CN110430865A - 包含桦褐孔菌提取物的化妆品组合物及其用途 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种包含来自桦褐孔菌(Chaga)的提取物的化妆品组合物，特别涉及一种化妆品组合物，其包含：(i)浓度为至少约2.5mg/ml的桦褐孔菌提取物；以及(ii)一种或多种生理学上或药学上可接受的赋形剂和/或稀释剂，其中所述桦褐孔菌提取物包含至少约1％(w/w)的β‑葡聚糖和/或至少约0.10％(w/w)的多酚。

Description

包含桦褐孔菌提取物的化妆品组合物及其用途

技术领域

本发明涉及一种包含来自桦褐孔菌(Inonotus obliquus，Chaga)的提取物的化妆品组合物及其在皮肤的各种应用中的用途。特别地，如本文所定义的提取物和包含所述提取物的组合物可用于改变、优选改善皮肤的美容外观和/或改善皮肤的活力或状况和性能。

背景技术

皮肤是身体最脆弱的器官之一。皮肤直接或间接地与外部刺激持续相互作用，并且经常暴露于环境因子并受其影响。事实上，皮肤可以被视为与外界的第一接触点。这种持续暴露会导致皮肤产生令人不愉快和/或不希望的物理和可见变化，特别是皮肤的美容外观。虽然这些变化可能不会威胁到个人的健康，但这种变化可能在身体上不舒服或明显不愉快。事实上，因为皮肤是如此明显，因此皮肤外观的变化可能导致心理压力。因此，持续需要和要求有效的治疗以维持、恢复或改善皮肤的状态(活力)和表现，特别是恢复皮肤的年轻外观。

皮肤是人体最大的器官，约占人体重的12-16％。它作为外部世界与我们体内受控环境之间的屏障和调节影响，发挥着许多重要作用。

皮肤由3层组成，即表皮、真皮和皮下组织。表皮是皮肤的最上层的上皮层。它起到物理屏障的作用，防止身体失去水分，防止物质和生物进入体内。它的厚度根据身体部位而有所不同。

表皮由复层鳞状上皮组成，即它由扁平细胞层组成。皮肤、头发和指甲是角质化的，这意味着它们具有由称为角蛋白的蛋白质制成的死的、硬化的疏水表面。表皮由于其与角蛋白辛酸盐相关的细胞外脂质的含量而变得不可渗透，特别是在表皮的透明层(Stratumlucidum)。粘膜(例如食道、口腔咽腔、生殖器官等)主要是非角质化和湿润的。表皮具有三种主要类型的细胞，即角质形成细胞(皮肤细胞)、黑素细胞(产生色素的细胞)和朗格汉斯(Langerhans)细胞(免疫细胞)。Merkel细胞是第四种不太普遍的表皮细胞。

当角蛋白向外移动时，随着角蛋白的积累，角质形成细胞成熟并分化。它们最终脱落或被擦掉。它们形成四个或五个不同的层，从最浅层到最深层是(i)角质层(Stratumcorneum，horny layer)，其具有死的且无核干燥硬细胞，(ii)颗粒层(Stratumgranulosum，granular layer)，其具有含嗜碱性颗粒的细胞，并且通过薄的透明层从角质层向外分离，(iii)棘层(Stratum spinulosum，棘刺、多刺或棘细胞层)，其中细胞在向上移动时变得越来越扁平，以及(iv)基底层(Stratum basale,basal layer)，具有柱状(高)再生细胞。

表皮下方是基底膜，其为一种位于表皮和真皮之间的特殊结构。

真皮是纤维结缔组织或皮肤的支撑层。主要纤维是交织的胶原纤维和弹性蛋白。

皮下组织是真皮和表皮正下方的脂肪层。它也被称为皮下结缔组织(subcutaneous tissue)，下皮层(hypodermis)或皮膜。皮下组织主要由脂肪细胞(脂细胞)、神经和血管组成。

皮肤下层即颗粒层(Stratum granulosum)产生新的上皮细胞。随着时间的推移，细胞迁移到皮肤表面并变得酸性更强。在其30天的过程中，细胞死亡并且角蛋白饱和。角蛋白和相关脂质很重要，因为它们可以保护皮肤免受外部因素的影响。

许多因素可能导致皮肤美容外观的恶化，包括疾病、损伤、环境因素、年龄、激素水平、药物、外部施用或摄入的材料、遗传条件或这些和其他因素的组合。皮肤美容外观的年龄相关性恶化是普遍因素(即随时间老化)。在某些情况下，皮肤的美容外观的恶化可能由外部因素加速或加剧，例如UV，即光老化(也称为光致老化)。这种恶化可以在皮肤的不规则或异常中看出，可能表现为例如皮肤干燥、皱纹、细纹、松弛(下垂)或色素沉着改变。

光老化是用于由慢性UVA和UVB暴露引起的特征变化的术语。管理代谢应激的生物功能和能力的恶化是衰老过程的主要后果之一。衰老是一个复杂的、渐进的过程，也会导致皮肤的功能和美学变化。

光老化是皮肤老化的过程，归因于皮肤持续长时间(长期)暴露于大约245-290nm的紫外(UV)辐射，其可以来自天然光或合成光。因此，光老化也被称为由UVA和UVB射线引起的皮肤老化，特别是面部、耳朵、颈部和手部的老化。值得注意的是，光老化与晒伤不同，晒伤是由皮肤急剧暴露于UVB引起的损伤。晒伤是一种急性炎症过程，在视觉上可见为红斑，并且在组织学上通过混合的皮肤中性粒细胞和淋巴细胞浸润来表征。值得注意的是，晒伤与真皮中的中性粒细胞聚集有关，这在光老化的皮肤中不会发生。

干燥和/或结垢皮肤(scaling skin)是皮肤老化的最常见迹象之一。虽然某些个体更容易干燥和/或结垢皮肤，但无论年龄、性别或皮肤类型如何，干燥和/或结垢皮肤的外观都会影响任何人。

当皮肤的外层(带有透明层的角质层)耗尽水时，即通过经表皮水分流失(TEWL)时，出现干性皮肤。当这一层充分润湿时，它可以最大限度地减少通过皮肤的水分流失，并有助于防止刺激物、过敏原和细菌。然而，当角质层干燥时，其保护功能降低。这样可以减少水分流失，使皮肤容易受到环境因素的影响。

理想地，角质层的含水量为10％至30％。这些水赋予皮肤柔软、光滑和柔韧的质地，即与年轻皮肤外观相关的特征。水来自大气层、下层皮肤和汗水。由皮肤腺体产生的油和由皮肤细胞产生的脂肪物质作为天然保湿剂，使角质层密封在水中。

身体通过蒸发不断从皮肤表面失去水分(TEWL)。在正常条件下，损失率很慢，并且水被充分更换。当水分损失超过水更换时，会出现皮肤干燥的特征性症状和症状，并且角质层的含水量低于10％。

非常需要保湿剂，其改善或根除干燥和/或结皮，从而改善皮肤的美容外观(例如光泽或光感、皮肤紧致度和/或皮肤粗糙度)。虽然本领域已知许多保湿剂，但仍需要有效而温和的天然产品。

表皮细胞表现出不希望的或过度的色素沉着，即过度色素沉着(例如肝斑)，是皮肤老化的另一个常见迹象。传统上，去角质可用于去除对皮肤的美容外观有害的表皮细胞。

去角质去除表皮外层，露出下面较新的皮肤细胞。去角质可以通过物理方法(即皮肤的摩擦)或通过化学方法实现。化学去角质剂包括含有水杨酸、乙醇酸、水果酶、柠檬酸或苹果酸的磨砂膏，并且可以由皮肤科医生以高浓度施用，或者在非处方产品中以较低浓度施用。化学去角质可能涉及使用含有α羟基酸(AHA)或β羟基酸(BHA)的产品，或用于在细胞连接处疏松将细胞保持在一起的胶状物质的酶，使它们易于去除。对于治疗痤疮的人，建议使用这种类型的去角质。

去角质的最大缺点是用于实现它的一些产品和方法的高价格。去角质会导致皮肤初期发红。接近化学去皮末期，皮肤会结霜，皮肤表面的颜色从亮白色变为灰色。

因此，期望减少皮肤色素沉着过度的有效方法，其比去角质对皮肤更温和。

因此，仍然需要适合于促进皮肤美学外观的治疗。换句话说，期望改善皮肤美容外观的组合物和方法。特别是，需要一种组合物和方法，用于恢复老化皮肤的年轻外观和/或对抗老化皮肤的迹象。

现在已经令人惊讶地发现含有高浓度的桦褐孔菌(Inonotus obliquus，Chaga)提取物的组合物在改善皮肤的美容外观，特别是皮肤质地方面以及减少与皮肤老化相关的生理体征(例如细纹、皱纹和色素沉着)方面非常有效。

桦褐孔菌(Inonotus obliquus，Chaga)，俗称白桦茸真菌或菌菇、野生北欧白桦茸真菌或Arctic是一种稀有的寄生真菌，生长在桦属树(例如桦树)的树皮上，通常在北纬地区发现。

几个世纪以来，桦褐孔菌一直在俄罗斯和其他北欧国家的民间疗法中被使用。传统上将真菌磨碎或研磨成细粉并用于酿造类似咖啡或茶的饮料。然而，桦褐孔菌的各种提取物已经用于医学，特别是用于治疗癌症。例如，已经显示从桦褐孔菌中纯化的特定组分，例如甾醇、多糖和萜类化合物具有抗癌/抗肿瘤活性。来自桦褐孔菌菌菇(chaga mushroom)的麦角甾醇过氧化物通过下调结肠直肠癌中的β-连环蛋白途径显示出抗癌活性(JEthnopharmacol.2015Jul 22.pii:S0378-8741(15)30047-7)。Lanostane型三萜，例如3β-羟基-25,26,27-三吲哚-8,22E-二烯-24-二酸对A549肿瘤细胞系表现出强烈的细胞毒性(Fitoterapia.2015年3月；101:34-40)。另一项研究表明，来自桦褐孔菌菌菇的多糖提取物可通过下调Bcl-2和上调caspase-3来抑制人神经胶质细胞瘤细胞的增殖(Int J MedMushrooms.2014；16(1):29-36)。因此，很明显，桦褐孔菌菌菇代表了丰富的生物活性化合物，特别是抑制细胞增殖的化合物的来源。

发明内容

本发明人出乎意料地确定，用于局部施用于皮肤且含有大量桦褐孔菌提取物的组合物在减少甚至完全抑制紫外线诱导的皮肤增厚和皱纹形成方面特别有效。值得注意的是，含有桦褐孔菌提取物的组合物的效果与高浓度视黄醇(retinol)的效果相当。

虽然不希望受理论束缚，但假设组合物中桦褐孔菌提取物中的多糖、β-葡聚糖和多酚的复杂混合物起到减少与紫外线损伤相关的氧化损伤的作用，同时改善现有角质形成细胞的性能并增加角质形成细胞在皮肤表皮层中的增殖。这些活性的结果是表皮体积的显著增加和皮肤光滑度的改善(即皮肤粗糙度的降低)。鉴于组合物中高浓度的桦褐孔菌提取物以及显示桦褐孔菌提取物中的各种生物活性化合物主动抑制细胞增殖的数据，这些结果特别令人惊讶。

因此，在其最广泛的范围内，可以看出本发明提供了包含如本文所述的桦褐孔菌提取物的组合物，其用于促进皮肤美学外观或用于促进皮肤美学外观的方法中。换句话说，如本文所述的组合物用于例如用于改善皮肤美容外观的方法。在一个特别优选的方面，本发明可以被视为提供如本文所述的组合物，其用于恢复老化皮肤的年轻外观和/或对抗老化皮肤的迹象或用于恢复老化皮肤的年轻外观和/或对抗老化皮肤的迹象的方法中。

因此，在一个方面，本发明提供化妆品组合物，其包含：

(i)浓度至少约2.5mg/ml的桦褐孔菌提取物；和

(ii)一种或多种生理学上或药学上可接受的赋形剂和/或稀释剂。

用于本发明组合物的桦褐孔菌提取物可以作为可溶于水的固体(例如粉末)提供，例如至少70％、75％、80％、85％、90％或95％，优选至少96％、97％、98％或99％(例如，99.9％)可溶于水。因此，在一些实施方案中，本发明提供化妆品组合物，其中桦褐孔菌提取物固体(例如粉末)已经以至少约2.5mg/ml的浓度溶解在一种或多种生理学上或药学上可接受的赋形剂和/或稀释剂中。

在一些实施方案中，用于本发明组合物的桦褐孔菌提取物可以是不溶的或部分可溶于组合物中的药学上可接受的赋形剂和/或稀释剂，例如，小于60％、50％、40％、30％或25％可溶于药学上可接受的赋形剂和/或稀释剂，例如，小于20％、15％、10％或5％可溶于药学上可接受的赋形剂和/或稀释剂。或者可以看出，在一些实施方案中，用于本发明组合物的桦褐孔菌提取物可以在水中或在药学上可接受的赋形剂和/或稀释剂中具有低溶解度，例如，桦褐孔菌提取物可以是至少5％，例如至少10、15、20或25％可溶于水或药学上可接受的赋形剂和/或稀释剂。因此，在一些实施方案中，组合物包含本文公开的浓度的桦褐孔菌提取物的悬浮液。在更进一步的实施方案中，组合物可以包含本文公开的浓度的桦褐孔菌提取物的悬浮液和溶液，例如，其中一部分桦褐孔菌提取物可溶于组合物的药学上可接受的赋形剂和/或稀释剂中，而剩余的提取物是不溶的，即形成悬浮液。

在一些实施方案中，所述组合物可包含浓度为至少约3.0、3.5、4.0、4.5或5.0mg/ml的桦褐孔菌提取物(例如粉末，例如可溶的、部分可溶的或不溶的粉末)，例如，至少约7.5、10、12.5、15或20mg/ml。在一些实施方案中，所述组合物可包含浓度为至少约25、30、35、40、45或50mg/ml，例如至少约60、70、80、90或100mg/ml，例如2.5-100、3.0-90、3.5-80、4.0-70、4.5-60或5.0-50mg/ml的桦褐孔菌提取物。另外可以看出，桦褐孔菌提取物(例如粉末)可以形成至少约0.25％(w/v)的化妆品组合物(即约0.25g的桦褐孔菌提取物(例如粉末)溶解和/或悬浮在100ml化妆品组合物中组成)。因此，在一些实施方案中，桦褐孔菌提取物可以形成化妆品组合物的至少约0.30、0.35、0.40、0.45或0.50％(w/v)。因此，在一些实施方案中，所述桦褐孔菌提取物可以形成至少约0.60、0.70、0.80、0.90或1.0％(w/v)，例如0.25-1.0、0.30-0.9、0.35-0.8、0.40-0.7、0.45-0.6或0.50-5.0％(w/v)的化妆品组合物。

如上所述，桦褐孔菌提取物含有多种化合物的混合物，包括多糖(例如β-葡聚糖)和多酚。因此，用于本发明组合物的桦褐孔菌提取物可以进一步基于其β-葡聚糖和多酚的含量来定义。

术语“β-葡聚糖”是指一组β-D-葡萄糖多糖，其天然存在于各种生物(包括真菌)的细胞壁中。通常，β-葡聚糖形成具有1-3个β-糖苷键的线性主链，但是在分子量、溶解度、粘度、分支结构和凝胶化性质方面变化，β-葡聚糖可以使用本领域已知的各种分光光度法定量。例如，基于苯胺蓝染料(三苯基甲烷染料)的荧光显微测定，其特异性结合1,3-β-葡聚糖(特别是染料混合物中发现的二苯甲酮荧光染料)，可用于定量桦褐孔菌提取物和/或化妆品组合物的β-葡聚糖含量。举例来说，定量桦褐孔菌提取物或组合物中β-葡聚糖的方法可包括以下步骤：

1.制备或提供染料混合物(例如含有40体积的0.1％苯胺蓝的水溶液、21体积的1MHCl和59体积的1M甘氨酸/NaOH缓冲液的混合物，pH 9.5)；

2.制备或提供稀释的样品(例如桦褐孔菌提取物或组合物的溶液)或对照物(例如已知浓度的凝胶多糖样品)，例如，在1.5mL微量离心管中用1M NaOH稀释10-50倍至终体积300μL；

3.将NaOH(例如30μL的6M NaOH)加入在步骤2中稀释的样品中；

4.将来自步骤3的溶液在80℃温育30分钟，然后立即浸入冰上(例如在冰浴中)；

5.将来自步骤1的染料混合物(例如630μL)加入到来自步骤4的溶液中并混合；

6.将来自步骤5的溶液在50℃温育30分钟，然后在室温下温育30分钟(使未结合的荧光染料脱色)；

7.用荧光分光光度计测量来自步骤6的溶液的荧光强度，发射波长为502nm(狭缝宽度为20nm)，激发波长为398nm(20nm狭缝宽度)；以及

8.将含有桦褐孔菌提取物的样品或本发明的组合物的荧光强度与标准曲线(例如，使用已知浓度的凝胶多糖(由非致病性细菌如农杆菌生物棒(Agrobacterium biobar)产生的线性β-1,3-葡聚糖)产生)比较。

因此，在一些实施方案中，β-葡聚糖形成用于本发明组合物的桦褐孔菌提取物固体(例如粉末)的至少1％(w/w)。在一些实施方案中，β-葡聚糖形成用于本发明组合物的桦褐孔菌提取物固体(例如粉末)的至少约2、3、4、5、6、7、8、9或10％(w/w)。因此，在一些实施方案中，β-葡聚糖形成用于本发明组合物的桦褐孔菌提取物固体(例如粉末)的至少约11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24或25％(w/w)，例如，用于本发明组合物的桦褐孔菌提取物固体(例如粉末)的大约1-35％、2-30％、3-25％、4-20％、5-15％或5-10％(w/w)，例如约1-15％(w/w)。

因此，在一些实施方案中，本发明的化妆品组合物可包含浓度为至少约0.025mg/ml的β-葡聚糖(即β-葡聚糖的总量)。因此，在一些实施方案中，本发明的化妆品组合物可包含浓度为至少约0.030、0.035、0.040、0.045或0.050mg/ml的β-葡聚糖(即β-葡聚糖的总量)，例如至少约0.075、0.100、0.125、0.150或0.200mg/ml。在一些实施方案中，所述组合物可包含浓度为至少约0.045、0.050、0.060、0.065或0.080mg/ml的β-葡聚糖(即β-葡聚糖的总量)，例如至少约0.125、0.165、0.210、0.250或0.350mg/ml。在更进一步的实施方案中，组合物可包含浓度为至少约0.45、0.50、0.60、0.65、0.75、0.80或0.85mg/ml的β-葡聚糖(即β-葡聚糖的总量)，例如至少约1.0、1.25、1.50、1.75或2.0mg/ml。因此，在一些实施方案中，组合物可包含浓度为约0.025-2.0mg/ml的β-葡聚糖(即β-葡聚糖的总量)，例如0.030-1.9、0.035-1.8、0.040-1.7、0.045-1.6、0.050-1.5、0.060-1.4、0.065-1.3、0.070-1.2、0.075-1.1、0.080-1.0、0.085-0.9、0.090-0.8、0.095-0.7、0.10-0.6或0.125-0.5mg/ml。

在一些实施方案中，本发明的化妆品组合物可包含浓度为至少约0.375mg/ml的β-葡聚糖(即β-葡聚糖的总量)。因此，在一些实施方案中，本发明的化妆品组合物可包含浓度为至少约为0.450、0.525、0.600、0.675或0.750mg/ml的β-葡聚糖(即β-葡聚糖的总量)，例如至少约1.125、1.500、1.875、2.250或3.000mg/ml。在一些实施方案中，所述组合物可包含浓度为至少约0.625、0.750、0.875、1.000或1.250mg/ml的β-葡聚糖(即β-葡聚糖的总量)，例如至少约1.875、2.500、3.125、3.750或5.000mg/ml。在更进一步的实施方案中，组合物可包含浓度为至少约6.25、7.5、8.75、10、11.25或12.5mg/ml的β-葡聚糖(即β-葡聚糖的总量)，例如至少约15、17.5、20、22.5或25mg/ml。因此，在一些实施方案中，组合物可包含浓度为约0.375-25mg/ml的β-葡聚糖(即β-葡聚糖的总量)，例如0.4-24、0.5-23、0.6-22、0.7-21、0.8-20、0.9-19、1.0-18、1.2-17、1.5-16、1.75-15、2-14、3-13、2-12、3-11或4-10mg/ml，例如0.5-10、0.75-9、1-8、1.25-7或1.5-6mg/ml。

或者，β-葡聚糖(即β-葡聚糖的总量)可形成本发明的化妆品组合物的至少约0.0025％(w/v)(即约0.0025g的β-葡聚糖溶解和/或悬浮于100ml化妆品组合物中)。因此，在一些实施方案中，本发明的化妆品组合物可包含浓度为至少约0.0030、0.0035、0.0040、0.0045或0.0050％(w/v)的β-葡聚糖(即β-葡聚糖的总量)，例如至少约0.0075、0.0100、0.0125、0.0150或0.0200％(w/v)。在一些实施方案中，所述组合物可包含浓度为至少约0.0045、0.0050、0.0060、0.0065或0.0080％(w/v)的β-葡聚糖(即β-葡聚糖的总量)，例如，至少约0.0125、0.0165、0.0210、0.0250或0.0350％(w/v)。在更进一步的实施方案中，组合物可以包含浓度为至少约0.045、0.050、0.060、0.065、0.075、0.080或0.085％(w/v)的β-葡聚糖(即β-葡聚糖的总量)，例如至少约0.10、0.125、0.150、0.175或0.20％(w/v)。因此，在一些实施方案中，组合物可以包含浓度为约0.0025-0.20％(w/v)的β-葡聚糖(即β-葡聚糖的总量)，例如0.003-0.19、0.0035-0.18、0.004-0.17、0.0045-0.16、0.0050-0.15、0.0060-0.14、0.0065-0.13、0.0070-0.12、0.0075-0.1、0.0080-0.10、0.0085-0.09、0.0090-0.08、0.0095-0.07、0.010-0.06或0.0125-0.05％(w/v)。

因此，在更进一步的实施方案中，β-葡聚糖(即β-葡聚糖的总量)可以形成本发明的化妆品组合物的至少约0.0375％(w/v)(即约0.0375g的β-葡聚糖溶解在100ml化妆品组合物中)。因此，在一些实施方案中，本发明的化妆品组合物可包含浓度为至少约0.0450、0.0525、0.0600、0.0675或0.750％(w/v)的β-葡聚糖(即β-葡聚糖的总量)，例如至少约0.1125、0.1500、0.1875、0.2250或0.3000％(w/v)。在一些实施方案中，所述组合物可包含浓度为至少约0.0625、0.0750、0.0875、0.1000或0.1250％(w/v)的β-葡聚糖(即β-葡聚糖的总量)，例如至少约0.1875、0.2500、0.3125、0.3750或0.5000％(w/v)。在更进一步的实施方案中，组合物可包含浓度为至少约0.625、0.75、0.875、1.0、1.125或1.25％(w/v)的β-葡聚糖(即β-葡聚糖的总量)，例如至少约1.5、1.75、2.0、2.25或2.5％(w/v)。因此，在一些实施方案中，组合物可包含浓度为约0.0375-2.5％(w/v)的β-葡聚糖(即β-葡聚糖的总量)，例如约0.0375-2.5％、0.04-2.4、0.05-2.3、0.06-2.2、0.07-2.1、0.08-2.0、0.09-1.9、0.10-1.8、0.12-1.7、0.15-1.6、0.175-1.5、5-1-1.4、0.3-1.3、0.2-1.2、0.3-1.1或0.4-1.0％(w/v)，如0.05-1.0、0.075-0.9、0.1-0.8、0.125-0.7或0.15-0.6％(w/v)。

术语“多酚”(也称为多羟基苯酚或多酚类)是指特征在于存在大量的酚结构单元的有机化学品的结构类别。多酚衍生自莽草酸/苯丙烷和/或聚酮化合物途径，并且具有多于一个酚单元并且不含有基于氮的功能。通常，多酚可被视为中等水溶性化合物，其典型分子量为约500-4000Da，包含至少12个酚羟基和每1000Da约5-7个芳环。

样品(例如本发明的桦褐孔菌提取物或组合物)的总多酚含量可使用本领域已知的各种方法定量。例如，用于快速评估样品中总酚含量的简单且廉价的方法基于酚类与固蓝BB(Fast Blue BB)重氮盐在碱性pH下的相互作用，形成偶氮络合物，在60分钟后在420nm处测量吸光度。可以相对于使用已知浓度的没食子酸测量的标准曲线评估样品的酚含量。因此，本发明的桦褐孔菌提取物固体或组合物的总多酚含量可通过上述固蓝BB方法测定。因此，除非另有说明，否则本文公开的桦褐孔菌提取物或组合物的多酚含量表示为没食子酸当量。

因此，在一些实施方案中，多酚(多酚化合物)形成用于本发明组合物的桦褐孔菌提取物固体(例如粉末)的至少约0.10％(w/w)。在一些实施方案中，多酚形成用于本发明组合物的桦褐孔菌提取物固体(例如粉末)的至少约0.15％、0.20％、0.25％、0.30％、0.35％、0.40％、0.45％或0.5％(w/w)。例如，多酚可以形成用于本发明组合物的桦褐孔菌提取物固体(例如粉末)的至少约0.6、0.7、0.8、0.9、1.0、1.1、1.2、1.3、1.4、1.5、1.75或2.0％(w/w)。因此，例如，多酚可以形成用于本发明组合物的桦褐孔菌提取物固体(例如粉末)的约0.10-2.0％、0.15-1.75％、0.20-1.5、0.25-1.4、0.30-1.3、3.25-1.2、0.40-1.1或0.5-1.0％(w/w)。

因此，在一些实施方案中，多酚(多酚化合物)形成用于本发明的组合物的桦褐孔菌提取物固体(例如粉末)的至少约2.5％(w/w)。在一些实施方案中，多酚形成用于本发明的组合物的桦褐孔菌提取物固体(例如粉末)的至少约3.0、3.5、4.0、4.5或5.0％(w/w)，例如用于本发明的组合物的桦褐孔菌提取物固体(例如粉末)的约2.5-5.0％、3.0-4.5％或3.5-4.0％(w/w)，例如约4.0-5.0％(w/w)。

因此，在一些实施方案中，本发明的化妆品组合物可包含浓度为至少约0.0030mg/ml(没食子酸当量)的多酚(即总多酚含量)。因此，在一些实施方案中，本发明的化妆品组合物可包含浓度至少约0.0035、0.0040、0.0045或0.0050mg/ml的多酚(即总多酚含量)，例如，至少约0.006、0.007、0.008、0.009或0.010mg/ml。在一些实施方案中，组合物可包含浓度为至少约0.0125、0.0150、0.0175、0.0200或0.0250mg/ml的多酚(即总多酚含量)，例如至少约0.0375、0.0500、0.0625、0.0750或0.100mg/ml。在更进一步的实施方案中，组合物可包含浓度为至少约0.125、0.150、0.175、0.200、0.225或0.250mg/ml的多酚(即总多酚含量)，例如至少约0.30、0.35、0.40、0.45或0.50mg/ml。因此，在一些实施方案中，组合物可包含浓度为约0.0030-0.50mg/ml的多酚(即总多酚含量)，例如0.0035-0.45、0.0040-0.40、0.0045-0.35、0.0050-0.30、0.006-0.250、0.007-0.225、0.008-0.200、0.002-0.175、0.010-0.150、0.0125-0.125、0.0150-0.100、0.0175-0.075、0.020-0.0625或0.025-0.05mg/ml。

因此，在一些实施方案中，本发明的化妆品组合物可包含浓度为约至少0.075mg/ml(没食子酸当量)的多酚(即总多酚含量)。因此，在一些实施方案中，本发明的化妆品组合物可包含浓度为至少约0.090、0.105、0.120、0.135或0.150mg/ml的多酚(即总多酚含量)，例如至少约0.225、0.300、0.375、0.450或0.600mg/ml。在一些实施方案中，组合物可包含浓度为至少约0.125、0.150、0.175、0.200或0.250mg/ml的多酚(即总多酚含量)，例如至少约0.375、0.500、0.625、0.750或1.000mg/毫升。在更进一步的实施方案中，组合物可包含浓度为至少约1.25、1.5、1.75、2.0、2.25或2.5mg/ml的多酚(即总多酚含量)，例如至少约3.0、3.5、4.0、4.5或5.0mg/ml。因此，在一些实施方案中，组合物可包含浓度为约0.075-5.0mg/ml的多酚(即总多酚含量)，例如0.08-4.8、0.1-4.6、0.12-4.4、0.14-4.2、0.16-4.0、0.18-3.8、0.20-3.6、0.22-3.4、0.24-3.2、0.35-3.0、0.4-2.8、0.6-2.6、0.4-2.4，0.6-2.2或0.8-2.0mg/ml，例如0.1-2.0、0.15-1.8、0.20-1.6、0.25-1.4或0.3-2.0mg/ml。

或者，观察到的多酚(即总多酚含量)可以形成本发明的化妆品组合物至少约7.5×10^-3％(w/v)(即溶解在100ml化妆品组合物中的约0.0075g多酚)。因此，在一些实施方案中，本发明的化妆品组合物可包含浓度为至少约9×10^-3、10.5×10^-3、12×10^-3、13.5×10^-3或15×10^-3％(w/v)的多酚(即总多酚含量)，例如至少约22.5×10^-3、30×10^-3、37.5×10^-3、45×10^-3或60×10^-3％(w/v)。在一些实施方案中，所述组合物可包含浓度为至少约12.5×10^-3、15×10^-3、17.5×10^-3、20×10^-3或25×10^-3％(w/v)的多酚(即总多酚含量)，例如至少约37.5×10^-3、50×10^-3、62.5×10^-3、75×10^-3或100×10^-3％(w/v)。在更进一步的实施方案中，组合物可包含浓度为约至少0.125、0.15、0.175、0.200、0.225或0.25％(w/v)的多酚(即总多酚含量)，例如至少约0.3、0.35、0.4、0.45或0.5％(w/v)。因此，在一些实施方案中，组合物可包含浓度为约7.5×10^-3-0.5％(w/v)的多酚(即总多酚含量)，例如，8.0×10^-3-0.48、0.01-0.46、0.012-0.44、0.014-0.42、0.016-0.40、0.018-0.38、0.02-0.36、0.024-0.34、0.03-0.32、0.035-0.3、04-0.28、0.06-0.26、0.04-0.24、0.06-0.22或0.08-0.2％(w/v)，例如0.01-0.20、0.015-0.18、0.02-0.16、0.025-0.14或0.03-0.12％(w/v)。

如实施例所讨论的，本发明组合物中使用的桦褐孔菌提取物在皮肤角质形成细胞模型细胞抗氧化测定(CAA)分析中表现出非常有效的抗氧化作用。因此，本发明的桦褐孔菌提取物和组合物可以通过参考它们的抗氧化(抗氧)性质进一步定义。在这方面，与标准Trolox相比，可以使用可测量给定物质的抗氧化能力的氧自由基吸收能力(ORAC)方法测量桦褐孔菌提取物或组合物的抗氧化能力。因此，样品的ORAC可以以每100g样品的Trolox当量(TE)的μmol表示。

因此，在一些实施方案中，用于本发明组合物的桦褐孔菌提取物固体(例如粉末)具有每100g(桦褐孔菌提取物)至少约45000μmol TE的ORAC。在一些实施方案中，所述用于本发明组合物的桦褐孔菌提取物固体(例如粉末)的ORAC为至少约47500、50000、52500、55000、57500或60000μmol TE/100g，例如约45000-75000、50000-70000或55000-65000μmolTE/100g。

或者，在一些实施方案中，本发明的组合物具有每毫升组合物至少约1.125μmolTE的ORAC。因此，在一些实施方案中，本发明的组合物具有每毫升组合物至少约1.250、1.375或1.500μmol TE的ORAC。在一些实施方案中，本发明的组合物具有每毫升组合物至少约22.5、27.5、30.0、35.0、40.0或45.0μmol TE的ORAC，例如，每毫升组合物约1.125-45.0、1.125-40.0、1.375-35.0或1.500-30.0μmol TE，例如每毫升组合物约1.125-27.5、1.5-25、2-22.5、2.5-20、3-15μmol TE。显而易见的是，上面给出的ORAC值说明了可能存在于本发明组合物中的范围。在这方面，本发明组合物的ORAC可以基于以上列出的关于用于组合物的桦褐孔菌提取物的值和本文公开的与组合物中存在的提取物的量有关的值来计算。

用于组合物的桦褐孔菌提取物可以通过任何合适的方法生产，并且本领域已知各种方法。在一些实施方案中，使用热水提取方法制备桦褐孔菌提取物。例如，用于本发明组合物的桦褐孔菌提取物可以通过包括以下步骤的方法获得或制得：

1)提供桦褐孔菌菌菇(chaga mushroom)干物质，例如，已经碾磨或磨碎的干燥桦褐孔菌菌菇；

2)将水与步骤1)的桦褐孔菌菌菇干物质接触，并温育所得悬浮液，优选在超过约60℃的温度下温育，至少约1小时，优选至少2、3或4小时；

3)从步骤2)获得的悬浮液中除去固体(不溶物质)，例如通过过滤或离心，获得桦褐孔菌提取液；

4)任选地对来自步骤3)的桦褐孔菌提取物溶液进行灭菌，例如，通过过滤灭菌；和

5)从步骤3)或4)的桦褐孔菌提取物溶液中产生固体(例如干粉)，例如通过喷雾干燥、冷冻干燥、微胶囊化等。

桦褐孔菌菌菇干物质可以从任何合适的桦褐孔菌菌菇来源获得。例如，桦褐孔菌菌菇可以从天然来源(例如从白桦树)获得，或从人工来源收获，例如桦褐孔菌菌菇可以在人工条件下生长、培养或培育，例如在培养箱中的生长培养基中或在其上生长、培养或培育。

步骤2)中的提取过程的温度优选在60-100℃、65-95℃、70-90℃或75-85℃的范围内，例如约80℃。因此，应该理解，实际上反应可以在高压下进行，例如至少约2、3或4MPa。有利地，在高压下进行提取方法可以防止生物活性β-葡聚糖的降解。

高压是指反应在合适的耐压反应器(例如由德国曼海姆的Lipp MischtechnikGmbH制造的IMR E-400混合反应器)中进行，然而技术人员将能够选择合适的反应器而不用过度的负担。萃取过程可在压力条件下进行，该压力条件由反应温度决定。压力和温度之间的关系在本领域中是公知的，并且可以获得在相应温度下观察到的压力的数据表，例如，CRC Handbook of Chemistry and Physics(第91版，2010Ed.Haynes，W.M，CRC Press)。通常压力相对温度增加，反之亦然。

通常，添加水至干物质含量的近似值为1-20％，并且更通常地，起始桦褐孔菌菌菇溶液/悬浮液的干物质含量可以在2-15％之间，或更特别地3-14％，优选4-12％，最优选5-10％。

可以以本领域已知的任何数量的方式达到升高的温度，包括但不限于间接通过压力反应器夹套或通过蒸汽注入直接进入反应器。

萃取反应通常在如上所述的恒定温度和压力条件下持续至少1小时。通常，萃取过程将持续1-10小时，优选2-8小时，3-7小时，4-6小时，最优选4-5小时。

从提取物中除去固体即不溶性物质的步骤可以通过本领域已知的任何合适的方法实现。例如，在一些实施方案中，除去固体的步骤可包括使用孔径为0.30-0.60μm的过滤器过滤来自步骤(2)的悬浮液的步骤，优选孔径为0.35-0.55，特别优选0.40-0.50μm，最优选0.45μm，并收集滤液，形成桦褐孔菌提取物溶液。在其他实施方案中，除去固体的步骤可以包括将步骤(2)的悬浮液离心分离的步骤，例如在10,000g分离至少约20分钟。

在一些实施方案中，对桦褐孔菌提取物溶液进行灭菌以减少生物负担可能是期望的或有利的。这可以通过对溶液进行过滤灭菌来实现。这优选将溶液过滤通过0.2-0.45μm过滤器来实现。因此，在一些实施方案中，可以同时进行除去不溶性物质和对溶液灭菌的步骤。

从步骤3)或4)的桦褐孔菌提取物溶液制备固体(例如干粉)的步骤，即使桦褐孔菌提取物溶液脱水的步骤，可以通过本领域技术人员熟知的许多技术实现，优选通过喷雾干燥。在一些实施方案中，包封(例如，使用本领域熟知的标准微囊化技术)桦褐孔菌提取物可能是优选的或有利的。例如，桦褐孔菌提取物溶液可以与麦芽糖糊精的溶液混合(葡萄糖当量(DE)值至少约为5，例如约5-20、6-18、7-16、8-14、9-12，例如约10)以1：1的比例，随后喷雾干燥。所得粉末可以是桦褐孔菌提取物的微囊化形式，可用于制备本发明的化妆品组合物。在一些实施方案中，可以将粉末筛分以在其掺入化妆品组合物中之前产生均匀的粒度，以促进其在上述浓度下在组合物中均匀溶解或分布。

因此，用于本发明组合物的桦褐孔菌提取物不是发酵的桦褐孔菌提取物或其提取物。

“发酵的桦褐孔菌提取物”是指在适合促进菌丝体生长的条件下通过在发酵培养基(例如包含碳和/或氮源)中培养桦褐孔菌菌丝体一段时间(例如数天)并随后将菌丝体从发酵培养基分离以获得发酵提取物而获得的提取物。任选地，可以进一步提取发酵的提取物以获得提取物，例如来自发酵提取物的组分(例如胞外多糖)的混合物。

上述桦褐孔菌提取物固体(例如粉末)可用于生产本发明的组合物，其根据本领域熟知的技术使用现有的成分，以常规方式与一种或多种生理学上可接受的载体、赋形剂和/或稀释剂一起配制。

因此，本发明的另一方面包括上述桦褐孔菌提取物固体(例如粉末)在化妆品组合物的配方中的用途，所述化妆品组合物包含浓度为至少约2.5mg/ml的桦褐孔菌提取物和一种或多种生理学上或药学上可接受的赋形剂和/或稀释剂。

本发明的另一方面提供了一种制备化妆品组合物的方法，包括将本文所述的桦褐孔菌提取物固体(例如粉末)加入一种或多种生理学或药学上可接受的赋形剂和/或稀释剂中，其中所述桦褐孔菌提取物固体以至少约2.5mg/ml的浓度存在。

另外的制备方法步骤包括改变或调节pH、离子浓度等和/或添加一种或多种另外的活性成分。在一些实施方案中，化妆品组合物的pH为约5.0-8.0，例如约6.0-7.0。

“药学上可接受的”或“生理学上可接受的”是指该成分必须适合于化妆品应用和组合物。该成分还必须与组合物中的其他成分相容并且与接受者在生理上可接受。

本发明的组合物用于局部(即皮肤)给药。

局部用组合物包括凝胶、乳膏、软膏剂、喷雾剂、洗剂、油膏剂、棒剂、肥皂、粉末剂、薄膜剂、气溶胶剂、滴剂、泡沫、溶液剂、乳液、悬浮液、分散液，例如非离子囊泡分散体、乳剂和本领域中的任何其他常规化妆品形式。

软膏、凝胶和乳膏可以例如用水性或油性基质同时加入合适的增稠剂和/或胶凝剂配制。洗剂可以用水性或油性基质配制，并且通常还含有一种或多种乳化剂、分散剂、悬浮剂、增稠剂或着色剂。粉末可以借助于任何合适的粉末基质形成。滴剂和溶液可以用含有一种或多种分散剂、增溶剂或悬浮剂的水性或非水性基质配制。通过使用合适的推进剂，可以方便地从加压包装中输送气溶胶喷雾剂。

在本发明的一个优选实施方案中，本发明的组合物是液体，优选水溶液和/或悬浮液。

可以加入到本发明组合物中的其他药学上可接受的组分或成分可以是活性组分，即对皮肤有影响的组分，优选还起到促进皮肤美学外观或改善皮肤美容外观的作用，例如在本文描述的美容适应症中。因此，作为另外一种选择或除此之外，所述方法可包括将一种或多种药学上可接受的活性组分加入组合物中或将组合物与一种或多种药学上可接受的活性组分组合的另一步骤。

药学上可接受的活性组分可包括矿物质、维生素、酶、蛋白质、肽、氨基酸、脂质、抗氧化剂、多糖、适合作为防晒过滤剂的物质、化学去角质剂、提取物及其混合物，如下文更详细描述的。

在一些实施方案中，本发明的组合物含有一种或多种维生素。维生素可以选自但不限于维生素A及其衍生物中的任何一种或多种(例如类维生素A或视黄醇或其衍生物，例如棕榈酸视黄酯或丙酸视黄酯)、生物素、叶酸、泛酸钙、烟酰胺、盐酸吡哆醇、盐酸吡哆醛、核黄素、硫胺素、胸苷、维生素B12、维生素B3(如烟酰胺)、维生素B5(如泛醇)、维生素C及其衍生物(如抗坏血酸棕榈酸酯、抗坏血酸磷酸钠、抗坏血酸磷酸镁、抗坏血酸乙酸酯)、生育酚和衍生物(如维生素E乙酸酯)。

在一些实施方案中，本发明的组合物包含维生素C或其衍生物。在特别优选的实施方案中，组合物包含抗坏血酸磷酸钠。

另外或可替代地，在一些实施方案中，本发明的组合物包含维生素E或其衍生物，例如，生育酚乙酸酯，和/或维生素B5或其衍生物，例如，泛醇。

在更进一步的实施方案中，本发明的组合物可含有辅酶Q10(也称为ubicuinona)。

因此，在特别优选的方面，本发明提供了一种组合物，包括：

(i)浓度至少约2.5mg/ml的桦褐孔菌提取物；

(ii)维生素C或其衍生物，例如抗坏血酸磷酸钠；

(iii)维生素E或其衍生物，例如生育酚乙酸酯；

(iv)维生素B5或其衍生物；

(v)辅酶Q10；和

(vi)一种或多种生理学上或药学上可接受的赋形剂和/或稀释剂。

在一些实施方案中，组合物可含有有效量的一种或多种试剂以稳定桦褐孔菌提取物(或桦褐孔菌提取物的组分，例如多酚和/或β-葡聚糖)以防止其降解。另外或可替代地，组合物可包含有效量的一种或多种防腐剂或抗微生物剂以防止组合物的腐败。

适用于化妆品组合物的稳定剂、防腐剂和抗微生物剂是本领域公知的，包括例如盐或非电解质、乙酸盐、SDS、EDTA、柠檬酸盐或乙酸盐缓冲剂、甘露醇、甘氨酸、聚山梨醇酯、苄醇、尿素。

该组合物可另外包括润滑剂、润湿剂、乳化剂、增粘剂、造粒剂、崩解剂、粘合剂、渗透活性剂、悬浮剂、防腐剂、甜味剂、调味剂、吸附促进剂(例如表面渗透剂，例如胆汁盐、卵磷脂、表面活性剂、脂肪酸、螯合剂)、褐变剂、有机溶剂、抗氧化剂、稳定剂、润肤剂、硅氧烷、α-羟基酸、缓和剂、消泡剂、保湿剂、香料、离子或非离子增稠剂、表面活性剂、填料、离子或非离子增稠剂、螯合剂、聚合物、推进剂、碱化剂或酸化剂、遮光剂、着色剂和脂肪化合物等。下面更详细地描述这些成分中的一些。

可以与本发明组合物组合的蛋白质的实例包括胶原和/或其衍生物(例如其部分)、能够促进细胞生长的蛋白质或肽、糖蛋白1、糖蛋白2和层粘连蛋白。

本发明的组合物可以与酶组合，所述酶包括但不限于水果酶(例如菠萝蛋白酶)、超氧化物歧化酶、过氧化物酶、透明质酸酶和粘多糖酶中的任何一种或多种。

肽可以选自但不限于D,L-肌肽、D-肌肽、L-肌肽、鹅肌肽和Matrixyl(五肽衍生物)中的任何一种或多种。

氨基酸可以选自但不限于L-丙氨酸、L-精氨酸、L-天冬酰胺、L-天冬氨酸、L-半胱氨酸、L-胱氨酸、甘氨酸、L-谷氨酰胺、L-谷氨酸、L-组氨酸、L-异亮氨酸、L-亮氨酸、L-赖氨酸、L-蛋氨酸、L-苯丙氨酸、L-脯氨酸、L-丝氨酸、L-苏氨酸、L-色氨酸、L-酪氨酸和L-缬氨酸及其衍生物中的任何一种或多种，包括表1中定义的非天然存在的氨基酸。特别优选的氨基酸为抗氧化剂，可选自甘氨酸、赖氨酸、精氨酸、半胱氨酸、胱氨酸、组氨酸、酪氨酸和色氨酸中的任何一种或多种。

化妆品组合物可包含一种或多种脂质，其包括脂肪、油、蜡等。合适的极性油是，例如，来自卵磷脂和脂肪酸甘油三酯的那些，即饱和和/或不饱和的、支链和/或无支链的链烷羧酸的三甘油酯，链长为8-24个碳原子，特别是12到18个碳原子。脂肪酸甘油三酯可以例如有利地选自合成的、半合成的和天然的油，例如橄榄油、向日葵油、大豆油、花生油、菜籽油、杏仁油、棕榈油、椰子油、蓖麻油、小麦胚芽油、葡萄籽油、蓟油、月见草油、澳洲坚果油等。

作为另外一种选择或除此之外，油可选自挥发性油、非挥发性油或其混合物。非挥发性油包括满足下列定义中的至少一个的油：(a)该油在25℃和一个大气压下的蒸汽压不超过0.2mm Hg；(b)该油在一个大气压下的沸点至少为300℃。挥发性油包括不是如上定义的“非挥发性”的材料。

非挥发性油可选自非挥发性硅油、非挥发性烃油及其混合物。合适的非挥发性硅油包括线性聚甲基硅氧烷，优选地，非挥发性硅油是高分子量二甲基硅氧烷。

合适的非挥发性烃油包括双甘油或三甘油的支链酯或酯或1,2,3,4-丁烷三醇或赤藓糖醇、赤藓糖醇或三噻吩特醇。优选地，非挥发性烃油包含赤藓红三乙基己酸酯和聚甘油-2三异硬脂酸酯、二乙基己基碳酸酯、二辛基醚、二辛基碳酸酯、异壬基异壬酸酯、十三烷基新戊酸酯，或其混合物。

挥发性油可选自挥发性硅油、官能化和非官能化的挥发性烃油及其混合物。可用于本发明的挥发性油可以是饱和的或不饱和的，具有直链或支链或环状结构，或者具有任何一种或多种所述特征的组合。

挥发性烃油的实例包括聚癸烷如异十二烷和异癸烷以及C7-C15异链烷烃。

挥发性硅油可选自环五硅氧烷、环己硅氧烷或其混合物。线性挥发性硅油可以是线性聚甲基硅氧烷。

本发明的化妆品组合物还可包含一种或多种多糖，其选自但不限于任何一种或多种阴离子多糖(例如海藻酸、果胶、黄原胶、透明质酸、硫酸软骨素、阿拉伯树胶、刺梧桐树胶、黄蓍胶、羧甲基壳多糖、纤维素胶、糖胺聚糖)，阳离子多糖(如壳聚糖、乙酰化壳聚糖、阳离子瓜尔胶、阳离子羟乙基纤维素(HEC))，非离子多糖(如淀粉、糊精、瓜尔胶、纤维素醚如羟乙基纤维素、甲基纤维素和硝酸纤维素)，两性多糖(例如羧甲基壳聚糖、N-羟基-二羧乙基-壳聚糖、改性马铃薯淀粉)和疏水多糖(例如十六烷基羟乙基纤维素、聚季铵盐24)。

化妆品组合物可以进一步包含适合作为防晒过滤剂的物质，例如有机防晒剂，例如肉桂酸衍生物。有机防晒活性物质可选自亲水性有机防晒剂、疏水性有机防晒剂或其混合物。防晒剂的合适实例可以在由Wenning和Mc Ewen编辑的CTFA InternationalCosmetic Ingredient Dictionary and Handbook，第7版第2卷，第1672页中发现(TheCosmetic,Toiletry,and Fragrance Association,Inc.,Washington,D.C.1997)。

有机防晒剂可选自烷基β,β-二苯基丙烯酸酯衍生物、α-氰基β,β-二苯基丙烯酸酯衍生物、邻氨基苯甲酸酯衍生物、二苯甲酮衍生物、樟脑衍生物、二苯甲酰甲烷衍生物、对氨基苯甲酸衍生物、水杨酸衍生物、三嗪衍生物或其混合物。例如，疏水性有机防晒剂可选自4-(1,1-二甲基乙基)-4'-甲氧基二苯甲酰基甲烷；4-异丙基二苯甲酰甲烷；4-(1,1-二甲基乙基)-4'-甲氧基二苯甲酰基甲烷、2-乙基己基-2-氰基-3,3-二苯基丙烯酸酯、或其混合物。

在一些实施方案中，亲水性有机防晒剂可以是2-苯基苯并咪唑-5-磺酸。

肉桂酸衍生物防晒剂的合适实例可以在由Wenning和Mc Ewen编辑的CTFAInternational Cosmetic Ingredient Dictionary and Handbook，第7版第2卷，第1672页(The Cosmetic,Toiletry,and Fragrance Association,Inc.,Washington,D.C.1997)中发现。肉桂酸衍生物可选自2-乙基己基-对甲氧基肉桂酸酯、二乙醇胺甲氧基肉桂酸酯、2-乙氧基乙基-对甲氧基肉桂酸酯、或其混合物。例如，肉桂酸衍生物可以是2-乙基己基-对甲氧基肉桂酸酯。

化妆品组合物可以与化学去角质剂组合，所述化学去角质剂选自但不限于α羟基酸(AHA)、β羟基酸(BHA)或多羟基酸中的任何一种，例如水杨酸、乙醇酸、柠檬酸和苹果酸。

可掺入化妆品组合物中的提取物包括但不限于植物提取物，其可包含酚类化合物，例如类黄酮(例如糖基芦丁、阿魏酸、咖啡酸)、糠基葡萄糖醇、丁基化羟基甲苯、丁基羟基茴香醚、去甲二氢愈创木脂酸树脂、去甲二氢葫芦酸、三羟基丁酰苯及其衍生物。用于本发明组合物的特定植物提取物包括芦荟提取物、人参提取物和马尾提取物。

人参提取物可通过用亲水性溶剂(特别是水、乙醇、乙二醇或其任何混合物)提取人参根而获得。提取物含有皂苷、甾醇、碳水化合物、果胶、维生素、矿物质和脂质。

马尾提取物可通过用亲水性溶剂(例如水，乙醇，乙二醇或其任何混合物)提取问荆(Equisetum arvense)的整个草本植物的而获得。该提取物含有硅酸盐、类黄酮、皂苷、咖啡酸和阿魏酸。

在一些特别优选的实施方案中，化妆品组合物和/或桦褐孔菌提取物不含植物和/或其他真菌的提取物。

例如，在优选的实施方案中，在上述产生桦褐孔菌提取物的方法中使用的桦褐孔菌菌菇干物质不含来自植物和/或其他真菌的物质，即它仅含有桦褐孔菌菌菇干物质或者可选地基本上由桦褐孔菌菌菇干物质(即至少95％，优选以96％、97％、98％或99％的桦褐孔菌菌菇干物质)组成。因此，在特别优选的实施方案中，使水与桦褐孔菌菌菇干物质接触的步骤不包括从植物和/或其他真菌中添加物质。

因此，在一些实施方案中，在化妆品组合物的制剂中使用的上述桦褐孔菌提取物固体(例如粉末)不含植物和/或其他真菌的提取物。

在更进一步的实施方案中，制备化妆品组合物的方法包含向一种或多种生理学上或药学上可接受的赋形剂和/或稀释剂中添加本文所述的桦褐孔菌提取物固体(例如粉末)的组合物，不包括从植物和/或其他真菌中添加提取物。

如本文所用的术语“提取物”是指包含通过使用溶剂(例如乙醇或水)提取植物或真菌(或其部分)而获得的多种化合物(即化合物的混合物)的物质或组合物。因此，从植物或真菌获得的单一纯化物质、化合物或试剂(例如活性剂)不是如本文所定义的提取物。

化妆品组合物可进一步包含皮肤调理剂。皮肤调理剂可选自保湿剂、去角质剂、润肤剂或其混合物。保湿剂包括多元醇，例如甘油、丙二醇、二丙二醇、聚丙二醇、聚乙二醇、山梨糖醇、羟丙基山梨糖醇、己二醇、1,3-丁二醇、1,2,6-己三醇、乙氧基化甘油、丙氧基化甘油或其混合物。

可与本发明组合物组合的抗氧化剂的实例包括但不限于氨基酸、维生素、矿物质、类胡萝卜素、肽、硫醇、亚砜亚胺化合物、螯合剂、不饱和脂肪酸、酚类化合物、植物提取物、二苯乙烯类、尿酸、甘露糖、绿原酸、咪唑(如尿刊酸)、呋喃甲基山梨醇、泛醌、泛醇、质体醌、植物甾醇及其衍生物(如盐、酯、醚、糖、核苷酸、核苷、肽和/或脂质衍生物)，部分如上所述。

矿物质可以选自但不限于任何一种或多种钼酸盐(例如(NH₄)OMo₇O₂₄)铝(例如AlCl₃)、钙(例如CaCl₂)、钴(例如CoCl₂)、铬(例如CrK(SO₄))、铜(例如CuSO₄)、铁(例如Fe(NO₃)₃、FeSO₄)、钾(例如KCl)、镁(例如MgCl₂)、锰(例如MnCI₂,MnSO₄)、磷酸盐(例如Na₂HPO₄、NaH₂PO₄)、碳酸盐(例如NaHCO₃)、硅酸盐(例如Na₂SiO₃)、钠(例如NaCl)、钒酸盐(例如NH₄VO₃)、镍(例如NiCl₂)、锡(例如SnCl₂)、锌(例如ZnO、ZnSO₄)、硒(例如硒代甲硫氨酸、依布硒啉、H₂SeO₃、Na₂SeO₃)、硫酸盐和硝酸盐。

类胡萝卜素可以选自但不限于胡萝卜素中的任何一种或多种，例如α-胡萝卜素、β-胡萝卜素、ψ-番茄红素、八氢番茄红素等及其衍生物。

硫醇可选自但不限于硫代葡萄糖、丙硫氧嘧啶、硫氧还蛋白、硫辛酸、谷胱甘肽、半胱氨酸、胱氨酸、胱胺及其糖基、N-乙酰基、甲基、乙基、丙基、戊基、丁基和月桂基、棕榈酰基、油基、γ-亚油基、胆甾醇基和甘油基酯及其盐、二月桂基硫代二丙酸酯、二硬脂基硫代二丙酸酯、硫代二丙酸及其衍生物中的任何一种或多种。

磺酰亚胺化合物可以选自但不限于同型半胱氨酸亚砜亚胺、丁硫氨酸砜、五-或六-己硫酮亚砜亚胺中的任何一种或多种，其可以包含在组合物中，使得它们以非常低的剂量提供(例如pmol至μmol/kg)。

螯合剂可选自但不限于脱铁铁蛋白、desferral、乳铁蛋白、羟基脂肪酸、棕榈酸、植酸、羟基酸(例如柠檬酸、乳酸、苹果酸)、腐殖酸、胆汁酸、胆汁提取物、胆红素、胆绿素、EDTA、EGTA及其衍生物中的任何一种或多种。

不饱和脂肪酸可选自但不限于γ-亚麻酸、亚油酸、油酸及其衍生物中的任何一种或多种。

二苯乙烯及其衍生物包括，例如，二苯乙烯氧化物和反式二苯乙烯氧化物。

多种另外的任选活性成分可以掺入本发明的化妆品组合物中。这些附加成分的非限制性实例包括另外的护肤活性物质，例如法呢醇、芳樟醇、红没药醇、植烷三醇、尿素、胍(例如氨基胍)；己糖胺化合物，其盐或衍生物；糖胺；自晒黑剂(例如脱羟基丙酮)；结构化代理人；亲水胶凝剂；抗痤疮药物(间苯二酚、水杨酸等)；皮肤舒缓和愈合剂，如尿囊素等；适用于美学目的的试剂，例如精油、香料、皮肤感觉剂、遮光剂、芳香化合物(例如丁香油、薄荷醇、樟脑、桉叶油和丁子香酚)。

可以采用本领域熟知的技术配制本文所述的组合物，以便在施用于身体后提供活性成分的快速、持续或延迟释放。

该组合物可以是任何合适的剂型，以允许递送或靶向特定细胞或组织，例如，作为乳剂或在脂质体、囊泡、微球、纳米颗粒等中，由此活性成分可以被吸收、吸附、掺入或结合。这可以有效地将产物转化为不溶形式。这些颗粒形式可以克服稳定性(例如降解)和递送问题。

溶液、悬浮液、凝胶和乳液的使用是优选的，例如，活性成分可以在水、水基液体、油、凝胶、乳液、水包油或油包水乳液、分散体或其混合物中携带。

乳化剂可选自非离子乳化剂、阴离子乳化剂、阳离子乳化剂、两性离子乳化剂、两性乳化剂或其混合物。乳化剂在本领域中是已知的。参见例如，McCutcheon's,Detergentsand Emulsifiers,North American Edition(1986)，由Allured Publishing Corporation出版。

当化妆品可接受的载体是硅氧烷包水乳液时，乳化剂优选选自聚氧化烯共聚物、聚甘油基共聚物或其混合物。聚氧化烯共聚物，也称为硅氧烷聚醚，在US 4,268,499中有详细描述。

在一些实施方案中，本文所述的化妆品组合物可通过已施用、浸渍或化学结合组合物的产品、装置或材料局部施用于皮肤。为此，绷带、膏药(例如粘合剂贴片)、纱布、手术胶带、棉签或其他吸收性材料(例如粉扑、羊毛或海绵或支撑基质)可以用本文所述的组合物涂覆、浸渍或化学结合。例如，可以使用本领域充分描述的皮肤贴剂将各种组合物施用于皮肤，例如US 2008/0038300、US 2009/0043236、WO2005/067499和WO 2009/085302，其通过引用并入本文。在一些实施方案中，包含如本文所述的组合物的材料可以是装置的形式，其可以是例如由待治疗的人穿着的装置。例如，如本文所述的组合物可以施加、浸渍或化学结合至形成尿布、手套、袜子等全部或部分的材料或支撑基质上。

化妆品组合物可以与给药说明一起包含在容器、包装或分配器中。

因此，本发明的另一方面包括提供用本文所述的组合物涂覆、浸渍或化学结合的产品、材料或装置。本发明还涉及用于本文所述用途的此类产品、材料或装置。优选地，所述产品是绷带、膏药(例如粘合剂贴片)、纱布、手术带或棉签或所述装置是尿布、手套或袜子。

如上所述，本发明的组合物用于改善哺乳动物皮肤的美容外观。

如本文所提及的，“化妆品”意指不治愈、治疗或预防疾病或病症，而是用作护肤产品或改变或改善皮肤外观，例如，皮肤的颜色、质地或水分含量。

本文所述治疗的基础是本文公开的组合物的皮肤抗衰老和角质形成细胞增强作用。这些效果已在本文提供的实施例中显示。

因此，考虑了基于本文所述组合物的抗衰老和角质形成细胞增强作用的治疗。

因此，本发明提供了改善哺乳动物皮肤的外观的美容方法，其中将如上所述的化妆品组合物施用于所述动物。

在特别优选的实施方案中，皮肤是老化的皮肤。

“老化皮肤”是指表现出一种或多种衰老迹象或症状的皮肤，即皱纹、细纹、色素沉着、松弛(下垂)、皮肤干燥、粗糙度增加或经皮水分流失(TEWL)的外观。特别地，相对于正常的最佳皮肤，即健康的、水合的、正常着色的和未老化的皮肤，确定“老化皮肤”。在这方面，老化皮肤不需要与受试者的年龄相关并且可能过早地老化，例如，长期暴露在阳光下(光损伤)。然而，显而易见的是，经历长期暴露于阳光下需要受试者始终如一地暴露于阳光下，例如，每天，持续数年。因此，本文提到的老化皮肤是指成年人的皮肤，通常是至少约25岁的成年人，例如至少约30年、35年或40年。

因此，对于“正常最佳皮肤”的参数可以被确定为来自与所述受试者相同或相似年龄的多个受试者(例如，没有长期暴露在阳光下的受试者)的上述衰老迹象的平均测量值。或者，对于“正常最佳皮肤”的参数可以确定为来自比所述受试者年轻的受试者的测量值。换句话说，如本文所述的组合物可用于相对于较小年龄的受试者的皮肤恢复皮肤的年轻外观。

因此，在一些实施方案中，该组合物用于改善随时间老化的皮肤的美容外观，即由于受试者年龄而具有一种或多种衰老迹象的皮肤，例如用于改善至少30、35、40或45岁的受试者皮肤的美容外观。

在一些实施方案中，所述组合物用于改善光老化皮肤的美容外观，即由于长期暴露于阳光下而具有一种或多种衰老迹象的皮肤的美容外观，例如用于改善长期暴露在阳光下至少5年的受试者的皮肤美容外观。因此，在一些实施方案中，具有光老化皮肤的受试者小于50岁，例如，不到45岁、40岁或35岁。

在一些实施方案中，改善皮肤的美容外观(例如，随时间老化或光老化的皮肤)涉及减少或预防皱纹、细纹、色素沉着过度、松弛、皮肤干燥、下垂(松弛)、皮肤粗糙和/或经表皮水分流失的美容外观或发生。可以改进这些参数中的一个或多个。优选减少细纹和/或皱纹。因此，或者，改善皮肤的美容外观(例如随时间老化或光老化的皮肤)可能涉及皮肤水合作用、光滑度、紧致度和/或光泽/光感的增加。

减少或预防皮肤的例如老化特征或症状的美容外观或发生，可能意味着特征或症状的数量和/或严重程度降低。例如，细纹和皱纹的数量和/或尺寸可以减少，例如，可以减小或最小化皱纹或细纹的深度，即体积。此外，减少或预防可能涉及停止或降低新特征或症状出现的速度。

如本文所提及的“干性皮肤”是指缺乏水分或皮脂的表皮，其特征通常在于细纹、鳞屑和瘙痒和/或灼热感。在一些实施方案中，干性皮肤是指其中角质层具有小于约10％的水含量的皮肤，例如，小于约9％、8％、7％、6％或5％。

在这方面，通过上述组合物的保湿效果可以实现干燥皮肤、皮肤粗糙(鳞屑)、细纹或经皮水分流失的减少。

因此，可以看出本发明提供了一种保湿哺乳动物皮肤的美容方法，其中将如本文所定义的化妆品组合物给予所述动物。或者，可以看出，本发明提供了一种将哺乳动物角质层的水含量从小于约10％增加至约10-30％的化妆方法，其中将如本文所定义的化妆品组合物施用于所述动物。

另外说明的是，本发明提供如本文所述的化妆品组合物，其用于保湿哺乳动物的皮肤，即用于将哺乳动物的角质层的水含量从小于约10％增加至约10-30％的范围。(该化合物或组合物可以替代地用于制备用于该目的的化妆品药物。)

如本文所提及的“保湿”包括防止皮肤失水(例如，TEWL)的保湿剂以及当施用于皮肤时吸引并保留水分的保湿剂(水分保持剂)，以及润肤剂(改善缺陷脱屑)。

如上所述，这种保湿性能有利于改善皮肤的美容外观。在特别优选的实施方案中，皮肤是面部、耳朵、颈部、手或头皮的皮肤，优选面部、颈部和/或耳朵的皮肤。

“皱纹”是皮肤上的皱褶、隆起或皱纹。皮肤皱纹通常表现为衰老过程的结果。在这方面，真皮包括许多皮肤结构元素，其包括赋予皮肤强度的胶原蛋白、赋予皮肤膨胀的糖胺聚糖、以及赋予皮肤弹性或弹性的弹性蛋白纤维。

随着皮肤老化，真皮层变薄，皮肤也会产生较少的胶原蛋白。而且，提供弹性的弹性蛋白纤维会耗尽。皮肤支架的这些变化导致皮肤皱纹和下垂。真皮-表皮连接处的切口变平，使皮肤更脆弱，使皮肤更容易剪切。该过程还通过减少与真皮接触的表面积来减少表皮可利用的营养物的量，还干扰皮肤的正常修复过程。

在皮下层，随着年龄增长脂肪细胞变小。这导致更明显的皱纹、松弛(下垂)和皮肤紧致度和光滑度的损失，因为脂肪细胞不能“填充”来自其他层的损伤。

暴露于UVA和UVB辐射(即阳光)导致胶原蛋白的分解速率以比仅随时间老化的更高。阳光会破坏胶原纤维并导致异常弹性蛋白的积聚。据认为，来自太阳光的UV照射导致过量产生活性氧物质的氧化应激，这导致细胞凋亡和胶原蛋白的分解。当太阳诱导的弹性蛋白积聚时，基质金属蛋白酶(MMP)大量产生。通常，金属蛋白酶通过制造和重整胶原蛋白来重塑受太阳伤的皮肤。然而，这个过程并不总是有效，一些金属蛋白酶实际上会分解胶原蛋白。这导致形成被称为太阳疤痕(solar scar)的无组织胶原纤维。重复这种不完美的重建/再生过程会导致皱纹发展和皮肤松弛。

然而，如上所述，已经显示本文所述的组合物可减少与暴露于UV辐射相关的氧化损伤。据认为，除了在暴露于UV后清除自由基的能力之外，本发明组合物中的多酚化合物还可提供UV散射和UV吸收性质。因此，本发明的组合物有利于减少或预防皱纹和皮肤松弛的形成。

在另一个优选的方面，本发明的组合物还可以减少皮肤色素沉着过度(例如黑斑)的出现。

色素沉着过度可能由于年龄的原因而发生，或者可能由于早老化(例如光老化引起的)而导致。改变的色素沉着可能是由于局部过量的黑素细胞或黑素细胞活性增加，或两者兼而有之。色素沉着症包括肝脏、太阳或老年斑(太阳穴)、黄褐斑和其他瑕疵，如雀斑。

如本文所述，“改善”皮肤的美容外观是相对于正常的最佳皮肤确定的。因此，在光老化皮肤的情况下，正常的最佳皮肤可以是未经历长期暴露于阳光下的相似年龄的受试者的健康的、水合的、正常着色的皮肤。在随时间老化的皮肤的情况下，正常的最佳皮肤可以是较年轻(成人)受试者(例如至少比受治疗的受试者年轻5岁，例如至少年轻10岁)的健康的、水合的、正常色素沉着的皮肤。因此，可以测量一种或多种衰老的特征或症状，并将其与相对于待治疗的受试者的正常最佳皮肤的相同特征进行比较。优选地，改善是衰老的一种或多种特征或症状的减少。

如本文所用，“治疗”是指相对于如上所述的皮肤不患有症状或病症并且不经受所述治疗的个体或在未经受所述治疗的相应“正常”个体的不同身体部位上存在的症状或效果，所述美容症状或病症(例如，皮肤干燥、细纹、皱纹、皮肤粗糙、色素沉着程度或面积等)的一种或多种美容症状或效果的减少、减轻或消除，优选降至正常水平。

“预防”或“减少”是指绝对预防、或减少或缓解该症状或效果发作的程度或时间(例如延迟)。例如，通过在出现这种病症之前定期施用本文所述的组合物，可以防止以干燥、异常着色、皱纹或粗糙皮肤为代表的病症。

优选地，使用本文所述的组合物实现所述治疗。

本发明组合物中其它活性成分的浓度取决于给药方式、治疗过程、受试者的年龄和体重、化妆品适应症、待治疗的身体或身体区域，并且可以改变或调整根据选择。然而，通常，本文描述的另外的活性成分的浓度范围是0.0001、0.0005、0.001或0.01至50％，例如0.0005至40％，例如0.01至25％，例如0.1或0.5至5，例如1-5％(w/w或v/v用于给药的最终制剂，特别是用于局部给药)。

本发明组合物的有效单剂量可以在约1-20×10^-5ml/cm²/天的范围内，例如2-15×10^-5ml/cm²/天，3-10×10^-5ml/cm²/天，例如约5×10^-5ml/cm²/天。因此，就桦褐孔菌提取物即活性成分的量而言，有效单一的量可以在约2×10^-4-10×10^-3ml/cm²/天的范围内，例如约3×10^-4-9×10^-3ml/cm²/天、4×10^-4-8×10^-3ml/cm²/天、5×10^-4-7×10^-3ml/cm²/天、6×10^-4-6×10^-3ml/cm²/天、7×10^-4-5×10^-3ml/cm²/天、8×10^-4-4×10^-3ml/cm²/天、9×10^-4-3×10^{- 3}ml/cm²/天、例如约1-2×10^-3ml/cm²/天，当局部施用时，取决于所治疗的哺乳动物，作为单剂量。

可以应用或施用组合物的动物(即受试者)限于哺乳动物。优选地，哺乳动物是灵长类动物、家畜、牲畜和实验动物。因此，优选的哺乳动物包括小鼠、大鼠、兔、豚鼠、猫、狗、猴、猪、牛、山羊、绵羊和马。特别优选将组合物应用或施用于人。

附图说明

以下实施例仅作为说明给出，其中所提及的附图如下：

图1显示了条形图，其显示了桦褐孔菌提取物溶液相对于众所周知的抗氧化剂木犀草素和槲皮素的抗氧化活性。L＝木犀草素；Q＝槲皮素；数量＝在测试溶液中每毫升的桦褐孔菌提取物的μg；-＝没有二氯荧光素探针；并且+＝没有测试剂，即二氯荧光黄(dichlorofluorescin)至二氯荧光素(Dichlorofluorescein)的完全氧化。

图2显示了条形图，其显示了在用测试化合物处理并反复暴露于UV辐射后的若干天内的皮肤厚度(mm)。对于每个时间点，从左到右的四个条形柱分别是：阴性对照(即不暴露于UV或测试化合物)；阳性对照(暴露于紫外线但不含试验化合物)；视黄醇(暴露于紫外线并用高浓度视黄醇组合物处理)；和桦褐孔菌提取物(暴露于UV并用包含5mg/ml桦褐孔菌提取物的组合物处理)。

图3显示(A)显示用本发明组合物(IVA)处理后相对于对照的表皮体积的变化的条形图。(B)处理前(第0天-基线)和用本发明组合物(IVA)和对照处理后的皮肤切片的显微照片。

图4显示了条形图，其显示了使用本发明的组合物在10天治疗方案后对30名受试者进行的自我评估调查的结果。

具体实施方式

实施例

实施例1-桦褐孔菌提取物的抗氧化作用

根据Wolfe和Liu(J.Agric.Food Chem.,2007,55(22),pp 8896–8907)进行用于定量桦褐孔菌提取物的抗氧化活性的细胞抗氧化活性(CAA)测定。二氯荧光素是一种探针，可能被捕获在细胞内，很容易被氧化成荧光二氯荧光素(DCF)。该方法测量在人肝癌HepG2细胞中化合物通过2,2'-偶氮双(2-脒基丙烷)二盐酸盐(ABAP)产生的过氧自由基阻止DCF形成的能力。与对照细胞相比，细胞荧光的减少表明测试化合物的抗氧化能力。使用CAA测定评估各种浓度的桦褐孔菌提取物的抗氧化活性，并且表达了相对于槲皮素和木犀草素的抗氧化能力结果。

如本文所述，使用热水提取方法制备桦褐孔菌提取物粉末。桦褐孔菌提取物粉末含有25±5％(w/w)的β-葡聚糖和5±1％(w/w)的多酚。将桦褐孔菌提取物粉末溶解在水中以提供浓度为1μg/ml、0.5μg/ml和0.25μg/ml的溶液，使用上述测定法评估。

图1显示所有的桦褐孔菌提取物溶液都显示出抗氧化活性，其中含有至少浓度为0.5μg/ml的溶液是特别有效的。值得注意的是，条形图表明含有1μg/ml的桦褐孔菌提取物溶液能够在60分钟内将氧化损伤降低80％。

实施例2-包含桦褐孔菌提取物的化妆品组合物在暴露于紫外线辐射后对皮肤厚 度和皱纹形成的影响

使用3-D体外皮肤模型(Epistem Ltd)评估含有桦褐孔菌提取物的化妆品组合物相对于视黄醇的效果。本质上，使用新鲜分离的人角质形成细胞和成纤维细胞产生皮肤模型，其随后在气-液界面的胶原凝胶内培养长达10天。可以通过培养基局部地和系统地递送测试剂。

在pH 6.0-7.0的水基中制备含有5mg/ml的实施例1中所述的桦褐孔菌提取物粉末的化妆品组合物。将各种测试剂，即含有桦褐孔菌提取物的化妆品组合物或包含高浓度视黄醇的组合物局部施用于经反复暴露于UV辐射的体外皮肤模型。相对于未与任何组合物接触并且没有暴露于UV辐射(阴性)或完全暴露于UV辐射(阳性)的体外皮肤样品，测量皮肤增厚和皱纹形成。

图2表明，含有5mg/ml桦褐孔菌提取物的化妆品组合物可有效减少因暴露于UV辐射而引起的皮肤增厚和皱纹形成。事实上，包含桦褐孔菌提取物的组合物能够几乎完全抑制UV诱导的皮肤增厚和皱纹形成。值得注意的是，包含桦褐孔菌提取物的组合物比含有高浓度视黄醇的组合物更有效。

实施例3-包含桦褐孔菌提取物的化妆品组合物对表皮体积和光滑度的影响

实施例2中描述的体外皮肤模型用于评估本发明的化妆品组合物对表皮体积和光滑度的影响。

在pH 6.0-7.0的水基中制备含有5mg/ml的实施例1中所述的桦褐孔菌提取物粉末的化妆品组合物，并局部施用于皮肤模型。

图3A表明，相对于对照处理，本发明的化妆品组合物在一周后导致表皮体积显著增加(超过50％)。图3B显示，由于改善的表皮性能，皮肤表面也显示出明显更光滑的外观和均匀的皮肤细胞分布。

实施例4-含有桦褐孔菌提取物的组合物的美容效果的自我评估调查

在pH 6.0-7.0的水基中制备含有5mg/ml的实施例1中所述的桦褐孔菌提取物粉末的化妆品组合物，并提供给30个年龄在31-62岁之间的个体用于测试。要求受试者在开始测试前12小时不使用任何护肤产品，并且要求在测试期间避免非常(extraordinary)活动(例如非常压力、非常紫外线照射、侵入性皮肤治疗)。治疗方案如下：

1.清洁皮肤；

2.将组合物涂抹于面部，让其吸收两分钟；

3.除组合物外，还应用普通护肤品；

4.每天两次(早晚)重复步骤1-3。

要求受试者在启动方案后10天完成调查问卷。使用10天后的自我评估结果如图4所示，总结如下：

·97％改善了皮肤纹理

·100％改善了光泽/光感

·97％减少了细纹和皱纹

·97％改善了皮肤水合作用

·87％改善了色素沉着/黑斑

·93％改善了皮肤粗糙度

·97％改善了皮肤紧致度

所有受试者均完成治疗方案和自我评估，并且受试者显示出任何不良反应。

Claims (24)

1.一种化妆品组合物，包含：

(i)浓度为至少约2.5mg/ml的桦褐孔菌(Inonotus obliquus)提取物；和

(ii)一种或多种生理学上或药学上可接受的赋形剂和/或稀释剂，

其中所述桦褐孔菌提取物包含至少约1％(w/w)的β-葡聚糖和/或至少约0.10％(w/w)的多酚。

2.根据权利要求1所述的化妆品组合物，其中所述组合物不含植物和/或其他真菌的提取物。

3.根据权利要求1或2所述的化妆品组合物，其中，所述桦褐孔菌提取物不是发酵的桦褐孔菌提取物或其提取物。

4.根据权利要求1至3中任一项所述的化妆品组合物，其中所述桦褐孔菌提取物具有每100g至少约45000μmol Trolox当量(TE)的氧自由基吸收能力(ORAC)。

5.根据权利要求1至4中任一项所述的化妆品组合物，其中所述桦褐孔菌提取物通过包括以下步骤的方法获得或可获得：

1)提供桦褐孔菌菌菇干物质；

2)使水与步骤1)的所述桦褐孔菌菌菇干物质接触，并将所得悬浮液温育至少约1小时；

3)从步骤2)获得的所述悬浮液中除去固体(不溶物)，以得到桦褐孔菌提取物溶液；

4)任选地对来自步骤3)的所述桦褐孔菌提取物溶液进行灭菌；以及

5)从步骤3)或4)的所述桦褐孔菌提取物溶液制备固体(例如干粉)。

6.根据权利要求5所述的化妆品组合物，其中添加步骤2)中的所述水达到约1-20％的干物质含量。

7.根据权利要求5或6所述的化妆品组合物，其中温育所述悬浮液的所述步骤在超过约60℃的温度下进行。

8.根据权利要求5至7中任一项所述的化妆品组合物，其中步骤2)中的提取过程在高压下进行。

9.根据权利要求5至8所述的化妆品组合物，其中从所述桦褐孔菌提取物溶液制备固体(例如干粉)的所述步骤包括喷雾干燥所述溶液。

10.根据权利要求1至9中任一项所述的化妆品组合物，其中所述组合物包含一种或多种维生素。

11.根据权利要求10所述的化妆品组合物，其中所述一种或多种维生素是维生素C或其衍生物、维生素E或其衍生物和/或维生素B5或其衍生物。

12.根据权利要求1至11中任一项所述的化妆品组合物，其中所述组合物包含辅酶Q10。

13.一种用于改善哺乳动物皮肤的美容外观的方法，其中将根据权利要求1至12中任一项所限定的化妆品组合物施用于所述动物。

14.根据权利要求13所述的方法，其中所述皮肤是随时间老化的皮肤。

15.根据权利要求13所述的方法，其中所述皮肤是光老化的皮肤。

16.根据权利要求13至15中任一项所述的方法，其中所述改善包括在所述美容外观中减少或预防皱纹、细纹、色素沉着过度、松弛(下垂)、皮肤粗糙、皮肤干燥和/或经表皮水分流失的发生。

17.根据权利要求13至15中任一项所述的方法，其中所述改善包括增加皮肤水合作用、紧致度、光滑度和/或光泽度。

18.根据权利要求13至17中任一项的方法，其中所述动物的皮肤是湿润的。

19.根据权利要求13至18中任一项的方法，其中将所述化妆品组合物局部施用于所述皮肤。

20.根据权利要求1至12中任一项所述的化妆品组合物，其用于改善哺乳动物皮肤的美容外观，优选其中所述皮肤根据权利要求14或15所限定，美容外观的所述改善根据权利要求16至18中任一项所限定，和/或所述施用根据权利要求19所限定。

21.根据权利要求1至12中任一项所述的化妆品组合物在制备用于改善哺乳动物皮肤美容外观的药物中的用途，优选其中所述皮肤根据权利要求14或15所限定，美容外观的所述改善根据权利要求16至18中任一项所限定，和/或所述施用根据权利要求19所限定。

22.根据权利要求1至21中任一项所述的化妆品组合物、方法或用途，其中所述化妆品组合物被涂覆、浸渍或化学结合到产品、材料或装置上。

23.通过根据权利要求5至9中任一项所限定的方法获得的桦褐孔菌提取物固体(例如粉末)在制备化妆品组合物中的用途，所述化妆品组合物包含浓度为至少约2.5mg/ml的桦褐孔菌提取物和一种或多种生理学上或药学上可接受的赋形剂和/或稀释剂。

24.一种制备根据权利要求1至12中任一项所限定的化妆品组合物的方法，包括将通过根据权利要求5至9中任一项所限定的方法获得的桦褐孔菌提取物固体(例如粉末)添加至一种或多种生理学上或药学上可接受的赋形剂/或稀释剂中，其中所述桦褐孔菌提取物粉末以至少约2.5mg/ml的浓度存在。