[go: up one dir, main page]

CN104887620A - 包括芳香族防腐剂和抗氧化剂的高浓度因子vii多肽制剂 - Google Patents

包括芳香族防腐剂和抗氧化剂的高浓度因子vii多肽制剂 Download PDF

Info

Publication number
CN104887620A
CN104887620A CN201510262781.6A CN201510262781A CN104887620A CN 104887620 A CN104887620 A CN 104887620A CN 201510262781 A CN201510262781 A CN 201510262781A CN 104887620 A CN104887620 A CN 104887620A
Authority
CN
China
Prior art keywords
fvii
factor vii
composition
factor
concentration
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Withdrawn
Application number
CN201510262781.6A
Other languages
English (en)
Inventor
C.里谢尔
M.B.詹森
A.D.尼尔森
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Novo Nordisk AS
Original Assignee
Novo Nordisk AS
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Novo Nordisk AS filed Critical Novo Nordisk AS
Publication of CN104887620A publication Critical patent/CN104887620A/zh
Withdrawn legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/08—Solutions
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/43—Enzymes; Proenzymes; Derivatives thereof
    • A61K38/46—Hydrolases (3)
    • A61K38/48—Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
    • A61K38/482—Serine endopeptidases (3.4.21)
    • A61K38/4846—Factor VII (3.4.21.21); Factor IX (3.4.21.22); Factor Xa (3.4.21.6); Factor XI (3.4.21.27); Factor XII (3.4.21.38)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/08—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing oxygen, e.g. ethers, acetals, ketones, quinones, aldehydes, peroxides
    • A61K47/10—Alcohols; Phenols; Salts thereof, e.g. glycerol; Polyethylene glycols [PEG]; Poloxamers; PEG/POE alkyl ethers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/20—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing sulfur, e.g. dimethyl sulfoxide [DMSO], docusate, sodium lauryl sulfate or aminosulfonic acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/04—Antihaemorrhagics; Procoagulants; Haemostatic agents; Antifibrinolytic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/14—Hydrolases (3)
    • C12N9/48—Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
    • C12N9/50—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25)
    • C12N9/64—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25) derived from animal tissue
    • C12N9/6421—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25) derived from animal tissue from mammals
    • C12N9/6424—Serine endopeptidases (3.4.21)
    • C12N9/6437—Coagulation factor VIIa (3.4.21.21)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Y—ENZYMES
    • C12Y304/00—Hydrolases acting on peptide bonds, i.e. peptidases (3.4)
    • C12Y304/21—Serine endopeptidases (3.4.21)
    • C12Y304/21021—Coagulation factor VIIa (3.4.21.21)

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)

Abstract

本发明涉及药物组合物，其包括至少10mg/mL的因子VII多肽(i)；适于保持pH范围为约5.0到约9.0的缓冲剂(ii)；至少一种浓度为至少0.1mg/mL的芳香族防腐剂(iii)；和至少一种浓度为至少0.1mg/mL的抗氧化剂(iv)；所述组合物任选的包括其他组分，前提条件是这类其他组分不是选自以下的因子VII多肽稳定剂：(a)包含金属的试剂，其中所述金属选自由除了锌以外的氧化态+II的第一过渡系金属组成的组；和(b)包括-C(＝N-Z1-R1)-NH-Z2-R2基序的稳定剂。

Description

包括芳香族防腐剂和抗氧化剂的高浓度因子VII多肽制剂
本申请是国际申请日为2008年4月30日、国际申请号为PCT/EP2008/055348、进入国家阶段的申请号为200880014075.8、发明名称为“包括芳香族防腐剂和抗氧化剂的高浓度因子VII多肽制剂”的PCT申请的分案申请。
技术领域
本发明涉及新的可即用因子VII多肽制剂(下文中：液体水性药物组合物)，包括高浓度的因子VII多肽、缓冲剂及至少一种芳香族防腐剂和至少一种抗氧化剂的组合。
背景技术
参与凝血级联的因子VII已被证明是治疗各种病理学状况的有效治疗剂。因此，越来越需要包括活化因子VII多肽的制剂，所述制剂是药学上可接受的并显示一致的和预定的临床功效。
现在商品化供应的重组制备的因子VII多肽组合物(Novo Nordisk A/S，Denmark)是，例如，以小瓶(约3.0mL容积)存在，包含1.2mg重组人因子VIIa，5.84mg NaCl，2.94mg CaCl2，2H2O，2.64mg GlyGly，0.14mg聚山梨醇酯80和60.0mg甘露醇。使用前将该产品用2.0mL注射用水(WFI)重建为pH 5.5，从而得到因子VII多肽的浓度为约0.6mg/mL。
对于需要施用更大量(例如10-20mg)活化因子VII多肽(例如rhFVIIa)的治疗应用，利用像组合物的制剂是不方便的，因为通常需要通过注射施用相当大的体积(例如15-30mL)。
因此，需要包括相对较高浓度的活化因子VII多肽的液体药剂。
因子VII多肽的液体制剂容易通过自溶作用降解。这对高浓度制剂来说是特别严重的，限制了液体稳定性。包含因子VII抑制剂/稳定剂的因子VII多肽的液体制剂先前已经被描述过。但是，这些因子VII抑制剂/稳定剂必须与因子VII多肽分子一起注射，而因子VII抑制剂/稳定剂对人类的影响通常是不知道的。
WO 2005/002615 A1公开了一种液体、水性药物组合物，包括因子VII多肽；适于维持pH范围为约5.0到约9.0的缓冲剂；至少一种包含金属的试剂，其中所述金属选自由除了锌以外的氧化态+II的第一过渡系金属组成的组；和非离子型表面活性剂。这种类型的一些离子，例如铜，具有已知的毒性，这使该类型的一些制剂不适合给人类施用。
WO 2005/016365 A1公开了一种液体、水性药物组合物，包括至少0.01mg/mL的因子VII多肽(i)；适于维持pH范围为约5.0到约9.0的缓冲剂(ii)；和至少一种包括-C(＝N-Z1-R1)-NH-Z2-R2基序的稳定剂(iii)(例如苯甲脒或精氨酸)。这种类型的一些化合物，例如L-精氨酸，已知具有降低血压的作用，这使该类型的一些制剂不适合给人类施用。
液体制剂对于注射药剂来说是有益的。如果数个注射剂量来自于相同小瓶，防腐剂经常是管理机构的要求。大量不同的化合物已经在注射产品中被用作防腐剂(S.Nema，N.R.Washkuhn and R.J.Brendel：Excipients and their use in injectable products，PDA Journal ofPharmaceutical Science and Technology 51(4)，166-171)。
”Et studie af mikrotiterpladers anvendelse i formuleringsscreening afproteiner-med rFVIIa som modelstof”，Catharina Margrethe Lerche和Charlotte Petersen(Pharmaceutical University of Denmark，2004)公开了包含1mg/mL活化因子VII和2mg/mL间-甲酚的制剂，但不含抗氧化剂。这些作者令人惊讶的发现，在间甲酚存在的条件下，在25℃温育4周后约30％的蛋白分子被氧化，表明含防腐剂的制剂对蛋白的稳定性非常有害。
发明内容
本发明人发现芳香族防腐剂与抗氧化剂组合抑制因子VII多肽(例如rFVIIa)的活性，并增强含高浓度因子VII多肽的制剂的稳定性。这些化合物已经被批准给人注射。本发明基于以下假设，抑制作用与化合物的芳香族本性有关。
本发明的第一个方面涉及一种液体、水性药物组合物，包括
至少10mg/mL的因子VII多肽(i)；
适于维持pH范围为约5.0到约9.0的缓冲剂(ii)；
至少一种浓度为至少0.1mg/mL的芳香族防腐剂(iii)；和
至少一种浓度为至少0.1mg/mL的抗氧化剂(iv)；
所述组合物任选的包括其他组分，前提条件是这类其他组分不是选自下列的因子VII多肽稳定剂：(a)包含金属的试剂，其中所述金属选自由除了锌以外的氧化态+II的第一过渡系金属组成的组；和(b)包括-C(＝N-Z1-R1)-NH-Z2-R2基序的稳定剂。
本发明的第二个方面涉及用做药物的本文限定的液体、水性药物组合物。
本发明的第三个方面涉及本文限定的液体、水性药物组合物在制备用于治疗因子VII应答性综合征的药物中的用途。
本发明的第四个方面涉及一种治疗因子VII应答性综合征的方法，所述方法包括给需要其的受试者施用有效量的本文限定的液体、水性药物组合物。
本发明的第五个方面涉及一种气密容器，包含本文限定的液体、水性药物组合物和任选的惰性气体。
本发明的第六个方面涉及一种用于制备本文限定的组合物的试剂盒，所述试剂盒包括：
(a)第一容器，包括至少冻干形式的因子VII多肽(i)；
(b)第二容器，包括水性重建液体，所述液体至少包括缓冲剂(ii)和至少一种芳香族防腐剂(iii)。
附图说明
图1.选择的芳香族防腐剂(苯酚和间甲酚)存在条件下rFVIIa的酰胺分解活性。
图2.选择的防腐剂(苯酚和间甲酚)浓度增加的条件下15mg/mLrFVIIa的浊度。
图3. 30mM间甲酚和泊洛沙姆-188浓度增加的条件下15mg/mLrFVIIa的浊度。
图4. 30mM间甲酚存在或缺失的条件下，包含5mg/mL rFVIIa的样品中重链片段的形成。将样品在37℃维持3天。
具体实施方式
如上所述，本发明在于开发一种新的稳定的液体、水性药物组合物，其包括高浓度的因子VII多肽。
更具体地，所述液体、水性药物组合物包括
至少10mg/mL的因子VII多肽(i)；
适于维持pH范围为约5.0到约9.0的缓冲剂(ii)；
至少一种浓度为至少1mg/mL的芳香族防腐剂(iii)；和
至少一种浓度为至少0.1mg/mL的抗氧化剂(iv)；
所述组合物任选的包括其他组分，前提条件是这类其他组分不是选自下列的因子VII多肽稳定剂：(a)包含金属的试剂，其中所述金属选自由除了锌以外的氧化态+II的第一过渡系金属组成的组；和(b)包括-C(＝N-Z1-R1)-NH-Z2-R2基序的稳定剂。
因子VII多肽(i)
药物组合物的生物学效应主要地归因于因子VII多肽的存在，尽管也可以包括其他活性成分与因子VII多肽的组合。
如本文使用的，术语“因子VII多肽”包括野生型因子VII(即具有美国专利号4,784,950公开的氨基酸序列的多肽)，显示与野生型因子VII相比生物活性基本上相同或提高的因子VII变体，以及因子VII衍生物和因子VII缀合物。术语“因子VII”旨在包括未切割(酶原)形式的因子VII多肽，以及已经被蛋白水解加工产生它们相应生物活性形式的因子VII多肽，它们可以被命名为因子VIIa。通常，因子VII在残基152和153之间被切割得到因子VIIa。术语“因子VII多肽”还包括了包含变体、衍生物和缀合物的多肽，其中与野生型因子VIIa的活性相比，因子VIIa生物活性已经基本上被改变或稍微降低。这些多肽包括，但不限于，因子VII或因子VIIa，其中已经导入特定的氨基酸序列改变，这改变或破坏所述多肽的生物活性。
血液凝固中因子VIIa的生物活性来源于它的下列能力：(i)结合组织因子(TF)和(ii)催化因子IX或因子X的蛋白水解切割产生活化的因子IX或X(分别为因子IXa或Xa)。
为了本发明的目的，可以通过测量制品促进血液凝固的能力来定量因子VII多肽的生物活性(“因子VII生物活性”)，参见本文描述的分析4。在该分析中，生物活性可以表示为相对于对照样品凝血时间的减少，并通过与包含1单位/mL因子VII活性的合并人血清标准品相比转化为“因子VII单位”。可选择地，因子VIIa生物活性可以通过以下方式定量：(i)在包括嵌入类脂膜的TF和因子X的系统中测量因子VII多肽(例如，因子VIIa)产生活化的因子X(因子Xa)的能力(Persson等，J.Biol.Chem.272：19919-19924，1997)；(ii)在含水体系中测量因子X水解(“In Vitro Proteolysis Assay(体外蛋白水解分析)”，参见下文的分析2)；(iii)利用基于表面等离子体共振的装置测量因子VII多肽(例如，因子VIIa)与TF的物理结合(Persson，FEBS Letts.413：359-363，1997)；(iv)测量因子VII多肽(例如，因子VIIa)对合成底物的水解(“InVitro Hydrolysis Assay(体外水解分析)”，参见下文的分析1)；或(v)在不依赖TF的体外系统中测量凝血酶的产生(参见下文的分析3)。
与野生型因子VIIa相比生物活性基本上相同或提高的因子VII变体包括当在如上所述的凝血分析(分析4)，蛋白水解分析(分析2)或TF结合分析中的一种或更多种中检测时，显示至少约25％，优选的至少约50％，更优选的至少约75％和最优选的至少约90％的在相同的细胞类型中产生的因子VIIa的特异活性的那些。与野生型因子VIIa相比生物活性基本上降低的因子VII变体是当在如上所述的凝血分析(分析4)，蛋白水解分析(分析2)或TF结合分析中的一种或更多种中检测时，显示低于约25％，优选的低于约10％，更优选的低于约5％和最优选的低于约1％的在相同的细胞类型中产生的野生型因子VIIa的特异活性的那些。与野生型因子VII相比生物活性基本上改变的因子VII变体包括，但不限于，显示不依赖于TF的因子X蛋白水解活性的因子VII变体，和结合TF但不切割因子X的因子VII变体。
因子VII的变体，不论是否显示与野生型因子VII基本上相同或更好的生物活性，或，可选择地，显示与野生型因子VII相比基本上改变或降低的生物活性，包括但不限于，通过一个或更多个氨基酸的插入、缺失或取代而具有不同于野生型因子VII序列的氨基酸序列的多肽。
如本文使用的术语“因子VII衍生物”意在指显示与野生型因子VII相比基本上相同或提高的生物活性的FVII多肽，其中亲本肽的一个或更多个氨基酸已经被遗传和/或化学和/或酶修饰，例如通过烷化，糖基化，PEG化，酰化，酯形成或酰胺形成等等。这包括但不限于PEG化的人因子VIIa，半胱氨酸-PEG化的人因子VIIa及其变体。因子VII衍生物的非限制性实例包括糖基聚乙二醇化的FVII衍生物，如WO03/31464和美国专利申请US 20040043446，US 20040063911，US20040142856，US 20040137557，US 20040132640，WO2007022512和US 20070105755(Neose Technologies，Inc.)所公开的；FVII缀合物，如WO 01/04287，美国专利申请20030165996，WO 01/58935，WO03/93465(Maxygen ApS)和WO 02/02764，美国专利申请20030211094(University of Minnesota)所公开的。
术语“提高的生物活性”是指i)具有与重组野生型人因子VIIa相比基本上相同或增加的蛋白水解活性的FVII多肽，或ii)具有与重组野生型人因子VIIa相比基本上相同或增加的TF结合活性的FVII多肽，或iii)具有与重组野生型人因子VIIa相比基本上相同或增加的血浆半衰期的FVII多肽。术语“PEG化的人因子VIIa”表示人因子VIIa，具有与人因子VIIa多肽缀合的PEG分子。应理解，PEG分子可以连接到因子VIIa多肽的任意部分，包括因子VIIa多肽的任意氨基酸残基或糖部分。术语“半胱氨酸-PEG化的人因子VIIa”表示因子VIIa，其具有与引入人因子VIIa的半胱氨酸的巯基缀合的PEG分子。
具有与野生型因子VII基本上相同生物活性的因子VII变体的非限制性实例包括S52A-FVIIa，S60A-FVIIa(Lino等，Arch.Biochem.Biophys.352：182-192，1998)；显示增加的蛋白水解稳定性的FVIIa变体，如美国专利号5,580,560所公开的；在残基290和291之间或残基315和316之间被蛋白水解切割的因子VIIa(Mollerup等，Biotechnol.Bioeng.48：501-505，1995)；因子VIIa的氧化形式(Kornfelt等，Arch.Biochem.Biophys.363：43-54，1999)；PCT/DK02/00189公开的FVII变体；和显示增加的蛋白水解稳定性的FVII变体，如WO02/38162所公开(Scripps Research Institute)的；具有改变的Gla结构域并显示增强的膜结合的FVII变体，如WO 99/20767所公开(Universityof Minnesota)的；和WO 01/58935公开的FVII变体(Maxygen ApS)。
具有与野生型FVIIa相比增加的生物活性的因子VII变体的非限制性实例包括在WO 01/83725(Novo Nordisk)、WO 02/22776(NovoNordisk)、WO 02/077218(Novo Nordisk)、WO 03/27147(NovoNordisk)、WO 03/37932、WO 02/38162(Scripps Research Institute)中公开的FVII变体；和JP 2001061479(Chemo-Sero-Therapeutic Res Inst.)中公开的活性增强的FVIIa变体。
具有相对于野生型因子VII基本上降低或改变的生物活性的因子VII变体的非限制性实例包括R152E-FVIIa(Wildgoose等，Biochem29：3413-3420，1990)，S344A-FVIIa(Kazama等，J.Biol.Chem.270：66-72，1995)，FFR-FVIIa(Holst等，Eur.J.Vasc.Endovasc.Surg.15：515-520，1998)，和缺失Gla结构域的因子VIIa(Nicolaisen等，FEBSLetts.317：245-249，1993)。
因子VII多肽的实例包括，但不限于，
野生型因子VII，L305V-FVII，L305V/M306D/D309S-FVII，L305I-FVII，L305T-FVII，F374P-FVII，V158T/M298Q-FVII，V158D/E296V/M298Q-FVII，K337A-FVII，M298Q-FVII，V158D/M298Q-FVII，L305V/K337A-FVII，V158D/E296V/M298Q/L305V-FVII，V158D/E296V/M298Q/K337A-FVII，V158D/E296V/M298Q/L305V/K337A-FVII，K157A-FVII，E296V-FVII，E296V/M298Q-FVII，V158D/E296V-FVII，V158D/M298K-FVII，和S336G-FVII，L305V/K337A-FVII，L305V/V158D-FVII，L305V/E296V-FVII，L305V/M298Q-FVII，L305V/V158T-FVII，L305V/K337A/V158T-FVII，L305V/K337A/M298Q-FVII，L305V/K337A/E296V-FVII，L305V/K337A/V158D-FVII，L305V/V158D/M298Q-FVII，L305V/V158D/E296V-FVII，L305V/V158T/M298Q-FVII，L305V/V158T/E296V-FVII，L305V/E296V/M298Q-FVII，L305V/V158D/E296V/M298Q-FVII，L305V/V158T/E296V/M298Q-FVII，L305V/V158T/K337A/M298Q-FVII，L305V/V158T/E296V/K337A-FVII，L305V/V158D/K337A/M298Q-FVII，L305V/V158D/E296V/K337A-FVII，L305V/V158D/E296V/M298Q/K337A-FVII，L305V/V158T/E296V/M298Q/K337A-FVII，S314E/K316H-FVII，S314E/K316Q-FVII，S314E/L305V-FVII，S314E/K337A-FVII，S314E/V158D-FVII，S314E/E296V-FVII，S314E/M298Q-FVII，S314E/V158T-FVII，K316H/L305V-FVII，K316H/K337A-FVII，K316H/V158D-FVII，K316H/E296V-FVII，K316H/M298Q-FVII，K316H/V158T-FVII，K316Q/L305V-FVII，K316Q/K337A-FVII，K316Q/V158D-FVII，K316Q/E296V-FVII，K316Q/M298Q-FVII，K316Q/V158T-FVII，S314E/L305V/K337A-FVII，S314E/L305V/V158D-FVII，S314E/L305V/E296V-FVII，S314E/L305V/M298Q-FVII，S314E/L305V/V158T-FVII，S314E/L305V/K337A/V158T-FVII，S314E/L305V/K337A/M298Q-FVII，S314E/L305V/K337A/E296V-FVII，S314E/L305V/K337A/V158D-FVII，S314E/L305V/V158D/M298Q-FVII，S314E/L305V/V158D/E296V-FVII，S314E/L305V/V158T/M298Q-FVII，S314E/L305V/V158T/E296V-FVII，S314E/L305V/E296V/M298Q-FVII，S314E/L305V/V158D/E296V/M298Q-FVII，S314E/L305V/V158T/E296V/M298Q-FVII，S314E/L305V/V158T/K337A/M298Q-FVII，S314E/L305V/V158T/E296V/K337A-FVII，S314E/L305V/V158D/K337A/M298Q-FVII，S314E/L30SV/V158D/E296V/K337A-FVII，S314E/L305V/V158D/E296V/M298Q/K337A-FVII，S314E/L305V/V158T/F296V/M298Q/K337A-FVII，K316H/L305V/K337A-FVII，K316H/L305V/V158D-FVII，K316H/L305V/E296V-FVII，K316H/L305V/M298Q-FVII，K316H/L305V/V158T-FVII，K316H/L305V/K337A/V158T-FVII，K316H/L305V/K337A/M298Q-FVII，K316H/L305V/K337A/E296V-FVII，K316H/L305V/K337A/V158D-FVII，K316H/L305V/V158D/M298Q-FVII，K316H/L305V/V158D/E296V-FVII，K316H/L305V/V158T/M298Q-FVII，K316H/L305V/V158T/E296V-FVII，K316H/L305V/E296V/M298Q-FVII，K316H/L305V/V158D/E296V/M298Q-FVII，K316H/L305V/V158T/E296V/M298Q-FVII，K316H/L305V/V158T/K337A/M298Q-FVII，K316H/L305V/V158T/E296V/K337A-FVII，K316H/L305V/V158D/K337A/M298Q-FVII，K316H/L305V/V158D/E296V/K337A-FVII，K316H/L305V/V158D/E296V/M298Q/K337A-FVII，K316H/L305V/V158T/E296V/M298Q/K337A-FVII，K316Q/L305V/K337A-FVII，K316Q/L305V/V158D-FVII，K316Q/L305V/E296V-FVII，K316Q/L305V/M298Q-FVII，K316Q/L305V/V158T-FVII，K316Q/L305V/K337A/V158T-FVII，K316Q/L305V/K337A/M298Q-FVII，K316Q/L305V/K337A/E296V-FVII，K316Q/L305V/K337A/V158D-FVII，K316Q/L305V/V158D/M298Q-FVII，K316Q/L305V/V158D/E296V-FVII，K316Q/L305V/V158T/M298Q-FVII，K316Q/L305V/V158T/F296V-FVII，K316Q/L305V/E296V/M298Q-FVII，K316Q/L305V/V158D/E296V/M298Q-FVII，K316Q/L305V/V158T/E296V/M298Q-FVII，K316Q/L305V/V158T/K337A/M298Q-FVII，K316Q/L305V/V158T/E296V/K337A-FVII，K316Q/L305V/V158D/K337A/M298Q-FVII，K316Q/L305V/V158D/E296V/K337A-FVII，K316Q/L305V/V158D/E296V/M298Q/K337A-FVII，K316Q/L305V/V158T/E296V/M298Q/K337A-FVII，F374Y/K337A-FVII，F374Y/V158D-FVII，F374Y/E296V-FVII，F374Y/M298Q-FVII，F374Y/V158T-FVII，F374Y/S314E-FVII，F374Y/L305V-FVII，F374Y/L305V/K337A-FVII，F374Y/L305V/V158D-FVII，F374Y/L305V/E296V-FVII，F374Y/L305V/M298Q-FVII，F374Y/L305V/V158T-FVII，F374Y/L305V/S314E-FVII，F374Y/K337A/S314E-FVII，F374Y/K337A/V158T-FVII，F374Y/K337A/M298Q-FVII，F374Y/K337A/E296V-FVII，F374Y/K337A/V158D-FVII，F374Y/V158D/S314E-FVII，F374Y/V158D/M298Q-FVII，F374Y/V158D/E296V-FVII，F374Y/V158T/S314E-FVII，F374Y/V158T/M298Q-FVII，F374Y/V158T/E296V-FVII，F374Y/E296V/S314E-FVII，F374Y/S314E/M298Q-FVII，F374Y/E296V/M298Q-FVII，F374Y/L305V/K337A/V158D-FVII，F374Y/L305V/K337A/E296V-FVII，F374Y/L305V/K337A/M298Q-FVII，F374Y/L305V/K337A/V158T-FVII，F374Y/L305V/K337A/S314E-FVII，F374Y/L305V/V158D/E296V-FVII，F374Y/L305V/V158D/M298Q-FVII，F374Y/L305V/V158D/S314E-FVII，F374Y/L305V/E296V/M298Q-FVII，F374Y/L305V/E296V/V158T-FVII，F374Y/L305V/E296V/S314E-FVII，F374Y/L305V/M298Q/V158T-FVII，F374Y/L305V/M298Q/S314E-FVII，F374Y/L305V/V158T/S314E-FVII，F374Y/K337A/S314E/V158T-FVII，F374Y/K337A/S314E/M298Q-FVII，F374Y/K337A/S314E/E296V-FVII，F374Y/K337A/S314E/V158D-FVII，F374Y/K337A/V158T/M298Q-FVII，F374Y/K337A/V158T/E296V-FVII，F374Y/K337A/M298Q/E296V-FVII，F374Y/K337A/M298Q/V158D-FVII，F374Y/K337A/E296V/V158D-FVII，F374Y/V158D/S314E/M298Q-FVII，F374Y/V158D/S314E/E296V-FVII，F374Y/V158D/M298Q/E296V-FVII，F374Y/V158T/S314E/E296V-FVII，F374Y/V158T/S314E/M298Q-FVII，F374Y/V158T/M298Q/E296V-FVII，F374Y/E296V/S314E/M298Q-FVII，F374Y/L305V/M298Q/K337A/S314E-FVII，F374Y/L305V/E296V/K337A/S314E-FVII，F374Y/E296V/M298Q/K337A/S314E-FVII，F374Y/L305V/E296V/M298Q/K337A-FVII，F374Y/L305V/E296V/M298Q/S314E-FVII，F374Y/V158D/E296V/M298Q/K337A-FVII，F374Y/V158D/E296V/M298Q/S314E-FVII，F374Y/L305V/V158D/K337A/S314E-FVII，F374Y/V158D/M298Q/K337A/S314E-FVII，F374Y/V158D/E296V/K337A/S314E-FVII，F374Y/L305V/V158D/E296V/M298Q-FVII，F374Y/L305V/V158D/M298Q/K337A-FVII，F374Y/L305V/V158D/E296V/K337A-FVII，F374Y/L305V/V158D/M298Q/S314E-FVII，F374Y/L305V/V158D/E296V/S314E-FVII，F374Y/V158T/E296V/M298Q/K337A-FVII，F374Y/V158T/E296V/M298Q/S314E-FVII，F374Y/L305V/V158T/K337A/S314E-FVII，F374Y/V158T/M298Q/K337A/S314E-FVII，F374Y/V158T/E296V/K337A/S314E-FVII，F374Y/L305V/V158T/E296V/M298Q-FVII，F374Y/L305V/V158T/M298Q/K337A-FVII，F374Y/L305V/V158T/E296V/K337A-FVII，F374Y/L305V/V158T/M298Q/S314E-FVII，F374Y/L305V/V158T/E296V/S314E-FVII，F374Y/E296V/M298Q/K337A/V158T/S314E-FVII，F374Y/V158D/E296V/M298Q/K337A/S314E-FVII，F374Y/L305V/V158D/E296V/M298Q/S314E-FVII，F374Y/L305V/E296V/M298Q/V158T/S314E-FVII，F374Y/L305V/E296V/M298Q/K337A/V158T-FVII，F374Y/L305V/E296V/K337A/V158T/S314E-FVII，F374Y/L305V/M298Q/K337A/V158T/S314E-FVII，F374Y/L305V/V158D/E296V/M298Q/K337A-FVII，F374Y/L305V/V158D/E296V/K337A/S314F-FVII，F374Y/L305V/V158D/M298Q/K337A/S314E-FVII，F374Y/L305V/E296V/M298Q/K337A/V158T/S314E-FVII，F374Y/L305V/V158D/E296V/M298Q/K337A/S314E-FVII，S52A-因子VII，S60A-因子VII；R152E-因子VII，S344A-因子VII，缺失Gla结构域的因子VIIa；和P11Q/K33E-FVII，T106N-FVII，K143N/N145T-FVII，V253N-FVII，R290N/A292T-FVII，G291N-FVII，R315N/V317T-FVII，K143N/N145T/R315N/V317T-FVII；和在233Thr到240Asn的氨基酸序列中具有取代、添加或缺失的FVII，在从304Arg到329Cys的氨基酸序列中具有取代、添加或缺失的FVII，和在氨基酸序列Ile 153-Arg223中具有取代、缺失或添加的FVII。
因此，因子VII多肽中的取代变体包括，但不限于以下位置的取代：
P10，K32，L305，M306，D309，L305，L305，F374，V158，M298，V158，E296，K337，M298，M298，S336，S314，K316，K316，F374，S52，S60，R152，S344，T106，K143，N145，V253，R290，A292，G291，R315，V317，和从T233到N240或从R304到C329；或从I153到R223的氨基酸序列中的取代、添加或缺失，或其组合，尤其是变体诸如
P10Q，K32E，L305V，M306D，D309S，L305I，L305T，F374P，V158T，M298Q，V158D，E296V，K337A，M298Q，M298K，S336G，S314E，K316H，K316Q，F374Y，S52A，S60A，R152E，S344A，T106N，K143N，N145T，V253N，R290N，A292T，G291N，R315N，V317T，和从T233到N240，或从R304到C329，或从I153到R223的氨基酸序列中的取代、添加或缺失，或其组合。
在一些实施方案中，因子VII多肽是人因子VIIa(hFVIIa)，优选的重组制备的人因子VIIa(rhVIIa)。
在其他实施方案中，因子VII多肽是因子VII序列变体。
在一些实施方案中，因子VII多肽具有不同于野生型人因子VII的糖基化。
在一些实施方案中，因子VII多肽是聚乙二醇化的FVII衍生物，优选的是糖基聚乙二醇化FVII衍生物。
在目前最感兴趣的实施方案中，蛋白是活化形式的因子VII多肽。
在各种实施方案中，例如因子VII多肽是因子VII序列变体的实施方案中，当按本说明书描述的“体外蛋白水解分析”(分析2)检测时，因子VII多肽的活性与天然人因子VIIa(野生型FVIIa)的活性之间的比例是至少约1.25，优选的至少约2.0，或4.0，最优选的至少约8.0。
在一些实施方案中，因子VII多肽是因子VII变体，其中在“体外水解分析”(参见下文的分析1)中检测时，所述因子VII多肽的活性与天然人因子VIIa(野生型FVIIa)的活性之间的比例是至少约1.25；在其他实施方案中，该比例是至少约2.0；在其他实施方案中，该比例是至少约4.0。
在药物组合物中，经常希望活性成分的浓度使得单位剂量的施用不会给患者造成不必要的不方便。因此，超过约2-10mL的单位剂量通常是不期望的。因此为了本发明的目的，因子VII多肽的浓度是相当高的，即至少10mg/mL。在不同的实施方案中，因子VII多肽以下列浓度存在：10-90mg/mL；12-80mg/mL；16-80mg/mL；22-70mg/mL；22-60mg/mL；22-50mg/mL；或25-50mg/mL。
因子VIIa浓度方便地用mg/mL或IU/mL表示，其中1mg通常代表43,000-56,000IU或更高。
缓冲剂(ii)
为了使液体、水性药物组合物可用于哺乳动物诸如人的直接肠胃外给药，通常需要所述组合物的pH值维持在合理的限度内，诸如从约5.0到约9.0。为了确保指定条件下合适的pH值，药物组合物还包括适合将pH范围保持在约5.0到约9.0的缓冲剂(ii)。
术语“缓冲剂”包括维持溶液pH在约5.0到约9.0的可接受范围的那些试剂或试剂组合。
在一个实施方案中，缓冲剂(ii)是选自下列组的至少一种组分：MES，PIPES，ACES，BES，TES，HEPES，TRIS，组氨酸，咪唑，甘氨酸，甘氨酰甘氨酸，甘氨酰胺，磷酸，醋酸(例如醋酸钠或醋酸钙)，乳酸，戊二酸，柠檬酸，酒石酸，苹果酸，马来酸和琥珀酸的酸和盐。应理解缓冲剂可以包括两种或更多种组分的混合物，其中所述混合物能够提供特定范围的pH值。作为实例可以提及的是醋酸和醋酸钠，等等。
选择缓冲剂的浓度以便维持溶液的优选pH。在各种实施方案中，缓冲剂的浓度是1-100mM；1-50mM；1-25mM或2-20mM。
在一个实施方案中，保持组合物的pH从约5.0到约8.0；诸如从约5.0到约7.5；从约5.0和约7.0；从约5.0到约6.5，从约5.0到约6.0，从约5.5到约7.0；从约5.5到约6.5，从约6.0到约7.0，从约6.4到约6.6，或从约5.2到约5.7。
芳香族防腐剂(iii)
药物组合物还包括至少一种浓度为至少0.1mg/mL的芳香族防腐剂(iii)。
组合物中通常包括防腐剂以抑制微生物生长(即芳香族防腐剂具有抑菌/杀菌作用)，从而允许因子VII多肽的“多剂量”包装。但是，还发现芳香族防腐剂与抗氧化剂组合对溶于水性溶液的因子VII多肽的稳定性有非常显著的影响，尤其是是在相当高浓度的情况下。
在下面，术语“芳香族”是指在其结构中包含碳原子的6元不饱和环(即苯环)的化合物。
芳香族防腐剂的实例包括苯酚，苯甲醇，邻甲酚，间甲酚，对甲酚，氯甲酚，对羟基苯甲酸甲酯，对羟苯甲酸丙酯，苯扎氯铵(benzalkonium chloride)，和苄索氯铵(benzethonium chloride)。
通常包括浓度为0.1-20mg/mL的至少一种芳香族防腐剂(iii)，所述浓度取决于芳香族防腐剂的pH范围和类型。例如，典型的浓度是1-4mg/mL间甲酚，或1-6mg/mL苯酚，或5-20mg/mL苯甲醇，或1-3mg/mL氯甲酚。
抗氧化剂(iv)
如上所述，因子VII多肽在水性组合物中的稳定性归因于芳香族防腐剂(iii)和抗氧化剂(iv)的组合。至少一种抗氧化剂以至少0.1mg/mL的浓度存在。
在不同的实施方案中，所述至少一种抗氧化剂(iv)选自以下组：L-甲硫氨酸，D-甲硫氨酸，甲硫氨酸类似物，包含甲硫氨酸的肽，甲硫氨酸同系物，抗坏血酸，半胱氨酸，高半胱氨酸，谷胱甘肽，胱氨酸，和胱硫醚(cysstathionine)。在一个优选的实施方案中，抗氧化剂是L-甲硫氨酸。
所述至少一种抗氧化剂的浓度通常是0.1-5.0mg/mL，诸如0.1-4.0mg/mL，0.1-3.0mg/mL，0.1-2.0mg/mL或0.5-2.0mg/mL。
本发明人发现，在芳香族防腐剂和抗氧化剂(例如0.5mg/mL甲硫氨酸)同时存在的条件下，活化因子VII的氧化实际上进行的非常慢。
其他组分
应理解防腐剂和抗氧化剂的存在的组合消除了对上文中(a)和(b)型稳定剂的需要，在更优选的实施方案中甚至消除了对其他因子VII多肽稳定剂的需要。因此，在一个优选的实施方案中，所述组合物的其他组分不是因子VII多肽稳定剂。
就(a)型稳定剂来说，这些在WO 2005/002615中描述和定义。
就(b)型稳定剂来说，这些在WO 2005/016365中描述和定义(一般而言明确的依据取代基Z1、Z2、R1和R2的具体含义)。为了方便起见还需提及，Z1和Z2独立的选自O、-S-、NRH-和单键，其中RH选自氢，C1-4-烷基，芳基和芳甲基，R1和R2独立的选自氢，任选取代的C1-6-烷基，任选取代的C2-6-链烯基，任选取代的芳基，任选取代的杂环基，或Z2和R2如上面所定义，和C＝N-Z1-R1形成杂环的一部分，或Z1和R1如上面所定义，-C-NH-Z2-R2形成杂环的一部分，或-C(＝N-Z1-R1)-NH-Z2-R2形成杂环，其中-Z1-R1-R2-Z2-是双基。
除了必需组分外，该所述液体、水性药物组合物包括有利于组合物的制备、制剂或施用的其他组分。
在一些实施方案中，所述组合物还包括张力调节剂(v)。
如本文使用的，术语“张力调节剂”包括有助于溶液重量克分子渗透浓度(osmolality)的试剂。张力调节剂(v)包括至少一种选自以下组的试剂：中性盐，氨基酸，2-5个氨基酸残基的肽，单糖，二糖，多糖，和糖醇。在一些实施方案中，组合物包括两种或更多种这类试剂的组合。
“中性盐”表示当溶于水溶液时既不是酸也不是碱的盐。
在一个实施方案中，至少一种张力调节剂(v)是选自以下组的中性盐：钠盐，钾盐，钙盐，和镁盐，诸如氯化钠，氯化钾，氯化钙，醋酸钙，葡萄糖酸钙，乙酰丙酸钙，氯化镁，醋酸镁，葡糖酸镁，和乙酰丙酸镁。
在其他实施方案中，张力调节剂(v)包括氯化钠与选自氯化钙、醋酸钙、氯化镁和醋酸镁中的至少一种的组合。
在另一个实施方案中，张力调节剂(v)是选自氯化钠、氯化钙、蔗糖、葡萄糖和甘露醇中的至少一种。
在不同的实施方案中，张力调节剂(v)以至少1mM，至少5mM，至少10mM，至少20mM，至少50mM，至少100mM，至少200mM，至少400mM，至少800mM，至少1000mM，至少1200mM，至少1500mM，至少1800mM，至少2000mM，或至少2200mM的浓度存在。
在一些实施方案中，张力调节剂(v)以5-2200mM的浓度存在，诸如
25-2200mM，50-2200mM，100-2200mM，200-2200mM，400-2200mM，600-2200mM，800-2200mM，1000-2200mM，1200-2200mM，1400-2200mM，1600-2200mM，1800-2200mM，或2000-2200mM；5-1800mM，25-1800mM，50-1800mM，100-1800mM，200-1800mM，400-1800mM，600-1800mM，800-1800mM，1000-1800mM，1200-1800mM，1400-1800mM，1600-1800mM；5-1500mM，25-1400mM，50-1500mM，100-1500mM，200-1500mM，400-1500mM，600-1500mM，800-1500mM，1000-1500mM，1200-1500mM；5-1200mM，25-1200mM，50-1200mM，100-1200mM，200-1200mM，400-1200mM，600-1200mM，或800-1200mM.
在本发明优选的实施方案中，至少一种张力调节剂(v)是离子强度调节剂(v/a)。
如本文使用的，术语“离子强度调节剂”包括有助于溶液离子强度的试剂。该试剂包括，但不限于，中性盐，氨基酸，2到5个氨基酸残基的肽。在一些实施方案中，组合物包括两种或更多种这类试剂的组合。
离子强度调节剂(v/a)的优选实例是中性盐诸如氯化钠，氯化钾，氯化钙和氯化镁。优选的试剂(v/a)是氯化钠。
术语“离子强度”是溶液的离子强度(μ)，其用以下等式定义：μ＝1/2∑([i](Zi 2))，其中μ是离子强度，[i]是离子的毫摩尔浓度，Zi是所述离子的电荷(+或-)(参见，例如，Solomon，Journal of Chemical Education，78(12)：1691-92，2001；James Fritz and George Schenk：QuantitativeAnalytical Chemistry，1979)。
在本发明不同的实施方案中，组合物的离子强度是至少50，诸如至少75，至少100，至少150，至少200，至少250，至少400，至少500，至少650，至少800，至少1000，至少1200，至少1600，至少2000，至少2400，至少2800，或至少3200。
在一些特定的实施方案中，张力调节剂(v)和离子强度调节剂(v/a)的总浓度范围是1-500mM，诸如1-300mM，或10-200mM，或20-150mM，取决于任何其他成分可能对张力和离子强度的影响。
在一个实施方案中，组合物是等渗的；在另一个实施方案中，它是高渗的。
术语“等渗的”表示“与血清等渗”，即为在大约300±50毫渗透分子/kg。张力表示在施用前溶液重量克分子渗透浓度的测量值。术语“高渗的”表示高于血清生理性水平的重量克分子渗透浓度指定水平，诸如高于300±50毫渗透分子/kg的水平。
此外，本发明的具体实施方案涉及芳香族防腐剂(iii)和抗氧化剂(iv)与相当高浓度的选自钠盐、钙盐和镁盐的离子强度调节剂(v/a)的组合。在该实施方案中，离子强度调节剂(v/a)，即钠盐、钙盐和/或镁盐，以15-1000mM的浓度存在，诸如
25-1000mM，50-1000mM，100-1000mM，200-1000mM，300-1000mM，400-1000mM，500-1000mM，600-1000mM，700-1000mM；15-800mM，25-800mM，50-800mM，100-800mM，200-800mM，300-800mM，400-800mM，500-800mM；15-600mM，25-600mM，50-600mM，100-600mM，200-600mM，300-600mM；15-400mM，25-400mM，50-400mM，或100-400mM.
在这些实施方案中，钠盐可以是氯化钠，钙盐可以选自氯化钙、醋酸钙、葡萄糖酸钙和乙酰丙酸钙，镁盐可以选自氯化镁、醋酸镁、葡糖酸镁、乙酰丙酸镁和强酸的镁盐。在更具体的实施方案中，钙盐和/或镁盐与氯化钠组合使用。
在当前优选的实施方案中，组合物包括一种或更多种选自钙(Ca2+)盐和镁(Mg3+)盐的离子强度调节剂，例如一种或更多种选自以下组的盐：氯化钙，醋酸钙，葡萄糖酸钙，乙酰丙酸钙，氯化镁，醋酸镁，硫酸镁，葡糖酸镁，乙酰丙酸镁，强酸的镁盐。在其一个实施方案中，钙(Ca2+)和/或镁(Mg3+)盐的浓度是至少2mM，诸如至少5mM或约10mM。在一个具体实施方案中，组合物包括浓度为至少2mM的Ca2+。
在可以与上述组合的其他实施方案中，药物组合物还可以包括非离子型表面活性剂(vi)。表面活性剂(亦称为去污剂)通常包括那些保护蛋白免受空气/溶液界面诱发应力和溶液/表面诱发应力(例如导致蛋白聚集)的试剂。
典型的非离子型表面活性剂是聚山梨醇酯，泊洛沙姆，聚氧乙烯烷基醚，聚乙烯/聚丙烯嵌段共聚物，聚乙二醇(PEG)，硬脂酸聚氧乙烯酯，和聚氧乙烯蓖麻油。
非离子型表面活性剂的例示性实例是聚山梨醇酯20，聚山梨醇酯80，Brij-35(聚氧乙烯十二醚)，泊洛沙姆188，泊洛沙姆407，PEG8000，多元醇，聚氧-23-月桂醚，Myrj 49，和Cremophor A，尤其是泊洛沙姆188。
在一个实施方案中，非离子型表面活性剂以0.005-2.0％的量存在(按重量计)。
优选的实施方案
本发明人目前确定下列实施方案是尤其有益的，即如此处限定的液体、水性药物组合物，其包括：
10-90mg/mL的因子VII多肽(i)；
适于维持pH范围为约5.0到约9.0的缓冲剂(ii)；
至少一种浓度为0.1-20mg/mL的芳香族防腐剂(iii)；和
至少一种浓度为0.1-5.0mg/mL的抗氧化剂(iv)；
稳定性
本发明的组合物可用做因子VII多肽的稳定可即用组合物。当在2℃到8℃的温度范围内保存时，组合物通常将稳定至少6个月，优选的最多36个月。
术语“稳定”旨在表示，(i)在2℃到8℃保存6个月后，通过一阶段凝血分析(分析4)测量，组合物保留其初始生物活性的至少50％，或(ii)在2℃到8℃保存6个月后，重链降解产物的含量最多为40％(w/w)，假定初始样品不包含重链降解产物(即只有因子VII多肽记入百分比的计算)。优选的，在2到8℃保存6个月后，组合物保留其初始活性的至少70％，诸如至少80％，或至少85％，或至少90％，或至少95％。此外优选的，组合物中重链降解产物的含量最多为30％(w/w)，最多为25％(w/w)，最多为20％(w/w)，最多为15％(w/w)，最多为10％(w/w)，最多为5％(w/w)或最多为3％(w/w)。
优选的，在2到8℃保存6个月后，稳定组合物保留其初始活性的至少70％，诸如至少80％，或至少85％，或至少90％，或至少95％。
优选的，在各种实施方案中，稳定组合物中重链降解产物的含量最多为30％(w/w)，最多为25％(w/w)，最多为20％(w/w)，最多为15％(w/w)，最多为10％(w/w)，最多为5％(w/w)或最多为3％(w/w)。
使用方法
应理解，本文限定的液体、水性药物组合物可用于医学领域。因此，本发明特别提供用做药物，更具体的用做治疗因子VII应答性综合征的药物的本文限定的液体、水性药物组合物。
因此，本发明还提供本文限定的液体、水性药物组合物在制备治疗因子VII应答性综合征的药物中的用途，以及一种治疗因子VII应答性综合征的方法，所述方法包括给需要其的受试者施用有效量的本文限定的液体、水性药物组合物。
本发明的制品可用于治疗任何因子VII应答性综合征，诸如，例如，出血症，包括由以下原因引起的出血症：凝血因子缺陷(例如，血友病A，血友病B，凝结因子XI缺陷，凝结因子VII缺陷)；血小板减少症或von Willebrand′s病，或凝血因子抑制剂的获得，和脑内出血，或任意原因(创伤，手术)的过度出血。所述制品还可以给进行手术或具有其他创伤的患者使用，或给接受抗凝疗法的患者使用。
术语“有效量”是由有资格的医师确定的有效量，该医师可以逐步增高剂量以实现需要的应答。关于剂量需要考虑的因素包括功效，生物利用率，所需药代动力学/药效学模式，治疗的状况，患者相关因素(体重，健康，年龄，等等)，共施用药物(例如，抗凝剂)的存在，施用时间，或执业医生已知的其他因素。
术语“治疗”被定义为为了抗击疾病、状况或病症，对受试者(例如哺乳动物，尤其是人)的处置和护理，包括施用因子VII多肽以阻止症状或并发症的发作，或减轻症状或并发症，或消除疾病、状况或病症。可以将包含因子VII多肽的本发明药物组合物给需要这种治疗的受试者肠胃外施用。利用注射器，任选的是笔样注射器，可以通过皮下、肌内或静脉注射进行肠胃外给药。可选择地，可以通过输液泵进行肠胃外给药。
在重要的实施方案中，根据本领域已知的方法药物组合物适于皮下、肌内或静脉注射。
气密容器
因此，本发明还提供一种包含本文限定的液体、水性药物组合物及任选的惰性气体的气密容器(例如，小瓶或药筒(诸如用于笔样施用器的药筒))。
惰性气体可以选自氮，氩气，等等。容器(例如小瓶或药筒)通常由玻璃或塑料制成，尤其是玻璃，任选的用橡胶隔片或允许渗透的其他密闭装置密封，以保证药物组合物的完整性。在其他实施方案中，容器是装入密封袋的小瓶或药筒，例如密封的塑料袋，诸如层压的(例如金属(诸如铝)层压塑料袋)。
包括冻干因子VII多肽的试剂盒
上述限定的液体、水性药物组合物主要预期用于直接使用，通常用于肠胃外给药，例如通过注射。但是，还想象得到该液体、水性药物组合物可能在医师或最终用户实际肠胃外使用前的一段时间从相应的冻干制剂制备，例如使用前1-24小时，或甚至数周，例如使用前2-4周，例如以多剂量批次的形式。在这种情况下对医师或最终用户来说，得到冻干形式的因子VII多肽以及合适量的水性重建液是方便的。
因此，本发明的另一个方面涉及用于制备本文限定的组合物的试剂盒，所述试剂盒包括：
(a)第一容器，包括至少冻干形式的因子VII多肽(i)；
(b)第二容器，包括水性重建液体，所述液体至少包括缓冲剂(ii)和至少一种芳香族防腐剂(iii)。
方便地，第二容器还包括抗氧化剂(iv)。
在一些实施方案中，第一容器和第二容器可以被安置为装置的分离小室，例如用于注射器装置的安瓿，例如笔。
实验
一般方法
当提及溶于溶液的固体和混入溶液的液体时，百分比均是(体重/体重)。例如，对于泊洛沙姆188来说，它是100％储液的重量/溶液的重量。
适于测定因子VII多肽的生物活性的分析
适用于本发明的因子VII多肽可以通过合适的分析挑选，所述分析可以作为简单的初步体外试验进行。因此，本说明书公开了检测因子VII多肽活性的简单试验(称为“体外水解分析”)。
第一代凝血分析
可以利用基本上如WO 92/15686或US 5,997,864描述的一阶段(one-stage)凝血分析测量因子VII多肽的活性。简单来说，将待测样品在50mM Tris(pH 7.5)，0.1％BSA中稀释，并将100μL与100μL因子VII缺陷型血浆和200μL包含10mM Ca2+的促凝血酶原激酶C温育。测量凝血时间，并与利用参照标准品或系列稀释的含柠檬酸盐的正常人血浆库的标准曲线进行比较。
体外水解分析(分析1)
可以检测天然(野生型)因子VIIa和因子VII多肽(以下均称为“因子VIIa”)的特异活性。它们也可平行检测以直接比较它们的特异活性。所述分析在微量滴定板(MaxiSorp，Nunc，Denmark)中进行。将终浓度1mM的显色底物D-Ile-Pro-Arg-p-硝基酰替苯胺(nitroanilide)(S-2288，Chromogenix，Sweden)添加到包含0.1M NaCl，5mM CaCl2和1mg/mL牛血清白蛋白的50mM HEPES，pH 7.4中的因子VIIa(终浓度100nM)。连续地在SpectraMaxTM340plate reader(Molecular Devices，USA)中测量405nm处的吸光度。在20分钟温育期间发展的吸光度，在减去不合酶的空白孔的吸光度后，用于计算因子VII多肽和野生型因子VIIa的活性之间的比例：
比例＝(A405nm因子VII多肽)/(A405nm因子VIIa野生型)。
基于此，可以鉴定出与天然因子VIIa相比活性更低、相当或更高的因子VII多肽，诸如，例如，其中因子VII多肽的活性与天然因子VII(野生型FVII)之间的比例为约1.0对高于1.0的因子VII多肽。
该分析还可以用于检测不同缓冲条件下的因子VII活性。
因子VII多肽的活性还可以利用生理底物诸如因子X测量(“体外蛋白水解分析”)，合适地采用100-1000nM的浓度，其中在添加合适的显色底物(例如S-2765)后测量产生的因子Xa。此外，可以在生理温度下进行所述活性分析。
体外蛋白水解分析(分析2)
对天然(野生型)因子VIIa和因子VII多肽(以下均称为“因子VIIa”)进行平行分析以直接比较它们的特异活性。所述分析在微量滴定板(MaxiSorp，Nunc，Denmark)中进行。将包含0.1M NaCl，5mM CaCl2和1mg/mL牛血清白蛋白的100μL50mM HEPES，pH 7.4中的因子VIIa(10nM)和因子X(0.8microM)温育15分钟。然后通过添加包含0.1M NaCl，20mM EDTA和1mg/mL牛血清白蛋白的50μL 50mMHEPES，pH 7.4终止因子X切割。通过添加终浓度0.5mM的显色底物Z-D-Arg-Gly-Arg-p-硝基酰替苯胺(S-2765，Chromogenix，Sweden)来测量产生的因子Xa的量。连续地在SpectraMaxTM340plate reader(Molecular Devices，USA)中测量405nm处的吸光度。在10分钟温育期间发展的吸光度，在减去不含FVIIa的空白孔的吸光度后，用于计算因子VII多肽和野生型因子VIIa的蛋白水解活性之间的比例：
比例＝(A405nm因子VII多肽)/(A405nm因子VIIa野生型)。
基于此，可以鉴定出与天然因子VIIa相比活性更低、相当或更高的因子VII多肽，诸如，例如，其中因子VII多肽的活性与天然因子VII(野生型FVII)之间的比例为约1.0对高于1.0的因子VII多肽。
凝血酶产生分析(分析3)
可以在包括生理浓度的所有相关凝血因子和抑制剂(当模拟血友病A状况时减去因子VIII)和活化的血小板的分析(分析3)中测量因子VII多肽产生凝血酶的能力(如描述于Monroe等(1997)Brit.J.Haematol.99，542-547的第543页，其在此通过援引并入)。
一阶段凝结分析(凝血分析)(分析4)
还可以利用一阶段凝结分析(分析4)检测因子VII多肽的特异活性(“凝血活性”)。为了这个目的，将待测样品用50mM PIPES-缓冲液(pH7.2)，1％BSA稀释，并将40μl与40μl因子VII缺陷型血浆及包含10mM Ca2+和合成磷脂的80μl人重组组织因子温育。测量凝结时间(凝血时间)，并与平行系分析中利用参照标准品的标准曲线进行比较。
重链降解分析
为了确定重链降解产物的含量，在颗粒大小为5μm和孔径的专有4.5×250mm丁基键合的二氧化硅柱上进行反相HPLC。柱温：70℃。A-缓冲液：0.1％v/v三氟醋酸。B-缓冲液：0.09％v/v三氟醋酸，80％v/v乙腈。在30分钟内利用从X到(X+13)％B的线性梯度洗脱柱。调整X以便在大约26分钟的保留时间洗脱FVIIa。流速：1.0mL/分钟。检测：214nm。上样：25μgFVIIa。从测量到的重链降解产物的含量中减去重链降解产物的初始含量，即，重链降解产物的初始含量被设为0％。然后在时间x的重链降解产物的含量计算为：
％＝(HCDP(x)-HCDP(0))/(HCDP(x)-HCDP(0)+FVII(x))×100％
＝(HCDP(x)-HCDP(0))/(FVII(0))×100％
其中HCDP(x)是时间x测量到的重链降解产物的含量，HCDP(0)是测量到的重链降解产物的初始含量，和FVII(x)是时间x的完整因子VII多肽的含量。
通过反相HPLC测定氧化产物
HPLC柱：4.5×250mm柱，装有颗粒大小5μm和孔径的丁基键合的二氧化硅。柱温：70℃。洗脱液A：水99.9％v/v和三氟醋酸0.1％v/v。洗脱液B：乙腈80％v/v，三氟醋酸0.09％v/v和水19.91％v/v。在30分钟内利用从X％B到(X+13)％B的线性梯度洗脱柱。流速：1.0mL/分钟。检测：214nm。
氧化形式是因子VII多肽的甲硫氨酸亚砜。例如，FVII的两种主要衍生物是Met(O)298FVII和Met(O)306FVII。
氧化形式的含量可以表示为制备(即作为因子VII多肽的氧化形式回收)时组合物中因子VII多肽初始量的百分比。
因子VII多肽的制备和纯化
适用于本发明的纯化的人因子VIIa优选的通过DNA重组技术制备，例如描述于Hagen等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 83：2412-2416，1986，或描述于欧洲专利号0 200 421(ZymoGenetics，Inc.)。
因子VII还可以按照以下描述的方法产生：Broze和Majerus，J.Biol.Chem.255(4)：1242-1247，1980以及Hedner和Kisiel，J.Clin.Invest.71：1836-1841，1983。这些方法产生因子VII而没有可检测数量的其他血液凝固因子。通过包括另外的凝胶过滤作为最终纯化步骤可以获得甚至进一步纯化的因子VII制品。然后通过已知的方法，例如通过数种不同的血浆蛋白，诸如因子XIIa、IXa或Xa，将因子VII转变为活化的因子VIIa。可选择地，如Bjoern等所述(ResearchDisclosure，269September 1986，pp.564-565)，通过将因子VII穿过离子交换层析柱，诸如Mono(Pharmacia fine Chemicals)或类似物，或通过溶液中的自体活化，可以将因子VII活化。
可以通过野生型因子VII的修饰或通过重组技术产生包括变体的因子VII多肽。通过已知的方法，例如通过位点特异性诱变，利用在编码天然因子VII的核酸中改变氨基酸密码子或者去除一些氨基酸密码子来改变编码野生型因子VII的核酸序列，可以产生与野生型因子VII相比具有改变的氨基酸序列的因子VII多肽。
以下对于本领域技术人员来说是显而易见的，可在对因子VIIa分子的功能关键的区域以外进行取代并仍然产生活性多肽。可以根据本领域已知的方法，诸如定点诱变或丙氨酸扫描诱变(参见，例如，Cunningham and Wells，1989，Science 244：1081-1085)鉴定因子VII多肽活性必需的氨基酸残基，因此它们优选的不进行取代。在后一技术中，突变被引入分子中每个带正电荷的残基，然后对生成的突变分子进行凝结、分别交联活性检测以鉴定对分子活性关键的氨基酸残基。利用核磁共振分析、结晶学或光亲和标记(参见，例如，de Vos等，1992，Science 255：306-312；Smith等，1992，Journal of Molecular Biology 224：899-904；Wlodaver等，1992，FEBS Letters 309：59-64)这类技术测定，通过分析三维结构还可以确定底物酶相互作用的位点。
利用本领域已知的任意方法，通过定点诱变可以实现将突变引入核酸序列以用另一种核苷酸替换一种核苷酸。尤其有效的是以下方法，利用具有感兴趣的插入物的超螺旋双链DNA载体和两条包含所需突变的合成引物。所述寡核苷酸引物，每条与载体的相反链互补，通过Pfu DNA聚合酶在温度循环期间延伸。在引物掺入时，产生包含交错切口的突变质粒。在温度循环后，用DpnI(对甲基化和半甲基化的DNA特异)处理产物以消化亲代DNA模板并选择包含突变的合成DNA。还可以使用本领域已知的产生、鉴定和分离变体的其他方法，诸如，例如，基因改组或噬菌体展示技术。
从多肽的细胞来源分离多肽可以通过本领域已知的任何方法实现，包括，但不限于，从粘附细胞培养物中除去包含所需产物的细胞培养基；离心或过滤以去除非粘附细胞；诸如此类。
任选的，因子VII多肽可以被进一步纯化。纯化可以利用本领域已知的任何方法实现，包括，但不限于，亲和层析，诸如，例如，在抗因子VII抗体柱上(参见，例如，Wakabayashi等，J.Biol.Chem.261：11097，1986；和Thim等，Biochem.27：7785，1988)；疏水性相互作用层析；离子交换层析；大小排阻层析；电泳方法(例如，制备式等电聚焦IEF)，差异溶解性(例如，硫酸铵沉淀)，或萃取等等。一般地参见，Scopes，Protein Purification，Springer-Verlag，New York，1982；和Protein Purification，J.C.Janson and Lars Ryden，editors，VCH Publishers，New York，1989。纯化后，按重量计制品优选的包含低于10％源自宿主细胞的非因子VII多肽，更优选的低于5％和最优选的低于1％。
因子VII多肽可以通过蛋白水解切割活化，利用具有胰蛋白酶样特异性的因子XIIa或其他蛋白酶，诸如，例如，因子IXa，激肽释放酶，因子Xa和凝血酶。参见，例如，Osterud等，Biochem.11：2853(1972)；Thomas，美国专利号4,456,591；和Hedner等，J.Clin.Invest.71：1836(1983)。可选择地，通过将其穿过离子交换层析柱，诸如Mono(Pharmacia)或类似物，或通过溶液中的自体活化，可以活化因子VII多肽。然后可以按照本申请的描述配制和施用所获活化的因子VII多肽。
下列实施例例示本发明的实施。包括这些实施例只是用于例示目的，无论如何不是为了限制本发明所要求的范围。
工作实施例
实施例1
按照上文所述，在下列条件下：3μM活化的因子VII，50mM咪唑，pH 6.5，20mM CaCl2，50mM NaCl，0.5mg/mL牛血清白蛋白，1mM S-2288，通过D-ILE-PRO-ARG-P-硝基酰替苯胺的降解测量活化的因子VII的酰胺分解活性。在大量不同浓度的间甲酚和苯酚中测量活性。所有实验都进行两次。图1显示不同防腐剂浓度下的酰胺分解活性，任意单位。令人意外地，观察到活性随着防腐剂浓度的增加而降低。
实施例2
在下列条件下：15mg/mL活化的因子VII，10mM组氨酸，pH 6.0，20mM CaCl2，8％蔗糖，将活化的因子VII与不同浓度的间甲酚或苯酚混合。将总体积100μl的样品分配入石英微量滴定板(Hellma)，并在平板读数器上通过测量400nm的吸收评价浊度。浊度是样品中沉淀的表征。观察到在研究的最高防腐剂浓度下，样品中存在显著的沉淀。该现象可能限制了没有添加其他赋形剂以补救沉淀的情况下间甲酚和苯酚的使用。
实施例3
在下列条件下：15mg/mL活化的因子VII，10mM组氨酸，pH 6.0，20mM CaCl2，8％蔗糖，将活化的因子VII与30mM间甲酚和不同浓度的泊洛沙姆188混合。将总体积100μl的样品分配入石英微量滴定板(Hellma)，并在平板读数器上通过测量400nm的吸收评价浊度。观察到泊洛沙姆188的浓度增加导致浊度的降低。因此，在一些情况下包括非离子型表面活性剂诸如泊洛沙姆188可能是有益的。
实施例4
制备含有下列组分的溶液：5mg/mL活化的因子VII，10mM组氨酸，pH 6.0，20mM CaCl2，0.1％泊洛沙姆188，8％蔗糖。制备两种溶液：一种含30mM间甲酚，一种不含间甲酚。在37℃温育三天后，通过反相HPLC测量重链降解的量。图4显示结果。观察到在间甲酚存在的条件下，重链降解的量基本上更低，表明这种制剂是有益的。
实施例5
将2mL下列溶液冻干：12mg/mL活化的因子VII，0.39mg/mLNaCl，5.15mg/mL CaCl2(2H2O)，10mM组氨酸，0.5mg/mL甲硫氨酸，0.07％吐温80，10mg/mL蔗糖和25mg/mL甘露醇。将冻干的饼状物溶于2mL水，并在5℃温育。2周后，重链片段的含量从约10％增加到19.5％。
实施例6
将2mL下列溶液冻干：12mg/mL活化的因子VII，0.39mg/mLNaCl，5.15mg/mL CaCl2(2H2O)，10mM组氨酸，0.5mg/mL甲硫氨酸，0.07％吐温80，10mg/mL蔗糖和25mg/mL甘露醇。将冻干的饼状物溶于2mL 1.5％苯甲醇，将pH调节至6.0，然后将样品在5℃温育。2周后，重链片段的含量从约10％增加到14.5％。
实施例7：
将5mL下列组分冻干：1.0mg/mL活化的因子VII，2.34mg/mLNaCl，1.47mg/mL氯化钙，1.32mg/mL甘氨酰甘氨酸，25mg/mL甘露醇，10mg/mL蔗糖，0.5mg/mL甲硫氨酸，0.07mg/mL吐温80，pH6.00。将冻干的粉末在1.2mL 0.3％间甲酚，10mM组氨酸，0.3％泊洛沙姆188，pH 6.0中重建。将样品在5℃温育。在0、1、2、3和4周后取出等分样品并冷冻。实验结束后，解冻所有样品，并分析重链片段和氧化产物。下表显示结果：
重链断裂和氧化均保持在可接受的限度内。
所有参考文献，包括本文引用的出版物、专利申请和专利，在此完整通过援引并入，以与每篇参考文献单独和具体的指明通过援引并入，和它们在本文中完整阐述相同的程度(到法律许可的最大程度)。所有标题和小标题在本文中只是为了方便起见而使用，无论如何不应被理解为限制本发明。本文提供的任意和所有实施例或示例性语言(例如，“诸如”)的使用仅仅是为了更好的说明本发明，不是为了给本发明的范围做出限制，除非另有要求。说明书中没有语言应被理解为指示任意未要求的要素是实施本发明必需的。本文中专利文献的引用和并入只是为了方便起见，不反映对这类专利文献的有效性、可专利性和/或可执行性的任何见解。本发明包括适用法律许可的所附权利要求中叙述的主题的所有改变物和同等物。
本发明优选特征
1.一种液体、水性药物组合物，包括：
至少10mg/mL的因子VII多肽(i)；
适于维持pH范围为约5.0到约9.0的缓冲剂(ii)；
至少一种浓度为至少0.1mg/mL的芳香族防腐剂(iii)；和
至少一种浓度为至少0.1mg/mL的抗氧化剂(iv)；
所述组合物任选的包括其他组分，条件是这类其他组分不是选自以下的因子VII多肽稳定剂：
(a)包含金属的试剂，其中所述金属选自由除了锌以外的氧化态+II的第一过渡系金属组成的组；和
(b)包括-C(＝N-Z1-R1)-NH-Z2-R2基序的稳定剂。
2.如条款1所述的组合物，其中所述其他组分不是因子VII多肽稳定剂。
3.如前述条款中任意一项所述的组合物，其中所述至少一种芳香族防腐剂(iii)选自苯酚，苯甲醇，邻甲酚，间甲酚，对甲酚，对羟基苯甲酸甲酯，对羟苯甲酸丙酯，苯扎氯铵，和苄索氯铵，尤其是间甲酚、苯酚和苯甲醇。
4.如前述条款中任意一项所述的组合物，其中包括的至少一种芳香族防腐剂的浓度是0.1-20mg/mL。
5.如前述条款中任意一项所述的组合物，其中所述至少一种抗氧化剂(iv)选自：L-甲硫氨酸，D-甲硫氨酸，甲硫氨酸类似物，包含甲硫氨酸的肽，甲硫氨酸同系物，抗坏血酸，半胱氨酸，高半胱氨酸，谷胱甘肽，胱氨酸，和胱硫醚。
6.如前述条款中任意一项所述的组合物，其中所述至少一种抗氧化剂(iv)以0.1-5.0mg/mL的浓度存在。
7.如前述条款中任意一项所述的组合物，其中所述因子VII多肽是人因子VIIa。
8.如前述条款中任意一项所述的组合物，其中所述因子VII多肽是因子VII序列变体。
9.如条款8所述的组合物，其中当在本文描述的“体外蛋白水解分析”(分析2)中检测时，因子VII多肽的活性与天然人因子VIIa(野生型FVIIa)的活性之间的比例是至少1.25。
10.如前述条款中任意一项所述的组合物，其中所述因子VII多肽以10-90mg/mL的浓度存在。
11.如前述条款中任意一项所述的组合物，其具有约5.0到约8.0的pH值范围。
12.如前述条款中任意一项所述的组合物，其中所述缓冲剂(ii)包括选自下组的至少一种组分：MES，PIPES，ACES，BES，TES，HEPES，TRIS，组氨酸，咪唑，甘氨酸，甘氨酰甘氨酸，甘氨酰胺，磷酸，醋酸，乳酸，戊二酸，柠檬酸，酒石酸，苹果酸，马来酸和琥珀酸的酸和盐。
13.如前述条款中任意一项所述的组合物，其中所述缓冲剂(ii)的浓度是1-100mM。
14.如前述条款中任意一项所述的组合物，还包括张力调节剂(v)。
15.如条款14所述的组合物，其中所述张力调节剂(v)是选自中性盐，氨基酸，2-5个氨基酸残基的肽，单糖，二糖，多糖，和糖醇中的至少一种。
16.如条款14-15中任意一项所述的组合物，其中至少一种张力调节剂(v)是选自以下组的中性盐：钠盐、钾盐、钙盐和镁盐。
17.如条款14-15中任意一项所述的组合物，其中所述张力调节剂(v)是氯化钠与选自氯化钙、醋酸钙、氯化镁和醋酸镁中的至少一种的组合。
18.如条款14-17中任意一项所述的组合物，其中所述张力调节剂(v)以至少1mM的浓度存在。
19.如条款14-18中任意一项所述的组合物，其中至少一种张力调节剂(v)是离子强度调节剂(v/a)。
20.如前述条款中任意一项所述的组合物，其还包括非离子型表面活性剂(vi)。
21.如条款20所述的组合物，其中所述非离子型表面活性剂(vi)是选自以下组中的至少一种：聚山梨醇酯，泊洛沙姆，聚氧乙烯烷基醚，乙烯/聚丙烯嵌段共聚物和聚乙二醇(PEG)。
22.如条款20-21中任意一项所述的组合物，其中所述非离子型表面活性剂(vi)的浓度按重量计为0.005-2％。
23.如前述条款中任意一项所述的液体、水性药物组合物，其包括：
10-90mg/mL的因子VII多肽(i)；
适于维持pH范围为约5.0到约9.0的缓冲剂(ii)；
至少一种浓度为0.1-20mg/mL的芳香族防腐剂(iii)；和
至少一种浓度为0.1-5.0mg/mL的抗氧化剂(iv)。
24.如前述条款中任意一项所述的组合物，其适用于肠胃外给药。
25.如条款24所述的组合物，其适用于皮下、肌内或静脉注射。
26.用做药物的如条款1-25中任意一项限定的液体、水性药物组合物。
27.如条款1-15中任意一项限定的液体、水性药物组合物在制备用于治疗因子VII应答性综合征的药物中的用途。
28.一种治疗因子VII应答性综合征的方法，所述方法包括给需要其的受试者施用有效量的如条款1-25中任意一项限定的液体、水性药物组合物。
29.一种气密容器，包含如条款1-25中任意一项限定的液体、水性药物组合物，和任选的惰性气体。
30.一种用于制备如条款1-25中任意一项限定的组合物的试剂盒，所述试剂盒包括：
(a)第一容器，包括至少冻干形式的因子VII多肽(i)；
(b)第二容器，包括水性重建液体，所述液体至少。

Claims (16)

1.一种液体、水性药物组合物，包括：
至少10mg/mL的因子VII多肽(i)；
适于维持pH范围为约5.0到约9.0的缓冲剂(ii)；
至少一种浓度为至少0.1mg/mL的芳香族防腐剂(iii)；和
至少一种浓度为至少0.1mg/mL的抗氧化剂(iv)；
所述组合物任选的包括其他组分，条件是这类其他组分不是选自以下的因子VII多肽稳定剂：
(a)包含金属的试剂，其中所述金属选自由除了锌以外的氧化态+II的第一过渡系金属组成的组；和
(b)包括-C(＝N-Z1-R1)-NH-Z2-R2基序的稳定剂。
2.如权利要求1所述的组合物，其中所述其他组分不是因子VII多肽稳定剂。
3.如前述权利要求中任意一项所述的组合物，其中所述至少一种芳香族防腐剂(iii)选自苯酚，苯甲醇，邻甲酚，间甲酚，对甲酚，对羟基苯甲酸甲酯，对羟苯甲酸丙酯，苯扎氯铵，和苄索氯铵，尤其是间甲酚、苯酚和苯甲醇。
4.如前述权利要求中任意一项所述的组合物，其中包括的至少一种芳香族防腐剂的浓度是0.1-20mg/mL。
5.如前述权利要求中任意一项所述的组合物，其中所述至少一种抗氧化剂(iv)选自：L-甲硫氨酸，D-甲硫氨酸，甲硫氨酸类似物，包含甲硫氨酸的肽，甲硫氨酸同系物，抗坏血酸，半胱氨酸，高半胱氨酸，谷胱甘肽，胱氨酸，和胱硫醚。
6.如前述权利要求中任意一项所述的组合物，其中所述至少一种抗氧化剂(iv)以0.1-5.0mg/mL的浓度存在。
7.如前述权利要求中任意一项所述的组合物，还包括张力调节剂(v)。
8.如权利要求7所述的组合物，其中所述张力调节剂(v)是选自中性盐，氨基酸，2-5个氨基酸残基的肽，单糖，二糖，多糖和糖醇中的至少一种。
9.如权利要求7-8中任意一项所述的组合物，其中至少一种张力调节剂(v)是选自以下组的中性盐：钠盐、钾盐、钙盐和镁盐。
10.如权利要求7-8中任意一项所述的组合物，其中所述张力调节剂(v)是氯化钠与选自氯化钙、醋酸钙、氯化镁和醋酸镁中的至少一种的组合。
11.如前述权利要求中任意一项所述的组合物，其还包括非离子型表面活性剂(vi)。
12.如权利要求11所述的组合物，其中所述非离子型表面活性剂(vi)是选自以下组中的至少一种：聚山梨醇酯，泊洛沙姆，聚氧乙烯烷基醚，乙烯/聚丙烯嵌段共聚物和聚乙二醇(PEG)。
13.如前述权利要求中任意一项所述的液体、水性药物组合物，其包括：
10-90mg/mL的因子VII多肽(i)；
适于维持pH范围为约5.0到约9.0的缓冲剂(ii)；
至少一种浓度为0.1-20mg/mL的芳香族防腐剂(iii)；和
至少一种浓度为0.1-5.0mg/mL的抗氧化剂(iv)。
14.如权利要求1-13中任意一项限定的液体、水性药物组合物在制备用于治疗因子VII应答性综合征的药物中的用途。
15.一种气密容器，包含如权利要求1-13中任意一项限定的液体、水性药物组合物，和任选的惰性气体。
16.一种用于制备如权利要求1-13中任意一项限定的组合物的试剂盒，所述试剂盒包括：
(a)第一容器，包括至少冻干形式的因子VII多肽(i)；
(b)第二容器，包括水性重建液体，所述液体至少包括缓冲剂(ii)和至少一种芳香族防腐剂(iii)。
CN201510262781.6A 2007-05-02 2008-04-30 包括芳香族防腐剂和抗氧化剂的高浓度因子vii多肽制剂 Withdrawn CN104887620A (zh)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP07107384 2007-05-02
EP07107384.5 2007-05-02
CN200880014075A CN101674805A (zh) 2007-05-02 2008-04-30 包括芳香族防腐剂和抗氧化剂的高浓度因子ⅶ多肽制剂

Related Parent Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN200880014075A Division CN101674805A (zh) 2007-05-02 2008-04-30 包括芳香族防腐剂和抗氧化剂的高浓度因子ⅶ多肽制剂

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN104887620A true CN104887620A (zh) 2015-09-09

Family

ID=38055248

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201510262781.6A Withdrawn CN104887620A (zh) 2007-05-02 2008-04-30 包括芳香族防腐剂和抗氧化剂的高浓度因子vii多肽制剂
CN200880014075A Pending CN101674805A (zh) 2007-05-02 2008-04-30 包括芳香族防腐剂和抗氧化剂的高浓度因子ⅶ多肽制剂

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN200880014075A Pending CN101674805A (zh) 2007-05-02 2008-04-30 包括芳香族防腐剂和抗氧化剂的高浓度因子ⅶ多肽制剂

Country Status (5)

Country Link
US (1) US9186323B2 (zh)
EP (1) EP2152233A1 (zh)
JP (2) JP2010525034A (zh)
CN (2) CN104887620A (zh)
WO (1) WO2008135500A1 (zh)

Families Citing this family (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2011520999A (ja) * 2008-05-23 2011-07-21 ノボ ノルディスク ヘルス ケア アーゲー 高濃度の芳香族保存料を有するペグ官能化セリンプロテアーゼの製剤
US20110112029A1 (en) * 2008-05-23 2011-05-12 Novo Nordisk Health Care Ag Low viscosity compositions comprising a pegylated gla-domain containing protein
FR2947181B1 (fr) * 2009-06-26 2012-05-04 Lfb Biotechnologies Composition de facteur vii
US20120294866A1 (en) * 2010-01-19 2012-11-22 F. Hoffmann-La Roche Ag Pharmaceutical formulation for proteins
WO2016198641A1 (en) * 2015-06-12 2016-12-15 Laboratoire Francais Du Fractionnement Et Des Biotechnologies Injectable composition of factor vii and fillers
CN111849945B (zh) * 2019-04-25 2024-11-29 正大天晴药业集团股份有限公司 人凝血因子VIIa的纯化方法
US20240165258A1 (en) * 2021-03-24 2024-05-23 Jcr Pharmaceuticals Co., Ltd. Stable Aqueous Pharmaceutical Composition or Freeze-Dried Pharmaceutical Composition

Family Cites Families (24)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
NZ197420A (en) * 1980-07-01 1984-04-27 Ici Australia Ltd -(quinazolin-(2-or 4-)(oxy,ylthio or amino)phen(oxy or ylthio)alkanoic acid derivatives
US6310183B1 (en) * 1997-09-10 2001-10-30 Novo Nordisk A/S Coagulation factor VIIa composition
EP1982732A3 (en) 2000-02-11 2011-06-08 Bayer HealthCare LLC Factor VII or VIIA-like conjugates
US20020028288A1 (en) * 2000-06-14 2002-03-07 The Procter & Gamble Company Long lasting coatings for modifying hard surfaces and processes for applying the same
US6423826B1 (en) 2000-06-30 2002-07-23 Regents Of The University Of Minnesota High molecular weight derivatives of vitamin K-dependent polypeptides
DE60139944D1 (de) 2000-10-12 2009-10-29 Genentech Inc Niederviskose konzentrierte proteinformulierungen
PL370652A1 (en) 2001-12-21 2005-05-30 Novo Nordisk Health Care Ag Liquid composition of factor vii polypeptides
DK2283856T3 (da) * 2002-06-21 2017-11-20 Novo Nordisk Healthcare Ag Stabiliserede, faste sammensætninger af Faktor VIIa-polypeptider
BR0311978A (pt) 2002-06-21 2005-03-22 Novo Nordisk Healthcare Ag Preparação, método para preparar a mesma, formulação farmacêutica, métodos para tratar de uma sìndrome responsiva ao fator vii, para prevenir hemorragias indesejáveis, para prevenir coagulação sanguìnea indesejável e para prevenir as reações mediadas pelo fator tecidual, e, uso de uma preparação
EA200500259A1 (ru) * 2002-07-25 2005-08-25 Байопойнт Апс Способ обработки поверхности, композиции для нанесения покрытия и их применение и поверхности с нанесенными покрытиями, полученные с их использованием
AU2004222625A1 (en) 2003-03-18 2004-09-30 Novo Nordisk Health Care Ag Liquid, aqueous, pharmaceutical compositions of factor VII polypeptides
JP5627832B2 (ja) * 2003-05-23 2014-11-19 ノボ ノルディスク ヘルス ケア アクチェンゲゼルシャフト 溶液中におけるタンパク質の安定化
WO2004112828A1 (en) 2003-06-25 2004-12-29 Novo Nordisk Health Care Ag Liquid composition of factor vii polypeptides
ES2335994T3 (es) 2003-07-01 2010-04-07 Novo Nordisk Health Care Ag Composicion farmaceutica liquida, acuosa de polipeptidos factor vii.
ES2574581T3 (es) * 2003-08-14 2016-06-20 Novo Nordisk Health Care Ag Composición farmacéutica líquida acuosa de polipéptidos de tipo Factor VII
AU2004298789A1 (en) * 2003-12-19 2005-06-30 Novo Nordisk Health Care Ag Stabilised compositions of factor VII polypeptides
US20090176967A1 (en) 2004-08-02 2009-07-09 Novo Nordisk Healthcare A/G Conjugation of FVII
JP2008516621A (ja) 2004-10-18 2008-05-22 ノボ ノルディスク アクティーゼルスカブ 成長ホルモン結合体
JP2008531525A (ja) * 2005-02-24 2008-08-14 ノボ ノルディスク ヘルス ケア アクチェンゲゼルシャフト Ｖｉｉ因子ポリペプチド製剤を安定化する化合物
EP1877037A2 (en) 2005-04-28 2008-01-16 Novo Nordisk Health Care AG A closed container comprising an activated factor vii polypeptide, processes for the preparation of the same, and a kit and a method for use of the kit
EP1919498A2 (en) 2005-08-26 2008-05-14 Maxygen Holdings Ltd. Liquid factor vii composition
CA2634131C (en) 2005-12-21 2014-02-11 Wyeth Protein formulations with reduced viscosity and uses thereof
ES2531934T3 (es) 2006-09-01 2015-03-20 Novo Nordisk Health Care Ag Glicoproteínas modificadas
WO2008081024A1 (en) 2007-01-03 2008-07-10 Novo Nordisk Health Care Ag Subcutaneous administration of coagulation factor viia-related popypeptdes

Also Published As

Publication number Publication date
CN101674805A (zh) 2010-03-17
EP2152233A1 (en) 2010-02-17
US9186323B2 (en) 2015-11-17
WO2008135500A1 (en) 2008-11-13
US20100294677A1 (en) 2010-11-25
JP2010525034A (ja) 2010-07-22
JP2014208659A (ja) 2014-11-06

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP5653572B2 (ja) 第ｖｉｉ因子ポリペプチドの液状水性医薬組成物
US7790852B2 (en) Liquid composition of factor VII polypeptides
JP5642065B2 (ja) ペグ化されたｇｌａ−ドメイン含有タンパク質を含む低粘度組成物
JP2014208659A (ja) 芳香族保存料及び抗酸化剤を含有してなる高濃縮第ｖｉｉ因子ポリペプチド製剤
JP2012153696A (ja) 第ｖｉｉ因子ポリペプチドの液体水性薬学的組成物
CN101184474B (zh) 含有活化的凝血因子ⅶ多肽的密封容器，制备这种容器的方法，和试剂盒以及该试剂盒的使用方法
JP2011520999A (ja) 高濃度の芳香族保存料を有するペグ官能化セリンプロテアーゼの製剤
US20100303786A1 (en) Stabilisation of Liquid-Formulated Factor VII(A) Polypeptides by Aldehyde-Containing Compounds
WO2009027478A2 (en) A method of removing preservatives from a liquid pharmaceutical preparation
WO2008023052A1 (en) Combination of a fvii and a thrombin-activable factor x

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C04 Withdrawal of patent application after publication (patent law 2001)
WW01 Invention patent application withdrawn after publication

Application publication date: 20150909