[go: up one dir, main page]

CN104619696A - 布鲁顿氏酪氨酸激酶抑制剂 - Google Patents

布鲁顿氏酪氨酸激酶抑制剂 Download PDF

Info

Publication number
CN104619696A
CN104619696A CN201380047474.5A CN201380047474A CN104619696A CN 104619696 A CN104619696 A CN 104619696A CN 201380047474 A CN201380047474 A CN 201380047474A CN 104619696 A CN104619696 A CN 104619696A
Authority
CN
China
Prior art keywords
compound
base
methyl
amino
oxo
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201380047474.5A
Other languages
English (en)
Inventor
C·E·布罗泽顿-普雷斯
R·希尔根卡姆普
R·K·孔德鲁
F·J·罗裴茨-塔比阿
Y·楼
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
F Hoffmann La Roche AG
Original Assignee
F Hoffmann La Roche AG
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by F Hoffmann La Roche AG filed Critical F Hoffmann La Roche AG
Publication of CN104619696A publication Critical patent/CN104619696A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D487/04—Ortho-condensed systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/06—Antiasthmatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/14—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing three or more hetero rings

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)

Abstract

本申请公开了可抑制Btk的通式I的化合物，其中所有的变量如本文所定义。本文所公开的化合物可用于调控Btk的活性和治疗与Btk活性过高有关的疾病。该化合物可进一步用于治疗与异常的B-细胞增殖有关的炎性和自身免疫性疾病如类风湿性关节炎。还公开了包含式I的化合物和至少一种载体、稀释剂或赋形剂的组合物。

Description

布鲁顿氏酪氨酸激酶抑制剂
发明领域
本发明涉及抑制Btk并可用于治疗由异常的B-细胞活化造成的自身免疫和炎性疾病的新化合物的用途。
发明背景
蛋白激酶构成了人类酶中最大的一族并且通过向蛋白加成磷酸根基团来调节许多不同的信号过程(T.Hunter,Cell 1987 50:823-829)。具体而言，酪氨酸激酶磷酸化蛋白中酪氨酸残基的苯酚部分。酪氨酸激酶族包括控制细胞生长、迁移和分化的成员。已经表明在许多人类疾病中都涉及异常的激酶活性，所述疾病包括癌症、自身免疫性和炎性疾病。由于蛋白激酶是细胞信号传导的关键调节剂，它们因此提供了用小分子激酶抑制剂调节细胞功能的靶点，成为良好的药物设计靶点。除治疗激酶介导的疾病过程外，也可用激酶活性的有效的选择性抑制剂来研究细胞信号传导过程和鉴定治疗感兴趣的其它细胞靶点。
有良好的证据表明B-细胞在自身免疫和/或炎性疾病的发病机理中起关键作用。消耗B细胞的以蛋白为基础的疗法如利妥昔单抗(Rituxan)可有效对抗自身抗体驱动的炎性疾病如类风湿性关节炎(Rastetter等,Annu RevMed 2004 55:477)。因此，在B-细胞活化中起一定作用的蛋白激酶抑制剂将可用于治疗B-细胞介导的疾病病理学如自身抗体产生。
通过B-细胞受体(BCR)的信号传导控制着包括增殖和分化成成熟的抗体产生细胞在内的一系列B-细胞应答。BCR是B-细胞活性的关键调节点，异常的信号传导可造成失调的B-细胞增殖和形成导致多种自身免疫和/或炎性疾病的致病性自身抗体。布鲁顿氏(Bruton’s)酪氨酸激酶(Btk)是一种非-BCR关联性激酶，其位于膜近侧区并且直接位于BCR的下游。已经表明Btk的缺乏阻断了BCR信号传导，因此，抑制Btk将是一种阻断B-细胞介导的疾病进程的有用的治疗途径。
Btk是酪氨酸激酶Tec族的一员，已经表明其是早期B-细胞发育和成熟的B-细胞活化和存活的关键调节剂(Khan等，Immunity 1995 3:283；Ellmeier等，J.Exp.Med.2000 192:1611)。人体内的Btk突变导致了X-连锁无丙种球蛋白血症(XLA)(Rosen等，New Eng.J.Med.1995 333:431和Lindvall等，Immunol.Rev.2005 203:200中的综述)。这些患者免疫功能低下，表现出B-细胞成熟受损、免疫球蛋白和外周B-细胞水平下降、不依赖T-细胞的免疫应答减少以及BCR刺激后的钙动员减弱。
Btk-缺乏小鼠模型也提供了Btk在自身免疫和炎性疾病中的作用的证据。在全身性红斑狼疮(SLE)的临床前鼠科动物模型中，Btk-缺乏小鼠表现出显著的疾病进程改善。此外，Btk-缺乏小鼠耐受胶原诱导的关节炎(Jansson和Holmdahl Clin.Exp.Immunol.1993 94:459)。已经证明一种选择性Btk抑制剂在小鼠关节炎模型中表现出剂量依赖性的功效(Z.Pan等,Chem.Med Chem.2007 2:58-61)。
Btk也通过参与疾病进程的除B-细胞外的其它细胞进行表达。例如，Btk由肥大细胞表达，并且得自Btk-缺乏的骨髓的肥大细胞表现出受损的抗原诱导的脱粒作用(Iwaki等，J.Biol.Chem.2005 280:40261)。这表明Btk可用于治疗病理性肥大细胞应答如过敏和哮喘。得自无Btk活性的XLA患者的单核细胞在刺激后也表现出TNFα产生减少(Horwood等，J ExpMed 197:1603,2003)。因此，可用小分子Btk抑制剂来调控TNFα介导的炎症。还报道了Btk在细胞凋亡中起一定作用(Islam和Smith Immunol.Rev.2000178:49)，因此，Btk抑制剂将可用于治疗某些B-细胞淋巴瘤和白血病(Feldhahn等，J.Exp.Med.2005 201:1837)。
发明概述
如本文下面所述，本申请提供了式I的Btk抑制剂化合物、其使用方法:
本申请提供了式I的化合物或其可药用的盐,
其中:
是单键或双键；
X是CH、CH2或N；
R是H、-R1、-R1-R2-R3、-R1-R3或-R2-R3；
R1是芳基、杂芳基、二环杂芳基、环烷基或杂环烷基，其各自任选地被一个或多个低级烷基、羟基、羟基低级烷基、低级烷氧基、卤素、硝基、氨基、酰氨基、氰基、氧代或低级卤代烷基取代；
R2是-C(＝O)、-C(＝O)O、-C(＝O)NR2’、-NHC(＝O)O、-C(R2’)2、-O、-S、-C(＝NH)NR2’或-S(＝O)2；
各R2’独立地是H或低级烷基；
R3是H或R4；
R4是低级烷基、低级卤代烷基、低级烷氧基、氨基、低级烷基氨基、环烷基氨基、低级二烷基氨基、芳基、芳基烷基、烷基芳基、杂芳基、烷基杂芳基、杂芳基烷基、环烷基、烷基环烷基、环烷基烷基、杂环烷基、烷基杂环烷基、杂环烷基烷基、二环环烷基、二环杂环烷基、螺环烷基、螺杂环烷基或二环螺杂环烷基，其各自任选地被一个或多个低级烷基、卤素、低级烷基氨基、低级二烷基氨基、羟基、羟基低级烷基、低级烷氧基、低级烷酰基、卤素、硝基、氨基、酰氨基、酰基、氰基、氧代、磺酰基、低级烷基磺酰基、胍基、羟基氨基、羧基、氨基甲酰基、氨基甲酸酯、卤代低级烷氧基、杂环烷基或卤代低级烷基取代，其中两个低级烷基可以一起形成一种环；
Y4是Y4a、Y4b、Y4c或Y4d；
Y4a是H或卤素；
Y4b是低级烷基，其任选地被一个或多个选自低级卤代烷基、卤素、羟基、氨基、氰基和低级烷氧基的取代基取代；
Y4c是低级环烷基，其任选地被一个或多个选自低级烷基、低级卤代烷基、卤素、羟基、氨基、氰基和低级烷氧基的取代基取代；且
Y4d是氨基，其任选地被一个或多个低级烷基、烷氧基低级烷基或羟基低级烷基取代。
本申请提供了治疗炎症和/或自身免疫性病症的方法，其包括给需要其的患者施用治疗有效量的式I的化合物。
本申请提供了一种包含式I化合物和至少一种可药用的载体、赋形剂或稀释剂的药物组合物。
发明的详细描述
定义
本文所用的措辞“一个”或“一种”是指一个或多个该类实体；例如，一种化合物是指一种或多种化合物或至少一种化合物。因此，术语“一个”、“一个或多个”和“至少一个”在本文可互换使用。
措辞“如本文上面所定义”是指如发明概述或范围最宽的权利要求中提供的各基团范围最宽的定义。在下面提供的所有其它实施方案中，可存在于各实施方案中和没有明确定义的取代基保留发明概述中提供的范围最宽的定义。
无论是在连接语还是在权利要求的主体中，本说明书中所用的术语“包含”被解释为具有开放式含义。即，该术语被解释为与“至少具有”或“至少包括”的措辞同义。当用于一种方法中时，术语“包含”意指该方法至少包括所列举的步骤，但是也可以包括其它步骤。当用于化合物或组合物背景中时，术语“包含”意指该化合物或组合物至少包括所列举的特征或组分，但是也可以包括其它特征或组分。
除非另外特别说明，否则本文所用的词语“或”的用法是“和/或”的“包含”的含义，而不是“二选一/或者”的“排他的”含义。
本文用术语“独立地”表示一种变量在任何一种情况中均适用，不考虑同一化合物中存在还是不存在具有相同或不同定义的变量。因此，在其中R"出现两次并被定义为“独立地是碳或氮”的化合物中，两个R"可以都是碳，两个R"可以都是氮，或者一个R"可以是碳而另一个可以是氮。
当任何变量在描绘或描述本发明所用或所要保护的化合物的任何部分或结构式中出现一次以上时，其每次出现时的定义与其在每次另外出现时的定义是独立的。只有当所述化合物是稳定的化合物时，取代基和/或变量的组合才是允许的。
位于一个键的末端的符号“*”或穿过一个键的符号“------”各自是指官能团或其它化学部分与其是其中一部分的分子的其余部分的连接点。因此，例如:
MeC(＝O)OR4其中
画入环系内的键(与连接在不同顶点上的键相反)表示该键可连接到任何适宜的环原子上。
本文所用的术语“任选的”或“任选地”意指随后描述的事件或情况可以发生但不一定发生，并且该描述包括其中该事件或情况发生的情况和其不发生的情况。例如，“任选地被取代的”意指该任选地被取代的部分可结合氢原子或取代基。
措辞“任选的键”意指该键可存在或不存在，并且该描述包括单键、双键或三键。如果一种取代基被定义为“键”或“不存在”，则与该取代基相连的原子直接相连。
本文所用的术语“约”意指大概、在……附近、大致或左右。当术语“约”与数字范围联用时，其通过使边界在所给出的数值上向上和向下延伸对该范围进行修饰。一般而言，本文所用的术语“约”将所述数值上下改变20％。
某些式I的化合物可能表现出互变异构现象。互变异构化合物可以以两种或多种可互相转化的种类的形式存在。两个原子之间共价键合的氢原子的迁移产生质子互变异构体。互变异构体通常处于平衡状态，并且当试图分离各互变异构体时，通常产生一种混合物，该混合物的化学和物理性质与化合物的混合物一致。平衡的位置取决于分子内的化学特征。例如，在许多脂族醛和酮如乙醛中，酮形式占优，而在苯酚中，烯醇形式占优。常见的质子互变异构体包括酮/烯醇(-C(＝O)-CH--C(-OH)＝CH-)、酰胺/亚氨酸(-C(＝O)-NH--C(-OH)＝N-)和脒(-C(＝NR)-NH--C(-NHR)＝N-)互变异构体。后两种互变异构体在杂芳基和杂环中特别常见，本发明包括所述化合物所有的互变异构形式。
除非特别定义，否则本文所用的技术和科学术语具有本发明所属领域技术人员通常所理解的含义。本文参考本领域技术人员已知的各种方法和材料。陈述药理学一般原理的标准参考著作包括Goodman和Gilman的The Pharmacological Basis of Therapeutics,第10版,McGraw HillCompanies Inc.,纽约(2001)。可以用本领域技术人员已知的任何适宜材料和/或方法来实施本发明。然而，对优选的材料和方法进行了描述。除非另外指明，否则在下面说明书和实施例中涉及的材料、试剂等可得自商业来源。
本文所述的定义可串接形成化学相关的组合，如“杂烷基芳基”、“卤代烷基杂芳基”、“芳基烷基杂环基”、“烷基羰基”、“烷氧基烷基”等。当用术语“烷基”在另一个术语后作为后缀时，如在“苯基烷基”或“羟基烷基”中，其意指被一至两个选自其它特别命名的基团的取代基取代的如上面所定义的烷基。因此，例如，“苯基烷基”是指具有一至两个苯基取代基的烷基，并且因此包括苄基、苯基乙基和联苯基。“烷基氨基烷基”是具有一至两个烷基氨基取代基的烷基。“羟基烷基”包括2-羟基乙基、2-羟基丙基、1-(羟基甲基)-2-甲基丙基、2-羟基丁基、2,3-二羟基丁基、2-(羟基甲基)、3-羟基丙基等。因此，如本文所用的那样，用术语“羟基烷基”来定义下面所定义的杂烷基的一个子集。术语-(芳)烷基是指未被取代的烷基或芳烷基。术语(杂)芳基是指芳基或杂芳基。
本文所用的术语“螺环烷基”意指螺环的环烷基，例如，螺环[3.3]庚烷。本文所用的术语螺杂环烷基意指螺环的杂环烷基，例如，2,6-二氮杂螺环[3.3]庚烷。
本文所用的术语“酰基”表示式-C(＝O)R的基团，其中R是氢或如本文所定义的低级烷基。本文所用的术语“烷基羰基”表示其中R是如本文所定义的烷基的式C(＝O)R的基团。术语C1-6酰基是指包含6个碳原子的基团-C(＝O)R。本文所用的术语“芳基羰基”意指其中R是芳基的式C(＝O)R的基团；本文所用的术语“苯甲酰基”是其中R是苯基的“芳基羰基”。
本文所用的术语“酯”表示其中R是如本文所定义的低级烷基的式-C(＝O)OR的基团。
本文所用的术语“烷基”表示包含1至10个碳原子的直链或支链的饱和单价烃残基。术语“低级烷基”表示包含1至6个碳原子的直链或支链烃残基。本文所用的“C1-10烷基”是指由1至10个碳组成的烷基。烷基的实例非限制性地包括低级烷基，包括甲基、乙基、丙基、异-丙基、正-丁基、异-丁基、叔-丁基或戊基、异戊基、新戊基、己基、庚基和辛基。
当术语“烷基”在另一个术语后用作后缀时，如在“苯基烷基”或“羟基烷基”中，其意指被一至两个选自其它特定命名的基团的取代基取代的如上面所定义的烷基。因此，例如，“苯基烷基”表示基团R'R"-，其中R'是苯基，R"是如本文所定义的亚烷基，应当清楚的是，该苯基烷基部分的连接点将位于亚烷基上。芳基烷基的实例非限制性地包括苄基、苯基乙基、3-苯基丙基。术语“芳基烷基”或“芳烷基”具有类似解释，只是R'是芳基。术语“(杂)芳基烷基”或“(杂)芳烷基”具有类似解释，只是R'任选地是芳基或杂芳基。
术语“卤代烷基”或“卤代-低级烷基”或“低级卤代烷基”是指其中一个或多个碳原子被一个或多个卤素原子取代的包含1至6个碳原子的直链或支链烃残基。
除非另外表明，否则本文所用的术语“亚烷基”表示1至10个碳原子的二价饱和直链烃基(例如,(CH2)n)或2至10个碳原子的二价饱和支链烃基(例如,-CHMe-或-CH2CH(i-Pr)CH2-)。除亚甲基的情况外，亚烷基的开放价键不连接在相同原子上。亚烷基的实例非限制性地包括亚甲基、亚乙基、亚丙基、2-甲基-亚丙基、1,1-二甲基-亚乙基、亚丁基、2-乙基亚丁基。
本文所用术语“烷氧基”意指-O-烷基，其中烷基如上面所定义，如甲氧基、乙氧基、正-丙氧基、异-丙氧基、正-丁氧基、异-丁氧基、叔-丁氧基、戊氧基、己氧基，包括其异构体。本文所定义的“低级烷氧基”表示具有如前面所定义的“低级烷基”的烷氧基。本文所用的“C1-10烷氧基”是指其中烷基是C1-10的-O-烷基。
术语“PCy3”是指被三个环状部分三取代的膦。
术语“卤代烷氧基”或“卤代-低级烷氧基”或“低级卤代烷氧基”是指其中一个或多个碳原子被一个或多个卤素原子取代的低级烷氧基。
本文所用的术语“羟基烷基”表示其中不同碳原子上的一至三个氢原子被羟基代替的如本文所定义的烷基。
本文所用的术语“烷基磺酰基”和“芳基磺酰基”是指式-S(＝O)2R的基团，其中R分别是烷基或芳基且烷基和芳基如本文所定义。本文所用的术语“杂烷基磺酰基”表示式-S(＝O)2R的基团，其中R是如本文所定义的“杂烷基”。
本文所用的术语“烷基磺酰基氨基”和“芳基磺酰基氨基”是指式-NR'S(＝O)2R的基团，其中R分别是烷基或芳基，R'是氢或C1-3烷基，且烷基和芳基如本文所定义。
本文所用的术语“环烷基”是指包含3至8个碳原子的饱和碳环，即环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基或环辛基。本文所用的“C3-7环烷基”是指在碳环中由3至7个碳组成的环烷基。
本文所用的术语“羧基-烷基”是指其中一个氢原子被羧基取代的烷基部分，应当清楚的是，该杂烷基是通过碳原子连接的。术语“羧基”是指-CO2H部分。
本文所用的术语“杂芳基”或“杂芳族的”意指具有至少一个芳族或部分不饱和环的5至12个环原子的单环或二环基团，每个环包含四至八个原子，混有一个或多个N、O或S杂原子，其余的环原子是碳，应当清楚的是，该杂芳基的连接点将位于芳族或部分不饱和环上。如本领域技术人员众所周知的那样，杂芳基环比其全碳副本的芳族特性低。因此，对于本发明的目的而言，杂芳基仅需要具有一定程度的芳族特性。杂芳基部分的实例包括具有5至6个环原子和1至3个杂原子的单环芳族杂环，非限制性地包括吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、嗪基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、唑基、4,5-二氢-唑基、5,6-二氢-4H-[1,3]唑基、异唑、噻唑、异噻唑、三唑啉、噻二唑和oxadiaxoline，其可任选地被一个或多个，优选一个或两个选自羟基、氰基、烷基、烷氧基、硫代、低级卤代烷氧基、烷硫基、卤素、低级卤代烷基、烷基亚磺酰基、烷基磺酰基、卤素、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、氨基烷基、烷基氨基烷基和二烷基氨基烷基、硝基、烷氧基羰基和氨基甲酰基、烷基氨基甲酰基、二烷基氨基甲酰基、芳基氨基甲酰基、烷基羰基氨基和芳基羰基氨基的取代基取代。二环部分的实例非限制性地包括喹啉基、异喹啉基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、苯并唑基、苯并异唑基、苯并噻唑基、萘啶基、5,6,7,8-四氢-[1,6]萘啶基和苯并异噻唑。二环部分可任选地在任何一个环上被取代，但是，其连接点位于包含杂原子的环上。
除非特别说明，本文所用的术语“杂环基”、“杂环烷基”或“杂环”表示由一个或多个环，优选一至两个环组成的单价饱和环状基团(包括螺环环系)以及其离子形式，每个环包含三至八个原子，混有一个或多个环杂原子(选自N、O或S(O)0-2)，并且可任选地被一个或多个，优选一个或两个选自羟基、氧代、氰基、低级烷基、低级烷氧基、低级卤代烷氧基、烷硫基、卤素、低级卤代烷基、羟基烷基、硝基、烷氧基羰基、氨基、烷基氨基、烷基磺酰基、芳基磺酰基、烷基氨基磺酰基、芳基氨基磺酰基、烷基磺酰基氨基、芳基磺酰基氨基、烷基氨基羰基、芳基氨基羰基、烷基羰基氨基、芳基羰基氨基的取代基独立地取代。杂环基团的实例非限制性地包括吗啉基、哌嗪基、哌啶基、氮杂环丁烷基、吡咯烷基、六氢氮杂基、氧杂环丁烷基、四氢呋喃基、四氢噻吩基、唑烷基、噻唑烷基、异唑烷基、四氢吡喃基、硫代吗啉基、奎宁环基和咪唑啉基、以及其离子形式。实例还可以是双环，如，例如，3,8-二氮杂-双环[3.2.1]辛烷、2,5-二氮杂-双环[2.2.2]辛烷或八氢-吡嗪并[2,1-c][1,4]嗪。
Btk抑制剂
本申请提供了式I的化合物或其可药用的盐,
其中:
是单键或双键；
X是CH、CH2或N；
R是H、-R1、-R1-R2-R3、-R1-R3或-R2-R3；
R1是芳基、杂芳基、二环杂芳基、环烷基或杂环烷基，其各自任选地被一个或多个低级烷基、羟基、羟基低级烷基、低级烷氧基、卤素、硝基、氨基、酰氨基、氰基、氧代或低级卤代烷基取代；
R2是-C(＝O)、-C(＝O)O、-C(＝O)NR2’、-NHC(＝O)O、-C(R2’)2、-O、-S、-C(＝NH)NR2’或-S(＝O)2；
各R2’独立地是H或低级烷基；
R3是H或R4；
R4是低级烷基、低级卤代烷基、低级烷氧基、氨基、低级烷基氨基、环烷基氨基、低级二烷基氨基、芳基、芳基烷基、烷基芳基、杂芳基、烷基杂芳基、杂芳基烷基、环烷基、烷基环烷基、环烷基烷基、杂环烷基、烷基杂环烷基、杂环烷基烷基、二环环烷基、二环杂环烷基、螺环烷基、螺杂环烷基或二环螺杂环烷基，其各自任选地被一个或多个低级烷基、卤素、低级烷基氨基、低级二烷基氨基、羟基、羟基低级烷基、低级烷氧基、低级烷酰基、卤素、硝基、氨基、酰氨基、酰基、氰基、氧代、磺酰基、低级烷基磺酰基、胍基、羟基氨基、羧基、氨基甲酰基、氨基甲酸酯、卤代低级烷氧基、杂环烷基或卤代低级烷基取代，其中两个低级烷基可以一起形成一种环；
Y4是Y4a、Y4b、Y4c或Y4d；
Y4a是H或卤素；
Y4b是低级烷基，其任选地被一个或多个选自低级卤代烷基、卤素、羟基、氨基、氰基和低级烷氧基的取代基取代；
Y4c是低级环烷基，其任选地被一个或多个选自低级烷基、低级卤代烷基、卤素、羟基、氨基、氰基和低级烷氧基的取代基取代；且
Y4d是氨基，其任选地被一个或多个低级烷基、烷氧基低级烷基或羟基低级烷基取代。
还应当清楚的是，涉及如本文所公开的特定残基R、R1、R2、R3、R4、X、R2`和Y4的每一个实施方案可以与涉及如本文所公开的其它残基R、R1、R2、R3、R4、X、R2`和Y4的任何其它实施方案组合。
本申请提供了式I的化合物，其中
是双键；且
X是N。
本申请提供了式I的化合物，其中
是单键；且
X是CH2。
本申请提供了式I的化合物，其中
是双键；
X是N；
R是-R1-R2-R3；
R1是吡啶基；
R2是-S(＝O)2,
R3是R4；且
R4是低级烷基。
本申请提供了式I的化合物，其中
是双键；
X是N；
R是-R1-R2-R3；
R1是吡啶基；
R2是-C(CH3)2；
R3是R4；且
R4是任选地被一个或多个低级烷基取代的低级烷基氨基、低级二烷基氨基或杂环烷基。
本申请提供了式I的化合物，其中
是双键；
X是N；
R是-R1-R2-R3；
R1是苯基或吡啶基；
R2是-C(＝O)；
R3是R4；且
R4是任选地被一个或多个低级烷基取代的吗啉或哌嗪。本申请提供了式I的化合物，其中
是双键；
X是N；且
Y4是叔-丁基。
本申请提供了式I的化合物，其中
是双键；
X是CH；且
Y4是
其中，Y5和Y6独立地是H、低级烷基或低级卤代烷基。本申请提供了式I的化合物，其中
是双键；
X是N；且
Y4是
其中，Y5是H、卤素、低级烷基或低级卤代烷基。
本申请提供了式I的化合物，其中
是双键；
X是N；且
Y4是
其中，Y5和Y6独立地是H或低级烷基。
本申请提供了式I的化合物，其中
是双键；
X是N；
Y4是叔-丁基；
R是-R1-R3；
R1是吡啶基或吡唑并吡嗪；
R3是R4；且
R4是任选地被取代的低级烷基、杂环烷基或烷基杂环烷基。
本申请提供了式I的化合物，其中
是双键；
X是N；
Y4是叔-丁基；
R是-R1-R2-R3；
R1是吡啶基；
R2是-C(CH3)2；
R3是R4；且
R4是任选地被一个或多个低级烷基取代的低级烷基氨基、低级二烷基氨基或杂环烷基。
本申请提供了式I的化合物，其中
是双键；
X是N；
Y4是叔-丁基；
R是-R1-R2-R3；
R1是吡啶基；
R2是-C(＝O)；
R3是R4；且
R4是任选地被取代的杂环烷基或二环螺杂环烷基。
本申请提供了式I的化合物，其中
是双键；
X是N；
Y4是叔-丁基；
R是-R1-R2-R3；
R1是吡啶基；
R2是-C(＝O)；
R3是R4；且
R4是任选地被取代的吗啉或哌嗪。
本申请提供了选自下列的式I化合物:
2-(3-{5-[5-(2-氮杂环丁烷-1-基-1,1-二甲基-乙氧基)-吡啶-2-基氨基]-1-甲基-6-氧代-1,6-二氢-哒嗪-3-基}-2-羟基甲基-苯基)-6-叔-丁基-2H-酞嗪-1-酮；
6-叔-丁基-2-{2-羟基甲基-3-[1-甲基-5-(1'-甲基-1',2',3',4',5',6'-六氢-[3,4']联吡啶-6-基氨基)-6-氧代-1,6-二氢-哒嗪-3-基]-苯基}-2H-酞嗪-1-酮；
2-{3-[5-(5-氮杂环丁烷-1-基甲基-1-甲基-1H-吡唑-3-基氨基)-1-甲基-6-氧代-1,6-二氢-哒嗪-3-基]-2-羟基甲基-苯基}-6-叔-丁基-2H-酞嗪-1-酮；
6-叔-丁基-2-(2-羟基甲基-3-{1-甲基-5-[5-((S)-1-甲基-吡咯烷-2-基)-吡啶-2-基氨基]-6-氧代-1,6-二氢-哒嗪-3-基}-苯基)-2H-酞嗪-1-酮；
6-叔-丁基-2-(2-羟基甲基-3-{1-甲基-5-[5-((S)-1-甲基-吡咯烷-3-基)-吡啶-2-基氨基]-6-氧代-1,6-二氢-哒嗪-3-基}-苯基)-2H-酞嗪-1-酮；
6-叔-丁基-2-(2-羟基甲基-3-{1-甲基-5-[5-((R)-1-甲基-吡咯烷-3-基)-吡啶-2-基氨基]-6-氧代-1,6-二氢-哒嗪-3-基}-苯基)-2H-酞嗪-1-酮；
2-(2-{2-羟基甲基-3-[1-甲基-5-(1'-甲基-1',2',3',4',5',6'-六氢-[3,4']联吡啶-6-基氨基)-6-氧代-1,6-二氢-哒嗪-3-基]-苯基}-1-氧代-1,2-二氢-酞嗪-6-基)-2-甲基-丙腈；
6-叔-丁基-2-{2-羟基甲基-3-[1-甲基-5-(5-甲基-4,5,6,7-四氢-吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-基氨基)-6-氧代-1,6-二氢-哒嗪-3-基]-苯基}-2H-酞嗪-1-酮；
6-叔-丁基-2-{3-[5-(1'-乙基-1',2',3',4',5',6'-六氢-[3,4']联吡啶-6-基氨基)-1-甲基-6-氧代-1,6-二氢-哒嗪-3-基]-2-羟基甲基-苯基}-2H-酞嗪-1-酮；
6-叔-丁基-2-(2-羟基甲基-3-{1-甲基-5-[5-(吗啉-4-羰基)-吡啶-2-基氨基]-6-氧代-1,6-二氢-哒嗪-3-基}-苯基)-2H-酞嗪-1-酮；
2-[2-(3-{5-[5-(2-氮杂环丁烷-1-基-1,1-二甲基-乙氧基)-吡啶-2-基氨基]-1-甲基-6-氧代-1,6-二氢-哒嗪-3-基}-2-羟基甲基-苯基)-1-氧代-1,2-二氢-酞嗪-6-基]-2-甲基-丙腈；
6-叔-丁基-2-[2-羟基甲基-3-(5-{5-[2-(3-羟基-丙基氨基)-1,1-二甲基-乙氧基]-吡啶-2-基氨基}-1-甲基-6-氧代-1,6-二氢-哒嗪-3-基)-苯基]-2H-酞嗪-1-酮；
6-叔-丁基-2-{2-羟基甲基-3-[1-甲基-5-(1'-氧杂环丁烷-3-基-1',2',3',4',5',6'-六氢-[3,4']联吡啶-6-基氨基)-6-氧代-1,6-二氢-哒嗪-3-基]-苯基}-2H-酞嗪-1-酮；
6-叔-丁基-2-[3-(5-{5-[2-(3,3-二氟-氮杂环丁烷-1-基)-1,1-二甲基-乙氧基]-吡啶-2-基氨基}-1-甲基-6-氧代-1,6-二氢-哒嗪-3-基)-2-羟基甲基-苯基]-2H-酞嗪-1-酮；和
2-(2-{2-羟基甲基-3-[1-甲基-5-(1'-甲基-1',2',3',4',5',6'-六氢-[3,4']联吡啶-6-基氨基)-6-氧代-1,6-二氢-哒嗪-3-基]-苯基}-1-氧代-1,2,3,4-四氢-异喹啉-6-基)-2-甲基-丙腈。
本申请提供了一种治疗炎性或自身免疫性病症的方法，其包括给需要其的患者施用治疗有效量的式I的化合物。
本申请提供了一种治疗类风湿性关节炎的方法，其包括给需要其的患者施用治疗有效量的式I的化合物。
本申请提供了一种治疗哮喘的方法，其包括给需要其的患者施用治疗有效量的式I的化合物。
本申请提供了一种包含式I化合物的药物组合物。
本申请提供了一种包含式I化合物和至少一种可药用的载体、赋形剂或稀释剂的药物组合物。
本申请提供了式I的化合物在制备治疗炎症的药物中的用途。
本申请提供了式I的化合物在制备治疗自身免疫性病症的药物中的用途。
本申请提供了式I的化合物在制备治疗类风湿性关节炎的药物中的用途。
本申请提供了式I的化合物在制备治疗哮喘的药物中的用途。
本申请提供了如上所述的化合物用于治疗炎性或自身免疫性病症的用途。
本申请提供了如上所述的化合物用于治疗类风湿性关节炎的用途。
本申请提供了如上所述的化合物用于治疗哮喘的用途。
本申请提供了用于治疗炎性或自身免疫性病症的如上所述的化合物。
本申请提供了用于治疗类风湿性关节炎的如上所述的化合物。
本申请提供了用于治疗哮喘的如上所述的化合物。
本申请提供了如本文所述的化合物、方法或组合物。
本申请提供了一种治疗炎性或自身免疫性病症的方法，其包括给需要其的患者施用治疗有效量的式I’的Btk抑制剂。
本申请提供了一种治疗关节炎的方法，其包括给需要其的患者施用治疗有效量的式I’的Btk抑制剂。
本申请提供了一种治疗哮喘的方法，其包括给需要其的患者施用治疗有效量的式I’的Btk抑制剂。
本申请提供了一种抑制B-细胞增殖的方法，其包括给需要其的患者施用治疗有效量的式I’的Btk抑制剂。
本申请提供了一种抑制Btk活性的方法，其包括施用任何一种式I’的Btk抑制剂化合物，其中所述Btk抑制剂化合物在Btk活性的体外生物化学试验中表现出50微摩尔或更低的IC50。
在上面方法的一个变型中，该Btk抑制剂化合物在Btk活性体外生物化学试验中表现出100纳摩尔或更低的IC50。
在上面方法的另一个变型中，该化合物在Btk活性体外生物化学试验中表现出10纳摩尔或更低的IC50。
本申请提供了一种治疗炎性病症的方法，其包括给需要其的患者共同施用与式I的Btk抑制剂化合物联合的治疗有效量的抗炎化合物。
本申请提供了一种治疗关节炎的方法，其包括给需要其的患者共同施用与式I的Btk抑制剂化合物联合的治疗有效量的抗炎化合物。
本申请提供了一种治疗淋巴瘤或BCR-ABL1+白血病细胞的方法，其包括给需要其的患者施用治疗有效量的式I的Btk抑制剂化合物。
本申请提供了一种药物组合物，其包含式’的Btk抑制剂化合物和至少一种可药用的载体、赋形剂或稀释剂。
本申请提供了式I的化合物在制备治疗炎症的药物中的用途。
本申请提供了式I’的化合物在制备治疗自身免疫性病症的药物中的用途。
本申请提供了如本文所公开的化合物、方法或组合物。
化合物和制备
在下表中提供了本发明所包括的在本发明范围内的典型化合物的实例。提供下面的这些实施例以及制备例来使得本领域技术人员可更清楚地理解和实施本发明。它们仅仅是本发明的说明和代表，不应被看成是对本发明范围的限制。
一般而言，本申请中所用的命名法是基于AUTONOMTM v.4.0,一种用于产生IUPAC系统命名法的Beilstein Institute计算机系统。如果在所示结构和对该结构给出的名称之间有矛盾，则所示结构所占权重更高。此外，如果没有用例如粗体或虚线表明一种结构或结构的一部分的立体化学，则该结构或结构部分被解释为包括其所有立体异构体。
表I描述了通式I的哒嗪酮化合物的一些实例:
表I
一般合成流程
本申请提供了一种制备其中Y1是硼酸或频哪醇硼酸酯的式II化合物的方法，其包括如下步骤:
将式I的化合物在存在二(频哪醇合)二硼、钯催化剂、碱和膦的情况下加热至约40℃至150℃。
本申请提供了上面的方法，其中所述膦是PCy3、烷基单-膦化合物、芳基单-膦化合物、烷基二膦化合物或芳基二-膦化合物。
本申请提供了上面的方法，其中所述碱是无机碱，包括碳酸钾、碳酸铯、磷酸钾和乙酸钾，或胺碱，包括二环己基胺和三乙胺。
本申请提供了上面的方法，其中所述钯催化剂是乙酸钯(II)或二(二亚苄基丙酮)钯(0)、三(二亚苄基丙酮)二钯(0)等。
本申请提供了一种制备式IV化合物的方法，其包括如下步骤:
a)将其中Y1是硼酸或频哪醇硼酸酯或二者的混合物的式II的化合物在存在式III的化合物、钯催化剂、碱和膦的情况下加热至约40℃至150℃；和b)用碱如氢氧化钠或氢氧化钾或碳酸钾或碳酸铯在溶剂如甲醇中在约室温至约40℃的温度下处理步骤a)的产物。
本申请提供了上面的方法，其中所述膦是PCy3、烷基单-膦化合物、芳基单-膦化合物、烷基二膦化合物或芳基二-膦化合物。
本申请提供了上面的方法，其中所述碱是无机碱，包括碳酸钾、碳酸铯、磷酸钾和乙酸钾，或胺碱，包括二环己基胺和三乙胺。
本申请提供了上面的方法，其中所述钯催化剂是乙酸钯(II)或二(二亚苄基丙酮)钯(0)、三(二亚苄基丙酮)二钯(0)等。
本申请提供了一种制备式IV化合物的方法，其包括如下步骤:
a)在存在二(频哪醇合)二硼、钯催化剂、碱和膦的情况下将式I的化合物加热至约40℃至150℃；
b)在存在式VII的化合物、钯催化剂、碱和膦的情况下，将步骤a)的产物在不进行分离的情况下与式III的化合物一起加热至约40℃至150℃；和c)用碱如氢氧化钠或氢氧化钾或碳酸钾或碳酸铯在溶剂如甲醇中在约室温至约40℃的温度下处理步骤b)的产物。
本申请提供了一种制备式IV化合物的方法，其包括如下步骤:
a)将其中Y1是硼酸或频哪醇硼酸酯或二者的混合物的式II的化合物在存在式V的化合物、钯催化剂、碱和膦的情况下加热至约40℃至150℃；和b)用还原剂如硼氢化钠等在溶剂如甲醇或甲醇和水的混合物中在约室温的温度下处理步骤a)的产物。
本申请提供了上面的方法，其中所述膦是PCy3、烷基单-膦化合物、芳基单-膦化合物、烷基二膦化合物或芳基二-膦化合物。
本申请提供了上面的方法，其中所述碱是无机碱，包括碳酸钾、碳酸铯、磷酸钾和乙酸钾，或胺碱，包括二环己基胺和三乙胺。
本申请提供了上面的方法，其中所述钯催化剂是乙酸钯(II)或二(二亚苄基丙酮)钯(0)、三(二亚苄基丙酮)二钯(0)等。
本申请提供了一种制备式VII的化合物的方法，其包括如下步骤:
a)在存在式VI的化合物、钯催化剂、碱和膦的情况下，将其中Y1是硼酸或频哪醇硼酸酯或二者的混合物的式II的化合物加热至约40℃至150℃；和b)用还原剂如硼氢化钠等在溶剂如甲醇或甲醇和水的混合物中在大约室温的温度下处理步骤a)的产物。
本申请提供了上面的方法，其中所述膦是PCy3、烷基单-膦化合物、芳基单-膦化合物、烷基二膦化合物或芳基二-膦化合物。
本申请提供了上面的方法，其中所述碱是无机碱，包括碳酸钾、碳酸铯、磷酸钾和乙酸钾，或胺碱，包括二环己基胺和三乙胺。
本申请提供了上面的方法，其中所述钯催化剂是乙酸钯(II)或二(二亚苄基丙酮)钯(0)、三(二亚苄基丙酮)二钯(0)等。
本申请提供了一种制备其中Y1是硼酸或频哪醇硼酸酯的式VIII化合物的方法，其包括如下步骤:
将式V的化合物在存在二(频哪醇合)二硼、钯催化剂、碱和膦的情况下进行加热。
本申请提供了上面的方法，其中所述膦是PCy3、烷基单-膦化合物、芳基单-膦化合物、烷基二膦化合物或芳基二-膦化合物。
本申请提供了上面的方法，其中所述碱是无机碱，包括碳酸钾、碳酸铯、磷酸钾和乙酸钾，或胺碱，包括二环己基胺和三乙胺。
本申请提供了上面的方法，其中所述钯催化剂是乙酸钯(II)或二(二亚苄基丙酮)钯(0)、三(二亚苄基丙酮)二钯(0)等。
本申请提供了一种制备式IV化合物的方法，其包括如下步骤:
a)将其中Y1是硼酸或频哪醇硼酸酯或二者的混合物的式VIII的化合物在存在式I的化合物、钯催化剂、碱和膦的情况下加热至约40℃至150℃；和b)用还原剂如硼氢化钠等在溶剂如甲醇或甲醇和水的混合物中在大约室温的温度下处理步骤a)的产物。
本申请提供了上面的方法，其中所述膦是PCy3、烷基单-膦化合物、芳基单-膦化合物、烷基二膦化合物或芳基二-膦化合物。
本申请提供了上面的方法，其中所述碱是无机碱，包括碳酸钾、碳酸铯、磷酸钾和乙酸钾，或胺碱，包括二环己基胺和三乙胺。
本申请提供了上面的方法，其中所述钯催化剂是乙酸钯(II)或二(二亚苄基丙酮)钯(0)、三(二亚苄基丙酮)二钯(0)等。
药物组合物和施用
本发明的化合物可以被配制到多种口服施用剂型和载体中。口服施用可以为片剂、包衣片、糖锭剂、硬和软明胶胶囊、溶液、乳剂、糖浆或混悬液的形式。当通过其它施用途径进行施用时，本发明的化合物是有效的，所述其它施用途径包括连续(静脉内滴注)局部胃肠外、肌内、静脉内、皮下、经皮(其可包括渗透增强剂)、颊、鼻、吸入和栓剂施用。优选的施用方式通常为使用方便的日给药方案的口服施用，可根据痛苦程度以及患者对活性成分的响应来调整该日给药方案。
可以将本发明的一种或多种化合物以及其可药用的盐与一种或多种常规的赋形剂、载体或稀释剂制成药物组合物和单位剂量的形式。该药物组合物和单位剂型可以包含常规比例的常规组分，包含或不包含另外的活性化合物或成分，并且该单位剂型可包含与所用的预期日剂量范围相称的任何适宜有效量的活性成分。该药物组合物可以以固体例如片剂或填充胶囊、半固体、粉剂、缓释制剂、或液体如溶液、混悬液、乳剂、酏剂、或用于口服使用的填充胶囊的形式进行应用；或者可以以用于直肠或阴道施用的栓剂形式进行应用；或者可以以用于胃肠外应用的无菌可注射溶液的形式进行应用。典型的制剂将包含约5％至约95％的一种或多种活性化合物(w/w)。术语“制剂”或“剂型”意指包括活性化合物的固体和液体制剂，且本领域技术人员将意识到，根据靶器官或组织和所需剂量以及药动学参数，活性成分可存在于不同的制剂中。
本文所用的术语“赋形剂”是指用于制备药物组合物的化合物，其通常是安全、无毒的并且在生物学或其它方面不会不可取，并且包括可兽用以及可人类药用的赋形剂。本发明的化合物可单独施用，但是，通常与一种或多种根据所需施用途径和标准药学实践选择的适宜的药用赋形剂、稀释剂或载体混合到一起进行施用。
“可药用的”意指可用于制备通常是安全、无毒、并且在生物学或其它方面不会不可取的药物组合物，并且包括对于兽用以及人类药用而言可接受的物质。
活性成分的“可药用盐”形式可以首先赋予活性成分非盐形式时不存在的所需的药动学性质，并且就活性成分在体内的治疗活性而言，甚至对活性成分的药效学产生积极影响。措辞化合物的“可药用的盐”意指药学可接受的且具有所需母体化合物的药理学活性的盐。该类盐包括:(1)与无机酸或有机酸形成的酸加成盐，所述无机酸如盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等；所述有机酸如乙酸、丙酸、己酸、环戊烷丙酸、乙醇酸、丙酮酸、乳酸、丙二酸、琥珀酸、苹果酸、马来酸、富马酸、酒石酸、枸橼酸、苯甲酸、3-(4-羟基苯甲酰基)苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、甲磺酸、乙磺酸、1,2-乙烷-二磺酸、2-羟基乙烷磺酸、苯磺酸、4-氯苯磺酸、2-萘磺酸、4-甲苯磺酸、樟脑磺酸、4-甲基双环[2.2.2]-辛-2-烯-1-甲酸、葡庚糖酸、3-苯基丙酸、三甲基乙酸、叔丁基乙酸、月桂基硫酸、葡萄糖酸、谷氨酸、羟基萘甲酸、水杨酸、硬脂酸、粘康酸等；或(2)当母体化合物中存在的酸性质子被金属离子，例如碱金属离子、碱土金属离子或铝离子代替时形成的盐；或者母体化合物中存在的酸性质子与有机碱如乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、氨基三丁醇、N-甲基葡糖胺等配合形成的盐。
固体形式的制剂包括粉剂、片剂、丸剂、胶囊、扁囊剂、栓剂和可分散颗粒。固体载体可以是一种或多种也可作为稀释剂、矫味剂、稳定剂、润滑剂、助悬剂、粘合剂、防腐剂、片剂崩解剂或包封材料的物质。在粉剂中，载体通常是分割的很细的固体，其是一种与分割的很细的活性组分的混合物。在片剂中，通常将活性组分与具有所需结合能力的载体以适宜比例混合并将其压成所需形状和大小。适宜的载体非限制性地包括碳酸镁、硬脂酸镁、滑石粉、糖、乳糖、果胶、糊精、淀粉、明胶、西黄蓍胶、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠、低熔点蜡、可可脂等。除活性组分外，固体形式的制剂还可包含着色剂、矫味剂、稳定剂、缓冲剂、人工和天然甜味剂、分散剂、增稠剂、增溶剂等。
液体制剂也适用于口服施用，包括乳液、糖浆、酏剂、水溶液、水性混悬液。这些制剂包括用于在临用前转化成液体形式的制剂的固体形式的制剂。乳液可以在溶液、例如丙二醇水溶液中制备，或者可以包含乳化剂如卵磷脂、脱水山梨醇单油酸酯或阿拉伯胶。水溶液可以通过将活性组分溶解于水中并加入适宜的着色剂、矫味剂、稳定剂和增稠剂来进行制备。水性混悬液可以通过将分割的很细的组分分散在含有粘性物质的水中来进行制备，所述粘性物质如天然或合成的树胶、树脂、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠和其它众所周知的助悬剂。
本发明化合物可以配制成用于胃肠外给药(例如通过注射，如推注或连续输注)的制剂，并可以以单位剂量形式存在于安瓿、预填装的注射器、小容量输注容器或加有防腐剂的多剂量容器中。所述组合物可以采取诸如混悬液、溶液、或位于油性或水性基质中的乳剂，例如位于含水聚乙二醇中的溶液的形式。油性或非水性载体、稀释剂、溶剂或基质的实例包括丙二醇、聚乙二醇、植物油(例如橄榄油)和可注射的有机酯(例如油酸乙酯)，并且其可以包含制剂物质，如防腐剂、润湿剂、乳化剂或助悬剂、稳定剂和/或分散剂。或者，活性成分可以为通过无菌分离无菌固体或者通过冷冻干燥溶液得到的粉末形式，其用于在使用前用适当的溶媒例如无菌无热原的水配制。
本发明化合物可以配制成用于表皮局部给药的制剂，如软膏、霜剂或洗剂，或透皮贴剂。例如，可以用含水或油性基质并加入合适的增稠剂和/或胶凝剂来配制软膏和霜剂。洗剂可以用含水或油性基质来配制，并且通常还含有一种或多种乳化剂、稳定剂、分散剂、助悬剂、增稠剂或着色剂。适于口腔局部给药的制剂包括：在矫味的基质中含有活性剂的锭剂，所述基质通常为蔗糖和阿拉伯胶或西黄蓍胶；在惰性基质如明胶和甘油或蔗糖和阿拉伯胶中含有活性成分的软锭剂；以及在合适的液体载体中含有活性成分的漱口剂。
本发明化合物可以配制成栓剂给药。先将低熔点蜡(例如脂肪酸甘油酯的混合物或可可脂)熔化，然后例如通过搅拌将活性成分分散均匀。然后将熔化的均匀混合物倒入适当大小的模具中，使其冷却并固化。
本发明化合物可以配制成用于阴道给药的制剂。适宜制剂是除了活性成分外还含有本领域已知载体的子宫托、卫生栓、乳膏剂、凝胶剂、糊剂、泡沫剂或喷雾剂。
本发明化合物可以配制成鼻内给药制剂。通过常规方式例如用滴管、吸管或喷雾，将溶液或混悬液直接应用于鼻腔。该制剂可以以单剂量或多剂量形式提供。在滴管或吸管的多剂量的情况中，通过给予患者适当的、预定体积的溶液或混悬液来完成给药。在喷雾的情况下，通过例如计量喷雾泵的方式来完成给药。
本发明化合物可以配制成气雾剂给药的形式，特别是用于呼吸道，并且包括鼻内给药的形式。该化合物通常具有很小的粒度，例如五(5)微米或更小。可以用现有技术中已知的方式例如微粉化来获得该类粒度。活性成分在具有适当的抛射剂(如含氯氟烃(CFC)，例如二氯二氟甲烷、三氯氟甲烷或二氯四氟乙烷，或二氧化碳或其它合适的气体)的加压包装中被提供。气雾剂也可方便地含有表面活性剂如卵磷脂。药物的剂量可通过计量阀控制。或者，活性成分可以是干燥粉末的形式，例如化合物在适当的粉末基质(如乳糖、淀粉、淀粉衍生物如羟丙基甲基纤维素和聚乙烯吡咯烷(PVP))中的粉末混合物。粉末载体可在鼻腔内形成凝胶。粉末组合物可以为单位剂量形式，如明胶的胶囊或药筒或铝塑包装，可以用吸入器由所述包装施用该粉末。
当需要时，可以用适于活性成分的持续或受控释放给药的肠溶包衣制备制剂。例如，本发明的化合物可以被配制到经皮或皮下药物传递装置中。当化合物的缓释是必要的且患者对治疗方案的依从性至关重要时，这些传递系统是有利的。在透皮传递系统中的化合物通常附着在皮肤粘附性固体载体上。还可以将感兴趣的化合物与渗透促进剂(例如，氮酮(1-十二烷基氮杂-环庚-2-酮))组合。通过手术或注射将缓释传递系统植入皮下层中。皮下埋植剂将化合物包埋在脂溶性膜(例如硅橡胶)或生物可降解聚合物(例如聚乳酸)中。
在Remington:The Science and Practice of Pharmacy 1995,E.W.Martin编辑,Mack Publishing Company,第19版,Easton,Pennsylvania中描述了适宜制剂以及药用载体、稀释剂和赋形剂。熟练的制剂学家可在说明书教导下对该制剂进行修改从而在不会使本发明组合物不稳定或损害其治疗活性的情况下提供大量用于特定给药途径的制剂。
例如，可通过本领域技术人员公知的微小修饰(成盐、酯化等)来对本发明化合物进行修饰以使得它们在水或其它溶媒中的溶解性更好。本领域技术人员还公知的是，可改变特定化合物的给药途径和剂量方案以控制本发明化合物的药动学，从而将其在患者体内的有益作用最大化。
本文所用的术语“治疗有效量”意指减轻个体疾病症状所需的数量。将根据各特定病例的个体需求来对剂量进行调整。该剂量可根据许多因素在很宽的范围内进行变化，所述因素如所治疗疾病的严重程度、患者的年龄和总体健康情况、所治疗的患者使用的其它药物、给药途径和形式以及所涉及的医师的偏好和经验。对于口服给药而言，在单一疗法和/或联合治疗中，约0.01至约1000mg/kg体重/天的日剂量将是适宜的。优选的日剂量为每天约0.1至约500mg/kg体重，更优选0.1至约100mg/kg体重，并且最优选1.0至约10mg/kg体重。因此，对于对70kg体重的人进行的给药而言，剂量范围将为每天约7mg至0.7g。该日剂量可以以单剂量或分割剂量的形式进行给药，每天通常给药1至5个剂量。通常用低于化合物最佳剂量的较小剂量开始治疗。其后，以小的增量增加剂量，直至达到各患者的最佳效果。治疗本文所述疾病领域的普通技术人员将能在不进行过度实验的情况下依赖个人知识、经验和本申请公开的内容，确定对于给定疾病和患者而言本发明化合物的治疗有效量。
该药物制剂优选为单位剂型。在该类形式中，制剂被细分成包含适宜量活性组分的单位剂量。该单位剂型可以是进行了包装的制剂，该包装包含离散数量的制剂，例如进行了包装的片剂、胶囊，和位于小瓶或安瓿中的粉剂。该单位剂型也可以是胶囊、片剂、扁囊剂或锭剂本身，或者它可以是包装形式的适当数量的任何上述形式。
适应症和治疗方法
通式I的化合物抑制布鲁顿氏酪氨酸激酶(Btk)。Btk被上游激酶活化导致了磷酸酯酶-Cγ的活化，该磷酸酯酶-Cγ的活化接下来又刺激了促炎介质的释放。与具有其它侧链的类似物相比，引入了1-氧代-1H-酞嗪-2-基侧链的通式I的化合物出乎意料地表现出增强的抑制活性。位于苯基环上的羟基甲基取代与在该位置上具有其它取代的类似物相比，进一步提供了出乎意料的增强的功效。式I的化合物可用于治疗关节炎和其它抗炎和自身免疫性疾病。因此，式I的化合物可用于治疗关节炎。式I的化合物可用于抑制细胞中的Btk和用于调控B-细胞发育。本发明进一步包含含有式I化合物和可药用载体、赋形剂或稀释剂的药物组合物。
本文所述的化合物是激酶抑制剂，特别是Btk抑制剂。这些抑制剂可用于治疗哺乳动物中一种或多种对激酶抑制有响应的疾病，包括对Btk抑制和/或B-细胞增殖的抑制有响应的疾病。不希望受任何特定理论的束缚，据信本发明化合物与Btk的相互作用导致了Btk活性的抑制，并因此导致了这些化合物的药物用途。因此，本发明包括对患有对Btk活性的抑制和/或抑制B-细胞增殖有响应的疾病的哺乳动物、例如人进行治疗的方法，该方法包括给患有该类疾病的哺乳动物施用有效量的至少一种本文所提供的化学实体。可实验确定有效浓度，例如可以通过测定化合物的血液浓度来进行确定，或者可以通过计算生物利用度从理论上确定有效浓度。除Btk外，可受影响的其它激酶非限制性地包括其它酪氨酸激酶和丝氨酸/苏氨酸激酶。
激酶在控制基础细胞过程如增殖、分化和死亡(细胞凋亡)的信号传导途径中起着重要作用。已经表明在许多疾病中都涉及异常的激酶活性，所述疾病包括多种癌症、自身免疫和/或炎性疾病、以及急性炎症反应。激酶在关键细胞信号传导途径中的多层面作用为鉴定靶向于激酶和信号传导途径的新药提供了重要机遇。
一个实施方案包括对患有自身免疫和/或炎性疾病、或对Btk活性和/或B-细胞增殖的抑制有响应的急性炎症反应的患者进行治疗的方法。
可用本发明化合物和组合物影响的自身免疫和/或炎性疾病非限制性地包括:银屑病、过敏、克罗恩氏病、肠易激综合征、斯耶格伦氏病、组织移植排斥和移植器官的超急性排斥、哮喘、全身性红斑狼疮(和相关的肾小球肾炎)、皮肌炎、多发性硬化、硬皮症、血管炎(ANCA-相关的和其它血管炎)、自身免疫性溶血和血小板减少状态、古德帕斯彻氏综合症(和相关的肾小球肾炎和肺出血)、动脉粥样硬化、类风湿性关节炎、慢性特发性血小板减少性紫癜(ITP)、阿狄森氏病、帕金森氏病、阿尔茨海默氏病、糖尿病、败血性休克和重症肌无力。
本文包括治疗方法，其中将至少一种本文所提供的化学实体与抗炎剂联合施用。抗炎剂非限制性地包括NSAID、非-特异性和COX-2特异性环氧合酶抑制剂、金化合物、皮质类固醇、甲氨喋呤、肿瘤坏死因子受体(TNF)拮抗剂、免疫抑制剂和甲氨喋呤。
NSAID的实例非限制性地包括布洛芬、氟比洛芬、萘普生和萘普生钠、双氯芬酸、双氯芬酸钠和米索前列醇的组合、舒林酸、奥沙普秦、二氟尼柳、吡罗昔康、吲哚美辛、依托度酸、非诺洛芬钙、酮洛芬、萘普酮钠、柳氮磺胺吡啶、甲苯酰吡啶乙酸钠和羟氯喹。NSAID的实例还包括COX-2特异性抑制剂如塞来昔布、伐地考昔、罗美昔布和/或依托考昔。
在一些实施方案中，抗炎剂是水杨酸盐/酯。水杨酸盐/酯非限制性地包括乙酰水杨酸或阿司匹林、水杨酸钠、和胆碱和水杨酸镁。
抗炎剂还可以是皮质类固醇。例如，皮质类固醇可以是可的松、地塞米松、甲基泼尼松龙、泼尼松龙、泼尼松龙磷酸钠或泼尼松。
在另一些实施方案中，抗炎剂是金化合物如硫代苹果酸金钠或金诺芬。
本发明还包括其中抗炎剂是代谢抑制剂如二氢叶酸还原酶抑制剂如甲氨喋呤或二氢乳清酸脱氢酶抑制剂如来氟米特的实施方案。
本发明的其它实施方案涉及组合产品，其中至少一种抗炎化合物是抗-C5单克隆抗体(如依库丽单抗或培克珠单抗)、TNF拮抗剂如依那西普、或英利昔单抗(其是一种抗-TNFα单克隆抗体)。
本发明的另一些实施方案涉及另一些组合产品，其中至少一种活性剂是免疫抑制化合物如选自甲氨蝶呤、来氟米特、环孢菌素、他克莫司、硫唑嘌呤和麦考酚酸莫酯的免疫抑制化合物。
已经表明表达Btk的B-细胞和B-细胞前体参与B-细胞恶性肿瘤的病理学，所述B-细胞恶性肿瘤非限制性地包括B-细胞淋巴瘤、淋巴瘤(包括何杰金氏和非何杰金氏淋巴瘤)、毛细胞淋巴瘤、多发性骨髓瘤、慢性和急性髓细胞白血病和慢性和急性淋巴细胞性白血病。
已经表明BTK是B-系淋巴细胞中Fas/APO-1(CD-95)死亡诱导信号传导复合物(DISC)的抑制剂。白血病/淋巴瘤细胞的命运可能在于由DISC活化的半胱天冬酶的对抗促凋亡作用和涉及BTK和/或其底物的上游抗细胞凋亡调控机理之间的平衡(Vassilev等,J.Biol.Chem.1998,274,1646-1656)。
还已经发现，BTK抑制剂可用作化学敏化剂，因此，可用于与其它化疗药，特别是诱导细胞凋亡的药物联用。可用于与化学敏化性BTK抑制剂联用的其它化疗药的实例包括拓扑异构酶I抑制剂(喜树碱或拓扑替康)、拓扑异构酶II抑制剂(例如道诺霉素和依托泊苷)、烷化剂(例如环磷酰胺、美法仑和BCNU)、针对微管蛋白的活性剂(例如紫杉醇和长春花碱)和生物学活性剂(例如抗体如抗CD20抗体、IDEC 8、免疫毒素和细胞因子)。
已经表明Btk活性与一些表达由染色体9和22的部分的易位产生的bcr-abl融合基因的白血病有关。在慢性髓细胞性白血病中通常会观察到这种异常。Btk被bcr-abl激酶结构性磷酸化，该激酶启动在bcr-abl细胞中防止细胞凋亡的下游存活信号。(N.Feldhahn等，J.Exp.Med.2005201(11):1837-1852)。
治疗方法
本申请提供了一种治疗炎性和/或自身免疫性病症的方法，其包括给需要其的患者施用治疗有效量的式I的化合物。
本申请提供了一种治疗炎性病症的方法，其包括给需要其的患者施用治疗有效量的式I的化合物。
本申请提供了一种治疗类风湿性关节炎的方法，其包括给需要其的患者施用治疗有效量的式I的化合物。
本申请提供了一种治疗哮喘的方法，其包括给需要其的患者施用治疗有效量的式I。
本申请提供了一种治疗炎性和/或自身免疫性病症的方法，其包括给需要其的患者施用治疗有效量的式I的Btk抑制剂化合物。
本申请提供了一种治疗关节炎的方法，其包括给需要其的患者施用治疗有效量的式I的Btk抑制剂化合物。
本申请提供了一种治疗哮喘的方法，其包括给需要其的患者施用治疗有效量的式I的Btk抑制剂化合物。
本申请提供了一种抑制B-细胞增殖的方法，其包括给需要其的患者施用治疗有效量的式I的Btk抑制剂化合物。
本申请提供了一种抑制Btk活性的方法，其包括施用任何一种式I的Btk抑制剂化合物，其中所述Btk抑制剂化合物在Btk活性体外生物化学试验中表现出50微摩尔或更低的IC50。
在上面方法的一个变型中，该Btk抑制剂化合物在Btk活性体外生物化学试验中表现出100纳摩尔或更低的IC50。
在上面方法的另一个变型中，该化合物在Btk活性体外生物化学试验中表现出10纳摩尔或更低的IC50。
本申请提供了一种治疗炎性病症的方法，其包括给需要其的患者共同施用与式I的Btk抑制剂化合物联合的治疗有效量的抗炎化合物。
本申请提供了一种治疗关节炎的方法，其包括给需要其的患者共同施用与式I的Btk抑制剂化合物联合的治疗有效量的抗炎化合物。
本申请提供了一种通过给需要其的患者施用治疗有效量的式I的Btk抑制剂化合物来治疗淋巴瘤或BCR-ABL1+白血病细胞的方法。
实施例
缩写
常用缩写包括:乙酰基(Ac)、偶氮二异丁腈(AIBN)、大气压(Atm)、9-硼杂双环[3.3.1]壬烷(9-BBN或BBN)、2,2'-二(二苯基膦基)-1,1'-联萘(BINAP)、叔丁氧基羰基(Boc)、二叔丁基焦碳酸酯或boc酐(BOC2O)、苄基(Bn)、丁基(Bu)、化学文摘登记号(CASRN)、苄氧基羰基(CBZ或Z)、羰基二咪唑(CDI)、1,4-二氮杂双环[2.2.2]辛烷(DABCO)、二乙基氨基三氟化硫(DAST)、二亚苄基丙酮(dba)、1,5-二氮杂双环[4.3.0]壬-5-烯(DBN)、1,8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯(DBU)、N,N'-二环己基碳二亚胺(DCC)、1,2-二氯乙烷(DCE)、二氯甲烷(DCM)、2,3-二氯-5,6-二氰基-1,4-苯醌(DDQ)、偶氮二甲酸二乙酯(DEAD)、偶氮二甲酸二异丙酯(DIAD)、二-异丁基氢化铝(DIBAL或DIBAL-H)、二-异丙基乙基胺(DIPEA)、N,N-二甲基乙酰胺(DMA)、4-N,N-二甲基氨基吡啶(DMAP)、N,N-二甲基甲酰胺(DMF)、二甲基亚砜(DMSO)、1,1'-二-(二苯基膦基)乙烷(dppe)、1,1'-二-(二苯基膦基)二茂铁(dppf)、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDCI)、2-乙氧基-1-乙氧基羰基-1,2-二氢喹啉(EEDQ)、乙基(Et)、乙酸乙酯(EtOAc)、乙醇(EtOH)、2-乙氧基-2H-喹啉-1-甲酸乙酯(EEDQ)、乙醚(Et2O)、乙基异丙基醚(EtOiPr)、O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N,N,N’N’-四甲基脲六氟磷酸盐(HATU)、乙酸(HOAc)、1-N-羟基苯并三唑(HOBt)、高压液相色谱(HPLC)、异-丙醇(IPA)、异丙基氯化镁(iPrMgCl)、六甲基二硅氮烷(HMDS)、液相色谱质谱(LCMS)、六甲基二硅氮烷锂(LiHMDS)、间-氯过氧苯甲酸(m-CPBA)、甲醇(MeOH)、熔点(mp)、MeSO2-(甲酰基或Ms)、甲基(Me)、乙腈(MeCN)、间-氯过苯甲酸(MCPBA)、质谱(ms)、甲基叔-丁基醚(MTBE)、甲基四氢呋喃(MeTHF)、N-溴琥珀酰亚胺(NBS)、正-丁基锂(nBuLi)、N-羧基酐(NCA)、N-氯琥珀酰亚胺(NCS)、N-甲基吗啉(NMM)、N-甲基吡咯烷酮(NMP)、氯铬酸吡啶(PCC)、二氯-((二-二苯基膦基)二茂铁基)钯(II)(Pd(dppf)Cl2)、乙酸钯(II)(Pd(OAc)2)、三(二亚苄基丙酮)二钯(0)(Pd2(dba)3)、重铬酸吡啶(PDC)、苯基(Ph)、丙基(Pr)、异-丙基(i-Pr)、磅/平方英寸(psi)、吡啶(pyr)、1,2,3,4,5-五苯基-1'-(二-叔丁基膦基)二茂铁(Q-Phos)、室温(环境温度、rt或RT)、仲-丁基锂(sBuLi)、叔-丁基二甲基甲硅烷基或t-BuMe2Si(TBDMS)、四-正丁基氟化铵(TBAF)、三乙胺(TEA或Et3N)、2,2,6,6-四甲基哌啶1-氧基(TEMPO)、三甲基甲硅烷基乙氧基甲基(SEM)、三氟甲磺酸酯或CF3SO2-(Tf)、三氟乙酸(TFA)、1,1'-二-2,2,6,6-四甲基庚烷-2,6-二酮(TMHD)、O-苯并三唑-1-基-N,N,N',N'-四甲基脲四氟硼酸盐(TBTU)、薄层色谱(TLC)、四氢呋喃(THF)、三甲基甲硅烷基或Me3Si(TMS)、对-甲苯磺酸单水合物(TsOH或pTsOH)、4-Me-C6H4SO2-或甲苯磺酰基(Ts)、N-尿烷-N-羧基酐(UNCA)。当与烷基部分一起使用时，包括前缀正(n)、异(i-)、仲(sec-)、叔(t-)和新在内的常规命名法具有其常规含义。(J.Rigaudy和D.P.Klesney,Nomenclature inOrganic Chemistry,IUPAC 1979Pergamon Press,牛津大学)。
一般条件
本发明的化合物可以用可商业获得的起始材料开始，用本领域技术人员已知的一般合成技术和操作来进行制备。下面的概述是适于制备该类化合物的反应流程。在具体实施例中可以找到进一步的例证。
制备实施例
在一个1L的圆底烧瓶中，将4-叔-丁基苯甲酰氯(97.2g,90ml,494mmol,Eq:1.00)与CH2Cl2(375ml)合并得到无色的溶液。将其冷却至0℃。通过滴液漏斗向其中滴加2-甲基丙-2-胺(79.5g,114ml,1.09mol,Eq:2.2)，同时维持其温度低于10℃。再用一些CH2Cl2清洗该滴液漏斗的侧壁。使该反应历经3小时升温至25℃。缓慢加入4N NaOH直至固体大部分溶解(约300mL)。进行层分离。将水层用4X CH2Cl2萃取。将有机层(总共2.5L)用Na2SO4干燥并浓缩至约250mL。形成大量沉淀。将该烧瓶在冰浴中冷却。将所得白色固体滤出，用3X CH2Cl2和1X EtOAc洗涤，从而得到针状的白色固体(72g)，将其在泵上真空干燥。将所合并的滤液和洗涤液再次浓缩至100mL。形成更多的结晶。冷却。过滤并用CH2Cl2洗涤得到第二批白色固体(31.6g)。1H NMR(300MHz,CHLOROFORM-d)δppm 1.33(s,9H)1.47(s,9H)5.91(br.s.,1H)7.43(d,J＝8.31Hz,2H)7.66(d,J＝8.31Hz,2H)
将该反应以2X 26g的批次运行并将其合并进行后处理。对于各批次而言，采用配有机械搅拌器、具有与鼓泡器相连的管线的加料漏斗和氮气入口的2L的三颈烧瓶。将该系统在干燥箱中加热，然后在N2下冷却。将N,4-二-叔-丁基苯甲酰胺(26.2g,112mmol,Eq:1.00)与THF(1.01l)合并，从而得到一种无色的溶液。将该反应混合物冷却至-78℃。在N2流下，缓慢滴加位于环己烷中的仲丁基锂(176ml 1.4M,247mmol,Eq:2.2)。得到黄色溶液。使该反应混合物历经1小时升温至-15℃。产生一种黄色混悬液。将该反应混合物冷却回-78℃。向其中滴加无水DMF(16.4g,17.4ml,225mmol,Eq:2)。使该反应升温至0℃。LCMS表明已经反应完全。
在0℃下缓慢加入150ml饱和NH4Cl。将该反应混合物在环境温度下放置，然后将其转移到一个4L的锥形瓶中并用水和EtOAc对其进行冲洗。将两个批次合并，然后将其转移到同一个4L的锥形瓶中。
2次反应混合物的总体积略多于3L。在旋转蒸发器上，在50℃下，在一个2L的圆底烧瓶中小心地将该反应混合物分批浓缩，避免暴沸。将其体积减至约200-300mL。
有大量固体沉淀。LCMS表明在液体部分没有产物。在大的烧结玻璃漏斗中通过过滤收集白色固体。将团块物质在漏斗中混悬于水中并用研棒将其破碎成细粉，过滤。用水将该固体洗涤5次，然后在真空烘箱中在50℃下干燥2天，从而得到59.6g米白色固体状2,5-二-叔-丁基-3-羟基异二氢吲哚-1-酮。进行1H NMR并直接用于下一步骤。1H NMR(300MHz,氯仿-d)δppm 7.27(s,9H)7.53(s,9H)8.26(d,J＝11.71Hz,1H)11.90(d,J＝11.71Hz,1H)13.40-13.46(m,1H)13.47(s,1H)13.51-13.58(m,1H)。
在一个配有加料漏斗、气冷式冷凝器和氮气入口的2L三颈烧瓶中，将2,5-二-叔-丁基-3-羟基异二氢吲哚-1-酮(59.6g,228mmol,Eq:1.00)和乙酸(868ml)合并得到一种亮黄色溶液。将该反应加热至90℃。滴加肼单水合物(14.8g,14.4ml,296mmol,Eq:1.3)。将该反应混合物在90℃下搅拌1小时，然后将该反应混合物用300mL H2O稀释并缓慢使之冷却至25℃。LCMS表明反应完全，完全转化成所需产物。将该反应浓缩至小体积(约50-100mL)。在静置时，从该溶液析出无色的固体。通过过滤收集固体，用水洗涤数次，用1X乙醚和2X乙醚/己烷洗涤并将其真空干燥，从而以白色固体形式得到6-叔-丁基-2H-酞嗪-1-酮(37g,收率为82％)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δppm 1.44(s,9H)7.66-7.73(m,1H)7.84-7.91(m,1H)8.18(d,J＝0.51Hz,1H)8.33-8.42(m,1H)。
在一个配有N2入口和鼓泡器出口以及机械搅拌器的500mL三颈烧瓶中，将6-叔-丁基酞嗪-1(2H)-酮(6.46g,31.9mmol,Eq:1.00)、2-氯-6-氟苯甲醛(7.6g,47.9mmol,Eq:1.5)和碳酸钾(8.83g,63.9mmol,Eq:2)(细粉)与DMA(70ml)混合，从而得到一种黄色的混悬液。加入四乙基氯化铵(688mg,4.15mmol,Eq:0.13)并将该反应混合物在强烈搅拌的情况下在68℃(浴温)下加热。在该反应混合物变成溶液后，将其在这一温度下搅拌1小时。将该反应在75℃(浴温)下继续加热一夜。再加入一些2-氯-6-氟苯甲醛(5g,31.9mmol,Eq:1.00)并将该反应混合物在75℃(浴温)下加热3天。将该反应混合物倾倒到300mL H2O中并用CH2Cl2进行萃取(5x 300mL)。将有机层用Na2SO4干燥并将其真空浓缩。剩余大量DMA。将该反应混合物倾倒到500mL H2O中，用乙醚萃取(5x 300mL)。将醚层用盐水洗涤，用MgSO4干燥，过滤并将其真空浓缩。当其体积为大约150mL时，有大量白色结晶状物质。通过过滤分离产物得到纯品(5.4g)。将滤液真空浓缩并将残余物用使用SF25-160g柱的Analogix纯化系统进行纯化(用5-25％(3:1CH2Cl2/EtOAc)/己烷进行洗脱)，从而又得到4.75g所需产物。2-(6-叔-丁基-1-氧代-1H-酞嗪-2-基)-6-氯-苯甲醛的总收率为10.1g(93％)。1HNMR(300MHz,氯仿-d)δppm 7.27(s,9H)13.30(d,J＝7.55Hz,1H)13.34-13.51(m,2H)13.56(d,J＝1.51Hz,1H)13.71(dd,J＝8.50,1.70Hz,1H)14.12(s,1H)14.21(d,J＝8.31Hz,1H)16.20(s,1H)。LC/MS实测值[M+H]+340.8；[M+Na]+362.9。
在0℃和氮气流下，在强烈搅拌的情况下，以每份1g的量向2-(6-叔-丁基-1-氧代酞嗪-2(1H)-基)-6-氯苯甲醛(61g,179mmol,Eq:1.00)在CH2Cl2(350ml)和甲醇(350ml)中的溶液中加入硼氢化钠(7.45g,197mmol,Eq:1.1)。使该反应混合物升温至环境温度并将其在这一温度下搅拌1小时。滴加水(100mL)，然后滴加CH2Cl2并再加入一些水，进行层分离。将水相用CH2Cl2萃取三次。将所合并的有机层用饱和NH4Cl萃取并用硫酸钠干燥。在过滤后，将该黄色液体浓缩得到一种黄绿色固体。将该固体用乙醚/乙酸乙酯6:1研磨并用相同溶剂洗涤数次，从而得到一种浅黄绿色的固体。将该固体在含有1％甲醇的二氯甲烷中浆化。通过过滤收集所得白色固体，用二氯甲烷洗涤，然后用二氯甲烷/乙醚洗涤，从而以白色固体形式得到6-叔-丁基-2-(3-氯-2-羟基甲基-苯基)-2H-酞嗪-1-酮。(28.3g)。1HNMR(300MHz,氯仿-d)δppm 1.45(s,9H)4.58(br.s.,2H)7.31(dd,J＝7.93,1.51Hz,1H)7.43(t,J＝7.93Hz,1H)7.57(dd,J＝8.12,1.32Hz,1H)7.77(d,J＝1.89Hz,1H)7.93(dd,J＝8.69,1.89Hz,1H)8.33(s,1H)8.44(d,J＝8.69Hz,1H)；LC/MS实测值[M+H]+343.0。
向6-叔-丁基-2-(3-氯-2-(羟基甲基)苯基)酞嗪-1(2H)-酮(28.3g,82.6mmol,Eq:1.00)在二氯甲烷(250ml)中的溶液中加入三乙胺(10.9g,10.1ml,107mmol,Eq:1.3)、乙酸酐(11.0g,15.1ml,107mmol,Eq:1.3)和DMAP(252mg,2.06mmol,Eq:0.025)并将该溶液在环境温度下搅拌一夜。将该反应混合物倾倒到300mL H2O中并用CH2Cl2进行萃取(3x 250mL)。
将有机层用硫酸钠干燥，过滤，浓缩，从而得到一种半固体。向该半固体中加入300ml乙酸异丙酯并将其浓缩，从而得到一种淡黄色固体。在冷却的情况下将固体用150ml乙酸异丙酯研磨，然后过滤，用30mL冷乙酸异丙酯洗涤一次，然后用50mL 2:1己烷:乙酸异丙酯洗涤一次，从而得到白色绒毛状固体形式的乙酸2-(6-叔-丁基-1-氧代-1H-酞嗪-2-基)-6-氯-苄基酯(23.9g)。1H NMR(300MHz,氯仿-d)δppm 1.44(s,9H)1.91(s,3H)5.18(s,2H)7.31-7.38(m,1H)7.45(t,J＝7.93Hz,1H)7.51-7.59(m,1H)7.73(d,J＝1.89Hz,1H)7.89(dd,J＝8.69,1.89Hz,1H)8.25(s,1H)8.40(d,J＝8.69Hz,1H)。LC/MS实测值[M+H]+385.0。
向一个1L的圆底烧瓶加入乙酸2-(6-叔-丁基-1-氧代酞嗪-2(1H)-基)-6-氯苄基酯(16.4g,42.6mmol,Eq:1.00)和二(频哪醇合)二硼(20.6g,81.0mmol,Eq:1.9)。向其中加入甲基THF(300ml)并搅拌5分钟。将该混合物排空并用氩气回填三次，然后迅速加入乙酸钾(10.5g,107mmol,Eq:2.5)以避免水分。加入乙酸钯(II)(239mg,1.07mmol,Eq:0.025)。加入X-PHOS(1.02g,2.13mmol,Eq:.05)。将该混合物排空并用氩气回填三次。将该橙色-黄色混合物加热至68℃(浴温)达1小时。1小时后，仅形成痕量的所需产物。将反应温度调至70℃。用LCMS密切监测反应进程。将该反应在这一温度下再搅拌9小时，其后，LCMS分析仅发现少量起始材料、痕量脱Cl副产物和大量产物，该反应仍然是淡琥珀色。将该反应在70℃下再搅拌1小时以驱使反应完全。颜色变成褐色。使该反应冷却至环境温度。将反应混合物倾倒到400ml H2O中并用EtOAc进行萃取(3x 250ml)。将所合并的有机提取物用盐水洗涤，干燥(MgSO4)，过滤并将其真空浓缩。将残余物用使用SF25-600g柱的Analogix纯化系统进行纯化(用100％己烷洗脱15min.，然后用0-25％EtOAc/己烷进行洗脱)。将通过色谱分离的产物峰的中央馏分进行浓缩，得到18g纯度>95％的黄色泡沫状乙酸2-(6-叔-丁基-1-氧代-1H-酞嗪-2-基)-6-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-苄基酯。1H NMR(300MHz,氯仿-d)δppm 1.34(s,12H)1.44(s,9H)1.87(s,3H)5.30(br.s.,2H)7.39-7.57(m,2H)7.72(d,J＝1.51Hz,1H)7.87(dd,J＝8.50,1.70Hz,1H)7.97(dd,J＝6.42,2.64Hz,1H)8.24(s,1H)8.40(d,J＝8.31Hz,1H)。主要LC峰的实测值：[M+H]+477。注意，该物质制备了数次，所需产物的纯度在约50％至95％之间变化。
将N,N-二乙基-4-氟-2-甲酰基-苯甲酰胺(2.94g,13.2mmol)、肼单水合物(Sigma-Aldrich；725mg,14.5mmol)和EtOH(15mL)的混合物在一个大容量微波管中在50℃下加热45分钟。加入冰乙酸(2mL)并将该混合物在150℃下在Biotage Initiator微波中加热2小时。加入饱和NaHCO3水溶液(75mL)和EtOAc(70mL)。将有机层用5％NaHCO3水溶液洗涤，然后用50％盐水溶液洗涤。将水层用EtOAc进行反萃(2x 60mL)。将所合并的有机层干燥(MgSO4)，过滤，蒸发，从而以亮黄色粉末形式得到6-氟-2H-酞嗪-1-酮(2.14g,99％)。LC/MS实测值[M+H]+165。
将二(三甲基甲硅烷基)氨化钾(0.91M的THF溶液,Alfa-Aesar；46.6mL,42.4mmol)加入到6-氟-2H-酞嗪-1-酮(1.16g,7.1mmol)在THF(20mL)中的溶液中。将该混合物在油浴中在70℃下加热一夜。加入水(125mL)和EtOAc(100mL)。进行层分离并将水层用EtOAc进行反萃(2x 70mL)。将所合并的有机层干燥(MgSO4)，过滤，蒸发，从而得到一种黄色固体(1.52g)。通过用热CH2Cl2/己烷研磨对该物质进行纯化，然后过滤，得到亮黄色粉末状2-甲基-2-(1-氧代-1,2-二氢-酞嗪-6-基)-丙腈(1.12g,74％)。LC/MS实测值[M+H]+214。
将2-甲基-2-(1-氧代-1,2-二氢-酞嗪-6-基)-丙腈(1.12g,5.23mmol)、2,6-二溴苯甲醛(2.21g,8.37mmol)、NaHCO3(879mg,10.5mmol)、碘化亚铜(I)(996mg,5.23mmol)和DMSO(35.3mL)的混合物在～110℃下加热2小时。将该混合物冷却至室温。加入CH2Cl2(40mL)和水(40mL)。将该混合物用硅藻土过滤并将硅藻土用CH2Cl2和少量MeOH充分洗涤。对滤液的各层进行分离，将有机层用50％盐水溶液进行洗涤。将水层用CH2Cl2反萃(2x 40mL)。将所合并的有机层干燥(MgSO4)，过滤并将其真空浓缩。将残余物用使用SF25-60g硅胶柱的Analogix纯化系统进行纯化(用0-5％MeOH/CH2Cl2进行洗脱)，从而得到淡黄色固体状的2-[2-(3-溴-2-甲酰基-苯基)-1-氧代-1,2-二氢-酞嗪-6-基]-2-甲基-丙腈(1.89mg,82％)，其纯度为大约90％。LC/MS实测值[M+H]+396/398。
实施例1
通过排真空和用氩气回填来对乙酸2-(6-叔-丁基-1-氧代-1H-酞嗪-2-基)-6-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-苄基酯(中间体5；177mg,371μmol)、4-[5-(2-氮杂环丁烷-1-基-1,1-二甲基-乙氧基)-吡啶-2-基氨基]-6-氯-2-甲基-2H-哒嗪-3-酮(其可以按照Berthel,S.J.等，US20120040949中I-13的制备的步骤2的描述进行制备；90mg,247μmol)、2-二环己基膦基-2′,4′,6′-三异丙基联苯(18mg,37μmol)、磷酸钾(144mg,0.68mmol)、水(332μL)和正丁醇(1.4mL)的混合物进行脱气。
加入二(二亚苄基丙酮)钯(0)(10mg,17μmol)并如前所述那样对该混合物进行脱气。将该混合物在110℃下加热2.5小时。加入水(35mL)和EtOAc(35mL)并将该混合物在分液漏斗中进行振摇。收集有机层，用盐水洗涤(35mL)。将水层用EtOAc进行反萃(2x 30mL)。将所合并的有机层干燥(MgSO4)，过滤，蒸发，并用使用24g柱的Analogix纯化系统对其进行纯化(用1-20％MeOH/CH2Cl2进行洗脱)，从而得到粘稠的亮黄色油状的乙酸2-{5-[5-(2-氮杂环丁烷-1-基-1,1-二甲基-乙氧基)-吡啶-2-基氨基]-1-甲基-6-氧代-1,6-二氢-哒嗪-3-基}-6-(6-叔-丁基-1-氧代-1H-酞嗪-2-基)-苄基酯和2-(3-{5-[5-(2-氮杂环丁烷-1-基-1,1-二甲基-乙氧基)-吡啶-2-基氨基]-1-甲基-6-氧代-1,6-二氢-哒嗪-3-基}-2-羟基甲基-苯基)-6-叔-丁基-2H-酞嗪-1-酮(112mg)的混合物。加入二恶烷(572μL)和2N NaOH水溶液(980μL,1.96mmol)并将该混合物在氩气下在50℃下加热2小时。加入水(25mL)和EtOAc(50mL)并将该混合物在分液漏斗中进行振摇。收集有机层，用盐水洗涤(50mL)。将水层用EtOAc进行反萃(2x 40mL)。将所合并的有机层干燥(MgSO4)，过滤，蒸发，用使用12g柱的Analogix纯化系统进行纯化(用1-15％MeOH/CH2Cl2进行洗脱)，得到淡黄色固体状的2-(3-{5-[5-(2-氮杂环丁烷-1-基-1,1-二甲基-乙氧基)-吡啶-2-基氨基]-1-甲基-6-氧代-1,6-二氢-哒嗪-3-基}-2-羟基甲基-苯基)-6-叔-丁基-2H-酞嗪-1-酮(81mg,52％)。LC/MS实测值[M+H]+636.0。
实施例2
将位于一个微波小瓶中的乙酸2-(6-叔-丁基-1-氧代-1H-酞嗪-2-基)-6-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-苄基酯(其可以如实施例5所述那样来进行制备；纯度为～75％；214mg,～0.34mmol)、6-氯-2-甲基-4-(5-(1-甲基哌啶-4-基)吡啶-2-基氨基)哒嗪-3(2H)-酮(其可以如Berthel,S.J.等US20120040949中实施例56的中间体所述那样来进行制备；100mg,0.3mmol)、二(二亚苄基丙酮)钯(Aldrich；8.6mg,15μmol)、XPhos(2-(二环己基膦基)-2',4',6'-三-异-丙基-1,1'-联苯，Strem Chemicals；14.3mg,30μmol)和磷酸钾(159mg,0.75mmol)的混合物进行净化并加入进行了脱气的正-丁醇(2.4mL)和水(600μL)的混合物。将该混合物在沙浴中在115℃下加热一夜。将该混合物用硅藻土过滤，浓缩，用色谱法进行纯化(用0-25％MeOH/CH2Cl2进行洗脱)，从而得到一种黄色油状物(150mg)。加入MeOH(2.3mL)和碳酸钾(96mg,0.7mmol)并将该混合物在45℃下加热1小时。加入CH2Cl2以改善溶解度，将该混合物再次在45℃下加热。将该混合物冷却至室温并向其中滴加水。将所得混合物在室温下搅拌一夜，然后用CH2Cl2进行萃取。将该有机萃取物浓缩并将残余物用乙酸异丙酯进行研磨。将固体滤出，用乙醚洗涤，在烘箱中真空干燥数小时，从而以米白色结晶形式得到6-叔-丁基-2-{2-羟基甲基-3-[1-甲基-5-(1'-甲基-1',2',3',4',5',6'-六氢-[3,4']联吡啶-6-基氨基)-6-氧代-1,6-二氢-哒嗪-3-基]-苯基}-2H-酞嗪-1-酮(100mg,55％)。NMR表明存在少量乙酸异丙酯。LC/MS实测值[M+H]+606.1。
实施例3
将位于一个微波小瓶中的乙酸2-(6-叔-丁基-1-氧代-1H-酞嗪-2-基)-6-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-苄基酯(其可如实施例5所述那样来进行制备；纯度为～75％；206mg,～0.32mmol)、4-(5-(氮杂环丁烷-1-基甲基)-1-甲基-1H-吡唑-3-基氨基)-6-氯-2-甲基哒嗪-3(2H)-酮(其可以如Berthel,S.J.等US20120040949中实施例58的中间体所述那样来进行制备；89mg,0.29mmol)、二(二亚苄基丙酮)钯(Aldrich；8.3mg,14μmol)、XPhos(2-(二环己基膦基)-2',4',6'-三-异-丙基-1,1'-联苯，Strem Chemicals；13.7mg,29μmol)和磷酸钾(184mg,0.87mmol)的混合物用氮气进行净化并加入进行了脱气的正-丁醇(2.3mL)和水(576μL)的混合物。将该混合物在沙浴中在115℃下加热一夜。将该混合物蒸发并用色谱法进行纯化(用0-25％MeOH/CH2Cl2进行洗脱)，从而得到一种黄色油状物(150mg)。加入MeOH(2.4mL)和碳酸钾(83mg,0.6mmol)并将该混合物在室温下搅拌1小时。向其中滴加水并将所得混合物在室温下搅拌1小时。将固体滤出并将其在真空烘箱中干燥一夜，从而以米白色结晶固体形式得到2-{3-[5-(5-氮杂环丁烷-1-基甲基-1-甲基-1H-吡唑-3-基氨基)-1-甲基-6-氧代-1,6-二氢-哒嗪-3-基]-2-羟基甲基-苯基}-6-叔-丁基-2H-酞嗪-1-酮(72mg,43％)。LC/MS实测值[M+H]+581.4。
实施例4
将位于一个微波小瓶中的乙酸2-(6-叔-丁基-1-氧代-1H-酞嗪-2-基)-6-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-苄基酯(其可如上所述那样来进行制备；纯度为～75％；172mg,～0.27mmol)、(S)-6-氯-2-甲基-4-(5-(1-甲基吡咯烷-2-基)吡啶-2-基氨基)哒嗪-3(2H)-酮(其可以如Berthel,S.J.等US20120040949中实施例18步骤3所述那样来进行制备；77mg,0.24mmol)、二(二亚苄基丙酮)钯(Aldrich；6.9mg,12μmol)、XPhos(2-(二环己基膦基)-2',4',6'-三-异-丙基-1,1'-联苯，Strem Chemicals；14.3mg,30μmol)和磷酸钾(153mg,0.72mmol)的混合物进行净化并加入进行了脱气的正-丁醇(2.4mL)和水(600μL)的混合物。将该混合物在沙浴中在115℃下加热2.5小时。将该混合物用硅藻土过滤，浓缩并用色谱法进行纯化(用0-25％MeOH/CH2Cl2进行洗脱)，从而得到100mg产物混合物。加入MeOH(1.58mL)，然后加入CH2Cl2以溶解固体。加入碳酸钾(65.4mg,0.47mmol)并将该混合物在44℃下加热1.5小时。向其中滴加水并将该混合物在室温下搅拌2小时。将该混合物过滤，将固体用水和Et2O洗涤，将其在真空中干燥一个周末，从而以米白色结晶固体形式得到6-叔-丁基-2-(2-羟基甲基-3-{1-甲基-5-[5-((S)-1-甲基-吡咯烷-2-基)-吡啶-2-基氨基]-6-氧代-1,6-二氢-哒嗪-3-基}-苯基)-2H-酞嗪-1-酮(85mg,91％)。[M+H]+592.5。
将6-氯-2-甲基-4-[5-((S)-1-甲基-吡咯烷-3-基)-吡啶-2-基氨基]-2H-哒嗪-3-酮(其可如Berthel,S.J.等US20120040949的实施例32步骤4所述那样来进行制备；150mg,469μmol)、二(频哪醇合)二硼(155mg,610μmol)、乙酸钾(138mg,1.41mmol)和二恶烷(7mL)的混合物在氩气下进行脱气。加入XPhos(2-(二环己基膦基)-2',4',6'-三-异-丙基-1,1'-联苯，StremChemicals；33.5mg,70.4μmol)和乙酸钯(II)(5.3mg,23.5μmol)并将该反应混合物在100℃(外部温度)下在氩气下搅拌30分钟。将烧瓶升高脱离加热浴并加入乙酸2-(6-叔-丁基-1-氧代酞嗪-2(1H)-基)-6-氯苄基酯(实施例4；199mg,516μmol)、碳酸钾(194mg,1.41mmol)、三环己基膦(13.2mg,46.9μmol)和二(二亚苄基丙酮)钯(0)(13.5mg,23.5μmol)和水(1.5ml)。将该反应混合物用氩气充溢并将其在强烈搅拌的情况下在80℃下加热7小时。将该反应混合物冷却至室温并将其倾倒到水和EtOAc中。将EtOAc层分离出来并将水层用EtOAc进行萃取。将所合并的有机层用盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤，蒸发。将残余物用使用12G柱的Analogix系统进行纯化(用CH2Cl2/MeOH/NH4OH 89:9:2->66:27:7进行洗脱)，从而得到乙酸2-(6-叔-丁基-1-氧代-1H-酞嗪-2-基)-6-{1-甲基-5-[5-((S)-1-甲基-吡咯烷-3-基)-吡啶-2-基氨基]-6-氧代-1,6-二氢-哒嗪-3-基}-苄基酯(78mg,26％)。LC/MS实测值[M+H]+634。
实施例5
将乙酸2-(6-叔-丁基-1-氧代-1H-酞嗪-2-基)-6-{1-甲基-5-[5-((S)-1-甲基-吡咯烷-3-基)-吡啶-2-基氨基]-6-氧代-1,6-二氢-哒嗪-3-基}-苄基酯(78mg,0.124mmol)、K2CO3(34.2mg,0.247mmol)和MeOH(10mL)的混合物在40℃下搅拌75分钟，然后冷却至室温。加入水和CH2Cl2并将水层用CH2Cl2进行萃取。将所合并的有机层干燥(Na2SO4)，过滤，蒸发。将残余物用Et2O进行研磨并将所得固体真空干燥一夜，从而得到黄色固体状的6-叔-丁基-2-(2-羟基甲基-3-{1-甲基-5-[5-((S)-1-甲基-吡咯烷-3-基)-吡啶-2-基氨基]-6-氧代-1,6-二氢-哒嗪-3-基}-苯基)-2H-酞嗪-1-酮(57mg,79％)。LC/MS实测值[M+H]+592。
将6-氯-2-甲基-4-[5-((R)-1-甲基-吡咯烷-3-基)-吡啶-2-基氨基]-2H-哒嗪-3-酮(其可如Berthel,S.J.等US20120040949的实施例33步骤1所述那样来进行制备；150mg,469μmol)、二(频哪醇合)二硼(155mg,610μmol)、乙酸钾(138mg,1.41mmol)和二恶烷(7mL)的混合物在氩气下进行脱气。加入XPhos(2-(二环己基膦基)-2',4',6'-三-异-丙基-1,1'-联苯，Strem Chemicals；33.5mg,70.4μmol)和乙酸钯(II)(5.3mg,23.5μmol)并将该反应混合物在100℃(外部温度)下在氩气下搅拌30分钟。将烧瓶升高脱离加热浴并加入2-(6-叔-丁基-1-氧代酞嗪-2(1H)-基)-6-氯苯甲醛(实施例2；160mg,469μmol)、碳酸钾(194mg,1.41mmol)、三环己基膦(13.2mg,46.9μmol)和二(二亚苄基丙酮)钯(0)(13.5mg,23.5μmol)和水(1.5ml)。将该反应混合物用氩气充溢并将其在强烈搅拌的情况下在80℃下加热1小时。将反应混合物冷却至室温并将其倾倒到水和EtOAc中。将EtOAc层分离出来并将水层用EtOAc进行萃取。将所合并的有机层用盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤，蒸发。将残余物用使用Supelco 24G柱的Analogix系统进行纯化(用CH2Cl2/MeOH/NH4OH 77:18:5进行洗脱)，从而得到乙酸2-(6-叔-丁基-1-氧代-1H-酞嗪-2-基)-6-{1-甲基-5-[5-((R)-1-甲基-吡咯烷-3-基)-吡啶-2-基氨基]-6-氧代-1,6-二氢-哒嗪-3-基}-苄基酯(16mg,6％)。LC/MS实测值[M+H]+633.9。
实施例6
6-叔-丁基-2-(2-羟基甲基-3-{1-甲基-5-[5-((R)-1-甲基-吡咯烷-3-基)-吡啶-2-基氨基]-6-氧代-1,6-二氢-哒嗪-3-基}-苯基)-2H-酞嗪-1-酮的制备
将乙酸2-(6-叔-丁基-1-氧代-1H-酞嗪-2-基)-6-{1-甲基-5-[5-((R)-1-甲基-吡咯烷-3-基)-吡啶-2-基氨基]-6-氧代-1,6-二氢-哒嗪-3-基}-苄基酯(16mg,27μmol)、硼氢化钠(1.64mg,43.4μmol)和甲醇(1mL)的混合物在氮气下搅拌30分钟。加入饱和NH4Cl水溶液并将该混合物搅拌5分钟，然后用CH2Cl2萃取两次。将所合并的有机层干燥，过滤并蒸发。将残余物用柱色谱进行纯化(用CH2Cl2/MeOH/NH4OH 89:9:2->66:27:7进行洗脱)，将产物在真空烘箱中在50℃下干燥一夜，从而得到淡黄色固体状的6-叔-丁基-2-(2-羟基甲基-3-{1-甲基-5-[5-((R)-1-甲基-吡咯烷-3-基)-吡啶-2-基氨基]-6-氧代-1,6-二氢-哒嗪-3-基}-苯基)-2H-酞嗪-1-酮(11.8mg,74％)。LC/MS实测值[M+H]+592。
溶液A的制备如下:将6-氯-2-甲基-4-(5-(1-甲基哌啶-4-基)吡啶-2-基氨基)哒嗪-3(2H)-酮(其可以如Berthel,S.J.等US20120040949中I-67的制备的步骤2所述那样来进行制备；125mg,0.374mmol)、XPhos(2-(二环己基膦基)-2',4',6'-三-异-丙基-1,1'-联苯，Strem Chemicals；27mg,56μmol)、乙酸钾(110mg,1.1mmol)、二(频哪醇合)二硼(124mg,0.49mmol)和二恶烷(4.4mL)的混合物在减压下真空脱气并将其放置在氩气气氛下。在室温下加入乙酸钯(II)(9.25mg,41.2μmol)并重复真空-脱气循环。将反应混合物在100℃(外部温度)下在氩气气氛下搅拌16分钟。将反应混合物冷却至环境温度并用氩气压通过一个硅藻土垫进行过滤(再用2.5ml二恶烷对硅藻土进行洗涤)，从而得到溶液A。
溶液B的制备如下:将2-(2-(3-溴-2-甲酰基苯基)-1-氧代-1,2-二氢酞嗪-6-基)-2-甲基丙腈(实施例8；158mg,399μmol)、三环己基膦(34.2mg,122μmol)、K2CO3(276mg,2mmol)、n-BuOH(486μL)、水(1.52mL)和二恶烷(2.03mL)的混合物脱气。在室温下加入二(二亚苄基丙酮)钯(0)(34.4mg,59.8μmol)。将该混合物再次真空脱气，然后在设置至110℃的加热浴中进行加热。
将溶液A加入到溶液B中并将所得混合物在110℃下搅拌35分钟。停止加热并将该反应混合物搅拌一夜。将反应混合物用硅藻土过滤并将硅藻土用EtOAc洗涤。向滤液中加入EtOAc(30mL)和水(30mL)并将滤液在分液漏斗中进行振摇。收集EtOAc相。将水层用EtOAc进行反萃(2x 20mL)并将所合并的有机层干燥(Na2SO4)，过滤并蒸发。将残余物通过色谱法用使用SF15-24g柱的Analogix系统(用3-18％MeOH/CH2Cl2进行洗脱)进行纯化，得到灰色粉末状的2-(2-{2-甲酰基-3-[1-甲基-5-(1'-甲基-1',2',3',4',5',6'-六氢-[3,4']联吡啶-6-基氨基)-6-氧代-1,6-二氢-哒嗪-3-基]-苯基}-1-氧代-1,2-二氢-酞嗪-6-基)-2-甲基-丙腈(178mg,73％)。LC/MS实测值[M+H]+615。
实施例7
2-(2-{2-羟基甲基-3-[1-甲基-5-(1'-甲基-1',2',3',4',5',6'-六氢-[3,4']联吡啶-6-基氨基)-6-氧代-1,6-二氢-哒嗪-3-基]-苯基}-1-氧代-1,2-二氢-酞嗪-6-基)-2-甲基-丙腈
向2-(2-{2-甲酰基-3-[1-甲基-5-(1'-甲基-1',2',3',4',5',6'-六氢-[3,4']联吡啶-6-基氨基)-6-氧代-1,6-二氢-哒嗪-3-基]-苯基}-1-氧代-1,2-二氢-酞嗪-6-基)-2-甲基-丙腈(实施例17；178mg,0.29mmol)中加入MeOH(4mL)和CH2Cl2(2.3mL)并将其冷却至0℃。向其中滴加NaBH4(55mg,1.5mmol)在水(0.5mL)中的溶液并将该混合物搅拌10分钟。然后，再加入一些位于水(0.5mL)中的NaBH4(55mg,1.5mmol)并将该混合物再搅拌10分钟。加入水(60mL)和CH2Cl2(60mL)并将该物质在分液漏斗中进行振摇。收集有机层，用50％稀释的盐水溶液洗涤，将水相用CH2Cl2反萃(2x 40mL)。将所合并的有机层干燥(MgSO4)，过滤，蒸发。将残余物用使用SF15-12G硅胶柱的Analogix纯化系统进行纯化(用3-14％MeOH/CH2Cl2进行洗脱)，从而得到一种淡黄色固体(138mg)。将该物质用CH2Cl2/己烷重结晶，从而以白色结晶形式得到2-(2-{2-羟基甲基-3-[1-甲基-5-(1'-甲基-1',2',3',4',5',6'-六氢-[3,4']联吡啶-6-基氨基)-6-氧代-1,6-二氢-哒嗪-3-基]-苯基}-1-氧代-1,2-二氢-酞嗪-6-基)-2-甲基-丙腈(109mg,61％)。LC/MS实测值[M+H]+617。
实施例8
将进行了脱气的n-BuOH(4mL)和水(1mL)的混合物加入到位于一个微波小瓶中的乙酸2-(6-叔-丁基-1-氧代-1H-酞嗪-2-基)-6-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-苄基酯(其可如实施例5所述那样来进行制备；纯度为～75％；364mg,～0.57mmol)、6-氯-2-甲基-4-(5-甲基-4,5,6,7-四氢-吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-基氨基)-2H-哒嗪-3-酮(其可如Berthel,S.J.等US20120040949的实施例59的制备中的中间体所述那样来进行制备；150mg,0.51mmol)、二(二亚苄基丙酮)钯(Aldrich；14.6mg,25μmol),XPhos(2-(二环己基膦基)-2',4',6'-三-异-丙基-1,1'-联苯，Strem Chemicals；24.3mg,51μmol)和磷酸钾(324mg,1.5mmol)的混合物中。将该小瓶盖上盖子并将该混合物在沙浴中在115℃下加热2.5小时。将该混合物用硅藻土过滤，蒸发并用色谱法进行纯化(用0-25％MeOH/CH2Cl2进行洗脱)，得到175mg产物的混合物。加入MeOH(2.9mL)和碳酸钾(119mg,0.86mmol)并将该混合物在40℃下搅拌1小时。向其中滴加水并将所得混合物在室温下搅拌1小时。向其中滴加水并将该混合物在室温下搅拌1小时。将所得固体滤出并将其在真空烘箱中干燥一夜，从而得到白色结晶固体状的6-叔-丁基-2-{2-羟基甲基-3-[1-甲基-5-(5-甲基-4,5,6,7-四氢-吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-基氨基)-6-氧代-1,6-二氢-哒嗪-3-基]-苯基}-2H-酞嗪-1-酮(147mg,51％)。LC/MS实测值[M+H]+567.0。
实施例9
用氩气向6-氯-4-(1'-乙基-1',2',3',4',5',6'-六氢-[3,4']联吡啶-6-基氨基)-2-甲基-2H-哒嗪-3-酮(其可如Berthel,S.J.等US20120040949的实施例69的中间体所述那样来进行制备；133mg,0.38mmol)、乙酸2-(6-叔-丁基-1-氧代酞嗪-2(1H)-基)-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苄基酯(其可如实施例5所述那样来进行制备；纯度为～75％；242mg,381μmol)和磷酸钾(202mg,953μmol)、水(1.25mL)和nBuOH(5mL)的混合物中鼓泡5分钟。加入XPhos(2-(二环己基膦基)-2',4',6'-三-异-丙基-1,1'-联苯，Strem Chemicals；18.2mg,38μmol)和二(二亚苄基丙酮)钯(0)(StremChemicals；11.0mg,19.1μmol)。将该管密封并将该反应混合物在115℃下加热6小时。将该反应混合物倾倒到水(100mL)中并将该混合物用EtOAc进行萃取(3x 75mL)。将所合并的有机层用盐水洗涤，干燥(MgSO4)，过滤并蒸发。将残余物用色谱法进行纯化(用0-6％MeOH/CH2Cl2进行洗脱，然后用NH4OH/MeOH/CH2Cl24:14:82进行洗脱)，然后用EtOAc/Et2O进行研磨，从而得到米白色固体状的6-叔-丁基-2-{3-[5-(1'-乙基-1',2',3',4',5',6'-六氢-[3,4']联吡啶-6-基氨基)-1-甲基-6-氧代-1,6-二氢-哒嗪-3-基]-2-羟基甲基-苯基}-2H-酞嗪-1-酮(32mg,13％)。1H NMR表明存在<3％的杂质乙酸2-(6-叔-丁基-1-氧代-1H-酞嗪-2-基)-6-[5-(1'-乙基-1',2',3',4',5',6'-六氢-[3,4']联吡啶-6-基氨基)-1-甲基-6-氧代-1,6-二氢-哒嗪-3-基]-苄基酯。LC/MS实测值[M+H]+620.1。
实施例10
将进行了脱气的n-BuOH(2.29mL)和水(0.57mL)的混合物加入到位于一个微波小瓶中的乙酸2-(6-叔-丁基-1-氧代-1H-酞嗪-2-基)-6-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-苄基酯(其可如实施例5所述那样来进行制备；纯度为～75％；204mg,～0.32mmol)、6-氯-2-甲基-4-[5-(吗啉-4-羰基)-吡啶-2-基氨基]-2H-哒嗪-3-酮(其可如Berthel,S.J.等US20120040949中I-2的制备所述那样来进行制备；100mg,0.29mmol)、二(二亚苄基丙酮)钯(8.2mg,14.3μmol)、XPhos(2-(二环己基膦基)-2',4',6'-三-异-丙基-1,1'-联苯，Strem Chemicals；13.6mg,28.6μmol)和磷酸钾(152mg,0.72mmol)的混合物中。将该混合物在沙浴中在115℃下加热一夜。将该混合物用硅藻土过滤，蒸发并用色谱法进行纯化(用0-20％MeOH/CH2Cl2进行洗脱)，从而得到一种固体。加入甲醇，将该混合物过滤并将其在真空烘箱中干燥一个周末，从而得到白色粉末状的6-叔-丁基-2-(2-羟基甲基-3-{1-甲基-5-[5-(吗啉-4-羰基)-吡啶-2-基氨基]-6-氧代-1,6-二氢-哒嗪-3-基}-苯基)-2H-酞嗪-1-酮(46mg,26％)。LC/MS实测值[M+H]+622.4。
溶液A的制备如下:将4-[5-(2-氮杂环丁烷-1-基-1,1-二甲基-乙氧基)-吡啶-2-基氨基]-6-氯-2-甲基-2H-哒嗪-3-酮(其可如Berthel,S.J.等US20120040949中I-13的制备中步骤2所述那样来进行制备；150mg,0.41mmol)、XPhos(2-(二环己基膦基)-2',4',6'-三-异-丙基-1,1'-联苯，StremChemicals；29.5mg,62μmol)、乙酸钾(121mg,1.2mmol)、二(频哪醇合)二硼(Matrix Scientific；136mg,0.54mmol)和二恶烷(5.3mL)的混合物在减压下真空脱气并将其放置在氩气气氛下。在室温下加入乙酸钯(II)(10.2mg,45μmol)并重复该真空-脱气循环。将该反应混合物在100℃(油浴温度)下在氩气下搅拌16分钟。将该反应混合物用氩气压通过一个硅藻土垫进行过滤(再用2.5ml二恶烷洗涤硅藻土)，从而得到溶液A。
溶液B的制备如下:将2-(2-(3-溴-2-甲酰基苯基)-1-氧代-1,2-二氢酞嗪-6-基)-2-甲基丙腈(实施例8；156mg,394μmol)、三环己基膦(33.8mg,120μmol)、K2CO3(276mg,2mmol)、n-BuOH(480μL)、水(1.5mL)和二恶烷(2mL)的混合物脱气。在室温下加入二(二亚苄基丙酮)钯(0)(34mg,59μmol)。将该混合物再次真空脱气，然后将其在设定在110℃的油浴中进行加热。
将溶液A加入到溶液B中并将所得混合物在110℃下搅拌60分钟。将该反应混合物冷却至室温并用硅藻土过滤。将硅藻土用EtOAc洗涤。向滤液中加入EtOAc(30mL)和水(30mL)并收集EtOAc相。将水层用EtOAc进行反萃(2x20mL)，将所合并的有机层干燥(Na2SO4)，过滤并蒸发。将残余物通过色谱法用使用SF15-12g柱的Analogix系统(用3-18％MeOH/CH2Cl2进行洗脱)进行纯化，从而得到亮棕色粉末状的2-[2-(3-{5-[5-(2-氮杂环丁烷-1-基-1,1-二甲基-乙氧基)-吡啶-2-基氨基]-1-甲基-6-氧代-1,6-二氢-哒嗪-3-基}-2-甲酰基-苯基)-1-氧代-1,2-二氢-酞嗪-6-基]-2-甲基-丙腈(201mg,79％)。LC/MS实测值[M+H]+645.0。
实施例11
向2-{5-[5-(2-氮杂环丁烷-1-基-1,1-二甲基-乙氧基)-吡啶-2-基氨基]-1-甲基-6-氧代-1,6-二氢-哒嗪-3-基}-6-(6-叔-丁基-1-氧代-1H-酞嗪-2-基)-苯甲醛(201mg,0.31mmol)在MeOH(4.5mL)和CH2Cl2(2.3mL)中的混合物中滴加NaBH4(59mg,1.6mmol)在水(0.5mL)中的溶液并将所得混合物在0℃下搅拌10分钟。加入NaBH4(59mg,1.6mmol)在水(0.5mL)中的溶液并将该混合物再搅拌10分钟。加入水(60mL)和CH2Cl2(60mL)并进行层分离。将有机层用50％盐水溶液(60mL)进行洗涤，将所合并的水溶液用CH2Cl2反萃(2x40mL)。将所合并的有机层干燥(MgSO4)，过滤，蒸发。将残余物用使用SF15-12G柱的Analogix纯化系统进行纯化(用2-14％MeOH/CH2Cl2进行洗脱)，然后用CH2Cl2/己烷重结晶得到白色结晶状的2-[2-(3-{5-[5-(2-氮杂环丁烷-1-基-1,1-二甲基-乙氧基)-吡啶-2-基氨基]-1-甲基-6-氧代-1,6-二氢-哒嗪-3-基}-2-羟基甲基-苯基)-1-氧代-1,2-二氢-酞嗪-6-基]-2-甲基-丙腈(145mg,72％)。LC/MS实测值[M+H]+647.1。
将4-[5-(2-氮杂环丁烷-1-基-1,1-二甲基-乙氧基)-吡啶-2-基氨基]-6-氯-2-甲基-2H-哒嗪-3-酮(其可如Berthel,S.J.等US20120040949中I-13的制备的步骤2所述那样来进行制备；1.50g,4.12mmol)、乙酸2-(6-叔-丁基-1-氧代-1H-酞嗪-2-基)-6-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-苄基酯(ELN003987-149；纯度83％；2.95g,5.14mmol)、二(二亚苄基丙酮)钯(Strem Chemicals；119mg,0.21mmol)、XPhos(2-(二环己基膦基)-2',4',6'-三-异-丙基-1,1'-联苯，Strem Chemicals；197mg,0.41mmol)和磷酸钾(2.19g,10.3mmol)、nBuOH(33mL)和水(8.25mL)的混合物用氩气充溢，然后将其在100℃下加热一夜。将该混合物用硅藻土过滤并浓缩。将残余物用Analogix纯化系统进行纯化(用CH2Cl2至CH2Cl2/MeOH/NH4OH(82:14:4)进行洗脱)。在纯化期间，该纯化系统的泵开始发生故障。用不同的Analogix纯化系统将产物从柱上洗脱下来，用CH2Cl2/MeOH/NH4OH(82:14:4->55:36:9))作为洗脱剂。将产物混悬/溶解于Et2O/EtOAc(2:1)中并使该混合物静置48小时。将固体滤出，从而以淡黄色固体形式得到乙酸2-(6-叔-丁基-1-氧代-1H-酞嗪-2-基)-6-(5-{5-[2-(3-羟基-丙基氨基)-1,1-二甲基-乙氧基]-吡啶-2-基氨基}-1-甲基-6-氧代-1,6-二氢-哒嗪-3-基)-苄基酯(525mg,19％)。LC/MS实测值[M+H]+696.0。
实施例12
将乙酸2-(6-叔-丁基-1-氧代-1H-酞嗪-2-基)-6-(5-{5-[2-(3-羟基-丙基氨基)-1,1-二甲基-乙氧基]-吡啶-2-基氨基}-1-甲基-6-氧代-1,6-二氢-哒嗪-3-基)-苄基酯(实施例24；295mg,0.42mmol)、K2CO3(117mg,0.85mmol)和MeOH(30mL)的混合物在40℃下搅拌75分钟，然后冷却至室温。加入水和CH2Cl2并将水层用CH2Cl2进行萃取。将所合并的有机层干燥(Na2SO4)，过滤，蒸发。将残余物通过使用12g Silicycle柱的色谱法进行纯化(用1-15％MeOH/CH2Cl2进行洗脱)。将产物的样品均质物蒸发并将残余物在50℃下真空干燥，从而以亮黄色泡沫形式得到6-叔-丁基-2-[2-羟基甲基-3-(5-{5-[2-(3-羟基-丙基氨基)-1,1-二甲基-乙氧基]-吡啶-2-基氨基}-1-甲基-6-氧代-1,6-二氢-哒嗪-3-基)-苯基]-2H-酞嗪-1-酮(119mg,43％)。LC/MS实测值[M+H]+654.2。
实施例13
用氩气向6-氯-2-甲基-4-(1'-氧杂环丁烷-3-基-1',2',3',4',5',6'-六氢-[3,4']联吡啶-6-基氨基)-2H-哒嗪-3-酮(其可如Berthel,S.J.等US20120040949的实施例80步骤1所述那样来进行制备；213mg,567μmol)、乙酸2-(6-叔-丁基-1-氧代-1H-酞嗪-2-基)-6-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-苄基酯(其可如实施例5所述那样来进行制备；纯度为～75％；648mg,～1.0mmol)和磷酸钾(301mg,1.42mmol)、水(1.25mL)和nBuOH(5mL)的混合物中鼓泡5分钟。加入XPhos(2-(二环己基膦基)-2',4',6'-三-异-丙基-1,1'-联苯，Strem Chemicals；27mg,57μmol)和二(二亚苄基丙酮)钯(0)(StremChemicals；16.3mg,28μmol)。将该管密封并将反应混合物在115℃下加热4小时。将反应混合物倾倒到水(100mL)中并将该混合物用CH2Cl2进行萃取(5x 75mL)。将所合并的有机层用盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并蒸发。将残余物用色谱法进行纯化(用0-4％MeOH/CH2Cl2进行洗脱)，从而得到醇和乙酸酯产物的混合物(374mg)。加入THF(12mL)和1N NaOH(2mL)并将该混合物在60℃下加热一夜。将该混合物倾倒到水中并将其用EtOAc萃取三次，用CH2Cl2萃取一次。将有机萃取物用盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并蒸发。将残余物用色谱法进行纯化(用1-5％MeOH/CH2Cl2进行洗脱)得到玻璃状物。加入EtOAc(4mL)和Et2O(30mL)，将白色沉淀滤出并用乙醚洗涤，从而以白色粉末形式得到6-叔-丁基-2-{2-羟基甲基-3-[1-甲基-5-(1'-氧杂环丁烷-3-基-1',2',3',4',5',6'-六氢-[3,4']联吡啶-6-基氨基)-6-氧代-1,6-二氢-哒嗪-3-基]-苯基}-2H-酞嗪-1-酮(246mg,67％)。LC/MS实测值[M+H]+648.1。
将2-[6-(6-氯-2-甲基-3-氧代-2,3-二氢-哒嗪-4-基氨基)-吡啶-3-基氧基]-2-甲基-丙醛(其可如Berthel,S.J.等US20120040949中I-13的制备中步骤1所述那样来进行制备；665mg,2.06mmol)、3,3-二氟氮杂环丁烷盐酸盐(347mg,2.68mmol)和1,2-二氯乙烷(70mL)的混合物在室温下搅拌1小时。加入三乙酰氧基硼氢化钠(655mg,3.09mmol)并将该混合物在室温下搅拌18小时。加入饱和NaHCO3水溶液并将该混合物用CH2Cl2进行萃取(5x20mL)。将所合并的有机层干燥(MgSO4)，过滤并蒸发。将残余物用色谱法进行纯化(30-50％EtOAc/己烷)，从而以白色粉末形式得到6-氯-4-{5-[2-(3,3-二氟-氮杂环丁烷-1-基)-1,1-二甲基-乙氧基]-吡啶-2-基氨基}-2-甲基-2H-哒嗪-3-酮(566mg,69％)。LC/MS实测值[M+H]+400.0。
实施例14
通过抽空和用氩气回填来对6-氯-4-{5-[2-(3,3-二氟-氮杂环丁烷-1-基)-1,1-二甲基-乙氧基]-吡啶-2-基氨基}-2-甲基-2H-哒嗪-3-酮(实施例27；120mg,0.3mmol)、乙酸2-(6-叔-丁基-1-氧代-1H-酞嗪-2-基)-6-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-苄基酯(其可如实施例5所述那样来进行制备；310mg,0.39mmol)、磷酸钾(140mg,0.66mmol)、nBuOH(4mL)和水(1mL)的混合物进行脱气。加入XPhos(2-(二环己基膦基)-2',4',6'-三-异-丙基-1,1'-联苯，可得自Strem Chemicals；21.5mg,45μmol)和二(二亚苄基丙酮)钯(0)(可得自Strem Chemicals；12.1mg,21μmol)。将该混合物再次脱气，然后将其在115℃下加热3小时。加入水(35mL)和EtOAc(35mL)。将EtOAc层用盐水洗涤(35mL)并将盐水层用EtOAc进行反萃(2x 30mL)。将所合并的有机层干燥(Na2SO4)，过滤并蒸发。将残余物用色谱法进行纯化(50-70％EtOAc/己烷)，从而以白色固体形式得到6-叔-丁基-2-[3-(5-{5-[2-(3,3-二氟-氮杂环丁烷-1-基)-1,1-二甲基-乙氧基]-吡啶-2-基氨基}-1-甲基-6-氧代-1,6-二氢-哒嗪-3-基)-2-羟基甲基-苯基]-2H-酞嗪-1-酮(130mg,65％)。LC/MS实测值[M+H]+672.0。
通过排空然后用氩气回填来对6-氯-2-甲基-4-(5-(1-甲基哌啶-4-基)吡啶-2-基氨基)哒嗪-3(2H)-酮(其可如Berthel,S.J.等US20120040949中I-67的制备的步骤2所述那样来进行制备；140mg,0.42mmol)、XPhos(2-(二环己基膦基)-2',4',6'-三-异-丙基-1,1'-联苯，Strem Chemicals；30mg,63μmol)、乙酸钾(123mg,1.26mmol)、二(频哪醇合)二硼(Matrix Scientific；138mg,0.55mmol)和二恶烷(7mL)的混合物进行脱气。加入乙酸钯(II)(10.4mg,46μmol)并将该混合物再次脱气。将该混合物在氩气下在100℃下加热16分钟。将该反应混合物用氩气压通过一个硅藻土垫进行过滤(再用2.5ml二恶烷对硅藻土进行洗涤)，从而得到溶液A。
溶液B的制备如下:将2-[2-(3-溴-2-甲酰基-苯基)-1-氧代-1,2,3,4-四氢-异喹啉-6-基]-2-甲基-丙腈(其可如Berthel,S.J.等US20100222325的实施例153中所述那样来进行制备；166mg,0.42mmol)、三环己基膦(36mg,128μmol)、K2CO3(290mg,2.1mmol)、n-BuOH(534μL)、水(2.1mL)和二恶烷(2.22mL)的混合物脱气。在室温下加入二(二亚苄基丙酮)钯(0)(36.1mg,63μmol)。将该混合物再次真空脱气，然后在设定至110℃的加热浴中进行加热。
将溶液A加入到溶液B中并将所得混合物在110℃下搅拌60分钟。关闭加热并将该反应混合物搅拌一夜。将该反应混合物用硅藻土过滤并将硅藻土用EtOAc洗涤。向滤液中加入EtOAc(30mL)和水(30mL)并收集EtOAc相。将水层用EtOAc进行反萃(2x 20mL)，将所合并的有机层干燥(Na2SO4)，过滤并蒸发。将残余物通过色谱法用使用SF25-24g柱的Analogix系统(用2-13％MeOH/CH2Cl2进行洗脱)进行纯化，从而以亮褐色半固体形式得到2-(2-{2-甲酰基-3-[1-甲基-5-(1'-甲基-1',2',3',4',5',6'-六氢-[3,4']联吡啶-6-基氨基)-6-氧代-1,6-二氢-哒嗪-3-基]-苯基}-1-氧代-1,2,3,4-四氢-异喹啉-6-基)-2-甲基-丙腈(158mg,61％)。LC/MS实测值[M+H]+616.0。
实施例15
将NaBH4(49mg,1.3mmol)在水(0.75mL)中的溶液加入到冷却的(～0℃)2-(2-{2-甲酰基-3-[1-甲基-5-(1'-甲基-1',2',3',4',5',6'-六氢-[3,4']联吡啶-6-基氨基)-6-氧代-1,6-二氢-哒嗪-3-基]-苯基}-1-氧代-1,2,3,4-四氢-异喹啉-6-基)-2-甲基-丙腈(158mg,0.26mmol)、CH2Cl2(2mL)和MeOH(2mL)的混合物中。将该混合物搅拌10分钟。加入NaBH4(49mg,1.3mmol)在水(0.75mL)中的溶液并将该混合物搅拌10分钟。加入NaBH4(66mg,1.7mmol)在水(0.75mL)中的溶液并将该混合物搅拌5分钟。将上层的水层取出并加入MeOH(1mL)。以10分钟的间隔，再加入两份位于水(0.75mL)中的NaBH4(66mg,1.7mL)并将该反应混合物搅拌10分钟。加入水(60mL)和CH2Cl2(50mL)。将该混合物在分液漏斗中振摇并分离出有机层。将有机层用50％盐水(50mL)洗涤，将所合并的水相用CH2Cl2反萃(2x40mL)。将所合并的有机层干燥(MgSO4)，过滤并蒸发。将残余物用使用SF15-12G柱的Analogix纯化系统进行纯化(用1-16％MeOH/CH2Cl2进行洗脱)得到米白色固体(101mg)。将其用CH2Cl2/己烷重结晶，从而以米白色粉末形式得到2-(2-{2-羟基甲基-3-[1-甲基-5-(1'-甲基-1',2',3',4',5',6'-六氢-[3,4']联吡啶-6-基氨基)-6-氧代-1,6-二氢-哒嗪-3-基]-苯基}-1-氧代-1,2,3,4-四氢-异喹啉-6-基)-2-甲基-丙腈(81mg,92％)。LC/MS实测值[M+H]+618.2。
生物学实施例
布鲁顿氏酪氨酸激酶(Btk)抑制试验
该试验是通过过滤捕获放射性的33P磷酸化产物。Btk、生物素化的SH2肽底物(Src同源性)和ATP的相互作用导致肽底物的磷酸化。生物素化的产物是结合的链霉抗生素蛋白琼脂糖小珠。所有被结合的放射性标记的产物都是用闪烁计数器来进行探测的。
试验板是96-孔聚丙烯(Greiner)和96-孔1.2μm亲水性PVDF滤板(Millipore)。这里所报告的浓度是最终的试验浓度:10-100μM化合物的DMSO溶液(Burdick和Jackson)、5-10nM Btk酶(His-标记的，全长型)、30μM肽底物(Biotin-Aca-AAAEEIYGEI-NH2)、100μM ATP(Sigma)、8mM咪唑(Sigma,pH 7.2)、8mM甘油-2-磷酸酯(Sigma)、200μM EGTA(Roche Diagnostics)、1mM MnCl2(Sigma)、20mM MgCl2(Sigma)、0.1mg/ml BSA(Sigma)、2mM DTT(Sigma)、1μCi 33P ATP(Amersham)、20％链霉抗生素蛋白琼脂糖小珠(Amersham)、50mM EDTA(Gibco)、2M NaCl(Gibco)、2M NaCl w/1％磷酸(Gibco)、microscint-20(Perkin Elmer)。
IC50测定是利用由标准96-孔板试验模板产生的数据，由每个化合物的10个数据点来计算的。在每个板上对一个对照化合物和七个未知的抑制剂进行试验，每个板运行两次。一般而言，化合物从100μM开始以半对数进行稀释，在3nM结束。对照化合物是十字孢碱。在不存在肽底物的情况下计算背景。在存在肽底物的情况下测定总活性。用下面的方案来测定Btk抑制作用。
1)样品制备:以半对数增量，用试验缓冲液(咪唑，甘油-2-磷酸酯，EGTA，MnCl2，MgCl2，BSA)对试验化合物进行稀释。
2)小珠制备
a.)通过在500g下离心来对小珠进行清洗
b.)用PBS和EDTA复溶小珠，从而产生20％的小珠浆液
3)将不含底物的反应混合物(试验缓冲液,DTT,ATP,33P ATP)和含底物的反应混合物(试验缓冲液,DTT,ATP,33P ATP,肽底物)在30℃预培养15分钟。
4)为了开始试验，将10μL位于酶缓冲液(咪唑,甘油-2-磷酸酯,BSA)中的Btk和10μL试验化合物在室温下预培养10分钟。
5)向Btk和化合物中加入30μL不含或含底物的反应混合物。
6)将共计50μL试验混合物在30℃下培养30分钟。
7)将40μL试验样品转移到150μL位于滤板中的小珠浆液中以终止反应。
8)在30分钟后，用下面的步骤洗涤滤板
a.3x250μL NaCl
b.3x250μL包含1％磷酸的NaCl
c.1x250μL H2O
9)将该板在65℃下干燥1小时或者在室温下干燥一夜
10)加入50μL microscint-20并在闪烁计数器上对33P cpm进行计数。
由以cpm为单位的原始数据计算百分比活性
百分比活性＝(样品-bkg)/(总活性-bkg)x 100
用单点剂量响应S形模型，由百分比活性计算IC50
y＝A+((B-A)/(1+((x/C)D))))
x＝化合物浓度,y＝％活性,A＝min,B＝max,C＝IC50,D＝1(Hill slope)
通过CD69表达测量的全血中B细胞活化的抑制作用
一种用于测试Btk抑制剂抑制人血中B细胞受体介导的B细胞活化的能力的操作如下:
人全血(HWB)得自健康志愿者，有如下限制条件:24小时内不服药，不吸烟。通过静脉穿刺将血液收集到用肝素钠抗凝的Vacutainer管中。用PBS(20x)将试验化合物稀释十倍至所需的起始药物浓度，然后用10％DMSO的PBS溶液进行三倍系列稀释，以产生九点的剂量-响应曲线。将5.5μl各化合物的稀释液一式两份地加入到2ml的96-孔V底板(AnalyticalSales and Services,#59623-23)中；将5.5μl 10％DMSO的PBS溶液加入到对照和无刺激物孔中。向各孔中加入HWB(100μl)，在混合后，将这些板在37C,5％CO2,100％湿度下培养30分钟。在混合的情况下，向各孔中加入Goat F(ab’)2抗-人IgM(Southern Biotech,#2022-14)(10μl 500μg/ml溶液，终浓度为50μg/ml)(无刺激物孔除外)并将这些板再培养20小时。
在20小时培养结束时，将这些样品与荧光-探针-标记的抗体(15μl PE小鼠抗-人CD20,BD Pharmingen,#555623和/或20ul APC小鼠抗-人CD69,BD Pharmingen#555533)一起在37℃，5％CO2,100％湿度下培养30分钟。为了补偿调整和初始电压设置，包括进行了诱导的对照、未染色的和单染色的。然后，将样品用1ml 1X Pharmingen溶解缓冲液(BDPharmingen#555899)进行溶解并将这些板在1800rpm下离心5分钟。通过抽吸除去上清液，将剩余的沉积物再次用另一份1ml 1X Pharmingen溶解缓冲液溶解，如前那样使这些板离心。将上清液吸出并将剩余的沉积物在FACs缓冲液(PBS+1％FBS)中进行洗涤。在最后一次离心后，除去上清液并将沉积物重新混悬于180μl FACs缓冲液中。将样品转移到适于在BD LSR II流式细胞仪上的HTS 96孔系统上运行的96孔板中。
用适于所用荧光素的激发和发射波长，获取数据并用Cell QuestSoftware获得阳性细胞值百分比。最初用FACS分析软件(Flow Jo)对结果进行分析。试验化合物的IC50被定义为用抗-IgM刺激后CD69-阳性(也是CD20-阳性的)细胞百分比降低50％的浓度(减去未进行刺激的背景的8个孔的均值后的8个对照孔的均值)。用XLfit软件第3版,方程201来计算IC50值。
在下面的表II中列出了本试验中代表性化合物的数据。
表II
B-细胞活化的抑制作用–拉莫斯细胞中的B细胞FLIPR试验
通过测定试验化合物对抗-IgM刺激的B细胞响应的影响来证明本发明化合物对B-细胞活化的抑制作用。
B细胞FLIPR试验是一种测定潜在的抑制剂对抗-IgM抗体刺激引起的细胞内钙增加的影响的以细胞为基础的功能性方法。将拉莫斯细胞(人Burkitt’s淋巴瘤细胞系，ATCC-No.CRL-1596)在生长培养基(如下所述)中培养。在试验前一天，将拉莫斯细胞重新混悬于新鲜的生长培养基(同上)中并将其浓度设定为在组织培养烧瓶中为0.5x 106/mL。在试验当天，对细胞进行计数并将其浓度设定为在组织培养烧瓶中，在补加有1μMFLUO-3AM(TefLabs Cat-No.0116,在无水DMSO和10％普朗尼克酸中制备的)的生长培养基中为1x 106/mL，将其在37℃(4％CO2)下培养1小时。为了除去细胞外染料，通过离心(5min,1000rpm)收集细胞，将其以1x106个细胞/mL混悬于FLIPR缓冲液(如下所述)中，然后以每孔1x105个细胞的数量将其分散到96-孔聚-D-赖氨酸涂布的黑色/透明板(BDCat-No.356692)中。以100μM至0.03μM范围内的各种浓度(7个浓度，细节如下)加入试验化合物，并使其与细胞一起在室温下培养30分钟。通过加入10μg/mL抗-IgM(Southern Biotech,Cat-No.2020-01)来刺激拉莫斯细胞Ca2+信号传导并在FLIPR(Molecular Devices,用具有氩激光器的CCD照相机在480nm激发下捕捉96孔板的图像)上进行测量。
培养基/缓冲液:
生长培养基:含有L-谷氨酰胺(Invitrogen,Cat-No.61870-010)、10％胎牛血清(FBS,Summit Biotechnology Cat-No.FP-100-05)；1mM丙酮酸钠(Invitrogen Cat.No.11360-070)的RPMI 1640培养基。
FLIPR缓冲液:HBSS(Invitrogen,Cat-No.141175-079),2mM CaCl2(Sigma Cat-No.C-4901),HEPES(Invitrogen,Cat-No.15630-080),2.5mM丙磺舒(Sigma,Cat-No.P-8761),0.1％BSA(Sigma,Cat-No.A-7906),11mM葡萄糖(Sigma,Cat-No.G-7528)
化合物稀释细节:
为了得到100μM的最高最终试验浓度，将24μL 10mM化合物储备液(在DMSO中制得)直接加入到576μL FLIPR缓冲液中。将试验化合物用FLIPR缓冲液稀释(用Biomek 2000自动移液器)，得到下面的稀释系列:基质、1.00x10-4M、1.00x10-5、3.16x10-6、1.00x10-6、3.16x10-7、1.00x10-7、3.16x10-8。
试验和分析:
用max-min统计数值(从由添加刺激性抗体造成的峰减去静息基线)，用Molecular Devices FLIPR控制和统计输出软件来报告钙的分子内增加。用非线性曲线拟合(GraphPad Prism软件)来测定IC50。
小鼠胶原-诱导的关节炎(mCIA)
在第0天，在尾巴根部或后背的一些点上，用II型胶原在完全弗氏佐剂(CFA)中的乳剂对小鼠进行注射(i.d.)。在胶原免疫后，动物在约21-35天时出现关节炎。在第21天，通过全身施用位于不完全弗氏佐剂(IFA；i.d.)中的胶原来使关节炎的发生同步(激发)。在第20天之后，每天检查动物是否出现轻度关节炎(得分为1或2；见下面的评分说明)，这是激发的信号。在激发后，对小鼠进行评分并用候选治疗剂以规定的时间(通常是2-3周)和给药频率每天一次(QD)或每天两次(BID)进行给药。
大鼠胶原诱导的关节炎(rCIA)
第0天，在后背的一些位置上，用牛II型胶原在不完全弗氏佐剂(CFA)中的乳剂对大鼠进行皮内(i.d.)注射。在大约第7天，在尾巴根部或背部的另一些部位进行胶原乳剂的加强注射(i.d.)。通常在最初的胶原注射后第12-14天观察到关节炎。从第14天往后，如下所述(关节炎的评估)那样对动物的关节炎发展进行评估。从第二次激发时开始，以预防的方式用候选的治疗剂对动物进行给药，以规定的时间(通常是2-3周)和给药频率每天一次(QD)或每天两次(BID)进行给药。
关节炎评估:
在两种模型中，都用涉及按照下述标准对4只爪子进行评估的评分系统来对爪子和肢体关节的炎症发展进行定量:
评分:1＝爪子或一个指(趾)头肿胀和/或发红
2＝两个或多个关节肿胀
3＝整个爪子肿胀，有两个以上关节涉及
4＝整个爪子和指(趾)头的严重关节炎
在第0天进行基础测量评估，并在第一个迹象或肿胀时再次开始进行评估，每周评估最多三次，直至实验结束。通过将各爪子的四种分值相加得到各小鼠的关节炎指数，给出每只动物最高为16的得分。
大鼠体内哮喘模型
用100μg位于0.2ml明矾(alum)中的OA(卵清蛋白)每周一次地对雄性Brown-Norway大鼠i.p.给药进行敏化，给药三周(第0、7和14天)。在第21天(最后一次敏化后一周)，用基质或化合物制剂对大鼠进行给药(q.d.)，在OA气雾剂激发(1％OA，45分钟)前0.5小时皮下给药，在激发后4或24小时结束。在处死时，由所有的动物收集血清和血浆，分别用于血清学和PK。插入气管插管并用PBS对肺灌洗3次。对该BAL液进行总白细胞计数和白细胞分类计数。用库尔特计数器测定细胞等分试样(20-100μl)中的总白细胞数。对于白细胞分类计数而言，将50-200μl样品在Cytospin中进行离心，将载玻片用Diff-Quik进行染色。用标准的形态学标准在光学显微镜下对单核细胞、嗜酸细胞、中心粒细胞和淋巴细胞的比例进行计数并以百分比的形式表达。与对照水平相比，在OA敏化和激发大鼠的BAL中，Btk的代表性抑制剂表现出总白细胞计数降低。
为了清楚和明了，已经用说明和实施例对前述本发明的一些细节进行了描述。对于本领域技术人员显而易见的是，可以在所附权利要求书的范围内进行变化和修饰。因此，应当清楚的是，上面的说明是用于进行说明，并不是用于进行限制。因此，本发明的范围不是参考上面的说明书来决定的，而是应当参考所附的权利要求书来决定，同时，也要求保护与该类权利要求等同的所有范围。
本申请中所列举的所有专利、专利申请和公开物都在与各个专利、专利申请或公开物被单独指明的程度相同的程度上被全部引入作为参考用于所有目的。

Claims (27)

1.式I的化合物或其可药用的盐，
其中:
是单键或双键；
X是CH、CH2或N；
R是H、-R1、-R1-R2-R3、-R1-R3或-R2-R3；
R1是芳基、杂芳基、二环杂芳基、环烷基或杂环烷基，其各自任选地被一个或多个低级烷基、羟基、羟基低级烷基、低级烷氧基、卤素、硝基、氨基、酰氨基、氰基、氧代或低级卤代烷基取代；
R2是-C(＝O)、-C(＝O)O、-C(＝O)NR2’、-NHC(＝O)O、-C(R2’)2、-O、-S、-C(＝NH)NR2’或-S(＝O)2；
各R2’独立地是H或低级烷基；
R3是H或R4；
R4是低级烷基、低级卤代烷基、低级烷氧基、氨基、低级烷基氨基、环烷基氨基、低级二烷基氨基、芳基、芳基烷基、烷基芳基、杂芳基、烷基杂芳基、杂芳基烷基、环烷基、烷基环烷基、环烷基烷基、杂环烷基、烷基杂环烷基、杂环烷基烷基、二环环烷基、二环杂环烷基、螺环烷基、螺杂环烷基或二环螺杂环烷基，其各自任选地被一个或多个低级烷基、卤素、低级烷基氨基、低级二烷基氨基、羟基、羟基低级烷基、低级烷氧基、低级烷酰基、卤素、硝基、氨基、酰氨基、酰基、氰基、氧代、磺酰基、低级烷基磺酰基、胍基、羟基氨基、羧基、氨基甲酰基、氨基甲酸酯、卤代低级烷氧基、杂环烷基或卤代低级烷基取代，其中两个低级烷基可以一起形成一种环；
Y4是Y4a、Y4b、Y4c或Y4d；
Y4a是H或卤素；
Y4b是低级烷基，其任选地被一个或多个选自低级卤代烷基、卤素、羟基、氨基、氰基和低级烷氧基的取代基取代；
Y4c是低级环烷基，其任选地被一个或多个选自低级烷基、低级卤代烷基、卤素、羟基、氨基、氰基和低级烷氧基的取代基取代；并且
Y4d是氨基，其任选地被一个或多个低级烷基、烷氧基低级烷基或羟基低级烷基取代。
2.权利要求1的化合物，其中是双键且X是N。
3.权利要求1的化合物，其中是单键且X是CH2。
4.权利要求1-3中任意一项的化合物，其中
R是-R1-R2-R3；
R1是吡啶基；
R2是-S(＝O)2,
R3是R4；且
R4是低级烷基。
5.权利要求1-3中任意一项的化合物，其中
R是-R1-R2-R3；
R1是吡啶基；
R2是-C(CH3)2；
R3是R4；且
R4是任选地被一个或多个低级烷基取代的低级烷基氨基、低级二烷基氨基或杂环烷基。
6.权利要求1-3中任意一项的化合物，其中
R是-R1-R2-R3；
R1是苯基或吡啶基；
R2是-C(＝O)；
R3是R4；且
R4是任选地被一个或多个低级烷基取代的吗啉或哌嗪。
7.权利要求2的化合物，其中Y4是叔-丁基。
8.权利要求3的化合物，其中是双键，X是CH且Y4是
其中，Y5和Y6独立地是H、低级烷基或低级卤代烷基。
9.权利要求2的化合物，其中Y4是
其中，Y5是H、卤素、低级烷基或低级卤代烷基。
10.权利要求2的化合物，其中Y4是
其中，Y5和Y6独立地是H或低级烷基。
11.权利要求7的化合物，其中
R是-R1-R3；
R1是吡啶基或吡唑并吡嗪；
R3是R4；且
R4是任选地被取代的低级烷基、杂环烷基或烷基杂环烷基。
12.权利要求7的化合物，其中
R是-R1-R2-R3；
R1是吡啶基；
R2是-C(CH3)2；
R3是R4；且
R4是任选地被一个或多个低级烷基取代的低级烷基氨基、低级二烷基氨基或杂环烷基。
13.权利要求7的化合物，其中
R是-R1-R2-R3；
R1是吡啶基；
R2是-C(＝O)；
R3是R4；且
R4是任选地被取代的杂环烷基或二环螺杂环烷基。
14.权利要求13的化合物，其中R4是任选地被取代的吗啉或哌嗪。
15.权利要求1-14中任意一项的化合物，其选自:
2-(3-{5-[5-(2-氮杂环丁烷-1-基-1,1-二甲基-乙氧基)-吡啶-2-基氨基]-1-甲基-6-氧代-1,6-二氢-哒嗪-3-基}-2-羟基甲基-苯基)-6-叔-丁基-2H-酞嗪-1-酮；
6-叔-丁基-2-{2-羟基甲基-3-[1-甲基-5-(1'-甲基-1',2',3',4',5',6'-六氢-[3,4']联吡啶-6-基氨基)-6-氧代-1,6-二氢-哒嗪-3-基]-苯基}-2H-酞嗪-1-酮；
2-{3-[5-(5-氮杂环丁烷-1-基甲基-1-甲基-1H-吡唑-3-基氨基)-1-甲基-6-氧代-1,6-二氢-哒嗪-3-基]-2-羟基甲基-苯基}-6-叔-丁基-2H-酞嗪-1-酮；
6-叔-丁基-2-(2-羟基甲基-3-{1-甲基-5-[5-((S)-1-甲基-吡咯烷-2-基)-吡啶-2-基氨基]-6-氧代-1,6-二氢-哒嗪-3-基}-苯基)-2H-酞嗪-1-酮；
6-叔-丁基-2-(2-羟基甲基-3-{1-甲基-5-[5-((S)-1-甲基-吡咯烷-3-基)-吡啶-2-基氨基]-6-氧代-1,6-二氢-哒嗪-3-基}-苯基)-2H-酞嗪-1-酮；
6-叔-丁基-2-(2-羟基甲基-3-{1-甲基-5-[5-((R)-1-甲基-吡咯烷-3-基)-吡啶-2-基氨基]-6-氧代-1,6-二氢-哒嗪-3-基}-苯基)-2H-酞嗪-1-酮；
2-(2-{2-羟基甲基-3-[1-甲基-5-(1'-甲基-1',2',3',4',5',6'-六氢-[3,4']联吡啶-6-基氨基)-6-氧代-1,6-二氢-哒嗪-3-基]-苯基}-1-氧代-1,2-二氢-酞嗪-6-基)-2-甲基-丙腈；
6-叔-丁基-2-{2-羟基甲基-3-[1-甲基-5-(5-甲基-4,5,6,7-四氢-吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-基氨基)-6-氧代-1,6-二氢-哒嗪-3-基]-苯基}-2H-酞嗪-1-酮；
6-叔-丁基-2-{3-[5-(1'-乙基-1',2',3',4',5',6'-六氢-[3,4']联吡啶-6-基氨基)-1-甲基-6-氧代-1,6-二氢-哒嗪-3-基]-2-羟基甲基-苯基}-2H-酞嗪-1-酮；
6-叔-丁基-2-(2-羟基甲基-3-{1-甲基-5-[5-(吗啉-4-羰基)-吡啶-2-基氨基]-6-氧代-1,6-二氢-哒嗪-3-基}-苯基)-2H-酞嗪-1-酮；
2-[2-(3-{5-[5-(2-氮杂环丁烷-1-基-1,1-二甲基-乙氧基)-吡啶-2-基氨基]-1-甲基-6-氧代-1,6-二氢-哒嗪-3-基}-2-羟基甲基-苯基)-1-氧代-1,2-二氢-酞嗪-6-基]-2-甲基-丙腈；
6-叔-丁基-2-[2-羟基甲基-3-(5-{5-[2-(3-羟基-丙基氨基)-1,1-二甲基-乙氧基]-吡啶-2-基氨基}-1-甲基-6-氧代-1,6-二氢-哒嗪-3-基)-苯基]-2H-酞嗪-1-酮；
6-叔-丁基-2-{2-羟基甲基-3-[1-甲基-5-(1'-氧杂环丁烷-3-基-1',2',3',4',5',6'-六氢-[3,4']联吡啶-6-基氨基)-6-氧代-1,6-二氢-哒嗪-3-基]-苯基}-2H-酞嗪-1-酮；
6-叔-丁基-2-[3-(5-{5-[2-(3,3-二氟-氮杂环丁烷-1-基)-1,1-二甲基-乙氧基]-吡啶-2-基氨基}-1-甲基-6-氧代-1,6-二氢-哒嗪-3-基)-2-羟基甲基-苯基]-2H-酞嗪-1-酮；和
2-(2-{2-羟基甲基-3-[1-甲基-5-(1'-甲基-1',2',3',4',5',6'-六氢-[3,4']联吡啶-6-基氨基)-6-氧代-1,6-二氢-哒嗪-3-基]-苯基}-1-氧代-1,2,3,4-四氢-异喹啉-6-基)-2-甲基-丙腈。
16.一种治疗炎性和/或自身免疫性病症的方法，其包括给需要其的患者施用治疗有效量的权利要求1-15中任意一项的化合物。
17.一种治疗炎性病症的方法，其包括给需要其的患者施用治疗有效量的权利要求1-15中任意一项的化合物。
18.一种治疗类风湿性关节炎的方法，其包括给需要其的患者施用治疗有效量的权利要求1-15中任意一项的化合物。
19.一种治疗哮喘的方法，其包括给需要其的患者施用治疗有效量的权利要求1-15中任意一项的化合物。
20.一种药物组合物，其包含权利要求1-15中任意一项的化合物以及至少一种可药用的载体、赋形剂或稀释剂。
21.权利要求1-15中任意一项的化合物在制备用于治疗炎性病症或自身免疫性病症的药物中的用途。
22.权利要求21所述的化合物的用途，其中该类病症是类风湿性关节炎或哮喘。
23.权利要求1-15中任意一项的化合物用于治疗炎性或自身免疫性病症的用途。
24.权利要求23所述的化合物的用途，其中该类病症是类风湿性关节炎或哮喘。
25.用于治疗炎性或自身免疫性病症的权利要求1-15中任意一项的化合物。
26.权利要求24的化合物，其中该类病症是类风湿性关节炎或哮喘。
27.如本文所述的化合物、方法或组合物。
CN201380047474.5A 2012-09-13 2013-09-10 布鲁顿氏酪氨酸激酶抑制剂 Pending CN104619696A (zh)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201261700373P 2012-09-13 2012-09-13
US61/700,373 2012-09-13
PCT/EP2013/068659 WO2014040965A1 (en) 2012-09-13 2013-09-10 Inhibitors of bruton's tyrosine kinase

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN104619696A true CN104619696A (zh) 2015-05-13

Family

ID=49118551

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201380047474.5A Pending CN104619696A (zh) 2012-09-13 2013-09-10 布鲁顿氏酪氨酸激酶抑制剂

Country Status (13)

Country Link
US (1) US9499548B2 (zh)
EP (1) EP2895473A1 (zh)
JP (1) JP2015531781A (zh)
KR (1) KR20150054994A (zh)
CN (1) CN104619696A (zh)
AR (1) AR092536A1 (zh)
BR (1) BR112015005361A2 (zh)
CA (1) CA2881761A1 (zh)
HK (1) HK1210461A1 (zh)
MX (1) MX2015002901A (zh)
RU (1) RU2015111133A (zh)
TW (1) TW201416361A (zh)
WO (1) WO2014040965A1 (zh)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104177338A (zh) * 2013-05-22 2014-12-03 江苏先声药物研究有限公司 一类布鲁顿激酶抑制剂
WO2022206924A1 (zh) * 2021-04-02 2022-10-06 南京明德新药研发有限公司 含氮三并环双功能化合物及其制备方法和应用

Families Citing this family (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP2882741B1 (en) 2012-08-10 2018-10-24 Boehringer Ingelheim International GmbH Heteroaromatic compounds as bruton's tyrosine kinase (btk) inhibitors
EP2920162B1 (en) * 2012-11-16 2017-04-19 F. Hoffmann-La Roche AG Inhibitors of bruton's tyrosine kinase
CN105143215B (zh) * 2013-03-05 2017-12-08 豪夫迈·罗氏有限公司 布鲁顿氏酪氨酸激酶抑制剂
CN111303159A (zh) * 2014-10-02 2020-06-19 豪夫迈·罗氏有限公司 用于治疗由布鲁顿酪氨酸激酶(btk)介导的疾病的吡唑甲酰胺化合物
WO2017123695A1 (en) * 2016-01-13 2017-07-20 Boehringer Ingelheim International Gmbh Isoquinolones as btk inhibitors
WO2020081450A1 (en) 2018-10-15 2020-04-23 Nurix Therapeutics, Inc. Bifunctional compounds for degrading btk via ubiquitin proteosome pathway
IL287049B2 (en) 2019-04-09 2025-01-01 Nurix Therapeutics Inc Trisubstituted piperidine compounds for inhibiting CBL-B, and use of a CBL-B inhibitor in combination with a cancer vaccine and/or oncolytic virus
EP3969447A1 (en) 2019-05-17 2022-03-23 Nurix Therapeutics, Inc. Cyano cyclobutyl compounds for cbl-b inhibition and uses thereof
JP2022538174A (ja) 2019-06-26 2022-08-31 ニューリックス セラピューティクス，インコーポレイテッド Ｃｂｌ－ｂ阻害のための置換ベンジル－トリアゾール化合物、及びそのさらなる使用
US20230024442A1 (en) * 2019-11-08 2023-01-26 Nurix Therapeutics, Inc. Bifunctional compounds for grading btk via ubiquitin proteosome pathway
JP2023504147A (ja) 2019-12-04 2023-02-01 ニューリックス セラピューティクス，インコーポレイテッド ユビキチンプロテオソーム経路を介したｂｔｋの分解のための二官能性化合物
WO2022217123A2 (en) 2021-04-08 2022-10-13 Nurix Therapeutics, Inc. Combination therapies with cbl-b inhibitor compounds

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2009098144A1 (en) * 2008-02-05 2009-08-13 F. Hoffmann-La Roche Ag Novel pyridinones and pyridazinones
US20090306041A1 (en) * 2008-02-05 2009-12-10 Roche Palo Alto Llc Inhibitors of Bruton's tyrosine kinase
WO2009156284A1 (en) * 2008-06-24 2009-12-30 F. Hoffmann-La Roche Ag Novel substituted pyridin-2-ones and pyridazin-3-ones
WO2010100070A1 (en) * 2009-03-02 2010-09-10 F. Hoffmann-La Roche Ag Inhibitors of bruton's tyrosine kinase
WO2012020008A1 (en) * 2010-08-12 2012-02-16 F. Hoffmann-La Roche Ag Inhibitors of bruton's tyrosine kinase

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
PE20110164A1 (es) * 2008-07-02 2011-03-28 Hoffmann La Roche Nuevas fenilpirazinonas como inhibidores de quinasa

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2009098144A1 (en) * 2008-02-05 2009-08-13 F. Hoffmann-La Roche Ag Novel pyridinones and pyridazinones
US20090306041A1 (en) * 2008-02-05 2009-12-10 Roche Palo Alto Llc Inhibitors of Bruton's tyrosine kinase
WO2009156284A1 (en) * 2008-06-24 2009-12-30 F. Hoffmann-La Roche Ag Novel substituted pyridin-2-ones and pyridazin-3-ones
WO2010100070A1 (en) * 2009-03-02 2010-09-10 F. Hoffmann-La Roche Ag Inhibitors of bruton's tyrosine kinase
WO2012020008A1 (en) * 2010-08-12 2012-02-16 F. Hoffmann-La Roche Ag Inhibitors of bruton's tyrosine kinase

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104177338A (zh) * 2013-05-22 2014-12-03 江苏先声药物研究有限公司 一类布鲁顿激酶抑制剂
CN104177338B (zh) * 2013-05-22 2018-04-03 南京勇山生物科技有限公司 一类布鲁顿激酶抑制剂
WO2022206924A1 (zh) * 2021-04-02 2022-10-06 南京明德新药研发有限公司 含氮三并环双功能化合物及其制备方法和应用

Also Published As

Publication number Publication date
AR092536A1 (es) 2015-04-22
US20150210704A1 (en) 2015-07-30
TW201416361A (zh) 2014-05-01
BR112015005361A2 (pt) 2017-07-04
MX2015002901A (es) 2015-06-03
US9499548B2 (en) 2016-11-22
EP2895473A1 (en) 2015-07-22
RU2015111133A (ru) 2016-11-10
JP2015531781A (ja) 2015-11-05
WO2014040965A1 (en) 2014-03-20
HK1210461A1 (zh) 2016-04-22
CA2881761A1 (en) 2014-03-20
KR20150054994A (ko) 2015-05-20

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN103582637B (zh) 酪氨酸激酶抑制剂
CN102083819B (zh) 作为激酶抑制剂的新型苯基吡嗪酮
CN104619696A (zh) 布鲁顿氏酪氨酸激酶抑制剂
CN102066370B (zh) 苯基-咪唑并吡啶类和哒嗪类
CN104812746B (zh) 布鲁顿氏酪氨酸激酶抑制剂
EP2744804B1 (en) Inhibitors of bruton&#39;s tyrosine kinase
CN102292329B (zh) 布鲁顿酪氨酸激酶的抑制剂
CN101932573B (zh) 吡啶酮类和哒嗪酮类
CN102066377B (zh) 苯基咪唑并吡嗪类
CA2728016C (en) Novel substituted pyridin-2-ones and pyridazin-3-ones
CN105143215B (zh) 布鲁顿氏酪氨酸激酶抑制剂
CN103998447A (zh) 布鲁顿酪氨酸激酶抑制剂
CN105814035B (zh) 布鲁顿氏酪氨酸激酶抑制剂
CN105073750A (zh) 布鲁顿氏酪氨酸激酶抑制剂
CN104837837A (zh) 作为布鲁顿氏酪氨酸激酶抑制剂的噻唑衍生物
CN105051028B (zh) 布鲁顿氏酪氨酸激酶抑制剂

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
REG Reference to a national code

Ref country code: HK

Ref legal event code: DE

Ref document number: 1210461

Country of ref document: HK

WD01 Invention patent application deemed withdrawn after publication

Application publication date: 20150513

WD01 Invention patent application deemed withdrawn after publication
REG Reference to a national code

Ref country code: HK

Ref legal event code: WD

Ref document number: 1210461

Country of ref document: HK