CN108095094A - 一种具有抗氧化活性的复合酵素饮料的制备方法 - Google Patents
一种具有抗氧化活性的复合酵素饮料的制备方法 Download PDFInfo
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Abstract
本发明提供了一种具有抗氧化活性的复合酵素饮料的制备方法，使用番茄果浆、金银花、山药、葛根、板栗为原料，在丙酸杆菌HX1202、乳酸杆菌HX2116和酿酒酵母HX3201条件下进行发酵后，取出打浆，再离心，过滤，收集滤液即得。本发明材料易得，安全绿色，成本较低，所得酵素具有很好的抗氧化活性，安全环保。
Description
技术领域
本发明涉及酵素技术领域，具体涉及一种具有抗氧化活性的复合 酵素饮料的制备方法。
背景技术
酵素存在于所有活的动植物体内，是维持机体正常功能，消化食 物，修复组织等生命活动的一种必需物质；随着年龄的增长和饮食安 全、生活环境等问题，人体内的酵素含量在逐年的下降，身体会由于 酵素的流失使身体代谢速率下降，容易产生亚健康和慢性病等问题， 如身体的老化，三高等，已经是属于常见慢性病。
酵素富含酶、维生素和次生代谢产物等活性营养成分，具有促进 人体新陈代谢、增强机体免疫、调节肠道、抗氧化、抑菌消炎等功效， 随着生活水平日益提高，人们日益关注养生保健；据预测，全球处于 亚健康状态的人占75％，养生保健品在全球市场开发前景广阔。
金银花露加工剩余物，也可以是金银花蒸馏剩余物，是企业生产 金银花露，即主要是金银花蒸馏液稀释所得后剩下的残液残渣；金银 花露加工剩余物含有多糖、黄酮等活性物质成分，但利用率低，基本 都是作为废弃物扔掉，带来环境污染的同时也造成了金银花资源的极 大浪费。
在大别山区，金银花、甜柿、山药、葛根、红薯、板栗、藜蒿等 特色资源富余，且品质优良，目前没有将上述富余产品有效转化的技 术及产品。
发明内容
为了解决上述问题，
本发明提供了一种具有抗氧化活性的复合酵素饮料的制备方法，包括 以下步骤：
(1)番茄洗净沥干，粉碎打浆后向番茄浆液中加入蒸馏水和果胶 酶，混匀后在15—45℃条件下静置20—100min，得到番茄果浆； 所述蒸馏水的质量为番茄浆液质量的20—60％，果胶酶的质量为番 茄浆液质量的1—8％；
(2)分别将丙酸杆菌HX1202和乳酸杆菌HX2116培养至OD值0.6 —0.8，将酿酒酵母HX3201培养至106—107个/mL；备用； 所述丙酸杆菌属HX1202的保藏分类命名为Propionibacterium sp.HX1202，2017年11月27日保藏在武汉大学中国典型培养物 保藏中心，保藏单位代码：CCTCC；保藏单位地址：中国.武汉.武 汉大学；保藏编号为CCTCC NO:M2017736；
所述乳酸杆菌HX2116的保藏分类命名为Lactobacillus sp.HX2116；2017年11月27日保藏武汉大学中国典型培养物保 藏中心，保藏单位代码：CCTCC；保藏单位地址：中国.武汉.武汉 大学；保藏编号为CCTCC NO:M2017734；
酿酒酵母HX3201的保藏分类命名为Saccharomyces cerevisiae HX3201；2017年11月27日保藏武汉大学中国典型培养物保藏 中心，保藏单位代码：CCTCC；保藏单位地址：中国.武汉.武汉大 学；保藏编号为CCTCC NO:M2017735；
(3)取新鲜葛根洗净沥干，去皮切片，捣碎成泥，向葛根泥中加 入蒸馏水和复合酶，混匀后在15—45℃条件下静置20—100min， 得到葛根浆；所述蒸馏水的质量为葛根泥质量的10—40％，复合酶 的质量为葛根泥质量的1—8％；
(4)取山药洗净沥干，削皮切片，捣碎成泥，向山药泥中加入蒸 馏水和复合酶，混匀后在15—45℃条件下静置20—100min，得到 山药浆；所述蒸馏水的质量为山药泥质量的10—40％，复合酶的质 量为山药泥质量的1—8％；
(5)将葛根浆和山药浆按质量比6：1—1:6混合配伍成复合浆， 将复合浆和番茄果浆按质量比1：1—10：1比例混匀，用白砂糖 调整使其糖度为8—20％，制得料液1备用；
(6)将步骤2所得丙酸杆菌HX1202、乳酸杆菌HX2116和酿酒酵 母HX3201按照质量比为1—3：1—3：1—6的比例接种到步骤(5) 所得料液1，然后在30℃条件下密封发酵，当料液1不再产生气 泡时，将料液1至于4℃条件下静置密封保藏≥30d，熟化产生酵 香后，取出料液1，对其依次打浆、离心、过滤，收集滤液，即得 葛根-山药复合酵素原液，备用；
所述丙酸杆菌HX1202、乳酸杆菌HX2116和酿酒酵母HX3201三者 接种量总和为料液质量的1—10％；
(7)取金银花洗净沥干，将金银花、番茄果浆按质量比为金银花： 番茄果浆1—10:1的比例搅拌混匀，用白砂糖调整使其糖度为8 —20％，制得料液2备用；
(8)将步骤2所得丙酸杆菌HX1202、乳酸杆菌HX2116和酿酒酵 母HX3201按照质量比为1—3：1—3：1—6的比例接种到步骤7 所得料液2，然后在30℃条件下密封发酵，当料液2不再产生气 泡时，将料液2至于4℃条件下静置密封保藏≥30d，熟化产生酵 香后，取出料液2，对其依次打浆、离心、过滤，收集滤液，即得 金银花酵素原液，备用；
所述丙酸杆菌HX1202、乳酸杆菌HX2116和酿酒酵母HX3201三 者接种量总和为料液质量的1—10％；
(9)将葛根-山药复合酵素原液和金银花酵素原液按照体积比3： 1-1：3的比例混合后，得到混合酵素原液；将酵素原液与甜酒酿、 白砂糖、纯净水、柠檬酸钠和柠檬酸混合均匀后，0-15℃条件下 静置冷却沉淀24h以上，用孔径为0.2-0.45μm的微滤膜过滤 后即得复合酵素饮料；所述复合酵素饮料中各组分体积百分比如 下：酵素原液10％～30％、甜酒酿5～10％、白砂糖8％、柠檬酸0.3％、 柠檬酸钠0.3％，余下为纯净水。
作为优选项：所述的步骤(2)和步骤(3)中葛根浆和山药浆的 制备方法也可为：取新鲜葛根或山药洗净沥干，去皮洗净切碎， 蒸熟后冷却至常温，添加甜酒曲，搅匀后密封，在30℃温度下发 酵20～40h，味甜后终止发酵，后熟1d～5d后打浆制得葛根浆；所 述甜酒曲的添加量为葛根质量的0.1％～1.0％。
作为优选项：所述的步骤(3)和(4)中复合酶包括果胶酶和纤维酶， 所述果胶酶和纤维酶质量比为3：1—1：5。
作为优选项：所述的步骤(6)和(8)中发酵液离心是在转速＜ 5000r/min的低速下离心20min。
作为优选项：所述的步骤(6)和(8)中发酵液过滤时使用的微滤膜 孔径为0.2-0.45μm。
作为优选项：所述的步骤(6)和(8)中密封发酵过程中前6d每天 搅拌≥3次，之后每天搅拌≤1次；每次搅拌＜2min。
作为优选项：所述的步骤(9)中甜酒酿的制备方法如下：以葛根或 山药或红薯或板栗为原料，去皮洗净切碎，使其粒度≤1.5cm，蒸熟 后冷却至常温，添加甜酒曲，搅匀后密封，在30℃条件下发酵20～40h， 味甜后终止发酵，后熟≥7d后的发酵液为甜酒酿；所述甜酒曲的量 为原料质量的0.1％～1.0％。
作为优选项：所述的步骤(7)中金银花为新鲜金银花洗净沥干后， 在-40° -0°条件下低温保藏1-20天后解冻而得。
作为优选项：所述的步骤(7)中金银花可由金银花露蒸馏剩余物经 加工后替代；所述金银花露蒸馏剩余物的加工方法如下：将金银花露 蒸馏剩余物，用1～3层粗纱布或网布过滤至干，收集滤液，将滤液减 压浓缩得浓缩液，使其体积与金银花露加工原料金银花的体积质量比 为1～3L/KG；向浓缩液中加入纯度80％以上的食用酒精使浓缩液中酒 精浓度达到50％～80％，10℃以下冷藏1h以上，然后过滤，滤液用氧 化铝脱色，所述氧化铝与滤液质量比为0.2～1:1；脱色后再次过滤， 滤液减压回收酒精后即得料液。
作为优选项：所述的葛根可用板栗代替。
本发明的有益效果：
(1)三种特定菌种进行复合发酵，形成了富含超氧化物歧化酶、 乳酸、醋酸和乙醇等代谢产物的酵素产品，不仅改善了发酵基质原有 的风味，更通过微生物发酵强化了产品的功能保健作用，如抗氧化、 降脂作用等；
(2)产品加工技术均在40℃以下进行操作处理，充分保留了发 酵基质及发酵过程产生的各种营养活性成分；
(3)本发明能够充分利用富余的金银花、山药、葛根、红薯、 板栗、藜蒿等特色资源，利用现代生物发酵技术开发了集营养保健一 体的酵素健康产品，延伸了地方特色资源的产业链，附加值高，实现 了特色资源的精深加工和综合利用；
(4)本发明方法材料易得，技术简单可行，投入成本低，绿 色无污染，所得酵素具有很好的抗氧化功效，安全环保；有利于产业 化。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明做进一步说明。
原料选取：葛根选取地为黄冈市，山药选取黄冈市武穴佛手山药，板 栗选取黄冈市罗田板栗
实施例1
(1)番茄洗净沥干，粉碎打浆后向番茄浆液中加入蒸馏水和果 胶酶，混匀后在30℃静置30min，得到番茄果浆；所述蒸馏水的质量 为番茄浆液质量的40％，果胶酶的质量为番茄浆液质量的2.5％；
(2)将金银花露加工剩余物浆液、番茄果浆按质量比1:1放入 灭菌的纤巧壶，搅拌混匀，用白砂糖调整糖度到12％，制得料液备用； 上述金银花露加工剩余物浆液的制备方法如下：将金银花露蒸馏剩余 物，用1～3层粗纱布或网布过滤至干，收集滤液，将滤液减压浓缩得 浓缩液，使其体积与金银花露加工原料金银花的体积质量比为 1～3L/KG；向浓缩液中加入纯度80％以上的食用酒精使浓缩液中酒精 浓度达到50％～80％，10℃以下冷藏1h以上，然后过滤，滤液用氧化 铝脱色，所述氧化铝与滤液质量比为0.2～1:1；脱色后再次过滤，滤 液减压回收酒精后即得料液。
将丙酸杆菌HX1202和乳酸杆菌HX2116培养至OD值0.65，将酿 酒酵母HX3201培养至3×106个/mL，按照1:1:2的比例接种到料液， 接种量为料液质量的6％。然后在30℃密封发酵，前6d每天搅拌3次， 之后每天搅拌1次，每次约1min，不再产生气泡时即结束发酵。在4℃ 静置密封保藏30d产生酵香，取出发酵液在150r/min转速下离心20 min，离心液0.25μm微滤膜过滤，滤液即为金银花酵素原液，测定 其SOD活性为103.16U/mL。
(3)果胶酶和纤维素酶按质量比1:3组成复合酶。
鲜板栗去壳，洗净沥干，捣碎成泥，按10～40％添加蒸馏水，加 入复合酶1～8％，混匀后在15～45℃静置20～100min，得到板栗浆；
山药洗净沥干，削皮切片，捣碎成泥，按20％添加蒸馏水，加入 复合酶3％，混匀后在30℃静置30min，得到山药浆；
板栗浆、山药浆按质量比2:1配伍成复合浆；
将复合浆、番茄果浆按质量比1:1放入灭菌的纤巧壶，搅拌混匀， 用白砂糖调整糖度到12％，制得料液备用；
将丙酸杆菌HX1202和乳酸杆菌HX2116培养至OD值0.65，将酿 酒酵母HX3201培养至3×106个/mL，按照1:1:2的比例接种到料液， 接种量为料液质量的6％。然后在30℃密封发酵，前6d每天搅拌3次， 之后每天搅拌1次，每次约1min，不再产生气泡时即结束发酵；在4℃ 静置密封保藏30d产生酵香，取出发酵液在150r/min转速下离心20 min，离心液0.25μm微滤膜过滤，滤液即为板栗-山药复合酵素原 液，测定其SOD活性为112.58U/mL。
(4)金银花酵素原液、板栗-山药复合酵素原液按照体积比2:1 混合配伍，即金银花酵素原液40％、板栗-山药复合酵素原液20％，加 入甜酒酿5％、白砂糖8％、柠檬酸0.3％、柠檬酸钠0.3％，余下为纯净 水，混合均匀后，0-15℃条件下静置冷却沉淀24h以上，用孔径为 0.2-0.45μm的微滤膜过滤后即得复合酵素饮料；
上述的步骤(4)中甜酒酿的制备方法如下：以葛根或山药或红 薯或板栗为原料，去皮洗净切碎，使其粒度≤1.5cm，蒸熟后冷却至 常温，添加甜酒曲，搅匀后密封，在30℃条件下发酵20～40h，味甜 后终止发酵，后熟≥7d后的发酵液为甜酒酿；所述甜酒曲的量为原料质量的0.2％。
本实施例中：(1)金银花酵素原液抗氧化活性
利用总抗氧化试剂盒、羟基自由基试剂盒、超氧阴离子试剂盒评 价实施例1制备的金银花酵素原液抗氧化活性，维生素C为对照，结 果发现1mL金银花酵素原液总抗氧化能力相当于130.65mgVC，羟自 由基清除能力相当于531.24mgVC，超氧阴离子清除能力相当于1.5mgVC，表现出较强的抗氧化活性。
(2)板栗-山药复合酵素原液抗氧化活性
利用总抗氧化试剂盒、羟基自由基试剂盒、超氧阴离子试剂盒评 价实施例3制备的板栗-山药复合酵素的抗氧化活性，维生素C为对 照，结果发现1mL板栗-山药复合酵素总抗氧化能力相当于 197.2mgVC，羟自由基清除能力相当于496.18mgVC，超氧阴离子清除 能力相当于1.9mgVC，表现出较强的抗氧化活性。
上述实施例中板栗可以用葛根替代，不影响本专利的实施，但抗 氧化活性方面利用总抗氧化试剂盒、羟基自由基试剂盒、超氧阴离子 试剂盒评价实施例3制备的葛根-山药复合酵素的抗氧化活性，维生 素C为对照，结果发现1mL葛根-山药复合酵素总抗氧化能力相当于 233.1mgVC，羟自由基清除能力相当于486.62mgVC，超氧阴离子清除 能力相当于1.72mgVC，表现出较强的抗氧化活性。
(3)酵素复合饮料
微甜，色泽淡黄，有金银花清香。
实施例2
(1)番茄洗净沥干，粉碎打浆后向番茄浆液中加入蒸馏水和果 胶酶，混匀后在15℃条件下静置100min，得到番茄果浆；所述蒸馏 水的质量为番茄浆液质量的20％，果胶酶的质量为番茄浆液质量的 1％；
(2)用果胶酶和纤维素酶按质量比3:1组成复合酶；
取新鲜葛根洗净沥干，去皮切片，捣碎成泥，按葛根泥质量的 10％添加蒸馏水，按葛根泥质量的1％加入复合酶，混匀后在20℃条件 下静置80min，得到葛根浆；
取山药洗净沥干，削皮切片，捣碎成泥，按山药泥质量的20％添 加蒸馏水，按山药泥质量的1％加入复合酶，混匀后在20℃条件下静 置80min，得到山药浆；
将葛根浆和山药浆按质量比6：1配伍成复合浆，将复合浆和番 茄果浆按质量比5：1放入灭菌的纤巧壶，搅拌混匀，用白砂糖调整 糖度为8％，制得料液备用；
将丙酸杆菌HX1202和乳酸杆菌HX2116培养至OD值0.8，将酿 酒酵母HX3201培养至106个/mL，丙酸杆菌HX1202、乳酸杆菌HX2116 和将酿酒酵母HX3201按照质量比为1:1:6的比例接种到料液，接种 量为料液质量的1％，然后在30℃条件下密封发酵，前6d每天搅拌3次，之后每天搅拌1次，每次约1min，不再产生气泡时即结束发酵， 调整温度到4℃静置密封保藏30d产生酵香，取出发酵液在300r/min 转速下离心20min，离心液用0.3μm微滤膜过滤，滤液即为葛根- 山药复合酵素原液，测定其SOD活性为73.23U/mL；
(3)取金银花洗净沥干，将金银花、番茄果浆按质量比为金银 花：番茄果浆1—1的比例搅拌混匀，用白砂糖调整使其糖度为8—20％，制得料液备用；将丙酸杆菌HX1202和乳酸杆菌HX2116培养至 OD值0.8，将酿酒酵母HX3201培养至106个/mL，丙酸杆菌HX1202、 乳酸杆菌HX2116和将酿酒酵母HX3201按照质量比为1:1:5的比例接 种到料液，接种量为料液质量的6％，然后在30℃条件下密封发酵， 前6d每天搅拌3次，之后每天搅拌1次，每次约1min，不再产生气 泡时即结束发酵，调整温度到4℃静置密封保藏30d产生酵香，然后 加入其质量的10％的蒸馏水稀释打浆，浆液在150r/min转速下离心 20min，离心液用0.25μm微滤膜过滤，滤液即为金银花酵素原液；
(4)金银花酵素原液、板栗-山药复合酵素原液按照体积比3:1 混合配伍，即金银花酵素原液45％、板栗-山药复合酵素原液15％，加 入白砂糖8％、柠檬酸0.3％、柠檬酸钠0.3％，余下为纯净水，混匀， 0-15℃条件下静置冷却沉淀24h以上，用孔径为0.2-0.45μm的微 滤膜过滤后即得复合酵素饮料；
上述的步骤(4)中甜酒酿的制备方法如下：以葛根或山药或红 薯或板栗为原料，去皮洗净切碎，使其粒度≤1.5cm，蒸熟后冷却至 常温，添加甜酒曲，搅匀后密封，在30℃条件下发酵20～40h，味甜 后终止发酵，后熟≥7d后的发酵液为甜酒酿；所述甜酒曲的量为原料质量的1.0％。
实施例3
(1)番茄洗净沥干，粉碎打浆后向番茄浆液中加入蒸馏水和果 胶酶，混匀后在45℃条件下静置20min，得到番茄果浆；所述蒸馏水 的质量为番茄浆液质量的60％，果胶酶的质量为番茄浆液质量的8％；
(2)用果胶酶和纤维素酶按质量比1:5组成复合酶；
取新鲜葛根洗净沥干，去皮切片，捣碎成泥，按葛根泥质量的 40％添加蒸馏水，按葛根泥质量的8％加入复合酶，混匀后在45℃条件 下静置20min，得到葛根浆；
取山药洗净沥干，削皮切片，捣碎成泥，按山药泥质量的40％添 加蒸馏水，按山药泥质量的8％加入复合酶，混匀后在45℃条件下静 置25min，得到山药浆；
将葛根浆和山药浆按质量比1：6配伍成复合浆，将复合浆和番 茄果浆按质量比10：1放入灭菌的纤巧壶，搅拌混匀，用白砂糖调整 糖度为20％，制得料液备用；
将丙酸杆菌HX1202和乳酸杆菌HX2116培养至OD值0.75，将酿 酒酵母HX3201培养至107个/mL，丙酸杆菌HX1202、乳酸杆菌HX2116 和将酿酒酵母HX3201按照质量比为1:1:6的比例接种到料液，接种 量为料液质量的10％，然后在30℃条件下密封发酵，前6d每天搅拌 3次，之后每天搅拌1次，每次约1min，不再产生气泡时即结束发酵， 调整温度到4℃静置密封保藏30d产生酵香，取出发酵液在600r/min 转速下离心20min，离心液用0.45μm微滤膜过滤，滤液即为葛根- 山药复合酵素原液，测定其SOD活性为52.07U/mL；
(3)取新鲜金银花洗净沥干后，在-40° -0°条件下低温保藏 1-20天后解冻而得，使用前将其粉碎使其长度不大于1.5c，将金银 花、番茄果浆按质量比为金银花：番茄果浆1—1的比例搅拌混匀， 用白砂糖调整使其糖度为15％，制得料液备用；将丙酸杆菌HX1202和乳酸杆菌HX2116培养至OD值0.75，将酿酒酵母HX3201培养至107个/mL，L，丙酸杆菌HX1202、乳酸杆菌HX2116和将酿酒酵母HX3201 按照质量比为1:1:5的比例接种到料液，接种量为料液质量的6％， 然后在30℃条件下密封发酵，前6d每天搅拌3次，之后每天搅拌1次，每次约1min，不再产生气泡时即结束发酵，调整温度到4℃静置 密封保藏30d产生酵香，然后加入其质量的10％的蒸馏水稀释打浆， 浆液在150r/min转速下离心20min，离心液用0.25μm微滤膜过 滤，滤液即为金银花酵素原液；
(4)金银花酵素原液、板栗-山药复合酵素原液按照体积比3:1 混合配伍，即金银花酵素原液30％、板栗-山药复合酵素原液10％，加 入白砂糖8％、柠檬酸0.3％、柠檬酸钠0.3％，余下为纯净水，混匀后 0-15℃条件下静置冷却沉淀24h以上，用孔径为0.2-0.45μm的微 滤膜过滤后即得复合酵素饮料；
上述的步骤(4)中甜酒酿的制备方法如下：以葛根或山药或红 薯或板栗为原料，去皮洗净切碎，使其粒度≤1.5cm，蒸熟后冷却至 常温，添加甜酒曲，搅匀后密封，在30℃条件下发酵20～40h，味甜 后终止发酵，后熟≥7d后的发酵液为甜酒酿；所述甜酒曲的量为原料质量的0.5％。
实施例4
(1)番茄洗净沥干，粉碎打浆后向番茄浆液中加入蒸馏水和果 胶酶，混匀后在40℃条件下静置30min，得到番茄果浆；所述蒸馏水 的质量为番茄浆液质量的60％，果胶酶的质量为番茄浆液质量的7％；
(2)取新鲜葛根洗净沥干，去皮洗净切碎，蒸熟后冷却至常温， 添加甜酒曲，搅匀后密封，在30℃温度下发酵20～40h，味甜后终止 发酵，后熟1d～5d后打浆制得葛根浆；所述甜酒曲的添加量为葛根 质量的0.2％。
取新鲜山药洗净沥干，去皮洗净切碎，蒸熟后冷却至常温，添加 甜酒曲，搅匀后密封，在30℃温度下发酵20～40h，味甜后终止发酵， 后熟1d～5d后打浆制得山药浆；所述甜酒曲的添加量为葛根质量的 1.0％。
将葛根浆和山药浆按质量比1：6配伍成复合浆，将复合浆和番 茄果浆按质量比10：1放入灭菌的纤巧壶，搅拌混匀，用白砂糖调整 糖度为20％，制得料液备用；
将丙酸杆菌HX1202和乳酸杆菌HX2116培养至OD值0.75，将酿 酒酵母HX3201培养至107个/mL，丙酸杆菌HX1202、乳酸杆菌HX2116 和将酿酒酵母HX3201按照质量比为1:1:6的比例接种到料液，接种 量为料液质量的10％，然后在30℃条件下密封发酵，前6d每天搅拌 3次，之后每天搅拌1次，每次约1min，不再产生气泡时即结束发酵， 调整温度到4℃静置密封保藏30d产生酵香，取出发酵液在600r/min 转速下离心20min，离心液用0.45μm微滤膜过滤，滤液即为葛根- 山药复合酵素原液，测定其SOD活性为50.93U/mL；
(3)取金银花露蒸馏剩余物，用1～3层粗纱布或网布过滤至干， 收集滤液，将滤液减压浓缩得浓缩液，使其体积与金银花露加工原料 金银花的体积质量比为1～3L/KG；向浓缩液中加入纯度80％以上的食 用酒精使浓缩液中酒精浓度达到50％～80％，10℃以下冷藏1h以上， 然后过滤，滤液用氧化铝脱色，所述氧化铝与滤液质量比为0.2～1:1； 脱色后再次过滤，滤液减压回收酒精后即得金银花加工料液；
将金银花加工料液、番茄果浆按质量比为金银花：番茄果浆1— 1的比例搅拌混匀，用白砂糖调整使其糖度为12％，制得料液备用； 将丙酸杆菌HX1202和乳酸杆菌HX2116培养至OD值0.75，将酿酒酵 母HX3201培养至107个/mL，L，丙酸杆菌HX1202、乳酸杆菌HX2116 和将酿酒酵母HX3201按照质量比为1:1:5的比例接种到料液，接种 量为料液质量的6％，然后在30℃条件下密封发酵，前6d每天搅拌3 次，之后每天搅拌1次，每次约1min，不再产生气泡时即结束发酵， 调整温度到4℃静置密封保藏30d产生酵香，然后加入其质量的10％ 的蒸馏水稀释打浆，浆液在150r/min转速下离心20min，离心液用0.25μm微滤膜过滤，滤液即为金银花酵素原液；
(4)金银花酵素原液、板栗-山药复合酵素原液按照体积比1:1混合 配伍，即金银花酵素原液20％、板栗-山药复合酵素原液20％，加入白 砂糖8％、柠檬酸0.3％、柠檬酸钠0.3％，余下为纯净水，混匀，0-15℃ 条件下静置冷却沉淀24h以上，用孔径为0.2-0.45μm的微滤膜过 滤后即得复合酵素饮料；
上述的步骤(4)中甜酒酿的制备方法如下：以葛根或山药或红薯 或板栗为原料，去皮洗净切碎，使其粒度≤1.5cm，蒸熟后冷却至常 温，添加甜酒曲，搅匀后密封，在30℃条件下发酵20～40h，味甜后 终止发酵，后熟≥7d后的发酵液为甜酒酿；所述甜酒曲的量为原料 质量的0.1％。
上述实施例中酵母培养基配方：1％Yeast Extract(酵母膏)， 2％Peptone(蛋白胨)，2％Dextrose(glucose)(葡萄糖)，培养条 件；pH6.8—7.2；细菌培养基配方：蛋白胨1％，酵母提取物0.5％， NaCl 1％，培养条件pH7.0-7.4。
上述培养基和培养方法均属于现有技术，不做其他说明。
应当理解的是，本说明书未详细阐述的部分均属于现有技术。
应当理解的是，上述针对较佳实施例的描述较为详细，并不能因 此而认为是对本发明专利保护范围的限制，本领域的普通技术人员在 本发明的启示下，在不脱离本发明权利要求所保护的范围情况下，还 可以做出替换或变形，均落入本发明的保护范围之内，本发明的请求 保护范围应以所附权利要求为准。
Claims (10)
1.一种具有抗氧化活性的复合酵素饮料的制备方法，其特征在于：
包括以下步骤：
(1)番茄洗净沥干，粉碎打浆后向番茄浆液中加入蒸馏水和果胶酶，混匀后在15—45℃条件下静置20—100min，得到番茄果浆；所述蒸馏水的质量为番茄浆液质量的20—60％，果胶酶的质量为番茄浆液质量的1—8％；
(2)分别将丙酸杆菌HX1202和乳酸杆菌HX2116培养至OD值0.6—0.8，将酿酒酵母HX3201培养至106—107个/mL；备用；
(3)取新鲜葛根洗净沥干，去皮切片，捣碎成泥，向葛根泥中加入蒸馏水和复合酶，混匀后在15—45℃条件下静置20—100min，得到葛根浆；所述蒸馏水的质量为葛根泥质量的10—40％，复合酶的质量为葛根泥质量的1—8％；
(4)取山药洗净沥干，削皮切片，捣碎成泥，向山药泥中加入蒸馏水和复合酶，混匀后在15—45℃条件下静置20—100min，得到山药浆；所述蒸馏水的质量为山药泥质量的10—40％，复合酶的质量为山药泥质量的1—8％；
(5)将葛根浆和山药浆按质量比6：1—1:6混合配伍成复合浆，将复合浆和番茄果浆按质量比1：1—10：1比例混匀，用白砂糖调整使其糖度为8—20％，制得料液1备用；
(6)将步骤2所得丙酸杆菌HX1202、乳酸杆菌HX2116和酿酒酵母HX3201按照质量比为1—3：1—3：1—6的比例接种到步骤(5)所得料液1，然后在30℃条件下密封发酵，当料液1不再产生气泡时，将料液1至于4℃条件下静置密封保藏≥30d，熟化产生酵香后，取出料液1，对其依次打浆、离心、过滤，收集滤液，即得葛根-山药复合酵素原液，备用；
所述丙酸杆菌HX1202、乳酸杆菌HX2116和酿酒酵母HX3201三者接种量总和为料液质量的1—10％；
(7)取金银花洗净沥干，将金银花、番茄果浆按质量比为金银花：番茄果浆1—10:1的比例搅拌混匀，用白砂糖调整使其糖度为8—20％，制得料液2备用；
(8)将步骤2所得丙酸杆菌HX1202、乳酸杆菌HX2116和酿酒酵母HX3201按照质量比为1—3：1—3：1—6的比例接种到步骤7所得料液2，然后在30℃条件下密封发酵，当料液2不再产生气泡时，将料液2至于4℃条件下静置密封保藏≥30d，熟化产生酵香后，取出料液2，对其依次打浆、离心、过滤，收集滤液，即得金银花酵素原液，备用；
所述丙酸杆菌HX1202、乳酸杆菌HX2116和酿酒酵母HX3201三者接种量总和为料液质量的1—10％；
(9)将葛根-山药复合酵素原液和金银花酵素原液按照体积比3：1-1：3的比例混合后，得到混合酵素原液；将酵素原液与甜酒酿、白砂糖、纯净水、柠檬酸钠和柠檬酸混合均匀后，0-15℃条件下静置冷却沉淀24h以上，用孔径为0.2-0.45μm的微滤膜过滤后即得复合酵素饮料；所述复合酵素饮料中各组分体积百分比如下：酵素原液10％～60％、甜酒酿5～10％、白砂糖8％、柠檬酸0.3％、柠檬酸钠0.3％，余下为纯净水。
2.如权利要求1所述的具有抗氧化活性的复合酵素饮料的制备方法，其特征在于：所述的步骤(2)和步骤(3)中葛根浆和山药浆的制备方法也可为：取新鲜葛根或山药洗净沥干，去皮洗净切碎，蒸熟后冷却至常温，添加甜酒曲，搅匀后密封，在30℃温度下发酵20～40h，味甜后终止发酵，后熟1d～5d后打浆制得葛根浆或山药浆；所述甜酒曲的添加量为葛根或山药质量的0.1％～1.0％。
3.如权利要求1所述的具有抗氧化活性的复合酵素饮料的制备方法，其特征在于：所述的步骤(3)和(4)中复合酶包括果胶酶和纤维酶，所述果胶酶和纤维酶质量比为3：1—1：5。
4.如权利要求1所述的具有抗氧化活性的复合酵素饮料的制备方法，其特征在于：所述的步骤(6)和(8)中发酵液离心是在转速＜5000r/min的低速下离心20min。
5.如权利要求1所述的具有抗氧化活性的复合酵素饮料的制备方法，其特征在于：所述的步骤(6)和(8)中发酵液过滤时使用的微滤膜孔径为0.2-0.45μm。
6.如权利要求1所述的具有抗氧化活性的复合酵素饮料的制备方法，其特征在于：所述的步骤(6)和(8)中密封发酵过程中前6d每天搅拌≥3次，之后每天搅拌≤1次；每次搅拌＜2min。
7.如权利要求1所述的具有抗氧化活性的复合酵素饮料的制备方法，其特征在于：所述的步骤(9)中甜酒酿的制备方法如下：以葛根或山药或红薯或板栗为原料，去皮洗净切碎，使其粒度≤1.5cm，蒸熟后冷却至常温，添加甜酒曲，搅匀后密封，在30℃条件下发酵20～40h，味甜后终止发酵，后熟≥7d后的发酵液为甜酒酿；所述甜酒曲的量为原料质量的0.1％～1.0％。
8.如权利要求1所述的具有抗氧化活性的复合酵素饮料的制备方法，其特征在于：所述的步骤(7)中金银花为新鲜金银花洗净沥干后，在-40°-0°条件下低温保藏1-20天后解冻而得。
9.如权利要求1所述的具有抗氧化活性的复合酵素饮料的制备方法，其特征在于：所述的步骤(7)中金银花可由金银花露蒸馏剩余物经加工后替代；所述金银花露蒸馏剩余物的加工方法如下：将金银花露蒸馏剩余物，用1～3层粗纱布或网布过滤至干，收集滤液，将滤液减压浓缩得浓缩液，使其体积与金银花露加工原料金银花的体积质量比为1～3L/KG；向浓缩液中加入纯度80％以上的食用酒精使浓缩液中酒精浓度达到50％～80％，10℃以下冷藏1h以上，然后过滤，滤液用氧化铝脱色，所述氧化铝与滤液质量比为0.2～1:1；脱色后再次过滤，滤液减压回收酒精后即得。
10.如权利要求1-9任一所述的具有抗氧化活性的复合酵素饮料的制备方法，其特征在于：所述的葛根可用板栗代替。
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