CN105193709B - 一种恩诺沙星注射液及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种恩诺沙星注射液，按重量百分含量包括：10～20％恩诺沙星、10～20％聚乙二醇400、10～20％葡甲胺、20％氢氧化钠。通过以下步骤制备：量取适量的注射用水加热至80℃，加入处方量的葡甲胺搅拌溶解，再加入聚乙二醇400搅拌溶解后，加入恩诺沙星搅拌溶解，用适量的20％氢氧化钠溶液滴加至澄清，搅拌均匀，调节pH值至9.5～10.5，粗滤，精滤，充氮气灌封，121℃热压灭菌20分钟，灯检，包装。本发明为兽医临床提供了一种高含量的恩诺沙星注射液，且刺激性小、稳定性良好，具有长效作用。

Description

一种恩诺沙星注射液及其制备方法

技术领域

本发明属于兽药技术领域，涉及畜牧水产疾病防治的抗菌药物， 具体为一种恩诺沙星注射液及其制备方法。

背景技术

恩诺沙星(Enrofloxacin)，又名恩氟奎林羧酸，分子式： C₁₉H₂₂FN₃O₃，属于氟奎诺酮类(Fluoroquinolones)之化学合成抑菌剂， 为微黄色或淡黄色结晶性粉末，味苦，不溶于水，易溶于氢氧化钠溶 液、甲醇及氰甲烷等有机溶剂。是新一代奎诺酮类抗菌药物的代表， 是畜牧水产疾病防治的专用新药，它不仅保留了奎诺酮类药物光谱、 高效、低毒以及吸收良好，给药方便的特点，而且对多种细菌引起的 各种感染有显著疗效，特别是对各种霉形体的杀伤力显著高于奎诺酮 类其他药物和各种已使用多年的泰乐菌素、泰牧霉素等药物。

目前兽药临床中常见的恩诺沙星剂型有片剂、可溶性粉、溶液剂、 注射剂等。但由于恩诺沙星本身具有强烈的刺激性苦味，适口性差， 不便于口服给药。恩诺沙星还有一种特殊的不良气味，而人的嗅觉难 以发觉。但猪的嗅觉是人的上百倍，特别是小猪的更为敏感。而市面 上常见的粉剂及所谓的包衣技术不能有效掩盖其苦味，导致猪群拒 食，采食量下降。如猪群生病食欲差，再加上恩诺沙星的苦味，采食 量也会大量下降，更难达到预期的治疗效果。而一般注射剂溶液剂 (pH10～13)由于其pH值偏高，注射时刺激性大，给药时引起动物应激 大，尤其是患病幼畜，应激性大会导致其猝死，得不偿失，同时目前 恩诺沙星在临床使用中发现有耐药性产生，现有的注射液在使用时需 要加大注射剂量。因此高浓度的恩诺沙星注射液在畜禽群体疾病防治 实践中有实际的需求，但是现有的高浓度恩诺沙星溶液存在着pH值 偏高、不稳定、刺激性大、疼痛等问题。

发明内容

本发明针对现有恩诺沙星注射液存在的浓度低、刺激性大等问 题，目的在于提供一种恩诺沙星注射液，克服了由于注射液含量低、 pH值较高而引起的动物应激反应大、需多次给药等问题。

本发明具体通过以下技术方案实现：

一种恩诺沙星注射液，按重量百分含量包括：10～20％恩诺沙星、 10～20％聚乙二醇400、10～20％葡甲胺、20％氢氧化钠，其余为注射 用水。

优选的，一种恩诺沙星注射液，按重量百分含量包括：20％恩诺 沙星、20％聚乙二醇400、20％葡甲胺、20％氢氧化钠，其余为注射 用水。

本发明利用葡甲胺的助溶作用，使葡甲胺(N-甲基-D-葡糖胺) 与恩诺沙星成盐，既促进了恩诺沙星的溶解还减少了氢氧化钠的使用 量，降低了该注射液的pH值。高分子物质聚乙二醇400具有的分散 性促溶作用，以及适宜的pH范围，共同作用使得恩诺沙星溶液稳定 可控。

本发明还提供了所述恩诺沙星注射液的制备方法，包括以下步 骤：量取适量的注射用水加热至80～100℃，加入处方量的葡甲胺搅 拌溶解，再加入处方量的聚乙二醇400搅拌溶解后，加入处方量的恩 诺沙星搅拌溶解，用适量的20％氢氧化钠溶液滴加至澄清，搅拌均匀， 调节pH值至9.5～10.5，注射用水补足至处方量。粗滤，精滤，充氮 气灌封，121℃热压灭菌20分钟，灯检，包装。

本发明的有益效果为：1)混合溶剂降低了高浓度恩诺沙星溶液 的pH值。选取了最佳混合溶剂的配比，利用葡甲胺的助溶作用，使 葡甲胺(N-甲基-D-葡糖胺)与恩诺沙星成盐，既促进了恩诺沙星的 溶解还减少了氢氧化钠的使用量，降低了该注射液的pH值；2)混合溶剂保持了高浓度恩诺沙星溶液的稳定性。注射液中葡甲胺与恩诺 沙星成盐形成的助溶作用，高分子物质聚乙二醇400具有的分散性促 溶作用，以及适宜的pH范围，共同作用使得恩诺沙星溶液稳定可控。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明做进一步的说明，以下所述，仅是对本 发明的较佳实施例而已，并非对本发明做其他形式的限制，任何熟悉 本专业的技术人员可能利用上述揭示的技术内容加以变更为同等变 化的等效实施例。凡是未脱离本发明方案内容，依据本发明的技术实 质对以下实施例所做的任何简单修改或等同变化，均落在本发明的保 护范围内。

实施例1

每100ml恩诺沙星注射液，通过以下步骤制备得到：

1)称取20g氢氧化钠溶于100ml注射用水形成20％氢氧化钠溶 液，备用；

2)称取20g葡甲胺和20ml聚乙二醇400，依次分别溶于70ml、 80℃的注射用水中，完全溶解得到混合溶剂；

3)称取20g恩诺沙星加入混合溶剂中，搅拌溶解；

4)滴加20％氢氧化钠溶液至澄清，搅拌均匀，注射用水补足 100ml，调节pH值至9.5～10.5；

5)粗滤，精滤，充氮气灌封，121℃热压灭菌20分钟，灯检， 包装。

实施例2

每100ml恩诺沙星注射液，通过以下步骤制备得到：

1)称取20g氢氧化钠溶于100ml注射用水中形成20％氢氧化钠 溶液，备用；

2)称取15g葡甲胺和15ml聚乙二醇400，依次分别溶于70ml、 80℃的注射用水中，完全溶解得到混合溶剂；

3)称取15g恩诺沙星加入混合溶剂中，搅拌溶解；

4)滴加20％氢氧化钠溶液至澄清，调节pH值至9.5～10.5，搅拌 均匀，注射用水补足100ml；

5)粗滤，精滤，充氮气灌封，121℃热压灭菌20分钟，灯检， 包装。

实施例3

每100ml恩诺沙星注射液，通过以下步骤制备得到：

1)称取20g氢氧化钠溶于100ml注射用水形成20％氢氧化钠溶 液，备用；

2)称取10g葡甲胺和10ml聚乙二醇400，依次分别溶于70ml、 80℃的注射用水中，完全溶解得到混合溶剂；

3)称取10g恩诺沙星加入混合溶剂中，搅拌溶解；

4)滴加20％氢氧化钠溶液至澄清，调节pH值至9.5～10.5，搅拌 均匀，注射用水补足100ml；

5)粗滤，精滤，充氮气灌封，121℃热压灭菌20分钟，灯检， 包装。

实施例4pH测定及加速稳定性实验

按照《中华人民共和国兽药典》2010年版一部附录246“兽药稳 定性试验指导原则”中的“原料药及制剂稳定性重点考察项目表”^[4]确定本品考察项目选定外观性状、澄明度、pH值及含量测定为考察 内容。

供试品：实施例1～3恩诺沙星注射液。

考察项目：外观性状、澄明度、pH值及含量。

温度加速试验：将供试品置于恒温恒湿培养箱中，调节温度 40℃±2℃，相对湿度75％±5％条件下放置6个月，试验期间每个月取 样一次，对稳定性重点考察项目进行检测，并将考察检测结果与0月 考察数据结果比较。

光加速试验：在室温条件下，将供试品去除外包装，置于药品稳 定性实验箱中，调节照度在4500lx±500lx的条件下放置10日，于第 5日和第10日取样，按照稳定性重点考察项目进行检测，其考察检 测结果并与0天考察数据结果进行比较。

长期试验：供试品置于恒温恒湿培养箱中，调节在温度 25℃±2℃，相对湿度60％±10％条件下放置24个月，分别于0、3、6、 9、12、18、24个月取样，按照稳定性重点考察项目进行检测，其考 察检测结果并与0月考察数据结果进行比较以确定兽药的有效期。

表1：加速试验结果 试验条件：温度40℃ 相对湿度75％

表2：光加速试验结果 试验条件：照度为4500lx

表3：长期试验结果 试验条件：温度25℃ 相对湿度60％

表1、表2、表3所列三个稳定性试验结果表明，本发明实施例 1～3恩诺沙星注射液试制品外观性状均为淡黄色，澄明度均澄清，pH 值均在9.5～10.5，含量均在98.0～102.0％，考察的各项指标均符合2010 版兽药典规定，产品的质量是稳定可控的。其中24个月的测定数据 表明，有效期可暂定为2年。

实施例5肌肉刺激性实验

采用家兔股四头肌肌内注法，取健康6只家兔平均分成2组，每 组3只，雌雄兼有，体重2～2.5kg，分别剪除家兔左侧后肢股四头肌 试验部位的毛，用酒精棉球和2％碘酊棉球对注射部位进行涂擦消毒 后，分别在第一组家兔左侧后肢股四头肌处注射恩诺沙星注射液 1ml，第二组家兔左侧后肢股四头肌处注射灭菌生理盐水1ml，在给 药后2d、7d、15d分别取每组家兔各1只处死，解剖取股四头肌，纵 向切开，观察注射部位肌肉的组织变化，如充血、红肿、变性、坏死 等。量取病变直径，按照肌肉组织刺激反应的评定标准进行评定。另外取两侧注射部位肌肉组织，常规处理后，作病理组织学检查，并评 定刺激反应级数(见表4)，当家兔的平均反应分值在2级以下的， 可判定为符合规定，该产品可用作肌内注射；平均反应分值大于2级 的，可判定为不符合规定，该产品不可用作肌肉注射；

表4：肌肉组织反应分级表

采用家兔股四头肌注法，在给药后2d、7d、15d，眼观无肿胀， 触摸注射部位无硬结。剖检后取股四头肌，纵向切开，观察注射部位 肌肉组织的反应情况，确定反应级数(见表5)，平均分级为1级， 小于2级，生理盐水对照组为0级，给家兔股四头肌注射灭菌生理盐水，肌肉组织与正常肌肉组织相同；注射恩诺沙星注射液2d后注射 部位就出现了肌肉组织红肿、充血等刺激性反应，但随着时间的延长， 给药7d后肌肉组织红肿、充血等刺激性反应完全消失，家兔精神状 态表现良好。显微镜下观察肌纤维组织横纹清晰、结构完整，无变性、 坏死和炎性反应，与生理盐水对照组比较未见明显的病理变化。

表5：恩诺沙星注射液对家兔股四头肌试验结果

实施例6临床药效试验

1)方法

试验前按常规饲养，自由饮水，分别按照每1千克体重肌肉注射 恩诺沙星注射液，每隔48小时一次，连用2天。停药后继续观察3 天。

2)患病猪的诊断与确诊

2.1依据临床症状：

1个月以上的仔猪很少发病，且发病无季节性，一般情况下，病 猪突然发生腹泻，排出浆状、糊状的，灰白色或黄白色腥臭的粪便， 初期体温和食欲无明显改变，病情严重的，腹泻次数增多，仔猪精神 抑郁，迟钝，逐渐消瘦，发育迟缓，拱背，行动迟缓，皮毛粗糙无光， 不洁，病程为3～7天。疑似仔猪白痢发病症状。

2.2依据剖检病理变化：

尸体消瘦、脱水，皮肤苍白，肛门及尾根部粘着灰白色带腥臭的 粪便。主要病变位于胃和小肠前部，肠内容空虚，含有大量气体和少 量稀薄、黄白色带酸臭味粪便，胃粘膜充血、出血、水肿性肿胀，表 面附有数量不等粘液，肠系膜淋巴结肿大、水肿、滤泡肿胀。肠粘膜 呈卡他性炎症变化。疑似仔猪白痢发病症状。

3)实验结果

3.1山西晋城泽州县川底乡马坝头村的小庙岭种猪场，在2011年 秋季饲养的保育猪2500头，其中有500头发生细菌性腹泻，发病猪 表现拉黄色和白色粪便，按照每千克体重0.05毫升剂量注射使用， 一针过后病情便有所好转，第二针过后，拉黄白色粪便的猪只的病情 已完全控制。第三针用过之后猪只恢复了正常状态。

3.2河南洛阳莲花乡马回村的河南民正畜牧业养殖有限公司，在 2011年的冬季饲养的42000头育肥猪中，其中一猪舍的育肥猪表现 精神不佳。食欲不振，主要表现为呼吸困难，喘气等现象，经综合诊 断为支原体感染，使用20％的恩诺沙星注射液和复方泰乐菌素注射 液，两种注射液都按照每千克体重0.1毫升的剂量注射使用，三天过 后，恢复正常的状态。

Claims (3)

1.一种恩诺沙星注射液，其特征在于按重量百分含量包括：10～20％恩诺沙星、10～20％聚乙二醇400、10～20％葡甲胺、浓度为20％的氢氧化钠溶液适量，余量为注射用水；

所述恩诺沙星注射液的pH值为9.5～10.5。

2.根据权利要求1所述的一种恩诺沙星注射液，其特征在于按重量百分含量包括：20％恩诺沙星、20％聚乙二醇400、20％葡甲胺、浓度为20％的氢氧化钠溶液适量，余量为注射用水。

3.权利要求1或2所述的恩诺沙星注射液的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

1)按处方称取原料为10～20％恩诺沙星、10～20％聚乙二醇400、10～20％葡甲胺、适量氢氧化钠；

2)将氢氧化钠溶于注射用水形成20％氢氧化钠溶液，备用；

3)将葡甲胺和聚乙二醇400依次溶于80℃的注射用水中，完全溶解得到混合溶剂；

4)将恩诺沙星加入混合溶剂中，搅拌溶解；

5)滴加20％氢氧化钠溶液至澄清，调节pH值至9.5～10.5，搅拌均匀，注射用水补足余量；

6)粗滤，精滤，充氮气灌封，121℃热压灭菌20分钟，灯检，包装。