CN107708446A

CN107708446A - 用于增强动物体内神经形成的组合物和方法

Info

Publication number: CN107708446A
Application number: CN201680034282.4A
Authority: CN
Inventors: 潘元龙
Original assignee: Societe dAssistance Technique pour Produits Nestle SA
Current assignee: Societe des Produits Nestle SA
Priority date: 2015-06-22
Filing date: 2016-06-21
Publication date: 2018-02-16
Also published as: EP3310349A1; JP6820868B2; AU2016281870A1; CA2987033A1; RU2735834C2; ES2860427T3; US20160367509A1; RU2018101989A3; MX2017015973A; RU2018101989A; WO2016207794A1; MX379147B; BR112017025664A2; JP2018528160A; EP3310349B1; AU2016281870B2; CA2987033C

Abstract

本发明提供了用于增强动物体内神经形成的方法。在一个实施方案中，用于增强动物体内神经形成的方法可包括，识别存在以下状况的动物：患有认知减退；处于认知损害的风险；被诊断为患有影响其认知能力的疾病、障碍、或其他病症；或处于感染影响其认知能力的疾病、障碍、或其他病症的风险，并且向所述动物施用包含不饱和脂肪酸(UFA)、一氧化氮释放化合物(NORC)、B族维生素和抗氧化剂的组合物，其中所述组合物以对增强所述动物体内神经形成有效的量进行施用。

Description

用于增强动物体内神经形成的组合物和方法

相关领域的描述

成年哺乳动物脑部中侧脑室的脑室下区(SVZ)和海马体齿状回的颗粒下区(SGZ)这两个部位的神经形成，在整个生命过程中不断发生并随着衰老而下降(Cell 132:645-660,2008)。神经干细胞(NSC)可分化为神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞(Cell 132:645-660,2008)。在成年哺乳动物中，已知齿状回的SGZ内的NSC引起迁移到内部颗粒细胞层中的未成熟的神经元分化成海马体中的齿状颗粒细胞(Neuron 70:687-702,2011)。已经提交了多个专利申请用来促进SVZ和SGZ的神经形成。美国专利8,383,626提及了使用一氧化氮供体用于在SVZ和SGZ诱导神经形成的技术。EP 2314289 A1提供了经由GABA试剂刺激或增加神经形成来治疗中枢和外周神经系统的疾病和病症的组合物和方法。EP1940389 A2描述了经由抑制环核苷酸磷酸二酯酶刺激或增加神经形成来治疗中枢和外周神经系统的疾病和病症的组合物和方法。EP 2258358 A2提供了经由乙酰胆碱酯酶抑制剂刺激或增加神经形成来治疗中枢和外周神经系统的疾病和病症的组合物和方法。WO 2010111136 A2提供了经由肾素抑制剂刺激或增加神经形成来治疗中枢和外周神经系统的疾病和病症的组合物和方法。

因此，已经确定在成年体的海马体中终生通过神经干细胞/祖细胞(NSC)生成新的神经元。神经形成是一种对外部刺激有响应的再生过程，涉及学习、记忆和情绪调节。因此，神经形成被认为是神经再生的一种重要形式，使生物体能够在一生中适应环境的变化。

海马体神经形成率受生理或病理影响，诸如体力活动、环境丰富度、压力、心里障碍、衰老和神经退行性疾病而发生显著改变。事实上，在衰老过程中，存在与年龄相关的成年体神经形成下降。这种下降主要与增殖减少相关，还与衰老的大脑中刺激增殖的减少相关。天然或受刺激的海马体神经形成在抗抑郁药的临床效应中起重要作用，并且神经形成减少可能涉及与抑郁症相关的脑区(包括海马体)萎缩。在阿尔茨海默病(AD)中，还有神经形成减少的证据，阿尔茨海默病伴随着神经元损失的特征。

因此，仍然需要增强动物体内神经形成的组合物和方法。

发明内容

因此，本发明的一个目标是提供可用于增强动物体内神经形成的方法。

在一个实施方案中，用于增强动物体内神经形成的方法可包括向动物施用包含不饱和脂肪酸(UFA)、一氧化氮释放化合物(NORC)、B族维生素和抗氧化剂的组合物，其中该组合物以对增强所述动物体内神经形成有效的量进行施用。

具体实施方式

定义

本文中可使用以下缩写：AA，花生四烯酸；ALA，α-亚麻酸；DHA，二十二碳六烯酸；DPA，二十二碳五烯酸；EPA，二十碳五烯酸；LA，亚油酸；UFA，不饱和脂肪酸；LCPUFA，长链多不饱和脂肪酸；NO，一氧化氮；NORC，一氧化氮释放化合物；以及L-Arg，L-精氨酸。

术语“动物”是指可受益于本发明的一种或多种方法的任何动物，包括人类、鸟类、牛类、犬类、马类、猫科、山羊类、狼类、鼠类、绵羊类和猪类动物。在一个实施方案中，术语“动物”是指期望增强其神经形成的动物。

术语“伴侣动物”是指任何驯养的动物，包括但不限于猫、狗、兔、豚鼠、雪貂、仓鼠、小鼠、沙鼠、马、牛、山羊、绵羊、驴、猪等。在一个示例中，伴侣动物可以是狗或猫。

术语“B族维生素”是指任何B族维生素，包括其衍生物、酸形式和盐。这类B族维生素可包括但不限于维生素B1(硫胺素)、维生素B2(核黄素)、维生素B3(烟酸、烟碱酸、烟酰胺)、维生素B5(泛酸)、维生素B6(吡哆醇、吡哆醛、吡哆胺)、维生素B7(生物素)、维生素B8(肌醇)、维生素B9(叶酸)、维生素B12(钴胺素化合物，包括甲基钴胺素、羟钴胺素和氰钴胺素)。

术语“不饱和脂肪酸”或“UFA”是指多不饱和脂肪酸或单不饱和脂肪酸，包括具有至少一个双键的一元羧酸。UFA包括(n-6)脂肪酸，诸如亚油酸(LA)和花生四烯酸(AA)以及(n-3)脂肪酸，诸如二十碳五烯酸(EPA)、α-亚麻酸(ALA)、二十二碳五烯酸(DPA)和二十二碳六烯酸(DHA)。UFA还包括肉豆蔻脑酸、棕榈油酸、油酸、亚油酸、顺异油酸和芥酸。

术语“鱼油”是指从海洋动物获得的、相对富含UFA的粗制或纯化的脂肪或油性提取物，所述海洋动物诸如冷水性鱼，但不限于鲑鱼、金枪鱼、鲭鱼、鲱鱼、海鲈鱼、条纹鲈鱼、比目鱼、鲶鱼和沙丁鱼、以及鲨鱼、虾和蛤，或这些动物的任何组合。鱼油通常是由配料供应商使用的专门术语，涵盖不同UFA含量和纯度的产品的范围。

术语“一氧化氮释放化合物”或“NORC”是指引起或可能导致在动物体内释放一氧化氮的任何一种或多种化合物。此类化合物的示例包括L-精氨酸、含L-精氨酸的肽和蛋白质、以及它们的已知或确定释放一氧化氮的类似物或衍生物诸如精氨酸α-酮戊二酸盐、GEA3175、硝普钠、三硝酸甘油酯、S-亚硝基-N-乙酰青霉胺、硝酸甘油、S-NO-谷胱甘肽、NO缀合的非甾体抗炎药(例如，NO-萘普生、NO-阿司匹林、NO-布洛芬、NO-双氯芬酸、NO-氟比洛芬和NO-酮洛芬)、NO释放化合物-7、NO释放化合物-5、NO释放化合物-12、NO释放化合物-18、二醇二氮烯鎓(diazenium diolate)及其衍生物、二乙胺NONOate(diethylamine NONOate)，以及导致在动物体内引起释放一氧化氮，尤其是“游离”NO的任何有机或无机化合物、生物分子或它们的类似物、同系物、缀合物或衍生物。NORC也被定义为包括补充剂，该补充剂在体内代谢时可转化为一氧化氮释放化合物，例如瓜氨酸和鸟氨酸。

术语“每日推荐需求量”或“每日推荐允许量”或“RDA”是指本领域内的认可机构或标准推荐的维生素或其他营养物质的日总量，到2015年1月1日为止，所述认可机构或标准包括但不限于国立卫生研究院(NIH)、国家科学院医学研究所(IOM)、膳食营养素参考摄入量(DRI)营养物质报告、欧洲宠物食品工业协会(FEDIAF)和美国饲料管理官员协会(AAFCO)。

术语“年老”是指动物年岁已高，已超过其特定物种和/或物种中品种的平均寿命的50％。例如，如果给定品种的狗的平均寿命为10年，那么该品种中大于5岁的狗将被视为“年老”，以用于本文的目的。“健康年老的动物”是指没有患已知疾病(特别是与认知丧失损害相关的疾病，诸如可能混淆结果)的动物。在使用健康年老的动物的研究中，队列动物也是健康年老的动物，但具有适合的认知性、运动性或行为性功能的其他健康动物可能也适合用作对比样本。如果使用具有特定疾病诊断结论或者认知、运动或行为限制的动物，则队列动物应包括得到了类似诊断的动物，或者具有类似的疾病征候或者认知、运动或行为限制的动物。

术语“长期施用”是指反复施用或食用超过一个月的时期。特定实施方案可使用长于两个月、三个月或四个月的时期。此外，可使用包括长于5个月、6个月、7个月、8个月、9个月或10个月的更长时期。也可使用超过11个月或1年的时期。在本发明中还可包括超过1年、2年、3年或更多年的更长期的使用。对于某些年老的动物，这些动物将在其余生中规律地持续食用。有时这称为“延长”时期的食用。

术语“规律地”是指至少每月一次定量给料组合物或食用组合物，并且在某些方面，每周一次定量给料。在某些实施方案中可使用更频繁的定量给料或食用，诸如每周两次或三次或七次。在其他实施方案中，包括包含至少每日一次食用的方案。本领域的技术人员将认识到，化合物或该化合物的某些代谢物的血液水平或者食用该化合物后产生的血液水平可能是用于评估或确定定量给料频率的有用工具。无论是否在本文中明确例示，允许将测量的化合物的期望血液水平维持在可接受范围内的频率可用于本文。本领域的技术人员将认识到，定量给料频率将随被食用或施用的组合物而变，并且一些组合物可需要更高或更低频率的施用，以维持所测量的化合物的期望血液水平。

术语“约”包括在规定数字5％的范围内的所有值。在一个实施方案中，“约”包括在2％的范围内的所有值，并且在一个方面中，在1％内。

当提及动物时，术语“个体”是指任何物种或种类的个体动物。

在全文中，本文使用的范围都是缩略范围，以免必须详细陈列和描述范围内的每个数值。可选择范围内的任何适当的值，适当时，可选择上限值、下限值或该范围的端值。

如本文所用，使用“包括”语言或其他开放式语言的实施方案、方面和实施例可用“基本上由…组成”和“由…组成”实施方案代替。

如本文及所附权利要求所用，除非上下文另外明确规定，否则词语的单数形式包括复数，反之亦然。因此，提及“一个”、“一种”和“该”通常包括相应术语的复数形式。例如，提及“一种狗”或“一种方法”包括提及多种此类“狗”或“方法”。例如，本文中提及“一种不饱和脂肪酸”包括多种此类不饱和脂肪酸，而提及“多种B族维生素”包括一种B族维生素。与此类似，词语“包括”、“包含”和“含有”都作包含性而非排他性地解释。同样地，术语“包括”、“包含”和“或”都应当视为包含性的，除非上下文明确禁止这一解释。本文使用的术语“示例”(尤其后跟一列术语时)，仅用于举例说明，而不应当被视为排他性的或全面的。

在此公开的方法、组合物和其他进展不限于本文所述的具体方法、方案及试剂，因为正如本领域的技术人员将认识到的，这些具体方法、方案及试剂可改变。此外，本文所用的术语只出于描述具体实施方案的目的，并非旨在限制、也不会限制本文公开或受权利要求书保护的范围。

除非另外定义，否则本文使用的全部科技术语、专门术语及首字母缩略词都具有本发明所属领域或使用这些术语的领域的普通技术人员所通常理解的含义。虽然在本发明的实施中可使用与本文所述那些组合物、方法、制品或者其他手段或材料类似或等效的任何组合物、方法、制品或者其他手段或材料，但本文描述的是某些组合物、方法、制品或者其他手段或材料。

本文中引述或提及的所有专利、专利申请、出版物、技术和/或学术论文以及其他参考文献都在法律允许的范围内全文以引用方式并入本文。对这些参考文献的论述仅旨在总结其中作出的论断。我们并不承认任何这些专利、专利申请、出版物或参考文献或它们的任何一部分是相关的、实质性的或为现有技术。特别保留质疑这些专利、专利申请、出版物及其它参考文献是相关的、实质性的或为现有技术的任何断言的准确性和相关性的权利。说明书末尾列出了在说明书内未完整引用的出版物的完整引用信息。

本发明

本发明人已经发现某些组合物可以增强动物体内神经形成。在一个实施方案中，用于增强动物体内神经形成的方法可包括向动物施用包含不饱和脂肪酸(UFA)、一氧化氮释放化合物(NORC)、B族维生素和抗氧化剂的组合物，其中该组合物以对增强所述动物体内神经形成有效的量进行施用。在一个实施方案中，抗氧化剂和B族维生素在RDA值以上施用。在一个方面，抗氧化剂和B族维生素可以在至少1.2倍RDA值下施用。

在一个方面，神经形成可以发生在但不限于动物中的海马体。在一个方面，神经形成可发生在海马体的CA1区域。与相同的生命阶段的能与之相比的动物相比，这种神经形成可以被测量为神经元的增加。在一个方面，本发明的方法可提供神经元的至少10％的增加。在另一方面，本发明的方法可提供神经元的至少20％、30％或甚至40％的增加。

在一个实施方案中，本发明的方法可包括识别生长中的动物。在一个方面，生长中的动物可以是未达到其全尺寸(高度)和成年体重的婴幼儿、幼猫或幼犬或任何幼年动物。在另一方面，生长中的动物可以是达到其预期寿命的0和30％之间的动物。

在另一个实施方案中，本发明的方法可包括识别患有认知减退或处于认知损害风险的动物。在另一方面，该方法可包括被诊断为患有影响其认知能力的疾病，障碍或其他病症的动物，或处于感染影响其认知能力的疾病、障碍或其他病症的风险的动物。确定处于认知减退的风险，或者处于感染影响认知能力的疾病、障碍或其他病症的风险的动物可包括但不限于，具有认知减退或影响认知能力的疾病、障碍或其他病症的家族史的动物，和具有认知减退或影响认知能力的疾病、障碍或其他病症的遗传倾向的动物。

UFA可以是适于施用给动物的任何UFA。UFA可得自任何合适的合成来源或天然来源。UFA的来源包括此类脂肪酸的天然来源，并且包括但不限于：樱草；深绿色蔬菜，诸如菠菜；藻类和蓝绿藻，诸如螺旋藻；来自植物诸如亚麻、芥花、大豆、核桃、南瓜、红花、芝麻、小麦胚芽、向日葵、玉米和大麻的植物种子和油；以及鱼类，诸如鲑鱼、金枪鱼、鲭鱼、鲱鱼、海鲈鱼、条纹鲈鱼、比目鱼、鲶鱼、沙丁鱼、鲨鱼、虾和蛤；以及上述中任何一者或多者的提取油。UFA也可以是合成的，并且因此可根据本领域适合的任何手段由任何合适的原料制备。UFA可包含来自任何一种或多种来源的任何一种或多种UFA的共混物，诸如上文例示的那些，无论是天然的还是合成的。在一些实施方案中，UFA可为长链多不饱和脂肪酸(LCPUFA)，其包括一种或多种具有至少20个碳原子和至少两个双键的一元羧酸。在一个方面，UFA可以是(n-6)脂肪酸或(n-3)脂肪酸，并且在特定方面，UFA可以是n-3LCPUFA。

NORC可以是适于施用给动物的任何NORC。NORC可得自任何合适的合成来源或天然来源。在各种实施方案中，NORC包括精氨酸。精氨酸的来源包括但不限于动物和植物蛋白质。被认为富含精氨酸含量且适合用于本文的植物的示例包括但不限于：豆类，诸如大豆、羽扇豆和角豆；谷物，诸如小麦和水稻；以及水果，诸如葡萄。诸如可可和花生之类的植物的种子和坚果也被认为富含精氨酸含量，因此可用于本文。被认为富含精氨酸含量的合适的动物蛋白质的一些示例是禽和鱼产品。也可根据本领域中任何合适的手段合成生产NORC。与UFA一样，本文所公开的任何组合物的NORC含量可包括任何天然的或合成的NORC的共混物。无论是天然的还是合成的，UFA和NORC都可直接获得或由商业来源提供。

B族维生素可以是适于施用给动物的任何B族维生素。B族维生素包括维生素B1(硫胺素)、维生素B2(核黄素)、维生素B3(烟酸、烟碱酸、烟酰胺)、维生素B5(泛酸)、维生素B6(吡哆醇、吡哆醛、吡哆胺)、维生素B7(生物素)、维生素B8(肌醇)、维生素B9(叶酸)、维生素B12(钴胺素化合物，包括甲基钴胺素、羟钴胺素和氰钴胺素)，或公认的发现具有B族维生素活性的其盐、缀合物或衍生物。任何上述各项的组合也可用于本文，并且在本文中有时称为B族维生素的“混合物”。由于不同物种的维生素需求不同，并非所有列出的化合物都被视为用于所有物种的维生素。例如，由于已知人可合成肌醇，所以不再将其视为维生素，因为它并非足够的人类营养所需的。

抗氧化剂可以是适于施用给动物的任何抗氧化剂。抗氧化剂在本领域中是众所周知的，特别是在食品技术和食品配制领域中。天然抗氧化剂化合物包括维生素(诸如A、C和E及其衍生物、缀合物或类似物)，以及植物提取物，包括水果、蔬菜、草本植物、种子和植物的其他类型和/或部分的提取物。已知诸如α-硫辛酸、叶绿素及其衍生物、谷胱甘肽、泛醌(例如，辅酶Q10)、类胡萝卜素(例如，β-胡萝卜素、α-胡萝卜素、β-隐黄素、γ-胡萝卜素、叶黄素、虾青素和玉米黄素等)、黄酮类、酚酸和多酚以及碧萝芷之类的化合物是优良的抗氧化剂。抗氧化剂的植物来源的一些示例包括：来自水果的植物来源，诸如浆果(樱桃、黑莓、草莓、树莓、岩高兰、蓝莓、越橘/野生蓝莓、黑醋栗)、石榴、葡萄、橙、李子、菠萝、猕猴桃和葡萄柚；来自蔬菜的那些，包括羽衣甘蓝、辣椒、红叶卷心菜、胡椒、欧芹、朝鲜蓟、芽球甘蓝、菠菜、柠檬、姜、大蒜和红甜菜；来自干果的那些，如杏、西梅和枣；来自豆类的那些，包括蚕豆、斑豆和大豆。还有坚果和种子，诸如山核桃、核桃、榛子、落花生和向日葵籽；谷物，诸如大麦、小米、燕麦和玉米。许多天然抗氧化剂还可得自各种各样的香料，包括丁香、肉桂、迷迭香和牛至。不那么广为人知的抗氧化剂来源包括银杏(Ginkgo biloba)和热带植物诸如乌药(uyaku)，以及番木瓜。近年来，各种茶和绿茶以及发酵产品诸如红酒的抗氧化特性已经引起了极大的关注，这些也将适用于本文。硒是一种优良的除氧剂且效果良好，特别是与维生素或相关生育酚化合物一起时。合成膳食抗氧化剂包括常用于食物产品中的丁基化羟基苯甲醚(BHA)和丁基化羟基甲苯(BHT)。上述中任一者单独地或以组合形式适用于本文，如天然抗氧化剂和合成抗氧化剂的组合。在一个实施方案中，抗氧化剂包含单独的虾青素，或虾青素与其他抗氧化剂的组合。

该组合物以对增强神经形成有效的量包含UFA和NORC、B族维生素和抗氧化剂。一般来讲，组合物包含约0.1％至约50％的UFA以及约0.1％至约20％的NORC。另外，组合物包含约1.2至40倍于每日推荐需求量(RDA)的B族维生素，以及约0.0001％至约25％的抗氧化剂。在各种实施方案中，组合物包含约1％至约30％的UFA，并且在一个方面，约1％至约15％的UFA；和约1％至约15％的NORC，并且在一个方面，约1％至约10％的NORC。在各种实施方案中，B族维生素含量为RDA的约1.2至20倍，并且在一个方面为RDA的约1.2至10倍，且抗氧化剂含量为约0.0001％至约15％，在一个方面为约0.001％至约5％，在一个特定方面为约0.001％至约2％。在一个实施方案中，该组合物包含约0.5g至约10g UFA和约0.5g至约10gNORC，并且B族维生素和抗氧化剂含量为RDA的1.5-4倍。在一些方面，该组合物可包含至少4倍于RDA的B族维生素。

组合物还可包含物质诸如矿物质、其他维生素、盐、营养物质、功能添加剂(包括例如增味剂、着色剂、乳化剂、抗微生物剂或其他防腐剂)。可用于此类组合物的矿物质包括例如钙、磷、钾、钠、铁、氯、硼、铜、锌、镁、锰、碘、硒等。可用于本文的另外的维生素的示例包括脂溶性维生素如维生素D和K。在各种实施方案中，包括菊粉、氨基酸、牛磺酸、胆碱、酶、辅酶等可能是有用的。

在一个实施方案中，组合物是食品组合物，包括人和宠物食品组合物。此类组合物包括旨在为动物、动物犒赏物(例如饼干)或膳食补充剂提供必要的膳食需求的食品。组合物可以是干组合物(例如粗磨食物)、半湿组合物、湿组合物或它们的任何混合物。在另一个实施方案中，组合物是膳食补充剂，诸如肉汁、饮用水、饮料、酸奶、粉末、颗粒、糊、悬浮液、咀嚼物、小块、犒赏物、小吃、食丸、丸剂、胶囊、片剂或任何其他合适的递送形式。膳食补充剂可包含高浓度的UFA和NORC，以及B族维生素和抗氧化剂。这允许将补充剂以少量施用给动物，或者可以在施用给动物之前稀释。膳食补充剂可能需要混合，或者可在施用给动物之前与水或其他稀释剂混合。

在一个实施方案中，组合物可以是冷藏或冷冻的组合物。在另一个实施方案中，UFA和NORC可与其他组分预混以提供所需的有益量。在其他实施方案中，UFA和NORC可用于涂覆食品、小吃、宠物食品组合物或宠物犒赏物。在一个实施方案中，可(例如，使用喷洒的粉末或混合物)刚好在向动物提供UFA和NORC之前将其添加到组合物中。这种组合物还包含B族维生素和/或抗氧化剂。

组合物可任选包含一种或多种促进或维持总体健康状况的补充物质。优选的物质可与改善的精神健康或增强的认知功能相关联，或者可以是抑制、延缓或降低认知功能丧失的物质，例如增强认知功能的草本植物或植物。

在各种实施方案中，宠物食品或宠物犒赏物组合物包含约15％至约50％的粗蛋白。粗蛋白材料可包含植物蛋白，诸如大豆粉、大豆浓缩蛋白、玉米蛋白粉、小麦谷蛋白、棉籽和花生粕，或者动物蛋白，诸如酪蛋白、白蛋白和肉蛋白。可用于本文的肉蛋白质的示例包括猪肉、羊羔肉、马肉、禽肉、鱼肉以及它们的混合物。

组合物还可包含约5％至约40％的脂肪。组合物还可包含碳水化合物源。组合物可包含约15％至约60％的碳水化合物。此类碳水化合物的示例包括谷粒或谷物，诸如水稻、玉米、芦粟、高粱、苜蓿、大麦、大豆、芥花、燕麦、小麦以及它们的混合物。组合物还可任选包含其他材料，诸如干乳清和其他乳制品副产品。

在一些实施方案中，组合物的灰分含量范围为小于1％至约15％，并且在一个方面，约5％至约10％。

水分含量可根据组合物的性质而变化。在一个实施方案中，组合物可以是完善且营养均衡的宠物食品。在该实施方案中，宠物食品可以是“湿食品”、“干燥食品”或中等水分含量的食品。“湿食品”描述的是通常以罐或箔袋形式销售的宠物食品，并且具有通常在约70％至约90％范围内的水分含量。“干燥食品”描述了与湿食品组成相似的宠物食品，但其含有的水分含量有限，通常在约5％至约15％或约20％的范围内，因此呈现为例如小饼干类粗磨食物。在一个实施方案中，组合物具有约5％至约20％的水分含量。干燥食物产品包括各种含水量的各种食品，使得它们是相对货架稳定的并且抵抗微生物或真菌导致的变质或污染。还包括在内的是作为挤出食物产品，诸如宠物食品，或用于人类或伴侣动物的零食的干燥食品组合物。

组合物还可包含一种或多种纤维源。术语“纤维”包括食物中无论是易消化还是不易消化的、可溶的还是不可溶的、可发酵的还是不可发酵的所有“大体积纤维性物质”来源。纤维可以来自植物源，诸如海生植物，但也可使用微生物源纤维。可利用多种可溶性或不溶性纤维，这将是本领域普通技术人员已知的。纤维源可以是甜菜浆(来源于甜菜)、阿拉伯树胶、塔尔哈型树胶、车前子、米糠、角豆胶、柑橘渣、低聚果糖、果胶、短链低聚果糖、甘露低聚果糖、大豆纤维、阿拉伯半乳聚糖、低聚半乳糖、阿拉伯糖基木聚糖或者它们的混合物。

或者，纤维源可以是可发酵纤维。可发酵纤维先前曾被描述为向伴侣动物的免疫系统提供有益效果。技术人员已知的提供益生元以增强肠内益生菌生长的可发酵纤维或其他组合物也可掺入到所述组合物中，以有助于增强本发明提供给动物免疫系统的有益效果。

在其他实施方案中，组合物还包含益生元、益生菌或它们的组合。益生菌是摄入后在预防和治疗特定医疗病症方面具有有益作用的活微生物。据信，益生菌通过被称为定植抗力的现象发挥生物学作用。益生菌有利于原生厌氧菌群限制消化道中潜在有害细菌(主要是需氧菌)的浓度的过程。其他作用模式，诸如供应酶或影响胃肠道中的酶活性，也可导致已被认为是由益生菌引起的一些其他功能。益生元是通过选择性刺激结肠中细菌的生长和/或活性来有益地影响宿主健康的不易消化的食物成分。益生元包括低聚果糖(FOS)、低聚木糖(XOS)、低聚半乳糖(GOS)和低聚甘露糖(通常用于非人类食品，诸如宠物食品)。许多食物诸如小麦、洋葱、香蕉、蜂蜜、大蒜和韭菜中可天然存在益生元低聚果糖(FOS)。FOS也可从菊苣根分离或由蔗糖酶促合成。结肠中的FOS发酵导致大量生理作用，包括提高结肠中双歧杆菌的数量、提高钙吸收、增加粪便重量、缩短胃肠通过时间，并可能降低血脂水平。已经假定双歧杆菌的增加通过产生化合物来抑制潜在病原体、通过降低血氨水平以及通过产生维生素和消化酶来使人类健康受益。据信，益生菌诸如乳酸杆菌或双歧杆菌通过改善肠道微生物平衡从而导致抗体产生增加和白细胞的吞噬(吞食或杀灭)活性增强，来积极影响免疫应答。乳酸双歧杆菌可能是一种有效的益生菌膳食补充剂，用于增强老年人细胞免疫的某些方面。益生菌增强全身细胞免疫应答，并可作为膳食补充剂用于增强原本健康的成年人的天然免疫力。益生菌包括许多类型的细菌，但通常选自四个细菌种属：嗜酸乳杆菌属(Lactobacilllus acidophillus)、双歧杆菌属(Bifidobacteria)、乳球菌属(Lactococcus)和片球菌属(Pediococcus)。有益物种包括肠球菌属(Enterococcus)和酵母属(Saccharomyces)物种。施用给动物的益生菌和益生元的量由技术人员基于益生元和益生菌的类型和性质以及动物的类型和性质(例如，年龄、体重、总体健康状况、性别、微生物消耗的程度、有害细菌的存在和动物的膳食)来确定。一般来讲，将益生菌以每天约十亿至约两百亿个菌落形成单位(CFU)的量施用给动物，以用于维持健康的肠道微生物群，优选地，每天约50亿至约100亿活细菌。一般来讲，益生元以足以积极刺激肠道中的健康微生物群并且使这些“有益”细菌繁殖的量施用。典型的量为每份约一克至约10克，或者推荐的动物每日膳食纤维的约5％至约40％。益生菌和益生元可通过任何合适的手段成为组合物的一部分。一般来讲，将试剂与组合物混合，或者例如通过喷洒或喷雾施加于组合物的表面。

可为预期的接受者或消费者，诸如用于成年动物或者用于老年或幼年动物专门配制组合物和膳食补充剂。例如，可制备适于幼犬或幼猫或者适于活跃的、怀孕的、哺乳中的或年老的动物的组合物。一般来说，专门的组合物将包括适合不同发育阶段或年龄的动物的能量和营养需求。

本发明的某些方面可与完善且均衡的食物组合使用。根据本文提供的某些实施方案，包含UFA、NORC、B族维生素和抗氧化剂的组合物可与高质量商业食品一起使用。如本文所用，“高质量商业食品”是指制造用于产生80％或更高的关键营养物质消化率的膳食，其在例如以上国家研究委员会针对狗的建议中或者在美国饲料控制官员协会规定的指导方针中示出。类似的高营养物质标准将用于其他动物。

在一个实施方案中，食品组合物包含多种成分或它们的组合中的任何一种，这些成分或它们的组合是针对其对整体组合物的贡献而选择的。因此，熟练的食品技术人员可从天然的(例如，植物或植物来源的、动物或动物来源的、以及微生物或微生物来源的)和合成的成分或组分中进行选择。在特定实施方案中，成分可包括谷物粒和/或其级分或组分、肉类和肉类副产品、鱼类、贝类或其他海产品、其他动物产品或副产品、任何来源的蛋、维生素、矿物质、盐、甜味剂、纤维、调味剂或其他增味剂、着色剂和功能成分(诸如乳化剂、稳定剂、软化剂、功能性涂层等)中的任一者。可用于本发明的谷物包括被公认为是“谷物”作物的所有植物，无论是当前用于商业性农业的还是仅在实际上或植物学上被认为是“谷物”的。例如，“谷物”包括玉米、小麦、水稻、大麦、高粱、小米、燕麦、黑麦、黑小麦、荞麦、福尼奥米(fonio)和藜麦。技术人员应当了解，在给定的食品组合物中使用一种或多种此类谷物产品并不罕见。可用于本发明的肉类包括来自任何动物的产品，包括肌肉组织，诸如鸡肉或其他家禽肉、羊羔肉、绵羊肉、小牛肉、牛肉或猪肉。可用于本发明的其他动物产品和副产品包括源于任何物种的乳的乳制品或副产品。其他重要的组分或成分包括脂肪，并且本领域的技术人员将认识到，许多来源的植物、动物或微生物脂肪可用于配制食品组合物。在一个实施方案中，脂肪源是植物脂肪，诸如玉米、大豆或芥花油，包括易得的脂肪。在另一个实施方案中，动物脂肪诸如牛油可用于提供来自脂肪的卡路里以及引用食肉动物的风味。当然，任何前述成分(诸如脂肪)的组合是本领域已知的，并且可用于基于功能特性以及价格和可用性来优化食品组合物。

本领域技术人员还将认识到，在配制本发明的食品组合物时，配制物可略有差别，以便配制人员考虑组合物中某些成分的价格和/或可用性，以及某些成分分析中的批次间变化。因此，根据这些因素，给定的食品组合物或配制物在不同批次之间、不同植物之间或甚至不同季节之间可略有不同。尽管选择用于制造特定批次的食品组合物的具体成分存在这种变化，但总体组合物(例如，对蛋白质、碳水化合物、脂肪、纤维或其他组分的分析)可(例如，根据标签声明，诸如特定组分的最小或最大百分比的声明或保证)保持恒定或至少基本上恒定。

对于宠物食品和配制用于人类食用的食物产品，以组合物的百分比计算的UFA量可在组合物的约0.1％至约13％的范围内，但也可提供更大的百分比。在各种实施方案中，UFA的量可以为组合物的约0.1％、0.2％、0.3％、0.4％、0.5％、0.6％、0.7％、0.8％、0.9％、1.0％、1.1％、1.2％、1.3％、1.4％、1.5％、1.6％、1.7％、1.8％、1.9％、2.0％、2.1％、2.2％、2.3％、2.4％、2.5％、2.6％、2.7％、2.8％、2.9％、3.0％、3.1％、3.2％、3.3％、3.4％、3.5％、3.6％、3.7％、3.8％、3.9％、4.0％、4.1％、4.2％、4.3％、4.4％、4.5％、4.6％、4.7％、4.8％、4.9％、5.0％或更多，例如6％、7％、8％、9％、10％、11％、12％、13％、14％、15％、16％、17％、18％、19％、20％或更多。在某些实施方案中，可使用最多至30％、40％或50％的UFA。

对于宠物食品和配制用于人类食用的食物产品，以组合物的百分比计算的NORC量可在组合物的约0.1％至约12％的范围内，但也可提供更大的百分比。在各种实施方案中，NORC的量可以为组合物的约0.1％、0.2％、0.3％、0.4％、0.5％、0.6％、0.7％、0.8％、0.9％、1.0％、1.1％、1.2％、1.3％、1.4％、1.5％、1.6％、1.7％、1.8％、1.9％、2.0％、2.1％、2.2％、2.3％、2.4％、2.5％、2.6％、2.7％、2.8％、2.9％、3.0％、3.1％、3.2％、3.3％、3.4％、3.5％、3.6％、3.7％、3.8％、3.9％、4.0％、4.1％、4.2％、4.3％、4.4％、4.5％、4.6％、4.7％、4.8％、4.9％、5.0％或更多，例如6％、7％、8％、9％、10％、11％、12％或更多，最多至约15％或甚至20％。在特定实施方案中，可以使用2-2.5％的UFA和2-2.5％的NORC。在此类实施方案中，纯的L-精氨酸可作为NORC化合物。膳食补充剂可被配制为含有高数倍浓度的UFA和NORC，从而适于以片剂、胶囊剂、液体浓缩物、乳剂、悬浮剂、凝胶剂或其他剂型的形式施用给动物，或者在施用之前进行稀释(诸如通过在水中稀释，或者添加到宠物食品中(例如通过喷雾或喷洒在宠物食品上))，以及其他适于施用这种膳食补充剂的施用模式。

在可供选择的实施方案中，组合物中UFA和NORC的量可以随着在动物血清中建立UFA和/或NORC或它们的代谢物的指定浓度或所需浓度范围所需的量而变。可通过测定喂食了推荐量的上文指定的UFA和NORC的动物的血清水平来计算血清中UFA和/或NORC的指定浓度或所需范围，如本领域的技术人员将会理解的那样。

在一个实施方案中，食品组合物包含适合所设计食品类型的常量营养物组合物。在一个实施方案中，食品组合物可具有约20％至32％的蛋白质、约30％至50％的碳水化合物、约5％至20％的脂肪和约15％至25％的水分。在另一个实施方案中，食品组合物可以是宠物食品组合物，诸如优质或超优质宠物食品组合物。在一个实施方案中，宠物食品可被配制用于犬科动物，其蛋白质含量为约20％至30％，在一个方面为约24％至28％，在一个特定方面为约25％至27％。在一个实施方案中，狗食品组合物的蛋白质含量可为约26重量％。在另一个实施方案中，配制物可用于猫科动物，其蛋白质含量可为约35％至45％，在一个方面为约37％至42％，在一个特定方面为约39％至41％。在一个实施方案中，猫食品组合物的蛋白质含量可为约40％。在另一个实施方案中，组合物可以是食物产品，所述食物产品包含UFA、NORC、B族维生素和抗氧化剂，并且还包含约15％至约50％的蛋白质，约5％至约40％的脂肪，约5％至约10％的灰分含量，并且水分含量为约5％至约20％。

在一个实施方案中，食品组合物可以是湿食品，诸如罐头食品、冷冻食品或新鲜食物产品。在一个实施方案中，食品组合物可以是货架稳定的。在另一个实施方案中，食品组合物可以是冷藏的。在其他实施方案中，食品组合物可以是如上所述的中等水分产物或干燥食物产品。

在一个实施方案中，UFA可以是鱼油，并且NORC可以是精氨酸或其释放一氧化氮的衍生物。在某些实施方案中，组合物可包含约0.1％至约50％的鱼油和约0.1％至约20％的精氨酸。在一些实施方案中，当该组合物是食物产品时，UFA和NORC均可以在本文提供的范围内。此类范围可以提供改善的适口性和功能特性，这将提高对食物产品的接受度。

在一个实施方案中，组合物可以配制用于伴侣动物，例如狗或猫。在其他实施方案中，该动物是患有或未患有与年龄相关的认知减退的人。

在一个实施方案中，可对组合物进行配制，从而在推荐食用份量的一份或多份中提供UFA和NORC每天各约0.5g至约10g。例如，如果该组合物旨在用于每天食用两次，则可以通过使每个推荐部分(例如，2匙或者一份20g等)提供UFA和NORC各5g这一方式来配制组合物，从而来提供10g的剂量。

在一个实施方案中，组合物可以包含约0.1％至约50％的鱼油、约0.1％至约20％的精氨酸、4倍至40倍于每日推荐需求量的B族维生素，以及约0.0001％至约25％的抗氧化剂。在一个实施方案中，该组合物包含约0.5g至约10g UFA和约0.5g至约10g NORC，以及B族维生素和抗氧化剂。

在另一方面，组合物还以对增强认知功能有效的量包含一种或多种认知药物。本领域技术人员可根据由其制造商给出的药物推荐剂量或根据动物的体重、物种、年龄、健康状态等来确定要添加到组合物中的认知药物的量。

在另一方面，本发明提供了包含本发明组合物和一种或多种药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂的药物组合物。一般来讲，药物组合物是通过将化合物或组合物与赋形剂、缓冲剂、粘合剂、增塑剂、着色剂、稀释剂、压缩剂、润滑剂、风味剂、润湿剂等，包括本领域技术人员已知可用于制备药物以及可用于配制适于作为药物施用给动物的组合物的其他成分混合而制成的。

在一些实施方案中，当描述组合物时，UFA、NORC、B族维生素和抗氧化剂可以本文给定的量施用给动物。在某些实施方案中，组合物的日剂量范围可为每只动物约5毫克/天至约5,000毫克/天、10,000毫克/天或20,000毫克/天，或者更多。在一个方面，日剂量范围为每只动物约30毫克/天至约10,000毫克/天，并且在另一个方面，每只动物约750毫克/天至约7,500毫克/天。UFA和NORC的日剂量可依据动物的每千克体重(BW)的UFA和NORC克数来测量。因此UFA和NORC的日剂量范围可为约0.001g/kg至约50g/kg动物BW，但也可提供更大或更小的剂量。在一个方面，UFA和NORC的日剂量可为约0.001g/kg至约25g/kg动物BW。在另一个方面，UFA和NORC的日剂量可为约0.001g/kg至约10g/kg动物BW。在其他方面，UFA和NORC的日剂量可为约0.001g/kg至约5g/kg动物BW、约0.001g/kg至约1g/kg动物BW，或约0.001g/kg至约0.5g/kg动物BW。

在一些实施方案中，可基于“喂食量”按表1中列出的范围向犬科动物每日施用该组分，其中该组分以毫克/千克犬科动物体重(mg/kg BW)计。

表1

组分	范围(mg/kg BW)	范围(mg/kg BW)
			α生育酚乙酸酯	0.1-100	1-50
维生素C	0.1-100	0.1-50
			硒	0.001-1	0.001-0.1
硫胺素	0.01-10	0.1-1
			核黄素	0.01-10	0.1-1
泛酸	0.01-10	0.1-1
			烟酸	0.1-100	0.1-50
吡哆醇	0.01-10	0.1-1
			叶酸	0.001-1	0.001-0.1
氰钴胺	0.0001-1	0.001-0.1

在一些实施方案中，可基于“喂食量”按表2中列出的范围向猫科动物每日施用该组分，其中该组分以毫克/千克猫科动物体重(mg/kg BW)计。

表2

组分	范围(mg/kg BW)	范围(mg/kg BW)
			α生育酚乙酸酯	0.1-100	1-50
维生素C	0.1-100	0.1-50
			硒	0.001-1	0.001-0.1
硫胺素	0.01-10	0.1-1
			核黄素	0.01-10	0.1-1
泛酸	0.01-10	0.1-1
			吡哆醇	0.01-10	0.1-10
氰钴胺	0.0001-1	0.001-0.1
			叶酸	0.001-1	0.01-0.1

仅一部分由个体消耗的精氨酸仍然可用于代谢成NO。精氨酸凭借一氧化氮合成酶(NOS)而代谢成瓜氨酸和NO。多达60％被摄取的精氨酸在进入循环之前在肝脏中被精氨酸酶代谢，其中任何剩余的精氨酸可代谢成瓜氨酸和NO。精氨酸的替代来源是从氨基酸瓜氨酸内源性地产生精氨酸。该途径为全身的精氨酸生成贡献了约20％。瓜氨酸在肠道内产生并进入循环而不会被肝脏代谢，在肾脏中几乎完全转化成精氨酸。瓜氨酸在几乎不或不发生代谢的情况下通过肝脏，并且在线粒体中转化为精氨酸。循环中的大部分瓜氨酸在由高代谢活性组织构成的肾脏中得到转化。在血流中循环的瓜氨酸首先转化为精氨酸，然后在细胞中转化为瓜氨酸和NO。瓜氨酸可在口服和肠内产品中经由胃肠(GI)道而施用。内源性瓜氨酸是谷氨酰胺在肠道中代谢的产物，其由鸟氨酸作为尿素循环的一部分而产生，并由分布在体内的一氧化氮合酶形成。精氨酸是由瓜氨酸凭借精氨琥珀酸合成酶(EC6.3.4.5)和精氨琥珀酸裂解酶(EC 4.3.2.1)而代谢(主要在肾脏)产生的。值得注意的是，只要瓜氨酸在血流中循环，瓜氨酸转化为精氨酸就会不断发生。因此，循环的瓜氨酸使得体内能随时间维持升高的精氨酸浓度，这继而可在细胞中维持NO的稳定释放。由于氨基酸瓜氨酸是L-精氨酸的前体，所以瓜氨酸可以替代营养组合物中的L-精氨酸。与精氨酸不同，瓜氨酸在通过饮食吸收或肠道从头产生而进入血流后不会被肝脏代谢。瓜氨酸通过尿素循环的一部分凭借线粒体而酶促转化为精氨酸。

类似地，鸟氨酸是L-精氨酸的前体。因此，鸟氨酸可以替代营养组合物中的L-精氨酸。与精氨酸不同，鸟氨酸在通过饮食吸收或肠道从头产生而进入血流后不会被肝脏代谢。鸟氨酸通过尿素循环的一部分凭借线粒体而酶促转化为精氨酸。

根据方法进行施用可根据需要或根据期望变化或者以固定频率进行。规律摄取的目标是为动物提供规律且一致剂量的组合物或因这种摄入产生的直接或间接代谢物。这种规律且一致的定量给料将倾向于产生恒定血液水平的组合物组分或其直接或间接代谢物。因此，规律地施用可以是每月一次、每周一次、每天一次或每天多于一次。类似地，施用可以每两天、每两周或每两月、每三天、每三周或每三月、每四天、每四周或每四月一次等。施用可以每天多次。当用作普通膳食需求的补充剂时，可例如以口服或其他方式直接将组合物施用给动物。或者，组合物可与日常饲料或食物接触或混合，所述日常饲料或食物包括流体(例如饮用水)，或者与接受静脉连接治疗的动物的静脉连接件接触或混合。当用作日常饲料或食物时，对于本领域普通技术人员而言，施用是众所周知的。

施用也可作为动物膳食方案的一部分实施。例如，膳食方案可包括使动物以对增强该动物体内神经形成有效的量定期摄取本文所述的组合物。

根据本发明的方法，组合物的施用(包括作为膳食方案的一部分施用)可延续从分娩到动物成年范围内的时间段。在多种实施方案中，动物可以是人或伴侣动物(诸如狗或猫)。在某些实施方案中，动物可以是年轻的或生长中的动物。在其他实施方案中，动物可以是年老动物。已达到其预计寿命的约35％的动物可纳入在内。在一些实施方案中，当动物已经达到其预计或预期寿命的超过约30％、40％或50％时，开始例如规律地或长期规律地施用。在一些实施方案中，动物可已经达到其预期寿命的40％、45％或50％。在另外其他实施方案中，动物可以更老，达到其可能寿命的60、66、70、75或80％。寿命的确定可以基于死亡率统计表、计算、估计等，并且可以考虑已知过去、现在和未来的已知会对寿命造成正面或负面影响的影响或因素。在确定寿命时，物种、性别、体型大小、遗传因素、环境因素和应激物，现在和过去的健康状态、过去和现在的营养状态、应激物等的考虑也可以造成影响或纳入考虑中。

在本方法的各种实施方案中，组合物可以是人类食品组合物、宠物食品组合物或膳食补充剂。在其他实施方案中，组合物可以是还包含如下物质的食品组合物：约15％至约50％的蛋白质，约5％至约40％的脂肪，约5％至约10％的灰分含量，并且水分含量为约5％至约20％。

在某些实施方案中，UFA可以是鱼油，并且NORC可以是精氨酸或其释放一氧化氮的衍生物。

在某些实施方案中，要施用的组合物包含约0.1％至约50％的鱼油和约0.1％至约20％的精氨酸。对于所述方法的实施方案，与上述组合物一样，UFA包含天然鱼油、ALA、EPA、DPA、DHA，来自任何来源的另一种多不饱和脂肪酸中的一种或多种或它们的组合。

据信，组合物在被施用于动物后，会增加动物血液或血浆中UFA和NORC的循环浓度。在某些实施方案中，由消耗UFA和/或NORC所得到的直接或间接代谢物的血液浓度增加，并且可用作剂量的指标。接受组合物的动物血流中一种或多种化合物浓度降低的现象，也可以在正常疗程中出现。这种降低也可以作为监测或确定剂量的有用工具。在一个方面，要测定的血流成分的量的变化可依赖于剂量。在一些实施方案中，该方法可以导致动物血液中一种或多种酮体增加。施用还可以导致所存在的任何B族维生素和/或抗氧化剂的循环浓度增加，并且可以用作剂量的指示。

在另一方面，本发明提供了适于向动物施用组合物的试剂盒，所述组合物包含一种或多种UFA和NORC。根据试剂盒组分，在单个包装中的独立容器中或在虚拟包装中的独立容器中，试剂盒包含(a)UFA、(b)NORC、(c)B族维生素、(d)抗氧化剂，以及以下组分中的一者或多者：(1)一种或多种适于动物食用的其他成分；(2)一种或多种认知药物；(3)一种或多种益生元；(4)一种或多种益生菌；(5)一种或多种适于确定动物是否可从组合物中获益的诊断装置和用于增强神经形成的方法；(6)关于如何组合或制备UFA和NORC以及试剂盒中提供的任何其他成分以用于施用给动物的说明；(7)关于如何使用组合的试剂盒组分、制备的试剂盒组分或用于使动物获益的其他试剂盒组分的说明；以及(8)用于将组合的或制备的试剂盒组分施用给动物的装置。组分各自在单个包装中的独立容器中提供，或在不同包装中以各种组分的混合物形式提供。试剂盒可包含各种组合形式的成分。例如，试剂盒可在一个容器中包含B族维生素和一种或多种抗氧化剂的混合物，并且在一个或多个其他容器中包含一种或多种其他成分。类似地，试剂盒可在一个容器中包含UFA和NORC的混合物，并且在一个或多个其他容器中包含一种或多种其他成分。本领域的技术人员可基于成分的特征及其物理和化学性质和相容性来产生其他此类组合。

在另一方面，本发明提供了用于传达关于下述中一者或多者的信息或说明的手段：(1)使用本发明的组合物用以用于增强神经形成；(2)混合UFA、NORC、B族维生素、抗氧化剂或本发明的其他组分，以制备适于增强神经形成的组合物；(3)使用本发明的试剂盒以用于增强神经形成；以及(4)将组合物施用给动物。所述手段包括包含信息或说明的物理或电子文档、数字存储介质、光学存储介质、音频演示、视听显示或视觉显示中的一者或多者。在一个实施方案中，所述手段可选自：展示的网站、可视显示亭、宣传册、产品标签、包装说明书、广告、传单、公告、录音带、录像带、DVD、CD-ROM、计算机可读芯片、计算机可读卡、计算机可读磁盘、USB设备、FireWire设备、计算机存储器以及它们的任意组合。

另一方面，本发明提供了用于制造食品组合物的方法，该食品组合物包含UFA、NORC、B族维生素和抗氧化剂以及适于动物食用的一种或多种其他成分，例如蛋白质、脂肪、碳水化合物、纤维素等。该方法包括将适于动物食用的一种或多种成分与UFA和NORC以及可能的其他成分(诸如B族维生素和/或抗氧化剂)混合。或者，所述方法包括将UFA和NORC和其他成分(如果需要)独立地或以任何组合形式(例如，作为涂层或顶料)施加至食品组合物上。可在食品组合物的制造和/或加工过程中随时添加UFA和NORC。这包括例如将UFA和NORC作为食品组合物“主体”的核心配制物的一部分混合，或者将其作为涂层施加，即主要在食品组合物制造之后施加到食品组合物的表面上。组合物可根据本领域适用的任何方法制备。

在另一方面，本发明提供了一种包含本发明组合物的包装以及贴附于包装的标签，所述标签包含一个或多个字词、图片、设计、首字母缩略词、标语、短语或其他装置或它们的组合，其指示包装的内容物包含适于增强动物(在一个方面，年老动物)体内神经形成的组合物。通常，此类装置包括印刷在包装上的字词“改善神经形成”或等同表达。任何适于容纳该组合物的包装或包装材料都可用于本发明，例如由纸、塑料、箔、金属等制造的袋、盒、瓶、罐、小袋等。在一个实施方案中，视标签而定，包装可包含适于特定动物(诸如人、犬科动物或猫科动物)的食品组合物，在一个方面包含伴侣动物食品组合物。

在本发明中，动物可以是少年、成年、壮年或老年动物。通常，对于大多数实施方案来说，动物可以是年老动物。一般来说，动物在其预期寿命的后半期可属壮年，并且在预期寿命的最后四分之一可属老年。寿命定义对于各种动物而言各有不同，并且是本领域技术人员已知的。例如，未满约16岁的人可以被认为是少年。对于狗或猫而言，该动物未满1岁则可被认为是少年。

本发明的组合物(包括药物组合物和药物)可以使用各种施用途径来施用给动物。此类途径包括口服、鼻内、静脉内、肌内、胃内、经幽门、皮下、直肠等。在一个方面中，组合物可以口服施用。

可向动物施用本发明的组合物(包括药物组合物和药物)持续实现本发明的一个或多个目的例如增强动物体内神经形成的所需时间。该组合物可以适于长期施用，或依照与组合物和目的相容的任何时间表施用。

在本发明的方法和组合物的各种实施方案中，抗氧化剂包含单独的虾青素，或虾青素与其他抗氧化剂的组合。

实施例

本发明可通过以下实施例进一步阐释，但应当理解，这些实施例仅出于阐释目的而包含在本文中，并非意在限制本发明的范围，除非另有特别说明。

实施例1-阿尔茨海默病小鼠模型(AD小鼠)

该转基因模型过表达5种FAD突变：具有瑞典(K670N,M671L)，佛罗里达(I716V)和伦敦(V717I)家族性阿尔茨海默氏病(FAD)突变的突变人APP(695)，以及具有两种FAD突变M146L和L286V的人PS1。

将所有小鼠饲养并基因分型并保持在温度受控的室内(22-25℃)，并进行12小时的黑暗/光照循环。在研究期间，所有小鼠均可自由进食并饮用自来水。

群组：正常雄性小鼠(4周龄)

·A组：阴性对照：APP PS1转基因小鼠(AD小鼠)，喂食对照饮食11个月。

·B组：前处理：APP PS1转基因小鼠(AD小鼠)+喂食试验饮食11个月(出现淀粉样斑块之前)。

·C组：后处理：APP PS1转基因小鼠(AD小鼠)+喂食对照饮食5个月，然后换为喂食试验饮食II持续6个月(出现淀粉样斑块之后)。

·D组：阳性对照：非AD同窝小鼠，喂食对照饮食持续11个月。

试验饮食

对照饮食为AIN-93M饮食，其含有140g/kg酪蛋白、100g/kg蔗糖、50g/kg纤维、155g/kg糊精、466g/kg玉米淀粉、35g/kg标准盐混合物、40g/kg大豆油、10g/kg标准维生素混合物、1.8g/kg L-胱氨酸和2.5g/kg氯化胆碱。

试验饮食是补充有2％精氨酸、2％鲱鱼油、4倍B族维生素，以及抗氧化剂(维生素E：500mg/kg饮食，维生素C：150mg/kg饮食，虾青素：100mg/kg，硒：0.40mg/kg)的AIN-93M饮食。B族维生素包括维生素B1(硫胺素)、维生素B2(核黄素)、维生素B3(烟酸或烟碱酸)、维生素B5(泛酸)、维生素B6(吡哆醇、吡哆醛、吡哆胺)、维生素B7(生物素)、维生素B9(叶酸)和维生素B12(钴胺素)。

神经元密度测量

实验最后，让所有小鼠在完成所有行为测试后都恢复两周。然后，处死所有动物进行尸体剖检。取出一半大脑，在4％福尔马林中固定，然后进行石蜡包埋。使用显微镜用薄片切片机连续切割6微米厚的矢状面切片。从矢状面开始，切割并丢弃大约180微米厚的大脑，直到海马体可见。一旦海马体可见，就将切片收集在载玻片上。将载玻片在37℃下干燥过夜并进行H&E染色。然后，使用Carl Ziess显微镜在20倍物镜下拍摄图像。

使用Image J软件对来自每只小鼠的相似海马体切片中的细胞进行计数。每个切片来自大脑中相匹配的区域，记数检查的切片来自CA1区域中的相似区域。选择具有代表性尺寸的细胞并使用Image J程序“圈选”。然后选择该细胞并编号且记录其面积。然后将“圆圈”移至另一个细胞，标记该细胞并记录其面积。持续该操作，直到记录了海马体中的所有细胞。仅将带有细胞核的细胞记录下来，尺寸明显更小的细胞也不计数。进行细胞计数的人员对表型和治疗条件并不知晓。

表3：神经元密度(神经元数量/面积)

试验饮食增加了AD小鼠海马体CA1区域的神经元数量，这表明共混物增强了成年动物体内神经形成。用喂食对照饮食的非AD小鼠作为12月龄小鼠神经元密度正常水平的阳性对照，结果示了出乎意料的发现，即在长期喂养包含鱼油、精氨酸、B族维生素和抗氧化剂的营养物共混物后，阿尔茨海默病小鼠模型(AD小鼠)海马体CA1区域神经元密度增加，这表明该共混物能够刺激海马体CA1区域的成年体神经形成。此外，当将试验饮食施用给年幼的生长中小鼠时，神经形成效应显著高于在成年后喂食的情况(将表3中的162.1与135.5的神经元密度比较而得)。也许更重要的是，含有足量精氨酸、B族维生素和抗氧化剂的对照饮食未能增强AD小鼠CA1处的神经元密度。实际上，与喂食对照饮食的非AD小鼠相比，喂食对照饮食的AD小鼠往往具有更低的神经元密度。这些数据表明，含有鱼油、精氨酸、B族维生素和抗氧化剂的营养物共混物增强了海马体CA1处的成年体神经形成，而对照饮食中足量的精氨酸、B族维生素和抗氧化剂不能增强CA1处的神经形成。

本说明书已公开了本发明的典型实施方案。虽然采用了特定术语，但这些术语仅以一般性和描述性意义使用，而非出于限制目的。本发明的范围在权利要求书中陈述。显然，按照以上教导内容，本发明的许多修改形式和变型形式皆是可能的。因此，应当理解，在所附权利要求书的范围内可以不同于具体描述的其他形式实施本发明。

Claims

1.一种用于增强动物体内神经形成的方法，包括：

识别存在以下状况的动物：患有认知减退；处于认知损害的风险；被诊断为患有影响其认知能力的疾病、障碍、或其他病症；或处于感染影响其认知能力的疾病、障碍、或其他病症的风险，以及

向所述动物施用包含不饱和脂肪酸(UFA)、一氧化氮释放化合物(NORC)、B族维生素和抗氧化剂的组合物，其中所述组合物以对增强所述动物体内神经形成有效的量进行施用。

2.根据权利要求1所述的方法，其中所述神经形成发生在所述动物的海马体中，并且神经元密度增加至少10％。

3.根据权利要求1所述的方法，其中所述组合物包含约0.1％至约50％的UFA，并且其中所述UFA包括天然鱼油、ALA、EPA、DPA、DHA或来自任何来源的另一种n-3脂肪酸中的一种或多种。

4.根据权利要求1所述的方法，其中所述组合物包含约0.1％至约20％的NORC，并且其中所述NORC为精氨酸、瓜氨酸、鸟氨酸或其释放一氧化氮的衍生物。

5.根据权利要求1所述的方法，其中所述组合物包含约1倍、2倍至40倍于每日推荐需求量的所述B族维生素，并且其中所述B族维生素选自由以下项组成的组：维生素B1、维生素B2、维生素B3、维生素B5、维生素B6、维生素B7、维生素B8、维生素B9、维生素B12以及它们的混合物。

6.根据权利要求1所述的方法，其中所述组合物包含约0.0001％至约25％的所述抗氧化剂，并且其中所述抗氧化剂选自由以下项组成的组中的任一者：类胡萝卜素、黄酮类、酚酸及其酯、非黄酮类酚、姜黄素、黄酮木脂素、氧杂蒽酮、丁子香酚、维生素C、维生素E、硒以及它们的混合物。

7.根据权利要求1所述的方法，其中所述组合物被配制为人类食品组合物、宠物食品组合物或膳食补充剂。

8.根据权利要求1所述的方法，其中所述动物具有与年龄相关的认知损害相关联的表型，其中所述表型包括以下项中的一个或多个：与不具有所述表型的对照动物相比，回忆能力下降、短期记忆丧失、学习速率下降、学习能力下降、解决问题的能力下降、注意力持续时间下降、运动表现下降、精神混乱现象增加、或者痴呆。

9.根据权利要求1所述的方法，其中所述动物为健康的年老动物。

10.根据权利要求1所述的方法，其中所述动物为犬科动物或猫科动物。

11.一种用于增强生长中的动物体内神经形成的方法，包括：

识别所述生长中的动物，以及

向所述生长中的动物施用包含不饱和脂肪酸(UFA)、一氧化氮释放化合物(NORC)、B族维生素和抗氧化剂的组合物，其中所述组合物以对增强所述生长中的动物体内神经形成有效的量进行施用。

12.根据权利要求11所述的方法，其中所述神经形成发生在所述生长中的动物的海马体中，并且所述神经元密度增加至少10％。

13.根据权利要求11所述的方法，其中所述组合物包含约0.1％至约50％的UFA，并且其中所述UFA包括天然鱼油、ALA、EPA、DPA、DHA或来自任何来源的另一种n-3脂肪酸中的一种或多种。

14.根据权利要求11所述的方法，其中所述组合物包含约0.1％至约20％的NORC，并且其中所述NORC为精氨酸、瓜氨酸、鸟氨酸或其释放一氧化氮的衍生物。

15.根据权利要求11所述的方法，其中所述组合物包含约1倍、2倍至40倍于所述每日推荐需求量的所述B族维生素，并且其中所述B族维生素选自由以下项组成的组：维生素B1、维生素B2、维生素B3、维生素B5、维生素B6、维生素B7、维生素B8、维生素B9、维生素B12以及它们的混合物。

16.根据权利要求11所述的方法，其中所述组合物包含约0.0001％至约25％的所述抗氧化剂，并且其中所述抗氧化剂选自由以下项组成的组中的任一者：类胡萝卜素、黄酮类、酚酸及其酯、非黄酮类酚、姜黄素、黄酮木脂素、氧杂蒽酮、丁子香酚、维生素C、维生素E、硒以及它们的混合物。

17.根据权利要求11所述的方法，其中所述组合物被配制为人类食品组合物、宠物食品组合物或膳食补充剂。

18.根据权利要求11所述的方法，其中所述生长中的动物达到预期寿命的0和30％之间。

19.根据权利要求11所述的方法，其中所述生长中的动物为婴儿、幼猫或幼犬。

20.根据权利要求11所述的方法，其中所述组合物包含精氨酸、鱼油、B族维生素、维生素E、维生素C、虾青素和硒。