CN110183431B

CN110183431B - 一类用于肝病治疗或预防的化合物

Info

Publication number: CN110183431B
Application number: CN201910485553.3A
Authority: CN
Inventors: 史东方; 傅长金; 承曦; 龚维伟; 顾杰; 李鹏飞; 张敏; 杨艳; 金文卿
Original assignee: Jiangsu Atom Bioscience and Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Hangzhou New Element Pharmaceutical Co ltd
Priority date: 2018-06-09
Filing date: 2019-06-05
Publication date: 2023-04-11
Anticipated expiration: 2039-06-05
Also published as: EP3805216A4; JP2021527069A; CN110183431A; BR112020025126A2; CA3103145C; AU2019281613A1; NZ771735A; US11643405B2; AU2019281613B2; CA3103145A1; US20210246126A1; WO2019233440A1; EP3805216A1; JP7214247B2; MX2020013297A

Abstract

本发明公开了一类用于肝病治疗或预防的化合物，其为通式(I)或(II)所示的化合物、光学异构体或其药学上可接受的盐，该类化合物、光学异构体或其药学上可接受的盐可应用在制备治疗或预防肝病的药物方面。

Description

一类用于肝病治疗或预防的化合物

技术领域

本发明属于药物化学领域，具体涉及一类对肝病具有治疗或预防效果的化合物。

背景技术

随着人们生活方式和饮食结构的不断改善，长期营养过剩极易导致非酒精性脂肪肝病(Non-Alcoholic Fatty Liver Disease,NAFLD)的发生。NAFLD按其病理过程可分为非酒精单纯性脂肪肝(Non-Alcoholic Simple Fatty liver,NAFL)和非酒精性脂肪性肝炎(Non-Alcoholic Steatohepatitis,NASH)及相关的肝硬化和肝癌(中华医学会肝脏病学分会脂肪肝和酒精性肝病学组.非酒精性脂肪性肝病诊疗指南.中华肝脏病杂志,2006,14:161-163)。NASH是指肝细胞大泡性脂肪变性、气球样变性、小叶内炎症等与酒精性肝炎相似的改变，但患者却无过量饮酒史的疾病。目前，一般人群的NAFLD患病率高达15％-20％，而肥胖症患者的NAFLD患病率则高达76％-90％(N.Belemets,N.Kobyliak,O.Virchenko,etal.Effects of polyphenol compounds melanin on NAFLD/NASHprevention.Biomedicine and Pharmacotherapy,2017,88:267-276)。预估未来全球人群患NAFLD的风险会明显超过乙型及丙型肝炎。同时NAFLD也是导致慢性肝病的主要原因，因此出现了诸多相关的严重健康问题，如肝硬化、肝转移、肝癌、甚至是死亡(N.Kobyliak,L.Abenavoli.The role of liver biopsy to assess non-alcoholic fatty liverdisease.Reviews onRecent Clinical Trials.2014,9:159-169；G.Musso,R.Gambino,M.Cassader,et al.Meta-analysis:natural history of non-alcoholic fatty liverdisease(NAFLD)and diagnostic accuracy of non-invasive tests for liver diseaseseverity.Annals of Medincine,2011,43:617–649)。

NASH病因与肥胖、高脂血症、糖尿病等代谢综合症有很大的关联性，但其发病机制复杂，至今尚未完全阐明。比较经典的是“二次打击”学说(C.P.Day,O.F.W.James.Steatohepatitis:A tale of two“hits”.Gastroenterology,1998,114(4):842-845)。“首次打击”(肝脏脂肪变性发展)被认为主要是由胰岛素抵抗(IR)导致的。游离脂肪酸(FFA)来源于周围脂肪的分解、摄取的食物或新的脂质生成；氧化、磷脂形成和甘油三酯(TG)合成时FFA则被利用，其在体内的产生和利用之间达成动态的平衡。但当发生IR时，胰岛素介导的信号通路调控的生理生化反应发生紊乱，其抑制脂肪组织的脂解作用被阻断，造成脂肪组织的过度脂解，从而使血浆中FFA水平上升，TG的形成大大超过其转换清除的速率，使得TG蓄积在肝脏内，因此肝细胞即发生大泡性脂肪变性(C.Postic,J.Girard.Contribution of de novo fatty acid synthesis to hepatic steatosisand insulin resistance:lessons from genetically engineered mice.The Journalof Clinical Investigation,2008,118(3):829-838)。“二次打击”(脂肪性炎症)是由于活性氧簇(ROS)的过量产生和抗氧化防御机制的降低，而导致氧化应激效应。大量的FFA代谢过程产生ROS，与细胞膜的磷脂双分子层发生脂质过氧化反应，生成活性代谢产物丙二醛、4-羟壬烯醇等，引起细胞膜结构和功能损伤；同时ROS也可引起线粒体损伤，后者又可导致继发性线粒体脂肪酸β氧化途径的受损，进一步促进肝细胞脂肪变性，形成恶性循环；其他二次打击因素还包括内毒素的增加、铁离子的超负荷和Kupffer细胞的激活过表达等(P.Z.Li,K.He,J.Z.Li,et al.The role of kupffer cells in hepaticdiseases.Molecular Immunology,2017,85:222-229)。

目前全球尚无针对NASH的治疗药物上市，当通过单纯生活方式调整不足以奏效时，临床上就将一些胰岛素增敏剂、减肥药物、抗氧化剂、保肝和降脂药物整合到NASH的治疗方案中，但这些药物通常都有潜在的用药安全风险以及疗效不足，无法达到治疗预期等问题。

部分进入临床阶段研究的药物，如由美国Intercept开发的奥贝胆酸正处于III期临床研究阶段，其为法尼醇酯X受体(FXR)激动剂，通过多种途径降低血脂水平，使肝脏TG积聚减少，并使氧化应激及脂质过氧化程度减轻，但其存在显著瘙痒的过敏反应(TheFarnesoid X Receptor(FXR)Ligand Obeticholic Acid in NASH Treatment Trial(FLINT).NCT01265498.2015)，且在过高剂量下可导致严重的肝损伤和死亡风险(FDA DrugSafety Communication:FDA warns about serious liver injury with Ocaliva(obeticholic acid)for rare chronic liver disease.September 21,2017)。该药在III期临床中发现，有3％的患者出现严重的心血管不良事件(Phase 3Study of ObeticholicAcid in Patients With Primary Biliary Cirrhosis(POISE).NCT01473524.2017)；Galmed制药公司开发的Aramchol是一类新型的脂肪酸-胆酸偶合物，用于早期NASH的治疗，但IIa期临床显示其给药剂量较高，需达300mg/天，才可显著减少肝脏脂肪堆积(R.Safadi,F.M.Konikoff,M.Mahamid,et al.The fatty acid–bile acid conjugate aramcholreduces liver fat content in patients with nonalcoholic fatty liverdisease.Clinical Gastroenterology and Hepatology,2014(12):2085–2091)；Gilead开发的GS-4997是高选择性的小分子细胞凋亡信号调节激酶(ASK)抑制剂，可用于减轻对ROS的促肝纤维化反应，虽然其II期临床结果显示有43％的受试者用药后纤维化程度得到改善，但研究的样本数过少，数据也未与安慰剂相对比，所以后续研究还存在大量不确定性(Safety,tolerability,and efficacy of GS-4997 alone or in combination withsimtuzumab(SIM)in adults with nonalcoholic steatohepatitis(NASH)and fibrosisstages F2-F3.NCT02466516.2015)；法国Genfit公司的Elafibranor是一种PPARα/δ的双激动剂，可改善胰岛素敏感性和脂质代谢紊乱的情况，并可减少炎症反应，但在II期临床中，该药物未能达到无肝纤维化恶化的脂肪性肝炎消失比例的预设终点，仅对轻中度患者评估达到预期目标(Phase IIb study to evaluate the efficacy and safety of GFT505versus placebo in patients eithnon-alcoholic steatohepatitis(NASH).NCT01694849.2012)。由此可见，目前已处于临床研究阶段的各类候选药物在药效上并不显著，且均有一定的毒副作用。

水飞蓟宾具有抗氧化活性，有显著的保肝护肝作用。其通过改善线粒体功能，清除氧自由基，减少一氧化碳产生，从而降低脂质过氧化水平，达到抑制肝细胞脂肪变性的作用(P.F.Surai.Silymarin as a natural antioxidant:an overview of the currentevidence and perspectives.Antioxidants(Basel),2015(4):204–247)；同时，水飞蓟宾也能够通过多种途径全面地治疗NASH疾病：其可抑制多种炎症因子的产生，如NF-kB、IL1、IL6、TNFα、IFN-γ和GM-CSF(A.Federico,M.Dallio,C.Loguercio.Silymarin/silybin andchronic liver disease:a marriage of many years.Molecules,2017(22):2)；也能通过降低由血小板衍生因子(PDGF)诱导的星状细胞增殖，并下调III型前胶原、α-SMA和TGF-β的水平，从而缓解或阻止肝脏纤维化的进程(S.Clichici,D.Olteanu,A.Filip,etal.Beneficial effects of silymarin after the discontinuation of CCl₄-inducedliver fibrosis.Journal of Medicinal Food,2016(19):789–797)。NAFLD动物模型也已证实了水飞蓟宾具有良好护肝作用。水飞蓟宾对病毒性慢性肝炎具有改善症状和肝脏生化功能的作用，临床上可见部分患者的肝组织病理学有不同程度的改善，同时对早期肝硬化也有一定疗效。

目前已有关于水飞蓟宾单用或与二甲双胍、罗格列酮联用治疗NASH的临床实例报道(刘忠鑫.水飞蓟宾联合吡格列酮治疗非酒精性脂肪性肝病76例疗效观察.临床消化病杂志,2012,24(5):288-290；鲁社玲.水飞蓟宾联合二甲双胍治疗非酒精性脂肪肝.医药论坛杂志,2016,37(4):153-154)，但其初步疗效有限。也有关于水飞蓟宾治疗NAFLD的临床研究，其连续给药48周后病人脂质化水平与安慰剂相比虽无明显的改善，但肝纤维化程度却发生显著性的降低(W.K.Chan,N.Raihan.N.Mustapha,et al.A randomized trial ofsilymarin for the treatment of non-alcoholic steatohepatitis.ClinicalGastroenterology and Hepatology,2017(15):1940-1949)。但水飞蓟宾也存在溶解性差、口服吸收差、生物利用度低等问题，从而影响其在临床上的疗效。

对于NASH的治疗是一个长期的临床用药过程，但目前临床研究阶段的药物都存在各种疗效不明确、毒副作用大，无法长期使用等问题，因此，NASH市场亟待疗效佳，毒性低的药物。

发明内容

本发明的目的是在现有技术的基础上，提供一类对肝病具有潜在治疗或预防效果的化合物。

本发明的另一目的是提供一种上述化合物在疾病治疗或预防方面的用途。

本发明的目的可以通过以下措施达到：

本发明提供了一类通式(I)或(II)所示的化合物、光学异构体或其药学上可接受的盐，

其中，

R¹或R²分别独立地选自氢、氘、羟基、卤素、氰基、羧基、C_1-5烷基、取代的C_1-5烷基、C_1-5烷氧基、取代的C_1-5烷氧基、C_1-3烷硫基或取代的C_1-3烷硫基中的一个或多个；

R³或R⁴分别独立地选自氢、氘、羟基、氨基、取代氨基、硝基、卤素、氰基、羧基、C_1-5烷基、取代的C_1-5烷基、C_1-3烷氧基或取代的C_1-3烷氧基，所述的取代基选自氘、羟基、氨基、硝基、卤素、氰基、羧基、C_1-3烷基或糖基中的一个或多个；

R⁵选自氢、氘、羟基、卤素、氰基、羧基、C_1-5烷基、取代的C_1-5烷基、C_1-3烷氧基、取代的C_1-3烷氧基、C_1-3烷硫基或取代的C_1-3烷硫基中的一个或多个；

R⁶选自氢、氘、羟基、卤素、氰基、氨基、取代氨基、羧基、C_1-5烷基、取代的C_1-5烷基、C_1-3烷氧基或取代的C_1-3烷氧基中的一个或多个，所述的取代基选自氘、羟基、氨基、硝基、卤素、氰基、羧基或C_1-3烷基中的一个或多个；

R⁷或R⁸分别独立地选自氢、氘、羟基、卤素、氨基、取代氨基、硝基、氰基、C_1-3烷基、取代的C_1-3烷基、C_1-3烷氧基或取代的C_1-3烷氧基，所述的取代基选自氘、羟基、氨基、硝基、卤素或氰基中的一个或多个；

A选自氧、硫或CHR’，R’选自羟基、氨基、氰基、羧基或取代的C_1-5烷基，所述的取代基选自氘、羟基、氨基、氰基或羧基中的一个或多个；

A’或A”分别独立地选自氧、硫、CO或CHR，R选自氢、氘、羟基、氨基、硝基、氰基、C_1-5烷基或取代的C_1-5烷基，所述的取代基选自氘、羟基、氨基、硝基、羧基、卤素或氰基中的一个或多个；

E或G分别独立地选自C或CH，E和G之间为碳碳单键或碳碳双键；

X、Y、Z或Z’分别独立地选自CH或N；

m、n、p或q为0、1、2或3；

R¹、R²或R⁵中所述的取代基分别独立地选自氘、羟基、氨基、硝基、卤素、氰基、羧基或糖基中的一个或多个；

在式(II)所示的化合物中，A’和A”不同时选自氧。

在一种优选方案中，R¹或R²分别独立地选自氢、羟基、卤素、氰基、羧基、C_1-3烷基、取代的C_1-3烷基、C_1-3烷氧基、取代的C_1-3烷氧基、C_1-3烷硫基或取代的C_1-3烷硫基中的一个或多个，所述的取代基选自氘、羟基、氨基、硝基、卤素、氰基、羧基或糖基中的一个或多个。

在另一种优选方案中，R¹或R²优选分别独立地选自羟基、氟、氯、氰基、C_1-3烷基、取代的C_1-3烷基、C_1-2烷氧基或取代的C_1-2烷氧基中的一个或多个，所述的取代基选自氘、羟基、氨基、硝基、氟、氯、氰基或羧基中的一个或多个。

本发明中的m、n、p或q大于2时，代表所限定的对应基团(如m限定的R¹)可以有多个，而这些多个基团可以选择所限定范围(如R¹的限定范围)内的相同基团，也可以选择所限定范围内的不同基团。

在一种优选方案中，m或n为0、1或2。

在另一种优选方案中，m或n为1或2。

R¹或R²分别独立地选自羟基、卤素、氰基、C_1-3烷基、C_1-3烷氧基或取代的C_1-2烷氧基，其取代基选自氘、羟基、氨基、氟或羧基；m或n为0、1或2。

在一种优选方案中，R³或R⁴分别独立地选自氢、氘、羟基、氨基、硝基、氰基、C_1-3烷基、取代的C_1-5烷基、C_1-3烷氧基或取代的C_1-3烷氧基，其取代基选自氘、羟基、氨基、硝基、氰基、羧基或糖基中的一个或多个。

在另一种优选方案中，R³或R⁴分别独立地选自氢、氘、羟基、氨基、C_1-3烷基或C_1-3烷氧基。

在另一种优选方案中，R³或R⁴分别独立地选自氢、羟基、氨基、C_1-3烷基、取代的C_1-5烷基、C_1-3烷氧基或取代的C_1-3烷氧基，其取代基选自氘、羟基、氨基、氟或羧基。

在一种优选方案中，R⁵选自氢、氘、羟基、卤素、氰基、C_1-3烷基、取代的C_1-3烷基、C_1-3烷氧基或取代的C_1-3烷氧基中的一个或多个，其取代基选自氘、羟基、氨基、硝基、卤素、氰基、羧基或糖基中的一个或多个。

在另一种优选方案中，R⁵选自氢、氘、羟基、卤素、氰基或C_1-2烷氧基中的一个或多个。

在另一种优选方案中，R⁵选自氢、羟基、卤素、氰基、C_1-2烷氧基或取代的C_1-3烷氧基，其取代基选自氘、羟基、氟或羧基。

在一种优选方案中，R⁶选自氢、氘、羟基、卤素、氰基、氨基、C_1-5烷基、取代的C_1-5烷基、C_1-3烷氧基或取代的C_1-3烷氧基中的一个或多个，其取代基选自氘、羟基、氨基、硝基、卤素、氰基或羧基中的一个或多个。

在另一种优选方案中，R⁶选自氢、氘、羟基、氨基、C_1-3烷基、取代的C_1-5烷基、C_1-3烷氧基或取代的C_1-3烷氧基，其取代基选自氘、羟基、氨基、氟、羧基或氰基中的一个或多个。

在一种优选方案中，p为0、1、2或3。

在另一种优选方案中，p为0或1。

在一种优选方案中，q为0、1或2。

在另一种优选方案中，q为0或1。

在另一种优选方案中，R⁶选自氢、氘、羟基、氰基、氨基、C_1-3烷基、取代的C_1-3烷基、C_1-3烷氧基或取代的C_1-3烷氧基中的一个或多个，其取代基选自氘、羟基、氨基、氟或羧基。

在一种优选方案中，R⁷或R⁸分别独立地选自氢、氘、羟基、卤素、氨基、氰基、C_1-3烷基、取代的C_1-3烷基、C_1-3烷氧基或取代的C_1-3烷氧基，所述的取代基选自氘、羟基、氨基或卤素中的一个或多个。

在另一种优选方案中，R⁷或R⁸分别独立地选自氢、氘、羟基、C_1-3烷氧基或取代的C_1-3烷氧基，所述的取代基选自氘、羟基、氨基或卤素中的一个或多个。

在另一种优选方案中，R⁷或R⁸分别独立地选自氢、羟基、氰基、C_1-3烷基、取代的C_1-3烷基、C_1-3烷氧基或取代的C_1-3烷氧基，取代基选自氘、羟基、氨基或氟中的一个或多个。

在一种优选方案中，A选自氧、硫或CHR’，R’选自羟基、氨基、氰基、羧基或取代的C_1-3烷基，所述的取代基选自羟基、氨基、氰基或羧基中的一个或多个。

在另一种优选方案中，A选自氧、硫或CHR’，R’选自羟基、氨基、氰基、羟基取代的C_1-3烷基或氨基取代的C_1-3烷基。

在一种优选方案中，A选自氧或硫。

在另一种优选方案中，A选自氧。

在一种优选方案中，A’或A”分别独立地选自氧、硫、CO或CHR。

在另一种优选方案中，A’或A”分别独立地选自氧、硫或CO。

在一种优选方案中，R选自氢、氘、羟基、氨基、硝基、氰基、C_1-3烷基或取代的C_1-3烷基，其取代基选自羟基、氨基、羧基或氰基中的一个或多个。

在另一种优选方案中，R选自羟基、氨基或取代的C_1-3烷基，其取代基选自氘、羟基或氨基。

本发明中的“E或G分别独立地选自C或CH”，是指E或G分别为C，或者E或G分别为CH。当E或G分别为C时E和G之间为碳碳双键，当E或G分别为CH时E和G之间为碳碳单键。在一种优选方案中，E或G分别独立地选自CH，E和G之间为碳碳单键。

在一种优选方案中，X或Y分别独立地选自CH或N。

在另一种优选方案中，X和Y不同时选自N。

在一种优选方案中，Z或Z’选自CH。

本发明中的取代基团，如取代的烷基、取代的烷氧基、取代的烷硫基、取代氨基等，当没有明确限定时，其取代基选自氘、羟基、氨基、硝基、卤素、氰基、羧基、C_1-3烷基、C_1-3烷氧基或糖基中的一个或多个。

本发明各基团(如R¹、R²、R³、R⁴、R⁵、R⁶、R⁷、R⁸等)中的取代基有多个时，这些取代基可以选取相同的取代基团，也可以选取不同的取代基团。

在一种优选方案中，本发明的化合物选自下述各化合物，

2-{8-羟基-3-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-2-羟甲基-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-6-基}色满-3,4,5,7-四醇(4)；

(2R,3S)-2-{(2R,3R)-3-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-2-羟甲基-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-6-基}色满-3,4,5,7-四醇(5)；

(2R,3S)-2-{(2R,3R)-3-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-2-羟甲基-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-6-基}色满-3,5,7-三醇(6)；

2-{8-羟基-3-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-2-羟甲基-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-6-基}色满-3,5,7-三醇(7)；

2-{3-(6-甲氧基吡啶-3-基)-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-6-基}色满-3,4,5,7-四醇(22)；

2-{3-(5-甲氧基吡啶-2-基)-2-甲基-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-6-基}色满-3,4,5,7-四醇(38)；

2-{3-(5-羟基吡啶-2-基)-2-甲基-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-6-基}色满-3,4,5,7-四醇(45)；

(2R,3S)-4-氨基-2-{(2R,3R)-3-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-2-羟甲基-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-6-基}色满-3,5,7-三醇(47)；

(2R,3S)-2-{(2R,3R)-2-羟甲基-3-[3-甲氧基-4-(三氘代甲氧基)苯基]-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-6-基}-5,7-二(三氘代甲氧基)色满-3-醇(55)；

2-{8-羟基-3-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-2-羟甲基-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-6-基}-7-甲氧基-色满-3,4,5-三醇(66)；

2-{8-羟基-3-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-2-羟甲基-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-6-基}-7-甲氧基色满-3,5-二醇(67)；

7-{(3-羟基-5,7二甲氧基色满-2-基)-2-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-3-羟基甲基-2,3二氢苯并[b][1,4]二恶烷}-5-醇(78)；

2-{8-羟基-3-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-2-羟甲基-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-6-基}-5-甲氧基色满-3,7–二醇(85)；

2-{8-羟基-3-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-2-羟甲基-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-6-基}-5,7-二甲氧基色满-3,4-二醇(92)；

7-氟-2-{8-羟基-3-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-2-羟甲基-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-6-基}色满–3,4,5-三醇(101)；

7-乙氧基-2-{8-羟基-3-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-2-羟甲基-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-6-基}色满–3,5-二醇(105)；

5-乙氧基-2-{8-羟基-3-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-2-羟甲基-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-6-基}色满–3,7-二醇(109)；

2-{8-溴-3-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-2-羟甲基-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-6-基}色满-3,4,5,7-四醇(117)；

2-{8-溴-3-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-2-羟甲基-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-6-基}色满-3,5,7-三醇(118)；

2-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-3-羟甲基-7-(3,5,7-三羟基色满-2-基)-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-5-甲腈(119)；

(2R,3S)-2-{2-氨基甲基-(2R,3R)-3-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-6-基}色满-3,5,7-三醇(126)；

2-{8羟基-3-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-2-羟甲基-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-6-基}色满-3,4,6,7-四醇(136)；

2-{8-羟基-3-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-2-羟甲基-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-6-基}色满-3,6,7-三醇(137)；

2-{3-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-2-羟甲基-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-6-基}色满-3,6,7-三醇(140)。

本发明还提供了一种药物组合物，它以本发明的各化合物、光学异构体或其药学上可接受的盐为活性成分或主要活性成分，辅以药学上可接受的辅料。即在本申请的药物组合物中，除了以本发明的化合物、光学异构体或其药学上可接受的盐为活性成分以外，还可以进一步加入其他种类的活性成分以达到联合用药、增效或降低副作用等多种目的。

本发明所涉及的化合物、光学异构体或其药学上可接受的盐可应用在制备治疗或预防肝病的药物方面，特别是可应用在制备治疗或预防脂肪肝、肝纤维化和肝硬化的药物方面。另一方面，本发明的化合物、光学异构体或其药学上可接受的盐可以用于治疗或预防肝病中，特别是用于治疗或预防脂肪肝、肝纤维化和肝硬化中。

除非另有说明，下列用在权利要求书和说明书中的术语有如下含义：

“氢”，是指氕(1H)，它是氢元素的主要稳定同位素。

“氘”，是指氢的一种稳定形态同位素，也被称为重氢，其元素符号为D。

“卤素”，是指氟原子，氯原子，溴原子或碘原子。

“羟基”，是指-OH基团。

“氨基”，是指-NH₂基团。

“氰基”，是指-CN基团。

“硝基”，是指-NO₂基团。

“羧基”，是指-COOH基团。

“烷基”，是指1-10个碳原子的饱和的脂烃基，包括直链和支链基团(本申请书中提到的数字范围，例如“1-10”，是指该基团，此时为烷基，可以含1个碳原子、2个碳原子、3个碳原子等，直至包括10个碳原子)。含1-4个碳原子的烷基称为低级烷基。当低级烷基没有取代基时，称其为未取代的低级烷基。烷基可以选用C_1-6烷基、C_1-5烷基、C_1-4烷基、C_1-3烷基、C_1-2烷基、C_2-3烷基、C_2-4烷基等。具体的烷基包括但不限于甲基、乙基、丙基、2-丙基、正丁基、异丁基或叔丁基等。烷基可以是取代的或未取代的。

“烷氧基”表示-O-(未取代的烷基)和-O-(未取代的环烷基)基团，其进一步表示-O-(未取代的烷基)。代表性实施例包括但不限于甲氧基、乙氧基、丙氧基、环丙氧基等。

“烷硫基”表示-S-(未取代的烷基)和-S-(未取代的环烷基)基团，其进一步表示-S-(未取代的烷基)。代表性实施例包括但不限于甲硫基、乙硫基、丙硫基、环丙硫基等。

“CO”，是指-C(＝O)-基团。

“E或G分别独立地选自C或CH”是指当E和G之间为碳碳单键时E或G分别独立地选自CH，当E和G之间为碳碳双键时E或G分别独立地选自C。

“糖基”表示单醣残基或多醣残基。本文所用之单醣为3-C单糖至8-C单糖，较佳为具有化学式C₆H₁₂O₆(即，己糖)的6-碳单醣。该己糖可为D构型、L构型或其组合。己糖通常根据官能团分类。举例而言，醛己糖在位置1具有醛，例如，阿洛糖、阿卓糖、葡萄糖、甘露糖、古洛糖、艾杜糖、半乳糖和塔罗糖；而酮己糖则在位置2具有酮，例如，阿洛酮糖、果糖、山梨糖和塔格糖。己糖还含有6个羟基，己糖中的醛或酮官能基可与相邻的羟基官能基反应，分别形成分子内的半缩醛或半缩酮。若所得之环状糖为5元环，则其为呋喃糖。若所得之环状糖为6元环，则其为吡喃糖。环自发地打开和关闭，允许羰基和相邻碳原子之间的键发生旋转，产生二种不同的构型(α和β)。己糖可为S构型或R构型。

“药学上可接受的盐”是包含通式(I)或(II)的化合物与有机酸或无机酸形成的盐，表示保留母体化合物的生物有效性和性质的那些盐。这类盐包括：

(1)与酸成盐，通过母体化合物的游离碱与无机酸或有机酸的反应而得，无机酸例如(但不限于)盐酸、氢溴酸、硝酸、磷酸、偏磷酸、硫酸、亚硫酸和高氯酸等，有机酸例如(但不限于)乙酸、丙酸、丙烯酸、草酸、(D)或(L)苹果酸、富马酸、马来酸、羟基苯甲酸、γ-羟基丁酸、甲氧基苯甲酸、邻苯二甲酸、甲磺酸、乙磺酸、萘-1-磺酸、萘-2-磺酸、对甲苯磺酸、水杨酸、酒石酸、柠檬酸、乳酸、扁桃酸、琥珀酸或丙二酸等。

(2)存在于母体化合物中的酸性质子被金属离子代替或者与有机碱配位化合所生成的盐，金属离子例如碱金属离子、碱土金属离子或铝离子，有机碱例如乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、氨丁三醇、N-甲基葡糖胺等。

“药用组合物”指的是在此描述的一种或多种化合物或者它们的药学上可接受的盐和前药与其它的化学成分，例如药学上可接受的载体和赋形剂的混合物。药用组合物的目的是促进化合物对生物体的给药。

“前药”指的是在经过生物体内转化后才具有药理作用的化合物。前体药物本身没有生物活性或活性很低，经过体内代谢后变为有活性的物质，这一过程的目的在于增加药物的生物利用度，加强靶向性，降低药物的毒性和副作用。

本发明进一步要求保护包括上面所述的任一化合物、其药学上可接受的盐或其易水解的前药酰胺与其它药用活性成分的药物组合物。

本发明也包括上述任一化合物、其药学上可接受的盐、其易水解的前药酰胺或其异构体，可以用本领域已知的方式配制成临床上或药学上可接受的任一剂型。用于口服给药时，可制成常规的固体制剂，如片剂、胶囊剂、丸剂、颗粒剂等；也可制成口服液体制剂，如口服溶液剂、口服混悬剂、糖浆剂等。

在制剂化的情况下，使用通常使用的填充剂、增量剂、粘合剂、润湿剂、崩解剂、表面活性剂等稀释剂或赋形剂而制造。用于口服给药的固态制剂可以混合所述化合物与一种以上的赋形剂，如淀粉、碳酸钙、蔗糖、乳糖或明胶等而调制。并且，除了简单的赋形剂以外，还使用硬脂酸镁、滑石等润滑剂。用于口服的液态制剂可以包括通常使用的作为简单稀释剂的水、液体石蜡以外的多种赋形剂，如润湿剂、甜味剂、芳香剂、防腐剂等。在用于非口服给药的制剂中，作为非水性溶剂、混悬剂可以使用丙二醇(propylene glycol)、聚乙二醇、橄榄油等植物油、油酸乙酯等可注射的酯类等。作为佐剂的基底可以使用witepsol、聚乙二醇，吐温61、可可脂、月桂酸甘油酯、甘油明胶等。

作为根据本发明的药学组成物的有效成分的化合物的使用量可以根据患者的年龄、性别、体重、疾病而不同而确定具体给药量，它可以根据给药途径、疾病的程度、性别、体重、年龄等而增减。因此，所述给药量并不以任何形式限制本发明的范围。所述药学组合物可以以各种途径给药于诸如老鼠、小鼠、家畜、人类等哺乳动物。给药的所有方式可以预料，例如，可以通过口服、直肠或静脉、肌肉、皮下、吸入支气管内、子宫内、硬脑膜或脑血管内注射而给药。

与现有该类药物(特别是水飞蓟宾)相比，本发明化合物在不同溶液中的溶解度有了极大的提高，能更有效地增加人体对药物的吸收效率，大幅提升相关治疗效果。本发明所提供的式(I)或(II)所示的化合物、光学异构体或其药学上可接受的盐对肝病，特别是脂肪肝具有疗效佳和毒性低的效果，实验显示，本发明涉及的部分化合物对斑马鱼非酒精性脂肪肝具有显著的治疗作用，也能显著地改善和治疗小鼠非酒精性脂肪肝炎，因此其在应用于治疗或预防肝病，特别是脂肪肝、肝纤维化和肝硬化的药物方面，具有良好的应用前景。

附图说明

图1为各受试化合物给药后的斑马鱼油红O染色镜检照片；

图中，虚线区域所示为肝脏部分，a为正常对照组，b为模型对照组，c为阳性对照物S-腺苷甲硫氨酸组(50μM)，d为阳性对照物水飞蓟宾组(200μM)，e为化合物4组(200μM)，f为化合物6组(200μM)，g为化合物7组(200μM)；

图2为各受试化合物给药后的斑马鱼油红O染色镜检照片；

图中，虚线区域所示为肝脏部分，a为正常对照组，b为模型对照组，c为阳性对照物S-腺苷甲硫氨酸组(50μM)，d为阳性对照物水飞蓟宾组(100μM)，e为化合物4组(100μM)，f为化合物6组(100μM)，g为化合物7组(100μM)，h为化合物67组(100μM)，i为化合物85组(100μM)，j为化合物92组(100μM)；

图3为组织病理学染色照片(HE染色，400×)；

图中，A为空白对照组；B为模型组；C为化合物7低剂量组(35mg/kg)。

具体实施方式

以下结合实施例对本发明做进一步的说明，但本发明的保护范围并不局限于以下各实施例。

实施例1：2-{8-羟基-3-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-2-羟甲基-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-6-基}色满-3,4,5,7-四醇(4)的合成

步骤A：将含有4-羟基-3-甲氧基苯甲醛(2.0g，13.1mmol)、乙氧甲酰基亚甲基三苯基膦(5.04g，14.5mmol)和二氯甲烷(40mL)的混合物在室温下搅拌过夜。减压蒸除溶剂，产物经柱层析纯化(200～300目硅胶，乙酸乙酯:石油醚＝1:20～1:10洗脱)，得3-(4-羟基-3-甲氧基苯基)丙烯酸乙酯(1)(2.5g)。收率为85.9％。

步骤B：在-50℃下，向化合物1(2.48g，11.2mmol)的THF(25mL)溶液中滴加1.5M二异丁基氢化铝的THF(25mL)溶液。加完后，升温到室温并继续搅拌0.5小时。将反应液缓慢倒入冰水(40mL)中，用2M柠檬酸溶液调节pH值至5～6。用乙酸乙酯(50mL×3)萃取，合并的有机相用饱和食盐水(30mL)洗涤，无水硫酸钠干燥。减压蒸除溶剂，产物经柱层析纯化(200～300目硅胶，乙酸乙酯:石油醚＝5:1～2:1洗脱)，得4-(3-羟基丙-1-烯-1-基)-2-甲氧基苯酚(2)(1.62g)。收率为80.3％。¹H NMR(DMSO-d₆，400MHz)δ8.99(s，1H)，6.99(d，J＝2.0Hz，1H)，6.81-6.78(m，1H)，6.72-6.70(m，1H)，6.44-6.40(m，1H)，6.21-6.14(m，1H)，4.77-4.74(m，1H)，4.09-4.06(m，2H)，3.81(s，3H)。步骤C：将含有3,5,7-三羟基-2-(3,4,5-三羟基苯基)色满-4-酮(622mg，1.94mmol)、化合物2(350mg，1.94mmol)、丙酮(10mL)和苯(20mL)的混合物在50℃搅拌10分钟，然后加入碳酸银(536mg，1.94mmol)，加完后，所得混合物在该温下搅拌过夜。冷却到室温，加入THF(15mL)，过滤除去不溶物。减压蒸除溶剂，产物经柱层析纯化(200～300目硅胶，甲醇:二氯甲烷＝1:100～1:60洗脱)，得3,5,7-三羟基-2-{8-羟基-3-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-2-羟甲基-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-6-基}色满-4-酮(3)(200mg)。收率为20.7％。¹H NMR(DMSO-d₆，400MHz)δ11.88(s，1H)，10.84(s，1H)，9.21(s，1H)，9.15(s，1H)，7.00(d，J＝1.6Hz，1H)，6.86-6.77(m，2H)，6.58-6.53(m，2H)，5.91-5.79(m，3H)，4.99-4.96(m，1H)，4.87-4.83(m，2H)，4.53-4.48(m，1H)，4.11(s，1H)，3.78(s，3H)，3.51-3.48(m，2H)。MS(EI，m/z)：497.4[M-H]^-。步骤D：将含有化合物3(170mg，0.341mmol)、甲醇(6mL)和硼氢化钠(32mg，0.846mmol)的混合物在室温下搅拌2小时，再加入硼氢化钠(32mg，0.846mmol)，所得混合物在室温下搅拌过夜。加入水(15mL)，用2M柠檬酸溶液调节pH值至5～6。用乙酸乙酯/THF(3V/1V，15mL×3)萃取，合并的有机相用饱和食盐水(10mL)洗涤，无水硫酸钠干燥。减压蒸除溶剂，产物经柱层析纯化(200～300目硅胶，二氯甲烷:乙酸乙酯:THF＝5:1:1～2:1:1洗脱)，得2-{8-羟基-3-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-2-羟甲基-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-6-基}色满-3,4,5,7-四醇(4)。¹H NMR(DMSO-d₆，400MHz)δ9.20(bs，4H)，6.98(d，J＝2.0Hz，1H)，6.86-6.79(m，2H)，6.48(s，1H)，6.39(d，J＝1.6Hz，1H)，5.85(d，J＝2.4Hz，1H)，5.68-5.67(m，1H)，5.18-5.16(m，1H)，4.85-4.83(m，2H)，4.69-4.68(m，1H)，4.51-4.48(m，1H)，4.08(bs，1H)，3.78(s，3H)，3.67-3.60(m，2H)，3.50-3.40(m，2H)。MS(EI，m/z)：499.2[M-H]^-。

实施例2：(2R,3S)-2-{(2R,3R)-3-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-2-羟甲基-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-6-基}色满-3,4,5,7-四醇(5)的合成

以(2R,3R)-3,5,7-三羟基-2-{(2R,3R)-3-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-2-羟甲基-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-6-基}色满-4-酮(购自上海笛柏生物科技有限公司，生产批号为EE09)为原料，合成化合物5的实验操作按照实施例1中步骤D的制备方法¹H NMR(DMSO-d₆，400MHz)δ9.28-9.14(s，3H)，7.02-6.79(m，6H)，5.88-5.87(m，1H)，5.70-5.69(m，1H)，5.58(s，1H)，5.20(s，1H)，4.95-4.88(m，2H)，4.72(s，1H)，4.64-4.60(m，1H)，4.14(s，1H)，3.80-3.75(m，4H)，3.54(s，1H)，3.36-3.28(m，1H)。MS(EI，m/z)：483.2[M-H]^-。

实施例3：(2R,3S)-2-{(2R,3R)-3-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-2-羟甲基-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-6-基}色满-3,5,7-三醇(6)的合成

向化合物5(103mg，0.213mmol)的乙酸(3mL)溶液中分批加入氰基硼氢化钠(50mg，0.796mmol)，加完后，所得混合物在室温下搅拌0.5小时。加入水(10mL)，用乙酸乙酯(15mL×3)萃取，合并的有机相用饱和碳酸氢钠溶液(10mL)洗涤，无水硫酸钠干燥。减压蒸除溶剂，产物经柱层析纯化(200～300目硅胶，乙酸乙酯:石油醚＝5:1洗脱)，得(2R,3S)-2-{(2R,3R)-3-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-2-羟甲基-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-6-基}色满-3,5,7-三醇(6)。¹H NMR(DMSO-d₆，400MHz)δ9.20(s，1H)，9.14(s，1H)，8.95(s，1H)，6.99-6.78(m，6H)，5.89(d，J＝2.0Hz，1H)，5.70(s，1H)，4.96-4.86(m，3H)，4.59-4.56(m，1H)，4.13(s，1H)，3.89-3.87(m，1H)，3.77(s，3H)，3.54-3.51(m，1H)，3.35-3.27(m，1H)，2.68-2.65(m，1H)，2.40-2.34(m，1H)。MS(EI，m/z)：467.2[M-H]^-。

实施例4：2-{8-羟基-3-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-2-羟甲基-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-6-基}色满-3,5,7-三醇(7)的合成

以化合物4为原料，合成化合物7的实验操作按照实施例3的制备方法。¹H NMR(DMSO-d₆，400MHz)δ9.17(s，1H)，9.12(s，1H)，9.07(s，1H)，8.93(s，1H)，6.98-6.97(m，1H)，6.85-6.76(m，2H)，6.42(d，J＝2.0Hz，1H)，6.34(d，J＝2.0Hz，1H)，5.88(d，J＝2.0Hz，1H)，5.69(d，J＝2.0Hz，1H)，4.92-4.90(m，1H)，4.84-4.79(m，2H)，4.51-4.49(m，1H)，4.09-4.05(m，1H)，3.85-3.80(m，1H)，3.77(s，3H)，3.49-3.45(m，1H)，3.40-3.38(m，1H)，2.64-2.60(m，1H)，2.38-2.32(m，1H)。MS(EI，m/z)：483.2[M-H]^-。

实施例5：3,5,7-三羟基-2-{3-(6-甲氧基吡啶-3-基)-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-6-基}色满-4-酮(21)和2-{3-(6-甲氧基吡啶-3-基)-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-6-基}色满-3,4,5,7-四醇(22)的合成

步骤A：将含有2,4,6-三羟基苯乙酮(5.0g，29.7mmol)、氯甲基甲醚(9.7g，120.5mmol)、碳酸钾(37.1g，269mmol)和丙酮(100mL)的混合物在回流下搅拌2小时。减压蒸除溶剂，加入水(50mL)，用乙酸乙酯(40mL×3)萃取，合并的有机相用饱和食盐水(30mL)洗涤，无水硫酸钠干燥。减压蒸除溶剂，产物经柱层析纯化(200～300目硅胶，甲基叔丁基醚:石油醚＝1:15～1:8洗脱)，得1-[2-羟基-4,6-二(甲氧基甲氧基)]苯乙酮(8)(5.1g)。收率为67.0％。¹H NMR(DMSO-d₆，400MHz)δ13.34(s，1H)，6.23(d，J＝2.4Hz，1H)，6.19(d，J＝2.4Hz，1H)，5.30(s，2H)，5.23(s，2H)，3.44(s，3H)，3.38(s，3H)，2.60(s，3H)。

步骤B：在冰水浴下，将氯甲基甲醚(2.52g，31.3mmol)滴加到含有化合物8(4.0g，15.6mmol)、氢氧化钠(1.84g，46mmol)、水(4mL)、四丁基溴化铵(252mg，0.782mmol)和二氯甲烷(60mL)的混合物中，加完后，所得混合物在室温下搅拌1小时。加入水(40mL)，用二氯甲烷(60mL×2)萃取，合并的有机相用饱和食盐水(30mL)洗涤，无水硫酸钠干燥。减压蒸除溶剂，得2,4,6-三(甲氧基甲氧基)苯乙酮(9)(4.6g)。收率为98.2％。

步骤C：向含有3,4-二羟基苯甲酸甲酯(25.0g，149mmol)、碳酸钾(20.5g，149mmol)和乙腈(500mL)的混合物中滴加溴化苄(25.4g，149mmol)，加完后，所得混合物在回流下搅拌过夜。减压蒸除大部分溶剂，加入水(400mL)，用乙酸乙酯(200mL×3)萃取，合并的有机相用饱和食盐水(100mL)洗涤，无水硫酸钠干燥。减压蒸除溶剂，产物经柱层析纯化(200～300目硅胶，乙酸乙酯:石油醚:二氯甲烷＝1:50:1～1:50:2洗脱)，得3-苄氧基-4-羟基苯甲酸甲酯(10)(4.7g)和4-苄氧基-3-羟基苯甲酸甲酯(11)(11.3g)。收率分别为12.2％和29.4％。

步骤D：将5-乙酰基-2-甲氧基吡啶(2.54g，16.8mmol)溶解于乙酸(40mL)，加入47％氢溴酸水溶液(5.79g，33.6mmol)，再滴加溴(2.95g，18.5mmol)的乙酸(5mL)溶液，加完后，升温到40℃，搅拌约3小时后，再加入溴(600mg，3.75mmol)，然后继续搅拌5小时。加入水(150mL)，用甲基叔丁基醚(60mL×4)萃取，合并的有机相用饱和食盐水(40mL)洗涤，无水硫酸钠干燥。减压蒸除溶剂，产物经柱层析纯化(200～300目硅胶，乙酸乙酯:石油醚＝1:100～1:10洗脱)，得2-溴-1-(6-甲氧基吡啶-3-基)乙酮(12)(1.91g)。收率为49.4％。

步骤E：将含有化合物10(1.84g，7.12mmol)、化合物12(1.64g，7.13mmol)、碳酸铯(2.90g，8.90mmol)和乙腈(25mL)的混合物在30℃搅拌2小时。加入水(120mL)，用乙酸乙酯(60mL×3)萃取，合并的有机相依次用水(40mL)和饱和食盐水(40mL)洗涤，无水硫酸钠干燥。减压蒸除溶剂，得3-苄氧基-4-[2-(6-甲氧基吡啶-3-基)-2-氧乙氧基]苯甲酸甲酯(13)(2.83g)。收率为97.4％。¹H NMR(DMSO-d₆，400MHz)δ8.90(d，J＝2.4Hz，1H)，8.23(dd，J＝2.4，8.8Hz，1H)，7.62-7.48(m，4H)，7.42-7.29(m，3H)，7.06(d，J＝8.8Hz，1H)，6.97(d，J＝8.8Hz，1H)，5.68(s，2H)，5.20(s，2H)，3.97(s，3H)，3.81(s，3H)。

步骤F：向化合物13(2.83g，6.95mmol)的甲醇(40mL)溶液中分批加入硼氢化钠(526mg，13.9mmol)，加完后，所得混合物在室温下搅拌4小时。加入水(120mL)，用乙酸乙酯(60mL×3)萃取，合并的有机相依次用水(40mL)和饱和食盐水(40mL)洗涤，无水硫酸钠干燥。减压蒸除溶剂，得3-苄氧基-4-[2-羟基-2-(6-甲氧基吡啶-3-基)乙氧基]苯甲酸甲酯(14)(2.61g)。收率为91.7％。

步骤G：向化合物14(2.6g，6.35mmol)的THF(40mL)溶液中加入5％钯碳(260mg)，所得混合物在氢气中30℃常压下搅拌3小时。通过硅藻土过滤，减压蒸除溶剂，得3-羟基-2-(3-羟基-4-甲氧基苯基)-5,7-二(甲氧基甲氧基)色满-4-酮(15)(1.96g)。收率为96.7％。

步骤H：向化合物15(1.94g，6.08mmol)和三苯基膦(2.15g，8.20mmol)的THF(35mL)溶液中加入偶氮二乙酸二异丙酯(1.66g，8.21mmol)，加完后，所得混合物在氮气下回流搅拌3.5小时。减压蒸除溶剂，产物经柱层析纯化(200～300目硅胶，乙酸乙酯:二氯甲烷＝1:1～10:1洗脱)，得3-(6-甲氧基吡啶-3-基)-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-6-甲酸甲酯(16)(1.75g)。收率为95.5％。¹H NMR(DMSO-d₆，400MHz)δ8.30(d，J＝2.4Hz，1H)，7.82(dd，J＝2.4，8.8Hz，1H)，7.53-7.49(m，2H)，7.06(d，J＝8.8Hz，1H)，6.99(d，J＝8.8Hz，1H)，5.33-5.30(m，1H)，4.53-4.50(m，1H)，4.32-4.27(m，1H)，3.87(s，3H)，3.81(s，3H)。MS(EI，m/z)：302.1[M+H]⁺。

步骤I：在冰水浴下，向含有氢化铝锂(441mg，11.6mmol)和THF(15mL)的混合物中滴加化合物16(1.75g，5.81mmol)的THF(7mL)溶液。加完后，继续搅拌5分钟，然后升温到室温继续搅拌30分钟。反应结束后，冷却到0～5℃，向反应混合物中依次缓慢加入水(0.5mL)、10％氢氧化钠溶液(1.0mL)和水(1.5mL)，加完后，升温到室温继续搅拌5分钟。通过硅藻土过滤除去不溶物，向滤液中加入乙酸乙酯(60mL)，用饱和食盐水(15mL×2)洗涤，无水硫酸钠干燥，减压蒸除溶剂，得3-(6-甲氧基吡啶-3-基)-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-6-甲醇(17)(1.52g)。收率为95.7％。

步骤J：将含有化合物17(1.50g，5.49mmol)、二氧化锰(2.39g，27.5mmol)和氯仿(15mL)的混合物在43℃搅拌过夜。通过硅藻土过滤除去不溶物，减压蒸除溶剂，产物经柱层析纯化(200～300目硅胶，乙酸乙酯:石油醚＝1:25～1:12洗脱)，得3-(6-甲氧基吡啶-3-基)-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-6-甲醛(18)(1.26g)。收率为84.6％。

步骤K：在室温下，将化合物18(300mg，1.11mmol)和化合物9(332mg，1.11mmol)加入到氢氧化钾(186mg，3.32mol)的乙醇(10mL)溶液中，加完后，所得混合物在30℃搅拌过夜。减压蒸除大部分溶剂，加入水(70mL)，用乙酸乙酯(70mL×3)萃取，合并的有机相用饱和食盐水(40mL)洗涤，无水硫酸钠干燥。减压蒸除溶剂，产物经柱层析纯化(200～300目硅胶，乙酸乙酯:石油醚＝1:20～1:2洗脱)，得3-{3-(6-甲氧基吡啶-3-基)-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-6-基}-1-[2,4,6-三(甲氧基甲氧基)苯基]丙-2-烯-1-酮(19)(510mg)。收率为83.0％。

步骤L：将氢氧化钠(360mg，9.0mmol)溶解于水(1.5mL)和甲醇(15mL)，然后依次加入化合物19(500mg，0.903mmol)和30％双氧水(1.03g，9.09mmol)，所得混合物在25℃搅拌过夜。加入饱和食盐水(40mL)，用乙酸乙酯(40mL×3)萃取，合并的有机相用饱和食盐水(20mL)洗涤，无水硫酸钠干燥。减压蒸除溶剂，得{3-{3-(6-甲氧基吡啶-3-基)-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-6-基}环氧乙烷-2-基}[2,4,6-三(甲氧基甲氧基)苯基]甲酮(20)(500mg)。收率为97.2％。

步骤M：向化合物20(490mg，0.860mmol)的甲醇(9mL)和THF(3mL)溶液中滴加浓盐酸(1.2mL)，加完后，所得混合物在65℃搅拌2小时。减压蒸除大部分溶剂，加入水(20mL)，用乙酸乙酯(25mL×3)萃取，合并的有机相用饱和食盐水(15mL)洗涤，无水硫酸钠干燥。减压蒸除溶剂，产物经柱层析纯化(200～300目硅胶，乙酸乙酯:石油醚:二氯甲烷＝1:15:1～1:4:1洗脱)，得3,5,7-三羟基-2-{3-(6-甲氧基吡啶-3-基)-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-6-基}色满-4-酮(21)。¹H NMR(DMSO-d₆，400MHz)δ11.89(s，1H)，10.85(s，1H)，8.31(d，J＝2.0Hz，1H)，7.85-7.82(m，1H)，7.14-7.13(m，1H)，7.05-7.02(m，1H)，6.98-6.96(m，1H)，6.90(d，J＝8.8Hz，1H)，5.92-5.91(m，1H)，5.88-5.87(m，1H)，5.83-5.82(m，1H)，5.29-5.27(m，1H)，5.11-5.08(m，1H)，4.64-4.59(m，1H)，4.46-4.43(m，1H)，4.24-4.17(m，1H)，3.87(s，3H)。MS(EI，m/z)：436.1[M-H]^-。

步骤N：化合物21用硼氢化钠还原，得2-{3-(6-甲氧基吡啶-3-基)-2,3-二氢苯并[1,4]二恶烷-6-基}色满-3,4,5,7-四醇(22)，具体实验操作按照实施例1步骤D的制备方法。MS(EI，m/z)：438.1[M-H]^-。

实施例6：3,5,7-三羟基-2-{3-(6-甲氧基吡啶-3-基)-2-甲基-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-6-基}色满-4-酮(37)和2-{3-(5-甲氧基吡啶-2-基)-2-甲基-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-6-基}色满-3,4,5,7-四醇(38)的合成

步骤A：在冰水浴下，将乙酰氯(3.22g，41.0mmol)滴加到化合物11(5.3g，20.5mmol)和三乙胺(3.11g，30.7mmol)的二氯甲烷(25mL)溶液中。加完后，所得混合物在室温下搅拌2小时。加入水(50mL)，用二氯甲烷(80mL×3)萃取，合并的有机相依次用水(40mL)和饱和食盐水(40mL)洗涤，无水硫酸钠干燥。减压蒸除溶剂，产物用二氯甲烷/石油醚重结晶，得3-乙酰氧基-4-苄氧基苯甲酸甲酯(23)(5.5g)。收率为89.3％。

步骤B：向化合物23(8.6g，28.6mmol)的THF(120mL)溶液中加入5％钯碳(800mg)，所得混合物在氢气中25℃常压下搅拌过夜。通过硅藻土过滤，减压蒸除溶剂，产物用石油醚重结晶，得3-乙酰氧基-4-羟基苯甲酸甲酯(24)(5.7g)。收率为94.8％。

步骤C：在0～5℃下，将苄醇(7.68g，71.0mmol)滴加到60％氢化钠(2.84g，71.0mmol)的DMF(60mL)悬浮液中。加完后，继续搅拌10分钟，然后分批加入5-溴-2-氰基吡啶(10.0g，54.6mmol)。所得混合物在该温度下继续搅拌15分钟。加入水(180mL)，过滤，滤饼用水(100mL)淋洗，然后用乙酸乙酯/石油醚重结晶，得5-苄氧基-2-氰基吡啶(25)(9.2g)。收率为80.2％。

步骤D：在-5～0℃下，将2M乙基溴化镁THF溶液(26.5mL，53mmol)滴加到化合物25(8.6g，40.9mmol)的THF(30mL)溶液中。加完后，所得混合物在该温度下继续搅拌1小时。缓慢加入水(90mL)，用2M盐酸调节pH值至3～4，用乙酸乙酯(100mL×3)萃取，合并的有机相依次用水(50mL)和饱和食盐水(50mL)洗涤，无水硫酸钠干燥。减压蒸除溶剂，得1-(5-苄氧基吡啶-2-基)丙-1-酮(26)(9.74g)。收率为98.7％。

步骤E和F的实验操作按照实施例5中步骤D和E的制备方法，得3-乙酰氧基-4-{[1-(5-苄氧基吡啶-2-基)-1-氧丙-2-基]氧基}苯甲酸甲酯(28)。¹H NMR(DMSO-d₆，400MHz)δ8.54(d，J＝2.8Hz，1H)，8.03(d，J＝8.8Hz，1H)，7.75-7.67(m，3H)，7.52-7.50(m，2H)，7.45-7.36(m，3H)，6.91(d，J＝8.4Hz，1H)，6.28(q，J＝6.8Hz，1H)，5.34(s，2H)，3.81(s，3H)，2.30(s，3H)，1.57(d，J＝6.8Hz，3H)。

步骤G：将含有化合物28(5.0g，11.1mmol)、碳酸钾(3.08g，22.3mmol)和甲醇(120mL)的混合物在5～10℃搅拌15分钟，然后加入硼氢化钠(1.26g，33.3mmol)，所得混合物在室温下搅拌0.5小时。加入饱和食盐水(360mL)，用2M柠檬酸溶液调节pH值至7～8。用乙酸乙酯(100mL×3)萃取，合并的有机相用饱和食盐水(50mL×2)洗涤，无水硫酸钠干燥，然后经短硅胶垫过滤。减压蒸除溶剂，得4-{[1-(5-苄氧基吡啶-2-基)-1-羟基丙-2-基]氧基}-3-羟基苯甲酸甲酯(29)(4.49g)。收率为98.8％。¹H NMR(CDCl₃，400MHz)δ8.32(s，1H)，7.60(d，J＝2.0Hz，1H)，7.52-7.50(m，1H)，7.42-7.34(m，7H)，6.96(d，J＝8.4Hz，1H)，5.12(s，2H)，4.85-4.84(m，1H)，4.58-4.56(m，1H)，3.87(s，3H)，1.32(d，J＝6.4Hz，3H)。

步骤H：向化合物29(4.49g，11.0mmol)和三苯基膦(3.88g，14.8mmol)的THF(20mL)溶液中加入偶氮二乙酸二异丙酯(2.99g，14.8mmol)，加完后，所得混合物在氮气下回流搅拌2.5小时。冷却到室温，减压蒸除溶剂，产物经柱层析纯化(200～300目硅胶，乙酸乙酯:石油醚＝1:30～1:10洗脱)，得3-(5-苄氧基吡啶-2-基)-2-甲基-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-6-甲酸甲酯(30)(3.87g)。收率为89.9％。

步骤I：向化合物30(2.78g，7.10mmol)的DMF(30mL)溶液中加入5％钯碳(280mg)，所得混合物在氢气中40℃常压下搅拌4小时。通过硅藻土过滤，加入水(120mL)，用乙酸乙酯(60mL×3)萃取，合并的有机相依次用水(30mL×2)和饱和食盐水(30mL)洗涤，无水硫酸钠干燥。减压蒸除溶剂，得3-(5-羟基吡啶-2-基)-2-甲基-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-6-甲酸甲酯(31)(1.80g)。收率为84.1％。

步骤J：将含有化合物31(575mg，1.91mmol)、碳酸钾(343mg，2.49mmol)、碘甲烷(406mg，2.86mmol)和DMF(10mL)的混合物在30℃搅拌过夜。加入水(40mL)，用乙酸乙酯(20mL×3)萃取，合并的有机相依次用水(15mL×2)和饱和食盐水(15mL)洗涤，无水硫酸钠干燥。减压蒸除溶剂，得3-(5-甲氧基吡啶-2-基)-2-甲基-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-6-甲酸甲酯(32)(617mg)。收率为100％。

步骤K和L的实验操作按照实施例6中步骤G和H的制备方法，得3-(5-甲氧基甲氧基吡啶-2-基)-2-甲基-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-6-甲醛(34)。¹H NMR(DMSO-d₆，400MHz)δ9.83(s，1H)，8.34(d，J＝2.4Hz，1H)，7.53-7.46(m，4H)，7.13(d，J＝8.4Hz，1H)，4.96(d，J＝7.2Hz，1H)，4.62-4.58(m，1H)，3.86(s，3H)，1.17(d，J＝7.2Hz，3H)。

步骤M、N和O的实验操作按照实施例6中步骤I、J和K的制备方法，得3,5,7-三羟基-2-{3-(5-甲氧基吡啶-2-基)-2-甲基-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-6-基}色满-4-酮(37)。¹H NMR(DMSO-d₆，400MHz)δ11.90(s，1H)，10.87(s，1H)，8.34(s，1H)，7.50(s，2H)，7.11-6.96(m，3H)，5.92-5.84(m，3H)，5.10-5.08(m，1H)，4.88-4.86(m，1H)，4.61(s，1H)，4.45(s，1H)，3.87(s，3H)，1.15(s，3H)。MS(EI，m/z)：450.1[M-H]^-。

步骤P：化合物37用硼氢化钠还原，得2-{3-(5-甲氧基吡啶-2-基)-2-甲基-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-6-基}色满-3,4,5,7-四醇(38)，具体实验操作按照实施例1步骤D的制备方法。MS(EI，m/z)：452.1[M-H]^-。

实施例7：3,5,7-三羟基-2-{3-(6-羟基吡啶-3-基)-2-甲基-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-6-基}色满-4-酮(44)和2-{3-(5-羟基吡啶-2-基)-2-甲基-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-6-基}色满-3,4,5,7-四醇(45)的合成

以化合物30为原料，步骤A、B、C、D和E的实验操作按照实施例5中步骤I、J、K、L和M的制备方法，得2-{3-(5-苄氧基吡啶-2-基)-2-甲基-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-6-基}-3,5,7-三羟基色满-4-酮(43)。¹H NMR(DMSO-d₆，400MHz)δ11.90(s，1H)，10.86(s，1H)，8.40(d，J＝2.8Hz，1H)，7.56-7.36(m，7H)，7.11-6.94(m，3H)，5.92-5.82(m，3H)，5.22(s，2H)，5.10-5.07(m，1H)，4.87-4.86(m，1H)，4.63-4.58(m，1H)，4.47-4.42(m，1H)，1.14(d，J＝6.0Hz，3H)。

步骤F：向化合物43(780mg，1.57mmol)的DMF(10mL)溶液中加入5％钯碳(80mg)，所得混合物在氢气中40℃常压下搅拌过夜。通过硅藻土过滤后，加入水(40mL)，过滤，滤饼用乙酸乙酯(20mL×3)溶解，然后用饱和食盐水(20mL)洗涤，无水硫酸钠干燥。减压蒸除溶剂，所得产物用乙酸乙酯/石油醚重结晶，得3,5,7-三羟基-2-{3-(5-羟基吡啶-2-基)-2-甲基-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-6-基}色满-4-酮(44)。¹H NMR(DMSO-d₆，400MHz)δ11.90(s，1H)，10.87(s，1H)，10.16(s，1H)，8.17(d，J＝2.8Hz，1H)，7.39-7.37(m，1H)，7.26-7.23(m，1H)，7.10(s，1H)，7.03-7.01(m，1H)，6.96-6.94(m，1H)，5.92-5.82(m，3H)，5.10-5.07(m，1H)，4.80-4.78(m，1H)，4.63-4.59(m，1H)，4.43-4.39(m，1H)，1.15(d，J＝6.4Hz，3H)。MS(EI，m/z)：436.1[M-H]^-。

步骤G：化合物44用硼氢化钠还原，得2-{3-(5-羟基吡啶-2-基)-2-甲基-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-6-基}色满-3,4,5,7-四醇(45)，具体实验操作按照实施例1步骤D的制备方法。MS(EI，m/z)：438.1[M-H]^-。

实施例8：(2R,3S)-3,5,7-三羟基-2-{(2R,3R)-3-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-2-羟甲基-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-6-基}色满-4-酮肟(46)和(2R,3S)-4-氨基-2-{(2R,3R)-3-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-2-羟甲基-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-6-基}色满-3,5,7-三醇(47)的合成

步骤A：将含有(2R,3R)-3,5,7-三羟基-2-{(2R,3R)-3-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-2-羟甲基-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-6-基}色满-4-酮(500mg，1.04mmol)、盐酸羟胺(94mg，1.35mmol)和吡啶(5mL)的混合物在70℃搅拌过夜。反应结束后，产物经柱层析纯化(200～300目硅胶，二氯甲烷:甲醇＝1:100～1:40洗脱)，得(2R,3S)-3,5,7-三羟基-2-{(2R,3R)-3-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-2-羟甲基-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-6-基}色满-4-酮肟(46)(481mg)。收率为93.0％。¹H NMR(DMSO-d₆，400MHz)δ11.34-11.32(m，1H)，11.09-10.80(m，1H)，9.85(s，1H)，9.15-9.14(m，1H)，7.08-6.72(m，5H)，6.56-6.46(m，1H)，5.93-5.85(m，2H)，5.36-5.32(m，1H)，4.96-4.90(m，3H)，4.17-4.14(m，1H)，3.79-3.75(m，3H)，3.62-3.60(m，3H)。MS(EI，m/z)：496.1[M-H]^-。

步骤B：将含有化合物46(100mg，0.207mmol)、雷尼镍(10mg)和甲醇(15mL)的混合物在氢气下回流搅拌过夜。冷却到室温，过滤，滤饼用少量乙酸乙酯淋洗。减压蒸除溶剂，产物经柱层析纯化(200～300目硅胶，甲醇:二氯甲烷＝1:50～1:20洗脱)，得(2R,3S)-4-氨基-2-{(2R,3R)-3-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-2-羟甲基-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-6-基}色满-3,5,7-三醇(47)。¹H NMR(DMSO-d₆，400MHz)δ9.27-9.02(m，3H)，7.03-6.81(m，7H)，5.78-5.64(m，3H)，5.18-5.14(m，1H)，4.96-4.90(m，3H)，4.61-4.59(m，1H)，4.18-4.13(m，1H)，3.80-3.63(m，3H)，3.61-3.53(m，3H)。MS(EI，m/z)：482.2[M-H]^-。

实施例9：(2R,3S)-2-{(2R,3R)-2-羟甲基-3-[3-甲氧基-4-(三氘代甲氧基)苯基]-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-6-基}-5,7-二(三氘代甲氧基)色满-3-醇(55)的合成

将含有化合物6(110mg，0.235mmol)、碳酸钾(195mg，1.41mmol)、氘代碘甲烷(136mg，0.938mmol)和DMF(5mL)的混合物在室温下搅拌过夜。加入水(20mL)，用乙酸乙酯(20mL×3)萃取，合并的有机相用饱和食盐水(10mL×2)洗涤，无水硫酸钠干燥。减压蒸除溶剂，产物经柱层析纯化(200～300目硅胶，乙酸乙酯:THF:二氯甲烷＝1:1:40～1:1:20洗脱)，得(2R,3S)-2-{(2R,3R)-2-羟甲基-3-[3-甲氧基-4-(三氘代甲氧基)苯基]-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-6-基}-5,7-二(三氘代甲氧基)色满-3-醇(55)。¹H NMR(DMSO-d₆，400MHz)δ7.03-6.86(m，6H)，6.11(d，J＝2.4Hz，1H)，6.03(d，J＝2.4Hz，1H)，5.05(d，J＝5.2Hz，1H)，4.97-4.92(m，2H)，4.69-4.66(m，1H)，4.19-4.15(m，1H)，3.97-3.92(m，1H)，3.82-3.74(m，4H)，3.55-3.51(m，1H)，2.69-2.65(m，1H)，2.46-2.40(m，1H)。MS(ESI，m/z)：518.3[M-H]^-。

实施例10：2-{8-羟基-3-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-2-羟甲基-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-6-基}-7-甲氧基-色满-3,4,5-三醇(66)的合成

步骤A：将没食子酸甲酯(30.0g，163mmol)、N,N-二异丙基乙胺(126g，977mmol)溶解于二氯甲烷(120mL)，然后在冰水浴下滴加氯甲基甲醚(52.5g，652mmol)，加完后，升温到室温并继续搅拌1.5小时，加入水(240mL)，分层，水层用二氯甲烷(50mL×2)萃取，合并的有机相依次用水(50mL×2)和饱和食盐水(50mL)洗涤，无水硫酸钠干燥。减压蒸除溶剂，产物经柱层析纯化(200～300目硅胶，乙酸乙酯:二氯甲烷:石油醚＝1:1:10～1:1:6)洗脱，得3,4,5-三-甲氧基甲氧基-苯甲酸甲酯(56)(47.9g)，收率为93.0％。

步骤B：将四氢铝锂(2.88g，75.9mmol)悬浮于THF中，在冰盐浴下缓慢滴加化合物56(20.0g，63.2mmol)的THF溶液，加完后，继续保温搅拌40分钟。向反应液中依次滴加水(3mL)，10％氢氧化钠溶液(6mL)和水(9mL)，搅拌10分钟，经过硅藻土过滤，无水硫酸钠干燥。减压整除溶剂，得(3,4,5-三甲氧基甲氧基苯基)甲醇(57)(18.1g)，收率为99.5％。

步骤C：将含有化合物57(18.0g，62.4mmol)、三氯甲烷(150mL)和二氧化锰(27.3g，312mmol)的混合物在43℃下搅拌过夜，反应液垫硅藻土过滤，二氯甲烷淋洗滤渣，减压蒸除溶剂，得3,4,5-三-甲氧基甲氧基-苯甲醛(58)(17.9g)，收率为100％。

步骤D：将含有2,4,6-三羟基苯乙酮(25.6g，149mmol)、碳酸钾(20.6g，149mmol)、硫酸二甲酯(28.1g，223mmol)和丙酮(250mL)的混合物在回流下搅拌2小时。反应液冷却到室温，过滤除去不溶物，减压蒸除溶剂，产物经柱层析纯化(200～300目硅胶，乙酸乙酯:二氯甲烷:石油醚＝1:1:40～1:1:6)洗脱，得1-(2,6-二羟基-4-甲氧基-苯基)乙酮(59)(8.51g)，收率为31.4％。

步骤E:将化合物59(8.50g，46.7mmol)、N,N-二异丙基乙胺(15.1g，117mmol)溶解于二氯甲烷(50ml)，然后在冰水浴下滴加氯甲基甲醚(5.63g，70.0mmol)，加完后，升温到室温并继续搅拌1小时。加入水(50mL)，分层，水层用二氯甲烷(30mL)洗涤，合并的有机相用饱和食盐水(50mL)洗涤，无水硫酸钠干燥。减压蒸除溶剂，产物经柱层析纯化(200～300目硅胶，乙酸乙酯:石油醚＝1:40～1:20洗脱)，得1-(2-羟基-4-甲氧基-6-甲氧基甲氧基-苯基)乙酮(60)(8.31g)，收率为78.6％。

以化合物60为原料，合成化合物64的实验操作按照实施例5中步骤B、K、L、M的制备方法得3,5-二羟基-7-甲氧基-2-(3,4,5-三羟基-苯基)色满-4-酮(64)(1.70g)。¹H NMR(DMSO-d₆，400MHz)δ11.86(s，1H)，8.96(s，2H)，8.24(s，1H)，6.45(s，2H)，6.10(d，J＝2.4Hz，1H)，6.07(d，J＝2.4Hz，1H)，5.84(d，J＝6.4Hz，1H)，4.95(d，J＝10.8Hz，1H)，4.49-4.45(m，1H)，3.78(s，3H)。

以化合物64为原料，合成化合物65的实验操作按照实施例1中步骤C的制备方法得3,5-二羟基-2-{8-羟基-3-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-2-羟甲基-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-6-基}-7-甲氧基色满-4-酮(65)¹H NMR(DMSO-d₆，400MHz)δ11.85(s，1H)，9.23(s，1H)，9.16(s，1H)，7.00(s，1H)，6.86-6.77(m，2H)，6.11(s，1H)，6.09(d，J＝2.0Hz，1H)，5.87(d，J＝2.4Hz，1H)，5.04(d，J＝11.2Hz，1H)，4.87-4.85(m，2H)，4.60-4.56(m，1H)，4.14-4.10(m，1H)，3.79(s，3H)，3.78(s，3H)，3.51-3.44(m，3H)。

以化合物65为原料，合成化合物66的实验操作按照实施例1中步骤D的制备方法得2-{8-羟基-3-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-2-羟甲基-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-6-基}-7-甲氧基-色满-3,4,5-三醇(66)。MS(ESI，m/z)：515.2[M+H]⁺。

实施例11：2-{8-羟基-3-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-2-羟甲基-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-6-基}-7-甲氧基色满-3,5-二醇(67)的合成

以化合物66为原料，合成化合物67的实验操作按照实施例3中操作步骤的制备方法得(67)。¹H NMR(DMSO-d₆，400MHz)δ9.39(s，1H)，9.13-9.09(m，2H)，6.98(s，1H)，6.85-6.76(m，2H)，5.98(d，J＝2.4Hz，1H)，5.89(d，J＝2.4Hz，1H)，4.98(d，J＝5.2Hz，1H)，4.84-4.80(m，2H)，4.58-4.56(m，1H)，4.10-4.07(m，1H)，3.90-3.85(m，1H)，3.78(s，3H)，3.62(s，3H)，3.49-3.45(m，1H)，3.41-3.38(m，1H)，2.66-2.61(m，1H)，2.43-2.37(m，1H)。MS(ESI，m/z)：499.2[M+H]⁺。

实施例12：7-{(3-羟基-5,7二甲氧基色满-2-基)-2-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-3-羟基甲基-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷}-5-醇(78)的合成。

步骤A：将含有没食子酸甲酯(20.0g，109mmol)、碳酸钾(90.1g，652mmol)、DMF(120mL)、溴化苄(74.3g，434mmol)的混合物在40℃搅拌过夜，加入水(240mL),用二氯甲烷(120mL×2)萃取，合并的有机相依次用水(50mL×2)和饱和食盐水(50mL)洗涤，无水硫酸钠干燥。减压蒸除溶剂，得3,4,5-三-苄氧基-苯甲酸甲酯(68)(46.5g)，收率为94.2％。

以化合物68为原料，合成化合物70的实验操作按照实施例10中步骤B、C的制备方法得3,4,5-三-苄氧基-苯甲醛(70)。

以化合物70为原料，合成化合物73的实验操作按照实施例5中步骤K、L、M的制备方法得3,5,7-三羟基-2-(3,4,5-三-苄氧基-苯基)色满-4酮(73)。¹H NMR(DMSO-d₆，400MHz)δ11.92(s，1H)，10.90(s，1H)，7.50-7.26(m，15H)，7.06(s，2H)，5.94(d，J＝2.0Hz，1H)，5.17-5.09(m，6H)，4.95(s，2H)，4.76-4.72(m，1H)。

以化合物73为原料，合成化合物74的实验操作按照实施例1中步骤D的制备方法得2-(3,4,5-三苄氧基-苯基)色满-3,4,5,7-四醇(74)。

以化合物74为原料，合成化合物75的实验操作按照实施例3的制备方法得2-(3,4,5-三苄氧基-苯基)色满-3,5,7-三醇(75)。

步骤I：将化合物75(1.10g，1.91mmol)、碳酸钾(792mg，5.72mmol)、碘甲烷(682mg，4.77mmol)和DMF(25mL)的混合物在室温下搅拌过夜。加入水(50ml)，用乙酸乙酯(25ml×2)萃取，合并的有机相依次用水(50mL×2)和饱和食盐水(50mL)洗涤，无水硫酸钠干燥。减压蒸除溶剂，产物经柱层析纯化(200～300目硅胶，乙酸乙酯:二氯甲烷:石油醚＝1:1:20～1:1:8洗脱)，得5,7-二-甲氧基-2-(3,4,5-三-苄氧基苯基)色满-3-醇(76)(1.00g)，收率为86.7％。

以化合物76为原料，合成化合物77的实验操作按照实施例5步骤G的制备方法得5-(3-羟基-5,7-二-甲氧基-色满-2基)-苯-1,2,3-三醇(77)(500mg)，收率为91.4％。¹H NMR(DMSO-d₆，400MHz)δ8.79(s，2H)，8.03(s，1H)，6.25(s，2H)，6.10(d，J＝2.4Hz，1H)，6.02(d，J＝2.4Hz，1H)，5.95(d，J＝4.8Hz，1H)，4.53(d，J＝6.8Hz，1H)，3.87-3.81(m，1H)，3.73(s，3H)，3.69(s，3H)，2.65-2.59(m，1H)，2.44-2.38(m，1H)。

以化合物77为原料，合成化合物78的实验操作按照实施例1步骤C的制备方法得7-(3-羟基-5,7-二甲氧基-色满-2-基)-2-(4-羟基-3-甲氧基-苯基)-3羟基甲基-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-5-醇(78)。¹H NMR(DMSO-d₆，400MHz)δ9.17-9.15(m，2H)，6.97(s，1H)，6.84-6.78(m，2H)，6.42(d，J＝2.0Hz，1H)，6.33(d，J＝2.0Hz，1H)，6.15(d，J＝2.0Hz，1H)，6.03(d，J＝2.0Hz，1H)，5.05(d，J＝4.8Hz，1H)，4.87-4.81(m，2H)，4.61(d，J＝6.8Hz，1H)，4.10-4.06(m，1H)，3.77(s，3H)，3.73(s，3H)，3.68(s，3H)，3.57-3.51(m，2H)，2.64-2.58(m，1H)，2.45-2.39(m，1H)。MS(ESI，m/z)：513.2[M+H]⁺。

实施例13：2-{8-羟基-3-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-2-羟甲基-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-6-基}-5-甲氧基色满-3,7–二醇(85)的合成。

步骤A:将化合物73(2.0g，3.39mmol)和N,N-二异丙基乙胺(569mg，4.40mmol)溶于二氯甲烷(20mL)，然后在冰水浴下滴加氯甲基甲醚，加完后，升温到室温并继续搅拌1小时，加入水(20mL)，分层，水层用二氯甲烷(10mL×2)萃取，合并的有机相用饱和食盐水(20mL)洗涤，无水硫酸钠干燥。减压蒸除溶剂，产物经柱层析纯化(200～300目硅胶，乙酸乙酯:石油醚＝1:10～1:4洗脱)，得3,5-二羟基-7-甲氧基甲氧基-2-(3,4,5-三苄氧基-苯基)色满4-酮(79)(1.82g)，收率84.7％。

以化合物79为原料，合成化合物80的实验操作按照实施例1中步骤D的制备方法得7-甲氧基甲氧基-2-(3,4,5-三苄氧基-苯基)色满-3,4,5-三醇(80)。

以化合物80为原料，合成化合物81的实验操作按照实施例3的制备方法得7-甲氧基甲氧基-2-(3,4,5-三苄氧基-苯基)色满-3,5-二醇(81)。

步骤D：将化合物81(1.00g，1.61mmol)、碳酸钾(267mg，1.93mmol)、碘甲烷(343mg，2.42mmol)和DMF(10mL)的混合物在室温下搅拌5小时。加入水(20mL)，用乙酸乙酯(20mL×2)萃取，合并的有机相用饱和食盐水(20mL)洗涤，无水硫酸钠干燥。减压蒸除溶剂，产物经柱层析纯化(200～300目硅胶，乙酸乙酯:石油醚＝1:15～1:6洗脱)，得5-甲氧基-7-甲氧基甲氧基-2-(3,4,5-三苄氧基-苯基)色满-3-醇(82)(610mg)，收率59.7％。¹H NMR(DMSO-d₆，400MHz)δ7.44-7.27(m，15H)，6.83(s，2H)，6.24(d，J＝2.4Hz，1H)，6.16(d，J＝2.4Hz，1H)，5.15-5.09(m，1H)，4.92(s，2H)，4.66(d，J＝7.6Hz，1H)，4.05-4.00(m，1H)，3.75(s，3H)，3.65-3.57(m，1H)，3.36(s，3H)，2.73-2.67(m，1H)，2.47-2.40(m，1H)。

步骤E:将化合物82(580mg，0.914mmol)、甲醇(6mL)、四氢呋喃(2mL)、浓盐酸(2mL)的混合物在40℃条件下搅拌30分钟，加水(20mL)，乙酸乙酯(20mL×2)萃取，合并的有机相用饱和食盐水(20mL)洗涤，无水硫酸钠干燥。减压蒸除溶剂，得5-甲氧基-2-(3,4,5-三苄氧基-苯基)色满-3,7-二醇(83)(510mg)，收率为98.1％。

以化合物83为原料，合成化合物84的实验操作按照实施例5中步骤G的制备方法得5-(3,7-二羟基-5-甲氧基色满-2-基)苯-1,2,3-三醇(84)。

以化合物84为原料，合成化合物85的实验操作按照实施例1中步骤C的制备方法得2-{8-羟基-3-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-2-羟甲基-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-6-基}-5-甲氧基色满-3,7-二醇(85)。¹H NMR(DMSO-d₆，400MHz)δ9.23(s，1H)，9.15(s，1H)，9.12(s，1H)，6.97(s，1H)，6.84-6.75(m，2H)，6.41(d，J＝2.0Hz，1H)，6.33(d，J＝2.0Hz，1H)，5.97(d，J＝2.4Hz，1H)，5.85(d，J＝2.4Hz，1H)，4.98(d，J＝4.8Hz，1H)，4.83-4.10(m，2H)，4.55(d，J＝6.8Hz，1H)，4.09-4.05(m，1H)，3.88-3.84(m，1H)，3.83(s，3H)，3.77(s，3H)，3.68-3.66(m，1H)，3.50-3.48(m，1H)，2.63-2.55(m，1H)，2.40-2.34(m，1H)。MS(ESI，m/z)：497.2[M-H]^-。

实施例14：2-{8-羟基-3-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-2-羟甲基-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-6-基}-5,7-二甲氧基色满-3,4-二醇(92)的合成。

步骤A：将含有2,4,6-三羟基苯乙酮(25.0g，149mmol)、碳酸钾(20.6g，149mmol)、硫酸二甲酯(28.1g，223mmol)和丙酮(250mL)的混合物在回流下搅拌2小时。冷至室温，过滤除去不溶物，减压蒸除溶剂，产物经柱层析纯化(200～300目硅胶，乙酸乙酯:二氯甲烷:石油醚＝1:1:40～1:1:6)洗脱，得1-(4-羟基-2,6-甲氧基-苯基)乙酮(86)(16.0g)，收率为54.9％。

以化合物86为原料，合成化合物91的实验操作按照实施例1中步骤D的制备方法得3-羟基-2-{8-羟基-3-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-2-羟甲基-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-6-基}-5,7-二甲氧基色满-4-酮(91)。¹H NMR(DMSO-d₆，400MHz)δ9.19(s，1H)，9.15(s，1H)，7.00(s，1H)，6.86-6.76(m，2H)，6.56(d，J＝2.4Hz，1H)，6.52(d，J＝2.4Hz，1H)，6.21(d，J＝2.4Hz，1H)，6.17(d，J＝2.4Hz，1H)，5.36(d，J＝4.8Hz，1H)，4.97-4.85(m，2H)，4.29-4.26(m，1H)，4.11-4.09(m，1H)，3.80(s，3H)，3.79(s，3H)，3.77(s，3H)，3.51-3.49(m，1H)，3.47-3.46(m，1H)。MS(ESI，m/z)：549.2[M+Na]⁺。

以化合物91为原料，合成化合物92的实验操作按照实施例1中步骤D的制备方法得2-{8-羟基-3-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-2-羟甲基-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-6-基}-5,7-二甲氧基色满-3,4-二醇(92)。¹H NMR(DMSO-d₆，400MHz)δ9.15(s，1H)，9.10(s，1H)，6.99(s，1H)，6.85-6.75(m，2H)，6.46(d，J＝2.0Hz，1H)，6.36(d，J＝2.0Hz，1H)，6.14(d，J＝2.4Hz，1H)，6.02(d，J＝2.4Hz，1H)，5.18(d，J＝5.6Hz，1H)，4.90-4.81(m，2H)，4.60-4.58(m，2H)，4.50(d，J＝4.4Hz，1H)，4.09-4.06(m，1H)，3.77(s，3H)，3.75(s，3H)，3.70(s，3H)，3.46-3.43(m，3H)。MS(ESI，m/z)：551.2[M+Na]⁺。

实施例15：7-氟-2-{8-羟基-3-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-2-羟甲基-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-6-基}色满–3,4,5-三醇(101)的合成。

步骤A:将化合物1,3-二甲氧基-5-氟苯(6.50g，41.6mmol)溶解于二氯甲烷(65ml)中，在冰水浴下滴加三溴化硼(24.0g，95.7mmol)，加完后，升温到室温并继续搅拌过夜。将反应液滴加到冰水中，用饱和碳酸氢钠溶液调节pH值至7～8，用乙酸乙酯(100mL×2)萃取，合并的有机相用饱和食盐水(100mL)洗涤，无水硫酸钠干燥。减压蒸除溶剂，产物经柱层析纯化(200～300目硅胶，乙酸乙酯:石油醚＝1:20～1:10洗脱)，得5-氟苯-1,3-二醇(93)(4.82g)，收率为90.4％。

步骤B：将化合物93(4.80g，37.5mmol)、三氯化铝(15.0g，112mmol)、氯苯(50ml)的混合物在45℃条件下搅拌10分钟，乙酰氯(4.12g，52.5mmol)缓慢滴加入反应体系，在75℃条件下搅拌过夜。将反应体系滴加到冰水中，2mol/L盐酸调pH值至3～4，加入乙酸乙酯(60ml×2)萃取，合并的有机相用饱和食盐水(60mL)洗涤，无水硫酸钠干燥。减压蒸除溶剂，产物经柱层析纯化(200～300目硅胶，乙酸乙酯:石油醚＝1:40～1:20洗脱)，得1-(4-氟-2,6-二羟基-苯基)乙酮(94)(2.48g)，收率为38.9％。

以化合物94为原料，合成化合物101的实验操作按照实施例10中步骤E、F、G、H、I、J、K的制备方法得7-氟-2-{8-羟基-3-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-2-羟甲基-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-6-基}色满–3,4,5-三醇(101)。¹H NMR(DMSO-d₆，400MHz)δ9.91(br，1H)，9.21(br，2H)，6.98(s，1H)，6.94-6.76(m，2H)，6.48(d，J＝1.2Hz，1H)，6.39(d，J＝1.2Hz，1H)，6.22-6.19(m，1H)，6.14-6.11(m，1H)，5.32-5.31(d，J＝6.0Hz，1H)，4.83(d，J＝8.0Hz，1H)，4.72(d，J＝6.8Hz，1H)，4.64(d，J＝8.8Hz，1H)，4.10-4.07(m，1H)，3.77(s，3H)，3.74-3.65(m，2H)，3.54-3.52(m，1H)。MS(ESI，m/z)：501.2[M-H]^-。

实施例16：7-乙氧基-2-{8-羟基-3-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-2-羟甲基-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-6-基}色满–3,5-二醇(105)的合成。

步骤A：将含有化合物81(750mg，1.21mmol)、碳酸钾(217mg，1.57mmol)、溴化苄(310mg，1.81mmol)和DMF(10mL)的混合物在室温下搅拌过夜。加入水(20mL)，用乙酸乙酯(20mL×2)萃取，合并的有机相用饱和食盐水(20mL)洗涤，无水硫酸钠干燥。减压蒸除溶剂，产物经柱层析纯化(200～300目硅胶，乙酸乙酯:石油醚＝1:10～1:5洗脱)，得5-苄氧基-7-甲氧基甲氧基-2-(3,4,5-三苄氧基-苯基)色满-3-醇(102)(640mg)，收率为74.5％。

以化合物102为原料，合成化合物105的实验操作按照实施例12中步骤E、F、G的制备方法得7-乙氧基-2-{8-羟基-3-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-2-羟甲基-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-6-基}色满–3,5-二醇(105)。¹H NMR(DMSO-d₆，400MHz)δ9.35(s，1H)，9.12(s，1H)，9.08(s，1H)，6.98(s，1H)，6.84-6.75(m，2H)，6.42(d，J＝2.0Hz，1H)，6.34(d，J＝2.0Hz，1H)，5.96(d，J＝2.4Hz，1H)，5.86(d，J＝2.4Hz，1H)，4.96(d，J＝5.2Hz，1H)，4.83-4.80(m，2H)，4.56(d，J＝7.2Hz，1H)，4.09-4.04(m，1H)，3.90-3.78(m，3H)，3.77(s，3H)，3.35-3.38(m，2H)，2.67-2.59(m，1H)，2.42-2.37(m，1H)。MS(ESI，m/z)：511.3[M-H]^-。

实施例17：5-乙氧基-2-{8-羟基-3-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-2-羟甲基-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-6-基}色满–3,7-二醇(109)的合成。

步骤A：将含有化合物81(630mg，1.01mmol)、碳酸钾(182mg，1.32mmol)、溴化苄(260mg，1.52mmol)和DMF(10mL)的混合物在室温下搅拌过夜。加入水(20mL)，用乙酸乙酯(20mL×2)萃取，合并的有机相用饱和食盐水(20mL)洗涤，无水硫酸钠干燥。减压蒸除溶剂，产物经柱层析纯化(200～300目硅胶，乙酸乙酯:石油醚＝1:10～1:5洗脱)，得5-乙氧基-7-甲氧基甲氧基-2-(3,4,5-三苄氧基-苯基)色满-3-醇(106)(620mg)，收率为94.2％。

以化合物106为原料，合成化合物109的实验操作按照实施例12中步骤E、F、G的制备方法得5-乙氧基-2-{8-羟基-3-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-2-羟甲基-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-6-基}色满-3,7-二醇(109)。¹H NMR(DMSO-d₆，400MHz)δ9.30(s，1H)，9.23(s，1H)，9.05(s，1H)，7.21(s，1H)，7.08-7.07(t，1H)，6.97(s，1H)，6.94-6.85(m，2H)，5.97(d，J＝2.4Hz，1H)，5.77(d，J＝2.4Hz，1H)，5.08(d，J＝5.6Hz，1H)，5.08-5.01(m，2H)，4.61(d，J＝7.6Hz，1H)，4.35-4.30(m，1H)，3.94-3.88(m，1H)，3.83(s，3H)，3.69-3.67(m，1H)，3.65-3.43(m，1H)，2.79-2.74(m，1H)，2.45-2.39(m，1H)。MS(ESI，m/z)：511.3[M-H]^-。

实施例18：2-{8-溴-3-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-2-羟甲基-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-6-基}色满-3,4,5,7-四醇(117)的合成。

步骤A：将3-甲氧基-4-羟基(5g，32.9mmol)、乙酸钠(3.23g，39.4mmol)溶于乙酸(25ml)，室温下滴加溴素(5.78g，36.1mmol)的乙酸(5mL)溶液。滴完后，升温到室温并继续搅拌1.5小时。向反应液中加入亚硫酸钠饱和溶液(5ml)和水(50mL)，过滤，得3-溴-4-羟基-5-甲氧基苯甲醛(110)(6.98g)，收率为92.0％

步骤B：将含有化合物110(6.95g，30.1mmol)、三氯化铝(4.41g，33.1mmol)、吡啶(10.7g，135.4mmol)和二氯甲烷(50mL)的混合物回流下搅拌过夜。减压蒸除溶剂，加入水(50mL)，用2M盐酸溶液调节pH值至3～4，用乙酸乙酯(50ml×2)萃取，合并的有机相用饱和食盐水(50mL)洗涤，无水硫酸钠干燥。减压蒸除溶剂，得3-溴-4,5-二羟基苯甲醛(111)(6.50g)，收率为99.5％。

步骤C：将化合物111(6.40g，30.1mmol)、N,N-二异丙基乙胺(11.4g，88.5mmol)溶于无水二氯甲烷(50mL)，在冰水浴下滴加氯甲基甲醚(5.93g，73.7mmol)。加完后，升温到室温并继续搅拌1小时。加入水(50mL)，分层，水层用二氯甲烷(50mL)萃取，合并的有机层用饱和食盐水(50mL)洗涤，无水硫酸钠干燥。减压蒸除溶剂，产物经柱层析纯化(200～300目硅胶，乙酸乙酯:石油醚＝1:50～1:20洗脱)，得3-溴-4,5-二甲氧基甲氧基苯甲醛(9.00g)(112)，收率为93.1％。

以化合物112为原料，合成化合物115的实验操作按照实施例5中步骤K、L、M的制备方法得2-(3-溴-4,5-二羟基苯基)-3,5,7-三羟基色满-4-酮(115)(2.6g)。步骤D、E、F三步总收率为23.0％。

以化合物115为原料，合成化合物116的实验操作按照实施例1中步骤C的制备方法得2-{8-溴-3-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-2-羟甲基-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-6-基}-3,5,7-三羟基色满-4-酮(116)。¹H NMR(DMSO-d₆，400MHz)δ11.94(s，1H)，10.94(br，1H)，9.26(s，1H)，7.40(s，1H)，7.19(s，1H)，7.09(s，1H)，6.95-6.86(m，2H)，5.97(d，J＝2.4Hz，1H)，5.94(d，J＝2.4Hz，1H)，5.16(d，J＝11.6Hz，1H)，5.05(d，J＝7.2Hz，1H)，4.74-4.68(m，1H)，4.40-4.36(m，1H)，3.84(s，3H)，3.71-3.66(m，1H)，3.55-3.52(m，1H)。MS(ESI，m/z)：583.0[M+Na]⁺。

以化合物116为原料，合成化合物117的实验操作按照实施例1中步骤D的制备方法得2-{8-溴-3-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-2-羟甲基-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-6-基}色满-3,4,5,7-四醇。MS(ESI，m/z)：

585.1[M+Na]⁺。

实施例19：2-{8-溴-3-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-2-羟甲基-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-6-基}色满-3,5,7-三醇(118)的合成。

以化合物117为原料，合成化合物118的实验操作按照实施例3中的制备方法，得2-{8-溴-3-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-2-羟甲基-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-6-基}色满-3,4,5,7-四醇(118)。¹H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ9.30(s，1H)，9.23(s，1H)，9.05(s，1H)，7.21(s，1H)，7.07(s，1H)，7.06(s，1H)，6.98-6.85(m，2H)，5.97(d，J＝2.4Hz，1H)，5.77(d，J＝2.4Hz，1H)，5.08(d，J＝5.6Hz，1H)，5.03-5.01(m，2H)，4.61(d，J＝7.6Hz，1H)，4.35-4.30(m，1H)，3.94-3.88(m，1H)，3.83(s，1H)，3.69-3.65(m，1H)，2.79-2.74(m，1H)，2.45-2.39(m，1H)。MS(ESI，m/z)：548.2[M+Na]⁺。

实施例20：2-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-3-羟甲基-7-(3,5,7-三羟基色满-2-基)-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-5-甲腈(119)的合成。

将含有化合物118(218mg，39.8μmol)、氰化亚铜(39.2mg，43.8μmol)和N-甲基吡咯烷酮(5mL)的混合物在150℃下搅拌2小时。冷却到室温，加入水(15mL)，用乙酸乙酯(15mL×2)萃取，合并的有机相用饱和食盐水(20mL)洗涤，无水硫酸钠干燥。减压蒸除溶剂，产物经柱层析纯化(200～300目硅胶，甲醇:乙酸乙酯:二氯甲烷＝1:100:100～1:50:50洗脱)，得2-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-3-羟甲基-7-(3,5,7-三羟基色满-2-基)-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-5-甲腈(119)。¹H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ9.30(s，1H)，9.18(s，1H)，9.15(s，1H)，7.12(s，1H)，7.00(s，1H)，6.88-6.79(m，3H)，6.04(d，J＝2.0Hz，1H)，5.02-4.95(m，4H)，4.60-4.56(m，1H)，4.28-4.21(m，1H)，3.86-3.81(m，1H)，3.78(s，3H)，3.65-3.60(m，1H)，3.83(s，1H)，2.68-2.57(m，1H)，2.37-2.33(m，1H)。MS(ESI，m/z)：494.1[M+H]⁺。

实施例21：(2R,3S)-2-{2-氨基甲基-(2R,3R)-3-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-6-基}色满-3,5,7-三醇(126)的合成

步骤A：将化合物6(1.50g，3.20mmol)、4,4’-双甲氧基三苯甲基氯(DMTCl)(1.41g，4.16mmol)、DMAP(78.2mg，0.64mmol)、Et₃N(389mg，38.4mmol)、吡啶(10mL)的混合物在100℃下搅拌过夜。减压蒸除大部分吡啶，加乙酸乙酯(20mL×2)和水(20mL)萃取，合并的有机相用饱和食盐水(20mL)洗涤，无水硫酸钠干燥。减压蒸除溶剂，产物经柱层析纯化(200～300目硅胶，乙酸乙酯:二氯甲烷＝1:10～1:5洗脱)，得(2R,3S)-2-{2-[二-(4-甲氧基苯基)苯基-甲氧基甲基]-(2R,3R)-3-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-6-基}色满-3,5,7-三醇(6)(1.15g)，收率为46.6％

步骤B：将化合物120(1.13g，1.47mmol)、乙酸酐(2.99g，29.3mmol)、吡啶(5mL)的混合物室温下搅拌过夜。加乙酸乙酯(20mL×2)和水(20mL)萃取，合并的有机相用饱和食盐水(20mL)洗涤，无水硫酸钠干燥。减压蒸除溶剂，产物经柱层析纯化(200～300目硅胶，乙酸乙酯:二氯甲烷:石油醚＝1:10:10～1:5:5洗脱)，得3,5-二乙酰氧基-(2R,3S)-2-{(2R,3R)-3-(4-乙酰氧基-3-甲氧基苯基)-2-[二-(4-甲氧基苯基)苯基-甲氧基甲基]-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-6-基}色满-7-基乙酸酯(121)(1.38g)。该化合物不经纯化直接用于下一步。

步骤C：将化合物121(1.38g，1.47mmol)溶解于二氯甲烷(10mL)，加入10％甲酸的二氯甲烷溶液(10mL)，室温搅拌1小时，加入水(20mL)萃取，水相二氯甲烷(10mL)洗，合并的有机相用饱和碳酸氢钠与食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥。减压蒸除溶剂，产物经柱层析纯化(200～300目硅胶，乙酸乙酯:二氯甲烷＝1:10～1:5洗脱)，得3,5-二乙酰氧基-(2R,3S)-2-{(2R,3R)-3-(4-乙酰氧基-3-甲氧基苯基)-2-羟甲基]-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-6-基}色满-7-基乙酸酯(122)(855mg)，收率为91.4％。

步骤D：将化合物122(850mg，1.34mmol)、Et₃N(176mg，1.74mmol)溶解于二氯甲烷(10mL),冰浴下滴加甲基磺酰氯(184mg，1.60mmol)的二氯甲烷溶液(2mL)，室温搅拌1小时，加入水(20mL)萃取，水相二氯甲烷(10mL)洗，合并的有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥。减压蒸除溶剂，产物经柱层析纯化(200～300目硅胶，乙酸乙酯:二氯甲烷＝1:10～1:6洗脱)，得3,5-二乙酰氧基-(2R,3S)-2-{(2R,3R)-3-(4-乙酰氧基-3-甲氧基苯基)-2-甲磺酰氧基甲基-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-6-基}色满-7-基乙酸酯(123)(905mg)，收率为94.9％。

步骤E：将化合物123(300mg，420μmol)、NaN₃(81.9mg，1.26mmol)、DMF(5mL)的混合物在70℃下搅拌过夜，加入乙酸乙酯(15mL×2)和水(15mL)萃取，合并的有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥。减压蒸除溶剂，产物经柱层析纯化(200～300目硅胶，乙酸乙酯:二氯甲烷＝1:10～1:5洗脱)，得3,5-二乙酰氧基-(2R,3S)-2-{(2R,3R)-3-(4-乙酰氧基-3-甲氧基苯基)-2-叠氮基甲基-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-6-基}色满-7-基乙酸酯(124)(125mg)，收率为45.0％。

步骤F：将化合物124(120mg，181μmol)、浓盐酸(1mL)、EtOH(4mL)的混合物在50℃下搅拌0.5小时，加入乙酸乙酯(10mL×2)和水(10mL)萃取，合并的有机相用饱和碳酸氢钠与食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥。减压蒸除溶剂，产物经柱层析纯化(200～300目硅胶，乙酸乙酯:二氯甲烷＝1:5～1:3洗脱)，得(2R,3S)-2-{2-叠氮基甲基-(2R,3R)-3-(4-乙酰氧基-3-甲氧基苯基)-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-6-基}色满-3,5,7-三醇(125)(55.0mg)，收率为61.5％。

步骤G：将化合物125(50mg，101μmol)、Pd/C(5mg)、甲醇(3mL)的混合物室温下搅拌过夜。垫硅藻土过滤，滤液减压蒸除溶剂，产物经柱层析纯化(200～300目硅胶，乙酸乙酯:二氯甲烷＝1:3～2:1洗脱)，得(2R,3S)-2-{2-氨基甲基-(2R,3R)-3-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-6-基}色满-3,5,7-三醇(126)。¹H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ9.17(s，1H)，9.07(s，1H)，8.93(s，1H)，7.01(s，1H)，6.94-6.80(m，2H)，5.90(d，J＝2.0Hz，1H)，5.70(d，J＝2.0Hz，1H)，4.94(br，1H)，4.87(d，J＝8.0Hz，1H)，4.58(d，J＝5.6Hz，1H)，4.18-4.15(m，1H)，3.89-3.86(m，1H)，3.79(s，3H)，3.76-3.74(m，1H)，2.74(br，2H)，2.69-2.65(m，1H)，2.41-2.35(m，1H)。MS(ESI，m/z)：466.2[M-H]^-。

实施例22：2-{8羟基-3-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-2-羟甲基-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-6-基}色满-3,4,6,7-四醇(136)的合成

步骤A：将2,4,5-三甲氧基苯甲醛(6.00g，30.6mmol)溶解于无水THF(50mL),冰盐浴下滴加甲基溴化镁的THF溶液(3.0M，13.3mL，39.8mmol)，加完后，冰盐浴下继续搅拌2小时。加水(100mL)淬灭，加入乙酸乙酯(50mL×2)萃取，合并的有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥。减压蒸除溶剂，产物经柱层析纯化(200～300目硅胶，乙酸乙酯:石油醚＝1:20～1:6洗脱)，得1-(2,4,5-三甲氧基苯基)乙醇(127)(4.66g)，收率为71.8％。

步骤B：将化合物127(4.65g，21.9mmol)、MnO₂(9.52g，110mmol)、二氯甲烷(35mL)的混合物回流过夜。反应液垫硅藻土过滤，滤液减压蒸除溶剂，产物经柱层析纯化(200～300目硅胶，乙酸乙酯:石油醚＝1:15～1:10洗脱)，得1-(2,4,5-三甲氧基苯基)乙酮(128)(2.33g)，收率为50.5％。

步骤C：将化合物128溶解于二氯甲烷(20mL),N₂保护，冰浴下滴加BBr₃，加完后室温下搅拌过夜。将反应液倒入碎冰中，2N NaOH溶液调pH值至4～5，加乙酸乙酯(50mL×2)萃取，合并的有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥。减压蒸除溶剂，产物经柱层析纯化(200～300目硅胶，乙酸乙酯:二氯甲烷＝1:5～1:1洗脱)，得1-(2,4,5-三羟基苯基)乙酮(129)(1.41g)，收率为76.6％。

以化合物129为原料，合成化合物131的实验操作按照实施例5中步骤A、B的制备方法得1-(2,4,5-三甲氧基甲氧基苯基)乙酮(131)(1.82g)。

以化合物131为原料，合成化合物135的实验操作按照实施例10中步骤G、H、I、J的制备方法得3,6,7-三羟基-2-{3-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-2-羟甲基-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-6-基}色满-4-酮(135)(150mg)。

以化合物135为原料，合成化合物136的实验操作按照实施例1中步骤D的制备方法得2-{8羟基-3-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-2-羟甲基-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-6-基}色满-3,4,6,7-四醇(136)。MS(ESI，m/z)：499.1[M-H]^-。

实施例23：2-{8-羟基-3-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-2-羟甲基-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-6-基}色满-3,6,7-三醇(137)的合成

以化合物以化合物136为原料，合成化合物137的实验操作按照实施例3中的制备方法得2-{8-羟基3-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-2-羟甲基-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-6-基}色满-3,6,7-三醇(137)。¹H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ9.12(s，1H)，9.05(s，1H)，8.71(s，1H)，8.26(s，1H)，7.01(s，1H)，7.00-6.79(m，2H)，6.46-6.38(t，2H)，6.24(s，1H)，4.93(d，J＝5.6Hz，1H)，4.92-4.83(m，2H)，4.50(d，J＝7.2Hz，1H)，4.12-4.09(m，1H)，3.89-3.88(m，1H)，3.87(s，3H)，3.50-3.48(m，1H)，3.44-3.43(m，1H)，2.75-2.71(m，1H)，2.62-2.58(m，1H)。MS(ESI，m/z)：483.2[M-H]^-。

实施例24：2-{3-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-2-羟甲基-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-6-基}色满-3,6,7-三醇(140)的合成

步骤A：将化合物122(130mg，204μmol)、Et₃N(31.0mg，306μmol)、MsCl(30.4mg，265μmol)、二氯甲烷(3mL)的混合物在室温下搅拌1.5小时。加入二氯甲烷(10mL×2)和水萃取，合并的有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥。减压蒸除溶剂，得3,7-二乙酰氧基-(2R,3S)-2-{(2R,3R)-3-(4-乙酰氧基-3-甲氧基苯基)-2-甲磺酰氧基甲基-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-6-基}色满-5-基乙酸酯(138)(143mg)，未经纯化直接用于下一步。

步骤B：将化合物138(140mg，196μmol)、TMSCN(311mg，314mmol)、TBAF(666mg，255mmol)、THF(3mL)、乙腈(3mL)的混合物在80℃下搅拌过夜。冷却至室温，加入乙酸乙酯(10mL×2)和水(10mL)萃取，合并的有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥。减压蒸除溶剂，产物经柱层析纯化(200～300目硅胶，乙酸乙酯:二氯甲烷:石油醚＝1:1:15～1:1:5洗脱)，得3,7-二乙酰氧基-(2R,3S)-2-{(2R,3R)-3-(4-乙酰氧基-3-甲氧基苯基)-2-氰基甲基-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-6-基}色满-5-基乙酸酯(139)(120mg)。

步骤C：将化合物139(110mg，170μmol)与4M NaOH水溶液(mL)得混合物在80℃下搅拌过夜。2N盐酸调pH值至3～4，加乙酸乙酯(10mL×2)和水(10mL)萃取，合并的有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥。减压蒸除溶剂，产物经柱层析纯化(200～300目硅胶，乙酸乙酯洗脱)，得{(2R,3R)-3-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-6-(3,5,7-三羟基色满-2-基)-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-2-基}乙酸(140)。MS(ESI，m/z)：495.1[M-H]^-。

实施例25:化合物溶解度的测定

一、试验材料

受试化合物分别为7、67和85；对照化合物为水飞蓟宾，购自上海笛柏生物科技有限公司，批号为HH06。受试化合物和对照化合物均分别使用DMSO配制成10mM的储备液。磷酸盐缓冲液(PBS)，pH值分别为4.0和7.4，用于受试化合物溶解度的测试。

二、试验方法

受试化合物和对照化合物的处理：在特制的溶解度样品板中按每孔30μL加入受试化合物或对照化合物储备液(10mM)，再每孔分别加入970μL不同pH值的PBS(pH值分别为4.0和7.4)，试验设置重复孔。每孔中加入搅拌子，并加盖聚四氟乙烯或硅胶塞，在25℃条件下，1100rpm搅拌2小时。每孔取10μL样品，再加入990μL的水和乙腈混合液(含内标物)混合均匀，然后使用滤板过滤。

标准品处理：10mM储备液用DMSO稀释至300μM，再取10μL化合物稀释液，加入990μL的水和乙腈混合液(含内标物)混合均匀，配制成终浓度为3μM的标准品溶液。

溶解度样品板放置于自动进样器中，使用LC-MS/MS方法进行分析，通过受试化合物和标准品的响应值，以及标准品浓度计算受试化合物浓度。

三、试验结果

由表1所示，在pH 4.0和7.4的PBS缓冲溶液中，供试化合物7、67和85在PBS缓冲溶液中的溶解度显著高于水飞蓟宾。

表1.化合物在不同pH缓冲溶液中的溶解度

水飞蓟宾由于溶解度极差，造成了其生物利用度低的问题，化合物7、67和85的溶解度得到了显著的提高，可能可增加该类化合物在体内的吸收，从而提高化合物的生物利用度，由此改善化合物的药理活性。

实施例26:化合物对斑马鱼非酒精性脂肪肝的脂肪减少或清除效果试验

一、试验材料

1.受试化合物

受试化合物4、5、6、7、46、67、78、85、92和101分别用DMSO配制成40mM的母液备用，-20℃冰箱储存。阳性对照化合物S-腺苷甲硫氨酸(以下简称SAM)购自阿拉丁试剂(上海)有限公司，批号为F1523051，用DMSO配制成50mM的母液备用。对照化合物水飞蓟宾购自上海笛柏生物科技有限公司，批号为EE09，用DMSO配制成40mM的母液备用。硫代乙酰胺购自Sigma-Aldrich，批号为BCBV3031，用DMSO配制成1M的母液备用。油红O购自Sigma-Aldrich，批号为SLBP5248V。4％多聚甲醛购自鼎国生物科技有限公司，批号为773001800。丙二醇购自国药集团化学试剂有限公司，批号为20170615。

2.试验动物

黑色素等位基因突变型半透明Albino品系斑马鱼，以自然成对交配繁殖方式进行。鱼龄为受精后3天，每试验组为30尾。

以上斑马鱼均饲养于28℃的养鱼用水中(水质：每1L反渗透水中加入200mg速溶海盐，电导作用为480-510μS/cm；pH为6.9-7.2；硬度为53.7-71.6mg/L CaCO₃)，实验动物使用许可证号为：SYXK(浙)2012-0171。饲养管理符合国际AAALAC认证的要求。

二、试验方法

1.斑马鱼非酒精性脂肪肝模型的建立

随机选择受精后3天的正常黑色素等位基因突变型半透明Albino品系斑马鱼放置于六孔板中，每孔(即每试验组)为30尾，再用终浓度为7mM的硫代乙酰胺处理斑马鱼72小时，即建立斑马鱼非酒精性脂肪肝模型。

2.供试化合物的药效评价

将斑马鱼转移至六孔板中，随机每孔(即每试验组)30尾。用硫代乙酰胺诱导斑马鱼建立非酒精性脂肪肝模型。将40mM受试化合物4、5、6、7、46、67、78、85、92和101定量转入六孔板中，用水稀释至相应浓度。其中受试化合物4、5、6和7用水分别配制成终浓度为100μM和200μM的两个浓度剂量组；受试化合物46配制成终浓度为200μM的剂量组；受试化合物67、78、85、92和101配制成终浓度为100μM的剂量组；50mM阳性对照物SAM用水配制成终浓度为50μM的剂量组，40mM阳性对照物水飞蓟宾用水配制成终浓度为100μM和200μM的两个浓度剂量组，同时设置正常对照组(养鱼用水处理斑马鱼)和模型对照组，每孔液体总体积为3mL。除正常对照组外，其它实验组在分别与硫代乙酰胺共同处理72小时后，用油红O进行染色，染色后每个实验组随机选取10尾斑马鱼在解剖显微镜下拍照，用NIS-Elements D 3.10高级图像处理软件进行图像分析并采集数据，分析统计斑马鱼肝脏脂肪光密度总和(S)，各实验组对斑马鱼肝脏脂肪变性抑制作用以以下计算公式，分别评价各个供试化合物对斑马鱼肝脏脂肪变性抑制率％，统计学处理结果用mean±SE表示：

肝脏脂肪变性抑制率(％)＝[S(模型对照组)-S(供试化合物组)]/[S(模型对照组)-S(正常对照组)]×100％

用方差分析和Dunnett’s T-检验进行统计学分析，p<0.05表明具有显著性差异。肝脏脂肪变性抑制率表示受试化合物对造模后的斑马鱼肝脏脂肪的减少程度，数值越大，受试化合物对肝脏脂肪的减少或清除效果越明显。

三、试验结果

如表2和表3所示，模型对照组斑马鱼肝脏脂肪光密度总和的平均值为22816，显著大于正常对照组的平均值(17734)，模型对照组与正常对照组间的统计学分析显示，p值<0.001，表明模型建立成功。经斑马鱼肝脏脂肪光密度总和与模型对照组比较，阳性对照物SAM(50μM)对斑马鱼肝脏脂肪变性抑制率为89％(p值<0.001)；水飞蓟宾在浓度100μM和200μM时，对斑马鱼肝脏脂肪变性抑制率分别为49％和69％，相关的p值分别<0.05和<0.01。表明阳性对照物SAM和水飞蓟宾均对斑马鱼非酒精性脂肪肝有保护作用。

试验结果如表2和图1所示，受试化合物4、5、6和7在浓度为200μM时，对造模后的斑马鱼肝脏脂肪变性抑制率分别为99％、86％、92％和93％，各组受试化合物斑马鱼肝脏部位的脂滴(油红O染色)明显地减少，而在相同浓度下，阳性对照物水飞蓟宾的抑制率仅为69％。试验结果表明，在200μM浓度下，受试化合物4、5、6、7和46对斑马鱼非酒精性脂肪肝具有显著的治疗作用，对斑马鱼非酒精性脂肪肝的脂肪减少或清除效果远优于水飞蓟宾。

表2.供试化合物和水飞蓟宾在200μM浓度下对斑马鱼肝脏脂肪变性抑制的作用(SAM浓度为50μM，n＝10)

与模型对照组比较，*p<0.05，**p<0.01，***p<0.001

受试化合物4、5、7、67、85、92和101在浓度为100μM对造模后的斑马鱼肝脏脂肪变性抑制率分别为83％、84％、98％、>100％、>100％、98％和93％，各组受试化合物斑马鱼肝脏部位的脂滴(油红O染色)明显地减少，而阳性对照物水飞蓟宾的抑制率仅为49％，表明这些化合物对斑马鱼非酒精性脂肪肝的脂肪减少或清除效果远优于水飞蓟宾。在100μM浓度下，受试化合物4、5、6、7、67、78、85、92和101对斑马鱼非酒精性脂肪肝具有显著的治疗作用，试验结果见表3和图2。

表3.供试化合物和水飞蓟宾在100μM浓度下对斑马鱼肝脏脂肪变性抑制的作用(SAM浓度为50μM，n＝10)

与模型对照组比较，*p<0.05，**p<0.01，***p<0.001

试验结果表明，本专利涉及的部分化合物4、5、7、67、85、92和101肝脏脂肪变性抑制率均显著大于水飞蓟宾，对斑马鱼非酒精性脂肪肝表现出极其优异的治疗作用。

实施例27：化合物对非酒精性脂肪肝炎(NASH)小鼠的药效评价

一、试验材料

1.受试化合物及溶液配制

受试化合物分别为4和7；阳性对照物为水飞蓟宾，购自上海笛柏生物科技有限公司，批号为HH06。

低剂量组(35mg/kg)溶液配制：精密称取定量的受试化合物，加入一定量的生理盐水，并分别配制成浓度为3.5mg/mL口服混悬溶液。给药体积为10mL/kg体重。

高剂量组(70mg/kg)溶液配制：精密称取定量的受试化合物，加入一定量的生理盐水，并分别配制成浓度为7.0mg/mL口服混悬溶液。给药体积为10mL/kg体重。

2.造模饲料

高脂饲料：基础饲料原料为玉米、面粉、进口鱼粉、豆粕、次粉、酵母粉、大豆油等。高脂饲料是在73.6％基础饲料中添加10％的猪油，10％的蛋黄粉，5％的蔗糖，1.2％的胆固醇和0.2％的猪胆盐。

3.试验动物

来源、种系、品系：C57BL/6小鼠，由北京维通利华实验动物技术有限公司南京分公司提供(实验动物生产许可证：SCXK(苏)2016-0003)；实验动物使用许可证：SYXK(军)2012-0049；周龄：开始给药时6-8周；体重：18-22g；性别：雌雄各半。

二、试验方法

采用正常饲料适应性饲喂小鼠3天以后，按照体重随机分配：取8只小鼠饲喂正常饲料，设为正常对照组(NC)；其他小鼠饲喂高脂饲料，直至实验结束。每3天小鼠称重并记录。采用高脂饲料饲喂小鼠造模56天(8周)后，小鼠进行眼眶静脉取血，检测血生化指标，用于鉴定是否造模成功。

造模成功后将高脂饲料组小鼠随机分为6组，每组8只动物，分别为模型组、化合物4低剂量组、化合物4高剂量组、化合物7低剂量组、化合物7高剂量组和阳性物水飞蓟宾高剂量组，每天分别根据动物体重灌胃给药，连续给药28天(4周)。同时，给药期间各给药组及模型组动物仍继续给予高脂饲料喂养，直至实验结束。正常对照组给予相应体积的生理盐水。

实验最后一天各组小鼠禁食不禁水8h，眼眶取血，分离血清，分离血清后-20℃保存。采血完成后处死小鼠，迅速分离肝脏，并称重，置于-80℃冰箱内保存。血清样本和肝脏组织样本分别进行血清甘油三酯(TG)、血清总胆固醇(TC)、血清高密度脂蛋白(HDL-C)、血清低密度脂蛋白(LDL-C)、血清谷丙转氨酶(ALT)、血清谷草转氨酶(AST)、血清肿瘤坏死因子α(TNFα)、肝脏甘油三酯(TG)、肝脏总胆固醇(TC)、肝脏丙二醛(MDA)、肝脏超氧化物歧化酶(SOD)等生化指标的检测；另取空白对照组、模型组、化合物7低剂量组和水飞蓟宾高剂量组的部分小鼠肝脏放入中性甲醛固定液中固定，进行HE染色，对肝脏组织进行病理学分析。

三、试验结果

如表4、表5、表6和表7所示，采用高脂饲料饲喂养C57BL/6小鼠，造模3个月后模型组小鼠肝脏系数较空白对照组相比显著升高(p<0.01)，模型组的血清指标(TC、TG、LDL-C、ALT、AST和TNFα)、肝脏组织指标(TC、TG、MDA和SOD)与空白对照组相比有显著性的差异(p<0.01)。与模型组相比，阳性化合物水飞蓟宾以70mg/kg连续灌胃给药1个月，可显著降低血液中ALT、AST、LDL-C和TNFα水平，同时可显著降低肝脏组织中TC、TG和MDA水平，升高SOD活力(p值均<0.01)，且肝脏系数有明显的下降(p<0.05)，表明阳性化合物水飞蓟宾对NASH小鼠具有一定的治疗作用。

化合物4、7分别以35或70mg/kg连续灌胃给药1个月，与模型组相比均可显著降低血液中的ALT和AST水平，同时对肝脏组织中的TC、TG和MDA也有显著改善作用(p值均<0.01)，且能明显降低炎症因子TNFα的表达水平；化合物7还能够显著降低血液中TG和LDL-C的水平，其低剂量组还可明显升高SOD活力(p<0.05)。

表4.化合物对非酒精性脂肪肝炎NASH小鼠肝重、肝脏系数的影响

注：与模型组比较，^*p<0.05，^**p<0.01；肝脏系数(％)＝肝脏重量/体重*100％

表5.化合物对NASH小鼠血生化指标中TC、TG、HDL-C和LDL-C的影响

注：与模型组比较，^*p<0.05，^**p<0.01。

表6.化合物对NASH小鼠血生化指标中ALT、AST和TNF-α的影响

注：与模型组比较，^*p<0.05，^**p<0.01。

表7.化合物对NASH小鼠肝脏组织生化指标的影响

注：与模型组比较，^*p<0.05，^**p<0.01。

NASH小鼠模型组的组织病理学结果显示(图3)，模型组肝细胞存在明显的脂肪性变性和坏死，并有炎症细胞灶存在，因此说明NASH模型建立成功。而化合物7低剂量组的小鼠肝细胞中未见脂肪变性引起的脂滴空泡，仅有个别小鼠肝脏组织中存在极少的炎症细胞。因此表明，化合物7可有效地改善NASH小鼠肝脏组织的脂质化程度，降低炎症反应。

该试验结果表明，本专利涉及的部分化合物4和7对小鼠非酒精性脂肪肝炎具有显著的治疗作用。

实施例28:化合物的小鼠单次给药急性毒性试验研究

一、试验材料

1.受试化合物及溶液配制

受试化合物为化合物7；阳性对照物为水飞蓟宾，购自上海笛柏生物科技有限公司，批号为HH06。临用前均以生理盐水超声配成相应浓度的混悬液。

低剂量组(1.5g/kg)溶液配制：精密称取定量的受试化合物7或阳性对照物，加入一定量的生理盐水，超声至分散均匀，配制成浓度为75mg/mL的口服混悬液。给药体积为20mL/kg。

高剂量组(3.0g/kg)溶液配制：精密称取定量的受试化合物7或阳性对照物，加入一定量的生理盐水，超声至分散均匀，配制成浓度为150mg/mL口服混悬液。给药体积为20mL/kg。

2.试验动物及饲养条件

ICR小鼠，SPF级，体重：16～18g，6～8周龄。由南通大学提供，实验动物生产许可证号：SCXK(苏)2014-0001)；实验动物使用许可证：SYXK(苏)2017-0007。

二、试验方法

取ICR小鼠16只，随机分为化合物7低剂量组、化合物7高剂量组、水飞蓟宾低剂量组和水飞蓟宾高剂量组，每组4只，雌雄各半，禁食6小时后按20mL/kg单次灌胃分别给予化合物7混悬液或水飞蓟宾混悬液。

三、试验结果

各组小鼠给药剂量及死亡率如表8所示。各给药组给药后均未见即时毒性反应，24小时后至十四天的观察期均未见延时毒性反应，动物状态良好，小鼠全部存活。化合物7和水飞蓟宾的小鼠急性毒性试验的最大耐受剂量均为3g/kg。

表8.ICR小鼠给药剂量及死亡率

Claims

1.通式(I)所示的化合物或其药学上可接受的盐，

其中，

R¹或R²分别独立地选自羟基、氟、氯、氰基、C_1-3烷基、取代的C_1-3烷基、C_1-2烷氧基或取代的C_1-2烷氧基中的一个或多个，所述的取代基选自氘、羟基、氨基、硝基、氟、氯、氰基或羧基中的一个或多个；

R³或R⁴分别独立地选自氢、氘、羟基、氨基、C_1-3烷基或C_1-3烷氧基；

R⁵选自羟基、卤素或氰基；

R⁶选自氢、氘、羟基、卤素、氰基、氨基、C_1-5烷基、取代的C_1-5烷基、C_1-3烷氧基或取代的C_1-3烷氧基中的一个或多个，其取代基选自氘、羟基、氨基、硝基、卤素、氰基或羧基中的一个或多个；

R⁷或R⁸分别独立地选自氢、氘、羟基、卤素、氨基、氰基、C_1-3烷基、取代的C_1-3烷基、C_1-3烷氧基或取代的C_1-3烷氧基，所述的取代基选自氘、羟基、氨基或卤素中的一个或多个；

A、A’或A”分别独立地选自氧；

E或G分别独立地选自CH，E和G之间为碳碳单键；

X或Y分别选自CH；

Z或Z’选自CH；

p为1，m、n或q为0、1、2或3；

或者p为0，m为1，n为1，q为0、1、2或3。

2.根据权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中，

R⁵选自羟基；

R⁶选自氢、氘、羟基、氨基、C_1-3烷基、取代的C_1-5烷基、C_1-3烷氧基或取代的C_1-3烷氧基，其取代基选自氘、羟基、氨基、氟、羧基或氰基中的一个或多个。

3.根据权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中，

R⁷或R⁸分别独立地选自氢、氘、羟基、C_1-3烷氧基或取代的C_1-3烷氧基，所述的取代基选自氘、羟基、氨基或卤素中的一个或多个。

4.化合物或其药学上可接受的盐，其中化合物选自，

2-{8-羟基-3-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-2-羟甲基-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-6-基}色满-3,4,5,7-四醇；

(2R,3S)-2-{(2R,3R)-3-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-2-羟甲基-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-6-基}色满-3,4,5,7-四醇；

2-{8-羟基-3-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-2-羟甲基-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-6-基}色满-3,5,7-三醇；

2-{8-羟基-3-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-2-羟甲基-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-6-基}-7-甲氧基-色满-3,4,5-三醇；

2-{8-羟基-3-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-2-羟甲基-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-6-基}-7-甲氧基色满-3,5-二醇；

7-{(3-羟基-5,7二甲氧基色满-2-基)-2-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-3-羟基甲基-2,3二氢苯并[b][1,4]二恶烷}-5-醇；

2-{8-羟基-3-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-2-羟甲基-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-6-基}-5-甲氧基色满-3,7–二醇；

2-{8-羟基-3-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-2-羟甲基-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-6-基}-5,7-二甲氧基色满-3,4-二醇；

7-氟-2-{8-羟基-3-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-2-羟甲基-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-6-基}色满–3,4,5-三醇；

7-乙氧基-2-{8-羟基-3-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-2-羟甲基-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-6-基}色满–3,5-二醇；

5-乙氧基-2-{8-羟基-3-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-2-羟甲基-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-6-基}色满–3,7-二醇；

2-{8-溴-3-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-2-羟甲基-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-6-基}色满-3,4,5,7-四醇；

2-{8-溴-3-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-2-羟甲基-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-6-基}色满-3,5,7-三醇；

2-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-3-羟甲基-7-(3,5,7-三羟基色满-2-基)-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-5-甲腈；

(2R,3S)-2-{2-氨基甲基-(2R,3R)-3-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-6-基}色满-3,5,7-三醇；

2-{8羟基-3-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-2-羟甲基-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-6-基}色满-3,4,6,7-四醇；

2-{8-羟基-3-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-2-羟甲基-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-6-基}色满-3,6,7-三醇；

2-{3-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-2-羟甲基-2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶烷-6-基}色满-3,6,7-三醇。

5.一种药物组合物，它以权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐为活性成分或主要活性成分，辅以药学上可接受的辅料。

6.权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐在制备治疗或预防肝病药物方面的用途。

7.权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐在制备治疗或预防脂肪肝、肝纤维化或肝硬化药物方面的用途。