经进一步提纯进行下一反应步骤。

中间体34. 5-(3-(1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-1- 基)-2-甲氧基烟腈

向2-甲氧基-5-(3-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-1-基)烟腈（49 mg）在MeOH（1.5 mL）中的混合物中加入2 M HCl水溶液（0.060 mL, 0.120 mmol）。反应混合物在氮气下在室温下搅拌整夜并在减压下浓缩。

残留物在碳酸氢钠（10 mL）和EtOAc（10 mL）之间分相。水层用另外的EtOAc（3 x10 mL）萃取，合并的有机层经过疏水玻璃料并在减压下浓缩以产生粗制标题化合物(41mg)。

LCMS (方法C): Rt = 0.82 min和Rt 0.80 min, MH⁺ 337。

化合物的粗制混合物不经进一步提纯进行下一合成步骤。

中间体35. 1-(5-(氟甲基)-6-甲氧基吡啶-3-基)-3-(1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8- 四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑

用TFA（1.4 mL, 18.17 mmol）处理在DCM（1.4 mL）中的1-(5-(氟甲基)-6-甲氧基吡啶-3-基)-3-(1-(4-甲氧基苄基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（191 mg, 0.412 mmol）并使用微波在70℃下加热4小时。

反应混合物用碳酸氢钠的饱和水溶液（20 mL）以逐滴方式处理并用DCM（25 mL）分相。分离有机层，水层用DCM（2 x 25 mL）再萃取。合并的有机层经过疏水玻璃料并在减压下浓缩，以产生灰白色固体形式的粗制标题化合物(177 mg)。

LCMS (方法C): Rt = 0.83 min, MH⁺ 344。

粗制化合物不经进一步提纯进行下一反应步骤。

通用烷基化程序

中间体36. 4-((4-(1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯

在氮气下用NaH（155 mg, 3.88 mmol，60重量%在矿物油中的悬浮液）处理在DMF（5mL）中的1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-3-(1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（400 mg, 1.229 mmol）。反应混合物在室温下搅拌30分钟并用4-(溴甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯（460 mg, 1.654 mmol）处理。反应混合物在室温下搅拌另外15小时。

反应混合物用碳酸氢钠的饱和水溶液（10 mL）以逐滴方式处理并搅拌30分钟。反应混合物用水（20 mL）稀释并用EtOAc（30 mL）分相。分离有机层，水层用EtOAc（2 x 30 mL）再萃取。各萃取物用5重量% LiCl溶液（2 x 20 mL）洗涤。合并的有机层经过疏水玻璃料并在减压下浓缩并干燥以产生棕色油形式的粗制标题化合物（726 mg）。

LCMS (方法C): Rt = 1.25 min, MH⁺ 523。

粗制化合物不经进一步提纯进行下一反应步骤。

中间体37. 3-((4-(1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯

1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-3-(1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（73 mg, 0.112 mmol）和碳酸钾（46.5 mg, 0.337 mmol）合并在DMF（1 mL）中并在氮气下在室温下搅拌30分钟。反应混合物用3-(溴甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯（94 mg,0.337 mmol）处理并搅拌整个周末。

反应混合物用碳酸钾（46.5 mg, 0.337 mmol）和3-(溴甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯（94 mg, 0.337 mmol）处理并在50℃下加热3小时，然后在室温下加热整夜。

反应混合物在50℃下加热7小时，然后用1当量的3-(溴甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯（0.112 mmol）处理并在50℃下加热1小时。反应混合物然后使用微波在50℃下加热1小时，然后在60℃下加热1小时，然后在70℃下加热1小时，然后在80℃下加热1小时，然后在90℃下加热7小时，然后在100℃下加热1小时。

反应混合物用饱和氯化铵溶液（5 mL）处理并用EtOAc（10 mL）分相。分离有机层，水层用EtOAc（2 x 10 mL）再萃取。合并的有机层用5重量% LiCl溶液洗涤。有机层经过疏水玻璃料并浓缩以产生粗制标题化合物(100 mg)。

LCMS (方法C): Rt = 1.26 min, MH⁺ 523。

粗制化合物不经进一步提纯进行下一反应步骤。

中间体38.4-((4-(1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并 [4,5-c]吡唑-3-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯

1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-3-(1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（105 mg, 0.319 mmol）在DMF（2 mL）中的溶液用氮气吹扫，然后用冰冷却。反应混合物用NaH在矿物油中的60%悬浮液（31.9 mg, 0.797 mmol）处理并允许升温到室温。将反应混合物搅拌30分钟并用4-(溴甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯（266 mg, 0.956 mmol）处理。反应在室温下在氮气下搅拌3小时。

反应混合物用冰冷却并用氯化铵水溶液（6 mL）逐滴处理。将混合物搅拌30分钟并用水（15 mL）稀释。反应混合物用EtOAc（25 mL）分相并分离有机层。水层用EtOAc（2 x 25mL）再萃取。分离合并的有机层并用3等分的5重量% LiCl溶液（各30 mL）洗涤。有机层经过疏水玻璃料并在减压下浓缩以提供黄色油形式的粗产物(335 mg)。

粗产物通过MDAP（方法B）提纯以产生黄色胶质形式的标题化合物(100 mg, 54%)。

LCMS (方法C): Rt = 1.22 min, MH⁺ 527。

中间体39. 4-((4-(1-(6-甲氧基-5-(甲基磺酰胺基)吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢- 1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯

使用通用烷基化程序使用N-(5-(3-(1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-1-基)-2-甲氧基吡啶-3-基)甲磺酰胺（115 mg, 0.284 mmol）、NaH（40 mg,60重量%在矿物油中）、DMF（2 mL）和4-(溴甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯（87 mg, 0.313 mmol）制备，只是用氯化铵的饱和水溶液（10 mL）代替碳酸氢钠的饱和水溶液淬灭反应。作为米色油分离粗产物（180 mg）并通过MDAP（方法A）提纯以产生白色固体形式的标题化合物（103mg, 57%）。

LCMS (方法C): Rt = 0.86 min, MH⁺ 602。

中间体40. 3-((4-(1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯

使用通用烷基化程序由1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-3-(1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（150 mg, 0.461 mmol）、NaH（50 mg, 在矿物油上的60重量%悬浮液）、DMF（2.5 mL）和3-(溴甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯（170 mg, 0.645 mmol）制备，只是产物不通过MDAP提纯。作为棕色胶质分离粗制标题化合物（294 mg, >99%）。

LCMS (方法C): Rt = 1.20 min, MH⁺ 509。

中间体41. 1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-3-(1-(吡咯烷-3-基甲基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑

用TFA（1.4 mL, 18.17 mmol）处理在DCM（3 mL）中的3-((4-(1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯（294 mg, 0.578 mmol）并将混合物在室温下搅拌2小时，然后允许静置整个周末。通过逐滴加入碳酸氢钠的饱和水溶液（10 mL）处理反应混合物直至达到pH 9。混合物用水（10 mL）稀释并用DCM（20 mL）分相。分离有机层，水层用DCM（2 x 20 mL）再萃取。合并的有机层经过疏水玻璃料并在减压下浓缩以产生棕色胶质形式的粗制标题化合物（236mg, 85%）。

LCMS (方法C): Rt =1.03 min, MH⁺ 409。

中间体42. 5-(3-(1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-1- 基)-2-甲氧基烟腈和5-(3-(1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-2H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-2- 基)-2-甲氧基烟腈

2-甲氧基-5-(3-(1-(4-甲氧基苄基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-1-基)烟腈和2-甲氧基-5-(3-(1-(4-甲氧基苄基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-2H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-2-基)烟腈（20 mg）的混合物用DCM（0.1 mL）和TFA（0.1mL, 1.298 mmol）处理。反应混合物使用微波在70℃下加热2小时。反应混合物用更多的在DCM（0.5 mL）中的2-甲氧基-5-(3-(1-(4-甲氧基苄基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-1-基)烟腈和2-甲氧基-5-(3-(1-(4-甲氧基苄基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-2H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-2-基)烟腈（183 mg）、接着TFA（0.62 mL）处理，并使用微波在70℃下加热5小时。

反应混合物用DCM（10 mL）稀释并用碳酸氢钠的饱和水溶液以逐滴方式处理直至反应混合物为pH 9。将反应混合物搅拌30分钟，然后用DCM（20 mL）分相。分离有机层，水层用DCM（2 x 20 mL）再萃取。合并的有机层经过疏水玻璃料并在减压下浓缩，以产生浅棕色胶质形式的标题化合物的粗制混合物(240 mg)。

LCMS (方法C): Rt = 0.79 min和0.81 min, MH⁺ 337。

化合物的粗制混合物不经进一步提纯进行下一反应步骤。

中间体43. 4-((4-(1-(5-氰基-6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯和4-((4-(2-(5-氰基-6- 甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-2H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)-1H-吡唑-1-基)甲基) 哌啶-1-甲酸叔丁酯

5-(3-(1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-1-基)-2-甲氧基烟腈和5-(3-(1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-2H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-2-基)-2-甲氧基烟腈（200 mg）在DMF（2 mL）中的混合物用NaH（20 mg在矿物油中的60重量%悬浮液，1.682mmol）处理。反应混合物在室温下在氮气气氛下搅拌30分钟。反应混合物然后用4-(溴甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯（250 mg, 0.899 mmol）处理并搅拌整夜。

反应混合物用氯化铵的饱和水溶液（5 mL）以逐滴方式处理。反应混合物用水（15mL）稀释并用EtOAc（25 mL）分相。分离有机层，水层用EtOAc（2 x 25 mL）再萃取。合并的有机层用5% LiCl溶液（2 x 30 mL）洗涤并经过疏水玻璃料，然后在减压下浓缩以产生粗产物(340 mg)。粗产物通过MDAP（方法A）提纯以产生灰白色固体形式的标题化合物（61 mg,31%）。

LCMS (方法C): Rt =1.22 min, MH⁺ 534。

中间体44. 4-((4-(1-(5-(氟甲基)-6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯

1-(5-(氟甲基)-6-甲氧基吡啶-3-基)-3-(1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（60 mg, 0.175 mmol）用NaH在矿物油中的60重量%悬浮液（13 mg,0.325 mmol）和DMF（1 mL）处理。反应混合物在氮气下搅拌30分钟并用4-(溴甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯（146 mg, 0.524 mmol）处理。反应混合物在氮气下在室温下搅拌18小时。

单独地，将一批1-(5-(氟甲基)-6-甲氧基吡啶-3-基)-3-(1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（117 mg, 0.341 mmol）溶解在DMF（2 mL）中并用NaH在矿物油中的60重量%悬浮液（28.0 mg, 0.699 mmol）处理。反应混合物在氮气下搅拌30分钟，然后用4-(溴甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯（300 mg, 1.078 mmol）处理。反应混合物在氮气下在室温下搅拌3小时。

这两种反应混合物用氯化铵的饱和水溶液（5 mL）淬灭并合并。合并的反应混合物用EtOAc（25 mL）分相。分离有机层，水层用EtOAc（2 x 25 mL）再萃取。合并的有机层用5重量% LiCl溶液（2 x 25 mL）洗涤并经过疏水玻璃料，然后在减压下浓缩，然后干燥。所得固体在EtOAc（25 mL）和水（25 mL）之间分相。分离有机层，水层用EtOAc（2 x 25 mL）再萃取。合并的有机层用5重量% LiCl溶液（25 mL）洗涤并经过疏水玻璃料，然后在减压下浓缩以产生棕色胶质形式的粗产物(454 mg)。

LCMS (方法C): Rt = 1.25 min, MH⁺ 541。

粗制化合物不经进一步提纯进行下一反应步骤。

中间体45. 4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-甲酸乙酯

2-重氮乙酸乙酯（1.4 g, 12.27 mmol）在DMSO（50 mL）中的搅拌溶液在室温下和在氮气气氛下用吡咯烷（0.101 mL, 1.227 mmol）和氧杂环庚烷-4-酮（2.80 g, 24.54mmol，关于制备参见Baldwin, John J.等人，PCT国际申请2007070201）处理。反应混合物在室温下搅拌16小时。

反应混合物用水（500 mL）稀释并用EtOAc（250 mL）分相。分离有机层，水层用EtOAc（250 mL）再萃取。合并的有机层用盐水（50 mL）洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩以产生粗产物。该化合物通过硅胶柱色谱法提纯，用20% EtOAc的石油醚溶液、然后25%EtOAc的石油醚溶液洗脱以产生灰白色固体形式的标题化合物（200 mg, 7%）。

LCMS (方法B): Rt = 1.51 min, MH⁺ 211。

中间体46. 1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5- c]吡唑-3-甲酸乙酯

4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-甲酸乙酯（200 mg, 0.951 mmol）在DCM（20 mL）中的搅拌溶液在室温下和在氧气气氛下用(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)硼酸（238 mg, 1.427 mmol）、乙酸铜(II)（259 mg, 1.427 mmol）和吡啶（0.154 mL, 1.903mmol）处理。反应混合物在室温下搅拌5小时，然后在减压下浓缩。粗制化合物通过硅胶柱色谱法提纯，用15% EtOAc/己烷溶液洗脱以产生灰白色固体形式的粗产物(220 mg)。粗物质通过制备HPLC（方法A）提纯以产生灰白色固体形式的标题化合物（14 mg, 12%）。

LCMS (方法B): Rt = 2.19 min, MH⁺ 332。

中间体47. (4-异丙基哌嗪-1-基)(噁唑-5-基)甲酮

噁唑-5-甲酸（80 mg, 0.708 mmol）、DIPEA（0.124 mL, 0.708 mmol）和1-异丙基哌嗪（0.111 mL, 0.778 mmol）在THF（5 mL）中的混合物用50重量% 2,4,6-三丙基-1,3,5,2,4,6-三氧杂三磷杂环己烷2,4,6-三氧化物溶液（0.463 mL, 0.778 mmol）处理并在室温下搅拌整夜。反应混合物用少量MeOH稀释并直接倒在已用MeOH预调节的SCX-SPE柱(5 g)上。该柱用MeOH洗涤并使用2 M氨/MeOH溶液洗脱产物以产生标题化合物（126 mg, 72%）。

LCMS (方法C): Rt = 0.59 min, MH⁺ 224。

粗制化合物不经进一步提纯进行下一反应步骤。

中间体48. 2-(2-羟基丙-2-基)异烟酸

溶解在水（2 mL）中的2-(4-(羟甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇（50 mg, 0.299 mmol）的溶液用高锰酸钾（0.5 mL, 0.500 mmol）在水（1 mL）中的溶液处理。反应混合物在室温下搅拌1小时并用NaHSO₃水溶液处理，然后用2 M HCl水溶液酸化。反应混合物用EtOAc（20 mL）分相并分离有机层。水层用EtOAc（20 mL）再萃取，合并的有机层经过疏水玻璃料并在减压下浓缩以产生白色固体形式的粗制标题化合物(35 mg)。

LCMS (方法C) Rt = 0.32 min, MH⁺ = 182。

粗制化合物不经进一步提纯进行下一反应步骤。

中间体49. 2-(2-羟基丙-2-基)异烟酸甲酯

2-(2-羟基丙-2-基)异烟酸（35 mg, 0.193 mmol）在甲苯（1 mL）和MeOH（0.500mL）的混合物中的溶液在氮气气氛下用2 M TMS-重氮甲烷的己烷溶液（0.2 mL, 0.400mmol）逐滴处理。反应混合物在室温下搅拌1小时并用几滴AcOH处理并在减压下浓缩以产生黄色油形式的粗制标题化合物(33 mg)。

LCMS (方法C) Rt = 0.67 min, MH⁺ = 196。

粗制化合物不经进一步提纯进行下一反应步骤。

中间体50. 2-(2-羟基丙-2-基)哌啶-4-甲酸甲酯

用氧化铂(IV)（8 mg, 0.035 mmol）处理在AcOH（2.5 mL）中的2-(2-羟基丙-2-基)异烟酸甲酯（33 mg, 0.169 mmol）并在室温下在氢气气氛下在4巴下搅拌2小时，然后在减压下浓缩以产生浅黄色胶质形式的粗制标题化合物（44 mg, 99%）。

粗制化合物不经进一步提纯进行下一反应步骤。

中间体51. 1-苄基-2-(2-羟基丙-2-基)哌啶-4-甲酸甲酯

2-(2-羟基丙-2-基)哌啶-4-甲酸甲酯（165 mg, 0.820 mmol）在MeCN（5 mL）中的溶液在氮气气氛下用碳酸钾（250 mg, 1.809 mmol）、接着苄基溴（0.2 mL, 1.682 mmol）处理并在室温下搅拌整夜。

反应混合物用水（20 mL）处理并用EtOAc（50 mL）分相。分离有机层，水层用EtOAc（50 mL）再萃取。合并的有机层经过疏水玻璃料并在减压下浓缩。将粗制残留物溶解在最小体积的MeOH中并加载到已用MeOH预调节的SPE-SCX柱上。该柱用MeOH洗涤并用2 M氨/MeOH溶液洗脱产物以产生浅黄色胶质形式的粗制标题化合物（216 mg, 90%）。

LCMS (方法C) Rt = 1.08 min, MH⁺ = 292。

粗制化合物不经进一步提纯进行下一反应步骤。

中间体52. 2-(1-苄基-4-(羟甲基)哌啶-2-基)丙-2-醇

1-苄基-2-(2-羟基丙-2-基)哌啶-4-甲酸甲酯（210 mg, 0.721 mmol）在THF（4mL）中的溶液在氮气气氛下用硼氢化锂（68 mg, 3.12 mmol）处理并在室温下搅拌2小时。反应混合物用另一部分硼氢化锂（16 mg, 0.734 mmol）处理并在室温下搅拌3小时。

反应混合物用水（20 mL）处理并搅拌10分钟并用EtOAc（30 mL）分相。分离有机层，水层用EtOAc（30 mL）再萃取。合并的有机层经过疏水玻璃料并在减压下浓缩以产生白色固体形式的粗产物(219 mg)。

将该物质溶解在最小体积的EtOAc中并经过已用MeOH预调节的SPE-SCX柱。该柱用MeOH洗涤并用2 M氨/MeOH溶液洗脱。在减压下浓缩溶剂以产生白色固体形式的粗制标题化合物（140 mg, 63%）。

LCMS (方法C) Rt = 0.83 min, MH⁺ = 264。

粗制化合物不经进一步提纯进行下一反应步骤。

中间体53. 甲磺酸(1-苄基-2-(2-羟基丙-2-基)哌啶-4-基)甲酯

2-(1-苄基-4-(羟甲基)哌啶-2-基)丙-2-醇（60 mg, 0.228 mmol）在THF（2 mL）中的溶液用TEA（0.064 mL, 0.456 mmol）和甲磺酰氯（0.027 mL, 0.342 mmol）处理并在氮气气氛下在室温下搅拌2小时。

反应混合物在冰上冷却并用碳酸氢钠的饱和水溶液（5 mL）处理。溶液用EtOAc（15mL）分相并分离有机层。水层用EtOAc（2 x 15 mL）再萃取，合并的有机层经过疏水玻璃料并在减压下浓缩以产生无色胶质形式的粗制标题化合物(79 mg)。

LCMS (方法C) Rt = 1.07 min, MH⁺ = 342。

粗制化合物不经进一步提纯进行下一反应步骤。

中间体54. 2-(1-苄基-4-((4-(1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢- 1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)哌啶-2-基)丙-2-醇

使用通用烷基化程序使用1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-3-(1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（160 mg, 0.418 mmol）、NaH（在矿物油上的60重量%分散体，50 mg）、DMF（3 mL）和甲磺酸(1-苄基-2-(2-羟基丙-2-基)哌啶-4-基)甲酯（144mg, 0.422 mmol）制备，只是该物质没有通过MDAP提纯。作为棕色胶质分离粗制标题化合物（18 mg, 5%）。

LCMS (方法C) Rt = 1.29 min, MH⁺ = 571。

粗制化合物不经进一步提纯进行下一反应步骤。

中间体55.

将加热干燥的粉状分子筛(3 Å)添加到3-溴-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（200 mg, 0.921 mmol）和1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)-1H-吡唑（513 mg, 1.843 mmol）、三乙胺（0.257 mL, 1.843 mmol）和乙酸铜(II)（167 mg, 0.921 mmol）的混合物中。反应混合物用MeCN（8 mL）和EtOH（0.400 mL）处理并在搅拌下在80℃下加热整夜，然后整个周末。

使反应混合物冷却到室温并经过Celite®筒。该筒用MeOH洗涤，滤液在减压下浓缩以提供深绿色油(687 mg)。粗物质通过硅胶色谱法提纯，用30至100%梯度的环己烷/EtOAc洗脱以产生黄色油形式的（推测）标题化合物的混合物（104 mg）。

LCMS (方法C) Rt = 1.00 min, MH⁺ = 367/369。

该化合物混合物进行下一反应步骤。

中间体56. 3-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-1-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑

(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)硼酸（624 mg, 3.65 mmol）、Xphos Pd G2（100 mg,0.128 mmol）和磷酸钾（775 mg, 3.65 mmol）的混合物在氮气气氛下用3-溴-1-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑和3-溴-2-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-2H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（670 mg）的混合物在脱气二氧杂环己烷（15 mL）中的溶液处理。反应混合物用水（3 mL）处理并在80℃下加热2小时。

反应混合物在减压下浓缩，用水（15 mL）处理并用EtOAc（25 mL）分相。分离有机层，水层用EtOAc（2 x 25 mL）再萃取。合并的有机层经过疏水玻璃料并在减压下浓缩以提供棕色油形式的粗产物。粗产物通过在C18柱上的反相色谱法提纯，用40至95%梯度的碳酸氢铵/MeCN溶液和水洗脱以产生标题化合物（247 mg, 32%）。

LCMS (方法C) Rt = 1.11 min, MH⁺ = 414。

中间体57. 3-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-1-(1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢- 1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑

3-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-1-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（247 mg, 0.597 mmol）在MeOH（4 mL）中的溶液用2M HCl水溶液（0.299 mL, 0.597 mmol）处理并在室温下搅拌整夜。

反应混合物在氮气流下浓缩，用碳酸氢钠的饱和水溶液（10 mL）处理并用EtOAc（10 mL）分相。分离有机层，水层用EtOAc（2 x 10 mL）再萃取。合并的有机层在减压下浓缩以提供白色固体形式的粗制标题化合物(172 mg)。

LCMS (方法C) Rt = 0.87 min, MH⁺ = 330。

粗物质不经进一步提纯进行下一反应步骤。

中间体58. 4-((4-(3-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并 [4,5-c]吡唑-1-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯

使用通用烷基化程序由3-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-1-(1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（110 mg, 0.332 mmol）、NaH（33 mg, 在矿物油上的60%分散体）、DMF（4 mL）和4-(溴甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯（231 mg, 0.830 mmol）制备，只是使用氯化铵的饱和水溶液代替碳酸氢钠的饱和水溶液淬灭反应。在MDAP（方法A）后作为棕色固体分离标题化合物（191 mg, 98%）。

LCMS (方法C) Rt = 1.27 min, MH⁺ = 527。

中间体59. 1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-3-(1-(4-甲氧基苄基)-1H-吡唑-4- 基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑和2-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-3-(1-(4- 甲氧基苄基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-2H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑

3-(1-(4-甲氧基苄基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（1.006 g, 3.10 mmol）、(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)硼酸（0.585g, 3.42 mmol）、CuOAc（0.563 g, 3.10 mmol）和DMAP（0.758 g, 6.20 mmol）在MeCN（30 mL）中的混合物暴露在空气中在室温下搅拌整夜。反应混合物用5重量% DMEDA水溶液（30 mL）处理并用EtOAc（30mL）分相。水层用EtOAc（30 mL）再萃取，合并的有机层经过疏水玻璃料，然后在减压下浓缩以产生粗产物。粗产物通过硅胶柱色谱法提纯，用30至60%梯度的EtOAc/环己烷洗脱以提供标题化合物的混合物(1.2 g)。

LCMS (方法C) Rt = 1.11 min和1.14 min, MH⁺ = 450。

部分纯化的化合物混合物进行下一反应步骤。

中间体60. 1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-3-(1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢- 1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑和2-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-3-(1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8- 四氢-2H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑

1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-3-(1-(4-甲氧基苄基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑和2-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-3-(1-(4-甲氧基苄基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-2H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（1.2 g, 2.67 mmol）的混合物在DCM（8 mL）中的溶液用TFA（8.00 mL）处理并使用微波在70℃下加热3小时。

反应混合物用碳酸氢钠的饱和水溶液（20 mL）处理并在室温下搅拌1小时。混合物使用DCM（30 mL）分相并分离有机层。水层用DCM（5 x 20 mL）再萃取，合并的有机层经过疏水玻璃料并在减压下浓缩以提供产物的粗制混合物。

粗产物通过硅胶柱色谱法提纯，用0至50%梯度的EtOAc在EtOH和环己烷中的3:1溶液洗脱以提供标题化合物的混合物(698 mg)。

LCMS (方法C) Rt = 0.79 min和0.83 min, MH⁺ = 330。

该化合物混合物进行下一反应步骤。

中间体61. 3-((4-(1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并 [4,5-c]吡唑-3-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯和3-((4-(2-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-2H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯

使用通用烷基化程序由1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-3-(1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑和2-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-3-(1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-2H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（461 mg）、NaH（112 mg, 在矿物油上的60%分散体）、DMF（10 mL）和3-(溴甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯（924 mg, 3.50 mmol）的混合物制备，只是粗物质通过硅胶柱色谱法使用0至100%梯度的EtOAc/环己烷提纯以产生白色固体形式的标题化合物的混合物(658 mg)。

LCMS (方法C) Rt = 1.17 min和1.19 min, MH⁺ = 513。

该化合物混合物进行下一反应步骤。

通用Boc-脱保护程序

中间体62. 1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-3-(1-(哌啶-4-基甲基)-1H-吡唑- 4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑

4-((4-(1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯（726 mg, 1.389 mmol）用DCM（5 mL）和TFA（2.140 mL）处理。反应混合物在室温下搅拌15小时。

反应混合物用碳酸氢钠饱和水溶液（20 mL）处理以达到pH 9并用DCM（25 mL）分相。分离有机层，水层用DCM（2 x 15 mL）再萃取。合并的有机层经过疏水玻璃料并在减压下浓缩以产生棕色固体形式的粗制标题化合物(642 mg)。

LCMS (方法C): Rt = 1.06 min, MH⁺ 423。

粗制化合物不经进一步提纯进行下一反应步骤。

中间体63. 1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-3-(1-(吡咯烷-3-基甲基)-1H-吡唑- 4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑和2-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-3-(1- (吡咯烷-3-基甲基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-2H-氧杂䓬并[4,5-c]

使用通用Boc-脱保护程序由3-((4-(1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯和3-((4-(2-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-2H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯（658 mg）、DCM（7 mL）和TFA（3.96 mL）的混合物制备，只是反应保持3小时。作为浅黄色玻璃状固体分离标题化合物的混合物(483 mg)。

LCMS (方法C) Rt = 0.84 min和0.91 min, MH⁺ = 413。

化合物的粗制混合物不经进一步提纯进行下一反应步骤。

中间体64. 4-羟基-4-((4-(1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H- 氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯

1-氧杂-6-氮杂螺[2.5]辛烷-6-甲酸叔丁酯（53 mg, 0.249 mmol）、1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-3-(1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（53 mg,0.163 mmol）和碳酸铯（83 mg, 0.255 mmol）的混合物在氮气气氛下用DMF（1 mL）处理。反应混合物使用微波在100℃下加热1小时。

反应混合物用碳酸氢钠的饱和水溶液（15 mL）处理并用EtOAc（15 mL）分相。分离有机层，水层用EtOAc（2 x 15 mL）再萃取。合并的有机层用5% LiCl溶液（15 mL）洗涤并经过疏水玻璃料并在减压下浓缩以产生棕色胶质形式的粗产物(245 mg)。

单独地，1-氧杂-6-氮杂螺[2.5]辛烷-6-甲酸叔丁酯（420 mg, 1.969 mmol）、1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-3-(1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（449 mg, 1.379 mmol）和碳酸铯（642 mg, 1.969 mmol）的混合物在氮气气氛下用DMF（10 mL）处理。反应混合物使用微波在100℃下加热1.5小时。

反应混合物用碳酸氢钠的饱和水溶液（30 mL）处理并用EtOAc（30 mL）分相。分离有机层，水层用EtOAc（2 x 30 mL）再萃取。合并的有机层用5% LiCl溶液（30 mL）洗涤并经过疏水玻璃料并在减压下浓缩以产生另一批粗产物(817 mg)。

合并这两批粗物质并通过硅胶柱色谱法使用0至100%梯度的EtOAc/环己烷提纯以产生白色固体形式的标题化合物（501 mg, 45%）。

LCMS (方法C): Rt = 1.14 min, MH⁺ 539。

中间体65. 4-氟-4-((4-(1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯

4-羟基-4-((4-(1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯（166 mg, 0.308 mmol）在DCM（2 mL）中的混合物使用干冰/丙酮浴冷却到-78℃。Deoxo-Fluor®在THF中的50%溶液（0.159 mL, 0.370 mmol）用DCM（2 mL）稀释并在氮气气氛下添加到搅拌的反应混合物中。将反应混合物搅拌24小时。

反应混合物用水（10 mL）逐滴处理并搅拌整个周末。反应混合物然后用DCM（4 x15 mL）萃取，经过疏水玻璃料并在减压下浓缩以产生棕色胶质形式的粗制标题化合物(153mg)。

LCMS (方法C): Rt = 1.25 min, MH⁺ 541。

粗制化合物不经进一步提纯进行下一反应步骤。

中间体66. 1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-3-(三甲基甲硅烷基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑

3-(三甲基甲硅烷基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（500 mg, 2.377mmol）、(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)硼酸（595 mg, 3.57 mmol）、DMAP（581 mg, 4.75mmol）、乙酸铜(II)（648 mg, 3.57 mmol）和MeCN（25 mL）的混合物暴露在空气中在40℃下搅拌3小时。

反应混合物用5重量% DMEDA水溶液（50 mL）处理并用EtOAc（3 x 50 mL）萃取。合并的有机层在减压下浓缩以提供橙色油。将粗物质溶解在EtOAc（15 mL）中并用2 M HCl水溶液（2 x 15 mL）洗涤。分离有机层，经过疏水玻璃料并在减压下浓缩以提供橙色固体形式的标题化合物(743 mg)。

LCMS (方法C): Rt = 1.35 min, MH⁺ 332。

该化合物不经进一步提纯进行下一反应步骤。

中间体67. 3-溴-1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4, 5-c]吡唑

3-溴-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（500 mg, 2.303 mmol）、(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)硼酸（472 mg, 2.76 mmol）、乙酸铜(II)（628 mg, 3.46 mmol）和DMAP（563 mg, 4.61 mmol）在MeCN（5 ml）中的混合物暴露在空气中在80℃下搅拌5小时。

用5重量% TMEDA水溶液（150 mL）淬灭反应并用EtOAc（2 x 100 mL）萃取。合并的有机层用盐水（100 mL）和0.5 M HCl溶液（2 x 100 mL）洗涤。有机层经过疏水玻璃料并在减压下浓缩。将残留物再溶解在EtOAc（50 mL）中并用碳酸氢钠的饱和水溶液（2 x 100 mL）洗涤。有机层经过疏水玻璃料并在减压下浓缩以产生黄色固体形式的粗产物(706 mg)。粗产物通过硅胶柱色谱法提纯，用0至100%梯度的EtOAc/环己烷洗脱以产生白色固体形式的标题化合物（222 mg）。

LCMS (方法C): Rt = 1.12 min, MH⁺ 342/344。

中间体68. 4-((4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)-1H-吡唑-1- 基)甲基)哌啶

4-((4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯（5 g, 12.78 mmol）在1,4-二氧杂环己烷（50 mL）中的搅拌溶液在氮气气氛下冷却到0℃并用4 M HCl/二氧杂环己烷溶液（11.18 mL, 44.7 mmol）以逐滴方式处理5分钟。反应混合物在25℃下搅拌16小时并在减压下浓缩。所得残留物用DCM（50 mL）处理并在减压下浓缩两次以产生无色胶质形式的标题化合物(6 g)。

LCMS (方法B): Rt = 1.41 min, MH⁺ 292。

粗制化合物不经进一步提纯进行下一反应步骤。

中间体69. 1-异丙基-4-((4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)- 1H-吡唑-1-基)甲基)哌啶

4-((4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)哌啶（1 g, 3.43 mmol）在无水MeCN（12 mL）中的搅拌溶液在氮气气氛下用STAB（1.092 g,5.15 mmol）处理。在15分钟后，加入丙酮（0.399 g, 6.87 mmol）并将反应搅拌16小时。

反应混合物经Celite®垫过滤并用MeCN（10 mL）洗涤。滤液经硫酸钠干燥并浓缩以获得黄色液体形式的粗产物(700 mg)。

单独地，4-((4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)哌啶（5 g, 17.17 mmol）在无水MeCN（60 mL）中的第二搅拌溶液在氮气气氛下用STAB（5.46 g, 25.8 mmol）处理。在15分钟后，反应混合物用丙酮（1.994 g, 34.3 mmol）处理。反应混合物在室温下搅拌16小时。

反应混合物经Celite®垫过滤并用MeCN（10 mL）洗涤。滤液经硫酸钠干燥并浓缩以获得黄色液体形式的粗产物(4.1 g)。

单独地，4-((4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)哌啶（5 g, 17.17 mmol）在无水MeCN（60 mL）中的第三搅拌溶液在氮气气氛下用三乙酰氧基硼氢化钠（5.46 g, 25.8 mmol）处理。在15分钟后，反应混合物用丙酮（1.994 g,34.3 mmol）处理并搅拌16小时。

反应混合物经Celite®垫过滤并用MeCN（10 mL）洗涤。滤液经硫酸钠干燥并浓缩以获得黄色液体形式的粗产物(5 g)。

这三批粗物质的9克部分通过用正己烷（100 mL）研制提纯并在真空下干燥以产生浅黄色液体形式的标题化合物(6.05 g)。

LCMS (方法B): Rt = 1.40 min, MH⁺ 334。

中间体70. 3-溴-1-(1-((1-异丙基哌啶-4-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8- 四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑

用3-溴-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（0.5 g, 2.303 mmol）、1-异丙基-4-((4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)哌啶（1.535 g, 4.61 mmol）、乙酸铜(II)（0.418 g, 2.303 mmol）和三乙胺（0.642 ml, 4.61mmol）、接着MeCN（22 ml）和EtOH（1.10 ml）处理微波小瓶。密封反应容器并在80℃下加热整夜。

反应混合物用EtOAc（200 mL）和TMEDA水溶液（5重量%，100 mL）稀释。混合物经Celite®筒过滤并用另外的EtAc洗涤该筒以除去残余沉淀物。分离有机层，水层用EtOAc（50 mL）萃取。合并的有机层经过疏水玻璃料并在减压下浓缩。

粗产物通过硅胶柱色谱法提纯，用含三乙胺（1%）的EtOAc / EtOH的3:1混合物和环己烷使用0至100%梯度洗脱以产生棕色油形式的标题化合物（158 mg, 16%）。

LCMS (方法C): Rt = 1.01 min, MH⁺ 422/424。

中间体71. (2R,4r,6S)-4-((4-(1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢- 1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)-2,6-二甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯

使用通用Suzuki偶联程序由3-溴-1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（222 mg, 0.649 mmol）、(2R,4r,6S)-2,6-二甲基-4-((4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯（408mg, 0.973 mmol）、Xphos Pd G2（35.7 mg, 0.045 mmol）、1,4-二氧杂环己烷（0.4 ml）和水（0.1 ml）制备，只是该物质经Celite®过滤，用EtOAc（100 mL）处理并用碳酸氢钠溶液（100mL）和盐水（100 mL）洗涤，然后通过MDAP（方法A）提纯以产生白色固体形式的标题化合物（280 mg, 39%）。

LCMS (方法C): Rt = 1.33 min, MH-Boc⁺ 455。

中间体72. (2R,4r,6S)-4-((4-(3-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-1-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)-2,6-二甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯

使用通用Suzuki偶联程序使用(2R,4r,6S)-4-((4-(3-溴-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-1-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)-2,6-二甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯（100 mg,0.197 mmol）、(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)硼酸（65.7 mg, 0.393 mmol）、磷酸钾（83 mg,0.393 mmol）、Xphos Pd G2（10.83 mg, 0.014 mmol）、1,4-二氧杂环己烷（0.4 ml）和水（0.100 ml）制备，只是粗产物通过MDAP（方法A）提纯以产生清澈的玻璃油形式的标题化合物（33 mg, 31%）。

LCMS (方法C): Rt = 1.39 min, MH⁺ 551。

中间体73. (2R,4r,6S)-4-((4-(1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)-2,6-二甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯

用1,4-二氧杂环己烷（1 mL）和水（0.43 mL）处理(2R,4r,6S)-2,6-二甲基-4-((4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯（84 mg, 0.200 mmol）、Xphos Pd G2（5 mg, 0.006 mmol）、3-溴-1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（54 mg, 0.128 mmol）和磷酸钾（170mg, 0.801 mmol）的混合物。将反应混合物置于氮气气氛下并使用微波在100℃下加热30分钟。

反应混合物经Celite®筒过滤，用EtOAc（10 mL）洗涤，且滤液用饱和碳酸氢钠溶液（10 mL）和盐水（10 mL）洗涤。有机层经过疏水玻璃料并在减压下浓缩以产生124 mg粗产物。

单独地，用1,4-二氧杂环己烷（3 mL）和水（1.3 mL）处理(2R,4r,6S)-2,6-二甲基-4-((4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯（273 mg, 0.651 mmol）、Xphos Pd G2（25 mg, 0.032 mmol）、3-溴-1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（186 mg, 0.440 mmol）和磷酸钾（185 mg, 0.872 mmol）的混合物。将反应混合物置于氮气气氛下并使用微波在100℃下加热30分钟。

反应混合物经Celite®筒过滤，用EtOAc（50 mL）洗涤，且滤液用饱和碳酸氢钠溶液（50 mL）和盐水（50 mL）洗涤。有机层经过疏水玻璃料并在减压下浓缩以产生406 mg粗产物。

合并这两批粗产物并通过硅胶柱色谱法使用0至100%梯度的3:1 EtOAc/EtOH溶液和EtOAc提纯以产生棕色油形式的标题化合物(447 mg)。

LCMS (方法C) : Rt = 1.37 min, MH⁺ = 551。

中间体74. 3-(4-(1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并 [4,5-c]吡唑-3-基)-1H-吡唑-1-基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯

使用通用烷基化程序使用1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-3-(1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（250 mg, 0.759 mmol）、NaH（76 mg, 在矿物油上的60%分散体）、DMF（5 mL）和3-溴吡咯烷-1-甲酸叔丁酯（380 mg, 1.518 mmol）制备，只是该物质使用反相色谱法提纯，用40至95%梯度的用氨水调节到pH 10的10 mM碳酸氢铵溶液和乙腈洗脱。作为无色油分离标题化合物（100 mg, 21%）。

LCMS (方法C): Rt = 1.18 min, MH⁺ 499。

中间体75. 1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-3-(1-(吡咯烷-3-基)-1H-吡唑-4- 基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑

使用通用Boc-脱保护程序由3-(4-(1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)-1H-吡唑-1-基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯（100 mg,0.201 mmol）、DCM（2 mL）和TFA（0.6 mL）制备，只是反应在室温下搅拌1小时后完成。作为无色胶质分离粗制标题化合物(74 mg)。

LCMS (方法C): Rt = 0.86 min, MH⁺ 399。

粗制化合物不经进一步提纯进行下一反应步骤。

中间体76. 3-氟-4-((4-(1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯

使用通用烷基化程序由1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-3-(1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（85 mg, 0.258 mmol）、NaH（26 mg, 在矿物油中的60%悬浮液）、DMF（2 mL）和3-氟-4-(((甲基磺酰基)氧基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯（201 mg,0.645 mmol）制备，只是该物质通过使用C18柱的反相色谱法提纯，用50至95%梯度的碳酸氢铵/MeCN溶液洗脱以产生灰白色固体形式的标题化合物(75 mg)。

LCMS (方法C): Rt = 1.21 min, MH⁺ 545。

中间体77. (3R,4S)-3-氟-4-((4-(1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯

使用通用烷基化程序由1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-3-(1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（85 mg, 0.258 mmol）、NaH（26 mg, 在矿物油中的60重量%悬浮液）、DMF（2.5 mL）和(3R,4S)-3-氟-4-(((甲基磺酰基)氧基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯（241 mg, 0.774 mmol）制备，只是该物质通过使用C18柱的反相色谱法提纯，用50至95%梯度的碳酸氢铵/MeCN洗脱以产生灰白色固体形式的标题化合物（103 mg, 59%）。

LCMS (方法C): Rt = 1.24 min, MH⁺ 545。

中间体78. 4-(((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯

咪唑（0.696 g, 10.22 mmol）在DMF（20 mL）中的溶液用4-(羟甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯（2.0 g, 9.29 mmol）和TBDPS-Cl（2.386 mL, 9.29 mmol）处理。反应混合物在室温下搅拌整夜。反应使用冰浴冷却并用氯化铵的饱和水溶液（30 mL）和碳酸氢钠（15 mL）淬灭。反应混合物用EtOAc（50 mL）分相，水层用EtOAc（2 x 50 mL）萃取。合并的有机层用5%LiCl水溶液（3 x 20 mL）洗涤，经过疏水玻璃料并在减压下浓缩以产生粗产物(4.35 g)。粗产物通过使用C18硅胶柱的反相色谱法提纯，用50至95%梯度的MeCN和10 mM碳酸氢铵水溶液洗脱以产生无色油形式的标题化合物（3.444 g, 82%）。

LCMS (方法C): Rt = 1.81 min, MH⁺-Boc 354。

中间体79. 4-(((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)甲基)-2-(2-羟基丙-2-基)哌啶- 1-甲酸叔丁酯

将4-(((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯（2745 mg, 6.05mmol）和无水TMEDA（1.278 mL, 8.47 mmol）在无水乙醚（50 mL）中的溶液冷却到-78℃并用仲丁基锂（7.78 mL, 10.89 mmol）缓慢处理。反应混合物在-78℃下搅拌2小时并用无水丙酮（1.333 mL, 18.15 mmol）处理和在-78℃下搅拌2小时。

反应混合物用水（20 ml）处理并用EtOAc（3 x 20 ml）萃取。将反应混合物浓缩并通过使用0至100%梯度的EtOAc/环己烷的硅胶柱色谱法提纯以产生标题化合物（1585 mg,51%）。

LCMS (方法C): Rt = 1.76 min, MH⁺-Boc 412。

中间体80. 3-((4-(1-(5-氰基-6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯

使用通用烷基化程序由5-(3-(1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-1-基)-2-甲氧基烟腈（41 mg）、NaH（12 mg, 在矿物油中的60重量%悬浮液，0.300mmol）、DMF（2.3 mL）和3-(溴甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯（101 mg, 0.382 mmol）制备以产生标题化合物（26 mg, 41%）。

LCMS (方法C): Rt = 1.15 min, MH⁺ 520。

该物质进行下一反应步骤。

中间体81. 2-甲氧基-5-(3-(1-(吡咯烷-3-基甲基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-1-基)烟腈

使用通用Boc-脱保护程序由3-((4-(1-(5-氰基-6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯（26mg）、DCM（0.75 mL）、TFA（0.25 mL）制备，只是反应混合物使用微波在70℃下加热30分钟。粗制分离标题化合物(35 mg)。

LCMS (方法C): Rt = 0.90 min, MH⁺ 420。

粗物质不经进一步提纯进行下一合成步骤。

中间体82. 5-氧代氧杂环庚烷-4-甲酸乙酯

在氮气气氛下在-30℃下向二氢-2H-吡喃-4(3H)-酮（0.923 mL, 9.99 mmol）在无水乙醚（50 mL）中的搅拌溶液中缓慢加入BF₃OEt₂（1.899 mL, 14.98mmol），接着加入2-重氮乙酸乙酯（1.328 mL, 10.99 mmol）在乙醚（10 mL）中的溶液。反应混合物在-10℃下搅拌5.5小时。用饱和碳酸氢钠（60 mL）淬灭反应。溶液然后用乙酸乙酯（60 mL）分相，水层用另外的乙酸乙酯（2 x 60 mL）萃取。合并有机层，用盐水（2 x 50 mL）洗涤，经过疏水玻璃料，然后在减压下浓缩。粗产物通过硅胶柱色谱法提纯，用环己烷 / EtOAc梯度（0至80%）洗脱以产生标题化合物（1.139 g, 52%）。

中间体83. ((2R,6S)-2,6-二甲基四氢-2H-吡喃-4-基)甲醇

NaBH₄（3.25 g, 86 mmol）在EtOH（150 mL）中的搅拌溶液在0℃下用(2R,6S)-2,6-二甲基四氢-2H-吡喃-4-甲醛（12.2 g, 86 mmol）处理并在室温下搅拌1小时。反应混合物在减压下浓缩，用1 N HCl（30 mL）中和，用DCM（2 x 200 mL）萃取，合并的有机层用盐水洗涤并经Na₂SO₄干燥，过滤并在减压下浓缩以产生粗产物。

粗产物通过硅胶柱色谱法提纯，用20% EtOAc/己烷溶液洗脱以产生浅黄色液体形式的标题化合物（4.3 g, 26%）。

中间体84. (2R,6S)-4-(溴甲基)-2,6-二甲基四氢-2H-吡喃

用PBr₃（0.654 mL, 6.93 mmol）处理((2R,6S)-2,6-二甲基四氢-2H-吡喃-4-基)甲醇（1 g, 6.93 mmol）在DCM（10 mL）中的溶液。反应混合物在室温下搅拌4小时。反应混合物用水（50 mL）稀释并用DCM（50 mL x 3）萃取。分离有机层并用饱和碳酸氢钠溶液（30 mL）洗涤，经硫酸钠干燥并在减压下浓缩以产生黄色油形式的粗产物(650 mg)。

中间体85. 1-(((2R,6S)-2,6-二甲基四氢-2H-吡喃-4-基)甲基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)-1H-吡唑

4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)-1H-吡唑（600 mg, 3.09mmol）、Cs₂CO₃ (1511 mg, 4.64 mmol)在MeCN（20 mL）中的溶液在氮气气氛下用(2R,6S)-4-(溴甲基)-2,6-二甲基四氢-2H-吡喃（640 mg, 3.09 mmol）处理。反应混合物在80℃下搅拌24小时。

反应混合物用水（50 mL）稀释并用DCM（50 mL x 3）萃取。合并的有机层用饱和碳酸氢钠溶液（25 mL）洗涤，经硫酸钠干燥，然后过滤并在减压下蒸发以产生黄色油形式的粗产物。粗产物通过硅胶柱色谱法提纯，用石油醚洗脱以产生无色液体形式的标题化合物（300 mg, 25%）。

LCMS (方法B) : Rt = 2.72 min, MH⁺ = 321。

中间体86. N-(5-(3-溴-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-1-基)-2-甲氧基吡啶-3-基)甲磺酰胺

3-溴-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（1 g, 4.61 mmol）、(6-甲氧基-5-(甲基磺酰胺基)吡啶-3-基)硼酸（2.83 g, 11.52 mmol）、TEA（1.284 mL, 9.21 mmol）和乙酸铜(II)（0.837 g, 4.61 mmol）的混合物在室温下在氧气气氛下在4 Ǻ分子筛(2 g)存在下搅拌。

反应混合物经Celite®过滤，并用MeCN（30 mL x 2）洗涤Celite®。滤液在减压下浓缩。粗产物（860 mg）使用反相色谱法提纯，使用C18柱，使用甲酸铵的水溶液（0.01 M）和MeCN。作为黄色固体分离标题化合物（160 mg, 7%）。

LCMS (方法B) : Rt = 1.93 min, MH⁺ = 417/419。

中间体87. 4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-醇

在密封小管中在氮气气氛下用三乙胺（1.05 mL, 7.53 mmol）和水合肼（1.0 mL,7.13 mmol）处理5-氧代氧杂环庚烷-4-甲酸乙酯（1162 mg, 6.24 mmol）在无水EtOH（12mL）中的溶液。反应混合物在80℃下搅拌2.5小时。使反应混合物冷却并用丙酮（5 mL）淬灭，剧烈搅拌2小时，然后在减压下浓缩以提供粗制标题化合物（973 mg, >99%）。

LCMS (方法A) : Rt = 0.32 min, MH⁺ 155。

粗物质不经进一步提纯用于下一反应步骤。

中间体88. 3-((三异丙基甲硅烷基)氧基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c] 吡唑

在氮气气氛下向4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-醇（417 mg, 2.70mmol）在无水DCM（20 mL）中的搅拌溶液中加入咪唑（225 mg, 3.31 mmol）和氯三异丙基甲硅烷（0.61 mL, 2.85 mmol）。反应混合物在室温下搅拌1小时。然后将水（10 mL）添加到反应混合物中并将该溶液搅拌10分钟。混合物用水稀释并用DCM萃取。合并的有机层经过疏水玻璃料，蒸发至干并在高真空线路上进一步干燥整夜以产生标题化合物(785 mg)。

LCMS (方法C): Rt = 1.44 min, MH⁺ = 311。

粗物质不经进一步提纯用于下一反应步骤。

中间体89. N-(2-甲氧基-5-(3-((三异丙基甲硅烷基)氧基)-4,5,7,8-四氢-1H- 氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-1-基)吡啶-3-基)-N-(4-甲氧基苄基)甲磺酰胺

将乙酸铜(II)（62 mg, 0.341 mmol）添加到3-((三异丙基甲硅烷基)氧基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（90 mg, 0.290 mmol）、N-(2-甲氧基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)吡啶-3-基)-N-(4-甲氧基苄基)甲磺酰胺和(6-甲氧基-5-(N-(4-甲氧基苄基)甲基磺酰胺基)吡啶-3-基)硼酸酯的混合物（260 mg）和DMAP（70mg, 0.573 mmol）在无水MeCN（3 mL）中的溶液中。反应混合物暴露在空气中在室温下搅拌18小时。反应混合物用水（5 mL, 5% TMEDA）淬灭，水层用EtOAc（4 x 10 mL）萃取。合并的有机层经过疏水玻璃料并在减压下浓缩。粗产物通过硅胶柱色谱法提纯，用0至50%梯度的EtOAc和环己烷洗脱以产生粗产物。粗产物通过使用C18硅胶柱的反相柱色谱法再提纯，用80-95%梯度的MeCN(+0.1%铵)/水（10mM碳酸氢铵）洗脱以产生标题化合物（24 mg, 12%）。

LCMS (方法C) : Rt = 1.73 min, MH⁺ 631。

中间体90. 1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-3-((三异丙基甲硅烷基)氧基)-4, 5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑

将乙酸铜(II)（292 mg, 1.610 mmol）添加到3-((三异丙基甲硅烷基)氧基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（500 mg, 1.610 mmol）、2-甲氧基-3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)吡啶（505 mg, 2.027 mmol）和DMAP（394 mg,3.23 mmol）在无水MeCN（7 mL）中的溶液中。反应混合物暴露在空气中在室温下搅拌24小时。反应混合物用水（5 mL, 5% TMEDA）淬灭，水层用EtOAc（5 x 10 mL）萃取。合并的有机层经过疏水玻璃料并在减压下浓缩。粗产物通过使用C18硅胶柱的反相色谱法提纯，用80-95%梯度的MeCN(+0.1%铵)/水（+0.1%碳酸氢铵）洗脱以产生标题化合物（571 mg, 74%）。

LCMS (方法C) : Rt = 1.82 min, MH⁺ = 432。

中间体91. 1-(5-(氟甲基)-6-甲氧基吡啶-3-基)-3-((三异丙基甲硅烷基)氧基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑

将乙酸铜(II)（36 mg, 0.198 mmol）添加到3-((三异丙基甲硅烷基)氧基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（50 mg, 0.161 mmol）、3-(氟甲基)-2-甲氧基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)吡啶（48 mg, 0.180 mmol）和DMAP（43 mg,0.352 mmol）在无水MeCN（1.5 mL）中的溶液中。反应混合物暴露在空气中在室温下搅拌18小时。反应混合物用水（2 mL, 5% TMEDA）淬灭，水层用EtOAc（4 x 5 mL）萃取。合并的有机层经过疏水玻璃料并在减压下浓缩。粗产物通过MDAP（方法A）提纯以产生标题化合物（35mg, 46%）。

LCMS (方法C) : Rt = 1.80 min, MH⁺ = 450。

中间体92. 1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-3-((三异丙基甲硅烷基)氧基)-4,5, 7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑

将乙酸铜(II)（31 mg, 0.171 mmol）添加到3-((三异丙基甲硅烷基)氧基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（50mg, 0.161 mmol）、3-氟-2-甲氧基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)吡啶（59mg, 0.233 mmol）和DMAP（43 mg, 0.352mmol）在无水MeCN（1 mL）中的溶液中。反应混合物暴露在空气中在室温下搅拌15小时。反应混合物用水（2 mL, 5% TMEDA）淬灭，水层用EtOAc（4 x 5 mL）萃取。合并的有机层经过疏水玻璃料并在减压下浓缩。粗产物通过MDAP（方法A）提纯以产生标题化合物（35 mg, 47%）。

LCMS (方法C) : Rt = 1.78 min, MH⁺ = 436。

中间体93. 2-甲氧基-5-(3-((三异丙基甲硅烷基)氧基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-1-基)烟腈

将乙酸铜(II)（29.2 mg, 0.161 mmol）添加到3-((三异丙基甲硅烷基)氧基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（50 mg, 0.161 mmol）、(5-氰基-6-甲氧基吡啶-3-基)硼酸（40.1 mg, 0.225 mmol）和DMAP（39.3 mg, 0.322 mmol）在无水乙腈（1 mL）中的溶液中。反应混合物暴露在空气中在室温下搅拌15小时。反应混合物用水（2 mL, 5% TMEDA）淬灭，水层用EtOAc（5 x 10 mL）萃取。合并的有机层经过疏水玻璃料，在减压下浓缩并通过MDAP（方法A）提纯以产生标题化合物（15 mg, 20%）。

LCMS (方法C) : Rt = 1.76 min, MH⁺ = 443。

中间体94. 1-(2-甲氧基嘧啶-5-基)-3-((三异丙基甲硅烷基)氧基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑

将(2-甲氧基嘧啶-5-基)硼酸（50 mg, 0.325 mmol）、3-((三异丙基甲硅烷基)氧基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（100 mg, 0.322 mmol）和DMAP（79 mg,0.644 mmol）的混合物合并在MeCN（1 mL）中。反应混合物用乙酸铜(II)（88 mg, 0.483mmol）处理并暴露在空气中在40℃下搅拌整夜。将反应混合物冷却到室温，用氢氧化铵（2mL）稀释，用水（5 mL）处理并用乙酸乙酯（3 x 5 mL）萃取。有机层用盐水（5 mL）洗涤，经过疏水玻璃料并在减压下除去溶剂。残留物吸收到fluorisil上并通过使用10至40%梯度的乙酸乙酯/环己烷的硅胶柱色谱法提纯以产生标题化合物（45 mg, 33%）。

LCMS (方法A) : Rt = 1.70 min, MH⁺ = 419。

中间体95. N-(5-(3-羟基-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-1-基)-2-甲氧基吡啶-3-基)-N-(4-甲氧基苄基)甲磺酰胺

N-(2-甲氧基-5-(3-((三异丙基甲硅烷基)氧基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-1-基)吡啶-3-基)-N-(4-甲氧基苄基)甲磺酰胺（100 mg, 0.143 mmol）在无水THF（2 mL）中的搅拌溶液在氮气气氛下在0℃下用1 M TBAF的THF溶液（0.143 mL, 0.143mmol）处理。将反应混合物搅拌90分钟。加入饱和NaHCO₃（5 mL），混合物用EtOAc（3 x 10mL）萃取。合并的有机层经过疏水玻璃料并在减压下浓缩以产生标题化合物（18 mg, 73%纯度，通过LCMS测得）。

LCMS (方法C) : Rt = 0.78 min, MH⁺ = 475。

粗物质不经进一步提纯用于下一反应步骤。

中间体96. 1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5- c]吡唑-3-醇

1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-3-((三异丙基甲硅烷基)氧基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（36 mg, 0.083 mmol）在无水THF（1 mL）中的搅拌溶液在氮气气氛下在0℃下用1 M TBAF的THF溶液（0.100 mL, 0.100 mmol）处理。将反应搅拌1.5小时。加入饱和NaHCO₃并将混合物转移至分液漏斗。水层用DCM洗涤，合并合并的有机层，经过疏水玻璃料并在减压下浓缩。残留物在高真空线路上进一步干燥5天以提供标题化合物（16 mg,0.058 mmol，82%纯度，通过LCMS测得）。

LCMS (方法C) : Rt = 0.64 min, MH⁺ = 276。

粗物质不经进一步提纯用于下一反应步骤。

中间体97. 1-(5-(氟甲基)-6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并 [4,5-c]吡唑-3-醇

1-(5-(氟甲基)-6-甲氧基吡啶-3-基)-3-((三异丙基甲硅烷基)氧基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（71 mg, 0.158 mmol）在无水THF（2 mL）中的搅拌溶液在氮气气氛下在0℃下用1 M TBAF的THF溶液（0.160 mL, 0.160 mmol）处理。将反应混合物搅拌2小时。加入饱和NaHCO₃（5 mL）并将混合物转移至分液漏斗。水层用EtOAc（4 x 10 mL）萃取，合并的有机层经过疏水玻璃料并在减压下浓缩以产生标题化合物（66 mg, 93%纯度，通过LCMS测得）。

LCMS (方法C) : Rt =0.59 min, MH⁺ = 294。

粗物质不经进一步提纯用于下一步骤。

中间体98. 1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c] 吡唑-3-醇

1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-3-((三异丙基甲硅烷基)氧基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（198 mg, 0.455 mmol）在无水THF（5 mL）中的搅拌溶液在氮气气氛下在0℃下用1 M TBAF的THF溶液（0.455 mL, 0.455 mmol）处理。将反应混合物搅拌2小时。加入饱和NaHCO₃（5mL）并将混合物转移至分液漏斗。水层用EtOAc（4 x 10 mL）萃取，合并的有机层经过疏水玻璃料并在减压下浓缩以产生标题化合物（165 mg, 75%纯度，通过NMR测得（数据未显示））。

LCMS (方法C) : Rt = 0.57 min, MH⁺ = 280。

粗物质不经进一步提纯用于下一步骤。

中间体99. 5-(3-羟基-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-1-基)-2-甲氧基烟腈

2-甲氧基-5-(3-((三异丙基甲硅烷基)氧基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-1-基)烟腈（59 mg, 0.133 mmol）在无水THF（1 mL）中的搅拌溶液在氮气气氛下在0℃下用1 M TBAF的THF溶液（0.133 mL, 0.133 mmol）处理。将反应混合物搅拌2小时。加入饱和NaHCO₃（1 mL）并将混合物转移至分液漏斗。水层用EtOAc（4 x 10 mL）萃取，合并的有机层经过疏水玻璃料并在减压下浓缩以产生标题化合物（32 mg, 85%，通过NMR测得（数据未显示））。

LCMS (方法C) : Rt = 0.58 min, MH⁺ = 287。

粗物质不经进一步提纯用于下一反应步骤。

中间体100. 1-(2-甲氧基嘧啶-5-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑- 3-醇

在0℃下将1 M TBAF的THF溶液（0.107 mL, 0.107 mmol）添加到1-(2-甲氧基嘧啶-5-基)-3-((三异丙基甲硅烷基)氧基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（45mg, 0.107 mmol）在THF（0.5 mL）中的溶液中4小时。反应混合物用水（10 mL）稀释，用2 M盐酸酸化至pH 4并用乙酸乙酯（3 x 10 mL）萃取。有机层用盐水（10 mL）洗涤，经过疏水玻璃料并在减压下浓缩以产生标题化合物（24 mg, 93%纯度，通过LCMS测得）。

LCMS (方法A) : Rt = 0.58 min, MH⁺ = 263。

粗物质不经进一步提纯用于下一步骤。

中间体101. N-(5-(3-(2-(4-(2-羟基丙-2-基)哌啶-1-基)乙氧基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-1-基)-2-甲氧基吡啶-3-基)-N-(4-甲氧基苄基)甲磺酰胺

向微波小瓶装载2-(三丁基正膦亚基)乙腈（0.014 mL, 0.053 mmol）和2-(1-(2-羟乙基)哌啶-4-基)丙-2-醇（7 mg, 0.037 mmol）。密封小瓶并用氮气吹扫。用N-(5-(3-羟基-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-1-基)-2-甲氧基吡啶-3-基)-N-(4-甲氧基苄基)甲磺酰胺（18 mg, 0.027 mmol）在甲苯（0.5 mL）中的溶液处理反应混合物。反应混合物在100℃下加热2小时，然后在氮气流下浓缩。将残留物溶于水（5 mL）中并用EtOAc（5 mL）分相。水层用另外的EtOAc（3 x 5 mL）萃取，合并的有机层经过疏水玻璃料并在减压下浓缩。粗产物通过MDAP（方法A）提纯以产生标题化合物（8 mg, 44%）。

LCMS (方法C) : Rt = 1.17 min, MH⁺ = 644。

中间体102. 2-甲氧基-5-(3-(1-(哌啶-4-基甲基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-1-基)烟腈

使用通用Boc-脱保护程序由4-((4-(1-(5-氰基-6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯（61 mg,0.114 mmol）、DCM（1 mL）和TFA（0.4 mL）制备，只是该反应在室温下搅拌2小时后完成。作为棕色固体分离标题化合物（47 mg, 74%）。

LCMS (方法C): Rt = 0.97 min, MH⁺ 434。

粗产物不经进一步提纯进行下一合成步骤。

中间体103. 1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-3-(1-(哌啶-3-基甲基)-1H-吡唑- 4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑

使用通用Boc-脱保护程序由3-((4-(1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯（126 mg,0.241 mmol）、DCM（2 mL）和TFA（0.186 mL）制备，以产生标题化合物（72 mg, 71%）。

LCMS (方法C): Rt = 0.95 min, MH⁺ 423。

粗产物不经进一步提纯进行下一合成步骤。

中间体104. 1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-3-(1-(哌啶-4-基甲基)-1H-吡唑- 4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑

使用通用Boc-脱保护程序由4-((4-(1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯（717 mg,0.823 mmol）、DCM（5 mL）和TFA（0.634 mL）制备以产生标题化合物（470 mg, >99%）。

LCMS (方法C): Rt = 1.00 min, MH⁺ 423。

粗产物不经进一步提纯进行下一合成步骤。

中间体105. 1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-3-(1-(哌啶-4-基甲基)-1H-吡唑-4- 基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑

使用通用Boc-脱保护程序由4-((4-(1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯（96 mg,0.182 mmol）、DCM（1.5 mL）和TFA（0.6 mL）制备，只是该反应在4小时后完成。作为米色油分离标题化合物（92 mg, 89%）。

LCMS (方法C): Rt = 0.88 min, MH⁺ 427。

粗产物不经进一步提纯进行下一合成步骤。

中间体106. N-(2-甲氧基-5-(3-(1-(哌啶-4-基甲基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8- 四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲磺酰胺

使用通用Boc-脱保护程序由4-((4-(1-(6-甲氧基-5-(甲基磺酰胺基)吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯（103 mg, 0.171 mmol）、DCM（1.5 mL）和TFA（0.6 mL）制备，只是相当大量的产物保留在碳酸氢钠水相中。水相因此经过Isolute 103柱(2 g)，其用水、然后MeOH洗涤。将来自MeOH洗涤的残留物与获自有机层的残留物合并以产生灰白色固体形式的标题化合物（84mg, 93%）。

LCMS (方法C): Rt = 0.56 min, MH⁺ 502。

粗产物不经进一步提纯进行下一合成步骤。

中间体107. 1-(5-(氟甲基)-6-甲氧基吡啶-3-基)-3-(1-(哌啶-4-基甲基)-1H- 吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑

使用通用Boc-脱保护程序使用4-((4-(1-(5-(氟甲基)-6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯（454 mg, 0.840 mmol）、DCM（3 mL）和TFA（2 mL）制备，只是该反应在2小时后完成（257mg）。作为棕色胶质分离标题化合物（257 mg, 55%）。

LCMS (方法C): Rt = 0.92 min, MH⁺ 441。

粗产物不经进一步提纯进行下一合成步骤。

中间体108. 3-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-1-(1-(哌啶-4-基甲基)-1H-吡唑- 4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑

使用通用Boc-脱保护程序由4-((4-(3-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-1-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯（55 mg,0.105 mmol）、DCM（1 mL）和TFA（0.5 mL）制备，只是反应混合物在70℃下加热15分钟，届时反应完成并产生标题化合物（116 mg, >99%）。

LCMS (方法C) Rt = 0.92 min, MH⁺ = 424。

粗产物不经进一步提纯进行下一合成步骤。

中间体109. 1-(6-甲氧基吡啶-3-基)-3-(三甲基甲硅烷基)-4,5,7,8-四氢-1H- 氧杂䓬并[4,5-c]吡唑

将3-(三甲基甲硅烷基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（2.0 g, 9.51mmol）、(6-甲氧基吡啶-3-基)硼酸（2.91 g, 19.02 mmol）、二乙酰氧基铜（2.07 g, 11.41mmol）和DMAP（1.39 g, 11.41 mmol）合并在MeCN（30 ml）中并暴露在空气中在40℃下搅拌18小时。反应混合物用5重量% TMEDA水溶液（150 mL）处理并用EtOAc（100 mL）分相。分离有机层并用5重量% TMEDA水溶液（100 mL）进一步洗涤。合并的水层用EtOAc（2 x 50 mL）萃取。合并的有机萃取物经过疏水玻璃料并在减压下除去溶剂。残留物通过硅胶柱色谱法提纯，用EtOAc/环己烷（0至50%）洗脱以产生白色固体形式的标题化合物（1.69 g）。

LCMS (方法C): Rt = 1.23 min, MH⁺ = 318。

中间体110. 3-溴-1-(6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c] 吡唑

向1-(6-甲氧基吡啶-3-基)-3-(三甲基甲硅烷基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（1.65 g, 5.20 mmol）在MeCN（20 mL）中的溶液中加入N-溴代琥珀酰亚胺（1.11 g, 6.24 mmol）。混合物在氮气气氛下搅拌3小时。反应混合物用MeOH（12 mL）处理并在减压下浓缩，然后溶解在EtOAc（100 mL）中。有机相用碳酸氢钠的饱和水溶液（2 x 100mL）洗涤。合并的水相用EtOAc（2 x 50 mL）萃取。合并的有机萃取物经过疏水玻璃料并在减压下浓缩以提供橙色固体形式的标题化合物（1.87 g）。

LCMS (方法C): Rt = 1.05 min, MH⁺ = 324/326。

粗产物不经进一步提纯进行下一合成步骤。

中间体111. 1-(4-(1-(6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5- c]吡唑-3-基)吡啶-2-基)乙酮

将XPhos（11 mg, 0.023 mmol）、Xphos Pd G2（19mg, 0.024 mmol）、磷酸三钾（177mg, 1.018 mmol）和1-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)吡啶-2-基)乙-1-酮（201 mg, 0.407 mmol）添加到微波小瓶中。加入3-溴-1-(6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（110 mg, 0.339 mmol）在EtOH（0.8 mL）和水（0.8 mL）中的溶液。密封小瓶，抽空并用氮气吹扫，然后反应混合物使用微波在100℃下加热1小时。反应混合物用EtOAc（80 mL）处理，混合物用2 M HCl水溶液（2 x 80 mL）萃取。通过加入氢氧化钾丸粒将水相碱化至~pH 9，然后用EtOAc（2 x 100 mL）萃取。有机相经过疏水玻璃料并在减压下除去溶剂以产生标题化合物（174 mg）。

LCMS (方法C): Rt = 1.01 min, MH⁺ = 365。

中间体112. 1-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)吡啶-2-基) 乙-1-酮

向微波小瓶装载在1,4-二氧杂环己烷（6 mL）中的1-(4-溴吡啶-2-基)乙-1-酮（203 mg, 1.01 mmol）、4,4,4',4',5,5,5',5'-八甲基-2,2'-二(1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷)（335 mg, 1.32 mmol）、PdCl₂(dppf)-DCM（48 mg, 0.06 mmol）和乙酸钾（310 mg, 3.16mmol）。密封小瓶，抽空并用氮气吹扫，然后使用微波在100℃下加热90分钟。在减压下除去溶剂并使残留物在EtOAc（50 mL）和水（50 mL）之间分相。分离水相并用EtOAc（3 x 50 mL）萃取。合并的有机萃取物经过疏水玻璃料并在减压下除去溶剂以产生标题化合物（319mg）。

LCMS (方法C): Rt = 0.52 min, MH⁺ = 248。

粗产物不经进一步提纯进行下一合成步骤。

中间体113. 1-(4-(1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并 [4,5-c]吡唑-3-基)吡啶-2-基)乙-1-酮

将1-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)吡啶-2-基)乙-1-酮（542 mg, 2.192 mmol）、3-溴-1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（500 mg, 1.461 mmol）、磷酸三钾（764 mg, 4.38 mmol）和Xphos Pd G2（80mg, 0.102 mmol）添加到微波小瓶中。加入EtOH（4mL）和水（4 mL）并密封小瓶，抽空并用氮气吹扫，然后反应混合物使用微波在100℃下加热1小时。反应混合物经硅胶塞过滤，用EtOAc洗涤，然后用另外的EtOAc（200 mL）稀释。有机相用2 M HCl水溶液（2 x 100 mL）萃取。通过加入氢氧化钠丸粒将水相碱化至~pH 9，然后用EtOAc（2 x 100 mL）萃取。有机相经过疏水玻璃料并在减压下除去溶剂。残留物通过硅胶柱色谱法提纯，用EtOAc/环己烷（0至100%）洗脱以产生无色油形式的两批标题化合物（87 mg和215 mg）。

LCMS (方法C): Rt = 1.09 min, MH⁺ = 383。

中间体114. 1-(4-(1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)吡啶-2-基)乙酮

将3-溴-1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（500 mg, 1.478 mmol）、1-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)吡啶-2-基)乙-1-酮（438 mg, 1.774 mmol）、磷酸三钾（772 mg, 4.44 mmol）和Xphos Pd G2（81mg, 0.103 mmol）添加到微波小瓶中。加入EtOH（4mL）和水（4 mL）并密封小瓶，抽空并用氮气吹扫，然后反应混合物使用微波在100℃下加热1小时。反应混合物经Celite®垫过滤，用EtOAc洗涤，然后用另外的EtOAc（200 mL）稀释。有机相用2 M HCl水溶液（2 x 100 mL）萃取。通过加入氢氧化钠丸粒将水相碱化至~pH 9，然后用EtOAc（2 x 100 mL）萃取。有机相经过疏水玻璃料并在减压下除去溶剂。残留物通过硅胶柱色谱法提纯，用EtOAc/环己烷（0至100%）洗脱以产生白色固体形式的两批标题化合物（143 mg和347 mg）。

LCMS (方法C): Rt = 1.13 min, MH⁺ = 379。

中间体115. 4-((4-(3-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-1-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯

3-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-1-(1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（19 mg, 0.058 mmol）在DMF（0.5 mL）中的溶液在氮气气氛下在冰上冷却，然后用NaH在矿物油中的60%悬浮液（6 mg, 0.150 mmol）处理并使其恢复到室温。将反应混合物搅拌30分钟并用4-(溴甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯（48 mg, 0.173 mmol）处理。反应在氮气气氛下在室温下搅拌3小时。

反应混合物在冰上冷却并逐滴用氯化铵水溶液（5 mL）处理并搅拌30分钟。反应混合物用水（10 mL）稀释并用EtOAc（15 mL）分相。分离有机层，水层用EtOAc（2 x 15 mL）萃取。合并的有机层用5重量% LiCl溶液（3 x 20 mL）洗涤。分离有机层并经过疏水玻璃料并在减压下浓缩以产生粗产物(63 mg)。混合物通过MDAP（方法A）提纯以产生标题化合物（21mg, 62%）。

LCMS (方法C) Rt = 1.30 min, MH⁺ = 523。

中间体116. 5-(3-(1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-1- 基)-2-甲氧基烟腈

将粗制2-甲氧基-5-(3-(1-(4-甲氧基苄基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-1-基)烟腈（174 mg, 0.168 mmol）溶解在DCM（4 mL）中并用TFA（4mL）处理。反应混合物分两份使用微波在70℃下加热3小时。用碳酸氢钠（3 mL）淬灭反应并在室温下搅拌1小时，然后静置整夜。合并溶液并用DCM（3 x 20 mL）萃取，使水相达到20mL。合并的有机层经过疏水玻璃料并在减压下浓缩以产生粗制5-(3-(1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-1-基)-2-甲氧基烟腈。粗物质通过硅胶柱色谱法部分提纯，用0至50%梯度的EtOH/EtOAc（3:1）和环己烷洗脱以产生部分纯化的5-(3-(1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-1-基)-2-甲氧基烟腈。

中间体117. 4-((4-(1-(5-氰基-6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯

粗制5-(3-(1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-1-基)-2-甲氧基烟腈（226 mg）在DMF（4 mL）中搅拌整夜。将反应混合物冷却到0℃并小心地用氢化钠（44.0 mg, 1.834 mmol）处理，然后允许在氮气气氛下升温至室温30分钟。反应混合物用4-(溴甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯（510 mg, 1.834 mmol）处理并在室温下搅拌3小时。然后使反应混合物静置5天并用饱和氯化铵溶液（3 mL）淬灭。混合物用水（10 mL）处理并用EtOAc（3x 15 mL）萃取。合并的有机层用5% LiCl水溶液（3 x 10 mL）洗涤，然后经过疏水玻璃料并在减压下浓缩以产生粗制4-((4-(1-(5-氰基-6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯（400 mg）。

中间体118. 2-甲氧基-5-(3-(1-(哌啶-4-基甲基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-1-基)烟腈和2-甲氧基-5-(3-(1-(哌啶-4-基甲基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-2H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-2-基)烟腈

粗制4-((4-(1-(5-氰基-6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯（400 mg）在DCM（4 mL）中用TFA（0.492 mL, 6.39 mmol）处理并在室温下搅拌1小时，然后静置5天。反应混合物用碳酸氢钠的饱和水溶液处理直至达到pH 9。反应混合物用3等分的DCM（各15 mL）萃取，分离有机层并经过疏水玻璃料并在减压下浓缩以提供粗产物。

将粗产物溶解在DMSO和MeOH的1:1混合物（2 mL）中的尝试失败，因此浓缩混合物。混合物用MeCN（5 mL）处理并通过使用C18硅胶柱的反相色谱法提纯，用MeCN的水溶液洗脱，用甲酸（30至85% MeCN + 0.1%甲酸）酸化以产生2-甲氧基-5-(3-(1-(哌啶-4-基甲基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-1-基)烟腈（246 mg）。

部分纯化的化合物混合物进行下一反应步骤。

将粗制2-甲氧基-5-(3-(1-(哌啶-4-基甲基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-1-基)烟腈（123 mg）溶解在丙酮（1 mL）中并在氮气气氛下在室温下搅拌2小时。反应混合物在60℃下加热2小时并静置整个周末。混合物小心地用三乙酰氧基硼氢化钠（60.1 mg, 0.284 mmol）处理并在氮气气氛下在室温下搅拌4小时。在2小时后，加入少量DMF以改进溶解度。将反应混合物搅拌整夜并加入另外的三乙酰氧基硼氢化钠（60.1mg, 0.284 mmol）。将反应混合物搅拌3小时并用碳酸氢钠水溶液（2 mL）处理，然后在室温下搅拌整夜。反应混合物用碳酸氢钠（5 mL）和EtOAc（10 mL）分相。分离有机层，水层用EtOAc（2 x 10 mL）再萃取。合并的有机层经过疏水玻璃料并在减压下浓缩以提供粗产物（50 mg）。粗产物通过MDAP（方法C）提纯以产生标题化合物（19 mg）。

LCMS (方法C): Rt = 0.63 min, MH⁺ 476。

中间体119. 2-甲氧基-5-(3-(1-(4-甲氧基苄基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-1-基)烟腈

乙酸铜（349 mg, 1.921 mmol）、3-(1-(4-甲氧基苄基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（623 mg, 1.921 mmol）、2-甲氧基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)烟腈（500 mg, 1.921 mmol）和DMAP（469 mg, 3.84 mmol）在MeCN（16 mL）中的混合物暴露在空气中在40℃下搅拌整夜。将反应加热5小时，然后静置整个周末。反应用水（25 mL）稀释并通过在减压下浓缩减少体积。所得溶液在5% DMEDA溶液存在下用EtOAc（3 x 25 mL）萃取。合并的有机层经过疏水玻璃料并在减压下浓缩。粗产物用在MeCN（16 mL）中的DMAP（469 mg, 3.84 mmol）、CuOAc（349 mg, 1.921 mmol）、2-甲氧基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)烟腈（500 mg, 1.921 mmol）处理。反应混合物在40℃下加热7小时，然后在室温下加热整夜。反应混合物在减压下浓缩并在水（25mL）和EtOAc（4 x 25 mL）之间分相，在水相中存在5% DMEDA。合并的有机层经过疏水玻璃料并在减压下浓缩。粗物质通过使用C18柱的反相色谱法部分提纯，用30至85%梯度的MeCN溶液（+0.1%甲酸/水）和0.1%甲酸洗脱以产生部分纯化的2-甲氧基-5-(3-(1-(4-甲氧基苄基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-1-基)烟腈（633 mg）。该物质直接用于下一步骤。

中间体120. 5-(3-(1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-1- 基)-2-甲氧基烟腈

粗制2-甲氧基-5-(3-(1-(4-甲氧基苄基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-1-基)烟腈（20 mg）用DCM（0.1 mL）和TFA（0.1 mL, 1.298 mmol）处理。反应混合物使用微波在70℃下加热2小时。反应混合物用更多在DCM（0.5 mL）中的粗制2-甲氧基-5-(3-(1-(4-甲氧基苄基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-1-基)烟腈（183 mg）、接着TFA（0.62 mL）处理并使用微波在70℃下加热5小时。

反应混合物用DCM（10 mL）稀释并用碳酸氢钠的饱和水溶液以逐滴方式处理直至反应混合物为pH 9。将反应混合物搅拌30分钟，然后用DCM（20 mL）分相。分离有机层，水层用DCM（2 x 20 mL）再萃取。合并的有机层经过疏水玻璃料并在减压下浓缩以产生浅棕色胶质形式的粗制5-(3-(1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-1-基)-2-甲氧基烟腈(240 mg)。

粗物质不经进一步提纯进行下一反应步骤。

中间体121. 3-((4-(1-(5-氰基-6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯

5-(3-(1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-1-基)-2-甲氧基烟腈（100 mg）在DMF（1.4 mL）中在0℃下用氢化钠在矿物油中的60重量%悬浮液（14.3mg, 0.357 mmol）处理并在氮气气氛下搅拌1小时。反应混合物用3-(溴甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯（124 mg, 0.446 mmol）处理并在氮气气氛下在室温下搅拌整个周末。

反应混合物用饱和氯化铵溶液（5 mL）处理并萃取到乙酸乙酯（3 x 10 mL）中。分离有机层并用5重量% LiCl溶液洗涤。溶剂经过疏水玻璃料并浓缩以产生粗制3-((4-(1-(5-氰基-6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯（193 mg）。

LCMS (方法C) Rt = 1.21 min, MH⁺ = 534。

粗物质不经进一步提纯进行下一反应步骤。

中间体122. 2-甲氧基-5-(3-(1-(哌啶-3-基甲基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-1-基)烟腈

用TFA（0.294 mL, 3.82 mmol）处理3-((4-(1-(5-氰基-6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯在DCM（3 mL）中的溶液。反应混合物在室温下搅拌5小时，然后整夜。

反应混合物用碳酸氢钠的饱和水溶液（2 mL）处理并剧烈搅拌2小时。加入另外1毫升碳酸氢钠的饱和水溶液，混合物用DCM（15 mL）稀释并加入更多碳酸氢钠的饱和水溶液以使总量达到15 mL。分离有机层，水层用DCM（2 x 15 mL）再萃取。合并的有机层经过疏水玻璃料并在减压下浓缩以提供粗产物。粗产物通过MDAP（方法A）提纯以产生2-甲氧基-5-(3-(1-(哌啶-3-基甲基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-1-基)烟腈（73 mg）。

2-甲氧基-5-(3-(1-(哌啶-3-基甲基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-1-基)烟腈（73 mg, 0.168 mmol）在DMF（0.75 mL）和丙酮（1 mL）中的溶液在密封小瓶中在氮气气氛下搅拌整夜。反应混合物用STAB（71.4 mg, 0.337 mmol）处理并搅拌3小时。用碳酸氢钠水溶液（2 mL）淬灭反应并剧烈搅拌整个周末。混合物用碳酸氢钠水溶液（10 mL）和EtOAc（10 mL）分相，并用另外的EtOAc（2 x 10 mL）萃取。合并的有机层经过疏水玻璃料并在减压下浓缩以产生粗产物(47 mg)。将粗产物置于真空炉中3小时，然后置于氮气流下整夜以除去残余DMF。分离粗制标题化合物(47 mg)。

LCMS (方法A) Rt = 0.65 min, MH⁺ = 476。

中间体123. (R)-1-(4-溴吡啶-2-基)乙-1-醇

向EasyMax反应容器中加入酶KRED-P1-F02（可获自Codexis，60.5 mg, 30.1mmol）、NADP+（61 mg, 30.1 mmol）和异丙醇（15 mL）。溶液在30℃下搅拌10分钟。加入1-(4-溴吡啶-2-基)乙-1-酮（6.03 g, 30.1 mmol）在0.1 M磷酸钾溶液（45 mL）中的溶液并将反应在30℃下搅拌26小时。加入EtOAc（40 mL）并分离各层。水相用另外的乙酸乙酯（2 x 40mL）萃取。合并的有机物用水（20 mL）洗涤并用MgSO₄干燥，然后过滤并在减压下浓缩。将残留物溶于少量DCM中并在减压下除去溶剂以产生标题化合物（4.88 g）。

LCMS (方法C) Rt = 0.69 min, MH⁺ = 202/204. ). 通过手性GC得出的对映体纯度 = >99.0% e.e。

中间体124. 甲磺酸(R)-1-(4-溴吡啶-2-基)乙酯

在0℃下在氮气气氛下向(R)-1-(4-溴吡啶-2-基)乙-1-醇（4.88 g, 24.15 mmol）在DCM（60 mL）中的溶液中加入DIPEA（8.44 mL, 48.3 mmol）和甲磺酸酐（6.31 g, 36.2mmol）。将反应混合物搅拌1小时，然后用DCM（50 mL）稀释并用水（50 mL）、然后饱和NaHCO₃水溶液（50 mL）洗涤。合并的水相用DCM（50 mL）萃取。合并的有机相经过疏水玻璃料并在减压下除去溶剂以产生标题化合物（6.897 g）。

LCMS (方法C) Rt = 0.85 min, MH⁺ = 280/282。

中间体125. (2S,6R)-4-((S)-1-(4-溴吡啶-2-基)乙基)-1,2,6-三甲基哌嗪

甲磺酸(R)-1-(4-溴吡啶-2-基)乙酯（3.78 g, 13.49 mmol）、(2S,6R)-1,2,6-三甲基哌嗪（2.076 g, 16.19 mmol）和DIPEA（2.83 mL, 16.19 mmol）在DCM（40 mL）中的混合物在氮气气氛下在室温下搅拌整夜。加入(2S,6R)-1,2,6-三甲基哌嗪（2.076 g, 16.19mmol）并继续搅拌整夜。混合物用DCM（50 mL）稀释并用饱和NaHCO₃水溶液（30 mL）洗涤。有机相经过疏水玻璃料并在减压下除去溶剂以提供橙色油。粗物质通过在硅胶上的色谱法提纯，用20-100% 3:1 EtOH:EtOAc(+0.1% NEt₃)/环己烷洗脱以产生标题化合物（3.00 g）。

LCMS (方法C) Rt = 0.95 min, MH⁺ = 312/314。

中间体126. (S)-1-(1-(4-溴吡啶-2-基)乙基)-4-甲基哌嗪

甲磺酸(R)-1-(4-溴吡啶-2-基)乙酯（488 mg, 1.742 mmol）、1-甲基哌嗪（0.290mL, 2.61 mmol）和DIPEA（0.456 mL, 2.61 mmol）在DCM（10 mL）中的混合物在氮气气氛下在室温下搅拌整夜。加入1-甲基哌嗪（0.290 mL, 2.61 mmol）并继续搅拌6小时。加入1-甲基哌嗪（0.290 mL, 2.61 mmol）并继续搅拌整夜。加入2M HCl水溶液并分离有机相。水相用另外的DCM（3 x 10 mL）洗涤。通过加入2M NaOH水溶液使水相达到pH 12。水相用DCM（3 x30 mL）萃取。合并的有机萃取物用水（20 mL）、然后盐水（20 mL）洗涤，经过疏水玻璃料干燥并在减压下浓缩以提供浅橙色油，其在高真空线路上干燥整夜以产生标题化合物（351mg）。

LCMS (方法A) Rt = 0.38 min, MH⁺ = 284/286。

中间体127. (2S,6R)-1,2,6-三甲基-4-((S)-1-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)吡啶-2-基)乙基)哌嗪

(2S,6R)-4-((S)-1-(4-溴吡啶-2-基)乙基)-1,2,6-三甲基哌嗪（1.51 g, 4.84mmol）、双(频哪醇合)二硼（1.80 g, 7.09 mmol）、乙酸钾（1.40 g, 14.27 mmol）和PdCl2(dppf)-CH2Cl2加合物（0.191 g, 0.234 mmol）在1,4-二氧杂环己烷（15 mL）中的混合物在搅拌下用氮气脱气15分钟。反应混合物在微波中在100℃下加热1小时。使反应混合物经过Celite®，用EtOAc洗涤。在减压下除去溶剂并将残留物溶于水（50 mL）和EtOAc（50 mL）中。加入盐水（20 mL）并分离各层。分离水相，有机相再用水（30 mL）洗涤。将一半水相加载到已用MeOH、然后水预调节的ISOLUTE® 103柱(5 g)上。该柱用水（1 CV）、然后MeOH（2 CV）洗脱。将水性级分与剩余水相合并，并分配在已用MeOH、然后水预调节的2 x Isolute 103柱(5 g)之间。该柱用水（1 CV）、然后MeOH（2 CV）洗脱。合并所有甲醇级分并在减压下浓缩，然后在高真空线路上干燥30分钟以产生标题化合物（1.78 g）。

中间体128. (S)-1-甲基-4-(1-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2- 基)吡啶-2-基)乙基)哌嗪

(S)-1-(1-(4-溴吡啶-2-基)乙基)-4-甲基哌嗪（351 mg, 1.235 mmol）、4,4,4',4',5,5,5',5'-八甲基-2,2'-二(1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷)（470 mg, 1.853 mmol）、乙酸钾（364 mg, 3.71 mmol）和PdCl2(dppf)-CH2Cl2加合物（50.4 mg, 0.062 mmol）在1,4-二氧杂环己烷（4 mL）中的混合物在搅拌下用氮气脱气10分钟。混合物然后在微波中在100℃下加热1小时。使反应混合物经过Celite®，用EtOAc洗涤。在减压下除去溶剂，残留物在高真空线路上干燥以提供粗制标题化合物(763 mg)。该物质直接用于下一步骤。

中间体129. 甲磺酸(R)-1-(4-(1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢- 1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)吡啶-2-基)乙酯

在0℃下向(R)-1-(4-(1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)吡啶-2-基)乙醇（2 g, 5.26 mmol）在DCM（20 mL）中的搅拌溶液中加入DIPEA（1.836 mL, 10.51 mmol）、接着甲磺酰氯（0.614 mL, 7.89 mmol）。反应混合物在氮气下在0-10℃之间搅拌3小时。反应混合物用水淬灭并萃取到DCM（3 x 30 mL）中，经硫酸钠干燥并在减压下浓缩。粗产物预吸附在硅胶(100-200目，15g)上并通过在硅胶上的正相柱色谱法提纯，用100% EtOAc洗脱以产生标题化合物（1.7 g）。

LCMS (方法D): Rt = 2.33 min, MH⁺ 459。

中间体130. 甲磺酸1-(4-(1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)吡啶-2-基)乙酯

在0℃下向1-(4-(1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)吡啶-2-基)乙醇（1.97 g, 5.13 mmol）和DIPEA（2.7 mL, 15.4 mmol）在DCM（50 mL）中的搅拌溶液中逐滴加入甲磺酰氯（0.8 mL, 10.27 mmol）。将反应混合物升温至室温并搅拌3小时。将反应混合物冷却到 0℃并用饱和NaHCO₃水溶液（20 mL）淬灭。分离有机相，水相进一步用DCM（20 mL）萃取。合并的有机萃取物经硫酸钠干燥并在减压下浓缩。粗产物通过在硅胶上的正相柱色谱法提纯，用40-100% EtOAc/己烷、然后0-20% MeOH/DCM洗脱以产生标题化合物（1.82 g）。

LCMS (方法E): Rt = 0.89 min, MH⁺ 463。

中间体131. 4-(1-羟乙基)哌啶-1-甲酸叔丁酯

在0℃下在氮气气氛下将二碳酸二叔丁酯（1.858 g, 8.51 mmol）逐滴添加到碳酸氢钠（0.715 g, 8.51 mmol）和1-(哌啶-4-基)乙-1-醇（1 g, 7.74 mmol）在水（10 mL）和1,4-二氧杂环己烷（10 mL）中的溶液中。使反应升温至室温并搅拌18小时。该反应混合物用水（100 mL）稀释和用DCM（100 mL）萃取。水层用另外的DCM（3 x 50mL）萃取，合并的有机萃取物经过疏水玻璃料干燥。在减压下除去溶剂以提供粗制标题化合物(1.87 g)。该物质直接用于下一步骤。

中间体132. 4-(1-((甲基磺酰基)氧基)乙基)哌啶-1-甲酸叔丁酯

在0℃下在氮气气氛下向4-(1-羟乙基)哌啶-1-甲酸叔丁酯（805 mg, 3.51 mmol）和三乙胺（0.979 mL, 3.86 mmol）在DCM（10 mL）中的溶液中加入甲磺酰氯（0.301 mL,3.86 mmol）。使反应混合物保持搅拌4小时。反应混合物用乙醚（30 mL）稀释并相继用1MHCl水溶液（20 mL）、饱和NaHCO₃水溶液（20 mL）和盐水（10 mL）洗涤。有机相经过疏水玻璃料并在减压下除去溶剂以提供粗制标题化合物(980 mg)。该物质直接用于下一步骤。

中间体133. (S)-4-(1-羟乙基)哌啶-1-甲酸叔丁酯

向二乙基苯胺-硼烷络合物（9.39 mL, 52.8 mmol）在THF（15 mL）中的溶液中加入(R)-1-甲基-3,3-二苯基四氢-1H,3H-吡咯并[1,2-c][1,3,2]氧氮硼杂环戊烯（1 M在THF中，4.40 mL，4.40 mmol）。反应混合物在氮气气氛下在室温下搅拌90分钟。在冰浴中将混合物冷却到5℃，然后经20分钟逐滴加入在THF（90 mL）中的4-乙酰基哌啶-1-甲酸叔丁酯（10g, 44.0 mmol）。反应在融化的冰浴中搅拌1.5小时，温度升至17℃。用MeOH（30 mL）淬灭反应并搅拌60分钟。在减压下除去溶剂并使残留物静置整夜，然后溶于EtOAc（80 mL）中并用5%柠檬酸水溶液（2 x 80 mL）、然后盐水（80 mL）洗涤。有机相经过疏水玻璃料并在减压下浓缩。粗物质通过在硅胶上的正相柱色谱法提纯，用0-100% EtOAc/环己烷洗脱以提供标题化合物（9.68 g）。

中间体134. (S)-4-(1-((甲基磺酰基)氧基)乙基)哌啶-1-甲酸叔丁酯

在0℃下在氮气气氛下向(S)-4-(1-羟乙基)哌啶-1-甲酸叔丁酯（10.6 g, 46.2mmol）在DCM（200 mL）中的溶液中加入甲磺酸酐（8.86 g, 50.8 mmol）和N-乙基-N-异丙基丙-2-胺（16.15 mL, 92 mmol）。使反应混合物升温至室温并搅拌整夜。反应混合物用乙醚（750 mL）稀释，然后用2 M HCl水溶液（200 mL）、然后水（200 mL）洗涤。有机相经过疏水玻璃料干燥并在减压下除去溶剂。粗物质通过在硅胶上的正相柱色谱法提纯，用0-100%EtOAc/环己烷洗脱以提供标题化合物（11.23 g)。

中间体135. 4-(1-(4-(3-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-1-基)-1H-吡唑-1-基)乙基)哌啶-1-甲酸叔丁酯

向3-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-1-(1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（350 mg, 1.063 mmol）和碳酸钾（441 mg, 3.19 mmol）中加入4-(1-((甲基磺酰基)氧基)乙基)哌啶-1-甲酸叔丁酯（490 mg, 1.594 mmol）在MeCN（7 mL）中的溶液。反应混合物在密封管中加热到100℃整夜，然后加热另外4小时。反应混合物用EtOAc（100 mL）稀释并用饱和NaHCO₃水溶液（2 x 100 mL）洗涤。水相用EtOAc（50 mL）萃取。合并的有机萃取物经过疏水玻璃料干燥并在减压下除去溶剂。粗产物通过在硅胶上的正相柱色谱法提纯，用0-100% EtOAc/环己烷洗脱以产生标题化合物（374 mg）。

LCMS (方法C): Rt = 1.30 min, MH⁺ 541。

中间体136. 3-(6-甲氧基吡啶-3-基)-1-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-4- 基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑

3-溴-1-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑和3-溴-2-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-2H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（670 mg）、(6-甲氧基吡啶-3-基)硼酸（279 mg, 1.824 mmol）、Xphos PdG2（50 mg, 0.064 mmol）和磷酸钾（318 mg, 1.824 mmol）在EtOH（4 mL）和水（4 mL）中的混合物在微波中在100℃下加热。加入EtOAc（30 mL）和NaHCO₃的饱和水溶液（20 mL）并分离有机相。水层用另外的EtOAc（3 x 20 mL）萃取。合并的有机萃取物经过疏水玻璃料干燥并在减压下除去溶剂。粗产物通过在硅胶上的正相柱色谱法提纯，用0-100% EtOAc/环己烷洗脱以产生标题化合物（356 mg）。

LCMS (方法C): Rt = 0.99 min, MH⁺ 396。

中间体137. 3-(6-甲氧基吡啶-3-基)-1-(1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑

3-(6-甲氧基吡啶-3-基)-1-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（360 mg, 0.910 mmol）在MeOH（6 mL）中的溶液用2 M HCl水溶液（2 mL, 4.0 mmol）处理并在氮气气氛下在室温下搅拌4小时。加入更多2 M HCl水溶液（1 mL, 2.0 mmol）并继续搅拌整夜。加入更多2 M HCl水溶液（0.5 mL, 1.0 mmol）并继续搅拌3小时。反应混合物用饱和NaHCO₃水溶液处理并用EtOAc（10 mL）分相。分离有机层，水相用EtOAc（2 x 30 mL）萃取。合并的有机萃取物经过疏水玻璃料干燥并在减压下浓缩以提供标题化合物（287 mg）。

LCMS (方法C) Rt = 0.77 min, MH⁺ = 312。

中间体138. 4-(1-(4-(3-(6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4, 5-c]吡唑-1-基)-1H-吡唑-1-基)乙基)哌啶-1-甲酸叔丁酯

将碳酸钾（381 mg, 2.76 mmol）添加到在MeCN（5 mL）中的3-(6-甲氧基吡啶-3-基)-1-(1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（286 mg, 0.919 mmol）中并将反应混合物在100℃下搅拌1小时。加入4-(1-((甲基磺酰基)氧基)乙基)哌啶-1-甲酸叔丁酯（282 mg, 0.919 mmol）并继续搅拌整个周末。加入更多碳酸钾（137 mg, 0.92mmoL）并在100℃下继续搅拌2小时。在减压下除去溶剂并将残留物溶于EtOAc中。这用饱和NaHCO₃水溶液分相并用EtOAc（3 x 30 mL）萃取水相。合并的有机相经过疏水玻璃料并在减压下除去溶剂。粗产物通过在硅胶上的正相柱色谱法提纯，用0-100% 3:1 EtOH:EtOAc(+1%NEt₃)/环己烷洗脱以产生标题化合物（248 mg）。

LCMS (方法C): Rt = 1.22 min, MH⁺ 523。

中间体139. 4-(1-(4-(1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)-1H-吡唑-1-基)乙基)哌啶-1-甲酸叔丁酯

在氮气气氛下在0℃下向1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-3-(1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（75 mg, 0.231 mmol）和碳酸钾（63.7 mg, 0.461mmol）在DMF（0.5 mL）中的溶液中加入在DMF（0.5 mL）中的 4-(1-((甲基磺酰基)氧基)乙基)哌啶-1-甲酸叔丁酯（106 mg, 0.346 mmol）。使反应混合物缓慢升温至室温并继续搅拌17小时。将反应混合物加热至80℃，搅拌5小时，然后加热至100℃并保持搅拌24小时。加入另外的4-(1-((甲基磺酰基)氧基)乙基)哌啶-1-甲酸叔丁酯（106 mg, 0.346 mmol）并将反应混合物加热至100℃持续18小时。以75 mg规模重复反应，合并的反应混合物用5% LiCl水溶液（10 mL）稀释并用乙酸乙酯（25 mL）萃取。水相进一步用乙酸乙酯（2 x 50 mL）萃取。合并的有机萃取物经过疏水玻璃料并在减压下除去溶剂。粗产物通过在硅胶上的正相柱色谱法提纯，用0-100% EtOAc/环己烷洗脱以产生标题化合物（130 mg）。

LCMS (方法C): Rt = 1.29 min, MH⁺ 537。

中间体140. 1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-3-(1-(1-(哌啶-4-基)乙基)-1H- 吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑

将4-(1-(4-(1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)-1H-吡唑-1-基)乙基)哌啶-1-甲酸叔丁酯（130 mg, 0.242 mmol）溶解在DCM（2 mL）中并加入三氟乙酸（0.746 mL, 9.69 mmol）。将反应混合物在室温下搅拌1小时。将饱和NaHCO₃水溶液逐滴添加到反应混合物中直至该溶液达到pH 8。产物用DCM（2 x 50 mL）萃取，合并的有机萃取物经过疏水玻璃料并在减压下浓缩以提供粗制标题化合物(50 mg)。该物质直接用于下一步骤。

中间体141. 1-(6-甲氧基吡啶-3-基)-3-(1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑

将3-溴-1-(6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（4.53g, 13.97 mmol）、4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)-1H-吡唑（3.90 g,20.10 mmol）、磷酸三钾（7.40 g, 42.5 mmol）、Xphos Pd G2（0.770 g, 0.978 mmol）、XPhos（0.466 g, 0.978 mmol）、EtOH（15 mL）和水（15 mL）分配在两个微波小瓶之间。密封小瓶并用氮气吹扫，然后首先使用微波在100℃下加热60分钟，接着使用微波在100℃下加热另外60分钟。反应混合物经Celite®过滤，用EtOAc洗涤。滤液在减压下浓缩并将残留物溶于EtOAc（300 mL）中。有机相用2M HCl水溶液（2 x 300 mL）萃取。使用氢氧化钠丸粒将水相碱化至~pH 12，在冰浴中冷却烧瓶。所得固体通过真空过滤分离并用几份水洗涤，然后在真空炉中在40℃下干燥整个周末以提供标题化合物（2.97 g）。

LCMS (方法C): Rt = 0.76 min, MH⁺ 312。

中间体142. (R)-4-(1-(4-(1-(6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)-1H-吡唑-1-基)乙基)哌啶-1-甲酸叔丁酯

将(S)-4-(1-((甲基磺酰基)氧基)乙基)哌啶-1-甲酸叔丁酯（4.40 g, 14.31mmol）在DMF（20 mL）中的溶液添加到含有在DMF（30 mL）中的1-(6-甲氧基吡啶-3-基)-3-(1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（2.97 g, 9.54 mmol）和碳酸铯（9.32 g, 28.6 mmol）的烧瓶中。混合物在氮气气氛下在60℃下搅拌3小时。将反应混合物冷却到室温并静置整夜。加入EtOAc（100 mL），有机相用饱和氯化铵水溶液（100 mL）洗涤。水相用EtOAc（2 x 100 mL）萃取。合并的有机萃取物用5% LiCl水溶液（5 x 20 mL）洗涤，然后经过疏水玻璃料干燥。在减压下除去溶剂。粗物质通过使用C18硅胶柱和30至75%梯度的MeCN/10 mM碳酸氢铵水溶液的反相色谱法提纯。含产物的级分静置整夜，然后合并并在减压下除去MeCN。水相用EtOAc（3 x 100 mL）萃取。合并的有机萃取物经过疏水玻璃料干燥并在减压下浓缩，然后残留物在高真空线路上干燥3小时以提供标题化合物（3.92 g）。

LCMS (方法C): Rt = 1.23 min, MH⁺ 523。

中间体143. (R)-1-(6-甲氧基吡啶-3-基)-3-(1-(1-(哌啶-4-基)乙基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑

将TFA（5 mL, 64.9 mmol）添加到(R)-4-(1-(4-(1-(6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)-1H-吡唑-1-基)乙基)哌啶-1-甲酸叔丁酯（3.90g, 7.46 mmol）在DCM（30 mL）中的溶液中并将反应混合物在室温下搅拌整夜。通过缓慢添加饱和NaHCO₃水溶液（60 mL）淬灭反应混合物并将混合物搅拌15分钟直至停止冒泡。分离有机相，水相用另外的DCM（2 x 60 mL）萃取。合并的有机萃取物经过疏水玻璃料并在减压下除去溶剂以提供标题化合物（3.69 g）。

LCMS (方法C): Rt = 0.91 min, MH⁺ 423。

中间体144. 1-(4-(3-溴-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-1-基)吡啶- 2-基)乙-1-酮

向微波小瓶装载3-溴-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（1 g, 4.61mmol）、1-(4-氯吡啶-2-基)乙-1-酮（0.986 g, 5.07 mmol）、碳酸铯（2.55 g, 7.83 mmol）和NMP（5 ml）并将混合物置于氮气气氛下，然后在微波中在100℃下加热2小时。使反应混合物在水（100 mL）和 EtOAc（100 mL）之间分相并分离有机相。水相用EtOAc（2 x 100 mL）萃取，合并的有机萃取物经过疏水玻璃料干燥，然后在减压下浓缩。粗物质通过使用C18柱的反相柱色谱法提纯，用0至40%梯度的MeCN(+0.1%甲酸)/水(+0.1%甲酸)洗脱以产生标题化合物（220 mg）。

LCMS (方法A): Rt = 1.01 min, MH⁺ 336/338。

中间体145. 3-溴-1-(2-(1-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基)吡啶-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑

密封在微波小瓶中的1-(4-(3-溴-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-1-基)吡啶-2-基)乙-1-酮（220 mg, 0.524 mmol）、异丙醇钛(IV)（0.184 mL, 0.628 mmol）、乙酸（0.060 mL, 1.047 mmol）和1-甲基哌嗪（0.087 mL, 0.785 mmol）在2-MeTHF（5 mL）中的搅拌溶液并在氮气下搅拌4小时。将三乙酰氧基硼氢化钠（222 mg, 1.047 mmol）添加到反应混合物中并密封小瓶，抽空并用氮气再填充并在微波中在100℃下加热1小时。加入水（2.5 mL）并将混合物静置整夜。反应混合物经过已用EtOAc预调节的10 g Celite®柱过滤。该柱用EtOAc（~200 mL）洗脱，洗脱液在减压下浓缩。残留物用EtOAc（50 mL）和水（50mL）分相，然后用饱和NaHCO₃水溶液（5 mL）处理。分离有机相，水相用EtOAc（2 x 50 mL）萃取。合并的有机萃取物经过疏水玻璃料干燥并在减压下浓缩以产生粗制标题化合物(326mg)。该物质直接用于下一步骤。

实施例1. 1-(1-(((2R,4r,6S)-2,6-二甲基哌啶-4-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)-3- (5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑

使用通用Boc-脱保护程序由(2R,4r,6S)-4-((4-(3-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-1-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)-2,6-二甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯（85 mg, 0.153 mmol）、DCM（1 mL）和TFA（0.472 mL）制备，只是该反应在室温下搅拌2小时后完成。作为浅黄色油分离标题化合物（76 mg）。

LCMS (方法C): Rt = 1.02 min, MH⁺ 455。

实施例2. 3-(1-(((2R,4r,6S)-2,6-二甲基哌啶-4-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)-1- (5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑

使用通用Boc脱保护程序由(2R,4r,6S)-4-((4-(1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)-2,6-二甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯（280 mg, 0.505 mol）、DCM（3 mL）和TFA（1.556 mL）制备以在通过MDAP（方法A）提纯后产生黄色油形式的标题化合物（57 mg）。

LCMS (方法C): Rt = 1.00 min, MH⁺ = 455。

实施例3. N-(2-甲氧基-5-(3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲磺酰胺

将乙酸铜(II)（30 mg, 0.165 mmol）添加到3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（36 mg, 0.165 mmol）、N-(2-甲氧基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)吡啶-3-基)甲磺酰胺（81 mg, 0.248 mmol）和DMAP（40 mg,0.330 mmol）在无水MeCN（1.5 ml）中的溶液中。反应混合物暴露在空气中在50℃下搅拌15小时。反应混合物用5重量% EDTA水溶液（10 mL）处理并用EtOAc（25 ml）分相。分离有机层，水层用EtOAc（2 x 25 mL）再萃取。将合并的有机层干燥，浓缩并通过MDAP（方法B）提纯以产生标题化合物（13 mg, 19%）。

LCMS (方法A): Rt = 0.74 min, MH⁺ 419。

实施例4. 1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4,5,7, 8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑

3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（50 mg,0.229 mmol）、(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)硼酸（38.3 mg, 0.229 mmol）、CuOAc（41.6mg, 0.229 mmol）和DMAP（56 mg, 0.458 mmol）在MeCN（1,5 mL）中的混合物暴露在空气中在搅拌下在50℃下加热15小时。反应混合物用5% EDTA水溶液（20 mL）处理，然后用EtOAc（3x 50 mL）萃取，浓缩并通过MDAP（方法A）提纯以产生标题化合物（22 mg, 28%）。

LCMS (方法A): Rt = 0.92 min, MH⁺ 340。

实施例5. N-(2-甲氧基-5-(1-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)吡啶-3-基)甲磺酰胺

将N-(2-甲氧基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)吡啶-3-基)甲磺酰胺（13 mg, 0.040 mmol）、3-溴-1-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（10 mg, 0.034 mmol）、氯-[2′-(二甲基氨基)-2-联苯基]-(二降冰片基膦)-钯（2 mg, 3.57 µmol）和磷酸三钾（22 mg, 0.104 mmol）的混合物合并在二氧杂环己烷（0.5 mL）和水（0.1 mL）的混合物中。反应混合物使用微波在100℃下加热60分钟。

使反应混合物经过用MeOH洗脱的硅胶柱(1 g)，然后通过MDAP（方法A）提纯以产生标题化合物（8 mg, 57%）。

LCMS (方法A): Rt = 0.57 min, MH⁺ 419。

实施例6. 1-(2-甲氧基嘧啶-5-基)-3-(1-((1-甲基哌啶-4-基)甲基)-1H-吡唑- 4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑.甲酸盐

将1-(2-甲氧基嘧啶-5-基)-3-(1-(哌啶-4-基甲基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑化合物和2-(2-甲氧基嘧啶-5-基)-3-(1-(哌啶-4-基甲基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-2H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（82 mg）的混合物溶解在DMF（1mL）中并用37重量%甲醛水溶液（0.075 mL, 1.001 mmol）处理。反应混合物在氮气气氛下在室温下搅拌1小时，然后用三乙酰氧基硼氢化钠（42.4 mg, 0.200 mmol）处理。反应混合物在氮气下搅拌3小时。

反应混合物用碳酸氢钠的饱和水溶液（5 mL）、水（5 mL）和EtOAc（5 mL）处理。分离有机层，水层用EtOAc（2 x 5 mL）再萃取。分离有机层，合并的有机层用盐水（5 mL）、然后5重量% LiCl水溶液（2 x 5 mL）洗涤并经过疏水玻璃料。有机层在减压下浓缩以产生粗产物，其通过MDAP（方法B）提纯以产生标题化合物（32 mg, 68%）。

LCMS (方法C): Rt = 0.46 min, MH⁺ 424。

实施例7. 3-(1-((1-异丙基哌啶-4-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)-1-(6-甲氧基-5- 甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑

向烘干的圆底烧瓶装载在DMF（1.5 mL）中的1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-3-(1-(哌啶-4-基甲基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（263 mg,0.498 mmol）。反应混合物用丙酮（2 mL）处理并在氮气气氛下搅拌45分钟。反应混合物用STAB（211 mg, 0.996 mmol）处理并搅拌整夜。使反应混合物在饱和碳酸氢钠水溶液（5 mL）之间分相并用EtOAc（3 x 10 mL）萃取。合并的有机层用LiCl水溶液洗涤。有机层在减压下浓缩且粗产物通过MDAP（方法A）提纯以产生标题化合物（107 mg, 45%）。

LCMS (方法C): Rt = 1.07 min, MH⁺ 465。

实施例8. 3-(1-((1-异丙基哌啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)-1-(6-甲氧基-5- 甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑

将1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-3-(1-(哌啶-3-基甲基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（72 mg, 0.102 mmol）溶解在丙酮（0.5 ml）中并在氮气气氛下在室温下搅拌1小时。反应混合物小心地用三乙酰氧基硼氢化钠（43 mg, 0.204mmol）处理并搅拌整夜，

反应混合物用碳酸氢钠水溶液（1 mL）处理并剧烈搅拌30分钟。反应混合物用碳酸氢钠（5 mL）和EtOAc（10 mL）分相。分离有机层，水层用EtOAc（2 x 10 mL）再萃取。合并的有机层用5重量% LiCl溶液洗涤，然后经过疏水玻璃料并在减压下浓缩。通过MDAP提纯粗产物的初步尝试导致产物收集在MDAP废料中。将该废料蒸发至干，然后通过MDAP（方法A）提纯以产生标题化合物（17 mg, 34%）。

LCMS (方法C): Rt = 1.18 min, MH⁺ 465。

实施例9. 1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-3-(1-((1-甲基哌啶-4-基)甲基)- 1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑

用37重量%甲醛水溶液（0.211 mL, 2.84 mmol）处理1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-3-(1-(哌啶-4-基甲基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（200 mg, 0.284 mmol）在DMF（2 mL）中的溶液。反应混合物在氮气气氛下在室温下搅拌1小时。反应混合物用STAB（120 mg, 0.568 mmol）处理并搅拌3小时。用碳酸氢钠水溶液（1 mL）淬灭反应并保持搅拌30分钟。反应混合物用更多的碳酸氢钠溶液（5 mL）和EtOAc（15 mL）分相。混合物用EtOAc（2 x 15 mL）萃取，合并的有机层用5% LiCl溶液（3 x 15 mL）洗涤。有机层经过疏水玻璃料并在减压下浓缩以产生粗产物。粗产物通过MDAP（方法A）提纯以产生标题化合物（39.8 mg, 32%）。

LCMS (方法C): Rt = 1.08 min, MH⁺ 437。

实施例10. 1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-3-(1-((1-甲基哌啶-4-基)甲基)-1H- 吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑

用37重量%甲醛水溶液（0.15 mL, 2.015 mmol）处理1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-3-(1-(哌啶-4-基甲基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（45mg, 0.106 mmol）在DMF（1 mL）中的溶液并在室温下搅拌30分钟。反应混合物用STAB（90mg, 0.425 mmol）处理并在室温下搅拌整夜。反应混合物用碳酸氢钠的饱和水溶液（10 mL）处理并用EtOAc（3 x 10 mL）萃取。有机层用LiCl溶液（2 x 15 mL）萃取。有机层在减压下浓缩以产生粗产物(46 mg)。粗产物通过MDAP（方法A）提纯以产生白色固体形式的标题化合物（26 mg, 53%）。

LCMS (方法C): Rt = 0.96 min, MH⁺ 441。

实施例11. 1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-3-(1-((1-异丙基哌啶-4-基)甲基)- 1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑

用丙酮（1.5 mL）处理1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-3-(1-(哌啶-4-基甲基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（86 mg, 0.201 mmol）和DIPEA（35 µL）在DMF（0.5 mL）中的溶液。反应混合物在室温下搅拌1小时，然后用STAB（0.210 g, 0.991mmol）处理并在室温下搅拌14小时。反应混合物用碳酸氢钠的饱和水溶液（10 mL）处理。

单独地，用丙酮（1.6 mL）处理1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-3-(1-(哌啶-4-基甲基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（86 mg, 0.201 mmol）在DMF（0.5 mL）中的溶液。反应混合物在室温下搅拌1小时，然后用STAB（0.210 g, 0.991 mmol）处理并在室温下搅拌15小时。反应混合物用碳酸氢钠的饱和水溶液（10 mL）处理。

合并这两批淬灭的反应混合物并用EtOAc（3 x 25 mL）萃取。合并的有机层用5%LiCl溶液（3 x 25 mL）洗涤，经过疏水玻璃料并在减压下浓缩以产生粗产物(160 mg)。粗产物通过MDAP（方法A）提纯以产生白色固体形式的标题化合物（51 mg, 52%）。

LCMS (方法C): Rt = 1.07 min, MH⁺ 469。

实施例12. N-(2-甲氧基-5-(3-(1-((1-甲基哌啶-4-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)- 4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲磺酰胺

用甲醛（37重量%水溶液，0.250 mL, 0.167 mmol）处理N-(2-甲氧基-5-(3-(1-(哌啶-4-基甲基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲磺酰胺（84 mg, 0.167 mmol）在DMF（1.5 mL）中的溶液并在氮气气氛下在室温下搅拌30分钟。反应混合物用STAB（150 mg, 0.708 mmol）处理并在室温下搅拌2小时。反应混合物用碳酸氢钠的饱和水溶液（5 mL）淬灭并用EtOAc（3 x 20 mL）萃取。水层经过Isolute 103柱，其用水、然后MeOH洗涤。将MeOH洗液与EtOAc层合并并在减压下浓缩以产生棕色胶质形式的粗产物(50 mg)。粗产物通过MDAP（方法B）提纯以产生无色胶质形式的标题化合物（9.5mg, 10%）。

LCMS (方法C): Rt = 0.55 min, MH⁺ 516。

实施例13. 2-甲氧基-5-(3-(1-((1-甲基哌啶-4-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)-4,5, 7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-1-基)烟腈

用37重量%甲醛水溶液（0.18 mL, 2.287 mmol）处理2-甲氧基-5-(3-(1-(哌啶-4-基甲基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-1-基)烟腈（47 mg,0.108 mmol）在DMF（1 mL）中的溶液并在氮气气氛下在室温下搅拌30分钟。反应混合物用STAB（92 mg, 0.434 mmol）处理并在室温下搅拌3小时。反应混合物用碳酸氢钠的饱和水溶液（10 mL）淬灭并用EtOAc（3 x 15 mL）萃取。有机层用LiCl溶液（20 mL）洗涤，经过疏水玻璃料，然后在减压下浓缩。水相经过Isolute 103柱(5 g)，其用水、然后MeOH洗涤。将来自MeOH洗涤的残留物与获自有机层的残留物合并，并通过MDAP（方法A）提纯以产生白色固体形式的标题化合物（16 mg, 31%）。

LCMS (方法C): Rt = 0.96 min, MH⁺ 448。

实施例14. 5-(3-(1-((1-异丙基哌啶-4-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-1-基)-2-甲氧基烟腈

CuOAc（308 mg, 1.696 mmol）、3-(1-(4-甲氧基苄基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（550 mg, 1.696 mmol）、2-甲氧基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)烟腈（463 mg, 1.780 mmol）和DMAP（414 mg, 3.39 mmol）在MeCN（14 mL）中的混合物在室温下搅拌整夜。反应混合物暴露在空气中在40℃下加热7小时，然后整夜。加入少量溶剂，接着加入EtOH（2 mL）。将反应加热5小时，然后整夜。反应混合物在室温下保持整个周末。反应混合物用2-甲氧基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)烟腈（463 mg, 1.780 mmol）处理并在40℃下加热整夜，然后加热另外7小时。反应混合物在减压下浓缩并在水（25 mL）之间分相和用EtOAc（3 x 25 mL）萃取，已将5%DMEDA添加到混合物中。合并的有机相经过疏水玻璃料并在减压下浓缩。混合物用在MeCN（14 mL）中的DMAP（414 mg, 3.39 mmol）、CuOAc（308 mg, 1.696 mmol）和2-甲氧基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)烟腈（463 mg, 1.780 mmol）处理并在40℃下加热7小时，然后在室温下加热整夜。反应混合物在减压下浓缩并在水（25 mL）之间分相和用添加了5% DMEDA的EtOAc（4 x 25 mL）萃取。合并的有机层经过疏水玻璃料并在减压下浓缩。粗产物通过使用C18硅胶柱的反相色谱法部分提纯，用30至85%梯度的MeCN+0.1%甲酸/水 + 0.1%甲酸洗脱以产生2-甲氧基-5-(3-(1-(4-甲氧基苄基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-1-基)烟腈（347 mg）。

实施例15. 1-(5-(氟甲基)-6-甲氧基吡啶-3-基)-3-(1-((1-甲基哌啶-4-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑

用37重量%甲醛水溶液（0.400 mL, 5.37 mmol）处理1-(5-(氟甲基)-6-甲氧基吡啶-3-基)-3-(1-(哌啶-4-基甲基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（125 mg, 0.284 mmol）在DMF（2 mL）中的溶液并在氮气气氛下在室温下搅拌30分钟。反应混合物用碳酸氢钠水溶液（25 mL）淬灭并用EtOAc（3 x 25 mL）萃取。合并的有机层用5%LiCl水溶液（2 x 25 mL）洗涤，然后经过疏水玻璃料并在减压下浓缩以产生粗产物。粗产物通过MDAP（方法A）提纯以产生无色胶质形式的标题化合物（7 mg, 5%）。

LCMS (方法C): Rt = 0.99 min, MH⁺ 455。

实施例16. 1-(5-(氟甲基)-6-甲氧基吡啶-3-基)-3-(1-((1-异丙基哌啶-4-基) 甲基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑

用丙酮（1.5mL）处理1-(5-(氟甲基)-6-甲氧基吡啶-3-基)-3-(1-(哌啶-4-基甲基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（125 mg, 0.284 mmol）和DIPEA（0.050 mL, 0.284 mmol）在DMF（2 mL）中的溶液。反应混合物在氮气气氛下在室温下搅拌1小时。反应混合物用STAB（241 mg, 1.135 mmol）处理并搅拌15小时。反应混合物用碳酸氢钠的饱和水溶液（25 mL）淬灭并用EtOAc（3 x 25 mL）萃取。合并的有机层用5% LiCl溶液（2 x 25 mL）洗涤，经过疏水玻璃料并在减压下浓缩以产生粗产物(105 mg)。粗产物通过MDAP（方法A）提纯以产生无色胶质形式的标题化合物（19 mg, 13%）。

LCMS (方法A): Rt = 0.65 min, MH⁺ 483。

实施例17. N-(5-(3-(1-((1-异丙基哌啶-4-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8- 四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-1-基)-2-甲氧基吡啶-3-基)甲磺酰胺

N-(2-甲氧基-5-(3-(1-(哌啶-4-基甲基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲磺酰胺（183 mg, 0.365 mmol）、DMF（0.5 mL）、丙酮（1.5mL）和DIPEA（0.064 mL, 0.365 mmol）的混合物在氮气气氛下在室温下搅拌18小时。反应混合物用碳酸氢钠的饱和水溶液（10 mL）淬灭并用水（10 mL）稀释。混合物用EtOAc（3x 25 mL）萃取。合并的有机层用3等分的5% LiCl溶液洗涤，经过疏水玻璃料并在减压下浓缩。显著量的粗制标题化合物留在水层中，因此水层经过Isolute 103柱，其用水、然后氨的MeOH溶液洗涤。基于MeOH的洗液在减压下浓缩并与EtOAc萃取物合并以产生190毫克粗产物。粗产物通过MDAP（方法A）提纯以产生棕色胶质形式的标题化合物(28 mg)。

LCMS (方法A): Rt = 0.53 min, MH⁺ 544。

实施例18. 3-(5-((4-异丙基哌嗪-1-基)甲基)噁唑-2-基)-1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑.甲酸盐

用1 M DIBAL-H的THF溶液（0.042 mL, 0.042 mmol）处理(4-异丙基哌嗪-1-基)(2-(1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)噁唑-5-基)甲酮（10 mg, 0.021 mmol）在THF（0.5 mL）中的溶液。将反应混合物搅拌整夜。反应混合物用IPA（2 mL）处理，在减压下浓缩并通过MDAP（方法A）提纯以产生无色油形式的标题化合物（2 mg, 21%）。

LCMS (方法C): Rt = 1.02 min, MH⁺ 467。

实施例19. 1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5- c]吡唑-3-甲酰胺和中间体146. 1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-甲酸

用THF（0.5 mL）处理双(三甲基甲硅烷基)氨基钠在甲苯中的0.6M溶液（0.2 mL,0.120 mmol）和(1-甲基哌啶-3-基)甲胺（7 mg, 0.055 mmol）的混合物并加热到70℃。反应混合物用1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-甲酸乙酯（11 mg, 0.033 mmol）处理并加热16小时，然后在减压下浓缩并通过MDAP（方法A）提纯以产生1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-甲酸（中间体146, 4.6 mg, 46%），LCMS (方法A): Rt = 0.85 min, MH⁺ 304，和标题化合物（2 mg, 20%）。LCMS (方法A): Rt = 0.84 min, MH⁺ 303。

实施例20. 1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-N-((1-甲基哌啶-3-基)甲基)-4,5, 7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-甲酰胺.甲酸盐

将1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-甲酸（4.6 mg, 0.015 mmol）、DIPEA（7.95 μl, 0.045 mmol）和HATU（7 mg, 0.018 mmol）的混合物溶解在DMF（0.5 mL）中并搅拌30分钟。反应混合物用(1-甲基哌啶-3-基)甲胺（2 mg,0.016 mmol）处理并搅拌16小时，然后在氮气流下浓缩。粗产物通过MDAP（方法B）提纯以产生无色胶质形式的标题化合物（2.4 mg, 34%）。

LCMS (方法A): Rt = 0.61 min, MH⁺ 414。

通用的通过环氧化物开环烷基化的程序

实施例21. 1-(3-((4-(1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)吡咯烷-1-基)-2-甲基丙-2-醇

1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-3-(1-(吡咯烷-3-基甲基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（118 mg, 0.289 mmol）、EtOH（2 mL）、DIPEA（0.101mL, 0.578 mmol）和2,2-二甲基环氧乙烷（0.07 mL, 0.788 mmol）的混合物使用微波在90℃下加热3小时并在减压下浓缩。该物质通过MDAP（方法A）提纯以产生无色胶质形式的标题化合物（60 mg, 41%）。

LCMS (方法C): Rt = 1.02 min, MH⁺ 481。

实施例22.和23. (R)-1-(3-((4-(1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)吡咯烷-1-基)-2-甲基丙-2-醇和(S)-1-(3-((4-(1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c] 吡唑-3-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)吡咯烷-1-基)-2-甲基丙-2-醇

通过用30% EtOH(+0.2%异丙基胺)/庚烷(+0.2%异丙基胺)洗脱的手性30 mm x 25cm Chiralcel AD-H柱，使用30 mL/min的流速从1-(3-((4-(1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)吡咯烷-1-基)-2-甲基丙-2-醇（实施例21, 53 mg）的混合物中分离这两种标题化合物。

实施例22:

作为无色胶质分离（19 mg）。

LCMS (方法C) Rt = 1.03 min, MH⁺ = 481。

实施例23:

作为无色胶质分离（20 mg）。

LCMS (方法C) Rt = 1.03 min, MH⁺ = 481。

没有指定绝对立体化学。

实施例24. 3-(1-乙基-5-甲基-1H-吡唑-4-基)-1-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4,5, 7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑

向微波小瓶装载4-溴-1-乙基-5-甲基-1H-吡唑（99 mg, 0.525 mmol）并密封。加入THF（1 mL），用氮气吹扫小瓶并冷却到-78℃。反应混合物用nBuLi在己烷中的溶液（2.5M, 0.210 mL, 0.525 mmol）处理并搅拌30分钟，然后使升温至室温。反应混合物用0.5 MZnCl₂/THF溶液（1.050 mL, 0.525 mmol）处理并搅拌30分钟。反应混合物用PdCl₂(PPh₃)₂（28.3 mg, 0.040 mmol）和3-溴-1-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（60 mg, 0.202 mmol）在THF（1 mL）中的溶液处理，然后在80℃下加热7.5小时并允许冷却到室温。

反应混合物用EtOAc（10 mL）和1 M NaOH水溶液（10 mL）处理。加入另外的EtOAc（10 mL）并分离有机层。水层用EtOAc（2 x 10 mL）再萃取，合并的有机层经过疏水玻璃料并在减压下浓缩以产生橙色油形式的粗产物。该物质通过MDAP（方法B）提纯以产生标题化合物（2.0 mg, 3%）。

LCMS (方法C): Rt = 0.75 min, MH⁺ 327。

实施例25. 1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-3-(1-((1-甲基吡咯烷-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑

1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-3-(1-(吡咯烷-3-基甲基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（118 mg, 0.289 mmol）和DMF（2 mL）和37%甲醛水溶液（0.35 mL, 4.70 mmol）的混合物在氮气气氛下在室温下搅拌30分钟。反应混合物用STAB（250 mg, 1.180 mmol）处理并搅拌15小时。

反应混合物用碳酸氢钠的饱和水溶液（20 mL）处理并用EtOAc（20 mL）分相。分离有机层，水层用EtOAc（2 x 20 mL）再萃取。合并的有机层用5重量% LiCl溶液（3 x 30 mL）洗涤并经过疏水玻璃料并在减压下浓缩以产生棕色油形式的粗产物（136 mg）。粗物质通过MDAP（方法A）提纯以产生无色胶质形式的标题化合物（30 mg）。

实施例26.和27. (R)-1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-3-(1-((1-甲基吡咯烷- 3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑和(S)-1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-3-(1-((1-甲基吡咯烷-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑

通过使用30 mm x 25 cm Chiralpak AD-H柱的制备手性HPLC将1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-3-(1-((1-甲基吡咯烷-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（实施例25）分离成其两种组分对映体。该柱用30% EtOH(+0.2%异丙基胺)/庚烷(+0.2%异丙基胺)使用30 mL/min的流速洗脱。合并适当的级分并蒸发产生两种对映体：

实施例26. : 10 mg, 无色油。LCMS (方法C) Rt = 0.97 min, MH⁺ = 423。通过手性HPLC的对映体纯度 = >99.0% e.e。

实施例27. : 7 mg, 无色油。LCMS (方法C) Rt = 1.00 min, MH⁺ = 485。通过手性HPLC的对映体纯度 = >97.4% e.e。

没有指定绝对立体化学。

实施例28. 3-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-1-(1-((1-甲基哌啶-4-基)甲基)- 1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑

用37%甲醛水溶液（0.141 mL, 1.893 mmol）处理3-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-1-(1-(哌啶-4-基甲基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（40mg, 0.095 mmol）在DMF（1 mL）中的溶液并在室温下搅拌30分钟。反应混合物用STAB（85mg, 0.401 mmol）处理并搅拌2小时。用碳酸氢钠的饱和水溶液（5 mL）淬灭反应，然后用EtOAc（10 mL）分相。水层用EtOAc（3 x 10 mL）再萃取。合并的有机层用LiCl溶液（2 x 20mL）洗涤并经过疏水玻璃料，然后在减压下浓缩以产生粗产物。粗产物通过MDAP（方法A）提纯以产生标题化合物（6 mg, 14%）。

LCMS (方法C) Rt = 1.01 min, MH⁺ = 437。

实施例29. 2-(4-((4-(1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)哌啶-2-基)丙-2-醇

使用H-Cube®连续流氢化反应器在25℃和50巴下使2-(1-苄基-4-((4-(1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)哌啶-2-基)丙-2-醇（18 mg, 0.019 mmol）在MeOH（1 mL）和EtOAc（0.5 mL）中的溶液经过CatCart^TM（氢氧化钯/碳）并在减压下浓缩。粗产物通过MDAP（方法A）提纯以产生标题化合物（6 mg, 66%）。

LCMS (方法C) Rt = 0.91 min, MH⁺ = 481。

实施例30. 5-(3-(1-((1-异丙基哌啶-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-1-基)-2-甲氧基烟腈

反应混合物用DCM（10 mL）稀释并用碳酸氢钠的饱和水溶液以逐滴方式处理直至反应混合物为pH 9。将反应混合物搅拌30分钟，然后用DCM（20 mL）分相。分离有机层，水层用DCM（2 x 20 mL）再萃取。合并的有机层经过疏水玻璃料并在减压下浓缩，以产生浅棕色胶质形式的粗制5-(3-(1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-1-基)-2-甲氧基烟腈（240 mg）。

粗物质不经进一步提纯进行下一反应步骤。

LCMS (方法C) Rt = 1.21 min, MH⁺ = 534。

粗物质不经进一步提纯进行下一反应步骤。

LCMS (方法A) Rt = 0.65 min, MH⁺ = 476。

实施例31. 3-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-1-(1-(哌啶-4-基甲基)-1H-吡唑-4- 基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑

使用通用Boc脱保护方法由4-((4-(3-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-1-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯（304 mg,0.577 mmol）、DCM（3 mL）和TFA（1.677 mL）制备，只是反应混合物使用微波在70℃下加热15分钟。作为棕色固体分离标题化合物（254 mg, >99%）。

LCMS (方法C) Rt = 0.99 min, MH⁺ = 427。

实施例32. 3-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-1-(1-((1-异丙基哌啶-4-基)甲基)- 1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑

向烘干的微波小瓶装载3-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-1-(1-(哌啶-4-基甲基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（65 mg, 0.142 mmol）、丙酮（0.7mL）和DMF（0.60 mL）。反应混合物在氮气气氛下搅拌1小时，然后用STAB（120 mg, 0.567mmol）处理。将反应混合物搅拌3小时。使用碳酸氢钠的饱和水溶液（5 mL）淬灭反应并用EtOAc（3 x 10 mL）萃取。合并的有机层用5重量% LiCl水溶液（2 x 15 mL）洗涤，经过疏水玻璃料并在减压下浓缩以产生黄色油。粗产物通过MDAP（方法A）提纯以产生灰白色固体形式的标题化合物（16 mg, 23%）。

LCMS (方法C) Rt = 1.15 min, MH⁺ = 469。

实施例33. 1-(1-((1-异丙基哌啶-4-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)-3-(6-甲氧基-5- 甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑

3-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-1-(1-(哌啶-4-基甲基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（116 mg, 0.275 mmol）在丙酮（5 mL）中的溶液在氮气气氛下在室温下搅拌30分钟。反应混合物用STAB（243 mg, 1.147 mmol）处理并搅拌整夜。用碳酸氢钠的饱和水溶液（5 mL）淬灭反应并用EtOAc（10 mL）分相。水层用EtOAc（3 x 10mL）再萃取。合并的有机层经过疏水玻璃料并在减压下浓缩以产生粗产物。粗产物通过MDAP（方法A）提纯以产生标题化合物（20 mg, 15%）。

LCMS (方法C) Rt = 1.10 min, MH⁺ = 465。

实施例34. 1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-3-(1-((1-异丙基吡咯烷-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑

1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-3-(1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑和2-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-3-(1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-2H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（50 mg）和氢化钠在矿物油中的60重量%悬浮液（14.57 mg, 0.364 mmol）在DMF（1.25 mL）中的混合物在氮气气氛下在0℃下搅拌并经3小时升温至室温。

将3-(溴甲基)-1-异丙基吡咯烷氢溴酸盐（131 mg, 0.455 mmol）溶解在MeOH中并加载到硅胶氨基丙基SPE柱上并用MeOH洗脱和在氮气流下浓缩以提供清澈液体形式的3-(溴甲基)-1-异丙基吡咯烷（94 mg, 0.455 mmol）。将3-(溴甲基)-1-异丙基吡咯烷（94 mg,0.455 mmol）添加到第一反应混合物中并将反应混合物在室温下在氮气气氛下搅拌整夜。

反应混合物用饱和氯化铵溶液（2 mL）处理并用EtOAc（7 mL）分相。分离有机层，水层用EtOAc（5 x 7 mL）再萃取。合并的有机层经过疏水玻璃料并在减压下浓缩，粗物质通过MDAP（方法A）提纯以产生标题化合物（35 mg）。

LCMS (方法C) Rt = 1.04 min, MH⁺ = 455。

实施例35.和实施例36. (S)-1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-3-(1-((1-异丙基吡咯烷-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑和(R)-1-(5- 氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-3-(1-((1-异丙基吡咯烷-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8- 四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑

通过使用30 mm x 25 cm Chiralpak AD-H的制备手性HPLC将1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-3-(1-((1-异丙基吡咯烷-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（实施例34, 30 mg）分离成其两种组分对映体。该柱用10% EtOH(+0.2%异丙基胺)/庚烷(+0.2%异丙基胺)使用42.5 mL/min的流速洗脱。合并适当的级分并蒸发产生两种对映体：

实施例35.: 8 mg, 清澈胶质。LCMS (方法C) Rt = 1.00 min, MH⁺ = 455。通过手性HPLC的对映体纯度 = >96.2% e.e。

实施例36.: 10 mg, 清澈胶质。LCMS (方法C) Rt = 1.00 min, MH⁺ = 455。通过手性HPLC的对映体纯度 = >88.5% e.e。

没有指定绝对立体化学。

实施例37. 1-(3-((4-(1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)吡咯烷-1-基)-2-甲基丙-2-醇

1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-3-(1-(吡咯烷-3-基甲基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑和2-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-3-(1-(吡咯烷-3-基甲基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-2H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑的混合物（100 mg）、2,2-二甲基环氧乙烷（0.065 mL, 0.727 mmol）、DIPEA（0.085 mL, 0.485 mmol）在EtOH（2 mL）中的溶液使用微波在70℃下加热1小时。反应混合物用MeOH（1 m）处理，在减压下浓缩，然后通过MDAP（方法A）提纯以产生棕色油形式的标题化合物（39 mg, 33%）。

LCMS (方法C) Rt = 1.00 min, MH⁺ = 485。

实施例38.和实施例39. (R)-1-(3-((4-(1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7, 8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)吡咯烷-1-基)-2-甲基丙- 2-醇和(S)-1-(3-((4-(1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5- c]吡唑-3-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)吡咯烷-1-基)-2-甲基丙-2-醇

通过使用30 mm x 25 cm Chiralpak IC柱的制备手性HPLC将1-(3-((4-(1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)吡咯烷-1-基)-2-甲基丙-2-醇（实施例37, 36 mg）分离成其两种组分对映体、该柱用30% EtOH(+0.2%异丙基胺)/庚烷(+0.2%异丙基胺)使用30 mL/min的流速洗脱。合并适当的级分并蒸发产生两种对映体：

实施例38.: 15 mg, 无色玻璃状。LCMS (方法C) Rt = 1.00 min, MH⁺ = 485。通过手性HPLC的对映体纯度 = >99.0% e.e。

实施例39.: 14 mg, 无色玻璃状。LCMS (方法C) Rt = 1.00 min, MH⁺ = 485。通过手性HPLC的对映体纯度 = >93.0% e.e。

没有指定绝对立体化学。

实施例40. 3-(1-((1-异丙基吡咯烷-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)-1-(6-甲氧基- 5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑

使用通用烷基化程序使用1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-3-(1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（52 mg, 0.160 mmol）、NaH（16 mg, 在矿物油上的60重量%悬浮液）、DMF（2 mL）和3-(溴甲基)-1-异丙基吡咯烷（99 mg, 0.479 mmol）制备，只是用氯化铵的饱和水溶液（4 mL）代替碳酸氢钠的饱和水溶液淬灭反应。粗制标题化合物通过MDAP（方法A）提纯以产生无色油形式的标题化合物（37 mg, 49%）。

LCMS (方法C): Rt = 1.08 min, MH⁺ 451。

实施例41. 4-((4-(1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)-1-甲基哌啶-4-醇

用37重量%甲醛水溶液（0.624 mL, 8.38 mmol）处理4-((4-(1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)哌啶-4-醇（245 mg, 0.559 mmol）在DMF（3 mL）中的溶液并在室温下搅拌1小时。反应混合物用STAB（300 mg, 1.415 mmol）处理并搅拌整夜。用碳酸氢钠的饱和水溶液（10 mL）淬灭反应并搅拌20分钟。混合物用水（10 mL）稀释并用EtOAc（4 x 20 mL）萃取。合并的有机层经过疏水玻璃料并在减压下浓缩以产生粗产物(234 mg)。粗产物通过MDAP（方法A）提纯以产生无色胶质形式的标题化合物（93 mg, 35%）。

LCMS (方法C): Rt = 0.89 min, MH⁺ 453。

实施例42. 3-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-1-(1-((1-甲基哌啶-4-基)甲基)-1H- 吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑

将3-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-1-(1-(哌啶-4-基甲基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（65 mg, 0.152 mmol）和37重量%甲醛水溶液 (0.170mL, 2.286 mmol)的混合物合并在DMF（2 mL）中并在氮气气氛下搅拌1小时。反应混合物用STAB（81 mg, 0.381 mmol）处理并搅拌整夜。使用碳酸氢钠的饱和水溶液（5 mL）淬灭反应，用水（5 mL）稀释，然后用EtOAc（3 x 10 mL）萃取。合并的有机层用5重量% LiCl水溶液（2 x15 mL）洗涤，经过疏水玻璃料并在减压下浓缩以产生黄色油形式的粗产物。粗产物通过MDAP（方法A）提纯以产生白色固体形式的标题化合物（16.9 mg, 24%）。

LCMS (方法C): Rt = 1.03 min, MH⁺ 441。

实施例43. 3-(1-((4-氟-1-甲基哌啶-4-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)-1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑

3-(1-((4-氟哌啶-4-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)-1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（113 mg）、DMF（2 mL）和37重量%甲醛水溶液（0.3 mL, 4.03 mmol）的混合物在氮气气氛下搅拌30分钟。使用碳酸氢钠的饱和水溶液（5mL）淬灭反应，用水（10 mL）稀释，然后用EtOAc（4 x 20 mL）萃取。合并的有机层经过疏水玻璃料并在减压下浓缩以产生粗产物（150 mg）。一半粗产物通过MDAP（方法A）提纯以产生红色胶质形式的标题化合物(24.9 mg)。

LCMS (方法C): Rt = 1.01 min, MH⁺ 455。

实施例44. (2R)-1-(3-((4-(1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H- 氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-醇

1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-3-(1-(吡咯烷-3-基甲基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑和2-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-3-(1-(吡咯烷-3-基甲基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-2H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（100 mg）、(R)-2-甲基环氧乙烷（42.2 mg, 0.727 mmol）、DIPEA（0.085 mL, 0.485 mmol）在EtOH（2 mL）中的混合物使用微波在70℃下加热1小时。反应混合物用MeOH（1 mL）处理，在减压下浓缩并通过MDAP（方法A）提纯以产生无色油形式的标题化合物(36 mg)。

LCMS (方法C): Rt = 0.94 min, MH⁺ 471。

实施例45.和46. (R)-1-((R)-3-((4-(1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8- 四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-醇和(R)- 1-((S)-3-((4-(1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑- 3-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-醇

通过使用30 mm x 25 cm Chiralpak AD-H柱的制备手性HPLC将(2R)-1-(3-((4-(1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-醇（实施例44, 36 mg）分离成其两种组分对映体。该柱用40% EtOH(+0.2%异丙基胺)/庚烷(+0.2%异丙基胺)使用30 mL/min的流速洗脱。合并适当的级分并蒸发产生两种对映体：

实施例45.: 13 mg, 清澈玻璃状。LCMS (方法C) Rt = 0.94 min, MH⁺ = 471。通过手性HPLC的对映体纯度 = >99.0% e.e。

实施例46.: 12 mg, 清澈玻璃状。LCMS (方法C) Rt = 0.94 min, MH⁺ = 471。通过手性HPLC的对映体纯度 = >90.8% e.e。

没有指定绝对立体化学。

实施例47. (2S)-1-(3-((4-(1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H- 氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-醇

1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-3-(1-(吡咯烷-3-基甲基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑和2-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-3-(1-(吡咯烷-3-基甲基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-2H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（100 mg）、(S)-2-甲基环氧乙烷（42.2 mg, 0.727 mmol）、DIPEA（0.085 mL, 0.485 mmol）在EtOH（2 mL）中的混合物使用微波在70℃下加热1小时。反应混合物用MeOH（1 mL）处理，在氮气流下浓缩并通过MDAP（方法A）提纯以产生无色玻璃油形式的标题化合物(36 mg)。

LCMS (方法C): Rt = 0.94 min, MH⁺ 471。

实施例48.和49. (S)-1-((R)-3-((4-(1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8- 四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-醇和(S)- 1-((S)-3-((4-(1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑- 3-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-醇

通过使用20 mm x 25 cm Chiralpak IC柱的制备手性HPLC将(2S)-1-(3-((4-(1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)吡咯烷-1-基)丙-2-醇（实施例47, 34 mg）分离成其两种组分对映体。该柱用40%EtOH(+0.2%异丙基胺)/庚烷(+0.2%异丙基胺)使用20 mL/min的流速洗脱。合并适当的级分并蒸发产生两种对映体：

实施例48.: 9 mg, 清澈玻璃状。LCMS (方法C) Rt = 0.94 min, MH⁺ = 471。通过手性HPLC的对映体纯度 = >99.0% e.e。

实施例49.: 10 mg, 清澈玻璃状。LCMS (方法C) Rt = 0.94 min, MH⁺ = 471。通过手性HPLC的对映体纯度 = >99.0% e.e。

没有指定绝对立体化学。

实施例50. 1-(3-((4-(1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)吡咯烷-1-基)丙-1-酮

用HATU（101 mg, 0.267 mmol）和DIPEA（0.085 mL, 0.485 mmol）处理丙酸（19.76mg, 0.267 mmol）在DMF（1.25mL）中的溶液。反应混合物在氮气气氛下在室温下搅拌30分钟。反应混合物用1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-3-(1-(吡咯烷-3-基甲基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑和2-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-3-(1-(吡咯烷-3-基甲基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-2H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（100 mg,0.242 mmol）和DIPEA（0.085 mL, 0.485 mmol）在DMF（1.25 mL）中的混合物处理并搅拌另外2小时。

反应混合物用MeOH（1 mL）处理并在减压下浓缩。残留物通过MDAP（方法A）提纯以产生无色油形式的标题化合物(34 mg)。

LCMS (方法C): Rt = 0.93 min, MH⁺ 469。

实施例51.和52. (R)-1-(3-((4-(1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢- 1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)吡咯烷-1-基)丙-1-酮和(S)-1-(3- ((4-(1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)-1H- 吡唑-1-基)甲基)吡咯烷-1-基)丙-1-酮

通过使用30 mm x 25 cm Chiralpak AS-H柱的制备手性HPLC将1-(3-((4-(1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)吡咯烷-1-基)丙-1-酮（实施例50, 31 mg）分离成其两种组分对映体。该柱用30%EtOH(+0.2%异丙基胺)/庚烷(+0.2%异丙基胺)使用30 mL/min的流速洗脱。合并适当的级分并蒸发产生两种对映体：

实施例51.: 11 mg, 清澈玻璃状。LCMS (方法C) Rt = 0.93 min, MH⁺ = 469。通过手性HPLC的对映体纯度 = >99.0% e.e。

实施例52.: 12 mg, 清澈玻璃状。LCMS (方法C) Rt = 0.93 min, MH⁺ = 469.通过手性HPLC的对映体纯度 = >92.8% e.e。

没有指定绝对立体化学。

实施例53. 7-((4-(1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并 [4,5-c]吡唑-3-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)-1,1-二甲基四氢-1H-噁唑并[3,4-a]吡啶-3 (5H)-酮

用1 M TBAF溶液（3.80 mL, 3.8 mmol）处理4-(((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)甲基)-2-(2-羟基丙-2-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯（1786 mg, 3.49 mmol）在THF（30 mL）中的溶液。反应混合物在室温下搅拌2小时并用饱和碳酸氢钠溶液淬灭，并用EtOAc（3 x 30 ml）萃取。将反应混合物浓缩并通过使用0至100%梯度的EtOAc/环己烷的硅胶柱色谱法提纯以产生4-(羟甲基)-2-(2-羟基丙-2-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯（785 mg, 95%）。

用甲磺酰氯（34.6 mg, 0.302 mmol）处理4-(羟甲基)-2-(2-羟基丙-2-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯（55 mg, 0.201 mmol）和吡啶（0.033 mL, 0.402 mmol）在DCM（1 mL）中的溶液。反应混合物在室温下搅拌8小时并浓缩以产生粗制2-(2-羟基丙-2-基)-4-(((甲基磺酰基)氧基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯（78 mg, >99%）。

将氢化钠（在矿物油中的60重量%悬浮液, 4.7 mg, 0.118 mmol）添加到1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-3-(1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（30mg, 0.091 mmol）在DMF（0.5 ml）中的溶液中。将反应混合物搅拌30分钟并用粗制2-(2-羟基丙-2-基)-4-(((甲基磺酰基)氧基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯（50 mg, 0.142 mmol）在DMF（0.5 ml）中的溶液处理。溶液在室温下搅拌3小时并在60℃下搅拌1小时。将反应混合物浓缩并通过MDAP（方法B）提纯以产生标题化合物（3.6 mg, 8%）。

LCMS (方法A): Rt = 1.00 min, MH⁺ 511。

实施例54. 1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-3-(1-(((2R,4r,6S)-1,2,6-三甲基哌啶-4-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑

3-(1-(((2R,4r,6S)-2,6-二甲基哌啶-4-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)-1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（59 mg, 0.130 mmol）和甲醛溶液（37重量%，水性，0.145 mL, 1.947 mmol）在DMF（2 mL）中的混合物在氮气气氛下搅拌2小时。反应混合物用STAB（68.8 mg, 0.324 mmol）处理并搅拌整个周末。

反应混合物用碳酸氢钠的饱和水溶液（2 mL）以逐滴方式处理并搅拌20分钟。反应混合物进一步用饱和碳酸氢钠水溶液（25 mL）和盐水（25 mL）稀释并用EtOAc（2 x 50 mL）分相。合并的有机层经过疏水玻璃料，在减压下浓缩并通过MDAP（方法A）提纯以产生橙色油形式的标题化合物（20 mg, 33%）。

LCMS (方法C) : Rt = 1.07 min, [M+H]⁺ = 469。

实施例55. 1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-3-(3-甲基-1H-吡唑-5-基)-4,5,7, 8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑

用PdCl₂(dtbpf)（3 mg, 4.60 μmol）处理3-溴-1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（22 mg, 0.052 mmol）和(1-(叔丁氧基羰基)-3-甲基-1H-吡唑-5-基)硼酸（25 mg, 0.111mmol）在1,4-二氧杂环己烷（0.5 mL）和水（0.215mL）中的混合物并使用微波在80℃下加热60分钟。反应混合物用(1-(叔丁氧基羰基)-3-甲基-1H-吡唑-5-基)硼酸（25 mg, 0.111 mmol）在1,4-二氧杂环己烷（0.05 mL）中的溶液和磷酸钾（21 mg, 0.099 mmol）在水（0.02 mL）中的溶液处理。反应混合物使用微波在80℃下加热120分钟。

单独地，用[1,3-双(2,6-二异丙基苯基)咪唑-2-亚基](3-氯吡啶基)二氯钯（3.5mg, 5.20 μmol）处理3-溴-1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（22 mg, 0.052 mmol）和(1-(叔丁氧基羰基)-3-甲基-1H-吡唑-5-基)硼酸（25mg, 0.111mmol）在1,4-二氧杂环己烷（0.550 mL）和水（0.215 mL）中的混合物。混合物使用微波在80℃下加热60分钟。反应混合物用磷酸钾（21 mg, 0.099 mmol）在水（0.02 mL）中的溶液处理并使用微波在80℃下加热120分钟。

单独地，用Xphos Pd G2（4.09 mg, 5.20 μmol）处理3-溴-1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（22 mg, 0.052 mmol）和(1-(叔丁氧基羰基)-3-甲基-1H-吡唑-5-基)硼酸（25 mg, 0.111mmol）在1,4-二氧杂环己烷（0.5 mL）和水（0.215 mL）中的混合物。混合物使用微波在80℃下加热60分钟。反应混合物用溶解在1,4-二氧杂环己烷（0.05 mL）中的(1-(叔丁氧基羰基)-3-甲基-1H-吡唑-5-基)硼酸（25 mg,0.111 mmol）的溶液和磷酸钾（21 mg, 0.099 mmol）在水（0.02 mL）中的溶液处理并使用微波在80℃下加热120分钟。

合并这三种反应混合物并用DCM（10 mL）和水（10 mL）分相。分离有机层，水层用另外的DCM（3 x 10 mL）萃取。合并的有机层经过疏水玻璃料并在减压下浓缩以产生粗产物(123 mg)。粗产物使用MDAP（方法A）提纯以产生标题化合物（9 mg）。

LCMS (方法C): Rt = 0.96 min, MH⁺ 340。

实施例56. 1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-3-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8- 四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑

将3-溴-1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（50 mg, 0.146 mmol）、3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)-1H-吡唑（68 mg, 0.327 mmol）、磷酸钾（70mg, 0.330 mmol）、二环己基(2',4',6'-三异丙基-[1,1'-联苯]-2-基)膦（6 mg, 0.013 mmol）和Xphos Pd G2（10 mg, 0.013 mmol）的混合物添加到微波小瓶中。将小瓶加盖并用氮气吹扫。反应混合物用EtOH（0.250 ml）和水（0.250ml）处理并再吹扫小瓶。反应混合物在100℃下加热1小时，然后在100℃下加热整夜。

单独地，将3-溴-1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（20 mg, 0.058 mmol）、3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)-1H-吡唑（12mg, 0.058 mmol）、磷酸钾（27 mg, 0.127 mmol）和Xphos Pd G2（6 mg,7.63 μmol）的混合物添加到微波小瓶中。将小瓶加盖并用氮气吹扫。反应混合物用1,4-二氧杂环己烷（0.5 mL）和水（0.125 ml）处理并在80℃下加热整夜。反应混合物在氮气下用3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)-1H-吡唑（12mg, 0.058 mmol）在0.05 mL 1,4-二氧杂环己烷中的溶液处理。反应混合物在80℃下加热2小时，然后在100℃下加热另外4小时。反应混合物用Xphos Pd G2（3 mg, 3.81 μmol）和二环己基(2',4',6'-三异丙基-[1,1'-联苯]-2-基)膦（3 mg, 6.29 μmol）处理并在100℃下加热整夜。

合并这两批反应混合物并经过Celite®，用MeOH洗涤。滤液然后在减压下浓缩，残留物用EtOAc（10 mL）和水（10 mL）分相。分离有机层，水层用另外的EtOAc（3 x 10 mL）萃取。合并的有机层经过疏水玻璃料并在减压下浓缩以产生粗产物（144 mg）。粗产物通过MDAP（方法A）提纯以产生标题化合物（15 mg）。

LCMS (方法C): Rt = 0.88 min, MH⁺ 344。

实施例57. 3-(1,3-二甲基-1H-吡唑-5-基)-1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4, 5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑

在室温下在氮气气氛下用氢化钠 (在矿物油中的60重量%悬浮液, 4.81 mg,0.120 mmol)处理1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-3-(3-甲基-1H-吡唑-5-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（34 mg, 0.100 mmol）在THF（1 mL）中的溶液。将所得混合物搅拌1小时并用碘甲烷（7 μl, 0.112 mmol）处理。将反应混合物在室温下搅拌1小时并用水（10 mL）以逐滴方式处理。

反应混合物用EtOAc（10 mL）分相并分离有机层。水层用EtOAc（3 x 10 mL）萃取，合并的有机层在减压下浓缩以产生粗产物(33 mg)。粗产物通过MDAP（方法A）提纯以产生标题化合物（16 mg）。

LCMS (方法C): Rt = 1.03 min, MH⁺ 354。

实施例58. 1-(二甲基氨基)-3-(4-(1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)-1H-吡唑-1-基)丙-2-醇

向微波小瓶装载1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-3-(1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（50 mg, 0.152 mmol）、Cs₂CO₃（77 mg, 0.236 mmol）、2-(氯甲基)环氧乙烷（0.024 mL, 0.304 mmol）和DMF（5 mL）。密封小瓶并使用微波在60℃下加热1小时45分钟。反应混合物用2 M二甲胺的THF溶液（0.190 mL, 0.380 mmol）处理并使用微波在70℃下加热7小时。反应混合物用水（15 mL）稀释并用EtOAc（3 x 20 mL）萃取。合并的有机层经过疏水玻璃料并在减压下浓缩。该物质通过MDAP（方法B）提纯以产生白色固体形式的标题化合物（15 mg, 22%）。

LCMS (方法C): Rt = 0.87 min, MH⁺ 431。

实施例59. 3-(1-((3-氟-1-异丙基哌啶-4-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)-1-(5-氟- 6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑

将1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-3-(1-((3-氟哌啶-4-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（52 mg, 0.117 mmol）、DMF（0.6 mL）和丙酮（0.5 mL）的混合物在氮气气氛下搅拌1小时。反应混合物用STAB（99 mg, 0.468 mmol）处理并搅拌3小时。用碳酸氢钠的饱和水溶液（5 mL）淬灭反应，并用EtOAc（3 x 15 mL）萃取。合并的有机层用LiCl水溶液（2 x 50 mL）洗涤并在减压下浓缩。粗物质通过MDAP（方法B）提纯以产生标题化合物（37 mg, 64%）。

LCMS (方法C): Rt = 1.09 min, MH⁺ 487。

实施例60. 3-(1-(((3R,4S)-3-氟-1-异丙基哌啶-4-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)- 1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑

将1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-3-(1-(((3R,4S)-3-氟哌啶-4-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（57 mg, 0.128 mmol）、丙酮（0.5 mL）和DMF（0.6 mL）的混合物在氮气气氛下在室温下搅拌1小时。反应混合物用STAB（109 mg,0.513 mmol）处理并搅拌3小时。用碳酸氢钠的饱和水溶液（5 mL）淬灭反应，并用EtOAc（3 x15 mL）萃取。合并的有机层用LiCl水溶液（2 x 50 mL）洗涤并在减压下浓缩。粗物质通过MDAP（方法B）提纯以产生标题化合物（35 mg, 55%）。

LCMS (方法C): Rt = 1.15 min, MH⁺ 487。

实施例61. 5-(3-(1-((1-异丙基吡咯烷-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8- 四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-1-基)-2-甲氧基烟腈

将2-甲氧基-5-(3-(1-(吡咯烷-3-基甲基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-1-基)烟腈（35 mg, 0.050 mmol）和丙酮（1 mL）的混合物在氮气气氛下在室温下搅拌30分钟。反应混合物用STAB（42.4 mg, 0.200 mmol）处理并搅拌整夜。用碳酸氢钠的饱和水溶液（5 mL）淬灭反应，并用EtOAc（10 mL）分相。水层用EtOAc（3 x 15 mL）萃取。合并的有机层经过疏水玻璃料并在减压下浓缩以产生粗产物（56 mg）。粗产物通过MDAP（方法A）提纯以产生标题化合物（4 mg, 16%）。

LCMS (方法C): Rt = 1.05 min, MH⁺ 462。

实施例62. 1-(4-((4-(1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)哌啶-1-基)丙-1-酮

在氮气气氛下用三乙胺（0.063 mL, 0.455 mmol）和丙酰氯（0.030 mL, 0.341mmol）处理1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-3-(1-(哌啶-4-基甲基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（97 mg, 0.227 mmol）在DCM（2.5 mL）中的溶液。将反应混合物在室温下搅拌整夜，然后用碳酸氢钠（10 mL）淬灭并用DCM（3 x 10 mL）萃取。合并的有机层经过疏水玻璃料并在减压下浓缩以产生粗产物（102 mg）。粗产物通过MDAP（方法A）提纯以产生标题化合物（37 mg, 32%）。

LCMS (方法C): Rt = 0.96 min, MH⁺ 483。

实施例63. 1-(1-(((2R,4r,6S)-2,6-二甲基哌啶-4-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)- 3-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑

使用通用Boc-脱保护程序由(2R,4r,6S)-4-((4-(3-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-1-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)-2,6-二甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯（33 mg, 0.060 mmol）、DCM（0.5 mL）和TFA（0.185 mL）制备，以产生棕色固体形式的标题化合物(27 mg)。

LCMS (方法C) : Rt = 1.03 min, MH⁺ = 451。

实施例64. N-(5-(3-(1-(((2R,6S)-2,6-二甲基四氢-2H-吡喃-4-基)甲基)-1H- 吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-1-基)-2-甲氧基吡啶-3-基)甲磺酰胺

在室温下和在氩气气氛下用PdCl₂(dppf)-DCM（21.53 mg, 0.026 mmol）处理K₂CO₃（36.4 mg, 0.264 mmol）、1-(((2R,6S)-2,6-二甲基四氢-2H-吡喃-4-基)甲基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)-1H-吡唑（84 mg, 0.264 mmol）和N-(5-(3-溴-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-1-基)-2-甲氧基吡啶-3-基)甲磺酰胺（110 mg,0.264 mmol）在1,4-二氧杂环己烷（5 mL）和水（1.000 mL）中的混合物并在密封管中在搅拌下在100℃下加热16小时。

反应混合物用水（10 mL）稀释并用EtOAc（30 mL x 3）萃取。合并的有机层用饱和盐水（25 mL）洗涤，经硫酸钠干燥并在减压下浓缩以产生黄色液体形式的粗产物（150 mg）。粗产物通过硅胶柱色谱法提纯，用2% MeOH/DCM溶液洗脱以产生黄色固体形式的粗产物(20mg)。

单独地，在室温下和在氩气气氛下用PdCl₂(dppf)-DCM（31.3 mg, 0.038 mmol）处理K₂CO₃（159 mg, 1.150 mmol)、1-(((2R,6S)-2,6-二甲基四氢-2H-吡喃-4-基)甲基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)-1H-吡唑（123 mg, 0.383 mmol）和N-(5-(3-溴-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-1-基)-2-甲氧基吡啶-3-基)甲磺酰胺（160 mg, 0.383 mmol）在1,4-二氧杂环己烷（5 mL）和水（1.000 mL）中的混合物在并在密封管中在搅拌下在100℃下加热16小时。

反应混合物用水（10 mL）稀释并用EtOAc（30 mL x 3）萃取。合并的有机层用饱和盐水（25 mL）洗涤，经硫酸钠干燥并在减压下浓缩以产生黄色液体形式的粗产物（210 mg）。粗产物通过硅胶柱色谱法提纯，用2% MeOH/DCM溶液洗脱以产生棕色固体形式的粗产物(35mg)。

这两批粗产物通过使用硅胶(GF254)和50% EtOAc/己烷溶液的制备TLC提纯。刮掉吸收了所需产物的硅胶并溶解在10% MeOH/DCM溶液（20 mL）中，然后使用Celite®过滤并用10% MeOH/DCM溶液（10 mL x 2）洗涤。滤液在减压下蒸发以产生棕色固体形式的标题化合物(40 mg)。

LCMS (方法A) : Rt = 0.95 min, MH⁺ = 531。

实施例65. 3-(1-(((2R,4r,6S)-2,6-二甲基哌啶-4-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)- 1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑

使用通用Boc脱保护程序由(2R,4r,6S)-4-((4-(1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)-2,6-二甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯（447 mg, 0.649 mmol）、DCM（4 mL）和TFA（1.00 mL）制备。一部分粗产物(135 mg)通过MDAP（方法A）提纯以产生清澈油形式的标题化合物(8 mg)。

LCMS (方法C) : Rt = 1.02 min, MH⁺ = 451。

实施例66. 3-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-1-(1-(((2R,4r,6S)-1,2,6-三甲基哌啶-4-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑

将1-(1-(((2R,4r,6S)-2,6-二甲基哌啶-4-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)-3-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（20 mg, 0.044 mmol）、37重量%甲醛水溶液（0.264 mL, 3.55 mmol）、DMF（0.2 mL）的混合物在氮气气氛下搅拌1小时。反应混合物用STAB（23.5 mg, 0.111 mmol）处理并搅拌48小时。反应混合物用37重量%甲醛水溶液（0.132 mL, 1.775 mmol）和STAB（23.5 mg, 0.111 mmol）处理并将反应搅拌8小时。反应混合物用AcOH（2.54 µL, 0.044 mmol）处理并在50℃下搅拌整夜。反应混合物在减压下浓缩并通过MDAP（方法A）提纯以产生无色玻璃油形式的标题化合物（9 mg, 44%）。

LCMS (方法C) : Rt = 1.11 min, MH⁺ = 465。

实施例67. 1-(1-((1-异丙基哌啶-4-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)-3-(6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑

使用通用Suzuki偶联程序使用3-溴-1-(1-((1-异丙基哌啶-4-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（20 mg, 0.047 mmol）、(6-甲氧基吡啶-3-基)硼酸（14.48 mg, 0.095 mmol）、磷酸三钾（20.10 mg, 0.095 mmol）、Xphos Pd G2（2.61 mg, 3.31 μmol）、1,4-二氧杂环己烷（0.4 ml）和水（0.100 ml）制备，以产生油形式的标题化合物（4.4 mg, 21%）。

LCMS (方法C) : Rt = 1.00 min, MH⁺ = 451。

实施例68. 1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-3-(1-(((2R,4r,6S)-1,2,6-三甲基哌啶-4-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑

用甲酸（0.055 mL, 1.445 mmol）和甲醛水溶液（36重量%, 0.063 mL, 0.826mmol）处理3-(1-(((2R,4r,6S)-2,6-二甲基哌啶-4-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)-1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（186 mg, 0.413 mmol）在MeOH（2 mL）中的溶液。反应混合物在微波中在100℃下加热2小时，然后用另一份甲醛（0.063 mL, 0.826 mmol）和甲酸（0.055 mL, 1.445 mmol）处理并加热1小时。将混合物转移至微波小瓶并加入另外几份甲醛（0.063 mL, 0.826 mmol）和甲酸（0.055 mL, 1.445mmol）。混合物在微波中加热至100℃持续1小时。反应混合物用另一份甲醛水溶液（36重量%, 0.063 mL, 0.826 mmol）和甲酸（0.055 mL, 1.445 mmol）处理并在微波中在110℃下加热1小时。

用碳酸氢钠水溶液（3 mL）逐滴处理反应混合物并搅拌20分钟。用另外的碳酸氢钠水溶液处理反应混合物并用EtOAc（2 x 20 mL）萃取。合并的有机层经过疏水玻璃料，并在减压下浓缩以产生粗产物(167 mg)。

粗产物通过使用19 mm x 25 cm Xterra® Prep RP₁₈ OBD^TM柱的反相色谱法提纯，用30至90%梯度的MeCN和10 mM碳酸氢铵水溶液洗脱以产生白色油性沉淀物形式的标题化合物（19.8 mg, 82%纯度）。

LCMS (方法C) : Rt = 1.09 min, MH⁺ = 465。

实施例69. N-(5-(3-(2-(4-(2-羟基丙-2-基)哌啶-1-基)乙氧基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-1-基)-2-甲氧基吡啶-3-基)甲磺酰胺

向微波小瓶中加入溶解在DCM（1 mL）中的N-(5-(3-(2-(4-(2-羟基丙-2-基)哌啶-1-基)乙氧基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-1-基)-2-甲氧基吡啶-3-基)-N-(4-甲氧基苄基)甲磺酰胺（80 mg, 0.087 mmol），接着加入TFA（0.5 mL, 6.49 mmol）。反应混合物在微波反应器中在50℃下加热105分钟。加入NaHCO₃（1 mL）以淬灭反应混合物。将反应混合物转移至分液漏斗，用DCM（5 mL）分相，水层用另外的DCM（3 x 5 mL）萃取。合并的有机层经过疏水玻璃料并在减压下浓缩。粗产物通过MDAP（方法A）提纯以产生标题化合物（5mg, 10%）。

LCMS (方法C) : Rt = 0.69 min, MH⁺ = 524。

实施例70. 2-(1-(2-((1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)氧基)乙基)哌啶-4-基)丙-2-醇.甲酸盐

将2-(三丁基正膦亚基)乙腈（263 mg, 1.090 mmol）添加到1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-醇（100 mg, 0.363 mmol）和2-(1-(2-羟乙基)哌啶-4-基)丙-2-醇（68.0 mg, 0.363 mmol）在甲苯（3 mL）中的溶液中。反应混合物在100℃下搅拌12小时，然后通过MDAP（方法B）提纯以产生标题化合物（110 mg,62%）。

LCMS (方法A) : Rt = 0.62 min, MH⁺ = 445。

实施例71. 2-(1-(2-((1-(5-(氟甲基)-6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H- 氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)氧基)乙基)哌啶-4-基)丙-2-醇

向微波小瓶装载2-(三丁基正膦亚基)乙腈（0.081 mL, 0.307 mmol）和2-(1-(2-羟乙基)哌啶-4-基)丙-2-醇（59 mg, 0.315 mmol）。密封小瓶并用氮气吹扫。用1-(5-(氟甲基)-6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-醇（60 mg, 0.153mmol）在甲苯（1.5 mL）中的溶液处理反应混合物。再吹扫反应混合物并在100℃下加热2小时。反应混合物在氮气流下浓缩并将残留物溶于水（10 mL）中并用EtOAc（10 mL）分相。水层用另外的EtOAc（3 x 10 mL）萃取，合并的有机层经过疏水玻璃料并在减压下浓缩。粗产物通过MDAP（方法B）提纯以产生标题化合物（6.5 mg, 9%）。

LCMS (方法A) : Rt = 0.62 min, MH⁺ = 463。

实施例72. 2-(1-(2-((1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)氧基)乙基)哌啶-4-基)丙-2-醇.甲酸盐

向微波小瓶装载2-(三丁基正膦亚基)乙腈（0.23 mL, 0.877 mmol）和2-(1-(2-羟乙基)哌啶-4-基)丙-2-醇（167 mg, 0.892 mmol）。密封小瓶并用氮气吹扫，用1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-醇（165 mg, 0.443 mmol）在甲苯（4 mL）中的溶液处理反应混合物。再吹扫小瓶并将混合物在100℃下加热2小时，然后在氮气流下浓缩。将残留物溶于水（5 mL）中并用EtOAc（5 mL）分相。水层用另外的EtOAc（4 x 5 mL）萃取，合并的有机层经过疏水玻璃料并在减压下浓缩。粗产物通过MDAP（方法B）提纯以产生标题化合物（33 mg, 14%）。

LCMS (方法A) : Rt = 0.62 min, MH⁺ = 449。

实施例73. 5-(3-(2-(4-(2-羟基丙-2-基)哌啶-1-基)乙氧基)-4,5,7,8-四氢- 1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-1-基)-2-甲氧基烟腈

向微波小瓶装载2-(三丁基正膦亚基)乙腈（0.050 mL, 0.190 mmol）和2-(1-(2-羟乙基)哌啶-4-基)丙-2-醇（44 mg, 0.235 mmol）。密封小瓶并用氮气吹扫。用5-(3-羟基-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-1-基)-2-甲氧基烟腈（32 mg, 0.095 mmol）在甲苯（1 mL）中的溶液处理反应混合物，再吹扫小瓶并在100℃下加热2小时。反应混合物在氮气流下浓缩。将残留物溶于水（5 mL）中并用EtOAc（5 mL）分相。水层用另外的EtOAc（6 x 10mL）萃取，合并的有机层经过疏水玻璃料并在减压下浓缩。粗产物通过MDAP（方法B）提纯以产生标题化合物（14 mg, 31%）。

LCMS (方法C) : Rt = 0.60 min, MH⁺ = 456。

实施例74. 2-(1-(2-((1-(2-甲氧基嘧啶-5-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4, 5-c]吡唑-3-基)氧基)乙基)哌啶-4-基)丙-2-醇

在微波小瓶中在甲苯（0.5 mL）中合并1-(2-甲氧基嘧啶-5-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-醇（20 mg, 0.076 mmol）、2-(1-(2-羟乙基)哌啶-4-基)丙-2-醇（20 mg, 0.107 mmol）和2-(三丁基正膦亚基)乙腈（0.043 mL, 0.166 mmol）。反应混合物在微波中在120℃下加热4小时并在减压下浓缩并通过MDAP（方法B）提纯以产生标题化合物（5 mg, 15%）。

LCMS (方法A) : Rt = 0.50 min, MH⁺ = 432。

实施例75. 4-(((1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并 [4,5-c]吡唑-3-基)氧基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯

向微波小瓶装载1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-醇（51 mg, 0.185 mmol）、4-(羟甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯（80 mg, 0.372mmol）和2-(三丁基正膦亚基)乙腈（0.143 mL, 0.547 mmol）。密封小瓶并用氮气脱气。将无水甲苯（2.5 mL）添加到反应混合物中，然后在微波中在120℃下加热1小时。反应混合物在氮气流下浓缩。将残留物溶于水（5 mL）中并用EtOAc（5 mL）分相。水层用另外的EtOAc（3 x5 mL）萃取，合并的有机层经过疏水玻璃料并在减压下浓缩。粗产物通过MDAP（方法A）提纯以产生标题化合物（62 mg, 67%）。

LCMS (方法C) : Rt = 1.47 min, MH⁺ = 473。

实施例76. 1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-3-(哌啶-4-基甲氧基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑

向含有4-(((1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)氧基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯（57 mg, 0.115 mmol）的圆底烧瓶中加入DCM（4 mL），接着加入TFA（0.5 ml, 6.49 mmol）。在室温下搅拌30分钟后，加入NaHCO₃（10 mL）以淬灭反应。反应混合物用DCM（10 mL）分相，水层用另外的DCM（3 x 10 mL）洗涤。合并的有机层经过疏水玻璃料，在减压下浓缩，并在高真空线路上干燥整夜。粗产物通过MDAP（方法A）提纯以产生标题化合物（30 mg, 67%）。

LCMS (方法C) : Rt = 1.07 min, MH⁺ = 373。

实施例77. 3-((1-异丙基哌啶-4-基)甲氧基)-1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)- 4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑.甲酸盐

向微波小瓶装载1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-醇（51 mg, 0.185 mmol）、(1-异丙基哌啶-4-基)甲醇（68 mg, 0.411mmol）和2-(三丁基正膦亚基)乙腈（0.143 mL, 0.547 mmol）。密封小瓶并用氮气脱气。将无水甲苯（2.5 mL）添加到反应混合物中，然后在微波中在120℃下加热1小时。反应混合物用另外的(1-异丙基哌啶-4-基)甲醇（50 mg, 0.302 mmol）和2-(三丁基正膦亚基)乙腈（0.143 mL, 0.547 mmol）处理并将反应混合物在120℃下加热1小时。

反应混合物在氮气流下浓缩并将残留物溶于水（5 mL）中并用EtOAc（5 mL）分相。水层用另外的EtOAc（3 x 5 mL）萃取，合并的有机层经过疏水玻璃料并在减压下浓缩。粗产物通过MDAP（方法A）提纯以产生标题化合物（15 mg, 17%）。

LCMS (方法A) : Rt = 0.66 min, MH⁺ = 415。

实施例78. 3-(((1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并 [4,5-c]吡唑-3-基)氧基)甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯

向微波小瓶装载1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-醇（52 mg, 0.189 mmol）、3-(羟甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯（74 mg,0.368 mmol）和(三丁基正膦亚基)乙腈（0.143 mL, 0.547 mmol）。密封小瓶并用氮气脱气。将无水甲苯（2.5 mL）添加到脱气固体中。反应混合物在120℃下加热1小时并在氮气流下浓缩。将残留物溶于水（5 mL）中并用EtOAc（5 mL）分相。水层用另外的EtOAc（3 x 5 mL）萃取，合并的有机层经过疏水玻璃料并在减压下浓缩。粗产物通过MDAP（方法A）提纯以产生标题化合物（51 mg, 58%）。

LCMS (方法C) : Rt = 1.36 min, MH⁺ = 459。

实施例79. 3-(((1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并 [4,5-c]吡唑-3-基)氧基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯

向微波小瓶装载1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-醇（51 mg, 0.185 mmol）、3-(羟甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯（82mg, 0.381mmol）和(三丁基正膦亚基)乙腈（0.143 mL, 0.545 mmol）。密封小瓶并用氮气脱气。将无水甲苯（2.5 mL）添加到脱气固体中。反应混合物在微波中在120℃下加热1小时。反应混合物在氮气流下浓缩并将残留物溶于水（5 mL）中并用EtOAc（5 mL）分相。水层用另外的EtOAc（3x 5 mL）萃取，合并的有机层经过疏水玻璃料并在减压下浓缩。粗产物通过MDAP（方法A）提纯以产生标题化合物（60 mg, 65%）。

LCMS (方法C) : Rt = 1.43 min, MH⁺ = 473。

实施例80. 1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-3-(哌啶-3-基甲氧基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑

向含有3-(((1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)氧基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯（53 mg, 0.112 mmol）的圆底烧瓶中加入DCM（4 mL），接着加入TFA（0.5 mL, 6.49 mmol）。在室温下搅拌20分钟后，加入NaHCO₃（10 mL）以淬灭反应。反应混合物用DCM（10 mL）分相，水层用另外的DCM（3 x 10 mL）萃取。合并的有机层经过疏水玻璃料，在减压下浓缩，然后在高真空线路上干燥整夜。粗产物通过MDAP（方法A）提纯以产生标题化合物（29 mg, 68%）。

LCMS (方法C) : Rt = 1.01 min, MH⁺ = 373。

实施例81. (S)-3-(((1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)氧基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯

向微波小瓶装载1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-醇（203 mg, 0.737 mmol）、(S)-3-(羟甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯（181 mg,0.841 mmol）和(三丁基正膦亚基)乙腈（0.3mL, 1.144 mmol）。密封小瓶并用氮气脱气。将无水甲苯（8 mL）添加到脱气固体中。在110℃下搅拌2小时后，反应混合物在氮气流下浓缩。将残留物溶于水（10 mL）中并用EtOAc（10 mL）分相。水层用另外的EtOAc（3 x 10 mL）萃取，合并的有机层经过疏水玻璃料并在减压下浓缩。粗产物通过硅胶柱色谱法提纯，用0至50%梯度的环己烷 / EtOAc洗脱以产生标题化合物（293 mg, 80%）。

LCMS (方法A，酸) : Rt = 1.45 min, MH⁺ = 473。

实施例82. (S)-1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-3-(哌啶-3-基甲氧基)-4,5,7, 8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑

向含有(S)-3-(((1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)氧基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯（293 mg, 0.620 mmol）的圆底烧瓶中加入DCM（6 mL），接着加入TFA（1 mL, 12.98 mmol）。在氮气气氛下在室温下搅拌1小时后，加入NaHCO₃（10 mL）以淬灭反应。反应混合物用DCM（10 mL）分相，水层用另外的DCM（3 x 10mL）萃取。合并的有机层经过疏水玻璃料并在减压下浓缩。化合物经过使用甲醇的10 g氨基丙基柱以产生标题化合物（211 mg, 82%）。

LCMS (方法C) : Rt = 1.04 min, MH⁺= 373。

实施例83. (S)-1-(3-(((1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)氧基)甲基)哌啶-1-基)-2-甲基丙-2-醇

将DIPEA（0.061 mL, 0.348 mmol）和1-氯-2-甲基丙-2-醇（0.018 mL, 0.174mmol）添加到在EtOH（1 mL）中的(S)-1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-3-(哌啶-3-基甲氧基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（48 mg, 0.116 mmol）中。在微波中将反应混合物加热至90℃持续1小时。将1-氯-2-甲基丙-2-醇（0.018 mL, 0.174 mmol）添加到反应混合物中，其在微波中在90℃下加热另外2小时。将1-氯-2-甲基丙-2-醇（0.018 mL, 0.174mmol）添加到反应混合物中，其在微波中加热另外5小时。反应混合物在氮气流下浓缩并使用MDAP（方法A）提纯以产生标题化合物（44.5 mg, 86%）。

LCMS (方法C) : Rt = 1.31 min, MH⁺= 445。

实施例84. (R)-1-((S)-3-(((1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢- 1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)氧基)甲基)哌啶-1-基)丙-2-醇

将DIPEA（0.041 mL, 0.232 mmol）和(S)-2-甲基环氧乙烷（0.012 mL, 0.174mmol）添加到在EtOH（1 mL）中的(S)-1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-3-(哌啶-3-基甲氧基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（48 mg, 0.116 mmol）中。反应混合物在微波中在90℃下加热1小时。将(S)-2-甲基环氧乙烷（0.012 mL, 0.174 mmol）添加到反应混合物中，其在微波中在90℃下加热另外1小时。反应混合物在减压下浓缩并通过MDAP（方法A）提纯以产生标题化合物（36 mg, 69%）。

LCMS (方法C) : Rt = 1.18 min, MH⁺= 431。

实施例85. (S)-1-((S)-3-(((1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢- 1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)氧基)甲基)哌啶-1-基)丙-2-醇

将DIPEA（0.041 mL, 0.232 mmol）和(R)-2-甲基环氧乙烷（0.012 mL, 0.174mmol）添加到在EtOH（1 mL）中的(S)-1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-3-(哌啶-3-基甲氧基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（48 mg, 0.116 mmol）中。反应混合物在微波中在90℃下加热2小时。将另外的(R)-2-甲基环氧乙烷（0.012 mL, 0.174 mmol）添加到反应混合物中，其在90℃下加热另外45分钟。反应混合物在减压下浓缩并通过MDAP（方法A）提纯以产生标题化合物（32 mg, 61%）。

LCMS (方法C) : Rt = 1.19 min, MH⁺= 431。

实施例86. (R)-3-(((1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)氧基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯

向微波小瓶装载1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-醇（100 mg, 0.363 mmol）、(R)-3-(羟甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯（78 mg,0.363 mmol）和(三丁基正膦亚基)乙腈（0.143 mL, 0.547 mmol）。密封小瓶并用氮气脱气。将无水甲苯（3.5 mL）添加到脱气固体中。反应混合物在110℃下加热6小时并在氮气流下浓缩。将残留物溶于水（5 mL）中并用EtOAc（5 mL）分相。水层用另外的EtOAc（3 x 5 mL）萃取，合并的有机层经过疏水玻璃料并在减压下浓缩。粗产物通过MDAP（方法A）提纯以产生标题化合物（96 mg, 55%）。

LCMS (方法C) : Rt = 1.44 min, MH⁺= 473。

实施例87. (S)-1-(2-(((1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)氧基)甲基)吗啉代)-2-甲基丙-2-醇

将DIPEA（0.112 mL, 0.642 mmol）和1-氯-2-甲基丙-2-醇（0.033 mL, 0.321mmol）添加到(S)-1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-3-(吗啉-2-基甲氧基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（89 mg, 0.214 mmol）在EtOH（1.5 mL）中的溶液中。反应混合物使用微波在90℃下加热2小时。将1-氯-2-甲基丙-2-醇（0.033 mL, 0.321 mmol）添加到反应混合物中，其使用微波加热8小时。反应混合物在氮气流下浓缩，然后使用MDAP（方法A）提纯以产生标题化合物（23 mg, 22%）。

LCMS (方法C) : Rt = 1.08 min, MH⁺= 447。

实施例88. 3-((1-异丙基吡咯烷-3-基)甲氧基)-1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3- 基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑.甲酸盐

将1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-醇（50 mg, 0.182 mmol）、(1-异丙基吡咯烷-3-基)甲醇（38 mg, 0.272 mmol）和2-(三丁基正膦亚基)乙腈（0.545 mL, 0.545 mmol）合并在甲苯（1 mL）中。密封反应容器在搅拌下在110℃下加热18小时。反应混合物用另外的2-(三丁基正膦亚基)乙腈（0.273 mL, 0.273mmol）和(1-异丙基吡咯烷-3-基)甲醇（25 mg, 0.181 mmol）处理并在密封反应容器中在搅拌下在110℃下加热18小时。反应混合物用CHCl₃稀释并向下经过已用CHCl₃（3ml）预调节的硅胶SPE柱(1 g)。该SPE柱用乙醚、然后5% MeCN的乙醚溶液、然后EtOAc洗脱。在EtOAc中洗脱的产物在氮气流下浓缩。粗产物通过MDAP（方法D）提纯以产生标题化合物（2.9 mg, 4%）。

LCMS (方法C) : Rt = 1.29 min, MH⁺= 401。

下表中的实施例（实施例89-95）以与对前一实施例（实施例88）所述类似的方式制备。

实施例编号	结构	名称	LCMS方法	Rtmin	MH<sup>+</sup>
						89	1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-3-((1-甲基吡咯烷-3-基)甲氧基)-4,5,7,8-四氢-1<i>H</i>-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑.甲酸盐.	C	1.20	373
90		1-(3-(((1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1<i>H</i>-氧杂䓬并[4,5-<i>c</i>]吡唑-3-基)氧基)甲基)吡咯烷-1-基)乙酮.甲酸盐.	C	0.97	401
						91	((1<i>R</i>,2<i>S</i>)-2-(((1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1<i>H</i>-氧杂䓬并[4,5-<i>c</i>]吡唑-3-基)氧基)甲基)环丙基)氨基甲酸叔丁酯.甲酸盐.	C	1.26	445
92		3-氟-3-(((1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1<i>H</i>-氧杂䓬并[4,5-<i>c</i>]吡唑-3-基)氧基)甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯.甲酸盐.	C	1.33	477
						93	4,4-二氟-3-(((1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1<i>H</i>-氧杂䓬并[4,5-<i>c</i>]吡唑-3-基)氧基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯.甲酸盐.	C	1.42	509
94		3-((1,3-二甲基哌啶-3-基)甲氧基)-1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1<i>H</i>-氧杂䓬并[4,5-<i>c</i>]吡唑.甲酸盐.	C	1.34	401
						95	1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-3-((1-(2-甲氧基乙基)-3-甲基吡咯烷-3-基)甲氧基)-4,5,7,8-四氢-1<i>H</i>-氧杂䓬并[4,5-<i>c</i>]吡唑.甲酸盐.	C	1.22	431

实施例96. 1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-3-((吡咯烷-3-基)甲氧基)-4,5,7, 8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑

向含有3-(((1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)氧基)甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯（50 mg, 0.104 mmol）的圆底烧瓶中加入DCM（4 mL），接着加入TFA（0.5 ml, 6.49 mmol）。在室温下搅拌1小时后，加入NaHCO₃ (10mL)以淬灭反应。反应混合物用DCM（10 mL）分相，水层用另外的DCM（3 x 10 mL）萃取。合并的有机萃取物经过疏水玻璃料干燥并在减压下浓缩。粗产物通过MDAP（方法A）提纯以产生标题化合物（23 mg）。

LCMS (方法C) : Rt = 1.02 min, MH⁺ = 359。

实施例97. 1-(6-甲氧基吡啶-3-基)-3-(2-(1-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基)吡啶-4- 基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑

将1-(4-(1-(6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)吡啶-2-基)乙酮（100 mg, 0.274 mmol）、异丙醇钛(IV)（0.096 mL, 0.329 mmol）、乙酸（0.031 mL, 0.549 mmol）和1-甲基哌嗪（0.046 mL, 0.412 mmol）在THF（1 mL）中的混合物在氮气下在室温下搅拌1小时。反应混合物用三乙酰氧基硼氢化钠（116 mg, 0.549 mmol）处理并通过抽空/再填充将反应混合物置于氮气气氛下，然后使用微波在100℃下加热1小时。反应混合物用水（5 mL）处理并经Celite®垫过滤，用EtOAc（200 mL）洗涤。在减压下除去溶剂。将残留物溶于EtOAc（50 mL）和水（50 mL）中并分离各层。通过加入饱和NaHCO₃（10mL）将水相碱化至pH 10并用EtOAc（3 x 40 mL）萃取。合并的有机萃取物经过疏水玻璃料干燥并在减压下浓缩以产生标题化合物（48 mg, 39%）。

LCMS (方法C) : Rt =0.91 min, MH⁺= 449。

实施例98. 1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-3-(2-(1-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基)吡啶-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑

将1-(4-(1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)吡啶-2-基)乙-1-酮（87 mg, 0.228 mmol）、异丙醇钛(IV)（0.08 mL, 0.273mmol）、乙酸（0.026 mL, 0.455 mmol）和1-甲基哌嗪（0.038 mL, 0.314 mmol）在THF（0.5mL）中的混合物在氮气下在室温下搅拌30分钟。反应混合物用三乙酰氧基硼氢化钠（96 mg,0.455 mmol）处理并通过抽空/再填充置于氮气气氛下，然后使用微波在100℃下加热1小时。反应混合物经Celite®垫过滤，用EtOAc（20 mL）洗涤。有机相用水（30 mL）萃取，水相用2 M NaOH水溶液（20 mL）碱化，然后用EtOAc（50 mL）萃取。有机萃取物经过疏水玻璃料并在减压下浓缩以产生浅棕色固体形式的标题化合物（39 mg）。

LCMS (方法C) : Rt = 0.98 min, MH⁺= 467。

实施例99. 1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-3-(2-(1-(4-异丙基哌嗪-1-基)乙基) 吡啶-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑

将1-(4-(1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)吡啶-2-基)乙-1-酮（150 mg, 0.392 mmol）、异丙醇钛(IV)（0.138 mL, 0.471mmol）、乙酸（0.045 mL, 0.785 mmol）和1-异丙基哌嗪（75 mg, 0.588 mmol）在THF（0.5mL）中的混合物在氮气下在室温下搅拌30分钟。反应混合物用三乙酰氧基硼氢化钠（166mg, 0.785 mmol）处理并通过抽空/再填充置于氮气气氛下，然后使用微波在100℃下加热1小时。反应混合物经Celite®垫过滤，用EtOAc（20 mL）洗涤。有机相用水（30 mL）萃取，水相用2 M NaOH水溶液（20 mL）碱化，然后用EtOAc（50 mL）萃取。有机萃取物经过疏水玻璃料并在减压下浓缩以产生棕色油形式的标题化合物（114 mg）。

LCMS (方法C) : Rt = 1.10 min, MH⁺= 495。

实施例100. 1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-3-(2-(1-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基)吡啶-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑

将1-(4-(1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)吡啶-2-基)乙酮（50 mg, 0.132 mmol）、异丙醇钛(IV)（0.046 mL, 0.159mmol）、乙酸（0.015 mL, 0.264 mmol）和1-甲基哌嗪（0.022 mL, 0.198 mmol）在THF（1 mL）中的混合物在氮气下在室温下搅拌30分钟。反应混合物用三乙酰氧基硼氢化钠（56 mg,0.264 mmol）处理并通过抽空/再填充置于氮气气氛下，然后使用微波在100℃下加热1小时。反应混合物经Celite®垫过滤，用EtOAc（20 mL）洗涤。将有机相萃取到水（30 mL）中，水相用饱和NaHCO₃（20 mL）碱化，然后用EtOAc（50 mL）萃取。有机萃取物经过疏水玻璃料干燥并在减压下浓缩以产生白色固体形式的标题化合物（26 mg）。

LCMS (方法C) : Rt = 1.03 min, MH⁺= 463。

实施例101. 3-(2-(1-(4-异丙基哌嗪-1-基)乙基)吡啶-4-基)-1-(6-甲氧基-5- 甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑

将1-(4-(1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)吡啶-2-基)乙酮（100 mg, 0.264 mmol）、异丙醇钛(IV)（0.093 mL, 0.317mmol）、乙酸（0.030 mL, 0.528 mmol）和1-异丙基哌嗪（50.8 mg, 0.396 mmol）在THF（0.5mL）中的混合物在氮气下在室温下搅拌30分钟。反应混合物用三乙酰氧基硼氢化钠（112mg, 0.528 mmol）处理并通过抽空/再填充置于氮气气氛下，然后使用微波在100℃下加热1小时。反应混合物经Celite®垫过滤，用EtOAc（20 mL）洗涤。将有机相萃取到水（30 mL）中，水相用2 M NaOH水溶液（20 mL）碱化，然后用EtOAc（50 mL）萃取。有机萃取物经过疏水玻璃料并在减压下浓缩以产生浅棕色固体形式的标题化合物（39 mg）。

LCMS (方法C) : Rt = 1.15 min, MH⁺= 491。

实施例102. 1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-3-(2-(1-((3S,5R)-3,4,5-三甲基哌嗪-1-基)乙基)吡啶-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑

将1-(4-(1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)吡啶-2-基)乙酮（100 mg, 0.264 mmol）、异丙醇钛(IV)（0.093 mL, 0.317mmol）、乙酸（0.030 mL, 0.528 mmol）和(2S,6R)-1,2,6-三甲基哌嗪（44 mg, 0.343 mmol）在THF（0.5 mL）中的混合物在氮气下在室温下搅拌1.5小时。加入三乙酰氧基硼氢化钠（112mg, 0.528 mmol）并通过抽空/再填充将反应混合物置于氮气气氛下，然后使用微波在100℃下加热1小时。反应混合物经Celite®垫过滤，用EtOAc（20 mL）洗涤。有机相用水（10 mL）萃取，水相用饱和NaHCO₃（10 mL）碱化，然后用EtOAc（2 x 10 mL）萃取。有机萃取物经过疏水玻璃料干燥并在减压下浓缩。将残留物溶于MeOH中，在氮气流下浓缩并在真空炉中在40℃下干燥1.5小时以产生浅橙色泡沫形式的标题化合物（70 mg）。

LCMS (方法A) : Rt = 0.60 min, MH⁺= 491。

实施例103. 1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-3-(1-((3-氟哌啶-4-基)甲基)-1H- 吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑

使用通用Boc-脱保护程序由3-氟-4-((4-(1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯（75mg, 0.138 mmol）、DCM（2 mL）和TFA（0.637 mL）制备，只是反应混合物使用微波在70℃下加热15分钟，以产生标题化合物（52 mg）。

LCMS (方法C): Rt = 0.90 min, MH⁺ 445。

粗制化合物不经进一步提纯进行下一反应步骤。

实施例104. 1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-3-(1-(((3R,4S)-3-氟哌啶-4-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑

使用通用Boc-脱保护程序由(3R,4S)-3-氟-4-((4-(1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯（102 mg, 0.187 mmol）、DCM（2 mL）和TFA（0.866 mL）制备，只是反应混合物使用微波在70℃下加热15分钟，以产生标题化合物（57 mg, 55%）。

LCMS (方法C): Rt = 0.91 min, MH⁺ 445。

实施例105. (S)-2-(((1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)氧基)甲基)吗啉-4-甲酸叔丁酯

向微波小瓶装载1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-醇（50 mg, 0.182 mmol）、(三丁基正膦亚基)乙腈（0.143 mL, 0.545mmol）和(S)-2-(羟甲基)吗啉-4-甲酸叔丁酯（79 mg, 0.363 mmol）。密封小瓶并用氮气脱气。将无水甲苯（1 mL）添加到脱气固体中。反应混合物在120℃下加热4小时并在氮气流下浓缩。将残留物溶于水（10 mL）中并用EtOAc（10 mL）分相。水层用另外的EtOAc（2 x 5 mL）萃取。合并的有机层经过疏水玻璃料并在减压下浓缩。粗产物使用反相色谱法使用C18硅胶柱和50至99%梯度的MeCN和0.1% NH₃/水 + 10 mM碳酸氢铵提纯以提供标题化合物（109mg, >99%）。

LCMS (方法C) : Rt = 1.30 min, MH⁺= 475。

粗制化合物不经进一步提纯用于下一步骤。

实施例106. (S)-1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-3-(吗啉-2-基甲氧基)-4,5, 7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑

用TFA（0.159 mL, 2.067 mmol）处理(S)-2-(((1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)氧基)甲基)吗啉-4-甲酸叔丁酯（109 mg,0.207 mmol）在DCM（1 mL）中的溶液。反应混合物在室温下搅拌整个周末，然后用饱和碳酸氢钠（2 mL）淬灭并搅拌30分钟。反应混合物用碳酸氢钠（4 mL）处理并用DCM（3 x 10 mL）萃取。合并的有机层经过疏水玻璃料并在减压下浓缩以提供标题化合物（89 mg, >99%）。

LCMS (方法C) : Rt = 0.87 min, MH⁺= 375。

粗物质不经进一步提纯用于下一步骤。

实施例107. (4-异丙基哌嗪-1-基)(2-(1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7, 8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)噁唑-5-基)甲酮

3-溴-1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑和3-溴-2-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-2H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（220mg, 0.651 mmol）的混合物在微波小瓶中用(4-异丙基哌嗪-1-基)(噁唑-5-基)甲酮（145mg, 0.651 mmol）、氯化钯(II)（24 mg, 0.135 mmol）、特戊酸（40 mg, 0.392 mmol）、XPhos（62 mg, 0.130 mmol）和碳酸钾（180 mg, 1.302 mmol）处理。密封微波小瓶并用氮气吹扫。用甲苯（2.5 mL）处理反应混合物并在110℃下加热96小时。

反应混合物经Celite®过滤，用MeOH（两个柱体积）洗涤，并在减压下浓缩溶剂。粗物质用碳酸钠的饱和水溶液（20 mL）处理并用EtOAc（20 mL）分相。分离有机层，水层用EtOAc（2 x 20 mL）萃取。合并的有机层经过疏水玻璃料并在减压下浓缩以产生棕色胶质形式的粗产物（400 mg）。粗产物通过MDAP（方法B）提纯以产生标题化合物（91 mg, 28%）。

LCMS (方法A): Rt = 0.64 min, MH⁺ 481。

实施例108. 4-((4-(1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)哌啶-4-醇

使用通用Boc-脱保护程序由4-羟基-4-((4-(1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯（155 mg, 0.288 mmol）、DCM（2.5 mL）和TFA（0.67 mL）制备以产生灰白色胶质形式的标题化合物（245 mg, >99%）。

LCMS (方法C): Rt = 0.86 min, MH⁺ = 439。

粗产物不经进一步提纯进行下一合成步骤。

实施例109. 3-(1-((4-氟哌啶-4-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)-1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑

使用通用Boc脱保护程序由4-氟-4-((4-(1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯（153mg）、DCM（2 mL）和TFA（0.6 mL）制备以产生棕色胶质形式的标题化合物(113 mg)。

LCMS (方法C): Rt = 0.98 min, MH⁺ = 441。

实施例110. 1-(6-甲氧基吡啶-3-基)-3-(2-((S)-1-((3S,5R)-3,4,5-三甲基哌嗪-1-基)乙基)吡啶-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑

将3-溴-1-(6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（4.31g, 13.30 mmol）、磷酸钾（8.47 g, 39.9 mmol）、Xphos Pd G2（0.262 g, 0.332 mmol）和XPhos（0.158 g, 0.332 mmol）分配在3个微波小瓶之间。将(2S,6R)-1,2,6-三甲基-4-((S)-1-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)吡啶-2-基)乙基)哌嗪（4.78 g,13.30 mmol）溶解在乙醇（21 mL）中并且也分配在3个微波小瓶之间。将水（21 mL）分配在3个微波小瓶之间，然后将反应混合物用氮气脱气并使用微波在100℃下加热3小时。合并反应混合物并经Celite®过滤，用EtOAc洗涤，并在减压下浓缩滤液。将粗产物溶于EtOAc（150 mL）和水（150 mL）中并分离各层。水相用EtOAc（2 x 150 mL）萃取，合并的有机萃取物经过疏水玻璃料干燥并在减压下浓缩。粗产物通过在KP-NH硅胶上的色谱法提纯，用含有1%NEt₃的EtOAc在环己烷中的40%溶液洗脱。所得残留物通过在KP-NH硅胶上的色谱法进一步提纯，用0-40%含有1% NEt₃的MeOH/EtOAc洗脱。将所得残留物溶于EtOAc（30 mL）中并加入QuadraPure® TU金属清除剂（4 g）并将该混合物在75℃下加热5小时。通过真空过滤除去QuadraPure® TU，用EtOAc洗涤，滤液在减压下浓缩并在高真空线路上干燥以产生标题化合物（3.58 g, 54%）。

LCMS (方法C): Rt = 1.00 min, MH⁺ 477。通过手性HPLC的对映体纯度 = >99.0% e.e。

下表中的实施例（实施例111-114）以与对前一实施例（实施例110）所述类似的方式使用指定的芳基卤中间体和下列硼酸制备：

(2S,6R)-1,2,6-三甲基-4-((S)-1-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)吡啶-2-基)乙基)哌嗪

(S)-1-甲基-4-(1-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)吡啶-2-基)乙基)哌嗪

实施例114. (S)-1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-3-(2-(1-(4-甲基哌嗪-1-基) 乙基)吡啶-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑

向甲磺酸(R)-1-(4-(1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)吡啶-2-基)乙酯（3.3 g, 7.20mmol）在DMF（30 mL）中的搅拌溶液中加入DIPEA（2.51 mL, 14.39 mmol），接着加入1-甲基哌嗪（0.721 g, 7.20 mmol）。反应混合物在氮气下在50℃下搅拌6小时。反应混合物用水（50 mL）淬灭，用10% MeOH/DCM（3 x100 mL）萃取。合并的有机萃取物用盐水（100 mL）洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并在减压下浓缩。粗物质预吸收在硅胶（100-200目, 15 g）上并通过用0-20% MeOH/DCM洗脱的正相柱色谱法提纯。合并适当的级分并在减压下浓缩，残留物通过手性SFC（方法A）提纯以提供标题化合物（1.8 g）。

LCMS (方法B): Rt = 1.46 min, MH⁺ 463。

实施例115. 1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-3-(1-(1-(1-甲基哌啶-4-基)乙基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑

将1-(4-(1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)吡啶-2-基)乙酮（1 g, 2.64 mmol）、1-(哌嗪-1-基)丙-1-酮（0.564 g, 3.96mmol）、四异丙氧基钛（0.962 mL, 3.17 mmol）、乙酸（0.303 mL, 5.29 mmol）和1,4-二氧杂环己烷（10 mL）的混合物在氮气气氛下在室温下搅拌30分钟。加入三乙酰氧基硼氢化钠（1.120 g, 5.29 mmol）并将混合物加热到120℃持续16小时。反应混合物经Celite®过滤，用EtOAc洗涤。将产物萃取到水（50 mL）中，然后用饱和NaHCO₃溶液（50 mL）将水相碱化。水相用EtOAc（100 mL）萃取。有机层经Na₂SO₄干燥，过滤并在减压下浓缩。粗物质通过制备HPLC（方法C）提纯以提供外消旋化合物（450 mg），其通过手性SFC（方法B）进一步提纯以提供标题化合物（155 mg）。

LCMS (方法B): Rt = 1.65 min, MH⁺ 505。

通过比较实验溶液VCD谱与模型结构的计算VCD谱来指定绝对构型。

实施例116. (S)-1-(1-(4-(1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)吡啶-2-基)乙基)-3-甲基咪唑烷-2-酮

在一个反应容器中，将双(三甲基甲硅烷基)氨基锂溶液（1 M在THF中, 5.9 mL,5.9 mmol）逐滴添加到1-甲基-2-咪唑烷酮（0.626 g, 6.28 mmol）在2-MeTHF（9 mL）中的溶液中并将混合物搅拌17分钟。逐滴加入在2-MeTHF（9 mL）中的甲磺酸1-(4-(1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)吡啶-2-基)乙酯（0.91g, 1.97 mmoL）并将混合物加热至80℃整夜。在第二反应容器中，将双(三甲基甲硅烷基)氨基锂溶液（1 M在THF中, 5.9 mL, 5.9 mmol）逐滴添加到1-甲基-2-咪唑烷酮（0.626 g,6.28 mmol）在2-MeTHF（9 mL）中的溶液中并将混合物搅拌17分钟。逐滴加入在2-MeTHF（9mL）中的甲磺酸1-(4-(1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)吡啶-2-基)乙酯（0.91 g, 1.97 mmoL）并将混合物加热至80℃整夜。合并粗制反应混合物，接着加入MeOH以获得溶液。在减压下除去溶剂，粗物质通过在硅胶上的正相柱色谱法提纯，用0-20% MeOH/DCM洗脱。以0.19 g和0.91 g规模重复反应，合并所有纯化物质并通过使用30 mm x 25 cm Chiralpak AD-H柱的制备手性HPLC提纯。该柱用20:80正庚烷/乙醇使用45 mL/min的流速洗脱以提供标题化合物（0.957 g）。

LCMS (方法E): Rt = 0.68 min, MH⁺ 466。

实施例117. 3-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-1-(1-(1-(1-甲基哌啶-4-基)乙基)- 1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑

密封3-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-1-(1-(1-(哌啶-4-基)乙基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（150 mg, 0.341 mmol）、甲醛（36.5%水溶液,0.103 mL, 1.362 mmol）和甲酸（0.091 mL, 2.384 mmol）在甲醇（1.5 mL）中的溶液并置于氮气气氛下。混合物在微波中在80℃下加热1.5小时。将饱和NaHCO₃水溶液逐滴添加到反应混合物中直至该溶液达到pH 8，然后加入更多以产生大约50 mL的水相。在减压下除去MeOH，水相用EtOAc（2 x 50 mL）萃取。合并的有机萃取物用饱和NaHCO₃水溶液（50 mL）洗涤，水相用另外的EtOAc（20 mL）萃取。合并的有机萃取物经过疏水玻璃料干燥并在减压下除去溶剂以提供标题化合物（142 mg）。

LCMS (方法C): Rt = 1.03 min, MH⁺ 455。

实施例118和119. (S)-3-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-1-(1-(1-(1-甲基哌啶-4- 基)乙基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑和(R)-3-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-1-(1-(1-(1-甲基哌啶-4-基)乙基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H- 氧杂䓬并[4,5-c]吡唑

通过使用30 mm x 25 cm Chiralpak AD-H柱的制备手性HPLC将3-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-1-(1-(1-(1-甲基哌啶-4-基)乙基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（实施例117）分离成其两种组分对映体。该柱用30% EtOH(+0.2%异丙基胺)/庚烷(+0.2%异丙基胺)使用30 mL/min的流速洗脱。合并适当的级分并蒸发产生两种对映体：

实施例118: 39 mg, 无色油。LCMS (方法C) Rt = 1.04 min, MH⁺ = 455。通过手性HPLC的对映体纯度 = >99.0% e.e。

实施例119: 42 mg, 无色油。LCMS (方法C) Rt = 1.04 min, MH⁺ = 455。通过手性HPLC的对映体纯度 = >99.0% e.e。

没有指定绝对立体化学。

实施例120. 1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-3-(1-(1-(1-甲基哌啶-4-基)乙基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑

将1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-3-(1-(1-(哌啶-4-基)乙基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（65 mg, 0.149 mmol）、甲醛（0.017 mL,0.234 mmol）、甲酸（0.033 mL, 0.869 mmol）和无水MeOH（1 mL）添加到微波小瓶中。将反应混合物置于氮气下，然后使用微波在80℃下加热2小时。通过逐滴加入饱和NaHCO₃水溶液（2mL）淬灭反应混合物并搅拌5分钟，然后进一步用饱和NaHCO₃水溶液（5 mL）稀释并用乙酸乙酯（3 x 20 mL）萃取。合并的有机萃取物经过疏水玻璃料并在减压下浓缩。粗产物通过MDAP（方法A）提纯以产生标题化合物（18 mg）。

LCMS (方法C): Rt = 1.07 min, MH⁺ 451。

实施例121和122. (S)-1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-3-(1-(1-(1-甲基哌啶- 4-基)乙基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑和(R)-1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-3-(1-(1-(1-甲基哌啶-4-基)乙基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑

通过使用30 mm x 25 cm Chiralpak IF柱的制备手性HPLC将1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-3-(1-(1-(1-甲基哌啶-4-基)乙基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（实施例120）分离成其两种组分对映体。该柱用100% MeCN(+0.2%异丙基胺)使用30 mL/min的流速洗脱。合并适当的级分并蒸发产生两种对映体：

实施例121: 4 mg. LCMS (方法C) Rt = 1.03 min, MH⁺ = 451。通过手性HPLC的对映体纯度 = >99.0% e.e。

实施例122: 4 mg. LCMS (方法C) Rt = 1.03 min, MH⁺ = 451。通过手性HPLC的对映体纯度 = >94.9% e.e。

没有指定绝对立体化学。

实施例123. (R)-1-(6-甲氧基吡啶-3-基)-3-(1-(1-(1-甲基哌啶-4-基)乙基)- 1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑

将(R)-1-(6-甲氧基吡啶-3-基)-3-(1-(1-(哌啶-4-基)乙基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（3.49 g, 8.26 mmol）、甲酸（1.1 mL, 28.7 mmol）、甲醛（1 mL, 13.43 mmol）和MeOH（20 mL）分配在2个微波小瓶之间。密封小瓶，用氮气吹扫并使用微波在80℃下加热3小时。合并反应混合物，用饱和NaHCO₃水溶液（40 mL）淬灭并搅拌10分钟。加入更多的饱和NaHCO₃水溶液（20 mL），水相用EtOAc萃取（2 x 80 mL，然后3 x50 mL）。合并的有机萃取物经过疏水玻璃料干燥并在减压下除去溶剂。粗物质通过使用30mm x 25cm Chiralpak AD-H (5μm)柱的制备手性HPLC提纯。该柱用50%EtOH(+0.2%异丙基胺)/庚烷(+0.2%异丙基胺)使用30 mL/min的流速洗脱。合并适当的级分并蒸发，并将残留物溶于MeCN/水（1:1, 20 mL）中，在干冰（cardice）中冷冻2小时并在冷冻干燥机上放置整个周末。所得固体通过制备HPLC（方法B）进一步提纯。合并适当的级分并用氨水溶液将pH调节至pH 10。在氮气流下除去有机溶剂并加入更多氨水溶液以确保pH 10。加入盐水（200mL），水相用DCM（3 x 600 mL）萃取。合并的有机萃取物经Na₂SO₄干燥，过滤并在减压下浓缩。将物质溶于最少量的MeCN/水中并置于冷冻干燥机上。所得固体在真空炉中进一步干燥以提供标题化合物（2.1 g）。

LCMS (方法F): Rt = 3.29 min, MH⁺ 437。通过手性HPLC的对映体纯度 = >99.0% e.e。

实施例124. 3-(6-甲氧基吡啶-3-基)-1-(1-(1-(1-甲基哌啶-4-基)乙基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑

向3-(6-甲氧基吡啶-3-基)-1-(1-(1-(哌啶-4-基)乙基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（183mg, 0.433 mmol）在MeOH（2mL）中的溶液中加入甲醛（36.5%水溶液, 0.064 mL, 0.866 mmol）和甲酸（0.058 mL, 1.516 mmol）。密封小瓶并置于氮气气氛下。混合物在微波中在80℃下加热1小时。将饱和NaHCO₃水溶液（2 mL）逐滴添加到反应混合物中，然后用更多饱和NaHCO₃水溶液（8 mL）稀释溶液。水相用EtOAc（3 x 20mL）萃取。合并的有机萃取物经过疏水玻璃料干燥和在减压下除去溶剂。粗物质通过MDAP（方法A）提纯以提供标题化合物（80 mg）。

LCMS (方法C): Rt = 0.95 min, MH⁺ 437。

实施例125和126. (S)-3-(6-甲氧基吡啶-3-基)-1-(1-(1-(1-甲基哌啶-4-基)乙基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑和(R)-3-(6-甲氧基吡啶-3- 基)-1-(1-(1-(1-甲基哌啶-4-基)乙基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4, 5-c]吡唑

通过使用30 mm x 25 cm Chiralpak AD-H柱的制备手性HPLC将3-(6-甲氧基吡啶-3-基)-1-(1-(1-(1-甲基哌啶-4-基)乙基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（实施例124）分离成其两种组分对映体。该柱用50% EtOH(+0.2%异丙基胺)/庚烷(+0.2%异丙基胺)使用30 mL/min的流速洗脱。合并适当的级分并蒸发产生两种对映体：

实施例125: 25 mg. LCMS (方法C) Rt = 0.95 min, MH⁺ = 437。通过手性HPLC的对映体纯度 = >99.0% e.e。

实施例126: 24 mg. LCMS (方法C) Rt = 0.96 min, MH⁺ = 437。通过手性HPLC的对映体纯度 = >99.0% e.e。

没有指定绝对立体化学。

实施例127. 1-(1-(1-(1-异丙基哌啶-4-基)乙基)-1H-吡唑-4-基)-3-(6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑

向3-(6-甲氧基吡啶-3-基)-1-(1-(1-(哌啶-4-基)乙基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（42 mg, 0.099 mmol）在MeCN（1 mL）中的溶液中加入NEt₃（0.042 mL, 0.298 mmol）和2-碘丙烷（0.016 mL, 0.159 mmol）。反应混合物在50℃下搅拌72小时。将2-碘丙烷（0.008 mL, 0.08 mmol）和NEt₃（0.021 mL, 0.149 mmol）添加到反应混合物中并在50℃下继续搅拌48小时。将2-碘丙烷（0.008 mL, 0.08 mmol）和NEt₃（0.021 mL, 0.149 mmol）添加到反应混合物中并在50℃下继续搅拌6小时。在减压下除去溶剂并将残留物溶于EtOAc（10 mL）中并用饱和NaHCO₃水溶液洗涤。有机相经过疏水玻璃料干燥并在减压下除去溶剂。粗物质通过MDAP（方法A）提纯以提供标题化合物（23 mg）。

LCMS (方法C): Rt = 1.06 min, MH⁺ 465。

实施例128.和129. (S)-1-(1-(1-(1-异丙基哌啶-4-基)乙基)-1H-吡唑-4-基)- 3-(6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑和(R)-1-(1-(1-(1-异丙基哌啶-4-基)乙基)-1H-吡唑-4-基)-3-(6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑

通过使用30 mm x 25 cm Chiralpak AD-H柱的制备手性HPLC将1-(1-(1-(1-异丙基哌啶-4-基)乙基)-1H-吡唑-4-基)-3-(6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（实施例127）分离成其两种组分对映体。该柱用10% EtOH(+0.2%异丙基胺)/庚烷(+0.2%异丙基胺)使用30 mL/min的流速洗脱。合并适当的级分并蒸发产生两种对映体：

实施例129: 9 mg. LCMS (方法C) Rt = 1.08 min, MH⁺ = 465。通过手性HPLC的对映体纯度 = >99.0% e.e。

实施例130: 10 mg. LCMS (方法C) Rt = 1.09 min, MH⁺ = 465。通过手性HPLC的对映体纯度 = >90.0% e.e。

没有指定绝对立体化学。

实施例130. 3-(6-甲氧基吡啶-3-基)-1-(2-(1-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基)吡啶- 4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑

向微波小瓶装载Xphos Pd G2（25.6 mg, 0.033 mmol）、(6-甲氧基吡啶-3-基)硼酸（142 mg, 0.931 mmol）和3-溴-1-(2-(1-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基)吡啶-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（326 mg, 0.465 mmol）在1,4-二氧杂环己烷（0.5 mL）中的溶液。用磷酸三钾（198 mg, 0.931 mmol）在水（2 mL）中的溶液处理反应混合物，并用氮气吹扫反应混合物，然后在微波中在100℃下加热1小时。使用EtOAc将反应混合物转移至圆底烧瓶，并在减压下除去溶剂。使混合物在EtOAc（50 mL）和水（50 mL）之间分相。分离有机相，水相用EtOAc（2 x 50 mL）萃取。合并的有机萃取物经过疏水玻璃料干燥并在减压下浓缩。粗物质通过使用C18柱的反相柱色谱法提纯，用0至50%梯度的MeCN(+0.1%氨)/10 mM碳酸氢铵水溶液洗脱，然后通过MDAP（方法A）提纯以产生标题化合物（62 mg）。

LCMS (方法C): Rt = 0.94 min, MH⁺ 449。

实施例131.和132. (S)-3-(6-甲氧基吡啶-3-基)-1-(2-(1-(4-甲基哌嗪-1-基) 乙基)吡啶-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑和(R)-3-(6-甲氧基吡啶-3- 基)-1-(2-(1-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基)吡啶-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c] 吡唑

通过使用30 mm x 25 cm Chiralpak AD-H柱的制备手性HPLC将3-(6-甲氧基吡啶-3-基)-1-(2-(1-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基)吡啶-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑（实施例130）分离成其两种组分对映体。该柱用10% EtOH(+0.2%异丙基胺)/庚烷(+0.2%异丙基胺)使用30 mL/min的流速洗脱。合并适当的级分并蒸发产生两种对映体：

实施例131: 26 mg. LCMS (方法C) Rt = 0.94 min, MH⁺ = 449。通过手性HPLC的对映体纯度 = >99.0% e.e。

实施例132: 23 mg. LCMS (方法C) Rt = 0.94 min, MH⁺ = 449。通过手性HPLC的对映体纯度 = >97.0% e.e。

没有指定绝对立体化学。

也通过类似方法制备下列化合物：

实施例293. (R)-1-(4-(1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)吡啶-2-基)乙醇

在MeOH冰浴中将三乙胺（2.005 g, 19.82 mmol）逐滴添加到纯甲酸（1.581 g,34.4 mmol）中。将1-(4-(1-(6-甲氧基-5-甲基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)吡啶-2-基)乙酮（3 g, 7.93 mmol）迅速添加到上述反应混合物中。向其中加入RuCl[(R,R)-Tsdpen](对伞花烃)（0.025 g, 0.039 mmol）并将该混合物在真空下搅拌10分钟，然后在氮气下搅拌16小时。在冷却下逐滴加入10% Na₂CO₃水溶液并将混合物搅拌1小时，然后用EtOAc（3x10 mL）萃取。合并的有机萃取物经硫酸钠干燥，过滤，然后在减压下浓缩。粗产物预吸附在硅胶（60-120目, 30 g）上并通过在硅胶上的正相柱色谱法提纯，用0-100% EtOAc/石油醚洗脱以产生标题化合物（2.2 g）。

LCMS (方法D): Rt = 1.87 min, MH⁺ 381。

实施例294. 1-(4-(1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并 [4,5-c]吡唑-3-基)吡啶-2-基)乙醇

用冰/水浴冷却1-(4-(1-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-3-基)吡啶-2-基)乙-1-酮（1.82 g, 4.82 mmol）和硼氢化钠（0.21 g,5.79 mmol）在THF（19 mL）中的混合物。逐份加入MeOH（4.8 mL）并将混合物搅拌11分钟。通过加入20 mL 2M NaOH水溶液（通过经13分钟缓慢加入）淬灭反应混合物。加入盐水溶液，使混合物升温至室温并搅拌5分钟。分离各相，水相用10% MeOH/CHCl₃（3 x 20 mL）萃取。THF溶液和合并的MeOH/CHCl₃有机萃取物分开用盐水（分别5和10 mL）洗涤，然后合并，经硫酸钠干燥并在减压下浓缩以提供粗制标题化合物（1.97 g）。该物质直接用于下一步骤。

实施例295. 3-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-1-(1-(1-(哌啶-4-基)乙基)-1H-吡唑-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑

将4-(1-(4-(3-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-1-基)-1H-吡唑-1-基)乙基)哌啶-1-甲酸叔丁酯（374 mg, 0.692 mmol）溶解在DCM（3mL）中并加入三氟乙酸（1.066 mL, 13.84 mmol）。将反应混合物置于氮气气氛下并在室温下搅拌4小时。将饱和NaHCO₃水溶液逐滴添加到反应混合物中直至溶液达到pH 8，然后加入更多饱和NaHCO₃水溶液以产生大约50 mL的水相。分离有机相，水相用另外的DCM（50 mL）萃取。合并的有机萃取物用饱和NaHCO₃水溶液（50 mL）洗涤，水相用另外的EtOAc（20 mL）萃取。合并的有机萃取物经过疏水玻璃料干燥并在减压下除去溶剂以提供标题化合物（298mg）。

LCMS (方法C): Rt = 0.92 min, MH⁺ 441。

实施例296. 3-(6-甲氧基吡啶-3-基)-1-(1-(1-(哌啶-4-基)乙基)-1H-吡唑-4- 基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑

将4-(1-(4-(3-(6-甲氧基吡啶-3-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑-1-基)-1H-吡唑-1-基)乙基)哌啶-1-甲酸叔丁酯（248 mg, 0.475 mmol）溶解在DCM（3 mL）中并加入三氟乙酸（0.531 mL, 6.89 mmol）。将反应混合物置于氮气气氛下并在室温下搅拌1小时。加入饱和NaHCO₃水溶液和EtOAc。分离有机相，水相用DCM（3 x 20 mL）萃取。合并的有机萃取物经过疏水玻璃料干燥并在减压下除去溶剂以提供粗制标题化合物(298 mg)。该物质直接用于下一步骤。

生物数据

PI3K HTRF检测

通过均相时间分辨荧光（HTRF）检测如下测定化合物与PI3K-α/β/δ/γ的结合；

简言之，将固体化合物以2 mM的浓度溶解在100% DMSO中。在100% DMSO中使用1:4连续梯度稀释制备稀释液。将稀释液转移到黑色低体积Greiner检测板，确保DMSO浓度在板中恒定在1%（0.1 µl/孔）。

PI3K反应缓冲液（含有50 mM HEPES pH7.0 (NaOH), 150 mM NaCl, 10 mMMgCl₂, 2.3 mM胆酸钠, 10 μM CHAPS，在milliQ水中构成）。在使用当天以1 mM的最终浓度加入新鲜DTT。将足以产生100%抑制的浓度（8.33e-6 M）的渥曼青霉素添加到化合物板的列18中。

酶溶液: 通常含有1X PI3K检测缓冲液：

·550 pM PI3K-α酶(275 pM最终检测浓度)

·800 pM PI3K-β酶(400 pM最终检测浓度)

·3 nM PI3K-δ酶(1.5 nM最终检测浓度)

·10 nM PI3K-γ酶(5 nM最终检测浓度)

这些浓度最适合实现1.5-4.5的信号:背景。将酶溶液添加到列1-24中（3ul/孔）并将板在室温下孵育15分钟。

底物溶液: 通常含有1X PI3K检测缓冲液：

·PI3K-α: 500 μM ATP, 20 μM PIP2和120 nM生物素-PIP3. (最终检测浓度为250 μM ATP, 10 μM PIP2（两者都在K _m）和40 nM生物素-PIP3)

·PI3K-β: 800 μM ATP, 20 μM PIP2和120 nM生物素-PIP3. (最终检测浓度为400 μM ATP, 10 μM PIP2（两者都在K _m）和40 nM生物素-PIP3)

·PI3K-δ: 160 μM ATP, 20 μM PIP2和120 nM生物素-PIP3. (最终检测浓度为80 μM ATP, 10 μM PIP2（两者都在K _m）和40 nM生物素-PIP3)

·PI3K-γ: 30 μM ATP, 20 μM PIP2和120 nM生物素-PIP3. (最终检测浓度为15 μM ATP, 10 μM PIP2（两者都在K _m）和40 nM生物素-PIP3)

将这添加到所有孔中并将板在室温下孵育1小时。

检测溶液: PI3K检测缓冲液（含有50 mM HEPES pH 7.0 (HCl), 150 mM NaCl,2.3 mM胆酸钠, 10 μM CHAPS, 240 mM氟化钾），含有2 mM DTT (2X最终浓度), 90 nMGRP-1 PH结构域, 300 nM链霉亲和素-APC和24 nM铕-抗-GST (6X最终浓度)

将这一混合物保持在室温下（避光）。

STOP溶液: PI3K STOP缓冲液（含有50 mM HEPES pH 7.0 (HCl), 150 mM NaCl,2.3 mM胆酸钠, 10 μM CHAPS, 150 mM EDTA）。

检测溶液用STOP溶液1:1稀释并添加到所有孔中（3ul/孔）。覆盖板并在台面上孵育45-60分钟。

在PerkinElmer Envision上读板，在都招募荧光团的GST标记PH结构域和生物素化PIP3（分别为铕标记的抗-GST & Strep-APC）之间形成的复合物之间测量TR-FRET。在不存在抑制剂的情况下，这种复合物被非生物素化PIP3（在该检测中通过PIP2被激酶 & ATP磷酸化形成）的竞争行为破坏。由此计算受体/供体比（λex = 317 nm, λem供体= 615 nm,em受体= 665 nm）并用于数据分析。

在上述PI3K α、β、δ和/或γ检测或类似检测中测试实施例1至42、44至95、97至101、109至133和134至292的化合物和盐并发现在PI3K δ检测中具有至少5或更大的平均pIC₅₀。发现实施例1、2、7至11、16、21至23、27至29、32至36、39、40、42、43、49、50至54、60、62、63、65、66、68、78、96、97至102、104、105、107、109至120和122、123、126、127、129、130、132、134、137-148、150、153、154、157、159、161-165、168、171至176、178至180、182、183、185至191、194至196、202、203、205、206、208至210、212、213至218、223至227、229至238、240至292在PI3K δ检测中具有至少8.5或更大的平均pIC₅₀。例如，发现实施例29和53在PI3K δ检测中分别具有9.6和9.5的平均pIC₅₀，并发现实施例110和123在PI3K δ检测中具有9.3和8.6的平均pIC₅₀。

Claims

1.式(I)的化合物或其盐：

其中

R⁹、R¹⁰、R¹¹和R¹²各自独立地是氢或C_1-6烷基；

X和Y各自独立地是-CH₂-或-CH(CH₃)-。

2.根据权利要求1的化合物或其盐，其中R¹是5-或6-元杂芳基，其中所述杂芳基含有一个或两个氮原子并被一个或两个独立地选自卤素、C_1-6烷氧基、-XR³和C_1-6烷基的取代基取代，其中所述C_1-6烷基任选被卤素取代。

3.根据权利要求1或权利要求2的化合物或其盐，其中R²是5-或6-元杂芳基，其中所述杂芳基含有一个或两个氮原子并被一个或两个独立地选自卤素、C_1-6烷氧基、-YR⁸和C_1-6烷基的取代基取代。

4.根据权利要求1或权利要求2的化合物或其盐，其中R³是6-元杂环基，其中所述杂环基含有一个或两个氮原子并任选被1至3个独立地选自C_1-6烷基的取代基取代。

5.根据权利要求1或权利要求2的化合物或其盐，其中R⁸是5-或6-元杂环基，其中所述杂环基含有一个或两个独立地选自氧和氮的杂原子并被1至3个独立地选自氧代、羟基、卤素、-COC_1-6烷基和任选被-OR¹²取代的C_1-6烷基的取代基取代。

6.化合物或其盐，所述化合物是：

(R)-3-(6-甲氧基吡啶-3-基)-1-(2-(1-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基)吡啶-4-基)-4,5,7,8-四氢-1H-氧杂䓬并[4,5-c]吡唑。

7.化合物或其盐，所述化合物是：

。

8.可药用盐形式的根据权利要求1至7任一项的化合物。

9.药物组合物，其包含如权利要求1至7任一项中所述的化合物或其可药用盐和一种或多种可药用赋形剂。

10.如权利要求1至7任一项中所述的化合物或其可药用盐在制备用于治疗由不适当的PI3-激酶活性介导的病症的药物中的用途。

11.根据权利要求10所述的用途，其中所述由不适当的PI3-激酶活性介导的病症是呼吸系统疾病、纤毛病、细菌感染或呼吸病况或肺损伤的细菌性加重、病毒感染或呼吸病况或肺损伤的病毒性加重、变应性疾病、自身免疫病、炎性病症、糖尿病、心血管疾病、恶性血液病、神经退行性疾病、多器官衰竭、肾病、血小板聚集、癌症、精子活力、移植排斥、移植物排斥、疼痛、纤维化疾病、精神障碍或活化PI3Kδ综合征（APDS）。

12.根据权利要求10所述的用途，其中所述由不适当的PI3-激酶活性介导的病症是哮喘。

13.根据权利要求10所述的用途，其中所述由不适当的PI3-激酶活性介导的病症是COPD。

14.根据权利要求10所述的用途，其中所述由不适当的PI3-激酶活性介导的病症是非病毒性呼吸道感染、胰腺炎、肺损伤、抑郁或支气管扩张。