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CN108310057A - 一种高含量丹参素提取物的制备方法 - Google Patents

一种高含量丹参素提取物的制备方法 Download PDF

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CN108310057A
CN108310057A CN201810388471.2A CN201810388471A CN108310057A CN 108310057 A CN108310057 A CN 108310057A CN 201810388471 A CN201810388471 A CN 201810388471A CN 108310057 A CN108310057 A CN 108310057A
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radix salviae
salviae miltiorrhizae
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miltiorrhizae extract
extraction
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李伟
胡晓雁
钟祥禄
管兰芳
胡君惠
陈曙平
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Ganzhou HLKJ Biotechnology Co Ltd
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Abstract

本发明公开了一种高含量丹参素提取物的制备方法，具体步骤为：步骤一、将丹参药材进行粉碎，并用碱水对其回流提取，得到提取液；步骤二、将提取液通过大孔树脂进行吸附，之后再对其进行解析，得到解析液，并去除解析液中的乙醇，得到浓缩液；步骤三、对浓缩液调节其pH，再向其加入HL‑2酶，并静置；步骤四、对静置溶液调节其pH，再用混合溶剂对其进行萃取，得到萃取上清液；步骤五、对萃取上清液进行浓缩并干燥，得到丹参素提取物成品。该制备方法实现了对丹参素的提取和纯化于一体，从而一次加工便得到了高含量的丹参素提取物，可实现丹参素含量达到40％以上；同时该制备方法操作简单、成本低，而且完全无污染，可进行大规模应用。

Description

一种高含量丹参素提取物的制备方法
技术领域
本发明属于植物成分提取领域，具体属于一种高含量丹参素提取物的制备方法。
背景技术
丹参药材为中医中最常用的一味中药，其具有活血祛瘀、通经止痛、清心除烦、凉血消痈的功效，主要用于胸痹心痛、脘腹胁痛、瘕瘕积聚、热痹疼痛、心烦不眠、月经不调、痛经经闭、疮疡肿痛的症状，而丹参素是丹参药材水溶性成分中主要的药效成分之一，所以现今对丹参药材内成分的提取，主要就是对其中丹参素的提取。但又因丹参药材中丹参素含量较低，所以通过常规的工艺中得到的丹参素提取物，其丹参素含量较低，仅为25左右％；而对于制取高含量丹参素的产品，则还需要在此基础上另外再进行其他萃取、浓缩和干燥等步骤，而这些附加的工艺过程不仅操作复杂，且需要消耗大量的溶剂，导致成本较高的同时，还会污染环境。
发明内容
(1)要解决的技术问题
针对现有技术的不足，本发明要解决的技术问题是提供一种高含量丹参素提取物的制备方法，该制备方法实现了对丹参素的提取和纯化于一体，从而一次加工便得到了高含量的丹参素提取物，可实现丹参素含量达到40％以上；同时该制备方法操作简单、成本低，而且完全无污染，可进行大规模应用。
(2)技术方案
为了解决上述技术问题，本发明提供了这样一种高含量丹参素提取物的制备方法，具体步骤为：
步骤一、将丹参药材进行粉碎，再用丹参药材8～12倍质量的碱水对其进行回流提取100～140分钟，提取两次以上得到提取液；通过该步骤实现对丹参素高效地初步提取。
步骤二、将步骤一得到的提取液通过大孔树脂进行吸附，之后再用乙醇溶液对大孔树脂进行解析，得到解析液，并通过蒸馏去除解析液中的乙醇，得到浓缩液；通过该步骤将初步提取的丹参素进行浓缩。
步骤三、向步骤二得到的浓缩液中加入盐酸，将其pH调节至5～6，再向其加入浓缩液体积2～3％的HL-2酶，并在40～55℃的温度下静置22～26小时；因为丹参素可通过脂键形成各种多聚体，所以在该步骤中利用酶解法，将其多聚体化合物进行分解，让其转化为丹参素，从而提高最终提取物中丹参素的含量。
步骤四、向步骤三得到的静置溶液中加入盐酸，将其pH调节至1.5～2.5，再用正丁醇与乙酸乙酯质量比为1：1的混合溶剂对其进行萃取3～5次，得到萃取上清液；通过该步骤中混合溶剂的作用并进行萃取，通过正丁醇与乙酸乙酯的成分和配比，可去除溶液中多余的灰分，还能对丹参素进行进一步纯化，一举两得。
步骤五、对步骤四得到的萃取上清液进行浓缩并干燥，得到丹参素提取物成品。
优选地，在步骤一中，所述将丹参药材进行粉碎为粉碎至60～80目。
优选地，在步骤一中，所述碱水为氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸氢钠、碳酸钠中的一种或多种配制而成的pH为10～11的水溶液。
优选地，在步骤一中，所述碱水的使用量为丹参药材质量的10倍，所述回流提取的时间为120分钟。
优选地，在步骤二中，所述乙醇溶液的质量浓度为80～95％。
优选地，在步骤二中，所述大孔树脂为非极性或小极性树脂。
进一步的，在步骤二中，所述大孔树脂为D101、AB-8、HPD-100中的一种。
优选地，在步骤三中，所述HL-2酶为纤维素酶和葡糖糖苷酶混合而成的酶。
优选地，在步骤三中，所述静置时间为24小时。
其中，本发明所述的“丹参药材”为常见的中药成品，可以直接通过购买得到。
其中，本发明所述的“浓缩”是指采用中药提取领域中常用的浓缩方法和设备来进行的，包括常压浓缩和减压浓缩，在本发明的技术方案中，所述浓缩一般采用减压浓缩；本发明所述的“干燥”是指采用中药提取领域中常规的干燥方法和设备来进行的。
(3)有益效果
与现有技术相比，本发明的有益效果在于：首先，该制备方法通过科学合理的步骤设置，利用各步骤合理地进行加工配合，实现了对丹参素的提取和纯化于一体，从而一次加工便得到了高含量的丹参素提取物，可实现丹参素含量达到40％以上；其次，该制备方法利用酶解法，将多聚体化合物进行分解，让其转化为丹参素，从而提高了最终提取物中丹参素的含量；再次，利用混合溶剂的作用并进行萃取，通过正丁醇与乙酸乙酯的成分和配比，可去除溶液中多余的灰分，还能对丹参素进行进一步纯化，一举两得；最后，该制备方法通过优化地设置各步骤最适宜的参数选择，如各步骤中的作业时间和温度，都是通过大量的实验得出的最优参数，具有极高的实用性，极大地提升了提取效果，同时该制备方法操作简单、成本低，而且完全无污染，可进行大规模应用。
总体而言，该制备方法实现了对丹参素的提取和纯化于一体，从而一次加工便得到了高含量的丹参素提取物，可实现丹参素含量达到40％以上；同时该制备方法操作简单、成本低，而且完全无污染，可进行大规模应用。
具体实施方式
为使本发明实现的技术手段、创作特征、达成目的与功效易于明白了解，下面对本发明具体实施方式中的技术方案进行清楚、完整的描述，以进一步阐述本发明，显然，所描述的具体实施方式仅仅是本发明的一部分实施方式，而不是全部的样式。
实施例1
取10kg丹参药材(直接在相应的中药药房中购买得到)进行粉碎至60目，再用80kg碱水(碱水为氢氧化钠配制而成的pH为10的水溶液)对其进行回流提取100分钟，提取两次得到提取液；将提取液通过D101大孔树脂进行吸附，之后再用质量浓度为80％的乙醇溶液对D101大孔树脂进行解析，得到解析液，并通过蒸馏去除解析液中的乙醇，得到浓缩液；向浓缩液中加入盐酸，将其pH调节至5，再向其加入浓缩液体积2％的HL-2酶(HL-2酶为纤维素酶和葡糖糖苷酶混合而成的酶)，并在40℃的温度下静置22小时；向静置溶液中加入盐酸，将其pH调节至1.5，再用正丁醇与乙酸乙酯质量比为1：1的混合溶剂对其进行萃取3次，得到萃取上清液；对萃取上清液进行浓缩并干燥，得到丹参素提取物的成品一。
实施例2
取10kg丹参药材(直接在相应的中药药房中购买得到)进行粉碎至60目，再用80kg碱水(碱水为氢氧化钾配制而成的pH为10的水溶液)对其进行回流提取100分钟，提取两次得到提取液；将提取液通过AB-8大孔树脂进行吸附，之后再用质量浓度为80％的乙醇溶液对AB-8大孔树脂进行解析，得到解析液，并通过蒸馏去除解析液中的乙醇，得到浓缩液；向浓缩液中加入盐酸，将其pH调节至5，再向其加入浓缩液体积2％的HL-2酶(HL-2酶为纤维素酶和葡糖糖苷酶混合而成的酶)，并在40℃的温度下静置22小时；向静置溶液中加入盐酸，将其pH调节至1.5，再用正丁醇与乙酸乙酯质量比为1：1的混合溶剂对其进行萃取3次，得到萃取上清液；对萃取上清液进行浓缩并干燥，得到丹参素提取物的成品二。
实施例3
取10kg丹参药材(直接在相应的中药药房中购买得到)进行粉碎至70目，再用100kg碱水(碱水为碳酸氢钠配制而成的pH为10.5的水溶液)对其进行回流提取120分钟，提取两次得到提取液；将提取液通过HPD-100大孔树脂进行吸附，之后再用质量浓度为85％的乙醇溶液对HPD-100大孔树脂进行解析，得到解析液，并通过蒸馏去除解析液中的乙醇，得到浓缩液；向浓缩液中加入盐酸，将其pH调节至5.5，再向其加入浓缩液体积2.5％的HL-2酶(HL-2酶为纤维素酶和葡糖糖苷酶混合而成的酶)，并在50℃的温度下静置24小时；向静置溶液中加入盐酸，将其pH调节至2，再用正丁醇与乙酸乙酯质量比为1：1的混合溶剂对其进行萃取4次，得到萃取上清液；对萃取上清液进行浓缩并干燥，得到丹参素提取物的成品三。
实施例4
取10kg丹参药材(直接在相应的中药药房中购买得到)进行粉碎至70目，再用100kg碱水(碱水为碳酸钠配制而成的pH为10.5的水溶液)对其进行回流提取120分钟，提取三次得到提取液；将提取液通过D101大孔树脂进行吸附，之后再用质量浓度为85％的乙醇溶液对D101大孔树脂进行解析，得到解析液，并通过蒸馏去除解析液中的乙醇，得到浓缩液；向浓缩液中加入盐酸，将其pH调节至5.5，再向其加入浓缩液体积2.5％的HL-2酶(HL-2酶为纤维素酶和葡糖糖苷酶混合而成的酶)，并在50℃的温度下静置24小时；向静置溶液中加入盐酸，将其pH调节至2，再用正丁醇与乙酸乙酯质量比为1：1的混合溶剂对其进行萃取4次，得到萃取上清液；对萃取上清液进行浓缩并干燥，得到丹参素提取物的成品四。
实施例5
取10kg丹参药材(直接在相应的中药药房中购买得到)进行粉碎至80目，再用120kg碱水(碱水为氢氧化钠和碳酸钠配制而成的pH为11的水溶液)对其进行回流提取140分钟，提取三次得到提取液；将提取液通过AB-8大孔树脂进行吸附，之后再用质量浓度为95％的乙醇溶液对AB-8大孔树脂进行解析，得到解析液，并通过蒸馏去除解析液中的乙醇，得到浓缩液；向浓缩液中加入盐酸，将其pH调节至6，再向其加入浓缩液体积3％的HL-2酶(HL-2酶为纤维素酶和葡糖糖苷酶混合而成的酶)，并在55℃的温度下静置26小时；向静置溶液中加入盐酸，将其pH调节至2.5，再用正丁醇与乙酸乙酯质量比为1：1的混合溶剂对其进行萃取5次，得到萃取上清液；对萃取上清液进行浓缩并干燥，得到丹参素提取物的成品五。
实施例6
取10kg丹参药材(直接在相应的中药药房中购买得到)进行粉碎至80目，再用120kg碱水(碱水为氢氧化钾和碳酸氢钠配制而成的pH为11的水溶液)对其进行回流提取140分钟，提取两次得到提取液；将提取液通过HPD-100大孔树脂进行吸附，之后再用质量浓度为95％的乙醇溶液对HPD-100大孔树脂进行解析，得到解析液，并通过蒸馏去除解析液中的乙醇，得到浓缩液；向浓缩液中加入盐酸，将其pH调节至6，再向其加入浓缩液体积3％的HL-2酶(HL-2酶为纤维素酶和葡糖糖苷酶混合而成的酶)，并在55℃的温度下静置26小时；向静置溶液中加入盐酸，将其pH调节至2.5，再用正丁醇与乙酸乙酯质量比为1：1的混合溶剂对其进行萃取5次，得到萃取上清液；对萃取上清液进行浓缩并干燥，得到丹参素提取物的成品六。
实验对比：取上述各实施例得到的6种成品，并分别对其丹参素的含量进行检测，并结合现今常规方法下得到丹参素提取物的成品七进行对比，实验数据如下表：
样本 成品一 成品二 成品三 成品四 成品五 成品六 成品七
丹参素含量 47.9％ 46.8％ 48.7％ 49.2％ 48.3％ 47.1％ 25.5％
结论：通过上述的数据对比，可以很明显地看出，本发明技术方案的制备方法能实现对丹参素含量达到40％以上的提取，与现有技术相比提升巨大，产生了质的飞跃。该制备方法实现了对丹参素的提取和纯化于一体，从而一次加工便得到了高含量的丹参素提取物，同时该制备方法操作简单、成本低，而且完全无污染，可进行大规模应用。
以上描述了本发明的主要技术特征和基本原理及相关优点,对于本领域技术人员而言，显然本发明不限于上述示范性具体实施方式的细节，而且在不背离本发明的构思或基本特征的情况下，能够以其他的具体形式实现本发明。因此，无论从哪一点来看，均应将上述具体实施方式看作是示范性的，而且是非限制性的，本发明的范围由所附权利要求而不是上述说明限定，因此旨在将落在权利要求的等同要件的含义和范围内的所有变化囊括在本发明内。
此外，应当理解，虽然本说明书按照各实施方式加以描述，但并非每个实施方式仅包含一个独立的技术方案，说明书的这种叙述方式仅仅是为清楚起见，本领域技术人员应当将说明书作为一个整体，各实施方式中的技术方案也可以经适当组合，形成本领域技术人员可以理解的其他实施方式。

Claims (9)

1.一种高含量丹参素提取物的制备方法，其特征在于，具体步骤为：
步骤一、将丹参药材进行粉碎，再用丹参药材8～12倍质量的碱水对其进行回流提取100～140分钟，提取两次以上得到提取液；
步骤二、将步骤一得到的提取液通过大孔树脂进行吸附，之后再用乙醇溶液对大孔树脂进行解析，得到解析液，并通过蒸馏去除解析液中的乙醇，得到浓缩液；
步骤三、向步骤二得到的浓缩液中加入盐酸，将其pH调节至5～6，再向其加入浓缩液体积2～3％的HL-2酶，并在40～55℃的温度下静置22～26小时；
步骤四、向步骤三得到的静置溶液中加入盐酸，将其pH调节至1.5～2.5，再用正丁醇与乙酸乙酯质量比为1：1的混合溶剂对其进行萃取3～5次，得到萃取上清液；
步骤五、对步骤四得到的萃取上清液进行浓缩并干燥，得到丹参素提取物成品。
2.根据权利要求1所述的高含量丹参素提取物的制备方法，其特征在于，在步骤一中，所述将丹参药材进行粉碎为粉碎至60～80目。
3.根据权利要求1所述的高含量丹参素提取物的制备方法，其特征在于，在步骤一中，所述碱水为氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸氢钠、碳酸钠中的一种或多种配制而成的pH为10～11的水溶液。
4.根据权利要求1所述的高含量丹参素提取物的制备方法，其特征在于，在步骤一中，所述碱水的使用量为丹参药材质量的10倍，所述回流提取的时间为120分钟。
5.根据权利要求1所述的高含量丹参素提取物的制备方法，其特征在于，在步骤二中，所述乙醇溶液的质量浓度为80～95％。
6.根据权利要求1所述的高含量丹参素提取物的制备方法，其特征在于，在步骤二中，所述大孔树脂为非极性或小极性树脂。
7.根据权利要求5所述的高含量丹参素提取物的制备方法，其特征在于，在步骤二中，所述大孔树脂为D101、AB-8、HPD-100中的一种。
8.根据权利要求1所述的高含量丹参素提取物的制备方法，其特征在于，在步骤三中，所述HL-2酶为纤维素酶和葡糖糖苷酶混合而成的酶。
9.根据权利要求1所述的高含量丹参素提取物的制备方法，其特征在于，在步骤三中，所述静置时间为24小时。
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