CN107537177A - 一种亚临界流体分步萃取蜂胶的方法 - Google Patents

Abstract

本发明亚临界流体分步萃取蜂胶的方法，采用两步法萃取毛胶破碎物蜂胶，先选择对蜂蜡选择性较高、极性较为相似的液化乙烷、液化丙烷作为萃取溶剂萃取蜂蜡，再选用对蜂胶选择性较高、极性较为相似的液化二甲醚或四氟乙烷萃取蜂胶，因毛胶中的蜂蜡已先前被萃取去除，避免了蜂蜡对蜂胶萃取率的影响，蜂胶萃取率高达99%以上，蜂胶提取物中黄酮类物质含量高，总黄酮含量大于25%，不含有蜂蜡、重金属，无溶剂残留，香气浓郁、无奇怪的溶剂残留味道，色泽浅，工艺操作简单、萃取温度低、无毒、无害，环保、无污染、非热加工、蜂胶中活性组份保持度好，萃取剂循环使用，生产成本低，提高了蜂胶提取物的质量。

Description

一种亚临界流体分步萃取蜂胶的方法

技术领域

本发明涉及一种实现蜂胶与蜂蜡分离提取的亚临界流体分步萃取蜂胶的方法。

背景技术

传统蜂胶胶提取方法一般采用水提法、酒精提取法、丙二醇提取法、大孔树脂吸附法、超临界二氧化碳提取法等，传统提取方法不能完全提取活性组份，存在工艺过程复杂、操作繁琐、生产成本高等问题，提取效率低，还含有大量的非活性组份蜂蜡，提取物颜色深暗，重金属含量超标，有溶剂残留。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是，提供一种提取效率高，提取物中不含有蜂蜡、重金属，无溶剂残留，活性组份保持度好，生产成本低的亚临界流体分步萃取蜂胶的方法。

本发明亚临界流体分步萃取蜂胶的方法，包括如下步骤：

第一步：粉碎蜂胶毛胶原料，得到毛胶破碎物；

第二步：将毛胶破碎物与第一萃取剂输送至萃取罐内混合，在20～25℃、0.3～0.5MPa的恒温恒压环境下进行第一次萃取，萃取分离出第一萃取液和第一萃余物，第一萃取剂为液化脂肪烷烃；

第三步：将第一萃取液移入蒸发罐蒸发去除第一萃取剂后，进行负压脱溶，获得第一萃取物蜂蜡；

第四步：将第二萃取剂加入第一次萃取后的第一萃余物，在30～55℃、0.6～0.9MPa的恒温恒压环境下进行第二次萃取，萃取分离出第二萃取液和第二萃余物，第二萃取剂为液化脂肪醚或液化四氟乙烷；

第五步：将第二萃取液移入蒸发罐蒸发去除第二萃取剂后，进行负压脱溶，获得第二萃取物蜂胶；

所述蜂胶毛胶原料在粉碎前置于-18～-22℃下冷冻40～50 h，将冷冻后的毛胶原料进行破碎处理，粉碎至得到粒度为0.1～2 mm的毛胶破碎物；

所述毛胶破碎物与第一萃取剂的质量体积混合比例为：1 g∶（3～10）ml；第二步所述萃取过程重复进行3～4遍，每一遍萃取时间为30～60min，所述第一萃取液为3～4遍第一次萃取所得萃取液的混合液；

第三步所述负压为-0.08～-0.10MPa，负压脱溶步骤持续进行10～60min；

所述第一萃余物经负压脱溶处理后再进行第四步萃取步骤，负压脱溶后的第一萃余物与第二萃取剂的质量体积混合比例为：1 g∶（2～10）ml，第四步所述萃取过程重复进行3～4遍，每一遍萃取时间为40～70min，所述第二萃取液为3～4遍第二次萃取所得萃取液的混合液；

第三步所述蒸发罐蒸发出的气状第一萃取剂、第五步所述蒸发罐蒸发出的气状第二萃取剂经压缩、冷却处理后循环输送至萃取罐重复利用；

所述液化脂肪烷烃为液化丁烷或液化丙烷；所述液化脂肪醚为液化二甲醚；

所述蜂胶毛胶原料破碎处理得到的毛胶破碎物用200～400目孔径大小的纺织材料包裹后再输送至萃取罐。

本发明亚临界流体分步萃取蜂胶的方法，采用两步法萃取蜂胶，先选择对蜂蜡选择性较高、极性较为相似的液化乙烷、液化丙烷作为萃取溶剂，对毛胶中的蜂蜡进行萃取，避免了蜂蜡在后续蜂胶提取中带来的不良影响，再选用对蜂胶选择性较高、极性较为相似的液化二甲醚和四氟乙烷作为萃取剂，对毛胶中的蜂胶进行萃取，因毛胶中的蜂蜡已先前被萃取去除，二次萃取过程中避免了蜂蜡对蜂胶萃取率的影响，对蜂胶的萃取率高达99%以上、且得到的蜂胶提取物中黄酮类物质含量高，提取物中总黄酮含量大于25%，对高良姜素和白杨素的萃取更加完全，且因而采用分步萃取首先对蜂蜡的去除以及去杂处理，而使得本发明方法得到的蜂胶中不含有蜂蜡、不含有重金属，无溶剂残留，得到的蜂胶产品安全性能更高，且得到的蜂胶提取物香气浓郁、无奇怪的溶剂残留味道，色泽浅，解决了传统方法提取的蜂胶提取物色泽过为暗沉的问题；对蜂胶的提取方法可针对不同蜂胶含量的毛胶进行提取，适用面广，工艺操作简单、萃取温度低、无毒、无害，环保、无污染、非热加工、蜂胶中活性组份保持度好、萃取剂循环使用、生产成本低，提高了蜂胶提取物的质量，适用于工业化大规模生产。

具体实施方式

一种亚临界流体分步萃取蜂胶的方法，包括如下步骤：

第一步：粉碎蜂胶毛胶原料，得到毛胶破碎物；

第二步：将毛胶破碎物与第一萃取剂输送至萃取罐内混合，在20～25℃、0.3～ 0.5MPa的恒温恒压环境下进行第一次萃取，萃取分离出第一萃取液和第一萃余物， 第一萃取剂为液化脂肪烷烃；

第三步：将第一萃取液移入蒸发罐蒸发去除第一萃取剂后，进行负压脱溶，获 得第一萃取物蜂蜡；

第四步：将第二萃取剂加入第一次萃取后的第一萃余物，在30～55℃、0.6～ 0.9MPa的恒温恒压环境下进行第二次萃取，萃取分离出第二萃取液和第二萃余物， 第二萃取剂为液化脂肪醚或液化四氟乙烷；

第五步：将第二萃取液移入蒸发罐蒸发去除第二萃取剂后，进行负压脱溶，获 得第二萃取物蜂胶。

蜂胶毛胶原料在粉碎前置于-18～-22℃下冷冻40～50 h，将冷冻后的毛胶原料进行破碎处理，粉碎至得到粒度为0.1～2 mm的毛胶破碎物。

毛胶破碎物与第一萃取剂的质量体积混合比例为：1 g∶（3～10）ml；第二步所述萃取过程重复进行3～4遍，每一遍萃取时间为30～60min，所述第一萃取液为3～4遍第一次萃取所得萃取液的混合液。

第三步所述负压为-0.08～-0.10MPa，负压脱溶步骤持续进行10～60min。

第一萃余物经负压脱溶处理后再进行第四步萃取步骤，负压脱溶后的第一萃余物与第二萃取剂的质量体积混合比例为：1 g∶（2～10）ml，第四步所述萃取过程重复进行3～4遍，每一遍萃取时间为40～70min，所述第二萃取液为3～4遍第二次萃取所得萃取液的混合液。

第三步所述蒸发罐蒸发出的气状第一萃取剂、第五步所述蒸发罐蒸发出的气状第二萃取剂经压缩、冷却处理后循环输送至萃取罐重复利用。

液化脂肪烷烃为液化丁烷或液化丙烷，液化脂肪醚为液化二甲醚。

蜂胶毛胶原料破碎处理得到的毛胶破碎物用200～400目孔径大小的纺织材料包裹后再输送至萃取罐。

本发明对毛胶中的蜂蜡和蜂胶的极性差别进行研究，通过创造性的选用两步萃取蜂胶的方法，先选择对蜂蜡选择性较高、极性较为相似的液化乙烷、液化丙烷作为萃取溶剂，对毛胶中的蜂蜡进行萃取，避免了蜂蜡在后续蜂胶提取中带来的不良影响，再选用对蜂胶选择性较高、极性较为相似的液化二甲醚和四氟乙烷作为萃取剂，对毛胶中的蜂胶进行萃取，因毛胶中的蜂蜡已先前被萃取去除，二次萃取过程中避免了蜂蜡对蜂胶萃取率的影响，进而使得本发明方法对蜂胶的萃取率高达99%以上、且得到的蜂胶提取物中黄酮类物质含量高，提取物中总黄酮含量大于25%，对高良姜素和白杨素的萃取更加完全，且因而采用分步萃取首先对蜂蜡的去除以及去杂处理，而使得本发明方法得到的蜂胶中不含有蜂蜡、不含有重金属，不仅如此，本发明方法与传统方法相比，无溶剂残留，得到的蜂胶产品安全性能更高，且得到的蜂胶提取物香气浓郁、无奇怪的溶剂残留味道，色泽浅，解决了现有传统方法得到的蜂胶提取物色泽过为暗沉的问题。本发明对蜂胶的提取方法可针对不同蜂胶含量的毛胶进行提取，适用面广，且本发明具有工艺操作简单、萃取温度低、无毒、无害，环保、无污染、非热加工、蜂胶中活性组份保持度好、萃取剂循环使用、操作费用低的特点，相应地降低了蜂胶的提取成本，提高了蜂胶提取物的质量，可进行工业化大规模生产。

下面结合具体实施例对本发明作进一步详细说明，实施例涉及蜂胶萃取物中总黄酮含量采用常见的芦丁标准曲线法进行测定（GB/T 24283—2009）。

实施例1

一种亚临界流体分步萃取蜂胶的方法，包括如下步骤：

1）称取毛胶1000g（蜂胶含量约为40.7%），置于-20℃条件下冷冻48小时后进行粉碎处理，粉碎至0.1～2毫米，得到毛胶破碎物粗颗粒；

2）将步骤1）粉碎后的毛胶破碎物装入300目的筛绢袋中，扎口，放入亚临界萃取装置的萃取罐中，抽真空，加入5200 mL液化丁烷气，于23℃、0.3MPa的参数条件下进行第一次萃取，重复萃取3次，每次萃取40分钟，合并每次萃取得到的萃取液，得到第一萃取液；将第一萃取液移入蒸发罐中进行蒸发，蒸发出的气状第一萃取剂经压缩、冷却后置于第一溶剂储罐中，继续作为步骤2）的萃取溶剂循环使用；通过真空泵将蒸发处理后的第一萃取液于-0.09MPa负压下脱溶40分钟，取出萃取物，得蜂蜡186g。

3）将萃取罐中经过第一次萃取后的毛胶破碎物脱溶、抽真空后，加入6100 mL液化四氟乙烷，于30℃、0.6 MPa的参数条件下进行第二次萃取，重复萃取3次，每次萃取50分钟，合并每次萃取得到的萃取液，得到第二萃取液；将第二萃取液移入蒸发罐中，蒸发、负压脱溶，收集萃取物得浅色的精制蜂胶萃取物；将蒸发得到的气状第二萃取剂四氟乙烷经压缩、冷却后置于第二溶剂储罐中作为步骤3）的萃取溶剂循环使用。

实施例1萃取得到的蜂胶提取总量为404g，总的提取率99.3%，提取效率高，而采用传统的溶剂提取法获得的蜂胶提取率仅为70%，相比而言，本实施例方法获得了意想不到的高提取率；且本发明方法得到的蜂胶提取物中不含有蜂蜡，具有特殊的香气、色泽浅，解决了现有传统方法提取得到的蜂胶提取物颜色偏深偏暗的问题。

经试验验证，实施例1得到的蜂胶提取物中总黄酮含量26.8%，明显优于普通传统溶剂提取方法得到的蜂胶提取物中的总黄酮含量（传统方法仅为15%），且对蜂胶中的高良姜素和白杨素萃取完全，得到的蜂胶提取物营养价值更好，经ICP-MS检测结果显示实施例1制得的蜂胶提取物中不含有重金属，且无溶剂残留，安全性能好。

实施例2

一种亚临界流体分步萃取蜂胶的方法，包括如下步骤：

1）称取毛胶1000g（蜂胶含量约为23.4%），置于-18℃条件下冷冻40小时后进行粉碎处理，粉碎至0.1～2毫米，得到毛胶破碎物粗颗粒；

2）将步骤1）粉碎后的毛胶破碎物装入200目的筛绢袋中，扎口，放入亚临界萃取装置的萃取罐中，抽真空，加入3100 mL液化丙烷气，于20℃、0.4MPa的参数条件下进行第一次萃取，重复萃取3次，每次萃取30分钟，合并每次萃取得到的萃取液，得到第一萃取液；将所述第一萃取液移入蒸发罐中进行蒸发，蒸发出的气状第一萃取剂经压缩、冷却后置于第一溶剂储罐中，继续作为步骤2）的萃取溶剂循环使用；通过真空泵将蒸发处理后的第一萃取液于-0.09MPa负压下脱溶20分钟，取出萃取物，得蜂蜡107g。

3）将萃取罐中经过第一次萃取后的毛胶破碎物脱溶、抽真空后，加入2100 mL液化四氟乙烷，于40℃、0.8 MPa的参数条件下进行第二次萃取，重复萃取3次，每次萃取40分钟，合并每次萃取得到的萃取液，得到第二萃取液；将第二萃取液移入蒸发罐中，蒸发、负压脱溶，收集萃取物得浅色的精制蜂胶萃取物；将蒸发得到的气状第二萃取剂四氟乙烷经压缩、冷却后置于第二溶剂储罐中作为步骤3）的萃取溶剂循环使用。

实施例2萃取得到的蜂胶提取总量为232g，总的提取率99.1%，提取效率高，而采用传统的溶剂提取法获得的蜂胶提取率仅为72%，相比而言，本实施例方法获得了意想不到的高提取率；且本发明方法得到的蜂胶提取物中不含有蜂蜡，具有特殊的香气、色泽浅，解决了现有传统方法提取得到的蜂胶提取物颜色偏深偏暗的问题。

经试验验证，实施例2得到的蜂胶提取物中总黄酮含量25.8%，明显优于普通传统方法得到的蜂胶提取物中的总黄酮含量（传统方法仅为17%），且对蜂胶中的高良姜素和白杨素萃取完全，得到的蜂胶提取物营养价值更好，经ICP-MS检测结果显示实施例2制得的蜂胶提取物中不含有重金属，且无溶剂残留，安全性能好。

实施例3

一种亚临界流体分步萃取蜂胶的方法，包括如下步骤：

1）称取毛胶500g（蜂胶含量约为68.8%），置于-22℃条件下冷冻50小时后进行粉碎处理，粉碎至0.1～2毫米，得到毛胶破碎物粗颗粒；

2）将步骤1）粉碎后的毛胶破碎物装入400目的筛绢袋中，扎口，放入亚临界萃取装置的萃取罐中，抽真空，加入5000 mL液化丁烷气，于25℃、0.5 MPa的参数条件下进行第一次萃取，重复萃取3次，每次萃取60分钟，合并每次萃取得到的萃取液，得到第一萃取液；将所述第一萃取液移入蒸发罐中进行蒸发，蒸发出的气状第一萃取剂经压缩、冷却后置于第一溶剂储罐中，继续作为步骤2）的萃取溶剂循环使用；通过真空泵将蒸发处理后的第一萃取液于-0.09MPa负压下脱溶60分钟，取出萃取物，得蜂蜡157g。

3）将萃取罐1中的毛胶破碎物脱溶、抽真空后，加入4000 mL液化二甲醚，于55℃、0.9 MPa的参数条件下进行第二次萃取，重复萃取3次，每次萃取70分钟，合并每次萃取得到的萃取液，得到第二萃取液；将所述第二萃取液移入蒸发罐2中，蒸发、负压脱溶，收集萃取物得浅色的精制蜂胶萃取物；将蒸发得到的气状第二萃取剂二甲醚经压缩、冷却后置于第二溶剂储罐中作为步骤3）的萃取溶剂循环使用。

实施例3萃取得到的蜂胶提取总量为341 g，总的提取率99.1%，提取效率高，而采用传统的溶剂提取法获得的蜂胶提取率仅为78%，相比而言，本实施例方法获得了意想不到的高提取率；且本发明方法得到的蜂胶提取物中不含有蜂蜡，具有特殊的香气、色泽浅，解决了现有传统方法提取得到的蜂胶提取物颜色偏深偏暗的问题。

经试验验证，实施例3得到的蜂胶提取物中总黄酮含量26.3%，明显优于普通传统溶剂提取方法得到的蜂胶提取物中的总黄酮含量（传统方法仅为15%），且对蜂胶中的高良姜素和白杨素萃取完全，得到的蜂胶提取物营养价值更好，经ICP-MS检测结果显示本实施例制得的蜂胶提取物中不含有重金属，且无溶剂残留，安全性能好。

本发明的上述实施例仅仅是为说明本发明所作的举例，而并非是对本发明的实施方式的限定。对于所属领域的普通技术人员来说，在上述说明的基础上还可以做出其他不同形式的变化和变动。这里无法对所有的实施方式予以穷举。凡是属于本发明的技术方案所引申出的显而易见的变化或变动仍处于本发明的保护范围之列。

Claims (8)

1.一种亚临界流体分步萃取蜂胶的方法，包括如下步骤：

第一步：粉碎蜂胶毛胶原料，得到毛胶破碎物；

第二步：将毛胶破碎物与第一萃取剂输送至萃取罐内混合，在20～25℃、0.3～0.5MPa的恒温恒压环境下进行第一次萃取，萃取分离出第一萃取液和第一萃余物，第一萃取剂为液化脂肪烷烃；

第三步：将第一萃取液移入蒸发罐蒸发去除第一萃取剂后，进行负压脱溶，获得第一萃取物蜂蜡；

第四步：将第二萃取剂加入第一次萃取后的第一萃余物，在30～55℃、0.6～0.9MPa的恒温恒压环境下进行第二次萃取，萃取分离出第二萃取液和第二萃余物，第二萃取剂为液化脂肪醚或液化四氟乙烷；

第五步：将第二萃取液移入蒸发罐蒸发去除第二萃取剂后，进行负压脱溶，获得第二萃取物蜂胶。

2.根据权利要求1所述亚临界流体分步萃取蜂胶的方法，其特征在于：所述蜂胶毛胶原料在粉碎前置于-18～-22℃下冷冻40～50 h，将冷冻后的毛胶原料进行破碎处理，粉碎至得到粒度为0.1～2 mm的毛胶破碎物。

3.根据权利要求1所述亚临界流体分步萃取蜂胶的方法，其特征在于：所述毛胶破碎物与第一萃取剂的质量体积混合比例为：1 g∶（3～10）ml；第二步所述萃取过程重复进行3～4遍，每一遍萃取时间为30～60min，所述第一萃取液为3～4遍第一次萃取所得萃取液的混合液。

4.根据权利要求1所述亚临界流体分步萃取蜂胶的方法，其特征在于：第三步所述负压为-0.08～-0.10MPa，负压脱溶步骤持续进行10～60min。

5.根据权利要求1所述亚临界流体分步萃取蜂胶的方法，其特征在于：所述第一萃余物经负压脱溶处理后再进行第四步萃取步骤，负压脱溶后的第一萃余物与第二萃取剂的质量体积混合比例为：1 g∶（2～10）ml，第四步所述萃取过程重复进行3～4遍，每一遍萃取时间为40～70min，所述第二萃取液为3～4遍第二次萃取所得萃取液的混合液。

6.根据权利要求1所述亚临界流体分步萃取蜂胶的方法，其特征在于：第三步所述蒸发罐蒸发出的气状第一萃取剂、第五步所述蒸发罐蒸发出的气状第二萃取剂经压缩、冷却处理后循环输送至萃取罐重复利用。

7.根据权利要求1所述亚临界流体分步萃取蜂胶的方法，其特征在于：所述液化脂肪烷烃为液化丁烷或液化丙烷；所述液化脂肪醚为液化二甲醚。

8.根据权利要求1所述亚临界流体分步萃取蜂胶的方法，其特征在于：所述蜂胶毛胶原料破碎处理得到的毛胶破碎物用200～400目孔径大小的纺织材料包裹后再输送至萃取罐。