CN108350081A - 使用抗pd-1抗体和抗ctla-4抗体的组合治疗肺癌 - Google Patents

Abstract

本公开内容提供了用于治疗患有肺癌的受试者的方法，所述方法包括向受试者施用治疗有效量的：(a)特异性结合程序性死亡‑1(PD‑1)受体并抑制PD‑1活性的抗体或其抗原结合部分；和(b)特异性结合细胞毒性T淋巴细胞抗原‑4(CTLA‑4)并抑制CTLA‑4活性的抗体或其抗原结合部分。

Description

使用抗PD-1抗体和抗CTLA-4抗体的组合治疗肺癌

发明领域

本发明涉及用于治疗受试者的肺癌的方法，包括向受试者施用抗程序性死亡-1(PD-1)抗体和抗细胞毒性T淋巴细胞抗原-4 (CTLA-4)抗体的组合。

发明背景

人类癌症具有许多遗传和表观遗传改变，从而产生潜在地可被免疫系统识别的新抗原(Sjoblom等人(2006) Science 314:268-74)。包含T和B淋巴细胞的适应性免疫系统具有强大的抗癌潜力，具有广泛的能力和精细的特异性以对不同肿瘤抗原作出响应。此外，所述免疫系统表现出相当大的可塑性和记忆组分。适应性免疫系统的所有这些属性的成功利用将使免疫疗法在所有癌症治疗模式中是独特的。

PD-1是由活化T和B细胞表达的关键的免疫检查点受体，和介导免疫抑制。PD-1是CD28受体家族的成员，所述家族包括CD28、CTLA-4、ICOS、PD-1和BTLA。已鉴定了PD-1的两种细胞表面糖蛋白配体，程序性死亡配体-1 (PD-L1)和程序性死亡配体-2 (PD-L2)，它们在抗原呈递细胞上以及许多人类癌症中表达，和已经表明在结合PD-1时下调T细胞活化和细胞因子分泌。

尼鲁单抗(旧称5C4、BMS-936558、MDX-1106或ONO-4538)是一种全人IgG4 (S228P)PD-1免疫检查点抑制剂抗体，其选择性地阻止与PD-1配体(PD-L1和PD-L2)的相互作用，从而阻断抗肿瘤T细胞功能的下调(美国专利号8,008,449; Wang等, 2014 Cancer Immunol Res. 2(9):846-56)。

伊匹单抗(YERVOY®)是一种全人IgG1单克隆抗体，其阻断CTLA-4与其B7配体的结合，从而刺激T细胞活化和改进具有晚期黑素瘤的患者的总体存活(OS) (Hodi等(2010) N Engl J Med 363:711-23)。在1期临床试验中用尼鲁单抗和伊匹单抗的并行疗法在大比例的晚期黑素瘤患者中产生快速和深度肿瘤消退，和比任一单独的抗体显著更加有效(Wolchok等(2013) N Engl J Med 369(2):122-33; WO 2013/173223)。然而，迄今未知这种免疫调节抗体组合是否在其它肿瘤类型中具有类似效果。

在美国和全世界，NSCLC是癌症死亡的第一原因(NCCN GUIDELINES®, 版本3.2014 – 非小细胞肺癌，可获自：www.nccn.org/professionals/physician_gls/pdf/nscl.pdf，2014年5月14日最后一次访问)。NSCLC对化学疗法相对不敏感，但具有良好体力状态(PS)的IV期疾病的患者获益于用化学治疗药的治疗，包括铂药剂(例如，顺铂、卡铂)、紫杉烷类药剂(例如，紫杉醇、白蛋白结合的紫杉醇、多西他赛)、长春瑞滨、长春碱、依托泊苷、培美曲塞和吉西他滨，和这些药物的各种组合。

发明简述

本公开内容涉及用于治疗患有肺癌的受试者的方法，包括向受试者施用以下的组合：(a) 特异性结合程序性死亡-1 (PD-1)受体和抑制PD-1活性的抗体或其抗原结合部分，其中PD-1抗体或其抗原结合部分以约每2周一次范围为约0.1 mg/kg至约5.0 mg/kg体重的剂量施用；和(b) 特异性结合细胞毒性T淋巴细胞抗原-4 (CTLA-4)和抑制CTLA-4活性的抗体或其抗原结合部分，其中CTLA-4抗体或其抗原结合部分以约每6周或12周一次范围为约1mg/kg至约5.0 mg/kg体重的剂量施用。在某些实施方案中，肺癌是非小细胞肺癌(NSCLC)。在其它实施方案中，NSCLC具有鳞状组织学。在仍其它实施方案中，NSCLC具有非鳞状组织学。

在一些实施方案中，抗PD-1抗体或其抗原结合部分与尼鲁单抗交叉竞争结合人PD-1。在实施方案中，抗PD-1抗体或其抗原结合部分是嵌合、人源化或人单克隆抗体或其部分。在其它实施方案中，抗PD-1抗体或其抗原结合部分包含具有人IgG1或IgG4同种型的重链恒定区。在某个实施方案中，抗PD-1抗体是尼鲁单抗。在一个实施方案中，抗PD-1抗体是派姆单抗。

在某些实施方案中，抗CTLA-4抗体或其抗原结合部分是嵌合、人源化或人单克隆抗体或其部分。在一些实施方案中，抗CTLA-4抗体或其抗原结合部分包含具有人IgG1同种型的重链恒定区。在某些实施方案中，抗CTLA-4抗体是伊匹单抗。在其它实施方案中，抗CTLA-4抗体是曲美木单抗。在一些实施方案中，抗CTLA-4抗体或其抗原结合部分与伊匹单抗交叉竞争结合人CTLA-4。

在某些实施方案中，抗PD-1抗体或其抗原结合部分以约每2周一次约1 mg/kg或约3 mg/kg体重的剂量施用。在某些实施方案中，抗CTLA-4抗体或其抗原结合部分以约1 mg/kg体重的剂量施用。在其它实施方案中，抗PD-1抗体或其抗原结合部分以约每2周一次约3mg/kg体重的剂量施用和抗CTLA-4抗体或其抗原结合部分以约每12周一次约1 mg/kg体重的剂量施用。在某些实施方案中，抗PD-1抗体或其抗原结合部分以约每2周一次约1 mg/kg体重的剂量施用和抗CTLA-4抗体或其抗原结合部分以约每6周一次约1 mg/kg体重的剂量施用。

在某些实施方案中，用所公开的方法治疗的受试者显示至少约1个月、至少约2个月、至少约3个月、至少约4个月、至少约5个月、至少约6个月、至少约7个月、至少约8个月、至少约9个月、至少约10个月、至少约11个月、至少约1年、至少约18个月、至少约2年、至少约3年、至少约4年或至少约5年的无进展存活。在一些实施方案中，在初始给药后受试者显示至少约8个月的无进展存活。

在某些实施方案中，与当受试者用每2周一次1 mg/kg体重的剂量施用的抗PD-1抗体或其抗原结合部分和每6周1 mg/kg体重的剂量施用的抗CTLA-4抗体或其抗原结合部分治疗("方案B")时相比，当受试者用每2周一次3 mg/kg体重的剂量施用的抗PD-1抗体或其抗原结合部分和每12周1 mg/kg体重的剂量施用的抗CTLA-4抗体或其抗原结合部分治疗("方案A")时，受试者具有更长的无进展存活。在一些实施方案中，施用方案A的受试者的无进展存活比施用方案B的受试者的无进展存活长至少约1周、至少约2周、至少约3周、至少约1个月、至少约2个月、至少约3个月、至少约4个月、至少约5个月或至少约6个月。在实施方案中，施用方案A的受试者的无进展存活比施用方案B的受试者的无进展存活长至少约3个月。

在某些实施方案中，与当受试者用每2周一次3 mg/kg体重的剂量施用的抗PD-1抗体或其抗原结合部分治疗("方案C")时相比，当受试者用每2周一次3 mg/kg体重的剂量施用的抗PD-1抗体或其抗原结合部分和每12周1 mg/kg体重的剂量施用的抗CTLA-4抗体或其抗原结合部分治疗("方案A")时，受试者具有更长的无进展存活。在实施方案中，施用方案A的受试者的无进展存活比施用方案C的受试者的无进展存活长至少约1周、至少约2周、至少约3周、至少约4周、至少约5周、至少约6周、至少约7周、至少约8周、至少约9周、至少约10周、至少约11周、至少约12周、至少约13周、至少约14周或至少约15周。在一些实施方案中，施用方案A的受试者的无进展存活比施用方案C的受试者的无进展存活长至少约3个月。

在某些实施方案中，受试者具有肺肿瘤，所述肺肿瘤具有≥ 1% PD-L1、≥ 5% PD-L1、≥ 10% PD-L1、≥ 25% PD-L1或≥ 50% PD-L1表达。在某些实施方案中，施用所述组合，只要观察到临床益处或直至疾病进展或不可控的毒性发生。在一个实施方案中，抗PD-1和抗CTLA-4抗体经配制用于静脉内施用。在某些实施方案中，抗PD-1抗体或其抗原结合部分和抗CTLA-4抗体或其抗原结合部分序贯施用给受试者。在一些实施方案中，抗PD-1和抗CTLA-4抗体在彼此30分钟内施用。在一个实施方案中，抗PD-1抗体或其抗原结合部分在抗CTLA-4抗体或其抗原结合部分之前施用。在另一个实施方案中，抗CTLA-4抗体或其抗原结合部分在抗PD-1抗体或其抗原结合部分之前施用。在一些实施方案中，抗PD-1抗体或其抗原结合部分和抗CTLA-4抗体或其抗原结合部分在分开的组合物中同时施用。在某些实施方案中，抗PD-1抗体或其抗原结合部分和抗CTLA-4抗体或其抗原结合部分作为单一组合物同时施用。

在一个实施方案中，抗PD-1抗体或其抗原结合部分以亚治疗剂量施用。在某些实施方案中，抗CTLA-4抗体或其抗原结合部分以亚治疗剂量施用。在一些实施方案中，抗PD-1抗体或其抗原结合部分和抗CTLA-4抗体或其抗原结合部分各自以亚治疗剂量施用。

本公开内容还涉及用于治疗患有肺癌的受试者的药盒，所述药盒包含：(a) 范围为约4 mg至约500 mg的量的抗PD-1抗体或其抗原结合部分；(b) 范围为约40 mg至约500mg的量的CTLA-4抗体或其抗原结合部分；和(c) 在任何公开的方法中使用PD-1抗体或其抗原结合部分和CTLA-4抗体或其抗原结合部分的说明书。

本发明的其它特征和优点根据以下详细描述和实施例将显而易见，所述详细描述和实施例不应视为限制性的。所有引用的参考文献的内容，包括本申请全文引用的科技论文、报纸报道、GenBank登录号、专利和专利申请，通过引用明确并入本文。

附图简述

图1显示尼鲁单抗和伊匹单抗的给药方案。

图2A-2D显示对于以下各治疗组的目标损伤自基线的百分比变化：尼鲁单抗1 mg/kg + 伊匹单抗1 mg/kg Q3W (图2A)；尼鲁单抗1 mg/kg Q2W + 伊匹单抗1 mg/kg Q6W (图2B)；尼鲁单抗3 mg/kg Q2W + 伊匹单抗1 mg/kg Q12W (图2C)；和尼鲁单抗3 mg/kg Q2W +伊匹单抗1 mg/kg Q6W (图2D)。

图3显示相对于基线肿瘤PD-L1表达，目标损伤肿瘤负荷的最佳百分比变化。

图4显示在第一线NSCLC中nivo + ipi的响应持续时间。

图5显示在所有肿瘤PD-L1表达水平中nivo + ipi的功效。

图6A和6B显示通过吸烟(图6A)和EGFR突变(图6B)状态，在第一线NSCLC中nivo +ipi的功效。

图7A-7D显示一个病理学CR的病例。

发明详述

本发明涉及用于治疗肺癌患者的方法，包括向患者施用抗PD-1抗体和另一种抗癌剂的组合。在某些实施方案中，另一种抗癌剂是抗CTLA-4抗体。

术语

为了可以更容易地理解本发明，首先定义某些术语。如在本申请中使用的，除了在本文中另外明确地提供以外，下述术语中的每一个应当具有下述的含义。另外的定义在本申请中阐述。

“施用”表示，使用本领域技术人员已知的多种方法和递送系统中的任一种，向受试者物理引入包含治疗剂的组合物。抗-PD-1抗体的施用途径包括静脉内、肌肉内、皮下、腹膜内、脊柱或其它胃肠外施用途径，例如通过注射或输注。本文中使用的短语“胃肠外施用”是指，通常通过注射进行的除了肠内和局部施用以外的施用模式，且包括但不限于静脉内、肌肉内、动脉内、鞘内、淋巴管内、病灶内、囊内、眶内、心内、真皮内、腹膜内、经气管、皮下、表皮下、关节内、囊下、蛛网膜下、脊柱内、硬膜外和胸骨内注射和输注、以及体内电穿孔。在某些实施方案中，所述组合通过非胃肠外途径施用，在某些实施方案中，口服施用。其它非胃肠外途径包括局部、表皮或粘膜施用途径，例如，鼻内地、阴道地、直肠地、舌下地或局部地。还可以执行施用，例如，一次、多次，和/或在一个或多个延长的时间段中。

本文中使用的“不利事件”(AE)是与医学治疗的应用有关的任何不利的和通常非故意的或不希望的迹象(包括异常的实验室发现)、征状或疾病。例如，不利事件可以与响应于治疗的免疫系统的激活或免疫系统细胞(例如，T细胞)的扩增相关。医学治疗可以具有一种或多种相关的AE，并且每种AE可以具有相同或不同的严重性水平。对能够“改变不利事件”的方法的提及是指降低与不同治疗方案的应用相关的一种或多种AE的发生率和/或严重性的治疗方案。

“抗体”(Ab)应当包括但不限于糖蛋白免疫球蛋白，其特异性地结合抗原并包含通过二硫键互连的至少两条重(H)链和两条轻(L)链，或其抗原结合部分。每条H链包含重链可变区(在本文中缩写为V_H)和重链恒定区。所述重链恒定区包含三个恒定结构域C _H1 、C _H2和C _H3。每条轻链包含轻链可变区(在本文中缩写为V _L )和轻链恒定区。所述轻链恒定区包含一个恒定结构域C _L 。V _H 和V _L 区域可以进一步细分为被称为互补决定区(CDR)的高变异性区域，其散布于更保守的被称为框架区(FR)的区域。每个V _H 和V _L 包含三个CDR和四个FR，从氨基端至羧基端按照以下顺序排列：FR1、CDR1、FR2、CDR2、FR3、CDR3、FR4。重链和轻链的可变区含有与抗原相互作用的结合结构域。所述抗体的恒定区可以介导免疫球蛋白与宿主组织或因子(包括免疫系统的各种细胞(例如，效应细胞)和经典补体系统的第一组分(C1q))的结合。

免疫球蛋白可以衍生自通常已知的同种型中的任一种，包括但不限于IgA、分泌型IgA、IgG和IgM。IgG亚类也是本领域技术人员众所周知的，并且包括但不限于人IgG1、IgG2、IgG3和IgG4。“同种型”表示由重链恒定区基因编码的抗体类别或亚类(例如，IgM或IgG1)。术语“抗体”包括，例如，天然存在的和非天然存在的抗体；单克隆和多克隆抗体；嵌合和人源化抗体；人或非人抗体；全合成抗体；和单链抗体。非人抗体可以通过重组方法人源化以降低其在人中的免疫原性。在没有明确说明的情况下，并且除非上下文另外指示，否则术语“抗体”还包括任何前述免疫球蛋白的抗原结合片段或抗原结合部分，并且包括单价和二价片段或部分，和单链抗体。

“分离的抗体”表示这样的抗体：其基本上不含有具有不同抗原特异性的其它抗体(例如，分离的特异性地结合PD-1的抗体基本上不含有特异性地结合除PD-1以外的抗原的抗体)。但是，分离的特异性地结合PD-1的抗体可以具有与其它抗原(诸如来自不同物种的PD-1分子)的交叉反应性。此外，分离的抗体可以基本上不含有其它细胞材料和/或化学物质。

术语“单克隆抗体”(“mAb”)表示单一分子组成的抗体分子(即，这样的抗体分子：其基本序列是基本上相同的，并且其表现出对特定表位的单一结合特异性和亲和力)的非天然存在的制备物。mAb是分离的抗体的一个例子。通过本领域技术人员已知的杂交瘤技术、重组技术、转基因技术或其它技术，可以生产单克隆抗体。

“人”抗体(HuMAb)表示具有可变区的抗体，其中框架区和CDR区都源自人种系免疫球蛋白序列。此外，如果抗体含有恒定区，那么所述恒定区也源自人种系免疫球蛋白序列。本发明的人抗体可以包括不由人种系免疫球蛋白序列编码的氨基酸残基(例如，通过随机的或位点特异性的体外诱变或体内体细胞突变而导入的突变)。但是，本文中使用的术语“人抗体”不意图包括这样的抗体：其中从另一哺乳动物物种(诸如小鼠)的种系衍生出的CDR序列已经移植至人框架序列上。术语“人”抗体和“全人”抗体同义地使用。

“人源化抗体”表示这样的抗体：其中非人抗体的CDR结构域之外的一些、大部分或所有氨基酸被源自人免疫球蛋白的相应氨基酸替换。在抗体的人源化形式的一个实施方案中，在CDR结构域之外的一些、大部分或所有氨基酸已经被来自人免疫球蛋白的氨基酸替换，而在一个或多个CDR区内的一些、大部分或所有氨基酸未改变。氨基酸的小添加、缺失、插入、置换或修饰是允许的，只要它们不废除所述抗体的结合特定抗原的能力。“人源化”抗体保留与原始抗体类似的抗原特异性。

“嵌合抗体”表示这样的抗体：其中可变区源自一个物种并且恒定区源自另一个物种，诸如其中可变区源自小鼠抗体并且恒定区源自人抗体的抗体。

“抗-抗原”抗体表示特异性地结合抗原的抗体。例如，抗-PD-1抗体特异性地结合PD-1，和抗-CTLA-4抗体特异性地结合CTLA-4。

抗体的“抗原结合部分”(也称为“抗原结合片段”)表示抗体的一个或多个片段，其保留特异性地结合被完整抗体结合的抗原的能力。

“癌症”表示以身体中异常细胞的失控生长为特征的多种疾病的广泛集合。失调的细胞分裂和生长导致恶性肿瘤的形成，所述恶性肿瘤侵入邻近组织并且还可以通过淋巴系统或血流转移至身体的远端部分。

“细胞毒性T-淋巴细胞抗原-4”(CTLA-4)表示属于CD28家族的免疫抑制性受体。CTLA-4排它地在体内T细胞上表达，且结合两种配体CD80和CD86 (也分别称为B7-1和B7-2)。本文中使用的术语“CTLA-4”包括人CTLA-4 (hCTLA-4)、hCTLA-4的变体、同种型和物种同系物、以及与hCTLA-4具有至少一个共同表位的类似物。完整的hCTLA-4序列可以在GenBank登记号AAB59385下找到。

术语“免疫疗法”表示通过一定方法治疗患有疾病或处于感染或遭受疾病复发的风险的受试者，所述方法包括诱导、增强、抑制或以其它方式改变免疫应答。受试者的“治疗”或“疗法”表示在受试者上执行的任何类型的干预或过程，或给受试者施用活性剂，目的在于逆转、减轻、改善、抑制、减慢或阻止征状、并发症或病症的发作、进展、发展、严重程度或复发，或与疾病相关的生化指标。

本文中使用的“PD-L1阳性的”可以与“至少约1%的PD-L1表达”互换使用。在一个实施方案中，通过本领域已知的任意方法可以使用PD-L1表达。在另一个实施方案中，通过自动化的IHC测量PD-L1表达。PD-L1阳性的肿瘤因而可以具有至少约1%、至少约2%、至少约5%、至少约10%、至少约20%、至少约25%、至少约30%、至少约40%、至少约50%、至少约60%、至少约70%、至少约75%、至少约80%、至少约85%、至少约90%、至少约95%或约100%的表达PD-L1的肿瘤细胞，如通过自动化的IHC测得的。在某些实施方案中，“PD-L1阳性的”是指，存在至少100个在细胞表面上表达PD-L1的细胞。

“程序性死亡-1 (PD-1)”表示属于CD28家族的免疫抑制性受体。PD-1主要在体内先前活化的T细胞上表达，并且结合两种配体PD-L1和PD-L2。本文使用的术语“PD-1”包括人PD-1 (hPD-1)、hPD-1的变体、同种型和物种同系物，以及与hPD-1具有至少一个共同表位的类似物。完整的hPD-1序列可以在GenBank登记号U64863下找到。

“程序性死亡配体-1 (PD-L1)”是针对PD-1的两种细胞表面糖蛋白配体(另一种是PD-L2)之一，其在结合PD-1后下调T细胞活化和细胞因子分泌。本文中使用的术语“PD-L1”包括人PD-L1 (hPD-L1)、hPD-L1的变体、同种型和物种同系物，以及与hPD-L1具有至少一个共同表位的类似物。完整的hPD-L1序列可以在GenBank登记号Q9NZQ7下找到。

“受试者”包括任何人或非人动物。术语“非人动物”包括但不限于脊椎动物诸如非人灵长类动物、绵羊、狗，和啮齿类动物诸如小鼠、大鼠和豚鼠。在某些实施方案中，所述受试者是人。术语“受试者”和“患者”在本文中可互换地使用。

药物或治疗剂的“治疗有效量”或“治疗上有效的剂量”是当单独使用或与另一种治疗剂联合使用时保护受试者免于疾病发作或促进疾病消退的药物的任何量，所述疾病消退通过疾病征状的严重程度的降低、无疾病征状阶段的频率和持续时间的增加、或由疾病折磨引起的损伤或失能的预防来证明。使用熟练的从业人员已知的多种方法可以评价治疗剂的促进疾病消退的能力，诸如在临床试验期间在人受试者中，在预测对于人类的效力的动物模型系统中，或通过在体外测定法中测定所述药剂的活性。

本文中使用的“亚治疗剂量”是指，当单独施用用于治疗过度增殖性疾病(例如，癌症)时低于治疗性化合物的常用或典型剂量的治疗性化合物(例如，抗体)的剂量。

作为例子，“抗癌药”促进受试者中的癌症消退或阻止进一步的肿瘤生长。在某些实施方案中，治疗有效量的药物将癌症消退促进至消除癌症的点。“促进癌症消退”是指，单独地或与抗肿瘤剂联合施用有效量的药物，导致肿瘤生长或大小的减小、肿瘤的坏死、至少一种疾病征状的严重程度的降低、无疾病征状阶段的频率和持续时间的增加、或由疾病折磨引起的损伤或失能的预防。此外，关于治疗的术语“有效的”和“有效性”包括药理学有效性和生理学安全性。药理学有效性表示药物在患者中促进癌症消退的能力。生理学安全性表示由药物施用引起的在细胞、器官和/或生物体水平的毒性水平或其它不利的生理效应(不良作用)。

作为用于治疗肿瘤的例子，相对于未治疗的受试者，治疗有效量的抗癌药可以将细胞生长或肿瘤生长抑制至少约20%、至少约40%、至少约60%或至少约80%。在本发明的其它实施方案中，可以观察到肿瘤消退并持续至少约20天、至少约40天或至少约60天的时间段。尽管存在治疗有效性的这些最终测量，免疫治疗药物的评价还必须考虑“免疫相关的”应答模式。

“免疫相关的”应答模式表示在用免疫治疗剂治疗的癌症患者中经常观察到的临床应答模式，所述免疫治疗剂通过诱导癌症特异性免疫应答或通过改变天然免疫过程而产生抗肿瘤作用。该应答模式的特征在于在肿瘤负荷的初始增加或新病变出现之后的有益的治疗效果，其在传统化学治疗剂的评价中将被分类为疾病进展并且将与药物失效同义。因此，免疫治疗剂的适当评价可需要长期监测这些药剂对靶疾病的影响。

药物的治疗有效量包括“预防有效量”，其为当单独地或与抗肿瘤剂联合施用给处于发生癌症的风险的受试者(例如，具有恶化前病症的受试者)或具有癌症复发的风险的受试者时，抑制癌症的发生或复发的任何药物量。在某些实施方案中，预防有效量完全阻止癌症的发生或复发。“抑制”癌症的发生或复发是指减少癌症的发生或复发的可能性，或完全阻止癌症的发生或复发。

备选方案(例如，“或”)的应用应当被理解为是指备选方案中的任一个、两个或它们的任意组合。本文中使用的不定冠词“一个”或“一种”应当理解为表示任何列举或枚举的组分中的“一个或多个/一种或多种”。

术语“约”或“基本上包含”表示在本领域普通技术人员确定的特定值或组成的可接受误差范围内的值或组成，其将部分地取决于如何测量或测定值或组成，即，测量系统的限制。例如，“约”或“基本上包含”可以是指按本领域中的实践，在1个或超过1个标准差内。可替换地，“约”或“基本上包含”可以是指至多10%或20%(即，±10%或±20%)的范围。例如，约3mg可以包括2.7mg至3.3mg之间(对于10％)或2.4mg至3.6mg(对于20％)之间的任何数字。此外，特别是关于生物学系统或过程，该术语可以是指直到一个数量级或直到数值的至多5倍。当在本申请和权利要求中提供特定值或组成时，除非另有说明，否则“约”或“基本上包含”的含义应当假定在该特定值或组成的可接受误差范围内。

本文中使用的术语“约每周一次”、“约每2周一次”或任意其它类似的给药间隔术语是指近似值。“约每周一次”可以包括每7天±1天，即，每6天至每8天。“约每2周一次”可以包括每14天±3天，即，每11天至每17天。类似的近似值适用于，例如，约每3周一次，约每4周一次，约每5周一次，约每6周一次，和约每12周一次。在某些实施方案中，约每6周一次或约每12周一次的给药间隔是指，可以在第一周的任意天施用第一剂，然后可以分别在第六周或第十二周的任意天施用第二剂。在其它实施方案中，约每6周一次或约每12周一次的给药间隔是指，在第一周的特定天(例如，星期一)施用第一剂，并然后分别在第六周或第十二周的相同天(即，星期一)施用第二剂。

本文提及的术语"基于重量的剂量"是指施用给患者的剂量基于患者的重量进行计算。例如，当60 kg体重的患者需要3 mg/kg的抗PD-1抗体时，可计算和使用合适量的抗PD-1抗体(即，180 mg)用于给药。

关于本发明的方法，使用术语"固定剂量"是指在单一组合物中的两种或更多种不同的抗体(例如，抗PD-1抗体和第二抗体，例如抗CTLA-4抗体)以彼此特定(固定)的比例存在于组合物中。在一些实施方案中，固定剂量基于抗体的重量(例如，mg)。在某些实施方案中，固定剂量基于抗体的浓度(例如，mg/ml)。在一些实施方案中，比例是至少约1:1、约1:2、约1:3、约1:4、约1:5、约1:6、约1:7、约1:8、约1:9、约1:10、约1:15、约1:20、约1:30、约1:40、约1:50、约1:60、约1:70、约1:80、约1:90、约1:100、约1:120、约1:140、约1:160、约1:180、约1:200、约200:1、约180:1、约160:1、约140:1、约120:1、约100:1、约90:1、约80:1、约70:1、约60:1、约50:1、约40:1、约30:1、约20:1、约15:1、约10:1、约9:1、约8:1、约7:1、约6:1、约5:1、约4:1、约3:1或约2:1 mg第一抗体(例如，抗PD-1抗体): mg第二抗体(例如，抗CTLA-4抗体)。例如，3:1比例的抗PD-1抗体和抗CTLA-4抗体可意指小瓶可含有约240 mg的抗PD-1抗体和80 mg的抗CTLA-4抗体或约3 mg/ml的抗PD-1抗体和1 mg/ml的抗CTLA-4抗体。

关于本发明的方法和剂量，使用术语"统一剂量"是指不考虑患者的重量或体表面积(BSA)而施用给患者的剂量。统一剂量因此不作为mg/kg剂量提供，而是作为药剂(例如，抗PD-1抗体)的绝对量提供。例如，60 kg的人和100 kg的人可接受相同剂量的抗体(例如，240 mg的抗PD-1抗体)。

如本文中所述的，任何浓度范围、百分比范围、比率范围或整数范围应当理解为包括在列举的范围内的任意整数的值，且当适当时，包括其分数(诸如整数的十分之一和百分之一)，除非另外指出。

在以下小节中更详细地描述本发明的不同方面。

本发明的方法

本公开内容提供了治疗患有肺癌的受试者的方法，所述方法包括向受试者施用治疗有效量的以下药剂的组合：(a) 抗癌剂，其为特异性结合PD-1受体和抑制PD-1活性的抗体或其抗原结合部分；和(b) 抗CTLA-4抗体。因为NSCLC占超过85%的肺肿瘤，在实施方案中，肺癌是NSCLC。在其它实施方案中，受试者是人患者。在某些实施方案中，受试者是未经过化学治疗的患者(例如，之前未接受任何化学治疗的患者)。在其它实施方案中，本发明的组合疗法的受试者已接受另一种癌症疗法(例如，化学治疗)，但对所述另一种癌症疗法抵抗或耐受。在某些具体的实施方案中，本发明的组合疗法的受试者具有表达突变形式的EGFR或KRAS基因的癌细胞。在某些实施方案中，受试者具有PD-L1+的癌细胞。在某些实施方案中，受试者具有PD-L1-的癌细胞。在一些实施方案中，受试者从未吸烟。在某些实施方案中，受试者从前吸烟。在一个实施方案中，受试者目前吸烟。在某些实施方案中，受试者具有鳞状的癌细胞。在某些实施方案中，受试者具有非鳞状的癌细胞。

在某些实施方案中，本发明的疗法(例如，施用抗PD-1抗体和CTLA-4抗体)有效地增加受试者存活的持续时间。在一些实施方案中，本发明的抗PD-1抗体组合疗法增加受试者的无进展存活。在某些实施方案中，与标准护理疗法相比，本发明的抗PD-1抗体组合疗法增加受试者的无进展存活。在一些实施方案中，与单独的抗PD-1抗体相比，本发明的抗PD-1抗体组合疗法增加受试者的无进展存活。在一些实施方案中，与其它抗PD-1抗体组合相比，本发明的抗PD-1抗体组合疗法增加受试者的无进展存活。在施用抗PD-1抗体组合疗法后，具有肺癌肿瘤的受试者可显示在施用后至少约10个月、至少约11个月、至少约12个月、至少约13个月、至少约14个月、至少约15个月、至少约16个月、至少约17个月、至少约18个月、至少约19个月、至少约20个月、至少约21个月、至少约22个月、至少约23个月、至少约2年、至少约3年、至少约4年或至少约5年的总存活。

在其它实施方案中，当与仅用标准护理疗法(例如，多西他赛)、单独的抗PD-1抗体或组合疗法的不同剂量方案治疗的另一受试者相比时，受试者的存活持续时间或总存活增加至少约1个月、至少约2个月、至少约3个月、至少约4个月、至少约6个月或至少约1年。例如，当与仅用标准护理疗法(例如，多西他赛)、单独的抗PD-1抗体或组合疗法的不同剂量方案治疗的另一受试者相比时，用本文公开的抗PD-1抗体组合治疗的受试者的存活持续时间或总存活增加至少约5%、至少约10%、至少约15%、至少约20%、至少约25%、至少约30%、至少约40%、至少约50%或至少约75%。

在某些实施方案中，本发明的疗法有效地增加受试者的无进展存活的持续时间。在一些实施方案中，受试者显示至少约1个月、至少约2个月、至少约3个月、至少约4个月、至少约5个月、至少约6个月、至少约7个月、至少约8个月、至少约9个月、至少约10个月、至少约11个月、至少约1年、至少约18个月、至少约2年、至少约3年、至少约4年或至少约5年的无进展存活。

在一些实施方案中，与当受试者用每2周一次以3 mg/kg体重的剂量施用的抗PD-1抗体或其抗原结合部分治疗时相比，当抗PD-1抗体或其抗原结合部分每2周一次以3 mg/kg体重的剂量施用和抗CTLA-4抗体或其抗原结合部分每6-12周(例如，每6或12周)以1 mg/kg体重的剂量施用时，受试者具有更长的无进展存活。在一些实施方案中，用每2周一次3 mg/kg体重的剂量的抗PD-1抗体或其抗原结合部分和每6或12周1 mg/kg体重的剂量的抗CTLA-4抗体或其抗原结合部分治疗的受试者的无进展存活比当受试者用每2周一次以3 mg/kg体重的剂量施用的抗PD-1抗体或其抗原结合部分治疗时长至少约1周、至少约2周、至少约3周、至少约1个月、至少约2个月、至少约3个月、至少约4个月、至少约5个月、至少约6个月、至少约7个月、至少约8个月、至少约9个月、至少约10个月、至少约11个月或至少约1年。在一些实施方案中，当抗PD-1抗体或其抗原结合部分每2周一次以3 mg/kg体重的剂量施用和抗CTLA-4抗体或其抗原结合部分每6或12周以1 mg/kg体重的剂量施用时，受试者的无进展存活比当受试者用每2周一次以3 mg/kg体重的剂量施用的抗PD-1抗体或其抗原结合部分治疗时长至少约3个月。在一些实施方案中，抗CTLA-4抗体或其抗原结合部分每6周施用。在其它实施方案中，抗CTLA-4抗体或其抗原结合部分每12周施用。

在一些实施方案中，与当受试者用每2周一次以1 mg/kg体重的剂量施用的抗PD-1抗体或其抗原结合部分和每6周以1 mg/kg体重的剂量施用的抗CTLA-4抗体或其抗原结合部分治疗时相比，当抗PD-1抗体或其抗原结合部分每2周一次以3 mg/kg体重的剂量施用和抗CTLA-4抗体或其抗原结合部分每6或12周以1 mg/kg体重的剂量施用时，受试者具有更长的无进展存活。在某些实施方案中，用每2周一次3 mg/kg体重的剂量的抗PD-1抗体或其抗原结合部分和每6或12周1 mg/kg体重的剂量的抗CTLA-4抗体或其抗原结合部分治疗的受试者的无进展存活比当受试者用每2周一次以1 mg/kg体重的剂量施用的抗PD-1抗体或其抗原结合部分和每6周以1 mg/kg体重的剂量施用的抗CTLA-4抗体或其抗原结合部分治疗时长至少约1周、至少约2周、至少约3周、至少约1个月、至少约2个月、至少约3个月、至少约4个月、至少约5个月或至少约6个月。在一些实施方案中，当抗PD-1抗体或其抗原结合部分每2周一次以3 mg/kg体重的剂量施用和抗CTLA-4抗体或其抗原结合部分每6或12周以1 mg/kg体重的剂量施用时，无进展存活比当受试者用每2周一次以1 mg/kg体重的剂量施用的抗PD-1抗体或其抗原结合部分和每6周以1 mg/kg体重的剂量施用的抗CTLA-4抗体或其抗原结合部分治疗时或当受试者用标准护理疗法治疗时长至少约3个月。在一些实施方案中，抗CTLA-4抗体或其抗原结合部分每6周施用。在其它实施方案中，抗CTLA-4抗体或其抗原结合部分每12周施用。

受试者的肿瘤的PD-L1状态可在施用任何组合物或利用本文公开的任何方法之前测量。在一个实施方案中，肿瘤的PD-L1表达水平是至少约1%、至少约2%、至少约3%、至少约4%、至少约5%、至少约6%、至少约7%、至少约8%、至少约9%、至少约10%、至少约11%、至少约12%、至少约13%、至少约14%、至少约15%、至少约20%、至少约25%、至少约30%、至少约40%、至少约50%、至少约60%、至少约70%、至少约75%、至少约80%、至少约85%、至少约90%、至少约95%或约100%。在另一个实施方案中，肿瘤的PD-L1状态是至少约1%。在其它实施方案中，受试者的PD-L1状态是至少约5%。在某个实施方案中，肿瘤的PD-L1状态是至少约10%。在一个实施方案中，肿瘤的PD-L1状态是至少约25%。在具体的实施方案中，肿瘤的PD-L1状态是至少约50%。

在一些实施方案中，具有≥ 1% PD-L1表达的肿瘤的受试者的中值无进展存活比具有< 1% PD-L1表达的肿瘤的受试者的中值无进展存活长至少约1周、至少约2周、至少约3周、至少约4周、至少约1个月、至少约2个月、至少约3个月、至少约4个月、至少约5个月、至少约6个月、至少约7个月、至少约8个月、至少约9个月、至少约10个月、至少约11个月或至少约1年。在一些实施方案中，具有≥ 1% PD-L1表达的肿瘤的受试者的无进展存活是至少约1个月、至少约2个月、至少约3个月、至少约4个月、至少约5个月、至少约6个月、至少约7个月、至少约8个月、至少约9个月、至少约10个月、至少约11个月、至少约1年、至少约18个月、至少约2年、至少约3年、至少约4年或至少约5年。

为了评价PD-L1表达，在一个实施方案中，试验组织样品可获自需要所述疗法的患者。在另一个实施方案中，PD-L1表达的评价可无需获得试验组织样品而实现。在一些实施方案中，选择合适的患者包括(i) 任选地提供获自具有癌症组织的患者的试验组织样品，所述试验组织样品包含肿瘤细胞和/或肿瘤浸润炎性细胞；和(ii) 基于试验组织样品中在细胞表面上表达PD-L1的细胞的比例高于预定阈值水平的评价，评价试验组织样品中在细胞表面上表达PD-L1的细胞的比例。

然而在包括测量试验组织样品中的PD-L1表达的任何方法中，应理解，包括提供获自患者的试验组织样品的步骤是任选步骤。还应理解，在某些实施方案中鉴定试验组织样品中在细胞表面上表达PD-L1的细胞或测定其数量或比例的"测量"或"评价"步骤通过测定PD-L1表达的改良方法进行，例如通过进行反转录酶-聚合酶链反应(RT-PCR)测定或IHC测定。在某些其它实施方案中，不包括改良步骤，和PD-L1表达通过例如审查来自实验室的测试结果报告评价。在某些实施方案中，直到和包括评价PD-L1表达的方法的步骤提供了中间结果，其可提供给医生或其它健康保健提供者，用于选择对抗PD-1抗体或抗PD-L1抗体疗法合适的候选者。在某些实施方案中，提供中间结果的步骤通过医学从业者或在医学从业者的指导下工作的人进行。在其它实施方案中，这些步骤通过中立实验室或通过中立的人例如实验室技术员进行。

在任何本发明的方法的某些实施方案中，表达PD-L1的细胞比例通过进行测定PD-L1 RNA的存在情况的测定法评价。在其它实施方案中，PD-L1 RNA的存在情况通过RT-PCR、原位杂交或RNA酶保护测定。在其它实施方案中，表达PD-L1的细胞比例通过进行测定PD-L1多肽的存在情况的测定法评价。在其它实施方案中，PD-L1多肽的存在情况通过免疫组织化学(IHC)、酶联免疫吸附测定(ELISA)、体内成像或流式细胞术测定。在一些实施方案中，PD-L1表达通过IHC测定。在所有这些方法的其它实施方案中，PD-L1的细胞表面表达使用例如IHC或体内成像测定。

成像技术已在癌症研究和治疗中提供了重要工具。在分子成像系统中的最近发展，包括正电子发射断层扫描术(PET)、单光子发射型计算机断层成像术(SPECT)、荧光反射成像(FRI)、荧光介导的断层成像术(FMT)、生物发光成像(BLI)、激光扫描共聚焦显微术(LSCM)和多光子显微术(MPM)，将可能预示着这些技术在癌症研究中的甚至更大用途。这些分子成像系统的一些允许临床医生不仅观察肿瘤在身体内的位置，而且使影响肿瘤对治疗药物的行为和/或反应的特定分子、细胞和生物学过程的表达和活性可视化(Condeelis和Weissleder，"In vivo imaging in cancer," Cold Spring Harb. Perspect. Biol. 2 (12):a003848 (2010))。抗体特异性结合PET的灵敏性和分辨能力，使得免疫PET成像对于监测和分析组织样品中抗原的表达特别具有吸引力(McCabe和Wu, "Positive progressin immunoPET—not just a coincidence," Cancer Biother. Radiopharm. 25(3):253-61 (2010); Olafsen et al., "ImmunoPET imaging of B-cell lymphoma using 124I-anti-CD20 scFv dimers (diabodies)," Protein Eng. Des. Sel. 23(4):243-9(2010))。在任何本发明的方法的某些实施方案中，PD-L1表达通过免疫PET成像测定。在任何本发明的方法的某些实施方案中，试验组织样品中表达PD-L1的细胞的比例通过进行测定在试验组织样品中在细胞表面上PD-L1多肽的存在情况的测定法评价。在某些实施方案中，试验组织样品是FFPE组织样品。在其它实施方案中，PD-L1多肽的存在情况通过IHC测定法测定。在其它实施方案中，IHC测定法使用自动化过程进行。在一些实施方案中，IHC测定法使用结合PD-L1多肽的抗PD-L1 mAb进行。

在本发明的方法的一个实施方案中，自动化IHC方法用于测定在FFPE组织样本中PD-L1在细胞表面上的表达。本公开内容提供了用于检测在试验组织样品中人PD-L1抗原的存在情况，或定量人PD-L1抗原的水平或样品中表达该抗原的细胞比例的方法，所述方法包括在允许在抗体或其部分和人PD-L1之间形成复合物的条件下，使试验样品和阴性对照样品与特异性结合人PD- L1的mAb接触。在某些实施方案中，试验和对照组织样品是FFPE样品。然后检测复合物的形成，其中在试验样品和阴性对照样品之间复合物形成的差异指示在样品中人PD-L1抗原的存在情况。各种方法用于定量PD-L1表达。

在具体的实施方案中，自动化IHC方法包括：(a) 在自动化染色器上使固定的组织切片脱蜡和再水合；(b) 使用去掩盖室和pH 6缓冲液恢复抗原，加热至110°C达10 min；(c)在自动化染色器上安装试剂；和(d) 运行自动化染色器以包括中和组织样本中的内源过氧化物酶的步骤；封闭玻片上的非特异性蛋白结合位点；用第一抗体孵育玻片；用第一后封闭剂孵育；用NovoLink Polymer孵育；加入色原体底物和显色；和用苏木精复染色。

为了评价肿瘤组织样品中的PD-L1表达，病理学家在显微镜下检查在每个视野中的膜PD-L1⁺肿瘤细胞的数量和脑中估算阳性的细胞的百分比，然后将它们平均得到最终的百分比。不同的染色强度定义为0/阴性、l+/弱、2+/中等和3+/强。通常，百分比值分配到0和3+之间，然后考虑中间的1+和2+强度。对于高度异质的组织，将样本分区，和各区单独评分，然后合并至单一组的百分比值。对于不同染色强度的阴性和阳性细胞的百分比从各区域确定，和对每个区域给出中值。对于每个染色强度类别：阴性、1+、2+和3+，给出组织的最终百分比值。所有染色强度的总和需要是100%。在一个实施方案中，需要是PD-L1阳性的细胞的阈值数量是至少约100、至少约125、至少约150、至少约175或至少约200个细胞。在某些实施方案中，需要是PD-L1阳性的细胞的阈值数量是至少约100个细胞。

染色还在肿瘤浸润炎性细胞例如巨噬细胞和淋巴细胞中进行评价。在大多数情况下，巨噬细胞用作内部阳性对照，因为在大比例的巨噬细胞中观察到染色。尽管不需要以3+强度染色，但缺少巨噬细胞染色应考虑排除任何技术失败。评价巨噬细胞和淋巴细胞的质膜染色和对所有样品仅记录为各细胞类别是阳性或阴性的。染色还根据外侧/内侧肿瘤免疫细胞命名表征。"内侧"是指免疫细胞在肿瘤组织内和/或在肿瘤区的边界上，而没有物理嵌入肿瘤细胞中。"外侧"是指与肿瘤没有物理关联，免疫细胞存在于与结缔组织或任何相关的邻近组织关联的外周。

在这些评分方法的某些实施方案中，样品通过单独操作的两个病理学家评分，然后将评分合并。在某些其它实施方案中，阳性和阴性细胞的鉴定使用合适的软件评分。

组织评分(Histoscore)用作IHC数据的更加量化的度量。组织评分如下计算：

组织评分 = [(% 肿瘤 x 1 (低强度)) + (% 肿瘤 x 2 (中等强度))+ (% 肿瘤 x 3(高强度)]

为了测定组织评分，病理学家估算在样本内的每个强度类别中的染色细胞的百分比。因为大多数生物标志物的表达是异质的，因此组织评分是总体表达的更加真实的表示。最终的组织评分范围是0 (无表达)至300 (最大表达)。

定量试验组织样品IHC中的PD-L1表达的备选方式是测定调整的炎症评分(AIS)，定义为炎症密度乘以肿瘤浸润炎性细胞的PD-L1表达百分比(Taube等，"Colocalizationof inflammatory response with B7-h1 expression in human melanocytic lesionssupports an adaptive resistance mechanism of immune escape," Sci. Transl. Med. 4(127):127ra37 (2012))。

本发明的方法可治疗任何阶段的非鳞状NSCLC。NSCLC存在至少7个阶段：隐蔽(隐藏)期、0期(原位癌)、I期、II期、IIIA期、IIIB期和IV期。在隐蔽期，通过成像或支气管镜检查，癌症不可见。在0期，癌细胞在气道的衬里(lining)中发现。

在一个实施方案中，本发明的方法治疗I期非鳞状NSCLC。I期NSCLC分为IA和IB期。在IA期，肿瘤仅在肺中，为3厘米或更小。在IB期，癌症尚未扩散到淋巴结，和以下一项或多项是真实的：1) 肿瘤大于3厘米，但不大于5厘米；2) 癌症已扩散至主支气管，并且在气管连接支气管处下面至少2厘米；3) 癌症已扩散至覆盖肺的最内层的膜；或4) 在气管连接支气管的区域中一部分肺已经塌陷或发生肺炎(肺的炎症)。

在另一个实施方案中，本发明的方法治疗II期非鳞状NSCLC。II期NSCLC分为IIA和IIB期。在IIA期，癌症已扩散至淋巴结或没有。如果癌症已经扩散至淋巴结，则癌症可仅扩散至与肿瘤同侧胸部的淋巴结，具有癌症或在肺内或在支气管附近的淋巴结，并且以下一项或多项是真实的：1) 肿瘤不大于5厘米；2) 癌症已扩散至主支气管，在气管连接支气管处下面至少2厘米；3) 癌症已扩散至覆盖肺的最内层的膜；或4) 在气管连接支气管的区域中一部分肺已经塌陷或发生肺炎(肺的炎症)。如果癌症尚未扩散至淋巴结和以下一项或多项是真实的，肿瘤也被视为IIA期：1) 肿瘤大于5厘米，但不大于7厘米；2) 癌症已扩散至主支气管，在气管连接支气管处下面至少2厘米；3) 癌症已扩散至覆盖肺的最内层的膜；或4)在气管连接支气管的区域中一部分肺已经塌陷或发生肺炎(肺的炎症)。在IIB期，癌症已扩散至淋巴结或没有。如果癌症已扩散至淋巴结，则癌症可仅已扩散至与肿瘤同侧胸部的淋巴结，具有癌症的淋巴结在肺内或在支气管附近，和以下一项或多项是真实的：1) 肿瘤大于5厘米，但不大于7厘米；2) 癌症已扩散至主支气管，在气管连接支气管处下面至少2厘米；3) 癌症已扩散至覆盖肺的最内层的膜；或4) 在气管连接支气管的区域中一部分肺已经塌陷或发生肺炎(肺的炎症)。如果癌症尚未扩散至淋巴结和以下一项或多项是真实的，肿瘤也被视为IIB期：1) 肿瘤大于7厘米；2) 癌症已扩散至主支气管(并且在气管连接支气管处下面至少2厘米)、胸壁、隔膜或控制隔膜的神经；3) 癌症已扩散至心脏或胸壁衬里周围的膜；4) 整个肺已塌陷或发生肺炎(肺的炎症)；或5) 在相同肺叶中存在一个或多个单独的肿瘤。

在其它实施方案中，本发明的任何方法治疗III期非鳞状NSCLC。IIIA期分为3个部分。这3个部分基于1) 肿瘤大小；2) 发现肿瘤的位置和3) 具有癌症的淋巴结(如果有的话)。在第一类型的IIIA期NSCLC中，癌症已扩散至与肿瘤同侧胸部的淋巴结，和具有癌症的淋巴结在胸骨附近或在支气管进入肺的位置。此外：1) 肿瘤可以是任何大小；2) 一部分的肺(气管连接支气管处)或整个肺可已经塌陷或发生肺炎(肺的炎症)；3) 在相同肺叶中可存在一个或多个单独的肿瘤；和4) 癌症可已扩散至以下任何一项：a) 主支气管，但不是气管连接支气管的区域，b) 胸壁，c) 隔膜和控制它的神经，d) 肺或胸壁衬里周围的膜，e)心脏周围的膜。在第二类型的IIIA期NSCLC中，癌症已扩散至与肿瘤同侧胸部的淋巴结，和具有癌症的淋巴结在肺内或支气管附近。此外：1) 肿瘤可以是任何大小；2) 整个肺可已塌陷或发生肺炎(肺的炎症)；3) 在具有癌症的肺的任何叶中可存在一个或多个单独的肿瘤；和4) 癌症可已扩散至以下任何一项：a) 主支气管，但不是气管连接支气管的区域，b) 胸壁，c) 隔膜和控制它的神经，d) 肺或胸壁衬里周围的膜，e) 心脏或其周围的膜，f) 通向或离开心脏的主血管，g) 气管，h) 食管、i) 控制喉(voice box)的神经，j) 胸骨(chestbone)或脊柱，或k) 脊(气管连接支气管的位置)。在第三类型的IIIA期NSCLC中，癌症尚未扩散至淋巴结，肿瘤可以是任何大小，和癌症已扩散至以下任何一项：a) 心脏、b) 通向或离开心脏的主血管，c) 气管，d) 食管，e) 控制喉的神经，f) 胸骨或脊柱,或g) 脊(气管连接支气管处)。根据1) 肿瘤大小，2) 发现肿瘤的位置和3) 具有癌症的淋巴结，将IIIB期分为2个部分。在第一类型的IIIB期NSCLC中，癌症已扩散至与肿瘤对侧胸部的淋巴结。另外，1) 肿瘤可以是任何大小；2) 一部分的肺(气管连接支气管处)或整个肺可已塌陷或发生肺炎(肺的炎症)；3) 在具有癌症的肺的任何叶中可存在一个或多个单独的肿瘤；和4) 癌症可已扩散至以下任何一项：a) 主支气管，b) 胸壁，c) 隔膜和控制它的神经，d) 肺或胸壁衬里周围的膜，e) 心脏或其周围的膜，f) 通向或离开心脏的主血管，g) 气管，h) 食管，i)控制喉的神经，j) 胸骨或脊柱，或k) 脊(气管连接支气管处)。在第二类型的IIIB期NSCLC中，癌症已扩散至与肿瘤同侧胸部的淋巴结。具有癌症的淋巴结在胸骨附近或在支气管进入肺的位置。此外，1) 肿瘤可以是任何大小；2) 在相同肺的不同叶中可存在单独的肿瘤；和3) 癌症已扩散至以下任何一项：a) 心脏，b) 通向或离开心脏的主血管，c) 气管，d) 食管，e) 控制喉的神经，f) 胸骨或脊柱，或g) 脊(气管连接支气管处)。

在一些实施方案中，本发明的方法治疗IV期非鳞状NSCLC。在IV期NSCLC中，肿瘤可以是任何大小，和癌症可已扩散至淋巴结。在IV期NSCLC中以下一项或多项是真实的：1) 在两个肺中均存在一个或多个肿瘤；2) 在肺或心脏周围的流体中发现癌症；和3) 癌症已扩散至身体的其它部分，例如脑、肝、肾上腺、肾或骨。

本公开内容提供了用于治疗肺癌的组合治疗方法，其中抗PD-1抗体与另一种抗癌剂组合，所述另一种抗癌剂是特异性结合CTLA-4和抑制CTLA-4活性的抗体或其抗原结合部分。本文已证实(参见实施例1)抗PD-1抗体尼鲁单抗和抗CTLA-4抗体伊匹单抗的组合在NSCLC患者中产生早期持久的抗肿瘤活性，特别是用特定的给药方案。因此，在某些实施方案中，与抗PD-1抗体组合使用的抗CTLA-4抗体是伊匹单抗。在实施方案中，抗CTLA-4抗体是曲美木单抗。在其它实施方案中，抗CTLA-4抗体或其抗原结合部分是与伊匹单抗交叉竞争结合人CTLA-4的抗体或其部分。在某些其它实施方案中，抗CTLA-4抗体或其抗原结合部分是嵌合、人源化或人mAb或其部分。在仍其它实施方案中，抗CTLA-4抗体或其抗原结合部分包含具有人IgG1或IgG4同种型的重链恒定区。在一些实施方案中，抗CTLA-4抗体包含具有人IgG1同种型的重链恒定区。

因为之前用通过抑制免疫检查点的免疫疗法证实的临床效果的持续性(参见例如，WO 2013/173223)，在备选的实施方案中组合治疗可包括有限量的剂量、例如约1-10个剂量，或可包括以长间隔时间给药，例如，约每3-6个月一次或约每1-2年一次或更长的时间间隔。

在本发明的方法的某些实施方案中，抗PD-1抗体是尼鲁单抗。在其它实施方案中，其是派姆单抗。在仍其它实施方案中，抗CTLA-4抗体是伊匹单抗。在其它实施方案中，抗CTLA-4抗体是曲美木单抗。通常，抗PD-1和抗CTLA-4抗体经配制用于静脉内施用。在某些实施方案中，当抗PD-1和抗CTLA-4抗体组合施用时，它们在彼此30分钟内施用。可首先施用任一抗体，即在某些实施方案中，抗PD-1抗体在抗CTLA-4抗体之前施用，而在其它实施方案中，抗CTLA-4抗体在抗PD-1抗体之前施用。通常，各抗体通过在60分钟的时间内静脉内输注施用。在某些实施方案中，抗PD-1和抗CTLA-4抗体同时施用，作为单一组合物在药学上可接受的制剂中混合用于同时施用，或作为各抗体在药学上可接受的制剂中的分开组合物同时施用。

在某些实施方案中，抗PD-1抗体或其抗原结合部分以亚治疗剂量施用。在某些其它实施方案中，抗CTLA-4抗体或其抗原结合部分以亚治疗剂量施用。在其它实施方案中，抗PD-1抗体或其抗原结合部分和抗CTLA-4抗体或其抗原结合部分二者均以亚治疗剂量施用。

本发明使用的抗PD-1抗体或抗PD-L1抗体

在美国专利号8,008,449中已经公开了以高亲和力特异性地结合PD-1的HuMAb。其它抗-PD-1单克隆抗体已经描述在例如美国专利号6,808,710、7,488,802、8,168,757和8,354,509以及PCT公开号WO 2012/145493中。已经证实在美国专利号8,008,449中公开的每种抗-PD-1 HuMAb表现出以下特征中的一种或多种：(a)以1 x 10^-7 M或更小的K_D结合人PD-1，如通过使用Biacore生物传感器系统的表面等离子体共振测定的；(b)基本上不结合人CD28、CTLA-4或ICOS；(c)在混合淋巴细胞反应(MLR)测定中增加T-细胞增殖；(d)在MLR测定中增加干扰素-γ产生；(e)在MLR测定中增加IL-2分泌；(f)结合人PD-1和食蟹猴PD-1；(g)抑制PD-L1和/或PD-L2与PD-1的结合；(h)刺激抗原特异性记忆应答；(i)刺激抗体应答；和(j)在体内抑制肿瘤细胞生长。在本发明中有用的抗-PD-1抗体包括特异性地结合人PD-1并且表现出至少一个(在某些实施方案中，至少五个)前述特征的单克隆抗体。在某些实施方案中，所述抗-PD-1抗体是尼鲁单抗。在一个实施方案中，所述抗-PD-1抗体是派姆单抗。

在某些实施方案中，抗-PD-1抗体或其抗原结合部分与尼鲁单抗交叉竞争结合人PD-1。在一个实施方案中，所述抗-PD-1抗体是尼鲁单抗。尼鲁单抗(也被称作“OPDIVO®”；以前称作5C4、BMS-936558、MDX-1106或ONO-4538)是一种全人IgG4 (S228P) PD-1免疫检验点抑制剂抗体，其选择性地阻止与PD-1配体(PD-L1和PD-L2)的相互作用，由此阻断抗肿瘤T-细胞功能的下调(美国专利号8,008,449; Wang等，2014 Cancer Immunol Res. 2(9):846-56)。在其它实施方案中，抗-PD-1抗体或其片段与尼鲁单抗结合相同的表位。在某些实施方案中，抗-PD-1抗体具有与尼鲁单抗相同的CDR。

在另一个实施方案中，所述抗-PD-1抗体或其片段与派姆单抗交叉竞争。在某些实施方案中，所述抗-PD-1抗体或其片段与派姆单抗结合相同表位。在某些实施方案中，所述抗-PD-1抗体具有与派姆单抗相同的CDR。在另一个实施方案中，所述抗-PD-1抗体是派姆单抗。派姆单抗(也被称作“KEYTRUDA®”、lambrolizumab和MK-3475)是针对人细胞表面受体PD-1 (程序性死亡-1或程序性细胞死亡-1)的人源化单克隆IgG4抗体。派姆单抗描述在例如美国专利号8,354,509和8,900,587中；也参见www.cancer.gov/drugdictionarycdrid=695789 (最后一次访问：2014年12月14日)。派姆单抗已经被FDA批准用于治疗复发性或难治性黑素瘤。

在其它实施方案中，所述抗-PD-1抗体或其片段与MEDI0608交叉竞争。在其它实施方案中，所述抗-PD-1抗体或其片段与MEDI0608结合相同表位。在某些实施方案中，所述抗-PD-1抗体具有与MEDI0608相同的CDR。在其它实施方案中，所述抗-PD-1抗体是MEDI0608(以前称作AMP-514)，其为单克隆抗体。MEDI0608描述在例如美国专利号8,609,089B2中。

在某些实施方案中，免疫检验点抑制剂是AMP-224，其为B7-DC Fc融合蛋白。AMP-224在美国公开号2013/0017199或www.cancer.gov/publications/dictionaries/cancer-drugcdrid=700595 (最后一次访问：2015年7月8日)中进行了讨论。

在其它实施方案中，所述抗-PD-1抗体或其片段与BGB-A317交叉竞争。在某些实施方案中，所述抗-PD-1抗体或其片段与BGB-A317结合相同表位。在某些实施方案中，所述抗-PD-1抗体具有与BGB-A317相同的CDR。在某些实施方案中，所述抗-PD-1抗体是BGB-A317，其为人源化的单克隆抗体。BGB-A317描述在美国公开号2015/0079109中。

在所公开的方法中有用的抗-PD-1抗体还包括特异性地结合人PD-1并且与尼鲁单抗交叉竞争对人PD-1的结合的分离的抗体(参见，例如，美国专利号8,008,449和8,779,105; WO 2013/173223)。抗体的交叉竞争与抗原的结合的能力指示，这些抗体结合抗原的相同表位区域并在空间上阻碍其它交叉竞争性抗体与该特定表位区域的结合。由于它们与PD-1的相同表位区域的结合，预期这些交叉竞争性抗体具有非常类似于尼鲁单抗的功能性质。基于它们在标准PD-1结合测定诸如Biacore分析、ELISA测定或流式细胞计量术(参见，例如，WO 2013/173223)中与尼鲁单抗交叉竞争的能力，可以容易地鉴定交叉竞争性抗体(参见例如WO 2013/173223)。

在某些实施方案中，与人PD-1抗体尼鲁单抗交叉竞争对人PD-1的结合或结合人PD-1抗体尼鲁单抗的相同表位区域的抗体是单克隆抗体。对于施用给人受试者，这些交叉竞争性抗体是嵌合抗体或人源化抗体或人抗体。这样的嵌合、人源化或人单克隆抗体可以通过本领域众所周知的方法制备和分离。

在公开的发明方法中有用的抗-PD-1抗体还包括上述抗体的抗原结合部分。已经充分证实，抗体的抗原结合功能可以由全长抗体的片段执行。被术语抗体的“抗原结合部分”包含的结合片段的例子包括：(i) Fab片段，即由V_L、V_H、C_L和C_H1结构域组成的单价片段；(ii) F(ab')₂片段，即包含2个Fab片段的二价片段，所述Fab片段在铰链区通过二硫键连接；(iii)由V_H和C_H1结构域组成的Fd片段；和(iv)由抗体的单臂的V _L 和V _H 结构域组成的Fv片段。

适合用于所公开的方法或组合物中的抗-PD-1抗体是以高特异性和亲和力结合PD-1、阻断PD-L1和/或PD-L2的结合并抑制PD-1信号传递途径的免疫抑制作用的抗体。在本文公开的任何组合物或方法中，抗-PD-1“抗体”包括结合PD-1受体并在抑制配体结合和上调免疫系统中表现出与完整抗体的功能性质类似的功能性质的抗原结合部分或片段。在某些实施方案中，所述抗-PD-1抗体或其抗原结合部分与尼鲁单抗交叉竞争对人PD-1的结合。在其它实施方案中，所述抗-PD-1抗体或其抗原结合部分是嵌合、人源化或人单克隆抗体或其部分。在某些实施方案中，所述抗体是人源化抗体。在其它实施方案中，所述抗体是人抗体。可以使用IgG1、IgG2、IgG3或IgG4同种型的抗体。

在某些实施方案中，所述抗-PD-1抗体或其抗原结合部分包含具有人IgG1或IgG4同种型的重链恒定区。在某些其它实施方案中，抗-PD-1抗体或其抗原结合部分的IgG4重链恒定区的序列含有S228P突变，其用通常在IgG1同种型抗体的对应位置处发现的脯氨酸残基替代铰链区中的丝氨酸残基。存在于尼鲁单抗中的该突变阻止与内源性IgG4抗体的Fab臂交换，同时保留低亲和力用于活化与野生型IgG4抗体有关的Fc受体(Wang等，2014Cancer Immunol Res. 2(9):846-56)。在其它实施方案中，所述抗体包含轻链恒定区，其为人κ或λ恒定区。在其它实施方案中，所述抗-PD-1抗体或其抗原结合部分是mAb或其抗原结合部分。在包括施用抗-PD-1抗体的本文描述的任何治疗方法的某些实施方案中，所述抗-PD-1抗体是尼鲁单抗。在其它实施方案中，所述抗-PD-1抗体是派姆单抗。在其它实施方案中，所述抗-PD-1抗体选自在美国专利号8,008,449中描述的人抗体17D8、2D3、4H1、4A11、7D3和5F4。在其它实施方案中，所述抗-PD-1抗体是MEDI0608 (以前称作AMP-514)、AMP-224或BGB-A317。

在公开的发明的方法中有用的抗-PD-1抗体也包括以上抗体的抗原结合部分。已经充分证实，抗体的抗原结合功能可以由全长抗体的片段执行。被术语抗体的“抗原结合部分”包括的结合片段的例子包括：(i) Fab片段，即由V_L、V_H、C_L和C_H1结构域组成的单价片段；(ii) F(ab'')₂片段，即包含2个Fab片段的二价片段，所述Fab片段在铰链区通过二硫键连接；(iii)由V_H和C_H1结构域组成的Fd片段；和(iv)由抗体的单臂的V _L 和V _H 结构域组成的Fv片段。

在某些实施方案中，在所述方法中使用的抗-PD-1抗体可以用另一种PD-1或抗-PD-L1拮抗剂替换。例如，因为抗-PD-L1抗体阻止PD-1和PD-L1之间的相互作用，由此对PD-1的信号传递途径发挥类似的作用，抗-PD-L1抗体可以替代抗-PD-1抗体在本文公开的方法中的应用。因此，在一个实施方案中，本发明涉及一种用于治疗患有NSCLC的受试者的方法，所述方法包括给所述受试者施用治疗有效量的抗-PD-L1抗体和抗CTLA-4抗体。

在某些实施方案中，用于所述方法的抗-PD-L1抗体是BMS-936559 (以前称作12A4或MDX-1105) (参见，例如，美国专利号7,943,743; WO 2013/173223)。

在其它实施方案中，所述抗-PD-L1抗体是MPDL3280A (也被称作RG7446) (参见，例如，Herbst等人(2013) J Clin Oncol 31(增刊):3000. 摘要；美国专利号8,217,149)。

在其它实施方案中，所述抗-PD-L1抗体是MEDI4736 (也称为Durvalumab; Khleif(2013)见: Proceedings from the European Cancer Congress 2013; 2013年9月27日至10月1日; Amsterdam，The Netherlands. 摘要802，参见2014年5月6日提交的美国专利号8,779,108或US 2014/0356353)。

在其它实施方案中，所述抗-PD-L1抗体是MSB0010718C (也称为Avelumab；参见US2014/0341917)。

因为抗-PD-1和抗-PD-L1抗体靶向相同信号传递途径且已经在临床试验中证实会表现出对多种癌症(包括RCC)类似的效力水平(参见Brahmer等人(2012) N Engl J Med366:2455-65; Topalian等人(2012a) N Engl J Med 366:2443-54; WO 2013/173223)，抗-PD-L1抗体可以替换本文公开的任何治疗方法中的抗-PD-1抗体。在某些实施方案中，所述抗-PD-L1抗体是BMS-936559 (以前称作12A4或MDX-1105) (参见，例如，美国专利号7,943,743；WO 2013/173223)。在其它实施方案中，所述抗-PD-L1抗体是MPDL3280A (也被称作RG7446) (参见，例如，Herbst等人(2013) J Clin Oncol 31(增刊):3000. 摘要；美国专利号8,217,149)或MEDI4736 (Khleif (2013)见: Proceedings from the EuropeanCancer Congress 2013; 2013年9月27日至10月1日; Amsterdam，The Netherlands. 摘要802)。在某些实施方案中，与以上参考PD-L1抗体交叉竞争对人PD-L1的结合、或与以上参考PD-L1抗体结合人PD-L1的相同表位区域的抗体是单克隆抗体。对于施用给人受试者，这些交叉竞争性抗体可以是嵌合抗体，或可以是人源化或人抗体。通过本领域众所周知的方法，可以制备和分离这样的嵌合、人源化或人单克隆抗体。

在某些实施方案中，在本发明中使用的免疫检验点抑制剂(例如，抗-PD-1拮抗剂)是PD-1 Fc融合蛋白。

本发明的抗PD-1抗体或其抗原结合部分或抗PD-L1抗体或其抗原结合部分可以选自以下的剂量(第一剂量或第二剂量)施用给受试者：约0.1 mg/kg、约0.2 mg/kg、约0.3mg/kg、约0.4 mg/kg、约0.5 mg/kg、约0.6 mg/kg、约0.7 mg/kg、约0.8 mg/kg、约0.9 mg/kg、约1.0 mg/kg、约1.1 mg/kg、约1.2 mg/kg、约1.3 mg/kg、约1.4 mg/kg、约1.5 mg/kg、约2.0 mg/kg、约2.5 mg/kg、约3.0 mg/kg、约3.5 mg/kg、约4.0 mg/kg、约4.5 mg/kg、约5.5mg/kg、约6.5 mg/kg、约7.5 mg/kg、约8.0 mg/kg、约8.5 mg/kg、约9.0 mg/kg、约9.5 mg/kg、约10 mg/kg、约11 mg/kg、约12 mg/kg、约13 mg/kg、约14 mg/kg、约15 mg/kg、约20 mg/kg或大于约20 mg/kg。在其它实施方案中，抗PD-1抗体或其抗原结合部分或抗PD-L1抗体或其抗原结合部分可以选自以下的剂量施用：约0.1至约20.0 mg/kg、约0.1至约15.0 mg/kg、约0.1至约10.0 mg/kg、约0.1至约9.5 mg/kg、约0.1至约9.0 mg/kg、约0.1至约8.5 mg/kg、约0.1至约8.0 mg/kg、约0.1至约7.5 mg/kg、约0.1至约7.0 mg/kg、约0.1至约6.5 mg/kg、约0.1至约6.0 mg/kg、约0.1至约5.5 mg/kg、约0.1至约5.0 mg/kg、约0.1至约4.5 mg/kg、约0.1至约4.0 mg/kg、 约0.1至约3.5 mg/kg、约0.1至约3.0 mg/kg、约0.3至约10.0 mg/kg、约0.3至约9.0 mg/kg、约0.3至约6.0 mg/kg、约0.3至约3.0 mg/kg、约3.0至约10.0 mg/kg、约3.0至约9.0 mg/kg或约3.0至约6.0 mg/kg。在某些实施方案中，施用给受试者0.3mg/kg的抗PD-1抗体，例如，尼鲁单抗，或抗PD-L1抗体。在其它实施方案中，施用给受试者2.0 mg/kg的抗PD-1抗体，例如，尼鲁单抗，或抗PD-L1抗体。在其它实施方案中，施用给受试者10 mg/kg的抗PD-1抗体，例如，尼鲁单抗，或抗PD-L1抗体。

本发明使用的抗CTLA-4抗体

本发明的抗-CTLA-4抗体结合人CTLA-4，以便破坏CTLA-4与人B7受体的相互作用。因为CTLA-4与B7的相互作用转导导致携带CTLA-4受体的T细胞失活的信号，所以相互作用的破坏有效地诱导、增强或延长这样的T细胞的活化，由此诱导、增强或延长免疫应答。

在美国专利号6,984,720和7,605,238中已经公开了以高亲和力特异性地结合CTLA-4的HuMAb。其它抗CTLA-4单克隆抗体已经描述在例如美国专利号5,977,318、6,051,227、6,682,736和7,034,121中。已经证实在美国专利号6,984,720和7,605,238中公开的抗CTLA-4 HuMAb表现出以下特征中的一种或多种：(a)以通过至少约10⁷ M^-1、或约10⁹ M^-1、或约10¹⁰ M^-1至10¹¹ M^-1或更高的平衡缔合常数(K _a )反映的结合亲和力特异性地结合人CTLA-4，如通过Biacore分析测定的；(b)至少约10³、约10⁴或约10⁵ m^-1 s^-1的动力学缔合常数(k _a )；(c)至少约10³、约10⁴或约10⁵ m^-1 s^-1的动力学解离常数(k _d )；和(d)抑制CTLA-4与B7-1(CD80)和B7-2 (CD86)的结合。在本发明中有用的抗-CTLA-4抗体包括特异性地结合人CTLA-4并表现出至少一个、至少两个、或在一个实施方案中至少三个上述特征的单克隆抗体。一种示例性的临床抗-CTLA-4抗体是在美国专利号6,984,720中公开的人mAb 10D1 (现在称作伊匹单抗并作为YERVOY®销售)。伊匹单抗是用于用在本文公开的方法中的抗-CTLA-4抗体。在本发明的方法中有用的另一种抗-CTLA-4抗体是曲美木单抗。

一种示例性临床抗-CTLA-4抗体是在美国专利号6,984,720中公开的人mAb 10D1(现在称作伊匹单抗并作为YERVOY®销售)。伊匹单抗是用于用在本文公开的方法中的抗-CTLA-4抗体。伊匹单抗是一种全人IgG1单克隆抗体，其阻断CTLA-4与它的B7配体的结合，由此在具有晚期黑素瘤的患者中刺激T细胞活化和提高总存活(OS)。

可用于本发明的方法的另一种抗-CTLA-4抗体是曲美木单抗(也被称作CP-675,206)。曲美木单抗是人IgG2单克隆抗-CTLA-4抗体。曲美木单抗描述在WO/2012/122444、美国公开号2012/263677或WO公开号2007/113648 A2中。

在公开的方法中有用的抗-CTLA-4抗体也包括分离的抗体，其特异性地结合人PD-1并与伊匹单抗或曲美木单抗交叉竞争对人CTLA-4的结合或者与伊匹单抗或曲美木单抗结合人CTLA-4的相同表位区域。在某些实施方案中，与伊匹单抗或曲美木单抗交叉竞争对人CTLA-4的结合或者与伊匹单抗或曲美木单抗结合人PD-1的相同表位区域的抗体是包含人IgG1同种型的重链的抗体。对于施用给人受试者，这些交叉竞争性抗体是嵌合抗体、或人源化或人抗体。有用的抗-CTLA-4抗体也包括以上抗体的抗原结合部分诸如Fab、F(ab'')₂、Fd或Fv片段。

伊匹单抗(YERVOY®)是一种全人IgG1单克隆抗体，其阻断CTLA-4与它的B7配体的结合，由此在具有晚期黑素瘤的患者中刺激T细胞活化和提高总存活(OS) (Hodi等人(2010) N Engl J Med 363:711-23)。在1期临床试验中使用尼鲁单抗和伊匹单抗的并行疗法在高比例的具有晚期黑素瘤的患者中产生快速且大幅度的肿瘤消退，比单独的任一种抗体显著更有效(Wolchok等人(2013) N Engl J Med 369(2):122-33; WO 2013/173223)。但是，迄今不知道免疫调节性抗体的这种组合在其它肿瘤类型中是否是类似地有效的。

肺癌的标准护理疗法

不同类型的癌症的标准护理疗法是本领域技术人员众所周知的。例如，NationalComprehensive Cancer Network (NCCN)是在美国的21个主要癌症中心的联盟，出版了NCCN Clinical Practice Guidelines in Oncology (NCCN GUIDELINES®)，其提供关于各种癌症的标准护理治疗的详细的最近更新信息(参见NCCN GUIDELINES® (2014)，可获自：www.nccn.org/professionals/physician_gls/f_guidelines.asp，最后一次访问：2014年5月14日)。

NSCLC是在美国和世界上癌症死亡的首要原因，超过乳腺癌、结肠癌和前列腺癌的组合。在美国，肺和支气管的估计228,190新病例将在美国被诊断，和大约159,480例死亡将因为该疾病而发生(Siegel等(2014) CA Cancer J Clin 64(1):9-29)。大多数患者(大约78%)被诊断具有晚期/复发或转移性疾病。从肺癌转移至肾上腺是常见的事件，约33%的患者具有这样的转移。NSCLC疗法具有逐渐改善的OS，但益处已达到平台(晚期患者的中位OS仅为1年)。1L疗法后的进展在几乎所有这些受试者中发生，和在难治性背景下5年存活率仅为3.6%。从2005至2009年，在美国肺癌的总体5年相对存活率为15.9% (NCCN GUIDELINES®，版本3.2014 – 非小细胞肺癌，可获自www.nccn.org/professionals/physician_gls/pdf/nscl.pdf，最后一次访问：2014年5月14日)。

手术、辐射疗法(RT)和化学治疗是通常用于治疗NSCLC患者的三种方式。作为一个类型，与小细胞癌相比，NSCLC对化学治疗和RT相对不敏感。通常，对于具有I或II期疾病的患者，手术切除提供了治愈的最好机会，在手术前和手术后逐渐使用化学治疗。RT也可用作可切除NSCLC的患者的辅助疗法，初步局部治疗或作为难治性NSCLC的患者的姑息疗法。

具有良好的体力状态(PS)的IV期疾病患者获益于化学治疗。许多药物，包括铂药剂(例如，顺铂、卡铂)、紫杉烷类药剂(例如，紫杉醇、白蛋白结合的紫杉醇、多西他赛)、长春瑞滨、长春碱、依托泊苷、培美曲塞和吉西他滨可用于IV期NSCLC。使用许多这些药物的组合产生30%-40%的1年存活率，和优于单一药剂。还已开发了特异性靶向疗法以治疗晚期肺癌。例如，贝伐单抗(AVASTIN®)是阻断血管内皮生长因子A (VEGF-A)的mAb。厄罗替尼(TARCEVA®)是表皮生长因子受体(EGFR)的小分子TKI。Crizotinib (XALKORI®)是靶向ALK和MET的小分子TKI，和用于治疗带有突变ALK融合基因的患者的NSCLC。西妥昔单抗(ERBITUX®)是靶向EGFR的mAb。

在具有鳞状细胞NSCLC (代表了所有NSCLC的至多25%)的患者中存在特别不满足的需求，因为在第一线(1L)疗法后存在很少治疗选择。单药剂化学治疗是用基于铂的对偶物化学治疗(Pt-doublet)进展后的标准护理，导致大约7个月的中位OS。在该线疗法中多西他赛仍是基准治疗，尽管厄罗替尼也可以较少频率使用。在晚期NSCLC患者的第二线(2L)治疗中，与多西他赛相比，培美曲塞也已显示产生临床等同功效结果，但具有显著更少的副作用(Hanna等(2004) J Clin Oncol 22:1589-97)。没有疗法目前在超过第三线(3L)背景下被批准用于肺癌。培美曲塞和贝伐单抗在鳞状NSCLC中未被批准，和分子靶向疗法具有受限的应用。Oncothyreon和Merck KgaA的STIMUVAX®在3期试验中改进OS的最近失败，ArQule和Daiichi Sankyo的c-Met激酶抑制剂tivantinib不能满足存活终点，在晚期研究中EliLilly的ALIMTA®与Roche的AVASTIN®的组合改进OS的失败，和Amgen和TakedaPharmaceutical在晚期试验中用小分子VEGF-R拮抗剂motesanib满足临床终点的失败，增加了在晚期肺癌中未满足的需求。

肺癌的免疫疗法

对用于在多线靶向疗法中已进展的患者的有效药剂，以及对延长存活超过当前标准治疗的更长时间的疗法，存在明显需求。更新的方法(包括免疫疗法，特别是阻断免疫检查点包括CTLA-4、PD-1和PD-L1抑制途径)最近已显示具有前景(Creelan等 (2014) Cancer Control 21(1):80-89)。因此，伊匹单抗与化学治疗的组合已显示在小细胞和非小细胞肺癌等中鼓舞人心的结果。此外，双重检查点阻断策略，例如组合抗PD-1和抗CTLA-4的那些，已证实在治疗黑素瘤中高度有效(Wolchok等 (2013) N Engl J Med 369(2):122-33; WO2013/173223)，和其它组合包括抗PD-L1、抗LAG-3或抗KIR，经测试增加肿瘤应答的比例和持久性。类似于黑素瘤，NSCLC患者可获益于不同免疫治疗药的组合或这样的药物与靶向剂或其它治疗(包括手术、辐射、标准癌症化学疗法或疫苗)的组合。尽管尼鲁单抗和伊匹单抗的组合已证实在治疗黑素瘤中非常有效，具有可控的毒性(Wolchok等 (2013) N Engl J Med 369(2):122-33)，但迄今未知与用单独的药剂治疗NSCLC和其它癌症相比，该组合是否会在人受试者中显著更加有效。

药物组合物和剂量

可以将本发明的治疗剂构成在组合物中，例如，含有一种或多种抗体和药学上可接受的载体的药物组合物。本文中使用的“药学上可接受的载体”包括生理学上相容的任意的和所有的溶剂、分散介质、包衣剂、抗细菌剂和抗真菌剂、等渗剂和吸收延迟剂等。在一个实施方案中，用于含有抗体的组合物的载体适合静脉内、肌肉内、皮下、胃肠外、脊柱或表皮施用(例如，通过注射或输注)。本发明的药物组合物可以包括一种或多种药学上可接受的盐、抗氧化剂、水性和非水性载体，和/或佐剂，诸如防腐剂、润湿剂、乳化剂和分散剂。

本公开内容提供了剂量方案，其可提供需要的响应，例如，最大治疗响应和/或最小副作用。对于施用抗PD-1抗体，特别是与抗CTLA-4抗体的组合，剂量范围可以是约0.01至约20 mg/kg、约0.1至约10 mg/kg、约0.01至约5 mg/kg、约1至约5 mg/kg、约2至约5 mg/kg、约1至约3 mg/kg、约7.5至约12.5 mg/kg或约0.1至约30 mg/kg的受试者体重。例如，剂量可以是约0.1、约0.3、约1、约2、约3、约4、约5或约10 mg/kg体重。基于抗体的典型药代动力学性质，给药方案通常设计为实现导致持续受体占据(RO)的暴露。示例性的治疗方案必须约每周一次、约每2周一次、约每3周一次、约每4周一次、约每个月一次、约每3-6个月或更久一次施用。在某些实施方案中，抗PD-1抗体例如尼鲁单抗约每2周一次施用给受试者。抗PD-1抗体可以至少两个剂量施用，每个剂量为约0.01 mg/kg-约5 mg/kg、例如3 mg/kg的量，在两个剂量之间的给药间隔为每两个周。在一些实施方案中，抗PD-1抗体以至少3、4、5、6或7个剂量(即，多个剂量)施用，每个剂量为约0.01 mg/kg-约5 mg/kg例如3 mg/kg的量，在两个相邻给予的剂量之间的给药间隔为每2个周。在治疗过程中剂量和时间安排可变化。在一个实施方案中，本发明的抗PD-1抗体的剂量方案包括通过静脉内施用约0.3-1 约5 mg/kg体重、1-5 mg/kg体重或约1- 约3 mg/kg体重，其中在至多约6个周或约12个周的周期内抗体每约14-21天给予，直到完全响应，或证实疾病进展。在一些实施方案中，本文公开的抗体治疗或任何组合治疗持续至少约1个月、至少约3个月、至少约6个月、至少约9个月、至少约1年、至少约18个月、至少约24个月、至少约3年、至少约5年或至少约10年。

当与抗CTLA-4抗体联合使用时，抗-PD-1抗体的剂量可以相对于单一疗法剂量降低。低于典型的3 mg/kg、但是不小于0.001 mg/kg的尼鲁单抗的剂量是亚治疗剂量。在本文方法中使用的抗-PD-1抗体的亚治疗剂量高于0.001 mg/kg且低于3mg/kg。在某些实施方案中，亚治疗剂量是约0.001 mg/kg至约1 mg/kg、约0.01 mg/kg至约1 mg/kg、约0.1 mg/kg至约1 mg/kg或约0.001 mg/kg至约0.1 mg/kg体重。在某些实施方案中，所述亚治疗剂量是至少约0.001 mg/kg、至少约0.005 mg/kg、至少约0.01 mg/kg、至少约0.05 mg/kg、至少约0.1mg/kg、至少约0.5 mg/kg或至少约1.0 mg/kg体重。接受0.3 mg/kg至10 mg/kg的尼鲁单抗给药的15名受试者的受体占用数据指示，PD-1占用看起来在该剂量范围内是剂量非依赖性的。在所有剂量中，平均占用率为85％(范围，70％至97％)，平均平台占用率为72％(范围，59％至81％) (Brahmer等人(2010) J Clin Oncol 28:3167-75)。因此，0.3 mg/kg给药可以允许足够的暴露以导致最大生物学活性。

在本发明的一些实施方案中，抗PD-1抗体以3 mg/kg的剂量施用。在本发明的其它实施方案中，抗PD-1抗体以1 mg/kg的剂量施用。

在某些实施方案中，抗-PD-1抗体(或抗-PD-L1抗体)的剂量是药物组合物中的固定剂量。在其它实施方案中，本发明的方法可以以统一剂量(不考虑患者的体重施用给患者的剂量)使用。在实施方案中，抗-PD-1抗体或其抗原结合部分的统一剂量是至少约100 mg、120 mg、140 mg、160 mg、180 mg、200 mg、220 mg、240 mg、260 mg、280 mg、300 mg、360 mg、400 mg、420 mg、440 mg、460 mg、480 mg、500 mg、520 mg、540 mg、560 mg或600 mg。例如，尼鲁单抗的统一剂量可以是约240 mg。例如，派姆单抗的统一剂量可以是约200 mg。在实施方案中，以约240 mg的剂量施用所述抗-PD-1抗体或其抗原结合部分。在实施方案中，以约360 mg的剂量施用所述抗-PD-1抗体或其抗原结合部分。在实施方案中，以约480 mg的剂量施用所述抗-PD-1抗体或其抗原结合部分。在实施方案中，抗-PD-1抗体或其抗原结合部分的统一剂量以约每周、每2周、每3周、每4周、每5周或每6周一次施用。在一个实施方案中，每3周一次施用360 mg所述抗-PD-1抗体或抗原结合片段。在另一个实施方案中，每4周一次施用480mg所述抗-PD-1抗体或抗原结合片段。

伊匹单抗(YERVOY^®)被批准以每3周一次静脉内给予3 mg/kg，持续4个剂量，用于治疗黑素瘤。因此在一些实施方案中，约3 mg/kg是与抗PD-1抗体组合使用的伊匹单抗的最高剂量，但在某些实施方案中，当与抗PD-1抗体组合时，抗CTLA-4抗体例如伊匹单抗可以约每2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15或20周在约0.3至约10 mg/kg、约0.5至约10 mg/kg、约0.5至约5 mg/kg、约1至约5 mg/kg、约1至约4 mg/kg或约1至约3 mg/kg体重的范围内给予。在其它实施方案中，抗CTLA-4抗体以与抗PD-1抗体不同的剂量方案施用。在一些实施方案中，伊匹单抗约每周、约每2周、约每3周、约每4周、约每5周、约每6周、约每7周、约每8周、约每9周、约每10周、约每11周、约每12周、约每13周、约每14周、约每15周或约每20周施用。低于典型的3 mg/kg、但是不小于0.001 mg/kg的伊匹单抗的剂量是亚治疗剂量。在本文方法中使用的抗-CTLA-4抗体的亚治疗剂量高于0.001 mg/kg且低于3mg/kg。在某些实施方案中，亚治疗剂量是约0.001 mg/kg至约1 mg/kg、约0.01 mg/kg至约1 mg/kg、约0.1 mg/kg至约1 mg/kg或约0.001 mg/kg至约0.1 mg/kg体重。在某些实施方案中，所述亚治疗剂量是至少约0.001 mg/kg、至少约0.005 mg/kg、至少约0.01 mg/kg、至少约0.05 mg/kg、至少约0.1 mg/kg、至少约0.5 mg/kg或至少约1.0 mg/kg体重。已经证实，3 mg/kg的尼鲁单抗和3mg/kg的伊匹单抗的联合给药超过黑素瘤群体中的MTD，而1 mg/kg的尼鲁单抗+3 mg/kg的伊匹单抗、或3 mg/kg的尼鲁单抗+1 mg/kg的伊匹单抗的组合被发现在黑素瘤患者中是可耐受的(Wolchok等人(2013) N Engl J Med 369(2):122-33)。因此，尽管尼鲁单抗被耐受直到每2周静脉内地施用的10 mg/kg，但是在某些实施方案中，当与抗CTLA-4抗体组合时，抗-PD-1抗体的剂量不超过约3 mg/kg。在某些实施方案中，抗CTLA-4抗体的剂量是约1 mg/kg。

在某些实施方案中，基于风险-收益和PK-PD评估，使用的剂量包含约1 mg/kg的尼鲁单抗加约1 mg/kg的伊匹单抗或约3 mg/kg的尼鲁单抗加约1 mg/kg的伊匹单抗的组合。在一些实施方案中，尼鲁单抗以约每2周一次的给药频率施用。在某些实施方案中，伊匹单抗以约每6周或12周一次的给药频率施用。在某些其它实施方案中，与约1 mg/kg的剂量施用的伊匹单抗组合，尼鲁单抗以约1或约3 mg/kg的剂量施用，其中尼鲁单抗每2周施用和伊匹单抗每6周或每12周施用。在某些其它实施方案中，与每6周以约1 mg/kg的剂量施用的伊匹单抗组合，尼鲁单抗每2周以1 mg/kg的剂量施用。在一些实施方案中，与每12周以约1mg/kg的剂量施用的伊匹单抗组合，尼鲁单抗每2周以1 mg/kg的剂量施用。在某些实施方案中，与每6周以约1 mg/kg的剂量施用的伊匹单抗组合，尼鲁单抗每2周以3 mg/kg的剂量施用。在其它实施方案中，与每12周以约1 mg/kg的剂量施用的伊匹单抗组合，尼鲁单抗每2周以3 mg/kg的剂量施用。

在某些实施方案中，抗PD-1抗体和抗CTLA-4抗体配制为单一组合物，其中抗PD-1抗体的剂量和抗CTLA-4抗体的剂量以比例为1:50、1:40、1:30、1:20、1:10. 1:5、1:3、1:1、3:1、5:1、10:1、20:1、30:1、40:1或50:1的固定剂量组合。在某些实施方案中，抗CTLA-4抗体的剂量为统一剂量，其给予患者而不考虑体重。在一些实施方案中，抗CTLA-4抗体的统一剂量是至少约40 mg、50 mg、60 mg、70 mg、80 mg、90 mg、100 mg、120 mg、140 mg、160 mg、180mg或200 mg。在特定的实施方案中，抗CTLA-4抗体的统一剂量是约80 mg。

剂量和频率随所述抗体在受试者中的半衰期而变化。一般而言，人抗体表现出最长的半衰期，其次是人源化抗体、嵌合抗体和非人抗体。施用的剂量和频率可以随治疗是预防性的还是治疗性的而变化。在预防性应用中，通常在长时间段内以相对不频繁的间隔施用相对低的剂量。一些患者在他们的余生中继续接受治疗。在治疗性应用中，有时需要在相对较短的时间间隔中的相对较高的剂量，直到疾病的进程减缓或终止，或者直到患者显示出疾病征状的部分或完全改善。此后，可以给患者施用预防性方案。

可以改变本发明的药物组合物中的活性成分的实际剂量水平，从而获得对于特定患者、组合物和施用模式而言有效地实现期望的治疗应答的活性成分的量，而对患者没有不适当毒性。选择的剂量水平将取决于多种药代动力学因素，包括采用的本发明的特定组合物的活性，施用途径，施用时间，正在采用的特定化合物的排泄速率，治疗的持续时间，与所用特定组合物联合使用的其它药物、化合物和/或材料，所治疗的患者的年龄、性别、重量、状况、一般健康和先前医疗史，和医学领域中众所周知的类似因素。使用本领域众所周知的多种方法中的一种或多种，可以经由一种或多种施用途径施用本发明的组合物。技术人员将理解，施用的途径和/或模式将随所期望的结果而变化。

药盒

本发明的范围还包括药盒，其包含抗PD-1抗体和另一种抗癌剂，用于治疗用途。药盒通常包括指示药盒的内容物的预期用途和使用说明的标签。术语标签包括在药盒上或随药盒提供，或以其它方式伴随药盒的任何书面或记录材料。因此，本公开内容提供了用于治疗患有肺癌的受试者的药盒，所述药盒包含：(a) 范围为约4 mg-约500 mg的量的PD-1抗体或其抗原结合部分；(b) 范围为约40 mg-约500 mg的量的CTLA-4抗体或其抗原结合部分；和(c)在本文公开的任何方法中使用PD-1抗体或其抗原结合部分和CTLA-4抗体或其抗原结合部分的说明书。在一些实施方案中，药盒包含作为单独的组合物的PD-1抗体或其抗原结合部分和CTLA-4抗体或其抗原结合部分。在一些实施方案中，药盒包含作为单一组合物的PD-1抗体或其抗原结合部分和CTLA-4抗体或其抗原结合部分。在某些实施方案中，抗PD-1和抗CTLA-4抗体可共包装在单位剂型中。在用于治疗人患者的某些实施方案中，药盒包含本文公开的抗人PD-1抗体，例如，尼鲁单抗或派姆单抗。在其它实施方案中，药盒包含本文公开的抗人CTLA-4抗体，例如，伊匹单抗或曲美木单抗。

本发明由下述实施例进一步例证，下述实施例不应解释为进一步限制。在本申请中引用的所有参考文献的内容明确地通过引用并入本文。

实施例1

用尼鲁单抗和伊匹单抗治疗NSCLC

研究设计

开发了四个不同的组以测试尼鲁单抗("nivo")和伊匹单抗("ipi")的剂量和给药方案。这些组经设计以测试与nivo + ipi组合治疗的起始测试不同的给药方案。之前组合治疗的结果综述见表1。NR= 未达到。

表1. 之前提供的具有晚期NSCLC的小组。参见Gettinger, S.等 J. Clin Oncol 33(suppl): 8025 (2015)和Antonia, S.J.等Int. J. Radial Oncol Bio Phys 90(suppl 5): S32-S33 (2014)。

Nivo 3 mg/kg Q3W的数据基于2015年3月数据库锁定。Nivo 1 mg/kg + Ipi 3mg/kg Q3W和Nivo 3 mg/kg+ Ipi 1 mg/kg Q3W的数据基于2015年9月数据库锁定。估算的mDOR是从首次响应至证实进展、最后一次尼鲁单抗剂量的100天内死亡或最后一次肿瘤评估(对于检查+数据)的时间。

测试了四个另外的组：1 mg/kg ipi和1 mg/kg nivo q3w；1 mg/kg nivo q2w和1mg/kg ipi q6w；3 mg/kg nivo q2w和1 mg/kg ipi q12w；3 mg/kg nivo q2w和1 mg/kgipi q6w。患者的人口统计学、突变和基线疾病特征显示在表2。

表2. 患者的基线特征

由于舍入关系，一些百分比总计可能不到100%。PD-L1表达百分比基于具有已知PD-L1状态的患者(nivo 1 + ipi 1 Q3W，n=25；nivo 1 Q2W + ipi 1 Q6W，n=28；nivo 3 Q2W +ipi 1 Q12W，n=31；nivo 3 Q2W + ipi Q6W，n=30)

最常见的治疗相关的不良事件(AE)在表3显示。在分析时，47%-81%的患者(跨组)停止研究治疗，最常见是由于疾病进展。

表3. 安全性概述、暴露和患者安排

NC=未计算。与早期尼鲁单抗加伊匹单抗组(见表1)相比，用新的给药方案，治疗相关的不良事件频率更低和严重性更低。与早期尼鲁单抗加伊匹单抗组相比，新给药方案与导致停止(表3)的治疗相关的不良事件的低频率有关。停止率与尼鲁单抗单一疗法(见表1)相当。没有治疗相关的死亡。

选择的治疗相关不良事件可见于表4。选择的不良事件是具有潜在的免疫学病因的那些，其需要频繁监测/干预。跨越各组，最常见类型的治疗相关的选择不良事件(任何等级 ≥ 20%)是：皮肤、内分泌、胃肠和肝。

表4. 在用尼鲁单抗加伊匹单抗治疗的患者中报告的治疗相关的选择AE

总体响应、无进展存活和总存活概述于表5。证实的总响应率(ORR)范围为13%-39% (跨所有组)，另外21-42%的患者实现疾病稳定。在尼鲁单抗3 mg/kg Q2W + 伊匹单抗1 mg/kgQ12W组中的两个患者和在尼鲁单抗3 mg/kg Q2W + 伊匹单抗1 mg/kg Q6W组中的一个患者具有非常规的免疫响应，在疾病进展或同时出现新损伤后具有42%、47%和44%的目标损伤最大减少。在任何组中均未达到中位DOR。在所有组中观察到肿瘤负荷减少(图2A-2D)。令人惊讶的是，与尼鲁单抗1 mg/kg Q2W加伊匹单抗1 mg/kg Q6W相比，3 mg/kg Q2W的尼鲁单抗加1 mg/kg Q12W的伊匹单抗和3 mg/kg Q2W的尼鲁单抗加1 mg/kg Q6W的伊匹单抗显示具有完全响应的患者，以及无进展存活的长度的显著增加。

表5. 响应概述(2015年8月数据库锁定，另外注释的除外)。

NC = 未计算(当>25%的患者被检查时)；NR = 由于高百分比的进行性响应或不充足的事件数和/或随访而未达到NR。符号+表示检查值。DCR=疾病控制率；mOS= 中位OS；mPFS= 中位PFS。DCR包括具有证实的CR、PR和SD的患者。

⁷ 2016年2月数据库锁定

在第一线NSCLC中Nivo加ipi的响应的持续时间可见于图4。在Q6W组中15个响应者中的12个(80%)和在Q12W组中18个响应者中的14个(77%)具有在第11周 +/- 5天通过首次扫描时证实的响应。在数据库锁定时，在Q6W和Q12W组中，15个响应者中的12个(80%)和18个响应者中的12个(67%)分别具有进行性响应。

通过基线肿瘤PD-L1表达的治疗功效可见于表6。肿瘤PD-L1表达在治疗前(存档或新鲜的)肿瘤样品中使用自动化Bristol-Myers Squibb/Dako免疫组织化学测定法评估，和评价ORR和PFS。参见Phillips, T.等Appl. Immunohistochem Mol Morphol 23: 541-549(2015)。所有患者具有可获得的治疗前肿瘤样品，76% (113/148)具有可评价PD-L1表达的样品。此外，不管肿瘤PD-L1表达如何，观察到临床活性(图3)，但具有在≥ 1% PD-L1表达肿瘤中更大活性的初步证据。85% (35/41)的证实的响应在分析时正在进行。不管肿瘤PD-L1表达如何，在任何组中未达到中位DOR。进一步的评价可见于表7，和在PD-L1表达水平中nivo加ipi的功效可见于图5。

表6. 基线肿瘤PD-L1表达的功效

NR是由于高百分比的进行性响应或不充足的事件数和/或随访导致。

表7. 通过基线肿瘤PD-L1表达的功效

中位PFS和总响应率(ORR)在当前和之前吸烟者中更高。见表8和图6A。在具有非鳞状NSCLC的患者中，不管EGFR突变状态如何，观察到响应。见表9和图6B。这些数据证明了不管吸烟状态或EGFR突变状态如何，观察到临床活性。

表8. 在用尼鲁单抗加伊匹单抗治疗的患者中通过吸烟状态的功效

表9. 在用尼鲁单抗加伊匹单抗治疗的非鳞状患者中通过EGFR突变状态的功效

NR是由于高百分比的进行性响应或不充足的事件数和/或随访导致。符号+ 表示检查值。这些值包括用nivo 1 mg/kg Q2W+ ipi 1 mg/kg Q6W、nivo 3 mg/kg Q2W +ipi 1 mg/kg Q12W或nivo 3 mg/kg Q2W + ipi 1 mg/kg Q6W治疗的具有非鳞状组织学的患者。DCR包括具有证实的完全响应、部分响应和疾病稳定的患者。符号+ 表示检查值。

结论

尽管每三周用1 mg/kg 尼鲁单抗和3 mg/kg 伊匹单抗或3 mg/kg 尼鲁单抗和1 m/kg伊匹单抗的早期研究显示临床活性，但给药方案与毒性有关。在本研究中，新给药方案已出人意料地证实了协同活性和增加的临床活性，以及可接受的安全性。用尼鲁单抗加伊匹单抗的第一线疗法证实了高水平的临床活性，其特征为在具有晚期NSCLC的患者中深度和可持久的响应。此外，用尼鲁单抗加伊匹单抗的组合治疗与有利的安全性特征有关。存在低频率的导致停止的治疗相关的3-4级不良事件，和不存在治疗相关的死亡。

实施例2

在一个接受Nivo 3 Q2W + Ipi 1 Q6W的患者中病理CR的病例

具有转移性大细胞肺癌的54岁男性(从前吸烟者，52包-年(pack-year)) (PD-L1 <1%；因为在数据库锁定时具有部分响应和在分析时未知的PD-L1表达而包括患者)用Nivo 3Q2W + Ipi 1 Q6W治疗。通过RECIST和在肺和纵隔淋巴结中的放射照相残留损伤，患者具有53%总肿瘤大小减少，没有远端疾病。见图7A-7D。

实施方案

E1.用于治疗具有肺癌的受试者的方法，包括向受试者施用以下的组合：

(a)特异性结合程序性死亡-1 (PD-1)受体并抑制PD-1活性的抗体或其抗原结合部分，其中PD-1抗体或其抗原结合部分约每2周一次以范围为约0.1至约5.0 mg/kg体重的剂量施用；和

(b) 特异性结合细胞毒性T淋巴细胞抗原-4 (CTLA-4)并抑制CTLA-4活性的抗体或其抗原结合部分，其中CTLA-4抗体或其抗原结合部分约每6周或12周一次以范围为约1至约5.0 mg/kg体重的剂量施用。

E2. E1的方法，其中肺癌是非小细胞肺癌(NSCLC)。

E3.E2的方法，其中NSCLC具有鳞状组织学。

E4.E2的方法，其中NSCLC具有非鳞状组织学。

E5. E1-4中任一项的方法，其中抗PD-1抗体或其抗原结合部分与尼鲁单抗交叉竞争结合人PD-1。

E6. E1-5中任一项的方法，其中抗PD-1抗体或其抗原结合部分是嵌合、人源化或人单克隆抗体或其部分。

E7. E1-E6中任一项的方法，其中抗PD-1抗体或其抗原结合部分包含具有人IgG1或IgG4同种型的重链恒定区。

E8. E1-E7中任一项的方法，其中抗PD-1抗体是尼鲁单抗。

E9. E1-E7中任一项的方法，其中抗PD-1抗体是派姆单抗。

E10. E1-E9中任一项的方法，其中抗CTLA-4抗体或其抗原结合部分是嵌合、人源化或人单克隆抗体或其部分。

E11. E1-E10中任一项的方法，其中抗CTLA-4抗体或其抗原结合部分包含具有人IgG1同种型的重链恒定区。

E12. E1-E11中任一项的方法，其中抗CTLA-4抗体是伊匹单抗。

E13. E1-E11中任一项的方法，其中抗CTLA-4抗体是曲美木单抗。

E14. E1-E13中任一项的方法，其中抗CTLA-4抗体或其抗原结合部分与伊匹单抗交叉竞争结合人CTLA-4。

E15. E1-14中任一项的方法，其中抗PD-1抗体或其抗原结合部分约每2周一次以约1 mg/kg或约3 mg/kg体重的剂量施用。

E16. E1-E15中任一项的方法，其中抗CTLA-4抗体或其抗原结合部分以约1 mg/kg体重的剂量施用。

E17. E1-E16中任一项的方法，其中抗PD-1抗体或其抗原结合部分约每2周一次以约3 mg/kg体重的剂量施用和抗CTLA-4抗体或其抗原结合部分约每12周一次以约1 mg/kg体重的剂量施用。

E18. E1-E16中任一项的方法，其中抗PD-1抗体或其抗原结合部分约每2周一次以约1 mg/kg体重的剂量施用和抗CTLA-4抗体或其抗原结合部分约每6周一次以约1 mg/kg体重的剂量施用。

E19. E1-E18中任一项的方法，其中在初始施用后受试者显示至少约1个月、至少约2个月、至少约3个月、至少约4个月、至少约5个月、至少约6个月、至少约7个月、至少约8个月、至少约9个月、至少约10个月、至少约11个月、至少约1年、至少约18个月、至少约2年、至少约3年、至少约4年或至少约5年的无进展存活。

E20. E19的方法，其中在初始施用后受试者显示至少约8个月的无进展存活。

E21. E1-E20中任一项的方法，其中与当受试者用每2周一次以1 mg/kg体重的剂量施用的抗PD-1抗体或其抗原结合部分和每6周以1 mg/kg体重的剂量施用的抗CTLA-4抗体或其抗原结合部分("方案B")治疗时相比，当受试者用约每2周一次以约3 mg/kg体重的剂量施用的抗PD-1抗体或其抗原结合部分和约每12周一次以约1 mg/kg体重的剂量施用的抗CTLA-4抗体或其抗原结合部分("方案A")治疗时，受试者具有更长的无进展存活。

E22. E21的方法，其中施用方案A的受试者的无进展存活比施用方案B的受试者的无进展存活长至少约1周、至少约2周、至少约3周、至少约1个月、至少约2个月、至少约3个月、至少约4个月、至少约5个月或至少约6个月。

E23. E21或E22的方法，其中施用方案A的受试者的无进展存活比施用方案B的受试者的无进展存活长至少约3个月。

E24. E1-E22中任一项的方法，其中与当受试者用每2周一次以3 mg/kg体重的剂量施用的抗PD-1抗体或其抗原结合部分("方案C")治疗时相比，当受试者用每2周一次以3mg/kg体重的剂量施用的抗PD-1抗体或其抗原结合部分和每12周以1 mg/kg体重的剂量施用的抗CTLA-4抗体或其抗原结合部分("方案A")治疗时，受试者具有更长的无进展存活。

E25. E23的方法，其中施用方案A的受试者的无进展存活比施用方案C的受试者的无进展存活长至少约1周、至少约2周、至少约3周、至少约4周、至少约5周、至少约6周、至少约7周、至少约8周、至少约9周、至少约10周、至少约11周、至少约12周、至少约13周、至少约14周或至少约15周。

E26. E21或E22的方法，其中施用方案A的受试者的无进展存活比施用方案C的受试者的无进展存活长至少约3个月。

E27. E1-E26中任一项的方法，其中受试者具有肺肿瘤，所述肺肿瘤具有≥ 1%PD-L1、≥ 5% PD-L1、≥ 10% PD-L1、≥ 25% PD-L1或≥ 50% PD-L1表达。

E28. E1-E27中任一项的方法，其中施用所述组合，只要观察到临床益处或直到疾病进展或不可控的毒性发生。

E29. E1-E28中任一项的方法，其中抗PD-1和抗CTLA-4抗体经配制用于静脉内施用。

E30. E1-29中任一项的方法，其中抗PD-1抗体或其抗原结合部分和抗CTLA-4抗体或其抗原结合部分序贯施用给受试者。

E31. E1-30中任一项的方法，其中抗PD-1和抗CTLA-4抗体在彼此30分钟内施用。

E32. E1-E31中任一项的方法，其中抗PD-1抗体或其抗原结合部分在抗CTLA-4抗体或其抗原结合部分之前施用。

E33. E1-E31中任一项的方法，其中抗CTLA-4抗体或其抗原结合部分在抗PD-1抗体或其抗原结合部分之前施用。

E34. E1-E29中任一项的方法，其中抗PD-1抗体或其抗原结合部分和抗CTLA-4抗体或其抗原结合部分在分开的组合物中同时施用。

E35. E1-E29中任一项的方法，其中抗PD-1抗体或其抗原结合部分和抗CTLA-4抗体或其抗原结合部分作为单一组合物同时施用。

E36. E1-E35中任一项的方法，其中抗PD-1抗体或其抗原结合部分以亚治疗剂量施用。

E37. E1-36中任一项的方法，其中抗CTLA-4抗体或其抗原结合部分以亚治疗剂量施用。

E38. E1-E37中任一项的方法，其中抗PD-1抗体或其抗原结合部分和抗CTLA-4抗体或其抗原结合部分各自以亚治疗剂量施用。

E39. 用于治疗患有肺癌的受试者的药盒，所述药盒包含：

(a)范围为约4 mg至约500 mg的量的抗PD-1抗体或其抗原结合部分；

(b) 范围为约40 mg至约500 mg的量的CTLA-4抗体或其抗原结合部分；和

(c)用于在E1-E38中任一项的方法中使用PD-1抗体或其抗原结合部分和CTLA-4抗体或其抗原结合部分的说明书。

Claims (15)

1. 组合物，其包含特异性结合程序性死亡-1 (PD-1)受体并抑制PD-1活性的抗体或其抗原结合部分(抗PD-1抗体或其抗原结合部分)，用于与特异性结合细胞毒性T淋巴细胞抗原-4 (CTLA-4)并抑制CTLA-4活性的抗体或其抗原结合部分(抗CTLA-4抗体或其抗原结合部分)组合来治疗患有肺癌的受试者；

其中抗PD-1抗体或其抗原结合部分以约每2周一次范围为约0.1至约5.0 mg/kg体重的剂量施用；和

其中抗CTLA-4抗体或其抗原结合部分以约每6至12周一次范围为约1至约5.0 mg/kg体重的剂量施用。

2.权利要求1使用的组合物，其中肺癌是非小细胞肺癌(NSCLC)。

3.权利要求1或2使用的组合物，其中抗PD-1抗体或其抗原结合部分与尼鲁单抗交叉竞争结合人PD-1。

4.权利要求1-3中任一项使用的组合物，其中抗CTLA-4抗体或其抗原结合部分与伊匹单抗交叉竞争结合人CTLA-4。

5.权利要求1-4中任一项使用的组合物，其中：

(i) 抗PD-1抗体是尼鲁单抗；

(ii) 抗CTLA-4抗体是伊匹单抗；或

(iii) 抗PD-1抗体是尼鲁单抗，且抗CTLA-4抗体是伊匹单抗。

6. 权利要求1-5中任一项使用的组合物，其中抗PD-1抗体或其抗原结合部分以约每2周一次约1 mg/kg或约3 mg/kg体重的剂量施用。

7. 权利要求1-6中任一项使用的组合物，其中抗CTLA-4抗体或其抗原结合部分以约1mg/kg体重的剂量施用。

8. 权利要求1-7中任一项使用的组合物，其中抗PD-1抗体或其抗原结合部分以约每2周一次约3 mg/kg体重的剂量施用，且抗CTLA-4抗体或其抗原结合部分以约每12周一次约1mg/kg体重的剂量施用。

9. 权利要求1-7中任一项使用的组合物，其中抗PD-1抗体或其抗原结合部分以约每2周一次约1 mg/kg体重的剂量施用，且抗CTLA-4抗体或其抗原结合部分以约每6周一次约1mg/kg体重的剂量施用。

10. 权利要求1-9中任一项使用的组合物，其中所述受试者具有肺肿瘤，所述肺肿瘤具有≥ 1% PD-L1、≥ 5% PD-L1、≥ 10% PD-L1、≥ 25% PD-L1或≥ 50% PD-L1表达。

11.权利要求1-10中任一项使用的组合物，其中施用所述组合，只要观察到临床益处或直到疾病进展或不可控的毒性发生。

12.权利要求1-11中任一项使用的组合物，其中抗PD-1和抗CTLA-4抗体经配制用于静脉内施用。

13.权利要求1-12中任一项使用的组合物，其中抗PD-1抗体或其抗原结合部分和抗CTLA-4抗体或其抗原结合部分序贯施用给受试者。

14.权利要求1-12中任一项使用的组合物，其中抗PD-1抗体或其抗原结合部分和抗CTLA-4抗体或其抗原结合部分在分开的组合物中同时施用或作为单一组合物同时施用。

15.权利要求1-14中任一项使用的组合物，其中：

(i) 抗PD-1抗体或其抗原结合部分以亚治疗剂量施用；

(ii) 抗CTLA-4抗体或其抗原结合部分以亚治疗剂量施用；或

(iii) 抗PD-1抗体或其抗原结合部分和抗CTLA-4抗体或其抗原结合部分各自以亚治疗剂量施用。