CN107091934A - 一种直接胆红素测定试剂盒及配置方法以及其运用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种直接胆红素测定试剂盒及配置方法以及其运用，解决了新生儿标本中黄疸对直接胆红素测定具有干扰的问题。本发明包括直接胆红素测定试剂盒本体，以及Emulgen A-90和/或Emulgen B-66。本发明具有有效避免新生儿黄疸对标本检测所带来的干扰，解决新生儿黄疸为标本带来的测定结果假性偏高的现象，使新生儿黄疸标本的检测准确度大大提高。
Description
技术领域
本发明涉及一种试剂盒，具体涉及一种直接胆红素测定试剂盒，并提供了该试剂盒的配置方法和运用。
背景技术
直接胆红素在临床上的应用较为广泛，对疾病的判断有较高的临床价值，对新生儿标本测定也有重要的临床意义。新生儿时期，由于体内胆红素代谢异常产生黄疸，会直接引起血中直接胆红素水平升高。即，直接胆红素水平升高既可以由生理性黄疸引起，也可以由病理性黄疸引起。
直接胆红素的常用方法为钒酸盐氧化法，现有的钒酸盐氧化法测定新生儿黄疸标本时，检测数据易受黄疸干扰，使其异常增高，给临床诊断带来很大的干扰，导致临床测定结果不准确，影响临床医生正确判断病人状况。并且在临床准确判断为生理性黄疸后，其测定值依然会异常偏高，从而导致临床上无法准确定量直接胆红素的真实浓度。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是新生儿黄疸标本对现有直接胆红素的测定具有干扰，目的在于提供一种直接胆红素测定试剂盒，解决新生儿标本中黄疸对直接胆红素测定干扰的问题。
本发明通过下述技术方案实现：
一种直接胆红素测定试剂盒，包括直接胆红素测定试剂盒本体，以及Emulgen A-90和/或Emulgen B-66。
本发明通过在试剂中加入Emulgen A-90和/或Emulgen B-66，有效减小甚至消除新生儿黄疸标本带来的干扰，提高了直接胆红素测定的真实性。
通过试验得知，同时添加Emulgen A-90和Emulgen B-66两种物质时，新生儿黄疸标本中黄疸带来的干扰最小，检测得到的数据的准确性最高；并且所述Emulgen A-90的浓度为1～10g/L，所述Emulgen B-66的浓度为1～10g/L时，如表2所示，能有效消除新生儿黄疸标本带来的干扰，使检测效果最准确。
优选地，所述直接胆红素测定试剂盒本体包括试剂1和试剂2，
所述试剂1包括：
柠檬酸 100～150mmol/L
NaOH 1.5～3.5g/L
硫酸羟胺 4.16～5.12g/L
PC300 1.0～1.5ml/L；
所述试剂2包括：
二水柠檬酸三钠 20～50mmol/L
柠檬酸 2.2～4.2g/L
偏钒酸钠 0.8～1.2g/L
叠氮钠 0.5～1.0ml/L
乙二胺四乙酸二钠 0.5～3.0mmol/L。
上述一种直接胆红素测定试剂盒的配置方法，包括：
（1）首先完成直接胆红素测定试剂盒本体中试剂的配置，
（2）将Emulgen A-90和/或Emulgen B-66分别用水溶解后，再缓慢加入试剂中，当Emulgen A-90和Emulgen B-66均加入时，先加入Emulgen A-90充分搅拌混匀，然后再缓慢加入Emulgen B-66充分搅拌混匀；
（3）定容。
Emulgen A-90与Emulgen B-66两种物质在直接胆红素测定试剂盒本体中的溶解度较低，直接加入直接胆红素试剂中无法完全溶解，且会导致在试剂中所起的作用完全减弱。本发明采用将Emulgen A-90与Emulgen B-66在水中溶解后再加入到直接胆红素测定试剂盒本体中，有效避免其无法完全溶解的问题，同时，通过本发明的方法进行溶解并添加后能有效避免常规添加方式导致其在试剂中所起的作用减弱，效果显著。
本申请发明人经过无数次的试验和研究后得出，当所述Emulgen A-90和EmulgenB-66的溶解温度为35～39℃时，对其在试剂中起到的作用影响最小，并且在该温度下能有效使Emulgen A-90和Emulgen B-66完全溶解，发挥其更好的作用。
优选地，所述Emulgen A-90和/或Emulgen B-66的溶解温度为37℃。
优选地，所述直接胆红素测定试剂盒本体包括试剂1和试剂2，
所述试剂1的配置过程如下：
顺次将柠檬酸、氢氧化钠、硫酸羟胺、PC300添加入纯化水中，当前一种物质溶解完成后再添加后一种物质，PC300添加后反复吸水吹打，再将Emulgen A-90和/或Emulgen B-66加入后定容即可；
所述试剂2的配置过程如下：
顺次将二水柠檬酸钠、柠檬酸、偏钒酸钠、叠氮钠、乙二胺四乙酸二钠添加入纯化水中，当前一种物质溶解完成后再添加后一种物质，最后定容即可。
本发明的一种直接胆红素测定试剂盒，其适用于所有血样标本的直接胆红素测定，但其在新生儿黄疸标本上的运用效果最佳，能有效避免新生儿黄疸标本中黄疸带来的干扰，使其检测的准确度最高。
本发明与现有技术相比，具有如下的优点和有益效果：
1、本发明能有效抗新生儿黄疸为标本检测所带来的干扰，通过Emulgen A-90与Emulgen B-66能很显著地解决新生儿黄疸带来的测定结果假性偏高现象，使新生儿黄疸标本的检测准确度大大提高；
2、本发明的配置方法能有效使Emulgen A-90与Emulgen B-66充分的溶解在试剂中，发挥Emulgen A-90与Emulgen B-66更好的作用。
具体实施方式
为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚明白，下面结合实施例，对本发明作进一步的详细说明，本发明的示意性实施方式及其说明仅用于解释本发明，并不作为对本发明的限定。
实施例1
如图1所示，本发明一种直接胆红素测定试剂盒，具体组成成份如表1所示。
表1
收集出生28天以内的新生儿血液标本，筛选胆红素测定浓度在34.2umol/L～205.23umol/L（新生儿生理性黄疸的指标）之间的40例标本，对采用上述表1中实施例的试剂对该40例标本进行检测，检测结果如表2所示。
表2
上述表2中的标准值是采用进口的不受新生儿黄疸干扰的直接胆红素试剂进行测试得到的值，该进口的直接胆红素试剂的具体型号为日本和光纯药工业株式会社的直接胆红素测定试剂盒（钒酸盐氧化法）。
本发明同时探讨了直接胆红素测定试剂盒本体，以及具有TX-100、吐温-20、Brij-35、十二烷基磺酸钠、吐温-80、NP40、NP1055 TX-405等活性剂的试剂对新生儿黄疸标本中黄疸干扰的情况，具体测试结果如表3所示。
表3
通过上述表2和表3可知，同时将Emulgen A-90与Emulgen B-66添加到直接胆红素测定试剂盒本体中，即采用本发明的直接胆红素测定试剂盒进行检测时，能有效减轻甚至消除直接胆红素测定中新生儿生理性黄疸对其的干扰，使检测数据更加准确。
本实施例还探讨了采用现有的直接胆红素测定试剂盒进行检测时，新生儿生理性黄疸对直接胆红素测定结果的影响。本实施例中直接胆红素测定试剂盒本体采用四川新健康成生物股份有限公司的直接胆红素测定试剂盒。使用时，按照本发明的方法将EmulgenA-90与Emulgen B-66添加到试剂中，Emulgen A-90的浓度为4.5g/L， Emulgen B-66的浓度为5.5g/L。
采用上述四川新健康成生物股份有限公司的原直接胆红素测定试剂、添加Emulgen A-90与Emulgen B-66后的直接胆红素测定试剂对新生儿血样进行检测，检测结果如表4所示。
表4
通过上述表4中的数据即可进一步证明：将Emulgen A-90与Emulgen B-66直接添加到直接胆红素测定试剂中，对新生儿血样进行检测时，可有效排除新生儿生理性黄疸对检测结果的干扰，效果显著。
以上所述的具体实施方式，对本发明的目的、技术方案和有益效果进行了进一步详细说明，所应理解的是，以上所述仅为本发明的具体实施方式而已，并不用于限定本发明的保护范围，凡在本发明的精神和原则之内，所做的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (8)
1.包括直接胆红素测定试剂盒本体，以及Emulgen A-90和/或Emulgen B-66。
2.根据权利要求1所述的一种直接胆红素测定试剂盒，其特征在于，所述Emulgen A-90的浓度为1～10g/L，所述Emulgen B-66的浓度为1～10g/L。
3.根据权利要求1或2所述的一种直接胆红素测定试剂盒，其特征在于，所述直接胆红素测定试剂盒本体包括试剂1和试剂2，
所述试剂1包括：
柠檬酸 100～150mmol/L
NaOH 1.5～3.5g/L
硫酸羟胺 4.16～5.12g/L
PC300 1.0～1.5ml/L；
所述试剂2包括：
二水柠檬酸三钠 20～50mmol/L
柠檬酸 2.2～4.2g/L
偏钒酸钠 0.8～1.2g/L
叠氮钠 0.5～1.0ml/L
乙二胺四乙酸二钠 0.5～3.0mmol/L。
4.如权利要求1～3任一项所述的一种直接胆红素测定试剂盒的配置方法，其特征在于，包括：
（1）首先完成直接胆红素测定试剂盒中试剂的配置，
（2）将Emulgen A-90和/或Emulgen B-66分别用水溶解后，再缓慢加入试剂中，当Emulgen A-90和Emulgen B-66均加入时，先加入Emulgen A-90充分搅拌混匀，然后再缓慢加入Emulgen B-66充分搅拌混匀；
（3）定容。
5.如权利要求4所述的一种直接胆红素测定试剂盒的配置方法，其特征在于，所述Emulgen A-90和/或Emulgen B-66的溶解温度为35～39℃。
6.如权利要求5所述的一种直接胆红素测定试剂盒的配置方法，其特征在于，所述Emulgen A-90和/或Emulgen B-66的溶解温度为37℃。
7.如权利要求4～6任一项所述的一种直接胆红素测定试剂盒的配置方法，其特征在于，所述直接胆红素测定试剂盒本体包括试剂1和试剂2，
所述试剂1的配置过程如下：
顺次将柠檬酸、氢氧化钠、硫酸羟胺、PC300 添加入纯化水中，当前一种物质溶解完成后再添加后一种物质，PC300添加后反复吸水吹打，再将Emulgen A-90和/或Emulgen B-66加入后定容即可；
所述试剂2的配置过程如下：
顺次将二水柠檬酸钠、柠檬酸、偏钒酸钠、叠氮钠、乙二胺四乙酸二钠添加入纯化水中，当前一种物质溶解完成后再添加后一种物质，最后定容即可。
8.如权利要求1～3任一项所述的一种直接胆红素测定试剂盒在新生儿黄疸标本上的运用。
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Legal Events
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| PB01 | Publication | ||
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| GR01 | Patent grant | ||
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