[go: up one dir, main page]

CN109843885B - 抗肿瘤杂环并咪唑类化合物的药用盐 - Google Patents

抗肿瘤杂环并咪唑类化合物的药用盐 Download PDF

Info

Publication number
CN109843885B
CN109843885B CN201780063235.7A CN201780063235A CN109843885B CN 109843885 B CN109843885 B CN 109843885B CN 201780063235 A CN201780063235 A CN 201780063235A CN 109843885 B CN109843885 B CN 109843885B
Authority
CN
China
Prior art keywords
pharmaceutically acceptable
compound
piperazine
salt
imidazo
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN201780063235.7A
Other languages
English (en)
Other versions
CN109843885A (zh
Inventor
樊兴
李文华
秦继红
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Shanghai Huilun Pharmaceutical Co ltd
Original Assignee
Shanghai Hui Bio Technology Co ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Shanghai Hui Bio Technology Co ltd filed Critical Shanghai Hui Bio Technology Co ltd
Publication of CN109843885A publication Critical patent/CN109843885A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN109843885B publication Critical patent/CN109843885B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/496—Non-condensed piperazines containing further heterocyclic rings, e.g. rifampin, thiothixene or sparfloxacin
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D471/04—Ortho-condensed systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/50—Pyridazines; Hydrogenated pyridazines
    • A61K31/502—Pyridazines; Hydrogenated pyridazines ortho- or peri-condensed with carbocyclic ring systems, e.g. cinnoline, phthalazine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)

Abstract

本发明涉及药物合成领域，具体涉及一种抗肿瘤杂环并咪唑类化合物(I)，即：4‑(3‑(4‑(1氢‑咪唑并[4,5‑b]吡啶‑5‑基)哌嗪‑1‑羰基)‑4‑氟苄基)呔嗪‑1(二氢)‑酮的药用盐、其制备方法、药物组合以及在抗肿瘤药物制备中的用途。本发明化合物(I)的药用盐可用于制备治疗或预防可以通过抑制PARP活性而改善的病症的药物中的用途中。

Description

抗肿瘤杂环并咪唑类化合物的药用盐
技术领域
本发明涉及药物合成领域，具体涉及一种抗肿瘤杂环并咪唑类化合物(I)，即：4-(3-(4-(1氢-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-基)哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)呔嗪-1(二氢)-酮的药用盐、其制备方法、药物组合以及在抗肿瘤药物制备中的用途。
背景技术
化疗药物和电离辐射治疗是治疗癌症的两种常用方法。这两种治疗方法均会诱发DNA单链和/或双链断裂进而产生细胞毒性作用，目标肿瘤细胞由于染色体损伤从而死亡。作为响应DNA损伤信号的一个重要结果是细胞周期调控位点信号被激活，其目的在于保护细胞在DNA损伤的情况下不进行有丝分裂从而避免细胞损伤。在大多数情况下，肿瘤细胞在表现出细胞周期调控位点信号缺损的同时具有很高的增殖率。因此可以推断，肿瘤细胞中存在特定的DNA修复机制，可以快速响应并修复与增殖调节相关的染色体损伤，从而使其自身幸免于一些治疗药物的细胞毒性作用并保持继续存活。
在临床应用中，化疗药物的有效浓度或治疗辐射强度可以对抗这些DNA修复机制，保证对目标肿瘤细胞的杀伤效果。然而，肿瘤细胞通过增强其DNA损伤修复机制能够对治疗产生耐受作用，使之从致命的DNA损伤中存活下来。为了克服产生的耐受性，通常需要增加治疗药物的剂量或提高辐射强度，这一做法将对病灶附近的正常组织产生不利影响，从而使治疗过程中伴有严重的不良反应，进而加大了治疗风险。同时，不断增加的耐受性将会降低治疗效果，因此可以推断，通过对DNA损伤信号修复机制的调节，能够以肿瘤细胞特异性的方式实现对DNA损伤药剂的细胞毒性的提高。
以聚腺苷二磷酸-核糖基化活性为特征的PARPs(Poly(ADP-ribose)polymerases)，构成了18种细胞核酶和细胞质酶的超家族。这种聚腺苷二磷酸-核糖基化作用可以调节目的蛋白的催化活性和蛋白质间相互作用，并且对许多基本生物过程进行调控，包括DNA修复，细胞死亡，基因组稳定性也与之相关。
PARP-1活性约占总的细胞PARP活性的80％，它和与其最相近的PARP-2共同成为PARP家族中具备修复DNA损伤能力的成员。作为DNA损伤的感应器和信号蛋白，PARP-1可以快速检测并直接结合至DNA损伤位点，之后诱导聚集DNA修复所需的多种蛋白，进而使DNA损伤得以修复。当细胞中的PARP-1缺乏时，PARP-2可以替代PARP-1实现DNA损伤的修复。研究表明，与正常细胞相比，PARPs蛋白在实体瘤中的表达普遍增强。此外，对于DNA修复相关基因缺失(如BRCA-1或BRCA-2)的肿瘤(如乳腺肿瘤和卵巢癌)，表现出对PARP-1抑制剂的极端敏感，这表明PARP抑制剂作为单剂在治疗这种被称为三阴性乳腺癌方面的潜在用途。同时，由于DNA损伤修复机制是肿瘤细胞应对化疗药物和电离辐射治疗产生耐受作用的主要机制，因此PARP-1被认为是探索新的癌症治疗方法的一个有效靶点。
早期开发设计的PARP抑制剂是以作为PARP催化底物的NAD的烟酰胺作为模板，开发其类似物。这些抑制剂作为NAD的竞争性抑制剂，与NAD竞争PARP的催化位点，进而阻止聚(ADP-核糖)链的合成。没有聚(ADP-核糖基化)修饰下的PARP无法从DNA损伤位点解离下来，将导致其他参与修复的蛋白质进入损伤为点，进而不能执行修复过程。因此，在细胞毒性药物或辐射的作用下，PARP抑制剂的存在使DNA受损的肿瘤细胞最终死亡。
此外，作为PARP催化底物而被消耗的NAD，是细胞合成ATP过程中必不可少的因素。在高PARP活性水平下，细胞内的NAD水平会显著下降，进而影响胞内的ATP水平。由于胞内的ATP含量不足，细胞无法实现ATP依赖的程序化死亡过程，只能转向坏死这一特殊凋亡过程。在坏死的过程中，大量的炎症因子会被释放出来，从而对其他器官和组织产生毒性作用。因此，PARP抑制剂也可以用于治疗与这一机制有关的多种疾病，包括神经退行性疾病(如老年痴呆症，亨廷顿舞蹈症，帕金森病)，糖尿病，缺血或缺血再灌注过程中的并发疾病，如心肌梗死和急性肾衰竭，循环系统疾病，如感染性休克，及炎症性疾病，如慢性风湿病等。
发明内容
本发明涉及PARP抑制剂4-(3-(4-(1氢-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-基)哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)呔嗪-1(二氢)-酮的药用盐，所述PARP抑制剂4-(3-(4-(1氢-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-基)哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)呔嗪-1(二氢)-酮具有如下结构(以下称式I)：
Figure GDA0002025485020000021
本发明中的式(I)的结构式具有一定碱性，能够与相应的有机酸或无机酸形成药用盐。
因此，本发明提供了式(I)化合物与有机酸或无机酸形成的药用盐。
式(I)化合物与有机酸形成的盐包括但不限于与甲酸、乙酸、三氟乙酸、甲磺酸、乙磺酸、苯磺酸、对甲苯磺酸、苯甲酸、柠檬酸、富马酸、苹果酸、马来酸、酒石酸、乳酸、羟乙磺酸等形成的盐。式(I)化合物与无机酸形成的盐包括但不限于与盐酸、氢溴酸、磷酸、硫酸、草酸、硝酸等形成的盐。
作为优选方案，本发明式(I)的药用盐为盐酸盐、氢溴酸盐、甲磺酸盐、对甲苯磺酸盐、苯磺酸盐、羟乙磺酸盐。更优选为盐酸盐、硫酸盐、磷酸盐、甲磺酸盐、对甲苯磺酸盐、苯磺酸盐、羟乙磺酸盐。最优选为盐酸盐、甲磺酸盐、对甲苯磺酸盐、苯磺酸盐、羟乙磺酸盐。
本发明式(I)的药用盐，特别是盐酸盐、甲磺酸盐、对甲苯磺酸盐、苯磺酸盐、羟乙磺酸盐，相对于成盐前的式(I)，具有优越的物理和化学性质，溶解度和溶解速率明显改善，其中式(I)溶解度提高至少10倍以上，使得与游离碱形式的式(I)比较，更适用于多种药物剂型的生产，提高体内的生物利用度。
本发明再一方面提供制备4-(3-(4-(1氢-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-基)哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)呔嗪-1(二氢)-酮，即式(I)，其药用盐的方法。
一般地，碱性化合物的盐可以通过离子交换色谱法制备，或者通过在适当的溶剂或各种溶剂的组合中将游离碱与化学计算量或与过量的所需的形成盐的无机或有机酸反应来制备。
因此，本发明式(I)的药用盐可以通过将化合物(I)与相应的酸、例如：相应的无机酸、有机酸或聚合物酸，经过酸碱反应准备得到。
上述通过酸碱反应的本发明化合物(I)药用盐的制备方法中，可以采用有机溶剂作为反应溶剂，优选极性溶剂，例如醇溶剂、乙氰、丙酮；或者采用有机溶剂与水的混合溶剂。
在一个实施方案中，本发明的药用盐含有1当量的式(I)和1当量的酸。在一个实施方案中，制备本发明式(I)的药用盐的方法包括将4-(3-(4-(1氢-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-基)哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)呔嗪-1(二氢)-酮在有机溶剂中与相应的无机酸或有机酸反应制备得到。
例如，在一优选实施例中，制备本发明的药用盐的方法包括将4-(3-(4-(1氢-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-基)哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)呔嗪-1(二氢)-酮在C1-C4醇或C3-C5酮的单一或混合溶剂中与盐酸反应制备得到。
例如，在一优选实施例中，制备本发明的药用盐的方法包括将4-(3-(4-(1氢-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-基)哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)呔嗪-1(二氢)-酮与甲磺酸在C1-C4醇或C3-C5酮的单一或混合溶剂中反应制备得到。
例如，在一优选实施例中，制备本发明式(I)盐酸盐的方法包括将4-(3-(4-(1氢-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-基)哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)呔嗪-1(二氢)-酮在C1-C4醇或C3-C5酮的单一或混合溶剂中与盐酸反应制备得到，其中C1-C4醇任选自甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇、正丁醇，C3-C5酮的任选自丙酮、丁酮、戊酮。所述反应温度为10-60℃，优选10-50℃，更优选20-40℃。
再一方面，本发明提供了药物组合物，所述组合物含有式(I)的药用盐，特别是含有式(I)的盐酸盐、甲磺酸盐、对甲苯磺酸盐、苯磺酸盐、羟乙磺酸盐，与一种或多种药学上可接受的载体或者赋形剂的组合。
再一方面，本发明提供化合物式(I)的药用盐在制备用于抑制聚(ADP-核糖)聚合酶(PARP)活性的药物中的用途，本发明还提供了治疗或预防可以通过抑制聚(ADP-核糖)聚合酶(PARP)而改善的病症的方法，所述方法包含给予需要其的患者有效量的化合物I的药学可接受的盐或包含该盐的组合物。
进一步地，所述抑制聚(ADP-核糖)聚合酶(PARP)而改善的病症包括癌症，例如：胃癌、胰腺癌、白血病、乳腺癌、卵巢癌、前列腺癌等。
本发明化合物还可以用于治疗同源重组(HR)依赖性DNA双链断裂(DSB)修复活性缺陷的癌症。
HR依赖性DNA双链断裂(DSB)修复活性缺陷的癌症可以包含或组成为一种或多种癌细胞，相对于正常细胞，所述癌细胞具有降低或丧失的通过该途径修复DNA DSBs的能力，即在一种或多种癌细胞中，HR依赖性DNA DSBs修复途径的活性可以是降低或丧失的。
在患有HR依赖性DNA DSBs修复缺陷的癌症的个体的一种或多种癌细胞中，HR依赖性DNA DSBs修复途径的一种或多种组分的活性可以是丧失的。本领域已经充分特征化了HR依赖性DNA DSBs修复途径的组分。
根据标准的药学物实践，本发明化合物可以单独或在药物组合物中与药物可接受的载体、赋形剂、稀释剂、助剂、填充剂、缓冲剂、稳定剂、防腐剂、润滑剂组合给予人。
无论是全身性/外周性或在所需作用的部位，本发明化合物可以通过任何方便的给药途径给予受试者，包括但不限于口服给药；局部给药；肺部给药；直肠给药；阴道给药；肠胃外给药；和通过植入贮库给药。
当将本发明化合物施用于受试者时，所选择的剂量水平将取决于各种因素，包括但不限于具体化合物的活性、个体症状的严重程度、给药途径、给药时间、化合物的排泄率、治疗的持续时间、联合使用的其他药物、化合物和/或材料，以及患者的年龄、性别、体重、状态、一般健康状况和以前的治疗史。化合物的量和给药途径最终由医师决定，虽然一般地剂量将会在作用部位达到实现所需效果而不会引起实质上有害或有毒的副作用的局部浓度。
在整个治疗过程中，可以一次剂量、连续或间歇地实现体内给药。确定最有效的给药方式和剂量的方法是本领域技术人员众所周知的，并且将随着用于治疗的制剂、治疗目的、所治疗的靶细胞和所治疗的受试者而变化。可以使用治疗医师选择的剂量水平和方案进行单次或多次给药。
本发明化合物还可以用于与抗癌剂或化疗药物联用。
本发明化合物可用作癌症治疗的化学增敏剂和放射增敏剂。它们可以用于治疗以前经受过或者目前正在经受癌症治疗的患者。这类以前的治疗包括预先化疗、放射治疗、手术或免疫治疗，例如癌症疫苗。因此，本发明提供了用于同时、单独或顺序给药的化合物I的药学可接受的盐和抗癌剂的组合。
本发明还提供了用于同时、单独或顺序给药的化合物I的药学可接受的盐、放射治疗和其他化疗药物的组合。
本发明还提供了用于制备药物的化合物I的药学可接受的盐，所述药物用做癌症治疗中的辅助物或通过与电离放射或化疗药物联用来增强对肿瘤细胞的杀伤力。
本发明还提供了化合物I的药学可接受的盐在制备药物中的用途，所述药物用作癌症治疗中的辅助物或通过与电离放射或化疗药物联用来增强对肿瘤细胞的杀伤力。所述化合物还可用于与电离放射或化疗药物联用。
从本文所包含的教导，本发明的这些和其他方面将是显而易见的。
本发明再一方面提供化合物式(I)的制备方法，通过化合物6和化合物4在缩合剂存在下制备得到。在一个具体实施方案中，所述的缩合剂是2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯，其合成路线表示如下：
Figure GDA0002025485020000051
已经发现5-(哌嗪-1-基)-1氢-咪唑并[4,5-b]吡啶(化合物4)可以通过以下步骤制备：4-(6-氨基-5-硝基吡啶-2-基)哌嗪-1-碳酸叔丁酯(化合物1)经氢化还原制备4-(5,6-二氨基吡啶-2-基)哌嗪-1-碳酸叔丁酯(化合物2)后，再与原甲酸三甲酯反应制备得到4-(1氢-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-基)哌嗪-1-碳酸叔丁酯(化合物3)，并进一步脱除保护基得到化合物4。具体合成路线参考如下：
Figure GDA0002025485020000052
具体实施方式
实施例1：化合物4的制备依照路线一：
Figure GDA0002025485020000061
路线一
步骤1：4-(6-氨基-5-硝基吡啶-2-基)哌嗪-1-碳酸叔丁酯(化合物1)的制备
将溶有化合物单叔丁氧羰基保护哌嗪(1.86g,10mmol)的二甲基甲酰胺(10mL)中加入6-氯-3-硝基-2-氨基吡啶(1.91g,11mmol)和二异丙基乙基胺(1.55g,12mmol)，室温反应8小时后减压除去溶剂，残余物经快速柱层析分离(二氯甲烷：甲醇＝50：1)得到白色固体化合物1：4-(6-氨基-5-硝基吡啶-2-基)哌嗪-1-碳酸叔丁酯(2.72g，收率84％)。MS(ESI)m/z:[M+H]+＝324。
步骤2：4-(5,6-二氨基吡啶-2-基)哌嗪-1-碳酸叔丁酯(化合物2)的制备
将10％钯碳(259mg)加入溶有化合物1(2.59g,8mmol)的甲醇(20mL)溶液中，常温下氢化7小时，过滤，残余物经快速柱层析分离(二氯甲烷：甲醇＝10：1)得到黄色固体化合物2：4-(5,6-二氨基哌啶-2-基)哌嗪-1-碳酸叔丁酯(2.25g，收率93％)。MS(ESI)m/z:[M+H]+＝294。
步骤3：4-(1氢-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-基)哌嗪-1-碳酸叔丁酯(化合物3)的制备
在一个溶有化合物2(1.47g,5mmol)的原甲酸三甲酯溶液(6g)中加入对甲苯磺酸(86mg,0.5mmol)，升温至回流，反应8小时后冷却，减压除去溶剂，残余物经快速柱层析分离(二氯甲烷：甲醇＝10：1)得到淡黄色固体化合物3：4-(1氢-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-基)哌嗪-1-碳酸叔丁酯(0.73g，收率48％)。MS(ESI)m/z:[M+H]+＝304。
步骤4：5-(哌嗪-1-基)-1氢-咪唑并[4,5-b]吡啶(化合物4)的制备
在一个溶有化合物3(1.52g,5mmol)的二氯甲烷溶液(10mL)中加入三氟乙酸(2.28g,20mmol)，室温反应8小时后减压除去溶剂，残余物用二氯甲烷(20mL)溶解，加入碳酸氢钠直至pH＝8，浓缩除去溶剂，残余物经快速柱层析分离(二氯甲烷：甲醇＝10：1)得到淡黄色固体化合物4：5-(哌嗪-1-基)-1氢-咪唑并[4,5-b]吡啶(0.87g，收率86％，HPLC检测纯度95.0％)。MS(ESI)m/z:[M+H]+＝204。
实施例2：化合物6的制备依照路线二
Figure GDA0002025485020000071
路线二
步骤1：2-氟-4-((3-氧代异苯并呋喃-1(3氢)-亚基)甲基)苯氰(化合物5)的制备
冰浴下，在一个溶有甲醇钠(61.8g，1.14mol)的无水甲醇溶液(1L)中缓慢加入亚磷酸二甲酯(97mL，1.06mol)。保持反应体系温度低于5℃，20分钟内缓慢滴加2-羧基苯甲醛(135g，0.9mol)。上述反应体系逐渐升至室温，并在半小时内逐渐滴加甲基磺酸(81.6mL，1.26mol)。减压除去溶剂后，残余物用水(600mL)稀释，并用二氯甲烷(500mL)萃取三次。合并有机相，并用水(100mL)萃取两次，有机相用无水硫酸镁干燥。减压除去溶剂得到淡黄色固体化合物3-氧代-1,3-二氢苯并异呋喃-1-基亚磷酸二甲酯，未经纯化直接投入下一步反应。将溶有上步反应未经纯化的化合物3-氧代-1,3-二氢苯并异呋喃-1-基亚磷酸二甲酯(35g，0.14mol)的四氢呋喃溶液(330mL)中加入2-氟-5-甲酰基苯氰(20.9g，0.14mol)，体系降温至15℃，30分钟内缓慢滴加三乙胺(19.5mL，0.14mol)。上述反应体系逐渐升至室温，减压除去溶剂，残余物用水(250mL)打浆，过滤得到白色固体化合物5：2-氟-4-((3-氧代异苯并呋喃-1(3氢)-亚基)甲基)苯氰(37.2g，收率96％)。
步骤2：2-氟-5-((4-氧代-3,4-二氢呔嗪-1-基)甲基)苯甲酸(化合物6)的制备
在一个溶有化合物5(37g，0.14mol)的水溶液(200mL)中加入13N氢氧化钠溶液(50mL)，升温至90℃搅拌1小时。将上述反应体系降至70℃后加入水合肼(100mL，2mol)，保持该温度搅拌18小时。反应液冷却至室温，使用8N的盐酸调节上述体系至pH＝4，过滤，滤饼依次用水(60mL)洗涤两次，乙醚(50mL)洗涤三次，真空干燥得到白色固体化合物6：2-氟-5-((4-氧代-3,4-二氢呔嗪-1-基)甲基)苯甲酸(30.1g，收率77％)。MS(ESI)m/z:[M+H]+＝299。
实施例3
化合物式(I)的制备
在一个溶有化合物4(50mg，0.17mmol)的二甲基甲酰胺溶液(5mL)中加入化合物6(49mg，0.24mmol)、2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(77mg，0.2mmol)和三乙胺(70mg，0.7mmol)，室温搅拌过夜。浓缩除去溶剂，残余物经快速柱层析分离(二氯甲烷：甲醇＝10：1)得到白色固体化合物(I)：4-(3-(4-(1氢-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-基)哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)呔嗪-1(二氢)-酮(16mg，收率20％)。MS(ESI)m/z:[M+H]+＝484。1H NMR(300MHz,DMSO-d6):δ12.61(br,1H),8.27-8.24(m,1H),8.16(s,1H),8.00-7.97(m,1H),7.93-7.82(m,4H),7.45-7.39(m,2H),7.28-7.22(m,1H),6.83-6.80(m,1H),4.34(s,2H),3.73(br,2H),3.58(br,2H),3.42(br,4H)。
实施例4
4-(3-(4-(1氢-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-基)哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)呔嗪-1(二氢)-酮盐酸盐的制备
在溶有式(I)(3g，6.21mmol)的乙醇(30ml)溶液中滴入盐酸(2.1ml，24.84mmol)，25℃搅拌反应5小时。过滤，干燥得类白色固体，即化合物式(I)4-(3-(4-(1氢-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-基)哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)呔嗪-1(二氢)-酮盐酸盐(3.0g，收率93％)。元素分析测定的理论值Cl：6.47％；实测值Cl：6.58％，判定式(I)与HCl的成盐比例为1:1。
MS(ESI)m/z:[M+H]+＝484。1H NMR(300MHz,DMSO-d6):δ12.62(s,1H),9.42(s,1H),8.24-8.22(m,1H),8.02(d,1H),7.94(d,1H),7.88-7.79(m,2H),7.46-7.39(m,2H),7.23(t,1H),7.09(d,1H),4.32(s,2H),3.75(br,2H),3.69(br,2H),3.53(br,2H),3.32(br,2H)。
实施例5
4-(3-(4-(1氢-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-基)哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)呔嗪-1(二氢)-酮甲磺酸盐的制备
在溶有式(I)(3g，6.21mmol)的丙酮(30ml)溶液中加入甲磺酸(2.38g，24.84mmol)，30℃搅拌10小时。过滤，干燥得类白色固体，即式(I)的甲磺酸盐：4-(3-(4-(1氢-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-基)哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)呔嗪-1(二氢)-酮甲磺酸盐(3.16g,收率88％)。元素分析测定的理论值S：5.36％；实测值S：5.34％，判定式(I)与甲磺酸的成盐比例为1:1。
MS(ESI)m/z:[M+H]+＝484。1H NMR(300MHz,DMSO-d6):δ12.60(s,1H),9.41(s,1H),8.24-8.22(m,1H),8.02(d,1H),7.94(d,1H),7.89-7.79(m,2H),7.47-7.39(m,2H),7.23(t,1H),7.09(d,1H),4.32(s,2H),3.75(br,2H),3.69(br,2H),3.53(br,2H),3.32(br,2H),2.46(s,3H)。
实施例6
4-(3-(4-(1氢-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-基)哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)呔嗪-1(二氢)-酮对甲苯磺酸盐的制备
在溶有式(I)(1g，2.07mmol)的丙酮(10ml)溶液中加入对甲苯磺酸(1.07g，6.21mmol)，20℃搅拌10小时。过滤，干燥得类白色固体，即式(I)的对甲苯磺酸盐：4-(3-(4-(1氢-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-基)哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)呔嗪-1(二氢)-酮对甲苯磺酸盐(1.22g,收率90％)。元素分析测定的理论值S：4.88％；实测值S：4.90％，判定式(I)与对甲苯磺酸的成盐比例为1:1。MS(ESI)m/z:[M+H]+＝484。
实施例7
4-(3-(4-(1氢-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-基)哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)呔嗪-1(二氢)-酮苯磺酸盐的制备
在溶有式(I)(1g，2.07mmol)的丙酮(10ml)溶液加入苯磺酸(1.31g，8.28mmol)，室35℃搅拌20小时。过滤，干燥得类白色固体，即式(I)的苯磺酸盐：4-(3-(4-(1氢-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-基)哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)呔嗪-1(二氢)-酮苯磺酸盐(1.13g,收率85％)。元素分析测定的理论值S：4.99％；实测值S：5.05％，判定式(I)与苯磺酸的成盐比例为1:1。MS(ESI)m/z:[M+H]+＝484。
实施例8
4-(3-(4-(1氢-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-基)哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)呔嗪-1(二氢)-酮羟乙基磺酸盐的制备
在溶有式(I)(1g，2.07mmol)的丙酮(10ml)溶液中加入羟乙基磺酸(1.04g，8.28mmol)，25℃搅拌20小时。过滤，干燥得类白色固体，即式(I)的羟乙基磺酸盐：4-(3-(4-(1氢-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-基)哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)呔嗪-1(二氢)-酮羟乙基磺酸盐(1.03g,收率82％)。元素分析测定的理论值S：5.25％；实测值S：5.10％，判定式(I)与羟乙基磺酸的成盐比例为1:1。MS(ESI)m/z:[M+H]+＝484。
实施例9
溶解度测试
本发明式(I)化合物的盐的溶解度参照以下方法测定：
a)取式(I)的盐约200mg，精密称量，加水溶液200ml溶解,用恒温搅拌30min,静置，取上层清液离心，然后取离心液的上层清液作为供试品溶液。
b)取式(I)约200mg，精密称定，加甲醇水溶液溶解并定量稀释成每1ml含游离碱0.02mg的溶液，作为对照品溶液。
c)分别取空白溶剂、对照品溶液和供试品溶液各10μl，经高效液相色谱仪，测定，记录峰面积，再计算出该盐在水中溶解度。
下表比较了式(I)及其不同类型的盐的溶解度，表1显示式(I)在成盐后水中溶解度有出乎意料的改善。
表1：溶解度的比较
测试化合物 水中溶解度
式I 1μg/ml
式I盐酸盐 340μg/ml
式I甲磺酸盐 300μg/ml
式I对甲苯磺酸盐 40μg/ml
式I苯磺酸盐 230μg/ml
式I羟乙基磺酸盐 310μg/ml
实施例10
生物学评价
实验原理：
核蛋白的多聚ADP核糖化是发生在DNA损伤应答时的翻译后。PARP，全称是聚腺苷二磷酸核糖聚合酶，在有NAD存在时，催化多聚(ADP-核糖)连接到临近的核蛋白上，从而引发经由碱基切补修复通路的DNA修复机制。Trevigen公司生产的HT UniversalChemiluminescent PARP Assay Kit能够测量出这种被生物素标记的ADP-核糖与组蛋白的结合水平。
试剂与耗材
1.HT Universal Chemiluminescent PARP Assay Kit with Histone-coatedStrip Wells，美国Trevigen，货号：4676-096-K
2.读板仪，美国Perkin Elmer，EnVision Multilabel Plate Reader
溶液与缓冲液
1.洗液含有0.1％Triton X-100的PBS溶液
2. 20X PARP缓冲液用去离子水将20X PARP缓冲液稀释20倍即得到1X缓冲液，该缓冲液被用来稀释重组PARP酶，PARP Cocktail和被测试化合物。
3. 10X PARP Cocktail按照以下方法配制1X PARP Cocktail：10X PARPCocktail 2.5μl/well，10X活化DNA 2.5μl/well，1X PARP缓冲液20μl/well。
4.PARP Enzyme仅在使用前，用1X PARP缓冲液小心稀释重组酶，稀释好的酶溶液要尽快使用，未用完的要废弃掉。
5.Strep-HRP仅在使用前，用1X Strep稀释液稀释Strep-HRP 500倍得到1X溶液。
6.化学发光底物仅在使用前，将相同体积的PeroxyGlow A和B溶液混合均匀得到辣根过氧化物酶的底物。
实验方法
化合物配制
1.用DMSO将10mM被测化合物式(I)的母液稀释至10uM，1uM。
2.仅在实验开始前，将溶解在DMSO中的化合物式(I)的梯度浓度溶液用1X PARP缓冲液稀释20倍，得到5X的化合物溶液，即可用来进行检测，阳性对照(POSITIVE)和阴性对照(NEGATIVE)孔为1X PARP缓冲液(DMSO含量5％)。
操作步骤
1.每孔加入50μl 1X PARP缓冲液润湿组蛋白，在室温孵育孔板30分钟，然后将孔里的1X PARP缓冲液吸出，并在纸巾上将残留液体拍干净。
2.根据化合物排列图，将稀释好的5X化合物溶液加入对应的孔中，每孔10μl，阳性对照(POSITIVE)和阴性对照(NEGATIVE)孔为1X PARP缓冲液(DMSO含量5％)
3.用1X PARP缓冲液将PARP酶稀释至每15μl溶液含有0.5Unit，然后在除了阴性对照孔以外的其他孔加入15μl酶溶液，阴性对照孔只加入1X PARP缓冲液，室温孵育孔板10分钟。
4.继续加入25μl的1X PARP Cocktail到每个孔中。
5. 27℃孵育孔板60分钟。
6.孵育结束后，将孔里的反应液吸出，并在纸巾上将残留液体拍干净。接着用含有0.1％Triton X-100的PBS溶液冲洗孔板4遍，每次每孔用200μl，并在纸巾上将残留液体拍干净。
7.接下来，在每孔中加入稀释好的1X Strep-HRP溶液，然后在27℃孵育孔板60分钟。
8.孵育结束后，将孔里的反应液吸出，并在纸巾上将残留液体拍干净。接着用含有0.1％Triton X-100的PBS溶液冲洗孔板4遍，每次每孔用200μl，并在纸巾上将残留液体拍干净。
9.洗板结束后，将相同体积的PeroxyGlow A和B溶液混合均匀，每孔加入100μl，立即放入读板仪记录化学发光信号。
数据处理
每孔中的读数需要被转换成抑制率。化合物的抑制率可以使用下列公式计算得出：
Figure GDA0002025485020000121
注：阳性对照孔读数为positive孔读数，意义为酶100％活性；阴性对照孔读数为negative孔读数，意义为酶0％活性；X为每个样品各个浓度的读数。
经测试化合物式(I)针对PARP-1的酶水平抑制活性IC50为1nM，具有极强的抑制活性。

Claims (8)

1.4-(3-(4-(1氢-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-基)哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)呔嗪-1(二氢)-酮的药用盐，其中所述盐为甲酸盐、乙酸盐、三氟乙酸盐、甲磺酸盐、乙磺酸盐、苯磺酸盐、对甲苯磺酸盐、苯甲酸盐、柠檬酸盐、富马酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、酒石酸盐、乳酸盐、羟乙磺酸盐、盐酸盐、氢溴酸盐、磷酸盐、硫酸盐、草酸盐或硝酸盐。
2.权利要求1所述的药用盐，其中所述盐为盐酸盐、甲磺酸盐、对甲苯磺酸盐、苯磺酸盐、羟乙磺酸盐。
3.权利要求1或2所述的药用盐，其为4-(3-(4-(1氢-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-基)哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)呔嗪-1(二氢)-酮的盐酸盐或甲磺酸盐。
4.权利要求1-3任意一项所述的4-(3-(4-(1氢-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-基)哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)呔嗪-1(二氢)-酮的药用盐的制备方法，包括步骤：将化合物(I)与相应的酸经过酸碱反应准备得到。
5.一种药物组合物，其包含权利要求1-3任意一项所述的药用盐，以及药学上可接受的载体。
6.权利要求1-3任意一项所述的所述的4-(3-(4-(1氢-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-基)哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)呔嗪-1(二氢)-酮的药用盐在制备治疗或预防可以通过抑制PARP活性而改善的病症的药物中的用途。
7.根据权利要求6所述的用途，其中，所述病症包括癌症。
8.根据权利要求7所述的用途，其中，所述癌症包括：胃癌、胰腺癌、白血病、乳腺癌、卵巢癌、前列腺癌。
CN201780063235.7A 2016-10-14 2017-10-11 抗肿瘤杂环并咪唑类化合物的药用盐 Active CN109843885B (zh)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201610899468.8A CN107955001A (zh) 2016-10-14 2016-10-14 抗肿瘤杂环并咪唑类化合物的药用盐
CN2016108994688 2016-10-14
PCT/CN2017/105646 WO2018068715A1 (zh) 2016-10-14 2017-10-11 抗肿瘤杂环并咪唑类化合物的药用盐

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN109843885A CN109843885A (zh) 2019-06-04
CN109843885B true CN109843885B (zh) 2022-03-29

Family

ID=61905168

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201610899468.8A Pending CN107955001A (zh) 2016-10-14 2016-10-14 抗肿瘤杂环并咪唑类化合物的药用盐
CN201780063235.7A Active CN109843885B (zh) 2016-10-14 2017-10-11 抗肿瘤杂环并咪唑类化合物的药用盐

Family Applications Before (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201610899468.8A Pending CN107955001A (zh) 2016-10-14 2016-10-14 抗肿瘤杂环并咪唑类化合物的药用盐

Country Status (8)

Country Link
US (1) US10874667B2 (zh)
EP (1) EP3527566B1 (zh)
JP (1) JP6740471B2 (zh)
KR (1) KR102456432B1 (zh)
CN (2) CN107955001A (zh)
AU (1) AU2017342887B2 (zh)
CA (1) CA3040231C (zh)
WO (1) WO2018068715A1 (zh)

Families Citing this family (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN112142726B (zh) * 2019-06-27 2024-01-09 上海汇伦医药股份有限公司 一种抗肿瘤药物盐酸盐水合物晶型
EP4342898A4 (en) * 2021-05-18 2024-09-11 Onconic Therapeutics Inc. Crystalline form of tricyclic derivative compound, method for preparing same, and pharmaceutical composition comprising same
CN116672345A (zh) * 2022-02-22 2023-09-01 上海汇伦医药股份有限公司 Parp抑制剂和细胞毒性剂的联合产品及其用途
CN118420547B (zh) * 2024-04-12 2025-06-03 苏州大学 一种放疗增敏剂及其制备方法与应用

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1788000A (zh) * 2003-03-12 2006-06-14 库多斯药物有限公司 酞嗪酮衍生物
WO2013078771A1 (zh) * 2011-11-30 2013-06-06 成都地奥制药集团有限公司 一种多聚（adp-核糖）聚合酶抑制剂
CN104003940A (zh) * 2014-06-16 2014-08-27 华东理工大学 2,4-二氟-5-(酞嗪酮-1-甲基)-苯甲酰哌嗪类化合物及其用途
CN106146492A (zh) * 2015-04-17 2016-11-23 上海汇伦生命科技有限公司 杂环并咪唑类化合物、其药物组合物及其制备方法和用途

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN100400518C (zh) 2000-10-30 2008-07-09 库多斯药物有限公司 2,3-二氮杂萘酮衍生物
GB2415430B (en) 2003-03-12 2006-07-12 Kudos Pharm Ltd Phthalazinone derivatives
DE102015103857A1 (de) 2014-12-01 2016-06-02 Schott Ag Miniaturisiertes elektronisches Bauelement mit verringerter Bruchgefahr sowie Verfahren zu dessen Herstellung
CN106146504B (zh) * 2015-04-17 2018-09-07 上海汇伦生命科技有限公司 一种杂环并咪唑类化合物、其药物组合物及其制备方法和用途

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1788000A (zh) * 2003-03-12 2006-06-14 库多斯药物有限公司 酞嗪酮衍生物
WO2013078771A1 (zh) * 2011-11-30 2013-06-06 成都地奥制药集团有限公司 一种多聚（adp-核糖）聚合酶抑制剂
CN104003940A (zh) * 2014-06-16 2014-08-27 华东理工大学 2,4-二氟-5-(酞嗪酮-1-甲基)-苯甲酰哌嗪类化合物及其用途
CN106146492A (zh) * 2015-04-17 2016-11-23 上海汇伦生命科技有限公司 杂环并咪唑类化合物、其药物组合物及其制备方法和用途

Also Published As

Publication number Publication date
JP6740471B2 (ja) 2020-08-12
WO2018068715A1 (zh) 2018-04-19
CN109843885A (zh) 2019-06-04
EP3527566B1 (en) 2025-06-04
CA3040231C (en) 2021-10-12
US10874667B2 (en) 2020-12-29
EP3527566A4 (en) 2020-05-06
AU2017342887B2 (en) 2020-06-25
US20200038394A1 (en) 2020-02-06
CN107955001A (zh) 2018-04-24
AU2017342887A1 (en) 2019-05-16
KR102456432B1 (ko) 2022-10-20
JP2019534272A (ja) 2019-11-28
CA3040231A1 (en) 2018-04-19
KR20190088464A (ko) 2019-07-26
EP3527566A1 (en) 2019-08-21

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN109843885B (zh) 抗肿瘤杂环并咪唑类化合物的药用盐
JP6263614B2 (ja) ベンゾイミダゾール−２−ピペラジン複素環系化合物、その医薬組成物及びその調製方法と用途
CN104140426B (zh) 嘧啶并咪唑类化合物、其药物组合物及其制备方法和用途
US20100234593A1 (en) Imidazo[4,5-B]Pyridine-7-Carboxamides 704
US10174023B2 (en) Heterocyclic-imidazole compounds, pharmaceutical compositions thereof, preparation method therefor and use thereof
CN108530426A (zh) 含喹喔啉酮的4-苯氧基取代喹啉类化合物及其应用
CN106146504B (zh) 一种杂环并咪唑类化合物、其药物组合物及其制备方法和用途
CN107474039A (zh) 含三氮唑酮和咪唑的4-苯氧基取代喹啉类化合物及其应用
KR100392468B1 (ko) 사이클린 의존 키나아제의 저해제로서 유용한3-히드록시크로멘-4-온 유도체
CN103923088A (zh) 2,5-二氮杂双环[2.2.1]庚烷类化合物和制备方法、其药用组合物及其在医药上的应用
WO2024217493A1 (en) CRYSTALLINE METHIONINE ADENOSYLTRANSFERASE 2a (MAT2A) INHIBITOR AND USES THEREOF

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
CB02 Change of applicant information
CB02 Change of applicant information

Address after: Room 650-10, building 2, 351 GuoShouJing Road, China (Shanghai) pilot Free Trade Zone, Pudong New Area, Shanghai, 201203

Applicant after: Shanghai Hui Bio Technology Co.,Ltd.

Address before: 201203 Shanghai Guo Shou Jing Road, Zhangjiang High Tech Park of Pudong New Area No. 351 Building No. 2 room 650-10

Applicant before: SHANGHAI HUILUN LIFE SCIENCE & TECHNOLOGY Co.,Ltd.

GR01 Patent grant
GR01 Patent grant
CP03 Change of name, title or address
CP03 Change of name, title or address

Address after: 200241 floor 10, building 5, No. 525, Yuanjiang Road, Minhang District, Shanghai

Patentee after: Shanghai Huilun Pharmaceutical Co.,Ltd.

Address before: Room 650-10, building 2, No. 351, GuoShouJing Road, China (Shanghai) pilot Free Trade Zone, Pudong New Area, Shanghai, 201203

Patentee before: Shanghai Hui Bio Technology Co.,Ltd.