[go: up one dir, main page]

CN105541825A - 三氮唑衍生物制备方法及其作为药物的用途 - Google Patents

三氮唑衍生物制备方法及其作为药物的用途 Download PDF

Info

Publication number
CN105541825A
CN105541825A CN201511016420.XA CN201511016420A CN105541825A CN 105541825 A CN105541825 A CN 105541825A CN 201511016420 A CN201511016420 A CN 201511016420A CN 105541825 A CN105541825 A CN 105541825A
Authority
CN
China
Prior art keywords
phenyl
methyl
triazole
compound
carbon
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201511016420.XA
Other languages
English (en)
Inventor
张惠斌
周金培
赵雷磊
张兵
徐斌
韩丽
杨一飞
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
China Pharmaceutical University
Original Assignee
China Pharmaceutical University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by China Pharmaceutical University filed Critical China Pharmaceutical University
Priority to CN201511016420.XA priority Critical patent/CN105541825A/zh
Publication of CN105541825A publication Critical patent/CN105541825A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing three or more hetero rings

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

本发明涉及三氮唑衍生物制备方法及其在医药上的应用。具体而言，本发明涉及一种通式(I)所示的三氮唑衍生物及其可药用的盐或含有其的药物组合物、及其制备方法，本发明进一步涉及所述三氮唑衍生物及其可药用的盐或含有其的药物组合物作为BET抑制剂在治疗多种肿瘤中的用途，其中通式(I)的各取代基同说明书中的定义相同。

Description

三氮唑衍生物制备方法及其作为药物的用途
技术领域
本发明涉及药物合成领域，具体而言，本发明涉及三氮唑类化合物及其药物组合物以及其作为BET抑制剂的药物用途。
背景技术
表观遗传现象包括DNA修饰、组蛋白修饰、染色质重塑和非编码RNA调节(ncRNA)等。组蛋白乙酰化是研究最多的一种组蛋白修饰方式，乙酰化能够中和赖氨酸带的正电荷，减弱DNA与组蛋白的亲和力，使染色质结构松散，处于开放状态，有利于基因转录，染色质重塑和DNA修复。此外，乙酰赖氨酸还能为含Bromodomain结构域的组蛋白乙酰基识别子提供识别和结合位点，利于识别子募集相关蛋白，调节基因转录。
近年研究发现组蛋白乙酰基识别子中的BET家族蛋白有潜力成为研发抗肿瘤药物的新靶点。BET家族蛋白包括四个蛋白(BRD2，BRD3，BRD4和BRDT)，每个蛋白都包含两个独立的Bromodomain结构域(BD1，BD2)用来识别组蛋白末端乙酰化的赖氨酸位点。Bromodomain结构域是一个高度保守的由约110个氨基酸构成的蛋白质功能结构域，蛋白由四个α螺旋(Z，A，B，C)和两个Loop(ZA，BC)构成，能够形成疏水区域，识别并结合乙酰化的赖氨酸残基。人类基因共编码61种Bromodomain结构域，分布于46种不同的功能蛋白中。
BET蛋白能够调控多个下游基因的转录(如原癌基因c-MYC)，而且BET蛋白还能识别并结合染色体上乙酰化修饰的转录因子(如GATA-1，NFκB)，共同调节基因转录，影响许多疾病的发生和病理进程，尤其涉及肿瘤和炎症。c-MYC编码的c-MYC蛋白是细胞增殖的主要调节因子，广泛参与多种肿瘤发生发展过程，并且与肿瘤药物治疗反应性紧密相关。抑制c-MYC的活性能够显著抑制肿瘤细胞的增殖生长，这一发现提示c-MYC是一个潜在的抗肿瘤靶点。然而，由于c-MYC蛋白的配体结合区域不明确，而且从高分辨率的复合物结构中也无法找出适合有机小分子结合的位点，严重阻碍小分子抑制剂的发展。研究发现，BET家族蛋白BRD4，调控c-MYC基因转录。因此，设计小分子BET抑制剂干扰BRD4与乙酰化组蛋白的结合，将有可能抑制c-MYC基因转录，达到抗肿瘤目的。通过对白血病细胞，淋巴瘤细胞和多发性骨髓瘤细胞研究发现，BET抑制剂(+)-JQ1能够影响BRD4与乙酰化组蛋白结合，显著下调c-MYC基因转录，抑制肿瘤细胞的增殖，且对正常细胞毒性较低，表明BET抑制剂有希望成为c-MYC高表达肿瘤的有效治疗药物。
此外，研究发现生物体内BRD3和BRD4与NUT基因可能发生基因易位，从而形成融合基因BRD3-NUT和BRD4-NUT，表达一种高致瘤性融合蛋白，该蛋白与中线癌(NMC)形成密切相关。目前并无有效的药物治疗该类患者，且传统的化疗和放疗手段对患者几乎无效。BET抑制剂有希望成为治疗NMC患者的有效药物。
发明内容
本发明的一个目的是提供一类三氮唑类化合物或其药学上接受的盐。
本发明的又一目的是提供该类化合物在制备药物中的用途。该类化合物可以有效结合具有Bromodomain结构域的蛋白，从而调节下游的信号通路，发挥特定功能，可以用于治疗与Bromodomain结构域蛋白相关的多种疾病。该类化合物可干扰具有Brodomain结构域的BRD4与乙酰化组蛋白的结合，进而下调癌基因和其他相关靶基因的转录，因此可以成为肿瘤的有效治疗药物。
本发明的再一目的是提供包含该类化合物作为活性成分的药物组合物。
为了实现上述目的，本发明提供了如下通式(I)所示的三氮唑类化合物或其药学上可接受的盐：
其中：
R1独立选自氢原子、1-6碳的烷基；
R2独立选自氟取代苯基、氯取代苯基、1-6碳的烷基取代苯基、1-6碳的烷氧基取代苯基、三氟甲基取代苯基、1-6碳的烷基羧酸、1-6碳的烷基羧酸酯、1-6碳的烷基酰胺、1-6碳的烯烃羧酸或者1-6碳的烯烃羧酸酯；
n为1至6的整数。
优选地，在通式(I)化合物中：
R1独立选自氢原子、1-3碳的烷基；
R2独立选自氟取代苯基、氯取代苯基、1-3碳的烷基取代苯基、1-3碳的烷氧基取代苯基、三氟甲基取代苯基、1-3碳的烷基羧酸、1-3碳的烷基羧酸酯、1-3碳的烷基酰胺、1-3碳的烯烃羧酸或者1-3碳的烯烃羧酸酯；
n为1至4的整数。
更优选地，在通式(I)化合物中：
R1独立选自氢原子、甲基；
R2独立选自氟取代苯基、氯取代苯基、甲基取代苯基、甲氧基取代苯基、三氟甲基取代苯基、乙酸基、乙酸甲酯、乙酰吡咯；
n为1至2的整数。
本发明的优选化合物包括，但不限于：
6-(3，5-二甲基异恶唑)-4-苯基-3-((1-苯基-1H-1，2，3-三氮唑)甲基)-3，4-二氢喹唑啉-2(1H)-酮；
6-(3，5-二甲基异恶唑)-4-(4-甲氧基苯基)-3-((1-苯基-1H-1，2，3-三氮唑)甲基)-3，4-二氢喹唑啉-2(1H)-酮；
6-(3，5-二甲基异恶唑)-4-(3-甲氧基苯基)-3-((1-苯基-1H-1，2，3-三氮唑)甲基)-3，4-二氢喹唑啉-2(1H)-酮；
6-(3，5-二甲基异恶唑)-4-(3-甲氧基苯基)-3-((1-苯基-1H-1，2，3-三氮唑)甲基)-3，4-二氢喹唑啉-2(1H)-酮；
6-(3，5-二甲基异恶唑)-4-(3-氟苯基)-3-((1-苯基-1H-1，2，3-三氮唑)甲基)-3，4-二氢喹唑啉-2(1H)-酮；
6-(3，5-二甲基异恶唑)-4-(2-氟苯基)-3-((1-苯基-1H-1，2，3-三氮唑)甲基)-3，4-二氢喹唑啉-2(1H)-酮；
6-(3，5-二甲基异恶唑)-4-(4-氟苯基)-3-((1-苯基-1H-1，2，3-三氮唑)甲基)-3，4-二氢喹唑啉-2(1H)-酮；
6-(3，5-二甲基异恶唑)-4-(2，4-二氟苯基)-3-((1-苯基-1H-1，2，3-三氮唑)甲基)-3，4-二氢喹唑啉-2(1H)-酮；
6-(3，5-二甲基异恶唑)-4-(3-甲基苯基)-3-((1-苯基-1H-1，2，3-三氮唑)甲基)-3，4-二氢喹唑啉-2(1H)-酮；
6-(3，5-二甲基异恶唑)-4-(4-三氟甲基苯基)-3-((1-苯基-1H-1，2，3-三氮唑)甲基)-3，4-二氢喹唑啉-2(1H)-酮；
6-(3，5-二甲基异恶唑)-4-(3-三氟甲基苯基)-3-((1-苯基-1H-1，2，3-三氮唑)甲基)-3，4-二氢喹唑啉-2(1H)-酮；
6-(3，5-二甲基异恶唑)-4-(2-三氟甲基苯基)-3-((1-苯基-1H-1，2，3-三氮唑)甲基)-3，4-二氢喹唑啉-2(1H)-酮；
6-(3，5-二甲基异恶唑)-1-甲基-4-苯基-3-((1-苯基-1H-1，2，3-三氮唑)甲基)-3，4-二氢喹唑啉-2(1H)-酮；
6-(3，5-二甲基异噁唑-4-基)-3-((1-(2-氧代-2-(吡咯烷基-1-基)-乙基)-1H-1，2，3-三氮唑-4-基)甲基-4-苯基-3，4-二氢喹唑啉-2(1H)-酮。
化合物的结构为：
通式(I)所示的化合物可以含有不对称或手性中心，因此可以以不同立体异构形式存在。本发明化合物的所有立体异构形式，包括但不限于非対映异构体、対映异构体和阻转异构体以及他们的混合物(如外消旋物)，均包括在本发明的范围内。
通式(I)所示的化合物还可以以不同互变异构形式存在，所有这些形式均包括在本发明范围内。属于“互变异构体”或“互变异构形式”是指经由低能垒相互转化的不同能量的结构异构体。
通式(I)所示的化合物可以以非溶剂化形式和含有药学上可接受的溶剂(如水、乙醇等)的溶剂化形式存在，本发明包括溶剂化和非溶剂化形式。
通式(I)所示的化合物可以与无机酸或有机酸形成“药学上可接受的盐”，所述的无机酸如：盐酸、氢溴酸、磷酸和硫酸，所述的有机酸如抗坏血酸、盐酸、柠檬酸、酒石酸、乳酸、马来酸、丙二酸、富马酸、草酸、苹果酸、乙醇酸、琥珀酸、丙酸、乙酸、甲磺酸、三氟甲磺酸、苯磺酸、对甲苯磺酸等。
本发明通式(I)所示的化合物可以通过包括化学领域众所周知的那些方法来合成，尤其根据本发明的说明来合成。原料一般可以从商业来源如安耐吉、西格玛公司获得，或者使用本领域技术人员熟知的方法容易的制备。
本发明提供的通式(I)表示的化合物可以通过下述反应方程式所示的合成路线进行制备。
步骤a：化合物A与N-溴代丁二酰亚胺反应得到化合物B；
步骤b：化合物B与叔丁基亚磺酰胺反应得到化合物C；
步骤c：用硼氢化钠还原化合物C得到化合物D；
步骤d：化合物D与溴代炔反应得到化合物E；
步骤e：化合物E与三光气反应得到化合物F；
步骤f：化合物F与叠氮物反应得到G；
步骤g：化合物G与3，5-二甲基异恶唑-4-硼酸频哪醇酯反应得到化合H；
步骤h：化合物H与碘代烷反应得到通式(I)表示的化合物；
其中，R1、R2和n的定义如上所述。
本发明的另一目的是提供通式(I)所示的三氮唑类化合物或其药学上可接受的盐在制备治疗与Bromodomain结构域蛋白相关疾病的药物中的用途。
通式(I)所示的化合物或其药学上可接受的盐可以有效结合具有Bromodomain结构域的蛋白，从而调节下游的信号通路，发挥特定功能，可用于治疗与Bromodomain结构域蛋白相关的多种疾病。如该类化合物可干扰具有Bromodomain结构域的BRD4与乙酰化蛋白的结合，进而下调癌基因C-MYC和其相关靶基因的转录，因此可以成为肿瘤的有效治疗药物。
因此，本发明的另一目的是提供通式(I)所示的化合物或其药学上可接受的盐在制备治疗肿瘤的药物中的用途。所述肿瘤可为但不限于多发性骨髓瘤、胃癌、肺癌、乳腺癌、食管癌、结肠癌、髓母细胞瘤、急性粒细胞白血病、慢性白血病、前列腺癌、肝细胞瘤、肾细胞瘤、宫颈癌、皮肤癌、卵巢癌、结肠癌、神经胶质瘤、甲状腺癌或胰腺癌。
本发明的另一目的在于提供一种药物组合物，其包含治疗有效量的一种通式(I)所示的化合物或其药学上可接受的盐，以及药学上可接受的辅料。
本发明的又一目的是提供一种预防或治疗与Bromodomain结构域蛋白相关疾病的方法，所述方法包括施用治疗有效量的通式(I)所示的类化合物或其药学上可接受的盐或本发明的上述药物组合物给患者。
具体实施方式
不需进一步详细说明，认为本领域熟练技术人员借助前面的描述，可以最大程度的利用本发明。因此，下面提供的实施例仅仅是进一步阐明本发明而已，并不意味着以任何方式限制本发明范围。
原料可以从商业途径获得，或者通过本领域已知的方法制备，或根据本文所述方法制备。
化合物的结构通过核磁共振(1H-NMR)和/或质谱(MS)来确定。NMR测定是用ACF-300BRUK型核磁共振仪，测定溶剂为氘代氯仿(CDCl3)或氘代二甲亚砜(DMSO-D6)，TMS为内标。MS的测定用HP1100型质谱仪。柱层析采用200-300目硅胶(青岛海洋化工厂生产)。
制备实施例：
实施例1：
合成路线为：
试剂与条件：a)N-溴代丁二酰亚胺，二氯甲烷，-10℃；b)叔丁基亚磺酰胺，钛酸四乙酯，四氢呋喃乙腈，70℃；c)硼氢化钠，四氢呋喃，水，室温；d)3-溴丙炔，氢化钠，N，N-二甲基甲酰胺，0℃；e)三光气，四氢呋喃，室温；f)苯基叠氮，五水合硫酸铜，抗坏血酸钠，二氯甲烷，甲醇，水，室温；g)3，5-二甲基异恶唑-4-硼酸频哪醇酯，[1，1′-双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯二氯甲烷络合物，碳酸钾，甲苯、甲醇，N，N-二甲基甲酰胺，氮气，80℃。
a)将2-氨基二苯甲酮(5g，25.35mmol)溶于60ml二氯甲烷中，在-10℃冷阱中搅拌10min，分批加入N-溴代丁二酰亚胺(4.74g，26.62mmol)，继续在冷阱中反应2小时后，加入30ml水，用二氯甲烷萃取，饱和食盐水洗，收集有机层，无水硫酸钠干燥，减压蒸去有机溶剂，残留物通过硅胶柱色谱层析纯化，使用石油醚/乙酸乙酯(V/V＝20/1-10/1)洗脱得到2-氨基-5-溴二苯甲酮6g，为黄色固体，收率85.71％。1HNMR(300MHz，DMSO)δ7.68-7.48(m，5H)，7.42(dd，J＝8.9，2.4Hz，1H)，7.31(d，J＝2.4Hz，1H)，7.24(s，2H)，6.86(d，J＝8.9Hz，1H).
b)将2-氨基-5-溴二苯甲酮(6g，21.73mmol)、叔丁基亚磺酰胺(10.53g，86.91mmol)和钛酸四乙酯(19.83g，86.91)依次溶于50ml四氢呋喃，加热至70℃搅拌反应48小时，加入30ml水和50ml乙酸乙酯，有固体析出，将反应液用硅藻土抽滤，收集滤液，用乙酸乙酯萃取，收集有机层，无水硫酸钠干燥，减压蒸去有机溶剂，残留物通过硅胶柱色谱层析纯化，使用石油醚/乙酸乙酯(V/V＝3/1-1/1)洗脱得到N-(2-氨基-5-溴二苯基)亚甲基叔丁基亚磺酰胺7.7g，为黄色泡沫状固体，收率93.42％。
c)将N-(2-氨基-5-溴二苯基)亚甲基叔丁基亚磺酰胺(7.7g，20.3mmol)溶于49ml四氢呋喃和1ml水中，室温下搅拌，分批加入硼氢化钠(3.07g，81.2mmol)，继续室温搅拌4小时，加入30ml水，用乙酸乙酯萃取，收集有机层，无水硫酸钠干燥，减压蒸去有机溶剂，得到N-(2-氨基-5-溴二苯基)甲基叔丁基亚磺酰胺7.6g，为白色固体，收率98.18％。1HNMR(300MHz，DMSO)δ7.42-7.20(m，5H)，7.13-7.00(m，2H)，6.60(d，J＝8.5Hz，1H)，5.95(d，J＝5.9Hz，1H)，5.47(d，J＝6.0Hz，1H)，5.25(s，2H)，1.13(s，9H).
d)将N-(2-氨基-5-溴二苯基)甲基叔丁基亚磺酰胺(2g，5.24mmol)和3-溴丙炔(0.93g，7.87mmol)溶于10mlN，N-一二甲基甲酰胺，在0℃冰浴中搅拌5min，分批加入60％氢化钠(0.63g，15.73mmol)，继续在0℃冰浴中搅拌1小时，加入30ml水，用乙酸乙酯萃取，收集有机层，无水硫酸钠干燥，减压蒸去有机溶剂，残留物通过硅胶柱色谱层析纯化，使用石油醚/乙酸乙酯(V/V＝6/1-5/1)洗脱得到N-(2-氨基-5-溴二苯基)甲基-N-丙炔基叔丁基亚磺酰胺1.9g，为黄色固体，收率86.38％。1HNMR(300MHz，DMSO)δ7.41-7.27(m，5H)，7.15(dd，J＝8.6，2.2Hz，2H)，6.62(d，J＝8.6Hz，1H)，5.82(s，1H)，5.31(s，2H)，4.07-3.97(m，1H)，3.42(d，J＝20.7Hz，1H)，3.26(d，J＝2.3Hz，1H)，1.03(d，J＝8.4Hz，9H).
e)将N-(2-氨基-5-溴二苯基)甲基-N-丙炔基叔丁基亚磺酰胺(1.8g，4.29mmol)溶于20ml四氢呋喃，室温搅拌，加入三光气(1.91g，6.44mmol)，室温搅拌2小时，减压浓缩反应液，有固体析出，加入20ml水，用饱和碳酸钠调pH至7，有大量固体析出，抽滤，干燥得到6-溴-4-苯基-3-丙炔基-3，4-二氢喹唑啉-2(1H)-酮1.25g，为浅黄色固体，收率85.35％。1HNMR(300MHz，DMSO)δ9.83(s，1H)，7.55-7.17(m，7H)，6.81(d，J＝8.5Hz，1H)，5.81(s，1H)，4.66(dd，J＝17.7，2.5Hz，1H)，3.41(dd，J＝17.7，2.3Hz，1H)，3.23(t，J＝2.4Hz，1H).
f)将6-溴-4-苯基-3-丙炔基-3，4-二氢喹唑啉-2(1H)-酮(0.2g，0.58mmol)和苯基叠氮(0.1g，0.87mmol)溶于3ml二氯甲烷、3ml甲醇和2ml水的混合液，室温搅拌，加入五水合硫酸铜(0.0146g，0.058mmol)，室温搅拌20min，加入抗坏血酸钠(0.046g，0.234mmol)，室温搅拌2小时，减压浓缩反应液，有固体析出，加入10ml水，抽滤，用石油醚洗滤饼，干燥得到6-溴-4-苯基-3-((1-苯基-1H-1，2，3-三氮唑)甲基)-3，4-二氢喹唑啉-2(1H)-酮0.25g，为浅黄色固体，收率92.65％。1HNMR(300MHz，DMSO)δ9.77(s，1H)，8.68(s，1H)，7.88(d，J＝8.1Hz，2H)，7.58(t，J＝7.7Hz，2H)，7.47(t，J＝7.4Hz，1H)，7.41-7.25(m，7H)，6.80(d，J＝8.5Hz，1H)，5.70(s，1H)，5.22(d，J＝15.3Hz，1H)，3.89(d，J＝15.3Hz，1H).
g)将6-溴-4-苯基-3-((1-苯基-1H-1，2，3-三氮唑)甲基)-3，4-二氢喹唑啉-2(1H)-酮(0.24g，0.52mmol)、3，5-二甲基异恶唑-4-硼酸频哪醇酯(0.23g，1.04mmol)、[1，1′-双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯二氯甲烷络合物(0.038g，0.052mmol)和碳酸钾(0.144g，1.04mmol)溶于1mlN，N-二甲基甲酰胺、1ml甲醇和3ml甲苯的混合液，氮气保护，加热至70℃搅拌反应24小时，加入10ml水和10ml乙酸乙酯，将溶液用硅藻土抽滤，收集滤液，用乙酸乙酯萃取，收集有机层，无水硫酸钠干燥，减压蒸去有机溶剂，残留物通过硅胶柱色谱层析纯化，使用石油醚/乙酸乙酯(V/V＝2/1-1/1)洗脱得到6-(3，5-二甲基异恶唑)-4-苯基-3-((1-苯基-1H-1，2，3-三氮唑)甲基)-3，4-二氢喹唑啉-2(1H)-酮0.13g，为白色固体，收率52.32％。1HNMR(300MHz，DMSO)δ9.76(s，1H)，8.72(s，1H)，7.88(d，J＝7.5Hz，2H)，7.58(s，2H)，7.42(tt，J＝14.8，7.5Hz，5H)，7.29(d，J＝6.9Hz，1H)，7.19(s，1H)，7.13(d，J＝8.2Hz，1H)，6.92(d，J＝8.2Hz，1H)，5.77(s，1H)，5.27(d，J＝15.4Hz，1H)，3.93(d，J＝15.4Hz，1H)，2.27(s，3H)，2.10(s，3H).
按照与制备实施例1相同的方法制备下列化合物：
实施例13：
合成路线为：
试剂与条件：a)碘甲烷，氢化钠，N，N-二甲基甲酰胺，0℃。
a)将6-(3，5-二甲基异恶唑)-4-苯基-3-((1-苯基-1H-1，2，3-三氮唑)甲基)-3，4-二氢喹唑啉-2(1H)-酮(0.12g，0.25mmol)和碘甲烷(0.071g，0.5mmol)溶于2mlN，N-二甲基甲酰胺中，在0℃冰浴中搅拌5min，分批加入60％氢化钠(0.03g，0.018mmol)，继续在冰浴中反应2小时后，加入10ml水，有固体析出，抽滤，用石油醚洗滤饼，干燥得到6-(3，5-二甲基异恶唑)-1-甲基-4-苯基-3-((1-苯基-1H-1，2，3-三氮唑)甲基)-3，4-二氢喹唑啉-2(1H)-酮0.11g，为白色固体，收率89.05％。1HNMR(300MHz，DMSO)δ8.69(s，1H)，7.86(d，J＝7.9Hz，2H)，7.58(t，J＝7.7Hz，2H)，7.48(d，J＝7.1Hz，1H)，7.43-7.23(m，7H)，7.08(d，J＝8.3Hz，1H)，5.80(s，1H)，5.26(d，J＝15.6Hz，1H)，4.08(d，J＝15.3Hz，1H)，3.36(s，3H)，2.31(s，3H)，2.14(s，3H).
实施例14：
合成路线为：
试剂与条件：a)叠氮乙酸乙酯，五水合硫酸铜，抗坏血酸钠，二氯甲烷，甲醇，水，室温；b)水合氢氧化锂，甲醇，水，室温；c)四氢吡咯，O-苯并三氮唑-四甲基脲六氟磷酸酯，二异丙基乙基胺，N，N-二甲基甲酰胺，室温；d)3，5-二甲基异恶唑-4-硼酸频哪醇酯，[1，1′-双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯二氯甲烷络合物，碳酸钾，甲苯、甲醇，N，N-二甲基甲酰胺，氮气，80℃。
a)将6-溴-4-苯基-3-丙炔基-3，4-二氢喹唑啉-2(1H)-酮(0.25g，0.73mmol)和叠氮乙酸乙酯(0.14g，1.1mmol)溶于3ml二氯甲烷、3ml甲醇和2ml水的混合液，室温搅拌，加入五水合硫酸铜(0.018g，0.073mmol)，室温搅拌20min，加入抗坏血酸钠(0.058g，0.293mmol)，室温搅拌2小时，用二氯甲烷萃取，饱和食盐水洗，收集有机层，无水硫酸钠干燥，减压蒸去有机溶剂，残留物通过硅胶柱色谱层析纯化，使用二氯甲烷/甲醇(V/V＝100/1-80/1)洗脱得到2-(4-((6-溴-2-氧代-4-苯基-1，4-二氢喹唑啉-3(2H))甲基)-1H-1，2，3-三氮唑乙酸乙酯0.3g，为浅黄色固体，收率87.06％。1HNMR(300MHz，DMSO)δ9.73(s，1H)，8.00(s，1H)，7.41-7.25(m，7H)，6.78(d，J＝8.4Hz，1H)，5.62(s，1H)，5.33(s，2H)，5.12(d，J＝15.3Hz，1H)，4.16(q，J＝7.1Hz，2H)，3.77(d，J＝15.4Hz，1H)，1.20(t，J＝7.1Hz，3H).
b)将2-(4-((6-溴-2-氧代-4-苯基-1，4-二氢喹唑啉-3(2H))甲基)-1H-1，2，3-三氮唑乙酸乙酯(0.3g，0.637mmol)和水合氢氧化锂(0.053g，1.28mmol)溶于6ml甲醇和3ml水混合液中，室温搅拌1小时，减压浓缩反应液，有固体析出，加入5ml水，用1mol/L盐酸调pH至3，有大量白色固体析出，抽滤，用石油醚洗滤饼，干燥得到2-(4-((6-溴-2-氧代-4-苯基-1，4-二氢喹唑啉-3(2H))甲基)-1H-1，2，3-三氮唑乙酸0.24g，为白色固体，收率85.07％。1HNMR(300MHz，DMSO)δ13.82-13.05(m，1H)，9.76(s，1H)，7.99(s，1H)，7.38-7.25(m，7H)，6.78(d，J＝8.5Hz，1H)，5.64(s，1H)，5.22(s，2H)，5.12(d，J＝15.3Hz，1H)，3.76(d，J＝15.3Hz，1H).
c)将2-(4-((6-溴-2-氧代-4-苯基-1，4-二氢喹唑啉-3(2H))甲基)-1H-1，2，3-三氮唑乙酸(0.137g，0.309mmol)、四氢吡咯(0.026g，0.371mmol)、O-苯并三氮唑-四甲基脲六氟磷酸酯(0.14g，0.371mmol)和二异丙基乙基胺(0.08g，0.619mmol)溶于2mlN，N-二甲基甲酰胺，室温搅拌2小时，加入10ml水，用乙酸乙酯萃取，饱和食盐水洗，收集有机层，无水硫酸钠干燥，减压蒸去有机溶剂，残留物通过硅胶柱色谱层析纯化，使用二氯甲烷/甲醇(V/V＝80/1-40/1)洗脱得到6-溴-3-((1-(2-氧代-2-(吡咯烷基-1-基)-乙基)-1H-1，2，3-三氮唑-4-基)甲基)-4-苯基-3，4-二氢喹唑啉-2(1H)-酮0.1g，为浅黄色固体，收率65.17％。1HNMR(300MHz，DMSO)δ9.75(s，1H)，7.89(s，1H)，7.40-7.26(m，7H)，6.78(d，J＝8.5Hz，1H)，5.64(s，1H)，5.30(s，2H)，5.14(d，J＝15.4Hz，1H)，3.75(d，J＝15.4Hz，1H)，3.50(t，J＝6.8Hz，2H)，3.30(d，J＝6.9Hz，2H)，1.90(dd，J＝13.0，6.3Hz，2H)，1.80(dd，J＝13.3，6.6Hz，2H).
d)将6-溴-3-((1-(2-氧代-2-(吡咯烷基-1-基)-乙基)-1H-1，2，3-三氮唑-4-基)甲基)-4-苯基-3，4-二氢喹唑啉-2(1H)-酮(0.09g，0.181mmol)、3，5-二甲基异恶唑-4-硼酸频哪醇酯(0.081g，0.363mmol)、[1，1′-双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯二氯甲烷络合物(0.026g，0.036mmol)和碳酸钾(0.05g，0.363mmol)溶于1mlN，N-二甲基甲酰胺、1ml甲醇和3ml甲苯的混合液，氮气保护，加热至70℃搅拌反应24小时，加入10ml水和10ml乙酸乙酯，将溶液用硅藻土抽滤，收集滤液，用乙酸乙酯萃取，收集有机层，无水硫酸钠干燥，减压蒸去有机溶剂，残留物通过硅胶柱色谱层析纯化，使用乙酸乙酯/甲醇(V/V＝40/1)洗脱得到6-(3，5-二甲基异噁唑-4-基)-3-((1-(2-氧代-2-(吡咯烷基-1-基)-乙基)-1H-1，2，3-三氮唑-4-基)甲基)-4-苯基-3，4-二氢喹唑啉-2(1H)-酮0.05g，为浅黄色固体，收率53.8％。1HNMR(300MHz，DMSO)δ9.70(s，1H)，7.90(s，1H)，7.43-7.35(m，4H)，7.32-7.26(m，1H)，7.16(s，1H)，7.14-7.09(m，1H)，6.90(d，J＝8.2Hz，1H)，5.71(s，1H)，5.29(s，2H)，5.19(d，J＝15.3Hz，1H)，3.78(d，J＝15.2Hz，1H)，3.50(t，J＝6.7Hz，2H)，3.29(d，J＝6.8Hz，2H)，2.28(s，3H)，2.11(s，3H)，1.90(dd，J＝13.1，6.5Hz，2H)，1.79(dd，J＝13.4，6.3Hz，2H).
药理活性实施例1：化合物的酶水平活性测定
化合物与BRD4蛋白N端第二个bromodomain结构域(以下称作BRD4(BD2))的结合活性测试采用的是AlphaScreen检测技术。化合物初筛浓度为1μM，该条件下抑制率大于70％的化合物测定其IC50值。配制HEPES缓冲液(50mMHEPES，100mMNaCl，0.1％BSA，0.05％CHAPS，pH7.5)用于制备BRD4(BD2)蛋白、Biotin标记的组蛋白H4、待测化合物(DMSO0.1％)、donorbeads和acceptorbeads溶液。取384孔板一块，按照布置，板上分待测化合物孔、空白对照孔(min，max)、阳性药对照孔。向待测化合物孔和阳性药孔分别加入不同浓度的化合物溶液5μL，空白加入缓冲液5μL(DMSO0.1％)。继续向除空白对照孔(min)外的各孔加入BRD4(BD2)蛋白溶液5μL，向空白对照孔(min)加入缓冲液5μL。室温下孵育15分钟后，每孔加入Biotin标记的组蛋白H4溶液5μL，继续在室温下孵育1小时后，加入donorbeads和acceptorbeads溶液15μL，避光室温孵育1小时后用EnSpire检测仪的Alphamode(λex＝680，λem＝570)读取荧光数值。
数值处理：抑制率＝(Max-Signal)/(Max-Min)×100％
其中：Max：Biotin标记的组蛋白H4与蛋白完全结合的值
Min：Biotin标记的组蛋白H4本底值
Signal：化合物相应浓度下的值
以化合物浓度和相应的抑制率做S曲线。得到相应化合物的IC50。
以下表1为本发明制备实施例中的化合物在药理实验实施例1中得到的生物活性结果。
表1
注：“NT”表示没有测试IC50。
表1所列的部分化合物初筛浓度为1μM下表现出与阳性对照(+)-JQ1相当的抑制率，部分化合物IC50与(+)-JQ1相当，显示出较强的活性，表明本发明的化合物在酶水平可以有效结合具有bromodomian结构域的蛋白，因此本发明的化合物可以成为抗肿瘤的有效药物。
药理活性实施例2：化合物细胞水平活性测定
化合物细胞水平的活性检测采用Celltiter-Glo荧光细胞活力检测法。将处于对数生长期的MV4-11细胞接种至96孔培养板，培养过夜后，加入待测化合物37℃，5％CO2孵育72h，结束后，检测前30分钟在室温下平衡测定试剂。每孔加入30uLCelltiter-Glo试剂，摇晃96孔板10分钟诱导细胞裂解。将96孔板在室温下孵育2分钟来稳定荧光信号。使用Envision检测仪来读取荧光数值。
数值处理：抑制率＝(Maxsignal-Compoundsignal)/(Maxsignal-Minsignal)×100％
其中：Maxsignal：DMSO作用中读取到的最大值
Minsignal：只有介质作用的最小值
Compoundsignal：化合物相应浓度下的值
以化合物浓度和相应的抑制率做S曲线。得到相应化合物的IC50。
以下表2为本发明制备实施例中部分化合物在药理实施例2中得到的生物活性结果。
表2
化合物 IC50(μM)
实施例1 0.0652
表2所列化合物的IC50数值，表明本发明的化合物在细胞水平可以有效结合具有bromodomain结构域的蛋白，因此本发明的化合物可以成为肿瘤的有效治疗药物。

Claims (9)

1.一种通式(I)所示的三氮唑类化合物及其可药用的盐：
其中：
R1独立选自氢原子、1-6碳的烷基；
R2独立选自氟取代苯基、氯取代苯基、1-6碳的烷基取代苯基、1-6碳的烷氧基取代苯基、三氟甲基取代苯基、1-6碳的烷基羧酸、1-6碳的烷基羧酸酯、1-6碳的烷基酰胺、1-6碳的烯烃羧酸或者1-6碳的烯烃羧酸酯；
n为1至6的整数。
2.根据权利要求1所述的化合物及其可药用的盐，其中：
R1独立选自氢原子、1-3碳的烷基；
R2独立选自氟取代苯基、氯取代苯基、1-3碳的烷基取代苯基、1-3碳的烷氧基取代苯基、三氟甲基取代苯基、1-3碳的烷基羧酸、1-3碳的烷基羧酸酯、1-3碳的烷基酰胺、1-3碳的烯烃羧酸或者1-3碳的烯烃羧酸酯；
n为1至4的整数。
3.根据权利要求2所述的化合物及其可药用的盐，其中：
R1独立选自氢原子、甲基；
R2独立选自氟取代苯基、氯取代苯基、甲基取代苯基、甲氧基取代苯基、三氟甲基取代苯基、乙酸基、乙酸甲酯、乙酰吡咯；
n为1至2的整数。
4.根据权利要求1-3中所述的化合物及其可药用的盐，其中，所述化合物为下列化合物之一或其可药用盐：
6-(3，5-二甲基异恶唑)-4-苯基-3-((1-苯基-1H-1，2，3-三氮唑)甲基)-3，4-二氢喹唑啉-2(1H)-酮；
6-(3，5-二甲基异恶唑)-4-(4-甲氧基苯基)-3-((1-苯基-1H-1，2，3-三氮唑)甲基)-3，4-二氢喹唑啉-2(1H)-酮；
6-(3，5-二甲基异恶唑)-4-(3-甲氧基苯基)-3-((1-苯基-1H-1，2，3-三氮唑)甲基)-3，4-二氢喹唑啉-2(1H)-酮；
6-(3，5-二甲基异恶唑)-4-(3-甲氧基苯基)-3-((1-苯基-1H-1，2，3-三氮唑)甲基)-3，4-二氢喹唑啉-2(1H)-酮；
6-(3，5-二甲基异恶唑)-4-(3-氟苯基)-3-((1-苯基-1H-1，2，3-三氮唑)甲基)-3，4-二氢喹唑啉-2(1H)-酮；
6-(3，5-二甲基异恶唑)-4-(2-氟苯基)-3-((1-苯基-1H-1，2，3-三氮唑)甲基)-3，4-二氢喹唑啉-2(1H)-酮；
6-(3，5-二甲基异恶唑)-4-(4-氟苯基)-3-((1-苯基-1H-1，2，3-三氮唑)甲基)-3，4-二氢喹唑啉-2(1H)-酮；
6-(3，5-二甲基异恶唑)-4-(2，4-二氟苯基)-3-((1-苯基-1H-1，2，3-三氮唑)甲基)-3，4-二氢喹唑啉-2(1H)-酮；
6-(3，5-二甲基异恶唑)-4-(3-甲基苯基)-3-((1-苯基-1H-1，2，3-三氮唑)甲基)-3，4-二氢喹唑啉-2(1H)-酮；
6-(3，5-二甲基异恶唑)-4-(4-三氟甲基苯基)-3-((1-苯基-1H-1，2，3-三氮唑)甲基)-3，4-二氢喹唑啉-2(1H)-酮；
6-(3，5-二甲基异恶唑)-4-(3-三氟甲基苯基)-3-((1-苯基-1H-1，2，3-三氮唑)甲基)-3，4-二氢喹唑啉-2(1H)-酮；
6-(3，5-二甲基异恶唑)-4-(2-三氟甲基苯基)-3-((1-苯基-1H-1，2，3-三氮唑)甲基)-3，4-二氢喹唑啉-2(1H)-酮；
6-(3，5-二甲基异恶唑)-1-甲基-4-苯基-3-((1-苯基-1H-1，2，3-三氮唑)甲基)-3，4-二氢喹唑啉-2(1H)-酮；
6-(3，5-二甲基异噁唑-4-基)-3-((1-(2-氧代-2-(吡咯烷基-1-基)-乙基)-1H-1，2，3-三氮唑-4-基)甲基-4-苯基-3，4-二氢喹唑啉-2(1H)-酮。
5.权利要求1-4中任一项所述的通式(I)所示的化合物的制备方法，由以下方法制备得到：
步骤a：化合物A与N-溴代丁二酰亚胺反应得到化合物B；
步骤b：化合物B与叔丁基亚磺酰胺反应得到化合物C；
步骤c：用硼氢化钠还原化合物C得到化合物D；
步骤d：化合物D与溴代炔反应得到化合物E；
步骤e：化合物E与三光气反应得到化合物F；
步骤f：化合物F与叠氮物反应得到G；
步骤g：化合物G与3，5-二甲基异恶唑-4-硼酸频哪醇酯反应得到化合H；
步骤h：化合物H与碘代烷反应得到通式(I)表示的化合物；
其中，R1、R2和n的定义如上所述。
6.权利要求1-4中任一项所述的通式(I)所示的化合物或其药学上可接受的盐在制备治疗与bromodomain结构域蛋白相关疾病的药物中的用途。
7.权利要求1-4中任一项所述的通式(I)所示的化合物或其药学上可接受的盐在制备治疗肿瘤的药物中的用途。
8.根据权利要求7所述的用途，其中，所述肿瘤可为但不限于多发性骨髓瘤、胃癌、肺癌、乳腺癌、食管癌、结肠癌、髓母细胞瘤、急性粒细胞白血病、慢性白血病、前列腺癌、肝细胞瘤、肾细胞瘤、宫颈癌、皮肤癌、卵巢癌、结肠癌、神经胶质瘤、甲状腺癌或胰腺癌。
9.一种药物组合物，其包含治疗有效量的一种或多种根据权利要求1-4中任一项所述的通式(I)所示的化合物或其药学上可接受的盐，以及药学上可接受的辅料。
CN201511016420.XA 2015-12-28 2015-12-28 三氮唑衍生物制备方法及其作为药物的用途 Pending CN105541825A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201511016420.XA CN105541825A (zh) 2015-12-28 2015-12-28 三氮唑衍生物制备方法及其作为药物的用途

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201511016420.XA CN105541825A (zh) 2015-12-28 2015-12-28 三氮唑衍生物制备方法及其作为药物的用途

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN105541825A true CN105541825A (zh) 2016-05-04

Family

ID=55821435

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201511016420.XA Pending CN105541825A (zh) 2015-12-28 2015-12-28 三氮唑衍生物制备方法及其作为药物的用途

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN105541825A (zh)

Cited By (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN106749513A (zh) * 2017-01-23 2017-05-31 中国药科大学 基于vhl配体诱导bet降解的双功能分子及其制备和应用
CN107056772A (zh) * 2017-01-23 2017-08-18 中国药科大学 基于cereblon配体诱导BET降解的双功能分子及其制备和应用
CN107056771A (zh) * 2017-01-23 2017-08-18 中国药科大学 Bromodomain蛋白二价抑制剂及其制备方法和应用
CN108440503A (zh) * 2018-04-10 2018-08-24 张海英 含三氮唑母核的二取代喹唑啉类药物化合物的制备方法
CN114437041A (zh) * 2022-02-25 2022-05-06 湖北科技学院 一类具有抗肿瘤活性的4-四唑基取代-3，4-二氢喹唑啉衍生物及其制备方法和应用

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101679318A (zh) * 2007-04-05 2010-03-24 美国西门子医疗解决公司 使用链接化学法的用于碳酸酐酶-ix的分子成象探针的发展
WO2014154762A1 (en) * 2013-03-27 2014-10-02 Boehringer Ingelheim International Gmbh Dihydroquinazolinone analogues as brd4 inhibitors

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101679318A (zh) * 2007-04-05 2010-03-24 美国西门子医疗解决公司 使用链接化学法的用于碳酸酐酶-ix的分子成象探针的发展
WO2014154762A1 (en) * 2013-03-27 2014-10-02 Boehringer Ingelheim International Gmbh Dihydroquinazolinone analogues as brd4 inhibitors

Cited By (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN106749513A (zh) * 2017-01-23 2017-05-31 中国药科大学 基于vhl配体诱导bet降解的双功能分子及其制备和应用
CN107056772A (zh) * 2017-01-23 2017-08-18 中国药科大学 基于cereblon配体诱导BET降解的双功能分子及其制备和应用
CN107056771A (zh) * 2017-01-23 2017-08-18 中国药科大学 Bromodomain蛋白二价抑制剂及其制备方法和应用
CN108440503A (zh) * 2018-04-10 2018-08-24 张海英 含三氮唑母核的二取代喹唑啉类药物化合物的制备方法
CN114437041A (zh) * 2022-02-25 2022-05-06 湖北科技学院 一类具有抗肿瘤活性的4-四唑基取代-3，4-二氢喹唑啉衍生物及其制备方法和应用
CN114437041B (zh) * 2022-02-25 2023-11-10 湖北科技学院 一类具有抗肿瘤活性的4-四唑基取代-3，4-二氢喹唑啉衍生物及其制备方法和应用

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN104011052B (zh) 化合物
Zhang et al. Discovery of a new class of PROTAC BRD4 degraders based on a dihydroquinazolinone derivative and lenalidomide/pomalidomide
CN109952295A (zh) 一种cdk4/6抑制剂及其制备方法和应用
CN105541825A (zh) 三氮唑衍生物制备方法及其作为药物的用途
IL235297A (en) Dna-pk inhibitors, compositions comprising same and uses thereof
CN101952286A (zh) 用于治疗和雄激素受体有关的病症的双环衍生物
HUP0203203A2 (hu) Heterociklusos szubsztituált pirazolonok és ilyen vegyületeket tartalmazó gyógyászati készítmények
WO2016169504A1 (zh) 稠环嘧啶氨基衍生物﹑其制备方法、中间体、药物组合物及应用
WO2020035020A1 (zh) 咪唑并吡啶类衍生物及其制备方法和其在医药上的用途
EP2838901B1 (en) 6-(4-(1-amino-3-hydroxycyclobutyl)phenyl)-5-phenyl(furo, thieno or pyrrolo)[2,3-d]pyrimidin-4-one derivatives for the treatment of cancer
Al-Muntaser et al. Novel 4-thiophenyl-pyrazole, pyridine, and pyrimidine derivatives as potential antitumor candidates targeting both EGFR and VEGFR-2; design, synthesis, biological evaluations, and in silico studies
CN104003988A (zh) 基于3-氨基-β-咔啉及其衍生物的CDK2激酶抑制剂及其制备方法和用途
CN105254635A (zh) 一类咪唑并吡嗪类化合物及其药物组合物和用途
JP6257787B2 (ja) Ｅｇｆｒ−ｔ７９０ｍキナーゼ阻害剤として置換されたピリミジニウム類化合物
CN106749513A (zh) 基于vhl配体诱导bet降解的双功能分子及其制备和应用
WO2020125759A1 (zh) 作为wnt信号通路抑制剂的化合物及其医学应用
JP6609308B2 (ja) キナーゼ阻害剤としての置換マクロサイクル
Boshta et al. Design, synthesis, molecular docking and biological evaluation of 1, 3, 5-trisubstituted-1H-pyrazole derivatives as anticancer agents with cell cycle arrest, ERK and RIPK3-kinase activities
CN104230954A (zh) 2,4-二氨基嘧啶类化合物及其医药用途
CN107652293A (zh) 咪唑并哒嗪类irak4抑制剂及其制备方法和应用
CN102153558B (zh) 多靶点抗肿瘤抑制剂2-氨吡咯-三嗪的衍生物及其合成方法
CN105198871A (zh) 一类喹喔啉酮类化合物及其制备方法和用途
El-Wakil et al. Identification of new 5-(2, 6-dichlorophenyl)-3-oxo-2, 3-dihydro-5H-thiazolo [3, 2-a] pyrimidine-7-carboxylic acids as p38α MAPK inhibitors: design, synthesis, antitumor evaluation, molecular docking and in silico studies
CN114656411A (zh) 一种用作egfr/her2双靶点抑制剂的多取代喹唑啉类化合物及其应用
Fang et al. Discovery of 3, 5-dimethylisoxazole derivatives as novel, potent inhibitors for bromodomain and extraterminal domain (BET) family

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
WD01 Invention patent application deemed withdrawn after publication
WD01 Invention patent application deemed withdrawn after publication

Application publication date: 20160504