CN109675041A

CN109675041A - 用于治疗癌症的系统、方法和制剂

Info

Publication number: CN109675041A
Application number: CN201910036937.7A
Authority: CN
Inventors: 穆哈默德·M·D·尼扎米
Original assignee: RESEARCH CANCER INSTITUTE OF AMERICA
Current assignee: RESEARCH CANCER INSTITUTE OF AMERICA
Priority date: 2011-07-07
Filing date: 2012-07-06
Publication date: 2019-04-26
Also published as: JP2017105797A; US20170014376A1; WO2013006821A1; AU2012278813B2; EP3326625A1; JP2018203767A; KR20190107166A; JP6082737B2; EP2729008B1; MX354383B; US20200206183A1; ES2630306T3; IN2014DN00195A; JP2014518274A; CA2839727C; EP2729008A4; AU2016269491A1; CA2839727A1; US20130011488A1; JP6401317B2

Abstract

本文描述了使用至少两种表观遗传修饰剂治疗癌症的方法和组合物。在不同的实施方案中，还使用了高压氧疗法和糖酵解抑制疗法。

Description

用于治疗癌症的系统、方法和制剂

相关申请的交叉引用

本申请要求享有于2011年7月7日提交的名称为“免疫功能失调和癌症患者的靶向静脉内疗法”(TARGETED INTRAVENOUS THERAPIES FOR PATIENTS WITH IMMUNEDYSFUNCTION AND CANCER)的第61/505,393号美国临时申请和于2011年7月14日提交的名称为“治疗癌症的方法”(METHOD FOR TREATING CANCER)的第61/507,950号美国临时申请的权益，在此都通过引用整体并入。

技术领域

本公开涉及用于治疗癌症患者(尤其是患有晚期癌症的患者)的不同的系统、方法和制剂。

发明背景

2007年，美国男性中十种最常被诊断的癌症包括：前列腺癌、肺癌、结肠癌、直肠癌和膀胱癌；皮肤黑素瘤；非霍奇金氏淋巴瘤；肾癌、口腔和咽喉癌、白血病、以及胰腺癌。女性中，最常见的癌症报道为乳腺癌、肺癌和结肠癌。总的来说，2007年美国有758,587名男性被告知他们患有癌症，292,853名男性死于癌症。女性中，国家癌症研究所(National CancerInstitute)2008年的监测、流行病学与最终结果(Surveillance,Epidemiology,and EndResults,SEER)项目报道存在6,451,737例晚期病例的患病率。一般来说，疾病预防控制中心(Centers for Disease Control and Prevention,CDC)2010年报道美国存在11,957,599例晚期癌症，并且该发生率在过去8年间几乎没有改变(2000年的482,000例对2008年的456,000例)。1999年至2008年间，癌症发生率每年仅存在约0.6％的变化。统计数据表明，由所有类型的晚期癌症造成的死亡数自十年前就未得到明显改善，并且在某些情况下，如肺癌，死亡率在上升，尤其是在女性中。尽管更多的用于晚期疾病的化疗剂被引入到市场，但患者存活率基本上没有改变。此外，许多化疗剂的潜在毒性对临床医师和患者而言可能都是破坏性因素。因此，对单独使用或与常规化疗组合使用的无毒疗法的需求是明显的。

发明概述

在不同实施方案中，提供了用于预防或治疗癌症的药物制剂，其包含两种或多种“表观遗传修饰剂”。在其他实施方案中，表观遗传修饰剂可以为组蛋白脱乙酰酶抑制剂和/或脱甲基化剂。在其他优选实施方案中，脱甲基化剂可以间接用作组蛋白脱乙酰酶抑制剂(HDACI)，并且反之亦然。在其他特别优选的实施方案中，表观遗传修饰剂可以选自：苯丁酸钠(SDB)、硫辛酸(LA)、槲皮素、丙戊酸、肼苯哒嗪、复方新诺明(bactrim)、绿茶提取物(例如，表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG))、姜黄素、萝卜硫素和蒜素/二烯丙基二硫化物。在优选实施方案中，一种表观遗传修饰剂包含苯丁酸钠(SPB)，并且另一种表观遗传修饰剂包含槲皮素。在另一优选实施方案中，一种表观遗传修饰剂包含苯丁酸钠(SPB)，并且另一种表观遗传修饰剂包含绿茶提取物，如表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)。

在其他实施方案中，药物制剂还可以包含一种或多种糖酵解抑制剂。在进一步的实施方案中，糖酵解抑制剂可以选自：二氯乙酸、奥曲肽和2脱氧葡萄糖(2DG)。在其他实施方案中，药物制剂还可以包含一种或多种氧化剂或抗氧化剂。在进一步的实施方案中，氧化剂或抗氧化剂选自：维生素C、锗、左旋肉碱、牛磺酸、谷胱甘肽、赖氨酸、脯氨酸、过氧化氢(H₂O₂)和二甲亚砜(DMSO)。

在不同实施方案中，提供了用于预防或治疗癌症的单位剂量的药物制剂，其包含组合形式的两种或多种表观遗传修饰剂，其中所述表观遗传修饰剂以足以在人体内引起肿瘤应答(例如，减少肿瘤标记物、缩小人肿瘤)的剂量存在，所述肿瘤应答在给予约1单位剂量至约60单位剂量后通过实验室和/或放射学研究测得。在其他不同实施方案中，提供了用于预防或治疗癌症的单位剂量的药物制剂，其包含组合形式的两种或多种表观遗传修饰剂，其中所述表观遗传修饰剂以足以引起免疫系统增强的剂量存在，所述免疫系统增强通过给予约1单位剂量至约60单位剂量后人体白细胞计数(WBC)和/或自然杀伤(NK)细胞活性的增加测得。

在其他实施方案中，提供了试剂盒，其包括用于预防或治疗癌症的单位剂量的药物制剂和容器，所述药物制剂包含两种或多种表观遗传修饰剂，所述单位剂量至少部分地被包括于所述容器中。

在不同实施方案中，提供了预防或治疗的方法，其包括给予动物治疗有效量的两种或多种表观遗传修饰剂。在一实施方案中，预防或治疗是针对癌症。在优选实施方案中，癌症为表观遗传驱动的癌症。在另一特别优选的实施方案中，癌症选自：胶质瘤、结肠癌、胰腺癌、白血病、非小细胞肺癌和恶性黑素瘤。在另一优选实施方案中，癌症是缺氧性的。

在另一实施方案中，提供了预防或治疗的方法，其包括给予动物模型体外或体内癌细胞系或培养物治疗量的一种或多种表观遗传修饰剂，并使动物经受高压氧环境。在一具体实施方案中，可以在使动物经受高压氧前给予一种或多种表观遗传修饰剂。在可选的具体实施方案中，可以在使动物经受高压氧后给予一种或多种表观遗传修饰剂。在另一可选的具体实施方案中，可以在使动物经受高压氧环境之前和之后给予一种或多种表观遗传修饰剂。在另一实施方案中，可以单独或以组合形式给予表观遗传修饰剂。在特别优选的实施方案中，使动物经受高压氧环境发生在给予一种或多种表观遗传修饰剂之前或之后约24小时内。在第二优选实施方案，使动物经受高压氧环境发生在给予一种或多种表观遗传修饰剂之前或之后约5分钟至约90分钟。在第三优选实施方案中，使动物经受高压氧环境发生在给予一种或多种表观遗传修饰剂之前或之后约30分钟至约3小时。

在另一实施方案中，对于任何前述方法，化疗或辐射可以为一个或多个额外的步骤，其发生在给予任何表观遗传修饰剂之前或之后，无论是以单独或组合形式、分开的或混合的、在使动物经受高压氧环境之前或之后。

在不同实施方案中，提供了预防或治疗的方法，其包括给予动物模型体外或体内癌细胞系或培养物治疗有效量的一种或多种糖酵解抑制剂或修饰剂，并使动物经受高压氧环境。在具体实施方案中，使动物经受高压氧环境发生在给予一种或多种糖酵解抑制剂或修饰剂之前或之后约24小时内。在第二优选实施方案，使动物经受高压氧环境发生在给予一种或多种糖酵解抑制剂或修饰剂之前或之后约5分钟至约90分钟。在另一特别优选的实施方案中，使动物经受高压氧环境发生在给予一种或多种糖酵解抑制剂或修饰剂之前或之后约30分钟至约3小时。

在其他实施方案中，预防或治疗的方法包括给予动物模型体外或体内癌细胞系或培养物治疗有效量的一种或多种糖酵解抑制剂或修饰剂，并给予动物治疗有效量的一种或多种表观遗传修饰剂。在具体实施方案中，一种或多种糖酵解抑制剂给予和一种或多种表观遗传修饰剂给予发生在彼此之前或之后约24小时内。在第二具体实施方案中，一种或多种糖酵解抑制剂给予发生在给予一种或多种表观遗传修饰剂给予之前或之后约5分钟至约90分钟。在第三具体实施方案中，一种或多种糖酵解抑制剂给予发生在一种或多种表观遗传修饰剂给予之后约30分钟至约3小时。

在一具体实施方案中，提供了用于预防或治疗癌症的药物制剂，其包含两种或多种表观遗传修饰剂。

在具体实施方案中，所述两种或多种表观遗传修饰剂为组蛋白脱乙酰酶抑制剂或脱甲基化剂。

在具体实施方案中，所述两种或多种表观遗传修饰剂选自：苯丁酸钠(SPB)、硫辛酸(LA)、槲皮素、丙戊酸、肼苯哒嗪、复方新诺明、绿茶提取物、表没食子儿茶素没食子酸酯、姜黄素、萝卜硫素和蒜素/二烯丙基二硫化物。

在具体实施方案中，所述药物制剂包含苯丁酸钠(SPB)和槲皮素。

在具体实施方案中，所述药物制剂为包含约1.0g至约10.0g苯丁酸钠(SPB)和约0.5g至约1.5g槲皮素的单位剂量。

在具体实施方案中，所述药物制剂包含槲皮素和硫辛酸(LA)。

在具体实施方案中，所述药物制剂为包含约0.5g至约1.5g槲皮素和约200mg至约1000mg硫辛酸(LA)的单位剂量。

在具体实施方案中，所述药物制剂包含硫辛酸(LA)和苯丁酸钠(SPB)。

在具体实施方案中，所述药物制剂为包含约200mg至约1000mg硫辛酸(LA)和约1.0g至约10.0g苯丁酸钠(SPB)的单位剂量。

在具体实施方案中，所述药物制剂包含绿茶提取物和苯丁酸钠(SPB)。

在具体实施方案中，所述药物制剂为包含约100mg至约1.5g绿茶提取物和约1.0g至约10.0g苯丁酸钠(SPB)的单位剂量。

在具体实施方案中，所述药物制剂还包含一种或多种氧化剂或抗氧化剂。

在具体实施方案中，所述一种或多种氧化剂或抗氧化剂选自：维生素C、锗、左旋肉碱、牛磺酸、谷胱甘肽、赖氨酸、脯氨酸、过氧化氢(H₂O₂)和二甲亚砜(DMSO)。

在具体实施方案中，所述药物制剂还包含一种或多种药学可接受的赋形剂、稀释剂或载体。

在具体实施方案中，所述药物制剂还包含生理盐水和D5盐水中的至少一种。

在具体实施方案中，所述药物制剂适合于经静脉注射到人体。

在具体实施方案中，所述药物制剂还包含一种或多种糖酵解抑制剂。

在具体实施方案中，所述一种或多种糖酵解抑制剂选自：二氯乙酸、奥曲肽和2脱氧葡萄糖(2DG)。

在另一具体实施方案中，提供了用于治疗癌症的单位剂量的药物制剂，其包含两种或多种组合形式的表观遗传修饰剂，其中所述表观遗传修饰剂以足以在人体引起肿瘤应答的剂量存在，所述肿瘤应答在给予约1单位剂量至约60单位剂量后通过实验室和/或放射学研究测得。

在又一具体实施方案中，提供了用于治疗癌症的单位剂量的药物制剂，其包含两种或多种组合形式的表观遗传修饰剂，其中所述表观遗传修饰剂以足以引起免疫系统增强的剂量存在，所述免疫系统增强通过给予约1单位剂量至约60单位剂量后人体白细胞计数(WBC)和/或自然杀伤(NK)细胞活性的增加测得。

在一具体实施方案中，提供了试剂盒，其包括：用于治疗癌症的单位剂量的药物制剂，其包含两种或多种表观遗传修饰剂；容器，所述单位剂量被至少部分地包含于其中。

在具体实施方案中，所述两种或多种表观遗传修饰剂包含脱甲基化剂或组蛋白脱乙酰酶抑制剂(HDACI)。

在具体实施方案中，所述表观遗传修饰剂选自：苯丁酸钠(SDB)、硫辛酸(LA)、槲皮素、丙戊酸、肼苯哒嗪、复方新诺明、绿茶提取物、姜黄素、萝卜硫素和蒜素/二烯丙基二硫化物。

在具体实施方案中，所述试剂盒还包括含有第一表观遗传修饰剂的第一子容器和含有第二表观遗传修饰剂的第二子容器。

在具体实施方案中，所述试剂盒还包括含有组合形式的第一表观遗传修饰剂和第二表观遗传修饰剂的子容器。

在具体实施方案中，所述试剂盒还包括用于指导给予所述单位剂量的记忆辅助物。

在另一具体实施方案中，提供了治疗方法，其包括：给予哺乳动物一种或多种表观遗传修饰剂；以及使所述哺乳动物经受高压氧环境。

在具体实施方案中，方法中的高压氧环境包含超过约95％的O₂气氛。

在具体实施方案中，方法中的所述经受发生在所述给予约24小时内。

在具体实施方案中，方法中的所述经受发生在所述给予之前或之后约5分钟至约90分钟。

在具体实施方案中，方法中的所述经受发生在所述给予之前或之后约30分钟至约3小时。

在具体实施方案中，方法中的所述一种或多种表观遗传修饰剂包含一种或多种脱甲基化剂或组蛋白脱乙酰酶抑制剂(HDACI)。

在具体实施方案中，方法中的所述一种或多种表观遗传修饰剂选自：苯丁酸钠(SPB)、硫辛酸(LA)、槲皮素、丙戊酸、肼苯哒嗪、复方新诺明、绿茶提取物、姜黄素、萝卜硫素和蒜素/二烯丙基二硫化物。

在具体实施方案中，方法中的所述一种或多种表观遗传修饰剂包含苯丁酸钠(SPB)。

在具体实施方案中，方法中的所述一种或多种表观遗传修饰剂包含硫辛酸(LA)。

在具体实施方案中，方法中的所述一种或多种表观遗传修饰剂包含槲皮素。

在具体实施方案中，方法中的所述一种或多种表观遗传修饰剂包含槲皮素和苯丁酸钠(SPB)。

在具体实施方案中，方法中的所述给予包括：以生理盐水中约0.5g至约1.5g的剂量经静脉给予槲皮素；和以生理盐水中约1.0g至约10.0g的剂量经静脉给予苯丁酸钠(SPB)。

在具体实施方案中，方法中的所述一种或多种表观遗传修饰剂包含槲皮素和硫辛酸(LA)。

在具体实施方案中，方法中的所述给予包括：以生理盐水中约0.5g至约1.5g的剂量经静脉给予槲皮素；和以生理盐水中约200mg至约1000mg的剂量经静脉给予硫辛酸(LA)。

在具体实施方案中，方法中的所述一种或多种表观遗传修饰剂包含硫辛酸(LA)和苯丁酸钠(SPB)。

在具体实施方案中，方法中的所述给予包括：以生理盐水中约200mg至约1000mg的剂量经静脉给予硫辛酸(LA)；和以生理盐水中约1.0g至约10.0g的剂量经静脉给予苯丁酸钠(SPB)。

在具体实施方案中，方法中的所述表观遗传修饰剂包含绿茶提取物和苯丁酸钠(SPB)。

在具体实施方案中，方法中的所述给予包括：以生理盐水中约100mg至约1.5g的剂量经静脉给予绿茶提取物；和以生理盐水中约1.0g至约10.0g的剂量经静脉给予苯丁酸钠。

在具体实施方案中，方法还包括给予哺乳动物一种或多种糖酵解抑制剂。

在具体实施方案中，方法还包括给予哺乳动物一种或多种氧化剂或抗氧化剂。

在又一具体实施方案中，提供了治疗方法，其包括：给予哺乳动物一种或多种糖酵解抑制剂；以及使所述哺乳动物经受高压氧环境。

在具体实施方案中，方法中的所述高压氧环境包含超过95％的O₂气氛。

在具体实施方案中，方法中的所述经受发生在所述给予之前或之后30分钟至约3小时。

在具体实施方案中，方法中的所述一种或多种糖酵解抑制剂包含二氯乙酸、奥曲肽和2脱氧葡萄糖(2DG)中的至少一种。

在具体实施方案中，方法还包括给予患者一种或多种HDACI。

在具体实施方案中，方法还包括给予患者一种或多种氧化剂或抗氧化剂。

在还一具体实施方案中，提供了治疗方法，其包括：给予哺乳动物一种或多种糖酵解抑制剂；和给予哺乳动物一种或多种表观遗传修饰剂。

在具体实施方案中，方法中的所述一种或多种表观遗传修饰剂包含脱甲基化剂或组蛋白脱乙酰酶抑制剂(HDACI)。

在具体实施方案中，方法中的所述一种或多种表观遗传修饰剂选自：苯丁酸钠(SDB)、硫辛酸(LA)、槲皮素、丙戊酸、肼苯哒嗪、复方新诺明、绿茶提取物、表没食子儿茶素没食子酸酯、姜黄素、萝卜硫素和蒜素/二烯丙基二硫化物。

发明详述

以下说明书、实施例和数据提供了制备和应用本发明化合物的完整描述。由于可以不脱离本发明的精神和范围形成本发明的许多实施方案，本发明属于下文所附的权利要求。提供上述实例是为了向本领域技术人员提供如何制备和应用所述组合物和方法的优选实施方案的完整公开和说明，并且不试图限制本发明的发明人认为是其发明内容的范围。对本领域技术人员显而易见的实施本发明上述模式的修改被认为在下述权利要求的范围内。除非明确指明，应用以下定义。

定义

如本文使用的术语“给予(administer/administration)”、“递送(deliver/delivery)”是指经由片剂、胶囊、软胶囊、静脉内、肌肉内、和/或皮下注射、透皮贴、霜剂、凝胶或本领域已知的或此后开发的其他机制给予身体。

如本文使用的术语“活性成分”可以指具有或预期具有生物活性的任何物质。

如本文使用的术语“组合形式”可以指两种或多种活性成分存在于同一媒介中。例如，如果活性成分A和活性成分B都存在于同一盐水媒介中，则可以认为活性成分A和活性成分B的混合物是组合形式。

如本文使用的术语“表观遗传修饰剂”可以指影响、被认为影响或倾向于影响基因表达和功能的物质。同样如本文所使用的“表观遗传驱动”可以指受基因表达和功能影响或倾向于受基因表达和功能影响的任何物质。

如本文使用的术语“糖酵解抑制剂”可以指抑制、被认为抑制或倾向于抑制癌细胞中出现的糖酵解的物质。

如本文使用的术语“盐水”可以指无菌的或基本上无菌的氯化钠水溶液。盐水可适合于经静脉注射到人体。

如本文使用的术语“单位剂量”可以指试图一次给予患者的药物制剂的量或体积。

描述

已发现两种或多种表观遗传修饰剂在治疗癌症中的应用可产生意想不到的协同治疗效果。具体来说，共给予、共配制和/或暂时密集的给予倾向于产生特别有效的结果。此外，在不同实施方案中，高压氧治疗还可提高治疗效果。还发现除了两种或多种表观遗传修饰剂，还可以有利地使用不同的抗氧化剂和糖酵解抑制剂。任何表观遗传修饰剂、抗氧化剂、糖酵解抑制剂和/或高压氧治疗的共给予、共配制和/或临时密集的给予可以以任何顺序发生，但可以在彼此之前或之后约24小时内、在彼此之前或之后约5分钟至约90分钟，或在彼此之前或之后约30分钟至约3小时发生。

根据不同的实施方案，制剂包含两种或多种表观遗传修饰剂。表观遗传修饰剂可以一起起作用来改变癌细胞和癌前细胞内的遗传表达。可以选择表观遗传修饰剂来增加或减少遗传表达。例如，可以将表观遗传修饰剂用于减少大鼠肉瘤(“Ras”)家族基因和/或b-细胞淋巴瘤2(“bcl-2”)基因的表达。

不同实施方案中出现的表观遗传修饰剂包括但不限于，组蛋白脱乙酰酶抑制剂和脱甲基化剂。脱甲基化剂是通过抑制或倾向于抑制甲基化酶而抑制或倾向于抑制DNA和/或组蛋白甲基化的试剂，如DNA甲基转移酶(DNMT)或组蛋白甲基转移酶。脱甲基化化疗剂包括但不限于，胞苷类似物，如5-氮杂胞苷(阿扎胞苷)和5-氮杂脱氧胞苷(地西他滨)。尤其是，已知HDACIs可干扰或倾向于干扰组蛋白脱乙酰酶。组蛋白脱乙酰酶是可从组蛋白脱除乙酰基的酶，并且在转录前是具有活性的。除了其他特征，还表明一些表观遗传修饰剂也可抑制血管生成。

在不同实施方案中，尽管本发明可考虑使用任何表观遗传修饰剂，HDACIs可能是直接的(例如，通过与靶酶直接关联起作用)或间接的(例如，通过间接方式起作用，如改变染色质形状)。另外，HDACI可包含以下中的一种或多种：苯丁酸钠(“SPB”)、硫辛酸(“LA”)、槲皮素、丙戊酸、肼苯哒嗪、复方新诺明、绿茶提取物(例如，表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG))、姜黄素、萝卜硫素和蒜素/二烯丙基二硫化物。

FDA目前将SPB归类为用于治疗尿素循环代谢障碍的罕见药。苯丁酸盐(“PB”)是前药。在人体内，PB通过β-氧化为苯乙酸盐而被代谢。苯乙酸盐与谷氨酰胺缀合形成苯乙酰谷氨酰胺，其最终在尿中被排泄。苯丁酸(“PBA”)在体外和体内模型系统中具有生长抑制和分化诱导活性。尽管不受该理论束缚，认为PBA可使细胞周期停止在其G1-G0期。PB是高效的HDACI，并且被认为可通过c-jun氨基末端激酶(“JNK”)诱导细胞凋亡。在肺癌细胞中，在MCF-7细胞中介导生长停滞的56p21wafl、肿瘤坏死因子(TNF)-α58或过氧化物酶体增殖物活化受体(PPAR)λ介导细胞分化，并且在前列腺癌细胞中比苯乙酸盐更有效，同时增加MHCI类表达。PB通过在肝和肾线粒体内的β-氧化在体内转化为活性代谢物苯乙酸盐(“PA”)。多数剂量限度中毒为疲乏、恶心和嗜睡。已经对患有复发性多形性成胶质细胞瘤的患者进行了初步研究。认为SPB通过影响NFκ-B通路、减少炎性反应和下调多于一百种基因而发挥作用。

SPB的毒性研究表明，每天多达36克的口服剂量显示最小毒性。在一项研究中，25％的患者在服用药物时疾病稳定超过6个月。口服形式的SPB耐受性良好，并达到了在体外表明具有生物活性的体内浓度。已经表明，SPB可以作为细胞抑制剂起作用。然而，在多数研究中，SPB经口使用而非经静脉使用。

在不同实施方案中，槲皮素被用作HDACI。槲皮素还被用作癌症干细胞分化剂，许多通路和信号分子的阻断剂，化疗增敏剂，以及凋亡剂。槲皮素是从苹果中提取的聚苯。已提出了显示槲皮素抗癌效应的几种机制。已表明槲皮素可与多种细胞受体相互作用，并且槲皮素抑制G1和G2期的细胞生长，抑制酪氨酸激酶以阻止不受控制的增殖，影响雌激素受体，以及与热休克蛋白相互作用以阻止增殖。

还表明槲皮素可以与受体如参与肿瘤增殖的Raf和MEK相互作用。还怀疑存在与其他受体如细胞表面受体的相互作用。另外，认为槲皮素可以用作信号转导的修饰剂。据报道，槲皮素影响细胞周期调节、细胞死亡、炎性反应和新血供应的来源。

已对槲皮素进行了毒性研究。进行了槲皮素开放标签、非控制性剂量探索临床试验。在该试验中，高达1700mg/m2递增值的槲皮素经静脉给予50名患者约3周，这些患者患有通过常规方法认为无法治疗的癌症。治疗了各种癌症患者，包括大肠癌、胃癌、胰腺癌、卵巢癌和黑色素瘤。没有患者达到由WHO的放射学标准定义的抑制，但两名患者在槲皮素疗法后显示特有癌症标记物的持续减少(一名患有转移性肝细胞癌，另一名患有4期转移性卵巢癌且之前对化疗无反应)。另外，测量了11名个体的酪氨酸激酶水平，并报道在9名个体中降低。通常在肿瘤学中研究酪氨酸激酶，因为其可以通过覆盖控制细胞生长的信号造成癌症不受控制的增殖。因此，推断槲皮素可能具有抑制酪氨酸激酶的能力，并且应当在不高于1400mg/m2的剂量下进行深入研究。几项体外试验已经支持了该研究的结果，其中槲皮素引起恶性和非恶性细胞中酪氨酸激酶表达的抑制。

虽然不受该理论束缚，由于其遗传调控作用，包括例如，减少RAS基因和bcl-2基因的遗传表达，推测槲皮素可以在几乎每种癌细胞的治疗中都显示有前景的效果。还表明槲皮素在癌症发生中具有预防作用。在当前的吸烟者中，槲皮素摄入与胰腺癌负相关，显示了摄入的最高和最低五分位数间的相对风险显著减少(0.55)。

然而，似乎没有关注结合其他表观遗传疗法经静脉使用槲皮素时其效果的人体研究。

在不同实施方案中，硫辛酸(“LA”)被用作HDACI。硫辛酸也是一种用于糖酵解疗法的拓扑异构酶抑制剂和氧化剂。在低水平时，LA是线粒体内丙酮酸脱氢酶的辅因子。人体不合成LA，并且在饮食或食物中不能获得足够的量。从膳食来源不能直接得到天然存在的LA。低水平的LA与多种疾病状态相关。LA一般被认为是安全且无毒的。

最近，认为LA的主要效应是作为氧化应激反应的诱导物。考虑到这点，使用高压氧治疗，LA通过加强针对癌症的组合疗法中的氧化可能有效。已表明α-硫辛酸通过增加线粒体呼吸作用并伴随着氧自由基产生而诱导人结肠癌细胞凋亡。几项研究提供了α硫辛酸可以通过促氧化机制有效诱导人结肠癌细胞凋亡的证明，所述促氧化机制由增加可氧化的底物吸收至线粒体而发起。

最近的研究显示了使用LA治疗以下多种小鼠癌症模型癌细胞中的前景：MBT-2膀胱移行细胞癌、B16-F10黑素瘤和LL/2Lewis肺癌。认为LA降低癌细胞生存能力并增加细胞的DNA片段化。一般来说，通过诱导细胞凋亡似乎可介导LA的抗癌效果，诱导细胞凋亡通过由细胞内Ca2+介导的不依赖半胱天冬酶和依赖半胱天冬酶的通路完成。LA通常被认为是安全且无毒的。α-硫辛酸在德国被许可作为治疗多发性神经病，如糖尿病性和酒精性多发性神经病，以及肝病的药物。

绿茶提取物，如表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)，也称为表没食子儿茶素3-没食子酸酯，也被考虑用于本发明。EGCG是表没食子儿茶素和没食子酸的酯，是儿茶素的一种类型。EGCG是茶中最丰富的儿茶素，并且是有效的抗氧化剂，其在治疗许多病症(例如癌症)中具有治疗应用。其通常在绿茶而非红茶中存在；在红茶制造期间，儿茶素转化为茶黄素和茶红素。EGCG存在于许多补充剂中。

越来越多的证据表明，EGCG连同其他黄酮类可有益于治疗某些癌症，包括脑癌、前列腺癌、宫颈癌和膀胱癌。已经表明EGCG结合并抑制抗细胞凋亡蛋白Bcl-xl，该蛋白涉及癌细胞和正常细胞的存活。同样地，发现EGCG，还有其他茶多酚，是强拓扑异构酶抑制剂，类似于一些化疗抗癌症药物，例如依托泊苷和阿霉素。

根据不同实施方案，包含一种或多种HDACIs的制剂可以为组合形式。

根据不同实施方案，制剂、系统和方法还可以包含一种或多种药学可接受的赋形剂。制剂可以单独给予或与本文中公开的一种或多种其他化合物组合或与一种或多种其他药物组合(或作为其任何组合)给予。一般来说，本文描述的制剂作为与一种或多种药学可接受的赋形剂组合的制剂给予。赋形剂的选择较大程度上取决于诸如给予的特定方式、赋形剂对溶解性和稳定性的影响和剂型性质的因素。

适合递送本发明化合物的药物组合物及它们的制备方法对本领域技术人员是显而易见的。此类组合物及它们的制备方法可以在例如，《雷氏药学大全》(Remington'sPharmaceutical Sciences,19th Edition,Mack Publishing Company,1995)中找到，其通过引用整体并入本文。

根据不同实施方案，制剂可以包含任何药学可接受的载体或稀释剂，如盐水。生理盐水可以包含无菌水和氯化钠。例如，可以使用生理盐水和/或D5盐水。D5盐水包含具有5％葡萄糖的盐水。

还可以将本发明的制剂直接给予到血流、肌肉或内部器官。肠胃外给予的合适方式包括静脉内、动脉内、腹膜内、鞘内、心室内、尿道内、胸骨内、颅内、肌肉内和皮下给予。肠胃外给予的合适装置包括针(包括微针)注射器、无针注射器和输注技术。

肠胃外制剂通常为水溶液，其可以含有赋形剂，如盐、糖类和缓冲剂(优选约pH 3至约pH 11)，但是对于一些应用，可能更适合将他们制成无菌的无水溶液或连同诸如无菌、无热源水的合适载体使用的干燥形式。

无菌条件下肠胃外制剂的制备，例如，通过冷冻干燥，可以容易地使用本领域技术人员熟知的标准制药技术完成。

本文公开化合物的药学可接受的盐包括其酸加成盐及碱盐。合适的酸加成盐由形成无毒盐的酸形成。实例包括但不限于：醋酸盐、天冬氨酸盐、苯甲酸盐、苯磺酸盐、碳酸氢盐/碳酸盐、重硫酸盐/硫酸盐、硼酸盐、樟脑磺酸盐、柠檬酸盐、乙二磺酸盐、乙磺酸盐、甲酸盐、延胡索酸盐、葡庚糖酸盐、葡萄糖酸盐、葡萄糖醛酸盐、六氟磷酸盐、海苯酸盐(hibenzate)、盐酸盐/氯化物、氢溴酸盐/溴化物、氢碘酸盐/碘化物、羟乙基磺酸盐、乳酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、丙二酸盐、甲磺酸盐、甲硫酸盐、萘酸盐(naphthylate)、2-萘磺酸盐、烟酸盐、硝酸盐、乳清酸盐、草酸盐、棕榈酸盐、双羟萘酸盐、磷酸盐/磷酸氢盐/磷酸二氢盐、糖酸盐、硬脂酸盐、琥珀酸盐、酒石酸盐、甲苯磺酸盐和三氟醋酸盐。

合适的碱盐由形成无毒盐的碱形成。实例包括：铝盐、精氨酸盐、苄星青霉素盐(benzathine)、钙盐、胆碱盐、二乙胺盐、二乙醇胺盐、甘氨酸盐、赖氨酸盐、镁盐、葡甲胺盐、乙醇胺盐、钾盐、钠盐、氨丁三醇盐(Tromethamine)和锌盐。

还可以形成酸和碱的半盐(hemisalts)，例如，半硫酸盐和半钙盐。

可以通过以下三种方法中的一种或多种制备本文公开的活性成分的药学可接受的盐(尽管可以使用制备药学可接受的盐的任何方法)：

(i)使本文公开的活性成分的化合物与期望的酸或碱反应；

(ii)使用期望的酸或碱，从本文公开的活性成分的合适前体脱去酸不稳定或碱不稳定保护基，或将合适的环形前体如内酯或内酰胺开环；或

(iii)将本文公开的活性成分的一种盐通过与合适的酸或碱反应或通过合适的离子交换柱法转化为另一种盐。

所有三种反应通常都在溶液中进行。生成的盐可以通过过滤沉淀收集，或者可以通过蒸发溶剂回收。生成的盐的离子化程度可在完全离子化至几乎未离子化之间变化。对于合适的盐的综述，参见Stahl和Wermuth的《药用盐手册：性质、选择和应用》(Handbook ofPharmaceutical Salts:Properties,Selection,and Use,Wiley-VCH,Weinheim,Germany,2002)，其中所有适用部分都通过引用并入本文。

在不同实施方案中，两种或多种活性成分，如两种或多种HDACIs，可能不为组合形式，但可以被共给予。共给予可以包括同时或在密集的时间段内给予患者。例如，共给予可以包括同时给予SPB和槲皮素。还例如，共给予可以包括在彼此间隔约24小时内，或者彼此间间隔约1分钟至约60分钟，或者彼此间间隔约5分钟至约90分钟，或彼此间间隔约30分钟至约3小时给予SPB和槲皮素。

在不同实施方案中，可以存在一种或多种氧化剂或抗氧化剂。实例包括但不限于：维生素C、锗、左旋肉碱、牛磺酸、谷胱甘肽、赖氨酸、脯氨酸、过氧化氢(H₂O₂)和二甲亚砜(DMSO)。氧化剂可以为释放或辅助释放自由基的任何化学制剂、物质、分子或化合物，所述自由基导致破坏细胞，包括癌细胞。一般来说，氧化剂(oxidizing agent/oxidizer/oxidiser)在氧化还原化学反应中从另一反应物中脱去电子。氧化剂通过其自身获得电子而被“还原”，而反应物通过其电子被夺走而被“氧化”。抗氧化剂可以为延迟或阻止底物氧化的任何化学制剂、物质、分子或化合物。一般来说，抗氧化剂降低氧化反应速率，所述氧化反应为涉及将电子从一种物质转移到氧化剂的化学反应。抗氧化剂可以通过与中间体反应并直接使氧化反应停止，或通过与氧化剂反应并阻止氧化反应发生来减缓这些反应。同一物质在不同的环境或条件下可以用作氧化剂或抗氧化剂。具体来说，物质的剂量可以确定物质是用作氧化剂还是抗氧化剂。例如，25克IV剂量的维生素C具有氧化或氧化剂性质，但在较低的剂量时，维生素C具有抗氧化剂性质。

在不同实施方案中，可以存在一种或多种糖酵解抑制剂。实例包括但不限于：二氯乙酸、奥曲肽和2脱氧葡萄糖(2DG)。然而，发现并非所有的糖酵解抑制剂都是有效的。具体来说，尽管先前的研究利用3溴丙酮酸盐(作为酵解烷基化剂和抑制剂)来靶向癌细胞，但在本发明中没有发现其有效或使用。一般来说，关于糖酵解抑制剂，一种破坏或预防癌症的策略为靶向它们的细胞能量产生点。有核的人细胞具有两类能量产生单元，即由ADP制造“高能”化合物ATP的系统。一类为“糖酵解”，另一类为“线粒体”。线粒体是非癌细胞中主要的ATP制造者(>90％)。然而，人癌症倾向于依赖这两种机制。糖酵解可以贡献接近一半的ATP，即使是在氧存在下(称为“Warburg效应”)。因此，糖酵解抑制剂在不同癌症的治疗中可能是有用的。

二氯乙酸(“DCA”)是水氯化的副产物。通过刺激丙酮酸盐脱氢酶的活性，DCA促进乳酸盐氧化并减少获得性和先天性乳酸酸中毒的发病率。二氯乙酸盐离子通过抑制酶(丙酮酸盐脱氢酶激酶)而刺激酶(丙酮酸盐脱氢酶)的活性。因此，其通过将丙酮酸盐代谢从糖酵解转向线粒体内氧化而减少乳酸盐产生。

癌细胞倾向于以改变其代谢氧方式的方法来促进它们的存活。实体瘤，包括侵袭性原发性脑癌多形性成胶质细胞瘤，发展出对细胞死亡的抗性，部分是由于从线粒体氧化磷酸化转换为细胞质糖酵解。在体外和体内，DCA都使线粒体去极化，增加线粒体反应性氧类，并诱导糖酵解的癌细胞凋亡。

在体内和体外，DCA疗法还抑制缺氧诱导因子-1α、促进p53活化和抑制血管生成。体外和体内模型中存在大量DCA可能对人癌症有益的临床前证据。此外，通过DCA活化线粒体而增加肿瘤中的O₂消耗，并极大地增强动物模型中缺氧特异性化疗的功效。在组织培养分离的癌细胞生长的实验室研究中，DCA恢复原始代谢，并促进它们自毁。

奥曲肽(商标名)是在药理上模拟天然生长激素抑制素的八肽，但是相比天然激素，其是生长激素、胰高血糖素和胰岛素更有效的抑制剂。奥曲肽在皮下应用后被快速且完全吸收。30分钟后达到最大血浆浓度。

癌基因可表达“酪氨酸激酶受体通路”蛋白，所述蛋白是包括胰岛素或IGF-生长激素受体的受体家族。其他癌基因改变阻碍这些激酶的PP2A磷酸酶。自1979年起，奥曲肽已用于多种医学病症。由于其抑制胰岛素分泌，还用作胰岛素生长因子1(IgF1)的抑制剂，已提议将其用于多种糖酵解的癌症。如通过动物实验所表明，已发现奥曲肽具有对患者有益的治疗应用。

GH激素在肝中诱导胰岛素样生长因子(IGF)的合成和释放。后者激活如胰岛素——IGF-酪氨酸激酶受体(IGFR)，引发MAP激酶-ERK促有丝分裂信号。在正常生理下，GH刺激脂肪细胞中的三酸甘油酯脂肪酶，增加脂肪酸释放及其β氧化。并行地，GH会关闭乙酰CoA的糖酵解源，可能抑制己糖激酶与线粒体相互作用。使细胞凋亡成为可能的这种效应在肿瘤细胞内却不发生。

由于可能期望给予活性成分的组合物，例如，为了治疗特定疾病或病症的目的，两种或多种药物制剂可以适合于共给予组合物的试剂盒形式方便地组合也在本公开的范围内。

因此，本文公开的试剂盒包括两种或多种单独的药物制剂和单独保存所述制剂的工具，其中所述药物制剂中的至少一种含有本文描述的活性成分，所述工具如容器、分隔的瓶或分隔的箔包装。此类试剂盒的一个实例为用于包装片剂、胶囊等的常见泡罩包装。

试剂盒特别适合于给予不同的剂型，例如经口和肠胃外，用于以不同的剂量间隔给予单独的组合物，或用于针对彼此滴定单独的组合物。为了有助于依从性，试剂盒通常包括给予说明书，并且可以与记忆辅助物一起提供。

本发明化合物可以溶剂化物和非溶剂化物的形式存在。术语“溶剂化物”在本文中用来描述包含本发明化合物和化学计量的一种或多种药学可接受的溶剂分子如乙醇的分子复合物。所述溶剂为水时使用术语“水合物”。

包括在本发明的范围内的复合物如笼形配合物、药物-主体包合配合物，其中，相比先前提及的溶剂化物，药物和主体以化学计量或非化学计量存在。还包括含有两种或多种有机和/或无机组分的药物配合物，其可以化学计量或非化学计量存在。产生的复合物可以为离子化的、部分离子化的或未离子化的。对于此类复合物的综述参见Haleblian(1975年8月)的J Pharm Sci,64(8),1269-1288，其通过引用整体并入本文。

下文所有提及如本文中公开的活性成分包括提及盐、溶剂化物及其复合物以及其盐的溶剂化物和复合物。

本文公开的活性成分包括下文定义为本文公开的活性成分的所有多晶型物及其晶体习性、前药及其异构体(包括光学、几何和互变异构体)。例如，本文公开的所有HDACIs和糖酵解抑制剂包括所有的多晶型物及其晶体习性、前药及其异构体(包括光学、几何和互变异构体)。

如同所指出的，本文公开的称为“前药”的活性成分也在本发明的范围内。因此本文公开的活性成分的某些衍生物，其可能自身具有很少或没有药理学活性，当给予到身体内或身体上时，所述衍生物可以转化为本文公开的具有期望活性的活性成分，例如，通过水解裂解。此类衍生物被称为“前药”。使用前药的其他信息可以在以下文献中找到：Prodrugsas Novel Delivery Systems,Vol.14,ACS Symposium Series(T.Higuchi and W.Stella)和Bioreversible Carriers in Drug Design,Pergamon Press,1987(ed.E.B.Roche,American Pharmaceutical Association)，其通过引用整体并入本文。

例如，根据本公开，可以通过用本领域技术人员已知的作为“前部分”的某些部分取代存在于本文公开的活性成分中的合适官能团来产生前药，所述“前部分”描述于，例如，H.Bundgaard(Elsevier,1985)的《前药设计》(Design of Prodrugs)，其通过引用整体并入本文。

根据前述实施例，取代基的实例和其他前药类型的实例可以在前面提及的参考文献中找到。

本发明的范围还包括本文公开的活性成分的代谢物，即通过给予药物在体内形成的化合物。

本文公开的活性成分的化合物可以含有一种或多种不对称碳原子，其可作为两种或多种立体异构体存在。本文公开的活性成分含有烯基或亚烯基(alkenylene)时，可能有几何顺式/反式(或Z/E)异构体。结构异构体可以通过低能障碍相互转化时，可发生互变异构现象(“互变现象”)。这在本文公开的含有例如亚氨基、酮基或肟基的活性成分中可表现为质子互变异构现象的形式，或在含有芳香族部分的化合物中被称为化合价互变异构现象。这遵循单一化合物可显示多于一种类型的异构现象。

包括于本公开范围内的是本文公开的活性成分的所有立体异构体、几何异构体和互变异构形式，包括显示多于一种类型的异构现象的化合物，以及其一种或多种混合物。还包括的是酸加成盐或碱盐，其中平衡离子是光学活性的，例如，d-乳酸盐或l-赖氨酸，或者外消旋盐，例如，dl-酒石酸盐或dl-精氨酸。

可以通过本领域技术人员熟知的常规技术分离顺式/反式异构体，例如色谱和分级结晶。

制备/分离单个对映体的常规技术包括使用如手性高压液相色谱(HPLC)，由合适的光学纯前体手性合成或拆分外消旋物(或外消旋物的盐或衍生物)。

可选地，外消旋物(或外消旋前体)可与合适的光学活性化合物如乙醇反应，或者在本文公开的活性成分含有酸性或碱性部分的情形下，与诸如1-苯乙胺或酒石酸的碱或酸反应。可以通过色谱法和/或分级结晶来分离生成的非对映体混合物，并且通过技术人员熟知的方式将非对映体的一种或两种都转化为相应的纯对映体。

本发明的手性化合物(及其手性前体)可以使用色谱法(通常为HPLC)在不对称树脂上以对映体浓缩的形式得到，其中流动相由碳氢化合物组成，通常为庚烷或己烷，其含有0至约50％体积的异丙醇；通常为约2％至约20％，约0至约5％体积的烷基胺；通常为约0.1％二乙胺。浓缩洗脱液提供了浓缩的混合物。

可以通过本领域技术人员已知的常规技术分离立体异构聚集物，参见例如，E.L.Eliel和S.H.Wilen(Wiley,New York,1994)的《有机化合物的立体化学》(Stereochemistry of Organic Compounds)，其通过引用整体并入本文。

本发明包括本文公开的活性成分的所有药学可接受的同位素标记的化合物，其中一个或多个原子被具有相同原子序数但原子量或质量数不同于天然主要原子的原子量或质量数的原子取代。

适合包含在本发明化合物中的同位素的实例包括但不限于，氢的同位素，2H和3H；碳的同位素，如11C、13C和14C；氯的同位素，如36Cl；氟的同位素，如18F；碘的同位素，如123I和125I；氮的同位素，如13N和15N；氧的同位素，如15O、17O和18O；磷的同位素，如32P；以及硫的同位素，如35S。

本文公开的某些同位素标记的活性成分，例如并入放射性同位素的那些活性成分，在药物和/或底物组织分布研究中是有用的。放射性同位素氚(即3H)和碳14(即14C)，考虑到其易于并入和现成的检测方式，对该目的特别有用。

用较重同位素取代，如氘(即2H)，可提供某些治疗优势，这是由于其更强的代谢稳定性，例如增加体内半衰期或减少需要的剂量，因而在一些情况下可能是优选的。

用发射正电子的同位素取代，如11C、18F、15O和13N，可能在检测底物受体占用的正电子发射断层扫描(PET)研究中是有用的。

通常可以通过本领域技术人员已知的常规技术或通过与随实施例描述的那些类似的方法，使用合适的同位素标记试剂代替先前采用的未标记试剂来制备本文公开的同位素标记的活性成分。

认为通过缺氧诱导因子1和VEGF，自由基和缺氧可以增加对线粒体DNA的破坏，并产生与癌症生长和转移风险相关的表观遗传学不期望的变化。缺氧是局部晚期实体瘤的常见特征，所述实体瘤与治疗应答降低相关，并且更后期与恶性进展相关。新出现的证据表明，缺氧对恶性进展的影响由一系列缺氧诱导的蛋白质组和基因组变化介导，这些变化激活血管生成，厌氧代谢，以及使肿瘤细胞能够存活或逃避其缺氧环境的其他过程。转录因子缺氧诱导因子1(“HIF-1”)是使肿瘤细胞适应缺氧应激的调节物。具有利于在缺氧条件下生存的蛋白质组和基因组变化的肿瘤细胞会增殖，从而进一步加重缺氧。逐渐成为主要肿瘤细胞类型的新(和更具侵袭性的)克隆的选择和扩增，造成了建立缺氧和恶性进展的恶性循环。缺氧倾向于通过增加肿瘤细胞-血小板结合和血行转移的恶性细胞而增加组织因子表达。缺氧，不论其持续多久，增加了HIF-1的核含量以及红细胞生成素和VEGF的mRNA水平。HIF-1在实体瘤细胞生长和存活中起着重要作用。HIF-1α的过表达在许多人肿瘤中已经得到证明，并且对放化疗预期应答较差。

考虑到这一点，认为与化疗一起使用时，高压氧疗法(HBOT)可以在某些恶性肿瘤中起积极作用，并且提高患者生命质量，在体外抑制某些癌基因和肿瘤生长，并且减少肿瘤负担及限制大的肿瘤细胞克隆生长。该效应可能是通过降低HIF-1，HIF-1可以改变随后参与肿瘤转移的VEGF基因表达。VEGF是肿瘤血管生成的引发剂。此外，认为VEGF表达通过缺氧增强，实体瘤缺氧区中加强VEGF产生有助于VEGF驱动的肿瘤血管生成。

认为不造成细胞死亡的自由基相关的病变可以刺激癌症的发展，并且可以促进癌生长和转移。活性氧类产生线粒体DNA突变并上调HIF-I，因此减少氧化损伤是有利的。

存在有效减少自由基产生和细胞损伤的可利用的治疗方法。这些治疗可以潜在地改变表观遗传，并增加其他治疗的效力，如DCA和3BP。因此，将HBOT与本文中公开的制剂和方法结合可能是有利的。

本发明还包括在给予任何表观遗传修饰剂之前或之后，使用高压氧单独或者与另一表观遗传修饰剂组合或共给予治疗的用途。一般来说，高压氧化或高压氧疗法为这样的治疗，其中在大于一个大气压的气氛压力下将个体暴露到增加氧气的环境中预定的时间段。高压氧疗法已经被许可用于治疗许多病症，包括栓塞、一氧化碳中毒、擦伤、减压病、贫血和骨感染。高压氧疗法和不同的高压治疗设备(如高压舱)通常是本领域已知的，并且描述于不同的专利中，如第5,865,722号美国专利，其通过引用全文并入本文。任何合适的高压设备或舱都可以用于本发明。可以在高压氧治疗如在高压舱中之前或之后给予一种或多种表观遗传修饰剂。高压氧治疗可以发生在给予任何表观遗传修饰剂之前或之后约24小时、给予任何表观遗传修饰剂之前或之后约5分钟至约90分钟，或给予任何表观遗传修饰剂之前或之后约30分钟至约3小时。

实施例

实例1：制剂、试剂盒和给予

在不同实施方案中，提供了包含SPB和槲皮素的制剂。该制剂可以为组合形式。该制剂使用盐水媒介，其中存在约0.5g至约1.0g槲皮素和约5.0g至约10.0g SPB。在其他实施方案中，使用D5盐水代替生理盐水媒介。在其他实施方案中，制剂还包含抗氧化剂。

在不同实施方案中，提供了包含LA和槲皮素的制剂。该制剂可以为组合形式。该制剂使用盐水媒介，其中存在约0.5g至约1.5g槲皮素和约200mg至约1000mgLA。在其他实施方案中，使用D5盐水代替生理盐水媒介。

在不同实施方案中，提供了包含LA和SPB的制剂。该制剂可以为组合形式。该制剂使用盐水媒介，其中存在约200mg至约1000mg的LA和约1.0g至约10.0g的SPB。在其他实施方案中，使用D5盐水代替生理盐水媒介。

在不同实施方案中，提供了包含SPB、槲皮素和糖酵解抑制剂的制剂。在不同实施方案中，糖酵解抑制剂包含3-BP、DCA和奥曲肽中的至少一种。该制剂可以为组合形式。该制剂使用盐水媒介，其中存在0.5g至约1.5g槲皮素、约1.0g至约10.0g SPB。在其他实施方案中，使用D5盐水代替生理盐水媒介。

在不同实施方案中，提供了包含绿茶提取物(例如，EGCG)和SPB的制剂。该制剂为组合形式。该制剂使用盐水媒介，其中存在约100mg至约1.5g绿茶提取物和约1.0g至约10.0g SPB。

可以将不同实施方案的任何制剂包装成试剂盒，如本文中所描述。另外，可以共给予或暂时密集地给予如上所述本文公开的活性成分。

实施例2：高压氧疗法(HBOT)

给予或共给予本文公开的任何活性成分后，可以给予HBOT。在不同实施方案中，在给予本文公开的任何活性成分后，使患者经受HBOT约5分钟至约90分钟。HBOT环境包含在压力约0.5atm至约2.5atm下，并且更优选地约1.5atm至约2atm下，至少超过95％的O₂气氛。HBOT发生约30分钟至约3小时。

实施例3：研究

与本文公开一致，进行了以下不同研究：通过靶向疗法，连同使用HDACIs和高压氧的表观遗传修饰剂治疗，来减少癌症患者的合成代谢糖酵解。这些治疗显示提高生命质量，并能提高患者存活率。更具体来说，进行了综合癌症护理/方法来治疗志愿转诊到此类干预的患者。

研究I：随机挑选并评估了40名患者记录。入选标准是诊断为癌症。没有患者被排除在外。患者年龄为27至83岁。所有患者都由他们的肿瘤医师/内科医师诊断，并被给予了标准的常规外科手术治疗、传统化疗或辐射。40名患者中，有20名拒绝了标准护理，或者由于疾病的严重性而没有适合他们的常规选择。40名患者中，在转诊开始治疗之前，有23名患有微观或宏观的多处转移的晚期疾病。这些患者中，有19名(47％)已用多种化疗剂治疗无效，并且通过他们的肿瘤标记物或扫描证明具有疾病发展或复发。

基于独特开发的方案来管理患者，所述方案的设计与涉及使用特定天然和合成IV疗法的可利用研究和临床试验相关。IV疗法靶向表观遗传水平，并且由抗氧化剂、槲皮素、DCA、苯基丁酸钠和硫辛酸单独或组合组成。所有患者都接受了一种或多种此类治疗。每次治疗的剂量保持相同或接近每次治疗，以约0.5g至约1.5g(50mg/ml)的剂量经静脉给予槲皮素。给予SPB时，剂量为约1.0g至约10.0g(200mg/ml的25至50ml)。给予DCA时，剂量为约500mg至约6g(最大100/kg)。给予硫辛酸时，剂量为约200mg至约1000mg。使用标准1.5至2.0大气压力实施高压氧治疗，每次应用45-90分钟(平均60分钟)。给予奥曲肽时，以约50mcgs至约400mcgs经皮下给予。

在告知所有患者关于常规和非常规治疗的可能选择并得到同意后开始该项目。在治疗过程期间，通过肿瘤标记物、成像研究和癌症生长标记物、坏死、LDH和炎症、CRP，以及自然杀伤细胞活性或淋巴细胞计数和循环肿瘤细胞来测量疾病的进展。

在完成治疗过程期间或之后得到以下结果：

1)QOL的主观性增加(增加能量水平、减少疼痛评分和改善情绪)：100％

2)免疫应答：增加自然杀伤(NK)细胞活性或白血细胞(WBC)计数：35％的患者具有初始低NK/WBC，所有这些患者在治疗后增加了NK活性

3)通过测量LDH，肿瘤活性潜在降低：40％的患者具有高LDH，所有这些患者在治疗后都显示LDH减少

4)肿瘤标记物的应答，足以获得临床反应：50％

5)影像学研究中肿瘤缩小：35％

6)CRP减少(与存活率提高相关)：23％

7)IgF-1减少：这些患者中的12％增加IgF-1，表明与文献中的预后相关。所有这些患者在治疗后都增加了IgF-1

由于选择癌症患者的对照组时可能具有明显的分类混淆因素，我们将每名患者在干预前的状态用作对照组。患者其他分类混淆因素在研究期间未变化。

研究I的结果分析：

1)这些数据揭示了相比对照，患者组应答较好。在治疗的患者中，有47％在转诊时没有可用的常规选择。在该组中，结果相比常规形式的治疗要好得多。

2)同时接受了HBOT和IV疗法的患者，就其成像、生命质量和肿瘤缩小以及肿瘤标记物控制而言，好于仅接受了IV疗法的患者。

3)患有4期末期疾病的患者，接受了上述项目后，应答超出了标准的护理期望，而同时接受化疗和上述靶向疗法的患者，具有生命质量和化疗应答的显著提高。

在进一步的研究中，挑选并反复评估了45名患者记录。入选标准是诊断为癌症，并且每疗程接受最少两周的治疗。没有患者被排除在外。患者年龄为27至83岁。所有患者都由他们的肿瘤医师/内科医师诊断，并被给予了标准的常规外科治疗、常规化疗或辐射。45名患者中，有25名拒绝了标准护理，或者由于疾病的严重性且不能对标准护理做出应答而没有适合他们的常规选择。

研究II：在转诊开始治疗前，45名患者中有36名(80％)处于4期，并且患有微观或宏观的多处转移的晚期疾病。

这些患者中有25名(55％)已用标准护理治疗无效，包括使用多种化疗剂，并且通过他们的肿瘤标记物或扫描证明疾病反复、发展或复发。

基于独特开发的方案来管理患者，所述方案的设计与涉及组合使用特定天然和合成IV疗法的可利用的研究和临床试验相关。IV疗法靶向表观遗传水平。还使用标准的1.5至2.0大气压力，对一些患者实施了高压氧治疗，每次45-90分钟(平均60分钟)。

在告知所有患者关于常规和非常规治疗的可能选择并得到同意后开始该项目。在治疗过程期间或之后，通过肿瘤标记物、成像研究和癌症生长标记物、坏死、LDH和炎症、CRP，以及自然杀伤细胞活性或淋巴细胞计数以及循环肿瘤细胞来测量疾病的进展。

在完成治疗过程期间或之后得到以下结果：

1)QOL的主观性增加(增加能量水平和功能、增加体重、改善疼痛评分)：98％(一名患者具有用抗生素治疗的线路感染，5名患者具有需要抗组胺的较小反应)

2)免疫应答：增加自然杀伤细胞活性：19名患者(42％)测量的初始自然杀伤细胞活性低，表明免疫功能低。19名中有12名在治疗后得到改善，1名维持不变，2名具有较低的活性，3名患者未遵循他们的治疗后处理。

3)通过测量LDH，肿瘤活性潜在降低：测量了42名患者的LDH(3名患者的LDH未知)。20名患者(44％)具有初始高LDH数值，其中有18名(90％)在治疗后显示LDH降低。

4)肿瘤标记物的应答，表明临床反应：14名患者具有正常肿瘤标记物，或者没有与他们的疾病相关的肿瘤标记物。其余具有高肿瘤标记物的31名患者中，在治疗过程后有27名患者(87％)的肿瘤标记物减少，在2名患者中出现波动，以及在1名中不变。

5)影像学/成像研究中，肿瘤缩小：25名患者具有跟随其状况的成像报告。其他20名未进行成像，或者不适用或不相关。治疗后，25名患者中有19名患者(76％)在其扫描中具有积极反应。在7名患者中，结果混淆或不变。两例有发展，1例在初始反应后出现。

6)CRP减少(与增加的存活率相关)：22名患者的CRP提高。23名患者的CRP处于正常范围，或者未检查。17名患者增加了C反应蛋白。16名患者通过减少CRP做出应答。1名增加。

7)IgF-1减少：检查了38名患者的胰岛素样生长因子。10名患者在开始治疗前水平已增加。治疗后，所有这些患者(100％)通过降低水平而应答，表明与文献中的预后相关。在治疗至正常范围后，这些患者全都增加了IgF-1。

8)VEGF减少：检查了20名患者的血管内皮生长因子(VEGF)。我们发现，4名患者的增加水平与转移的高风险相关。这4名患者在治疗后全都减少了VEGF。

由于在选择癌症患者的对照组时可能具有明显的分类混淆因素，我们将每名患者在干预前的状态用作对照组。患者其他分类混淆因素在研究期间未变化。

研究II的结果分析：

1)这些数据揭示了相比对照，患者组中应答较好。在治疗的患者中，有47％在转诊时没有可用的常规选择。在该组中，结果相比常规形式的治疗要好得多，这些常规治疗中没有可用的治疗选择。

3)患有4期晚期疾病的患者，接受了上述项目后，应答超出了标准的护理期望，并且同时接受化疗和上述靶向疗法的患者，具有生命质量和化疗应答的显著提高。

如所示，表观遗传修饰剂的使用提高了多名患者的癌症存活率和生命质量。发现以上所述的护理模式优于常规的标准护理。

Claims

1.用于预防或治疗癌症的药物制剂，其包含两种或多种表观遗传修饰剂。

2.用于治疗癌症的单位剂量的药物制剂，其包含两种或多种组合形式的表观遗传修饰剂，其中所述表观遗传修饰剂以足以在人体引起肿瘤应答的剂量存在，所述肿瘤应答在给予约1单位剂量至约60单位剂量后通过实验室和/或放射学研究测得。

3.用于治疗癌症的单位剂量的药物制剂，其包含两种或多种组合形式的表观遗传修饰剂，其中所述表观遗传修饰剂以足以引起免疫系统增强的剂量存在，所述免疫系统增强通过给予约1单位剂量至约60单位剂量后人体白细胞计数(WBC)和/或自然杀伤(NK)细胞活性的增加测得。

4.试剂盒，其包括：

用于治疗癌症的单位剂量的药物制剂，其包含两种或多种表观遗传修饰剂；

容器，所述单位剂量被至少部分地包含于其中。

5.治疗方法，其包括：

给予哺乳动物一种或多种表观遗传修饰剂；以及

使所述哺乳动物经受高压氧环境。

6.治疗方法，其包括：

给予哺乳动物一种或多种糖酵解抑制剂；以及

使所述哺乳动物经受高压氧环境。

7.治疗方法，其包括：

给予哺乳动物一种或多种糖酵解抑制剂；和

给予哺乳动物一种或多种表观遗传修饰剂。