CN110368347A - 一种抗衰修复双层双色精华素及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明一种抗衰修复双层双色精华素，由以下原料制得：环五聚二甲基硅氧烷/环己硅氧烷、聚二甲基硅氧烷、β‑胡萝卜素、霍霍巴籽油、山茶籽油、燕麦仁油、尿囊素、EDTA‑2NA、甘油、丙二醇、甜菜碱、氯化钠、对羟基苯乙酮、丙二醇、精氨酸、燕麦β‑葡聚糖、寡肽‑1、铁皮石斛茎提取物、甘油、棕榈酰三肽‑5、林兰润露、七重抗敏剂、1，2己二醇、PEG‑12甘油月桂酸酯、聚乙二醇‑400、水溶橘皮苷和去离子水。本发明抗衰修复双层双色精华素的燕麦β‑葡聚糖和SYN‑COLL在促进皮肤中胶原蛋白质的生成、修复肌肤深层皱纹、改善皮肤粗糙度、抑制皮肤过敏等方面均发挥着显著的功效。

Description

一种抗衰修复双层双色精华素及其制备方法

技术领域

本发明属于化妆品领域，具体涉及一种抗衰修复双层双色精华素及其制备方法。

背景技术

随着年龄的生长，我们的身体与组织器官都在不断衰弱。皮肤作为人体最大的器官，也在不断衰老，表现为细纹、皱纹、干燥、松弛、肤色黯淡和色斑等，多种皮肤问题。皮肤可以分为表皮，真皮和皮下组织。在表层和真皮之间，还有一层称之为表皮-真皮交界层的，简称为(DEJ)。

表皮层起到屏障与保护的作用，皮肤干燥与否与表皮层关系重大。真皮中的胶原蛋白和弹力蛋白对皮肤的弹性，饱满度起到了决定性的作用。而其中的透明质酸及其它粘多糖填充于真皮层中，真皮细胞中非常重要的是成纤维细胞，它负责细胞外基质的更新，也就是胶原蛋白，透明质酸这些都是由成纤维细胞生成的。皮肤中的皱纹的多少，各项物理指标(比如弹性)都由这一层决定。

DEJ层起到了链接表皮与真皮层的作用，让皮肤不那么容易松垮。每一层皮肤对于年轻态的皮肤都有着重要作用，都应该认真护理。如果涉及到完整的抗衰老过程，有一长串的项目需要考虑：

1.保湿

2.表皮屏障功能重建

3.抗细纹

4.抗皱纹

5.皮肤的弹性

6.皮肤的紧致

7.皮肤轮廓和体积

8.抗氧化

9.抗糖化

10.基质保护

11.毛孔

12.色斑

13.抗炎

14.…

以上每一步骤，是在随着衰老的过程中，皮肤会慢慢出现的一些问题，以及需要做的护肤针对方向。然而做好每一步，都不简单。如果进一步将这些抗衰修复的手段与方向综合起来，上升到更高层面来看，抗衰修复的护肤与技术实现途径，其实就是两方面，一方面是：抑制；另一方面是：促进。

一、抑制

随着机体的老化，环境的影响或是基因的原因，皮肤各层的细胞与组织结构将分解并变化，如果能抑制这些有害的变化，那么就可以起到抗衰修复作用。同时，如果能抑制一些有害的外部来内部有影响因素，也将有助于抗衰修复皮肤问题。

在抑制这一端，有很多东西需要被抑制，比如氧化，自由基，胶原蛋白酶，弹性蛋白酶，金属基质蛋白酶，纤溶酶，糖化等等…。

人体细胞不断遭受着自由基的攻击，而人体本身也能自然产生抵抗自由基的抗氧化物质，就是很多情况下不够用罢了。人体的抗氧化能力越强，身体越健康，皮肤也就越好。我们可以通过外用抗氧化剂来抵抗一部分自由基对皮肤的影响，比如我们熟悉的抗氧化成分，包括β-胡萝卜素，VC，VE，Q10等等。这也是各种化妆品产品中广泛添加的成分。

二、促进

老化的细胞的更新速度会变慢，生成胶原蛋白和透明质酸的速度都会降低。

那么，如果能够促进这些老化细胞的工作，使更新速度加快，那么就可以起到抗衰修复的作用了。比如促进细胞信号的交流，以便让细胞更积极地工作，促进胶原蛋白和弹性蛋白的生成，促进皮肤微循环等等。与促进相关的成分，包括棕榈酰三肽-5，A醇，肌肽等等都是“促进”的好手。

无论是抑制还是促进，想把其中的任何一个步骤做好都是要花心思且长期坚持的，绝非一蹴而就。促进这一方面，要促进胶原蛋白的生成，甚至产生紧致的功效。

所以，除了护肤，还有环境因素，基因因素都会影响衰老的进程。具体来说，饮食，运动，环境污染，心情等，每一个因素都会干扰皮肤的抗老战争，影响最终的皮肤状态。

本项发明涉及一种抗衰修复双层双色精华素及其制备方法，对皮肤有抗衰修复作用，临床测试发现确有很好的效果。

发明内容

为实现上述目的，本发明一种抗衰修复双层双色精华素，由以下原料制得：环五聚二甲基硅氧烷/环己硅氧烷、聚二甲基硅氧烷、β-胡萝卜素、霍霍巴籽油、山茶籽油、燕麦仁油、尿囊素、EDTA-2NA、甘油、丙二醇、甜菜碱、氯化钠、对羟基苯乙酮、丙二醇、精氨酸、燕麦β-葡聚糖、寡肽-1、铁皮石斛茎提取物、甘油、棕榈酰三肽-5、林兰润露、CalmYang、1，2己二醇、PEG-12甘油月桂酸酯、聚乙二醇-400、水溶橘皮苷和去离子水。

优选地，抗衰修复双层双色精华素，其可分为A、B、C、D、E、F六种混合原料组成，将各混合原料分步骤相混合制备获得所述精华素：

其中，A原料中包含有：环五聚二甲基硅氧烷/环己硅氧烷、聚二甲基硅氧烷、β-胡萝卜素、霍霍巴籽油、山茶籽油、燕麦仁油；

B原料中包含有：尿囊素、EDTA-2NA、甘油、丙二醇、甜菜碱、氯化钠；

C原料中包含有：对羟基苯乙酮、丙二醇；

D原料中包含有：精氨酸；

E原料中包含有：燕麦β-葡聚糖、寡肽-1、铁皮石斛茎提取物、甘油、棕榈酰三肽-5、林兰润露、CalmYang、1，2己二醇、PEG-12甘油月桂酸酯、聚乙二醇-400；

F原料中包含有：水溶橘皮苷。

所述抗衰修复双层双色精华素，所述各原料的配比(质量百分比)为：

与现有技术相比，本发明抗衰修复双层双色精华素中采用若干种具有抗衰皮肤修复功效的组分按特定的比例分组混合，经过各种实验验证，本发明抗衰修复双层双色精华素的燕麦β-葡聚糖和SYN-COLL在促进皮肤中胶原蛋白质的生成、修复肌肤深层皱纹、改善皮肤粗糙度、抑制皮肤过敏等方面均发挥着显著的功效，比含酵母葡聚糖、透明质酸的保湿原液在抗衰修复皮肤具有突出功效，这是整个精华素的各种组分按特定比例分次混合制备获得的，相辅相成，SYN-COLL促进与燕麦β-葡聚糖相结合反应，也促进燕麦β-葡聚糖的功效发挥，方能获得最佳的修复皮肤的功效。

附图说明

图1为使用含燕麦葡聚糖的抗衰修复双层双色精华素与空白膏霜的皮肤粗糙度的比对效果图；

图2为使用含燕麦葡聚糖的抗衰修复双层双色精华素与含酵母葡聚糖、空白膏霜的皮肤弹性的比对效果图；

图3为使用含燕麦葡聚糖的抗衰修复双层双色精华素与含酵母葡聚糖、透明质酸的保湿效果的对比效果图；

图4为本发明抗衰修复双层双色精华素中胶原蛋白生成和防止降解的分子原理图；

图5为本发明抗衰修复双层双色精华素中SYN-COLL与燕麦β-葡聚糖相互结合激活燕麦β-葡聚糖的反应图；

图6为本发明抗衰修复双层双色精华素中SYN-COLL的化学结构图；

图7为本发明抗衰修复双层双色精华素中SYN-COLL体外功效中促进胶原蛋白的生成；

图8为本发明抗衰修复双层双色精华素中SYN-COLL体外功效压力状态下角化细胞中对胶原蛋白的保护示意图；

图9为本发明抗衰修复双层双色精华素中SYN-COLL与空白膏霜的体内功效在舒缓皱纹和减少皱纹深度的对比效果图；

图10为本发明抗衰修复双层双色精华素中SYN-COLL的体内功效在舒缓皱纹和减少皱纹深度的前后使用效果对比图；

图11为本发明抗衰修复双层双色精华素中SYN-COLL的体内功效在对抗和平滑皮肤的功效对比测试图；

图12为本发明抗衰修复双层双色精华素中SYN-COLL与棕榈酰三肽-5在体外功效上的对比测试图；

图13为本发明抗衰修复双层双色精华素中SYN-COLL在刺激透明质酸的合成检测图；

图14为本发明抗衰修复双层双色精华素中SYN-COLL在刺激年老纤维细胞中透明质酸的对比测试图；

图15为本发明抗衰修复双层双色精华素中SYN-COLL在抑制促炎细胞因子的功效原理图。

具体实施方式

本发明一种抗衰修复双层双色精华素，由以下原料制得：环五聚二甲基硅氧烷/环己硅氧烷、聚二甲基硅氧烷、β-胡萝卜素、霍霍巴籽油、山茶籽油、燕麦仁油、尿囊素、EDTA-2NA、甘油、丙二醇、甜菜碱、氯化钠、对羟基苯乙酮、丙二醇、精氨酸、燕麦β-葡聚糖、寡肽-1、铁皮石斛茎提取物、甘油、棕榈酰三肽-5、林兰润露、七重抗敏剂、1，2己二醇、PEG-12甘油月桂酸酯、聚乙二醇-400、水溶橘皮苷和去离子水。

优选地，抗衰修复双层双色精华素，其可分为A、B、C、D、E、F六种混合原料组成，将各混合原料分步骤相混合制备获得所述精华素：

其中，A原料中包含有：环五聚二甲基硅氧烷/环己硅氧烷、聚二甲基硅氧烷、β-胡萝卜素、霍霍巴籽油、山茶籽油、燕麦仁油；

B原料中包含有：尿囊素、EDTA-2NA、甘油、丙二醇、甜菜碱、氯化钠；

C原料中包含有：对羟基苯乙酮、丙二醇；

D原料中包含有：精氨酸；

E原料中包含有：燕麦β-葡聚糖、寡肽-1、铁皮石斛茎提取物、甘油、棕榈酰三肽-5、林兰润露、七重抗敏剂(CalmYang)、1，2己二醇、PEG-12甘油月桂酸酯、聚乙二醇-400；

F原料中包含有：水溶橘皮苷。

其中，七重抗敏剂包括：洋甘菊，甘草，积雪草，迷迭香，贝加尔黄芩，茶和日本虎杖。

所述抗衰修复双层双色精华素，所述各原料的配比(质量百分比)为：

优选地，所述抗衰修复双层双色精华素，所述各原料的配比(质量百分比)为：

以下具体说明组分组合A和E的功效：

组分A的功效说明：

1、β-胡萝卜素：β-胡萝卜素是从盐生杜氏藻中获取的天然产物，它又被称为维生素A源，其化学结构由4个异戊二烯双键首尾相连而成，属四萜类化合物，在分子的两端各有1个β-紫萝酮环，中心断裂可产生2个维生素A分子，而且在结构上有多个双键且双键之间共轭。这样的体系比较稳定，并且生色作用大为加强，共轭双键愈多，深色移动愈显著。

正是这种共轭双键的结构，使得β-胡萝卜素有如下的特点与作用：

1.1.盐生杜氏藻积累大量胡萝卜素,其细胞中胡萝卜素含量可达细胞干重的14％(质量分数)，因此，它已成为生产天然胡萝卜素的最好藻种。它不但是天然抗衰老剂，还有很好的清洗血液和血管的作用。因为它可让硬化的毛细血管恢复生机，恢复毛细血管的柔韧性。而既能保护完整的细胞，又能救治损坏细胞。

1.2.抗氧化作用。β-胡萝卜素能利用自身独特的化学结构特性来维护微粒体膜完整，而细胞微粒体膜完整性能防止氧自由基产生，并且稳定自由基多余的电子和清除自由基，延缓身体退化速度，防止肌肤衰老。

1.3具有生理活性的物质。在体内可转化成维生素A，可治疗上皮组织角化症，维持皮肤粘膜层的完整性，防止皮肤干燥、粗糙。促进皮肤生长发育，有效促进皮肤细胞健康发育。

组分E的功效说明：

以下分别具体说明组分E中几种核心组分：燕麦β-葡聚糖、寡肽-1和SYN-COLL(甘油、棕榈酰三肽-5、水)的功效机理。

1.燕麦β-葡聚糖：为天然非淀粉类水溶性植物糖，燕麦中的β-(1→3，1→4)葡聚糖简称燕麦β-葡聚糖，是存在于燕麦胚乳和糊粉层细胞壁的一种非淀粉多糖。它由单体β-D-吡喃葡萄糖，通过β-(1→3)和β-(1→4)糖苷键连接起来形成的一种高分子聚合物，是一种相对分子质量较小的短链葡聚糖，其相对分子质量的变化范围为5300-257200，燕麦β-葡聚糖其拥有优异的抗衰老功效，能够抚平细小皱纹，提高皮肤弹性，改善皮肤纹理度；具有独特的直链分子结构，赋予了良好的透皮吸收性能；促进成纤维细胞合成胶原蛋白，促进伤口愈合，修复受损肌肤，给予皮肤如丝绸般滋润光滑的触感。

燕麦β-葡聚糖是一种源自燕麦的纯天然多糖，采用现代化先进生物工程技术及独特的产品生产工艺加工而成，生产过程中不添加任何有机溶剂，保证产品绿色安全。燕麦β-葡聚糖具有非常出色的抗衰老特性，能够即时的收紧及软化细小皱纹，改善皮肤纹理度。燕麦β-葡聚糖独特的1,3与1,4直链分子结构，透皮吸收性能良好，可作为活性成份的释放载体。燕麦β-葡聚糖具有长期高效保湿性能，能赋予皮肤如丝绸般滋润光滑的触感。燕麦β-葡聚糖还能够显著提高皮肤的免疫功能，增强对皮肤保护，提高皮肤抵抗外界刺激的能力，促进伤口愈合，淡化疤痕颜色。

燕麦β-葡聚糖的性质

燕麦β-葡聚糖是一种多功能性的活性化妆品用添加剂，主要从燕麦麸皮中提取分离得到。燕麦β-葡聚糖，是一种由1,3位和1,4位糖苷键，即纤维三糖和纤维四糖连接的糖单体组成的多聚糖；β－葡聚糖中(l-3)糖苷键与(l-4)糖苷键含量之比约为3∶7。20世纪80年代后，Wood等人用专一性酶水解表明：在燕麦β-葡聚糖中β-(1-4)和β-(1-3)糖苷键在空间上呈链式单螺旋结构。其中，85％以上燕麦β-葡聚糖分子存在着每隔2～3个β-(1-4)糖苷键有一个β-(1-3)糖苷键，大量亲水基团均匀分布在葡聚糖主链上。产品融合了目前两个最主要的抗衰老和天然发展趋势。

燕麦β-葡聚糖的化妆品性质

1、优异的透皮吸收性能

燕麦β-葡聚糖中β-(1-4)和β-(1-3)糖苷键在空间上呈链式单螺旋结构，能够快速地穿透皮肤，消除皱纹。在《国际化妆品科学》(第27卷，第5期)研究人员发表了对燕麦β-葡聚糖透皮吸收的研究成果。实验将0.5％的β-葡聚糖加入示踪原子后，涂抹于志愿者的腹部皮肤上，用量为5mg/cm²。结果发现，燕麦β-葡聚糖能够快速通过细胞间脂质基质渗入皮肤深层。

与酵母β-葡聚糖比较，燕麦β-葡聚糖分子为直链分子结构。独特的空间结构使燕麦β-葡聚糖具有优异的透皮吸收性能，给与皮肤直接有效的营养补充，实验测试其化妆品功效约为酵母β-葡聚糖的两倍。燕麦β-葡聚糖能够快速促进免疫和促进成纤维细胞的生长，增强皮肤弹性，延缓皮肤衰老；并且燕麦β-葡聚糖能够促进成纤维细胞合成胶原蛋白，促进伤口愈合并减少疤痕，使干燥、变薄的皮肤显得显著改善。

2、抗衰老功能

2.1改善皮肤粗糙度

人体测试实验。

(1)实验仪器：皮肤粗糙度测试仪；(2)实验时间：8小时；(3)志愿者：10名，男女各半。(4)各膏霜所含有效成份量：①燕麦β-葡聚糖5％；②空白膏霜。

实验结果如下图所示。在连续使用8小时之后，可以明显改善皮肤的粗糙度，实验室测定，在同等使用条件下，燕麦β-葡聚糖可降低皮肤粗糙度约43.7％。参照图1所示，本发明含有燕麦β-葡聚糖的精华素在皮肤粗糙度的功效上比空白膏霜的功效改善明显，有显著提升。

2.2增加皮肤弹性

参照图1所示，人体测试实验中，皮肤粗糙度的对比效果示意图。

(1)实验仪器：皮肤弹性测试仪。

(2)实验时间:8小时。

(3)志愿者：10名，男女各半。

(4)各膏霜所含有效成份量：

①燕麦β-葡聚糖5％；

②酵母β-葡聚糖5％；

③空白膏霜。

实验结果如下图所示。从实验结果可以看出燕麦β-葡聚糖在提高皮肤弹性方面明显优于酵母β-葡聚糖。这主要是由于①燕麦β-葡聚糖的空间构象为直链单螺旋结构，而酵母β-葡聚糖的支链很多，阻碍了酵母β-葡聚糖的透皮吸收。②燕麦β-葡聚糖的分子量小于酵母β-葡聚糖，更容易渗透到皮肤深层，从而在增加皮肤弹性方面较酵母β-葡聚糖有很大优势。从图2采用本发明精华素与酵母葡聚糖、空白膏霜的皮肤弹性对比图，可明显看出本发明含有燕麦β-葡聚糖精华素对皮肤弹性的功效明显，比其他两种护肤品改善明显，有显著提升。

3.促进胶原蛋白合成，修复受损肌肤

3.1促进胶原蛋白的合成

动物测试实验：

实验采用1％燕麦β-葡聚糖；对照组为1％透明质酸。

将大鼠分为对照组和燕麦β-葡聚糖组，每组8只，用宠物推分别在实验动物大鼠的脊背部两侧脱毛,脱毛范围3cm×3cm。在背部两侧无毛区先用清水清洗，然后选取每只大鼠脊背两侧无毛区中间的皮肤，实验点约2cm×2cm,对照组除清水清洗外不做任何处理；燕麦β－葡聚糖组涂以等剂量的燕麦β－葡聚糖制剂，每日一次。涂药后7天取材，检测皮肤中胶原蛋白含量。

实验发现，燕麦β-葡聚糖组大鼠皮肤中胶原Ⅰ和胶原Ⅲ含量明显高于对照组，并且差异显著。证明燕麦β－葡聚糖能够促进多种胶原蛋白的合成，有效减缓皮肤松弛和老化，增强皮肤弹性，修复由于年龄的增长和环境的影响带来的对肌肤的损伤。

3.2提高皮肤的免疫机能

国际上许多著名的研究机构，包括哈佛大学医学院、图伦大学、华盛顿大学以及美国空军放射生物学研究所等都证实，β-葡聚糖具有显著提高免疫力的作用。

研究表明β-葡聚糖能提高巨噬细胞的吞噬能力，能加快确定人群的免疫细胞对细菌感染的反应，并控制住细菌感染的位置，使感染面尽快恢复。

研究人员将β－葡聚糖捆绑在人体自然免疫细胞中最丰富的免疫细胞嗜中性粒细胞的感受器上，结果β－葡聚糖增强了嗜中性粒细胞的杀伤能力，又促进了嗜中性粒细胞在血液蛋白质的作用下，朝感染位置移动，并在第一时间对外来感染作出迅速反应。

经过β－葡聚糖武装的嗜中性粒细胞，还增强了觉察感染位置的能力，并帮助嗜中性粒细胞找到细菌在感染组织中的主脉，能够对感染部位作出更快的反应，尽快清除细菌感染并使感染面康复。

3.3良好的皮肤修复功能

燕麦β-葡聚糖被FDA和欧盟批准用于伤口和烧伤治疗，并推出相关治疗产品。实验结果表明使用燕麦β-葡聚糖可迅速减少疼痛，并且伤口愈合速度快15％左右。

3.4.高效保湿效果

人体测试实验：

(1)实验仪器：皮肤水分测试仪。

(2)实验时间：4小时；

(3)志愿者：10名，男女各半；

(4)各膏霜所含有效成份量：①燕麦β-葡聚糖3％；

②透明质酸0.1％；

③酵母β-葡聚糖3％。

燕麦β-葡聚糖具有优异的保湿性能，其自身独特的成膜特性能够赋予皮肤光滑的外观。从实验结果可以明显看出燕麦β-葡聚糖的保湿效果优于透明质酸和酵母β-葡聚糖，并且燕麦β-葡聚糖的保湿性能接近于酵母β-葡聚糖的两倍。这可能是由于燕麦β-葡聚糖分子自身所含大量亲水基团外露，而酵母β-葡聚糖的亲水基团内敛造成的。

参照图3所示，将含有燕麦葡聚糖、酵母葡聚糖、透明质酸三种不同组分的精华素的保湿效果对比，保湿效果及皮肤水分的效果，含燕麦β-葡聚糖的精华素优于含酵母β-葡聚糖的精华素，含酵母β-葡聚糖的精华素优于含透明质酸的精华素。

3.5.控制释放性能

燕麦中的β-葡聚糖可以形成纳米结构，使化妆品中活性成分缓慢释放，纳米小分子结构使得更容易渗透皮肤真皮层，锁住水分，保湿效果尤佳。

2.寡肽－1：促进皮肤细胞生长、胶原蛋白再生，修复损伤性肌肤表面；增强皮肤抵抗力，改善肤质，调理皮肤敏感、刺激、过敏、发红、瘙痒症状；提高皮肤细胞活力，促进细胞新陈代谢，加速表层色斑代谢、提亮肤色、使皮肤透亮光泽；促进皮肤细胞分泌胶原蛋白，提高皮肤弹性、令肌肤紧致光滑、淡化细纹干纹；促进皮肤细胞分泌透明质酸，提高皮肤锁水能力，令肌肤水嫩柔润。

2.1寡肽－1的简介

寡肽-1是一个三肽分子，序列是GHK。它自然存在于人的血液、唾液和尿液当中。20岁的时候GHK在血液当中的浓度是200ng/mL(10-7M)，到了60岁的时候浓度降到80ng/mL。这种下降现象是与人的器官再生能力显著下降直接相关的。1973年Dr.LorenPickart首先分离到了GHK-Cu，它是在研究对老化组织和年轻组织同样起作用的活性物质中发现的三肽物质，接下来的研究证明这种三肽的序列是甘氨酸-组氨酸-赖氨酸，并且与铜离子有很强的亲和力，形成GHK-Cu复合物。研究证明GHK是以与铜离子形成复合物的形式发挥功能。

GHK最大的特点是与Cu离子形成复合物，这是非常重要的，因为人体内和皮肤上有很多重要的酶需要Cu离子，这些酶在结缔组织形成、抗氧化防御、细胞呼吸中发挥作用。Cu离子同时也发挥信号功能，能够影响细胞的行为和代谢。例如足够多的Cu离子是干细胞增殖和组织修复的信号。GHK也帮助降低自由态的Cu离子浓度，防止氧化损伤。除了与Cu离子结合，GHK也可以中和毒素，尤其是那些在脂质过氧化过程中产生的毒素，GHK是一种非常高效的抗氧化剂。最后GHK能作为细胞粘附分子，能帮助细胞粘附到细胞外基质中，帮助细胞迁移、增殖、分化、修复皮肤细胞。

2.1.1.GHK与皮肤干细胞再生

皮肤再生依赖于皮肤干细胞的生存能力和增殖能力。皮肤增生始于基底部附着在基底膜上的角化细胞。当细胞离开基底膜就开始进行终端分化。干细胞有无限的自我更新能力，然而他们的增殖潜力随着年龄的增长逐年下降。GHK-Cu在0.1-10micromolar的浓度可以提高表皮干细胞中的标记物例如整合素和基底层角化细胞中的标志物p63的表达，根据作者的表述，这些分子是基底层角化细胞干细胞活性提高的标志。因此整合素和p63或许是GHK调节皮肤再生的相关靶点。近期的研究已经证实，人的干细胞用GHK凝胶预处理可以提高促血管生成因子的比如VEGF、bFGF等的分泌，并且是剂量依赖模式。当干细胞用抗整合素抗体处理时，以上情况不再发生，暗示GHK在干细胞上的作用是通过整合素信号途径发生的。

GHK和IL-6在皮肤修复中的作用

伤口愈合和皮肤再生包括抗炎反应、细胞增殖、细胞迁移和基质重塑等。过度的炎症反应会延迟伤口的愈合并导致疤痕的形成。在正常人的牙成纤维细胞中，铜肽复合物GGH、GHK等可以减少TNF-alpha诱导的IL-6的分泌。而其他的铜复合物无此作用。研究者推断GHK和GHK-Cu可以作为替代糖皮质激素的抗炎剂使用。

2.1.2.GHK与DNA损伤修复

GHK能够恢复受辐射的成纤维细胞的活力。研究者用来自暴露于辐射环境(5000rad)的颈部成纤维细胞，把GHK(10-9M)加入到无血清培养基中。对照组不加GHK。在对照组中尽管细胞可以存活并且繁殖，但它们的生长曲线与正常细胞完全不同。受辐射细胞在24h和48h的检测中与正常细胞相比生长延迟。而用GHK处理的辐射细胞生长得更快(表现与正常细胞相似)。此外GHK处理过的细胞产生了更多的生长因子，这些因子对于伤口愈合非常重要。成纤维细胞是伤口愈合和组织再生的主要细胞。它们不仅合成细胞外基质的各种成分，也产生大量的生长因子(这些因子调节细胞的迁移和增殖、血管生成、上皮化等等)。辐射损伤细胞的DNA，进而损伤细胞功能。既然GHK可以恢复受辐射细胞的功能，我们有理由相信GHK有修复受损DNA的能力。采用布罗德研究所开发的软件基因分析工具：基因连通图研究GHK发现：GHK可以提高与DNA损伤修复行管的47个基因的表达并下调5个基因的表达。

2.1.3.GHK:一种天然的真皮修复调节剂

皮肤中伤口的愈合经历了以下阶段：止血、炎症反应、造粒、疤痕重建。每个阶段都需要协调细胞相互作用，因此不同来源的大量的生物活性分子作为协调员来引导细胞完成整个过程。例如受伤后立即脱粒，血小板释放生长因子调动免疫细胞到受伤的位置。角化细胞和成纤维细胞也会产生大量的细胞因子，中性粒细胞、巨噬细胞和其他被征召到受伤部位的免疫细胞生产相应的细胞因子。GHK是人类蛋白质中罕见的序列；然而，它在细胞外基质的蛋白质中更为常见(ECM)。GHK是一型胶原2链中的组成部分，受伤时蛋白酶分解胶原将GHK释放到伤口部分。另外一个含有GHK的非常有名的糖蛋白是SPARC，它在受伤后分解生成GHK-Cu。蛋白质水解或者说细胞外基质水解后释放了一系列重要的调控分子，称为细胞外基质活化素。这些分子激活或者调控真皮修复过程。既然GHK作为受伤后在细胞外基质中存在的多肽序列，那么可以认为它是一种天然的真皮修复剂。

通过以上对寡肽-1的功效机理的详细阐述，说明了寡肽-1应用于精华素中，与其他原料相混合，具有突出的皮肤修复和锁水功效等显著功效，促进精华素的皮肤修复保湿功效发挥。

3.SYN-COLL(甘油、棕榈酰三肽-5、水):(参考文献：皮肤药用和化妆品用的活性寡肽专利号CN 1582302A)

本发明(CN1582302A)涉及药用、皮肤药用和化妆品用活性寡肽及其衍生物、肽类似物及其衍生物及其在皮肤药用和化妆品用活性组合物中的应用。

己知皮肤衰老的基本机制发生在细胞外基质，即位于上皮细胞和结缔组织之间交叉点的所谓的基础薄层中。细胞外基质的再生是非常重要的，因为这将显著影响与其接触的细胞的行为，特别是那些细胞的生长、迁移、增殖、形态和功能。在细胞外基质中的成纤维细胞合成的胶原与衰老相关性减少，结果导致由这些细胞所分泌的化学物质的量减少。由于皮肤蛋白含有约80％的胶原，在组织中胶原浓度少量的自然减少会对皮肤的物理和生理特性产生明显的影响。

Katayama等人(TheJournalofBiologicalChemistry，第268卷，第14期，9941-9944页，1993)发现刺激胶原和纤连蛋白的最低亚片段序列由五肽Lys-Thr-Thr-Lys-Ser表示。四个或更少氨基酸的序列具有更轻微的刺激效果或者不具有刺激效果。

欧洲专利申请WO00/15188描述了棕搁酰化的五肽，棕榈酰-Lys-Thr-Thr-Lys-Ser作为治疗皮肤衰老、加速伤口愈合和增加皮肤水分的成分的效果。

已经发现经选择的新寡肽及其衍生物以及肽类似物及其衍生物(下文称作“本发明(CN1582302A)的化合物”)具有特别高的药用和/或化妆品用效果，因此特别适合用于皮肤药用和/或化妆品用有效的组合物。本发明(CN1582302A)的化合物扩散迅速，并以足够的浓度通过细胞膜到达细胞内的作用位点，在此他们能显著提高胶原和纤连蛋白的童。因此，本发明(CN1582302A)的化合物对细胞外基质施加了令人惊奇的积极的和刺激性效果，而细胞外基质对皮肤的物理和生理外观具有决定性的影响，尤其是，与现有技术已知的其他化合物相比.本发明(CN1582302A)的化合物诱导对胶原的合成更快速和更强烈的刺激。所述本发明(CN1582302A)化合物对胶原合成更快速和更强烈的刺激可能是通过分子量减少、氨基酸中N-甲基基团的引入以及用例如脂肪酸酯对氨基酸的修饰所获得的协同作用的结果。但是，本发明(CN1582302A)不受此种解释的限制。

而且，本发明(CN1582302A)还涉及本发明化合物用于制备促进伤口愈合和刺激皮肤保湿药物的应用，以及延缓或治疗皮肤衰老，特别是皱纹的形成的方法，所述方法包括在皮肤上施用本发明的化合物和/或本发明的组合物。

SYN-COLL(甘油、棕榈酰三肽-5、水)机理及相关测试。图4-15为针对SYN-COLL在本发明抗衰修复双层双色精华素中各方面的性能测试，采样与含有透明质酸的精华素进行参考比对，通过一系列的实验对比测试，从功效机理、分子结构、皮肤修复及保湿功效测试等方面，说明了本发明抗衰修复双层双色精华素中采用SYN-COLL在精华素中，与其他组分按特定比例混合，与燕麦β-葡聚糖相互结合激活燕麦β-葡聚糖提升效果明显，在体外功效中，促进胶原蛋白的生成和功效发挥，在压力状态下角化细胞中对胶原蛋白的保护。在使用后的体内功效对比上，将含有SYN-COLL的抗衰修复双层双色精华素与空白膏霜对比，含有SYN-COLL的抗衰修复双层双色精华素在舒缓皱纹和减少皱纹深度、在对抗和平滑皮肤改善明显，可以从使用效果图上看到抗皱效果的突破。另外，SYN-COLL还可以刺激透明质酸以及年老纤维细胞中透明质酸和抑制促炎细胞因子发挥作用。

参照图1所示,促进胶原蛋白生成，防止胶原蛋白降解的示意图。

参照图5所示,图5是SYN-COLL刺激TGF-8的过程示意图：失活的TGF-8和(LAP)潜在性相关蛋白)在SYN-COLL或者血小板反应蛋白(TSP)的反应作用下，会刺激TGF-8中的纤维细胞中胶原蛋白的合成，从而实现激活TGF-8的功能，另外，TSP和LAP-TGF-β相结合可以激活TGF-β，SYN-COLL可以以类似的途径结合，其功效相同。

参照图6所示是SYN-COLL的及棕搁酰三肽-5化学结构示意图，其中，SYN-COLL的氨基酸部分，其序列：

棕榈-赖氨酸-缬氨酸-赖氨酸-羧基，另外，最佳渗透可以选择三肽小分子和棕搁酰基团反应；

参照图7所示是SYN-COLL体外功效增加胶原蛋白I合成的示意图，SYN-COLL刺激胶原蛋白I合成的测试是在培养的人成纤维细胞上完成的，SYN-COLL以剂量依赖性途径有效的诱导胶原蛋白的合成。

参照图8所示,SYN-COLL的体外功效，在压力状态下角化细胞中胶原蛋白的保护，在化学诱导(PMA)应激(24小时)后，正常人类角化细胞(NHK)中细胞因子和MMP的表达，与无应激细胞相比，荧光强度成倍增加(＝1.00)，经SYN-COLL处理的细胞未表现出胶原蛋白降解酶和细胞因子的应激相关形成(成倍增加小于1)参照图9所示,SYN-COLL的体内功效，具有抗邹和平滑的功效，从图中可知SYN-COLL具有舒缓平滑和减少皱纹深度的功效；

参照图10所示是SYN-COLL抗邹和平滑的显示功效，其中SYN-COLL的用量是：2.5％，由图可知：SYN-COLL能够明显的减少皱纹

参照图11所示是SYN-COLL的体内功效对抗和平滑皱纹的例子，由图可知，深层皱纹在三个月内明显减少：整个皮肤外观得到改善，由3D皮肤成像可知，皮肤的纹理使用Primos技术用不同颜色表示，其中，SYN-COLL用量为2.5％。

参照图12所示是SYN-COLL和棕搁酰五肽-3的体外功效比较示意图，将SYN-COLL(棕搁酰三肽-5；25ppm)与商业化的竞争产品对比，(棕搁酰五肽-3；10ppm)在这个测试中棕搁酰五肽-3似乎甚至加深皱纹，由图可知，2.5％的SYN-COLL比10％的竞争对手的产品的产品成本更低，效果更好。

参照图13所示一个是实验数据，SYN-COLL刺激透明质酸的合成与未经处理的细胞相比的情况如图中所示。

SYN-COLL刺激透明质酸的合成，透明质酸是由上层的人皮肤成纤维细胞添加所示浓度物质培养72小时后测量到的。

参照图14所示是SYN-COLL的体内功效,刺激年老成纤维细胞中透明质酸的合成，用7代表示年轻细胞，用28代表示年老细胞，测量添加或不添加SYN-COLL 50um后人皮细胞成纤维细胞中透明质酸的浓度，右边图片表示展示β半乳糖甘酶染色作为衰老细胞的标记。

参照图15所示是SYN-COLL的体内功效,表示成纤维细胞在机械应力下(拉伸)，机械负荷导致许多细胞信号和细胞行为发生改变的示意图，图中的1代表的是白细胞介素B，图中的2表示的是白细胞介素8,图中的3表示TNF-α；拉伸细胞培养，在SYN-COLL影响下，典型促炎细胞因子的感知变化，在机械应力下，SYN-COLL抑制促炎细胞因子如TNF-α、IL-8:TGFbeta、SYN-COLL。

本发明还提供了一种制备所述的抗衰修复双层双色精华素的制备方法，其包括以下步骤：

步骤1)将组分A按比例混合搅拌均匀，待用；

步骤2)将组分B按比例混合，搅拌并加热至80-85℃；

步骤3)降温至70℃，所述C组分提前加热70-75℃溶解；一边搅拌加入C组分搅拌均匀，组分D需提前分散溶解透明，然后一边搅拌加入D组分搅拌均匀后降温；

步骤4)降温至40℃后，组分F组分需提前分散溶解透明，加入组分E、F搅拌均匀即可；

其中，A原料中包含有：环五聚二甲基硅氧烷/环己硅氧烷、聚二甲基硅氧烷、β-胡萝卜素、霍霍巴籽油、山茶籽油、燕麦仁油；

B原料中包含有：尿囊素、EDTA-2NA、甘油、丙二醇、甜菜碱、氯化钠；

C原料中包含有：对羟基苯乙酮、丙二醇；

D原料中包含有：精氨酸；

E原料中包含有：燕麦β-葡聚糖、寡肽-1、铁皮石斛茎提取物、甘油、棕榈酰三肽-5、林兰润露、七重抗敏剂、1，2己二醇、PEG-12甘油月桂酸酯、聚乙二醇-400；

F原料中包含有：水溶橘皮苷。

其中，所述组分A与组分B/C/D/E/F混合相的比例：0.3：1.7。制备获得的精华素的外观：淡黄色双层精华，pH(25℃)：6.50。

Claims (10)

1.一种抗衰修复双层双色精华素，其特征在于，由以下原料制得：环五聚二甲基硅氧烷/环己硅氧烷、聚二甲基硅氧烷、β-胡萝卜素、霍霍巴籽油、山茶籽油、燕麦仁油、尿囊素、EDTA-2NA、甘油、丙二醇、甜菜碱、氯化钠、对羟基苯乙酮、丙二醇、精氨酸、燕麦β-葡聚糖、寡肽-1、铁皮石斛茎提取物、甘油、棕榈酰三肽-5、林兰润露、七重抗敏剂、1，2己二醇、PEG-12甘油月桂酸酯、聚乙二醇-400、水溶橘皮苷和去离子水。

2.根据权利要求1所述的抗衰修复双层双色精华素，其特征在于，其可分为A、B、C、D、E、F六种混合原料组成，将各混合原料分步骤相混合制备获得所述精华素：

其中，A原料中包含有：环五聚二甲基硅氧烷/环己硅氧烷、聚二甲基硅氧烷、β-胡萝卜素、霍霍巴籽油、山茶籽油、燕麦仁油；

B原料中包含有：尿囊素、EDTA-2NA、甘油、丙二醇、甜菜碱、氯化钠；

C原料中包含有：对羟基苯乙酮、丙二醇；

D原料中包含有：精氨酸；

E原料中包含有：燕麦β-葡聚糖、寡肽-1、铁皮石斛茎提取物、甘油、棕榈酰三肽-5、林兰润露、七重抗敏剂、1，2己二醇、PEG-12甘油月桂酸酯、聚乙二醇-400；

F原料中包含有：水溶橘皮苷。

3.根据权利要求1所述的抗衰修复双层双色精华素，其特征在于，所述各原料的配比(质量百分比)为：

4.根据权利要求3所述的抗衰修复双层双色精华素，其特征在于，所述各原料的配比(质量百分比)为：

5.一种制备如权利要求1所述的抗衰修复双层双色精华素的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

步骤1)将组分A按比例混合搅拌均匀，待用；

步骤2)将组分B按比例混合，搅拌并加热至80-85℃；

步骤3)降温至70℃，一边搅拌加入C组分搅拌均匀，然后一边搅拌加入D组分搅拌均匀后降温；

步骤4)降温至40℃后，加入组分E、F搅拌均匀即可；

其中，A原料中包含有：环五聚二甲基硅氧烷/环己硅氧烷、聚二甲基硅氧烷、β-胡萝卜素、霍霍巴籽油、山茶籽油、燕麦仁油；

B原料中包含有：尿囊素、EDTA-2NA、甘油、丙二醇、甜菜碱、氯化钠；

C原料中包含有：对羟基苯乙酮、丙二醇；

D原料中包含有：精氨酸；

E原料中包含有：燕麦β-葡聚糖、寡肽-1、铁皮石斛茎提取物、甘油、棕榈酰三肽-5、林兰润露、七重抗敏剂、1，2己二醇、PEG-12甘油月桂酸酯、聚乙二醇-400；

F原料中包含有：水溶橘皮苷。

6.根据权利要求5所述的抗衰修复双层双色精华素的制备方法，其特征在于：在步骤3)中，所述C组分提前加热70-75℃溶解；组分D需提前分散溶解透明。

7.根据权利要求5所述的抗衰修复双层双色精华素的制备方法，其特征在于：在步骤4)中，组分F组分需提前分散溶解透明。

8.根据权利要求5所述的抗衰修复双层双色精华素的制备方法，其特征在于：所述组分A与组分B/C/D/E/F混合相的比例：0.3：1.7。

9.根据权利要求5所述的抗衰修复双层双色精华素的制备方法，其特征在于：所述各原料的配比(质量百分比)为：

10.根据权利要求5所述的抗衰修复双层双色精华素的制备方法，其特征在于：所述精华素的pH值为6.5。