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CN107207505B - 治疗和预防乙型肝炎病毒感染的 2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸衍生物 - Google Patents

治疗和预防乙型肝炎病毒感染的 2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸衍生物 Download PDF

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CN107207505B CN201680008772.7A CN201680008772A CN107207505B CN 107207505 B CN107207505 B CN 107207505B CN 201680008772 A CN201680008772 A CN 201680008772A CN 107207505 B CN107207505 B CN 107207505B
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F Hoffmann La Roche AG
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Abstract

本发明提供了通式(I)的新化合物以及包含该化合物的组合物和该化合物的使用方法，其中R1、R2、R3、R4、R5和Ar如文中所述。

Description

治疗和预防乙型肝炎病毒感染的 2-氧代-6,7-二氢苯并[a] 喹嗪-3-甲酸衍生物
本发明涉及可用于哺乳动物的治疗和/或预防的有机化合物，并且特 别涉及可用于治疗HBV感染的HBsAg(HBV表面抗原)抑制剂和HBV DNA生成的抑制剂。
发明领域
本发明涉及具有药物活性的新的2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸 衍生物、它们的制造、包含它们的药物组合物以及它们作为药物的潜在用 途。
本发明涉及式I的化合物或其可药用盐或对映体
其中R1至R5和Ar如以下所述。
乙型肝炎病毒(HBV)是有包膜的、部分双链DNA病毒。紧凑3.2kb HBV基因组由四个重叠的开放读框(ORF)组成，其编码核、聚合酶(Pol)、 包膜和X-蛋白。Pol ORF是最长的并且包膜ORF位于其内，而X和核 ORF与Pol ORF重叠。HBV的生命周期具有两个主要事件：1)闭合环状 DNA(cccDNA)由松环(RC DNA)的生成，和2)前基因组RNA(pgRNA)逆 转录以生成RCDNA。在宿主细胞感染之前，HBV基因组作为RC DNA 存在于病毒子内。已经确定HBV病毒子能够通过非特异性结合至存在于 人肝细胞表面的带负电荷的蛋白聚糖(Schulze,A.,P.Gripon&S.Urban. Hepatology,46,(2007),1759-68)和经由HBV表面抗原(HBsAg)特异性结 合至肝细胞牛磺胆酸钠共转运多肽(NTCP)受体(Yan,H.等人,J Virol,87, (2013),7977-91)而进入到宿主细胞中。一旦病毒子进入细胞，病毒核和包 被的RC DNA通过宿主因子经由核定位信号，通过Impβ/Impα核转运受 体转运到细胞核中。在细胞核内部，宿主DNA修复酶将RCDNA转化为 cccDNA。cccDNA充当所有病毒mRNA的模板并由此负责在感染个体中的HBV持久性。由cccDNA生成的转录物被分成两类：前基因组RNA (pgRNA)和次基因组RNA。次基因组转录物编码三种包膜(L、M和S)和 X蛋白，并且pgRNA编码前核、核和Pol蛋白(Quasdorff,M.&U.Protzer. J Viral Hepat,17,(2010),527-36)。HBV基因表达或HBV RNA合成的抑 制导致HBV病毒复制和抗原生成的抑制(Mao,R.等人,PLoS Pathog,9, (2013),e1003494；Mao,R.等人,J Virol,85,(2011),1048-57)。例如，IFN-α 显示通过减少从HBV共价闭合环状DNA(cccDNA)微型染色体的pgRNA 和次基因组RNA的转录而抑制HBV复制和病毒HBsAg生成。(Belloni,L. 等人,J Clin Invest,122,(2012),529-37；Mao,R.等人,JVirol,85,(2011), 1048-57)。所有HBV病毒mRNA被帽化并且多腺苷酸化，然后输出至细 胞质用于翻译。在细胞质中，新病毒子的组装被引发并且初生的pgRNA 被病毒Pol包裹，以使能够出现pgRNA经由单链DNA中间体逆转录为 RC DNA。含有RC DNA的成熟核壳体被细胞质粒以及病毒L、M和S 蛋白包封，然后感染性HBV颗粒接着通过在细胞内膜处芽殖而释放(Locarnini,S.Semin Liver Dis,(2005),25Suppl 1,9-19)。令人感兴趣的 是，也生成非感染性颗粒，其在数量上极大地多于感染性病毒子。这些空 的、包封的颗粒(L、M和S)被称为亚病毒颗粒。重要地，由于亚病毒颗 粒与感染性颗粒具有相同的包膜蛋白，已经推测它们充当宿主免疫系统的 诱饵并且已被用于HBV疫苗。S、M和L包膜蛋白由含有3个不同起始密码子的单个ORF表达。所有三种蛋白在它们的C-末端共享226aa序列、 S-结构域。M和L分别具有另外的pre-S结构域，Pre-S2以及Pre-S2和 Pre-S1。然而，正是S-结构域具有HBsAg表位(Lambert,C.&R.Prange. Virol J,(2007),4,45)。
病毒感染的控制需要宿主先天免疫系统的密切监视，其可以在感染后 数分钟至数小时内产生响应以影响病毒的初始生长，并且限制慢性和持久 感染的发展。尽管目前有基于IFN和核苷(核苷酸)类似物的治疗，但是乙 型肝炎病毒(HBV)感染仍然是世界范围内的主要健康问题，其涉及估计约 3亿5千万慢性携带者，他们具有更高的肝硬化和肝细胞癌的风险。
肝细胞和/或肝内免疫细胞响应于HBV感染而分泌抗病毒细胞因子 在被感染肝的病毒清除中起关键作用。然而，由于病毒采用了多种逃避策 略来对抗宿主细胞识别系统和随后的抗病毒响应，慢性感染的患者仅显示 出弱的免疫响应。
许多观察结果显示若干HBV病毒蛋白可以通过干扰病毒识别信号转 导系统并随后干扰干扰素(IFN)抗病毒活性而对抗最初的宿主细胞响应。 其中，HBV空亚病毒颗粒(SVP，HBsAg)的过度分泌可以参与在慢性感染 患者(CHB)中观察到的免疫耐受状态的维持。持续暴露于HBsAg和其他 病毒抗原可以导致HBV-特异性T细胞缺失或导致进行性的功能受损 (Kondo等人,Journal of Immunology(1993),150,4659-4671；Kondo等人,Journal of Medical Virology(2004),74,425-433；Fisicaro等人, Gastroenterology,(2010),138,682-93)。此外，HBsAg已被报道通过直接 相互作用而抑制免疫细胞如单核细胞、树突细胞(DC)和自然杀伤(NK)细 胞的功能(Op den Brouw等人,Immunology,(2009b),126,280-9； Woltman等人,PLoS One,(2011),6,e15324；Shi等人,J Viral Hepat.(2012),19,e26-33；Kondo等人,ISRN Gasteroenterology,(2013), 文章编号935295)。
HBsAg定量是用于慢性乙型肝炎中的预后和治疗响应的显著生物标 志物。然而，在慢性感染患者中很少观察到HBsAg消失和血清转化，其 仍然是治疗的终极目标。当前疗法如核苷(核苷酸)类似物是抑制HBV DNA合成但不降低HBsAg水平的分子。即使采用延长的治疗，核苷(核 苷酸)类似物所显示的HBsAg清除率也与天然观察到的那些相当(在 -1％-2％之间)(Janssen等人,Lancet,(2005),365,123-9；Marcellin等人,N. Engl.J.Med.,(2004),351,1206-17；Buster等人,Hepatology,(2007),46, 388-94)。因此，在CHB患者中，靶向于HBsAg连同HBV DNA水平可 以显著地改善CHB患者的免疫再激活和缓解(Wieland,S.F.& F.V.Chisari.J Virol,(2005),79,9369-80；Kumar等人,J Virol,(2011),85, 987-95；Woltman等人,PLoS One,(2011),6,e15324；Op den Brouw等人, Immunology,(2009b),126,280-9)。
发明概述
本发明涉及式I的化合物或其可药用盐或对映体
其中
R1、R2、R3和R4独立地选自C1-6烷基、卤代C1-6烷基、氢、卤素、氰基、 氨基、C1-6烷基氨基、二C1-6烷基氨基、吡咯烷基和OR6；
R5是氢或C1-6烷基；
R6是氢；C1-6烷基；卤代C1-6烷基；C3-7环烷基C1-6烷基；苯基C1-6烷基； 羟基C1-6烷基；C1-6烷氧基C1-6烷基；羧基C1-6烷基；C1-6烷硫基C1-6烷 基；C1-6烷基磺酰基C1-6烷基；氰基C1-6烷基；氨基C1-6烷基；C1-6烷基 氨基C1-6烷基；二C1-6烷基氨基C1-6烷基；C1-6烷基羰基氨基C1-6烷基； C1-6烷基磺酰基氨基C1-6烷基；C1-6烷氧基羰基氨基C1-6烷基；吡唑基 C1-6烷基；三唑基C1-6烷基或杂环烷基C1-6烷基，其中的杂环烷基是含 氮单环杂环烷基；
Ar是苯基；被一个、两个或三个独立地选自C1-6烷基、C1-6烷氧基、羟 基、卤素和苯基C1-6烷氧基的基团取代的苯基；噻吩基；被一个、两 个或三个独立地选自C1-6烷基、C1-6烷氧基、羟基、卤素和苯基C1-6烷氧基的基团取代的噻吩基；苯并噻吩基；被一个、两个或三个独立 地选自C1-6烷基、C1-6烷氧基、羟基、卤素和苯基C1-6烷氧基的基团 取代的苯并噻吩基；吡啶基；被一个、两个或三个独立地选自C1-6烷 基、C1-6烷氧基、羟基、卤素和苯基C1-6烷氧基的基团取代的吡啶基； 嘧啶基；被一个、两个或三个独立地选自C1-6烷基、C1-6烷氧基、羟基、卤素和苯基C1-6烷氧基的基团取代的嘧啶基；吡咯基；被一个、 两个或三个独立地选自C1-6烷基、C1-6烷氧基、羟基、卤素和苯基 C1-6烷氧基的基团取代的吡咯基；吡唑基；被一个、两个或三个独立 地选自C1-6烷基、C1-6烷氧基、羟基、卤素和苯基C1-6烷氧基的基团 取代的吡唑基；噻唑基；或被一个、两个或三个独立地选自C1-6烷基、 C1-6烷氧基、羟基、卤素和苯基C1-6烷氧基的基团取代的噻唑基。
发明详述
定义
如本文中使用的，单独的或组合中的术语“C1-6烷基”表示含有1至6 个、特别是1至4个碳原子的饱和的直链或支链烷基基团，例如甲基、乙 基、丙基、异丙基、1-丁基、2-丁基、叔丁基等。特别的，“C1-6烷基”基 团是甲基、乙基、异丙基和叔丁基。
单独的或组合中的术语“C3-7环烷基”是指含有3至7个碳原子、特别 是3至6个碳原子的饱和碳环，例如，环丙基、环丁基、环戊基、环己基、 环庚基等。特别的，“C3-7环烷基”基团是环丙基、环丁基、环戊基和环己 基。
单独的或组合中的术语“C1-6烷氧基”表示基团C1-6烷基-O-，其中“C1-6烷基”如以上所定义；C1-6烷氧基的例子是甲氧基、乙氧基、丙氧基、异 丙氧基、正丁氧基、异丁氧基、2-丁氧基、叔丁氧基等。特别的，“C1-6烷氧基”基团是甲氧基和乙氧基，并且更特别地是甲氧基。
术语“卤素”表示氟、氯、溴或碘。
术语“卤代C1-6烷基”是指其中至少一个C1-6烷基的氢原子被相同不不 同的卤素原子、特别是氟原子替代了的C1-6烷基。“卤代C1-6烷基”的例子 包括单氟-、二氟-或三氟-甲基、-乙基或-丙基，例如3,3,3-三氟丙基、3,3- 二氟丙基、2-氟乙基、2,2-二氟乙基、2,2,2-三氟乙基、氟甲基、二氟甲基 或三氟甲基。特别的，“卤代C1-6烷基”是二氟甲基或三氟甲基。
术语“单环杂环烷基”是指4至7个环原子的单价饱和或部分不饱和的 单环环系，其包含1、2或3个选自N、O和S的环杂原子，其余的环原 子是碳。单环杂环烷基的例子是氮杂环丙烷基、氧杂环丙烷基、氮杂环丁 烷基、氧杂环丁烷基、吡咯烷基、2-氧代-吡咯烷基、四氢呋喃基、四氢- 噻吩基、吡唑烷基、咪唑烷基、唑烷基、异唑烷基、噻唑烷基、哌啶基、四氢吡喃基、四氢噻喃基、哌嗪基、吗啉基、硫吗啉基、1,1-二氧代 -硫吗啉-4-基、氮杂环庚烷基、二氮杂环庚烷基、高哌嗪基或氧氮杂环庚 烷基。特别的，“单环杂环烷基”是哌啶基、吗琳基、2-氧代-吡咯烷基和 吡咯烷基。
术语“含氮单环杂环烷基”是指其中至少一个杂原子是N的以上所定 义的“单环杂环烷基”。“含氮单环杂环烷基”的例子是氮杂环丙烷基、氮 杂环丁烷基、吡咯烷基、2-氧代-吡咯烷基、吡唑烷基、咪唑烷基、唑烷 基、异唑烷基、噻唑烷基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基、硫吗啉基、1,1- 二氧代-硫吗啉-4-基、氮杂环庚烷基、二氮杂环庚烷基、高哌嗪基或氧氮 杂环庚烷基。特别的，“含氮单环杂环烷基”是哌啶基、吗琳基、2-氧代- 吡咯烷基和吡咯烷基。
术语“氨基”是指式-NR’R”的基团，其中R’和R”独立地是氢、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C3-7环烷基、杂C3-7环烷基、芳基或杂芳基。或者， R’和R”与它们所连接的氮一起可以形成杂C3-7环烷基。
单独的或组合中的术语“羰基”是指基团-C(O)-。
单独的或组合中的术语“氰基”是指基团-CN。
单独的或组合中的术语“C1-6烷硫基”是指基团-S-R’，其中R’是以上 所定义的C1-6烷基。
单独的或组合中的术语“C1-6烷基磺酰基”是指基团-SO2-R’，其中R’ 是以上所定义的C1-6烷基。C1-6烷基磺酰基包括甲基磺酰基和乙基磺酰基。
术语“对映体”表示化合物的两种彼此互为不能重叠的镜像的立体异 构体。
术语“非对映体”是指具有两个或多个手性中心并且其分子不互为镜 像的立体异构体。非对映体具有不同的物理性质，例如熔点、沸点、光谱 特性和反应性。
本发明的化合物可以以它们的可药用盐的形式存在。术语“可药用盐” 是指常规酸加成盐或碱加成盐，其保留式I化合物的生物学有效性和性能 并且形成自合适的无毒有机或无机酸或者有机或无机碱。酸加成盐包括例 如衍生自无机酸的那些和衍生自有机酸的那些，所述无机酸如盐酸、氢溴 酸、氢碘酸、硫酸、氨基磺酸、磷酸和硝酸，所述有机酸如对甲苯磺酸、 水杨酸、甲磺酸、草酸、琥珀酸、柠檬酸、苹果酸、乳酸、富马酸等。碱 加成盐包括衍生自铵、钾、钠和季铵的氢氧化物例如四甲基氢氧化铵的那 些。药物化合物成盐的化学修饰是药物化学家熟知的技术，用以获得化合 物改善的物理和化学稳定性、吸湿性、流动性和溶解性。其例如描述于 Bastin R.J.等人,Organic Process Research&Development(有机工艺研 发)2000,4,427-435；或Ansel,H.等人,Pharmaceutical DosageForms and Drug Delivery Systems(药物剂型和药物递送系统),第6版(1995),pp.196 和1456-1457。特别是式I化合物的钠盐。
含有一个或多个手性中心的通式I的化合物可以作为外消旋物、非对 映体混合物或光学活性的单个异构体存在。外消旋物可以根据已知方法分 离成对映体。特别地，可以通过结晶分离的非对映体盐由外消旋混合物与 光学活性的酸例如D-或L-酒石酸、扁桃酸、苹果酸、乳酸或樟脑磺酸反 应而形成。
HBsAg的抑制剂
本发明提供了(i)具体通式I的新化合物或其可药用盐或对映体:
其中
R1、R2、R3和R4独立地选自C1-6烷基、卤代C1-6烷基、氢、卤素、氰基、 氨基、C1-6烷基氨基、二C1-6烷基氨基、吡咯烷基和OR6；
R5是氢或C1-6烷基；
R6是氢；C1-6烷基；卤代C1-6烷基；C3-7环烷基C1-6烷基；苯基C1-6烷基； 羟基C1-6烷基；C1-6烷氧基C1-6烷基；羧基C1-6烷基；C1-6烷硫基C1-6烷 基；C1-6烷基磺酰基C1-6烷基；氰基C1-6烷基；氨基C1-6烷基；C1-6烷基 氨基C1-6烷基；二C1-6烷基氨基C1-6烷基；C1-6烷基羰基氨基C1-6烷基； C1-6烷基磺酰基氨基C1-6烷基；C1-6烷氧基羰基氨基C1-6烷基；吡唑基 C1-6烷基；三唑基C1-6烷基或杂环烷基C1-6烷基，其中的杂环烷基是含 氮单环杂环烷基；
Ar是苯基；被一个、两个或三个独立地选自C1-6烷基、C1-6烷氧基、羟 基、卤素和苯基C1-6烷氧基的基团取代的苯基；噻吩基；被一个、两个 或三个独立地选自C1-6烷基、C1-6烷氧基、羟基、卤素和苯基C1-6烷 氧基的基团取代的噻吩基；苯并噻吩基；被一个、两个或三个独立地选 自C1-6烷基、C1-6烷氧基、羟基、卤素和苯基C1-6烷氧基的基团取代 的苯并噻吩基；吡啶基；被一个、两个或三个独立地选自C1-6烷基、 C1-6烷氧基、羟基、卤素和苯基C1-6烷氧基的基团取代的吡啶基；嘧 啶基；被一个、两个或三个独立地选自C1-6烷基、C1-6烷氧基、羟基、卤素和苯基C1-6烷氧基的基团取代的嘧啶基；吡咯基；被一个、两个 或三个独立地选自C1-6烷基、C1-6烷氧基、羟基、卤素和苯基C1-6烷 氧基的基团取代的吡咯基；吡唑基；被一个、两个或三个独立地选自 C1-6烷基、C1-6烷氧基、羟基、卤素和苯基C1-6烷氧基的基团取代的 吡唑基；噻唑基；或被一个、两个或三个独立地选自C1-6烷基、C1-6烷氧基、羟基、卤素和苯基C1-6烷氧基的基团取代的噻唑基。 本发明的另一个实施方案是(ii)式I的化合物或其可药用盐或对映体， 其中
R1是氢；
R2是氢、卤素或C1-6烷氧基；
R3是C1-6烷基、吡咯烷基或OR6；
R4是C1-6烷基或氢；
R5是氢；
R6是C1-6烷基、卤代C1-6烷基、C3-7环烷基C1-6烷基、苯基C1-6烷基、羟 基C1-6烷基、C1-6烷氧基C1-6烷基、羧基C1-6烷基、C1-6烷硫基C1-6烷 基、C1-6烷基磺酰基C1-6烷基、氰基C1-6烷基、氨基C1-6烷基、C1-6烷 基羰基氨基C1-6烷基、C1-6烷基磺酰基氨基C1-6烷基、C1-6烷氧基羰基 氨基C1-6烷基、吡唑基C1-6烷基、三唑基C1-6烷基、哌啶基C1-6烷基、 吗琳基C1-6烷基或2-氧代吡咯烷基C1-6烷基；
Ar是苯基；被C1-6烷基、C1-6烷氧基、羟基、卤素或苯基C1-6烷氧基取 代的苯基；噻吩基；被C1-6烷基取代的噻吩基；或苯并噻吩基。
本发明的另一个实施方案是(iii)如上所定义的式I化合物或其可药用 盐或对映体，其中R1是氢、R4是氢、R5是氢，并且所有其它的取代基 具有以上给出的含义。
本发明的另一个实施方案是(iv)如上所定义的式I化合物或其可药用 盐或对映体，其中R2是C1-6烷氧基，并且所有其它的取代基具有以上给 出的含义。
本发明的另一个实施方案是(v)如上所定义的式I化合物或其可药用 盐或对映体，其中R2是甲氧基，并且所有其它的取代基具有以上给出的 含义。
本发明的另一个实施方案是(vi)如上所定义的式I化合物或其可药用 盐或对映体，其中R3是吡咯烷基或OR6，其中R6是C1-6烷基、卤代C1-6烷基、C3-7环烷基C1-6烷基、羟基C1-6烷基、C1-6烷氧基C1-6烷基、羧基 C1-6烷基、C1-6烷硫基C1-6烷基、氰基C1-6烷基、氨基C1-6烷基、C1-6烷 基羰基氨基C1-6烷基、C1-6烷基磺酰基氨基C1-6烷基或C1-6烷氧基羰基氨 基C1-6烷基，并且所有其它的取代基具有以上给出的含义。
本发明的另一个实施方案是(vii)如上所定义的式I化合物或其可药用 盐或对映体，其中R3是OR6，其中R6是甲基、异丁基、三氟乙基、环 丙基甲基、氰基丙基、羟基丙基、羟基己基、羟基二甲基丙基、甲氧基丙 基、羧基丙基、甲硫基丙基、氨基己基、甲基羰基氨基己基、甲基磺酰基 氨基己基或甲氧基羰基氨基己基，并且所有其它的取代基具有以上给出的含义。
本发明的另一个实施方案是(viii)如上所定义的式I化合物或其可药用 盐或对映体，其中Ar是苯基、被C1-6烷基或卤素取代的苯基、噻吩基或 被C1-6烷基取代的噻吩基，并且所有其它的取代基具有以上给出的含义。
本发明的另一个实施方案是(ix)如上所定义的式I化合物或其可药用 盐或对映体，其中Ar是苯基；被甲基、氟或氯取代的苯基；噻吩基或被 甲基取代的噻吩基，并且所有其它的取代基具有以上给出的含义。
本发明的另一个实施方案是(x)如上所定义的式I化合物或其可药用 盐或对映体，其中
R1是氢；
R2是C1-6烷氧基；
R3是吡咯烷基或OR6；
R4是氢；
R5是氢；
R6是C1-6烷基、卤代C1-6烷基、C3-7环烷基C1-6烷基、羟基C1-6烷基、C1-6烷氧基C1-6烷基或C1-6烷硫基C1-6烷基；
Ar是被C1-6烷基取代的苯基，或噻吩基。
本发明的另一个实施方案是(x)如上所定义的式I化合物或其可药用 盐或对映体，其中
R1是氢；
R2是甲氧基；
R3是吡咯烷基或OR6；
R4是氢；
R5是氢；
R6是异丁基、三氟乙基、环丙基甲基、羟基二甲基丙基、甲氧基丙基或 甲硫基丙基；
Ar是被甲基取代的苯基，或噻吩基。
本发明的具体的式I化合物是如下化合物:
10-甲氧基-9-(3-甲氧基丙氧基)-2-氧代-6-苯基-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3- 甲酸；
10-甲氧基-9-(3-甲氧基丙氧基)-2-氧代-6-(3-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a] 喹嗪-3-甲酸；
10-甲氧基-9-(3-甲氧基丙氧基)-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a] 喹嗪-3-甲酸；
6-(4-羟基苯基)-10-甲氧基-9-(3-甲氧基丙氧基)-2-氧代-6,7-二氢苯并[a] 喹嗪-3-甲酸；
10-甲氧基-6-(4-甲氧基苯基)-9-(3-甲氧基丙氧基)-2-氧代-6,7-二氢苯 并[a]喹嗪-3-甲酸；
6-(4-苄氧基苯基)-10-甲氧基-9-(3-甲氧基丙氧基)-2-氧代-6,7-二氢苯 并[a]喹嗪-3-甲酸；
10-甲氧基-9-(3-甲氧基丙氧基)-6-(4-甲基-2-噻吩基)-2-氧代-6,7-二氢 苯并[a]喹嗪-3-甲酸；
6-(3-氯苯基)-10-甲氧基-9-(3-甲氧基丙氧基)-2-氧代-6,7-二氢苯并[a] 喹嗪-3-甲酸；
6-(4-氟苯基)-10-甲氧基-9-(3-甲氧基丙氧基)-2-氧代-6,7-二氢苯并[a] 喹嗪-3-甲酸；
10-甲氧基-9-(3-甲氧基丙氧基)-6-(邻甲苯基)-2-氧代-6,7-二氢苯并[a] 喹嗪-3-甲酸；
9-甲氧基-8-甲基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸；
9-苄氧基-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲 酸；
9,10-二甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸；
9-异丁氧基-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲 酸；
9-(环丙基甲氧基)-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹 嗪-3-甲酸；
10-甲氧基-2-氧代-9-(3-吡唑-1-基丙氧基)-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并 [a]喹嗪-3-甲酸；
9-(3-羟基丙氧基)-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹 嗪-3-甲酸；
10-甲氧基-2-氧代-9-[3-(1-哌啶基)丙氧基]-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并 [a]喹嗪-3-甲酸甲酸盐；
9-(3-氰基丙氧基)-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹 嗪-3-甲酸；
10-甲氧基-2-氧代-9-[2-(2-氧代吡咯烷-1-基)乙氧基]-6-(2-噻吩基)-6,7- 二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸；
9-[6-(叔丁氧基羰基氨基)己氧基]-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7- 二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸；
9-(6-氨基己氧基)-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹 嗪-3-甲酸甲酸盐；
9-(6-乙酰氨基己氧基)-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a] 喹嗪-3-甲酸；
9-[6-(甲磺酰氨基)己氧基]-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯 并[a]喹嗪-3-甲酸；
9-(6-羟基己氧基)-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹 嗪-3-甲酸；
9-(3-羟基-2,2-二甲基-丙氧基)-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二 氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸；
10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-9-(2,2,2-三氟乙氧基)-6,7-二氢苯并[a] 喹嗪-3-甲酸；
10-甲氧基-9-(3-吗啉代丙氧基)-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a] 喹嗪-3-甲酸酯；
10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-9-[3-(1,2,4-三唑-1-基)丙氧基]-6,7-二 氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸；
9-(3-羧基丙氧基)-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹 嗪-3-甲酸；
10-甲氧基-9-(3-甲硫基丙氧基)-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a] 喹嗪-3-甲酸；
10-甲氧基-9-(3-甲基磺酰基丙氧基)-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯 并[a]喹嗪-3-甲酸；
10-甲氧基-9-甲基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸；
9-乙基-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸；
10-甲氧基-2-氧代-9-丙基-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸；
10-甲氧基-2-氧代-9-吡咯烷-1-基-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪 -3-甲酸；
6-(苯并噻吩-2-基)-10-氯-9-(3-甲氧基丙氧基)-2-氧代-6,7-二氢苯并[a] 喹嗪-3-甲酸；
或其可药用盐或对映体。
更具体地讲，本发明涉及如下式I化合物:
10-甲氧基-9-(3-甲氧基丙氧基)-2-氧代-6-(3-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a] 喹嗪-3-甲酸；
10-甲氧基-9-(3-甲氧基丙氧基)-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a] 喹嗪-3-甲酸；
10-甲氧基-9-(3-甲氧基丙氧基)-6-(邻甲苯基)-2-氧代-6,7-二氢苯并[a] 喹嗪-3-甲酸；
9-异丁氧基-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲 酸；
9-(环丙基甲氧基)-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹 嗪-3-甲酸；
9-(3-羟基-2,2-二甲基-丙氧基)-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二 氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸；
10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-9-(2,2,2-三氟乙氧基)-6,7-二氢苯并[a] 喹嗪-3-甲酸；
10-甲氧基-9-(3-甲硫基丙氧基)-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a] 喹嗪-3-甲酸；
10-甲氧基-2-氧代-9-吡咯烷-1-基-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪 -3-甲酸；
或其可药用盐或对映体。
合成
本发明的化合物可以通过任何常规手段制备。用于合成这些化合物的 合适方法以及它们的起始原料在以下流程和实施例中提供。除非另有指 明，所有取代基，特别是R1至R5和Ar如上所定义。此外，除非另有明 确说明，所有反应、反应条件、缩写和符号具有有机化学领域的普通技术 人员熟知的含义。
用于化合物I的通用合成路线(流程1)
流程1
式I的化合物可以按照流程1制备。溴-苯II与酮III的偶联反应生成 化合物IV。反应可在Pd催化剂例如Pd2(dba)3、Pd(PPh3)4或PdCl2(PPh3)2、 配体例如Xantphos和适宜的碱例如t-BuONa、Na2CO3或Cs2CO3的存在 下、在适宜的溶剂例如THF、甲苯或1,4-二恶烷中，在室温至130℃的 温度下进行。将化合物IV还原胺化生成化合物V。将化合物V与甲酸乙 酯或甲酸一起在溶剂例如乙醇或二恶烷中加热得到化合物XI。将化合物 XI用POCl3在适宜的溶剂例如乙腈或DCM中、在室温至100℃的温度 下处理得到化合物XII。将化合物XII与2-(乙氧基亚甲基)-3-氧代-丁酸 C1-6烷基酯在溶剂例如乙醇中反应得到化合物XIII。通过将化合物XIII 用对-四氯苯醌脱氢得到化合物XIV。将化合物XIV用碱例如氢氧化锂或 氢氧化钠在适宜的溶剂例如THF/H2O、EtOH/H2O或MeOH/H2O中水解 得到式I化合物。
用于化合物I-1的通用合成路线(流程2)
流程2
式I-1的化合物可以按照流程2制备。化合物XIV-1通过在Pd/C的 存在下在溶剂例如乙醇、THF、甲醇中氢化脱苄基化生成化合物XIV-2。 然后将化合物XIV-2与卤化物、甲磺酸酯或甲苯磺酸酯在碱例如K2CO3的存在下、在溶剂例如丙酮或DMF中反应得到XIV-3。将化合物XIV用 碱例如氢氧化锂或氢氧化钠在适宜的溶剂例如THF/H2O、EtOH/H2O或 MeOH/H2O中水解得到式I-1的化合物。
本发明还涉及制备式I化合物的方法，包括
(a)水解式(A)的化合物
(A)；或
(b)水解式(B)的化合物
其中R1至R77和Ar如以上所定义，除非另有指明。
按照上述方法制备的式I的化合物也是本发明的目的之一。
药物组合物和给药
本发明还涉及用作治疗活性物质的式I的化合物。
另一个实施方案提供含有本发明的化合物和治疗上惰性的载体、稀释 剂或赋形剂的药物组合物或药物，以及使用本发明的化合物来制备这些组 合物和药物的方法。在一个实施例中，式I的化合物可以通过在环境温度 下、在适当pH下并以所需的纯度与生理学可接受的载体(即，在所采用 的剂量和浓度下对接受者是无毒的载体)混合而配制成盖仑制剂给药形 式。制剂的pH主要取决于化合物的具体用途和浓度，但优选约3至约8 的任意范围。在一个实施例中，式I的化合物在pH 5的乙酸盐缓冲液中 配制。在另一个实施方案中，式I的化合物是无菌的。化合物可以例如作 为固体或无定形组合物、作为冻干制剂或作为水溶液储存。
组合物以符合良好医学实践的方式进行配制、定剂量和给药。在此上 下文中考虑的因素包括被治疗的具体病症、被治疗的具体哺乳动物、个体 患者的临床病症、病症的病因、药剂的递送部位、给药方法、给药时间安 排和执业医师已知的其他因素。要给药的化合物的“有效量”将受这些考虑 控制，并且是抑制HBsAg所需的最低量。例如，这样的量可以低于对正 常细胞或作为整体的哺乳动物而言是有毒的量。
在一个实施例中，每个剂量胃肠外给药的本发明化合物的药物有效量 将在约0.01至100mg/kg，或者约0.01至100mg/kg患者体重/天的范围内， 其中所使用的化合物的典型初始范围为0.3至15mg/kg/天。在另一个实施 方案中，口服单位剂型如片剂和胶囊，优选含有约0.1至约1000mg的本 发明化合物。
本发明的化合物可以通过任何合适的方式给药，包括经口、局部(包 括含服和舌下)、直肠、阴道、透皮、胃肠外、皮下、腹膜内、肺内、皮 内、鞘内和硬膜外及鼻内给药，以及在期望用于局部治疗时，病变内给药。 胃肠外输注包括肌肉内、静脉内、动脉内、腹膜内或皮下给药。
本发明的化合物可以以任何方便的给药形式给药，例如片剂、粉剂、 胶囊、溶液、分散液、混悬剂、糖浆剂、喷雾剂、栓剂、凝胶、乳液、贴 剂等。这些组合物可以含有药物制剂中常见的组分，例如稀释剂、载体、 pH调节剂、甜味剂、填充剂和其他活性物质。
典型制剂通过混合本发明的化合物和载体或赋形剂进行制备。合适的 载体和赋形剂对于本领域技术人员是熟知的并且详细描述于例如Ansel, Howard C.等人，Ansel’s Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems.Philadelphia:Lippincott,Williams&Wilkins,2004； Gennaro,Alfonso R.等人，Remington:The Science and Practice of Pharmacy.Philadelphia:Lippincott,Williams&Wilkins,2000；和Rowe, Raymond C.Handbook of Pharmaceutical Excipients.Chicago,Pharmaceutical Press,2005。所述制剂还可以包含一种或多种缓冲剂、稳 定剂、表面活性剂、湿润剂、润滑剂、乳化剂、助悬剂、防腐剂、抗氧化 剂、遮光剂、助流剂、加工助剂、着色剂、甜味剂、芳香剂、矫味剂、稀 释剂和其它公知的添加剂，以便使药物(即本发明的化合物或其药物组合 物)具有优美的外观或有助于制备药物产品(即药物)。
适合的口服剂型的实例是包含约0.1至1000mg的本发明的化合物、 约0至2000mg无水乳糖、约0至2000mg交联羧甲基纤维素钠、约0至 2000mg聚乙烯吡咯烷酮(PVP)K30和约0至2000mg硬脂酸镁的片剂。 首先将粉状成分混合在一起，然后与PVP的溶液混合。可以将所得组合 物干燥、制粒、与硬脂酸镁混合并使用常规设备压制成片剂。气雾剂制剂 的一个实例可以通过将例如0.1至1000mg的本发明化合物溶解在合适缓 冲溶液例如磷酸盐缓冲液中，在需要时添加张力剂例如盐如氯化钠而制 备。所述溶液可以过滤，例如使用0.2微米滤器过滤，以除去杂质和污染 物。
因此，一个实施方案包括药物组合物，其包含式I的化合物或其立体 异构体或可药用盐。在另一个实施方案中，包括药物组合物，其包含式I 的化合物或其立体异构体或可药用盐以及可药用载体或赋形剂。
以下实施例A和B示例本发明的典型组合物，但是其仅仅是作为本 发明的代表。
实施例A
式I的化合物可以以本身已知的方式用作生产具有以下组成的片剂的 活性成分：
实施例B
式I的化合物可以以本身已知的方式用作生产具有以下组成的胶囊的 活性成分：
适应症和治疗方法
本发明的化合物可以抑制HBsAg生成或分泌并且抑制HBV基因表 达。因此，本发明的化合物可用于治疗或预防HBV感染。
本发明涉及式I的化合物用于抑制HBsAg生成或分泌的用途。
本发明涉及式I的化合物用于抑制HBV DNA生成的用途。
本发明涉及式I的化合物用于抑制HBV基因表达的用途。
本发明涉及式I的化合物用于治疗或预防HBV感染的用途。
式I化合物用于制备可用于治疗或预防与HBV感染相关的疾病的药 物的用途是本发明的一个目的。
本发明特别涉及式I化合物用于制备用于治疗或预防HBV感染的药 物的用途。
另一个实施方案包括一种用于治疗或预防HBV感染的方法，所述方 法包括施用有效量的式I的化合物、其立体异构体、互变异构体、前药、 缀合物或可药用盐。
组合疗法
本发明的化合物可与其他抗HBV药物例如干扰素α-2b、干扰素α-2a 和干扰素alphacon-1(聚乙二醇化的和未聚乙二醇化的)、利巴韦林、拉米 夫定(3TC)、恩替卡韦、替诺福韦、替比夫定(LdT)、阿德福韦酯或其他新 兴的抗HBV药物如HBV RNA复制抑制剂、HBsAg分泌抑制剂、HBV衣壳 蛋白抑制剂、反义寡核苷酸、siRNA、HBV治疗疫苗、HBV预防性疫苗、 HBV抗体疗法(单克隆或多克隆)和TLR 2、3、7、8和9激动剂组合用于治 疗或预防HBV。
实施例
通过参照以下实施例可以更完整地理解本发明。然而，不应将它们视 为限定本发明的范围。
本文中使用的缩写如下：
μL： 微升
μm： 微米
μM： 微摩尔/升
Ar: 氩气
DIPEA: N,N-二异丙基乙基胺
DME: 1,2-二甲氧基乙烷
DMF: 二甲基甲酰胺
DMSO-d6: 氘代二甲基亚砜
EtOAc: 乙酸乙酯
h或hr: 小时
hrs: 小时
IC50: 半数最大抑制浓度
HCMV: 人巨细胞病毒
HIV: 人免疫缺陷病毒
HSV: 单纯疱疹病毒
HPV: 人乳头状瘤病毒
HPLC: 高效液相色谱
LC/MS: 液相色谱/质谱
m-CPBA: 间-氯过氧苯甲酸
MeOH: 甲醇
METHANOL-d4: 氘代甲醇
M: 摩尔浓度
mg: 毫克
MHz: 兆赫
min: 分钟
mL: 毫升
mM: 毫摩尔/升
mm: 毫米
mmol: 毫摩尔
MS(ESI): 质谱(电子喷雾电离)
NMR: 核磁共振
N2: 氮气
rt: 室温
Pd/C: 钯/活性碳
Pd(PPh3)4: 四(三苯基膦)钯
Pd(dppf)Cl2: [1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)
PE或Pet: 石油醚
制备型HPLC: 制备型高效液相色谱
TFA: 三氟乙酸
TLC: 薄层色谱
δ: 化学位移
Xantphos: 9,9-二甲基-4,5-双(二苯基膦基)氧杂蒽
Pd2(dba)3: 三(二亚苄基丙酮)二钯(0)
t-BuONa: 叔丁醇钠
通用实验条件
中间体和最终化合物通过快速色谱使用以下仪器之一进行纯化：i) Biotage SP1系统和Quad 12/25Cartridge组件；ii)ISCO组合快速色谱仪。 硅胶品牌和孔径：i)KP-SIL粒度：40-60μm；ii)CAS注册号：硅 胶：63231-67-4，粒度：47-60微米硅胶；iii)来自青岛海洋化工股份有限 公司(Qingdao Haiyang Chemical Co.,Ltd)的ZCX，孔：200-300或300-400。
中间体和最终化合物通过使用X BridgeTM Perp C18(5μm,OBDTM 30×100mm)柱或SunFireTM Perp C18(5μm,OBDTM 30×100mm)柱的反相 柱的制备型HPLC纯化。
LC/MS光谱使用Acquity Ultra Performance LC-3100质量检测器或 AcquityUltra Performance LC-SQ检测器获得。标准LC/MS条件如下(运 行时间3分钟)：
酸性条件：A：0.1％甲酸的H2O溶液；B：0.1％甲酸的乙腈溶液；
碱性条件：A：0.05％NH3·H2O的H2O溶液；B：乙腈；
中性条件：A：H2O；B：乙腈。
质谱(MS)：通常仅报告指示母核质量的离子，并且除非另有说明， 引述的质量离子是正质量离子(M+H)+。
微波辅助反应在Biotage Initiator Sixty或CEM Discover中进行。
NMR谱图使用Bruker Avance 400MHz获得。
所有涉及空气敏感试剂的反应均在氩气氛下进行。除非另有说明，试 剂在从商业供应商处获得后不经进一步纯化直接使用。
制备实施例
实施例1:10-甲氧基-9-(3-甲氧基丙氧基)-2-氧代-6-苯基-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸
步骤1:4-溴-1-甲氧基-2-(3-甲氧基丙氧基)苯的制备
向5-溴-2-甲氧基-苯酚(10.0g,49.5mmol)的MeCN(100mL)溶液中加 入Cs2CO3(48.1g,148mmol)和1-溴-3-甲氧基-丙烷(11.3g,74mmol)。将 混合物回流16小时，然后过滤。将滤液减压浓缩并将残余物通过用石油 醚研磨进行纯化，得到白色固体状4-溴-1-甲氧基-2-(3-甲氧基丙氧基)苯 (10.5g)。
步骤2:2-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]-1-苯基-乙酮的制备
将4-溴-1-甲氧基-2-(3-甲氧基丙氧基)苯(10.0g,36.4mmol)、1-苯基乙 酮(5.7g,47mmol)、t-BuONa(5.24g,55mmol)、Xantphos(840mg,1.5 mmol)和Pd2(dba)3(660mg,0.73mmol)在THF(100mL)中的混合物在氮 气氛下于80℃搅拌加热5小时。将混合物冷却至室温并过滤。将滤液减 压浓缩。将残余物通过快速柱色谱纯化得到黄色固体状2-[4-甲氧基-3-(3- 甲氧基丙氧基)苯基]-1-苯基-乙酮(9.5g)。
步骤3:2-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]-1-苯基-乙胺的制备
向2-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]-1-苯基-乙酮(9.5g,30.2 mmol)的MeOH(100mL)溶液中于18℃下加入NH4OAc(17.2g,223 mmol)。搅拌1小时后，将形成的混合物冷却至0℃。然后于0℃下向冷 却的混合物中加入NaBH3CN(4g,63.6mmol)。然后将形成的混合物于 50℃下搅拌加热12小时。将得到的反应混合物减压浓缩。将残余物用 H2O(200mL)稀释并用DCM(300mL)萃取。将有机层用盐水(200mL)洗 涤，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩得到黄色油状2-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基 丙氧基)苯基]-1-苯基-乙胺(13.4g)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤。
步骤4:N-[2-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]-1-苯基-乙基]甲酰胺的制备
向2-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]-1-苯基-乙胺(13.0g,41.3 mmol)的二恶烷(150mL)溶液中加入甲酸(13.3g,289mmol)。将混合物于 120℃搅拌加热12小时。冷却至室温后，将形成的混合物减压浓缩。将 残余物用EtOAc(300mL)稀释。将有机混合物用H2O(200mL)和盐水 (200mL,2次)洗涤，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩。将残余物通过柱色谱纯化得到黄色固体状N-[2-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]-1-苯基- 乙基]甲酰胺(2.2g,收率:16％)。
步骤5:7-甲氧基-6-(3-甲氧基丙氧基)-3-苯基-3,4-二氢异喹啉的制备
向N-[2-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]-1-苯基-乙基]甲酰胺(2.0g,5.8mmol)的DCM(20mL)溶液中加入POCl3(2.29g,14.9mmol)。于40℃ 搅拌加热12小时后，将形成的混合物用氨水碱化并用DCM(200mL)萃 取。将有机层用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩。将残余物通过 柱色谱纯化得到绿色固体状7-甲氧基-6-(3-甲氧基丙氧基)-3-苯基-3,4-二 氢异喹啉(500mg)。
步骤6:10-甲氧基-9-(3-甲氧基丙氧基)-2-氧代-6-苯基-1,6,7,11b-四氢苯 并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯的制备
将7-甲氧基-6-(3-甲氧基丙氧基)-3-苯基-3,4-二氢异喹啉(500mg,1.54 mmol)和2-(乙氧基亚甲基)-3-氧代-丁酸乙酯(688mg,3.69mmol)的EtOH (5mL)溶液于100℃搅拌加热48小时。冷却至室温后，将形成的混合物 减压浓缩得到10-甲氧基-9-(3-甲氧基丙氧基)-2-氧代-6-苯基-1,6,7,11b-四 氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯粗品，其不经进一步纯化直接用于下一步骤。
步骤7:10-甲氧基-9-(3-甲氧基丙氧基)-2-氧代-6-苯基-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯的制备
向10-甲氧基-9-(3-甲氧基丙氧基)-2-氧代-6-苯基-1,6,7,11b-四氢苯并[a] 喹嗪-3-甲酸乙酯(916mg,1.97mmol)的DME(10mL)溶液中加入对-四氯 苯醌(486mg,1.97mmol)。将形成的混合物在氮气氛下于70℃搅拌加热 3小时。然后将混合物过滤。将滤液减压浓缩。将残余物溶于DCM。将 形成的溶液用NaHCO3水溶液和盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥并减压浓 缩得到黄色固体状10-甲氧基-9-(3-甲氧基丙氧基)-2-氧代-6-苯基-6,7-二氢 苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯粗品(1.2g)，其不经进一步纯化直接用于下一步 骤。
步骤8:10-甲氧基-9-(3-甲氧基丙氧基)-2-氧代-6-苯基-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸的制备
向10-甲氧基-9-(3-甲氧基丙氧基)-2-氧代-6-苯基-6,7-二氢苯并[a]喹嗪 -3-甲酸乙酯(1.02g,2.2mmol)的MeOH(10mL)溶液中加入2M NaOH水 溶液(2.2mL)。将混合物于18℃搅拌16小时，然后减压浓缩。将残余物 用2M盐酸酸化至pH＝3。然后将得到的含水混合物用DCM萃取。将有 机层用无水硫酸钠干燥并减压浓缩。将残余物通过制备型HPLC纯化得到浅黄色固体状10-甲氧基-9-(3-甲氧基丙氧基)-2-氧代-6-苯基-6,7-二氢苯 并[a]喹嗪-3-甲酸(5mg)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ1.87-1.98(m, 2H)3.21(s,3H)3.42(t,3H)3.66(dd,1H)3.85(s,3H)4.00(t,2H)6.08 (br.s.,1H)6.93(s,1H)6.98(d,2H)7.19-7.33(m,3H)7.51(s,1H)7.58 (s,1H)8.82(s,1H)。MS实测值(ESI+)[(M+H)+]:435。
实施例2:10-甲氧基-9-(3-甲氧基丙氧基)-2-氧代-6-(3-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸
步骤1:2-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]-1-(3-噻吩基)乙酮的制备
将4-溴-1-甲氧基-2-(3-甲氧基丙氧基)苯(16.5g,60mmol)、1-(3-噻吩 基)乙酮(9.84g,78mmol)、t-BuONa(8.64g,90mmol)、Xantphos(1.39g, 2.4mmol)和Pd2(dba)3(1.1g,1.2mmol)在THF(200mL)中的混合物于 100℃加热1小时。冷却至室温后，将混合物过滤。将滤液减压浓缩并将 残余物通过快速柱色谱纯化得到棕色油状2-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基) 苯基]-1-(3-噻吩基)乙酮(6.8g)。
步骤2:2-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]-1-(3-噻吩基)乙胺的制备
向2-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]-1-(3-噻吩基)乙酮(6.8g,21.2mmol)的MeOH(80mL)溶液中在室温下加入NH4OAc(16.4g,212 mmol)。搅拌1小时后，将形成的混合物冷却至0℃。然后在0℃下向冷 却的混合物中加入NaBH3CN(2.67g,42.5mmol)。然后将混合物于50℃ 搅拌加热12小时。将混合物减压浓缩。将残余物用H2O(200mL)稀释。 将含水混合物用DCM(300mL)萃取。将有机层用盐水(200mL)洗涤，用 无水硫酸钠干燥并减压浓缩得到黄色油状2-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基) 苯基]-1-(3-噻吩基)乙胺粗品(6.82g)，其不经进一步纯化直接用于下一步 骤。
步骤3:N-[2-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]-1-(3-噻吩基)乙基]甲酰 胺的制备
向2-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]-1-(3-噻吩基)乙胺粗品(6.82g,21.2mmol)的二恶烷(80mL)溶液中加入甲酸(9.77g,212mmol)。然后将混 合物于120℃加热12小时。冷却至室温后，将混合物减压浓缩。将残余 物用EtOAc(300mL)稀释。将有机混合物用H2O(200mL)和盐水(200mL, 2次)洗涤，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩。将残余物通过柱色谱纯化得到 黄色固体状N-[2-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]-1-(3-噻吩基)乙基]甲 酰胺(5.0g)。
步骤4:7-甲氧基-6-(3-甲氧基丙氧基)-3-(3-噻吩基)-3,4-二氢异喹啉的制 备
向N-[2-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]-1-(3-噻吩基)乙基]甲酰胺(5.0g,14.3mmol)的DCM(50mL)溶液中加入POCl3(4.51g,29.3mmol)。 将混合物于40℃加热12小时然后用氨水碱化。将得到的混合物用DCM (200mL)萃取。将有机层用无水硫酸钠干燥并减压浓缩。将残余物通过柱 色谱纯化得到黄色固体状7-甲氧基-6-(3-甲氧基丙氧基)-3-(3-噻吩基)-3,4- 二氢异喹啉(3.0g)。
步骤5:10-甲氧基-9-(3-甲氧基丙氧基)-2-氧代-6-(3-噻吩基)-1,6,7,11b-四氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯的制备
将7-甲氧基-6-(3-甲氧基丙氧基)-3-(3-噻吩基)-3,4-二氢异喹啉(610mg,1.84mmol)和2-(乙氧基亚甲基)-3-氧代-丁酸乙酯(1.03g,5.52mmol)在 EtOH(10mL)中的混合物于100℃加热48小时。冷却至室温后，将混合 物减压浓缩得到10-甲氧基-9-(3-甲氧基丙氧基)-2-氧代-6-(3-噻吩 基)-1,6,7,11b-四氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯粗品，其不经进一步纯化直接用 于下一步骤。
步骤6:10-甲氧基-9-(3-甲氧基丙氧基)-2-氧代-6-(3-噻吩基)-6,7-二氢苯 并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯的制备
向10-甲氧基-9-(3-甲氧基丙氧基)-2-氧代-6-(3-噻吩基)-1,6,7,11b-四氢 苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯(800mg,1.70mmol)的DME(10mL)溶液中加入 对-四氯苯醌(375mg,1.53mmol)。将混合物在氮气氛下于70℃加热3小 时。然后将混合物过滤。将滤饼减压干燥得到黄色固体状10-甲氧基-9-(3- 甲氧基丙氧基)-2-氧代-6-(3-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯(250 mg)。
步骤7:10-甲氧基-9-(3-甲氧基丙氧基)-2-氧代-6-(3-噻吩基)-6,7-二氢苯 并[a]喹嗪-3-甲酸的制备
向10-甲氧基-9-(3-甲氧基丙氧基)-2-氧代-6-(3-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a] 喹嗪-3-甲酸乙酯(250mg,532μmol)的EtOH(3mL)溶液中加入2M NaOH水溶液(0.8mL)。将混合物于室温搅拌0.5小时然后减压浓缩以除 去大部分EtOH。将残余物用1M盐酸酸化然后过滤。将滤饼通过柱色谱 纯化得到浅黄色固体状10-甲氧基-9-(3-甲氧基丙氧基)-2-氧代-6-(3-噻吩 基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸(110mg)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6): δ1.97(q,2H)3.26(s,3H)3.36-3.45(m,1H)3.49(t,2H)3.59(dd,1H) 3.87(s,3H)4.10(t,2H)5.99(br.s.,1H)6.83(d,1H)6.99(s,1H)7.11(br. s.,1H)7.26-7.55(m,3H)8.74(br.s.,1H)。MS实测值(ESI+)[(M+H)+]: 442。
实施例3:10-甲氧基-9-(3-甲氧基丙氧基)-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸
步骤1:2-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]-1-(2-噻吩基)乙酮的制备
将4-溴-1-甲氧基-2-(3-甲氧基丙氧基)苯(5.0g,18.2mmol)、1-(2-噻吩 基)乙酮(3.43g,27.2mmol)、Xantphos(440mg)、Pd2(dba)3(340mg)和 t-BuONa(2.61g,27.2mmol)在THF(50mL)中的混合物于70℃加热5小 时。冷却至室温后，将混合物过滤。将滤液减压浓缩并将残余物通过柱色 谱纯化得到黄色固体状2-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]-1-(2-噻吩基) 乙酮(2.7g)。
步骤2:2-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]-1-(2-噻吩基)乙胺的制备
向2-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]-1-(2-噻吩基)乙酮(2.7g,8.43mmol)的MeOH(40mL)溶液中加入NH4OAc(6.50g,84.3mmol)。将混合 物搅拌20分钟后，向形成的混合物中加入NaBH3CN(1.06g,16.8mmol)。 将形成的混合物于40℃搅拌加热24小时然后减压浓缩。将残余物用 DCM稀释。将有机混合物用水和盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥并减压浓 缩得到黄色油状2-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]-1-(2-噻吩基)乙胺 粗品(2.2g)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤。
步骤3:N-[2-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]-1-(2-噻吩基)乙基]甲酰 胺的制备
向2-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]-1-(2-噻吩基)乙胺(粗品2.2g) 的二恶烷(30mL)溶液中加入甲酸(1.54g,33.6mmol)。将混合物回流24小 时。冷却至室温后，将混合物减压浓缩。将残余物用DCM稀释。将有机 混合物用水和盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩。将残余物通过柱 色谱纯化得到灰色固体状N-[2-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]-1-(2- 噻吩基)乙基]甲酰胺(800mg)。
步骤4:7-甲氧基-6-(3-甲氧基丙氧基)-3-(2-噻吩基)-3,4-二氢异喹啉的制 备
向N-[2-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]-1-(2-噻吩基)乙基]甲酰胺(750mg,2.15mmol)的DCM(10mL)溶液中加入POCl3(493mg,3.22 mmol)。将混合物于40℃搅拌加热2小时，然后倒入氨水中。将得到的 混合物用DCM萃取。将有机层用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥并减压浓 缩。将残余物通过柱色谱纯化得到灰色固体状7-甲氧基-6-(3-甲氧基丙氧 基)-3-(2-噻吩基)-3,4-二氢异喹啉(400mg)。
步骤5:10-甲氧基-9-(3-甲氧基丙氧基)-2-氧代-6-(2-噻吩基)-1,6,7,11b-四氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯的制备
将7-甲氧基-6-(3-甲氧基丙氧基)-3-(2-噻吩基)-3,4-二氢异喹啉(50mg,0.15mmol)和2-(乙氧基亚甲基)-3-氧代-丁酸乙酯(84mg,0.45mmol)在 EtOH(1mL)中的混合物回流24小时。冷却至室温后，将混合物减压浓 缩得到10-甲氧基-9-(3-甲氧基丙氧基)-2-氧代-6-(2-噻吩基)-1,6,7,11b-四氢 苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯粗品(70mg)，其不经进一步纯化直接用于下一步 骤。
步骤6:10-甲氧基-9-(3-甲氧基丙氧基)-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯 并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯的制备
向10-甲氧基-9-(3-甲氧基丙氧基)-2-氧代-6-(2-噻吩基)-1,6,7,11b-四氢 苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯(粗品70mg,0.15mmol)的DME(1mL)溶液中加 入对-四氯苯醌(37mg,0.15mmol)。将形成的混合物回流3小时，然后过 滤。将滤液减压浓缩。将残余物用DCM稀释。将有机混合物用NaHCO3水溶液和盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩得到10-甲氧基-9-(3- 甲氧基丙氧基)-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯粗品(60mg)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤。
步骤7:10-甲氧基-9-(3-甲氧基丙氧基)-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯 并[a]喹嗪-3-甲酸的制备
向10-甲氧基-9-(3-甲氧基丙氧基)-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a] 喹嗪-3-甲酸乙酯(粗品60mg,0.15mmol)在MeOH(1mL)中的混合物中 加入2M NaOH水溶液(0.15mL,0.3mmol)。于室温下搅拌16小时后， 将形成的混合物减压浓缩以除去大部分MeOH。将残余物用2M盐酸酸 化至pH＝3，然后用DCM萃取。将有机层用无水硫酸钠干燥并减压浓缩。 将残余物通过制备型HPLC纯化得到灰色固体状10-甲氧基-9-(3-甲氧基 丙氧基)-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸(2.4mg)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ:8.99(s,1H),7.50-7.53(m,2H),7.33-7.38 (m,1H),7.08(s,1H),7.03(s,1H),6.86-7.01(m,1H),6.35(s,1H),4.08(t, 2H),3.87(s,3H),3.66-3.70(m,1H),3.46(t,2H),3.43-3.45(m,2H),3.24(s, 3H),1.94-2.01(m,2H)。MS实测值(ESI+)[(M+H)+]:442。
实施例4:6-(4-羟基苯基)-10-甲氧基-9-(3-甲氧基丙氧基)-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸
步骤1:1-(4-苄氧基苯基)-2-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]乙酮的制 备
向4-溴-1-甲氧基-2-(3-甲氧基丙氧基)苯(15g,54.5mmol)在THF(150 mL)中的混合物中加入1-(4-苄氧基苯基)乙酮(16g,70.9mmol)、t-BuONa (7.86g,81.8mmol)、Pd2(dba)3(1g,1.09mmol)和Xantphos(1.26g,2.18 mmol)。将混合物于50℃加热4小时。冷却至室温后，将混合物减压浓 缩，然后将残余物溶于DCM。将有机溶液用H2O和盐水洗涤，用无水硫 酸钠干燥并减压浓缩。将残余物通过柱色谱纯化得到黄色固体状1-(4-苄 氧基苯基)-2-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]乙酮(17g)。
步骤2:1-(4-苄氧基苯基)-2-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]乙胺的制 备
向1-(4-苄氧基苯基)-2-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]乙酮(17g,40.4mmol)的MeOH(170mL)溶液中于70℃下加入NH4OAc(31.2g,404 mmol)。加热1小时后，将形成的混合物冷却至0℃。然后于0℃下向形 成的混合物中加入NaBH3CN(5.08g,80.9mmol)。将得到的混合物于80℃ 加热12小时然后减压浓缩以除去大部分MeOH。将残余物用H2O(100 mL)稀释并用DCM(500mL)萃取。将有机层用盐水(100mL)洗涤，用无 水硫酸钠干燥并减压浓缩得到黄色油状1-(4-苄氧基苯基)-2-[4-甲氧基 -3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]乙胺粗品(24g)，其不经进一步纯化直接用于下 一步骤。
步骤3:N-[1-(4-苄氧基苯基)-2-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]乙基]甲酰胺的制备
向1-(4-苄氧基苯基)-2-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]乙胺(24.0g,56.9mmol)在二恶烷(250mL)中的混合物中加入甲酸(13.1g,285mmol)。 于120℃加热12小时后，将混合物减压浓缩以除去大部分二恶烷。将残 余物在H2O(200mL)和DCM(600mL)之间进行分配。分离有机层，用盐 水洗涤(200mL)，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩。将残余物通过柱色谱纯 化得到浅黄色固体状N-[1-(4-苄氧基苯基)-2-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基) 苯基]乙基]甲酰胺(13.0g)。
步骤4:3-(4-苄氧基苯基)-7-甲氧基-6-(3-甲氧基丙氧基)-3,4-二氢异喹啉 的制备
向N-[1-(4-苄氧基苯基)-2-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]乙基]甲 酰胺(11.0g,24.5mmol)在干燥DCM(120mL)中的混合物中于0℃下滴 加POCl3(5.75g,37.5mmol)。然后将混合物回流12小时。冷却至室温后， 将混合物倒入氨水(30mL)的H2O(20mL)溶液中。然后将混合物用DCM (300mL)萃取。将有机层用盐水(150mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥并减压 浓缩。将残余物通过柱色谱纯化得到黄色固体状3-(4-苄氧基苯基)-7-甲氧 基-6-(3-甲氧基丙氧基)-3,4-二氢异喹啉(8.4g)。
步骤5:6-(4-苄氧基苯基)-10-甲氧基-9-(3-甲氧基丙氧基)-2-氧代 -1,6,7,11b-四氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯的制备
将3-(4-苄氧基苯基)-7-甲氧基-6-(3-甲氧基丙氧基)-3,4-二氢异喹啉 (4.0g,9.27mmol)和2-(乙氧基亚甲基)-3-氧代-丁酸乙酯(5.18g,27.8mmol) 的EtOH(50mL)溶液在100℃的油浴中加热12小时。冷却至室温后， 将混合物减压浓缩得到6-(4-苄氧基苯基)-10-甲氧基-9-(3-甲氧基丙氧 基)-2-氧代-1,6,7,11b-四氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯粗品，其不经进一步纯 化直接用于下一步骤。
步骤6:6-(4-苄氧基苯基)-10-甲氧基-9-(3-甲氧基丙氧基)-2-氧代-6,7-二 氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯的制备
将6-(4-苄氧基苯基)-10-甲氧基-9-(3-甲氧基丙氧基)-2-氧代-1,6,7,11b- 四氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯(5.3g,9.27mmol)和对-四氯苯醌(1.6g,6.49 mmol)在DME(60mL)中的混合物于80℃加热3小时。冷却至室温后， 将混合物在H2O(150mL)和DCM(300mL)之间进行分配。分离有机层， 用盐水洗涤(150mL)，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩。将残余物通过柱色 谱纯化得到黑色固体状6-(4-苄氧基苯基)-10-甲氧基-9-(3-甲氧基丙氧 基)-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯(4g)。
步骤7:6-(4-羟基苯基)-10-甲氧基-9-(3-甲氧基丙氧基)-2-氧代-6,7-二氢 苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯的制备
向6-(4-苄氧基苯基)-10-甲氧基-9-(3-甲氧基丙氧基)-2-氧代-6,7-二氢 苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯(700mg,1.23mmol)的EtOH(10mL)溶液中加入 Pd/C(50mg)。然后将混合物加热至30℃并在30℃下在氢气氛(30psi) 下搅拌12小时。冷却至室温后，将混合物减压浓缩得到黑色固体状6-(4- 羟基苯基)-10-甲氧基-9-(3-甲氧基丙氧基)-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3- 甲酸乙酯粗品(650mg)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤。
步骤8:6-(4-羟基苯基)-10-甲氧基-9-(3-甲氧基丙氧基)-2-氧代-6,7-二氢 苯并[a]喹嗪-3-甲酸的制备
向6-(4-羟基苯基)-10-甲氧基-9-(3-甲氧基丙氧基)-2-氧代-6,7-二氢苯 并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯(200mg,417μmol)的MeOH(5mL)溶液中加入2M NaOH水溶液(0.625mL,1.25mmol)。于25℃搅拌12小时后，将形成的 混合物浓缩。将残余物用H2O(20mL)稀释，用1M盐酸酸化至pH＝3， 然后用DCM(100mL)萃取。将有机层用盐水(50mL)洗涤，用无水硫酸 钠干燥并减压浓缩。将残余物通过制备型HPLC纯化得到白色固体状 6-(4-羟基苯基)-10-甲氧基-9-(3-甲氧基丙氧基)-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹 嗪-3-甲酸(8.2mg)。1H NMR(400MHz,METHANOL-d4):δ:1.94-2.10 (m,2H),3.07-3.30(m,3H),3.33-3.37(m,1H),3.42-3.53(m,1H),3.55 (t,2H),3.88(br.s.,3H),4.08(br.s.,2H),5.51(br.s.,1H),6.64(br.s.,2 H),6.74-7.15(m,4H),7.32(br.s.,1H),8.24(br.s.,1H)。MS实测值(ESI+) [(M+H)+]:452。
实施例5:10-甲氧基-6-(4-甲氧基苯基)-9-(3-甲氧基丙氧基)-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸
步骤1:10-甲氧基-6-(4-甲氧基苯基)-9-(3-甲氧基丙氧基)-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯的制备
向6-(4-羟基苯基)-10-甲氧基-9-(3-甲氧基丙氧基)-2-氧代-6,7-二氢苯 并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯(450mg,938μmol,得自实施例4的步骤7)的DMF (10mL)溶液中加入K2CO3(389mg,2.82mmol)和碘甲烷(2.05g,14.4 mmol)。将混合物于25℃搅拌24小时，然后在H2O(50mL)和EtOAc(100 mL)之间进行分配。将有机层用盐水(50mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩得到棕色油状10-甲氧基-6-(4-甲氧基苯基)-9-(3-甲氧基丙氧 基)-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯粗品(350mg)，其不经进一步 纯化直接用于下一步骤。
步骤2:10-甲氧基-6-(4-甲氧基苯基)-9-(3-甲氧基丙氧基)-2-氧代-6,7-二 氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸的制备
向10-甲氧基-6-(4-甲氧基苯基)-9-(3-甲氧基丙氧基)-2-氧代-6,7-二氢 苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯(350mg,790μmol)的MeOH(5mL)溶液中加入2 M NaOH水溶液(1.19mL,2.37mmol)。于25℃搅拌12小时后，将得到 的反应混合物用H2O(20mL)稀释，用1M盐酸酸化至pH＝3并用DCM (100mL)萃取。将有机层用盐水(50mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥并减压 浓缩。将残余物通过制备型HPLC纯化得到黄色固体状10-甲氧基-6-(4- 甲氧基苯基)-9-(3-甲氧基丙氧基)-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸(27 mg)。1H NMR(400MHz,CDCl3):δ:2.12(q,2H),3.28(dd,1H),3.34(s,3 H),3.55(t,3H),3.60(d,1H),3.77(s,3H)3.94(s,3H),4.13(t,2H),5.39 (s,1H),6.69(s,1H),6.79-6.86(m,2H),6.88-6.95(m,2H),7.15(s,1 H),7.20(s,1H),8.45(s,1H)。MS实测值(ESI+)[(M+H)+]:466。
实施例6:6-(4-苄氧基苯基)-10-甲氧基-9-(3-甲氧基丙氧基)-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸
向6-(4-苄氧基苯基)-10-甲氧基-9-(3-甲氧基丙氧基)-2-氧代-6,7-二氢 苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯(200mg,351μmol,得自实施例4的步骤6)的 MeOH(5mL)溶液中加入2MNaOH水溶液(0.526mL,1.05mmol)。于 25℃搅拌12小时后，将形成的混合物用H2O(20mL)稀释，用1M盐酸 酸化至pH＝3并用DCM(100mL)萃取。将有机层用盐水(50mL)洗涤，用 无水硫酸钠干燥并减压浓缩。将残余物通过制备型HPLC纯化得到白色 固体状6-(4-苄氧基苯基)-10-甲氧基-9-(3-甲氧基丙氧基)-2-氧代-6,7-二氢 苯并[a]喹嗪-3-甲酸(31mg)。1H NMR(400MHz,CDCl3):δ:2.12(q,2H), 3.28(dd,1H),3.34(s,3H),3.55(t,3H),3.93(s,3H),4.13(t,2H),5.02(s, 2H),5.40(br.s.,1H),6.69(s,1H),6.82-6.96(m,4H),7.17(d,2H),7.31 -7.45(m,5H),8.46(s,1H)。MS实测值(ESI+)[(M+H)+]:542。
实施例7:10-甲氧基-9-(3-甲氧基丙氧基)-6-(4-甲基-2-噻吩基)-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸
步骤1:2-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]-1-(4-甲基-2-噻吩基)乙酮 的制备
将4-溴-1-甲氧基-2-(3-甲氧基丙氧基)苯(5.0g,18.2mmol)、1-(4-甲基 -2-噻吩基)乙酮(3.82g,27.2mmol)、t-BuONa(2.80g,29.1mmol)、 Pd2(dba)3(350mg)和Xantphos(440mg)在THF(60mL)中的混合物于 80℃加热3小时。冷却至室温后，将混合物在DCM(200mL)和H2O(50 mL)之间进行分配。分离有机层，用盐水(50mL)洗涤，用无水硫酸钠干 燥并减压浓缩。将残余物通过柱色谱纯化得到黄色固体状2-[4-甲氧基 -3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]-1-(4-甲基-2-噻吩基)乙酮(3.7g)。
步骤2:2-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]-1-(4-甲基-2-噻吩基)乙胺的制备
向2-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]-1-(4-甲基-2-噻吩基)乙酮(3.7 g,11.1mmol)在MeOH(50mL)中的混合物中加入NH4OAc(8.53g,111 mmol)。将混合物于40℃加热1小时。然后向形成的混合物中加入 NaBH3CN(1.39g,22.2mmol)。将得到的混合物于70℃加热48小时，然 后减压浓缩。将残余物用DCM(200mL)稀释。将有机混合物分离，用水(100mL)和盐水(100mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩。将残余物 通过柱色谱纯化得到黄色油状2-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]-1-(4- 甲基-2-噻吩基)乙胺粗品(2.5g)。
步骤3:N-[2-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]-1-(4-甲基-2-噻吩基)乙基]甲酰胺的制备
向2-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]-1-(4-甲基-2-噻吩基)乙胺(2.5 g,7.46mmol)在二恶烷(30mL)中的混合物中加入甲酸(1.72g,37.3 mmol)。将混合物加热回流24小时。冷却至室温后，将混合物减压浓缩 并将残余物用DCM(100mL)稀释。然后将有机混合物分离，用水(50mL) 和盐水(50mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩。将残余物通过柱色 谱纯化得到黄色油状N-[2-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]-1-(4-甲基 -2-噻吩基)乙基]甲酰胺(1.3g)。
步骤4:7-甲氧基-6-(3-甲氧基丙氧基)-3-(4-甲基-2-噻吩基)-3,4-二氢异喹 啉的制备
向N-[2-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]-1-(4-甲基-2-噻吩基)乙基] 甲酰胺(700mg,1.93mmol)在DCM(10mL)中的混合物中加入POCl3 (442mg,2.89mmol)。将混合物加热回流2小时。冷却至室温后，将混合 物在氨水(20mL)和DCM(100mL)之间进行分配。分离有机层，用水(30 mL)和盐水(30mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩。将残余物通过柱色谱纯化得到白色固体状7-甲氧基-6-(3-甲氧基丙氧基)-3-(4-甲基-2-噻 吩基)-3,4-二氢异喹啉(390mg)。
步骤5:10-甲氧基-9-(3-甲氧基丙氧基)-6-(4-甲基-2-噻吩基)-2-氧代 -1,6,7,11b-四氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯的制备
将7-甲氧基-6-(3-甲氧基丙氧基)-3-(4-甲基-2-噻吩基)-3,4-二氢异喹啉(390mg,1.13mmol)和2-(乙氧基亚甲基)-3-氧代-丁酸乙酯(630mg,3.39 mmol)在EtOH(7mL)中的混合物加热回流24小时。冷却至室温后，将 混合物减压浓缩得到10-甲氧基-9-(3-甲氧基丙氧基)-6-(4-甲基-2-噻吩 基)-2-氧代-1,6,7,11b-四氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯粗品(1.0g)，其不经进一 步纯化直接用于下一步骤。
步骤6:10-甲氧基-9-(3-甲氧基丙氧基)-6-(4-甲基-2-噻吩基)-2-氧代-6,7- 二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯的制备
将10-甲氧基-9-(3-甲氧基丙氧基)-6-(4-甲基-2-噻吩基)-2-氧代 -1,6,7,11b-四氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯(粗品1g)和对-四氯苯醌(277mg, 1.13mmol)在DME(10mL)中的混合物加热回流3小时。然后将混合物过 滤。将滤液减压浓缩。将残余物用DCM稀释。然后将有机混合物用 NaHCO3水溶液和盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩得到10-甲氧基-9-(3-甲氧基丙氧基)-6-(4-甲基-2-噻吩基)-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪 -3-甲酸乙酯粗品(1g)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤。
步骤7:10-甲氧基-9-(3-甲氧基丙氧基)-6-(4-甲基-2-噻吩基)-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸的制备
向10-甲氧基-9-(3-甲氧基丙氧基)-6-(4-甲基-2-噻吩基)-2-氧代-6,7-二 氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯粗品(1g)在MeOH(10mL)中的混合物中加入2 M NaOH水溶液(1.1mL)。将混合物于15℃搅拌16小时。将混合物减 压浓缩。将残余物用1M盐酸酸化至pH＝3。将得到的含水混合物用DCM 萃取。将有机层用无水硫酸钠干燥并减压浓缩。将残余物用MeOH(5mL) 处理，然后过滤。将滤饼通过制备型HPLC纯化得到白色固体状10-甲氧 基-9-(3-甲氧基丙氧基)-6-(4-甲基-2-噻吩基)-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪 -3-甲酸(64mg)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ8.93(s,1H),7.50-7.53 (m,2H),7.06(s,1H),6.91(s,1H),6.82(s,1H),6.26(s,1H),4.07(t,J＝6.4 Hz,2H),3.87(s,3H),3.66-3.70(m,1H),3.46(t,J＝6.4Hz,2H),3.30-3.31 (m,1H),3.24(s,3H),2.07(s,3H),1.94-2.01(m,2H)。MS实测值(ESI+) [(M+H)+]:456。
实施例8:6-(3-氯苯基)-10-甲氧基-9-(3-甲氧基丙氧基)-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸
步骤1:1-(3-氯苯基)-2-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]乙酮的制备
将4-溴-1-甲氧基-2-(3-甲氧基丙氧基)苯(10.0g,36.3mmol)、1-(3-氯苯 基)乙酮(7.3g,47.2mmol)、t-BuONa(5.24g,54.5mmol)、Pd2(dba)3(1.33g, 1.45mmol)和Xantphos(841mg,1.45mmol)在THF(100mL)中的混合物 在氮气氛下于60℃加热12小时。冷却至室温后，将反应混合物减压浓 缩。将残余物用DCM(600mL)稀释。将有机混合物用水和盐水洗涤，用 无水硫酸钠干燥并减压浓缩。将残余物通过柱色谱纯化得到浅黄色油状 1-(3-氯苯基)-2-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]乙酮(9.0g)。
步骤2:1-(3-氯苯基)-2-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]乙胺的制备
向1-(3-氯苯基)-2-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]乙酮(9.0g,25.8mmol)在MeOH(100mL)中的混合物中于24℃下加入NH4OAc(13.9g, 181mmol)。将混合物搅拌1小时后，于0℃下向混合物中加入NaBH3CN (14.2g,226mmol)。将得到的混合物于70℃加热12小时，然后冷却至 室温并减压浓缩以除去大部分MeOH。将残余物在H2O(100mL)和DCM(500mL)之间进行分配。将有机层用盐水(100mL)洗涤，用无水硫酸钠干 燥并减压浓缩得到黄色油状1-(3-氯苯基)-2-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基) 苯基]乙胺粗品(9.0g)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤。
步骤3:N-[1-(3-氯苯基)-2-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]乙基]甲酰胺的制备
向1-(3-氯苯基)-2-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]乙胺(9.0g,33.4mmol)在二恶烷(120mL)中的混合物中于24℃下加入甲酸(5.92g,129 mmol)。将混合物回流12小时，然后冷却至室温并减压浓缩以除去大部 分二恶烷。将残余物在H2O(100mL)和DCM(500mL)之间进行分配。将 有机层用盐水(100mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩。将残余物通 过柱色谱纯化得到浅黄色固体状N-[1-(3-氯苯基)-2-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]乙基]甲酰胺(2.0g)。
步骤4:3-(3-氯苯基)-7-甲氧基-6-(3-甲氧基丙氧基)-3,4-二氢异喹啉的制备
向N-[1-(3-氯苯基)-2-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]乙基]甲酰胺(1.0g,2.65mmol)在DCM(10mL)中的混合物中加入POCl3(608mg,3.97 mmol)。将混合物加热回流2小时。冷却至室温后，将混合物在氨水(20mL) 和DCM(100mL)之间进行分配。分离有机层，用水(30mL)和盐水(30mL) 洗涤，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩。将残余物通过柱色谱纯化得到棕色 油状3-(3-氯苯基)-7-甲氧基-6-(3-甲氧基丙氧基)-3,4-二氢异喹啉(600mg)。
步骤5:6-(3-氯苯基)-10-甲氧基-9-(3-甲氧基丙氧基)-2-氧代-1,6,7,11b-四氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯的制备
将3-(3-氯苯基)-7-甲氧基-6-(3-甲氧基丙氧基)-3,4-二氢异喹啉(600mg,1.67mmol)和2-(乙氧基亚甲基)-3-氧代-丁酸乙酯(930mg,5.00mmol)在 EtOH(10mL)中的混合物加热回流48小时。冷却至室温后，将混合物减 压浓缩得到6-(3-氯苯基)-10-甲氧基-9-(3-甲氧基丙氧基)-2-氧代-1,6,7,11b- 四氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯粗品(1.3g)，其不经进一步纯化直接用于下一 步骤。
步骤6:6-(3-氯苯基)-10-甲氧基-9-(3-甲氧基丙氧基)-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯的制备
将6-(3-氯苯基)-10-甲氧基-9-(3-甲氧基丙氧基)-2-氧代-1,6,7,11b-四氢 苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯粗品(1.3g)和对-四氯苯醌(410mg,1.67mmol)在 DME(15mL)中的混合物加热回流3小时。然后将混合物过滤。将滤液减 压浓缩并将残余物用DCM稀释。然后将有机混合物用NaHCO3水溶液和 盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩得到6-(3-氯苯基)-10-甲氧基 -9-(3-甲氧基丙氧基)-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯粗品(1.4g)， 其不经进一步纯化直接用于下一步骤。
步骤7:6-(3-氯苯基)-10-甲氧基-9-(3-甲氧基丙氧基)-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸的制备
向6-(3-氯苯基)-10-甲氧基-9-(3-甲氧基丙氧基)-2-氧代-6,7-二氢苯并[a] 喹嗪-3-甲酸乙酯(粗品700mg)在MeOH(7mL)中的混合物中加入2M NaOH水溶液(0.8mL)。将混合物于15℃搅拌16小时，然后减压浓缩。 将残余物用1M盐酸酸化至pH＝3。将得到的含水混合物用DCM萃取。 将有机层用无水硫酸钠干燥并减压浓缩。将残余物用MeOH(5mL)处理 然后过滤。将滤饼用DMSO/MeCN重结晶得到白色固体状6-(3-氯苯 基)-10-甲氧基-9-(3-甲氧基丙氧基)-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸(36 mg)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ8.85(s,1H),7.58(s,1H),7.52(s, 1H),7.23-7.35(m,2H),7.18(s,1H),6.94(s,1H),6.80(d,1H),6.08(d,1H), 4.02(t,2H),3.85(s,3H),3.66-3.70(m,1H),3.42-3.50(m,3H),3.21(s,3H), 1.94-2.01(m,2H)。MS实测值(ESI+)[(M+H)+]:470。
实施例9:6-(4-氟苯基)-10-甲氧基-9-(3-甲氧基丙氧基)-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸
步骤1:1-(4-氟苯基)-2-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]乙酮的制备
将4-溴-1-甲氧基-2-(3-甲氧基丙氧基)苯(8.0g,29.1mmol)、1-(4-氟苯 基)乙酮(6.02g,43.6mmol)、t-BuONa(4.47g,46.5mmol)、Pd2(dba)3(550 mg)、Xantphos(700mg)在THF(100mL)中的混合物于80℃加热3小时。 冷却至室温后，将混合物减压浓缩。将残余物在DCM(200mL)和H2O(50 mL)之间进行分配。将有机层用盐水(50mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥并 减压浓缩。将残余物通过柱色谱纯化得到黄色固体状1-(4-氟苯基)-2-[4- 甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]乙酮(8.9g)。
步骤2:1-(4-氟苯基)-2-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]乙胺的制备
向1-(4-氟苯基)-2-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]乙酮(8.9g,26.8mmol)在MeOH(100mL)中的混合物中加入NH4OAc(20.6g,268mmol)。 将混合物于30℃搅拌1小时。然后向混合物中加入NaBH3CN(3.38g, 53.6mmol)。将得到的混合物于40℃加热16小时，然后减压浓缩。将残 余物用DCM(200mL)稀释。将有机混合物用水(100mL)、盐水(100mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩。将残余物通过柱色谱纯化得到黄色 油状1-(4-氟苯基)-2-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]乙胺(6.0g)。
步骤3:N-[1-(4-氟苯基)-2-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]乙基]甲酰胺的制备
向1-(4-氟苯基)-2-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]乙胺(6.0g,18.0mmol)在二恶烷(80mL)中的混合物中加入甲酸(4.14g,90.0mmol)。将混 合物加热回流48小时。冷却至室温后，将混合物减压浓缩。将残余物用 DCM(100mL)稀释并将有机混合物用水(50mL)和盐水(50mL)洗涤，用 无水硫酸钠干燥并减压浓缩。将残余物通过柱色谱纯化得到白色固体状 N-[1-(4-氟苯基)-2-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]乙基]甲酰胺(2.6g)。
步骤4:3-(4-氟苯基)-7-甲氧基-6-(3-甲氧基丙氧基)-3,4-二氢异喹啉的制备
向N-[1-(4-氟苯基)-2-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]乙基]甲酰胺(1.0g,2.77mmol)在DCM(10mL)中的混合物中加入POCl3(636mg,4.16 mmol)。将混合物加热回流2小时。冷却至室温后，将混合物在氨水(20mL) 和DCM(100mL)之间进行分配。将有机层用水(30mL)和盐水(30mL)洗 涤，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩。将残余物通过柱色谱纯化得到黄色油 状3-(4-氟苯基)-7-甲氧基-6-(3-甲氧基丙氧基)-3,4-二氢异喹啉(650mg)。
步骤5:6-(4-氟苯基)-10-甲氧基-9-(3-甲氧基丙氧基)-2-氧代-1,6,7,11b-四氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯的制备
将3-(4-氟苯基)-7-甲氧基-6-(3-甲氧基丙氧基)-3,4-二氢异喹啉(650mg,1.89mmol)和2-(乙氧基亚甲基)-3-氧代-丁酸乙酯(1.06g,5.69mmol)在 EtOH(10mL)中的混合物加热回流24小时。冷却至室温后，将混合物减 压浓缩得到6-(4-氟苯基)-10-甲氧基-9-(3-甲氧基丙氧基)-2-氧代-1,6,7,11b- 四氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯粗品(1.2g)，其不经进一步纯化直接用于下一 步骤。
步骤6:6-(4-氟苯基)-10-甲氧基-9-(3-甲氧基丙氧基)-2-氧代-6,7-二氢苯 并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯的制备
将6-(4-氟苯基)-10-甲氧基-9-(3-甲氧基丙氧基)-2-氧代-1,6,7,11b-四氢 苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯(粗品1.2g)和对-四氯苯醌(410mg,1.67mmol)在 DME(15mL)中的混合物加热回流3小时。然后将混合物过滤并将滤液减 压浓缩。将残余物用DCM稀释。将有机混合物用NaHCO3水溶液和盐水 洗涤，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩得到6-(4-氟苯基)-10-甲氧基-9-(3-甲 氧基丙氧基)-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯粗品(1.4g)，其不经 进一步纯化直接用于下一步骤。
步骤7:6-(4-氟苯基)-10-甲氧基-9-(3-甲氧基丙氧基)-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸的制备
向6-(4-氟苯基)-10-甲氧基-9-(3-甲氧基丙氧基)-2-氧代-6,7-二氢苯并[a] 喹嗪-3-甲酸乙酯(粗品700mg)在MeOH(7mL)中的混合物中加入2M NaOH水溶液(0.8mL)。将混合物于15℃搅拌16小时，然后减压浓缩。 将残余物用1M盐酸酸化至pH＝3，然后用DCM萃取。将有机层用无水 硫酸钠干燥并减压浓缩。将残余物用MeOH(5mL)处理，然后过滤。将 滤饼通过制备型HPLC纯化得到白色固体状6-(4-氟苯基)-10-甲氧基-9-(3- 甲氧基丙氧基)-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸(22mg)。1H NMR(400 MHz,DMSO-d6):δ:8.82(s,1H),7.50-7.53(m,2H),7.06-7.23(m,4H), 6.94(s,1H),6.08(s,1H),4.02(t,2H),3.86(s,3H),3.66-3.70(m,1H), 3.42-3.50(m,4H),3.22(s,3H),1.94-2.01(m,2H)。MS实测值(ESI+)[(M+H)+]:454。
实施例10:10-甲氧基-9-(3-甲氧基丙氧基)-6-(邻甲苯基)-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸
步骤1:2-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]-1-(邻甲苯基)乙酮的制备
将4-溴-1-甲氧基-2-(3-甲氧基丙氧基)苯(41.0g,155mmol)、1-(邻甲苯 基)乙酮(17.5g,202mmol)、t-BuONa(27.0g,280mmol)、Pd2(dba)3(11.4g, 12.5mmol)和Xantphos(3.61g,6.23mmol)在THF(500mL)中的混合物 于50℃加热12小时。冷却至室温后，将混合物减压浓缩。将残余物通 过柱色谱纯化得到浅黄色油状2-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]-1-(邻 甲苯基)乙酮(38.0g)。
步骤2:2-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]-1-(邻甲苯基)乙胺的制备
向2-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]-1-(邻甲苯基)乙酮(10.5g,32 mmol)的MeOH(120mL)溶液中在24℃下加入NH4OAc(17.25g,224 mmol)。将混合物搅拌1小时后，于0℃下向混合物中加入NaBH3CN(2.61 g,2.61mmol)。将形成的混合物加热回流12小时，然后冷却至室温并减 压浓缩。将残余物在H2O(100mL)和DCM(500mL)之间进行分配。将有 机层用盐水(100mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩得到黄色油状 2-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]-1-(邻甲苯基)乙胺(11.0g,粗品)，其 不经进一步纯化直接用于下一步骤。
步骤3:N-[2-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]-1-(邻甲苯基)乙基]甲酰 胺的制备
向2-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]-1-(邻甲苯基)乙胺(11.0g,33.4mmol)的二恶烷(120mL)溶液中加入甲酸(7.68g,147mmol)。将混合 物加热回流12小时。冷却至室温后，将混合物减压浓缩。将残余物在H2O (100mL)和DCM(500mL)之间进行分配。分离有机层，用盐水(100mL) 洗涤，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩。将残余物通过柱色谱纯化得到浅黄 色固体状N-[2-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]-1-(邻甲苯基)乙基]甲 酰胺(5.0g)。
步骤4:7-甲氧基-6-(3-甲氧基丙氧基)-3-(邻甲苯基)-3,4-二氢异喹啉的制备
向搅拌中的N-[2-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]-1-(邻甲苯基)乙 基]甲酰胺(2.0g,5.6mmol)的DCM(40mL)溶液中加入POCl3(1.7g,11.1 mmol)。将反应混合物于30℃搅拌8小时，然后倒入搅拌中的DCM和 氨水的混合物中。分离有机层，用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥并减压浓 缩。将残余物通过快速柱色谱纯化得到黄色油状7-甲氧基-6-(3-甲氧基丙 氧基)-3-(邻甲苯基)-3,4-二氢异喹啉(1.12g)。
步骤5:10-甲氧基-9-(3-甲氧基丙氧基)-6-(邻甲苯基)-2-氧代-1,6,7,11b-四氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯的制备
将7-甲氧基-6-(3-甲氧基丙氧基)-3-(邻甲苯基)-3,4-二氢异喹啉(500 mg,1.47mmol)和2-(乙氧基亚甲基)-3-氧代-丁酸乙酯(82mg,4.42mmol) 在EtOH(10mL)中的混合物回流72小时。冷却至室温后，将混合物减压 浓缩得到10-甲氧基-9-(3-甲氧基丙氧基)-6-(邻甲苯基)-2-氧代-1,6,7,11b-四 氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯粗品(750mg)，其不经进一步纯化直接用于下一 步骤。
步骤6:10-甲氧基-9-(3-甲氧基丙氧基)-6-(邻甲苯基)-2-氧代-6,7-二氢苯 并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯的制备
将10-甲氧基-9-(3-甲氧基丙氧基)-6-(邻甲苯基)-2-氧代-1,6,7,11b-四氢 苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯(750mg,1.56mmol)和对-四氯苯醌(385mg,1.356 mmol)在DME(10mL)中的混合物于80℃加热3小时。然后将反应混合 物过滤。将滤液减压浓缩得到10-甲氧基-9-(3-甲氧基丙氧基)-6-(邻甲苯 基)-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯粗品(703mg)，其不经进一步 纯化直接用于下一步骤。
步骤7:10-甲氧基-9-(3-甲氧基丙氧基)-6-(邻甲苯基)-2-氧代-6,7-二氢苯 并[a]喹嗪-3-甲酸的制备
将10-甲氧基-9-(3-甲氧基丙氧基)-6-(邻甲苯基)-2-氧代-6,7-二氢苯并 [a]喹嗪-3-甲酸乙酯粗品(703mg,1.47mmol)和NaOH(235mg)在H2O(3 mL)和MeOH(10mL)的溶剂混合物中的混合物于30℃加热16小时。将 混合物减压浓缩。将残余物用H2O稀释并用1M盐酸酸化至pH＝3-4。将 形成的混合物过滤。将滤饼用MeOH重结晶然后通过制备型HPLC纯化 得到白色固体状10-甲氧基-9-(3-甲氧基丙氧基)-6-(邻甲苯基)-2-氧代-6,7- 二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸(51mg)。1H NMR(400MHz,MeOD):δ1.95- 2.07(m,2H),2.53(s,3H),3.29(s,3H),3.35(d,1H),3.53(td,2H),3.62 (dd,1H),3.95(s,3H),4.02-4.11(m,2H),4.61(s,1H),6.06(br.s.,1H), 6.56(d,1H),6.82(s,1H),7.00(t,1H),7.18(t,1H),7.24-7.31(m,1H), 7.42(s,1H),7.51(s,1H),8.54(s,1H)。MS实测值(ESI+)[(M+H)+]:450。
实施例11:9-甲氧基-8-甲基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸
步骤1:4-溴-1-甲氧基-2-(3-甲氧基丙氧基)苯的制备
向3-溴-2-甲基-苯酚(11.4g,60.95mmol)的DMF(150mL)溶液中加入 K2CO3(25.3g,183mmol)和碘甲烷(26.0g,183mmol)。将混合物于25℃ 搅拌12小时，然后减压浓缩。将残余物用EtOAc(200mL)稀释。将有机 混合物用水和盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩。将残余物通过柱 色谱纯化得到无色油状4-溴-1-甲氧基-2-(3-甲氧基丙氧基)苯(11.0g)。
步骤2:2-(3-甲氧基-2-甲基-苯基)-1-(2-噻吩基)乙酮的制备
向4-溴-1-甲氧基-2-(3-甲氧基丙氧基)苯(11.0g,54.7mmol)的THF (120mL)溶液中在氮气氛下加入1-(2-噻吩基)乙酮(8.97g,71.1mmol)、 t-BuONa(7.89g,82.1mmol)、Pd2(dba)3(1g,1.09mmol)和Xantphos(633 mg,1.09mmol)。将混合物于50℃加热4小时，然后减压浓缩。将残余 物用DCM(600mL)稀释。将得到的有机混合物用水和盐水洗涤，用无水 硫酸钠干燥并减压浓缩。将残余物通过柱色谱纯化得到棕色油状2-(3-甲 氧基-2-甲基-苯基)-1-(2-噻吩基)乙酮(13.0g)。
步骤3:2-(3-甲氧基-2-甲基-苯基)-1-(2-噻吩基)乙胺的制备
向2-(3-甲氧基-2-甲基-苯基)-1-(2-噻吩基)乙酮(13.0g,52.8mmol)的 MeOH(130mL)溶液中于70℃下加入NH4OAc(40.7g,528mmol)。将混 合物于70℃加热1小时，然后冷却至0℃。于0℃下向该混合物中加 入NaBH3CN(6.63g,105mmol)。然后将得到的混合物于80℃加热12 小时。冷却至室温后，将混合物减压浓缩以除去大部分MeOH。将残余 物在H2O(100mL)和DCM(500mL)之间进行分配。分离有机层，用盐水 洗涤(100mL)，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩。将残余物通过柱色谱纯化 得到黄色固体状2-(3-甲氧基-2-甲基-苯基)-1-(2-噻吩基)乙胺(6.4g,粗品)。
步骤4:N-[2-(3-甲氧基-2-甲基-苯基)-1-(2-噻吩基)乙基]甲酰胺的制备
向2-(3-甲氧基-2-甲基-苯基)-1-(2-噻吩基)乙胺(5.4g,21.8mmol)的二 恶烷(60mL)溶液中加入甲酸(10.05g,218mmol)。将混合物于120℃加热 12小时。冷却至室温后，将混合物在H2O(200mL)和DCM(600mL)之 间进行分配。将有机层用盐水(200mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥并减压浓 缩。将残余物通过柱色谱纯化得到棕色油状N-[2-(3-甲氧基-2-甲基-苯 基)-1-(2-噻吩基)乙基]甲酰胺(3.4g)。
步骤5:6-甲氧基-5-甲基-3-(2-噻吩基)-3,4-二氢异喹啉的制备
向N-[2-(3-甲氧基-2-甲基-苯基)-1-(2-噻吩基)乙基]甲酰胺(2.9g,10.53mmol)在干燥DCM(40mL)中的混合物中于0℃下滴加POCl3(5.41g, 35.3mmol)。然后将混合物加热回流12小时。冷却至室温后，将混合物 倒入氨水(30mL)的H2O(100mL)溶液中。然后将混合物用DCM(200mL) 萃取。将有机层用盐水(100mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩得到 黄色油状6-甲氧基-5-甲基-3-(2-噻吩基)-3,4-二氢异喹啉粗品(4.0g)，其不 经进一步纯化直接用于下一步骤。
步骤6:9-甲氧基-8-甲基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-1,6,7,11b-四氢苯并[a]喹嗪 -3-甲酸乙酯的制备
将6-甲氧基-5-甲基-3-(2-噻吩基)-3,4-二氢异喹啉(2.0g,7.77mmol)和 2-(乙氧基亚甲基)-3-氧代-丁酸乙酯(4.34g,23.3mmol)的EtOH(30mL)溶 液于100℃加热48小时。冷却至室温后，将混合物减压浓缩得到9-甲氧 基-8-甲基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-1,6,7,11b-四氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯粗 品，其不经进一步纯化直接用于下一步骤。
步骤7:9-甲氧基-8-甲基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲 酸乙酯的制备
将9-甲氧基-8-甲基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-1,6,7,11b-四氢苯并[a]喹嗪-3- 甲酸乙酯(3.0g,7.55mmol)和对-四氯苯醌(1.3g,5.28mmol)的DME(30 mL)溶液在氮气氛下于80℃加热3小时。冷却至室温后，将混合物过滤。 将滤饼减压干燥得到黄色固体状9-甲氧基-8-甲基-2-氧代-6-(2-噻吩 基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯(1.3g)。
步骤8:9-甲氧基-8-甲基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲 酸的制备
向9-甲氧基-8-甲基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸 乙酯(200mg,506μmol)的MeOH(2mL)溶液中加入2M NaOH水溶液 (0.76mL,1.5mmol)。将混合物于25℃搅拌12小时，然后用H2O(20mL) 稀释并用1M盐酸酸化至pH＝3。将混合物用DCM(100mL)萃取。将有 机层用盐水(50mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩。将残余物通过 制备型HPLC纯化得到黄色固体状9-甲氧基-8-甲基-2-氧代-6-(2-噻吩 基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸(12mg)。1H NMR(400MHz,CDCl3):δ: 2.22(s,3H),3.37-3.69(m,2H),3.93(s,3H),5.73(br.s.,1H),6.81(d,1 H),6.85-6.91(m,1H),6.95(d,1H),7.12(s,1H),7.18(d,1H),7.66(d,1 H),8.59(s,1H)。MS实测值(ESI+)[(M+H)+]:368。
实施例12:9-苄氧基-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪 -3-甲酸
步骤1:2-苄氧基-4-溴-1-甲氧基-苯的制备
将5-溴-2-甲氧基-苯酚(100.0g,0.49mol)、K2CO3(102.0g,0.74mol) 和溴甲基苯(101.0g,0.59mol)在丙酮(1.5L)中的混合物加热回流16小时。 冷却至室温后，将混合物过滤。将滤液减压浓缩。将残余物通过研磨(PE, 300mL)进行纯化，得到白色固体状2-苄氧基-4-溴-1-甲氧基-苯(140.0g)。
步骤2:2-(3-苄氧基-4-甲氧基-苯基)-1-(2-噻吩基)乙酮的制备
将2-苄氧基-4-溴-1-甲氧基-苯(50.0g,0.17mol)、1-(2-噻吩基)乙酮 (32.3g,0.26mol)、t-BuONa(29.5g,0.31mol)、Xantphos(4.9g,8.53mmol) 和Pd2(dba)3(3.9g,4.26mmol)在THF(800ml)中的混合物在氮气氛下于 60℃加热5小时。冷却至室温后，将混合物过滤。将滤液减压浓缩。将 残余物通过快速柱色谱纯化得到浅黄色固体状2-(3-苄氧基-4-甲氧基-苯 基)-1-(2-噻吩基)乙酮(31.0g)。
步骤3:2-(3-苄氧基-4-甲氧基-苯基)-1-(2-噻吩基)乙胺的制备
将2-(3-苄氧基-4-甲氧基-苯基)-1-(2-噻吩基)乙酮(31.0g,0.092mol)和NH4OAc(49.4g,0.64mol)在MeOH(500ml)中的混合物回流6小时。将 形成的混合物冷却至室温，然后向混合物中分批加入NaBH3CN(8.6g, 0.14mol)。将形成的混合物回流16小时。冷却至室温后，将得到的反应 混合物减压浓缩并将残余物在EtOAc和H2O之间进行分配。将有机层用 盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩得到2-(3-苄氧基-4-甲氧基-苯 基)-1-(2-噻吩基)乙胺(38.0g)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤。
步骤4:N-[2-(3-苄氧基-4-甲氧基-苯基)-1-(2-噻吩基)乙基]甲酰胺的制备
将2-(3-苄氧基-4-甲氧基-苯基)-1-(2-噻吩基)乙胺(85.0g,0.25mol)和 甲酸(57.6g,1.25mol)在1,4-二恶烷(850ml)中的混合物回流48小时。将形 成的混合物冷却至室温并减压浓缩。将残余物在EtOAc和饱和NaHCO3水溶液之间进行分配。分离有机层，用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥并减 压浓缩。将残余物通过柱色谱纯化得到黄色油状N-[2-(3-苄氧基-4-甲氧基 -苯基)-1-(2-噻吩基)乙基]甲酰胺(41.5g)。
步骤5:6-苄氧基-7-甲氧基-3-(2-噻吩基)-3,4-二氢异喹啉的制备
向搅拌中的N-[2-(3-苄氧基-4-甲氧基-苯基)-1-(2-噻吩基)乙基]甲酰胺(35.0g,0.095mol)的DCM(400ml)溶液中在室温下加入POCl3(31.59g, 0.21mol)。将混合物于50℃加热1小时。冷却至室温后，将混合物倒入 搅拌中的氨水和DCM的混合物中。将有机相分离，用盐水洗涤，用无水 硫酸钠干燥并减压浓缩。将残余物通过快速柱色谱纯化得到浅黄色固体状 6-苄氧基-7-甲氧基-3-(2-噻吩基)-3,4-二氢异喹啉(25.3g)。
步骤6:9-苄氧基-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-1,6,7,11b-四氢苯并[a] 喹嗪-3-甲酸乙酯的制备
将6-苄氧基-7-甲氧基-3-(2-噻吩基)-3,4-二氢异喹啉(17.2g,0.049mol) 和2-(乙氧基亚甲基)-3-氧代-丁酸乙酯(27.5g,0.15mol)在EtOH(200ml) 中的混合物加热回流72小时。冷却至室温后，将混合物减压浓缩得到9- 苄氧基-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-1,6,7,11b-四氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸 乙酯粗品(24.0g)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤。
步骤7:9-苄氧基-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯的制备
将9-苄氧基-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-1,6,7,11b-四氢苯并[a]喹 嗪-3-甲酸乙酯(14.6g,0.029mol)和对-四氯苯醌(7.3g,0.029mol)在DME (150ml)中的混合物于80℃加热3小时。将混合物冷却至室温并过滤。 将滤饼干燥得到浅黄色固体状9-苄氧基-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩 基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯(7.0g,收率:48％)。
步骤8:9-苄氧基-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸的制备
将9-苄氧基-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲 酸乙酯(100mg,0.21mmol)和NaOH(16mg)在H2O(0.2mL)和THF(5 mL)的溶剂混合物中的混合物于室温下搅拌16小时。将混合物减压浓缩。 将残余物用H2O稀释并用1M盐酸酸化至pH＝2-3。然后将混合物过滤。 将滤饼减压干燥得到黄色固体状9-苄氧基-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩 基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸(54mg)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ: 3.30-3.39(m,1H),3.73(dd,1H),3.88(s,3H),5.16(s,2H),6.35(d,1H), 6.87-6.94(m,1H),7.02(d,1H),7.20(s,1H),7.32-7.43(m,4H),7.44- 7.50(m,2H),7.54(d,2H),8.99(s,1H)。MS实测值(ESI+)[(M+H)+]:460。
实施例13:9,10-二甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸
步骤1:9-羟基-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯的制备
将9-苄氧基-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲 酸乙酯(5.0g,0.01mol,得自实施例12的步骤7)和茴香硫醚(13.66g,0.11 mmol)在TFA(50mL)中的混合物于室温下搅拌16小时。将形成的混合物 在DCM和H2O之间进行分配。分离有机层，用饱和NaHCO3水溶液和 盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩。将残余物用DCM/己烷重结晶 得到黄色固体状9-羟基-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯(3.50g)。
步骤2:9,10-二甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯的制备
将9-羟基-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸 乙酯(210mg,0.53mmol)、K2CO3(132mg,0.95mmol)和碘甲烷(113mg, 0.79mmol)在丙酮(5mL)中的混合物于50℃加热16小时。将混合物减压 浓缩并将残余物在EtOAc和H2O之间进行分配。分离有机层，用无水硫 酸钠干燥并减压浓缩。将残余物用溶剂混合物(PE:EA＝1:1)重结晶得到浅 黄色固体状9,10-二甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯(200mg)。
步骤3:9,10-二甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸的制备
将9,10-二甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙 酯(100mg,0.24mmol)和NaOH(20mg)在MeOH(2mL)和H2O(0.2mL) 中的混合物于室温下搅拌16小时。将形成的混合物减压浓缩。将残余物 用H2O稀释并用1M盐酸酸化至pH＝2-3。将混合物过滤。将滤饼减压干 燥得到白色固体状9,10-二甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹 嗪-3-甲酸(46mg)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:3.37-3.39(m,1H), 3.73(dd,1H),3.85(d,6H),6.35(d,1H),6.90(t,1H),6.99-7.12(m,2H), 7.36(d,1H),7.51(d,2H),8.98(s,1H)。MS实测值(ESI+)[(M+H)+]:384。
实施例14:9-异丁氧基-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸
步骤1:9-异丁氧基-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪 -3-甲酸乙酯的制备
将9-羟基-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸 乙酯(150mg,0.38mmol)、1-溴-2-甲基-丙烷(78mg,0.57mmol)和K2CO3 (78mg,0.57mmol)在DMF(5ml)中的混合物于50℃加热16小时。将混 合物在H2O和DCM之间进行分配。分离有机层，用盐水洗涤，用无水 硫酸钠干燥并减压浓缩。将残余物用PE/EtOAc重结晶得到浅黄色固体状9-异丁氧基-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙 酯(110mg)。
步骤2:9-异丁氧基-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪 -3-甲酸的制备
将9-异丁氧基-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3- 甲酸乙酯(80mg,0.18mmol)和NaOH(14mg)在MeOH(2mL)和H2O (0.2mL)中的混合物于室温下搅拌16小时。将混合物减压浓缩。将残余 物用H2O稀释并用1M盐酸酸化至pH＝2-3。将形成的混合物过滤。将滤 饼减压干燥得到白色固体状9-异丁氧基-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸(38mg)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ: 0.98(d,6H),1.98-2.12(m,1H),3.37(br.s.,1H),3.70(dd,1H),3.80(d, 2H),3.88(s,3H),6.27-6.39(m,1H),6.88-6.93(m,1H),7.02(d,1H), 7.07(s,1H),7.36(d,1H),7.50(d,2H),8.98(s,1H)。MS实测值(ESI+) [(M+H)+]:426。
实施例15:9-(环丙基甲氧基)-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯 并[a]喹嗪-3-甲酸
步骤1:9-(环丙基甲氧基)-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并 [a]喹嗪-3-甲酸乙酯的制备
将9-羟基-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸 乙酯(150mg,0.38mmol)、溴甲基环丙烷(76mg,0.57mmol)和K2CO3(78 mg,0.57mmol)在DMF(5ml)中的混合物于室温下搅拌16小时。将形成 的混合物在H2O和DCM之间进行分配。将有机层用盐水洗涤，用无水 硫酸钠干燥并减压浓缩。将残余物用PE/EA重结晶得到浅黄色固体状 9-(环丙基甲氧基)-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3- 甲酸乙酯(140mg)。
步骤2:9-(环丙基甲氧基)-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸的制备
将9-(环丙基甲氧基)-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a] 喹嗪-3-甲酸乙酯(70mg,0.16mmol)和NaOH(12mg)在MeOH(2mL)和 H2O(0.1mL)中的混合物于室温下搅拌16小时。将形成的混合物减压浓 缩。将残余物用H2O稀释并用1M盐酸酸化至pH＝2-3。将混合物过滤并 将滤饼减压干燥得到9-(环丙基甲氧基)-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩 基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:0.26- 0.39(m,2H),0.53-0.64(m,2H),1.17-1.33(m,1H),3.31(s,1H),3.70 (dd,1H),3.81-3.95(m,5H),6.34(d,1H),6.90(dd,1H),6.98-7.07(m, 2H),7.35(dd,1H),7.51(d,2H),8.98(s,1H)。MS实测值(ESI+)[(M+H)+]: 424。
实施例16:10-甲氧基-2-氧代-9-(3-吡唑-1-基丙氧基)-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸
步骤1:1-(3-溴丙基)吡唑的制备
向1H-吡唑(1g,14.7mmol)的丙酮(20mL)溶液中加入K2CO3(4.06g, 29.4mmol)和1,3-二溴丙烷(14.8g,73.4mmol)。将混合物于30℃加热12 小时。将混合物减压浓缩并将残余物在H2O(150mL)和EtOAc(200mL) 之间进行分配。分离有机层，用盐水洗涤(150mL)，用无水硫酸钠干燥并 减压浓缩。将残余物通过柱色谱纯化得到黄色油状化合物1-(3-溴丙基)吡唑(500mg)。
步骤2:10-甲氧基-2-氧代-9-(3-吡唑-1-基丙氧基)-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢 苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯的制备
向化合物9-羟基-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪 -3-甲酸乙酯(150mg,377μmol)的DMF(3mL)溶液中加入K2CO3(104mg, 754μmol)和1-(3-溴丙基)吡唑(85.6mg,453μmol)。将混合物于30℃加热 12小时然后在H2O(50mL)和EtOAc(100mL)之间进行分配。分离有机 层，用盐水(50mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩。将残余物通过 柱色谱纯化得到黄色油状10-甲氧基-2-氧代-9-(3-吡唑-1-基丙氧基)-6-(2- 噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯粗品(100mg)。
步骤3:10-甲氧基-2-氧代-9-(3-吡唑-1-基丙氧基)-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢 苯并[a]喹嗪-3-甲酸的制备
向10-甲氧基-2-氧代-9-(3-吡唑-1-基丙氧基)-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯 并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯(100mg,198μmol)的MeOH(2mL)溶液中加入2M NaOH水溶液(0.197mL,395μmol)。将混合物于30℃搅拌12小时，然 后减压浓缩。将残余物用H2O(20mL)稀释并用1M盐酸酸化至pH＝3。 然后将得到的混合物用DCM(100mL)萃取。将有机层用盐水(50mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩。将残余物通过制备型HPLC纯化得 到白色固体状10-甲氧基-2-氧代-9-(3-吡唑-1-基丙氧基)-6-(2-噻吩基)-6,7- 二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸(13.8mg)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:2.25 (t,2H),3.23-3.28(m,1H),3.70(dd,1H),3.90(s,3H),3.94-4.07(m,2 H),4.27(t,2H),6.23(t,1H),6.33(d,1H),6.90(dd,1H),7.02(s,2H), 7.36(d,1H),7.44(d,1H),7.52(d,2H),7.72(d,1H),8.98(s,1H)。MS实 测值(ESI+)[(M+H)+]:478。
实施例17:9-(3-羟基丙氧基)-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸
步骤1:9-(3-羟基丙氧基)-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯的制备
向化合物9-羟基-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪 -3-甲酸乙酯(150mg,377μmol)的DMF(3mL)溶液中加入K2CO3(78mg, 566μmol)和3-溴丙-1-醇(79mg,566μmol)。将混合物于30℃加热12小 时，然后在H2O(50mL)和EtOAc(100mL)之间进行分配。分离有机层， 用盐水(50mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩得到棕色油状9-(3-羟 基丙氧基)-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙 酯粗品(200mg)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤。
步骤2:9-(3-羟基丙氧基)-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸的制备
向9-(3-羟基丙氧基)-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a] 喹嗪-3-甲酸乙酯(200mg,439μmol)的MeOH(2mL)溶液中加入2M NaOH水溶液(0.439mL,878μmol)。将混合物于30℃搅拌12小时，然 后减压浓缩。将残余物用H2O(20mL)稀释并用1M盐酸酸化至pH＝3。 然后将得到的混合物用DCM(100mL)萃取。将有机层用盐水(50mL)洗 涤，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩。将残余物通过制备型HPLC纯化得 到黄色固体状9-(3-羟基丙氧基)-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢 苯并[a]喹嗪-3-甲酸(7.9mg)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:1.89(t,2 H),3.33(br.s.,1H),3.55(t,2H),3.71(d,1H),3.87(s,3H),4.09(t,2H), 4.60(br.s.,1H),6.33(br.s.,1H),6.82-6.94(m,1H),6.96-7.13(m,2H), 7.35(d,1H),7.50(br.s.,2H),8.97(br.s.,1H)。MS实测值(ESI+) [(M+H)+]:428。
实施例18:10-甲氧基-2-氧代-9-[3-(1-哌啶基)丙氧基]-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸甲酸盐
步骤1:9-(3-溴丙氧基)-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a] 喹嗪-3-甲酸乙酯的制备
将9-羟基-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸 乙酯(400mg,1.0mmol)、1,3-二溴丙烷(244mg,1.21mmol)和K2CO3(209 mg,1.51mmol)在DMF(7mL)中的混合物于室温下搅拌16小时。将混合 物在H2O和DCM之间进行分配。分离有机层，用盐水洗涤，用无水硫 酸钠干燥并减压浓缩得到9-(3-溴丙氧基)-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩 基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯粗品(500mg)，其不经进一步纯化直 接用于下一步骤。
步骤2:10-甲氧基-2-氧代-9-[3-(1-哌啶基)丙氧基]-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯的制备
将9-(3-溴丙氧基)-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹 嗪-3-甲酸乙酯(200mg,0.39mmol)、哌啶(164mg,1.93mmol)和K2CO3 (267mg,1.93mmol)在DMF(5mL)中的混合物于室温下搅拌16小时。将 混合物在H2O和DCM之间进行分配。分离有机层，用盐水洗涤，用无 水硫酸钠干燥并减压浓缩得到10-甲氧基-2-氧代-9-[3-(1-哌啶基)丙氧 基]-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯粗品(140mg)，其不经进 一步纯化直接用于下一步骤。
步骤3:10-甲氧基-2-氧代-9-[3-(1-哌啶基)丙氧基]-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸甲酸盐的制备
将10-甲氧基-2-氧代-9-[3-(1-哌啶基)丙氧基]-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯 并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯(140mg,0.27mmol)和NaOH(21mg)在MeOH(3 mL)和H2O(0.3mL)中的混合物于室温下搅拌16小时。将混合物减压浓 缩。将残余物用H2O稀释并用1M盐酸酸化至pH＝2-3。将形成的混合物 过滤。将滤饼干燥并通过制备型HPLC纯化(含有甲酸作为添加剂)得到白 色固体状10-甲氧基-2-氧代-9-[3-(1-哌啶基)丙氧基]-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸甲酸盐(23mg)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:1.39 (d,2H),1.46-1.57(m,4H),1.91(t,2H),2.36-2.48(m,6H),3.34(s.,1 H),3.72(dd,1H),3.88(s,3H),4.07(t,2H),6.34(d,1H),6.85-6.95(m,1 H),7.00-7.11(m,2H),7.36(d,1H),7.45-7.56(m,2H),8.21(s,1H), 8.98(s,1H)。MS实测值(ESI+)[(M+H)+]:495。
实施例19:9-(3-氰基丙氧基)-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯 并[a]喹嗪-3-甲酸
步骤1:9-(3-氰基丙氧基)-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯的制备
向化合物9-羟基-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪 -3-甲酸乙酯(150mg,377μmol)的DMF(3mL)溶液中加入K2CO3(78mg, 566μmol)和4-溴丁腈(84mg,566μmol)。然后将混合物于30℃搅拌12 小时。将混合物在H2O(50mL)和EtOAc(100mL)之间进行分配。分离 有机层，用盐水(50mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩得到棕色油 状9-(3-氰基丙氧基)-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯粗品(190mg)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤。
步骤2:9-(3-氰基丙氧基)-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸的制备
向9-(3-氰基丙氧基)-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a] 喹嗪-3-甲酸乙酯(190mg,409μmol)的THF(2mL)溶液中加入2M LiOH 水溶液(0.409mL,818μmol)。将混合物于30℃搅拌12小时，然后减压 浓缩。将残余物用H2O(20mL)稀释并用1M盐酸酸化至pH＝3。然后将 得到的混合物用DCM(100mL)萃取。将有机层用盐水(50mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩。将残余物通过制备型HPLC纯化得到白色 固体状9-(3-氰基丙氧基)-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a] 喹嗪-3-甲酸(32.5mg)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:1.97-2.15(m,2 H),2.65(t,2H),3.42-3.49(m,1H),3.72(dd,1H),3.89(s,3H),4.10(t,2 H),6.35(br.s.,1H),6.91(dd,1H),7.03(br.s.,1H),7.11(s,1H),7.30- 7.41(m,1H),7.53(d,2H),8.99(s,1H)。MS实测值(ESI+)[(M+H)+]:437。
实施例20:10-甲氧基-2-氧代-9-[2-(2-氧代吡咯烷-1-基)乙氧基]-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸
步骤1:9-(2-溴乙氧基)-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a] 喹嗪-3-甲酸乙酯的制备
将9-羟基-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸 乙酯(100mg,0.25mmol)、1,2-二溴乙烷(57mg,0.30mmol)和K2CO3(53 mg,0.38mmol)在DMF(3ml)中的混合物于室温下搅拌16小时。将混合 物在H2O和DCM之间进行分配。分离有机层，用盐水洗涤，用无水硫 酸钠干燥并减压浓缩得到9-(2-溴乙氧基)-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩 基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯粗品(130mg)，其不经进一步纯化直 接用于下一步骤。
步骤2:10-甲氧基-2-氧代-9-[2-(2-氧代吡咯烷-1-基)乙氧基]-6-(2-噻吩 基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸的制备
向冷却并搅拌中的吡咯烷-2-酮(290mg,3.41mmol)的DMF(2mL)溶 液中于0℃下加入NaH(50mg,1.25mmol)。加料完成后，将形成的混合 物升温至室温并搅拌10分钟。然后向混合物中加入9-(2-溴乙氧基)-10-甲 氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯(130mg,0.25 mmol)并将形成的混合物于室温搅拌16小时。加入饱和NH4Cl水溶液终 止反应，然后将混合物用EtOAc萃取。将有机层用盐水洗涤，用无水硫 酸钠干燥并减压浓缩。将残余物通过制备型HPLC纯化得到白色固体状 10-甲氧基-2-氧代-9-[2-(2-氧代吡咯烷-1-基)乙氧基]-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢 苯并[a]喹嗪-3-甲酸(7.0mg)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:1.91(quin, 2H),2.15-2.26(m,2H),3.31-3.32(m,1H),3.48(t,2H),3.56(t,2H), 3.71(dd,1H),3.88(s,3H),4.13(t,2H),6.34(d,1H),6.90(dd,1H),7.01(d,1H),7.10(s,1H),7.36(d,1H),7.52(d,2H),8.92-9.03(m,1H)。MS 实测值(ESI+)[(M+H)+]:481。
实施例21:9-[6-(叔丁氧基羰基氨基)己氧基]-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸
步骤1:9-[6-(叔丁氧基羰基氨基)己氧基]-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩 基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯的制备
向9-羟基-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸 乙酯(120mg,0.3mmol)的DMF(3mL)溶液中加入K2CO3(83mg,0.6 mmol)和(6-溴己基)氨基甲酸叔丁酯(101mg,0.36mmol)。将混合物于30℃ 搅拌12小时，然后在H2O(50mL)和EtOAc(100mL)之间进行分配。分 离有机层，用盐水(50mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩得到黄色 油状9-[6-(叔丁氧基羰基氨基)己氧基]-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯粗品(140mg)，其不经进一步纯化直接用于下 一步骤。
步骤2:9-[6-(叔丁氧基羰基氨基)己氧基]-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩 基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸的制备
向9-[6-(叔丁氧基羰基氨基)己氧基]-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩 基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯粗品(70mg,0.117mmol)的MeOH(1 mL)溶液中加入2M NaOH水溶液(0.117mL,0.234mmol)。将混合物于 30℃搅拌2小时，然后用H2O(20mL)稀释。将形成的混合物用1M盐 酸酸化至pH＝3，然后用DCM(100mL)萃取。将有机层用盐水(50mL) 洗涤，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩。将残余物通过制备型HPLC纯化 得到白色固体状9-[6-(叔丁氧基羰基氨基)己氧基]-10-甲氧基-2-氧代-6-(2- 噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸(18.1mg)。1H NMR(400MHz, DMSO-d6)δ:1.36(s,15H)1.71(d,2H)2.81-2.98(m,2H)3.11-3.28(m, 1H)3.70(d,1H)3.87(s,3H)4.01(t,2H)6.33(br.s.,1H)6.77(br.s.,1H) 6.84-6.95(m,1H)6.96-7.12(m,2H)7.35(d,1H)7.50(br.s.,2H)8.96 (br.s.,1H)。MS实测值(ESI+)[(M+H)+]:569。
实施例22:9-(6-氨基己氧基)-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸甲酸盐
步骤1:9-(6-氨基己氧基)-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯盐酸盐的制备
将9-[6-(叔丁氧基羰基氨基)己氧基]-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩 基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯(70mg,117μmol)的HCl/二恶烷(3 mL)溶液于30℃搅拌12小时。将混合物减压浓缩得到黄色油状9-(6-氨 基己氧基)-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙 酯盐酸盐粗品(60mg)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤。
步骤2:9-(6-氨基己氧基)-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸甲酸盐的制备
向9-(6-氨基己氧基)-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a] 喹嗪-3-甲酸乙酯盐酸盐(60mg,0.112mmol)的MeOH(1mL)溶液中加入 2M NaOH(0.112mL,0.224mmol)。将混合物于30℃搅拌2小时，然后 减压浓缩。将残余物用H2O(20mL)稀释并用1M盐酸酸化至pH＝3。然 后将混合物用DCM(60mL)萃取。将有机层用盐水(50mL)洗涤，用无水 硫酸钠干燥并减压浓缩。将残余物通过制备型HPLC纯化(含有甲酸作为 添加剂)得到黄色固体状化合物9-(6-氨基己氧基)-10-甲氧基-2-氧代-6-(2- 噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸甲酸盐(12mg)。1H NMR(400MHz, DMSO-d6)δ:1.38(br.s.,4H),1.48-1.63(m,2H),1.64-1.82(m,2H), 2.74(t,2H),3.31(br.s.,1H),3.72(d,1H),3.87(s,3H),4.01(t,2H),6.33 (br.s.,1H),6.90(dd,1H),6.95-7.11(m,2H),7.35(d,1H),7.45-7.52(m, 1H),8.40(br.s.,1H),8.95(br.s.,1H)。MS实测值(ESI+)[(M+H)+]:469。
实施例23:9-(6-乙酰氨基己氧基)-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸
步骤1:9-(6-乙酰氨基己氧基)-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢 苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯的制备
向9-(6-氨基己氧基)-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a] 喹嗪-3-甲酸乙酯盐酸盐(80mg,0.15mmol)的DCM(3mL)溶液中加入 DIPEA(97mg,0.75mmol)和乙酰氯(95mg,0.75mmol)。将混合物于30℃ 搅拌12小时，然后用H2O(20mL)稀释。将得到的混合物用DCM萃取 (60mL)。将有机层用盐水(50mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩得到黄色油状9-(6-乙酰氨基己氧基)-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二 氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯粗品(100mg)，其不经进一步纯化直接用于下一 步骤。
步骤2:9-(6-乙酰氨基己氧基)-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢 苯并[a]喹嗪-3-甲酸的制备
向9-(6-乙酰氨基己氧基)-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯 并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯(100mg,0.185mmol)的MeOH(2mL)溶液中加入 2M NaOH水溶液(0.186mL,0.371mmol)。将混合物于30℃搅拌2小时， 然后减压浓缩。将残余物用H2O(20mL)稀释并用1M盐酸酸化至pH＝3。 然后将混合物用DCM(60mL)萃取。将有机层用盐水(50mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩。将残余物通过制备型HPLC纯化得到白色固 体状9-(6-乙酰氨基己氧基)-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并 [a]喹嗪-3-甲酸(17.5mg)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:1.25-1.48(m, 6H),1.66-1.76(m,2H),1.77(s,3H),3.01(q,2H),3.39-3.47(m,1H), 3.71(dd,1H),3.87(s,3H),4.02(t,2H),6.34(d,1H),6.90(dd,1H),7.00 -7.11(m,2H),7.36(dd1H),7.51(d,2H),7.78(br.s.,1H),8.98(s,1H)。 MS实测值(ESI+)[(M+H)+]:511。
实施例24:9-[6-(甲磺酰氨基)己氧基]-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸
步骤1:9-[6-(甲磺酰氨基)己氧基]-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯的制备
向9-(6-氨基己氧基)-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a] 喹嗪-3-甲酸乙酯盐酸盐(100mg,0.187mmol)的DCM(3mL)溶液中加入 DIPEA(121mg,0.937mmol)和甲磺酰氯(107mg,937μmol)。将混合物于 30℃搅拌12小时，然后减压浓缩。将残余物在H2O(20mL)和DCM(60 mL)之间进行分配。分离有机层，用盐水(50mL)洗涤，用无水硫酸钠干 燥并减压浓缩得到黄色油状9-[6-(甲磺酰氨基)己氧基]-10-甲氧基-2-氧代 -6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯粗品(100mg)，其不经进一 步纯化直接用于下一步骤。
步骤2:9-[6-(甲磺酰氨基)己氧基]-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸的制备
向9-[6-(甲磺酰氨基)己氧基]-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢 苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯(100mg,0.174mmol)的MeOH(2mL)溶液中加 入2M NaOH(0.174mL,0.348mmol)。将混合物于30℃搅拌2小时，然 后用H2O(20mL)稀释并用1M盐酸酸化至pH＝3。然后将得到的混合物 用DCM(60mL)萃取。将有机层用盐水(50mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩。将残余物通过制备型HPLC纯化得到黄色固体状9-[6-(甲磺 酰氨基)己氧基]-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲 酸(53.3mg)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:1.32-1.53(m,6H),1.66- 1.81(m,2H),2.87(s,3H),2.92(q,2H),3.40-3.48(m,1H),3.71(dd,1H), 3.87(s,3H),4.02(t,2H),6.34(d,1H),6.85-6.96(m,2H),6.98-7.11(m, 2H),7.36(dd,1H),7.50(d,2H),8.98(s,1H)。MS实测值(ESI+)[(M+H)+]:547。
实施例25:9-(6-羟基己氧基)-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸
步骤1:9-(6-羟基己氧基)-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯的制备
向化合物9-羟基-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪 -3-甲酸乙酯(150mg,0.377mmol)的DMF(3mL)溶液中加入K2CO3(104 mg,754μmol)和6-溴己-1-醇(102mg,0.566mmol)。将混合物于30℃搅 拌12小时，然后在H2O(50mL)和EtOAc(100mL)之间进行分配。分离 有机层，用盐水(50mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩得到9-(6-羟基己氧基)-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙 酯(90mg)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤。
步骤2:9-(6-羟基己氧基)-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸的制备
向9-(6-羟基己氧基)-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a] 喹嗪-3-甲酸乙酯(90mg,0.181mmol)的MeOH(2mL)溶液中加入2M NaOH水溶液(0.181mL,0.362mmol)。将混合物于30℃搅拌12小时， 然后用H2O(20mL)稀释并用1M盐酸酸化至pH＝3。将得到的混合物用 DCM(100mL)萃取。将有机层用盐水(50mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩。将残余物通过制备型HPLC纯化得到白色固体状9-(6-羟基己 氧基)-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸(48 mg)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:1.15-1.55(m,6H),1.73(br.s.,2 H),3.12-3.30(m,1H),3.73(br.s.,1H),3.86(br.s.,3H),4.01(br.s.,2H), 4.39(br.s.,2H),6.33(br.s.,1H),6.90(d,1H),7.04(d,2H),7.35(br.s.,1 H),7.50(br.s.,2H),8.97(br.s.,1H)。MS实测值(ESI+)[(M+H)+]:470。
实施例26:9-(3-羟基-2,2-二甲基-丙氧基)-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩 基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸
步骤1:9-(3-羟基-2,2-二甲基-丙氧基)-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩 基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯的制备
将9-羟基-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸 乙酯(100mg,0.25mmol)、3-溴-2,2-二甲基-丙-1-醇(63mg,0.38mmol)和 K2CO3(52mg,0.38mmol)在DMF(3ml)中的混合物于80℃加热16小 时。冷却至室温后，将混合物在H2O和DCM之间进行分配。分离有机 层，用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩得到9-(3-羟基-2,2-二甲 基-丙氧基)-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙 酯粗品(130mg)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤。
步骤2:9-(3-羟基-2,2-二甲基-丙氧基)-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩 基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸的制备
将9-(3-羟基-2,2-二甲基-丙氧基)-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7- 二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯(130mg,0.27mmol)和NaOH(22mg)在H2O (0.3mL)和MeOH(2mL)中的混合物于室温下搅拌16小时。将混合物减 压浓缩。将残余物用H2O稀释并用1M盐酸酸化至pH＝2-3。将形成的混 合物过滤。将滤饼通过制备型HPLC纯化得到黄色固体状9-(3-羟基-2,2- 二甲基-丙氧基)-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸(52mg)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:0.93(s,6H),3.29(br.s.,2 H),3.32-3.33(m,1H),3.66-3.74(m,1H),3.74-3.79(m,2H),3.88(s,3 H),6.34(d,1H),6.90(dd,1H),7.01(d,1H),7.06(s,1H),7.32-7.38(m, 1H),7.50(d,2H),8.97(s,1H)。MS实测值(ESI+)[(M+H)+]:456。
实施例27:10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-9-(2,2,2-三氟乙氧基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸
步骤1:10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-9-(2,2,2-三氟乙氧基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯的制备
将9-羟基-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸 乙酯(150mg,0.38mmol)、1,1,1-三氟-2-碘-乙烷(119mg,0.57mmol)和 K2CO3(78mg,0.57mmol)在DMF(5ml)中的混合物于70℃加热6小时。 将混合物在H2O和DCM之间进行分配。分离有机层，用盐水洗涤，用 无水硫酸钠干燥并减压浓缩。将残余物用PE/EA重结晶得到白色固体状10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-9-(2,2,2-三氟乙氧基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪 -3-甲酸乙酯(100mg)。
步骤2:10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-9-(2,2,2-三氟乙氧基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸的制备
将10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-9-(2,2,2-三氟乙氧基)-6,7-二氢苯并 [a]喹嗪-3-甲酸乙酯(70mg,0.15mmol)和NaOH(12mg)在H2O(0.1mL) 和THF(2mL)中的混合物于室温下搅拌16小时。将混合物减压浓缩。将 残余物用H2O稀释并用1M盐酸酸化至pH＝2-3。将形成的混合物过滤。 将滤饼通过制备型HPLC纯化得到白色固体状10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻 吩基)-9-(2,2,2-三氟乙氧基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸(25mg)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:3.30(s,1H),3.75(dd,1H),3.90(s,3H),4.82(q, 2H)6.37(d,1H),6.90(dd,1H),7.02(d,1H),7.21(s,1H),7.32-7.42(m, 1H),7.60(d,2H),9.02(s,1H)。MS实测值(ESI+)[(M+H)+]:452。
实施例28:10-甲氧基-9-(3-吗啉代丙氧基)-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢 苯并[a]喹嗪-3-甲酸
步骤1:10-甲氧基-9-(3-吗啉代丙氧基)-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯 并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯的制备
将9-(3-溴丙氧基)-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹 嗪-3-甲酸乙酯(130mg,0.25mmol,实施例18的步骤1)、吗啉(109mg,1.25 mmol)和K2CO3(173mg,1.25mmol)在DMF(3ml)中的混合物于室温下 搅拌16小时。将混合物在H2O和DCM之间进行分配。将有机层用盐水 洗涤，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩。将残余物通过快速柱色谱纯化得到 黄色油状10-甲氧基-9-(3-吗啉代丙氧基)-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯 并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯(100mg)。
步骤2:10-甲氧基-9-(3-吗啉代丙氧基)-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸的制备
将10-甲氧基-9-(3-吗啉代丙氧基)-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a] 喹嗪-3-甲酸乙酯(100mg,0.27mmol)和NaOH(15mg)在MeOH(2mL)和 H2O(0.2mL)中的混合物于室温下搅拌16小时。将混合物减压浓缩。将 残余物用H2O稀释并用1M盐酸酸化至pH＝2-3。将形成的混合物过滤。 将滤饼通过制备型HPLC纯化得到白色固体状10-甲氧基-9-(3-吗啉代丙 氧基)-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸(7mg)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:1.90(quin,2H),2.35(m,4H),2.41(t,2H),3.33 (m,1H),3.56(t,4H),3.70(dd,1H),3.87(s,3H),4.07(t,2H),6.32(m,1 H),6.91(dd,1H),6.97-7.13(m,2H),7.29-7.40(m,1H),7.45-7.54(m, 1H),8.33(s,1H),8.94(s,1H)。MS实测值(ESI+)[(M+H)+]:497。
实施例29:10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-9-[3-(1,2,4-三唑-1-基)丙氧基]-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸
步骤1:1-(3-溴丙基)-1,2,4-三唑的制备
向1H-1,2,4-三唑(1g,14.5mmol)的DMF(10mL)溶液中加入NaH (596mg,14.9mmol)并将混合物搅拌15分钟。然后向混合物中加入1,3- 二溴丙烷(14.6g,72.4mmol)。将形成的混合物于30℃搅拌12小时，然 后在H2O(150mL)和EtOAc(200mL)之间进行分配。分离有机层，用盐 水(150mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩。将残余物通过柱色谱纯 化得到黄色油状1-(3-溴丙基)-1,2,4-三唑粗品(300mg)。
步骤2:10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-9-[3-(1,2,4-三唑-1-基)丙氧基]-6,7- 二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯的制备
向9-羟基-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸 乙酯(150mg,0.377mmol)的DMF(3mL)溶液中加入K2CO3(104mg,754 μmol)和1-(3-溴丙基)-1,2,4-三唑(107mg,0.566mmol)。将混合物于30℃ 搅拌12小时，然后在H2O(50mL)和EtOAc(100mL)之间进行分配。将 有机层用盐水(50mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩得到棕色油状 10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-9-[3-(1,2,4-三唑-1-基)丙氧基]-6,7-二氢苯 并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯粗品(200mg)，其不经进一步纯化直接用于下一步 骤。
步骤3:10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-9-[3-(1,2,4-三唑-1-基)丙氧基]-6,7- 二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸的制备
向10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-9-[3-(1,2,4-三唑-1-基)丙氧基]-6,7- 二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯(200mg,0.395mmol)的MeOH(2mL)溶液 中加入2M NaOH水溶液(0.395mL,0.790mmol)。将混合物于30℃搅拌 12小时，然后减压浓缩。将残余物用H2O(20mL)稀释并用1M盐酸酸化 至pH＝3。将得到的混合物用DCM(100mL)萃取。将有机层用盐水(50mL) 洗涤，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩。将残余物通过制备型HPLC纯化 得到白色固体状10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-9-[3-(1,2,4-三唑-1-基)丙 氧基]-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸(61mg)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6) δ:2.28(t,2H),3.23-3.31(m,1H),3.71(dd,1H),3.90(s,3H),4.05(d,2 H),4.35(t,2H),6.34(d,1H),6.91(dd,1H),6.99-7.08(m,2H),7.36(dd, 1H),7.53(d,2H),7.98(s,1H),8.53(s,1H),8.99(s,1H)。MS实测值(ESI+)[(M+H)+]:479。
实施例30:9-(3-羧基丙氧基)-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸
步骤1:9-(4-乙氧基-4-氧代-丁氧基)-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯的制备
将9-羟基-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸 乙酯(100mg,0.25mmol)、4-溴丁酸乙酯(74mg,0.38mmol)和K2CO3(52 mg,0.38mmol)在DMF(3mL)中的混合物于室温下搅拌16小时。将混合 物在H2O和DCM之间进行分配。分离有机层，用盐水洗涤，用无水硫 酸钠干燥并减压浓缩。将残余物用PE/EA重结晶得到白色固体状9-(4-乙 氧基-4-氧代-丁氧基)-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪 -3-甲酸乙酯(60mg)。
步骤2:9-(3-羧基丙氧基)-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸的制备
将9-(4-乙氧基-4-氧代-丁氧基)-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二 氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯(60mg,0.12mmol)和NaOH(20mg)在MeOH (2mL)和H2O(0.1mL)中的混合物于室温下搅拌16小时。将混合物减压 浓缩。将残余物用H2O稀释并用1M盐酸酸化至pH＝2-3。将形成的混合 物过滤，然后将滤饼减压干燥得到白色固体状9-(3-羧基丙氧基)-10-甲氧 基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸(26mg)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:1.96(t,2H),2.39(t,2H),3.36(m,1H),3.71(d, 1H),3.88(s,3H),4.05(br.s.,2H),6.35(br.s.,1H),6.90(br.s.,1H), 7.05(d,2H),7.35(d,1H),7.51(d,2H),8.98(s,1H),12.17(br.s.,1H)。 MS实测值(ESI+)[(M+H)+]:456。
实施例31:10-甲氧基-9-(3-甲硫基丙氧基)-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸
步骤1:甲磺酸3-甲硫基丙基酯的制备
向3-甲硫基丙-1-醇(500mg,4.71mmol)的DCM(5mL)溶液中加入 Et3N(2.38g,23.5mmol)和甲磺酰氯(2.86g,25.0mmol)。将混合物于30℃ 搅拌12小时，然后在H2O(20mL)和DCM(60mL)之间进行分配。分离 有机层，用盐水(50mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩得到黄色油 状甲磺酸3-甲硫基丙基酯粗品(600mg)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤。
步骤2:10-甲氧基-9-(3-甲硫基丙氧基)-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯 并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯的制备
向9-羟基-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸 乙酯(100mg,0.251mmol)的DMF(3mL)溶液中加入K2CO3(69.6mg, 0.503mmol)和甲磺酸3-甲硫基丙基酯(69.6mg,0.377mmol)。将混合物于 30℃搅拌12小时，然后在H2O(50mL)和EtOAc(100mL)之间进行分 配。分离有机层，用盐水(50mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩得到黄色油状10-甲氧基-9-(3-甲硫基丙氧基)-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢 苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯粗品(120mg)，其不经进一步纯化直接用于下一步 骤。
步骤3:10-甲氧基-9-(3-甲硫基丙氧基)-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸的制备
向10-甲氧基-9-(3-甲硫基丙氧基)-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a] 喹嗪-3-甲酸乙酯(120mg,0.247mmol)的MeOH(1mL)溶液中加入2M NaOH水溶液(0.247mL,0.494mmol)。将混合物于30℃搅拌2小时，然 后减压浓缩。将残余物用H2O(20mL)稀释并用1M盐酸酸化至pH＝3。 然后将得到的混合物用DCM(60mL)萃取。将有机层用盐水(50mL)洗涤， 用无水硫酸钠干燥并减压浓缩。将残余物通过制备型HPLC纯化得到白 色固体状10-甲氧基-9-(3-甲硫基丙氧基)-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯 并[a]喹嗪-3-甲酸(14.9mg)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:1.94-2.03 (m,2H),2.04-2.10(m,3H),2.61(t,2H),3.41-3.52(m,1H),3.72(dd,1 H),3.88(s,3H),4.11(t,2H),6.34(d,1H),6.90(dd,1H),6.99-7.15(m,2 H),7.36(dd,1H),7.51(d,2H),8.98(s,1H)。MS实测值(ESI+)[(M+H)+]:458。
实施例32:10-甲氧基-9-(3-甲基磺酰基丙氧基)-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸
步骤1:甲磺酸3-甲基磺酰基丙基酯的制备
向3-甲基磺酰基丙-1-醇(200mg,1.45mmol)的DCM(5mL)溶液中加 入Et3N(732mg,23.5mmol)和甲磺酰氯(2.84g,24.9mmol)。将混合物于 30℃搅拌12小时，然后在H2O(20mL)和DCM(60mL)之间进行分配。 分离有机层，用盐水(50mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩得到黄 色油状甲磺酸3-甲基磺酰基丙基酯粗品(300mg)，其不经进一步纯化直接 用于下一步骤。
步骤2:10-甲氧基-9-(3-甲基磺酰基丙氧基)-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二 氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯的制备
向9-羟基-10-甲氧基-22-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸 乙酯(100mg,0.251mmol)的DMF(3mL)溶液中加入K2CO3(69.6mg, 0.503mmol)和甲磺酸3-甲基磺酰基丙基酯(81.6mg,0.377mmol)。将混合 物于30℃搅拌12小时，然后在H2O(50mL)和EtOAc(100mL)之间进 行分配。分离有机层，用盐水(50mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥并减压浓 缩得到黄色油状10-甲氧基-9-(3-甲基磺酰基丙氧基)-2-氧代-6-(2-噻吩 基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯粗品(90mg)，其不经进一步纯化直接 用于下一步骤。
步骤3:10-甲氧基-9-(3-甲基磺酰基丙氧基)-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二 氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸的制备
向10-甲氧基-9-(3-甲基磺酰基丙氧基)-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢 苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯(90mg,0.174mmol)的MeOH(1mL)溶液中加入 2M NaOH水溶液(0.174mL,0.348mmol)。将混合物于30℃搅拌2小时， 然后减压浓缩。将残余物用H2O(20mL)稀释并用1M盐酸酸化至pH＝3。 将得到的混合物用DCM(60mL)萃取。将有机层用盐水(50mL)洗涤，用 无水硫酸钠干燥并减压浓缩。将残余物通过制备型HPLC纯化得到黄色 固体状10-甲氧基-9-(3-甲基磺酰基丙氧基)-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢 苯并[a]喹嗪-3-甲酸(14.4mg)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:2.12- 2.25(m,2H)3.03(s,3H),3.23-3.30(m,2H),3.34(br.s.,1H),3.72(dd,1 H),3.89(s,3H),4.16(t,2H),6.35(br.s.,1H),6.86-6.94(m,1H),6.97- 7.13(m,2H),7.35(d,1H),7.52(d,2H),8.98(s,1H)。MS实测值(ESI+) [(M+H)+]:490。
实施例33:10-甲氧基-9-甲基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸
步骤1:10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-9-(三氟甲基磺酰氧基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯的制备
向搅拌中的9-羟基-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹 嗪-3-甲酸乙酯(1.5g,3.77mmol)和Et3N(1.15g,11.32mmol)的DCM(15 mL)溶液中在0℃下滴加N-苯基-双(三氟甲磺酰亚胺)(2.0g,5.66mmol) 的DCM(10mL)溶液。将混合物升温至室温并在室温下搅拌16小时。将 反应混合物用DCM稀释并用1M盐水和盐水洗涤。将有机相用无水硫酸 钠干燥并减压浓缩。将残余物通过柱色谱纯化得到黄色固体状10-甲氧基 -2-氧代-6-(2-噻吩基)-9-(三氟甲基磺酰氧基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸 乙酯(1.55g)。
步骤2:10-甲氧基-9-甲基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯的制备
将10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-9-(三氟甲基磺酰氧基)-6,7-二氢苯 并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯(200mg,0.38mmol)、甲基硼酸(34mg,0.57mmol)、 K2CO3(157mg,1.13mmol)和Pd(dppf)Cl2·CH2Cl2(31mg,0.04mmol)在 THF/H2O(4mL/1mL)中的混合物在氮气氛下于60℃加热12小时。将 混合物减压浓缩，然后将残余物通过快速柱色谱纯化得到深黄色固体状 10-甲氧基-9-甲基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯粗 品(310mg)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤。
步骤3:10-甲氧基-9-甲基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸的制备
将10-甲氧基-9-甲基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸 乙酯(310mg,0.78mmol)和NaOH(63mg)在MeOH(3mL)和H2O(0.8 mL)中的混合物于室温下搅拌16小时。将混合物减压浓缩。将残余物用 H2O稀释并用1M盐酸酸化至pH＝2-3。将形成的混合物过滤。将滤饼通 过制备型HPLC纯化得到浅黄色固体状10-甲氧基-9-甲基-2-氧代-6-(2-噻 吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸(26mg)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6) δ:2.20(s,3H),3.31(m,1H),3.68-3.71(m,1H),3.91(s,3H),6.37(br.s., 1H),6.90(dd,1H),7.00(br.s.,1H),7.24(s,1H),7.36(d,1H),7.50(s,1 H)7.62(s,1H,)9.02(s,1H)。MS实测值(ESI+)[(M+H)+]:368。
实施例34:9-乙基-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸
步骤1:9-乙基-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯的制备
将10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-9-(三氟甲基磺酰氧基)-6,7-二氢苯 并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯(200mg,0.38mmol,得自实施例33的步骤1)、乙基 硼酸(42mg,0.57mmol)、K2CO3(157mg,1.13mmol)和 Pd(dppf)Cl2·CH2Cl2(31mg,0.04mmol)在THF/H2O(4mL/1mL)中的混 合物在氮气氛下于60℃加热12小时。将混合物减压浓缩。将残余物通 过快速柱色谱纯化得到黄色油状9-乙基-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩 基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯粗品(140mg)，其不经进一步纯化直 接用于下一步骤。
步骤2:9-乙基-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸的制备
将9-乙基-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸 乙酯(140mg,0.34mmol)和NaOH(27mg)在H2O(0.3mL)和MeOH(2 mL)中的混合物于室温下搅拌16小时。将混合物减压浓缩。将残余物用 H2O稀释并用1M盐酸酸化至pH＝2-3。将形成的混合物过滤。将滤饼通 过制备型HPLC纯化得到浅黄色固体状9-乙基-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻 吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸(21mg)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6) δ:1.15(t,3H),2.55-2.71(m,2H),3.37(m,1H),3.68-3.73(m,1H),3.92 (s,3H),6.37(br.s.,1H),6.91(dd,1H),7.01(br.s.,1H),7.24(s,1H), 7.36(d,1H,)7.51(s,1H),7.62(s,1H),9.02(s,1H)。MS实测值(ESI+) [(M+H)+]:382。
实施例35:10-甲氧基-2-氧代-9-丙基-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸
步骤1:10-甲氧基-2-氧代-9-丙基-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯的制备
将10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-9-(三氟甲基磺酰氧基)-6,7-二氢苯 并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯(200mg,0.38mmol)、丙基硼酸(50mg,0.57mmol)、 K2CO3(157mg,1.13mmol)和Pd(dppf)Cl2·CH2Cl2(31mg,0.04mmol)在 THF/H2O(4mL/1mL)中的混合物在氮气氛下于70℃加热12小时。将 混合物减压浓缩。将残余物通过快速柱色谱纯化得到棕色固体状10-甲氧 基-2-氧代-9-丙基-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯粗品(100mg)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤。
步骤2:10-甲氧基-2-氧代-9-丙基-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸的制备
将10-甲氧基-2-氧代-9-丙基-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸 乙酯(100mg,0.24mmol)和NaOH(19mg)在H2O(0.2mL)和MeOH(2 mL)中的混合物于室温下搅拌16小时。将混合物减压浓缩。将残余物用 H2O稀释并用1M盐酸酸化至pH＝2-3。将形成的混合物过滤。将滤饼通 过制备型HPLC纯化得到白色固体状10-甲氧基-2-氧代-9-丙基-6-(2-噻吩 基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸(15mg)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ: 0.89(t,3H),1.56(sxt,2H),2.53-2.62(m,2H),3.31-3.33(m,1H),3.65- 3.74(m,1H),3.90(s,3H),6.36(br.s.,1H),6.90(dd,H),7.02(br.s.,1H), 7.21(s,1H),7.35(d,1H),7.50(s,1H),7.61(s,1H),9.02(s,1H)。MS实 测值(ESI+)[(M+H)+]:396。
实施例36:10-甲氧基-2-氧代-9-吡咯烷-1-基-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸
步骤1:10-甲氧基-2-氧代-9-吡咯烷-1-基-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯的制备
向10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-9-(三氟甲基磺酰氧基)-6,7-二氢苯 并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯(100mg,0.189mmol)的NMP(20mL)溶液中加入吡 咯烷(67mg,0.944mmol)。将反应容器密封并在微波反应器中于150℃加 热1小时。然后将得到的混合物通过柱色谱纯化得到黄色油状粗产物(3 g)，将其在H2O(50mL)和EtOAc(100mL)之间进行分配。分离有机层， 用盐水(50mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩得到棕色油状10-甲氧 基-2-氧代-9-吡咯烷-1-基-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯 (60mg)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤。
步骤2:10-甲氧基-2-氧代-9-吡咯烷-1-基-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸的制备
向10-甲氧基-2-氧代-9-吡咯烷-1-基-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪 -3-甲酸乙酯(60mg,0.133mmol)的MeOH(1mL)溶液中加入2M NaOH (0.2mL,0.399mmol)。将形成的混合物于30℃搅拌0.5小时，然后减压 浓缩。将残余物用H2O(20mL)稀释并用1M盐酸酸化至pH＝3。将得到 的混合物用DCM(60mL)萃取。将有机层用盐水(50mL)洗涤，用无水硫 酸钠干燥并减压浓缩。将残余物通过制备型HPLC纯化得到黄色固体状 10-甲氧基-2-氧代-9-吡咯烷-1-基-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲 酸(13.8mg)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:1.78-1.92(m,4H),3.24 (br.s.,1H)3.44(d,4H),3.63(dd,1H),3.84(s,3H),6.29(d,1H),6.54(s, 1H),6.91(dd,1H),7.02(d,1H),7.26-7.42(m,3H),8.90(s,1H)。MS实测值(ESI+)[(M+H)+]:423。
实施例37:6-(苯并噻吩-2-基)-10-氯-9-(3-甲氧基丙氧基)-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸
步骤1:4-溴-1-氯-2-(3-甲氧基丙氧基)苯的制备
将5-溴-2-氯-苯酚(22.0g,106mmol)、1-溴-3-甲氧基-丙烷(19.5g,127 mmol)和K2CO3(30g,212mmol)在DMF(50mL)中的混合物于50℃加热 3小时。然后将混合物在乙酸乙酯和水之间进行分配。分离有机层，用无 水硫酸钠干燥并减压浓缩得到4-溴-1-氯-2-(3-甲氧基丙氧基)苯粗品(30.0 g)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤。
步骤2:1-(苯并噻吩-2-基)-2-[4-氯-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]乙酮的制备
向4-溴-1-氯-2-(3-甲氧基丙氧基)苯粗品(1.11g,4mmol)、三(二亚苄基 丙酮)二钯(0)(37mg,0.04mmol)、Xantphos(46mg,0.08mmol)和 t-BuONa(768mg,8mmol)在THF(10mL)中的混合物中加入1-(苯并噻吩 -2-基)乙酮(1.41g,8mmol)。将得到的混合物在微波下于60℃加热30分 钟。冷却至室温后，将混合物在水和乙酸乙酯之间进行分配。将分离的水 层用EtOAc萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥并 减压浓缩。将残余物通过柱色谱纯化得到棕色油状1-(苯并噻吩-2-基)-2-[4- 氯-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]乙酮(1.41g)。
步骤3:1-(苯并噻吩-2-基)-2-[4-氯-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]乙胺的制备
向1-(苯并噻吩-2-基)-2-[4-氯-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]乙酮(770mg,2 mmol)和乙酸铵(2.31g,30mmol)在甲醇(10mL)和二氯乙烷(5mL)中的混 合物中加入NaBH3CN(252mg,4mmol)。将得到的混合物于65℃加热 16小时。冷却至室温后，将反应混合物用2MNaOH水溶液碱化至pH＝12 然后用水稀释。将得到的混合物用DCM萃取三次。将合并的有机层用盐 水洗涤，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩得到棕色油状1-(苯并噻吩-2- 基)-2-[4-氯-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]乙胺粗品(739mg)，其不经进一步纯 化直接用于下一步骤。
步骤4:N-[1-(苯并噻吩-2-基)-2-[4-氯-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]乙基]甲 酰胺的制备
将1-(苯并噻吩-2-基)-2-[4-氯-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]乙胺粗品(739 mg,2mmol)和甲酸(0.1mL)在甲酸乙酯(10mL)中的混合物于90℃加热2 小时。冷却至室温后，将混合物减压浓缩得到棕色油状N-[1-(苯并噻吩-2- 基)-2-[4-氯-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]乙基]甲酰胺(756mg)，其不经进一步 纯化直接用于下一步骤。
步骤5:3-(苯并噻吩-2-基)-7-氯-6-(3-甲氧基丙氧基)-3,4-二氢异喹啉的制 备
向N-[1-(苯并噻吩-2-基)-2-[4-氯-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]乙基]甲酰 胺(756mg,1.9mmol)的CH3CN(10mL)溶液中加入POCl3(291mg,1.9 mmol)。将混合物于80℃加热2小时。冷却至室温后，将混合物减压浓 缩。将残余物溶于CH3CN(10mL)，然后用氨水在0℃下碱化至pH＝10。 将得到的混合物用DCM萃取。将有机层用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩得到棕色油状3-(苯并噻吩-2-基)-7-氯-6-(3-甲氧基丙氧基)-3,4- 二氢异喹啉粗品(727mg)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤。
步骤6:6-(苯并噻吩-2-基)-10-氯-9-(3-甲氧基丙氧基)-2-氧代-1,6,7,11b-四氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯的制备
将3-(苯并噻吩-2-基)-7-氯-6-(3-甲氧基丙氧基)-3,4-二氢异喹啉粗品(727mg,1.9mmol)和2-(乙氧基亚甲基)-3-氧代-丁酸乙酯(1.06g,5.7mmol) 在乙醇(15mL)中的混合物回流24小时。将混合物减压浓缩得到6-(苯并 噻吩-2-基)-10-氯-9-(3-甲氧基丙氧基)-2-氧代-1,6,7,11b-四氢苯并[a]喹嗪 -3-甲酸乙酯粗品(1.70g)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤。
步骤7:6-(苯并噻吩-2-基)-10-氯-9-(3-甲氧基丙氧基)-2-氧代-6,7-二氢苯 并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯的制备
将6-(苯并噻吩-2-基)-10-氯-9-(3-甲氧基丙氧基)-2-氧代-1,6,7,11b-四氢 苯并[a]喹嗪-3-甲酸乙酯粗品(1.70g,1.9mmol)和对-四氯苯醌(467mg,1.9 mmol)在DME(10mL)中的混合物于70℃加热3小时。冷却至室温后， 将混合物在DCM和水之间进行分配。将有机层用饱和NaHCO3水溶液(50 mL)洗涤5次然后用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩得到棕色油 状6-(苯并噻吩-2-基)-10-氯-9-(3-甲氧基丙氧基)-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹 嗪-3-甲酸乙酯粗品(2.01g)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤。
步骤8:6-(苯并噻吩-2-基)-10-氯-9-(3-甲氧基丙氧基)-2-氧代-6,7-二氢苯 并[a]喹嗪-3-甲酸的制备
向6-(苯并噻吩-2-基)-10-氯-9-(3-甲氧基丙氧基)-2-氧代-6,7-二氢苯并 [a]喹嗪-3-甲酸乙酯粗品(2.01g,1.9mmol)在甲醇(16mL)和H2O(4mL)中 的混合物中加入LiOH·H2O(958mg,22.8mmol)。将形成的混合物于室温 下搅拌过夜，然后用1M盐酸酸化至pH＝2-3。将混合物用DCM萃取三 次。将合并的有机层用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩。将残余 物通过柱色谱纯化得到棕色固体状粗产物，将其用乙醚和EtOH重结晶得到淡棕色固体状6-(苯并噻吩-2-基)-10-氯-9-(3-甲氧基丙氧基)-2-氧代-6,7- 二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸(80mg)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:8.95(s, 1H),8.14(s,1H),7.81-7.76(m,1H),7.75-7.69(m,1H),7.37(s,1H),7.34 -7.28(m,2H),7.24(s,1H),6.40(s,1H),4.23-4.09(m,2H),3.85-3.75(m, 1H),3.60-3.50(m,1H),3.49-3.41(m,2H),3.20(m,3H),2.00-1.88(m, 2H)。MS实测值(ESI+)[(M+H)+]:496。
生物学实施例
实施例38材料和方法
HBV细胞系
将组成性表达HBV的细胞系HepG2.2.15细胞(Acs等.Proc Natl Acad Sci USA,84,(1987),4641-4)在保持在5％CO2、37℃的 DMEM+Glutamax-I培养基(Invitrogen,Carlsbad,CA,USA)中培养，所述 培养基补充有10％胎牛血清(Invitrogen)和最终浓度为200mg/L的 G418(Invitrogen)。
HBsAg试验
将HepG2.2.15细胞一式两份地以1.5x104个细胞/孔接种到白色96孔 板中。所述细胞用化合物在DMSO中的三倍系列稀释液处理。在所有孔 中的最终DMSO浓度为1％，并将DMSO用作无药物对照。
使用HBsAg化学发光免疫测定(CLIA)试剂盒(Autobio Diagnostics Co.，中国郑州，目录号：CL0310-2)来半定量地测量分泌的HBV抗原的 水平。对于该检测，使用50μL/孔培养上清液并用HBsAg化学发光免疫 测定(CLIA)试剂盒(Autobio Diagnostics Co.，中国郑州，目录号：CL0310-2) 对HBsAg进行定量，将50μL的上清液转移至CLIA测定板并将50μL的 酶结合试剂添加到每个孔中。将板密封并在室温下温和搅拌1小时。弃去 上清液-酶-混合物并将孔用300μL的PBS洗涤6次。通过将CLIA板正 面向下放置在吸水纸巾上将残余液体除去。向每个孔中添加25μL的底物 A和B。在温育10分钟后使用照度计(MithrasLB940Multimode Microplate Reader)测量发光度。生成剂量-响应曲线并使用E-WorkBookSuite(ID Business Solutions Ltd.,Guildford,UK)外推IC50值。IC50定义 为相比于无药物对照，HBsAg分泌减少50％时的化合物浓度(或经调节的 培养基对数稀释)。
按照本文的描述测试本发明化合物抑制HBsAg的活性。在以上试验 中测试实施例化合物并发现其具有低于25.0μM的IC50。发现式I的特定 化合物具有低于0.100μM的IC50。发现式I的更为特定的化合物具有低 于0.010μM的IC50。HBsAg试验的结果在表1中给出。
表1：具体化合物的活性数据
HBV DNA试验
该试验采用实时qPCR(TaqMan)直接测量细胞外HBV DNA拷贝 数。将HepG2.2.15细胞接种于96孔微量滴定板。只使用靠内的孔以减少 细胞培养过程中观察到的“边缘效应”，靠外的孔中充满完全培养液以帮 助减少样品蒸发。在接下来的一天，洗涤HepG2.2.15细胞并将培养液用 含有各种浓度的试验化合物的完全培养液替换，一式三份。用3TC作为 阳性对照，向细胞中加入单独的溶媒作为阴性对照(病毒对照，VC)。三 天后，将培养液用含有适当稀释的药物的新鲜培养液替换。在首次加入试 验化合物6天后，收集细胞培养上清液，用链霉蛋白酶处理，然后用实时 qPCR/TaqMan试验检测HBV DNA拷贝数。从HBV DNA水平的降低计 算抗病毒活性(IC50)。
按照本文的描述测试本发明化合物抗HBV DNA生成的活性。在以上 试验中测试实施例化合物并发现其具有低于25.0μM的IC50。发现式I的 特定化合物具有低于0.10μM的IC50。HBV DNA试验的结果在表2中给 出。
表2:在HepG2.2.15细胞中抗HBV DNA生成的活性
实施例号 IC50(μM)
7 <0.032
8 <0.032
15 <0.032

Claims (20)

1.式I的化合物或其可药用盐或对映体
其中
R1、R2、R3和R4独立地选自C1-6烷基、卤代C1-6烷基、氢、卤素、氰基、氨基、C1-6烷基氨基、二C1-6烷基氨基、吡咯烷基和OR6；
R5是氢或C1-6烷基；
R6是氢；C1-6烷基；卤代C1-6烷基；C3-7环烷基C1-6烷基；苯基C1-6烷基；羟基C1-6烷基；C1-6烷氧基C1-6烷基；羧基C1-6烷基；C1-6烷硫基C1-6烷基；C1-6烷基磺酰基C1-6烷基；氰基C1-6烷基；氨基C1-6烷基；C1-6烷基氨基C1-6烷基；二C1-6烷基氨基C1-6烷基；C1-6烷基羰基氨基C1-6烷基；C1-6烷基磺酰基氨基C1-6烷基；C1-6烷氧基羰基氨基C1-6烷基；吡唑基C1-6烷基；三唑基C1-6烷基或杂环烷基C1-6烷基，其中的杂环烷基是含氮单环杂环烷基；
Ar是苯基；被一个、两个或三个独立地选自C1-6烷基、C1-6烷氧基、羟基、卤素和苯基C1-6烷氧基的基团取代的苯基；噻吩基；被一个、两个或三个独立地选自C1-6烷基、C1-6烷氧基、羟基、卤素和苯基C1-6烷氧基的基团取代的噻吩基；苯并噻吩基；被一个、两个或三个独立地选自C1-6烷基、C1-6烷氧基、羟基、卤素和苯基C1-6烷氧基的基团取代的苯并噻吩基；吡啶基；被一个、两个或三个独立地选自C1-6烷基、C1-6烷氧基、羟基、卤素和苯基C1-6烷氧基的基团取代的吡啶基；嘧啶基；被一个、两个或三个独立地选自C1-6烷基、C1-6烷氧基、羟基、卤素和苯基C1-6烷氧基的基团取代的嘧啶基；吡咯基；被一个、两个或三个独立地选自C1-6烷基、C1-6烷氧基、羟基、卤素和苯基C1-6烷氧基的基团取代的吡咯基；吡唑基；被一个、两个或三个独立地选自C1-6烷基、C1-6烷氧基、羟基、卤素和苯基C1-6烷氧基的基团取代的吡唑基；噻唑基；或被一个、两个或三个独立地选自C1-6烷基、C1-6烷氧基、羟基、卤素和苯基C1-6烷氧基的基团取代的噻唑基。
2.根据权利要求1的化合物或其可药用盐或对映体，其中
R1是氢；
R2是氢、卤素或C1-6烷氧基；
R3是C1-6烷基、吡咯烷基或OR6；
R4是C1-6烷基或氢；
R5是氢；
R6是C1-6烷基、卤代C1-6烷基、C3-7环烷基C1-6烷基、苯基C1-6烷基、羟基C1-6烷基、C1-6烷氧基C1-6烷基、羧基C1-6烷基、C1-6烷硫基C1-6烷基、C1-6烷基磺酰基C1-6烷基、氰基C1-6烷基、氨基C1-6烷基、C1-6烷基羰基氨基C1-6烷基、C1-6烷基磺酰基氨基C1-6烷基、C1-6烷氧基羰基氨基C1-6烷基、吡唑基C1-6烷基、三唑基C1-6烷基、哌啶基C1-6烷基、吗琳基C1-6烷基或2-氧代吡咯烷基C1-6烷基；
Ar是苯基；被C1-6烷基、C1-6烷氧基、羟基、卤素或苯基C1-6烷氧基取代的苯基；噻吩基；被C1-6烷基取代的噻吩基；或苯并噻吩基。
3.根据权利要求1的化合物或其可药用盐或对映体，其中R1是氢，R4是氢，R5是氢。
4.根据权利要求1至3任意一项的化合物或其可药用盐或对映体，其中R2是C1-6烷氧基。
5.根据权利要求4的化合物或其可药用盐或对映体，其中R2是甲氧基。
6.根据权利要求1至3任意一项的化合物或其可药用盐或对映体，其中R3是吡咯烷基或OR6，其中R6是C1-6烷基、卤代C1-6烷基、C3-7环烷基C1-6烷基、羟基C1-6烷基、C1-6烷氧基C1-6烷基、羧基C1-6烷基、C1-6烷硫基C1-6烷基、氰基C1-6烷基、氨基C1-6烷基、C1-6烷基羰基氨基C1-6烷基、C1-6烷基磺酰基氨基C1-6烷基或C1-6烷氧基羰基氨基C1-6烷基。
7.根据权利要求6的化合物或其可药用盐或对映体，其中R3是OR6，其中R6是甲基、异丁基、三氟乙基、环丙基甲基、氰基丙基、羟基丙基、羟基己基、羟基二甲基丙基、甲氧基丙基、羧基丙基、甲硫基丙基、氨基己基、甲基羰基氨基己基、甲基磺酰基氨基己基或甲氧基羰基氨基己基。
8.根据权利要求7的化合物或其可药用盐或对映体，其中Ar是苯基、被C1-6烷基或卤素取代的苯基、噻吩基或被C1-6烷基取代的噻吩基。
9.根据权利要求8的化合物或其可药用盐或对映体，其中Ar是苯基；被甲基、氟或氯取代的苯基；噻吩基或被甲基取代的噻吩基。
10.根据权利要求1或2的化合物或其可药用盐或对映体，其中
R1是氢；
R2是C1-6烷氧基；
R3是吡咯烷基或OR6；
R4是氢；
R5是氢；
R6是C1-6烷基、卤代C1-6烷基、C3-7环烷基C1-6烷基、羟基C1-6烷基、C1-6烷氧基C1-6烷基或C1-6烷硫基C1-6烷基；
Ar是被C1-6烷基取代的苯基，或噻吩基。
11.根据权利要求1或2的化合物或其可药用盐或对映体，其中
R1是氢；
R2是甲氧基；
R3是吡咯烷基或OR6；
R4是氢；
R5是氢；
R6是异丁基、三氟乙基、环丙基甲基、羟基二甲基丙基、甲氧基丙基或甲硫基丙基；
Ar是被甲基取代的苯基，或噻吩基。
12.根据权利要求1的化合物，选自
10-甲氧基-9-(3-甲氧基丙氧基)-2-氧代-6-苯基-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸；
10-甲氧基-9-(3-甲氧基丙氧基)-2-氧代-6-(3-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸；
10-甲氧基-9-(3-甲氧基丙氧基)-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸；
6-(4-羟基苯基)-10-甲氧基-9-(3-甲氧基丙氧基)-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸；
10-甲氧基-6-(4-甲氧基苯基)-9-(3-甲氧基丙氧基)-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸；
6-(4-苄氧基苯基)-10-甲氧基-9-(3-甲氧基丙氧基)-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸；
10-甲氧基-9-(3-甲氧基丙氧基)-6-(4-甲基-2-噻吩基)-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸；
6-(3-氯苯基)-10-甲氧基-9-(3-甲氧基丙氧基)-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸；
6-(4-氟苯基)-10-甲氧基-9-(3-甲氧基丙氧基)-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸；
10-甲氧基-9-(3-甲氧基丙氧基)-6-(邻甲苯基)-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸；
9-甲氧基-8-甲基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸；
9-苄氧基-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸；
9,10-二甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸；
9-异丁氧基-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸；
9-(环丙基甲氧基)-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸；
10-甲氧基-2-氧代-9-(3-吡唑-1-基丙氧基)-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸；
9-(3-羟基丙氧基)-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸；
10-甲氧基-2-氧代-9-[3-(1-哌啶基)丙氧基]-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸甲酸盐；
9-(3-氰基丙氧基)-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸；
10-甲氧基-2-氧代-9-[2-(2-氧代吡咯烷-1-基)乙氧基]-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸；
9-[6-(叔丁氧基羰基氨基)己氧基]-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸；
9-(6-氨基己氧基)-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸甲酸盐；
9-(6-乙酰氨基己氧基)-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸；
9-[6-(甲磺酰氨基)己氧基]-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸；
9-(6-羟基己氧基)-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸；
9-(3-羟基-2,2-二甲基-丙氧基)-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸；
10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-9-(2,2,2-三氟乙氧基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸；
10-甲氧基-9-(3-吗啉代丙氧基)-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸；
10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-9-[3-(1,2,4-三唑-1-基)丙氧基]-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸；
9-(3-羧基丙氧基)-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸；
10-甲氧基-9-(3-甲硫基丙氧基)-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸；
10-甲氧基-9-(3-甲基磺酰基丙氧基)-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸；
10-甲氧基-9-甲基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸；
9-乙基-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸；
10-甲氧基-2-氧代-9-丙基-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸；
10-甲氧基-2-氧代-9-吡咯烷-1-基-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸；
6-(苯并噻吩-2-基)-10-氯-9-(3-甲氧基丙氧基)-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸；
或其可药用盐或对映体。
13.根据权利要求1的化合物，选自
10-甲氧基-9-(3-甲氧基丙氧基)-2-氧代-6-(3-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸；
10-甲氧基-9-(3-甲氧基丙氧基)-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸；
10-甲氧基-9-(3-甲氧基丙氧基)-6-(邻甲苯基)-2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸；
9-异丁氧基-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸；
9-(环丙基甲氧基)-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸；
9-(3-羟基-2,2-二甲基-丙氧基)-10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸；
10-甲氧基-2-氧代-6-(2-噻吩基)-9-(2,2,2-三氟乙氧基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸；
10-甲氧基-9-(3-甲硫基丙氧基)-2-氧代-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸；
10-甲氧基-2-氧代-9-吡咯烷-1-基-6-(2-噻吩基)-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸；
或其可药用盐或对映体。
14.制备根据权利要求1至13任意一项的化合物的方法，包括
(a)水解式(A)的化合物
或
(b)水解式(B)的化合物
其中R1至R7和Ar如权利要求1至11任意一项所定义。
15.用作治疗活性物质的根据权利要求1至13任意一项的化合物。
16.包含根据权利要求1至13任意一项的化合物和治疗惰性载体的药物组合物。
17.根据权利要求1至13任意一项的化合物在制备用于治疗或预防HBV感染的药物中的用途。
18.根据权利要求1至13任意一项的化合物在制备用于抑制HBsAg生成或分泌的药物中的用途。
19.用于治疗或预防HBV感染的根据权利要求1至13任意一项的化合物。
20.按照权利要求14的方法制备的根据权利要求1至13任意一项的化合物。
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