CN108289938A

CN108289938A - 多价vlp缀合物

Info

Publication number: CN108289938A
Application number: CN201680052432.4A
Authority: CN
Inventors: S.V.卡普雷
Original assignee: Create A Ltd Co
Current assignee: Create A Ltd Co; Inventprise LLC
Priority date: 2015-09-10
Filing date: 2016-09-12
Publication date: 2018-07-17
Also published as: US20170072043A1; US10736952B2; MY177587A; PH12018500305B1; KR20200038339A; WO2017044932A1; KR20180043352A; PH12018500305A1; ZA201800928B; EP3347042A1; KR20210011083A; EP3347042A4; MY187472A; US20210113680A1; US10159728B2; US20190105383A1

Abstract

本发明涉及包含与病毒样颗粒(VLP)的一种或多种组分缀合的夹膜多糖的疫苗，以及用于给予本发明的疫苗的方法和用于制造本发明的疫苗的方法。优选地，本发明的疫苗在有需要的个体中对相同或不同感染因子的多菌株和/或多血清型产生治疗有效响应。优选地，这种疫苗对相同感染因子的所有病原性菌株和/或血清型产生治疗有效免疫响应。特别是，本发明涉及用于成本有效地将疫苗给予有需要的患者的方法和组合物，将患者的免疫系统仅暴露于免疫原性组分，该免疫原性组分很可能对产生保护性免疫学响应有益，增加了功效和安全性二者并且成本有效。

Description

多价VLP缀合物

相关申请的引用

本申请要求于2015年9月10日提交的题目为“Multivalent VLP Conjugates (多价VLP缀合物)”的美国临时申请第62/216,646号的优先权，其全部内容通过引用结合于此。

背景

1. 发明领域

本发明提供了用于对抗病毒、细菌和其他疾病的组合物、方法和多价疫苗，特别是使用VLP制造多价缀合物疫苗的组合物和方法。

2. 背景说明

由病毒、细菌或其他物质引起的感染发生在各种动物身上。感染通常是物种特异性的并且基于它们感染的宿主分为不同的组，可以包括多血清型。多价疫苗已被开发试图针对感染因子的所有或最可能的血清型进行疫苗接种。多价肺炎球菌多糖疫苗Prevnar 13已被用于预防肺炎球菌疾病。Prevnar 13包含十三种肺炎球菌血清型，即，血清型1、3、4、5、6A、6B、7F、9V、14、18C、19A、19F和23F。还存在9种可能病原性的其他血清型，且因此，Prevnar13疫苗未解决由这些另外的9种血清型引起的感染。存在的另一个问题是这些新血清型没有人类宿主。由于疫苗研发需要很多年，迫切需要尽快开发出合适的疫苗。

已显示病毒样颗粒(VLP)可用作对抗各种感染因子(包括病毒和细菌感染)的疫苗。VLP由选定病毒组的结构蛋白的自组装形成。这些蛋白自组装成荚膜(capsule)，但由于不存在复制核酸，所以VLP不能复制病毒基因组和产生更多或另外的感染性病毒颗粒。VLP绝对无感染性且通常对环境无害。

当在抗原性分子存在下形成VLP时，VLP成为抗原的递送载体，或换言之，成为有效疫苗。VLP可具有与从其获得或衍生结构组分的亲本病毒相似的抗原性，因此可用作对抗该特定病毒感染的疫苗。通过在VLP的组分内具有抗原，VLP通常用作疫苗。这允许外来抗原暴露在它们的表面上。其他VLP已经通过化学缀合用作包括非蛋白抗原的外来抗原的载体。然而，通过基因融合或化学修饰用靶-抗原装饰VLP是耗时的并且常常导致衣壳错配或抗原错叠，从而阻碍保护性免疫的产生。

目前可得的疫苗，例如对抗肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae)的疫苗，涉及使用蛋白载体的多价多糖缀合物疫苗。目前对抗原缀合物的数量存在限制，这产生了对余量血清型无保护的区域。由于目前的疫苗预防由对疫苗抗原具有特异性的病原体引起的感染，因此在疫苗中未抗原性呈现的病原体变得更为主要。在这种情况下，在相当长时间内不存在可用的保护性疫苗，该时间将包括识别新病原体、识别和表征靶抗原以及开发新疫苗所需的时间。并且目前的问题是用作载体蛋白的单一蛋白。缀合物中的蛋白组分是多糖量的两倍，并随着价数的增加而开始变成巨大的数字。对于包含许多血清型的多价疫苗，患者的蛋白负载可能很大。例如，假设每种血清型每剂量将需要2微克多糖抗原部分和每种血清型每剂量4微克载体蛋白，则23价疫苗将产生一剂量约92微克的蛋白负载，该剂量对患者可能是灾难性的。

因此，需要不引起蛋白过载但对特定感染性微生物的所有病原性菌株和/或血清型具有保护性的疫苗。

发明概述

本发明克服了与现有策略和设计相关的问题和缺点，并且提供了用于对抗感染性疾病且特别是对抗特定疾病的所有病原性菌株的新型疫苗和方法。

本发明的一个实施方案涉及包含与病毒样颗粒(VLP)连接的得自或衍生自相同或不同感染因子的一种或多种、优选多种免疫原性抗原的疫苗。优选地，所述免疫原性抗原是代表感染因子的多种或全部病原性血清型的多糖(PS)。优选地，所述病毒样颗粒得自或衍生自肝炎病毒、人乳头瘤病毒、呼吸道合胞病毒、黄病毒或其组合。优选地，所述多种多糖通过缀合共价连接到病毒样颗粒的一种或多种组分。优选地，所述缀合包括通过氰基化剂连接，所述氰基化剂例如四氟硼酸1-氰基-4-(二甲基氨基)-吡啶鎓(CDAP)、1-氰基苯并三唑(1-CBT)、2-氰基哒嗪-3(2H)-酮(2-CPO)、1-氰基咪唑(1-CI)、四氟硼酸1-氰基-4-吡咯烷并吡啶鎓(CPPT)或其组合。

优选地，所述感染因子包括病毒、细菌或寄生虫。优选地，所述病毒包括一种或多种肠病毒、肝炎病毒、人免疫缺陷病毒(HIV)、人乳头瘤病毒(HPV)、流感病毒、百日咳病毒、风疹病毒、破伤风病毒、水痘带状疱疹病毒(VZV)、黄病毒、西尼罗(West Nile)病毒、登革热病毒、蜱媒脑炎病毒、黄热病毒、寨卡(Zika)病毒及其组合。优选地，所述细菌包括一种或多种衣原体、梭菌、白喉、脑膜炎球菌、链球菌、葡萄球菌、肺炎球菌、芽孢杆菌或其组合。优选地，所述寄生虫包括贾第虫、疟原虫或其组合。优选地，所述VLP得自或衍生自单一病毒，例如可以重组方式产生但可由多种不同病毒产生的肝炎病毒。优选地所述多糖与病毒样颗粒的一种或多种组分共价连接，且得自和/或衍生自一种或多种、两种或更多种或所有的肺炎球菌(Streptococcus pneumoniae)的血清型1、2、3、4、5、6B、7F、8、9N、9V、10A、11A、12F、14、15B、17F、18C、19A、19F、20F、23F和33F。本发明的疫苗可以包含佐剂，例如氢氧化铝与磷酸盐缓冲剂，或可以不需要佐剂以在给予患者时产生对抗感染因子的治疗有效免疫响应。

优选地，所述疫苗对多血清型是治疗有效的(例如，多价多糖-VLP缀合物疫苗)并且对一种或多种感染因子产生体液和/或细胞免疫响应。优选地，所述治疗有效疫苗是为个体提供对抗后续感染的保护和/或为感染的个体提供治疗性处理的疫苗。优选地，本发明的治疗有效疫苗提供抵抗感染因子的多血清型感染的保护。优选地，所述治疗有效免疫响应包括对感染因子的体液和/或细胞免疫响应。

本发明的另一个实施方案涉及预防或治疗感染因子感染的方法，包括给予患者本发明的疫苗。优选地，给予包括肌内注射、腹膜内注射、静脉内注射、鼻内、口服或透皮。优选地，所述患者是婴儿、幼儿、青少年、成人或年长者。

本发明的另一个实施方案涉及制造本发明的疫苗的方法，包括：将病毒样颗粒的组分与相同或不同感染因子的多种免疫原性抗原混合；使所述病毒样颗粒的组分与所述相同或不同感染因子的多种免疫原性抗原缀合；和形成缀合的病毒样颗粒的疫苗。优选地，将所述缀合的VLP冻干。本发明的疫苗可以包含或不包含佐剂。当使用时，优选的佐剂包括例如氢氧化铝和磷酸盐缓冲剂。本发明的疫苗可以进一步包含稳定剂。优选的稳定剂包括例如山梨糖醇和/或降解的明胶。

本发明的其他实施方案和优点部分地在下面的描述中阐述，并且部分地可从本说明书显而易见，或者可从本发明的实践获知。

发明描述

研发多价疫苗的常规程序涉及蛋白载体中的多价多糖。由于特定感染因子的大量菌株和/或血清型，蛋白负载可能很大，因此使得这样的构建体可用作疫苗。当减少价数(即感染因子的菌株、血清型的数目)以解决蛋白/抗原过载时，对未在疫苗中呈现的病原性血清型产生不受保护的区域。因此，在以其他方式疫苗接种群体中，未在疫苗中抗原性呈现的病原体变得更占主导地位。虽然可以实现对一些群体的短期保护，但长期的前景可能是归因于未接种疫苗菌株的感染的迅速且侵略性的产生，预期的病理和并发症可能现在无法以其他方式治疗。

令人意外地发现，与代表特定感染因子的血清型变体的多种不同的多糖(PS)缀合的病毒样颗粒(VLP)可用作有效多价疫苗。令人意外的是，即使使用大量缀合的PS，也几乎不存在衣壳错配或抗原错叠，否则这会妨碍从所得疫苗接种产生保护性免疫。虽然可以加入佐剂，但令人意外地发现添加的佐剂对于治疗有效和保护性疫苗不是必需的。治疗有效疫苗是为个体提供对抗后续感染的保护和/或为感染个体提供治疗性处理的疫苗。由于VLP具有佐剂性质，本发明的疫苗具有巨大的免疫增强作用，但剂量比以其他方式需要的量低。缀合反应减少了保护性接种疫苗所需的抗原性材料的量，优选减少约一半或更少。此外，无需佐剂进一步减少了保护性接种疫苗所需的材料的量。所需的抗原材料和所需总量二者的减少允许产生对特定感染因子的大量血清型具有保护性的多价疫苗，以及对多种不同感染因子具有保护性的疫苗。归因于减少需要的抗原和疫苗材料总量的重要优点之一是本发明的疫苗可以给予与成人疫苗相比通常需要较低剂量的抗原和/或疫苗量的儿童。

本发明的一个实施方案涉及包含相同或多种不同感染因子的一种或多种且优选多种抗原的VLP疫苗。本发明的疫苗允许加入所有的病原性血清型，优选多糖，制备对抗病原体的全疫苗。这种组合的免疫原性高于由常规多价疫苗产生的免疫原性，并且具有降低的剂量，这继而将降低患者的蛋白负载。当缀合物疫苗包括CRM₁₉₇时，这是特别重要的。与常规疫苗相比，本发明的疫苗所需的CRM₁₉₇的量在数量上少一半或更多。因此，本发明的VLP疫苗避免了阻止全疫苗开发的主要并发症，并且不产生过量毒性或归因于施用高剂量抗原和/或大量疫苗而产生的任何副作用。

病毒样颗粒与病毒相似，但不具感染性且不含病毒遗传材料。VLP可以在体外或在培养物中从病毒结构蛋白(例如包膜或衣壳蛋白)的表达自组装。VLP部分优选由感染人、细菌、寄生虫、真菌、植物和/或其他宿主的病毒或病毒样物质产生。包含病毒蛋白的优选的VLP包括但不限于从肝炎病毒(例如Hep A、B、C、D和/或E)、人乳头瘤病毒(HPV)、细小病毒(例如20腺相关病毒)、呼吸道合胞病毒、逆转录病毒(例如HIV)、流感病毒及其组合纯化或衍生的VLP。本发明的VLP优选得自或衍生自乙型肝炎病毒(Hep B)且由小HBV衍生的表面抗原(HBsAg)组成。VLP可以在各种细胞培养物体系中产生，包括哺乳动物细胞系、昆虫细胞系、酵母和植物细胞。优选地，所述VLP部分是感染因子的普遍公认的部分并且可以纯化、合成、作为融合蛋白产生和/或重组产生。优选地，所述VLP的抗原部分可商购获得并且显示可安全用于具有公认的安全性特征的疫苗。

VLP的免疫原性试剂包含刺激个体中的免疫响应的抗原或其他结构。免疫原性试剂包括但不限于肽、蛋白、脂质、脂肪酸、多糖、脂多糖。通常，免疫原性试剂是感染性颗粒的表面抗原。抗原对于特定的感染因子或感染因子的组合可以是特异性的，例如病毒性感染因子(例如肠病毒、肝炎病毒、人免疫缺陷病毒(HIV)、人乳头瘤病毒(HPV)、流感病毒、百日咳病毒、风疹病毒、破伤风、水痘病毒(VZV)、黄病毒、西尼罗(West Nile)病毒、登革热病毒、蜱媒脑炎病毒、黄热病毒、寨卡(Zika)病毒)、细菌性感染因子(例如衣原体、梭菌、白喉、脑膜炎球菌、链球菌、葡萄球菌、肺炎球菌)、寄生虫感染因子(例如贾第虫、疟疾(疟原虫))和/或引起脓毒症或败血症的因子。优选地，所述免疫响应足以保护个体免于后续感染一段时间。优选地，所述疫苗是有效的并且保护患者免于感染六个月或更长时间、一年或更长时间、两年或更长时间，五年或更长时间或十年或更长时间。响应本发明的免疫原性试剂产生的免疫响应在个体中产生体液免疫响应、细胞免疫响应或优选这两者。优选的细胞响应包括T细胞响应和/或吞噬细胞响应，并且还优选记忆细胞响应。

本发明的VLP可以与感染因子的抗原部分融合、缀合或以其他方式连接(例如，共价或非共价连接)。优选地，本发明的VLP与一种或多种感染因子的多种多糖(PS)并且优选与相同或不同感染因子(例如感染人类的感染性微生物)的荚膜多糖缀合。缀合疫苗可以通过使用活化剂例如氰基化试剂例如四氟硼酸1-氰基-4-(二甲基氨基)-吡啶鎓(CDAP)或其他众所周知的氰基化试剂(例如，1-氰基苯并三唑{1-CBT}、2-氰基哒嗪-3(2H)-酮{2-CPO}、1-氰基咪唑{1-CI}、四氟硼酸1-氰基-4-吡咯烷并吡啶鎓{CPPT})将VLP与PS共价连接而产生。用于缀合的方法可以包括接头化合物并且是众所周知的且可商购获得(Lees等人, "Activation of Soluble Polysaccharides with 1-Cyano-4-Dimethylamino PyridiniumTetrafluoroborate For Use in Protein-Polysaccharide Conjugate Vaccines andImmunological Reagents ," Vaccine, 第14卷，第3期(1996), pp. 190 198; 美国专利第 9,044,517号)。通过将VLP与多种且不同的PS(其可以是相同感染因子或多种感染因子的多血清型)连接，由于VLP固有地具有免疫性，因此可以获得针对感染因子的强且宽的免疫力。

优选地，本发明的VLP与特定感染性微生物的所有病原性形式(例如，血清型、菌株、型、物种、亚种)或相关的至少所有连接以提供对个体和/或特定群体的保护。PS可缀合至完全形成的VLP或VLP的结构组分和在缀合后形成的VLP。

在一个实施方案中，可以通过将抗原性多糖部分(其可能已经发现抗原性差)共价连接到载体蛋白来产生缀合物疫苗，从而为所连接的抗原产生载体的免疫学属性。因此，共轭多糖/蛋白载体诱导T细胞响应，但是对于这两种成分都是如此。例如，用交叉反应性抗原(例如CRM₁₉₇)作为载体，往往对CRM₁₉₇产生巨大的不需要的抗体。当使用VLP时，情况并非如此，因为所产生的免疫响应对特定疾病具有保护性。

与具有高度免疫原性的PS缀合的VLP载体蛋白降低了本来需要的剂量，同时在降低的剂量下维持免疫增强能力。这样的缀合物是稳定的，并且任选地可以与氢氧化铝和磷酸盐缓冲剂配制以提高吸附。VLP疫苗的稳定性可以在不增加抗原负载的情况下通过添加糖醇例如山梨糖醇、明胶以及优选化学和/或机械降解的明胶(例如具有10千道尔顿{kD}的平均分子量或更少)进一步补充。与VLP疫苗一起的有用的稳定剂公开于2016年9月6日提交的标题为“VLP稳定的疫苗组合物(VLP Stabilized Vaccine Compositions)”的美国专利申请号15/257,143中，该专利通过引用明确地并入本文。

本发明的优选的多价缀合物疫苗包含与重组肝炎VLP缀合的肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae)的多种荚膜多糖。该疫苗可以有效对抗肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae)的任何或更多或所有血清型(例如1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22或23种血清型)。优选地，所述疫苗包含呈现肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae)的至少两种不同的血清型的至少两种不同的荚膜多糖，更优选至少五种，更优选至少十种，更优选至少十五种，更优选至少二十种，且甚至更优选至少二十三种。产生的疫苗作为通用的成人以及婴儿疫苗是有效的，至少因为所需剂量将低于目前可用的多价肺炎球菌疫苗，并且被儿童和婴儿可以很好地耐受。作为载体的蛋白需求将约为23微克，接近成人剂量。由于不会注射过量的蛋白，这种疫苗比现在可得的疫苗要安全得多。这允许产生更大数目的多价疫苗，否则由于大蛋白量对于所有组分可能不是有效的。

其他感染因子包括以下中的一种或多种：金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)和相关亚种的十一个聚簇(clusters)、绿脓假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)的二十种血清型，其中的至少三种是临床相关的(血清型03、06和011)、大肠杆菌(Eschericia coli)的O抗原、K抗原和H抗原血清型(包括病原性血清型O157:H7、O104:H4、O121、O26、O103、O111、O145和O104:H21)；以及克雷伯菌(Klebsiella)、肠杆菌(Enterobacter)、沙雷氏菌(Serratia)、柠檬酸杆菌(Citrobacter)、沙门氏菌(Salmonella)、李斯特菌(Listeria)、志贺氏菌(Shigella)、弯曲杆菌(Campylobacter)和分枝杆菌(Mycobacterium)的各种病原性菌株和/或血清型。

本发明的另一个实施方案涉及通过给予患者本发明的VLP疫苗来治疗和/或预防归因于感染因子的感染。本发明的疫苗的有效给予方法包括但不限于经由贴片(例如皮肤贴片)给予、注射(例如肌内、腹膜内、器官内、静脉内、脑内)、接种、口服或直接胃肠道给予、透皮吸收、疫苗枪或喷射注射器，或优选地通过使用溶解或可溶生物可降解针阵列的透皮吸收。优选地，本发明的疫苗作为透皮注射或经由没有铝佐剂的皮肤贴剂给予。由于这种途径，剂量会进一步降低，而疫苗的效果和安全性与较大剂量相当。

优选地，所述疫苗保持为液体，但液体可以冻干并作为干粉储存直至使用，其中粉末在合适的携带剂(水性或非水性)中再水合以给予个体。优选通过注射给予，其可以是腹膜内(i.p.)、肌内(i.m.)和/或静脉内(i.v.)或局部给予感染部位。

优选地，作为液体或粉末的本发明的疫苗在4℃或更高、15℃或更高、25℃或更高、37℃或更高、40℃或更高、50℃或更高或100℃或更高下稳定。还优选地，作为液体或粉末的本发明的疫苗在15℃或更低、更优选0℃或更低、更优选-20℃或更低且更优选-50℃或更低下稳定。还优选地，疫苗的稳定性维持六个月或更长、八个月或更长或十二个月或更长。优选地，本发明的疫苗通过随时间改变温度而稳定，其可以包括多次冷冻和解冻。

本发明的另一个实施方案涉及将本发明的疫苗给予有需要的患者用于治疗或预防感染的方法。所述方法包括将治疗有效量的本发明的疫苗给予哺乳动物，包括确定为被感染患者提供治疗和/或感染预防的待给予的疫苗的治疗有效量。治疗有效量通常通过基于哺乳动物的重量和患者免疫系统的强度或反应性来确定，并且可以由本领域技术人员确定。将治疗有效量给予有需要的患者，其可以治疗活动性或疑似性感染或预防感染。疫苗可能已经从冻干粉末中获得并且在给予患者之前重构成水性或非水性液体。优选地，疫苗作为液体给予，其可以是肌内、腹膜内或静脉内给予，并且患者可以是婴儿、幼儿、青少年、成人或年长者。令人意外的是，本发明的疫苗不会在注射部位产生副作用，例如发红或炎症，并且不会对患者产生一般性发热或炎症或其他不良副作用。优选地，免疫有效的疫苗仅包含完全形成的包含多种免疫原性试剂的VLP，并且没有其他，例如没有添加的佐剂。

本发明的另一个实施方案涉及制造本发明的疫苗的方法。病毒的结构组分通过本领域技术人员熟知的方法获得，并且不包括将允许组分和所得颗粒复制的任何核酸材料。将预定摩尔量的结构组分优选在室温或更低的温度下与大约等摩尔量的一种或多种免疫原性试剂和一种或多种本发明的稳定剂混合，使得VLP包封大致相当量的所述一种或多种免疫原性试剂和所述一种或多种稳定剂。优选通过过滤、离心或本领域技术人员已知的其他方法将完全形成的VLP与未形成的VLP以及游离的结构和其他材料分离，由此产生完全形成的包含一种或多种免疫原和一种或多种稳定剂的VLP。完全形成的VLP可以作为水性(例如水或盐水)或非水性(例如油、脂肪酸)混合物储存，或冻干并作为粉末储存。无论是作为液体还是粉末，优选在使用前的储存不会明显损失免疫原性活性，并且例如可以是一个月或更长时间、四个月或更长时间、六个月或更长时间，或更优选一年或更长时间，并且在环境温度下。在不损失免疫原活性的情况下储存疫苗也可以低于环境温度，例如在20℃或更低，10℃或更低，4℃或更低或0℃或更低。

以下实施例说明了本发明的实施方案，但不应将其视为限制本发明的范围。

实施例1 对抗肺炎链球菌的VLP缀合物疫苗

VLP从肝炎病毒的结构组分获得，并与衍生自肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae)的荚膜多糖共价缀合。所述缀合的VLP与肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae)免疫原性肽连接，所述免疫原性肽从微生物中分离或重组制备。根据常规HepB疫苗的制备，缀合物用氢氧化铝和磷酸盐缓冲液作为佐剂配制，并用于增加组织吸附。所得缀合物疫苗长时间稳定(例如，在4℃下至少1-6个月或当冻干时至少12-24个月)。至少部分由于缀合物的免疫增强能力，该疫苗以每种血清型1微克的剂量给予哺乳动物。用23种血清型，载体的蛋白负载总量为每次疫苗接种约23微克，接近成人剂量。当给予具有活动免疫系统的哺乳动物(例如，成年人)时，患者以体液和细胞响应两种形式对肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae)产生保护性免疫响应，并且没有蛋白过载的风险。

考虑到本文公开的本发明的说明书和实践，本发明的其他实施方案和用途对于本领域技术人员将是显而易见的。本文引用的所有参考文献(包括所有出版物、美国和外国专利和专利申请)均通过引用明确且全文结合到本文中。其中曾经使用的术语“包含”旨在包括术语“由......组成”和“基本上由......组成”。此外，术语包含、包括和含有不旨在是限制性的。意欲认为说明书和实施例仅是示例性的，并且本发明的真实范围和精神仅由下列权利要求给出。

Claims

1.一种对抗感染因子的多血清型的疫苗，其包含与多种多糖连接的病毒样颗粒，每种多糖代表所述感染因子的血清型。

2.权利要求1的疫苗，其中所述病毒样颗粒得自或衍生自肝炎病毒、人乳头瘤病毒、呼吸道合胞病毒、黄病毒或其组合。

3.权利要求1的疫苗，其中所述多种多糖通过缀合共价连接至所述病毒样颗粒的一种或多种组分。

4.权利要求3的疫苗，其中所述缀合包括经由氰基化剂连接。

5.权利要求4的疫苗，其中所述氰基化剂包括四氟硼酸1-氰基-4-(二甲基氨基)-吡啶鎓(CDAP)、1-氰基苯并三唑(1-CBT)、2-氰基哒嗪-3(2H)-酮(2-CPO)、1-氰基咪唑(1-CI)、四氟硼酸1-氰基-4-吡咯烷并吡啶鎓(CPPT)或其组合。

6. 权利要求1的疫苗，其中所述荚膜多糖得自或衍生自肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae)的一种或多种血清型1、2、3、4、5、6B、7F、8、9N、9V、10A、11A、12F、14、15B、17F、18C、19A、19F、20、22F、23F和33F。

7. 权利要求1的疫苗，其中所述病毒样颗粒得自和/或衍生自肝炎且所述荚膜多糖得自和/或衍生自肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae)的两种或更多种血清型1、2、3、4、5、6B、7F、8、9N、9V、10A、11A、12F、14、15B、17F、18C、19A、19F、20、22F、23F和33F。

8. 权利要求1的疫苗，其中所述荚膜多糖得自或衍生自肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae)的血清型1、2、3、4、5、6B、7F、8、9N、9V、10A、11A、12F、14、15B、17F、18C、19A、19F、20、22F、23F和33F。

9.权利要求1的疫苗，其中所述感染因子是病毒、细菌或寄生虫。

10. 权利要求9的疫苗，其中所述病毒包括一种或多种肠病毒、肝炎病毒、人免疫缺陷病毒(HIV)、人乳头瘤病毒(HPV)、流感病毒、百日咳病毒、风疹病毒、破伤风病毒、水痘带状疱疹病毒(VZV)、黄病毒、西尼罗(West Nile)病毒、登革热病毒、蜱媒脑炎病毒、黄热病毒、寨卡(Zika)病毒及其组合。

11.权利要求9的疫苗，其中所述细菌包括一种或多种衣原体、梭菌、白喉、脑膜炎球菌、链球菌、葡萄球菌、肺炎球菌、芽孢杆菌或其组合。

12.权利要求9的疫苗，其中所述寄生虫包括贾第虫、疟原虫或其组合。

13.权利要求1的疫苗，其不需要佐剂来产生治疗有效响应。

14.权利要求1的疫苗，其进一步包含佐剂。

15.权利要求14的疫苗，其中所述佐剂包括氢氧化铝与磷酸盐缓冲剂。

16.权利要求1的疫苗，其在给予患者时对感染因子产生治疗有效免疫响应。

17.权利要求16的疫苗，其中所述治疗有效免疫响应包括保护个体免受感染因子的后续感染和/或治疗性处理被感染因子感染的个体。

18.权利要求16的疫苗，其中所述治疗有效免疫响应提供保护免受感染因子的多血清型感染。

19.权利要求16的疫苗，其中所述治疗有效免疫响应包括对感染因子的体液和/或细胞免疫响应。

20.一种预防或治疗被感染因子的多血清型感染的方法，包括给予患者权利要求1的疫苗。

21.权利要求20的方法，其中给予包括肌内注射、腹膜内注射、静脉内注射、鼻内、口服或透皮。

22.权利要求20的方法，其中所述患者是婴儿、幼儿、青少年、成人或年长者。

23. 制造权利要求1的疫苗的方法，包括：

将病毒样颗粒的组分与相同或不同感染因子的多种免疫原性抗原混合；和

使所述病毒样颗粒的组分与所述相同或不同感染因子的多种免疫原性抗原缀合；和

形成缀合的病毒样颗粒的疫苗。

24. 权利要求23的方法，其中所述多种免疫原性抗原包括肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae)的多种荚膜多糖。

25. 权利要求24的方法，其中所述肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae)的多种荚膜多糖包括来自肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae)的血清型1、2、3、4、5、6B、7F、8、9N、9V、10A、11A、12F、14、15B、17F、18C、19A、19F、20、22F、23F和33F的多糖。

26.权利要求23的方法，其进一步包括冻干所述疫苗。

27.权利要求23的方法，其进一步包括向所述缀合的病毒样颗粒添加佐剂。

28.权利要求27的方法，其中所述佐剂包含氢氧化铝和磷酸盐缓冲剂。

29.权利要求23的方法，其进一步包括向所述缀合的病毒样颗粒添加稳定剂。

30.权利要求23的方法，其中所述稳定剂包括山梨糖醇和/或降解的明胶。