CN105037574B - 一种超声提取紫锥菊多糖的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种超声提取紫锥菊多糖的方法，属于多糖提取技术领域。本发明提供一种超声紫锥菊提取多糖的方法，将紫锥菊地上部分粉碎后，经过脱脂脱色，超声提取、离心、上清液进行旋转蒸发浓缩，醇沉，沉淀依次用无水乙醇、丙酮、乙醚洗涤，干燥，即得紫锥菊多糖。本发明的制备方法，大大缩短了提取时间，大大提高了提取率，并且提取稳定，重现性高，制备得到的紫锥菊多糖溶解性好，得到最佳活性成分。
Description
技术领域
本发明涉及多糖的提取，特别涉及一种超声提取紫锥菊多糖的方法。
背景技术
紫锥菊是闻名世界的免疫药草，原产地位于北美和加拿大南部。其为一种松果菊属植物，该属植物共有8个种和数个变种，目前作为药物开发的主要有3个品种:紫松果菊(Echinacea purpurea，即通常所说的紫锥菊)，狭叶紫锥菊(Echinacea augustifolia)和白色紫锥菊(Echinacen pallida)。研究表明紫锥菊含有多种活性成分，咖啡酸衍生物类、多糖和糖蛋白、烷酰胺类、生物碱类、多炔类、黄酮类、挥发油、甾醇等，其活性成分已成为当前研究热点。
近年来，病菌、病毒引起的疾病严重威胁着人们的健康和生活质量。化学药物被大量应用于控制肿瘤、炎症、病毒等，但是化学药物使用所引起的毒副作用及机体的抗药性，要求我们能够寻求一种新方法或可替代药物从一定程度上解决化学药物问题。天然植物药具有防治病毒感染性疾病的功效、不易产生抗药性的特点，因此，应用天然植物药活性成分解决抗肿瘤、抗炎症、抗病毒、增强免疫成为研究热点。同时，多糖作为天然植物药的主要活性成分有着多种的药理活性：抗肿瘤、抗肝炎、抗病毒、抗衰老、抗突变、降血糖、增强免疫等，多糖的提取工艺亦成为研究的热点。越来越多的人将研究的目光聚焦在天然植物药多糖上。目前，在紫锥菊的活性成分研究中，菊苣酸研究较多，但对多糖还缺乏系统深入研究。选择合适的提取技术，获得提取率较高的紫锥菊多糖，并且还能保证其活性成分成为一个热点研究方向。
发明内容
为了解决提取时间过长，提取率低，以及无法保证其活性成分的问题，本发明提供了一种超声提取紫锥菊多糖的方法。
为了达到上述目的，本发明提供了一种超声提取紫锥菊多糖的方法，包括以下步骤：
第一步，取紫锥菊药材于50-60℃鼓风干燥机中烘干，并粉碎，过40-60目筛，并使用1-3倍量的石油醚溶液中浸泡1-2小时进行处理，将石油醚溶液在30-60℃的条件下挥干，处理后的药材备用；
第二步，将第一步处理得到的药材加入溶剂，药材与溶剂的质量份数比为：1:10-1:25，在超声功率为100W-600W的条件下进行提取，每次超声提取时间为5min-30min，超声提取次数为1-4次；
第三步，提取之后进行离心，过滤药渣，合并上清液，将合并后的上清液旋蒸浓缩至20-30℃时相对密度为1.01-1.1的浓缩液；
第四步，将第三步得到的浓缩液加1-3倍的无水乙醇，在温度为0-4℃的条件下进行醇沉，放置24-48小时；
第五步，醇沉之后抽滤，沉淀，过滤，将沉淀物依次用无水乙醇、丙酮、乙醚洗涤，在温度30-50℃下干燥即得紫锥菊多糖。
优选的，所述溶剂为水，所述第二步中，药材与水的质量份数比为：1:15，超声功率为300W，超声提取时间20min，超声提取次数为2次。
还优选的，所述第二步中的溶剂为仲丁醇、肉豆寇酸异丙酯、酒石酸二乙酯和水的混合溶剂，其质量份数比为：1-2：0.1-0.5:0.1-0.2:4-8。
优选的，所述第一步中的石油醚溶液中还含有质量份数0.01-0.03％的甲酸、质量份数0.01-0.02％的氯仿和质量份数0.01-0.02％的乙酸乙酯。
优选的，所述第五步中的无水乙醇为沉淀物的0.5-1倍量，所述丙酮为沉淀物的1-2倍量，所述乙醚为沉淀物的1-2倍量。
优选的，所述紫锥菊药材来源于紫锥菊属植物紫锥菊，取自盛花期到花后期的地上部分。
本发明的有益效果是：本发明的制备方法，大大缩短了提取时间，大大提高了提取率，并且提取稳定，重现性高，制备得到的紫锥菊多糖溶解性好，得到最佳活性成分。
具体实施方式
实施例1
包括以下步骤：
第一步，取紫锥菊药材于60℃鼓风干燥机中烘干，并粉碎，过60目筛，并使用石油醚溶液中浸泡1小时进行处理，将石油醚溶液在50℃的条件下挥干，处理后的药材备用；
第二步，将第一步处理得到的药材100g，加入1500g的水，超声功率为300W，超声提取时间20min，超声提取次数为2次。
第三步，提取之后进行离心，过滤药渣，合并上清液，将合并后的上清液旋蒸浓缩至30℃时相对密度为1.01的浓缩液；
第四步，将第三步得到的浓缩液加3倍的无水乙醇，在温度为4℃的条件下进行醇沉，放置24小时；
第五步，醇沉之后抽滤，沉淀，过滤，将沉淀物依次用无水乙醇、丙酮、乙醚洗涤，在温度30℃下干燥即得紫锥菊多糖1。
实施例2
包括以下步骤：
第一步，取紫锥菊药材于60℃鼓风干燥机中烘干，并粉碎，过60目筛，并使用2倍量的石油醚溶液中浸泡1小时进行处理，将石油醚溶液在40℃的条件下挥干，处理后的药材备用；
第二步，将第一步处理得到的药材100g，加入1500g的溶剂，溶剂为241.9g仲丁醇、24.19g肉豆寇酸异丙酯、24.19g酒石酸二乙酯和1209.7g水的混合溶剂，超声功率为300W，超声提取时间20min，超声提取次数为2次；
第三步，提取之后进行离心，过滤药渣，合并上清液，将合并后的上清液旋蒸浓缩至30℃时相对密度为1.05的浓缩液；
第四步，将第三步得到的浓缩液加3倍的无水乙醇，在温度为4℃的条件下进行醇沉，放置24小时；
第五步，醇沉之后抽滤，沉淀，过滤，将沉淀物依次用1倍量的无水乙醇、1倍量的丙酮、1倍量的乙醚洗涤，在温度30℃下干燥即得紫锥菊多糖2。
石油醚溶液中还含有质量份数0.01％的甲酸、质量份数0.02％的氯仿和质量份数0.01％的乙酸乙酯。
实施例3
包括以下步骤：
第一步，取紫锥菊药材于60℃鼓风干燥机中烘干，并粉碎，过60目筛，并使用2倍量的石油醚溶液中浸泡1小时进行处理，将石油醚溶液在40℃的条件下挥干，处理后的药材备用；
第二步，将第一步处理得到的药材100g，加入1500g溶剂，超声功率为300W，超声提取时间20min，超声提取次数为2次；
第三步，提取之后进行离心，过滤药渣，合并上清液，将合并后的上清液旋蒸浓缩至20℃时相对密度为1.01的浓缩液；
第四步，将第三步得到的浓缩液加3倍的无水乙醇，在温度为4℃的条件下进行醇沉，放置24小时；
第五步，醇沉之后抽滤，沉淀，过滤，将沉淀物依次用无水乙醇、丙酮、乙醚洗涤，在温度30℃下干燥即得紫锥菊多糖3。
实施例4
包括以下步骤：
第一步，取紫锥菊药材于60℃鼓风干燥机中烘干，并粉碎，过60目筛，并使用1倍量的石油醚溶液中浸泡1小时进行处理，将石油醚溶液在30-60℃的条件下挥干，处理后的药材备用；
第二步，将第一步处理得到的药材100g，加入1500g溶剂，在超声功率为300W的条件下进行提取，每次超声提取时间为20min，超声提取次数为2次；
第三步，提取之后进行离心，过滤药渣，合并上清液，将合并后的上清液旋蒸浓缩至20℃时相对密度为1.03的浓缩液；
第四步，将第三步得到的浓缩液加3倍的无水乙醇，在温度为4℃的条件下进行醇沉，放置24小时；
第五步，醇沉之后抽滤，沉淀，过滤，将沉淀物依次用无水乙醇、丙酮、乙醚洗涤，在温度30℃下干燥即得紫锥菊多糖4。
其中，溶剂为288.46g仲丁醇、28.85g肉豆寇酸异丙酯、28.85g酒石酸二乙酯和1153.8g水的混合溶剂。
其中，石油醚溶液中还含有质量份数0.02％的甲酸、质量份数0.01％的氯仿和质量份数0.01％的乙酸乙酯。
其中，第五步中的无水乙醇为沉淀物的0.5倍量，丙酮为沉淀物的2倍量，乙醚为沉淀物的1倍量。
对比试验1
针对料液比、提取条件等对提取率的影响如下：
表1 紫锥菊多糖提取试验设计因素水平表
表2 紫锥菊多糖提取试验结果与分析
根据试验结果，通过直观分析和极差分析，可知在紫锥菊多糖提取过程中，4个因素对提取率的影响顺序为D超声提取次数＞A料液比＞C超声时间＞B超声功率。根据分析最佳条件是：即料液比为1:15，功率为300W，提取时间为20min，超声提取2次。
对比试验2
选择实施例1-实施例4的4个制备过程，比较其提取率。如表3
| 组别 | 紫锥菊多糖提取率/％ |
| 实施例1 | 7.51％ |
| 实施例2 | 7.8％ |
| 实施例3 | 7.79％ |
| 实施例4 | 7.78％ |
由表3可知，四个实施例组的紫锥菊多糖的提取过程都得到了较高的提取率。
综上，本发明提取紫锥菊多糖，在缩短提取时间的同时，大大提高了紫锥菊多糖的提取率，并且得到了溶解性较好的紫锥菊多糖，具有较好的活性成分。
以上所述仅为本发明的较佳实施例，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (2)
1.一种超声提取紫锥菊多糖的方法，其特征在于，包括以下步骤：
第一步，取紫锥菊药材于50-60℃鼓风干燥机中烘干，并粉碎，过40-60目筛，并使用1-3倍量的石油醚溶液浸泡1-2小时进行处理，将石油醚溶液在30-60℃的条件下挥干， 处理后的药材备用；
第二步，将第一步处理得到的药材加入溶剂，药材与溶剂的质量份数比为：1:10-1:25，在超声功率为100W-600W的条件下进行提取，每次超声提取时间为5min-30min，超声提取次数为1-4次；
第三步，提取之后进行离心，过滤药渣，合并上清液，将合并后的上清液旋蒸浓缩至20-30℃时相对密度为1.01-1.1的浓缩液；
第四步，将第三步得到的浓缩液加1-3倍的无水乙醇，在温度为0-4℃的条件下进行醇沉，放置24-48小时；
第五步，醇沉之后抽滤，沉淀，过滤，将沉淀物依次用无水乙醇、丙酮、乙醚洗涤，在温度30-50℃下干燥即得紫锥菊多糖；
所述第五步中的无水乙醇为沉淀物的0.5-1倍量，所述丙酮为沉淀物的1-2倍量，所述乙醚为沉淀物的1-2倍量；
所述紫锥菊药材来源于紫锥菊属植物紫锥菊，取自盛花期到花后期的地上部分；
所述第一步中的石油醚溶液中还含有质量份数0.01-0.03%的甲酸、质量份数0.01-0.02%的氯仿和质量份数0.01-0.02%的乙酸乙酯；
所述第二步中的溶剂为仲丁醇、肉豆蔻酸异丙酯、酒石酸二乙酯和水的混合溶剂，其质量份数比为：1-2：0.1-0.5:0.1-0.2:4-8。
2.根据权利要求1所述的提取紫锥菊多糖的方法，其特征在于，所述第二步中，药材与溶剂的质量份数比为：1:15，超声功率为300W，超声提取时间20min，超声提取次数为2次。
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Patent Citations (4)
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| 杭白菊多糖超声提取工艺的研究;王丰等;《北方园艺》;20120130(第2期);第28-31页 * |
| 菊花多糖超声提取工艺及数学模拟;延绥宏等;《中国医院药学杂志》;20100215;第30卷(第3期);第188-190页 * |
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