CN107236008B

CN107236008B - 喹唑啉-4-胺基葡萄糖衍生物及制备方法和生物活性

Info

Publication number: CN107236008B
Application number: CN201710511005.4A
Authority: CN
Inventors: 刘刚; 时尚; 刘雪娜; 黄银久; 刘芳; 刘霞; 刘建博; 刘继桥; 刘雯静; 李晗钰; 樊帅
Original assignee: Ludong University
Current assignee: Binhai Nasheng Technical Consulting Service Studio; Shenyang Sunshine Pharmaceutical Co ltd
Priority date: 2017-06-29
Filing date: 2017-06-29
Publication date: 2019-08-06
Anticipated expiration: 2037-06-29
Also published as: CN107236008A

Abstract

本发明公开了一种喹唑啉‑4‑胺基葡萄糖衍生物及制备方法和生物活性，是由通式（I）表示的化合物及其制备方法。式（I）中R₁、R₂、R₃、R₄、R₅如说明书中所定义。本发明介绍了以4‑氯喹唑啉或取代4‑氯喹唑啉和氨基葡萄糖或其盐为原料，以甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇、正丁醇、异丁醇、叔丁醇、异戊醇、新戊醇、季戊四醇为溶剂，反应合成喹唑啉‑4‑胺基葡萄糖衍生物。本发明部分化合物对测试的七种癌细胞株有增殖抑制效果，表现出一定的抗癌活性。

Description

喹唑啉-4-胺基葡萄糖衍生物及制备方法和生物活性

技术领域

本发明属于喹唑啉-4-胺基葡萄糖衍生物及其制备方法和生物活性。

背景技术

喹唑啉类化合物由于其不同的生物和药理性质而引起医药化学家极大兴趣的一种稠合双环杂芳族化合物。古老的本土药物，L-乙酰水杨酸（缓解冷、咳嗽、支气管炎和哮喘）和鲁沙星（治疗头痛、霍乱和痢疾的药物）是喹唑啉酮的衍生物。1900年Bogert等人（Bogert M.T., Gotthelf A.H. Journal of the American Chemical Society, 1900,22(3): 129-132.）第一次在发表的文献中提及了喹唑啉化合物。之后，越来越多不同结构类型和不同生物活性的衍生物陆续被开发出来。其中，喹唑啉酮类衍生物因其具有抗癌、抗结核、抗炎、抗惊厥和抗高血压等许多作用持续吸引着人们的密切关注（Manjula S.N.,Bharath E.N., Divya B. International Journal of Pharma and Bio Sciences,2011, 2(1): 780-809.; Zuo S.J., Li S., Yu R.H., et al. Bioorganic &Medicinal Chemistry Letters, 2014, 24(24): 5597-5601）。一些氨基喹唑啉衍生物被发现是酪氨酸的抑制剂激酶或二氢叶酸还原酶的抑制剂（Elliott C.T., Thompson C.S., CrooksS.R.H., et al. Analyst, 1998, 123(5): 1103-1107；Al-Rashood S.T., AboldahabI.A., Nagi M.N., et al. Bioorganic & Medicinal Chemistry, 2006, 14(24): 8608-8621.），最近越来越多研究证明，一些取代的喹唑啉显示出非常良好抗菌活性。随着对结构与活性的构效关系的深入研究，已开发出多种商品化药物，如抗高血压药哌唑嗪，抗肿瘤药Gefitinib、Afatinib，精神药品忽得等。

喹唑啉骨架在许多天然产物和生物活性分子中是普遍存在的，与不同的药效基团相连能产生不同的生物活性。由于其广谱选择活性，以喹唑啉作为基本结构，设计合成新的喹唑啉衍生物以期发现生物活性优异的药物，一直是合成化学的研究热点。尤其是近几年来，越来越多新的合成方法被应用。而且，许多有关活性的探究也不断的深入。

2016年Dong Cao等人（Cao D., Wang X.Y., Lei L., et al. Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters, 2016, 26(8): 1931-1935.）通过对2, 4-二氯喹唑啉的进一步修饰得到了多种化合物，通过MTT法测试，大多数衍生物都显示出了一定的抗增殖活性，其中某一产物对HepG2，A549，MCF-7和SW620四种类型的癌细胞的IC₅₀ = 0.029, 0.147,0.099 和0.052 μM，此外，间接免疫荧光染色法测试出其抗微管蛋白的性质，证实该化合物可以在G₂ / M期触发凋亡。经过进一步探究，此化合物在作用24小时后引起细胞周期蛋白B1和p-H3表达显著增加，并使Cdc25c和Cdk1表达明显下降。更重要的是，该化合物能显著抑制HepG2异种移植模型中的肿瘤生长，而不引起体重的显著损失，而且水溶性良好，这预示着有希望发展为新的抗癌药剂。

为了开发出高效的抗糖尿病化合物，2015年Venkateshwarlu Gurram等人（GurramV., Garlapati R., Thulluri C., et al. Medicinal Chemistry Research, 2015, 24(5): 2227-2237.）设计了多种6取代-2-环丙基喹唑啉。通过虚拟筛选以及体外活性测试，其中七种新发现的化合物能够阻碍α-葡萄糖苷酶（IC₅₀< 20 μM），且六种化合物的IC₅₀低于标准药剂阿卡波糖（IC₅₀=6.20 μM）。特别需要注意的是，其中一产物展现出了最高的抑制能力（IC₅₀=3.20 μM）。通过α-葡萄糖苷酶的分子对接实验证明，六种化合物的相互作用模式和作用方向与对照化合物阿卡波糖明显不同。以此为参考有希望研究出一类新的可以改善餐后高血糖的化合物。

Cheng等人（Cheng W Y, Yuan Y T, Qiu N, et al. Bioorganic & MedicinalChemistry, 2014, 22: 6796-6805; Cheng, W Y, Zhu S J, Ma X D, et al. EuropeanJournal of Medicinal Chemistry, 2015, 89: 826-834.）先后设计并合成了一系列含2-硝基咪唑的4-芳胺喹唑啉类化合物、4-芳胺喹唑啉类化合物作为EGFR抑制剂，大部分新化合物与吉非替尼相比，在低氧和缺氧环境下对HT-29细胞的抗增殖活性有更卓越的表现，并研究了某一化合物在缺氧条件下的还原激活作用比在低氧条件下更稳定。

本研究团队先后公开了两个中国发明专利（CN105520951A，2016-04-27；CN105601685A，2016-05-25），分别对含喹唑啉环壳聚糖/壳寡糖衍生物及制备方法和生物活性，部分化合物表现出一定的抗癌活性。而壳聚糖和壳寡糖的最终降解产物就是氨基葡萄糖。氨基葡萄糖具有多羟基胺的性质，以聚合物或衍生物的形式存在于甲壳动物、昆虫、霉菌和细菌的细胞壁中。α-型为晶体状，熔点88℃，在水溶液中变旋[α]_D ²⁰100°→47.5°(30分钟)。β-型从甲醇中得针状晶体，110℃时分解，在水溶液中变旋[α]_D ²⁰28° →47.5°(30分钟)。易溶于水，可溶于热甲醇，微溶于冷甲醇和乙醇，不溶于乙醚和氯仿。氨基葡萄糖是人体内合成的物质，是形成软骨细胞的重要营养素，是健康关节软骨的天然组织成份。随着年龄的增长，人体内的氨基葡萄糖的缺乏越来越严重，关节软骨不断退化和磨损。美国、欧洲和日本的大量医学研究表明：氨基葡萄糖可以帮助修复和维护软骨，并能刺激软骨细胞的生长。

本发明研究发现把喹唑啉和氨基葡萄糖结构有机结合后，经活性测试发现具有一定的抗肿瘤活性，细胞毒性大大降低，这可能与氨基葡萄糖和喹唑啉双重协同作用有关。

发明内容

一种用于抗肿瘤的药物，其特征在于是由下列通式（I）表示的化合物：

（I）

其中R₁、R₂、R₃、R₄和R₅各自是氢、卤原子、C1-6烷基、C1-6烷氧基、苯基、硝基、氨基、取代氨基，氨基葡萄糖为α型或β型。

以上所述的一种用于抗肿瘤的药物，其特征在于化合物的通式（I）中R₁、R₂、R₃、R₄和R₅均为氢。

以上所述的一种用于抗肿瘤的药物，其特征在于化合物的通式（I）中R₁、R₄和R₅均为氢，R₂和R₃选自C1-6烷基、C1-6烷氧基。

以上所述的一种用于抗肿瘤的药物，其特征在于化合物的通式（I）中R₁、R₃和R₅均为氢，R₂和R₄选自卤原子。

以上所述的一种用于抗肿瘤的药物，其特征在于化合物的通式（I）中R₅为甲基，R₂、R₃和R₄选自卤原子、C1-6烷基、C1-6烷氧基。

以上所述的一种用于抗肿瘤的药物，其特征在于化合物的通式（I）中R₂和R₃选自甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、异丁氧基、叔丁氧基、正戊氧基、异戊氧基、叔戊氧基、新戊氧基。

以上所述的一种用于抗肿瘤的药物，其特征在于化合物的通式（I）中R₂和R₄选自氟、氯、溴、碘原子。

以上所述的一种用于抗肿瘤的药物的制备方法，其特征在于反应釜中依次加入4-氯喹唑啉或取代4-氯喹唑啉、氨基葡萄糖或其盐酸盐或硫酸盐，溶剂选用甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇、正丁醇、异丁醇、叔丁醇、异戊醇、新戊醇或季戊四醇，缚酸剂选用碳酸氢钠、碳酸钠、碳酸铵、碳酸氢铵、吡啶或三乙胺，加热搅拌反应8-20小时，反应结束后，抽滤，母液脱溶，得淡黄色固体。然后柱层析分离，用甲醇：石油醚（V:V=1:6-4:6）进行梯度洗脱，得最终产物。以上所述的一种用于抗肿瘤的药物的制备方法，其特征在于合成化学反应方程式如下：

本步骤适用于所有上述喹唑啉-4-胺基葡萄糖衍生物的合成。

以上所述的一种用于抗肿瘤的药物，其特征在于在制备用于治疗和预防各种良性或恶性肿瘤药物中的用途。

以上所述肿瘤包括前列腺癌、皮肤癌、胃癌、乳腺癌、肝癌、肺癌、卵巢癌、宫颈癌、淋巴癌、大肠癌、鼻咽癌、口腔癌。

以上所述的一种用于抗肿瘤的药物，其特征在于所述的药物为一种药物组合物，包含有效量的式（I）化合物或其药学上可接受的盐。

以上所述药物组合物，含有作为活性成分的至少式（I）化合物本身或其与一种或多种可药用的惰性无毒赋形剂或载体的混合物。

以上所述药学上可接受的盐，包括无机酸的盐，例如氢卤酸盐、硫酸盐、硫酸氢盐、磷酸盐、磷酸一氢盐、磷酸二氢盐、硝酸盐、碳酸盐或碳酸氢盐，或者有机酸的盐，例如乙酸盐、三氟乙酸盐、三氯乙酸盐、柠檬酸盐、马来酸盐、富马酸盐、草酸盐、草酸一氢盐、膦酸盐、烷基磺酸盐、芳基磺酸盐、苯甲酸盐、延胡索酸盐、琥珀酸盐、乳酸盐、酒石酸盐、苹果酸盐、枸椽酸盐、抗坏血酸盐、水杨酸盐、咖啡酸盐、烟酸盐和2-氯烟酸盐。

具体实施方式

下面的实施示例将更好的说明本发明，但需要强调的是本发明决不仅限于这几个实施示例所表示的内容。

以下实施例显示了本发明的不同侧面，所给出的数据包括具体操作和反应条件及产物，产物通过反应前后原料与产物的红外光谱和核磁共振氢谱确证了其结构。

实施例1、喹唑啉-4-胺基葡萄糖的合成。

在反应瓶中，依次加入4-氯喹唑啉0.1 mol、氨基葡萄糖盐酸盐0.1 mol、甲醇200mL、碳酸氢钠21 g，升温搅拌下进行反应，当反应瓶中反应物料温度升至50℃时开始计时，反应12 h。待反应完成后将反应瓶中的物料进行过滤，得淡黄色液体，将该液体在减压脱溶，得淡黄色固体物质。然后柱层析分离，用甲醇：石油醚（V:V=1:6-4:6）进行梯度洗脱，得最终产物喹唑啉-4-胺基葡萄糖，产率35.2%。IR (KBr) v: 3310.6 (v_N-H), 3209.8 (v_O-H),3042.3 (v_Ar-H), 2882.5, 2942.9 (v_C-H), 1442.1-1650.7 (quinazoline skeletonvibration), 1316.9 (δ_N-H), 1260.1 (v_C-N), 838.2 (δ_Ar-H), 576.9 (δ_O-H) cm^-1。¹H NMR(DMSO-d ₆, 400 MHz) δ: 8.61-7.66 (m, 5H, quinazoline-H), 5.32 (d, 1H, 1-C-H),3.80-3.40 (m, 10H, O-H+C-H+N-H), 2.89 (m, 1H, 2-C-H).

通过IR和¹H NMR谱图来看，证明喹唑啉环存在，红外光谱主要吸收峰有：喹唑啉环芳氢的伸缩振动吸收峰（3042.3 cm^-1）、喹唑啉环的骨架振动吸收峰（1442.1-1650.7 cm^-1）和喹唑啉环上芳氢的面外弯曲吸收峰（838.2 cm^-1），虽然吸收强度较弱，但足以证明喹唑啉环骨架的存在；胺基葡萄糖结构也存在，主要吸收峰：N-H的伸缩振动吸收峰（3310.6 cm^-1）、O-H的伸缩振动吸收峰（3209.8 cm^-1）、C-H的伸缩振动吸收峰（2882.5, 2942.9 cm^-1）、C-N伸缩振动吸收峰（1260.1 cm^-1）。核磁共振氢谱主要吸收峰有：8.61-7.66 ppm出的多峰为喹唑啉环上的氢，5.32 ppm双重峰为氨基葡萄糖环1-位碳上的氢， 3.80-3.40 ppm多峰为氨基葡萄糖环上羟基氢、亚甲基氢、次甲基氢和氮上的氢，最高场为氨基葡萄糖环上2-位碳上的氢。从而证明了喹唑啉-4-胺基葡萄糖的结构。

实施例2、6-硝基喹唑啉-4-胺基葡萄糖的合成。

在反应瓶中，依次加入4-氯-6-硝基喹唑啉0.1 mol、氨基葡萄糖盐酸盐0.1 mol、甲醇200 mL、碳酸氢钠21 g，升温搅拌下进行反应，当反应瓶中反应物料温度升至50℃时开始计时，反应12小时。待反应完成后将反应瓶中的物料进行过滤，得淡黄色液体，将该液体在减压脱溶，得淡黄色固体物质。然后柱层析分离，用甲醇：石油醚（V:V=1:6-4:6）进行梯度洗脱，得最终产物6-硝基喹唑啉-4-胺基葡萄糖，产率30.4%。IR (KBr) v: 3311.4 (v_N-H),3208.9 (v_O-H), 3035.2 (v_Ar-H), 2885.7, 2947.8 (v_C-H), 1455.2-1657.2 (quinazolineskeleton vibration), 1541.2, 1356.0 (v_NO2),1312.8 (δ_N-H), 1257.2 (v_C-N), 652.2,662.4 (δ_Ar-H), 578.1 (δ_O-H) cm^-1。¹H NMR (DMSO-d ₆, 400 MHz) δ: 8.77-8.49 (m, 4H,quinazoline-H), 5.54 (d, 1H, 1-C-H), 3.78-3.41 (m, 10H, O-H+C-H+N-H), 2.92(m, 1H, 2-C-H)。

实施例3、6-氯喹唑啉-4-胺基葡萄糖的合成。

如实施例1的方法和条件合成，仅把原料4-氯喹唑啉替换为4,6-二氯喹唑啉，得到产物即为产物6-氯喹唑啉-4-胺基葡萄糖，产率40.2%。IR (KBr) v: 3318.2 (v_N-H),3210.4 (v_O-H), 3083.3 (v_Ar-H), 2887.1, 2940.5 (v_C-H), 1615.4-1450.9 (quinazolineskeleton vibration), 1310.1 (δ_N-H), 1250.7 (v_C-N), 825.7, 681.7 (δ_Ar-H), 647.7(v_C-Cl) cm^-1。¹H NMR (DMSO-d ₆, 400 MHz) δ: 8.55-7.78 (m, 4H, quinazoline-H), 5.41(d, 1H, 1-C-H), 3.80-3.42 (m, 10H, O-H+C-H+N-H), 2.84 (m, 1H, 2-C-H)。

实施例4、6-溴喹唑啉-4-胺基葡萄糖的合成。

如实施例1的方法和条件合成，仅把原料4-氯喹唑啉替换为4-氯-6-溴喹唑啉，得到产物即为产物6-溴喹唑啉-4-胺基葡萄糖，产率28.3%。IR (KBr) v: 3317.5 (v_N-H),3211.1 (v_O-H), 3017.6 (v_Ar-H), 2883.7, 2947.2 (v_C-H), 1617.4-1454.8 (quinazolineskeleton vibration), 1311.0 (δ_N-H), 1248.2 (v_C-N), 823.2, 676.5 (δ_Ar-H), 559.1(v_C-Br) cm^-1。¹H NMR (DMSO-d ₆, 400 MHz) δ: 8.71-7.71 (m, 4H, quinazoline-H), 5.40(d, 1H, 1-C-H), 3.81-3.46 (m, 10H, O-H+C-H+N-H), 2.86 (m, 1H, 2-C-H)。

实施例5、6,8-二氯喹唑啉-4-胺基葡萄糖的合成。

如实施例1的方法和条件合成，仅把原料4-氯喹唑啉替换为4,6,8-三氯喹唑啉，得到产物即为产物6,8-二氯喹唑啉-4-胺基葡萄糖，产率20.2%。IR (KBr) v: 3320.1 (v_N-H),3200.4 (v_O-H), 3082.9 (v_Ar-H), 2885.6, 2951.8 (v_C-H), 1607.9-1470.9 (quinazolineskeleton vibration), 1315.4 (δ_N-H), 1246.7 (v_C-N), 861.8 (δ_Ar-H), 656.6 (v_C-Cl)cm^-1。¹H NMR (DMSO-d ₆, 400 MHz) δ: 8.90-8.10 (m, 3H, quinazoline-H), 5.42 (d,1H, 1-C-H), 3.84-3.49 (m, 10H, O-H+C-H+N-H), 2.88 (m, 1H, 2-C-H)。

实施例6、6,8-二溴喹唑啉-4-胺基葡萄糖的合成。

如实施例1的方法和条件合成，仅把原料4-氯喹唑啉替换为4-氯-6,8-二溴喹唑啉，得到产物即为产物6,8-二溴喹唑啉-4-胺基葡萄糖，产率18.7%。IR (KBr) v: 3320.4(v_N-H), 3200.5 (v_O-H), 3079.6 (v_Ar-H), 2885.7, 2951.5 (v_C-H), 1600.2-1465.1(quinazoline skeleton vibration), 1315.7 (δ_N-H), 1246.4 (v_C-N), 805.8 (δ_Ar-H),632.7 (v_C-Br) cm^-1。¹H NMR (DMSO-d ₆, 400 MHz) δ: 8.91-8.25 (m, 3H, quinazoline-H), 5.44 (d, 1H, 1-C-H), 3.85-3.49 (m, 10H, O-H+C-H+N-H), 2.89 (m, 1H, 2-C-H)。

实施例7、6,7-二甲氧基喹唑啉-4-胺基葡萄糖的合成。

如实施例1的方法和条件合成，仅把原料4-氯喹唑啉替换为4-氯-6,7-二甲氧基喹唑啉，得到产物即为产物6,7-二甲氧基喹唑啉-4-胺基葡萄糖，产率52.9%。IR (KBr) v:3333.8 (v_N-H), 3209.1 (v_O-H), 3038.5 (v_Ar-H), 2946.7-2846.1 (v_C-H), 1601.3-1468.7(quinazoline skeleton vibration), 1245.6 (v_asAr-O-C), 1135.8 (v_sAr-O-C), 782.6(δ_Ar-H) cm^-1。¹H NMR (DMSO-d ₆, 400 MHz) δ: 8.95-7.26 (m, 3H, quinazoline-H), 5.45(d, 1H, 1-C-H), 4.05 (s, 6H, OCH₃), 3.84-3.47 (m, 10H, O-H+C-H+N-H), 2.84 (m,1H, 2-C-H)。

实施例8、6,7-二乙氧基喹唑啉-4-胺基葡萄糖的合成。

如实施例1的方法和条件合成，仅把原料4-氯喹唑啉替换为4-氯-6,7-二乙氧基喹唑啉，得到产物即为产物6,7-二乙氧基喹唑啉-4-胺基葡萄糖，产率50.1%。IR (KBr) v:3333.7 (v_N-H), 3209.3 (v_O-H), 3037.9 (v_Ar-H), 2947.6-2834.6 (v_C-H), 1606.1-1466.4(quinazoline skeleton vibration), 1243.2 (v_asAr-O-C), 1132.7 (v_sAr-O-C), 786.7(δ_Ar-H) cm^-1。¹H NMR (DMSO-d ₆, 400 MHz) δ: 8.93-7.30 (m, 3H, quinazoline-H), 5.42(d, 1H, 1-C-H), 4.06 (s, 4H, CH₂), 3.82-3.46 (m, 10H, O-H+C-H+N-H), 2.84 (m,1H, 2-C-H), 1.31 (s, 6H, CH₃)。

实施例9、2-甲基-6,7-二甲氧基喹唑啉-4-胺基葡萄糖的合成。

如实施例1的方法和条件合成，仅把原料4-氯喹唑啉替换为2-甲基-4-氯-6,7-二甲氧基喹唑啉，得到产物即为产物2-甲基-6,7-二甲氧基喹唑啉-4-胺基葡萄糖，产率35.5%。IR (KBr) v: 3334.4 (v_N-H), 3210.9 (v_O-H), 3034.0 (v_Ar-H), 2952.4-2866.5(v_C-H), 1615.6-1454.8 (quinazoline skeleton vibration), 1243.8 (v_asAr-O-C),1135.6 (v_sAr-O-C), 776.7 (δ_Ar-H) cm^-1。¹H NMR (DMSO-d ₆, 400 MHz) δ: 7.68-7.36 (m,2H, quinazoline-H), 5.44 (d, 1H, 1-C-H), 4.05 (s, 6H, OCH₃), 3.85-3.48 (m,10H, O-H+C-H+N-H), 2.68 (m, 1H, 2-C-H), 2.42 (s, 3H, CH₃)。

实施例10、2-氯-6,7-二甲氧基喹唑啉-4-胺基葡萄糖的合成。

如实施例1的方法和条件合成，仅把原料4-氯喹唑啉替换为2,4-二氯-6,7-二甲氧基喹唑啉，得到产物即为产物2-氯-6,7-二甲氧基喹唑啉-4-胺基葡萄糖，产率27.3%。IR(KBr) v: 3335.1 (v_N-H), 3208.7 (v_O-H), 3030.8 (v_Ar-H), 2953.2-2865.6 (v_C-H),1616.5-1455.4 (quinazoline skeleton vibration), 1243.6 (v_asAr-O-C), 1135.5(v_sAr-O-C), 774.2 (δ_Ar-H), 658.6 (v_C-Cl) cm^-1。¹H NMR (DMSO-d ₆, 400 MHz) δ: 8.17-7.42 (m, 2H, quinazoline-H), 5.41 (d, 1H, 1-C-H), 4.06 (s, 6H, OCH₃), 3.86-3.51 (m, 10H, O-H+C-H+N-H), 2.62 (m, 1H, 2-C-H)。

实施例11、2-苯基喹唑啉-4-胺基葡萄糖的合成。

如实施例1的方法和条件合成，仅把原料4-氯喹唑啉替换为2-苯基-4-氯喹唑啉，得到产物即为产物2-苯基喹唑啉-4-胺基葡萄糖，产率21.9%。IR (KBr) v: 3335.2 (v_N-H),3230.1 (v_O-H), 3035.7 (v_Ar-H), 2884.5, 2945.7 (v_C-H), 1616.7-1455.4 (quinazolineskeleton vibration), 1312.4 (δ_N-H), 1258.2 (v_C-N), 826.2, 683.9 (δ_Ar-H) cm^-1。¹HNMR (DMSO-d ₆, 400 MHz) δ: 8.58-7.06 (m, 9H, quinazoline-H+Ph-H), 5.48 (d, 1H,1-C-H), 3.83-3.54 (m, 10H, O-H+C-H+N-H), 2.81 (m, 1H, 2-C-H)。

实施例12、6-氨基喹唑啉-4-胺基葡萄糖的合成。

如实施例2的方法和条件合成6-硝基喹唑啉-4-胺基葡萄糖，再在反应瓶中，用还原性铁粉和氯化铵水溶液加热下还原硝基为氨基，反应完毕后，冷却至室温，抽滤，用蒸馏水重结晶，最终得白色絮状固体6-氨基喹唑啉-4-胺基葡萄糖，产率61.4%。IR (KBr) v:3340.8,3246.2 (v_NH2), 3209.8 (v_O-H), 3030.4 (v_Ar-H), 2881.6, 2944.5 (v_C-H),1453.7-1652.8 (quinazoline skeleton vibration), 1340.6 (δ_N-H), 1250.6 (v_C-N),656.8, 668.4 (δ_Ar-H) cm^-1。

实施例13、喹唑啉-4-胺基葡萄糖的合成。

如实施例1的方法和条件合成，仅把溶剂甲醇替换为无水乙醇，得到产物即为产物喹唑啉-4-胺基葡萄糖，产率30.8%。

实施例14、喹唑啉-4-胺基葡萄糖的合成。

如实施例1的方法和条件合成，仅把溶剂甲醇替换为叔丁醇，得到产物即为产物喹唑啉-4-胺基葡萄糖，产率28.4%。

实施例15、喹唑啉-4-胺基葡萄糖的合成。

如实施例1的方法和条件合成，仅把缚酸剂碳酸氢钠替换为碳酸钠，得到产物即为产物喹唑啉-4-胺基葡萄糖，产率32.6%。

实施例16、喹唑啉-4-胺基葡萄糖的合成。

如实施例1的方法和条件合成，仅把缚酸剂碳酸氢钠替换为吡啶，得到产物即为产物喹唑啉-4-胺基葡萄糖，产率20.7%。

实施例17、喹唑啉-4-胺基葡萄糖的合成。

如实施例1的方法和条件合成，仅把反应时间12小时缩减为8小时，得到产物即为产物喹唑啉-4-胺基葡萄糖，产率21.4%。

实施例18、喹唑啉-4-胺基葡萄糖的合成。

如实施例1的方法和条件合成，仅把反应时间12小时增加为18小时，得到产物即为产物喹唑啉-4-胺基葡萄糖，产率35.9%。

实施例19、喹唑啉-4-胺基葡萄糖类化合物对各癌细胞的增殖抑制测定。

试验方法：将药物用DMSO溶解配制成各个浓度，每浓度重复三次；将各类癌细胞株细胞消化后制成悬浮液4×10⁴个/毫升，取10毫升加至一大培养皿中，待24小时贴壁后，加药处理；24小时后随机取2皿拍照，记录细胞状态；吸出原培养基换含药培养基（10％FBS1640）处理72小时；加1.5毫升胰酶，消化4分钟后加原含药培养基终止消化，打匀，计数细胞数目，取平均值，计算抑制率。

试验结果见图1所示，试验所使用的癌细胞株包括：MDA-MB-435（乳腺癌细胞）、MDA-MB-231（乳腺癌细胞）、A549（非小细胞肺癌细胞）、SiHa（子宫颈鳞癌细胞）、Hela（宫颈癌细胞）、PC-3（前列腺癌细胞）、MFC（小鼠胃癌细胞）7种癌细胞的增殖抑制活性测定。

图1 喹唑啉-4-胺基葡萄糖类化合物在不同药剂浓度下对MDA-MB-435、A549、MDA-MB-231癌细胞株的增殖抑制率。

图2 喹唑啉-4-胺基葡萄糖类化合物在不同药剂浓度下对SiHa、HeLa、PC-3、MFC癌细胞株的增殖抑制率。

附图注：*与DMSO控制相比，喹唑啉-4-胺基葡萄糖类化合物，吉非替尼、奥沙利铂和其它阳性对照药剂72h治疗显示对细胞生长显著抑制（P<0.05）。（1）测试细胞：MDA-MB-435（乳腺癌细胞），MDA-MB-231（乳腺癌细胞），A549（非小细胞肺癌细胞），SiHa（子宫颈鳞癌细胞），Hela（宫颈癌细胞），PC-3（前列腺癌细胞）。（2）对比药物：Oxaliplatin（奥沙利铂），Gefitinib（吉非替尼）10-Hydroxy camptothecin（10-羟基喜树碱），Taxol（紫杉醇），Epirubicin Hydrochloride（盐酸表阿霉素）。（3）NT表示没有测试。

从图1和图2可看出，各目标化合物在不同浓度下，特别是10μM药剂浓度下对测试的7种癌细胞均具有一定的抑制活性，且对癌细胞的抑制率与药剂浓度呈正比关系。例如化合物喹唑啉-4-胺基葡萄糖在1 μmol/L的药剂浓度的条件下，对MDA-MB-435的抑制率为6.32 ±5.95%，而在10 μmol/L药剂浓度的条件下，此化合物的抑制率可达到51.1±3.21%；化合物6,7-二甲氧基喹唑啉-4-胺基葡萄糖在1 μmol/L的药剂浓度条件下，对PC-3的抑制率为1.35 ±7.59%，而在10 μmol/L药剂浓度的条件下，此化合物的抑制率可达到54.46 ±4.81%。说明药剂浓度对目标产物抗癌活性的影响较大。

Claims

1.一种用于抗肿瘤的药物化合物，其特征在于是由下列通式（I）表示的化合物：

（I）

其中，R₁、R₂、R₃和R₄各自是氢、卤原子、C1-6烷氧基、苯基、硝基、氨基，氨基葡萄糖为α型或β型。

2.根据权利要求1所述的一种用于抗肿瘤的药物化合物，其特征在于化合物的通式（I）中R₁、R₂、R₃和R₄均为氢。

3.根据权利要求1所述的一种用于抗肿瘤的药物化合物，其特征在于化合物的通式（I）中R₁和R₄均为氢，R₂和R₃选自C1-6烷氧基。

4.根据权利要求1所述的一种用于抗肿瘤的药物化合物，其特征在于化合物的通式（I）中R₁和R₃均为氢，R₂和R₄选自卤原子。

5.根据权利要求3所述的一种用于抗肿瘤的药物化合物，其特征在于化合物的通式（I）中R₂和R₃选自甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、异丁氧基、叔丁氧基、正戊氧基、异戊氧基、叔戊氧基、新戊氧基。

6.根据权利要求4所述的一种用于抗肿瘤的药物化合物，其特征在于化合物的通式（I）中R₂和R₄选自氟、氯、溴、碘原子。

7.根据权利要求1所述的一种用于抗肿瘤药物化合物的制备方法，其特征在于反应釜中依次加入4-氯喹唑啉或取代4-氯喹唑啉、氨基葡萄糖或其盐酸盐或其硫酸盐，溶剂选用甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇、正丁醇、异丁醇、叔丁醇、异戊醇、新戊醇或季戊四醇，缚酸剂选用碳酸氢钠、碳酸钠、碳酸铵、碳酸氢铵、吡啶或三乙胺，加热搅拌反应8-20小时，反应结束后，抽滤，母液脱溶，得淡黄色固体，然后柱层析分离，用体积比为1:6-4:6的甲醇和石油醚进行梯度洗脱，得式（I）化合物。

8.根据权利要求1所述的用于抗肿瘤的药物化合物的用途，其特征在于在制备用于治疗和预防各种良性或恶性肿瘤的药物中的用途。

9.一种药物组合物，包含有效量的权利要求1所述的式（I）化合物或其药学上可接受的盐。