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CN105229012A - 用于治疗细菌感染的化合物和方法 - Google Patents

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CN105229012A
CN105229012A CN201480017715.6A CN201480017715A CN105229012A CN 105229012 A CN105229012 A CN 105229012A CN 201480017715 A CN201480017715 A CN 201480017715A CN 105229012 A CN105229012 A CN 105229012A
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CN201480017715.6A
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G·S·巴萨拉布
M·R·高拉瓦拉姆
S·I·豪克
周非
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AstraZeneca AB
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Abstract

本文公开了式(I)的化合物、其药学上可接受的盐以及式(I)的化合物用于治疗细菌感染的用途。

Description

用于治疗细菌感染的化合物和方法
相关申请
根据美国法典第35篇第119条(e)款，本申请要求2013年7月30日提交的美国临时专利申请No.61/859,910和2013年1月23日提交的美国临时专利申请No.61/755,537的权益。前述申请各自的内容特此以引用的方式整体并入。
序列表
本申请含有已以ASCII格式电子版形式提交且特此以引用的方式整体并入的序列表。2014年1月6日创建的所述ASCII拷贝名为200070-WO-PCT_SL.txt且大小为772字节。
发明背景
抗生素耐受性和抗性已经成为对成功治疗许多常见细菌感染的严重威胁。事实上，根据美国感染疾病学会，耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)每年杀死的美国人比肺气肿、HIV/AIDS、帕金森氏病和凶杀的总和多。不仅常见感染性革兰氏阳性和阴性病原体如粪肠球菌(Enterococcusfaecium)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)、肺炎克雷伯氏菌(Klebsiellapneumoniae)、鲍氏不动杆菌(Acinetobacterbaumannii)、铜绿假单胞菌(Pseudomonasaeruginosa)、结核分支杆菌(Mycobacteriumtuberculosis)和肠杆菌属的多药抗性呈上升趋势，而且在沙门氏菌属(Salmonella)和艰难梭菌(Clostridiumdifficile)及越来越多地在淋病奈瑟菌(Neisseriagonorrheae)中观察到抗性的证据(GerardD.Wright,“Antibiotics:ANewHope,”19(2012)3-10)。由于抗性的这种增加，开发新型抗细菌药是重要的医学需要。
概述
对于用于治疗细菌感染的新型疗法仍然存在需求。本发明提供新型化合物和用于使用所述化合物治疗细菌感染的方法。
一方面，本发明提供式(I)的化合物或其药学上可接受的盐：
其中
X是氟或氯；
R1选自由以下组成的组：氢、苯基、-C≡N、四氢吡喃基、N-甲基-1,2,4-三唑基、嘧啶基、吡啶基、吡嗪基、环丙基、-C≡CH、-CH＝CH2以及C1-C3烷基，所述C1-C3烷基任选地被以下中的一个或多个取代：-OR10、卤素、-C≡N、-N3、-SO2CH3、-SCH3、-CH＝CH2、-CH＝NOR11以及苯基；
R2选自由氢、-C≡N、吡啶基、C1-C3烷基组成的组，所述C1-C3烷基任选地被以下中的一个或多个取代：卤素、-OR20和-CH＝NOR21；
R3是氢或C1-C3烷基；
R10在每次出现时独立地选自由氢、C1-C4烷基和-(CH2)2OCH3组成的组；以及
R11、R20和R21在每次出现时独立地是氢或C1-C4烷基。
一方面，本发明提供一种药物组合物，所述药物组合物包含式(I)的化合物或其药学上可接受的盐以及药学上可接受的赋形剂或稀释剂。
一方面，本发明提供一种用于治疗有需要的受试者中的细菌感染的方法，所述方法包括向所述受试者施用有效量的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。
一方面，本发明提供式(I)的化合物或其药学上可接受的盐用于治疗细菌感染的用途。
一方面，本发明提供式(I)的化合物或其药学上可接受的盐在制造用于治疗细菌感染的药剂中的用途。
一方面，本发明提供一种用于治疗细菌感染的药物组合物，所述药物组合物包含式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。
一方面，本发明提供一种用于抑制有需要的受试者中的细菌DNA旋转酶的方法，所述方法包括施用有效量的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。
一方面，本发明提供式(I)的化合物或其药学上可接受的盐用于抑制细菌DNA旋转酶的用途。
一方面，本发明提供式(I)的化合物或其药学上可接受的盐在制造用于抑制细菌DNA旋转酶的药剂中的用途。
一方面，本发明提供一种用于抑制细菌DNA旋转酶的药物组合物，所述药物组合物包含式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。
附图简述
图1是示出实施例5在中性粒细胞减少的CD1小鼠的由金黄色葡萄球菌USA100诱导的大腿损伤模型中的功效的图。
图2是示出实施例5在中性粒细胞减少的小鼠的由化脓链球菌ATCC12384诱导的大腿损伤模型中的功效的图。
发明详述
化合物
本发明至少部分地提供式(I)的化合物及其药学上可接受的盐：
其中
X是氟或氯；
R1选自由以下组成的组：氢、苯基、-C≡N、四氢吡喃基、N-甲基-1,2,4-三唑基、嘧啶基、吡啶基、吡嗪基、环丙基、-C≡CH、-CH＝CH2以及C1-C3烷基，所述C1-C3烷基任选地被以下中的一个或多个取代：-OR10、卤素、-C≡N、-N3、-SO2CH3、-SCH3、-CH＝CH2、-CH＝NOR11以及苯基；
R2选自由氢、-C≡N、吡啶基、C1-C3烷基组成的组，所述C1-C3烷基任选地被以下中的一个或多个取代：卤素、-OR20和-CH＝NOR21；
R3是氢或C1-C3烷基；
R10在每次出现时独立地选自由氢、C1-C4烷基和-(CH2)2OCH3组成的组；以及
R11、R20和R21在每次出现时独立地是氢或C1-C4烷基。
一方面，R1是氢、甲基、乙基、苯基、-CH2-苯基、-CH2F、-CH2OCH3、-CH2CH＝CH2、四氢吡喃基、-(CH2)3OH、-(CH2)3F、-(CH2)3OH、-(CH2)3F、-CH＝CH2、-C≡N、-CH＝NOCH3、-CH2SCH3、-CH2SO2CH3、-CH2N3、-CH2OCH2CH3、-CH2O(CH2)2OCH3、环丙基、吡啶基、-CH(CH3)OCH3、嘧啶基、吡嗪基、-C≡CH、N-甲基-1,2,4-三唑基、-CH(OH)CH3、-CH＝NOH或-CH2OH。
一方面，R2是氢、甲基、乙基、-CH2F、-CH2OCH3、-CH2OH、-CH＝NOH、-CH2N3、吡啶基、-C≡N或-CH＝NHOCH3。
一方面，R3是氢或甲基。
一方面，R10是氢、甲基、乙基或-(CH2)2OCH3。
一方面，R11是氢或甲基。
一方面，R20是氢、甲基或乙基。
一方面，R21是氢或甲基。
一方面，在式(I)的化合物中，X是氟并且R1、R2和R3各自是氢。
一方面，在式(I)的化合物中，X是氟，R1是甲基并且R2和R3各自是氢。
一方面，在式(I)的化合物中，X是氟，R1和R3各自是氢并且R2是甲基。
一方面，在式(I)的化合物中，X是氟，R1是乙基并且R2和R3各自是氢。
一方面，在式(I)的化合物中，X是氟，R1是苯基并且R2和R3各自是氢。
一方面，在式(I)的化合物中，X是氟，R1是-CH2-苯基并且R2和R3各自是氢。
一方面，在式(I)的化合物中，X是氟，R1是氢并且R2和R3各自是甲基。
一方面，在式(I)的化合物中，X是氟，R1和R3各自是氢并且R2是乙基。
一方面，在式(I)的化合物中，X是氟，R1是-CH2F并且R2和R3各自是氢。
一方面，在式(I)的化合物中，X是氟，R1是–CH2OCH3并且R2和R3各自是氢。
一方面，在式(I)的化合物中，X是氟，R1和R3各自是氢并且R2是-CH2F。
一方面，在式(I)的化合物中，X是氯，R1和R3各自是氢并且R2是-CH2OCH3。
一方面，在式(I)的化合物中，X是氯，R1和R3各自是氢并且R2是甲基。
一方面，在式(I)的化合物中，X是氟，R1和R2各自是甲基并且R3是氢。
一方面，在式(I)的化合物中，X是氟，R1是–CH2CH＝CH2并且R2和R3各自是氢。
一方面，在式(I)的化合物中，X是氟，R1和R3各自是氢并且R2是-CH2OH。
一方面，在式(I)的化合物中，X是氟，R1是四氢吡喃基并且R2和R3各自是氢。
一方面，在式(I)的化合物中，X是氟，R1是–(CH2)3OH并且R2和R3各自是氢。
一方面，在式(I)的化合物中，X是氟，R1是–(CH2)3F并且R2和R3各自是氢。
一方面，在式(I)的化合物中，X是氯，R1和R3各自是氢并且R2是-CH2F。
一方面，在式(I)的化合物中，X是氯，R1是–(CH2)3OH并且R2和R3各自是氢。
一方面，在式(I)的化合物中，X是氯，R1是–(CH2)3F并且R2和R3各自是氢。
一方面，在式(I)的化合物中，X是氟，R1和R3各自是氢并且R2是-CH2OCH3。
一方面，在式(I)的化合物中，X是氟，R1是–CH＝CH2并且R2和R3各自是氢。
一方面，在式(I)的化合物中，X是氟，R1和R3各自是氢并且R2是–CH＝NOH。
一方面，在式(I)的化合物中，X是氟，R1是–C≡N并且R2和R3各自是氢。
一方面，在式(I)的化合物中，X是氟，R1是–CH＝NOCH3并且R2和R3各自是氢。
一方面，在式(I)的化合物中，X是氟，R1和R3各自是氢并且R2是–CH＝NHOCH3。
一方面，在式(I)的化合物中，X是氟，R1和R3各自是氢并且R2是-CH2N3。
一方面，在式(I)的化合物中，X是氟，R1是-CH2SCH3并且R2和R3各自是氢。
一方面，在式(I)的化合物中，X是氟，R1是-CH2SO2CH3并且R2和R3各自是氢。
一方面，在式(I)的化合物中，X是氟，R1是-CH2N3并且R2和R3各自是氢。
一方面，在式(I)的化合物中，X是氟，R1是-CH2OCH2CH3并且R2和R3各自是氢。
一方面，在式(I)的化合物中，X是氟，R1是-CH2O(CH2)2OCH3并且R2和R3各自是氢。
一方面，在式(I)的化合物中，X是氟，R1是-CHF2并且R2和R3各自是氢。
一方面，在式(I)的化合物中，X是氟，R1是环丙基并且R2和R3各自是氢。
一方面，在式(I)的化合物中，X是氟，R1和R3各自是氢并且R2是吡啶基。
一方面，在式(I)的化合物中，X是氟，R1是吡啶基并且R2和R3各自是氢。
一方面，在式(I)的化合物中，X是氟，R1是-CH(CH3)OCH3并且R2和R3各自是氢。
一方面，在式(I)的化合物中，X是氟，R1是嘧啶基并且R2和R3各自是氢。
一方面，在式(I)的化合物中，X是氟，R1是吡嗪基并且R2和R3各自是氢。
一方面，在式(I)的化合物中，X是氟，R1是-C≡CH并且R2和R3各自是氢。
一方面，在式(I)的化合物中，X是氯，R1是甲基并且R2和R3各自是氢。
一方面，在式(I)的化合物中，X是氟，R1是N-甲基-1,2,4-三唑基并且R2和R3各自是氢。
一方面，在式(I)的化合物中，X是氟，R1是-CH(OH)CH3并且R2和R3各自是氢。
一方面，在式(I)的化合物中，X是氟，R1是-CH(OH)CH2OH并且R2和R3各自是氢。
一方面，在式(I)的化合物中，X是氟，R1是-CH＝NOH并且R2和R3各自是氢。
一方面，在式(I)的化合物中，X是氟，R1和R3各自是氢并且R2是-C≡N。
一方面，在式(I)的化合物中，X是氟，R1是-CH2OCH3，R2是甲基并且R3是氢。
一方面，在式(I)的化合物中，X是氟，R1是-CH2F，R2是甲基并且R3是氢。
一方面，在式(I)的化合物中，X是氟，R1是-CH2OH并且R2和R3各自是氢。
在一些实施方案中，式(I)的化合物具有式(Ia)或其药学上可接受的盐的结构：
其中
R1a是氢或C1-C3烷基，所述C1-C3烷基任选地被卤素或OR11a取代；
R2a是氢或C1-C3烷基，所述C1-C3烷基任选地被卤素或OR21a取代；以及
R11a和R21a在每次出现时独立地是氢或C1-C4烷基。
一方面，R1a是氢、-(CH2)3OH、-(CH2)3F或甲基。
一方面，R2a是-CH2OCH3、甲基、-CH2F或氢。
一方面，R11a是氢或甲基。
一方面，R21a是氢或甲基。
一方面，在式(Ia)的化合物中，R1a是氢并且R2a是-CH2OCH3。
一方面，在式(Ia)的化合物中，R1a是氢并且R2a是甲基。
一方面，在式(Ia)的化合物中，R1a是氢并且R2a是-CH2F。
一方面，在式(Ia)的化合物中，R1a是-(CH2)3OH并且R2a是氢。
一方面，在式(Ia)的化合物中，R1a是-(CH2)3F并且R2a是氢。
一方面，在式(Ia)的化合物中，R1a是甲基并且R2a是氢。
在一些实施方案中，式(I)的化合物具有式(Ib)的结构：
其中
R1b选自由以下组成的组：氢、苯基、-C≡N、四氢吡喃基、1,2,4-三唑基、嘧啶基、吡啶基、吡嗪基、环丙基、-C≡CH、-CH＝CH2以及C1-C3烷基，所述C1-C3烷基任选地被以下中的一个或多个取代：OR10b、卤素、-C≡N、-N3、-SO2CH3、-SCH3、-CH＝CH2、-CH＝NOR11b以及苯基；
R2b选自由氢、-C≡N、C1-C3烷基组成的组，所述C1-C3烷基任选地被以下中的一个或多个取代：卤素、OR20b和CH＝NOR21b；
R3b是氢或C1-C4烷基；
R10b在每次出现时独立地选自由氢、C1-C4烷基和-(CH2)2OCH3组成的组；以及
R11b、R20b和R21b在每次出现时独立地是氢或C1-C4烷基。
一方面，R1b是氢、甲基、乙基、苯基、-CH2-苯基、-CH2F、-CH2OCH3、-CH2CH＝CH2、四氢吡喃基、-(CH2)3OH、-(CH2)3F、-(CH2)3OH、-(CH2)3F、-CH＝CH2、-C≡N、-CH＝NOCH3、-CH2SCH3、-CH2SO2CH3、-CH2N3、-CH2OCH2CH3、-CH2O(CH2)2OCH3、环丙基、吡啶基、-CH(CH3)OCH3、嘧啶基、吡嗪基、-C≡CH、N-甲基-1,2,4-三唑基、-CH(OH)CH3、-CH＝NOH或-CH2OH。
一方面，R2b是氢、甲基、乙基、-CH2F、-CH2OH、-CH＝NOH、-CH2N3、吡啶基、-C≡N或-CH＝NHOCH3。
一方面，R3b是氢或甲基。
一方面，R10b是氢、甲基、乙基或-(CH2)2OCH3。
一方面，R11b是氢或甲基。
一方面，R20b是氢、甲基或乙基。
一方面，R21b是氢或甲基。
一方面，在式(Ib)的化合物中，R1b是甲基并且R2b和R3b各自是氢。
一方面，在式(Ib)的化合物中，R1b和R3b各自是氢并且R2b是甲基。
一方面，在式(Ib)的化合物中，R1b是乙基并且R2b和R3b各自是氢。
一方面，在式(Ib)的化合物中，R1b是苯基并且R2b和R3b各自是氢。
一方面，在式(Ib)的化合物中，R1b是-CH2-苯基并且R2b和R3b各自是氢。
一方面，在式(Ib)的化合物中，R1b是氢并且R2b和R3b各自是甲基。
一方面，在式(Ib)的化合物中，R1b和R3b各自是氢并且R2b是乙基。
一方面，在式(Ib)的化合物中，R1b是-CH2F并且R2b和R3b各自是氢。
一方面，在式(Ib)的化合物中，R1b是-CH2OCH3并且R2b和R3b各自是氢。
一方面，在式(Ib)的化合物中，R1b和R3b各自是氢并且R2b是-CH2F。
一方面，在式(Ib)的化合物中，R1b和R2b各自是甲基并且R3b各自是氢。
一方面，在式(Ib)的化合物中，R1b是-CH2CH＝CH2并且R2b和R3b各自是氢。
一方面，在式(Ib)的化合物中，R1b和R3b各自是氢并且R2b是-CH2OH。
一方面，在式(Ib)的化合物中，R1b是四氢吡喃基并且R2b和R3b各自是氢。
一方面，在式(Ib)的化合物中，R1b是-(CH2)3OH并且R2b和R3b各自是氢。
一方面，在式(Ib)的化合物中，R1b是-(CH2)3F并且R2b和R3b各自是氢。
一方面，在式(Ib)的化合物中，R1b和R3b各自是氢并且R2b是-CH2OCH3。
一方面，在式(Ib)的化合物中，R1b是-CH＝CH2并且R2b和R3b各自是氢。
一方面，在式(Ib)的化合物中，R1b和R3b各自是氢并且R2b是-CH＝NOH。
一方面，在式(Ib)的化合物中，R1b是-C≡N并且R2b和R3b各自是氢。
一方面，在式(Ib)的化合物中，R1b是-CH＝NOCH3并且R2b和R3b各自是氢。
一方面，在式(Ib)的化合物中，R1b和R3b各自是氢并且R2b是-CH＝NHOCH3。
一方面，在式(Ib)的化合物中，R1b和R3b各自是氢并且R2b是–CH2N3。
一方面，在式(Ib)的化合物中，R1b是-CH2SCH3并且R2b和R3b各自是氢。
一方面，在式(Ib)的化合物中，R1b是-CH2SO2CH3并且R2b和R3b各自是氢。
一方面，在式(Ib)的化合物中，R1b是-CH2N3并且R2b和R3b各自是氢。
一方面，在式(Ib)的化合物中，R1b是-CH2OCH2CH3并且R2b和R3b各自是氢。
一方面，在式(Ib)的化合物中，R1b是-CH2O(CH2)2OCH3并且R2b和R3b各自是氢。
一方面，在式(Ib)的化合物中，R1b是-CHF2并且R2b和R3b各自是氢。
一方面，在式(Ib)的化合物中，R1b是环丙基并且R2b和R3b各自是氢。
一方面，在式(I)的化合物中，R1b和R3b各自是氢并且R2b是吡啶基。
一方面，在式(I)的化合物中，R1b是吡啶基并且R2b和R3b各自是氢。
一方面，在式(Ib)的化合物中，R1b是-CH(CH3)OCH3并且R2b和R3b各自是氢。
一方面，在式(Ib)的化合物中，R1b是嘧啶基并且R2b和R3b各自是氢。
一方面，在式(Ib)的化合物中，R1b是吡嗪基并且R2b和R3b各自是氢。
一方面，在式(Ib)的化合物中，R1b是-C≡CH并且R2b和R3b各自是氢。
一方面，在式(Ib)的化合物中，R1b是N-甲基-1,2,4-三唑基并且R2b和R3b各自是氢。
一方面，在式(Ib)的化合物中，R1b是-CH(OH)CH3并且R2b和R3b各自是氢。
一方面，在式(Ib)的化合物中，R1b是-CH(OH)CH2OH并且R2b和R3b各自是氢。
一方面，在式(Ib)的化合物中，R1b是-CH＝NOH并且R2b和R3b各自是氢。
一方面，在式(Ib)的化合物中，R1b和R3b各自是氢并且R3b是-C≡N。
一方面，在式(Ib)的化合物中，R1b是-CH2OCH3，R2b是甲基并且R3b是氢。
一方面，在式(Ib)的化合物中，R1b是-CH2F，R2b是甲基并且R3b是氢。
一方面，在式(Ib)的化合物中，R1b是-CH2OH并且R2b和R3b各自是氢。
在一些实施方案中，式(I)的化合物具有式(Ic)或其药学上可接受的盐的结构：
其中
R1c是苯基、N-甲基-1,2,4-三唑基、四氢吡喃基、嘧啶基、吡啶基、吡嗪基或C1-C3烷基，所述C1-C3烷基任选地被以下中的一个或多个取代：苯基、卤素、-N3或OR10c；以及
R10c在每次出现时是氢或C1-C4烷基。
一方面，R1c是甲基、乙基、苯基、-CH2-苯基、-CH2F、-CH2OCH3、四氢吡喃基、-CH2N3、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、-CH(CH3)OCH3、N-甲基-1,2,4-三唑基或-CH2OH。
一方面，R10c是氢或甲基。
一方面，在式(Ic)的化合物中，R1c是甲基。
一方面，在式(Ic)的化合物中，R1c是乙基。
一方面，在式(Ic)的化合物中，R1c是苯基。
一方面，在式(Ic)的化合物中，R1c是-CH2-苯基。
一方面，在式(Ic)的化合物中，R1c是-CH2F。
一方面，在式(Ic)的化合物中，R1c是-CH2OCH3。
一方面，在式(Ic)的化合物中，R1c是四氢吡喃基。
一方面，在式(Ic)的化合物中，R1c是-CH2N3。
一方面，在式(Ic)的化合物中，R1c是吡啶基。
一方面，在式(Ic)的化合物中，R1c是嘧啶基。
一方面，在式(Ic)的化合物中，R1c是吡嗪基。
一方面，在式(Ic)的化合物中，R1c是-CH(CH3)OCH3。
一方面，在式(Ic)的化合物中，R1c是N-甲基-1,2,4-三唑基。
一方面，在式(Ic)的化合物中，R1c是-CH2OH。
在一些实施方案中，式(I)的化合物具有式(Id)或其药学上可接受的盐的结构：
其中
X是氯或氟；
R1d选自由以下组成的组：氢、苯基、-C≡N、四氢吡喃基、N-甲基-1,2,4-三唑基、嘧啶基、吡啶基、吡嗪基、环丙基、-C≡CH、-CH＝CH2以及C1-C3烷基，所述C1-C3烷基任选地被以下中的一个或多个取代：-OR10d、卤素、-C≡N、-N3、-SO2CH3、-SCH3、-CH＝CH2、-CH＝NOR11d以及苯基；
R10d在每次出现时独立地选自由氢、C1-C4烷基和-(CH2)2OCH3组成的组；以及
R11d在每次出现时独立地是氢或C1-C4烷基。
一方面，R1d是甲基、乙基、苯基、-CH2-苯基、-CH2F、-CH2OCH3、-CH2CH＝CH2、四氢吡喃基、-(CH2)3OH、-(CH2)3F、-CH＝CH2、-C≡N、-CH＝NOCH3、-CH2SCH3、-CH2SO2CH3、-CH2N3、-CH2OCH2CH3、-CH2O(CH2)2OCH3、吡啶基、-CH(CH3)OCH3、嘧啶基、吡嗪基、-C≡CH、N-甲基-1,2,4-三唑基、-CH(OH)CH3、-CH(OH)CH2OH或-CH＝NOH。
一方面，R10d是氢、甲基或乙基。
一方面，R10d是氢或甲基。
一方面，在式(Id)的化合物中，X是氟并且R1d是甲基。
一方面，在式(Id)的化合物中，X是氟并且R1d是乙基。
一方面，在式(Id)的化合物中，X是氟并且R1d是苯基。
一方面，在式(Id)的化合物中，X是氟并且R1d是-CH2-苯基。
一方面，在式(Id)的化合物中，X是氟并且R1d是-CH2F。
一方面，在式(Id)的化合物中，X是氟并且R1d是-CH2OCH3。
一方面，在式(Id)的化合物中，X是氟并且R1d是-CH2CH＝CH2。
一方面，在式(Id)的化合物中，X是氟并且R1d是四氢吡喃基。
一方面，在式(Id)的化合物中，X是氟并且R1d是-(CH2)2OH。
一方面，在式(Id)的化合物中，X是氟并且R1d是-(CH2)2F。
一方面，在式(Id)的化合物中，X是氯并且R1d是-(CH2)3OH。
一方面，在式(Id)的化合物中，X是氯并且R1d是-(CH2)3F。
一方面，在式(Id)的化合物中，X是氟并且R1d是-(CH2)3OH。
一方面，在式(Id)的化合物中，X是氟并且R1d是-CH＝CH2。
一方面，在式(Id)的化合物中，X是氟并且R1d是-(CH2)3OH。
一方面，在式(Id)的化合物中，X是氟并且R1d是-C≡N。
一方面，在式(Id)的化合物中，X是氟并且R1d是-CH＝NOCH3。
一方面，在式(Id)的化合物中，X是氟并且R1d是-CH2SCH3。
一方面，在式(Id)的化合物中，X是氟并且R1d是-CH2SO2CH3。
一方面，在式(Id)的化合物中，X是氟并且R1d是-CH2N3。
一方面，在式(Id)的化合物中，X是氟并且R1d是-CH2OCH2CH3。
一方面，在式(Id)的化合物中，X是氟并且R1d是-CH2O(CH2)2OCH3。
一方面，在式(Id)的化合物中，X是氟并且R1d是-CHF2。
一方面，在式(Id)的化合物中，X是氟并且R1d是吡啶基。
一方面，在式(Id)的化合物中，X是氟并且R1d是-CH(CH3)OCH3。
一方面，在式(Id)的化合物中，X是氟并且R1d是嘧啶基。
一方面，在式(Id)的化合物中，X是氟并且R1d是吡嗪基。
一方面，在式(Id)的化合物中，X是氟并且R1d是-C≡CH。
一方面，在式(Id)的化合物中，X是氯并且R1d是甲基。
一方面，在式(Id)的化合物中，X是氟并且R1d是N-甲基-1,2,4-三唑基。
一方面，在式(Id)的化合物中，X是氟并且R1d是-CH(OH)CH3。
一方面，在式(Id)的化合物中，X是氟并且R1d是-CH(OH)CH2OH。
一方面，在式(Id)的化合物中，X是氟并且R1d是-CH＝NOH。
在一些实施方案中，式(I)的化合物具有式(Ie)或其药学上可接受的盐的结构：
其中
X是氯或氟；
R2e选自由吡啶基、-C≡N或C1-C3烷基组成的组，所述C1-C3烷基任选地被以下中的一个或多个取代：OR20e、卤素、叠氮和CH＝NOR21e；以及
R20e和R21e在每次出现时独立地是氢或C1-C4烷基。
一方面，R2e是甲基、乙基、-CH2OCH3、-CH2OH、-CH2F、-CH2N3、吡啶基、-CH＝NOH或-CH＝NOCH3。
一方面，R20e是氢或甲基。
一方面，R21e是氢或甲基。
一方面，在式(Ie)的化合物中，X是氟并且R2e是甲基。
一方面，在式(Ie)的化合物中，X是氟并且R2e是乙基。
一方面，在式(Ie)的化合物中，X是氯并且R2e是-CH2OCH3。
一方面，在式(Ie)的化合物中，X是氯并且R2e是甲基。
一方面，在式(Ie)的化合物中，X是氟并且R2e是-CH2OCH3。
一方面，在式(Ie)的化合物中，X是氟并且R2e是-CH2OH。
一方面，在式(Ie)的化合物中，X是氟并且R2e是-CH2F。
一方面，在式(Ie)的化合物中，X是氟并且R2e是-CH2N3。
一方面，在式(Ie)的化合物中，X是氟并且R2e是吡啶基。
一方面，在式(Ie)的化合物中，X是氟并且R2e是-CH＝NOH。
一方面，在式(Ie)的化合物中，X是氟并且R2e是-CH＝NOCH3。
在一些实施方案中，式(I)的化合物具有式(If)或其药学上可接受的盐的结构：
其中
X是氯或氟；
R2f是吡啶基或C1-C3烷基，所述C1-C3烷基任选地被一个或多个卤素或-OR20f取代；以及
R20f在每次出现时独立地是氢或C1-C4烷基。
一方面，R2f是甲基、乙基、-CH2F、-CH2OCH3或-CH2OH。
一方面，R20f是氢或甲基。
一方面，在式(If)的化合物中，X是氟并且R2f是甲基。
一方面，在式(If)的化合物中，X是氟并且R2f是乙基。
一方面，在式(If)的化合物中，X是氟并且R2f是-CH2F。
一方面，在式(If)的化合物中，X是氯并且R2f是-CH2OCH3。
一方面，在式(If)的化合物中，X是氯并且R2f是甲基。
一方面，在式(If)的化合物中，X是氟并且R2f是-CH2OH。
一方面，在式(If)的化合物中，X是氯并且R2f是-CH2F。
一方面，在式(If)的化合物中，X是氟并且R2f是-CH2OCH3。
在一些实施方案中，式(I)的化合物具有式(Ig)或其药学上可接受的盐的结构：
其中
R1g是任选地被卤素和OR10g中的一个或多个取代的C1-C3烷基；
R2g是C1-C3烷基；以及
R10g在每次出现时独立地是氢或C1-C4烷基。
一方面，R1g是甲基、-CH2OCH3或-CH2F。
一方面，R2g是甲基。
一方面，R10g是氢或甲基。
一方面，在式(Ig)的化合物中，X是氟，R1g和R2d各自是甲基。
一方面，在式(Ig)的化合物中，X是氟，R1g是-CH2OCH3并且R2d是甲基。
一方面，在式(Ig)的化合物中，X是氟，R1g是-CH2F并且R2d是甲基。
一方面，本发明至少部分地提供以下化合物或其药学上可接受的盐：
一方面，本发明涉及一种可通过本发明的例证说明中描述的任何方法获得的产物。
术语“烷基”包括具有指定数目的碳原子的直链和支链饱和烃基。例如，“C1-C3烷基”包括具有1-3个碳原子的烷基，例如甲基、乙基、正丙基和异丙基。同样，措辞“C1-C4烷基”包括具有1-4个碳原子的烷基，例如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基和叔丁基。
术语“卤素”包括氯、氟、溴和碘。
术语“四氢吡喃基”包括
术语“N-甲基-1,2,4-三唑基”包括
术语“吡啶基”包括
术语“嘧啶基”包括
术语“吡嗪基”包括
措辞“药学上可接受的盐”包括保留本发明化合物的生物有效性和特性并且通常不是生物学或其它方面不合需要的酸加成盐或碱加成盐。在许多情况下，由于存在氨基和/或羧基或与其类似的基团，本发明的化合物能够形成酸式盐和/或碱式盐。
药学上可接受的酸加成盐可用无机酸和有机酸形成，例如，乙酸盐、天冬氨酸盐、苯甲酸盐、苯磺酸盐、溴化物/氢溴酸盐、碳酸氢盐/碳酸盐、硫酸氢盐/硫酸盐、樟脑磺酸盐、氯化物/盐酸盐、氯茶碱盐(chlortheophyllonate)、柠檬酸盐、乙二磺酸盐(ethandisulfonate)、富马酸盐、葡庚糖酸盐、葡糖酸盐、葡糖醛酸盐、马尿酸盐、氢碘酸盐/碘化物、羟乙基磺酸盐、乳酸盐、乳糖酸盐、月桂基硫酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、丙二酸盐、扁桃酸盐、甲磺酸盐、甲基硫酸盐、萘甲酸盐、萘磺酸盐、烟酸盐、硝酸盐、十八烷酸盐、油酸盐、草酸盐、棕榈酸盐、双羟萘酸盐(palmoate)、磷酸盐/磷酸氢盐/磷酸二氢盐、聚半乳糖醛酸盐、丙酸盐、硬脂酸盐、琥珀酸盐、碱式水杨酸盐、酒石酸盐、甲苯磺酸盐以及三氟乙酸盐。可衍生出盐的无机酸包括例如盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等。可衍生出盐的有机酸包括例如乙酸、丙酸、乙醇酸、草酸、马来酸、丙二酸、琥珀酸、富马酸、酒石酸、柠檬酸、苯甲酸、扁桃酸、甲磺酸、乙磺酸、甲苯磺酸、三氟乙酸、磺基水杨酸等。药学上可接受的碱加成盐可用无机碱和有机碱形成。
可衍生出盐的无机碱包括例如铵盐和周期表的I列至XII列金属。在某些实施方案中，所述盐衍生自钠、钾、铵、钙、镁、铁、银、锌和铜；特别适合的盐包括铵盐、钾盐、钠盐、钙盐和镁盐。可衍生出盐的有机碱包括例如伯胺、仲胺和叔胺、取代的胺(包括天然存在的取代的胺)、环胺、碱性离子交换树脂等。某些有机胺包括异丙胺、二苄基乙二胺(benzathine)、胆茶碱(cholinate)、二乙醇胺、二乙胺、赖氨酸、葡甲胺、哌嗪以及氨丁三醇。
可通过常规化学方法从碱性或酸性部分合成本发明的药学上可接受的盐。一般来说，可通过使游离酸形式的这些化合物与化学计量量的适当碱(如Na+、Ca2+、Mg2+或K+氢氧化物、碳酸盐、碳酸氢盐等)反应或通过使游离碱形式的这些化合物与化学计量量的适当酸反应来制备这类盐。这类反应通常在水中或在有机溶剂中或在水与有机溶剂的混合物中进行。一般来说，在可行的情况下，使用像乙醚、乙酸乙酯、乙醇、异丙醇或乙腈的非水性介质是合乎需要的。另外适合的盐的列表可例如在“Remington'sPharmaceuticalSciences,”第20版,MackPublishingCompany,Easton,Pa.,(1985)以及在Stahl和Wermuth的“HandbookofPharmaceuticalSalts:Properties,Selection,andUse”(Wiley-VCH,Weinheim,Germany,2002)中找到。
对于式(I)的化合物，本文给出的任何化学式还意图表示未标记的形式以及同位素标记的形式。同位素标记的化合物具有由本文给出的化学式描绘的结构，除了一个或多个原子被具有选定原子质量或质量数的原子置换。可并入式(I)的化合物中的同位素的实例包括氢、碳、氮、氧、磷、氟和氯的同位素，如2H、3H、11C、13C、14C、15N、16F、31P、32P、35S、36CI以及125I。本发明包括各种同位素标记的式(I)化合物，放射性同位素如2H、3H、13C和14C存在于所述化合物中。同位素标记的式(I)化合物通常可通过本领域技术人员已知的常规技术或者通过与所附实施例中所述的那些方法类似的使用适当同位素标记试剂代替先前使用的未标记试剂的方法来制备。
式(I)的化合物可具有不同异构形式。措辞“光学异构体”或“立体异构体”是指对于本发明的给定化合物可存在的各种立体异构构型中的任何一种。应理解取代基可在碳原子的手性中心处连接并且因此本发明包括所述化合物的对映体、非对映体以及外消旋体。术语“对映体”包括彼此为不能重叠的镜像的成对立体异构体。一对对映体的1:1混合物是外消旋混合物。术语用于在适当的情况下表示外消旋混合物。术语“非对映体”或“非对映异构体”包括具有至少两个不对称原子的立体异构体，但其彼此不为镜像。绝对立体化学根据Cahn-Ingold-PrelogR-S体系规定。当化合物是纯的对映体时，每个手性中心处的立体化学可通过R或S表示。未知绝对构型的拆分化合物可取决于其使波长为钠D线的平面偏振光旋转的方向(右旋或左旋)来指定(+)或(-)。本文所述的某些化合物包含一个或多个不对称中心或不对称轴，并且因此可生成对映体、非对映体或其它立体异构形式，可以根据绝对立体化学将其定义为(R)-或(S)-。本发明意指包括所有这类可能的异构体，包括外消旋混合物、光学纯形式以及中间体混合物。光学活性(R)-和(S)-异构体可使用手性合成子或手性试剂来制备，或使用本领域中熟知的常规技术如手性HPLC来拆分。
药物组合物
在一些实施方案中，本发明提供一种药物组合物，所述药物组合物包含式(I)的化合物和药学上可接受的赋形剂或稀释剂。
措辞“药学上可接受的赋形剂或稀释剂”包括在合理医学判断范围内、适用于与人类和动物的组织相接触而没有过量毒性、刺激、过敏反应或其它问题或并发症、与合理的利益/风险比相称的化合物、材料、组合物和/或剂型。
本发明的组合物可呈适合用于以下的形式：口服使用(例如作为片剂、锭剂、硬胶囊或软胶囊、水性或油性悬浮剂、乳剂、可分散粉剂或颗粒剂、糖浆剂或酏剂)、局部使用(例如作为乳膏剂、软膏剂、凝胶剂或水性或油性溶液或悬浮剂)、通过吸入施用(例如作为细碎粉剂或液体气雾剂)、通过吹入施用(例如作为细碎粉剂)、胃肠外施用(例如作为无菌水性或油性溶液用于静脉内、皮下、肌内或肌内给药或者作为栓剂用于直肠给药)或眼内施用。本发明的组合物可通过常规工序使用本领域中熟知的常规药物赋形剂来获得。因此，意图用于口服使用的组合物可包含例如一种或多种着色剂、甜味剂、调味剂和/或防腐剂。
适用于片剂制剂的药学上可接受的赋形剂包括例如，惰性稀释剂如乳糖、碳酸钠、磷酸钙或碳酸钙；成粒剂和崩解剂如玉米淀粉或藻酸；粘合剂如淀粉；润滑剂如硬脂酸镁、硬脂酸或滑石；防腐剂如对羟基苯甲酸乙酯或丙酯；以及抗氧化剂，如抗坏血酸。片剂制剂可以是不包衣的，或者可以包衣以改变其崩解和随后活性成分在胃肠道内的吸收或者改进其稳定性和/或外观，在任一种情况下均使用常规包衣剂和本领域中熟知的工序。
用于口服使用的组合物可呈硬明胶胶囊的形式，其中活性成分与惰性固体稀释剂(例如碳酸钙、磷酸钙或高岭土)混合，或作为软明胶胶囊，其中活性成分与水或油如花生油、液体石蜡或橄榄油混合。
水性悬浮剂通常含有呈微粉形式或呈纳米颗粒或微粉化颗粒形式的活性成分连同一种或多种悬浮剂，如羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、藻酸钠、聚乙烯吡咯烷酮、黄蓍胶和阿拉伯胶；分散剂或润湿剂如卵磷脂或环氧烷烃与脂肪酸的缩合产物(例如聚氧乙烯硬脂酸酯)，或者环氧乙烷与长链脂肪醇的缩合产物(例如十七乙烯氧基十六醇)，或者环氧乙烷与衍生自脂肪酸和己糖醇的偏酯的缩合产物(如聚氧乙烯山梨糖醇单油酸酯)，或者环氧乙烷与长链脂肪醇的缩合产物(例如十七乙烯氧基十六醇)，或者环氧乙烷与衍生自脂肪酸和己糖醇的偏酯的缩合产物(如聚氧乙烯山梨糖醇单油酸酯)，或者环氧乙烷与衍生自脂肪酸和己糖醇酐的偏酯的缩合产物(例如聚乙烯脱水山梨糖醇单油酸酯)。水性混悬剂还可含有一种或多种防腐剂，如对羟基苯甲酸乙酯或丙酯；抗氧化剂，如抗坏血酸；着色剂；调味剂；和/或甜味剂，如蔗糖、糖精或阿斯巴甜。
可通过将活性成分悬浮在植物油(如花生油、橄榄油、芝麻油或椰子油)中或矿物油(如液体石蜡)中来配制油性混悬剂。油性混悬剂还可含有增稠剂如蜂蜡、硬石蜡或鲸蜡醇。可添加甜味剂(如上述的那些甜味剂)和调味剂以提供可口的口服制剂。这些组合物可通过添加如抗坏血酸的抗氧化剂来保存。
适合用于通过添加水来制备水性混悬剂的可分散粉末和颗粒通常含有活性成分连同分散剂或润湿剂、悬浮剂以及一种或多种防腐剂。适合的分散剂或润湿剂和悬浮剂通过已在以上提及的那些来例证。还可存在另外的赋形剂，如甜味剂、调味剂以及着色剂。
本发明的药物组合物也可为水包油型乳液形式。所述油相可以是植物油，如橄榄油或花生油；或矿物油，例如像液体石蜡或任何这些的混合物。适合的乳化剂可以是例如，天然存在的树胶，如阿拉伯树胶或黄蓍胶；天然存在的磷脂，如大豆、卵磷脂、衍生自脂肪酸和己糖醇酐的酯类或偏酯类(例如脱水山梨糖醇单油酸酯)；以及所述偏酯与环氧乙烷的缩合产物，如聚氧乙烯脱水山梨糖醇单油酸酯。所述乳液还可包含甜味剂、调味剂和防腐剂。
糖浆和酏剂可用甜味剂(如甘油、丙二醇、山梨糖醇、阿斯巴甜或蔗糖)配制，并且还可以含有缓和剂、防腐剂、调味剂和/或着色剂。
所述药物组合物还可呈无菌可注射水性或油性混悬剂的形式，其可根据已知工序使用一种或多种适当的分散剂或润湿剂和悬浮剂(它们已经在上面提及)来配制。无菌可注射制剂也可以是在胃肠外可接受的无毒稀释剂或溶剂中的无菌可注射溶液或混悬剂，例如，1,3-丁二醇中的溶液。
用于通过吸入施用的组合物可呈常规加压气溶胶的形式，所述气雾剂被设置成将活性成分分配为含有细碎固体的气溶胶或液滴。可使用常规气溶胶推进剂如挥发性氟化烃或烃并且气溶胶装置常规地设置成分配计量量的活性成分。关于制剂的进一步信息，读者可参考ComprehensiveMedicinalChemistry(CorwinHansch；ChairmanofEditorialBoard),PergamonPress1990的第5卷的第25.2章。
与一种或多种赋形剂组合以产生单一剂型的活性成分的量将必然取决于所治疗的宿主和具体的施用方式而变化。关于给药途径和剂量方案的进一步信息，读者可参考ComprehensiveMedicinalChemistry(CorwinHansch；ChairmanofEditorialBoard),PergamonPress1990的第5卷的第25.3章。
在一些实施方案中，施用至受试者的式(I)化合物的总量可以是400mg至10g之间、400mg-4g之间、400-4000mg之间、400-2000mg之间、500-1900mg之间、600-1800mg之间、700-1700mg之间、800-1600mg之间，例如，800mg、825mg、875mg、900mg、925mg、950mg、975mg、1000mg、1025mg、1050mg、1075mg、1100mg、1125mg、1150mg、1175mg、1200mg、1225mg、1250mg、1275mg、1300mg、1325mg、1350mg、1375mg、1400mg、1425mg、1450mg、1475mg、1500mg、1525mg、1550mg、1575mg或1600mg。在一些实施方案中，施用至受试者的式(I)化合物的总量可以是400-500mg之间、500-600mg之间、600-700mg之间、700-800mg之间、800-900mg之间、900-1000mg之间、1000-1100mg之间、1100-1200mg之间、1200-1300mg之间、1300-1400mg之间、1400-1500mg之间、1500-1600mg之间、1600-1700mg之间、1700-1800mg之间、1800-1900mg或1900-2000mg。
式(I)的化合物可一天一次、一天两次、一天三次或在24小时期间内如医学上必要地尽可能多次。本领域的技术人员将能够容易地基于受试者确定每个个体剂量的量。在一些实施方案中，以一种剂型施用式(I)的化合物。在一些实施方案中，以多种剂型施用式(I)的化合物。
使用方法
一方面，本发明提供一种用于治疗有需要的受试者中的细菌感染的方法，所述方法包括施用有效量的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。
一方面，本发明提供式(I)的化合物或其药学上可接受的盐用于治疗细菌感染的用途。
一方面，本发明提供式(I)的化合物或其药学上可接受的盐在制造用于治疗细菌感染的药剂中的用途。
一方面，本发明提供一种用于治疗细菌感染的药物组合物，所述药物组合物包含式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。
措辞“细菌感染”包括由一种或多种革兰氏阴性、革兰氏阳性或非典型细菌物种引起的感染。
在一些实施方案中，细菌感染由革兰氏阳性细菌引起，如金黄色葡萄球菌、酿脓链球菌、肺炎链球菌、无乳链球菌、炭疽杆菌、蜡样芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌。
在一些实施方案中，感染由革兰氏阴性细菌引起，如流感嗜血杆菌、鲍氏不动杆菌、弗氏柠檬酸杆菌、大肠杆菌、阴沟肠杆菌、铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯氏菌以及淋病奈瑟氏菌。
在一些实施方案中，感染由分枝杆菌科引起，如结核分枝杆菌、鸟-胞内分枝杆菌、海鱼分枝杆菌、溃疡分枝杆菌和堪萨斯分枝杆菌。
在一些实施方案中，感染由非典型细菌引起，如肺炎支原体、肺炎嗜衣原体和嗜肺军团菌。
在一些实施方案中，细菌对不同于本文所述的式(I)化合物的一种或多种抗细菌剂具有抗性。措辞“抗性”和“抗细菌抗性”是指能够在暴露于一种或多种抗细菌剂的情况下存活的细菌。在一些实施方案中，抗细菌抗性细菌包括酿脓链球菌、无乳链球菌、肺炎链球菌(包括耐青霉素肺炎链球菌)、金黄色葡萄球菌(包括耐万古霉素金黄色葡萄球菌(VRSA))、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)(包括医院获得性MRSA、社区获得性MRSA以及凝固酶阴性葡萄球菌)以及淋病奈瑟氏菌(包括耐青霉素淋病奈瑟氏菌，例如，染色体介导的耐青霉素淋病奈瑟氏菌(CMRNG)和青霉素酶介导的抗性淋病奈瑟氏菌(PPNG)，耐头孢菌素淋病奈瑟氏菌，例如耐头孢曲松淋病奈瑟氏菌和耐头孢克肟淋病奈瑟氏菌，耐喹诺酮淋病奈瑟氏菌(QRNG)，例如耐环丙沙星淋病奈瑟氏菌，耐四环素淋病奈瑟氏菌，例如染色体介导的耐四环素淋病奈瑟氏菌和质粒介导的耐青霉素淋病奈瑟氏菌，耐复方新诺明淋病奈瑟氏菌和耐氨基糖苷淋病奈瑟氏菌，例如耐卡那霉素淋病奈瑟氏菌和耐庆大霉淋病奈瑟氏菌，耐磺酰胺淋病奈瑟氏菌和耐大环内酯淋病奈瑟氏菌，例如耐阿奇霉素淋病奈瑟氏菌)。
在一些实施方案中，淋病奈瑟氏菌是耐多药淋病奈瑟氏菌(MDRNG)。措辞“耐多药淋病奈瑟氏菌”包括对通常用于治疗淋病奈瑟氏菌感染的抗生素中的两种或更多种具有抗性的淋病奈瑟氏菌，所述抗生素例如，四环素、青霉素、头孢菌素类(例如，头孢曲松或头孢克肟)、喹诺酮类(例如，诺氟沙星、环丙沙星或氧氟沙星)、复方新诺明、磺胺类、氨基糖苷类(例如，卡那霉素或庆大霉素)以及大环内酯(例如，阿奇霉素)。
一方面，本发明提供一种用于治疗有需要的受试者中的革兰氏阳性细菌感染的方法，所述方法包括施用有效量的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。
一方面，本发明提供式(I)的化合物或其药学上可接受的盐用于治疗革兰氏阳性细菌感染的用途。
一方面，本发明提供式(I)的化合物或其药学上可接受的盐在制造用于治疗革兰氏阳性细菌感染的药剂中的用途。
一方面，本发明提供一种用于治疗革兰氏阳性细菌感染的药物组合物，所述药物组合物包含式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。
一方面，本发明提供一种用于治疗有需要的受试者中的复杂皮肤和皮肤结构感染的方法，所述方法包括施用有效量的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。
一方面，本发明提供式(I)的化合物或其药学上可接受的盐用于治疗复杂皮肤和皮肤结构感染的用途。
一方面，本发明提供式(I)的化合物或其药学上可接受的盐在制造用于治疗复杂皮肤和皮肤结构感染的药剂中的用途。
一方面，本发明提供一种用于治疗复杂皮肤和皮肤结构感染的药物组合物，所述组合物包含式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。
措辞“复杂皮肤和皮肤结构感染”包括可能需要显著手术干预的皮肤和周围软组织的感染，包括例如，感染的溃疡、烧伤或主要脓肿。在一些实施方案中，复杂皮肤和皮肤结构感染由化脓链球菌、无乳链球菌或金黄色葡萄球菌引起，包括MRSA和/或VRSA。
一方面，本发明提供一种用于治疗有需要的受试者中的肺炎的方法，所述方法包括施用有效量的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。
一方面，本发明提供式(I)的化合物或其药学上可接受的盐用于治疗肺炎的用途。
一方面，本发明提供式(I)的化合物或其药学上可接受的盐在制造用于治疗肺炎的药剂中的用途。
一方面，本发明提供一种用于治疗肺炎的药物组合物，所述药物组合物包含式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。
术语“肺炎”是指由细菌感染引起的肺的炎性病状。在一些实施方案中，肺炎由肺炎链球菌或金黄色葡萄球菌感染引起。在一些实施方案中，肺炎是医源性肺炎(例如，医院获得性肺炎)或社区获得性肺炎。在一些实施方案中，肺炎由耐青霉素肺炎链球菌引起。
一方面，本发明提供一种用于治疗有需要的受试者中的革兰氏阴性细菌感染的方法，所述方法包括施用有效量的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。
一方面，本发明提供式(I)的化合物或其药学上可接受的盐用于治疗革兰氏阴性细菌感染的用途。
一方面，本发明提供式(I)的化合物或其药学上可接受的盐在制造用于治疗革兰氏阴性细菌感染的药剂中的用途。
一方面，本发明提供一种用于治疗革兰氏阴性细菌感染的药物组合物，所述药物组合物包含式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。
一方面，本发明提供一种用于治疗有需要的受试者中的非典型细菌感染的方法，所述方法包括施用有效量的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。
一方面，本发明提供式(I)的化合物或其药学上可接受的盐用于治疗非典型细菌感染的用途。
一方面，本发明提供式(I)的化合物或其药学上可接受的盐在制造用于治疗非典型细菌感染的药剂中的用途。
一方面，本发明提供一种用于治疗非典型细菌感染的药物组合物，所述药物组合物包含式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。
一方面，本发明提供一种用于抑制有需要的受试者中的细菌DNA旋转酶的方法，所述方法包括施用有效量的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。
一方面，本发明提供式(I)的化合物或其药学上可接受的盐用于抑制细菌DNA旋转酶的用途。
一方面，本发明提供式(I)的化合物或其药学上可接受的盐在制造用于抑制细菌DNA旋转酶的药剂中的用途。
一方面，本发明提供一种用于抑制细菌DNA旋转酶的药物组合物，所述药物组合物包含式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。
措辞“细菌DNA旋转酶”是指将负超螺旋引入DNA中的细菌II型拓扑异构酶。
措辞“有效量”包括将引发受试者的生物或医学反应的式(I)化合物的量，所述反应例如降低或抑制与细菌DNA旋转酶或细菌感染相关的酶或蛋白质活性、改善细菌感染的症状或减缓或延迟细菌感染的进展。在一些实施方案中，措辞“有效量”包括当施用至受试者时有效于至少部分地减轻、抑制和/或改善细菌感染或抑制细菌DNA旋转酶和/或降低或抑制受试者中的细菌的细菌生长、复制或细菌负荷的式(I)化合物的量。
一方面，本发明提供一种用于治疗有需要的受试者中的淋病奈瑟氏菌感染的方法，所述方法包括施用有效量的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。
一方面，本发明提供式(I)的化合物或其药学上可接受的盐用于治疗淋病奈瑟氏菌感染的用途。
一方面，本发明提供式(I)的化合物或其药学上可接受的盐在制造用于治疗淋病奈瑟氏菌感染的药剂中的用途。
一方面，本发明提供一种用于治疗淋病奈瑟氏菌感染的药物组合物，所述药物组合物包含式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。
术语“受试者”包括温血哺乳动物，例如灵长类动物、牛、猪、绵羊、狗、猫、兔、大鼠和小鼠。在一些实施方案中，受试者是灵长类动物，例如人。在一些实施方案中，受试者患有革兰氏阳性细菌感染。在一些实施方案中，受试者需要治疗(例如，受试者将从治疗在生物学上或医学上受益)。在一些实施方案中，受试者患有使响应于治疗细菌感染复杂的显著潜在疾病状态，例如糖尿病。
措辞“抑制(inhibit)”、“抑制(inhibition)”或“抑制(inhibiting)”包括生物活性或过程的基线活性的降低。
措辞“治疗(treat)”、“治疗(treating)”和“治疗(treatment)”包括减少或抑制与受试者中的细菌感染或细菌DNA旋转酶相关的酶或蛋白质活性、改善受试者中的细菌感染的一种或多种症状或减缓或延迟受试者中的细菌感染的进展。措辞“治疗(treat)”、“治疗(treating)”和“治疗(treatment)”还包括降低或抑制细菌生长、复制或降低或抑制受试者中的细菌的细菌负荷。
本发明的例证说明
本发明现在通过但不限于以下实施例进行说明。
合成方法
除非另外说明：
(i)蒸发通过在真空中旋转蒸发进行，并且后处理工序在除去残留固体后通过过滤进行；
(ii)温度被表示为℃；操作在室温下、即通常在18℃-26℃范围内并且在不排除空气的情况下进行，除非另外说明，或除非技术人员将以另外的方式在惰性气氛下工作；
(iii)柱色谱法(通过快速工序)用于纯化化合物并且在MerckKieselgel二氧化硅(Art.9385)上进行，除非另外说明；
(iv)一般来说，反应过程之后进行TLC、HPLC或LC/MS，并且给出反应时间仅用于说明；给出产率仅用于说明并且不一定是最大可达到的；
(v)本发明的最终产物的结构通常通过NMR和质谱技术证实。质子磁共振谱(1HNMR)通常使用分别在300MHz或400MHz的场强度下操作的BrukerDRX-300光谱仪或BrukerDRX-400光谱仪进行测定。在NMR光谱复杂的情况下，仅报道诊断信号。化学位移是以来自作为内部标准(δ级)的四甲基硅烷的ppm低磁场报道，并且因此峰多重性被示出为：s，单峰；d，双重峰；dd，双二重峰；dt，双三重峰；dm，双多重峰；t，三重峰；m，多重峰；br，宽峰。化学位移以±0.1ppm的误差报道。快原子轰击(FAB)质谱数据通常使用在电喷雾中运行的Platform光谱仪(由Micromass提供)获得，并且在适当的情况下，收集正离子数据或负离子数据或使用配备有Sedex75ELSD的Agilent1100系列LC/MS，并且在适当的情况下收集正离子数据或负离子数据。报道分子的最低质量主要离子，其中同位素分裂导致多个质谱峰(例如当存在氯时)。在Agilent仪器上使用YMCPackODS-AQ(100x20mmID，S-5μ粒度，12nm孔径)进行反相HPLC；以及
(vi)每种中间体被纯化至后续阶段所需的标准并且进行足够详细地表征以证实所分配的结构正确；通过HPLC(高压液相色谱)、TLC或NMR评定纯度并且在适当情况下通过红外光谱(IR)、质谱(MS)或NMR光谱测定身份。
(vii)使用ACD/Name(Release12.00，产品版本12.01)对化合物进行命名。
中间体1
3-氯-6-[(2R,6S)-2,6-二甲基吗啉-4-基]-7-氟-1,2-苯并噁唑-5-甲醛
向3-氯-6,7-二氟-1,2-苯并噁唑-5-甲醛(根据在国际申请公布No.WO2010/043893中描述的工序制备，5.0g，23.0mmol)于无水乙腈(50ml)中的冰冷却溶液中添加二异丙基乙胺(5.9g，45.9mmol)，接着添加顺式-2,6-二甲基吗啉(2.6g，23.0mmol)，并且将混合物在密封管中在85℃下加热12小时。将溶液冷却至室温并且在真空下除去挥发物。将残余物溶解于乙酸乙酯中，用水、接着用盐水洗涤，然后经无水Na2SO4干燥。在真空下除去溶剂得到粗产物，所述粗产物经硅胶柱使用乙酸乙酯于石油醚中的梯度纯化以得到呈固体的标题化合物。产率：6.0g(84％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:1.0(d,6H),2.9(t,2H),3.1(d,2H),3.8(m,2H),7.7(s,1H),10.2(s,1H)。C14H14ClFN2O3的MS(ES)MH+:313。
中间体2
3-氯-5-(二甲氧基甲基)-6-[(2R,6S)-2,6-二甲基吗啉-4-基]-7-氟 -1,2-苯并噁唑
将中间体1(3.0g，9.6mmol)和少许对甲苯磺酸于2,2’-二甲氧基丙烷(15mL)中的溶液在60℃下加热3小时。将水(10mL)在室温下添加至反应混合物。用乙酸乙酯(3x10mL)萃取，干燥(Na2SO4)合并的有机层并且在真空下除去溶剂，接着用冷二乙醚(15mL)研磨得到呈黄色固体的粗产物。产率：2.7g(80％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:1.1(d,6H),2.8(t,2H),3.0(d,2H),3.3(s,6H),3.8(m,2H),5.7(s,1H),7.6(s,1H)。
中间体3
3-{5-(二甲氧基甲基)-6-[(2R,6S)-2,6-二甲基吗啉-4-基]-7-氟-1,2- 苯并噁唑-3-基}-1,3-噁唑烷-2-酮
在0℃下将2-噁唑烷酮(0.18g，2.1mmol)于二甲基甲酰胺(1mL)中的溶液缓慢添加至NaH(0.06g，2.5mmol)于二甲基甲酰胺(1mL)中的搅拌悬浮液。将混合物在室温下搅拌30分钟，并且在相同温度下添加中间体2(0.25g，0.7mmol)在二甲基甲酰胺(3mL)中的溶液。将此混合物在60℃下加热16小时，倒入冰冷却的水中，并且用乙酸乙酯(2x20mL)萃取。将有机层经无水Na2SO4干燥并且在真空下除去溶剂。粗产物通过硅胶柱色谱法使用乙酸乙酯于石油醚中的梯度纯化以得到标题化合物。产率：37mg(13％)。C19H24FN3O6的MS(ES)MH+:410.4。
中间体4
3-氯-6-[(2R,6R)-2,6-二甲基吗啉-4-基]-7-氟-1,2-苯并噁唑-5-甲醛
向3-氯-6,7-二氟-1,2-苯并噁唑-5-甲醛(根据在国际申请公布No.WO2010/043893中描述的工序制备，10.0g，46.0mmol)于无水乙腈(50mL)中的冰冷却溶液中添加二异丙基乙胺(11.9g，91.9mmol)，接着添加(2R,6R)-2,6-二甲基吗啉(5.2g，46.0mmol)，并且将混合物在密封管中在85℃下加热12小时。在冷却至室温之后，在真空下除去挥发物。将残余物溶解于乙酸乙酯(50mL)中，用水(2x15mL)、接着用盐水洗涤，然后经无水Na2SO4干燥。在真空下除去溶剂得到粗产物，所述粗产物经硅胶柱使用乙酸乙酯于石油醚中的梯度纯化以得到呈固体的标题化合物。产率：11.0g(76％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:1.2(d,6H),3.0(m,2H),3.4(m,2H),4.1(m,2H),8.0(s,1H),10.3(s,1H)。C14H14ClFN2O3的ESMH+:313.3。
中间体5
3-氯-5-(二甲氧基甲基)-6-((2R,6R)-2,6-二甲基吗啉代)-7-氟苯并[d] 异噁唑
将中间体4(14.42g，46.10mmol)、2,2-二甲氧基丙烷(57.4ml，461.00mmol)以及对甲苯磺酸(0.088g，0.46mmol)的混合物在室温下搅拌16小时。用添加饱和NaHCO3水溶液猝灭反应物并且用乙酸乙酯萃取。将有机层用水、盐水洗涤，并且经Na2SO4干燥。将滤液在真空下浓缩以得到标题化合物(15.35g，90％)。C16H20ClFN2O4的MS(ES)MH+:359。
中间体6
3-(5-(二甲氧基甲基)-6-((2R,6R)-2,6-二甲基吗啉代)-7-氟苯并[d] 异噁唑-3-基)噁唑烷-2-酮
将于1二甲基甲酰胺(1mL)中的噁唑烷-2-酮(购自Sigma-Aldrich，728mg，8.36mmol)添加至NaH(290mg，7.25mmol，60％于矿物油中)于二甲基甲酰胺(1mL)中的悬浮液，并且将混合物在室温下搅拌10分钟。缓慢添加于二甲基甲酰胺(2mL)中的中间体5(2.0g，5.57mmol)。将所得混合物在80℃下加热5小时，之后冷却并且倒入冰冷NH4Cl水溶液中，并且用乙酸乙酯萃取。将有机层用水、盐水洗涤，并且干燥(Na2SO4)。在浓缩之后，将残余物在硅胶柱(用20％-50％于CHCl3中的乙酸乙酯洗脱)上纯化以得到标题化合物(800mg，35％)。1HNMR(300MHz,DMSO-D6)δ:1.2(brs,6H)2.7-2.9(m,2H)3.06-3.35(m,8H)3.9-4.25(m,4H)4.45-4.7(m,2H)5.7(s,1H)8.35(s,1H)。C19H24FN3O6的MS(ES)MH+:410。
中间体7
3-氯-6-[(2R,6S)-2,6-二甲基吗啉-4-基]-5-(1,3-二氧戊环-2-基)-7-氟 -1,2-苯并噁唑
将中间体1(16.3g，52.2mmol)、乙二醇(8.1g，130.6mmol)和对甲苯磺酸吡啶鎓(1.31g，5.2mmol)于甲苯(300mL)中的溶液在回流下在Dean-Stark设备中加热16小时。在真空下除去溶剂并且将残余物溶解于二乙醚(75mL)中，用水(3x25mL)和盐水溶液(25mL)洗涤。将有机层经无水Na2SO4干燥并过滤。在真空下除去溶剂得到标题化合物，将所述化合物通过用热己烷研磨进一步纯化。产率：18.0g(80％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:1.1(d,6H),2.8(t,2H),3.0(d,2H),3.3(m,4H),3.8(m,2H),5.7(s,1H),7.6(s,1H)。
中间体8
(4R)-3-{6-[(2R,6S)-2,6-二甲基吗啉-4-基]-5-(1,3-二氧戊环-2- 基)-7-氟-1,2-苯并噁唑-3-基}-4-甲基-1,3-噁唑烷-2-酮
在0℃下历经10分钟的时间段向NaH(0.24g，9.9mmol)于二甲基甲酰胺(10mL)中的搅拌溶液缓慢添加(4R)-4-甲基-1,3-噁唑烷-2-酮(根据Nishiyama,T.；Matsui,Shigeki；Yamada,F.J.Het.Chem.(1986),23(5),1427-9中描述的工序合成)(1.0g，9.9mmol)于二甲基甲酰胺(10mL)中的溶液。将混合物在室温下搅拌30分钟，并且在相同温度下添加中间体7(1.1g，3.1mmol)于二甲基甲酰胺(5mL)中的溶液。将此混合物在80℃下加热12小时，并且倒入冰冷却的水中，且用乙酸乙酯(2x20mL)萃取。将有机层经无水Na2SO4干燥并且在真空下除去溶剂。粗产物通过硅胶柱色谱法使用乙酸乙酯于石油醚中的梯度纯化。产率：0.15g(12％)。C20H24FN3O6的MS(ES)MH+:422.4。
使用与针对中间体8的合成所描述的方法类似的方法从中间体7和所指定的噁唑烷酮原料来制备中间体9和10。
中间体9
(5S)-3-{6-[(2R,6S)-2,6-二甲基吗啉-4-基]-5-(1,3-二氧戊环-2- 基)-7-氟-1,2-苯并噁唑-3-基}-5-甲基-1,3-噁唑烷-2-酮
原料：(5S)-5-甲基-1,3-噁唑烷-2-酮(根据Rein,K.；Goicoechea-Pappas,M.；Anklekar,T.V.；Hart,G.C.；Smith,G.A.；Gawley,R.E.JACS(1989),111(6),2211-17中所描述的工序来合成)。C20H24FN3O6的MS(ES)MH+:422.4。
中间体10
(5R)-3-{6-[(2R,6S)-2,6-二甲基吗啉-4-基]-5-(1,3-二氧戊环-2- 基)-7-氟-1,2-苯并噁唑-3-基}-5-甲基-1,3-噁唑烷-2-酮
原料：(5R)-5-甲基-1,3-噁唑烷-2-酮(根据Chouhan,G.；Alper,H.J.Org.Chem.(2009),74(16),6181-6189中所描述的工序来合成)。C20H24FN3O6的MS(ES)MH+:422.4。
中间体11
3-氯-6-[(2R,6R)-2,6-二甲基吗啉-4-基]-5-(1,3-二氧戊环-2-基)-7-氟 -1,2-苯并噁唑
将中间体4(11.0g，35.3mmol)、乙二醇(5.7g，91.9mmol)和对甲苯磺酸吡啶鎓(0.92g，3.7mmol)于甲苯中的溶液在回流下在Dean-Stark设备中加热16小时。在真空下除去溶剂并且将残余物溶解于二乙醚(75mL)中，用水(3x25mL)、接着用盐水溶液(25mL)洗涤。将有机层经无水Na2SO4干燥并且过滤。在真空下除去溶剂得到标题化合物，将所述化合物通过用热己烷研磨进一步纯化。产率：9.0g(72％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:1.2(d,6H),2.9(m,2H),3.2(d,2H),4.05(m,4H),4.15(m,2H),6.2(s,1H),7.7(s,1H)。C16H18ClFN2O4的MS(ES)MH+:357.3。
中间体12
(R)-3-(6-((2R,6R)-2,6-二甲基吗啉代)-5-(1,3-二氧戊环-2-基)-7-氟 苯并[d]异噁唑-3-基)-5-甲基噁唑烷-2-酮
将于二甲基甲酰胺(10mL)中的(R)-5-甲基噁唑烷-2-酮(1.134g，11.21mmol，根据Chouhan,G.；Alper,H.J.Org.Chem.(2009),74(16),6181-6189中描述的工序合成)添加至NaH(0.448g，11.21mmol，60％于矿物油中)于二甲基甲酰胺(10mL)中的悬浮液。将混合物在室温下搅拌30分钟。缓慢添加于二甲基甲酰胺(10mL)中的中间体11(4g，11.2mmol)，并且将所得混合物在80℃下加热2小时。将反应物冷却，倒入冰冷NH4Cl水溶液中并且用乙酸乙酯萃取。将有机层用水、盐水洗涤，并且干燥。在浓缩之后，将粗产物在硅胶柱(用40％-50％于己烷中的乙酸乙酯洗脱)上纯化以得到标题化合物。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ:1.2(d,6H),1.5(d,3H),2.8-3.3(m,4H),3.7-4.3(m,8H),4.9-5.1(m,1H),6.2(s,1H),8.4(s,1H)。C20H24FN3O6的MS(ES)MH+:422。
中间体13
2-(2,3,4-三氟苯基)-1,3-二氧戊环
在环境温度下将乙二醇(348.7g，5.62mol)一次性添加至2,3,4-三氟苯甲醛(300.0g，1.87mol)和对甲苯磺酸单水合物(35.6g，0.18mol)于甲苯(4.5L)中的搅拌混合物。将所得到的混合物在回流下加热，其中使用Dean-Stark设备共沸除去水。不时除去水(3小时间隔)。在24小时之后，除去甲苯并且将残余物用乙酸乙酯(1.5L)稀释且用饱和NaHCO3水溶液(2x750mL)、水(2x500mL)和盐水溶液(500mL)洗涤。将有机层经硫酸钠干燥并且在真空下除去溶剂。使粗产物经受在60℃-70℃下在高真空(0.1mm的Hg)中蒸馏以除去原料和杂质。在75℃-85℃(0.1mm的Hg)下获得的级分与标题化合物一致。产率：300.0g(78％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:3.9-4.1(m,4H),6.0(s,1H),7.3-7.4(m,2H)。
中间体14
5-(1,3-二氧戊环-2-基)-2,3,4-三氟苯甲醛
在-70℃下经45分钟将正丁基锂(2.5M溶液于己烷中，300mL，0.75mol)滴加至中间体13(118.0g，0.57mol)于四氢呋喃(2.3L)中的溶液，并且将混合物在该温度下搅拌一小时。在-70℃下经30分钟搅拌的时间段滴加二甲基甲酰胺(236mL，3.27mol)，并且继续在同一温度下搅拌1小时，之后在0℃下用饱和NH4Cl水溶液猝灭。将混合物用乙酸乙酯(2x500mL)萃取并且将有机层用水(2x500mL)、盐水(500mL)洗涤且经Na2SO4干燥。粗产物通过硅胶(60-120目)快速柱色谱法使用10％于石油醚中的乙酸乙酯的梯度纯化。产率：125.0g(93％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:4.0-4.1(m,4H),6.05(s,1H),7.8(m,1H),10.1(s,1H)。
中间体15
1-[5-(1,3-二氧戊环-2-基)-2,3,4-三氟苯基]-N-羟基甲亚胺
在0℃下将吡啶(95.3g，1.2mol)和盐酸羟胺(62.8g，0.90mol)依序添加至中间体14(140.0g，0.60mol)于乙醇(1500mL)中的搅拌溶液。将混合物在室温下搅拌18小时。在真空下除去挥发物并且将残余物用乙酸乙酯(2.0L)稀释且用水(2x500mL)、盐水(2x500mL)洗涤，并且经硫酸钠干燥。将溶剂除去以获得粗产物，将所述粗产物通过用二乙醚与庚烷(1:9)的混合物洗涤来进行纯化。产率：100.0g(第1批产物)。还通过使用乙酸乙酯于石油醚中的梯度硅胶柱纯化从第1批产物获得的母液来获得20g的产物。总产率：120.0g(80％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:3.95-4.1(m,4H),6.0(s,1H),7.6(m,1H),8.2(s,1H),11.8(s,1H)。
中间体16
5-(1,3-二氧戊环-2-基)-2,3,4-三氟-N-羟基亚氨苄基氯
在环境温度下在N2气氛下将N-氯代琥珀酰亚胺(49.0g，0.36mol)分批添加至中间体15(70.0g，0.28mol)于二甲基甲酰胺(360mL)中的搅拌溶液。在搅拌4小时之后，使N2通过反应混合物鼓泡30分钟，之后将混合物倒入冰水(2L)中。将所得混合物搅拌1小时，并且将固体过滤且用水(2x250mL)洗涤。将固体在甲苯(300mL)中搅拌30分钟，并且过滤以获得53.0g作为第1批产物。将甲苯滤液用庚烷(400ml)处理，从而沉淀另外固体，将所述固体过滤且用另外庚烷(50mL)洗涤，从而得到7g作为第2次收获。总产率：60.0g(76％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:3.95-4.1(m,4H),6.0(s,1H),7.6(m,1H),12.8(s,1H)。
中间体17
(2R)-1-[[5-(1,3-二氧戊环-2-基)-6,7-二氟-1,2-苯并噁唑-3-基]氨基] 丙烷-2-醇
在环境温度下将(R)-1-氨基丙烷-2-醇(1.3ml，16.6mmol)添加至中间体16(2.22g，7.88mmol)于二甲基甲酰胺(30mL)中的溶液。对于所述反应存在缓慢放热。在搅拌10分钟之后，LC-MS显示原料的消耗，产生新型中间体材料(MH+＝321)。在再搅拌30分钟之后，一次添加叔丁醇钾(1.77g，15.8mmol)。确保缓慢放热。在搅拌1小时之后，LC-MS显示转化成与标题化合物一致的材料(MH+＝301)，其中一些一致的中间体材料(MH+＝321)剩余。添加另外的叔丁醇钾(400mg，3.6mmol)，并且将混合物在室温下搅拌1小时。LC-MS显示完全转化成MH+＝321的材料。将混合物用NH4Cl水溶液猝灭，并且在真空中除去溶剂。将固体残余物溶解于水(50mL)中，同时破碎固体物质，并且将混合物在环境温度下搅拌过夜。将固体过滤并且用水冲洗，之后在真空中干燥以得到与标题化合物一致的材料。产率2.24g(95％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:1.1(d,3H)3.2(t,2H)3.8-4.0(m,1H)4.0-4.1(m,4H)4.8(d,1H)6.1(s,1H)7.3(t,1H)8.0(dd,1H)。C13H14F2N2O4的ESMH+:301。
中间体18
(R)-3-(5-(1,3-二氧戊环-2-基)-6,7-二氟苯并[d]异噁唑-3-基)-5-甲 基噁唑烷-2-酮
将中间体17(500mg，1.67mmol)、二(1H-咪唑-1-基)甲酮(405mg，2.50mmol)和二甲基氨基吡啶(102mg，0.83mmol)于四氢呋喃(10mL)中的混合物在回流下加热过夜(21小时)。将溶剂除去以得到油状残余物。将残余物溶解于1NHCl中，并且将混合物在环境温度下搅拌90分钟，从而得到固体。将固体过滤并且用水充分冲洗，从而用刮勺使所述固体破碎，之后在真空中干燥。所述材料与标题化合物一致，由于水解成对应醛而具有约5％杂质。产率407mg(75％)。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ:1.5(d,3H)3.8(dd,1H)4.0-4.1(m,4H)4.3(t,1H)5.0(m,1H)6.1(s,1H)8.45(d,1H)。C14H12F2N2O5的ESMH+:327；
中间体19
(R)-6,7-二氟-3-(5-甲基-2-氧代噁唑烷-3-基)苯并[d]异噁唑-5-甲醛
将中间体18(404mg，1.24mmol)于HCl(1.0M于水中)(10mL，10.00mmol)和四氢呋喃(10mL)中的溶液在室温下搅拌3天。将反应混合物用水稀释并且用乙酸乙酯萃取2次，并且将每一萃取物用盐水洗涤。将有机层合并并且经MgSO4干燥，过滤并且蒸发以得到与标题化合物一致的呈灰白色固体的材料。产率350mg(100％)。1HNMR(300MHz,CDCl3)δ:1.6(d,3H)3.8(dd,1H)4.3(dd,1H)4.9(m,1H)8.9(dd,1H)10.2(s,1H)。C12H8F2N2O4的ESMH+:283。
中间体20
6-((2R,6R)-2,6-二甲基吗啉代)-7-氟-3-((R)-5-甲基-2-氧代噁唑烷 -3-基)苯并[d]异噁唑-5-甲醛
将中间体19(92mg，0.33mmol)、(2R,6R)-2,6-二甲基吗啉(45.1mg，0.39mmol)和K2CO3于丁腈(3mL)和水(0.5mL)中的混合物在100℃下在微波反应器容器中加热。将溶剂除去并且将残余物用水稀释且用乙酸乙酯萃取2次，其中每一萃取物用盐水洗涤。将有机层合并且经MgSO4干燥、过滤并蒸发以得到材料，将所述材料在硅胶(50％于CH2CH2中的己烷，接着梯度洗脱至100％CH2CH2)上进行色谱以得到与标题化合物一致的黄色固体。产率100mg(81％)。1HNMR(300MHz,CDCl3)δ1.2(d,6H)1.5(d,3H)2.9-3.0(m,2H)3.4(dt,2H)3.7(dd,1H)4.1-4.3(m,3H)4.8-5.0(m,1H)8.7(d,1H)10.3(s,1H)。C18H20FN3O5的MS(ES)MH+:378。
中间体21
(4S)-3-{6-[(2R,6S)-2,6-二甲基吗啉-4-基]-5-(1,3-二氧戊环-2- 基)-7-氟-1,2-苯并噁唑-3-基}-4-甲基-1,3-噁唑烷-2-酮
以与针对中间体8的合成所描述的方法类似的方法使用(4S)-4-甲基-1,3-噁唑烷-2-酮(根据Nishiyama,T.；Matsui,Shigeki；Yamada,F.J.Het.Chem.(1986),23(5),1427-9中描述的工序合成)从中间体7制备中间体21。C20H24FN3O6的MS(ES)MH+:422.4。
中间体22
(S)-3-(6-((2R,6R)-2,6-二甲基吗啉代)-5-(1,3-二氧戊环-2-基)-7-氟 苯并[d]异噁唑-3-基)-4-甲基噁唑烷-2-酮
使用与针对中间体12的合成所描述的方法类似的方法从中间体11和(4S)-4-甲基-1,3-噁唑烷-2-酮(根据Nishiyama,T.；Matsui,Shigeki；Yamada,F.J.Het.Chem.(1986),23(5),1427-9中描述的工序合成)制备中间体22。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ:1.2(d,6H),1.35-1.5(m,3H),2.8-3.3(m,4H),3.9-4.3(m,7H),4.6-4.8(m,2H),6.0-6.3(m,1H),6.2(s,1H),8.2(s,1H)。C20H24FN3O6的MS(ES)MH+:422。
使用与针对中间体8的合成所描述的方法类似的方法从中间体7和所指定的噁唑烷酮原料来制备中间体23-29。
中间体23
(4S)-3-{6-[(2R,6S)-2,6-二甲基吗啉-4-基]-5-(1,3-二氧戊环-2- 基)-7-氟-1,2-苯并噁唑-3-基}-4-乙基-1,3-噁唑烷-2-酮
原料：(4S)-4-乙基-1,3-噁唑烷-2-酮(根据Begis,G.；Cladingboel,D.E.；Jerome,L.；Motherwell,W.B.；Sheppard,T.D.Eur.J.Org..Chem.(2009),(10),1532-1548中所描述的工序来合成)。C21H26FN3O6的MS(ES)MH+:436.4。
中间体24
(4R)-3-{6-[(2R,6S)-2, . 6-二甲基吗啉-4-基]-5-(1,3-二氧戊环-2- 基)-7-氟-1,2-苯并噁唑-3-基}-4-乙基-1,3-噁唑烷-2-酮
原料：(4R)-4-乙基-1,3-噁唑烷-2-酮-(5R)-5-甲基-1,3-噁唑烷-2-酮(根据Chouhan,G.；Alper,H.J.Org.Chem.(2009),74(16),6181-6189中描述的工序来合成)。C21H26FN3O6的MS(ES)MH+:436.4。
中间体25
(4R)-3-{6-[(2R,6S)-2,6-二甲基吗啉-4-基]-5-(1,3-二氧戊环-2- 基)-7-氟-1,2-苯并噁唑-3-基}-4-苯基-1,3-噁唑烷-2-酮
原料：(4R)-4-苯基-1,3-噁唑烷-2-酮(根据Begis,G.；Cladingboel,D.E.；Jerome,L.；Motherwell,W.B.；Sheppard,T.D.Eur.J.Org.Chem.(2009),(10),1532-1548中所描述的工序来合成)。C25H28FN3O6的MS(ES)MH+:484.5。
中间体26
(4S)-3-{6-[(2R,6S)-2,6-二甲基吗啉-4-基]-5-(1,3-二氧戊环-2- 基)-7-氟-1,2-苯并噁唑-3-基}4-苯基-1,3-噁唑烷-2-酮
原料：(4S)-4-苯基-1,3-噁唑烷-2-酮(根据MacNevin,C.J.；MooreR.L；Liotta,D.C.J.Org.Chem.(2008)，73(4),1264-1269中所描述的工序来合成)。C25H26FN3O6的MS(ES)MH+:484.5。
中间体27
(4R)-4-苄基-3-{6-[(2R,6S)-2,6-二甲基吗啉-4-基]-5-(1,3-二氧戊环 -2-基)-7-氟-1,2-苯并噁唑-3-基}-1,3-噁唑烷-2-酮
原料：(4R)-4-苄基-1,3-噁唑烷-2-酮(根据Paz,J.；Perez-Balado,C.；Iglesias,B.；Munoz,L.J.Org.Chem.(2010),75(9),3037-3046中所描述的工序来合成)。C26H28FN3O6的MS(ES)MH+:498.5。
中间体28
(4S)-4-苄基-3-{6-[(2R,6S)-2,6-二甲基吗啉-4-基]-5-(1,3-二氧戊环 -2-基)-7-氟-1,2-苯并噁唑-3-基}-1,3-噁唑烷-2-酮
原料：(4S)-4-苄基-1,3-噁唑烷-2-酮(根据Begis,G.；Cladingboel,D.E.；Jerome,L.；Motherwell,W.B.；Sheppard,T.D.Eur.J.Org.Chem.(2009),(10),1532-1548中所描述的工序来合成)。C26H28FN3O6的MS(ES)MH+:498.5。
中间体29
3-{6-[(2R,6S)-2,6-二甲基吗啉-4-基]-5-(1,3-二氧戊环-2-基)-7-氟 -1,2-苯并噁唑-3-基}-5,5-二甲基-1,3-噁唑烷-2-酮
原料：5,5-二甲基-1,3-噁唑烷-2-酮(根据Jones,S.；Smanmoo,C.Tet.Lett.(2004),45(8),1585-1588中所描述的工序来合成)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:1.1(d,6H),1.5(s,6H),2.8(t,2H),3.1(d,2H),3.8(m,2H),4.0(m,4H),4.1(m,2H),6.1(s,1H),8.4(s,1H)。C21H26FN3O6的MS(ES)MH+:436.4。
中间体30和31的混合物
(5R)-3-{6-[(2R,6S)-2,6-二甲基吗啉-4-基]-5-(1,3-二氧戊环-2- 基)-7-氟-1,2-苯并噁唑-3-基}-5-乙基-1,3-噁唑烷-2-酮和 (5S)-3-{6-[(2R,6S)-2,6-二甲基吗啉-4-基]-5-(1,3-二氧戊环-2-基)-7-氟 -1,2-苯并噁唑-3-基}-5-乙基-1,3-噁唑烷-2-酮
使用与针对中间体12的合成所描述的方法类似的方法从中间体11和5-乙基-1,3-噁唑烷-2-酮(根据欧洲专利申请公布No.EP244810中所描述的工序来合成)制备中间体30和31。使用ChiralpakIC(250x4.6)mm(己烷：乙醇，80:20，1.0ml/分钟)通过HPLC分离非对映体。
中间体30((5R)-3-{6-[(2R,6S)-2,6-二甲基吗啉-4-基]-5-(1,3-二氧戊环-2-基)-7-氟-1,2-苯并噁唑-3-基}-5-乙基-1,3-噁唑烷-2-酮)是第一洗脱非对映体。RT＝16.2分钟；1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:1.0(t,3H),0.95-1.0(m,6H),1.8(m,2H),2.9(m,2H),3.2(m,2H),3.8(dd,1H),4.0(m,2H),4.0-4.05(m,4H),4.2(t,1H),6.2(s,1H),8.4(s,1H)。C21H26FN3O6的MS(ES)MH+:436.4。
中间体31((5S)-3-{6-[(2R,6S)-2,6-二甲基吗啉-4-基]-5-(1,3-二氧戊环-2-基)-7-氟-1,2-苯并噁唑-3-基}-5-乙基-1,3-噁唑烷-2-酮)是第二洗脱非对映体。RT＝18.9分钟；1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:1.0(t,3H),0.95-1.0(m,6H),1.8(m,2H),2.9(m,2H),3.2(m,2H),3.8(dd,1H),4.0(m,2H),4.0-4.05(m,4H),4.2(t,1H),6.2(s,1H),8.4(s,1H)。C21H26FN3O6的MS(ES)MH+:436.4。
中间体32
(4R)-4-({[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}甲基)-3-(6-[(2R,6S)-2,6- 二甲基吗啉-4-基]-5-(1,3-二氧戊环-2-基)-7-氟-1,2-苯并噁唑-3- 基}-1,3-噁唑烷-2-酮
在0℃下历经10分钟的时间段向NaH(0.83g，34.6mmol)于二甲基甲酰胺(10mL)中的搅拌溶液添加(4R)-4-({[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧基}甲基)-1,3-噁唑烷-2-酮(根据Berkowitz,D.B.；Sloss,D.G.J.Org.Chem.(1995),60(21),7047-50中所描述的工序合成)于二甲基甲酰胺(15mL)中的溶液。将混合物在室温下搅拌30分钟，并且在相同温度下添加中间体7(6.17g，17.3mmol)于二甲基甲酰胺(25mL)中的溶液。将此混合物在60℃下加热2小时，并且倒入冰冷却的水中，用乙酸乙酯(2x20mL)萃取。将有机层经无水Na2SO4干燥并且在真空下除去溶剂。将粗产物使用乙酸乙酯于石油醚中的梯度通过硅胶柱色谱法纯化。产率：1.2g(13％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:-0.2(s,3H),-0.1(s,3H),0.75(s,9H),1.1(d,6H),2.8(t,2H),3.1(d,2H),3.7(m,3H),4.0(m,2H),4.0-4.1(m,2H),4.1(d,1H),4.4(d,1H),4.7(d,2H),6.1(s,1H),8.3(s,1H)。C26H38FN3O7Si的MS(ES)MH+:552.6。
中间体33和34的混合物
(4S)-3-{6-[(2R,6S)-2,6-二甲基吗啉-4-基]-5-(1,3-二氧戊环-2- 基)-7-氟-1,2-苯并噁唑-3-基}-4-(羟甲基)-1,3-噁唑烷-2-酮和 (4R)-3-{6-[(2R,6S)-2,6-二甲基吗啉-4-基]-5-(1,3-二氧戊环-2-基)-7-氟 -1,2-苯并噁唑-3-基}-4-(羟甲基)-1,3-噁唑烷-2-酮
在0℃下向中间体32(1.5g，2.7mmol)于四氢呋喃(50mL)中的搅拌溶液添加1M四丁基氟化铵于四氢呋喃中的溶液(1.4g，5.4mmol)，并且将混合物在室温下搅拌10分钟。将水(3mL)添加至反应混合物并且将有机层分离且经Na2SO4干燥。在真空下蒸发溶剂得到固体，其通过手性HPLC分析为对映体的68％+27％混合物。产率：1.1g(92％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:1.1(d,6H),2.8(t,2H),3.1(d,2H),3.5-3.6(m,1H),3.7-3.8(m,2H),3.9-4.0(m,3H),4.05-4.1(m,2H),4.5(dd,1H),4.6-4.65(m,2H),5.2(t,1H),6.1(s,1H),8.3(s,1H)。C20H24FN3O7的MS(ES)MH+:438.4。
中间体33和34的混合物的R和S对映体通过手性HPLC使用ChiralpakIC(250x4.6mm)柱(己烷：乙醇(80:20)；1.0mL/分钟)进行分离以得到2种组分，作为主要组分的中间体33和作为次要组分的中间体34。
中间体33((4S)-3-{6-[(2R,6S)-2,6-二甲基吗啉-4-基]-5-(1,3-二氧戊环-2-基)-7-氟-1,2-苯并噁唑-3-基}-4-(羟甲基)-1,3-噁唑烷-2-酮)是第一洗脱对映体。RT＝10.86分钟；产率：550mg。C20H24FN3O7的MS(ES)MH+:438.4。
中间体34((4R)-3-{6-[(2R,6S)-2,6-二甲基吗啉-4-基]-5-(1,3-二氧戊环-2-基)-7-氟-1,2-苯并噁唑-3-基}-4-(羟甲基)-1,3-噁唑烷-2-酮)是第二洗脱对映体。RT＝14.99分钟；产率：420mg。C20H24FN3O7的MS(ES)MH+:438.4。
中间体35
(4R)-3-{6-[(2R,6S)-2,6-二甲基吗啉-4-基]-5-(1,3-二氧戊环-2- 基)-7-氟-1,2-苯并噁唑-3-基]4-(氟甲基)-1,3-噁唑烷-2-酮
在-78℃下将二乙基氨基三氟化硫(1.0g，6.3mmol)添加至中间体33(0.55g，1.25mmol)于四氢呋喃(25mL)中的搅拌溶液，并且将混合物搅拌1小时，之后升温至室温持续1小时。添加甲醇(1mL)，并且在真空下除去挥发物。将残余物溶解于乙酸乙酯(15mL)中，并且用饱和NaHCO3(5mL)、水(10mL)和盐水洗涤。将有机层经Na2SO4干燥，并且在真空下除去溶剂以得到呈固体的标题化合物。产率：0.44g(80％)。C20H23F2N3O6的MS(ES)MH+:440.4。
中间体36
(4S)-3-{6-[(2R,6S)-2,6-二甲基吗啉-4-基]-5-(1,3-二氧戊环-2- 基)-7-氟-1,2-苯并噁唑-3-基}4-(氟甲基)-1,3-噁唑烷-2-酮
使用与针对中间体35的合成所描述的方法类似的方法从中间体34制备中间体36。C20H23F2N3O6的MS(ES)MH+:440.4。
中间体37和38的混合物
(4R)-3-{6-[(2R,6S)-2,6-二甲基吗啉-4-基]-5-(1,3-二氧戊环-2- 基)-7-氟-1,2-苯并噁唑-3-基]-4-(甲氧基甲基)-1,3-噁唑烷-2-酮和 (4S)-3-{6-[(2R,6S)-2,6-二甲基吗啉-4-基]-5-(1,3-二氧戊环-2-基)-7-氟 -1,2-苯并噁唑-3-基}-4-(甲氧基甲基)-1,3-噁唑烷-2-酮
在0℃下将中间体33和34(0.55g，1.3mmol)与甲基碘(0.54g，3.8mmol)的混合物添加至NaH(0.06g，2.5mmol)于二甲基甲酰胺(5mL)中的搅拌混合物，并且将所得混合物在室温下搅拌一小时。将反应混合物用饱和NH4Cl水溶液(5ml)猝灭并且用乙酸乙酯(3x10ml)萃取。将合并的有机层用水洗涤并且经Na2SO4干燥。在真空下蒸发溶剂得到粗标题化合物，所述化合物通过快速柱硅胶色谱法使用乙酸乙酯于石油醚中的梯度进行纯化。产率：0.4g(70％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:1.1(d,6H),2.8(t,2H),3.1(d,2H),3.2(s,3H),3.5(dd,1H),3.7-3.75(m,2H),3.9(d,1H),3.9-34.0(m,2H),4.0-4.1(m,2H),4.4(dd,1H),4.6-4.7(m,2H),6.1(s,1H),8.3(s,1H)。C21H26FN3O7的MS(ES)MH+:452.4。
中间体39
(4S)-4-(甲氧基甲基)-1,3-噁唑烷-2-酮
在0℃下向[(2R)-1-羟基-3-甲氧基丙-2-基]氨基甲酸叔丁酯(根据Sowinski,J.A.；Toogood,P.L.J.Org.Chem.(1996),61(22),7671-7676中所描述的工序来合成)(8.3g，40.4mmol)于四氢呋喃(100mL)中的搅拌溶液中滴加1M叔丁醇钾于四氢呋喃中的溶液(80.9mL,80.9mmol)，并且将混合物在室温下搅拌2小时。将水(20mL)添加至反应混合物并且用乙酸乙酯(3x50ml)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤并且经Na2SO4干燥。产率：5.0g(94％)。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ:3.3(s,3H),3.3(m,2H),3.9(m,1H),4.0(dd,1H),4.3(t,1H),7.7(d,1H)。[α]D 25＝-5.876。
中间体40
(4S)-3-{6-[(2R,6S)-2,6-二甲基吗啉-4-基]-5-(1,3-二氧戊环-2- 基)-7-氟-1,2-苯并噁唑-3-基}-4-(甲氧基甲基)-1,3-噁唑烷-2-酮
使用与针对中间体32的合成所描述的方法类似的方法从中间体39和中间体7制备中间体40。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:1.1(d,6H),2.8(t,2H),3.1(d,2H),3.2(s,3H),3.5(dd,1H),3.7-3.75(m,2H),3.9(d,1H),3.95-4.0(m,2H),40-4.1(m,2H),4.4(dd,1H),4.45-4.7(m,2H),6.1(s,1H),8.3(s,1H)。C21H26FN3O7的MS(ES)MH+:452.4。
中间体41
(S)-5-((叔丁基二苯基甲硅烷基氧基)甲基)噁唑烷-2-酮
将(S)-5-(羟甲基)噁唑烷-2-酮(570mg，4.87mmol，如由Danielmeier,K.；Steckhan,E.TetAsymmetry,6(5),1995,1181所描述)和咪唑(331mg，4.87mmol)溶解于二甲基甲酰胺(5mL)中并且冷却至0℃。在0℃下滴加叔丁基氯二苯基硅烷(1.34g，4.87mmol)。使反应混合物升温至室温并且搅拌5小时。将混合物倒入0.5NHCl(50ml)中，并且将所得混合物用乙酸乙酯萃取。将层分离并且将有机相用饱和碳酸氢钠、水和盐水洗涤。将有机相经硫酸钠干燥并且除去溶剂以得到粗材料，所述粗材料在硅胶柱(50％于己烷中的乙酸乙酯)上纯化以得到标题化合物(1.28g，74.0％)。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ:1.0(s,9H)3.3-3.6(m,2H)3.6-3.9(m,2H)4.6-4.8(m,1H)7.3-7.8(m,11H)。C20H25NO3Si的Na+加合物的MS(ES)(M+23)+:278。
中间体42
(S)-5-((叔丁基二苯基甲硅烷基氧基)甲基)-3-(6-((2R,6R)-2,6-二甲 基吗啉代)-5-(1,3-二氧戊环-2-基)-7-氟苯并[d]异噁唑-3-基)噁唑烷-2- 酮
使用与针对中间体32的合成所描述的方法类似的方法从中间体41和中间体11制备中间体42。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ:0.9(s,9H)1.2(d,6H)2.9(dd,2H)3.2-3.3(m,2H)3.8-4.1(m,9H)4.3(t,1H)4.95-5.1(m,1H)6.2(s,1H)7.3-7.7(m,10H)8.5(s,1H)。C36H42FN3O7Si的MS(ES)MH+:676。
中间体43
(S)-3-(6-((2R,6R)-2,6-二甲基吗啉代)-5-(1,3-二氧戊环-2-基)-7-氟 苯并[d]异噁唑-3-基)-5-(羟甲基)噁唑烷-2-酮
将乙酸(0.89mL，15.5mmol)和1M四丁基氟化铵于四氢呋喃中的溶液(3.1mL，3.1mmol)依序添加至中间体42(2.1g，3.11mmol)溶解于15mL四氢呋喃中的溶液。将混合物在室温下搅拌18小时。将反应混合物用水稀释并且用乙酸乙酯萃取，将其浓缩以得到粗材料，所述粗材料在硅胶柱(50％-70％于己烷中的乙酸乙酯梯度)上纯化以得到标题化合物(1.33g，98％产率)。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ:1.2(d,6H)2.8-3.3(m,4H)3.5-3.8(m,2H)3.9-4.3(m,8H)4.7-5.05(m,1H)6.2(s,1H)8.4(s,1H)。C20H24FN3O7的MS(ES)MH+:438。
中间体44
(S)-3-(6-((2R,6R)-2,6-二甲基吗啉代)-5-(1,3-二氧戊环-2-基)-7-氟 苯并[d]异噁唑-3-基)-5-(氟甲基)噁唑烷-2-酮
使用与针对中间体35的合成所描述的方法类似的方法从中间体43制备中间体44。1HNMR(300MHz,CDCl3)δ:1.3(d,6H)3.0(dd,2H)4.0-4.2(m,8H)4.3(t,1H)4.55-4.9(m,3H)5.0-5.25(m,1H)6.3(s,1H)8.5(s,1H)。C20H23F2N3O6的MS(ES)MH+:440。
中间体45
3-氯-4-氟-2-羟基苯甲酸
将氢氧化钠(208g，5.21mol)分批添加至3-氯-2,4-二氟苯甲酸(200g，1.04mol)于1,3-二甲基咪唑烷-2-酮(1L)中的搅拌溶液，并且将混合物加热至140℃持续2小时。将反应混合物冷却至室温并且用冰冷却的2NHCl(350mL)中和，从而沉淀白色固体，通过过滤收集所述白色固体。将过滤的固体溶解于甲基叔丁基醚(500mL)中，用饱和盐水溶液(150mL)洗涤并且经Na2SO4干燥。在真空下除去溶剂得到呈灰白色固体的标题化合物。产率：180g(91％)。1HNMR(300MHz,MeOH-d4)δ:6.8(t,1H),7.90(dd,1H),11.3(s,1H)。C7H4ClFO3的MS(ES)MH-:189。
中间体46
3-氯-4-氟-2-羟基苯甲酸甲酯
将草酰氯(75.9g，0.60mol)和二甲基甲酰胺(1mL)依序添加至冰冷却和搅拌的中间体45(57.0g，0.29mol)于干燥二氯甲烷(570mL)中的溶液，并且将混合物在室温下搅拌16小时。在真空下除去挥发物，从而得到黄色固体，在0℃下向所述黄色固体添加甲醇(350mL)，并且将所得混合物在同一温度下搅拌1小时。将反应混合物缓慢倒入冰冷却的2NHCl溶液(1.0L)中，从而沉淀固体，通过过滤收集所述固体。将所述湿固体溶解于二乙醚(1.5L)中，将其分离并且经Na2SO4干燥。在真空下除去溶剂得到呈白色固体的标题化合物。产率：58.0g(95％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:3.9(s,3H),7.0(t,1H),7.8(dd,1H),11.3(s,1H)。
中间体47
3-氯-4-氟-N,2-二羟基苯甲酰胺
在0℃下将盐酸羟胺(43.3g，0.62mol)和KOH沉淀(73.2g，1.30mol)依序添加至中间体46(58.0g，0.28mol)于甲醇(580mL)中的溶液，并且将混合物回流16小时。将反应混合物冷却至10℃并且通过添加冰浴冷却的1.5NHCl溶液(3.0L)来将溶液的pH调节至2，从而沉淀白色固体。将固体过滤并且在真空下充分干燥。然后将所述固体溶解于乙酸乙酯(500mL)中，用1.5N盐酸(200mL)、盐水溶液(200mL)洗涤并且经Na2SO4干燥。除去溶剂得到呈白色固体的标题产物。产率：55.0g(94％)。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ:7.0(t,1H),7.7(dt,1H),9.6(brs,1H),11.9(s,1H),13.9(s,1H)。C7H5ClFNO3的MS(ES)MH+:206。
中间体48
7-氯-6-氟苯并[d]异噁唑-3(2H)-酮
在70℃下经一小时将于干燥四氢呋喃(100mL)中的羰基二咪唑(86.75g，0.54mol)滴加至中间体47(55.0g，0.27mol)于干燥四氢呋喃(550mL)中的搅拌溶液，并且将反应混合物在同一温度下搅拌另外一小时。在真空下除去溶剂，并且将获得的半固体与冰冷却的2N盐酸(500mL)一起剧烈搅拌10分钟。将获得的白色固体过滤且溶解于乙酸乙酯(500mL)中，用盐水溶液(150mL)洗涤且经Na2SO4干燥。除去溶剂得到呈白色固体的标题化合物。产率：47.0g(94％)。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ:8.0(t,1H),8.4(dd,1H),13.5(brs,1H)。C7H3ClFNO2的MS(ES)MH-:186。
中间体49
3,7-二氯-6-氟苯并[d]异噁唑
向冰冷却的中间体48(47.0g，0.25mol)的混合物中添加氧氯化磷(114.3g，0.75mol)和三乙胺(25.36g，0.25mol)，并且将混合物在140℃下在密封管中加热6小时。将反应物质冷却至室温并且然后在剧烈搅拌下缓慢添加冰冷却的水。将获得的固体过滤并且用饱和碳酸氢钠溶液(200mL)和冰冷却的水洗涤。然后将所述湿固体溶解于二乙醚(2.0L)中，将其经Na2SO4干燥。在35℃下除去溶剂得到呈淡棕色固体的标题化合物。产率：32.0g(62％)。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ:7.6(t,1H),7.9(dd,1H)。C7H2Cl2FNO的MS(ES)MH-:206.0。
中间体50
3,7-二氯-6-氟苯并[d]异噁唑-5-甲醛
在-10℃下将1.6M正丁基锂于己烷中的溶液(194.17mL，0.31mol)滴加至四甲基哌啶(48.26g，0.34mol)于四氢呋喃(160mL)中的溶液，并且将所述溶液搅拌40分钟。将反应混合物冷却至-78℃并且向所述混合物中添加于四氢呋喃(160mL)中的中间体49(32.0g，0.16mol)。在-78℃下搅拌2小时之后，添加二甲基甲酰胺(22.69g，0.31mol)并且继续在-78℃下搅拌1小时。将反应物通过添加乙酸(46.6g，0.78mol)猝灭并且升温至室温。将混合物用水稀释并且用乙酸乙酯(2x250mL)萃取。将合并的有机层用水和盐水洗涤并且然后经无水Na2SO4干燥。在真空下除去溶剂得到粗产物，将所述粗产物使用2％于石油醚中的乙酸乙酯的梯度经硅胶柱(230-400目)纯化。产率：27.5g(76％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:8.4(d,1H),10.2(s,1H)。C8H2Cl2FNO2的MS(ES)MH+:233。
中间体51
3,7-二氯-6-((2R,6R)-2,6-二甲基吗啉代)苯并[d]异噁唑-5-甲醛
将中间体50(15g，64.10mmol)、(2R,6R)-2,6-二甲基吗啉(7.38g，64.10mmol)和K2CO3(13.29g，96.15mmol)于丁腈(80mL)和水(8mL)中的混合物在回流下加热6小时。除去溶剂。将混合物用乙酸乙酯稀释并且用水和盐水洗涤。将合并的水层用乙酸乙酯萃取，将其用水和盐水洗涤。将合并的乙酸乙酯萃取物干燥(Na2SO4)并且浓缩以得到与标题化合物一致的淡黄色固体(21.2g，100％)。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ:1.2(d,6H)3.0(dd,2H)3.55(dd,2H)4.1-4.2(m,2H)8.1(s,1H)10.3(s,1H)。C14H14Cl2N2O3的MS(ES)MH+:329。
中间体52
3,7-二氯-6-((2R,6R)-2,6-二甲基吗啉代)-5-(1,3-二氧戊环-2-基)苯 并[d]异噁唑
向溶解于200mL甲苯中的中间体51(21g，63.8mmol)的溶液中添加乙烷-1,2-二醇(15.8g，255mmol)和4-甲基苯磺酸(0.55g，3.19mmol)。将混合物在回流下加热，其中共沸除去水持续4小时。将反应物冷却且用乙醚稀释，将其用水、NaHCO3水溶液和水洗涤。干燥(MgSO4)和除去溶剂得到残余物，所述残余物在硅胶(25％于己烷中的乙酸乙酯)上纯化以得到标题化合物(21.35g，90％)。1HNMR(300MHz,DMSO–d6)δ:1.2(br.s.,3H)1.3(br.s.,3H)2.7-3.2(m,3H)3.5-3.75(m,1H)3.9-4.25(m,6H)6.2(s,1H)7.9(s,1H)。C16H18Cl2N2O4的MS(ES)MH+:373。
使用与针对中间体42的合成所描述的方法类似的方法从所指定的原料制备以下3种中间体。
中间体53
(S)-3-(6-((2R,6R)-2,6-二甲基吗啉代)-5-(1,3-二氧戊环-2-基)-7-氯 苯并[d]异噁唑-3-基)-5-(甲氧基甲基)噁唑烷-2-酮
原料：(S)-5-(甲氧基甲基)噁唑烷-2-酮(购自SanyoCo.,LTD)和中间体52。1HNMR(300MHz,CDCl3)δ:1.0-1.3(m,3H),1.3-1.6(m,3H),2.8(d,1H),2.9(s,1H),3.0(s,1H),3.05(d,1H),3.2(d,1H)3.4-3.5(m,3H),3.7(qd,2H),3.8-4.0(m,1H),4.1-4.35(m,6H),4.9(ddd,1H),6.35(s,1H),8.7(s,1H)。C21H26ClN3O7的MS(ES)MH+:468。
中间体54
(R)-3-(6-((2R,6R)-2,6-二甲基吗啉代)-5-(1,3-二氧戊环-2-基)-7-氟 苯并[d]异噁唑-3-基)-5-(甲氧基甲基)噁唑烷-2-酮
原料：(R)-5-(甲氧基甲基)噁唑烷-2-酮(购自SanyoCo.,LTD)和中间体52。1HNMR(300MHz,CDCl3)δ：1.2(m,3H),1.45(m,3H)2.8(d,1H),3.1(d,1H),3.2-3.4(m,2H),3.4-3.5(m,3H),3.7(qd,2H),3.85(d,2H),3.9-43(m,6H),4.8-5.0(m,1H)6.35(s,1H)8.7(s,1H)。C21H26FN3O7的MS(ES)MH+:468。
中间体55
(R)-3-(7-氯-6-((2R,6R)-2,6-二甲基吗啉代)-5-(1,3-二氧戊环-2-基) 苯并[d]异噁唑-3-基)-5-甲基噁唑烷-2-酮
原料：(R)-5-甲基噁唑烷-2-酮(根据在Chouhan,G.；Alper,H.J.Org.Chem.(2009),74(16),6181-6189中所描述的工序来合成)和中间体52。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ:1.1(s,3H)1.3(s,3H)1.5(d,3H)2.7-3.2(m,3H)3.5-43(m,9H)4.9-5.2(m,1H)6.2(s,1H)8.6(s,1H)。C20H24ClN3O6的MS(ES)MH+:438。
中间体56和57
(4S,5R)-3-[6-[(2R,6R)-2,6-二甲基吗啉-4-基]-5-(1,3-二氧戊环-2- 基)-7-氟-1,2-苯并噁唑-3-基]-4,5-二甲基-噁唑烷-2-酮和 (4R,5S)-3-[6-[(2R,6R)-2,6-二甲基吗啉-4-基]-5-(1,3-二氧戊环-2-基)-7- 氟-1,2-苯并噁唑-3-基]-4,5-二甲基-噁唑烷-2-酮
在室温下将NaH于10mL二甲基甲酰胺中的悬浮液缓慢添加至4,5-二甲基噁唑烷-2-酮(2.7g，18.8mmol，根据在Chouchan,Gagan；C.J.O.C.,2009,74,第6181页中所描述的工序来合成)于50mL的二甲基甲酰胺中的溶液。在10分钟搅拌之后，添加中间体11(6.7g，18.8mmol)并且将混合物在微波中在100℃下加热一小时。将所得混合物冷却并且倒入冰冷NH4Cl水溶液中且用乙酸乙酯萃取。将有机层用水、盐水洗涤，并且干燥(Na2SO4)。在浓缩之后，残余物在硅胶柱(用0％-5％于CHCl3中的甲醇洗脱)上纯化以得到作为非对映体的混合物的固体。将非对映体通过手性HPLC使用ChiralpakIC(250x4.6mm)柱(己烷：甲醇：乙醇(70:15:15)1.0ml/分钟)分离以得到2种组分：作为第一洗脱异构体的中间体56和作为第二洗脱异构体的中间体57。
中间体56是第一洗脱异构体。产率：840mg(10％)。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ:1.2(d,6H),1.3(d,3H),1.4(d,3H),2.9(s,2H),3.2(d,2H),3.9-4.2(m,6H),4.7(s,1H),5.1(s,1H),6.2(s,1H),8.3(s,1H)。C21H26ClN3O6的MS(ES)MH+:436。
中间体57是第二洗脱异构体。产率：920mg(11％)。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ:1.2(d,6H),1.3(d,3H),1.4(d,3H),2.9(dd,2H),3.2(d,2H),3.9-42(m,6H),4.5-4.9(m,1H),4.9-5.2(m,1H),6.2(s,1H),8.3(s,1H)。C21H26ClN3O6的MS(ES)MH+:436。
中间体58
(S)-2-(5-(1,3-二氧戊环-2-基)-6,7-二氟苯并[d]异噁唑-3-基氨基)戊 -4-烯-1-醇
使用针对中间体17的合成所描述的方法从中间体16和(S)-2-氨基戊-4-烯-1-醇制备中间体58。1HNMR(300MHz,CDCl3)δ:1.6(br.s,1H),2.5(t,2H),3.7-4.0(m,3H),4.0-4.35(m,4H),4.5(d,1H),5.0-5.3(m,2H),5.7-6.0(m,1H),6.1(s,1H),7.5(dd,1H)。C15H16F2N2O4的MS(ES)MH+:327。
中间体59
(S)-3-(5-(1,3-二氧戊环-2-基)-6,7-二氟苯并[d]异噁唑-3-基)-4-烯丙 基噁唑烷-2-酮
使用针对中间体18的合成所描述的方法从中间体58制备中间体59。1HNMR(300MHz,CDCl3)δ:2.5-2.7(m,1H),2.7-2.9(m,1H),4.0-4.3(m,4H),4.4(dd,1H),4.6(t,1H),4.7-4.9(m,1H),5.1-5.3(m,2H),5.6-5.9(m,1H),6.1(s,1H),8.4(dd,1H)。C16H14F2N2O5的MS(ES)MH+:353。
中间体60
(S)-3-(4-烯丙基-2-氧代噁唑烷-3-基)-6,7-二氟苯并[d]异噁唑-5-甲 醛
使用针对中间体19的合成所描述的方法从中间体59制备中间体60。C14H10F2N2O4的MS(ES)MH+:309。
中间体61
3-((S)-4-烯丙基-2-氧代噁唑烷-3-基)-6-((2R,6R)-2,6-二甲基吗啉代)-7-氟苯并[d]异噁唑-5-甲醛
使用针对中间体20的合成所描述的方法从中间体60制备中间体61。1HNMR(300MHz,CDCl3)δ:1.2-1.4(m,6H),2.5-2.7(m,1H),2.7-2.9(m,1H),2.9-3.1(m,2H),3.4(dt,2H),3.9-4.3(m,2H),4.3-4.5(m,1H),4.5-4.8(m,2H),5.0-5.4(m,2H),5.5-5.9(m,1H),8.7(s,1H),10.4(s,1H)。C20H22FN3O5的MS(ES)MH+:404。
中间体62
2-(5-(1,3-二氧戊环-2-基)-6,7-二氟苯并[d]异噁唑-3-基氨基)-2-(四 氢-2H-吡喃-4-基)乙醇
使用针对中间体17的合成所描述的方法从中间体16和4-(四氢-2H-吡喃-4-基)噁唑烷-2-酮(购自Pharmacore,Inc.)制备中间体62。C17H20F2N2O5的MS(ES)MH+:371。
中间体63
3-(5-(1,3-二氧戊环-2-基)-6,7-二氟苯并[d]异噁唑-3-基)-4-(四氢 -2H-吡喃-4-基)噁唑烷-2-酮
使用针对中间体18的合成所描述的方法从中间体62制备中间体63。1HNMR(300MHz,CDCl3)δ:0.7-1.0(m,2H),1.4-1.6(m,5H),2.6(d,1H),3.15-3.5(m,2H),3.9-4.2(m,6H),4.35-4.7(m,3H),5.1-5.5(m,2H),6.1(s,1H),8.4(dd,1H)。C18H18F2N2O6的MS(ES)MH+:397。
中间体64
6,7-二氟-3-(2-氧代-4-(四氢-2H-吡喃-4-基)噁唑烷-3-基)苯并[d]异 噁唑-5-甲醛
使用针对中间体19的合成所描述的方法从中间体63制备中间体64。C16H14F2N2O5的MS(ES)MH+:353。
中间体65
6-((2R,6R)-2,6-二甲基吗啉代)-7-氟-3-((2-氧代-4-(四氢-2H-吡喃 -4-基)-2-噁唑烷-3-基)苯并[d]异噁唑-5-甲醛
使用针对中间体20的合成所描述的方法从中间体64制备中间体65。C22H26FN3O6的MS(ES)MH+:448。
中间体66
(S)-4-(3-羟丙基)噁唑烷-2-酮
将NaH(0.365g，9.12mmol，60％分散液)分批添加至溶解于10mL四氢呋喃中的(S)-1,5-二羟基戊烷-2-基氨基甲酸叔丁酯(1g，4.56mmol)的冰浴冷却混合物。将混合物升温至60℃持续2.5小时。在冷却至室温之后，将溶液用10％HCl酸化并且浓缩。将残余物用甲醇稀释且滤出任何不溶性材料。将滤液浓缩以得到粗噁唑烷酮并且用于下一步骤而不需任何另外纯化。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ:1.1-1.2(m,3H)3.4(d,2H)3.5(q,2H)3.8-4.0(m,1H)40-4.1(m,1H)4.2-4.4(m,1H)4.6-4.7(m,2H)7.7(br.s,1H)。
中间体67
(S)-4-(3-(叔丁基二苯基甲硅烷基氧基)丙基)噁唑烷-2-酮
使用与中间体41的合成类似的方法从中间体66制备中间体67。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ:1.0(s,9H)1.45-1.7(m,4H)3.6-3.8(m,3H)3.9(dd,1H)4.3(t,1H)7.4-7.5(m,6H)7.6-7.7(m,4H)7.7(s,1H)。
中间体68
(S)-4-(3-(叔丁基二苯基甲硅烷基氧基)丙基)-3-(6-((2R,6R)-2,6-二 甲基吗啉代)-5-(1,3-二氧戊环-2-基)-7-氟苯并[d]异噁唑-3-基)噁唑烷 -2-酮
使用与针对中间体42的合成所描述的方法类似的方法从中间体67和中间体11制备中间体68。C38H46FN3O7Si的MS(ES)MH+:704。
中间体69
(S)-3-(6-((2R,6R)-2,6-二甲基吗啉代)-5-(1,3-二氧戊环-2-基)-7-氟 苯并[d]异噁唑-3-基)-4-(3-羟丙基)噁唑烷-2-酮
使用针对中间体43的合成所描述的方法从中间体68制备中间体69。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ:1.2(d,5H)1.3-1.5(m,2H)1.7-2.0(m,2H)2.9(dd,2H)3.2-3.4(m.4H)3.95-4.1(m,6H)4.3-4.5(m,2H)46-4.8(m,2H)6.2(s,1H)8.25(s,1H)。C22H28FN3O7的MS(ES)MH+:466。
中间体70
(S)-3-(6-((2R,6R)-2,6-二甲基吗啉代)-5-(1,3-二氧戊环-2-基)-7-氟 苯并[d]异噁唑-3-基)-4-(3-氟丙基)噁唑烷-2-酮
将双(2-甲氧基乙基)氨基-三氟化硫(0.149ml，50％于四氢呋喃中，0.40mmol)的溶液添加至中间体69(125mg，0.27mmol)于10mLCH2Cl2中的冰浴冷却溶液。将溶液升温至室温，搅拌18小时。在用NaHCO3水溶液猝灭之后，将混合物用CH2Cl2萃取。从有机萃取物中除去溶剂，并且将残余物在硅胶(50％于己烷中的乙酸乙酯)上进行色谱法以得到83mg(66％产率)的标题化合物。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ:1.2(d,6H)1.5-2.1(m,4H)2.9(dd,2H)3.2-3.3(m,2H)3.9-4.1(m,6H)43-4.6(m,3H)4.6-4.8(m,2H)6.2(s,1H)8.25(s,1H)。C22H27F2N3O6的MS(ES)MH+:468。
中间体71
N-(1,4-二羟基丁-2-基)-5-(1,3-二氧戊环-2-基)-2,3,4-三氟-N'-羟基 苯甲脒
将中间体16(2.07g，7.34mmol)和(S)-2-氨基丁烷-1,4-二醇(1.3g，9.18mmol)在50mL二甲基甲酰胺中搅拌，同时用冰水浴冷却。经约10分钟缓慢添加三乙胺(7.68mL，55.09mmol)，并且使反应物升温至室温，搅拌18小时。除去溶剂，并且将残余物溶解于4mL水和5mL乙酸乙酯中。将浓溶液通过硅胶管(10mL容量)过滤，其中用乙酸乙酯洗脱。浓缩洗脱物以得到3.45g(100％产率)。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ:1.4-1.7(m,2H)3.3(t,2H)3.3-35(m,3H)3.9-4.1(m,6H)4.3(t,1H)4.6(t,1H)5.7(d,1H)5.9-6.1(m,1H)7.3(td,1H)9.9(s,1H)。C14H17F3N2O5的MS(ES)MH+:351。
中间体72
(S)-2-(5-(1,3-二氧戊环-2-基)-6,7-二氟苯并[d]异噁唑-3-基氨基)丁 烷-1,4-二醇
将中间体71(3.2g，9.14mmol)和CsCO3(5.95g，18.27mmol)的混合物溶解于二甲基甲酰胺(50mL)中，在室温下搅拌过夜。将溶液从固体盐中倾析出来并且过滤。将固体用乙醚洗涤3次并且过滤。浓缩合并的滤液并且将残余物分配在水与乙酸乙酯之间。分离乙酸乙酯并且用乙酸乙酯萃取水层3次。将有机层用饱和NaCl水溶液洗涤3次，经MgSO4干燥并且浓缩以得到油状物。将所述油状物在硅胶柱上使用CH2Cl2至10％于乙酸乙酯中的CH2Cl2的梯度进行纯化以得到标题化合物。产率1.0g，33％。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ:1.6-1.9(m,2H)3.4-3.6(m,4H)3.7(td,1H)3.9-4.2(m,4H)4.4(t,1H)4.6-4.8(m,1H)5.7-5.8(m,1H)6.1(s,1H)7.05(d,1H)8.0(dd,1H)。C14H16F2N2O5的MS(ES)MH+:331。
中间体73
(S)-6,7-二氟-3-(4-(2-羟乙基)-2-氧代噁唑烷-3-基)苯并[d]异噁唑 -5-甲醛
将中间体72(220mg，0.67mmol)和羰基二咪唑(412mg，2.54mmol)溶解于二甲基甲酰胺(20mL)中。添加二甲基氨基吡啶(31mg，0.25mmol)并且将反应物在60℃下搅拌2小时。在冷却至室温之后，添加5mL的1NHCl水溶液并且将反应混合物加热至60℃持续4小时。然后添加2mL的6NHCl并且将反应混合物在60℃下搅拌2小时。浓缩反应混合物并且将残余物用乙酸乙酯萃取3次。将有机层用盐水洗涤，经MgSO4干燥并且浓缩以得到油状物。将残余物在硅胶柱上使用己烷与乙酸乙酯的梯度进行纯化以得到100mg(48％产率)的标题化合物。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ:1.9(m,1H),2.2(m,1H)3.5(q,2H),4.5-4.6(m,1H),4.6-4.7(m,2H),47-4.8(m,2H)，8.7(dd,1H)，10.2(s,1H)。C13H10F2N2O5的MS(ES)MH+:313。
中间体74
6-((2R,6R)-2,6-二甲基吗啉代)-7-氟-3-((S)-4-(2-羟乙基)-2-氧代噁 唑烷-3-基)苯并[d]异噁唑-5-甲醛
将中间体73(100mg，0.32mmol)、二异丙基乙胺(225μL，1.29mmol)和(2R,6R)-2,6-二甲基吗啉(44μl，0.35mmol)于5mL的乙腈中的溶液在80℃下加热18小时。将反应混合物用水稀释并且用乙酸乙酯萃取3次。将有机层用盐水洗涤两次，经MgSO4干燥并且浓缩以得到油状物。将残余物在硅胶柱上使用己烷与乙酸乙酯的梯度进行纯化以得到标题化合物(60mg，0.147mmol，46.0％产率)。1HNMR(300MHz,CDCl3)δ:1.3-1.4(m,6H),1.9-2.1(m,1H),2.3-2.5(m,1H),3.0(ddd,2H),3.4(dt,2H),3.7-3.9(m,2H),4.2-4.3(m,2H),4.5-4.5(m,1H),4.7-4.9(m,2H),8.7(d,1H),10.4(s,1H)。C19H22FN3O6的MS(ES)MH+:408。
中间体75
(S)-5-((叔丁基二苯基甲硅烷基氧基)甲基)-3-(7-氯-6-((2R,6R)-2,6- 二甲基吗啉代)-5-(1,3-二氧戊环-2-基)苯并[d]异噁唑-3-基)噁唑烷-2- 酮
使用针对中间体32的合成所描述的方法从中间体41和52制备中间体75。C36H42ClN3O7Si的MS(ES)MH+:693。
中间体76
(S)-3-(7-氯-6-((2R,6R)-2,6-二甲基吗啉代)-5-(1,3-二氧戊环-2-基) 苯并[d]异噁唑-3-基)-5-(羟甲基)噁唑烷-2-酮
使用针对中间体43的合成所描述的方法从中间体75制备中间体76。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ:1.1(br.s,3H)1.3(br.s,3H)27-2.9(m,1H)3.0-3.2(m,2H)3.6-3.8(m,3H)3.9-4.2(m,8H)4.8-5.0(m,1H)5.3(t,1H)6.2(s,1H)8.6(s,1H)。C20H24ClN3O7的MS(ES)MH+:454。
中间体77
(S)-3-(7-氯-6-((2R,6R)-2,6-二甲基吗啉代)-5-(1,3-二氧戊环-2-基) 苯并[d]异噁唑-3-基)-5-(氟甲基)噁唑烷-2-酮
使用与针对中间体70的合成所描述的方法类似的方法从中间体76制备中间体77。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ:1.1(brs,3H)1.3(brs,3H)2.65-2.9(m,1H)2.9-3.2(m,2H)3.5-3.7(m,1H)3.8-4.2(m,7H)4.2-4.35(m,1H)4.6-4.9(m,2H)5.05-5.3(m,1H)6.2(s,1H)8.6(s,1H)。C20H23ClFN3O6的MS(ES)MH+:456。
中间体78
(S)-4-(3-(叔丁基二苯基甲硅烷基氧基)丙基)-3-(7-氯 -6-((2R,6R)-2,6-二甲基吗啉代)-5-(1,3-二氧戊环-2-基)苯并[d]异噁唑 -3-基)噁唑烷-2-酮
使用与针对中间体42的合成所描述的方法类似的方法从中间体67和中间体52制备中间体78。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ:0.9(s,9H)1.1(br.s.，3H)1.3(br.s.，3H)1.4-1.65(m,2H)1.85-2.0(m,2H)2.7-3.1(m,3H)3.5-3.7(m,3H)3.95-4.2(m,6H)4.3-4.4(m,1H)4.6-4.8(m,2H)6.2(s,1H)7.3-7.5(m,6H)7.5-7.6(m,4H)8.4(s,1H)。C38H46IN3O7Si的MS(ES)MH+:720。
中间体79
(S)-3-(7-氯-6-((2R,6R)-2,6-二甲基吗啉代)-5-(1,3-二氧戊环-2-基) 苯并[d]异噁唑-3-基)-(3-羟丙基)噁唑烷-2-酮
使用针对中间体43的合成所描述的方法从中间体78制备中间体79。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ:1.1(br.s,3H)1.25-1.5(m,5H)1.7-2.0(m,2H)2.7-2.9(m,1H)3.0-3.2(m,2H)3.3-3.45(m,2H)3.5-3.7(m,1H)3.9-4.15(m,6H)4.3-4.5(m,2H)46-4.8(m,2H)6.2(s,1H)8.4(s,1H)。O22H28ClN3O7的MS(ES)MH+:482。
中间体80
(S)-3-(7-氯-6-((2R,6R)-2,6-二甲基吗啉代)-5-(1,3-二氧戊环-2-基) 苯并[d]异噁唑-3-基)-4-(3-氟丙基)噁唑烷-2-酮
使用针对中间体70的合成所描述的方法从中间体79制备中间体80。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ:1.1(br.s,3H)1.3(brs,3H)1.5-2.0(m,4H)2.7-2.9(m,1H)3.0-3.1(m,2H)3.5-3.7(m,1H)3.9-4.15(m,6H)4.3-4.6(m,3H)4.65-4.8(m,2H)6.2(s,1H)8.4(s,1H)。C22H27ClFN3O6的MS(ES)MH+:484。
中间体81
(S)-3-(6-((2R,6R)-2,6-二甲基吗啉代)-5-(1,3-二氧戊环-2-基)-7-氟 苯并[d]异噁唑-3-基)-5-(甲氧基甲基)噁唑烷-2-酮
使用针对中间体12所描述的方法从中间体11和(S)-5-(甲氧基甲基)噁唑烷-2-酮(购自DaiscoCo.,LTD)制备中间体81。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ:1.2(d，6H),2.9(dd,2H),3.2-3.3(m，2H)，3.3(s，3H)，3.6-4.3(m,9H),49-5.2(m,1H),6.2(s,1H),8.4(s,1H)。C21H26FN3O7的MS(ES)MH+:452。
中间体82
(R)-3-(6-((2R,6R)-2,6-二甲基吗啉代)-5-(1,3-二氧戊环-2-基)-7-氟 苯并[d]异噁唑-3-基)-5-(甲氧基甲基)噁唑烷-2-酮
使用针对中间体12的合成所描述的方法从(R)-5-(甲氧基甲基)噁唑烷-2-酮(购自DaiscoCo.,LTD)和中间体11制备中间体82。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ:1.2(d,6H)2.9(dd,4.8Hz,2H)3.1-3.3(m,2H)3.3(s,3H)3.6-4.3(m,9H)4.9-5.1(m,1H)6.2(s,1H)8.4(s,1H)。C21H26FN3O7的MS(ES)MH+:452。
中间体83
(5R)-5-(羟甲基)-1,3-噁唑烷-2-酮
向3-氨基-1,2-丙二醇(5.07g，55.7mmol)于水(60mL)中的搅拌溶液中滴加碳酸氢钠(20.70g，195.3mmol)，接着添加三光气(4.70g，15.8mmol)，并且将混合物在室温下搅拌16小时。将反应混合物用1.5N盐酸小心地中和，并且在真空下除去水，且将残余物溶解于乙醇(250mL)中并通过硅藻土过滤。将残余物用乙醇(250mL)洗涤，并且在真空下除去滤液的溶剂。因此获得的固体通过硅胶柱色谱法使用甲醇于乙酸乙酯中的梯度纯化。产率：3.30(51％)1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ:3.18-3.30(m,1H),3.45-3.56(m,3H),4.47-4.55(m,1H),4.05(t,1H),7.39(s,1H)。
中间体84
(5R)-5-[(四氢-2H-吡喃-2-基氧基)甲基]-1,3-噁唑烷-2-酮
向中间体83(5.0g，42.7mmol)于二氯甲烷(50mL)中的搅拌溶液添加对甲苯磺酸吡啶鎓(1.07g，4.27mmol)和3,4-二氢吡喃(5.84mL，64.1mmol)，并且将混合物在室温下搅拌16小时。将反应混合物用盐水溶液(25mL)猝灭并且用二氯甲烷(3x25mL)萃取。将合并的有机层经硫酸钠干燥并且在真空下除去溶剂。获得的粗产物通过硅胶快速柱色谱法使用50％于己烷中的乙酸乙酯纯化。产率：5.0g(58％)1HNMR(300MHz,DMSO-d6):δ1.45-1.49(m,4H),1.57-1.73(m,2H),3.12-3.28(m,1H),3.45-3.55(m,3H),3.67-3.75(m,2H),4.62-4.63(m,1H),4.70-4.72(m,1H),7.50(s,1H)。C9H15FNO4的MS(ELSD)MH+:202.2。
中间体85
(5R)-3-{6-[(2R,6R)-2 , 6-二甲基吗啉-4-基]-5-(1,3-二氧戊环-2- 基)-7-氟-1,2-苯并噁唑-3-基}5-[(四氢-2H-吡喃-2-基氧基)甲基]-1,3-噁 唑烷-2-酮
在0℃下经10分钟的时间段向氢化钠(0.61g，25.5mmol)于二甲基甲酰胺(10mL)中的搅拌溶液缓慢添加中间体84(2.57g，12.7mmol)于二甲基甲酰胺(20mL)中的溶液。将混合物在室温下搅拌30分钟，并且在相同温度下添加中间体11(4.55g，12.7mmol)于二甲基甲酰胺(20mL)中的溶液，且将混合物在60℃下加热2小时。将反应物用饱和氯化铵溶液(10mL)猝灭，用乙酸乙酯(3x50mL)萃取。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥并且在真空下除去溶剂。粗产物通过硅胶柱色谱法使用乙酸乙酯于己烷中的梯度纯化。产率：2.0g(30％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:1.16(d,6H),1.39-1.48(m,5H),2.85-2.90(m,2H),3.18-3.21(m,4H),3.58-3.83(m,2H),3.93-3.99(m,2H),4.04-4.07(m,5H),4.46-4.58(m,2H),4.67-4.76(m,2H),6.15(s,1H),8.25(d,1H)。C25H32FN3O8的MS(ES)MH+:522.2。
中间体86
(5R)-3-{6-[(2R,6R)-2,6-二甲基吗啉-4-基]-5-(1,3-二氧戊环-2- 基)-7-氟-1,2-苯并噁唑-3-基}-5-(羟甲基)-1,3-噁唑烷-2-酮
向中间体85(2.6g，4.99mmol)于甲苯(20mL)中的搅拌溶液添加乙二醇(2.0mL)，接着添加对甲苯磺酸吡啶鎓(0.23g，0.99mmol)，并且将混合物在110℃下加热1.5小时。将反应混合物用饱和碳酸氢钠溶液(10mL)猝灭，并且用乙酸乙酯(3x25mL)萃取。将有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并且在真空下除去溶剂。粗产物通过快速柱硅胶色谱法使用30％于己烷中的乙酸乙酯纯化。产率：1.40g(66％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:1.20(d,6H),2.88-2.92(m,2H),3.21-3.23(m,2H),3.61-3.65(m,1H),3.72-3.77(m,1H),3.93-4.01(m,3H),4.04-4.10(m,4H),4.19(t,1H),4.88-4.92(m,1H),5.30(t,1H)，6.18(s,1H),8.45(s,1H)。C20H24FN3O7的MS(ES)MH+:438.4。
中间体87
(5R)-3-{6-[(2R,6R)-2,6-二甲基吗啉-4-基]-5-(1,3-二氧戊环-2- 基)-7-氟-1,2-苯并噁唑-3-基}-5-(羟甲基)-1,3-噁唑烷-2-酮
在-78℃下向中间体86(0.10g，0.21mmol)于四氢呋喃(3mL)中的搅拌溶液添加二乙基氨基三氟化硫(0.17g，1.06mmol)，并且将混合物在相同温度下搅拌另一小时，且然后将其在室温下搅拌2小时。将甲醇(1mL)添加至反应混合物，并且在真空下除去挥发物。将残余物溶解于乙酸乙酯(15mL)中，并且用饱和碳酸氢钠(5mL)、水(10mL)并且最终用盐水溶液洗涤。将有机层经硫酸钠干燥并且在真空下除去溶剂。获得的固体是足够纯的并且将其移至下一步骤而无需进一步纯化。产率：0.05g(55％)。C20H23F2N3O6的MS(ES)MH+:440.4。
中间体88
(4S)-3-{6-[(2R,6R)-2,6-二甲基吗啉-4-基]-5-(1,3-二氧戊环-2- 基)-7-氟-1,2-苯并噁唑-3-基}-乙烯基-1.3-噁唑烷-2-酮
在0℃下历经10分钟的时间段向氢化钠(0.71g，17.6mmol)于二甲基甲酰胺(10mL)中的搅拌悬浮液缓慢添加(4S)-4-乙烯基-1,3-噁唑烷-2-酮(根据文献工序Chem.Eur.J.2006,12,6607–6620制备，2.0g和17.6mmol)于二甲基甲酰胺(10mL)中的溶液。将混合物在室温下搅拌30分钟，并且在相同温度下添加中间体11(3.1g，8.84mmol)于二甲基甲酰胺(10mL)中的溶液。将所述混合物在80℃下加热12小时，并且倒入冰冷却的水中，且用乙酸乙酯(3x25mL)萃取。将有机层经无水硫酸钠干燥并且在真空下除去溶剂。粗产物通过硅胶柱色谱法使用乙酸乙酯于石油醚中的梯度纯化。产率：0.70g(19％)。C21H24FN3O6的MS(ES)MH+:434.3。
中间体89
(5R)-3-{6-[(2R,6R)-2,6-二甲基吗啉-4-基]-5-(1,3-二氧戊环-2- 基)-7-氟-1,2-苯并噁唑-3-基}-5-[(E)-(羟基亚氨基)甲基]-1,3-噁唑烷-2- 酮
在-80℃下在氮气氛下向二甲亚砜(0.22g，2.74mmol)于二氯甲烷(3mL)中的溶液添加草酰氯(0.18g，1.37mmol)，并且将混合物在所述温度下搅拌30分钟。在相同温度下向此中滴加中间体86(0.4g，0.92mmol)于二氯甲烷(3mL)中的溶液，并且将反应混合物在所述温度下搅拌3小时，之后在相同温度下添加三乙胺(0.46g，4.50mmol)。然后将其升至0℃，其中将其搅拌1.5小时并且将水添加至其(5mL)且用二氯甲烷(5mL)稀释。将有机层萃取且经硫酸钠干燥并且在真空下在室温下除去溶剂。将粗材料(0.36g)溶解于绝对乙醇(10mL)中并且添加盐酸羟胺(0.9g，1.20mmol)，接着添加乙酸钠(0.08g，1.20mmol)，并且将混合物回流3小时。除去挥发物并且将残余物倒入水中且过滤，并且将沉淀物用水(25mL)洗涤且干燥。粗产物通过硅胶快速柱色谱法使用乙酸乙酯于石油醚中的梯度纯化。所述化合物作为未确定的E和Z异构体(通过1HNMR，1:2比例)的混合物获得。产率：0.13g(35％)1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:1.24(brs,6H),2.89-2.93(m,2H),3.21-3.24(m,2H),3.95-4.00(m,2H),4.02-4.11(m,4H),4.20(t,1H),4.34&4.44(t,1H),5.43&5.82(quin,1H),6.18(s,1H),7.21&7.65(d,1H),8.41-8.42(m,1H),11.58&11.78(s,1H)。C20H23FN4O7的MS(ES)MH+:451.4。
中间体90
(4R)-3-{6-[(2R,6R)-2,6-二甲基吗啉-4-基]-5-(1,3-二氧戊环-2- 基)-7-氟-1,2苯并噁唑3-基}-2-氧代-1,3-噁唑烷-4-甲醛
向中间体88(0.4g，0.92mmol)于四氢呋喃(4mL)和水(4mL)中的溶液添加N-甲基吗啉-N-氧化物(0.22g，1.84mmol)和2wt％四氧化锇于叔丁醇中的溶液(0.02g,0.05mmol)，并且将混合物在室温下搅拌3小时。向此溶液添加二乙酸碘苯(0.75g，2.3mmol)并且将其搅拌16小时。将反应物质用乙酸乙酯(3x20mL)萃取，将合并的有机层用水(15mL)洗涤、经硫酸钠干燥并且在真空下除去溶剂。所述固体不经进一步纯化移至下一步骤。产率：0.40g(粗)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:1.24(d,6H),2.89-2.96(m,2H),3.31-3.50(m,2H),4.02-4.17(m,8H),4.56-4.74(m,1H),6.32(s,1H),8.52(s,1H),9.90(s,1H)。C20H22FN3O7的MS(ES)MH+:451.4。
中间体91
(4S)-3-{6-[(2R,6R)-2 , 6-二甲基吗啉-4-基]-5-(1,3-二氧戊环-2- 基)-7-氟-1,2-苯并噁唑-3-基}-4-[(E)-(羟基亚氨基)甲基]-1,3-噁唑烷-2- 酮
向中间体90(0.4g，0.92mmol)于吡啶(5mL)和甲醇(5mL)中的溶液添加盐酸羟胺(0.08g，1.1mmol)，并且将混合物在95℃下加热30分钟。在真空下除去挥发物并且将粗产物溶解于乙酸乙酯(30mL)中，用水(2x15mL)和盐水(15mL)洗涤，经硫酸钠干燥。在真空下除去溶剂得到作为E/Z异构体的40:60混合物的标题化合物，将其通过用己烷(25mL)洗涤进一步纯化。产率：0.37g(90％)1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:1.24(d,6H),2.89-2.91(m,2H),3.19-3.22(m,2H),3.96-4.07(m,6H),4.31&4.52(dd,1H),4.75&4.87(t,1H),5.25-5.29&5.51-5.61(m,1H),6.16&6.17(s,1H),7.12&7.53(d,1H),8.27&8.37(s,1H),11.24&11.55(s,1H)。C20H23FN4O7的MS(ES)MH+:451.4。
中间体92
(4S)-3-{6-[(2R,6R)-2,6-二甲基吗啉-4-基]-5-(1,3-二氧戊环-2- 基)-7-氟-1,2-苯并噁唑-3-基}-2-氧代-1,3-噁唑烷-4-甲腈
将中间体91(0.18g，0.4mmol)于三氯乙腈(10mL)中的溶液在95℃下加热一小时。蒸发挥发物并且使用乙酸乙酯和己烷使粗产物再结晶。产率：0.09g(53％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:1.21(d,6H),2.87-2.93(m,2H),3.23(d,2H),3.94-4.04(m,6H),4.85(d,2H),5.64(dd,1H),6.17(s,1H),8.32(s,1H)。C20H23FN4O7的MS(ES)MH+:436.4。
中间体93
(4S)-3-{6-[(2R,6R)-2,6-二甲基吗啉-4-基]-5-(1,3-二氧戊环-2- 基)-7-氟-1,2-苯并噁唑-3-基}-4-[(E)-(甲氧基亚氨基)甲基]-1,3-噁唑烷 -2-酮
使用针对中间体91的合成所描述的方法从中间体90和O-甲基盐酸羟胺制备中间体93。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:1.24(d,6H),2.89-2.91(m,2H),3.19-3.22(m,2H),3.32&3.72(s,3H),3.96-4.09(m,6H),4.31&4.52(dd,1H),4.75&4.87(t,1H),5.25-5.29&5.51-5.61(m,1H),6.17(s,1H),7.25&7.66(d,1H),8.27&8.36(s,1H)。C21H25FN4O7的MS(ES)MH+:465.4。
中间体94
(5R)-3-{6-[(2R,6R)-2,6-二甲基吗啉-4-基]-5-(1,3-二氧戊环-2- 基)-7-氟-1,2-苯并噁唑-3-基}-5-[(E)-(甲氧基亚氨基)甲基]-1,3-噁唑烷 -2-酮
使用针对中间体86的合成所描述的方法从中间体85和O-甲基盐酸羟胺制备中间体94。所述化合物作为未确定的E和Z异构体(1:2.3)的混合物获得。产率：0.13(30％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:1.24(d,6H),2.86-2.91(m,2H),3.19-3.25(m,2H),3.76&3.83(s,3H),3.91-3.99(m,2H),4.00-4.07(m,4H),4.14-4.19(m,1H),4.32-4.44(m,1H),5.25-5.39-5.46&5.75-5.76(m,1H),6.16(s,1H),7.31&7.75(d,1H),8.40(s,1H)。C21H25FN4O7的MS(ES)MH+:465.3。
中间体95
4-甲基苯磺酸[(5R)-3-{6-[(2R,6R)-2,6-二甲基吗啉-4-基]-5-(1,3-二 氧戊环-2-基)-7-氟-1,2-苯并噁唑-3-基}-2-氧代-1,3-噁唑烷-5-基]甲酯
在0℃下向中间体86(2.7g，6.10mmol)于二氯甲烷(50mL)中的搅拌溶液添加4-二甲基氨基吡啶(1.50g，12.3mmol)，接着添加对甲苯磺酰氯(1.76g，9.20mmol)。在于室温下搅拌一小时之后使所得溶液升至室温，其中将其搅拌另外一小时的时间段。将反应混合物用柠檬酸溶液(25mL)、水(25mL)、饱和碳酸氢钠溶液(25mL)洗涤并且再次用水(2x25mL)洗涤。将有机层经硫酸钠干燥并且在真空下除去溶剂以获得粗产物，所述粗产物通过硅胶快速柱色谱法使用乙酸乙酯于己烷中的梯度纯化。产率：3.2g(88％)1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:1.20(d,6H),2.39(s,3H),2.88-2.92(m,2H),3.19-3.22(m,2H),3.78(dd,1H),3.94-3.99(m,2H),4.04-4.10(m,4H),4.19(t,1H),4.41(d,2H),5.05-5.07(m,1H),6.16(s,1H),7.45(d,2H),7.77(d,2H),8.38(s,1H)。C27H30FN3O9S的MS(ES)MH+:592.4。
中间体96
(5R)-5-(叠氮甲基)-3-{6-[(2R,6R)-2,6-二甲基吗啉-4-基]-5-(1,3-二 氧戊环-2-基)-7-氟-1,2-苯并噁唑-3-基}-1,3-噁唑烷-2-酮
向中间体95(3.20g，5.40mmol)于密封管中的二甲基甲酰胺(30mL)中的搅拌溶液添加叠氮化钠(1.0g，16.20mmol)，并且将混合物在90℃下加热3小时。在使反应物升至室温之后将其用水(15mL)猝灭并且用乙酸乙酯(2x15mL)萃取。将合并的有机层用水(2x10mL)和盐水溶液(10mL)洗涤，经硫酸钠干燥并且在真空下除去溶剂得到粗标题化合物，所述化合物通过快速柱色谱法使用乙酸乙酯于石油醚中的梯度进一步纯化以获得呈无色粘性液体的纯产物。产率：2.1g(51％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:1.24(d,6H),2.90(dd,2H),3.22(d,2H),3.82(d,2H),3.88(dd,1H),3.95-4.00(m,2H),4.02-4.10(m,4H),4.25(t,1H),5.08-5.11(m,1H),6.18(s,1H),8.44(s,1H)。C20H23FN6O6的MS(ES)MH+:463.4。
中间体97
(4R)-2-氧代-1,3-噁唑烷-4-甲酸甲酯
在0℃下向D-丝氨酸甲酯盐酸盐(25.0g，160.7mmol)于四氢呋喃(150mL)中的悬浮液添加三光气(47.68g，160.7mmol)于四氢呋喃(100mL)中的溶液，并且将混合物在80℃下搅拌2小时。在真空下蒸发挥发物并且使残余物经受使用5％于氯仿中的甲醇的快速柱硅胶色谱法。产率：17.5g(75％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:3.69(s,3H),4.32-4.33(m,1H),4.32-4.33(m,2H),8.22(s,1H)。
中间体98
(4S)-4-(羟甲基)-1,3-噁唑烷-2-酮
在0℃下向中间体97(15.0g，103.4mmol)于乙醇(100mL)中的搅拌溶液滴加硼氢化钠(1.96g，51.7mmol)，并且将混合物在室温下搅拌30分钟。向此混合物中添加1.5N盐酸，并且在真空下除去挥发物。将甲醇(50mL)添加至残余物，通过硅藻土过滤并且在真空下除去溶剂。获得呈无色油状物的标题化合物，其不经纯化用于另一步骤。手性HPLC数据显示91.3:8.7对映体的混合物[柱：ChiralpakAD-H(250x4.6)mm5μm；流动相：己烷：乙醇(85:15)]。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:3.34-3.35(m,2H),3.70-3.72(m,1H),4.04(dd,1H),2.96(t,1H),4.96(t,1H),7.59(s,1H)。
中间体99
4-甲基苯磺酸[(4R)-2-氧代-1,3-噁唑烷-4-基]甲酯
在0℃下向中间体98(11.0g，94.0mmol)于二氯甲烷(250mL)中的搅拌溶液添加4-二甲基氨基吡啶(22.94g，188.0mmol)和对甲苯磺酰氯(26.88g，141.0mmol)，并且将其搅拌一小时，之后使其升至室温，并且将反应物搅拌一小时。将反应混合物用1.5N盐酸(50mL)、水(50mL)、饱和碳酸氢钠(50mL)洗涤并且最终用盐水洗涤。将有机层经硫酸钠干燥并且在真空下除去溶剂。然后粗产物通过硅胶快速柱色谱法使用乙酸乙酯于石油醚中的梯度纯化。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ:2.49(s,3H),3.91-3.95(m,2H),3.99-4.02(m,2H),4.30(t,1H),7.49(d,2H),7.80(d,2H),7.88(s,1H)。产率：12.0g(47％)。
中间体100
(R)-4-((甲硫基)甲基)噁唑烷-2-酮
向中间体99(4.00g，14.76mmol)于密封管中的甲醇(30mL)中的搅拌溶液添加甲硫醇钠(3.12g，44.28mmol)，并且将混合物在室温下搅拌2小时。在真空下除去挥发物并且将残余物溶解于二氯甲烷(50mL)中，且将有机层用水(2x25mL)、盐水(25mL)洗涤，并且经硫酸钠干燥。除去溶剂得到标题化合物。产率：0.82g(38％)。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ:2.08(s,3H),2.59(d,2H),3.93-4.03(m,2H),4.37(t,1H),7.78(s,1H)。
中间体101
(R)-3-(6-((2R,6R)-2,6-二甲基吗啉代)-5-(1,3-二氧戊环-2-基)-7-氟 苯并[d]异噁唑-3-基)-4-((甲硫基)甲基)噁唑烷-2-酮
在0℃下经10分钟的时间段向氢化钠(0.22g，5.5mmol)于二甲基甲酰胺(5mL)中的搅拌悬浮液缓慢添加中间体100(0.82g和5.5mmol)于二甲基甲酰胺(10mL)中的溶液。将混合物在室温下搅拌10分钟，并且在相同温度下添加(中间体11(1.96g，5.50mmol)于二甲基甲酰胺(10mL)中的溶液。将所述混合物在80℃下加热2小时，并且倒入冰冷却的饱和氯化铵溶液(20mL)中，且用乙酸乙酯(3x20mL)萃取。将有机层经无水硫酸钠干燥并且在真空下除去溶剂。粗产物通过硅胶柱色谱法使用乙酸乙酯于石油醚中的梯度纯化。产率：0.70g(27％)。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ:1.22(brs,6H),2.04(s,3H),2.86-2.91(m,2H),3.02-3.04(m,2H),3.19-3.22(m,2H),3.96-4.07(m,6H),4.42(dd,1H),4.73(t,1H),4.84-4.86(m,1H),6.16(s,1H),8.28(s,1H)。C21H26FN3O6S的MS(ES)MH+:468.2。
中间体102
(R)-3-(6-((2R,6R)-2,6-二甲基吗啉代)-5-(1,3-二氧戊环-2-基)-7-氟 苯并[d]异噁唑-3-基)-4-((甲磺酰基)甲基)噁唑烷-2-酮
向中间体101(0.20g，0.42mmol)于四氢呋喃(5mL)中的搅拌溶液添加间氯苯甲酸(0.37g，2.14mmol)，并且将混合物在室温下搅拌2小时。将水(2mL)添加至反应混合物，并且用乙酸乙酯(3x5mL)萃取。将合并的有机层用水(2x5mL)、盐水(5mL)洗涤，并且经硫酸钠干燥。在真空下除去溶剂得到呈淡黄色固体的标题化合物。产率：0.20g(94％)。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ:1.22(brs,6H),2.88-2.92(m,2H),3.10(s,3H),3.20-3.23(m,2H),3.77-3.83(m,1H),3.88-3.93(m,1H),3.96-4.00(m,2H),4.02-4.10(m,4H),4.68(dd,1H),4.81(t,1H)5.10-5.14(m,1H),6.17(s,1H),8.27(s,1H)。C21H26FN3O8S的MS(ES)MH+:500.3。
中间体103
N-(叔丁氧基羰基)-O-(四氢-2H-吡喃-2-基)-L-丝氨酸甲酯
向N-(叔丁氧基羰基)-L-丝氨酸甲酯(根据报道的工序制备：Bioorg.Med.Chem.2007,15,2860-2867，10.0g，64.27mmol)于二氯甲烷(100mL)中的搅拌溶液添加对甲苯磺酸(0.24g，1.28mmol)和3,4-二氢-1H-吡喃(8.8mL，96.67mmol)，并且将混合物在室温下搅拌16小时。将反应混合物用饱和碳酸氢钠溶液(50mL)猝灭，并且用二氯甲烷(3x50mL)萃取。将合并的有机层用水(2x50mL)、盐水溶液(50mL)洗涤，并且经硫酸钠干燥。在真空以及还有高真空下除去溶剂以除去过量3,4-二氢-1H-吡喃。将残余物溶解于乙酸乙酯(10mL)中并且添加石油醚(100mL)，将其搅拌10分钟。将获得的固体过滤且用石油醚(50mL)洗涤。产率：12.0g(78％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:1.33-1.34(m,1H),1.39(s,9H),1.41-1.68(m,6H),3.41-3.45(m,1H),3.55-3.59(m,1H),3.61(s,3H),3.81-3.84(m,1H),4.23-4.28(m,1H),4.58(brs,1H),7.15(d,1H)。
中间体104
[(2R)-1-羟基-3-(四氢-2H-吡喃-2-基氧基)丙-2-基]氨基甲酸叔丁酯
在0℃下向中间体103(41.0g，135.0mmol)于四氢呋喃(250mL)和甲醇(125mL)中的搅拌溶液分批添加硼氢化钠(15.32g，405.0mmol)，并且将混合物在室温下搅拌30分钟。在真空下除去挥发物并且将残余物溶解于乙酸乙酯(250mL)中，并且用水(2x50mL)和盐水溶液(50mL)洗涤。将有机层经硫酸钠干燥并且在真空下除去溶剂。将粗产物通过使用硅胶(40％于石油醚中的乙酸乙酯)的快速柱色谱法纯化。产率：35.5g(96％)。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ：1.41(s,9H),1.44-1.70(m,7H),3.34-3.41(m,3H),3.47-3.69(m,2H),3.70-3.75(m,1H),4.53-4.61(m,2H),6.46(d,1H)。
中间体105
(4S)-4-[(四氢-2H-吡喃-2-基氧基)甲基]-1,3-噁唑烷-2-酮
在0℃下向中间体104(35.5g，129.0mmol)于四氢呋喃(250mL)中的搅拌溶液添加1M叔丁醇钾于四氢呋喃)中的溶液(258.0mL,258.0mmol，并且将混合物在室温下搅拌30分钟。在0℃下将反应混合物用水(50mL)猝灭并且用乙酸乙酯(3x50mL)萃取。将合并的有机层用水(50mL)、盐水溶液(50mL)洗涤，并且经硫酸钠干燥且在真空下除去溶剂。获得的粗产物通过硅胶快速柱色谱法使用乙酸乙酯于己烷中的梯度纯化。产率：22.0g(85％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6):δ1.38-1.51(m,4H),1.59-1.62(m,1H),1.73-1.75(m,1H),3.35-3.37(m,1H),3.45-3.47(m,1H),3.56-3.59(m,1H),3.72-3.77(m,1H),3.93(h,1H),4.05-4.08(m,1H),4.35(t,1H),4.60(t,1H),7.75(t,1H)。C9H15FNO4的MS(ELSD)MH+:202.2。
中间体106
(4S)-3-{6-[(2R,6R)-2,6-二甲基吗啉-4-基]-5-(1,3-二氧戊环-2- 基)-7-氟-1,2-苯并噁唑-3-基}-4-[(四氢-2H-吡喃-2-基氧基)甲基]-1,3-噁 唑烷-2-酮
在0℃下经10分钟的时间段向氢化钠(1.41g，35.3mmol)于二甲基甲酰胺(10mL)中的搅拌溶液缓慢添加中间体105(7.1g，35.3mmol)于二甲基甲酰胺(50mL)中的溶液，并且将混合物在室温下搅拌30分钟。在相同温度下添加中间体11_(12.59g，35.3mmol)于二甲基甲酰胺(50mL)中的溶液，并且将混合物在60℃下加热2小时。将反应物用饱和氯化铵溶液(10mL)猝灭，用乙酸乙酯(3x50mL)萃取。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥并且在真空下除去溶剂。粗产物通过硅胶柱色谱法使用3％于氯仿中的甲醇纯化。产率：4.3g(23％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:1.18(d,6H),1.30-1.58(m,5H),2.85-2.90(m,2H),3.18-3.21(m,4H),3.58-3.83(m,2H),3.93-3.99(m,2H),4.04-4.07(m,5H),4.46-4.58(m,2H),4.67-4.76(m,2H),6.15(s,1H),8.25(d,1H)。C25H32FN3O8的MS(ES)MH+:522.2。
中间体107
(4S)-3-{6-[(2R,6R)-2,6-二甲基吗啉-4-基]-5-(1,3-二氧戊环-2- 基)-7-氟-1,2-苯并噁唑-3-基}-4-(羟甲基)-1,3-噁唑烷-2-酮
向中间体106(3.2g，6.21mmol)于甲苯(30mL)中的搅拌溶液添加乙二醇(2.0mL)，接着添加对甲苯磺酸吡啶鎓(0.59g，23.6mmol)，并且将混合物在110℃下加热1.5小时。将反应混合物用饱和碳酸氢钠溶液(10mL)猝灭，并且用乙酸乙酯(3x25mL)萃取。将有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并且在真空下除去溶剂。将因此获得的粗产物通过快速柱硅胶色谱法使用30％于己烷中的乙酸乙酯纯化。手性HPLC数据显示其是97％de[柱：ChiralpakIC(250x4.6mm)；流动相：己烷：乙醇(80:20)]。产率：1.63g(60％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:1.09(d,6H),2.83(t,2H),3.08(d,2H),3.53-3.57(m,1H),3.73-3.76(m,2H),3.91-3.99(m,3H),4.06-4.09(m,2H),4.48(dd,1H),4.63-4.65(m,2H),5.19(t,1H),6.11(s,1H),8.32(s,1H)。C20H24FN3O7的MS(ES)MH+:438.4。
中间体108
4-甲基苯磺酸((R)-3-(6-((2R,6R)-2,6-二甲基吗啉代)-5-(1,3-二氧戊 环-2-基)-7-氟苯并[d]异噁唑-3-基)-2-氧代噁唑烷-4-基)甲酯
向中间体107(4.5g，10.29mmol)于二氯甲烷(100mL)中的搅拌溶液添加N,N-二甲基氨基吡啶(2.51g，20.59mmol)和对甲苯磺酰氯(2.94g，15.43mmol)，并且将溶液在0℃下搅拌一小时，之后使其升至室温，其中将其搅拌另外一小时。将反应混合物用1.5N盐酸(50mL)、水(2x50mL)和饱和碳酸氢钠溶液(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥。在真空下除去溶剂得到灰白色固体，所述固体通过硅胶快速柱色谱法使用乙酸乙酯于己烷中的梯度进一步纯化。产率：5.0g(82％)。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ:1.21(d,6H),2.16(s,3H),2.86-2.92(m,2H),3.08(d,2H),3.95-4.10(m，6H)，4.35(d,1H)，4.44-4.47(m,1H),4.55(d,1H),4.67(t,1H),4.78-4.83(m,1H),6.19(s,1H),7.1(d,2H),7.54(d,2H),8.29(s，1H)。C27H30FN3O9S的MS(ES)MH+:592.6。
中间体109
(S)-4-(叠氮甲基)-3-(6-((2R,6R)-2,6-二甲基吗啉代)-5-(1,3-二氧戊 环-2-基)-7-氟苯并[d]异噁唑-3-基)噁唑烷-2-酮
向中间体108(1.5g，2.53mmol)于密封管中的二甲基甲酰胺(15mL)中的搅拌溶液添加叠氮化钠(0.99g，15.22mmol)，并且将混合物在90℃下加热2小时。在使反应物升至室温之后将其用水(15mL)猝灭并且用乙酸乙酯(2x30mL)萃取。将合并的有机层用水(2x10mL)和盐水溶液(10mL)洗涤，经硫酸钠干燥并且在真空下除去溶剂得到粗标题化合物，所述化合物通过快速柱色谱法使用乙酸乙酯于石油醚中的梯度进一步纯化以获得呈无色粘性液体的纯产物。产率：0.85g(73％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:1.20(brs,6H),2.91-2.93(m,2H),3.21-3.23(m,2H),3.70(d,2H),3.98-4.15(m,7H),4.71(t,1H),4.80-4.82(m,1H),6.18(s,1H),8.29(s,1H)。C20H23FN6O6的MS(ES)MH+:463.4。
中间体110
N-[(苄氧基)羰基]-O-乙基-L-丝氨酸甲酯
在0℃下向(S)-氮杂环丙烷-1,2-二甲酸1-苄基2-甲基酯(根据文献工序制备：Org.Biomol.Chem.,2005,3,3357，2.7g，11.4mmol)于二氯甲烷(30mL)中的搅拌溶液三氟化硼醚合物(0.01mL，0.11mmol)，接着添加绝对乙醇(1.05g，22.9mmol)。将反应混合物在室温下搅拌一小时，在其之后将溶液用饱和碳酸氢盐溶液(2mL)猝灭，用二氯甲烷(3x25mL)萃取，将有机层用水(25mL)、盐水溶液(25mL)洗涤且经硫酸钠干燥。除去溶剂得到粗产物，所述粗产物通过硅胶柱色谱法使用乙酸乙酯于石油醚中的梯度纯化。产率：2.0g(63％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:1.08(t,3H),3.38-3.46(m,2H),3.57-3.63(m,2H),3.70(s,3H),4.26-4.31(m,1H),5.04(s,2H),7.30-7.39(m,5H),7.73(d,1H)。
中间体111
[(2R)-1-乙氧基-3-羟基丙-2-基]氨基甲酸苄酯
在0℃下向中间体110(2.0g，7.10mmol)于四氢呋喃和甲醇的9:1混合物(20mL)中的搅拌溶液分批添加硼氢化钠(0.54g，14.21mmol)，并且将混合物在室温下搅拌2小时。将反应物用水(5mL)猝灭，倒入冰冷却的水(25mL)中并且用乙酸乙酯(3x20mL)萃取。将有机层用水(20mL)、盐水溶液(20mL)洗涤，并且经硫酸钠干燥。除去溶剂得到粗产物，所述粗产物经硅胶柱色谱法使用乙酸乙酯于石油醚中的梯度纯化。产率：0.7g(35％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:1.07(t,3H),3.35-3.46(m,6H),3.55-3.60(m,1H),4.65(t,1H),5.00(s,2H),7.02(d,1H),7.27-7.35(m,5H)。
中间体112
(4S)-4-(乙氧基甲基)-1,3-噁唑烷-2-酮
在0℃下向中间体111(1.20g，4.49mmol)于四氢呋喃(50mL)中的搅拌溶液添加1M叔丁醇钾于四氢呋喃中的溶液(9.0mL,8.98mmol)，并且将混合物在室温下搅拌30分钟。在0℃下将反应混合物用水(25mL)猝灭并且用乙酸乙酯(3x25mL)萃取。将合并的有机层用水(20mL)、盐水溶液(20mL)洗涤，并且经硫酸钠干燥且在真空下除去溶剂。获得的粗产物通过硅胶快速柱色谱法使用乙酸乙酯于石油醚中的梯度纯化。产率：0.31g(48％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:1.09(t,3H),3.45(q,2H),3.86(quin,1H),3.99(dd,1H),4.31(t,1H),7.72(brs,1H)。注意：两个环CH2质子与DMSO-d6水峰合并。
中间体113
(4S)-3-{6-[(2R,6R)-2,6-二甲基吗啉-4-基]-5-(1,3-二氧戊环-2- 基)-7-氟-1,2-苯并噁唑-3-基}-4-(乙氧基甲基)-1,3-噁唑烷-2-酮
在0℃下经10分钟的时间段向氢化钠(0.06g，2.19mmol)于二甲基甲酰胺(15mL)中的搅拌溶液缓慢添加中间体112(0.32g，2.19mmol)于二甲基甲酰胺(15mL)中的溶液，并且将混合物在室温下搅拌1小时。在相同温度下添加中间体11(0.60g，1.68mmol)于二甲基甲酰胺(15mL)中的溶液，并且将混合物在90℃下加热3小时。将反应物用饱和氯化铵溶液(10mL)猝灭并且用乙酸乙酯(3x10mL)萃取。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥并且在真空下除去溶剂。粗产物通过硅胶柱色谱法使用乙酸乙酯于石油醚中的梯度纯化并且获得呈无色固体的产物。产率：0.20g(25％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:1.00(t,3H),1.12(brs,6H),2.89-2.91(m，2H)，3.19-3.26(m,2H),3.37-3.46(m,2H),3.58-3.61(m,1H),3.83-3.88(m,1H),3.93-4.09(m,6H),4.43(dd,1H),4.67-4.70(m,2H〉，6.16(s,1H),8.27(s,1H)。C22H28FN3O7的MS(ES)MH+:466.5。
中间体114
N-[(苄氧基)羰基]-O-(2-甲氧基乙基)-L-丝氨酸甲酯
使用(S)-氮杂环丙烷-1,2-二甲酸1-苄基2-甲基酯(2.0g，8.03mmol)和2-甲氧基乙醇(4.2mL，53.15mmol)按照针对中间体110的制备所描述的工序合成中间体114。产率：2.0g(80％)。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ:3.16(s,3H),3.38-3.41(m,2H),3.42-3.52(m,2H),3.55-3.65(m,4H),4.26-4.29(m,1H),4.47-4.48(m,1H),5.03(s,2H),7.21-7.34(m,5H),7.71(d,1H)。
中间体115
[(2R)-1-羟基-3-(2-甲氧基乙氧基)丙-2-基]氨基甲酸苄酯
按照针对中间体111的制备所描述的工序使用中间体114(2.0g，6.43mmol)来合成中间体115。产率：1.0g(54％)。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ:3.23(s,3H),3.40-3.41(m,2H),3.44-3.47(m,2H),3.51-3.54(m,2H),3.58-3.629m,1H),4.47(d,1H),4.66(t,1H),4.99(s,2H),7.03(d,1H),7.19-7.34(m,5H)。
中间体116
[(2R)-1-羟基-3-(2-甲氧基乙氧基)丙-2-基]氨基甲酸苄酯
按照针对中间体112的制备所描述的工序使用中间体115(1.0g，3.50mmol)来合成中间体116，除了粗产物不经纯化移至下一步骤。产率：0.32g(粗)。
中间体117
(4S)-3-{6-[(2R,6R)-2,6-二甲基吗啉-4-基]-5-(1,3-二氧戊环-2- 基)-7-氟-1,2-苯并噁唑-3-基}-4-[(2-甲氧基乙氧基)甲基]-1,3-噁唑烷-2- 酮
按照针对中间体113的制备所描述的工序使用中间体116(0.32g，1.82mmol)和中间体11(0.50g，1.40mmol)来合成中间体117。将产物的混合物用甲醇从硅胶柱洗脱。UPLC分析显示所述级分含有37％产物，所述产物不经进一步纯化移至下一步骤。产率：0.15g(37％产物)。C23H30FN3O8的MS(ES)MH+:496.5。
中间体118
5-(1,3-二氧戊环-2-基)-2,3,4-三氟-N’-羟基-N-[(2S)-1-羟基丁-3-烯 -2-基]苯甲脒
使用与针对中间体71的合成所描述的方法类似的方法从中间体16(2.0g，7.1mmol)和(2S)-2-氨基丁-3-烯-1-醇(0.74g，8.54mmol，根据文献工序制备，Eur.J.Chem.2006,12,6607-6620)制备中间体118。产率：1.4g(59％)。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ:3.36-3.40(m,3H),3.95-4.05(m,4H),4.83-5.00(m,3H),5.87-5.90(m,1H),6.01(s,1H),7.26(t,1H),8.30(s,1H),10.12(s,1H)。C14H15F3N2O4的MS(ES)MH+:333.3。
中间体119
(2S)-2-{[5-(1,3-二氧戊环-2-基)-6,7-二氟-1,2-苯并噁唑-3-基]氨基} 丁-3-烯-1-醇
使用与针对中间体72的合成所描述的方法类似的方法从中间体118(1.4g，4.2mmol)制备中间体119。产率：0.75g(57％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:3.56(t,2H),4.01-4.14(m,5H),4.92(t,1H),5.17(d,1H),5.29(d,1H),5.90(ddd,1H),6.09(s,1H),7.34(d,1H),8.07(d,1H)。C14H14F2N2O4的MS(ES)MH+:313.3。
中间体120
(4S)-3-[5-(1,3-二氧戊环-2-基)-6,7-二氟-1,2-苯并噁唑-3-基]-4-乙 烯基-1,3-噁唑烷-2-酮
使用与针对中间体73的合成所描述的方法类似的方法从中间体119(0.75，2.4mmol)制备中间体120。产率：0.60g(74％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:4.00-4.08(m,4H),4.33(dd,1H),4.79(t,1H),5.17(q,1H),5.32(d,1H),5.40(d,1H),5.93(ddd,1H),6.10(s,1H),8.23-8.25(m,1H)。产率：0.60g(74％)。C15H12F2N2O5的MS(ES)MH+:339.2。
中间体121
(R)-3-(5-(1,3-二氧戊环-2-基)-6,7-二氟苯并[d]异噁唑-3-基)-4-(二 氟甲基)噁唑烷-2-酮
向中间体120(0.50g，0.30mmol)于四氢呋喃和水的2:1混合物(20mL)中的搅拌溶液添加氧化锇(IV)(0.2mL，于叔丁醇中的2.5％溶液)。将所得混合物在室温下搅拌10分钟。经一小时的时间段向此中分批添加偏高碘酸钠(3.16g，14.75mmol)，并且将反应混合物搅拌另外16小时。将反应混合物倒入冰水(15mL)中并且用二氯甲烷(3x15ml)萃取，用水(15mL)、盐水洗涤并且将有机层经硫酸钠干燥。在真空下在10℃下除去溶剂，并且将所得残余物溶解于二氯甲烷(15mL)中。在-10℃下添加二乙基氨基三氟化硫(1mL)并且将所得混合物在室温下搅拌6小时，之后用冰冷却的水(10mL)猝灭。将有机层用饱和碳酸氢钠溶液(5mL)、水(5mL)、盐水(5mL)洗涤并且将有机层经硫酸钠干燥。在真空下除去溶剂得到标题化合物，将所述化合物不经进一步纯化移至下一步骤。产率：0.25g(47％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:3.99-4.08(m,4H),4.69-4.79(m,2H),5.08-5.15(m,1H),6.10(s,1H),6.59(dt,1H),8.28(dd,1H)。19FNMR(376.5MHz,DMSO-d6)δ:-130.0(d),132.4(d),-139.9(d),-160.7(d)。C14H10F4N2O5的MS(ES)MH+:363.3。
中间体122
(R)-3-(4-(二氟甲基)-2-氧代噁唑烷-3-基)-6,7-二氟苯并[d]异噁唑 -5-甲醛
在0℃下将6N盐酸(2.0mL)的量添加至中间体121(0.25g，0.69mmol)于1,4-二噁烷(10mL)中的搅拌溶液，并且将混合物在室温下搅拌8小时。将混合物倒入冰冷却的水(25mL)中并且用乙酸乙酯(2x50ml)萃取。将合并的有机层用水(15mL)和盐水溶液(15mL)洗涤，之后经Na2SO4干燥。除去溶剂得到标题产物。产率：0.20g(91％)。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ:4.03-4.04(m,1H),4.71-4.81(m,1H),5.11-5.17(m,1H),6.60(t,1H),8.68(d,1H),10.19(s,1H)。C12H6F4N2O4的MS(ES)MH+:319.2。
中间体123
(3-((R)-4-(二氟甲基)-2-氧代噁唑烷-3-基)-6-((2R,6R)-2,6-二甲基 吗啉代)-7-氟苯并[d]异噁唑-5-甲醛
将中间体122(0.2g，0.63mmol)、二异丙基乙胺(0.15g，1.2mmol)和(2R,6R)-2,6-二甲基吗啉(80mg，0.67mmol)于乙腈(5mL)中的搅拌溶液在80℃下在密封管中加热16小时。在冷却至室温之后，在真空下除去挥发物。将粗产物通过硅胶上色谱法使用CHCl3于乙酸乙酯中的梯度进行纯化以得到呈淡黄色固体的标题化合物。产率：0.16g(62％)。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ:1.20(d,6H),3.02-3.05(m,2H),3.38-3.41(m,2H),4.10-4.16(m,2H),4.70-4.77(m,2H),5.11-5.15(m,1H),6.47(dt,1H),8.54(s,1H),10.31(s,1H)。C18H18F3N3O5的MS(ES)MH+:414.4。
中间体124
(S)-N-(1-环丙基-2-羟乙基)-5-(1,3-二氧戊环-2-基)2.3,4-三氟-N’- 羟基苯甲脒
按照针对中间体118的制备所描述的工序使用(S)-2-氨基-2-环丙基乙醇(1.38g，13.30mmol)和中间体16(2.50g，8.89mmol)来合成中间体124。产率：2.2g(72％)。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ:-0.79--0.89(m,1H),-0.92-0.10(m,1H),0.31(d,2H),0.88-0.90(m,1H),2.15-2.30(m,1H),3.39(t,2H),3.94-4.06(m,4H),4.71(t,1H),5.81(d,1H),6.02(s,1H),7.30(t,1H),9.98(s,1H)。
中间体125
(S)-2-((5-(1,3-二氧戊环-2-基)-6,7-二氟苯并[d]异噁唑-3-基)氨 基)-2-环丙基乙醇
按照针对中间体119的制备所描述的工序使用中间体124(2.20g，6.40mmol)来合成中间体125。产率：1.80g(87％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:0.23-0.25(m,1H),0.37-0.45(m,3H),1.01-1.12(m,1H),3.03-3.05(m,1H),3.53-3.56(m,1H),3.64-3.65(m,1H),4.03-4.10(m,4H),4.75(t,1H),6.08(s,1H),7.16(d,1H),8.05(dd,1H)。C15H16F2N2O4的MS(ES)MH+:327.3。
中间体126
(S)-3-(5-(1,3-二氧戊环-2-基)-6,7-二氟苯并[d]异噁唑-3-基)-4-环丙 基噁唑烷-2-酮
按照针对中间体120的制备所描述的工序使用中间体125(1.20g，3.67mmol)来合成中间体126。产率：1.10g(85％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:0.28-0.31(m,1H),0.42-0.44(m,1H),0.53-0.56(m,2H),1.21-1.23(m,1H),4.01-4.08(m,4H),4.21-4.25(m,1H),4.30-4.33(m,1H),4.70(t,1H),6.10(s,1H)，8.21(dd,1H)。C16H14F2N2O5的MS(ES)MH+:353.3。
中间体127
(S)-3-(4-环丙基-2-氧代噁唑烷-3-基)-6,7-二氟苯并[d]异噁唑-5-甲 醛
按照针对中间体122的制备所描述的工序使用中间体126(1.10g，3.12mmol)来合成中间体127。产率：0.91g(95％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:0.30-0.34(m,1H),0.44-0.49(m,1H),0.56-0.62(m,2H),1.21-1.25(m，1H)，4.24-4.28(m,1H),4.32-4.36(m,1H),4.72(t,1H),8.64(dd,1H),10.20(s,1H)。C14H10F2N2O4的MS(ES)MH+:309.3。
中间体128
3-((S)-4-环丙基-2-氧代噁唑烷-3-基)-6-((2R,6R)-2,6-二甲基吗啉 代)-7-氟苯并[d]异噁唑-5-甲醛
按照针对中间体123的制备所描述的工序使用中间体127来合成中间体128。产率：1.0g(86％)。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ:0.30-0.34(m,1H),0.44-0.49(m,1H),0.57-0.60(m,2H),1.20(d,6H),2.99-3.03(m,2H),3.31-3.39(m,2H),4.10-4.15(m,2H),4.19-4.33(m,2H),4.69(t,1H),8.30(s,1H),8.47(s,1H),10.31(s,1H)。C20H22FN3O5的MS(ES)MH+:404.4。
中间体129
5-(1,3-二氧戊环-2-基)-2,3,4-三氟-N’-羟基-N-(2-羟基-2-(吡啶-2- 基)乙基)苯甲脒
按照针对中间体118的制备所描述的工序使用2-氨基-1-(吡啶-2-基)乙醇(1.35g，6.40mmol)和中间体16(1.50g，5.33mmol)来合成中间体129。产率：1.70g(83％)。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ:3.02-3.09(m,1H),3.19-3.39(m,1H),3.96-4.05(m,4H),4.55(d,1H),5.72(d,1H),6.02(m,2H),7.10(t,1H),7.22(t,1H),7.41(t,1H),7.74(t,1H),8.37(d,1H),9.96(s,1H)。19FNMR(376.5MHz,DMSO-d6)δ:-134.3(dd),-138.3(dd),-159.91(d)。C17H16F3N3O4的MS(ES)MH+:384.3。
中间体130
2-((5-(1,3-二氧戊环-2-基)-6,7-二氟苯并[d]异噁唑-3-基)氨 基)-1-(吡啶-2-基)乙醇
按照针对中间体119的制备所描述的工序使用中间体129(1.60g，4.17mmol)来合成中间体130。产率：1.30g(86％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:3.66(dd,1H),4.00-4.09(m,4H),4.92(t,1H),5.75(d,1H),6.08(s,1H),7.28(dd,1H),7.50(t,1H),7.55(d,1H),7.80(t,1H),8.04(d,1H),8.52(d,1H)。注意：又一个CH质子与DMSO-d6峰合并。C17H15F2N3O4的MS(ES)MH+:364.3。
中间体131
3-(5-(1,3-二氧戊环-2-基)-6,7-二氟苯并[d]异噁唑-3-基)-5-(吡啶-2- 基)噁唑烷-2-酮
按照针对中间体120的制备所描述的工序使用中间体130(1.20g，3.30mmol)来合成中间体131。产率：1.20g(93％)。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ:3.98-4.09(m,4H),4.22-4.35(m,1H),4.58(t,1H),6.01(dd,1H),6.10(s,1H),7.46(dd,1H),7.65(d,1H),7.91(t,1H),8.47(d,1H),8.65(d,1H)。19FNMR(376.5MHz,DMSO-d6)δ:-140.4(d),-161.10(d)。C18H13F2N3O5的MS(ES)MH+:390.3。
中间体132
6,7-二氟-3-(2-氧代-5-(吡啶-2-基)噁唑烷-3-基)苯并[d]异噁唑-5- 甲醛
按照针对中间体122的制备所描述的工序使用中间体131(1.20g，3.09mmol)来合成中间体132。产率：1.0g(94％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:4.35(dd,1H),4.60(t,1H),6.04(dd,1H),7.45-7.49(m,1H),7.70(d,1H),7.93(t,1H),8.65(d,1H),8.86(d,1H),10.20(s,1H)。19FNMR(376.5MHz,DMSO-de)δ:-143.1(d),-160.4(d)。C16H9F2N3O4的MS(ES)MH+:346.3。
中间体133
6-((2R,6R)-2,6-二甲基吗啉代)-7-氟-3-(2-氧代-5-(吡啶-2-基)噁唑 烷-3-基)苯并[d]异噁唑-5-甲醛
按照针对中间体123的制备所描述的工序使用中间体132(1.0g，2.89mmol)来合成中间体133。产率：1.0g(78％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:1.21(d,6H),3.00-3.04(m,2H),3.37-3.40(m,2H),4.12-4.15(m,2H),4.33(dd,1H),4.57(t,1H),6.02(dd,1H),7.46-7.48(m,1H),7.66(d,1H),7.91(t,1H),8.65(d,1H),8.71(s,1H),10.30(s,1H)。C22H21FN4O5的MS(ES)MH+:441.4。
中间体134
5-(1,3-二氧戊环-2-基)-2,3,4-三氟-N’-羟基-N-(2-羟基-1-(吡啶-2- 基)乙基)苯甲脒
按照针对中间体118的制备所描述的工序使用中间体16(1.0g，3.55mmol)来合成中间体134。产率：1.05g(78％)。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ:3.59(t,2H),3.93-4.08(s,5H),4.94(t,1H),5.96(s,1H),6.41(d,1H),7.09(t,1H),7.20-7.25(m,2H),7.72(t,1H),8.43(d,1H),10.20(s,1H)。C17H16F3N3O4的MS(ES)MH+:384.3。
中间体135
2-((5-(1,3-二氧戊环-2-基)-6,7-二氟苯并[d]异噁唑-3-基)氨 基)-2-(吡啶-2-基)乙醇
按照针对中间体119的制备所描述的工序使用中间体134(1.60g，2.60mmol)来合成中间体135。产率：0.78g(73％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:3.79-3.85(m,2H),4.03-4.14(m,4H),4.74(q,1H),5.02(t,1H),6.10(s,1H),7.26(dd,1H),7.41(d,1H),7.72(t,1H),7.74(dd,1H),8.17(d,1H),8.54(d,1H)。C17H15F2N3O4的MS(ES)MH+:364.3。
中间体136
3-(5-(1,3-二氧戊环-2-基)-6,7-二氟苯并[d]异噁唑-3-基)-4-(吡啶-2- 基)噁唑烷-2-酮
按照针对中间体120的制备所描述的工序使用中间体135(1.0g，2.75mmol)来合成中间体136。产率：0.90g(84％)。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ:3.99-4.10(m,4H),4.44(dd,1H),4.97(t,1H),5.75(dd,1H),6.09(s,1H),7.34(dd,1H),7.55(d,1H),7.82(t,1H),8.41(d,1H),8.51(d,1H)。C18H13F2N3O5的MS(ES)MH+:390.3。
中间体137
6,7-二氟-3-(2-氧代-4-(吡啶-2-基)噁唑烷-3-基)苯并[d]异噁唑-5- 甲醛
按照针对中间体122的制备所描述的工序使用中间体136(0.90g，2.31mmol)来合成中间体137。产率：0.75g(94％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:4.49(dd,1H),5.01(t,1H),5.79(dd,1H),7.35-7.38(m,1H),7.59(d,1H),7.85(dt,1H),8.54(d,1H),8.83(d,1H),10.20(s,1H)。C16H9F2N3O4的MS(ES)MH+:346.3。
中间体138
6-((2R,6R)-2,6-二甲基吗啉代)-7-氟-3-(2-氧代-4-(吡啶-2-基)噁唑 烷-3-基)苯并[d]异噁唑-5-甲醛
按照针对中间体123的制备所描述的工序使用中间体137(0.75g，2.17mmol)来合成中间体138。产率：0.85g(89％)。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ:1.20(d,6H),2.96-3.00(m,2H),3.31-3.36(m,2H),4.00-4.13(m,2H),4.45(dd,1H),4.98(t,1H),5.75(dd,1H),7.33(t,1H),7.54(d,1H),7.82(t,1H),8.51(d,1H),8.65(d,1H),10.30(s,1H)。C22H21FN4O5的MS(ES)MH+:441.4。
中间体139
5-(1,3-二氧戊环-2-基)-2,3,4-三氟-N’-羟基-N-(2-羟基-1-(吡啶-4- 基)乙基)苯甲脒
按照针对中间体118的制备所描述的工序使用中间体16(1.08g，3.84mmol)来合成中间体139。产率：0.91g(62％)。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ:3.55-3.68(m,2H),3.82-3.92(m,4H),3.98-4.08(m,1H),5.05(t,1H),5.93(s,1H),6.51(d,1H),6.92-6.96(m,1H),7.11(d,2H),8.41(d,2H),10.30(s,1H)。C17H16F3N3O4的MS(ES)MH+:384.3。
中间体140
2-((5-(1,3-二氧戊环-2-基)-6,7-二氟苯并[d]异噁唑-3-基)氨 基)-2-(吡啶-4-基)乙醇
按照针对中间体119的制备所描述的工序使用中间体139(0.90g，2.34mmol)来合成中间体140。产率：0.60g(71％)。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ:3.73(t,2H),4.00-4.12(m,4H),4.66(q,1H),5.12(t,1H),6.08(s,1H),7.39(d,2H),7.89(d,1H),8.11(t,1H),8.49(d,2H)。C17H15F2N3O4的MS(ES)MH+:364.3。
中间体141
3-(5-(1,3-二氧戊环-2-基)-6,7-二氟苯并[d]异噁唑-3-基)-4-(吡啶-4- 基)噁唑烷-2-酮
按照针对中间体120的制备所描述的工序使用中间体140(0.60g，1.65mmol)来合成中间体141。产率：0.61g(95％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:4.01-4.10(m,4H),4.36(dd,1H),5.02(t,1H),5.75(dd，1H),6.10(s,1H),7.49(dd,2H),8.38(dd,1H),8.55(dd,2H)。C18H13F2N3O5的MS(ES)MH+:390.3。
中间体142
6,7-二氟-3-(2-氧代-4-(吡啶-4-基)噁唑烷-3-基)苯并[d]异噁唑-5- 甲醛
按照针对中间体122TQ-100-14-V的制备所描述的工序使用中间体141(0.60g，1.54mmol)来合成中间体142。产率：0.47g(88％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:4.40(dd,1H),5.05(t,1H),5.77(dd,1H),7.51(d,2H),8.57(d,2H),8.78(d,1H),10.22(s,1H)。C16H9F2N3O4的MS(ES)MH+:346.3。
中间体143
6-((2R,6R)-2,6-二甲基吗啉代)-7-氟-3-(2-氧代-4-(吡啶-4-基)噁唑 烷-3-基)苯并[d]异噁唑-5-甲醛
按照针对中间体123的制备所描述的工序使用中间体142(0.46g，1.33mmol)来合成中间体143。产率：0.52g(89％)。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ:1.36(d,6H),2.87-2.99(m,2H),3.31-3.37(m,2H),4.08-4.12(m,2H),4.36(t,1H),5.01(t,1H),5.74(t,1H),7.46(d,2H),8.54(d,2H),8.62(d,1H),10.31(s,1H)。C22H21FN4O5的MS(ES)MH+:441.4。
中间体144
(2R,3R)-2-氨基-3-甲氧基丁-1-醇
向(2S,3R)-2-氨基-3-甲氧基丁酸甲酯(10.0g，75.19mmol)于四氢呋喃(150mL)中的搅拌溶液添加硼氢化钠(10.28g，270.7mmol)和碘(24.7g，97.77mmol)并且使混合物回流16小时的时间段。将混合物过滤并且在真空下除去挥发物且将粗产物不经进一步纯化移至下一步骤。产率：7.0g(78％)。
中间体145
5-(1,3-二氧戊环-2-基)-2,3,4-三氟-N'-羟基-N-((2R,3R)-1-羟基-3- 甲氧基丁-2-基)苯甲脒
向中间体144(7.0g，58.82mmol)于二甲基甲酰胺(25mL)中的搅拌溶液添加三乙胺(11.91g，117.64mmol)，并且将混合物在室温下搅拌20分钟。向此溶液中添加中间体16(3.50g，12.43mmol)并且将混合物在室温下搅拌另外2小时。将混合物倒入冰冷水(50mL)中并且用乙酸乙酯(3x50mL)萃取。将有机层用水(2x25mL)、盐水溶液(25mL)洗涤，并且经硫酸钠干燥。除去溶剂得到粗产物，将所述粗产物通过硅胶快速柱色谱法使用乙酸乙酯于石油醚中的梯度纯化。产率：1.8g(40％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:1.02(d,3H),2.72-2.74(m,1H),3.22(s,3H),3.41-3.43(m,1H),3.98-4.05(m,4H),4.69(t,1H),5.51(d,1H),6.04(s,1H),7.34(t,1H),10.08(s,1H)。注意：NH和OH质子未出现。19FNMR(376.5MHz,DMSO-d6)δ:-134.33(m),-138.45(m),-159.75(m)。C15H19F3N2O5的MS(ES)MH+:365.2。
中间体146
(2R,3R)-2-((5-(1,3-二氧戊环-2-基)-6,7-二氟苯并[d]异噁唑-3-基) 氨基)-3-甲氧基丁-1-醇
向中间体145(1.8g，4.96mmol)于二甲基甲酰胺(20mL)中的搅拌溶液添加碳酸铯(3.55g，10.90mmol)，并且将混合物在室温下搅拌16小时。将水10mL)添加至混合物并且用乙酸乙酯(3x25mL)萃取。将有机层用水(2x15mL)、盐水溶液(15mL)洗涤，并且经硫酸钠干燥。除去溶剂得到粗产物，将所述粗产物通过硅胶快速柱色谱法使用75％于石油醚中的乙酸乙酯进一步纯化。产率：1.30g(76％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:1.12(d,3H),3.30(s,3H),3.51-3.52(m,1H),3.59-3.66(m,3H),4.01-4.10(m,4H),4.74(t,1H),6.07(s,1H),7.12(d,1H),8.16(d,1H)。19FNMR(376.5MHz,DMSO-d6)δ:-143.58(d),-162.18(d)。C15H18F2N2O5的MS(ES)MH+:345.2。
中间体147
(R)-3-(5-(1,3-二氧戊环-2-基)-6,7-二氟苯并[d]异噁唑-3- 基)-4-((R)-1-甲氧基乙基)噁唑烷-2-酮
在0℃下向中间体146(1.30g，3.78mmol)于乙腈(20mL)中的搅拌溶液添加三乙胺(0.76g，7.56mmol)，并且将混合物搅拌15分钟。在0℃下向此溶液中添加碳酸二(2,5-二氧代吡咯烷-1-基)酯(或)碳酸二琥珀酰亚胺基酯(1.06g，4.16mmol)并且将混合物在室温下搅拌16小时。在真空下除去挥发物并且将残余物溶解于乙酸乙酯(25mL)中，用水(10mL)、盐水溶液(10mL)洗涤并且经硫酸钠干燥。在真空下除去溶剂得到淡黄色固体，将所述固体在Combi-Flash仪器中使用乙酸乙酯于石油醚中的梯度纯化。产率：0.40g(29％)。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ:1.03(d,3H),3.32(s,3H),3.96-4.08(m,4H),4.49-4.53(m,1H),4.63(t,1H),4.78-4.83(m,1H),6.08(s,1H),8.27(d,1H)。19FNMR(376.5MHz,DMSO-d6)δ:-140.41(d),-161.03(d)。C16H16F2N2O6的MS(ES)MH+:371.3。
中间体148
6,7-二氟-3-((R)-4-((R)-1-甲氧基乙基)-2-氧代噁唑烷-3-基)苯并[d]异噁 唑-5-甲醛
在0℃下向中间体147(0.40g，1.08mmol)于1,4-二噁烷(4mL)中的搅拌溶液添加6N盐酸(2mL)，并且将混合物在室温下搅拌1小时。将混合物倒入冰冷却的水(25mL)中并且用乙酸乙酯(3x25mL)萃取。将有机层用水(15mL)、盐水溶液(15mL)洗涤，并且经硫酸钠干燥。除去溶剂得到标题产物。产率：0.35g(99％)。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ:1.03(d,3H),3.32(s,3H),3.96-4.08(m,4H),4.49-4.53(m,1H),4.63(t,1H),4.78-4.83(m,1H),6.08(s,1H),8.27(d,1H)。19FNMR(376.5MHz,DMSO-d6)δ:-140.41(d),-161.03(d)。C14H12F2N2O5的MS(ES)MH+:327.2。
中间体149
6-((2R,6R)-2,6-二甲基吗啉代)-7-氟-3-((R)-4-((R)-1-甲氧基乙基 -2-氧代噁唑烷-3-基)苯并[d]异噁唑-5-甲醛
将中间体148(0.35g，1.07mmol)于乙腈(4mL)中的搅拌溶液添加二异丙基乙胺(0.21g，1.61mmol)，接着添加(2R,6R)-2,6-二甲基吗啉(0.13g，1.07mmol)并且将混合物在80℃下在密封管中加热16小时。将其冷却至室温并且在真空下除去挥发物以获得粗产物，将所述粗产物在Combi-Flash仪器中使用乙酸乙酯于石油醚中的梯度纯化以获得呈淡黄色固体的标题化合物。产率：0.25g(56％)。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ:1.02(d,3H),1.20(d,6H),2.97-3.03(m,2H),3.28(s,3H),3.35-3.39(m,2H),3.97-4.01(m,1H),4.10-4.15(m,2H),4.51-4.54(m,1H),4.63(t,1H),4.81-4.84(m,1H),8.54(s,1H),10.29(s,1H)。19FNMR(376.5MHz,DMSO-d6)δ:-146.80(s)。C20H24FN3O6的MS(ES)MH+:422.5。
中间体150
((2R,3S)-1-羟基-3-甲氧基丁-2-基)氨基甲酸苄酯
向(2S,3S)-2-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-甲氧基丁酸甲酯(根据文献工序制备：Bioorg.Med.Chem.Lett.15(2005)1447-1449，1.60g，5.68mmol)于四氢呋喃和甲醇的3:1混合物(12mL)中的搅拌溶液添加硼氢化钠(0.43g，11.38mmol)，并且将混合物在室温下搅拌2小时。除去挥发物并且将残余物溶解于乙酸乙酯(25mL)中并且用盐水(10mL)洗涤。除去溶剂得到粗产物，所述粗产物通过硅胶柱色谱法使用乙酸乙酯于石油醚中的梯度纯化。产率：1.32g(92％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:1.01(d,3H),3.22(s,3H),3.36-3.42(m,3H),3.57-3.60(m,1H),4.57(t,1H),5.02(s,2H),6.98-7.01(m,1H),7.31-7.37(m,5H)。C13H19F3NO4的MS(ES)MH+:254.4。
中间体151
(2R,3S)-2-氨基-3-甲氧基丁-1-醇
向中间体150(1.32g，5.20mmol)于乙酸乙酯(50mL)中的搅拌溶液添加10％钯碳(0.13g,10wt％)，并且将混合物在室温下在20mm氢压力下搅拌6小时。将混合物过滤并且在真空下除去挥发物且将粗产物不经进一步纯化移至下一步骤。产率：0.47g(47％)
中间体152
5-(1,3-二氧戊环-2-基)-2,3,4-三氟-N'-羟基-N-((2R,3S)-1-羟基-3-甲 氧基丁-2-基)苯甲脒
按照针对中间体145的制备所描述的工序使用中间体151(0.47g，4.02mmol)来合成中间体152。产率：0.50g(35％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:1.00(d,3H),3.02(s,3H),3.27-3.32(m,2H),3.41(d,2H),3.96-4.06(m,4H),4.68(t,1H),5.67(d,1H),6.03(s,1H),7.33-7.34(m,1H),10.03(s,1H)。19FNMR(376.5MHz,DMSO-d6)δ:-134.26(m),-138.79(m),-160.03(m)。C15H19F3N2O5的MS(ES)MH+:365.5。
中间体153
(2R,3S)-2-((5-(1,3-二氧戊环-2-基)-6,7-二氟苯并[d]异噁唑-3-基) 氨基)-3-甲氧基丁-1-醇
按照针对中间体146的制备所描述的工序使用中间体152(0.50g，1.37mmol)来合成中间体153。产率：0.32g(67％)。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ:1.15(d,3H),3.25(s,3H),3.52-3.60(m,4H),3.98-4.10(m,4H),4.70(t,1H),6.06(s,1H),7.09(d,1H),8.09(d,1H)。19FNMR(376.5MHz,DMSO-d6)δ:-143.51(d),-162.06(d)。C15H18F2N2O5的MS(ES)MH+:345.5。
中间体154(R)-3-(5-(1,3-二氧戊环-2-基)-6,7-二氟苯并[d]异噁唑 -3-基)-4-((S)-1-甲氧基乙基)噁唑烷-2-酮
按照针对中间体147的制备所描述的工序使用中间体153(0.25g，0.72mmol)来合成中间体154。产率：0.08g(30％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:1.11(d,3H),3.15(s,3H),3.98-4.08(m,5H),4.55-4.61(m,3H),6.09(s,1H),8.30(d,1H)。19FNMR(376.5MHz,DMSO-d6)δ:-140.43(d),-161.01(d)。C16H16F2N2O6的MS(ES)MH+:371.4
中间体155
6,7-二氟-3-((R)-4-((S)-1-甲氧基乙基)-2-氧代噁唑烷-3-基)苯并[d] 异噁唑-5-甲醛
按照针对中间体148的制备所描述的工序使用中间体154(0.08g，0.22mmol)来合成中间体155。将粗产物不经纯化移至下一步骤。产率：0.06g(85％)。
中间体156
6-((2R,6R)-2,6-二甲基吗啉代)-7-氟-3-((R)-4-((S)-1-甲氧基乙 基)-2-氧代噁唑烷-3-基)苯并[d]异噁唑-5-甲醛
按照针对中间体149的制备所描述的工序使用中间体155(0.06g，0.18mmol)来合成中间体156。将粗产物不经纯化移至下一步骤。产率：0.04g(52％)。C20H24FN3O6的MS(ES)MH+:422.5。
中间体157
2-((二苯基亚甲基)氨基)-2-(吡嗪-2-基)乙酸乙酯
将2-((二苯基亚甲基)氨基)乙酸乙酯(6.0g，22.47mmol)、2-溴吡嗪(7.1g，44.90mmol)、碳酸钾(9.30g，67.40mmol)和四丁基碘化铵(8.10g，22.40mmol)于N-甲基-2-吡咯烷酮(25mL)中的混合物在密封管中在110℃下加热16小时。将混合物倒入水(100mL)中并且用乙酸乙酯(3x50mL)萃取。将有机层用盐水(25mL)洗涤并且经硫酸钠干燥。在真空下除去溶剂得到粗产物，将所述粗产物在Combi-Flash仪器中使用甲醇于氯仿中的梯度纯化。产率：4.90g(63％)。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ:1.16(t,3H),4.07(q,2H),5.26(s,1H),7.18(dd,2H),7.38-7.61(m,8H),8.56(d,1H),8.57(d,1H),8.60(s,1H)。C21H19N3O2的MS(ES)MH+:346.3。
中间体158
2-氨基-2-(吡嗪-2-基)乙酸乙酯
向中间体157(4.9g，14.20mmol)于二噁烷(20mL)中的搅拌溶液添加3N盐酸(20mL)，并且将混合物在室温下搅拌3小时。在真空下完全除去挥发物并且将作为其盐酸盐获得的产物不经纯化移至下一步骤。产率：2.4g(92％)。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ:1.13(t,3H),4.19(q,2H),5.66(s,1H),8.73-8.77(m,2H),8.95(d,1H),9.19(brs,3H)。C8H11N3O2的MS(ES)MH+:182.3。
中间体159
2-((叔丁氧基羰基)氨基)-2-(吡嗪-2-基)乙酸乙酯
向中间体158(2.4g，11.60mmol)于二氯甲烷(25mL)中的搅拌溶液添加二碳酸二叔丁酯(2.88g，12.76mmol)和三乙胺(5mL)，并且使混合物回流2小时。在真空下完全除去挥发物并且将粗产物不经纯化移至下一步骤。产率：2.80g(90％)。
中间体160
(2-羟基-1-(吡嗪-2-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯
向中间体163(2.80g，9.96mmol)于四氢呋喃和甲醇的1:1混合物(50mL)中的搅拌溶液添加硼氢化钠(0.37g，9.96mmol)，并且将混合物在室温下搅拌16小时。在真空下除去挥发物并且将残余物溶解于乙酸乙酯(25mL)中并且用盐水(10mL)洗涤。除去溶剂得到粗产物，将所述粗产物不经纯化移至下一步骤。产率：1.8g(76％)
中间体161
2-氨基-2-(吡嗪-2-基)乙醇
向中间体160(1.80g，7.50mmol)的搅拌溶液添加于二乙醚(20mL)中的3N盐酸，并且将混合物在室温下搅拌3小时。在真空下完全除去挥发物并且将产物不经纯化移至下一步骤。产率：1.1g(83％)。C6H9N3O的MS(ES)MH+:140.2。
中间体162
5-(1,3-二氧戊环-2-基)-2,3,4-三氟-N'-羟基-N-(2-羟基-1-(吡嗪-2- 基)乙基)苯甲脒
按照针对中间体118的制备所描述的工序使用中间体161(1.10g，6.32mmol)和中间体16(1.78g，6.32mmol)来合成中间体162。产率：0.96g(40％)。C15H15F3N4O4的MS(ES)MH+:385.4
中间体163
2-((5-(1,3-二氧戊环-2-基)-6,7-二氟苯并[d]异噁唑-3-基)氨 基)-2-(吡嗪-2-基)乙醇
按照针对中间体119的制备所描述的工序使用中间体162(0.96g，2.50mmol)来合成中间体163。产率：0.52g(55％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:3.87(t,2H),4.00-4.09(m,4H),4.80(q,1H),5.09(t,1H),6.08(s,1H),7.96(d,1H),8.13(d,1H),8.54(d,1H),8.61(d,1H),8.68(s,1H)。C16H14F2N4O4的MS(ES)MH+:365.4。
中间体164
3-(5-(1,3-二氧戊环-2-基)-6,7-二氟苯并[d]异噁唑-3-基)-4-(吡嗪-2- 基)噁唑烷-2-酮
按照针对中间体120的制备所描述的工序使用中间体163(0.25g，0.69mmol)来合成中间体164。产率：0.16g(59％)。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ:3.98-4.09(m,4H),4.54(dd,1H),4.99(t,1H),5.87(dd,1H),6.09(s,1H),8.39(dd,1H),8.61-8.63(m,2H),8.86(d,1H)。19FNMR(376.5MHz,DMSO-d6)δ:-140.24(d),-160.93(d)。C17H12F2N4O5的MS(ES)MH+:391.4。
中间体165
6,7-二氟-3-(2-氧代-4-(吡嗪-2-基)噁唑烷-3-基)苯并[d]异噁唑-5- 甲醛
按照针对中间体122的制备所描述的工序使用中间体164(0.16g，2.41mmol)来合成中间体165。产率：0.12g(86％)。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ:4.56(dd,1H),5.01(t,1H),5.88(dd,1H),8.61-8.64(m,2H),8.80(d,1H),8.88(d,1H),10.18(s,1H)。19FNMR(376.5MHz,DMSO-d6)δ:-142.93(d),-160.18(d)。C15H8F2N4O4的MS(ES)MH+:347.4。
中间体166
6-((2R,6R)-2,6-二甲基吗啉代)-7-氟-3-(2-氧代-4-(吡嗪-2-基)噁唑 烷-3-基)苯并[d]异噁唑-5-甲醛
按照针对中间体123的制备所描述的工序使用中间体165(0.12g，0.35mmol)来合成中间体166。产率：0.12g(80％)。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ:1.21(d,6H),2.98-3.00(m,2H),3.31-3.33(m,2H,合并在DMSO峰中),4.11-4.13(m,2H),4.56(dd,1H),5.01(t,1H),5.88(dd,1H),8.63-8.67(m,3H),8.88(s,1H),10.31(s,1H)。19FNMR(376.5MHz,DMSO-d6)δ:-142.93(d),-160.18(d)。C21H20FN5O5的MS(ES)MH+:442.5。
中间体167
5-(1,3-二氧戊环-2-基)-2,3,4-三氟-N'-羟基-N-(2-羟基-1-(嘧啶-2- 基)乙基)苯甲脒
按照针对中间体118的制备所描述的工序使用2-氨基-2-(嘧啶-2-基)乙醇中间体161(1.0g，5.7mmol)和中间体16(1.60g，5.71mmol)来合成中间体167。产率：1.0g(42％)。C16H15F3N4O4的MS(ES)MH+:385.5
中间体168
2-((5-(1,3-二氧戊环-2-基)-6,7-二氟苯并[d]异噁唑-3-基)氨 基)-2-(嘧啶-2-基)乙醇
按照针对中间体119的制备所描述的工序使用中间体167(1.0g，2.51mmol)来合成中间体168。产率：0.42g(45％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:3.86-3.94(m,2H),4.01-4.11(m,4H),4.84-4.87(m,1H),5.02(t,1H),6.10(s,1H),7.39(t,1H),7.85(d,1H),8.18(d,1H),8.76(d,2H)。19FNMR(376.5MHz,DMSO-d6)δ:-143.35(d),161.90(d)。C16H14F2N4C4的MS(ES)MH+:365.4。
中间体169
3-(5-(1,3-二氧戊环-2-基)-6,7-二氟苯并[d]异噁唑-3-基)-4-(嘧啶-2- 基)噁唑烷-2-酮
按照针对中间体120的制备所描述的工序使用中间体168(0.34g，0.93mmol)来合成中间体169。产率：0.25g(70％)。C17H12F2N4O5的MS(ES)MH+:391.4。
中间体170
6,7-二氟-3-(2-氧代-4-(嘧啶-2-基)噁唑烷-3-基)苯并[d]异噁唑-5- 甲醛
按照针对中间体122的制备所描述的工序使用中间体169(0.25g，2.41mmol)来合成中间体170。将粗产物不经纯化移至下一步骤。产率：0.14g(64％)。C15H8F2N4O4的MS(ES)MH+:347.4。
中间体171
6-((2R,6R)-2,6-二甲基吗啉代)-7-氟-3-(2-氧代-4-(嘧啶-2-基)噁唑 烷-3-基)苯并[d]异噁唑-5-甲醛
按照针对中间体123的制备所描述的工序使用中间体170(0.14g，0.26mmol)来合成中间体171。产率：0.12g(63％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:1.22(d,6H),2.98-3.02(m,2H),3.36-3.39(m,2H),4.11-4.14(m,2H),4.54(dd,1H),5.05(t,1H),5.75(s,1H),7.49-7.52(m,1H),8.69(d,1H),8.81-8.83(m,2H),10.31(s,1H)。19FNMR(376.5MHz,DMSO-d6)δ:-146.69(d)。C21H20FN5O5的MS(ES)MH+:442.5。
中间体172
(S)-5-(1,3-二氧戊环-2-基)-2,3,4-三氟-N'-羟基-N-(1-羟基-3-炔-2- 基)苯甲脒
按照针对中间体118的制备所描述的工序使用(S)-2-氨基丁-3-炔-1-醇(根据来自Garneraldehyde；Eur.J.Org.Chem.2009,3619-3627的文献程序来制备，0.30g，2.44mmol)和中间体16(0.65g，2.32mmol)来合成中间体172。产率：0.53g(65％)。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ:3.16(d,1H),3.50(t,2H),3.60-3.70(m,1H),3.98-4.05(m,4H),5.12(t,1H),6.04-6.10(m,2H),7.34(t,1H),10.23(s,1H)。19FNMR(376.5MHz,DMSO-d6)δ:-133.64(m),-138.05(m),-159.54(m)。C14H13F3N2O4的MS(ES)MH+:331.4。
中间体173
(S)-2-((5-(1,3-二氧戊环-2-基)-6,7-二氟苯并[d]异噁唑-3-基)氨基) 丁-3-炔-1-醇
按照针对中间体119的制备所描述的工序使用中间体172(0.15g，1.55mmol)来合成中间体173。产率：0.27g(55％)。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ:3.24(d,1H),3.65(t,2H),3.98-4.05(m,4H),4.32-4.34(m,1H),5.20(t,1H),6.08(s,1H),7.70(d,1H),8.01(d,1H)。19FNMR(376.5MHz,DMSO-d6)δ:-142.96(d),-161.66(d)。C14H12F2N2O4的MS(ES)MH+:311.4。
中间体174
(S)-3-(5-(1,3-二氧戊环-2-基)-6,7-二氟苯并[d]异噁唑-3-基)-4-乙炔 基噁唑烷-2-酮
按照针对中间体120的制备所描述的工序使用中间体173(0.25g，0.81mmol)来合成中间体174。产率：0.25g(92％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:3.69(d,1H),3.99-4.08(m,4H),4.56(dd,1H),4.85(t,1H),5.41-5.45(m,1H),6.11(s,1H),8.27(dd,1H)。19FNMR(376.5MHz,DMSO-d6)δ:-140.16(d),-160.70(d)。C15H10F2N2O5的MS(ES)MH+:337.4。
中间体175
(S)-3-(4-乙炔基-2-氧代噁唑烷-3-基)-6,7-二氟苯并[d]异噁唑-5-甲 醛
按照针对中间体122的制备所描述的工序使用中间体174(0.25g，0.74mmol)来合成中间体175。产率：0.14g(65％)。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ:3.70(d,1H),4.58(dd,1H),4.86(t,1H),5.41-5.46(m,1H),8.67(dd,1H),10.18(s,1H)。19FNMR(376.5MHz,DMSO-d6)δ:-142.87(d),-159.98(d)。C13H6F2N2O4的MS(ES)MH+:293.3。
中间体176
6-((2R,6R)-2,6-二甲基吗啉代)-3-((S)-4-乙炔基-2-氧代噁唑烷-3- 基)-7-氟苯并[d]异噁唑-5-甲醛
按照针对中间体123的制备所描述的工序使用中间体175(0.14g，0.48mmol)来合成中间体176。产率：0.08g(43％)。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ:1.21(d,6H),2.98-3.04(m,2H),3.36-3.40(m,2H),3.67(d,1H),4.12-4.13(m,2H),4.56(dd,1H),4.81(t,1H),5.39-5.43(m,1H),8.51(s,1H),10.30(s,1H)。19FNMR(376.5MHz,DMSO-d6)δ:-146.52(s)。C19H18FN3O5的MS(ES)MH+:388.5。
中间体177
(S)-3-(7-氯-6-((2R,6R)-2,6-二甲基吗啉代)-5-(1,3-二氧戊环-2-基) 苯并[d]异噁唑-3-基)-4-甲基噁唑烷-2-酮
按照针对中间体42的制备所描述的工序使用(S)-4-甲基噁唑烷-2-酮(根据在Nishiyama,T.；Matsui,Shigeki；Yamada,F.J.Het.Chem.(1986),23(5),1427-9中所描述的工序合成)和中间体52来合成中间体177。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ:1.1(br.s.,3H)1.3(br.s.,3H)1.4(d,3H)2.7-2.8(m,1H)2.95-3.2(m,2H)3.5-3.7(m,1H)3.9-4.1(m,7H)4.6-4.8(m,2H)6.2(s,1H)8.4(s,1H)。C20H24ClN3O6的MS(ES)MH+:438。
中间体178
S(S)-N-[(1S)-2-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基-1-(2-甲基-1,2,4-三 唑-3-基)乙基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺
在-78℃下在氮下将正丁基锂(185ml，462mmol)滴加至1-甲基-1H-[1,2,4]三唑(8g，96.43mmol)于四氢呋喃(1000mL)中的溶液，并且将所述溶液在此温度下搅拌30分钟。在-78℃下滴加于1200mL四氢呋喃中的[S(S)]-N-[2-[[(1,1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷基]氧基]亚乙基]-2-甲基-2-丙烷亚磺酰胺(107g，385mmol)Rech,J.C.等JACS(2007),129(3),490-491)并且搅拌3小时。将混合物用饱和NH4Cl水溶液(200mL)猝灭并且用乙酸乙酯(1000ml×3)萃取。将合并的有机层用饱和NaCl水溶液洗涤并且经Na2SO4干燥。滤出固体，并且浓缩滤液以得到粗材料，将所述粗材料通过硅胶柱色谱法(用20/1至3/1的石油醚/乙酸乙酯梯度洗脱)纯化以得到呈黄色油状物的标题化合物(100g，72％)。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ0.00(s,3H),0.04(s,3H),0.85(s,3H),1.3(s,9H),4.0(s,3H),4.2-4.6(m,2H),4.7(m,1H),7.9(s,1H)。
中间体179
(2S)-2-氨基-2-(2-甲基-1,2,4-三唑-3-基)乙醇
在0℃下将2M于叔丁基甲基醚中的HCl的量(320mL)缓慢添加至中间体178(70g，194mmol)于MeOH(330mL)中的溶液。将混合物在冷却浴中搅拌过夜。添加叔丁基甲基醚(200mL)并且将混合物搅拌1小时。过滤来自混合物的固体以得到呈双-HCl盐的白色固体的标题化合物(23g，87％)。1HNMR(400MHz,D2O)δ3.75(s,3H),3.8(d,2H)4.7(t,1H),7.8(s,1H)。C5H10F2N4O的MS(ES)MH+:143。
中间体180
(S)-2-(5-(1,3-二氧戊环-2-基)-6,7-二氟苯并[d]异噁唑-3-基氨 基)-2-(1-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)乙醇
按照针对中间体17的制备所描述的工序使用中间体179和中间体16来合成中间体180。C15H15F2N5O4的MS(ES)MH+:368。
中间体181
(S)-3-(5-(1,3-二氧戊环-2-基)-6,7-二氟苯并[d]异噁唑-3-基)-4-(1- 甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)噁唑烷-2-酮
按照针对中间体18的制备所描述的工序使用中间体180来合成中间体181。1HNMR(300MHz,CDCl3)δ1.6(br.s.,4H),4.0-4.1(m,2H),4.15(s,3H),4.8-5.0(m,1H),5.8(dd,1H),7.9(s,1H),8.4(dd,1H)。C16H13F2N5O5的MS(ES)MH+:394。
中间体182
(S)-6,7-二氟-3-(4-(1-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-2-氧代噁唑烷-3-基) 苯并[d]异噁唑-5-甲醛
按照针对中间体19的制备所描述的工序使用中间体181来合成中间体182。C14H9F2N2O4的MS(ES)MH+:350。
中间体183
6-((2R,6R)-2,6-二甲基吗啉代)-7-氟-3-((S)-4-(1-甲基-1H-1,2,4-三 唑-5-基)-2-氧代噁唑烷-3-基)苯并[d]异噁唑-5-甲醛
按照针对中间体20的制备所描述的工序使用中间体182来合成中间体183。C20H21FN6O5的MS(ES)MH+:445。
中间体184
S(R)-N-[(1R)-2-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基-1-(2-甲基-1,2,4- 三唑-3-基)乙基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺
在-78℃下在氮下将正丁基锂(38.57mL,96.43mmol)的量滴加至1-甲基-1H-[1,2,4]三唑(8g，96.43mmol)于四氢呋喃(250ml)中的溶液，并且将所述溶液在此温度下搅拌30分钟。在-78℃下滴加于20mL四氢呋喃中的[S(R)]-N-[2-[[(1,1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷基]氧基]亚乙基]-2-甲基-2-丙烷亚磺酰胺(22.3g，80.36mmol)(Seguin,C.等人J.Org.Chem.(2009),74(18),6986-6992)并且搅拌3小时。将混合物用饱和NH4Cl水溶液(40ml)猝灭。在第二批中再次进行以上反应。将在NH4Cl水溶液之后的两批合并并且用乙酸乙酯(100mlx3)萃取。将合并的有机层用饱和NaCl水溶液洗涤并且经Na2SO4干燥。滤出固体，并且浓缩滤液以得到粗材料，将所述粗材料通过硅胶柱色谱法(用20/1至3/1的石油醚/乙酸乙酯梯度洗脱)纯化以得到呈黄色油状物的标题化合物(31.8g，55％)。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ0.00(s,3H),0.04(s,3H),0.85(s,3H),1.3(s,9H),4.0(s,3H),4.2-4.6(m,2H),4.7(m,1H),7.9(s,1H)。
中间体185
(2R)-2-氨基-2-(2-甲基-1,2,4-三唑-3-基)乙醇
在0℃下将2M于叔丁基甲基醚中的HCl的量(210mL)缓慢添加至中间体184(45g，135mmol)于MeOH(210mL)中的溶液。将混合物在冷却浴中搅拌过夜。添加叔丁基甲基醚(200mL)并且将混合物搅拌1小时。过滤来自混合物的固体以得到呈双-HCl盐的白色固体的标题化合物(23g，87％)。1HNMR(400MHz,d4-MeOH)δ3.9(d,2H)4.0(s,3H),4.8(t,1H),8.0(s,1H)。C5H10F2N4O的MS(ES)MH+:143。
中间体186
(R)-2-(5-(1,3-二氧戊环-2-基)-6,7-二氟苯并[d]异噁唑-3-基氨 基)-2-(1-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)乙醇
按照用于制备中间体17的工序使用中间体185和中间体16来合成中间体186。C15H15F2N5O4的MS(ES)MH+:368。
中间体187
(R)-3-(5-(1,3-二氧戊环-2-基)-6,7-二氟苯并[d]异噁唑-3-基)-4-(1- 甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)噁唑烷-2-酮
按照用于制备中间体18的工序使用中间体186来合成中间体187。1HNMR(300MHz,CDCl3)δ1.6(br.s.,4H),4.0-4.1(m,2H),4.15(s,3H),4.75-5.0(m,1H),5.8(dd,1H),7.9(s,1H),8.4(dd,1H)。C16H13F2N5O5的MS(ES)MH+:394。
中间体188
(R)-6,7-二氟-3-(4-(1-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-2-氧代噁唑烷-3- 基)苯并[d]异噁唑-5-甲醛
按照用于制备中间体19的工序使用中间体187来合成中间体188。C14H9F2N2O4的MS(ES)MH+:350。
中间体189
6-((2R,6R)-2,6-二甲基吗啉代)-7-氟-3-((R)-4-(1-甲基-1H-1,2,4-三 唑-5-基)-2-氧代噁唑烷-3-基)苯并[d]异噁唑-5-甲醛
按照用于制备中间体20的工序使用中间体188来合成中间体189。C20H21FN6O5的MS(ES)MH+:445。
中间体190
(2S,3S)-2-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-羟基丁酸甲酯
向(2S,3S)-2-氨基-3-羟基丁酸甲酯(2.5g，14.73mmol)于四氢呋喃和水的1:1混合物(50mL)中的搅拌溶液添加碳酸氢钠(1.9g，22.10mmol)，将混合物冷却至0℃并且经30分钟的时间段向此中滴加氯甲酸苄酯(2.76g，16.21mmol)。然后将混合物在室温下搅拌16小时。将反应混合物用乙酸乙酯(25mL)稀释，将有机层分离，用盐水(25mL)洗涤并且经硫酸钠干燥。在真空下除去溶剂得到粗产物，所述粗产物通过硅胶柱色谱法(230-400目)使用乙酸乙酯于石油醚中的梯度纯化。产率：3.4g(86％)1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:1.09(d,3H),3.89(s,3H),3.99(t,1H),4.01-4.06(m,1H),5.00(d,1H),5.04(s,2H),7.30-7.40(m,5H),7.63(d,1H)。C13H17NO5的MS(ES)MH+:268.1。
中间体191
(2S,3S)-2-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)丁酸 甲酯
向中间体190(2.0g，7.89mmol)于二氯甲烷(20mL)中的搅拌溶液一次性添加对甲苯磺酸吡啶鎓(0.79g，3.16mmol)和2,3-二氢吡喃(1.02g,11.85mmol)，并且将溶液在室温下搅拌16小时。将饱和碳酸氢钠溶液(50mL)添加至反应混合物，分离有机层并且用二氯甲烷(2x50mL)萃取水层。将合并的有机层用水(50mL)和盐水溶液(50mL)洗涤，并且经硫酸钠干燥。除去溶剂得到粗产物，所述粗产物通过快速柱色谱法(硅胶：60-120目)使用乙酸乙酯于石油醚中的梯度纯化。产率：2.4g(87％)。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ:1.10&1.15(d,3H),1.41-1.58(m,6H),3.36-3.43(m,1H),3.63(s,3H),3.69-3.73(m,1H),3.99(q,1H),4.15&4.27(t,1H),4.57&4.72(s,1H),5.03(s,2H),7.28-7.34(m,5H),7.71&7.79(d,1H)。
中间体192
((2R,3S)-1-羟基-3-((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)丁-2-基)氨基甲酸苄 酯
在5℃下向中间体191(2.4g，7.12mmol)于四氢呋喃和甲醇的7:3混合物(20mL)中的搅拌溶液分批添加硼氢化钠(0.32g，8.55mmol)，并且将溶液在室温下搅拌3小时。在真空下除去挥发物并且将残余物溶解于乙酸乙酯(50mL)中并且用盐水(25mL)洗涤。将水层用乙酸乙酯(2x25mL)萃取。将合并的有机层用盐水(25mL)洗涤并且经硫酸钠干燥。除去溶剂得到粗产物，将所述粗产物不经进一步纯化移至下一步骤。产率：1.6g(70％)。
中间体193
(2R,3S)-2-氨基-3-((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)丁-1-醇
向中间体192(1.6g，4.95mmol)于乙酸乙酯(20mL)中的搅拌溶液添加三乙胺(1mL)和10％钯碳(0.16g,10wt％)，并且将混合物在室温下在20mm氢压力下搅拌6小时。将混合物过滤并且在真空下除去挥发物且将粗产物不经纯化移至下一步骤。产率：0.93g(99％)。
中间体194
5-(1,3-二氧戊环-2-基)-2,3,4-三氟-N'-羟基-N-((2R,3S)-1-羟基 -3-((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)丁-2-基)苯甲脒
向中间体194(0.95g，5.02mmol)于二甲基甲酰胺(10mL)中的搅拌溶液添加三乙胺(0.76g，7.53mmol)，并且将混合物在室温下搅拌20分钟。添加中间体16(1.41g，5.02mmol)并且将混合物在室温下搅拌另外2小时。将混合物倒入冰冷水(50mL)中并且用乙酸乙酯(3x50mL)萃取。将有机层用水(2x25mL)、盐水溶液(25mL)洗涤，并且经硫酸钠干燥。除去溶剂得到粗产物，所述粗产物通过硅胶快速柱色谱法使用乙酸乙酯于石油醚中的梯度纯化。此化合物作为非对映体的混合物获得。产率：1.0g(46％)1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:1.01&1.09(d,3H),1.16-1.56(m,6H),2.77-2.79&2.88-2.90(m,1H),3.38-3.78(m,5H),3.99-4.05(m,4H),4.43&4.56(s,1H),4.66&4.74(t,1H),5.69&5.80(d,1H),6.03(s,1H),7.36-7.38(m,1H),10.00&10.09(s,1H)。19FNMR(376.5MHz,DMSO-d6)δ:-133.89(m),-138.56(m),-159.90(m)。C19H25F3N2O6的MS(ES)MH+:435.3。
中间体195
(2R,3S)-2-((5-(1,3-二氧戊环-2-基)-6,7-二氟苯并[d]异噁唑-3-基) 氨基)-3-((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)丁-1-醇
向中间体194(1.0g，2.30mmol)于二甲基甲酰胺(10mL)中的搅拌溶液添加碳酸铯(1.13g，3.45mmol)，并且将混合物在室温下搅拌16小时。将水(10mL)添加至混合物，并且用乙酸乙酯(3x25mL)萃取溶液。将有机层用水(25mL)、盐水溶液(25mL)洗涤，并且经硫酸钠干燥。除去溶剂得到粗产物，所述粗产物通过硅胶快速柱色谱法使用75％于石油醚中的乙酸乙酯进一步纯化。此化合物作为非对映体的混合物获得。产率：0.60g(63％)。C19H24F2N2O6的MS(ES)MH+:415.3。
中间体196
(4R)-3-(5-(1,3-二氧戊环-2-基)-6,7-二氟苯并[d]异噁唑-3- 基)-4-((1S)-1-((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)乙基)噁唑烷-2-酮
在0℃下向中间体195(0.60g，1.45mmol)于乙腈(10mL)中的搅拌溶液添加三乙胺(0.5mL，3.62mmol)，并且将混合物搅拌15分钟。在0℃下向此中添加碳酸二(2,5-二氧代吡咯烷-1-基)酯(或)碳酸二琥珀酰亚胺基酯(0.93g，3.62mmol)并且将混合物在室温下搅拌16小时。在真空下除去挥发物并且将残余物溶解于乙酸乙酯(10mL)中，用水(5mL)、盐水溶液(5mL)洗涤并且经硫酸钠干燥。在真空下除去溶剂得到淡黄色固体，将所述固体在Combi-Flash仪器中使用乙酸乙酯于石油醚中的梯度纯化。此化合物作为非对映体的混合物获得。产率：0.23g(36％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:1.10&1.19(d,3H),1.22-1.72(m,6H),2.85-2.92&3.01-3.12(m,1H),3.65-3.67(m,1H),4.00-4.05(m,4H),4.32-4.35(m,1H),4.57-4.65(m,4H),6.09(s,1H),8.26&8.36(d,1H)。19FNMR(376.5MHz,DMSO-d6)δ:-140.34&-140.59(d),-160.87&161.19(d)。
中间体197
6,7-二氟-3-((R)-4-((S)-1-羟乙基)-2-氧代噁唑烷-3-基)苯并[d]异噁 唑-5-甲醛
在0℃下向中间体196(0.23g，0.68mmol)于1,4-二噁烷(3mL)中的搅拌溶液添加6N盐酸(3mL)，并且将混合物在室温下搅拌1小时。将混合物倒入冰冷却的水(25mL)中并且用乙酸乙酯(3x25mL)萃取。将有机层用水(15mL)、盐水溶液(15mL)洗涤，并且经硫酸钠干燥。除去溶剂得到粗产物，将所述粗产物不经纯化移至下一步骤。产率：0.15g(92％)。C13H10F2N2O5的MS(ES)MH+:313.1。
中间体198
6-((2R,6R)-2,6-二甲基吗啉代)-7-氟-3-((R)-4-((S)-1-羟乙基)-2-氧 代噁唑烷-3-基)苯并[d]异噁唑-5-甲醛
将中间体197(0.15g，0.48mmol)于乙腈(2mL)中的搅拌溶液添加二异丙基乙胺(0.09g，0.72mmol)，接着添加(2R,6R)-2,6-二甲基吗啉(0.06g，0.53mmol)并且将混合物在80℃下在密封管中加热6小时。将溶液冷却至室温并且在真空下除去挥发物以获得粗产物，将所述粗产物在Combi-Flash仪器中使用乙酸乙酯于石油醚中的梯度纯化以获得呈淡黄色固体的标题化合物。产率：0.12g(77％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:1.05(d,3H),1.22(d,6H),2.99-3.04(m,2H),3.36-3.39(m,2H),4.12-4.15(m,2H),4.31-4.33(m,1H),4.52-4.60(m,3H),5.22(d,1H),8.63(s,1H),10.32(s,1H)。19FNMR(376.5MHz,DMSO-d6)δ:-146.94(d)。C19H22FN3O6的MS(ES)MH+:408.3。
中间体199
[(4R)-3-{6-[(2R,6R)-2,6-二甲基吗啉-4-基]-5-(1,3-二氧戊环-2- 基)-7-氟-1,2-苯并噁唑-3-基}2-氧代-1,3-噁唑烷-4-基]甲磺酸甲酯
在0℃下向中间体107(0.3g，0.68mmol)于二氯甲烷(5mL)中的搅拌溶液添加三乙胺(0.14mL，1.02mmol)和甲磺酰氯(1.02mmol，0.12g)，接着添加甲磺酰氯(1.63g，8.55mmol)。将所得溶液在室温下搅拌持续一小时的时间段。将水(2mL)添加至反应混合物，并且用乙酸乙酯(2x10mL)萃取反应混合物。将有机层用盐水溶液(5mL)洗涤，经硫酸钠干燥并且在真空下除去溶剂以获得粗产物，将所述粗产物通过硅胶快速柱色谱法使用乙酸乙酯于己烷中的梯度纯化。产率：0.25g(71％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:1.18(d,6H),2.88-2.92(m,2H),3.18(s,3H),3.21-3.24(m,2H),3.95-4.01(m,2H),4.04-4.10(m,4H),4.46-4.52(m,2H),4.74-4.78(m,2H),4.94-4.95(m,1H),6.17(s,1H),8.23(s,1H)。C21H26FN3O9S的MS(ES)MH+:516.4。
中间体200
[(4S)-3-{6-[(2R,6R)-2,6-二甲基吗啉-4-基]-7-氟-5-甲酰基-1,2-苯并 噁唑-3-基}-2-氧代-1,3-噁唑烷-4-基]乙腈
向中间体199(0.28g，0.54mmol)于乙腈(5mL)中的搅拌溶液添加1M四丁基氟化铵于四氢呋喃中的溶液(0.2mL,0.65mmol)和三甲基氰硅烷(0.08mL,0.65mmol)，并且将混合物在室温下搅拌2天。将水(2mL)添加至反应混合物，并且用乙酸乙酯(2x10mL)萃取反应混合物。将有机层用盐水溶液(5mL)洗涤，经硫酸钠干燥并且在真空下除去溶剂以获得粗产物，将所述粗产物通过硅胶快速柱色谱法使用乙酸乙酯于己烷中的梯度纯化。产率：0.11g(50％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:1.20(d,6H),2.98-3.04(m,2H),3.14-3.20(m,2H),3.32-3.40(m,2H),4.08-4.12(m,2H),4.47-4.51(m,1H),4.81(t,1H),4.90-4.92(m,1H),8.56(s,1H),10.30(s,1H)。C19H19FN4O5的MS(ES)MH+:403.4。
中间体201
(R)-4-((R)-1,2-二羟基乙基)-3-(6-((2R,6R)-2,6-二甲基吗啉 代)-5-(1,3-二氧戊环-2-基)-7-氟苯并[d]异噁唑-3-基)噁唑烷-2-酮
向中间体120(0.50g，1.15mmol)于叔丁醇和水的混合物(10mL；1:1)中的溶液添加AD-mix-β(5.0g)，并且将混合物在室温下搅拌16小时。在0℃下将固体硫酸钠(5.0g)添加至此混合物并且将其在室温下搅拌一小时。将混合物用乙酸乙酯(3x15mL)萃取并且将合并的有机层用水(10mL)、盐水(10mL)洗涤且经硫酸钠干燥。在真空下除去溶剂得到固体，将所述固体不经进一步纯化移至下一步骤。产率：0.50g(93％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:1.22(brs,6H),2.88-2.92(m,2H),3.20-3.22(m,2H),3.32-3.36(m,1H),3.43-3.44(m,1H),3.96-4.01(m,2H),4.03-4.10(m,4H),4.16-4.18(m,1H),4.56-4.62(m,2H),4.75-4.76(m,1H),4.86(t,1H),5.36(d,1H),6.18(s,1H),8.33(s,1H)。C21H26FN3O8的MS(ES)MH+:468.3。
中间体202
(R)-4-((S)-1,2-二羟乙基)-3-(6-((2R,6R)-2,6-二甲基吗啉代)-5-(1,3- 二氧戊环-2-基)-7-氟苯并[d]异噁唑-3-基)噁唑烷-2-酮
按照针对中间体201的制备所描述的工序使用中间体120(0.50g，1.15mmol)和AD-mix-α(5.0g)来合成中间体202。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:1.23(brs,6H),2.87-2.91(m,2H),3.20-3.22(m,2H),3.33-3.36(m,1H),3.43-3.44(m,1H),3.96-4.02(m,2H),4.03-4.10(m,4H),4.16-4.17(m,1H),4.56-4.64(m,2H),4.75-4.76(m,1H),4.86(t,1H),5.36(d,1H),6.18(s,1H),8.33(s,1H)。C21H26FN3O8的MS(ES)MH+:468.3。
中间体203
(5R)-3-{6-[(2R,6R)-2,6-二甲基吗啉-4-基]-5-(1,3-二氧戊环-2-基)-7-氟-1,2-苯并噁唑-3-基}-2-氧代-1,3-噁唑烷-5-甲腈
将中间体89(0.38g，0.84mmol)于三氯乙腈(5mL)中的溶液在95℃下加热2小时。蒸发挥发物并且将粗产物通过硅胶快速柱色谱法使用25％-30％于己烷中的乙酸乙酯的梯度纯化。产率：0.13g(36％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:1.25(brs,6H),2.88-2.92(m,2H),3.22(d,2H),3.96-4.01(m,2H),4.04-4.10(m,4H),4.34-4.37(m,1H),4.48(t,1H),5.93(dd,1H),6.17(s,1H),8.35(s,1H)。C20H21FN4O6的MS(ES)MH+:433.3。
中间体204
(2S,3R)-2-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)丁 酸甲酯
向(2S,3R)-2-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-羟基丁酸甲酯(5.0g，18.72mmol)于二氯甲烷(100mL)中的搅拌溶液一次性添加对甲苯磺酸吡啶鎓(0.47g，1.87mmol)和2,3-二氢吡喃(2.6mL，28.08mmol)，并且将溶液在室温下搅拌16小时。将饱和碳酸氢钠溶液(50mL)添加至反应混合物，分离有机层并且用二氯甲烷(2x50mL)萃取水层。将合并的有机层用水(50mL)和盐水溶液(50mL)洗涤，并且经硫酸钠干燥。除去溶剂得到粗产物，所述粗产物通过快速柱色谱法(硅胶：60-120目)使用乙酸乙酯于石油醚中的梯度纯化。产物作为非对映体的混合物获得。产率：5.9g(90％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:1.10&1.15(d,3H),1.38-1.72(m,6H),3.39-3.41(m,1H),3.60-3.64(m,1H),3.65(s,3H),4.17-4.25(m,2H),4.57&4.67(t,1H),5.05&5.06(s,2H),7.31-7.37(m,5H),7.26&7.58(d,1H)。
中间体205
((2R,3R)-1-羟基-3-((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)丁-2-基)氨基甲酸 苄酯
在5℃下向中间体204(5.90g，16.80mmol)于四氢呋喃和甲醇的7:3混合物(200mL)中的搅拌溶液分批添加硼氢化钠(1.60g，42.02mmol)，并且将溶液在室温下搅拌3小时。在真空下除去挥发物并且将残余物溶解于乙酸乙酯(50mL)中，用水(25mL)洗涤并且用乙酸乙酯(2x25mL)萃取水层。将合并的有机层用盐水溶液(25mL)洗涤并且经硫酸钠干燥。除去溶剂得到粗产物，将所述粗产物不经进一步纯化移至下一步骤。产率：4.9g(90％)。C17H25NO5的MS(ES)MH+:324.3
中间体206
(2R,3R)-2-氨基-3-((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)丁-1-醇
向中间体205(4.9g，15.17mmol)于乙酸乙酯(50mL)中的搅拌溶液添加三乙胺(1mL)和10％钯碳(1.0g，10wt％)，并且将混合物在室温下在20mm氢压力下搅拌6小时。将混合物过滤并且在真空下除去挥发物且将粗产物不经纯化移至下一步骤。产率：2.5g(87％)
中间体207
5-(1,3-二氧戊环-2-基)-2,3,4-三氟-N'-羟基-N-((2R,3R)-1-羟基 -3-((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)丁-2-基)苯甲脒
向中间体206(2.5g，13.22mmol)于二甲基甲酰胺(20mL)中的搅拌溶液添加三乙胺(2.0g，19.84mmol)，并且将混合物在室温下搅拌20分钟。向此中添加中间体16(3.1g，11.24mmol)并且将混合物在室温下搅拌另外2小时。将混合物倒入冰冷水(50mL)中，用乙酸乙酯(3x50mL)萃取，将有机层用水(2x25mL)、盐水(25mL)洗涤且经硫酸钠干燥。除去溶剂得到粗产物，将所述粗产物通过硅胶快速柱色谱法使用乙酸乙酯于石油醚中的梯度纯化。产率：2.2g(38％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:1.08&1.12(d,3H),1.44-1.72(m,6H),3.65-3.85(m,1H),3.36-3.42(m,2H),3.76-3.78(m,2H),3.96-4.05(m,5H),4.57-4.75(m,2H),5.61(d,1H),6.04(s,1H),7.36-7.38(m,1H),10.04&10.08(s,1H)。19FNMR(376.5MHz,DMSO-d6)δ:-134.33(m),-138.45(m),-159.79(m)。C19H25F3N2O6的MS(ES)MH+:435.3。
中间体208
(2R,3R)-2-((5-(1,3-二氧戊环-2-基)-6,7-二氟苯并[d]异噁唑-3-基) 氨基)-3-((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)丁-1-醇
向中间体207(2.2g，5.07mmol)于二甲基甲酰胺(25mL)中的搅拌溶液添加碳酸铯(3.65g，11.19mmol)，并且将混合物在室温下搅拌16小时。将水(10mL)添加至混合物，用乙酸乙酯(3x25mL)萃取，用水(25mL)、盐水溶液(25mL)洗涤有机层且经硫酸钠干燥。除去溶剂得到粗产物，所述粗产物通过硅胶快速柱色谱法使用75％于石油醚中的乙酸乙酯进一步纯化。产率：1.3g(62％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:1.10&1.18(d,3H),1.41-1.80(m,6H),3.42-3.44(m,1H),3.57-3.60(m,2H),3.61-3.63(m,1H),3.70-3.72(m,1H),4.00-4.08(m,5H),4.65-4.77(m,2H),6.07(s,1H),7.09&7.11(d,1H),8.13(t,1H)。19FNMR(376.5MHz,DMSO-d6)δ:-143.47(m),-162.10(m)。C19H24F2N2O6的MS(ES)MH+:415.3。
中间体209
(4R)-3-(5-(1,3-二氧戊环-2-基)-6,7-二氟苯并[d]异噁唑-3- 基)-4-((1R)-1-((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)乙基)噁唑烷-2-酮
在0℃下向中间体208(0.35g，0.84mmol)于乙腈(10mL)中的搅拌溶液添加三乙胺(0.17g，1.69mmol)，并且将混合物搅拌15分钟。在0℃下向此中添加碳酸二(2,5-二氧代吡咯烷-1-基)酯或碳酸二琥珀酰亚胺基酯(0.23g，0.89mmol)并且将混合物在室温下搅拌16小时。在真空下除去挥发物并且将残余物溶解于乙酸乙酯(10mL)中，用水(5mL)、盐水溶液(5mL)洗涤并且经硫酸钠干燥。在真空下除去溶剂得到淡黄色固体，将所述固体在Combi-Flash仪器中使用乙酸乙酯于石油醚中的梯度纯化。产率：0.12g(32％)。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ:1.03&1.09(d,3H),1.22-1.72(m,6H),3.42-3.44(m,1H),3.70-3.85(m,1H),4.00-4.04(m,4H),4.35(t,1H),4.55(t,1H),4.62-4.68(m,2H),4.79(t,1H),6.09(s,1H),8.25(d,1H)。19FNMR(376.5MHz,DMSO-d6)δ:-140.46(d),-161.07(m)。
中间体210
6,7-二氟-3-((R)-4-((R)-1-羟乙基)-2-氧代噁唑烷-3-基)苯并[d]异噁 唑-5-甲醛
在℃下向中间体209(0.12g，0.27mmol)于1,4-二噁烷(2mL)中的搅拌溶液添加6N盐酸(2mL)，并且将混合物在室温下搅拌1小时。将混合物倒入冰冷却的水(25mL)中并且用乙酸乙酯(3x25mL)萃取。将有机层用水(15mL)、盐水溶液(15mL)洗涤，并且经硫酸钠干燥。除去溶剂得到标题产物。产率：0.07g(82％)。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ:0.99(d,3H),4.27-4.28(m,1H),4.57-4.66(m,3H),5.28(d,1H),8.70(d,1H),10.18(s,1H)。19FNMR(376.5MHz,DMSO-d6)δ:-140.41(d),-161.03(d)。C13H10F2N2O5的MS(ES)MH+:313.1。
中间体211
6-((2R,6R)-2,6-二甲基吗啉代)-7-氟-3-((R)-4-((R)-1-羟乙基)-2-氧 代噁唑烷-3-基)苯并[d]异噁唑-5-甲醛
将中间体210(0.07g，0.22mmol)于乙腈(2mL)中的搅拌溶液添加二异丙基乙胺(0.04g，0.34mmol)，接着添加(2R,6R)-2,6-二甲基吗啉(0.03g，0.25mmol)并且将混合物在80℃下在密封管中加热6小时。将溶液冷却至室温并且在真空下除去挥发物以获得粗产物，将所述粗产物在Combi-Flash仪器中使用乙酸乙酯于石油醚中的梯度纯化以获得呈淡黄色固体的标题化合物。产率：0.07g(77％)。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ:0.98(d,3H),1.20(d,6H),2.99-3.03(m,2H),3.35-3.39(m,2H),4.11-4.13(m,1H),4.25-4.35(m,1H),4.57-4.63(m,4H),5.25(d,1H),8.55(s,1H),10.30(s,1H)。19FNMR(376.5MHz,DMSO-d6)δ:-161.03(d)。C19H22FN3O6的MS(ES)MH+:408.3。
中间体212
5-(1,3-二氧戊环-2-基)-2,3,4-三氟-N-((2R,3R)-1-氟-3-羟基丁-2- 基)-N'-羟基苯甲脒
按照用于制备中间体207的工序使用(2R,3S)-3-氨基-4-氟丁-2-醇(0.35g，2.48mmol)(根据文献工序制备；TetLett1985,26,4687和WO2005/66119A2,2005,27-28列)和中间体16(0.84g，2.98mmol)来合成中间体212。产率：0.55g(83％)。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ:1.02(d,3H),3.69(brs,2H),3.97-4.00(m,4H),4.17-4.44(m,3H),5.76(d,1H),6.03(s,1H),7.29(t,1H),10.18(s,1H)。C14H16F4N2O4的MS(ES)MH+:353.4。
中间体213
(2R,3R)-3-((5-(1,3-二氧戊环-2-基)-6,7-二氟苯并[d]异噁唑-3-基) 氨基)-4-氟丁-2-醇
按照用于制备中间体208的工序使用中间体204(0.39g，1.08mmol)来合成中间体213。产率：0.26g(73％)。C14H15F3N2O4的MS(ES)MH+:333.4。
中间体214
(4R,5R)-3-(5-(1,3-二氧戊环-2-基)-6,7-二氟苯并[d]异噁唑-3- 基)-4-(氟甲基)-5-甲基噁唑烷-2-酮
按照用于制备中间体209的工序使用中间体205(0.26g，0.78mmol)来合成中间体214。产率：0.07g(25％)。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ:1.52(d,3H),4.00-4.05(m,4H),4.49(d,1H),4.73(dd,1H),4.86-5.06(m,2H),6.09(s,1H),8.30(d,1H)。19FNMR(376.5MHz,DMSO-d6)δ:-140.27(d),-161.04(d),-236.04(s)。C15H13F3N2O5的MS(ES)MH+:359.3。
中间体215
6,7-二氟-3-((4R,5R)-4-(氟甲基)-5-甲基-2-氧代噁唑烷-3-基)苯并 [d]异噁唑-5-甲醛
按照用于制备中间体210的工序使用中间体206(0.07g，0.20mmol)来合成中间体215。产率：0.06g(85％)。C13H9F3N2O4的MS(ES)MH+:315.3。
中间体216
6-((2R,6R)-2,6-二甲基吗啉代)-7-氟-3-((4R,5R)-4-(氟甲基)-5-甲基 -2-氧代噁唑烷-3-基)苯并[d]异噁唑-5-甲醛
按照用于制备中间体211的工序使用中间体207(0.06g，0.18mmol)来合成中间体216。产率：0.03g(33％)。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ:1.20(d,6H),1.52(d,3H),2.99-3.03(m,2H),4.10-4.12(m,3H),4.49(d,2H),4.73(dd,1H),4.87-4.94(m,1H),5.05(d,1H),8.55(s,1H),10.30(s,1H)。19FNMR(376.5MHz,DMSO-d6)δ:-146.81(s),-236.15(s)。
中间体217
5-(1,3-二氧戊环-2-基)-2,3,4-三氟-N'-羟基-N-((2S,3R)-3-羟基-1-甲 氧基丁-2-基)苯甲脒
按照用于制备中间体207的工序使用(2R,3S)-3-氨基-4-甲氧基丁-2-醇(0.73g，4.70mmol)(根据文献工序制备；TetLett1985,26,4687)(氨基醇被制备为1:3比例的非对映体的混合物)和中间体16(1.45g，5.15mmol)来合成中间体217。所述产物不经进一步纯化移至下一步骤。产率：1.25g(73％)。C15H19F3N2O5的MS(ES)MH+:365.4。
中间体218
(2R,3S)-3-((5-(1,3-二氧戊环-2-基)-6,7-二氟苯并[d]异噁唑-3-基) 氨基)-4-甲氧基丁-2-醇
按照针对中间体208的制备所描述的工序使用中间体217(1.25g，3.43mmol)来合成中间体218。所述产物不经进一步纯化移至下一步骤。产率：0.60g(51％)。C15H18F2N2O5的MS(ES)MH+:345.4。
中间体219
(4S,5R)-3-(5-(1,3-二氧戊环-2-基)-6,7-二氟苯并[d]异噁唑-3- 基)-4-(甲氧基甲基)-5-甲基噁唑烷-2-酮
按照针对中间体209的制备所描述的工序使用中间体218(0.50g，1.45mmol)来合成中间体219。所述产物不经进一步纯化移至下一步骤。产率：0.33g(61％)。C16H16F2N2O6的MS(ES)MH+:371.4。
中间体220
6,7-二氟-3-((4S,5R)-4-(甲氧基甲基)-5-甲基-2-氧代噁唑烷-3-基) 苯并[d]异噁唑-5-甲醛
按照针对中间体210的制备所描述的工序使用中间体219(0.33g，0.89mmol)来合成中间体220，并且产物不经进一步纯化移至下一步骤。产率：0.28g(96％)。C14H12F2N2O5的MS(ES)MH+:327.4。
中间体221
6-((2R,6R)-2,6-二甲基吗啉代)-7-氟-3-((4S,5R)-4-(甲氧基甲基)-5- 甲基-2-氧代噁唑烷-3-基)苯并[d]异噁唑-5-甲醛
按照针对中间体211的制备所描述的工序使用中间体220(0.38g，0.86mmol)来合成中间体221。所述产物不经进一步纯化移至下一步骤。产率：0.28g(77％)。C20H24FN3O6的MS(ES)MH+:422.5。
实施例
实施例1
(2R,4S,4aS)-11-氟-2,4-二甲基-8-(2-氧代-1,3-噁唑烷-3- 基)-1,2,4,4a-四氢-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉 -5.5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮
将中间体17(0.04g，0.1mmol)与巴比妥酸(0.01g，0.1mmol)于乙酸(3ml)中的混合物在110℃下加热2小时。蒸发溶剂并且将残余物溶解于甲醇(1mL)中。添加水(3mL)以沉淀固体，将所述固体过滤且通过反相HPLC(10mM乙酸铵于水中，CH3CN)纯化以得到呈固体形式的作为外消旋混合物的一部分的标题化合物。产率：15mg(35％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:0.9(d,3H),1.1(d,3H),2.9(d,1H),3.1(t,1H),3.7(t,2H),3.8(m,1H),3.9(d,1H),4.1(m,3H),4.6(t,2H),7.75(s,1H),11.5(s,1H),11.8(s,1H)。C21H20FN5O7的MS(ES)MH+:474.4。
实施例1的替代合成
将于乙酸(8mL)与水(2mL)的混合物中的中间体6(800mg，1.95mmol)和吡啶-2,4,6(1H,3H,5H)-三酮(250mg，1.95mmol)在110℃下加热3.5小时。除去溶剂并且将反应混合物使用超临界流体色谱法(40％异丙醇和60％CO2作为流动相的ChiralpakIA柱)以得到作为第一洗脱化合物的呈固体的标题化合物(571mg，61.7％产率)。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ0.9(d,3H)1.1(d,3H)2.8-32(m,2H)7.7(s,1H)11.4(s,1H)11.8(s,1H)。C21H20FN5O7的MS(ES)MH+:474。
还从实施例1的替代合成的合成分离作为从HPLC纯化洗脱的第二组分是(2R,4R,4aR)-11-氟-2,4-二甲基-8-(2-氧代-1,3-噁唑烷-3-基)-1,2,4,4a-四氢-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮(40mg)：
1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ0.95(d,3H),1.3(d,3H),3.1(d,1H),3.45-4.3(m,8H),4.5-4.7(m,2H),7.75(s,1H),11.45(br.s.,1H),11.7(br.s.,1H)。C21H20FN5O7的MS(ES)MH+:474。
实施例2
(2R,4S,4aS)-11-氟-2,4-二甲基-8-[(4R)-4-甲基-2-氧代-1,3-噁唑烷 -3-基]-1,2,4,4a-四氢-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹 啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮
将中间体8(0.15g，0.36mmol)与巴比妥酸(0.04g，0.3mmol)于乙酸(1ml)中的搅拌混合物在85℃下加热16小时。蒸发溶剂，将残余物溶解于甲醇(2ml)中并且添加水(5ml)。将沉淀的固体过滤且通过反相HPLC(10mM于水中的乙酸铵，CH3CN)纯化，从而洗脱两种组分。将第二洗脱组分以固体形式分离并且鉴别为标题化合物。产率：35mg(21％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:0.9(d,3H),1.3(d,3H),1.4(d,3H),2.9(d,1H),3.1(t,1H),3.6-3.65(m,2H),3.8(m,1H),3.9(d,1H),4.1(d,1H),4.2(q,1H),4.6-4.7(m,2H),7.6(s,1H),11.5(s,1H),11.8(s,1H)。C22H22FN5O7的MS(ES)MH+:488.4：[α]D 20＝-239(c＝1；MeOH)。
还从实施例2的合成分离作为从HPLC纯化洗脱的第一组分是(2S,4R,4aR)-11-氟-2,4-二甲基-8-[(4R)-4-甲基-2-氧代-1,3-噁唑烷-3-基]-1,2,4,4a-四氢-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮：
产率：20mg(12％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:0.9(d,3H),1.3(d,3H),1.4(d,3H),2.9(d,1H),3.1(t,1H),3.6(m,2H),3.75(m,1H),3.9(d,1H),4.1(d,1H),4.2(q,1H),4.6-4.7(m,2H),7.6(s,1H),11.45(s,1H),11.8(s,1H)。C22H22FN5O7的MS(ES)MH+:488.4[α]D 20＝+73(c＝1；MeOH)。
除非另外指出，否则使用针对实施例2的合成描述的方法(具有指出的任何变化)从巴比妥酸和所指定的原料制备实施例3至34。
实施例3
(2R,4S,4aS)-11-氟-2,4-二甲基-8-[(5S)-5-甲基-2-氧代-1,3-噁唑烷 -3-基]-1,2,4,4a-四氢-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹 啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮
从中间体9制备实施例3。标题化合物作为来自HPLC纯化的第二洗脱组分获得。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:0.9(d,3H),1.1(d,3H),1.45(d,3H),2.9(d,1H),3.1(t,1H),3.65-3.7(m,2H),3.75(m,2H),3.9(d,1H),4.1(d,1H),4.2(t,1H),4.95(h,1H),7.7(s,1H),11.4(s,1H),11.8(s,1H)。C22H22FN5O7的MS(ES)MH+:488.4；[α]D 20＝-130(c＝1；MeOH)。
还从实施例3的合成分离作为从HPLC纯化洗脱的第一组分是(2S,4R,4aR)-11-氟-2,4-二甲基-8-[(5S)-5-甲基-2-氧代-1,3-噁唑烷-3-基]-1,2,4,4a-四氢-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮：
1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:0.9(d,3H),1.1(d,3H),1.45(d,3H),2.9(d,1H),3.10(t,1H),3.65(m,2H),3.7(m,2H),3.9(d,1H),4.1(d,1H),4.2(t,1H),4.95(h,1H),7.75(s,1H),11.4(s,1H),11.8(s,1H)。C22H22FN5O7的MS(ES)MH+:488.4；[α]D 20＝+101(c＝1；MeOH)。
实施例4
(2R,4S,4aS)-11-氟-2,4-二甲基-8-[(5R)-5-甲基-2-氧代-1,3-噁唑烷 -3-基]-1,2,4,4a-四氢-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹 啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1’H,3'H)-三酮
从中间体10制备实施例4。标题化合物作为来自HPLC纯化的第一洗脱组分获得。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:0.9(d,3H),1.1(d,3H),1.45(d,3H),2.9(d,1H),3.1(t,1H),3.65(m,2H),3.7-3.8(m,2H),3.9(d,1H),4.1(d,1H),4.2(t,1H),4.95(h,1H),7.75(s,1H),11.45(s,1H),11.8(s,1H)。C22H22FN5O7的MS(ES)MH+:488.4；[α]D 20＝-188(c＝1；MeOH)。
还从实施例4的合成分离作为从HPLC纯化洗脱的第二组分是(2S,4R,4aR)-11-氟-2,4-二甲基-8-[(5R)-5-甲基-2-氧代-1,3-噁唑烷-3-基]-1,2,4,4a-四氢-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1’H,3'H)-三酮：
1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:0.9(d,3H),1.1(d,3H),1.45(d,3H),2.9(d,1H),3.1(t,1H),3.65(m,2H),3.7-3.8(m,2H),3.9(d,1H),4.1(d,1H),4.2(t,1H),4.95(h,1H),7.7(s,1H),11.4(s,1H),11.8(s,1H)。C22H22FN5O7的MS(ES)MH+:488.4。[α]D 20＝+179(c＝1；MeOH)。
实施例4的替代合成
第一替代合成
将于乙酸(8mL)与水(2mL)的混合物中的中间体12(1.67g，3.96mmol)和嘧啶-2,4,6(1H,3H,5H)-三酮(0.508g，3.96mmol)在110℃下加热2小时。除去溶剂并且将反应混合物通过超临界流体色谱法(30％异丙醇和70％CO2作为流动相的ChiralpakIA柱)以得到作为第一洗脱组分的呈固体的标题化合物(1.560g，81％)。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ:0.9(d,3H),1.1(d,3H),1.45(d,3H),2.8-3.2(m,2H),3.6-4.3(m,7H),4.9-5.1(m,1H),7.75(s,1H),11.4(s,1H),11.8(s,1H)。C22H22FN5O7的MS(ES)MH+:488。
还从实施例4(第一替代合成)的合成分离作为从HPLC纯化洗脱的第二组分是(2R,4R,4aR)-11-氟-2,4-二甲基-8-[(5R)-5-甲基-2-氧代-1,3-噁唑烷-3-基]-1,2,4,4a-四氢-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮：
1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ:0.95(d,3H),1.3(d,3H),1.5(d,3H),3.1(d,1H),3.5-4.3(m,8H),4.8-5.1(m,1H),7.75(s,1H),11.5(br.S.,2H)。C22H22FN5O7的MS(ES)MH+:488。
实施例4(第二替代合成)
将于3mL的乙醇中的中间体20(64mg，0.17mmol)和嘧啶-2,4,6(1H,3H,5H)-三酮(25mg，0.20mmol)在120℃下加热2小时。除去溶剂并且将反应混合物通过超临界流体色谱法(30％异丙醇和70％CO2作为流动相的ChiralpakIA柱)以得到作为第一洗脱组分的呈固体的标题化合物。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ0.9(d,3H),1.1(d,3H),1.45(d,3H),2.8-3.2(m,2H),3.6-4.3(m,7H),4.9-5.1(m,1H),7.75(s,1H),11.4(s,1H),11.8(s,1H)。C22H22FN5O7的MS(ES)MH+:488。
实施例5
(2R,4S,4aS)-11-氟-2,4-二甲基-8-[(4S)-4-甲基-2-氧代-1,3-噁唑烷 -3-基]-1,2,4,4a-四氢-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹 啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮
从中间体21制备实施例5。将标题化合物通过反相HPLC(10mM于水中的乙酸铵，CH3CN)分离，为两者组分中的第一洗脱组分。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:0.9(d,3H),1.15(d,3H),1.4(d,3H),2.9(d,1H),3.1(t,1H),3.5-3.6(m,2H),3.8(m,1H),3.9(d,1H),4.0(d,1H),4.2(q,1H),4.6-4.7(m,2H),7.6(s,1H),11.5(s,1H),11.8(s,1H)。C22H22FN5O7的MS(ES)MH+:488.4；[α]D 20＝-92(c＝1；MeOH)。
还从实施例5的合成分离作为来自HPLC纯化的第二洗脱组分是(2S,4R,4aR)-11-氟-2,4-二甲基-8-[(4S)-4-甲基-2-氧代-1,3-噁唑烷-3-基]-1,2,4,4a-四氢-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮
1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:0.9(d,3H),1.15(d,3H),1.4(d,3H),2.9(d,1H),3.1(t,1H),3.6-37(m,2H),3.8-4.0(m,1H),3.9(d,1H),4.1(d,1H),4.2(q,1H),4.6-47(m,2H),7.6(s,1H),11.5(s,1H),11.8(s,1H)。C22H22FN5O7的MS(ES)MH+:488.4；[α]D 20＝+224(c＝1；MeOH)。
实施例5的替代合成
将中间体22(1.14g，2.71mmol)和嘧啶-2,4,6(1H,3H,5H)-三酮(0.346g，2.71mmol)于乙酸(8mL)和水(2mL)中的溶液在110℃下加热2小时。除去溶剂并且将反应混合物使用超临界流体色谱法(30％甲醇和70％CO2作为流动相的ChiralpakIC柱)进行纯化。通过溶解于乙腈(30mL)中并且用水(60mL)稀释来进一步纯化第一洗脱化合物以得到呈固体的标题化合物。(0.910g，69.0％产率)。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ:δ0.9(d,3H),1.15(d,3H),1.4(d,3H),2.9(d,1H),3.1(t,1H),3.6-3.7(m,2H),3.8(m,1H),3.9(d,1H),4.1(d,1H),4.2(q,1H),4.6-4.75(m,2H),7.6(s,1H),11.4(s,1H),11.8(s,1H)。C22H22FN5O7的MS(ES)MH+:488。
还从实施例5的替代合成的合成分离作为从HPLC纯化洗脱的第二组分是(2R,4R,4aR)-11-氟-2,4-二甲基-8-[(4S)-4-甲基-2-氧代-1,3-噁唑烷-3-基]-1,2,4,4a-四氢-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1’H,3'H)-三酮：
1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ:1.0(d,3H),1.3(d,3H),1.4(d,3H),3.1(d,1H),3.5-4.3(m,7H),4.5-4.8(m,2H),7.6(s,1H),11.5(br.s.,1H),11.7(br.s.,1H)。C22H22FN5O7的MS(ES)MH+:488。
实施例6
(2R,4S,4aS)-8-[(4S)-4-乙基-2-氧代-1,3-噁唑烷-3-基]-11-氟-2,4-二 甲基-1,2,4,4a-四氢-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹 啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1’H,3'H)-三酮
从中间体23制备实施例6。标题化合物作为来自HPLC纯化的第一洗脱组分获得。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:0.8(t,3H),0.9(d,3H),1.1(d,3H),1.75-1.9(m,2H),2.90(d,1H),1.8(t,1H),3.5(m,1H),3.65-3.7(m,1H),3.8-4.0(m,1H),3.9(d,1H),419(d,1H),4.3-4.3(m,1H),4.55(m,1H),4.6-4.7(m,1H),7.6(s,1H)。C23H24FN5O7的MS(ES)MH+:502.4；[α]D 20＝-24(c＝1；MeOH)。
还从实施例6的合成分离作为从HPLC纯化洗脱的第二组分是(2S,4R,4aR)-8-[(4S)-4-乙基-2-氧代-1,3-噁唑烷-3-基]-11-氟-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氢-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮：
1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:0.8(t,3H),0.9(d,3H),1.1(d,3H),1.8(m,2H),2.9(d,1H),3.1(t,1H),3.5-3.6(m,1H),3.6-3.7(m,1H),3.7(m,1H),3.8(m,1H),3.9(d,1H),4.1(d,1H),4.3-4.35(m,1H),4.5-4.6(m,1H),7.6(s,1H)。C23H24FN5O的MS(ES)MH+:502.47；[α]D 20＝+101(c＝1；MeOH)。
实施例7
(2R,4S,4aS)-8-[(4R)-4-乙基-2-氧代-1,3-噁唑烷-3-基]-11-氟-2,4-二 甲基-1,2,4,4a-四氢-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹 啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮)
从中间体24制备实施例7。标题化合物作为来自HPLC纯化的第二洗脱组分获得。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:0.8(t,3H),0.9(d,3H),1.15(d,3H),1.8-1.85(m,2H),2.9(d,1H),3.1(t,1H),3.65(m,2H),3.8(m,1H),3.9(d,1H),4.1(d,1H),4.3-4.4(m,1H),4.5-4.6(m,1H),4.6-4.7(m,1H),7.6(s,1H),11.5(s,1H),11.8(s,1H)。C23H24FN5O7的MS(ES)MH+:502.4；[α]D 20＝+101(c＝1；MeOH)。
还从实施例7的合成分离作为从HPLC纯化洗脱的第一组分是(2S,4R,4aR)-8-[(4R)-4-乙基-2-氧代-1,3-噁唑烷-3-基]-11-氟-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氢-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮：
1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:0.8(t,3H),0.9(d,3H),1.15(d,3H),1.8-1.9(m,2H),2.9(d,1H),3.1(t,1H),3.6-37(m,2H),3.8(m,1H),3.9(d,1H),4.1(d,1H),4.3-4.35(m,1H),4.65(m,1H),4.65-4.7(m,1H),7.6(s,1H),11.5(s,1H),11.8(s,1H)。C23H24FN5O7的MS(ES)MH+:502.4；[α]D 20＝+59(c＝1；MeOH)。
实施例8
(2R,4S,4aS)-11-氟-2,4-二甲基-8-[(4R)-2-氧代-4-苯基-1,3-噁唑烷 -3-基]-1,2,4,4a-四氢-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹 啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮
从中间体25制备实施例8。标题化合物作为来自HPLC纯化的第二洗脱组分获得。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:0.9(d,3H),1.1(d,3H),2.9(d,1H),3.1(t,1H),3.6-3.7(m,2H),3.8(m,1H),3.9(d,1H),4.1(d,1H),4.3(q,1H),5.0(t,1H),5.7(q,1H),7.2-7.4(m,5H),7.65(s,1H),11.6(brs,2H)。C27H24FN5O7的MS(ES)MH+:550.5；[α]D 20＝-125(c＝0.1；MeOH)。
还从实施例8的合成分离作为从HPLC纯化洗脱的第一组分是(2S,4R,4aR)-11-氟-2,4-二甲基-8-[(4R)-2-氧代-4-苯基-1,3-噁唑烷-3-基]-1,2,4,4a-四氢-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮
1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:0.9(d,3H),1.1(d,3H),2.9(d,1H),3.1(t,1H),3.6-3.7(m,2H),3.7-3.8(m,1H),3.9(d,1H),4.1(d,1H),4.3(q,1H),5.0(t,1H),5.7(q,1H),7.3-7.4(m,5H),7.65(s,1H),11.5(brs,1H),11.9(brs,1H)。C27H24FN5O7的MS(ES)MH+:550.5；[α]D 20＝+249(c＝0.1；MeOH)。
实施例9
(2R,4S,4aS)-11-氟-2,4-二甲基-8-[(4S)-2-氧代-4-苯基-1,3-噁唑烷 -3-基]-1,2,4,4a-四氢-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹 啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮
从中间体26制备实施例9。标题化合物作为来自HPLC纯化的第一洗脱组分获得。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:0.9(d,3H),1.1(d,3H),2.95(d,1H),3.1(t,1H),3.6(m,2H),3.65-3.7(m,1H),3.9(d,1H),4.1(d,1H),4.35(q,1H),5.0(t,1H),5.7(q,1H),7.3-7.65(m,5H),7.65(s,1H),11.5(s,1H),11.8(s,1H)。C27H24FN5O7的MS(ES)MH+:550.5；[α]D 20＝-228(c＝1；MeOH)。
还从实施例9的合成分离作为从HPLC纯化洗脱的第二组分是(2S,4R,4aR)-11-氟-2,4-二甲基-8-[(4S)-2-氧代-4-苯基-1,3-噁唑烷-3-基]-1,2,4,4a-四氢-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1’H,3'H)-三酮：
1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:0.9(d,3H),1.1(d,3H),2.9(d,1H),3.1(t,1H),3.6-3.7(m,2H),3.75(m,1H),3.9(d,1H),4.05(d,1H),4.3(q,1H),5.0(t,1H),5.7(q,1H),7.3-7.4(m,5H),7.7(s,1H),11.5(s,1H),11.8(s,1H)。C27H24FN5O7的MS(ES)MH+:550.5；[α]D 20＝+151(c＝1；MeOH)。
实施例10
(2R,4S,4aS)-8-[(4R)-4-苄基-2-氧代-1,3-噁唑烷-3-基]-11-氟-2,4-二 甲基-1,2,4,4a-四氢-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹 啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮
从中间体27制备实施例10。标题化合物作为来自HPLC纯化的第二洗脱组分获得。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:0.9(d,3H),1.1(d,3H),2.9(d,1H),3.1-3.2(m,3H),3.6-37(m,2H),3.8(m,1H),3.9(d,1H),4.1(d,1H),4.3-4.4(m,1H),4.5(t,1H),4.8(m,1H),7.2(m,2H),7.2-7.3(m,3H),7.6(s,1H),11.65(brs,2H)。C28H26FN5O7的MS(ES)MH+:564.5；[α]D 20＝-274(c＝0.1；MeOH)。
还从实施例10的合成分离作为从HPLC纯化洗脱的第一组分是(2S,4R,4aR)-8-[(4R)-4-苄基-2-氧代-1,3-噁唑烷-3-基]-11-氟-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氢-2’H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5’-嘧啶]-2’,4’,6’(1’H,3’H)-三酮：
1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:0.9(d,3H),1.1(d,3H),2.9(d,1H),3.05-3.1(m,2H),3.1-3.2(m,1H),3.6-3.7(m,2H),3.8(m,1H),3.95(d,1H),4.1(d,1H),4.4(dd,1H),4.5(t,1H),4.8(m,1H),7.2(m,2H),7.2-7.3,(m,3H),7.6(s,1H),11.7(brs,2H)。C28H26FN5O7的MS(ES)MH':562.4；[α]D 20＝+224(c＝0.1；MeOH)。
实施例11
(2R,4S,4aS)-8-[(4S)-4-苄基-2-氧代-1,3-噁唑烷-3-基]-11-氟-2,4-二 甲基-1,2,4,4a-四氢-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹 啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮
从中间体28制备实施例11。标题化合物作为来自HPLC纯化的第一洗脱组分获得。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:0.9(d,3H),1.1(d,3H),2.9(d,1H),3.1-3.15(m,2H),3.2(m,1H),3.6-3.7(m,2H),3.8(m,1H),3.9(d,1H),4.1(d,1H),4.4(dd,1H),4.5(t,1H),4.8(m,1H),7.2(m,2H),7.2-7.3(m,3H),7.6(s,1H),11.45(brs,1H),11.85(brs,1H)。C28H26FN5O7的MS(ES)MH+:564.5；[α]D 20＝-115(c＝0.1；MeOH)。
还从实施例11的合成分离作为从HPLC纯化洗脱的第二组分是(2S,4R,4aR)-8-[(4S)-4-苄基-2-氧代-1,3-噁唑烷-3-基]-11-氟-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氢-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮：
1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:0.9(d,3H),1.1(d,3H),2.9(d,1H),3.1-3.2(m,3H),3.6-3.7(m,2H),3.8(m,1H),3.9(d,1H),4.1(d,1H),4.4(dd,1H),4.55(t,1H),4.8(m,1H),7.2-7.3(m,5H),7.6(s,1H),11.6(brs,2H)。C28H28FN5O7的MS(ES)MH+:564.5；[α]D 20＝+163(c＝0.1；MeOH)。
实施例12
(2R,4S,4aS)-8-(5,5-二甲基-2-氧代-1,3-噁唑烷-3-基)-11-氟-2,4-二 甲基-1,2,4,4a-四氢-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹 啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮
从中间体29制备实施例12。标题化合物作为外消旋混合物的一部分获得。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:0.9(d,3H),1.1(d,3H),1.5(s,6H),2.9(d,1H),3.1(t,1H),3.65-3.7(m,2H),3.8(m,1H),3.9-3.95(m,3H),4.1(d,1H),7.8(s,1H),11.5(s,1H),11.8(s,1H)。C23H24FN5O7的MS(ES)MH+:502.4。
实施例13
(2R,4S,4aS)-8-[(5S)-5-乙基-2-氧代-1,3-噁唑烷-3-基]-11-氟-2,4-二 甲基-1,2,4,4a-四氢-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹 啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1’H,3'H)-三酮
从中间体31制备实施例13。对于所述反应，使用100％乙酸在90℃下加热3小时。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:0.9(d,3H),1.0(t,3H),1.1(d,3H),1.8(q,2H),2.9(d,1H),3.1(t,1H),3.6-3.7(m,2H),3.7-3.8(m,2H),3.9(d,1H),4.1(d,1H),4.2(t,1H),4.8(q,1H),7.8(s,H),11.5(s,H),11.8(s,H)。
实施例14
(2R,4S,4aS)-8-[(5R)-5-乙基-2-氧代-1,3-噁唑烷-3-基]-11-氟-2,4-二 甲基-1,2,4,4a-四氢-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹 啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮
从中间体30制备实施例14。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:0.9(d,3H),1.0(t,3H),1.1(d,3H),1.8(q,2H),2.9(d,1H),3.1(t,1H),3.6-3.7(m,2H),3.8(m,2H),3.9(d,1H),4.1(d,1H),4.2(t,1H),4.8(q,1H),7.7(s,1H),11.45(s,1H),11.8(s,1H)。C23H24FN5O7的MS(ES)MH+:502.4；[α]D 20＝-177(c＝1；MeOH)。
实施例15
(2R,4S,4aS)-11-氟-8-[(4R)-4-(氟甲基)-2-氧代-1,3-噁唑烷-3- 基]-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氢-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并 [4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1’H,3'H)-三酮
从中间体35制备实施例15。标题化合物作为来自HPLC纯化的第一洗脱组分获得。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:0.9(d,3H),1.1(d,3H),2.9(d,1H),3.1(t,1H),3.9(d,1H),3.65-3.7(m,1H),3.75-3.8(m,1H),3.9(d,1H),4.1(d,1H),4.5(dd,1H),4.6(d,1H),4.7(m,1H),4.9(m,2H),7.6(s,1H),11.0(brs,2H)。C22H21F2N5O7的MS(ES)MH+:506.5；[α]D 20＝-74.4(c＝1.12；MeOH)，RT＝14.08分钟。
还从实施例15的合成分离作为从HPLC纯化洗脱的第二组分是(2S,4R,4aR)-11-氟-8-[(4R)-4-(氟甲基)-2-氧代-1,3-噁唑烷-3-基]-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氢-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮
1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:0.9(d,3H),1.1(d,3H),2.9(d,1H),3.1(t,1H),3.6(d,1H),3.65-3.7m,1H),3.75-3.8(m,1H),3.9(d,1H),4.1(d,1H),4.5(dd,1H),4.59(d,1H),4.70(m,1H),4.9(m,2H),7.6(s,1H),11.0(brs,2H)。C22H21F2N5O7的MS(ES)MH+:506.5；[α]D 20＝+210(c＝1.08；MeOH)；RT＝14.78分钟。
实施例16
(2R,4S,4aS)-11-氟-8-[(4S)-4-(氟甲基)-2-氧代-1,3-噁唑烷-3- 基]-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氢-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并 [4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮
从中间体36制备实施例16。标题化合物作为来自HPLC纯化的第二洗脱组分获得。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:0.9(d,3H),1.1(d,3H),2.9(d,1H),3.1(t,1H),3.6(d,1H),3.65-3.7(m,1H),3.75-3.8(m,1H),3.9(d,1H),4.1(d,1H),4.5(dd,1H),4.6(d,1H),4.70(m,1H),4.9(m,2H),7.6(s,1H),11.5(s,1H),11.8(s,1H)。C22H21F2N5O7的MS(ES)MH+:506.5；[α]D 20＝-38.6(c＝1.08；MeOH)，RT＝21.50分钟。
还从实施例16的合成分离作为从HPLC纯化洗脱的第一组分是(2S,4R,4aR)-11-氟-8-[(4S)-4-(氟甲基)-2-氧代-1,3-噁唑烷-3-基]-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氢-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1’H,3'H)-三酮：
1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:0.9(d,3H),1.1(d,3H),2.9(d,1H),3.1(t,1H),3.6(d,1H),3.65-3.7(m,1H),3.75-38(m,1H),3.9(d,1H),4.1(d,1H),4.5(dd,1H),4.6(d,1H),4.70(m,1H),4.9(m,2H),7.6(s,1H),11.5(s,1H),11.8(s,1H)。C22H21F2N5O7的MS(ES)MH+:506.5；[α]D 20＝+64.9(c＝1.07；MeOH)：RT＝17.62分钟。
实施例17和18
(2R,4S,4aS)-11-氟-8-[(4S)-4-(甲氧基甲基)-2-氧代-1,3-噁唑烷-3- 基)-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氢-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并 [4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1’H,3'H)-三酮和(2R,4S,4aS)-11-氟 -8-[(4R)-4-(甲氧基甲基)-2-氧代-1,3-噁唑烷-3-基]-2,4-二甲基-1,2,4,4a- 四氢-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧 啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮
原料是中间体37和中间体38的混合物。根据所指定的工序的所述原料的反应产生以上所示的两种非对映体，连同每种非对映体的相应对映体。两种非对映体经由HPLC分离。每种非对映体连同其对应对映体一起获得。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:0.9(d,3H),1.15(d,3H),2.9(d,1H),3.1(t,1H),3.2(s,3H),3.5-3.55(m,1H),3.65-3.7(m,2H),3.8-3.9(m,2H),3.9(d,1H),4.1(d,1H),4.45-4.5(m,1H),4.6-4.65(m,2H),7.7(s,1H),11.5(brs,1H),11.8(brs,1H)。C23H24FN5O8的MS(ES)MH+:518.4。
使用超临界流体色谱法(20％甲醇和80％CO2作为流动相的ChiralpakIA柱)分离来自实施例17和18的混合物的非对映体。分离出四种组分。
实施例17
(2R,4S,4aS)-11-氟-8-[(4S)-4-(甲氧基甲基)-2-氧代-1,3-噁唑烷-3- 基]-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氢-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并 [4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮
标题化合物作为来自HPLC纯化的第一洗脱组分获得。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ:0.9(s,3H),1.1(s,3H),2.9(d,1H),3.1(t,1H),3.25(s,3H),3.5(d,1H),3.6-3.7(m,2H),3.7-3.9(m,2H),3.9(d,1H),4.1(d,1H),4.4(m,1H),4.6-4.7(m,2H),7.65(s,1H),11.5(brs,2H)。旋光度：[α]D 20＝-128；C23H24FN5O8的MS(ES)MH+:518。
实施例18
(2R,4S,4aS)-11-氟-8-[(4R)-4-(甲氧基甲基)-2-氧代-1,3-噁唑烷-3- 基]-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氢-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并 [4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮
标题化合物作为来自HPLC纯化的第四洗脱组分获得。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ:0.9(s,3H),1.1(s,3H),2.9(d,1H),3.1(t,1H),3.2(s,3H),3.5-3.7(m,3H),3.7-3.9(m,2H),3.9(d,1H),4.1(d,1H),4.4(m,1H),4.6-4.7(m,2H),7.1(s,1H),11.5(brs,2H)。旋光度：[α]D 20＝-189:C23H24FN5O8的MS(ES)MH+:518。
还从实施例17和18的合成分离作为从HPLC纯化洗脱的第二组分是(2S,4R,4aR)-11-氟-8-[(4R)-4-(甲氧基甲基)-2-氧代-1,3-噁唑烷-3-基]-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氢-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮：
1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ:0.88(s,3H),1.1(s,3H),2.9(d,1H),3.1(t,1H),3.25(s,3H),3.5-3.7(m,3H),3.7-3.9(m,2H),3.9(d,1H),4.1(d,1H),4.4(m,1H),4.6-4.7(m,2H),7.6(s,1H),11.55(brs,2H)。旋光度：[α]D 20＝+135；C23H24FN5O8的MS(ES)MH+:518。
还从实施例17和18的合成分离作为从HPLC纯化洗脱的第三组分是(2S,4R,4aR)-11-氟-8-[(4S)-4-(甲氧基甲基)-2-氧代-1,3-噁唑烷-3-基]-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氢-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮：
1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ:0.9(s,3H),1.1(s,3H),2.1(d,1H),3.1(t,1H),3.2(s,3H),3.5-3.7(m,3H),3.7-3.9(m,2H),3.9(d,1H),4.1(d,1H),4.4(m,1H),4.6-4.7(m,2H),7.1(s,1H),11.6(brs,2H)。旋光度：[α]D 20＝+208；C23H24FN5O8的MS(ES)MH+:518。
实施例17的替代合成
将中间体40(0.67g，1.5mmol)与巴比妥酸(0.21g，1.6mmol)于乙酸(10mL)中的搅拌溶液在95℃下加热4小时。蒸发溶剂并且将残余物溶解于甲醇(2mL)中。添加水(5mL)以沉淀固体，收集所述固体并且通过手性HPLC[ChiralpakIC(250X4.6)mm；己烷：乙醇(80:20)；1.0ml/分钟]进行色谱法以分离作为第二洗脱组分的标题化合物。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:0.9(d,3H),1.1(d,3H),2.9(d,1H),3.1(t,1H),3.25(s,3H),3.5(d,1H),3.6-3.7(m,2H),3.85(m,1H),3.85-3.9(d,1H),3.9(d,1H),4.1(d,1H),4.45-4.5(m,1H),4.6-4.7(m,2H),7.65(s,1H),11.5(s,1H),11.8(s,1H)。C23H24FN5O8的MS(ES)MH+:518.4；[α]D 20＝-93.8(c＝1.14；MeOH)，RT＝20.7分钟。
还从实施例17(替代合成)的合成分离作为从HPLC纯化洗脱的第一组分是(2S,4R,4aR)-11-氟-8-[(4S)-4-(甲氧基甲基)-2-氧代-1,3-噁唑烷-3-基]-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氢-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮：
1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:0.9(d,3H),1.1(d,3H),2.9(d,1H),3.1(t,1H),3.2(s,3H),3.5(d,1H),3.6-3.7(m,2H),3.85(m,1H),3.85-3.9(d,1H),3.9(d,1H),4.1(d,1H),4.45-4.5(m,1H),4.6-4.65(m,2H),7.7(s,1H),11.5(s,1H),11.8(s,1H)。C23H24FN5O8的MS(ES)MH+:518.4；[α]D 20＝+159.4(c＝1.04；MeOH)，RT＝17.8分钟。
实施例19
(2R,4S,4aS)-11-氟-8-((S)-5-(氟甲基)-2-氧代噁唑烷-3-基)-2,4-二甲 基-2,4,4a,6-四氢-1H,1'H-螺[异噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉 -5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮
从中间体44制备实施例19。作为来自超临界流体色谱法(ChiralpakIA柱，80％CO2，20％异丙醇)的主要洗脱组分获得标题化合物以分离主要洗脱组分。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ:0.9(d,3H)1.1(d,3H)2.8-3.2(m,2H)3.6-4.0(m,5H)4.0-4.3(m,2H)4.6-5.2(m,3H)7.75(s,1H)11.4(s,1H)11.8(s,1H)。C22H21F2N5O7的MS(ES)MH+:506。
实施例20
(2R,4S,4aS)-11-氯-8-[(5S)-4-(甲氧基甲基)-2-氧代-1,3-噁唑烷-3- 基]-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氢-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并 [4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮
从中间体53制备实施例20。作为来自反相HPLC(具有0.1％TFA的20％-50％乙腈/水梯度)纯化的主要洗脱组分获得标题化合物。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ:0.9(d,3H),1.2(d,3H),2.8-3.2(m,2H),3.3(d,6H),3.5-3.75(m,3H),3.75-4.1(m,3H),4.2(t,1H),4.5(d,1H)4.8-5.3(m,1H),7.85(s,1H),11.4(br.s,1H),11.8(brs.,1H)。C23H24ClN5O8的MS(ES)MH+:534。
实施例21
(2R,4S,4aS)-11-氯-8-[(5R)-4-(甲氧基甲基)-2-氧代-1,3-噁唑烷-3- 基]-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氢-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并 [4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮
原料是中间体54。作为来自反相HPLC(具有0.1％TFA的20％-50％乙腈/水梯度)纯化的主要洗脱组分获得标题化合物。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ:0.9(d,3H),1.2(d,3H),2.9-3.2(m,2H),3.2-3.45(m,6H),3.5-3.75(m,3H),3.8-4.1(m,3H),4.15(t,1H),4.35-4.6(m,1H),4.85-5.1(m,1H),7.85(s,1H)。C23H24ClN5O8的MS(ES)MH+:534。
实施例22
((2R,4S,4aS)-11-氯-2,4-二甲基-8-((R)-5-甲基-2-氧代噁唑烷-3- 基)-2,4,4a,6-四氢-1H,1'H-螺[异噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉 -5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮
从中间体55制备实施例22。作为来自超临界流体色谱法(ChiralpakIA柱，60％CO2，40％MeOH)的主要洗脱组分获得标题化合物。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ:0.9(d,3H)1.2(d,3H)1.45(d,3H)2.9-3.1(m,2H)3.6-3.8(m,3H)3.9-4.05(m,2H)4.2(dd,1H)4.5(d,1H)7.85(s,1H)11.4(s,1H)11.8(s,1H)。C22H22ClN5O7的MS(ES)MH+:504。
实施例23
(2R,4S,4aS)-8-((4S,5R)-4,5-二甲基-2-氧代噁唑烷-3-基)-11-氟-2,4- 二甲基-2,4,4a,6-四氢-1H,1'H-螺[异噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹 啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮
从中间体56制备实施例23。作为来自反相HPLC(具有0.1％TFA的20％-50％乙腈/水梯度)纯化的主要洗脱组分获得标题化合物。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ:0.9(d,3H)1.15(d,3H),1.3(d,3H),1.4(d,3H),2.9(d,1H),3.1(t,1H),3.6-3.7(m,2H),3.7-3.8(m,1H),3.9(d,1H),4.1(d,1H),4.5-4.6(m,1H),4.8-5.1(m,1H),7.6(s,1H),11.4(s,1H),11.8(s,1H)。C23H24FN5O7的MS(ES)MH+:502；[α]D20＝-221(c＝0.1；MeOH)。
实施例24
(2R,4S,4aS)-8-((4R,5S)-4,5-二甲基-2-氧代噁唑烷-3-基)-11-氟-2,4- 二甲基-2,4,4a,6-四氢-1H,1'H-螺[异噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹 啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮
从中间体57制备实施例24。作为来自反相HPLC(具有0.1％TFA的20％-50％乙腈/水梯度)纯化的主要洗脱组分获得标题化合物。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ:0.9(d,3H),1.15(d,3H),1.35(d,3H),1.33(d,3H),2.8-3.0(m,1H),3.1(t,1H),3.5-3.7(m,2H),3.7-3.9(m,1H),3.9(d,1H),4.1(d,1H),4.6(m,1H),5.0(m,1H),7.6(s,1H),11.5(s,1H),11.8(s,1H)。C23H24FN5O7的MS(ES)MH+:502；[α]D20＝-117(c＝0.1；MeOH)。
实施例25
(2R,4S,4aS)-8-((S)-4-烯丙基-2-氧代噁唑烷-3-基)-11-氟-2,4-二甲 基-2,4,4a,6-四氢-1H,1’H-螺[异噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉 -5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮
从中间体61制备实施例25。作为来自反相HPLC(具有0.1％TFA的20％-50％乙腈/水梯度)纯化的主要洗脱组分获得标题化合物。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:0.7-1.0(m,3H),1.1(d,3H),2.55-2.65(m,2H),2.7(d,1H),2.8-3.0(m,2H),3.1(t,1H),3.5-3.7(m,2H),3.7-3.9(m,1H),4.1(d,1H),4.6-4.7(m,2H),5.0-5.3(m,2H),5.7-5.85(m,1H),7.6(s,1H),11.4(s,1H),11.8(s,1H)。C24H24FN5O7的_MS(ES)MH+:514。
实施例26
(2R,4S,4aS)-11-氟-8-((S)-5-(羟甲基)-2-氧代噁唑烷-3-基)-2,4-二甲 基-2,4,4a,6-四氢-1H,1'H-螺[异噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉 -5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮
从中间体43制备实施例26。作为来自超临界流体色谱法(ChiralpakIA柱，70％CO2，30％MeOH)的主要洗脱组分获得标题化合物以分离主要洗脱组分。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ:0.9(d,3H)1.1(d,3H)2.9(d,1H)3.0-3.2(m,1H)3.5-3.8(m,5H)3.85-4.0(m,2H)4.0-4.2(m,2H)4.75-4.9(m,1H)5.2(t,1H)7.8(s,1H)11.4(s,1H)11.75(s,1H)。C22H22FN5O8的MS(ES)MH+:504。
实施例27和28
((2R,4S,4aS)-11-氟-2,4-二甲基-8-[(4R-(四氢-2H-吡喃-4-基)-2-氧 代-1,3-噁唑烷-3-基)-1,2,4,4a-四氢-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁 唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1’H,3'H)-三酮和(2R,4S,4aS)-11-氟 -2,4-二甲基-8-[(4S-(四氢-2H-吡喃-4-基)-2-氧代-1,3-噁唑烷-3- 基)-1,2,4,4a-四氢-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉 -5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1’H,3'H)-三酮
从中间体65制备实施例27和实施例28。通过反相HPLC(具有0.1％TFA的20％-50％乙腈/水梯度)纯化分离标题化合物。分离对应于标题化合物的两种非对映体，但未确定每种噁唑烷酮环的构型。
实施例27是第一洗脱非对映体。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:0.9(d,3H),1.15(d,3H),1.2-1.5(m,4H),2.9(d,1H),3.0-3.3(m,4H),3.6-3.7(m,4H),3.7-4.0(m,3H),4.1(d,1H),4.4-4.7(m,2H),7.6(s,1H),11.5(s,1H),11.8(s,1H)。C26H28FN5O8的MS(ES)MH+:558。
实施例28是第二洗脱非对映体。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:0.9(d,3H)1.15(d,3H)1.2-1.5(m,4H)2.2-2.4(m,1H)2.9(d,1H)3.0-3.3(m,3H)3.5-3.7(m,2H)3.7-4.0(m,4H)4.1(d,1H)4.4-4.7(m,3H)7.6(s,1H)11.45(s,1H)11.8(s,1H)。C26H28FN5O8的MS(ES)MH+:558。
实施例29
(2R,4S,4aS)-11-氟-8-((S)-4-(3-羟丙基)-2-氧代噁唑烷-3-基)-2,4-二 甲基-2,4,4a,6-四氢-1H,1'H-螺[异噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉 -5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮
从中间体69制备实施例29。作为来自超临界流体色谱法(ChiralpakIA柱)的主要洗脱组分获得标题化合物以分离主要洗脱组分。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ:0.9(d,3H)1.1(d,3H)1.3-1.5(m,2H)1.7-2.0(m,2H)2.9(d,1H)3.0-3.2(m,1H)3.3-3.45(m,2H)3.6-3.85(m,3H)3.9-4.15(m,2H)4.3-4.7(m,4H)7.6(s,1H)11.45(s,1H)11.8(s,1H)。C24H26FN5O8的MS(ES)MH+:532。
实施例30
(2R,4S,4aS)-11-氟-8-((S)-4-(3-氟丙基)-氧代噁唑烷-3-基)-2,4-二甲 基-2,4,4a,6-四氢-1H,1'H-螺[异噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉 -5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮
原料是中间体70。作为来自超临界流体色谱法(ChiralpakIA柱)的主要洗脱组分获得标题化合物以分离主要洗脱组分。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ:0.9(d,3H)1.15(d,3H)1.5-2.05(m,4H)2.9(d,1H)3.05-3.2(m,1H)3.6-4.2(m,5H)4.3-4.7(m,5H)7.6(s,1H)11.5(s,1H)11.7(s,1H)。C24H25F2N5O7的MS(ES)MH+:534。
实施例31
(2R,4S,4aS)-11-氟-8-((S)-4-(2-羟乙基)-2-氧代噁唑烷-3-基)-2,4-二 甲基-2,4,4a,6-四氢-1H,1’H-螺[异噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉 -5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮
从中间体74制备实施例31。作为来自超临界流体色谱法(ChiralpakIA柱)的主要洗脱组分获得标题化合物。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ:0.9(d,3H),1.2(d,3H),1.8-1.9(m,1H),2.1-2.3(m,1H),3.0(d,1H),3.1-3.2(m,1H),3.5-3.6(m,2H),3.6-3.7(m,2H),3.8-3.9(m,1H),4.0(d,1H),4.1(d,1H),4.5(q,1H),4.6-4.8(m,3H),7.7(s,1H),11.5,(br.s,2H)。C23H24FN5O8的MS(ES)MH+:518.5。
实施例32
(2R,4S,4aS)-11-氯-8-((S)-5-(氟甲基)-2-氧代噁唑烷-3-基)-2,4-二甲 基-2,4,4a,6-四氢-1H,1’H-螺[异噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉 -5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮
从中间体77制备实施例32。作为来自超临界流体色谱法(ChiralpakIA柱，70％CO2，30％EtOH)的主要洗脱组分获得标题化合物以分离主要洗脱组分。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ:0.9(d,3H)1.3(d,3H)2.9-3.1(m,2H)3.6-3.7(m,2H)3.8-4.0(m,3H)4.25(t,1H)4.45-4.9(m,3H)5.0-5.2(m,1H)7.85(s,1H)11.5(s,1H)11.7(s,1H)。C22H22ClFN5O7的MS(ES)MH+:522。
实施例33
(2R,4S,4aS)-11-氯-8-((S)-4-(3-羟丙基)-2-氧代噁唑烷-3-基)-2,4-二 甲基-2,4,4a,6-四氢-1H,1’H-螺[异噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉 -5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮
从中间体79制备实施例33。作为来自超临界流体色谱法(ChiralpakIA柱，70％CO2，30％MeOH)的主要洗脱组分获得标题化合物以分离主要洗脱组分。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ:0.9(d,3H)1.15(d,3H)1.5-2.05(m,4H)2.9(d,1H)3.05-3.2(m,1H)3.6-4.2(m,5H)4.3-4.7(m,5H)7.6(s,1H)11.5(s,1H)11.7(s,1H)。C24H25F2N5O7的MS(ES)MH+:534。
实施例34
(2R,4S,4aS)-11-氯-8-((S)-4-(3-氟丙基)-2-氧代噁唑烷-3-基)-2,4-二 甲基-2,4,4a,6-四氢-1H,1’H-螺[异噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉 -5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮
从中间体80制备实施例34。作为来自超临界流体色谱法(ChiralpakIA柱，60％CO2，40％MeOH)的主要洗脱组分获得标题化合物以分离主要洗脱组分。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ:0.9(d,3H)1.2(d,3H)1.5-2.0(m,4H)2.9-3.1(m,2H)3.5-3.7(m,2H)3.9-4.05(m,2H)4.3-4.75(m,6H)7.7(s,1H)11.4(s.,1H)11.75(s,1H)。C24H25ClFN5O7的MS(ES)MH+:550。
实施例35
(2R,4S,4aS)-11-氟-8-[(5S)-4-(甲氧基甲基)-2-氧代-1,3-噁唑烷-3- 基]-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氢-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2l噁唑并 [4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮
将于乙酸(8mL)与水(2mL)的混合物中的中间体81(445mg，0.99mmol)和嘧啶-2,4,6(1H,3H,5H)-三酮(126mg，0.99mmol)在110℃下加热2小时。除去溶剂并且将反应混合物使用超临界流体色谱法(25％的85:15乙腈甲醇和75％CO2作为流动相的(S,S)Whelk-O1柱)进行纯化以得到作为第一洗脱化合物的呈固体的(2R,4S,4aS)-11-氟-8-((S)-5-(甲氧基甲基)-2-氧代噁唑烷-3-基)-2,4-二甲基-2,4,4a,6-四氢-1H,1'H-螺[异噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮(368mg，72.1％)。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ:1.0(d,3H),1.3(d,3H),1.4(d,3H),3.1(d,1H),3.-4.3(m,7H),4,5-4.8(m,2H),7.6(s,1H),11.5(br.s.,1H),11.7(br.s.,1H)。C23H24FN5O8的MS(ES)MH+:518。
还从实施例35的合成分离作为从HPLC纯化洗脱的第二组分是((2R,4R,4aR)-11-氟-8-[(5S)-4-(甲氧基甲基)-2-氧代-1,3-噁唑烷-3-基]-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氢-2’H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1’H,3’H)-三酮(27mg)
1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ:0.9(d,3H),1.3(d,3H),3.1(d,1H),3.3(s,3H),3.5-4.3(m,10H),4.8-5.1(m,1H),7.8(s,1H),11.4(s,1H),11.7(s,1H)。C23H24FN5O8的MS(ES)MH+:518。
实施例36
(2R,4S,4aS)-11-氟-8-[(5R)-4-(甲氧基甲基)-2-氧代-1,3-噁唑烷-3- 基]-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氢-2’H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并 [4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1’H,3'H)-三酮
将中间体82(487mg，1.08mmol)和嘧啶-2,4,6(1H,3H,5H)-三酮(138mg，1.08mmol)于乙酸(8mL)和水(2mL)中的混合物在110℃下加热2小时。除去溶剂并且将反应混合物使用超临界流体色谱法(40％异丙醇和60％CO2作为流动相的ChiralpakIA柱)以得到作为第一洗脱组分的呈固体的标题化合物(408mg，73.1％)。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ:0.9(d,3H),1.1(d,3H),2.9-3.2(m,2H),3.3(s,3H),3.6-4.2(m,9H),4.9-5.1(m,1H),7.75(s,1H),11.4(s,1H),11.8(s,1H)。C23H24FN5O8的MS(ES)MH+:518。
实施例37
(2R,4S,4aS)-11-氟-8-[(5R)-5-(羟甲基)-2-氧代-1,3-噁唑烷-3- 基]-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氢-2’H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并 [4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮
向中间体87(0.10g，0.22mmol)于乙酸(5mL)中的溶液添加巴比妥酸(0.04g，0.3mmol)，并且将混合物在95℃下加热3小时。在真空下完全除去挥发物，将水(2mL)添加至残余物并且过滤。使残余物经受使用乙酸铵方法的制备型HPLC以获得纯标题化合物。产率：0.03g(26％)1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:0.88(d,3H),1.13(d,3H),2.90(d,1H),3.13(t,1H),3.58-3.78(m,5H),3.89-3.94(m,2H),4.08-4.14(m,2H),4.86-4.87(m,1H),5.26(t,1H),7.77(s,1H),11.44(s,1H),11.81(s,1H)。C22H22FN5O8的MS(ES)MH+:504.3。
实施例38
(2R,4S,4aS)-11-氟-8-[(5R)-5-(氟甲基)-2-氧代-1,3-噁唑烷-3- 基]-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氢-2’H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并 [4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮
向中间体84(0.05g，0.11mmol)于乙酸(2mL)中的溶液添加巴比妥酸(0.02g，0.11mmol)，并且将混合物在95℃下加热3小时。在真空下完全除去挥发物，将水(2mL)添加至残余物并且过滤。在通过使用乙酸铵和乙腈方法的制备型HPLC纯化之后获得标题化合物。产率：0.02g(34％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:0.89(d,3H),1.14(d,3H),2.90(d,1H),3.11(t,1H),3.62-3.71(m,2H),3.71-3.78(m,1H),3.88-3.95(m,2H),4.10(d,1H),4.22(t,1H),4.67-4.71(m,1H),4.77-4.84(m,1H),5.09-5.12(m,1H),7.76(s,1H),11.46(s,1H),11.83(s,1H)。C22H21F2N5O7的MS(ES)MH+:506.5
实施例39
(2R,4S,4aS)-11-氟-2,4-二甲基-8-((S)-2-氧代-4-乙烯基噁唑烷-3- 基)-2,4,4a,6-四氢-1H,1'H-螺[异噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉 -5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮
向中间体88(0.15g，0.34mmol)于乙酸(5mL)中的搅拌溶液添加巴比妥酸(0.05g，0.38mmol)，并且将混合物在95℃下加热3小时。在真空下除去挥发物并且将所得残余物溶解于甲醇(0.5mL)中，向其加入水(3mL)并且过滤，并且将残余物用水洗涤以获得标题化合物。产率：0.05g(30％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:0.90(d,3H),1.14(d,3H),2.94(d,1H),3.11(t,1H),3.64-3.68(m,2H),3.76-3.80(m,1H),3.94(d,1H),4.10(d,1H),4.28-4.31(m,1H),4.76(t,1H),5.11(q,1H),5.30(d,1H),5.36(d,1H),5.90(dd,1H),7.57(m,1H),11.48(s,1H),11.84(s,1H)。C23H22FN5O7的MS(ES)MH+:500.3。
实施例40
(2R,4S,4aS)-11-氟-8-{(5R)-5-[(羟基亚氨基)甲基]-2-氧代-1,3-噁唑 烷-3-基}-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氢-2’H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3a][1,2]噁 唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮
向中间体89(0.15g,0.3mmol)于乙酸(10mL)中的溶液添加巴比妥酸(0.05g,0.4mmol)，并且将混合物在95℃下加热3小时。在真空下完全除去挥发物，将水(4mL)添加至残余物并且过滤。将因此获得的固体通过硅胶柱色谱法使用氯仿于甲醇中的梯度进一步纯化。我们已获得作为未确定的E和Z异构体(1:2比例)的混合物的此化合物。产率：0.06g(34％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:0.89(d,3H),1.14(d,3H),2.93(d,1H),3.11(t,1H),3.65-3.80(m,3H),3.94(d,1H),4.10(d,1H),4.30-4.32&4.47-4,51(m,1H),4.76&4.88(t,1H),5.24-5.30&5.48-5.55(m,1H),7.10-7.14&7.51-7.75(m,2H),11.28&11.48(s,1H),11.45(s,1H),11.85(s,1H)。C22H21FN6O8的MS(ES)MH+:517.3。
实施例41
(4S)-3-[(2R,4S,4aS)-11-氟-2,4-二甲基-2',4',6'-三氧代 -1,1',2,3',4,4',4a,6'-八氢-2’H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g] 喹啉-5,5'-嘧啶]-8-基]-2-氧代-1,3-噁唑烷-4-甲腈
向中间体92(0.08g，0.17mmol)于乙酸(5mL)中的溶液添加巴比妥酸(0.03g，0.2mmol)，并且将混合物在95℃下加热3小时。在真空下完全除去挥发物，将水(2mL)添加至残余物并且过滤。将获得的固体通过制备型TLC使用氯仿与甲醇的9:1混合物进一步纯化。产率：0.03g(34％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:0.89(d,3H),1.15(d,3H),2.92(d,1H),3.13(t,1H),3.65-3.82(m,2H),3.95(d,1H),4.82-4.86(m,2H),5.58-5.61(m,1H),7.68(s,1H),11.49(s,1H),11.84(s,1H)。C22H19FN6O7的MS(ES)MH+:499.3。
实施例42
(2R,4S,4aS)-11-氟-8-{(4S)-4-[(甲氧基亚氨基)甲基]-2-氧代-1,3-噁 唑烷-3-基}-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氢-2’H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2] 噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮
向中间体93(0.07g，0.15mmol)于乙酸(5mL)中的溶液添加巴比妥酸(0.03g，0.2mmol)，并且将混合物在95℃下加热3小时。在真空下完全除去挥发物，将水(2mL)添加至残余物并且过滤。将获得的固体通过制备型TLC使用氯仿与甲醇的9:1混合物进一步纯化。我们已获得作为未确定的E和Z异构体(～1:0.65比例)的混合物的此化合物。产率：0.03g(30％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:0.89(d,3H),1.13(d,3H),2.93(d,1H),3.11(t,1H),3.65-3.80(m,3H),3.74&3.85(s,3H),3.94(d,1H),4.10(d,1H),4.30-4.32&4.47-4,51(m,1H),4.76&4.88(t,1H),5.24-5.30&5.48-5.55(m,1H),7.27&7.68(d,1H),7.63&7.74(s,1H),11.45(s,1H),11.82(s,1H)。C23H23FN6O8的MS(ES)MH+:531.2。
实施例43
(2R,4S,4aS)-11-氟-8-{(5R)-5-(甲氧基亚氨基)甲基]-2-氧代-1,3-噁 唑烷-3-基}-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氢-2’H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4，3-a][1,2] 噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮
向中间体94(0.13g，0.28mmol)于乙酸(5mL)中的溶液添加巴比妥酸(0.04g，0.28mmol)，并且将混合物在95℃下加热3小时。在真空下完全除去挥发物，将水(2mL)添加至残余物并且过滤。将因此获得的固体通过使用氯仿与甲醇的9:1混合物的制备型TLC进一步纯化。我们已经获得作为未确定的E和Z异构体(约3:1比例)的混合物的此化合物。产率：0.03g(20％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:0.94(d,3H),1.14(d,3H),2.91(d,1H),3.11(t,1H),3.62-3.67(m,2H),3.71-3.81(m,1H),3.84-3.95(m,4H),4.10-4.16(m,2H),4.29-4.39(m,1H),5.37-5.42&5.73-5.75(m,1H),7.30&7.73(d,1H),7.76(s,1H),11.46(s,1H),11.83(s,1H)。C23H23FN6O8的MS(ES)MH+:531.2。
实施例44
(2R,4S,4aS)-8-[(5R)-5-(叠氮甲基)-2-氧代-1,3-噁唑烷-3-基]-11-氟 -2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氢-2’H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并 [4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮
向中间体96(0.12g，0.25mmol)于乙酸(3mL)中的溶液添加巴比妥酸(0.03g，0.25mmol)，并且将混合物在95℃下加热3小时。在真空下完全除去挥发物，将水(2mL)添加至残余物并且过滤。使残余物经受使用甲酸/乙腈方法的制备型HPLC以获得纯标题化合物。产率：0.03g(22％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:0.88(d,3H),1.13(d,3H),2.90(d,1H),3.14(t,1H),3.63-3.70(m,2H),3.74-3.86(m,4H),3.93(d,1H),4.10(d,1H),4.18(t,1H),5.00-5.06(m,1H),7.75(s,1H),11.44(s,1H),11.81(s,1H)。C22H21FN8O7的MS(ES)MH+:529.3。
实施例45
(2R,4S,4aS)-11-氟-2,4-二甲基-8-((R)-4-((甲硫基)甲基)-2-氧代噁 唑烷-3-基)-2,4,4a,6-四氢-1H,1'H-螺[异噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a] 喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮
向中间体101(0.20g,0.43mmol)于乙酸(10mL)中的溶液添加巴比妥酸(0.066g,0.51mmol)，并且将混合物在95℃下加热3小时。在真空下完全除去挥发物，将水(2mL)添加至残余物并且过滤。将因此获得的固体通过使用乙酸铵/乙腈方法的制备型HPLC进一步纯化。产率：0.05g(22％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:0.87(d,3H),1.13(d,3H),2.04(s,3H),2.9(d,1H),3.01-3.07(m,2H),3.10(t,1H),3.62-3.68(m,2H),3.75-3.79(m,1H),3.92(d,1H),4.09(d,1H),4.37(dd,1H),4.67-4.72(m,1H),4.78-4.83(m,1H),7.64(s,1H),11.47(s,1H),11.82(s,1H)。C23H24FN5O7S的MS(ES)MH+:534.4。
实施例46
(2R,4S,4aS)-11-氟-2,4-二甲基-8-((R)-4-((甲磺酰基)甲基)-2-氧代 噁唑烷-3-基)-2,4,4a,6-四氢-1H,1'H-螺[异噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并 [4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮
按照针对实施例45的制备所描述的工序使用中间体102(0.20g，0.40mmol)来合成实施例46。产率：0.06(26％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:0.88(d,3H),1.14(d,3H),2.92(d,1H),3.09-3.14(m,4H),3.63-3.69(m,2H),3.77-3.82(m,2H),3.91-3.95(m,2H),4.09(d,1H),4.64(dd,1H),4.78(t,1H),5.07-5.08(m,1H),7.63(s,1H),11.44(s,1H),11.83(s,1H)。C23H24FN5O9S的MS(ES)MH+:566.2；[α]D 20＝-105.76(c＝1.00；MeOH)。
实施例47和实施例48
(2R,4S,4aS)-8-((R)-4-(叠氮甲基)-2-氧代噁唑烷-3-基)-11-氟-2,4-二 甲基-2,4,4a,6-四氢-1H,1'H-螺[异噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉 -5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮和(2R,4S,4aS)-8-((S)-4-(叠氮甲基)-2-氧代 噁唑烷-3-基)-11-氟-2,4-二甲基-2,4,4a,6-四氢-1H,1’H-螺[异噁唑并 [4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮
向中间体109(0.25g,0.54mmol)于乙酸(10mL)中的溶液添加巴比妥酸(0.07g,0.54mmol)，并且将混合物在90℃下加热16小时。在真空下完全除去挥发物，将水(2mL)添加至残余物并且过滤。将因此获得的固体通过硅胶柱色谱法使用甲醇于氯仿中的梯度进一步纯化。产率：0.25g(86％)。
手性HPLC分析[chiralcelOD-H(250x4.6)mm,5μm；流动相'A'己烷；流动相'B'：乙醇(50:50)]显示存在通过手性HPLC[柱：chiralcelOD-H；流动相：己烷：乙醇(50:50)]分离的1:1比例的两种异构体。
实施例47是第一洗脱非对映体。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:0.89(d,3H),1.15(d,3H),2.92(d,1H),3.12(t,1H),3.64-3.81(m,4H),3.94(d,1H),4.09-4.15(m,2H),4.37-4.43(m,1H),4.67(t,1H),4.76-4.79(m,1H),7.67(s,1H),11.48(s,1H),11.84(s,1H)。RT＝8.21分钟：产率：0.04g。C22H21FN8O7的MS(ES)MH+:529.3
实施例48是第二洗脱非对映体。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:0.89(d,3H),1.15(d,3H),2.92(d,1H),3.11(t,1H),3.63-3.79(m,4H),3.94(d,1H),4.09-4.16(m,2H),4.39-4.41(m,1H),4.67(t,1H),4.74-4.76(m,1H),7.64(s,1H),11.48(s,1H),11.84(s,1H)。RT＝11.40分钟：产率：0.03g。C22H21FN8O7的MS(ES)MH+:529.3
实施例49
(2R,4S,4aS)-8-[(4S)-4-(乙氧基甲基)-2-氧代-1,3-噁唑烷-3-基]-11- 氟-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氢-2’H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并 [4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮
向中间体113(0.20g，0.43mmol)于乙酸(4mL)中的溶液添加巴比妥酸(0.06g，0.43mmol)，并且将混合物在95℃下加热2小时。在真空下完全除去挥发物，并且将残余物通过使用乙酸铵/乙腈方法的反向制备型HPLC进行纯化。将因此获得的灰白色固体在水(1mL)中搅拌10分钟、过滤且干燥。产率：0.08g(35％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:0.88(d,3H),1.03(t,3H),1.14(d,3H),2.91(d,1H),3.11(t,1H),3.40-3.44(m,2H),3.56-3.68(m,3H),3.74-3.80(m,1H),3.85(dd,1H),3.93(d,1H),4.09(d,1H),4.41(dd,1H),4.62-4.70(m,2H),7.64(s,1H),11.45(s,1H),11.81(s,1H)。C24H26FN5O8的MS(ES)MH+:532.4。
实施例50
(2R,4S,4aS)-11-氟-8-{(4S)-4-[(2-甲氧基乙氧基)甲基]-2-氧代-1,3- 噁唑烷-3-基}-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氢-2’H,6H-螺[1,4-噁嗪并 [4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮
按照针对实施例49的制备所描述的工序使用中间体117(0.15g，37％产物)来合成实施例50。通过使用乙酸铵/甲醇方法的反相制备型HPLC来进行纯化。产率：0.01g。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:0.88(d,3H),1.14(d,3H),2.91(d,1H),3.08-3.14(m,1H),3.15(s,3H),3.34-3.38(m,2H),3.50-3.52(m,2H),3.60-3.68(m,3H),3.74-3.80(m,1H),3.88-3.94(m,2H),4.09(d,1H),4.40-4.43(m,1H),4.64-4.68(m,2H),7.64(s,1H),11.60(brs,2H)。C22H28FN5O9的MS(ES)MH+:562.4。
实施例51
(2R,4S,4aS)-8-((R)-4-(二氟甲基)-2-氧代噁唑烷-3-基)-11-氟-2,4-二 甲基-2,4,4a,6-四氢-1H,1'H-螺[异噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉 -5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮
将中间体123(90mg，0.13mmol)与17mg巴比妥酸(17mg，0.13mmol)于2-丙醇(5mL)中的混合物在90℃下加热16小时。在真空下除去挥发物并且将残余物在水(5mL)中搅拌10分钟且过滤。对所收集的固体残余物的分析显示存在两种非对映体的混合物。将固体悬浮在甲醇(5mL)中并且在微波反应器中在150℃下加热2小时。添加水(10mL)并且通过过滤收集固体且在真空下干燥。将因此获得的固体通过制备型HPLC使用乙酸铵水溶液/乙腈梯度进一步纯化。产率：70mg(60％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:0.89(d,3H),1.15(d,3H),2.92(d,1H),3.12(t,1H),3.65-3.72(m,2H),3.78-3.82(m,1H),3.95(d,1H),4.11(d,1H),4.66(dd,1H),4.73(t,1H),5.04-5.10(m,1H),6.59(t,1H),7.64(s,1H),11.65(s,1H),11.83(s,1H)。19FNMR(376.5MHz,DMSO-d6)δ:-130.45(d),-133.57(d),-158.12(s)。C22H20F3N5O7的MS(ES)MH+:524.4。
实施例52
(2R,4S,4aS)-8-((S)-4-环丙基-2-氧代噁唑烷-3-基)-11-氟-2,4-二甲 基-2,4,4a,6-四氢-1H,1’H-螺[异噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉 -5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮
将中间体128(1.0g，2.48mmol)、巴比妥酸(0.04g，0.29mmol)于2-丙醇(2mL)中的混合物在130℃下在微波炉中加热2小时的时间段。在真空下除去挥发物并且将残余物在水(5mL)中搅拌10分钟并过滤。将此悬浮在甲醇(2mL)中并且将水(5mL)添加至其中并过滤。产率：1.0g(79％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:0.28-0.30(m,1H),0.42-0.44(m,1H),0.52-0.57(m,2H),0.89(d,3H),1.15(d,3H),2.94(d,1H),3.12(t,1H),3.62-3.69(m,2H),3.73-3.82(m,1H),3.95(d,1H),4.11(d,1H),4.19-4.21(m,1H),4.23-4.28(m,1H),4.66(t,2H),7.53(s,1H),11.48(s,1H),11.84(s,1H)。C24H24FN5O7的MS(ES)MH+:514.4。
实施例53和54
(2R,4S,4aS)-11-氟-2,4-二甲基-8-((R)-2-氧代-5-(吡啶-2-基)噁唑烷 -3-基)-2,4,4a,6-四氢-1H,1'H-螺[异噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉 -5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮和(2R,4S,4aS)-11-氟-2,4-二甲基-8-((S)-2- 氧代-5-(吡啶-2-基)噁唑烷-3-基)-2,4,4a,6-四氢-1H,1'H-螺[异噁唑并 [4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮
将中间体133(1.0g，2.27mmol)、巴比妥酸(0.32g，2.50mmol)于2-丙醇(10mL)中的混合物在130℃下在微波炉中加热2小时的时间段。在真空下除去挥发物并且将残余物在水(5mL)中搅拌10分钟并过滤。将残余物在Combi-Flash仪器中使用甲醇于氯仿中的梯度纯化。产率：1.0g(80％)。手性HPLC分析显示[柱：ChiralpakIC(250x4.6)mm流动相：己烷：乙醇(25:75)]存在45％+6％+5％+42％的异构体。将两种主要异构体通过手性HPLC[柱：ChiralpakIC；流动相：己烷：乙醇(25:75)]分离。
实施例53是第一洗脱非对映体。RT＝8.98分钟：[α]D 25＝-197.07(c＝0.123；二甲基甲酰胺)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:0.88(d,3H),1.13(d,3H),2.92(d,1H),3.11(t,1H),3.63-3.70(m,2H),3.76-3.81(m,1H),3.93(d,1H),4.10(d,1H),4.26(dd,1H),4,54(t,1H),5.95(dd,1H),7.45(ddd,1H),7.62(d,1H),7.78(s,1H),7.91(dt,1H),8.65(d,1H),11.40(s,1H),11.80(s,1H)。19FNMR(376.5MHz,DMSO-d6)δ:-158.1(s)。产率：0.25g。C26H23FN6O7的MS(ES)MH+:551.4。
实施例54是第二洗脱非对映体。RT＝17.50分钟：[α]D 25＝-109.13(c＝0.103；二甲基甲酰胺)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:0.88(d,3H),1.14(d,3H),2.92(d,1H),3.12(t,1H),3.62-3.69(m,2H),3.77-3.81(m,1H),3.93(d,1H),4.10(d,1H),4.28(dd,1H),4,52(t,1H),5.95(dd,1H),7.45(ddd,1H),7.63(d,1H),7.78(s,1H),7.91(dt,1H),8.64(d,1H),11.40(s,1H),11.80(s,1H)。19FNMR(376.5MHz,DMSO-d6)δ:-158.1(s)。产率：0.22g。C26H23FN6O7的MS(ES)MH+:551.4
实施例55和56
(2R,4S,4aS)-11-氟-2,4-二甲基-8-((R)-2-氧代-4-(吡啶-2-基)噁唑烷 -3-基)-2,4,4a,6-四氢-1H,1'H-螺[异噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉 -5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮和(2R,4S,4aS)-11-氟-2,4-二甲基-8-((S)-2- 氧代-4-(吡啶-2-基)噁唑烷-3-基)-2,4,4a,6-四氢-1H,1'H-螺[异噁唑并 [4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮
将中间体138(1.0g，2.27mmol)、巴比妥酸(0.32g，2.50mmol)于2-丙醇(10mL)中的混合物在130℃下在微波炉中加热2小时。在真空下除去挥发物并且将残余物在水(5mL)中搅拌10分钟并过滤。将残余物在Combi-Flash仪器中使用甲醇于氯仿中的梯度纯化。产率：0.95g(90％)。手性HPLC分析显示[柱：ChiralpakIC(250x4.6)mm流动相：己烷：乙醇(25:75)]存在45％+6％+5％+42％的异构体。将两种主要异构体通过手性HPLC[柱：ChiralpakIC；流动相：己烷：乙醇(25:75)]分离。
实施例55是第一洗脱非对映体。RT＝10.22分钟：[α]D 25＝-339.4(c＝0.10；二甲基甲酰胺)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:0.88(d,3H),1.12(d,3H),2.91(d,1H),3.09(t,1H),3.60-3.67(m,2H),3.71-3.76(m,1H),3.93(d,1H),4.09(d,1H),4.35-4.43(m,1H),4.94(t,1H),5.72(dd,1H),7.33-7.37(m,1H),7.51(d,1H),7.75(s,1H),7.82(dt,1H),8.54(d,1H),11.48(s,1H),11.83(s,1H)。19FNMR(376.5MHz,DMSO-d6)δ:-158.3(s)。产率：0.20g。C26H23FN6O7的MS(ES)MH+:551.4。
实施例56是第二洗脱非对映体。RT＝6.67分钟：[α]D 25＝-109.13(c＝0.112；二甲基甲酰胺)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:0.89(d,3H),1.12(d,3H),2.92(d,1H),3.08(t,1H),3.64-3.67(m,2H),3.69-3.71(m,1H),3.92(d,1H),4.07(d,1H),4.39-4.42(m,1H),4.94(t,1H),5.70(dd,1H),7.33-7.36(m,1H),7.49(d,1H),7.72(s,1H),7.82(dt,1H),8.52(d,1H),11.48(s,1H),11.83(s,1H)。19FNMR(376.5MHz,DMSO-d6)δ:-158.2(s)。产率：0.22g。C26H23FN6O7的MS(ES)MH+:551.4。
实施例57和58(2R,4S,4aS)-11-氟-2,4-二甲基-8-((R)-2-氧代-4-(吡 啶-4-基)噁唑烷-3-基)-2,4,4a,6-四氢-1H,1'H-螺[异噁唑并[4,5-g][1,4]噁 嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮和(2R,4S,4aS)-11-氟-2,4-二 甲基-8-((S)-2-氧代-4-(吡啶-4-基)噁唑烷-3-基]-2,4,4a,6-四氢-1H,1'H- 螺[异噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮
将中间体143(0.52g，1.18mmol)、巴比妥酸(0.17g，1.3mmol)于2-丙醇(5mL)中的混合物在130℃下在微波炉中加热2小时。在真空下除去挥发物并且将残余物在水(5mL)中搅拌10分钟并过滤。将残余物在Combi-Flash仪器中使用甲醇于氯仿中的梯度纯化。产率：0.63g(97％)。手性HPLC分析显示[柱：ChiralpakIC(250x4.6)mm流动相：己烷：乙醇(50:50)]存在41％+5％+5％+44％的异构体。将两种主要异构体通过手性HPLC[柱：ChiralpakIC；流动相：具有0.1％二乙胺的己烷：乙醇(25:75)]分离。：最终化合物的1HNMR表明样品含有二乙胺杂质。
实施例57是第一洗脱非对映体。tR＝7.61分钟：[α]D 25＝-130.1(c＝0.10；二甲基甲酰胺)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:0.88(d,3H),1.14(d,3H),2.94(d,1H),3.09(t,1H),3.58-3.67(m,2H),3.74-3.76(m,1H),3.94(d,1H),4.08(d,1H),4.33(dd,1H),4.98(t,1H),5.69(dd,1H),7.41(dd,2H),7.71(s,1H),8.57(dd,2H)。注意：对应于NH质子的峰未出现。产率：0.81g。C26H23FN6O7的MS(ES)MH+:551.4。
实施例58是第二洗脱非对映体。tR＝15.38分钟：[α]D 25＝-73.39(c＝0.112；二甲基甲酰胺)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:0.89(d,3H),1.13(d,3H),2.92(d,1H),3.08(t,1H),3.62-3.66(m,2H),3.67-3.69(m,1H),3.93(d,1H),4.06(d,1H),4.32(dd,1H),4.99(t,1H),5.70(dd,1H),7.39(d,2H),7.70(s,1H),8.55(dd,2H)。注意：对应于NH质子的峰未出现。产率：0.11g。C26H23FN6O7的MS(ES)MH+:551.4。
实施例59
(2R,4S,4aS)-11-氟-8-((R)-4-((R)-1-甲氧基乙基)-2-氧代噁唑烷-3- 基)-2,4-二甲基-2,4,4a,6-四氢-1H,1'H-螺[异噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并 [4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮
将中间体149(0.25g，0.59mmol)、巴比妥酸(0.08g，0.59mmol)于2-丙醇(9mL)中的混合物在微波反应器中在130℃下加热2小时的时间段。在真空下除去挥发物并且将残余物在水(2mL)中搅拌10分钟并过滤。产率：0.26g(81％)。UPLC显示存在非对映体的9:1混合物并且主要异构体已经通过手性HPLC使用chiralpakIC[己烷：乙醇(70:30)；tR＝8.67分钟]分离并表征。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:0.88(d,3H),1.01(d,3H),1.13(d,3H),2.91(d,1H),3.10(t,1H),3.28(s,3H),3.63-3.69(m,2H),3.76-3.78(m,1H),3.93(d,1H),3.96-3.99(m,1H),4.10(d,1H),4.46-4.49(m,1H),4,59(t,1H),4.76-4.79(m,1H),7.62(s,1H),11.48(s,1H),11.82(s,1H)。19FNMR(376.5MHz,DMSO-d6)δ:-158.11(s)。C24H26FN5O8的MS(ES)MH+:532.4。
实施例60
(2R,4S,4aS)-11-氟-8-((R)-4-((S)-1-甲氧基乙基)-2-氧代噁唑烷-3- 基)-2,4-二甲基-2,4,4a,6-四氢-1H,1'H-螺[异噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并 [4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮
将中间体156(0.04g，0.1mmol)、巴比妥酸(0.01g，0.1mmol)于2-丙醇(1mL)中的混合物在微波反应器中在130℃下加热2小时的时间段。在真空下除去挥发物并且将残余物在水(0.5mL)中搅拌10分钟并过滤。产率：0.05g(98％)。UPLC显示存在非对映体的61％+5％+18％+3％混合物并且主要异构体(61％)已经通过手性HPLC使用chiralpakIC柱[己烷：乙醇(70:30)；tR＝8.42分钟]分离并表征。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:0.89(d,3H),1.10(d,3H),1.15(d,3H),2.91(d,1H),3.12(t,1H),3.15(s,3H),3.63-3.70(m,2H),3.76-3.80(m,1H),3.93-3.99(m,2H),4.11(d,1H),4,51-4.26(m,3H),7.65(s,1H),11.44(s,1H),11.78(s,1H)。19FNMR(376.5MHz,DMSO-d 6 )δ:-158.17(s)。C24H26FN5O8的MS(ES)MH+:532.5
实施例61和62
(2R,4S,4aS)-11-氟-2,4-二甲基-8-((R)-2-氧代-4-(吡嗪-2-基)噁唑烷 -3-基)-2,4,4a,6-四氢-1H,1'H-螺[异噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉 -5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮和(2R,4S,4aS)-11-氟-2,4-二甲基-8-((S)-2- 氧代-4-(吡嗪-2-基)噁唑烷-3-基)-2,4,4a,6-四氢-1H,1'H-螺[异噁唑并 [4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮
将中间体166(0.12g，0.27mmol)、巴比妥酸(0.04g，0.27mmol)于2-丙醇(1.5mL)中的混合物在130℃下在微波炉中加热2小时的时间段。在真空下除去挥发物并且将残余物在水(5mL)中搅拌10分钟并过滤。产率：0.13g(87％)。手性HPLC分析显示[柱：ChiralpakIA(250x4.6)mm流动相：己烷：乙醇(40:60)]存在45％+6％+5％+42％的异构体。将两种主要异构体通过手性HPLC[柱：ChiralpakIA；流动相：己烷：乙醇(40:60)]分离。
实施例61是第一洗脱非对映体。tR＝9.43分钟：[α]D 25＝-310.4(c＝0.2；MeOH)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:0.87(d,3H),1.11(d,3H),2.90(d,1H),3.09(t,1H),3.62-3.69(m,2H),3.73-3.77(m,1H),3.91(d,1H),4.05(d,1H),4.48(dd,1H),4.94(t,1H),5.80(dd,1H),7.71(s,1H),8.61-8.62(m,2H),8.81(s,1H),11.46(s,1H),11.83(s,1H)。19FNMR(376.5MHz,DMSO-d6)δ:-158.25(s)。产率：0.04g。C25H22FN7O7的MS(ES)MH+:552.5。
实施例62是第二洗脱非对映体。tR＝18.04分钟：[α]D 25＝-176.0(c＝0.2；MeOH)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:0.87(d,3H),1.11(d,3H),2.90(d,1H),3.08(t,1H),3.60-3.75(m,3H),3.91(d,1H),4.06(d,1H),4.48(dd,1H),4.95(t,1H),5.81(dd,1H),7.74(s,1H),8.62(s,2H),8.82(s,1H),11.47(brs,1H),11.81(brs,1H)。19FNMR(376.5MHz,DMSO-d6)δ:-158.15(s)。产率：0.05g。C25H22FN7O7的MS(ES)MH+:552.5
实施例63和64
(2R,4S,4aS)-11-氟-2,4-二甲基-8-((R)-2-氧代-4-(嘧啶-2-基)噁唑烷 -3-基)-2,4,4a,6-四氢-1H,1'H-螺[异噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉 -5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮和(2R,4S,4aS)-11-氟-2,4-二甲基-8-((S)-2- 氧代-4-(嘧啶-2-基)噁唑烷-3-基)-2,4,4a,6-四氢-1H,1'H-螺[异噁唑并 [4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮
将中间体171(0.12g，0.27mmol)、巴比妥酸(0.04g，0.27mmol)于2-丙醇(1.5mL)中的混合物在130℃下在微波炉中加热2小时的时间段。在真空下除去挥发物并且将残余物在水(5mL)中搅拌10分钟并过滤。产率：0.13g(87％)。手性HPLC分析显示[柱：ChiralpakIC(250x4.6)mm流动相：己烷：乙醇(70:30)]存在45％+6％+5％+42％的异构体。将两种主要异构体通过手性HPLC[柱：ChiralpakIC；流动相：己烷：乙醇(70:30)]分离。
实施例63是第一洗脱非对映体。tR＝13.09分钟：[α]D 25＝-183.23(c＝0.31；MeOH)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:0.89(d,3H),1.13(d,3H),2.92(d,1H),3.10(t,1H),3.63-3.77(m,3H),3.94(d,1H),4.08(d,1H),4.47(dd,1H),5.01(t,1H),5.71(dd,1H),7.50(t,1H),7.82(s,1H),8.84(d,2H),11.51(s,1H),11.83(s,1H)。19FNMR(376.5MHz,DMSO-d6)δ:-158.30(s)。C25H22FN7O7的MS(ES)MH+:552.5。
实施例64是第二洗脱非对映体。tR＝30.80分钟：[α]D 25＝-112.25(c＝0.38；MeOH)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:0.89(d,3H),1.13(d,3H),2.94(d,1H),3.10(t,1H),3.64-3.79(m,3H),3.94(d,1H),4.07(d,1H),4.31(dd,1H),5.01(t,1H),5.68(dd,1H),7.49(t,1H),7.75(s,1H),8.82(d,2H),11.46(brs,1H),11.81(brs,1H)。19FNMR(376.5MHz,DMSO-d6)δ:-158.15(s)。C25H22FN7O7的MS(ES)MH+:552.5。
实施例65
(2R,4S,4aS)-8-((S)-4-乙炔基-2-氧代噁唑烷-3-基)-11-氟-2,4-二甲 基-2,4,4a,6-四氢-1H,1’H-螺[异噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉 -5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮
将中间体176(0.08g，0.21mmol)、巴比妥酸(0.03g，0.21mmol)于2-丙醇(2mL)中的混合物在130℃下在微波炉中加热2小时的时间段。在真空下除去挥发物并且将残余物在水(5mL)中搅拌10分钟并过滤。将此悬浮在甲醇(0.5mL)中并且将水(5mL)添加至其中并过滤。产率：0.09g(92％)。PhenomenexGeminiC18(250X4.6)mm，5μm[流动相'A'：含10mM乙酸铵的水；流动相'B'：乙腈；tR＝9.72分钟]中的反相HPLC分析显示存在非对映体的7％+87％混合物并且主要异构体已经通过反相HPLC[PhenomenexGeminiC18(流动相'A'：含10mM乙酸铵的水；流动相'B'：乙腈)]分离。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:0.88(d,3H),1.14(d,3H),2.92(d,1H),3.11(t,1H),3.62(d,1H),3.64-3.68(m,2H),3.77-3.79(m,1H),3.94(d,1H),4.10(d,1H),4,51(dd,1H),4.80(t,1H),5.35-5.39(m,1H),7.59(s,1H),11.45(s,1H),11.82(s,1H)。C23H20FN5O7的MS(ES)MH+:498.4。
实施例66
(2R,4S,4aS)-11-氯-2,4-二甲基-8-((S)-4-甲基-2-氧代噁唑烷-3- 基)-2,4,4a,6-四氢-1H,1'H-螺[异噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉 -5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮
按照针对实施例2的制备所描述的工序使用中间体177来合成实施例66。通过硅胶色谱法(50％于己烷中的乙酸乙酯)获得标题化合物以分离主要洗脱组分，将所述组分通过超临界流体色谱法(ChiralpakIA柱)进一步纯化以分离主要洗脱组分。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ:0.9(d,3H)1.2(d,3H)1.4(d,3H)2.9-3.15(m,2H)3.5-3.7(m,2H)3.9-4.1(m,2H)4.1-4.25(m,1H)4.4-4.8(m,3H)7.7(s,1H)11.4(s,1H)11.8(s,1H)。C22H22ClN5O7的MS(ES)MH+:504。
实施例67
(2R,4S,4aS)-11-氟-8-[(4S)-4-(甲氧基甲基)-2-氧代-1,3-噁唑烷-3- 基]-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氢-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并 [4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮
将中间体40(0.67g，1.5mmol)与巴比妥酸(0.21g，1.6mmol)于乙酸(10mL)中的搅拌溶液在95℃下加热4小时。蒸发溶剂并且将残余物溶解于甲醇(2mL)中。添加水(5mL)以沉淀固体，收集所述固体并且通过手性HPLC[ChiralpakIC(250X4.6)mm；己烷：乙醇(80:20)；1.0ml\分钟]进行色谱分析以分离作为第二洗脱组分的标题化合物。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:0.9(d,3H),1.1(d,3H),2.9(d,1H),3.1(t,1H),3.25(s,3H),3.5(d,1H),3.6-3.7(m,2H),3.85(m,1H),3.85-3.9(d,1H),3.9(d,1H),4.1(d,1H),4.45-4,5(m,1H),4.6-4.7(m,2H),7.65(s,1H),11.5(s,1H),11.8(s,1H)。C23H24FN5O8的MS(ES)MH+:518.4；[α]D 20＝-93.8(c＝1.14；MeOH)，RT＝20.7分钟。
还在实施例67的合成中分离的是(2S,4R,4aR)-11-氟-8-[(4S)-4-(甲 氧基甲基)-2-氧代-1,3-噁唑烷-3-基)-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氢-2’H,6H- 螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧 啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮(来自手性HPLC纯化的第一洗脱组分)：
1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:0.9(d,3H),1.1(d,3H),2.9(d,1H),3.1(t,1H),3.2(s,3H),3.5(d,1H),3.6-3.7(m,2H),3.85(m,1H),3.85-3.9(d,1H),3.9(d,1H),4.1(d,1H),4.45-4,5(m,1H),4.6-4.65(m,2H),7.7(s,1H),11.5(s,1H),11.8(s,1H)。C23H24FN5O8的MS(ES)MH+:518.4；[α]D 20＝+159.4(c＝1.04；MeOH)，RT＝17.8分钟。
实施例68
(2R,4S,4aS)-11-氟-2,4-二甲基-8-((S)-4-(1-甲基-1H-1,2,4-三唑-5- 基)-2-氧代噁唑烷-3-基)-2,4,4a,6-四氢-1H,1’H-螺[异噁唑[4,5-g][1,4]噁 嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮
按照针对实施例2的制备所描述的工序使用中间体183来合成实施例68。通过SFC纯化使用ChiralpakOJ(250x4.6mm)柱(二氧化碳:乙醇(75:25)；1.0mL/分钟)来获得标题化合物。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ0.9(d,3H),1.1(d,3H),2.9(d,1H),3.15(m,1H)3.5-3.8(m,3H),3.8-4.2(m,5H),4,55(dd,1H),4.8-5.1(m,1H),5.0(dd,1H),7.7(s,1H),7.9(s,1H)11.4(s,1H),11.8(s,1H)。C24H23FN8O7的MS(ES)MH+:558。
实施例69
(2R,4S,4aS)-11-氟-2,4-二甲基-8-((R)-4-(1-甲基-1H-1,2,4-三唑-5- 基)-2-氧代噁唑烷-3-基)-2,4,4a,6-四氢-1H,1’H-螺[异噁唑并[4,5-g][1,4] 噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮
按照针对实施例2的制备所描述的工序使用中间体189来合成实施例69。通过SFC纯化使用ChiralpakOJ(250x4.6mm)柱(二氧化碳:乙醇(75:25)；1.0ml\分钟)来获得标题化合物。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ0.9(d,3H),1.1(d,3H),2.9(d,1H),3.15(m,1H)3.5-3.8(m,3H),3.8-4.2(m,5H),4,55(dd,1H),4.8-5.1(m,1H),6.0(dd,1H),7.7(s,1H),7.9(s,1H)11.4(s,1H),11.8(s,1H)。C24H23FN8O7的MS(ES)MH+:558。
实施例70
(2R,4S,4aS)-11-氟-8-((R)-4-((S)-1-羟乙基)-2-氧代噁唑烷-3- 基)-2,4-二甲基-2,4,4a,6-四氢-1H,1'H-螺[异噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并 [4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H')-三酮
将中间体198(0.12g，0.30mmol)与巴比妥酸(0.04g，0.30mmol)于2-丙醇(2mL)中的混合物在微波反应器中在130℃下加热2小时的时间段。在真空下除去挥发物并且将残余物在水(0.5mL)中搅拌10分钟并过滤。产率：0.05g(61％)1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:0.89(d,3H),1.04(d,3H),1.14(d,3H),2.92(d,1H),3.10(t,1H),3.59-3.69(m,2H),3.77-3.78(m,1H),3.94(d,1H),4.10(d,1H),4.32(quin,1H),4.45-4.49(m,1H),4,53-4,55(m,2H),5.29(d,1H),7.73(s,1H),11.83(brs,2H)。19FNMR(376.5MHz,DMSO-d6)δ:-158.38(s)。C23H24FN5O8的MS(ES)MH+:518.3。
实施例71
{(4S)-3-[(2R,4S,4aS)-11-氟-2,4-二甲基-2',4',6'-三氧代 -1,1’2,3',4,4',4a,6'-八氢-2’H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g] 喹啉-5,5'-嘧啶]-8-基]-2-氧代-1,3-噁唑烷-4-基}乙腈
向中间体200(0.1g，0.23mmol)于异丙醇(5mL)中的搅拌溶液添加巴比妥酸(0.03g，0.25mmol)，并且将混合物在95℃下加热16小时。在真空下完全除去挥发物，并且将水(5mL)添加至残余物并过滤。产率：0.10g(77％)。手性HPLC分析[柱：chiralcelOD-H，洗脱剂：己烷：乙醇(50:50)]显示其是呈33:45:17:5比例的四种异构体的混合物。具有33％比率的异构体已经通过手性HPLC[柱：chiralcelOD-H，洗脱剂：己烷：乙醇(50:50)]分离且被鉴别为实施例71。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:0.89(d,3H),1.15(d,3H),2.92(d,1H),3.12-3.19(m,2H),3.39-3.40(m,1H),3.65-3.70(m,2H),3.74-3.78(m,1H),3.94(d,1H),4.10(d,1H),4.44(dd,1H),4.78(t,1H),4.87-4.89(m,1H),7.69(s,1H),11.47(s,1H),11.83(s,1H)。C23H21FN6O7的MS(ES)MH+:513.2。
实施例72
(2R,4S,4aS)-8-((R)-4-((R)-1,2-二羟乙基)-2-氧代噁唑烷-3-基)-11- 氟-2,4-二甲基-2,4,4a,6-四氢-1H,1'H-螺[异噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并 [4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮
向中间体201(0.35g，0.75mmol)于乙醇(4mL)中的搅拌溶液添加巴比妥酸(0.19g，14.9mmol)和2N盐酸(4mL)，并且将混合物在微波反应器中在120℃下加热2小时。在真空下完全除去挥发物，添加水(3mL)并过滤固体以得到标题化合物。产率：0.35g(88％)注意：手性HPLC分析[柱：ChiralpakAD-H(250x4.6)mm；流动相：己烷：乙醇(70:30)]显示反应混合物是89％de。主要异构体(实施例72)通过手性HPLC[柱：ChiralpakAD-H；流动相：己烷：乙醇(70:30)]分离。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:0.88(d,3H),1.13(d,3H),2.92(d,1H),3.10(t,1H),3.34-3.40(m,2H),3.62-3.68(m,2H),3.75-3.79(m,1H),3.92(d,1H),4.09(d,1H),4.18(q,1H),4.48-4.53(m,1H),4,56-4.59(m,1H),4.69-4.73(m,1H),4.84(t,1H),5.40(q,1H),7.72(s,1H),11.44(s,1H),11.82(s,1H)。C23H24FN5O9的MS(ES)MH+:534.2。
实施例73
(2R,4S,4aS)-8-((R)-4-((S)-1,2-二羟乙基)-2-氧代噁唑烷-3-基)-11- 氟-2,4-二甲基-2,4,4a,6-四氢-1H,1'H-螺[异噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并 [4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮
按照针对实施例72的制备所描述的工序使用中间体202(0.40g，0.85mmol)来合成实施例73。在通过乙酸铵方法经受反相HPLC纯化之后获得产物。产率：0.25g(54％)。注意：手性HPLC分析[柱：ChiralpakAD-H(250x4.6)mm；流动相：己烷：乙醇(70:30)]显示所述反应产生呈58％de的化合物的混合物。主要异构体(实施例73)和次要异构体均通过手性HPLC分离。
主要异构体(实施例73)是第二洗脱非对映体：RT＝9.99分钟。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:0.88(d,3H),1.13(d,3H),2.92(d,1H),3.10(t,1H),3.32-3.44(m,2H),3.64-3.68(m,2H),3.76-3.80(m,1H),3.93(d,1H),4.10(d,1H),4.19(q,1H),4.49-4,53(m,1H),4,56-4.60(m,1H),4.70-4.73(m,1H),4.84(t,1H),5.40(q,1H),7.72(s,1H),11.43(s,1H),11.81(s,1H)。C23H24FN5O9的MS(ES)MH+:534.2。
实施例74
(2R,4S,4aS)-11-氟-8-{(4S)-4-[(羟基亚氨基)甲基]-2-氧代-1,3-噁唑 烷-3-基}-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氢-2’H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2] 噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮
向中间体91(0.15g,0.3mmol)于乙酸(10mL)中的溶液添加巴比妥酸(0.05g,0.4mmol)，并且将混合物在95℃下加热3小时。在真空下完全除去挥发物，将水(4mL)添加至残余物并过滤溶液。将因此获得的固体通过硅胶柱色谱法使用氯仿于甲醇中的梯度进一步纯化。所述化合物作为未确定的E和Z异构体(约1:0.65比例)的混合物获得。产率：0.06g(34％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:0.89(d,3H),1.14(d,3H),2.93(d,1H),3.11(t,1H),3.65-3.80(m,3H),3.94(d,1H),4.10(d,1H),4.30-4.32&4.47-4,51(m,1H),4.76&4.88(t,1H),5.24-5.30&5.48-5.55(m,1H),7.10-7.14&7.51-7.75(m,2H),11.28&11.48(s,1H),11.45(s,1H),11.85(s,1H)。C22H21FN6O8的MS(ES)MH+:517.3。
实施例75和76
(5R)-3-[(2R,4S,4aS)-11-氟-2,4-二甲基-2',4',6'-三氧代 -1,1',2,3',4,4',4a,6'-八氢-2’H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g] 喹啉-5,5'-嘧啶]-8-基]-2-氧代-1,3-噁唑烷-5-甲腈和 (5S)-3-[(2R,4S,4aS)11-氟-2,4-二甲基-2',4',6'-三氧代-1,1',2,3',4,4',4a,6'- 八氢-2’H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-8- 基]-2-氧代-1,3-噁唑烷-5-甲腈
向中间体203(0.13g，0.3mmol)于乙酸(5mL)中的溶液添加巴比妥酸(0.04g，0.3mmol)，并且将混合物在95℃下加热3小时。在真空下完全除去挥发物，并且将水(2mL)添加至残余物并过滤溶液。HPLC分析[柱XbridgeC18(150mmx4.6mm)3.5μ，流动相：含10mM乙酸铵的水和甲醇]显示所述反应产生异构体的1:1混合物，其通过反相HPLC分离(XbridgeC18；流动相：含10mM乙酸铵的水和甲醇)。产率：0.03g(34％)。
实施例75(较低极性的异构体)：1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:0.88(d,3H),1.13(d,3H),2.88(d,1H),3.10(t,1H),3.58-3.68(m,2H),3.76-3.82(m,1H),3.94(d,1H),4.10(d,1H),4.31-4.35(m,1H),4.45(t,1H),5.88(dd,1H),7.67(s,1H),11.60(brs,2H)。C22H19FN6O7的MS(ES)MH+:499.3。
实施例76(较高极性的异构体)：1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:0.88(d,3H),1.13(d,3H),2.90(d,1H),3.11(t,1H),3.64-3.70(m,2H),3.74-3.80(m,1H),3.93(d,1H),4.09(d,1H),4.30-4.34(m,1H),4.47(t,1H),5.89(dd,1H),7.67(s,1H),11.44(s,1H),11.81(s,1H)。C22H19FN6O7的MS(ES)MH+:499.3。
实施例77
(2R,4S,4aS)-11-氟-8-((R)-4-((R)-1-羟乙基)-2-氧代噁唑烷-3- 基)-2,4-二甲基-2,4,4a,6-四氢-1H,1'H-螺[异噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并 [4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮
将中间体211(0.07g，0.17mmol)与巴比妥酸(0.02g，0.17mmol)于2-丙醇(1mL)中的混合物在微波反应器中在130℃下加热2小时的时间段。在真空下除去挥发物并且将残余物在水(0.5mL)中搅拌10分钟并过滤。产率：0.08g(90％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:0.89(d,3H),0.98(d,3H),1.15(d,3H),2.92(d,1H),3.12(t,1H),3.64-3.69(m,2H),3.75-3.78(m,1H),3.93(d,1H),4.10(d,1H),4.29(brs,1H),4.52-4.60(m,3H),5.27(d,1H),7.64(s,1H),11.49(s,1H),11.83(s,1H)。19FNMR(376.5MHz,DMSO-d6)δ:-158.15(s)。C23H24FN5O8的MS(ES)MH+:518.4。
实施例78
(2R,4S,4aS)-11-氟-8-((4R,5R)-4-(氟甲基)-5-甲基-2-氧代噁唑烷-3- 基)-2,4-二甲基-2,4,4a,6-四氢-1H,1’H-螺[异噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并 [4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮
将中间体216(0.03g，0.06mmol)与巴比妥酸(0.008g，0.06mmol)于2-丙醇(0.5mL)中的混合物在微波反应器中在130℃下加热2小时的时间段。在真空下除去挥发物并且将残余物在水(1mL)中搅拌10分钟并过滤。将此悬浮在甲醇(0.5mL)中，将水(1mL)添加至其中并过滤。产率：0.03g(81％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:0.89(d,3H),1.15(d,3H),1.51(d,3H),2.93(d,1H),3.12(t,1H),3.65-3.70(m,2H),3.77-3.78(m,1H),3.95(d,1H),4.11(d,1H),4.35-4,58(m,1H),4.71(dd,1H),4.86-4.89(m,1H),4.99-5.01(m,1H),7.63(s,1H),11.46(s,1H),11.82(s,1H)。C23H23F2N5O7的MS(ES)MH+:520.5。
实施例79和80
(2R,4S,4aS)-11-氟-8-((4S,5R)-4-(甲氧基甲基)-5-甲基-2-氧代噁唑 烷-3-基)-2,4-二甲基-2,4,4a,6-四氢-1H,1’H-螺[异噁唑并[4,5-g][1,4]噁 嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮和(2R,4S,4aS)-11-氟 -8-((4R,5R)-4-(甲氧基甲基)-5-甲基-2-氧代噁唑烷-3-基)-2,4-二甲基 -2,4,4a,6-四氢-1H,1'H-螺[异噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'- 嘧啶]-2',4',6'(3'H')-三酮
将中间体221(0.28g，0.67mmol)、巴比妥酸(0.09g，0.67mmol)于2-丙醇(5mL)中的混合物在130℃下在微波炉中加热2小时的时间段。在真空下除去挥发物并且将残余物在水(5mL)中搅拌10分钟并过滤。将产物悬浮在甲醇(0.5mL)中并且将水(5mL)添加至其中并过滤。产率：0.34g(96％)。手性HPLC[柱：ChiralpakIA(250x4.6)mm，流动相：含0.1％二乙胺的己烷：乙醇(50:50)]显示存在17％+51％的非对映体。这些峰已经通过反相HPLC[ChiralpakIA；流动相：含0.1％二乙胺的己烷：乙醇(50:50)]分离。
实施例79(第一洗脱非对映体)：tR＝6.53分钟；[α]D 25＝-121.46(c＝0.22；MeOH)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:0.88(d,3H),1.13(d,3H),1.46(d,3H),2.88(d,1H),3.09(t,1H),3.19(s,3H),3.56-3.59(m,2H),3.67(t,1H),3.74-3.77(m,1H),3.85-3.88(m,1H),3.93-3.95(m,1H),4.09(d,1H),4,55(s,1H),5.02(t,1H),7.66(s,1H),11.40(brs,2H)。19FNMR(376.5MHz,DMSO-d6)δ:-158.49(s)。C24H26FN5O8的MS(ES)MH+:532.5。
实施例80(第二洗脱非对映体)：tR＝8.22分钟；[α]D 25＝-129.17(c＝0.30；MeOH)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ:0.89(d,3H),1.14(d,3H),1.45(d,3H),2.90(d,1H),3.12(t,1H),3.22(s,3H),3.55-3.62(m,2H),3.66(t,1H),3.77-3.78(m,1H),3.82-3.86(m,1H),3.92-3.94(m,1H),4.10(d,1H),4.23(s,1H),4.76(t,1H),7.61(s,1H),11.18(brs,2H)。19FNMR(376.5MHz,DMSO-d6)δ:-158.21(s)。C24H26FN5O8的MS(ES)MH+:532.5。
生物活性
式(I)的化合物抑制细菌DNA旋转酶并且因此对于它们的抗细菌作用具有兴趣。所述化合物针对革兰氏阳性细菌、革兰氏阴性细菌和非典型细菌是活性的。这些特性可以使用例如以下描述的测定来进行评定。
敏感度测试(MIC)–测定1
根据临床和实验室标准协会(CLSI)准则通过肉汤微量稀释法测定最小抑制浓度(MIC)。简言之，将生物体悬浮液调整至0.5McFarland标准以产生在3x105与7x105个集落形成单位(CFU)/mL之间的最终接种物。细菌接种物被制备用于在无菌、阳离子调节的米勒-辛顿肉汤(Mueller-HintonBroth)(BecktonDickinson)中的大多数生物体。如上在阳离子调节的米勒-辛顿肉汤中制备链球菌，向所述肉汤添加2.5％裂解马血(HemaResource&SupplyInc.)。将100μL的接种物体积添加至含有2μL的含药物2倍连续稀释液的DMSO的孔(使用TecanEVO机器人)。将所有接种的微量稀释托盘在环境空气中在35℃下孵育18-24小时。在孵育之后，如在OD600nm下读取的阻止可见生长并且通过使用测试读数镜可视读取证实的药物的最低浓度被记录为MIC。根据CLSI准则通过使用实验室质量控制菌株和具有限定的MIC谱的可商购获得的对照化合物来监测测定的性能。表1提供在测定1中测试的实施例1-77的MIC结果(μM)。表2提供在测定1中测试的实施例78-80的MIC(μg/mL)结果。
表1
a酿脓链球菌，体内菌株。b肺炎链球菌，体内菌株。
c肺炎链球菌，体内菌株。d金黄色葡萄球菌体内菌株，MSQS。
e金黄色葡萄球菌，体内菌株，MRQR。f金黄色葡萄球菌，血清。
表2
a酿脓链球菌，体内菌株。b肺炎链球菌，体内菌株。
c肺炎链球菌，ATCC49619。d金黄色葡萄球菌，体内菌株，ATCC29213。e金黄色葡萄球菌，体内菌株，MRQR。f金黄色葡萄球菌，体内菌株，MRSA。
敏感度测试(MIC)–测定2
根据临床和实验室标准协会(CLSI)准则通过肉汤微量稀释法测定最小抑制浓度(MIC)。简言之，将生物体悬浮液调整至0.5McFarland标准以产生在3x105与7x105个集落形成单位(CFU)/mL之间的最终接种物。细菌接种物通常在无菌、阳离子调节的米勒-辛顿肉汤(BectonDickinson)中制备，其包括大肠杆菌、肺炎克雷伯氏菌以及铜绿假单胞菌。在含有0.5％酵母提取物(BectonDickinson)加30mL的15μg/mL牛血红素储备液(Sigma)和3mL的15μg/mLβ-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(Sigma)的无菌、阳离子调节的米勒-辛顿肉汤(BectonDickinson)中制备流感嗜血杆菌细菌接种物。根据CLSI准则使用琼脂稀释法针对MIC测试奈瑟氏菌的菌株。对于肉汤微量稀释测试，将100μL的接种物体积添加至含有2μL的含药物2倍连续稀释液的DMSO的孔(使用TecanEVO机器人)。将所有接种的微量稀释板在环境空气中在35℃下孵育18-24小时。在孵育之后，如在OD600nm下读取的阻止可见生长并且通过使用测试读数镜可视读取证实的药物的最低浓度被记录为MIC。根据CLSI准则通过使用实验室质量控制菌株和具有限定的MIC谱的可商购获得的对照化合物来监测测定的性能。表3提供在测定2中测试的实施例1-77的MIC结果(μM)。表4提供在测定2中测试的实施例78-80的MIC(μg/mL)结果。
表3
a流感嗜血杆菌，ATCC51907，体内菌株。b大肠杆菌，K12。
c肺炎克雷伯氏菌，临床分离物，粘液样。d铜绿假单胞菌，PAO1。
表4
a流感嗜血杆菌，ATCC49247。b大肠杆菌，体内菌株，ATCC25922。c大肠杆菌，ATCC35218。d肺炎克雷伯氏菌，临床分离物，粘液样。e肺炎克雷伯氏菌，ATCC700603。f铜绿假单胞菌，PAO1。
DNA旋转酶超螺旋活性荧光偏振测定
在黑色384-孔聚苯乙烯测定板中，将在由35mMTris-HCl(pH7.5)、24mMKCl、4mMMgCl2、2mM二硫苏糖醇、1.8mM亚精胺、5％(v/v)甘油、200nM牛血清白蛋白、0.8％二甲亚砜以及0.3mMATP组成的测定缓冲液中的30微升/孔的5nM大肠杆菌DNA旋转酶A/B四聚物和130微克/mL的含有三链体形成序列TTCTTCTTCTTCTTCTTCTTCTTCTTC(SEQIDNO:1)的拓扑学松弛型质粒在不存在或存在5-10种不同浓度的测试化合物的情况下在环境温度下孵育(通常30分钟)。通过在由150mMNaCl和150mM乙酸钠(pH3.5)组成的3X三链体形成缓冲液中添加10微升/孔的40nM寡聚脱氧核苷酸探针来猝灭超螺旋反应。寡聚脱氧核苷酸探针是5’-BODIPY-FL-标记的TTCTTCTTC(SEQIDNO:2)。在60分钟之后，使用配备有偏振镜的485nm激发和535nm发射过滤器在TecanUltra读板器中测量BODIPY-FL的荧光各向异性。通过非线性回归使用两个对照反应来测定IC50。第一对照反应不含测试化合物但含有0.8％DMSO(100％活性)，而第二对照反应含有5μM环丙沙星和0.8％DMSO(0％活性)。
当在基于上述DNA旋转酶超螺旋活性荧光偏振测定的体外测定中测试时，测定实施例1-77的大肠杆菌DNA旋转酶超螺旋IC50测定抑制活性，如在表5中所示。
表5
小鼠大腿模型中实施例5针对金黄色葡萄球菌的体内功效
本研究的目标是在小鼠大腿感染模型中测定实施例5针对金黄色葡萄球菌(S.aureus)的功效和药物代谢动力学/药效动力学(PK/PD)关系。
所使用的金黄色葡萄球菌菌株包括从美国典型培养物保藏中心获得的耐甲氧西林分离物(ATCC33591)(MRSA)。此外，利用三种金黄色葡萄球菌临床分离物；(1)甲氧西林敏感性分离物(MSSA)；(2)USA300基因型(USA300)的最近耐甲氧西林临床分离物以及(3)USA100基因型(USA1000)的最近耐甲氧西林临床分离物。
按照CLSI准则(Rayner等Clinicalpharmacodynamicsoflinezolidinseriouslyillpatientstreatedinacompassionateuseprogram.ClinPharmacokinet2003.42:1411-23)使用肉汤微量稀释法来测定针对每种分离物的MIC。对于每种菌株进行十次单独测定并且模态MIC用于所有PK/PD计算。
根据动物护理和使用委员会(InstitutionalAnimalCareandUseCommittee,IACUC)批准的方案11-03-i进行所有工序。在第4天腹膜内用150mg/kg的环磷酰胺和在第1天腹膜内用100mg/kg的环磷酰胺来使小鼠中性白细胞减少(Andes等InvivopharmacodynamicsofanewOxazolidinone(Linezolid)AAC2002,46(11):3484-9)。在感染前两小时，小鼠接受口服施用50mg/kg氨基苯并三唑(ABT)以抑制细胞色素P450(CYP450)活性；小鼠在12小时后接受第二次50mg/kg施用。以类似的方式制备每种金黄色葡萄球菌分离物。新鲜过夜板用于接种胰蛋白酶大豆肉汤(TSB)的25mL培养物。将培养物在37℃下在200rpm振荡下孵育过夜。将过夜培养物以1:10稀释于TSB中，测定OD600，并且进入对于所述分离物具有特异性的稀释计算器中。将计算体积的过夜培养物吸移至适当体积的盐水中以获得5x105CFU/大腿的目标接种物水平，并且一式两份测定活菌计数。
然后将小鼠分配至对照或处理组。在感染之后2小时，将一组10只小鼠安乐死以测定在处理开始时受感染的大腿中的活菌计数。向剩余组的小鼠施用(1)实施例5，(2)对照化合物(左氧氟沙星或利奈唑胺)或(3)媒介物。在开始处理之后24小时测定功效。将小鼠通过二氧化碳窒息和颈椎脱位安乐死并且除去且解剖受感染的大腿。将大腿称重并且转移至含有1mL盐水的管以用于均化。将大腿组织均化(OmniTH匀浆器，OmniInternational,Warrenton,VA)并且将100μL的匀浆连续稀释在盐水中并且涂铺至胰蛋白酶大豆琼脂板上以用于活菌计数测定。将板在37℃下孵育过夜。
最初，对于每种分离物进行单剂量时程研究以确定最佳给药方案。对于金黄色葡萄球菌MRSA分离物，每日一次(uid)给药被确定为最佳方案，对于所有其它分离物每日两次(bid，q12)方案被确定为最佳。在时程研究之后，对于每种分离物进行两个单独的剂量响应研究并且组合结果以获得与功效相关的AUC/MIC比率。向小鼠给用qd或bidq12给予的2.5至160mg/kg/天，施用体积是通过弹丸腹膜内剂量10mL/kg，并且处理持续时间是24小时。
用金黄色葡萄球菌感染的卫星小鼠的组用于测定血浆浓度。在感染后2小时开始给药并且在二氧化碳窒息和颈椎脱位之后通过颌下出血或通过心脏穿刺在时间点0.5、1、2、4、6、8、12和24小时取得全血样品。将全血采样至含有乙二胺四乙酸(EDTA)(BecktonDickenson)的微容器管中。使用每个时间点三只小鼠。通过在13200rpm下离心五分钟分离血浆并且储存在-20℃下直到生物分析。
使用蛋白质沉淀提取含有实施例5的生物样品。向一体积的样品中添加5体积的含有内标物(格列本脲)的乙腈。然后将混合物混合并且将板在3200rpm下离心5分钟。将200μL体积的上清液干燥并且在流动相中复溶，且将混合物注入至液相色谱-质谱(LC-MS)上。通过Analystv1.4.2控制的SciexAPI4000用于获得实施例5的数据和定量。LC-MS仪器参数在以下表6和7中提供。
表6.用于检测血浆中的实施例5的液相色谱法条件
表7.用于实施例5和格列本脲检测的MS/MS参数
药物代谢动力学数据分析：通过计算在每个时间点三个动物中的每个中化合物的平均血浆浓度来获得每个剂量组的血浆曲线。每个剂量组的从零至无限大的血浆浓度时间曲线下面积(AUC)；最大血浆药物浓度(Cmax)；达到最大浓度的时间(tmax)；以及血浆半衰期(t1/2)通过非房室分析(non-compartmentalanalysis)(WinNonLin5.2,Pharsight)来确定。非房室模型200用于所述分析中。
用于bid剂量方案的AUC通过将在单个剂量之后获得的AUC值乘以二(假定在第二剂量之后无积聚)来确定。药效动力学数据分析：调节从每个动物的大腿生长的细菌菌落的数目以说明样品稀释和组织重量来测定每克组织的CFU(CFU/g)。通过计算跨每组内的动物的标准误差来确定每个剂量组中的可变性。
药物代谢动力学/药效动力学分析：将针对预处理组获得的平均logCFU/g从针对处理组中的每个单独动物获得的logCFU/g中减去。对于功效组中的每只动物测定logCFU/g中的Δ并且用于PK/PD分析。统计异常值使用四分位数方法来确定并且从分析中消除。
对于每个剂量组AUC的药物代谢动力学参数与实施例5针对每种金黄色葡萄球菌分离物的MIC有关。确定每个剂量组的AUC与MIC的比率并且针对每个动物的CFU/g绘图。22.1％的鼠未结合级分用于计算游离血浆浓度。此值来自实施例5的1μM至50μM范围中的小鼠蛋白质未结合级分的平均值。
功效与PK/PD指数总AUC之间的关联通过非线性回归(WinNonlin5.2，Pharsight)确定。将数据使用以下所示的S形Emax模型进行建模，其中Emax是在不存在药物的情况下观察到的最大生长；E0是最大杀死，EC50是给出50％响应的浓度，并且N是Hill因子。
E = E max - ( E max - E 0 ) · C N C N + EC 50 N
对组合的剂量组以及针对单独剂量方案进行PK/PD分析。拟合的良好性通过评价模型计算的参数、Aikaike标准以及加权残值的分析中的可变性来确定。
通过建模确定的PK/PD参数用于确定达到静态响应所要求的暴露以及与在疗法开始时的计数相比菌落计数的1log减少。
针对实施例5确定的四种金黄色葡萄球菌分离物的MIC值在表8中呈现。
表8.针对金黄色葡萄球菌分离物的模态MIC值
在用金黄色葡萄球菌MSSA、MRSA和USA300感染的中性粒细胞减少小鼠大腿中测定与在ABT存在下腹膜内施用实施例5相关的血浆暴露。对组合的数据进行分析以建立共有剂量/暴露关系。最佳关系与幂关系相关，Y＝(1,022.7)*(X1.2019)，其中Y是AUC无限大(ηgh/mL)，并且X是所测量的剂量(mg/kg)。
图1示出在用ABT预处理的中性粒细胞减少的小鼠的大腿中针对金黄色葡萄球菌USA100的实施例5剂量响应。每个点表示5个动物的平均值。误差条表示标准误差。在疗法开始时，细菌负荷是5.93±0.09CFU/g。细菌在媒介物组中生长3.3logCFU/g。出于比较在单独实验中腹膜内施用利奈唑胺。
从处理开始时每种金黄色葡萄球菌分离物在媒介物对照组中生长至少两个对数；MSSA、MRSA、USA100和USA300分别生长1.96±0.08、3.2±0.12、2.66±0.16和3.1±0.21CFU/g。金黄色葡萄球菌MRSA每日一次(uid)施用，因为所测试的剂量中没有一个再生长至相当于媒介物对照组的水平。其它三种分离物用间隔十二小时施用的两个相等剂量(bid,q12)的施用方案来进行测试。
计算来自简单剂量响应研究的PK/PD参数。假设，AUC/MIC参数是与活性最佳相关的参数，因为此驱动因素已经显示与体外功效最佳相关。对于所有剂量响应研究，对给药溶液进行分析以评定所测量的剂量，并且共有暴露关系用于估计血浆暴露。
从两个剂量响应研究产生中性粒细胞减少小鼠模型中金黄色葡萄球菌MSSA的PK/PD参数。针对停滞和1-log减少的AUC值分别被确定为28和69μg.h/mL。
从两个剂量响应研究的结果产生中性粒细胞减少小鼠模型中金黄色葡萄球菌MRSA的PK/PD参数。针对停滞和1-log减少的AUC值分别被确定为24和55μg.h/mL。
从两个剂量响应研究的结果产生中性粒细胞减少小鼠模型中金黄色葡萄球菌USA300的PK/PD参数。针对停滞和1-log减少的AUC值分别被确定为91和150μg.h/mL。
从两个剂量响应研究的结果产生中性粒细胞减少小鼠模型中金黄色葡萄球菌USA100的PK/PD参数。针对停滞和1-log减少的AUC值分别被确定为25和47μg.h/mL。
针对功效的计算的游离AUC/MIC比率
针对金黄色葡萄球菌动物模型计算的游离血浆AUC/MIC量值在表9中呈现。
表9.实施例5对比金黄色葡萄球菌分离物的游离血浆AUC/MIC量值
表9.实施例5对比金黄色葡萄球菌分离物的游离血浆AUC/MIC量值
a研究的数量。
b作用浓度中值±平均值的标准误差(％差异系数)。
c停滞±平均值的标准误差(％差异系数)。
d1-log减少±平均值的标准误差(％差异系数)。
总结
实施例5显示在给药范围上的非线性药物代谢动力学。吸收是良好的，其中最大浓度在施用后0.5小时时获得。基于来自多个功效研究的血浆PK暴露和所述给药溶液的测量的浓度来建立剂量/暴露关系。此共有暴露与单独分离物的模态MIC值和小鼠游离血浆水平结合用于确定与抑菌作用相关且针对模型中的1-log减少的游离AUC/MIC量值。
在中性粒细胞减少的大腿模型中进行剂量响应研究以确定功效所要求的相对游离AUC/MIC量值。游离AUC/MIC比率要求抑菌作用和1-log减少，相对于初始细菌负荷，分别在43至98和83至245的范围。
小鼠大腿模型中实施例5针对酿脓链球菌的体内功效
本研究的目标是在小鼠中性粒细胞减少大腿感染模型中测定实施例5针对酿脓链球菌(S.pyogenes)的功效和药物代谢动力学/药效动力学(PK/PD)关系。从美国典型培养物保藏中心获得的酿脓链球菌ATCC12384用于本研究中。
按照CLSI准则使用肉汤微量稀释法来确定针对酿脓链球菌ATCC12384的MIC。对于每种菌株进行三次单独测定并且模态MIC用于所有PK/PD计算。所有动物实验在地方道德伦理委员会特许的情况下在英国内政部许可下进行。所有实验由技术员进行，所述技术员具有内政部个人许可证的完成部分1、2和3并且持有当前个人许可证。
通过在感染前4天用150mg/kg的环磷酰胺(Baxter,Norfolk,UK)免疫抑制并且在感染前一天通过腹膜内注射100mg/kg来使所有小鼠暂时中性粒细胞减少(Andes等，下文)。在第二轮免疫抑制之后二十四小时，将小鼠用酿脓链球菌ATCC12384使用约5x105CFU/小鼠大腿在暂时吸入麻醉(3％异氟烷)下通过肌内注射至两个侧大腿肌肉中感染。将丁丙诺啡0.06mg/kg皮下(SC)施用至研究中的所有小鼠，在所述研究中大腿中的疼痛通常由残废和有效肢的使用损失引起。在感染时开始的12小时间隔处再施用丁丙诺啡以确保持续疼痛缓解。
在功效研究中，6只小鼠用于感染后2小时预处理组中；8只小鼠用于媒介物对照和治疗性处理组中。在感染之前十五分钟和感染之后十二小时，将待用测试剂和媒介物处理的动物通过经口灌胃施用50mg/kg1-氨基苯并三唑。抗细菌处理在感染后2小时和14小时施用，以10mL/kg腹膜内递送。比较例组通过SC递送在感染后2小时和14小时用100mg/kg利奈唑胺进行处理。将对照组用仅媒介物(0.2M葡甲胺/30％HPβCD)进行处理。
对于功效研究，在感染后第24小时(或早些时候，如果小鼠达到预定终点)，在使用苯巴比妥过量剂量使它们人道安乐死之前，评定所有动物的临床病状。两个大腿被除去并且单独地称重。将单独大腿组织样品使用在冰冷无菌磷酸盐缓冲盐水中使用珠磨器来均化。然后将大腿匀浆定量地培养至血液琼脂上并且在计数之前在37℃下孵育24小时。
如上所述用酿脓链球菌感染的卫星小鼠的组用于测定血浆浓度。给药在感染之后2小时时开始，并且在0.5、1、2、4、6、8、12和24小时取得全血样品。将来自卫星PK研究的小鼠通过在处理后的指定时间点处吸入5％异氟烷来安乐死，通过心脏穿刺使小鼠立即出血。将肝素化血液样品通过在13200rpm下离心五分钟来分离。将血浆样品储存在-80℃下，之后转移至客户用于分析。
对于所述研究的PK臂，使用3只小鼠/时间点/单位剂量。由于最终工作次序中的非故意变化，初始对80和160mg/kg给药组施用实施例5而无用氨基苯并三唑先前处理。一旦实现这一点，使剩余的小鼠跨给药组重新分布，并且组大小被减少至每个时间点两只小鼠。
使用蛋白质沉淀提取含有实施例5的生物样品。向一体积的样品中添加5体积的含有内标物(格列本脲)的乙腈。然后将混合物混合并且将板在3200rpm下离心5分钟。将200μL体积的上清液干燥并且在流动相中复溶，且将混合物注入至液相色谱-质谱(LC-MS)上。通过Analystv1.4.2控制的SciexAPI4000用于获得实施例5的数据和定量。LC-MS仪器参数在表6和7中提供。
通过计算在每个时间点两至三个动物中的每个中化合物的平均血浆浓度来获得每个剂量组的血浆曲线。每个剂量组的从零至无限大的血浆浓度时间曲线下面积(AUC)；最大血浆药物浓度(Cmax)；达到最大浓度的时间(tmax)；以及血浆半衰期(t1/2)通过非房室分析(non-compartmentalanalysis)(WinNonLin5.2,Pharsight)来确定。非房室模型200用于所述分析中。用于bid剂量方案的AUC通过将在单个剂量之后获得的AUC值乘以二(假定在第二剂量之后无积聚)来确定。调节从每个动物的大腿生长的细菌菌落的数目以说明样品稀释来测定每大腿的CFU(CFU/大腿)。通过计算跨每组内的动物的标准误差来确定每个剂量组中的可变性。
将针对预处理组获得的平均logCFU/g从针对处理组中的每个单独动物获得的logCFU/g中减去。测定功效组中的每只动物logCFU/g中的Δ并且将其用于PK/PD分析。统计异常值使用四分位数方法来确定并且从分析中消除。
每个剂量组AUC的药物代谢动力学参数与实施例5针对酿脓链球菌ATCC12384的MIC有关。确定每个剂量组的AUC与MIC的比率并且针对每个动物的CFU/大腿绘图。22.1％的鼠未结合级分用于计算游离血浆浓度。此值来自1μM至50μM范围中的实施例5的小鼠蛋白质未结合级分的平均值。
功效与PK/PD指数总AUC之间的关联通过非线性回归(WinNonlin5.2，Pharsight)确定。将数据使用以下所示的S形Emax模型进行建模，其中Emax是在不存在药物的情况下观察到的最大生长；E0是最大杀死，EC50是给出50％响应的浓度，并且N是Hill因子。
E = E max - ( E max - E 0 ) · C N C N + EC 50 N
对组合的剂量组以及针对单独剂量方案进行PK/PD分析。拟合的良好性通过评价模型计算的参数、Aikaike标准以及加权残值的分析中的可变性来确定。
通过建模确定的PK/PD参数用于确定达到静态响应所要求的暴露以及与在疗法开始时的计数相比菌落计数的1-log和2-log减少。
针对实施例5测定的酿脓链球菌ATCC12384的MIC值是0.125μg/mL。
在用酿脓链球菌ATCC12384感染的中性粒细胞减少小鼠大腿中测定与在ABT存在下腹膜内施用实施例5相关的血浆暴露。针对每个卫星PK计算的经计算的药物代谢动力学参数在表10中呈现。将此数据与针对在金黄色葡萄球菌中性粒细胞减少的大腿模型中的血浆暴露建立的共有剂量/暴露关系进行比较。共有关系被定义为Y＝(1,022.7)*(X1.2019)相关，其中Y是AUC无限大(ηgh/mL)，并且X是所测量的剂量(mg/kg)。
表10.在酿脓链球菌感染的小鼠中在ABT存在下施用的实施例5的血浆药物代谢动力学。
图2示出在用ABT预处理的中性粒细胞减少的小鼠的大腿中针对酿脓链球菌ATCC12384的实施例5剂量响应。每个点表示16个大腿的平均值。在疗法开始时，细菌负荷是6.38±0.03CFU/g。细菌在媒介物组中生长2.6-logCFU/g。出于比较在单独实验中腹膜内施用阿莫西林。
计算来自剂量响应研究的PK/PD参数。假设，AUC/MIC参数是与活性最佳相关的参数，因为此驱动因素已经显示与在系列中的前述化合物情况下的功效最佳相关并且与体外功效高度相关。对给药溶液进行分析以评定所测量的剂量，并且共有暴露关系用于估计血浆暴露。计算的AUC值以μgh/mL呈现。
从单个剂量响应研究产生中性粒细胞减少小鼠模型中酿脓链球菌ATCC12384的PK/PD参数。针对停滞、1-log和2-log减少的AUC值分别被确定为60、76和95μg.h/mL。
针对酿脓链球菌ATCC12384计算的游离血浆AUC/MIC量值在表11中呈现。
表11.实施例5对比酿脓链球菌ATCC12384的游离血浆AUC/MIC量值
a研究的数量。
b作用浓度中值±平均值的标准误差(％差异系数)。
总结
在给药范围内的实施例5药物代谢动力学证明与在金黄色葡萄球菌中性粒细胞减少大腿模型中证明的暴露一致的暴露。所述共有暴露与酿脓链球菌ATCC12384MIC值和小鼠游离血浆水平结合用于确定与抑菌作用相关且针对模型中的1-和2-log减少的游离AUC/MIC量值。
实施例5显示在中性粒细胞减少小鼠中针对酿脓链球菌ATCC12384的体内剂量依赖性功效。游离AUC/MIC比例要求抑菌作用和1-和2-log减少，相对于初始细菌负荷分别是106、135和168。
实施例5的体外抗细菌活性
本研究的目标是测定实施例5针对革兰氏阳性、革兰氏阴性、营养苛求性以及厌氧细菌分离物的集合的体外抗细菌活性。所进行的测试包括最小抑制浓度(MIC)、最低杀菌浓度(MBC)以及在血清(小鼠和人)存在下的MIC。在这些研究中利用的细菌分离物主要包括最近获得的地理上多样的临床分离物，而且还包括CLSI质量对照参照菌株、内部筛选组培养物以及具有限定的抗性机制的分离物。
使用CLSI肉汤微量稀释法或琼脂稀释法(淋病奈瑟菌)方法来测定MIC值。对于肉汤微量稀释法敏感性测试，制备储备化合物母板并且用于将连续2倍药物稀释液的2μL等分部分点样至96孔子板的列1-11中。列12不含药物并且充当生长对照。使用TecanFreedomEVO或Perkin-ElmerMiniTrakTM多位置液体处理机器人将100μL(5x10E5CFU/mL)的接种物体积直接添加至96孔板的每个孔。针对含有≥10个分离物的生物体组测定MIC范围，MIC50和MIC90。MIC50和MIC90被定义为分别抑制50％和90％的所测试的临床分离物的组合组的生长的化合物的浓度。至少一个CLSI质量对照参照生物体和对照化合物用于验证敏感性测试以确保在测试日期或对照化合物之间不存在变化。按照临床和实验室标准研究所准则(Methodsfordilutionantimicrobialsusceptibilitytestsforbacteriathatgrowaerobically；approvedstandard.第九版.Wayne,PA.第32卷.第2期；Methodsforantimicrobialsusceptibilitytestingofanaerobicbacteria；approvedstandard.第七版.Wayne,PA.第27卷第2期；以及Methodsfordeterminingbactericidalactivityofantimicrobialagents；approvedguideline.Wayne,PA.第19卷第18期)测定针对每种生物体/药物组合获得的MIC和MBC值。参照化合物的敏感性断点解释连同参照细菌菌株的QC范围描述于CLSIdocumentsPerformanceforantimicrobialsusceptibilitytesting；第二十一信息增刊.Wayne,PA.第31卷.第1期，以及Performancestandardsforantimicrobialsusceptibilitytesting；第二十二信息增刊.Wayne,PA.第32卷.第3期。对所测试的所有物种进行肉汤微量稀释法MIC测试，除利用琼脂稀释法的厌氧菌和淋病奈瑟氏菌之外。在军团菌肉汤中进行用于嗜肺军团菌的肉汤微量稀释法MIC。将嗜肺军团菌的菌株在转移之前在缓冲炭酵母提取物(BCYE)琼指平板上初始生长48小时。
目测读取单独分离物的MIC值，使用CUMPER(累积百分比的简称)(一种内部统计软件程序)生成MIC测定(MIC范围，MIC50、MIC90)和累积百分数抑制曲线图。
实施例5针对单独革兰氏阳性、革兰氏阴性以及厌氧细菌分离物的抗细菌谱在表12和13中呈现。总体上，实施例5针对所测试的葡萄球菌、链球菌、流感嗜血杆菌、卡他莫拉菌、梭菌属各种、大芬戈尔德菌(Finegoldiamagna)以及产黑素普雷沃氏菌(Prevotellamelaninogenica)分离物具有活性。还针对具有表征的旋转酶和拓扑异构酶突变的金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌以及酿脓链球菌菌株评价实施例5和比较例的抗细菌活性。未发现实施例5针对具有gyrA、gyrB、ParC或ParE中的频繁遭遇的突变的细菌临床分离物的交叉抗性，所述突变已知引起对喹诺酮、新生霉素和香豆霉素A1的抗性。
在MIC90研究中针对676种最近获得的革兰氏阳性和营养苛求性革兰氏阴性细菌临床分离物的集合评价实施例5和比较例。针对金黄色葡萄球菌的100个菌株，实施例5(MIC900.25μg/mL)是所测试的活性最高的化合物，并且维持针对对左氧氟沙星、利奈唑胺和万古霉素抗性的分离物的此活性。还针对凝固酶阴性葡萄球菌的99种菌株观察到这种高度抗细菌活性和交叉抗性的缺乏，包括表皮葡萄球菌(MIC900.25μg/mL，n＝37)、溶血葡萄球菌(MIC900.25μg/mL，n＝21)、里昂葡萄球菌(MIC900.5μg/mL，n＝11)以及腐生葡萄球菌(MIC900.5μg/mL，n＝16)。针对肺炎链球菌、酿脓链球菌和无乳链球菌中的每种的100个菌株，实施例5是非常活性的，其中MIC50值和MIC90值分别是0.125μg/mL和0.25μg/mL。未观察到实施例5对于针对左氧氟沙星、红霉素或阿莫西林有抗性的任何链球菌的交叉抗性。
与葡萄球菌和链球菌相比，观察到实施例5针对肠球菌的降低的活性，其中粪肠球菌(n＝51)导致最低MIC(MIC范围0.125-2μg/mL和MIC902μg/mL)并且屎肠球菌MIC高大约8倍(MIC9016μg/mL)。测量到实施例5针对11种菌株，活性枯草杆菌和蜡样芽孢杆菌(作为炭疽芽孢杆菌的替代物)中的每种的活性。针对两个物种的MIC90是0.5μg/mL。实施例5针对炭疽芽孢杆菌的BSL3测试证实这种活性(MIC范围0.125-1μg/mL，和MIC900.5μg/mL)。
实施例5的抗细菌活性还涵盖营养苛求性革兰氏阴性生物体，包括流感嗜血杆菌(n＝29)、嗜肺军团菌(n＝11)以及17种淋病奈瑟氏菌菌株。MIC范围对比这些生物体组分别是0.125-1μg/mL、0.008-0.06μg/mL和0.03-0.25μg/mL。对应MIC90分别是1μg/mL、0.06μg/mL和0.125μg/mL。在对环丙沙星具有抗性的淋病奈瑟菌的菌株中未观察到与实施例5的交叉抗性。
在不同浓度的小鼠和人血清(0％、10％、25％、50％)中评定实施例5的对MIC值的血清蛋白结合作用。针对所测试的9种金黄色葡萄球菌菌株，在50％人血清存在下观察到实施例5的2至8倍的MIC增加，并且在50％小鼠血清中观察到更大蛋白质结合作用(8至32倍MIC增加)。
评价实施例5和比较例的针对7种金黄色葡萄球菌菌株和1种酿脓链球菌菌株的杀菌活性。实施例5、左氧氟沙星以及万古霉素针对所有所测试的菌株具有杀菌性，其中最低杀菌浓度(MBC)在MIC的2倍内。实施例5的杀菌活性通过体外时间-杀死研究证实。
表12.实施例5针对各种各样的细菌分离物的体外抗细菌活性
表13.实施例5针对厌氧细菌物种的体外抗细菌活性
总结
实施例5是具有针对关键革兰氏阳性(金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、溶血葡萄球菌、肺炎链球菌、酿脓链球菌和无乳链球菌)、营养苛求性革兰氏阴性(流感嗜血杆菌、嗜肺军团菌、卡他莫拉菌、淋病奈瑟氏菌)和厌氧(艰难梭菌)细菌物种(包括具有对氟喹诺酮的已知抗性的分离物)的体外抗细菌活性的DNA旋转酶/拓扑异构酶抑制剂。未观察到实施例5针对新近的细菌临床分离物的交叉抗性，所述分离物具有对其它药物类别(包括大环内酯类、β-内酰胺、糖肽以及噁唑烷酮)的抗性。
具有连续传代的金黄色葡萄球菌和酿脓链球菌中的抗性的出现
本研究的目标是测定在甲氧西林敏感性金黄色葡萄球菌、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌和酿脓链球菌的代表性分离物中的连续传代期间对实施例5的抗性的出现。
从血液琼脂平板(Remel,LenexaKS)中收获新鲜生长的金黄色葡萄球菌516和2398以及酿脓链球菌838，悬浮于3mL阳离子调节的米勒欣顿2肉汤(MHB2)(Sigma-Aldrich，St.LouisMO)中并且冷冻的样品作为传代零。将这些培养物稀释至无菌盐水(Remel)中的0.5McFarland，然后将其1:200稀释至新鲜肉汤中并且用作接种物。在整个实验中使用的培养基和孵育条件是对于金黄色葡萄球菌MHB2和在环境空气中36℃,并且对于酿脓链球菌838是MHB2添加2.5％裂解马血和在5％CO2中36℃(HemaResourceInc.,Aurora,OR)。
在DMSO中制备一系列两倍增加浓度的实施例5并且将40μL的每种浓度分配至24孔培养板(Costar,CorningNY)的孔中。将板密封并冷冻在-80℃下且每天解冻。将总计2mL的接种物添加至每个孔，并且将板20至24小时。将来自允许可见细菌生长的含有最高测试浓度的测试化合物的孔的细菌细胞冷冻在20％甘油中并且储存在-70℃下且还在无菌盐水(Remel)中再稀释至0.5McFarland并且随后稀释至新鲜培养基中。然后将表示来自0.5XMIC的细胞的这种稀释的培养物分配至含有增加浓度系列的测试化合物的新鲜24孔培养板中。将这重复二十天。
然后将冷冻的样品在不存在化合物的情况下在血液琼脂平板上单集落纯化并且使用标准肉汤微量稀释测定法测试敏感性，根据临床实验室标准研究所的文件M07-A8(Methodsfordilutionantimicroiasusceptibilitytestsforbacteriathatgrowaerobically；approvedstandard.第八版。Wayne,PA.第29卷。第2期。2009)进行。来自表示敏感性降低的针对实施例5具有升高的MIC值的几种传代的分离物被选择用于通过序列分析进行调查。全基因组DNA由所选择的分离物制备，使用标准基因组DNA制备试剂盒(Promega，MadisonWI)。将编码DNA旋转酶(gyrA和gyrB)和拓扑异构酶IV(parC和parE)的两种亚基的基因使用高保真度PCR混合物(Roche,Nutley,NJ)进行扩增。聚合酶链式反应(PCR)产物使用QIAquickPCR纯化试剂盒(Qiagen,Valencia,CA)进行纯化并且在AppliedBiosystems3100GeneticAnalyzer(ABI,FosterCity,CA)使用金黄色葡萄球菌和肺炎链球菌的适当引物进行测序。如果观察到变化，则扩增第二独立的PCR产物并且进行测序以证实变化是真正的并且不是由于在PCR扩增期间掺入误差所导致。
在含有亚抑制浓度的实施例5的液体培养基中进行金黄色葡萄球菌和酿脓链球菌超过二十传代的生长以研究抗性的出现。在实施例5的增加选择压力存在下的二十传代之后，金黄色葡萄球菌和酿脓链球菌ARC838的变体已经分离，所述变体展示相对于起始培养物敏感性降低32倍、16倍和8倍。对实施例5的敏感性的这种损失不与对利奈唑胺、万古霉素以及左氧氟沙星大于4倍的敏感性的任何变化相关联。
所测试的实施例5针对淋病奈瑟氏菌的体外活性和效力
淋病奈瑟氏菌是全世界性传播疾病的显著病因。在历史上青霉素在淋病的治疗中是有效的，但质粒介导的产生淋病奈瑟氏菌(PPNG)菌株的青霉素酶在世界范围内传播，从而将青霉素的经验性使用限制于具有PPNG的已知低流行、其它青霉素抗性机制的某些地理区域。此外，抗性发展已经针对用于淋球菌感染的经验疗法的几种替代抗微生物类别试剂发生，包括氟喹诺酮(环丙沙星)、四环素和大环内酯类(阿奇霉素)。100种淋病奈瑟氏菌的集合(包括对阿奇霉素、环丙沙星、青霉素以及四环素不敏感的分离物)在体外通过CLSI参考琼脂稀释法针对实施例5和比较例试剂进行测试。结果指示实施例5是针对所有测试的分离物高度活性的(在≤0.25μg/ml下的MIC值)并且似乎不存在与其它测试的比较例类别的交叉抗性。
对来自JMI实验室(NorthLiberty,IowaUSA)的总计100种储备临床和ATCC质量对照淋病奈瑟氏菌分离物进行了测试。集合包括具有以下特征的菌株：
表型 分离物的数量
环丙沙星抗性 47a
青霉素抗性 63b
环丙沙星抗性和青霉素抗性 24c
总计 100d
a主要是北美和一些欧洲分离物
b近似相等数量的北美和欧洲分离物
c主要是北美和一些欧洲分离物
d具有在≥0.5μg/mL(非敏感性)下的阿奇霉素MIC的二十七种分离物
方法：
A.使用用于如在M07-A9[2012]中所描述的淋球菌的参考CLSI琼脂稀释法来测定淋病奈瑟氏菌的MIC值。
B.用于淋病奈瑟氏菌测试的琼脂稀释板(具有1％确定补充物的GC琼脂基质)由JMI实验室产生。
C.比较例试剂通过Sigma-Aldrich或其相应制造商由JMI实验室提供。
D.用于比较例化合物的质量对照(QC)范围和解释标准如在CLSIM100-S23[2013]和EUCAST[2013]中所公布。QC菌株是淋病奈瑟氏菌ATCC49226。
实施例5是针对所测试的所有淋病奈瑟氏菌菌株活性的，展示出≤0.004至0.25μg/mL的MIC范围和0.06/0.125μg/mL的MIC50/90。总计99.0％的分离物展示出MIC值≤0.125μg/mL。仅存在具有0.25μg/mL的MIC值的一种分离物。
实施例5证明针对青霉素中间体和青霉素抗性菌株的类似活性，其中模态MIC值为0.06μg/mL以及MIC50/90值分别0.06/0.06μg/mL和0.06/0.12μg/mL[85.7％的分离物在≤0.06μg/mL下]。
环丙沙星中间体和环丙沙星抗性菌株也显示对实施例5的0.06μg/mL的模态MIC值，其中MIC50/90值为0.06/0.12μg/mL。
实施例5展示针对四环素中间体和四环素抗性菌株的类似活性，其中模态MIC值为0.06μg/mL以及MIC50/90值分别为0.06/0.06μg/mL和0.06/0.12μg/mL[66.7％的分离物在≤0.06μg/mL下]。
阿奇霉素敏感性和阿奇霉素中间体分离物的模态值是0,06μg/mL，其中MIC50/90值分别为0.06/0.06μg/mL和0.06/0/0.12μg/mL[66.7％的分离物在≤0.06μg/mL下]。
针对阿奇霉素的所有100种菌株的MIC50/90值是0.25/0.5μg/mL；对于头孢克肟是0.03/0.06μg/mL；对于头孢曲松是0.015/0.06μg/mL；对于环丙沙星是0.25/>2μg/mL；对于青霉素是2/>2μg/mL；并且对于四环素是1/2μg/mL。
实施例5(MIC90，0.12μg/mL)比阿奇霉素(MIC90，0.5μg/mL)活性高四倍，比头孢克肟和头孢曲松(MIC900.06μg/mL)活性低两倍，比四环素(MIC90，2μg/mL)活性高16倍，并且比环丙沙星和青霉素(MIC90.2μg/mL)活性高>32倍。
当针对QC菌株(淋病奈瑟氏菌ATCC49226)测试时实施例5MIC值是0.06、0.12和0.12μg/mL。
总结：实施例5是针对淋病奈瑟氏菌分离物高度活性的，其中99.0％的分离物展示出≤0.125μg/mL的MIC值。实施例5比头孢克肟和头孢曲松活性低两倍并且比阿奇霉素、环丙沙星、青霉素和四环素活性高4->32倍的范围。对于分离物的不同亚群(包括对比较例试剂不敏感的那些)，实施例5的模态MIC值保持相同(0.06μg/mL)。敏感性表型(环丙沙星敏感性、四环素敏感性和阿奇霉素敏感性)的MIC90值是0.06μg/mL。对于非敏感性表型，MIC90值是0.06-0.12μg/mL，从而指示高活性水平和实施例5与比较例试剂的显著交叉抗性的缺乏。

Claims (14)

1.一种化合物或其药学上可接受的盐，其中所述化合物具有式(I)的结构：
其中
X是氟或氯；
R1选自由以下组成的组：氢、苯基、-C≡N、四氢吡喃基、N-甲基-1,2,4-三唑基、嘧啶基、吡啶基、吡嗪基、环丙基、-C≡CH、-CH＝CH2以及C1-C3烷基，所述C1-C3烷基任选地被以下中的一个或多个取代：-OR10、卤素、-C≡N、-N3、-SO2CH3、-SCH3、-CH＝CH2、-CH＝NOR11以及苯基；
R2选自由氢、-C≡N、吡啶基、C1-C3烷基组成的组，所述C1-C3烷基任选地被以下中的一个或多个取代：卤素、-OR20和-CH＝NOR21；
R3是氢或C1-C3烷基；
R10在每次出现时独立地选自由氢、C1-C4烷基和-(CH2)2OCH3组成的组；以及
R11、R20和R21在每次出现时独立地是氢或C1-C4烷基。
2.如权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中R10是氢、甲基、乙基或-(CH2)2OCH3。
3.如权利要求1或2所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中R11是氢或甲基。
4.如权利要求1-3中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中R20是氢、甲基或乙基。
5.如权利要求1-4中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中R21是氢或甲基。
6.如权利要求1-5中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中R1选自由以下组成的组：氢、甲基、乙基、苯基、-CH2-苯基、-CH2F、-CH2OCH3、-CH2CH＝CH2、四氢吡喃基、-(CH2)3OH、-(CH2)3F、-(CH2)3OH、-(CH2)3F、-CH＝CH2、-C≡N、-CH＝NOCH3、-CH2SCH3、-CH2SO2CH3、-CH2N3、-CH2OCH2CH3、-CH2O(CH2)2OCH3、环丙基、吡啶基、-CH(CH3)OCH3、嘧啶基、吡嗪基、-C≡CH、N-甲基-1,2,4-三唑基、-CH(OH)CH3、-CH＝NOH以及-CH2OH。
7.如权利要求1-6中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中R2选自由以下组成的组：氢、甲基、乙基、-CH2F、-CH2OCH3、-CH2OH、-CH＝NOH、-CH2N3、吡啶基、-C≡N以及-CH＝NHOCH3。
8.如权利要求1-7中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中R3是氢或甲基。
9.如权利要求1-8中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中所述化合物选自由以下组成的组：
(2R,4S,4aS)-11-氟-2,4-二甲基-8-(2-氧代-1,3-噁唑烷-3-基)-1,2,4,4a-四氢-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮；
(2R,4S,4aS)-11-氟-2,4-二甲基-8-[(4R)-4-甲基-2-氧代-1,3-噁唑烷-3-基]-1,2,4,4a-四氢-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5’-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮；
(2R,4S,4aS)-11-氟-2,4-二甲基-8-[(5S)-5-甲基-2-氧代-1,3-噁唑烷-3-基]-1,2,4,4a-四氢-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮；
(2R,4S,4aS)-11-氟-2,4-二甲基-8-[(5R)-5-甲基-2-氧代-1,3-噁唑烷-3-基]-1,2,4,4a-四氢-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮；
(2R,4S,4aS)-11-氟-2,4-二甲基-8-[(4S)-4-甲基-2-氧代-1,3-噁唑烷-3-基]-1,2,4,4a-四氢-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮；
(2R,4S,4aS)-8-[(4S)-4-乙基-2-氧代-1,3-噁唑烷-3-基]-11-氟-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氢-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮；
(2R,4S,4aS)-8-[(4R)-4-乙基-2-氧代-1,3-噁唑烷-3-基]-11-氟-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氢-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮)；
(2R,4S,4aS)-11-氟-2,4-二甲基-8-[(4R)-2-氧代-4-苯基-1,3-噁唑烷-3-基]-1,2,4,4a-四氢-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮；
(2R,4S,4aS)-11-氟-2,4-二甲基-8-[(4S)-2-氧代-4-苯基-1,3-噁唑烷-3-基]-1,2,4,4a-四氢-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮；
(2R,4S,4aS)-8-[(4R)-4-苄基-2-氧代-1,3-噁唑烷-3-基]-11-氟-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氢-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮；
(2R,4S,4aS)-8-[(4S)-4-苄基-2-氧代-1,3-噁唑烷-3-基]-11-氟-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氢-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮；
(2R,4S,4aS)-8-(5,5-二甲基-2-氧代-1,3-噁唑烷-3-基)-11-氟-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氢-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮；
(2R,4S,4aS)-8-[(5S)-5-乙基-2-氧代-1,3-噁唑烷-3-基]-11-氟-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氢-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮；
(2R,4S,4aS)-8-[(5R)-5-乙基-2-氧代-1,3-噁唑烷-3-基]-11-氟-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氢-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮；
(2R,4S,4aS)-11-氟-8-[(4R)-4-(氟甲基)-2-氧代-1,3-噁唑烷-3-基]-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氢-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮；
(2R,4S,4aS)-11-氟-8-[(4S)-4-(氟甲基)-2-氧代-1,3-噁唑烷-3-基]-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氢-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮；
(2R,4S,4aS)-11-氟-8-[(4S)-4-(甲氧基甲基)-2-氧代-1,3-噁唑烷-3-基]-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氢-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮；
(2R,4S,4aS)-11-氟-8-[(4R)-4-(甲氧基甲基)-2-氧代-1,3-噁唑烷-3-基]-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氢-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮；
(2R,4S,4aS)-11-氟-8-((S)-5-(氟甲基)-2-氧代噁唑烷-3-基)-2,4-二甲基-2,4,4a,6-四氢-1H,1'H-螺[异噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮；
(2R,4S,4aS)-11-氯-8-[(5S)-4-(甲氧基甲基)-2-氧代-1,3-噁唑烷-3-基]-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氢-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮；
(2R,4S,4aS)-11-氯-8-[(5R)-4-(甲氧基甲基)-2-氧代-1,3-噁唑烷-3-基]-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氢-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮；
((2R,4S,4aS)-11-氯-2,4-二甲基-8-((R)-5-甲基-2-氧代噁唑烷-3-基)-2,4,4a,6-四氢-1H,1'H-螺[异噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮；
(2R,4S,4aS)-8-((4S,5R)-4,5-二甲基-2-氧代噁唑烷-3-基)-11-氟-2,4-二甲基-2,4,4a,6-四氢-1H,1'H-螺[异噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮；
(2R,4S,4aS)-8-((4R,5S)-4,5-二甲基-2-氧代噁唑烷-3-基)-11-氟-2,4-二甲基-2,4,4a,6-四氢-1H,1'H-螺[异噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮；
(2R,4S,4aS)-8-((S)-4-烯丙基-2-氧代噁唑烷-3-基)-11-氟-2,4-二甲基-2,4,4a,6-四氢-1H,1'H-螺[异噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮；
(2R,4S,4aS)-11-氟-8-((S)-5-(羟甲基)-2-氧代噁唑烷-3-基)-2,4-二甲基-2,4,4a,6-四氢-1H,1'H-螺[异噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮；
((2R,4S,4aS)-11-氟-2,4-二甲基-8-[(4R-(四氢-2H-吡喃-4-基)-2-氧代-1,3-噁唑烷-3-基]-1,2,4,4a-四氢-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮；
(2R,4S,4aS)-11-氟-2,4-二甲基-8-[(4S-(四氢-2H-吡喃-4-基)-2-氧代-1,3-噁唑烷-3-基]-1,2,4,4a-四氢-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮；
(2R,4S,4aS)-11-氟-8-((S)-4-(3-羟丙基)-2-氧代噁唑烷-3-基)-2,4-二甲基-2,4,4a,6-四氢-1H,1'H-螺[异噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮；
(2R,4S,4aS)-11-氟-8-((S)-4-(3-氟丙基)-2-氧代噁唑烷-3-基)-2,4-二甲基-2,4,4a,6-四氢-1H,1'H-螺[异噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮；
(2R,4S,4aS)-11-氟-8-((S)-4-(2-羟乙基)-2-氧代噁唑烷-3-基)-2,4-二甲基-2,4,4a,6-四氢-1H,1'H-螺[异噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮；
(2R,4S,4aS)-11-氯-8-((S)-5-(氟甲基)-2-氧代噁唑烷-3-基)-2,4-二甲基-2,4,4a,6-四氢-1H,1'H-螺[异噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮；
(2R,4S,4aS)-11-氯-8-((S)-4-(3-羟丙基)-2-氧代噁唑烷-3-基)-2,4-二甲基-2,4,4a,6-四氢-1H,1'H-螺[异噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮；
(2R,4S,4aS)-11-氯-8-((S)-4-(3-氟丙基)-2-氧代噁唑烷-3-基)-2,4-二甲基-2,4,4a,6-四氢-1H,1'H-螺[异噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮；
(2R,4S,4aS)-11-氟-8-[(5S)-4-(甲氧基甲基)-2-氧代-1,3-噁唑烷-3-基]-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氢-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮；
(2R,4S,4aS)-11-氟-8-[(5R)-4-(甲氧基甲基)-2-氧代-1,3-噁唑烷-3-基]-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氢-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮；
(2R,4S,4aS)-11-氟-8-[(5R)-5-(羟甲基)-2-氧代-1,3-噁唑烷-3-基]-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氢-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮；
(2R,4S,4aS)-11-氟-8-[(5R)-5-(氟甲基)-2-氧代-1,3-噁唑烷-3-基]-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氢-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮；
(2R,4S,4aS)-11-氟-2,4-二甲基-8-((S)-2-氧代-4-乙烯基噁唑烷-3-基)-2,4,4a,6-四氢-1H,1'H-螺[异噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮；
(2R,4S,4aS)-11-氟-8-{(5R)-5-[(羟基亚氨基)甲基]-2-氧代-1,3-噁唑烷-3-基}-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氢-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮；
(4S)-3-[(2R,4S,4aS)-11-氟-2,4-二甲基-2',4',6'-三氧代-1,1',2,3',4,4',4a,6'-八氢-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-8-基]-2-氧代-1,3-噁唑烷-4-甲腈；
(2R,4S,4aS)-11-氟-8-{(4S)-4-[(甲氧基亚氨基)甲基]-2-氧代-1,3-噁唑烷-3-基}-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氢-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮；
(2R,4S,4aS)-11-氟-8-{(5R)-5-(甲氧基亚氨基)甲基]-2-氧代-1,3-噁唑烷-3-基}-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氢-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮；
(2R,4S,4aS)-8-[(5R)-5-(叠氮甲基)-2-氧代-1,3-噁唑烷-3-基]-11-氟-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氢-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮；
(2R,4S,4aS)-11-氟-2,4-二甲基-8-((R)-4-((甲硫基)甲基)-2-氧代噁唑烷-3-基)-2,4,4a,6-四氢-1H,1'H-螺[异噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮；
(2R,4S,4aS)-11-氟-2,4-二甲基-8-((R)-4-((甲磺酰基)甲基)-2-氧代噁唑烷-3-基)-2,4,4a,6-四氢-1H,1'H-螺[异噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮；
(2R,4S,4aS)-8-((R)-4-(叠氮甲基)-2-氧代噁唑烷-3-基)-11-氟-2,4-二甲基-2,4,4a,6-四氢-1H,1'H-螺[异噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮；
(2R,4S,4aS)-8-((S)-4-(叠氮甲基)-2-氧代噁唑烷-3-基)-11-氟-2,4-二甲基-2,4,4a,6-四氢-1H,1'H-螺[异噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮；
(2R,4S,4aS)-8-[(4S)-4-(乙氧基甲基)-2-氧代-1,3-噁唑烷-3-基]-11-氟-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氢-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮；
(2R,4S,4aS)-11-氟-8-{(4S)-4-[(2-甲氧基乙氧基)甲基]-2-氧代-1,3-噁唑烷-3-基}-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氢-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮；
(2R,4S,4aS)-8-((R)-4-(二氟甲基)-2-氧代噁唑烷-3-基)-11-氟-2,4-二甲基-2,4,4a,6-四氢-1H,1'H-螺[异噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮；
(2R,4S,4aS)-8-((S)-4-环丙基-2-氧代噁唑烷-3-基)-11-氟-2,4-二甲基-2,4,4a,6-四氢-1H,1'H-螺[异噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮；
(2R,4S,4aS)-11-氟-2,4-二甲基-8-((R)-2-氧代-5-(吡啶-2-基)噁唑烷-3-基)-2,4,4a,6-四氢-1H,1'H-螺[异噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮；
(2R,4S,4aS)-11-氟-2,4-二甲基-8-((S)-2-氧代-5-(吡啶-2-基)噁唑烷-3-基)-2,4,4a,6-四氢-1H,1'H-螺[异噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮；
(2R,4S,4aS)-11-氟-2,4-二甲基-8-((R)-2-氧代-4-(吡啶-2-基)噁唑烷-3-基)-2,4,4a,6-四氢-1H,1'H-螺[异噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮；
(2R,4S,4aS)-11-氟-2,4-二甲基-8-((S)-2-氧代-4-(吡啶-2-基)噁唑烷-3-基)-2,4,4a,6-四氢-1H,1'H-螺[异噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮；
(2R,4S,4aS)-11-氟-2,4-二甲基-8-((R)-2-氧代-4-(吡啶-4-基)噁唑烷-3-基)-2,4,4a,6-四氢-1H,1'H-螺[异噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮；
(2R,4S,4aS)-11-氟-2,4-二甲基-8-((S)-2-氧代-4-(吡啶-4-基)噁唑烷-3-基)-2,4,4a,6-四氢-1H,1'H-螺[异噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮；
(2R,4S,4aS)-11-氟-8-((R)-4-((R)-1-甲氧基乙基)-2-氧代噁唑烷-3-基)-2,4-二甲基-2,4,4a,6-四氢-1H,1'H-螺[异噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮；
(2R,4S,4aS)-11-氟-8-((R)-4-((S)-1-甲氧基乙基)-2-氧代噁唑烷-3-基)-2,4-二甲基-2,4,4a,6-四氢-1H,1'H-螺[异噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮；
(2R,4S,4aS)-11-氟-2,4-二甲基-8-((R)-2-氧代-4-(吡嗪-2-基)噁唑烷-3-基)-2,4,4a,6-四氢-1H,1'H-螺[异噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮；
(2R,4S,4aS)-11-氟-2,4-二甲基-8-((S)-2-氧代-4-(吡嗪-2-基)噁唑烷-3-基)-2,4,4a,6-四氢-1H,1'H-螺[异噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮；
(2R,4S,4aS)-11-氟-2,4-二甲基-8-((R)-2-氧代-4-(嘧啶-2-基)噁唑烷-3-基)-2,4,4a,6-四氢-1H,1'H-螺[异噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮；
(2R,4S,4aS)-11-氟-2,4-二甲基-8-((S)-2-氧代-4-(嘧啶-2-基)噁唑烷-3-基)-2,4,4a,6-四氢-1H,1'H-螺[异噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮；
(2R,4S,4aS)-8-((S)-4-乙炔基-2-氧代噁唑烷-3-基)-11-氟-2,4-二甲基-2,4,4a,6-四氢-1H,1'H-螺[异噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮；
(2R,4S,4aS)-11-氯-2,4-二甲基-8-((S)-4-甲基-2-氧代噁唑烷-3-基)-2,4,4a,6-四氢-1H,1'H-螺[异噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮；
(2R,4S,4aS)-11-氟-8-[(4S)-4-(甲氧基甲基)-2-氧代-1,3-噁唑烷-3-基]-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氢-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮；
(2R,4S,4aS)-11-氟-2,4-二甲基-8-((S)-4-(1-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-2-氧代噁唑烷-3-基)-2,4,4a,6-四氢-1H,1'H-螺[异噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮；
(2R,4S,4aS)-11-氟-2,4-二甲基-8-((R)-4-(1-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-2-氧代噁唑烷-3-基)-2,4,4a,6-四氢-1H,1'H-螺[异噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮；
(2R,4S,4aS)-11-氟-8-((R)-4-((S)-1-羟乙基)-2-氧代噁唑烷-3-基)-2,4-二甲基-2,4,4a,6-四氢-1H,1'H-螺[异噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮；
{(4S)-3-[(2R,4S,4aS)-11-氟-2,4-二甲基-2',4',6'-三氧代-1,1',2,3',4,4',4a,6'-八氢-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-8-基]-2-氧代-1,3-噁唑烷-4-基}乙腈；
(2R,4S,4aS)-8-((R)-4-((R)-1,2-二羟乙基)-2-氧代噁唑烷-3-基)-11-氟-2,4-二甲基-2,4,4a,6-四氢-1H,1'H-螺[异噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮；
(2R,4S,4aS)-8-((R)-4-((S)-1,2-二羟乙基)-2-氧代噁唑烷-3-基)-11-氟-2,4-二甲基-2,4,4a,6-四氢-1H,1'H-螺[异噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮；
(2R,4S,4aS)-11-氟-8-{(4S)-4-[(羟基亚氨基)甲基]-2-氧代-1,3-噁唑烷-3-基}-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氢-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮；
(5R)-3-[(2R,4S,4aS)-11-氟-2,4-二甲基-2',4',6'-三氧代-1,1',2,3',4,4',4a,6'-八氢-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-8-基]-2-氧代-1,3-噁唑烷-5-甲腈；以及
(5S)-3-[(2R,4S,4aS)-11-氟-2,4-二甲基-2',4',6'-三氧代-1,1',2,3',4,4',4a,6'-八氢-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-8-基]-2-氧代-1,3-噁唑烷-5-甲腈，
或其药学上可接受的盐。
10.一种药物组合物，其包含如权利要求1-9中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐以及药学上可接受的赋形剂或稀释剂。
11.如权利要求1-9中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐用于治疗细菌感染或用于抑制细菌DNA旋转酶的用途。
12.如权利要求1-9中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐在制造用于治疗细菌感染或用于抑制细菌DNA旋转酶的药剂中的用途。
13.一种用于治疗有需要的受试者中的细菌感染的方法，所述方法包括施用有效量的如权利要求1-9中任一项中所述的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。
14.一种用于抑制细菌DNA旋转酶的方法，所述方法包括施用有效量的如权利要求1-9中任一项中所述的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。
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Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN108060207A (zh) * 2017-12-29 2018-05-22 河南科技大学 一种基于微量天然化合物的最小杀菌浓度测定方法
WO2018233663A1 (zh) * 2017-06-22 2018-12-27 中国科学院上海药物研究所 噻唑烷酮螺嘧啶三酮类化合物及制备方法和用途
CN109111466A (zh) * 2017-06-22 2019-01-01 中国科学院上海药物研究所 苯并异噁唑螺嘧啶三酮类化合物及制备方法和用途
CN112341402A (zh) * 2020-05-13 2021-02-09 河南科技大学第一附属医院 一种可用于医疗护理过程中抑菌的嘧啶类化合物的制备方法及应用

Families Citing this family (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US9040528B2 (en) * 2008-10-14 2015-05-26 Astrazeneca Ab Chemical compounds 542
US8889671B2 (en) * 2013-01-23 2014-11-18 Astrazeneca Ab Compounds and methods for treating bacterial infections
CN106659725A (zh) * 2014-05-29 2017-05-10 恩塔西斯治疗有限公司 用于治疗细菌感染的稠合螺环杂芳族化合物
CN108136211A (zh) * 2015-10-29 2018-06-08 马里兰大学派克分院 用于抑制人宫颈内膜中的细菌感染的组合物和方法
CN106632298B (zh) * 2015-11-03 2021-06-01 上海科胜药物研发有限公司 一种泰地唑胺的制备方法及其中间体
KR102655318B1 (ko) 2017-06-01 2024-04-04 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 치환된 질소 함유 화합물
WO2018233670A1 (zh) * 2017-06-22 2018-12-27 中国科学院上海药物研究所 苯并异噁唑螺嘧啶三酮类化合物及制备方法和用途
US11905286B2 (en) 2018-08-09 2024-02-20 Antabio Sas Diazabicyclooctanones as inhibitors of serine beta-lactamases

Family Cites Families (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH0759570B2 (ja) 1986-05-06 1995-06-28 三井東圧化学株式会社 ２−オキサゾリジノン類の製造方法
US7208490B2 (en) 2002-10-07 2007-04-24 Pharmacia & Upjohn Company Llc Tricyclic tetrahydroquinoline antibacterial agents
WO2005016929A1 (en) 2003-08-15 2005-02-24 Astrazeneca Ab Fused heterocylcles as inhibitors of glutamate racemase (muri)
WO2005066119A2 (en) 2003-12-31 2005-07-21 Schering-Plough Ltd. Antibacterial 1-(4-mono-and di-halomethylsulphonylphenyl)-2-acylamino-3-fluoropropanols and preparation thereof
CA2606847A1 (en) 2005-05-09 2006-11-16 Warner-Lambert Company Llc Antibacterial agents
DOP2006000268A (es) 2005-12-22 2007-07-31 Pfizer Prod Inc Agentes antibacterianos
CL2007003332A1 (es) * 2006-11-24 2008-06-20 Actelion Pharmaceuticals Ltd Compuestos derivados de heterociclos condensados; compuestos intermediarios; composicion farmaceutica; y uso en la prevencion o tratamiento de infecciones bacterianas.
US20100261719A1 (en) 2007-07-02 2010-10-14 Gregory Steven Basarab Chemical compounds
US8658641B2 (en) * 2008-10-14 2014-02-25 Astrazeneca Ab Fused, spirocyclic heteroaromatic compounds for the treatment of bacterial infections
US9040528B2 (en) 2008-10-14 2015-05-26 Astrazeneca Ab Chemical compounds 542
US8952149B2 (en) 2012-09-26 2015-02-10 Zoetis Llc Tricyclic tetrahydroquinoline antibacterial agents
US8889671B2 (en) * 2013-01-23 2014-11-18 Astrazeneca Ab Compounds and methods for treating bacterial infections

Cited By (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2018233663A1 (zh) * 2017-06-22 2018-12-27 中国科学院上海药物研究所 噻唑烷酮螺嘧啶三酮类化合物及制备方法和用途
CN109111465A (zh) * 2017-06-22 2019-01-01 中国科学院上海药物研究所 噻唑烷酮螺嘧啶三酮类化合物及制备方法和用途
CN109111466A (zh) * 2017-06-22 2019-01-01 中国科学院上海药物研究所 苯并异噁唑螺嘧啶三酮类化合物及制备方法和用途
CN109111465B (zh) * 2017-06-22 2021-01-12 中国科学院上海药物研究所 噻唑烷酮螺嘧啶三酮类化合物及制备方法和用途
US11180509B2 (en) 2017-06-22 2021-11-23 Shanghai Institute Of Materia Medica, Chinese Academy Of Sciences Thiazolidone spiro pyrimidine trione compound, preparation method therefor and uses thereof
CN109111466B (zh) * 2017-06-22 2022-08-02 中国科学院上海药物研究所 苯并异噁唑螺嘧啶三酮类化合物及制备方法和用途
CN108060207A (zh) * 2017-12-29 2018-05-22 河南科技大学 一种基于微量天然化合物的最小杀菌浓度测定方法
CN108060207B (zh) * 2017-12-29 2021-10-15 河南科技大学 一种基于微量天然化合物的最小杀菌浓度测定方法
CN112341402A (zh) * 2020-05-13 2021-02-09 河南科技大学第一附属医院 一种可用于医疗护理过程中抑菌的嘧啶类化合物的制备方法及应用

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