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CN110577899A - 含有甘露聚糖酶基因的2017-m2菌株 - Google Patents

含有甘露聚糖酶基因的2017-m2菌株 Download PDF

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CN110577899A CN201910869927.1A CN201910869927A CN110577899A CN 110577899 A CN110577899 A CN 110577899A CN 201910869927 A CN201910869927 A CN 201910869927A CN 110577899 A CN110577899 A CN 110577899A
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Abstract

本发明属于农业微生物应用领域,涉及含有甘露聚糖酶基因的2017‑M2菌株。该株能产生食用红色素、甘露聚糖酶和纤维素酶。从土壤中分离得到。为蓝状菌属阿托罗斯菌(Talaromyces atroroseus),其中甘露聚糖酶基因序列如SEQ ID NO:2所示。与已知甘露聚糖β‑1,4‑内切酶基因的相似性仅为71%,为一种新的功能基因,有广泛的应用价值。该株在22℃–35℃生长良好,产纤维素酶、甘露聚糖酶和淀粉酶,不产蛋白酶,无抑菌作用。在PDA培养基中能得到最大量的吸光值为600nm的红色素。在大肠杆菌中能表达出所述的活性基因。最佳诱导条件为1mM IPTG1.5μL,37℃诱导3h。

Description

含有甘露聚糖酶基因的2017-M2菌株
技术领域
本发明属于农业微生物应用技术领域,具体涉及一株含有甘露聚糖酶基因的能产食用红 色素、纤维素酶和甘露聚糖酶的阿托罗斯菌(Talaromyces atroroseus)2017-M2菌株,该菌 株从土壤中分离得到,为蓝状菌属阿托罗斯菌(Talaromyces.atroroseus),是从青霉分支演 化而来,属于一种新菌株,含甘露聚糖酶基因,该基因表达的甘露聚糖酶为β-1,4-内切甘露 聚糖酶。
背景技术
Talaromyce atroroseus是2013年发现的一种真菌的新种,分类命名为蓝状菌属阿托罗斯 菌(Talaromyces.atroroseus)。该真菌存在于土壤和水果中,最初是从南非收集的房屋灰尘中 鉴定出来的。它能产生大量红色素,且不含有任何已知真菌毒素。菌株基因组中含有β-1,4- 甘露聚糖酶编码基因,β甘露聚糖酶(endo-1,4-β-mannanase)属于内切水解酶,它可作用于 由甘露糖苷键组成的甘露聚糖(包括异甘露聚糖),其作用底物主要为甘露聚糖、半乳甘露 聚糖、半乳葡萄甘露聚糖以及葡萄甘露聚糖。水解产生单糖以及低聚糖如二糖、三糖、四糖 等。
现有资料表明,β-甘露聚糖酶可在饲料生产和造纸工业中应用广泛。畜禽和鱼类的消化 酶系中缺少β-甘露聚糖酶,可以通过添加外源β-甘露聚糖酶,降解饲料中的非淀粉多糖, 降低肠道粘度,促进营养物质的消化和吸收。此外,有研究表明,β-甘露聚糖酶还是一种多 功能的促生长剂,它可以促进生长因子IGF-I的分泌,促进蛋白质的合成,提高瘦肉率;还 可消除饲料中β-甘露聚糖对葡萄糖的吸收干扰,提高富含β-甘露聚糖饲料的能量消化率。 另外,降解产物甘露低聚糖可以减少病原菌在肠道的定植,通过促进有益菌的大量增殖从而 保护动物肠粘膜,提高免疫力,提高动物的生长性能。造纸工业上,应用甘露聚糖酶降解甘 露聚糖,有利于化学漂白剂的渗入和木质素脱除,不仅可以提高漂白效果,还能减少化学漂 白剂和过氧化氢使用,减少对环境的污染。
色素在纺织、建筑、食品、生物、医药卫生、化妆品、日用工业品、饲料等行业领域广泛应用,按来源被分为天然色素和合成色素两大类。天然色素来自天然物,主要由植物组织中提取,也包括来自动物和微生物的一些色素,与合成色素相比具有无毒、安全性高和色泽自然鲜艳等特点,并有很高的营养价值和药理功能等优越性。目前,天然色素已成为食品、化妆品、保健品行业的主要着色剂。
利用微生物可以产生多种天然色素,而且这种方法生产的天然色素不受环境、资源和空 间等条件的制约,因此微生物色素成为了广大学者的研究热点。红、黄、蓝作为三个基本色 素,可以相互搭配呈现出丰富色调。天然色素中红色素主要从动植物中提取和微生物发酵法 制备。通过抽提法生产的主要有姜黄色素、叶黄素、栀子黄色素、红花黄色素等,这种生产 方法主要从植物中抽提,受季节影响较大,而且抽提中引入了有机溶剂,成本较高。微生物 发酵法生产红色素不受季节影响,转化率较高,成本低,发展前景广阔。但由于菌种资源匮 乏,相关的报道较少,已经公开报道的红曲霉菌所产的红曲色素;栀子微生物所产的栀子红 色素;红酵母所产的类胡萝卜素等,都是天然红色素获得的一个主要途径,但是这些菌种的 种类及数量远不能满足各行业对天然红色素研究及其开发的需要。因此,筛选出能大量生产 红色素的新型微生物菌种和具有不同特性黄色素具有重要的科学研究和应用价值。
本发明分离的2017-M2菌株含有β-1,4-甘露聚糖基因,该基因通过BLAST-N比对,与 现有的同源的基因最高相似性仅为71%,属于一种新的功能基因;另外,该菌株产红色素, 所生产的红色素在pH 2.0~9.0范围内稳定,具有较好的热稳定性和一定的光稳定性。因此, 该菌株具有很高的研究价值及应用价值。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术的缺陷,现有甘露聚糖酶菌种的种类及数量远不能满足 行业对天然红色素产生菌资源的需求。本发明提供的阿托罗斯菌菌株2017-M2具有生产食用 红色素、β-1,4-甘露聚糖内切酶及纤维素酶的能力,具有很高的研究价值和广阔的应用价值。
为了实现上述目的,本发明从土壤中分离一种产生天然红色素产生菌,所生产的红色素 在pH 2.0~9.0范围内稳定,具有较好的热稳定性和一定的光稳定性。
本发明提供了的一种产红色素产生菌分离株,经微生物菌株分类鉴定,确定该菌株为蓝 状菌属阿托罗斯菌(Talaromyces atroroseus)。申请人将该菌株命名为Talaromyces atroroseus 2017-M2,于2019年3月26日送交中国.武汉.武汉大学中国典型培养物保藏中心保藏,保藏 编号为CCTCC NO:M2019205。
Talaromyces atroroseus 2017-M2菌株形态特征及生理生化特征:
将Talaromyces atroroseus2017-M2菌株用牙签点种至PDA平板上,于28℃恒温培养 5d,在10×40光学显微镜下观察菌株的个体形态,所产孢子为球形,孢子大小为4.0~8.0μm, 蓝绿色,产孢子器为扫帚状分生孢子器。
其生长特征及生理生化特征:好氧性,在22℃–35℃生长良好,产纤维素酶、甘露聚糖 酶、淀粉酶,不产蛋白酶,无抑菌作用。
提取2017-M2的总DNA,采用真菌18s r DNA PCR扩增通用引物,进行PCR扩增,然后送商业测序公司进行测序。将测序结果与GenBank数据库中的已知序列进行核酸序列比对 (Nucleotide BLAST),确定与该菌株亲缘关系最近的种为蓝状菌属阿托罗斯菌,故命名该 菌株为蓝状菌属阿托罗斯(Talaromyces atroroseus)2017-M2菌株。
对所述的2017-M2菌株发酵产生红色素进行了测定,步骤如下:
(1)对2017-M2菌株选择高氏1号培养基以平板划线法接种于固体培养基表面进行活 化培养,以检测产其特性,同时检测菌株是否有杂菌污染。
(2)将步骤(1)活化培养的2017-M2菌株培养物接种于适合菌体增殖的发酵培养基上, 于30℃、160rpm下恒温震荡培养5-7d。
(3)离心收集步骤(2)发酵培养物中的发酵液,在600nm波长测定发酵液中红色素的 OD值。
2017-M2菌株的采用甘油管保藏法:将2017-M2菌株接种在高氏1号培养基上,于30℃ 下恒温培养5d,待孢子完成生长后加入适量无菌水洗下孢子,制成孢子数约为108个孢子的 孢子悬液;再将孢子悬液与灭菌甘油(浓度为30%)以1:1的体积比混合,摇匀后置于-80℃ 冰箱里保藏,可保藏5~10年。
本发明的有益效果:
本发明提供的2017-M2菌株,其生长速度快,培养条件要求低。
该菌株所产的天然红色素与水、无水乙醇、丙酮、甲醇和、异丙醇均互溶;遇乙醚、氯 仿均分层;正丁醇、异戊醇、乙酸乙酯均分层,且红色素被萃取到有机层;乙酸乙酯的溶剂 层褪色成褐色。
本发明分离的2017-M2菌株含有β-1,4-甘露聚糖基因(见序列表SEQ ID NO:2所述), 通过在GenBank数据库里比对,发现2017-M2菌株中的β-1,4-甘露聚糖酶基因与之同源的 基因最高相似性仅为71%,非常新颖。
本发明提供了一种基于2017-M2菌株中β-1,4-甘露聚糖酶新基因的异源表达方法,该 方法其特征在于人工合成β-1,4-甘露聚糖酶基因,诱导β-1,4-甘露聚糖酶高效表达,包括 如下步骤:
(1)将Talaromyces atroroseus 2017-M2菌株接种甘露聚糖酶鉴定培养基进行培养,同 时检测菌株是否有杂菌污染。
甘露聚糖酶鉴定培养基配方:魔芋甘露聚糖粉3.0g/L;蛋白胨1.0g/L;NaCl 1.0g/L; MgSO4 0.2g/L;KH2PO4 0.2g/L;琼脂20g/L;补充蒸馏水至1L;调培养基的pH至7.0。
(2)将Talaromyces atroroseus 2017-M2菌株接种到液体培养基上进行培养,进而提取 菌株总DNA(即基因组DNA),PCR获得甘露聚糖酶基因片段,其核苷酸序列如序列表SEQ ID NO:2所示。
(3)按照常规方法对所述的β-1,4-甘露聚糖酶新基因进行异源表达,证明可以表达 产生β-1,4-甘露聚糖酶。
以所述的新基因为菌种DNA全长,搜索到甘露聚糖β-1,4-内切酶基因的c DNA序列, 质粒的构建委托南京金斯瑞公司合成,得到质粒pbEX-6P-1。
所述的异源表达法为:以感受态为大肠杆菌BL21(DE3)为起始材料,将质粒pbEX-6P-1 连接到DE3中,在终浓度为1-2μmol/L的IPTG中进行诱导表达。
附图说明:
图1:本发明分离的Talaromyces atroroseus 2017-M2菌株的个体形态。
图2:Talaromyces atroroseus 2017-M2菌株的菌落形态。附图标记说明:图2中的A图 为菌落的正面形态;图2中的B图为菌落的反面形态。
图3:Talaromyces atroroseus 2017-M2菌株中甘露聚糖酶的鉴定。
图4:Talaromyces atroroseus 2017-M2菌株中纤维素酶的水解圈。
图5:Talaromyces atroroseus 2017-M2菌株中甘露聚糖β-1,4-内切酶活性基因blast X结果。
图6:在37℃下,人工合成的Talaromyces atroroseus 2017-M2的甘露聚糖β-1,4-内切酶活性基因在大肠杆菌中的表达结果。
具体实施方式
对序列表的说明
序列表SEQ ID NO:1是本发明分离的Talaromyces atroroseus 2017-M2菌株的18S r DNA序 列。
序列表SEQ ID NO:2是本发明合成的Talaromyces atroroseus 2017-M2甘露聚糖β-1,4- 内切酶(活性)基因序列。
下面对本发明的具体实施方式作进一步详细描述,但本发明的方法不限于下述实施例。
本发明中选用的所有原辅材料,以及选用的菌种培养方法都为本领域熟知选用的,本发 明中涉及到的%都为重量百分比,除非特别指出除外。
实施例1 Talaromyces atroroseus 2017-M2菌株的分离、筛选及鉴定
1.蓝状菌属阿托罗斯(Talaromyces atroroseus)2017-M2菌株的分离
(1)蓝状菌属阿托罗斯(Talaromyces atroroseus)2017-M2菌株分离于湖北省武汉市武 汉设计工程学院所在地湖北省武汉市江夏区汤逊湖地区地面5cm以下部位土壤。具体步骤 为,称取10g土壤,用90mL无菌水稀释10倍,摇匀,澄清,再继续稀释至1000倍;取1000 倍稀释液0.1mL涂布在马丁孟加拉红固体平板上,培养3d,在室温下继续培养到第7d,观 察培养皿中菌落生长及培养基中水溶性红色素的产生情况。挑选产红色素的青霉样菌落。在 高氏1号固体平板中划线分离纯培养。直至无杂菌落,从中优选出一株编号为2017-M2的 菌株,菌落形态见图2。
(2)将上述初筛的菌株接种到PDA培养基上,在培养条件为30℃,160rpm恒温震荡条件下培养5-7d,可见能产生红色素最多,且生长量最大的2017-M2菌株。
(3)在后续的测定中显示筛选的2017-M2菌株具有β-1,4-甘露聚糖内切酶活性。
(4)人工合成2017-M2菌株的β-1,4-内切甘露聚糖酶基因,在大肠杆菌BL21(DE3)中 诱导异源表达。酶活最高的诱导条件为:1mM IPTG1.5μL,37℃,诱导3h。酶活为OD=0.496*2
试验结果表明:
Talaromyces atroroseus 2017-M2菌株在22℃~35℃生长良好,最适生长温度为30℃。 所产孢子为球形孢子,孢子大小为4.0μm-8.0μm,蓝绿色,产孢子器为扫帚状分生孢子器。 好氧,无运动性。在营养较好时产孢子少,产色素也较少,在营养不良的情况下产孢子及色 素较多。低温下4℃-15℃产色素较多,温度适宜时产色素较少。菌落开始为白色,捎带粉色, 圆形,微突起,边缘规则。菌体可产纤维素酶和甘露聚糖酶,不产蛋白酶,无抑菌作用,参 见图1、图3和图4。
利用18S r DNA PCR方法鉴定Talaromyces atroroseus 2017-M2菌株的分类种属:
提取Talaromyces atroroseus 2017-M2菌株总DNA,采用真菌18S r DNA PCR扩增通 用引物,进行PCR扩增。PCR产物经切胶纯化,送往商业测序公司测序,测序后的核苷酸序列参见SEQ ID NO:1。将所得核苷酸序列与GenBank数据库中的已知序列进行BLAST比较,确定与实验菌株亲缘关系最近的菌株为Talaromyces atroroseus strain IBT 11181,与其最大同 源性为99%,为2013年发现的新菌种。
Talaromyces atroroseus 2017-M2菌株的18S r DNA序列如下所示(序列同序列表SEQ ID NO:1):
AGGCTTCTTGGTGCGGACCTCGCGGGTCCACCTCCCACCCGTGTCTCTTGAATACC CTGTTGCTTTGGCGGGCCCACCGGGTCGCCCCGGTCGCCGGGGGGCACTGCGCCCCCG GGCCTGCGCCCGCCAGAGCGCTCTGTGAACCCTAATGAAGATGGGCTGTCTGAGTGTGA TTTTGAATTATCAAAACTTTCAACAATGGATCTCTTGGTTCCGGCATCGATGAAGAACGC AGCGAAATGCGATAAGTAATGTGAATTGCAGAATTCCGTGAATCATCGAATCTTTGAACGCACATTGCGCCCCCTGGCATTCCGGGGGGCATGCCTGTCCGAGCGTCATTTCTGCCCTCA AGCGCGGCTTGTGTGTTGGGTGTGGTCCCCCCGGTGTTGGGGGGACCTGCCCGAAAGG CAGCGGCGACGTCCCGTCTAGGTCCTCGAGCGTATGGGGCTTTGTCACCCGCTCGGGAG GGGCCTGCGGGCGTTGGCCACCCACGATATTTTTTTACCGTTGACCTCGGATCAGGTAGG AGTTACCCGCTGAACTTAAGCATATCAATAAGCGGAGGA。
实施例2 Talaromyces atroroseus2017-M2菌株发酵生产和提取红色素的应用
本实施例中,将Talaromyces atroroseus 2017-M2菌株接种于发酵培养基(500mL三角 瓶装填100mL发酵培养基),发酵培养基为PDA液体培养基:去皮土豆200g到30min, 取土豆汁1000mL,加葡萄糖20g,包装灭菌,pH 7.0。30℃,200rpm摇床培养5d-7d。菌 液以8000rpm、10min离心处理获得发酵液,用细菌过滤器过滤除菌,所获得的滤液即为红 色素粗提取液。将红色素粗提取液置于70℃旋转蒸发仪中进行真空浓缩,直至成为膏状物, 所得产物即为红色素粗提物。
将所得的红色素粗提物溶解于与发酵培养基等量的蒸馏水中,在200-800nm的紫外分光 光度计进行扫描分析,结果表明,2017-M2产生的红色素在600nm处有最大的吸收峰,说明 可以用600nm波长的光波对2017-M2的红色素进行含量测定。不同液体培养基中2017-M2 菌株的色素产量及菌丝湿重见表1.
表1不同液体培养基中2017-M2菌株的色素产量及菌丝湿重
实施例3 Talaromyces atroroseus 2017-M2菌株产生纤维素酶的鉴定
挑取菌种用牙签点在纤维素鉴定培养基上,28℃培养5-7天,用1mg/ml刚果红溶液覆盖 培养基染色15min,倒掉刚果红溶液,再用1mol/L NaCl溶液洗去刚果红溶液15min,倒掉 NaCl溶液,观察到透明圈,说明Talaromyces atroroseus 2017-M2菌株具有产生纤维素酶的 能力。
实施例4 Talaromyces atroroseus 2017-M2菌株甘露聚糖酶基因的异源表达
将人工合成的β-1,4-甘露聚糖基因(核苷酸序列见SEQ ID NO:2)插入到pGEX-6p-1 质粒中。具体步骤为:将4μg冻干粉纯质粒pbEX-6P-1用无菌dd H2O溶解成100ng/μL。取一只含有50μL-200μL的BL21(DE3)感受态细胞(储于-80℃),在冰上解冻20-30min; 取2-3μL溶解后的质粒转入解冻后的感受态细胞,冰上放置30min;将其2/3放置在42℃的 水浴锅中水浴,热击90s;立即将其从水浴锅中取出,放回冰上5min;将其加入至800μL LB 培养基,并在37℃振荡培养箱(200rpm)中培养45min-1h;将部分或全部转化到含有10μg/mL 氨苄青霉素(Amp)的LB琼脂平板上;倒置平板,37℃过夜培养。在Amp抗性平板上若有菌 落生长,则说明转化成功。转化结果见图5。
取接种过夜的含氨苄抗性的重组菌落培养液,按2%(即200μl)的接菌量接种到10ml 新鲜的含Amp﹢的LB液体培养基中,37℃,200rpm摇床培养至在600nm波长下OD值为0.8;
在培养液中,每组分别加入浓度1mmol/L的IPTG,在不同温度下进行诱导表达,于150rpm摇床培养,培养一定时间后进行后续检测。
将各培养液取出,4000rpm,离心10min,收集菌液,同时做上清液和未诱导菌对照,置于-20℃冰箱保存。在各培养基中,每组分别加入不同体积的1mmol/L的IPTG,在不同时间下进行培养诱导表达,结果见图6。
Talaromyces atroroseus 2017-M2菌株的甘露聚糖酶基因(即,甘露聚糖β-1,4-内切酶 活性基因)的核苷酸序列如下所示:
GGATCCATGGCGGTGCACATGCGTAAGGCGGTTTTCGCGCTGAGCCTGATCAGCGG TGTGCTGGCGGCGCCGTACAAACGTCTGGAGAACCCGCTGGGTGTTCAGTATGGCATTG ACGCGAGCAGCATGATCAGCTACGATAGCATTTATTTTGGCTGGGCGCCGAACTACAAG CCGAGCGTGACCCTGGCGAGCCTGAACCAGGCGACCGGTCAAAAAGGCGCGACCTACA ACGTGTATAGCCAGATCACCAGCAGCAACGTTGACAGCGGTAGCTACGATGGCAACTACCAATATAACCTGACCATTCCGACCAGCGTGAACTACGACGAGTATAAGACCGCGTGGAA AACCATGTATAACGCGGTTAGCAGCAACGATAAGATCTTCATGTTTTGGAGCCCGAACG ACGATACCAGCAGCGAACCGGTTGCGCCGTGGTGGCCGGGCGAGGAATACGTGGACAT TGTTGGCATGGATTACTATCCGAACGCGGACGAGGGTCTGCCGGATTTCGAAAGCGCGT ACGGCGCGTTTTACGACACCTATAGCGCGGGTTATGGCATCCCGTTCGCGATTGGCGAGA CCGGCACCCAGCTGAGCAACGGTGATAGCGCGAGCACCGAACAAAAAGAGGAGTGGC TGAAAGCGGTGATCAACCCGCTGAGCGGTTTCGGCGACTACAGCGAGTACTATTTCAGC TGCACCTGGTTTGAATATGGTCCGCCGACCAACGACATCAACTTCTACATCGTTTACGAA CAAGATAGCAGCGTGGTTACCGAGACCATTAGCAACACCGAAAGCGGCACCGCGTAAC TCGAG。
分析结果表明,本发明克隆的甘露聚糖酶基因为一种新发现的功能基因。
序列表
<110> 武汉设计工程学院
<120> 含有甘露聚糖酶基因的2017-M2 菌株
<141> 2019-09-15
<160> 2
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 569
<212> DNA
<213> β-甘露聚糖酶(β-mannanase)
<220>
<221> gene
<222> (1)..(569)
<400> 1
aggcttcttg gtgcggacct cgcgggtcca cctcccaccc gtgtctcttg aataccctgt 60
tgctttggcg ggcccaccgg gtcgccccgg tcgccggggg gcactgcgcc cccgggcctg 120
cgcccgccag agcgctctgt gaaccctaat gaagatgggc tgtctgagtg tgattttgaa 180
ttatcaaaac tttcaacaat ggatctcttg gttccggcat cgatgaagaa cgcagcgaaa 240
tgcgataagt aatgtgaatt gcagaattcc gtgaatcatc gaatctttga acgcacattg 300
cgccccctgg cattccgggg ggcatgcctg tccgagcgtc atttctgccc tcaagcgcgg 360
cttgtgtgtt gggtgtggtc cccccggtgt tggggggacc tgcccgaaag gcagcggcga 420
cgtcccgtct aggtcctcga gcgtatgggg ctttgtcacc cgctcgggag gggcctgcgg 480
gcgttggcca cccacgatat ttttttaccg ttgacctcgg atcaggtagg agttacccgc 540
tgaacttaag catatcaata agcggagga 569
<210> 2
<211> 825
<212> DNA
<213> 阿托罗斯菌(Talaromyces . atroroseus)
<220>
<221> gene
<222> (1)..(825)
<400> 2
ggatccatgg cggtgcacat gcgtaaggcg gttttcgcgc tgagcctgat cagcggtgtg 60
ctggcggcgc cgtacaaacg tctggagaac ccgctgggtg ttcagtatgg cattgacgcg 120
agcagcatga tcagctacga tagcatttat tttggctggg cgccgaacta caagccgagc 180
gtgaccctgg cgagcctgaa ccaggcgacc ggtcaaaaag gcgcgaccta caacgtgtat 240
agccagatca ccagcagcaa cgttgacagc ggtagctacg atggcaacta ccaatataac 300
ctgaccattc cgaccagcgt gaactacgac gagtataaga ccgcgtggaa aaccatgtat 360
aacgcggtta gcagcaacga taagatcttc atgttttgga gcccgaacga cgataccagc 420
agcgaaccgg ttgcgccgtg gtggccgggc gaggaatacg tggacattgt tggcatggat 480
tactatccga acgcggacga gggtctgccg gatttcgaaa gcgcgtacgg cgcgttttac 540
gacacctata gcgcgggtta tggcatcccg ttcgcgattg gcgagaccgg cacccagctg 600
agcaacggtg atagcgcgag caccgaacaa aaagaggagt ggctgaaagc ggtgatcaac 660
ccgctgagcg gtttcggcga ctacagcgag tactatttca gctgcacctg gtttgaatat 720
ggtccgccga ccaacgacat caacttctac atcgtttacg aacaagatag cagcgtggtt 780
accgagacca ttagcaacac cgaaagcggc accgcgtaac tcgag 825

Claims (2)

1.一株分离的含有甘露聚糖酶基因的产食用红色素和纤维素酶的阿托罗斯菌(Talaromyces atroroseus)2017-M2菌株,保藏在中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCC NO:M2019205;所述甘露聚糖酶基因的核苷酸序列如序列表SEQ ID NO:2所示。
2.权利要求1所述的阿托罗斯菌(Talaromyces.atroroseus)2017-M2菌株在制备食用红色素和纤维素酶中的应用。
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