[go: up one dir, main page]

CN106038618A - 一种香榧提取物的制备方法及其抗肿瘤应用 - Google Patents

一种香榧提取物的制备方法及其抗肿瘤应用 Download PDF

Info

Publication number
CN106038618A
CN106038618A CN201610307143.6A CN201610307143A CN106038618A CN 106038618 A CN106038618 A CN 106038618A CN 201610307143 A CN201610307143 A CN 201610307143A CN 106038618 A CN106038618 A CN 106038618A
Authority
CN
China
Prior art keywords
chinese torreya
extract
extract product
phase
product
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201610307143.6A
Other languages
English (en)
Inventor
杨成东
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Nanjing Zelang Medical Technology Co Ltd
Original Assignee
Nanjing Zelang Medical Technology Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Nanjing Zelang Medical Technology Co Ltd filed Critical Nanjing Zelang Medical Technology Co Ltd
Priority to CN201610307143.6A priority Critical patent/CN106038618A/zh
Publication of CN106038618A publication Critical patent/CN106038618A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/13—Coniferophyta (gymnosperms)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
    • A61K2236/30—Extraction of the material
    • A61K2236/33—Extraction of the material involving extraction with hydrophilic solvents, e.g. lower alcohols, esters or ketones
    • A61K2236/333—Extraction of the material involving extraction with hydrophilic solvents, e.g. lower alcohols, esters or ketones using mixed solvents, e.g. 70% EtOH
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
    • A61K2236/50—Methods involving additional extraction steps
    • A61K2236/51—Concentration or drying of the extract, e.g. Lyophilisation, freeze-drying or spray-drying
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
    • A61K2236/50—Methods involving additional extraction steps
    • A61K2236/53—Liquid-solid separation, e.g. centrifugation, sedimentation or crystallization
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
    • A61K2236/50—Methods involving additional extraction steps
    • A61K2236/55—Liquid-liquid separation; Phase separation

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Alternative & Traditional Medicine (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Medical Informatics (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)

Abstract

本发明属于医药技术领域，具体涉及一种香榧提取物的制备方法及其抗肿瘤应用。其制备方法包括如下步骤：a.将香榧假种皮干燥粉碎，过40目筛；b.将粉碎后的香榧假种皮粉末置于超声装置中，在70~80℃的条件下提取3~4h，提取液减压浓缩，得浓缩液；c.将所得浓缩液加入大孔吸附树脂柱中，乙醇洗脱，收集洗脱液，浓缩得香榧提取物粗品；d.将上述粗品采用高速逆流色谱分离纯化得香榧提取物。经药效学评价，该提取物具有显著的抗肿瘤效果，为开发应用新一代天然来源的抗肿瘤药物开拓了新径。

Description

一种香榧提取物的制备方法及其抗肿瘤应用
技术领域
本发明属于医药技术领域，具体涉及一种香榧提取物的制备方法及其抗肿瘤应用。
背景技术
香榧又名细榧、榧树、香榧子，可供药用，有止咳、润肺、消痔、驱蛔等功效。其假种皮作为香榧种子加工后的废弃物，富含多种活性物质，主要是一些萜类化合物和黄酮类物质，具有很强的药理活性。研究表明，萜类化合物为香榧中主要的活性成分，在香榧的茎叶、种子和果实中量最丰富，种类也很多，以二萜类化合物为主，近些年来，不少学者对香榧中的某些二萜类化合物进行了大量的研究，发现这些二萜类化合物具有较强的抗肿瘤活性。因此，香榧提取物具有很好的应用价值，可应用于医药、保健品等行业。
现有提取香榧提取物的报道并不多见，超声波提取香榧提取物，具有耗时少，收率高，提取的活性成分也较多等优点。因此，本发明对香榧提取物的制备方法及其在抗肿瘤方面的研究十分必要，可以为其后续研究提供支持。
发明内容
为满足临床需要，扩大用药品种，更好地治疗肿瘤，本发明提供一种香榧提取物的制备方法及其在抗肿瘤药物中的应用。
本发明是通过如下技术方案完成的；
a. 原料处理：将香榧假种皮干燥粉碎，过40目筛；
b. 超声波提取：将粉碎后的香榧假种皮粉末置于频率为40KHz的超声装置中，加入原料重量4~5倍的70~80%的乙醇溶液，在70~80℃的条件下提取3~4h，提取液减压浓缩，得浓缩液；
c. 大孔吸附树脂富集：将所得浓缩液加入大孔吸附树脂柱中，先用2~3倍柱体积的蒸馏水洗脱，后用4~6倍柱体积的60~80%的乙醇洗脱，收集洗脱液，减压浓缩得香榧提取物粗品；
d. 纯化：将上述粗品采用高速逆流色谱法分离纯化，以氯仿-甲醇-水为两相溶剂系统，取上相做固定相、下相为流动相，主机转速700-1000rpm，流速为1-3mL/min，收集目标流分，回收试剂，真空干燥得产品。
步骤c中所述的大孔吸附树脂类型为D-101、AB-8或HPD100中的任意一种。
步骤d中所述的氯仿-甲醇-水体积比为4:9:3。
本发明制得的香榧提取物采用MTT法（四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法）进行抗肿瘤活性测试。
试验用细胞株：
T-98和U251-SP：人脑神经胶质瘤细胞株；HLE：人肝癌细胞株；MM1-CB和HMV-1：人黑色素瘤细胞株。
方法：（1）0.25%胰酶消化对数生长期细胞，10%NBS的RPMI 1640调细胞浓度50000个/ml。96孔板100ul/孔。设溶剂对照，每组3平行孔。37℃，5%CO2 、95%空气的培养箱中预培养24h，弃上清。
（2）加药物5个10倍稀释的浓度（溶剂为有二甲亚砜和水)，为10 -4 mol/L。
（3）细胞连续培养48h，每孔加入10μl 5mg/ml的 MTT溶液（以无血清培养基配制），继续培养4h。
（4）吸去上清。加入200μl DMSO，轻轻振荡以使甲臜完全溶解。570nm处用酶标仪测定OD值。
（5）计算抑制率(%)=（对照OD-药物OD）/对照OD*100%
实验结果：本发明化合物的抑制率以相对于对照（添加DMSO）的结果如下表1。
表1 香榧提取物的肿瘤细胞增值抑制率%
香榧提取物浓度（µ M） T-98 U251-SP HLE MM1-CB HMV-1
100 84 81 62 59 78
10 35 26 14 10 20
1 12 9 6 4 11
由表1可看出，香榧提取物具有良好的抑制肿瘤细胞生长的活性，其可在制备抗肿瘤药物中得到应用。
本发明为制备抗肿瘤药物提供了一种新的选择。
本发明所述香榧提取物在制备抗肿瘤药物时，可按照常规的制剂方法以香榧提取物为药物活性成分，添加适宜的药物载体，制成各种药物剂型，如片剂、胶囊、滴丸、注射剂、缓控释剂等。
下面将结合具体实施方式进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。
具体实施方式：
实施例1：
将香榧假种皮干燥粉碎，过40目筛；将粉碎后的香榧假种皮粉末置于频率为40KHz的超声装置中，加入原料重量4倍的70%的乙醇溶液，在70℃的条件下提取3h，提取液减压浓缩，得浓缩液；将所得浓缩液加入HPD100大孔吸附树脂柱中，先用2倍柱体积的蒸馏水洗脱，后用4倍柱体积的60%的乙醇洗脱，收集洗脱液，减压浓缩得香榧提取物粗品；取氯仿-甲醇-水按4:9:3体积比置于分液漏斗中，混匀后，静置，放出上层作为固定相，下层作为流动相，将粗品用下相溶解，开启制备型高速逆流色谱仪，先将固定相泵入色谱柱中，再以2mL/min流速泵入流动相，并通过进样阀连续进样，控制转速为850r/min，收集流出液，浓缩，干燥得香榧提取物，检测含量95.8%。
实施例2：
将香榧假种皮干燥粉碎，过40目筛；将粉碎后的香榧假种皮粉末置于频率为40KHz的超声装置中，加入原料重量5倍的80%的乙醇溶液，在75℃的条件下提取4h，提取液减压浓缩，得浓缩液；将所得浓缩液加入D-101大孔吸附树脂柱中，先用3倍柱体积的蒸馏水洗脱，后用5倍柱体积的70%的乙醇洗脱，收集洗脱液，减压浓缩得香榧提取物粗品；取氯仿-甲醇-水按4:9:3体积比置于分液漏斗中，混匀后，静置，放出上层作为固定相，下层作为流动相，将粗品用下相溶解，开启制备型高速逆流色谱仪，先将固定相泵入色谱柱中，再以1mL/min流速泵入流动相，并通过进样阀连续进样，控制转速为1000r/min，收集流出液，浓缩，干燥得香榧提取物，检测含量97.2%。
实施例3：
将香榧假种皮干燥粉碎，过40目筛；将粉碎后的香榧假种皮粉末置于频率为40KHz的超声装置中，加入原料重量4倍的75%的乙醇溶液，在80℃的条件下提取4h，提取液减压浓缩，得浓缩液；将所得浓缩液加入AB-8大孔吸附树脂柱中，先用3倍柱体积的蒸馏水洗脱，后用6倍柱体积的80%的乙醇洗脱，收集洗脱液，减压浓缩得香榧提取物粗品；取氯仿-甲醇-水按4:9:3体积比置于分液漏斗中，混匀后，静置，放出上层作为固定相，下层作为流动相，将粗品用下相溶解，开启制备型高速逆流色谱仪，先将固定相泵入色谱柱中，再以3mL/min流速泵入流动相，并通过进样阀连续进样，控制转速为700r/min，收集流出液，浓缩，干燥得香榧提取物，检测含量93.4%。

Claims (4)

1.一种香榧提取物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
a. 原料处理：将香榧假种皮干燥粉碎，过40目筛；
b. 超声波提取：将粉碎后的香榧假种皮粉末置于频率为40KHz的超声装置中，加入原料重量4~5倍的70~80%的乙醇溶液，在70~80℃的条件下提取3~4h，提取液减压浓缩，得浓缩液；
c. 大孔吸附树脂富集：将所得浓缩液加入大孔吸附树脂柱中，先用2~3倍柱体积的蒸馏水洗脱，后用4~6倍柱体积的60~80%的乙醇洗脱，收集洗脱液，减压浓缩得香榧提取物粗品；
d. 纯化：将上述粗品采用高速逆流色谱法分离纯化，以氯仿-甲醇-水为两相溶剂系统，取上相做固定相、下相为流动相，主机转速700-1000rpm，流速为1-3mL/min，收集目标流分，回收试剂，真空干燥得产品。
2.根据权利要求1所述的一种香榧提取物的制备方法，其特征在于，步骤c中所述的大孔吸附树脂类型为D-101、AB-8或HPD100中的任意一种。
3.根据权利要求1所述的一种香榧提取物的制备方法，其特征在于，步骤d中所述的氯仿-甲醇-水体积比为4:9:3。
4.根据权利要求1所述的香榧提取物在制备抗肿瘤药物中的应用。
CN201610307143.6A 2016-05-11 2016-05-11 一种香榧提取物的制备方法及其抗肿瘤应用 Pending CN106038618A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201610307143.6A CN106038618A (zh) 2016-05-11 2016-05-11 一种香榧提取物的制备方法及其抗肿瘤应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201610307143.6A CN106038618A (zh) 2016-05-11 2016-05-11 一种香榧提取物的制备方法及其抗肿瘤应用

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN106038618A true CN106038618A (zh) 2016-10-26

Family

ID=57176395

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201610307143.6A Pending CN106038618A (zh) 2016-05-11 2016-05-11 一种香榧提取物的制备方法及其抗肿瘤应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN106038618A (zh)

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109045100A (zh) * 2018-09-05 2018-12-21 山西绿立葳生物技术开发有限公司 红芸豆皮提取物、及其制备方法和应用
CN109350636A (zh) * 2018-09-05 2019-02-19 山西绿立葳生物技术开发有限公司 一种红芸豆皮提取物、及其制备方法和应用
CN112679343A (zh) * 2020-12-11 2021-04-20 浙江工业大学 一种利用香榧籽油制备高纯度金松酸乙酯的方法

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109045100A (zh) * 2018-09-05 2018-12-21 山西绿立葳生物技术开发有限公司 红芸豆皮提取物、及其制备方法和应用
CN109350636A (zh) * 2018-09-05 2019-02-19 山西绿立葳生物技术开发有限公司 一种红芸豆皮提取物、及其制备方法和应用
CN112679343A (zh) * 2020-12-11 2021-04-20 浙江工业大学 一种利用香榧籽油制备高纯度金松酸乙酯的方法

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US10183028B2 (en) Enrichment method of ergosterol peroxide from sporoderm-broken Ganoderma lucidum spore powder
CN104415070B (zh) 一种人参中人参总皂苷的分离纯化方法
CN103819445B (zh) 小叶莲中两个具有降血脂活性的新异戊烯基化黄酮类化合物的制备方法
CN101824067A (zh) 玉蕊醇型三萜皂苷类化合物、制备方法及其应用
CN108003214B (zh) 一种从土贝母中提取的皂苷化合物及其方法和应用
CN106038618A (zh) 一种香榧提取物的制备方法及其抗肿瘤应用
CN107510710A (zh) 一种从甘草残渣中富集2型糖尿病靶点抑制剂的方法和医药用途
CN107383144A (zh) 一种制备人参皂苷组合物的提取与转化耦合技术
CN104945362A (zh) 一种半日花烷型二萜化合物及其制备方法和用途
CN104844675A (zh) 白肉灵芝三萜化合物、其药用组合物及其应用
CN108690023B (zh) 一种赛塔城翠雀花中二萜类生物碱化合物及制备方法和用途
CN107286172B (zh) 阿朴啡生物碱Illigerine B及其制备方法和应用
CN103479723B (zh) 丹参二萜醌有效部位及其逆流色谱制备方法和癌症治疗应用
CN102764320B (zh) 山大颜提取物及其制备方法与抗肿瘤应用
CN106083556A (zh) 马齿苋中甘菊蓝结构新化合物及其提取分离方法
CN106045819A (zh) 一种云实三环二萜及其制法和用途
CN101851266A (zh) 新的环阿尔廷型三萜皂苷及其制备方法和应用
CN108484634A (zh) 一种青蒿素类似物的制备方法
CN102731464A (zh) 一个倍半萜内酯化合物、制备方法及其应用
CN103169752A (zh) 一种木鳖子提取物及其制备方法和用途
CN107365284A (zh) 一种从红豆杉中提取紫杉醇的方法
CN102670670A (zh) 一种高银杏萜类内酯含量的银杏达莫注射液的制备方法
CN102846680B (zh) 猫人参提取物及其制备方法和用途
CN105330588A (zh) 马齿苋中新生物碱Oleracone及其提取分离方法
JP6654754B2 (ja) イワベンケイ属植物からのヘルバセチン抽出方法

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
WD01 Invention patent application deemed withdrawn after publication
WD01 Invention patent application deemed withdrawn after publication

Application publication date: 20161026