CN104558066A

CN104558066A - 一种熊果苷的提取方法

Info

Publication number: CN104558066A
Application number: CN201410824317.7A
Authority: CN
Inventors: 高俊丽
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 2014-12-26
Filing date: 2014-12-26
Publication date: 2015-04-29

Abstract

本发明公开一种熊果苷的提取方法，属于植物的活性成分的提取方法。本发明公开一种纯度高的熊果苷提取方法，其具体包括以下步骤：植物清洗后、干燥后经超声波粉碎加入至极性溶液中，在30~100℃温度下回流提取，合并提取液，回收提取剂，得粗产品；粗产品加入至极性溶剂中进行溶解，然后经膜过滤分离，收集滤过液，冷却，放置5~24小时，得到结晶物；然后结晶物加入至极性溶剂中溶解，用大孔树脂进行纯化处理，收集解吸液后，进行旋转蒸发、浓缩、真空冷冻干燥，得成品。本发明的提取熊果苷的方法、得到产物的纯度高，提取过程无毒、经济环保。

Description

一种熊果苷的提取方法

技术领域

本发明涉及一种从植物中提取熊果苷的方法，属于植物的活性成分的提取方法。

背景技术

熊果素(Arbutin)主要萃取自熊果(Bearberry)的叶子，一些水果和其它植物中也可以发现熊果素的存在，它具有使肌肤明亮的功效，能迅速的渗入肌肤而不影响肌肤细胞，与造成黑色素产生的酪胺酸结合，能有效的阻断酪胺酸(tyrosinase) 的活动以及麦拉宁(melanin)的生成，加速麦拉宁的分解与排除。此外，熊果素还能保护肌肤免於自由基的侵害，亲水性佳。熊果苷即为对-羟基苯-β-D-吡喃葡萄糖苷。理化指标：外观：呈白色针状结晶或粉末；含量：≥99.5%(HPLC) ；熔点：197~200(±0.5)℃；pH值：6.0~6.8；重金属：≤10ppm；对苯二酚含量：≤10ppm；比旋光度：=-64.00±1.00；红外特征峰：1515cm^-1、1220cm^-1、1050±(5-8) cm^-1。

熊果苷是源于绿色植物的天然活性物质，集“绿色植物、安全可靠”和“高效脱色”三者合谐统一于一体的皮肤脱色组份，它能迅速渗入肌肤，在不影响细胞增殖浓度的同时，能有效地抑制皮肤中的酪氨酸酶的活性，阻断黑色素的形成，通过自身与酪氨酶直接结合，加速黑色素的分解与排泄，从而减少皮肤色素沉积，祛除色斑和雀斑，而且对黑色素细胞不产生毒害性、刺激性、致敏性等副作用，同时还有杀菌、消炎的作用。它是当今流行的最为安全有效美白原料，也是二十一世纪的理想皮肤美白祛斑活性剂。

其主要用途是用于高级化妆品中，可配制成护肤霜，祛斑霜、高级珍珠膏等，既能美容护肤，又能消炎、抗刺激性。作为烧烫伤药原料：熊果苷是新型烧烫伤药主要成分，特点是快速止痛，消炎力强，迅速消除红肿，愈合快，不留疤痕。作为剂型：喷射或涂抹。也可以作为肠道消炎用药原料：杀菌、消炎效果好，无毒副作用。

植物提取从植物中提取的一般为β-熊果苷。熊果苷的制备方法主要包括有机合成法、酶转化法、植物组织培养法和天然产物提取法等。

发明内容

本发明涉及一种熊果苷的提取方法，尤其是从植物中进行提取的方法。其具体由以下步骤组成：

植物清洗、干燥后经超声波粉碎后加入至极性溶剂中，在30~100℃温度下回流提取，合并提取液，回收提取剂，得粗产品；

粗产品在极性溶剂进行溶解，在50~70℃下经膜过滤分离，收集滤过液，冷却，放置5~24小时，得到结晶物；

上述结晶物加入至极性溶剂中溶解，然后用大孔树脂进行进一步纯化，收集解吸液，进行旋转蒸发、浓缩、真空冷冻干燥，得成品。

具体的，上述植物越桔属植物，如蓝莓、越桔梨树；木犀科植物，如女贞子。

具体的，上述超声波粉碎后加入至极性溶液为甲醇和水的混合溶液，其中甲醇︰水=1︰7；回流提取的温度为30~70℃。其中萃取剂也可以为甲醇与乙醇和水的混合溶液，这三组分的体积比为甲醇︰乙醇︰水=0.1~0.7︰1~3︰1~5。其中萃取剂也可以为体积分数为5%~50%的乙醇。其中极性溶剂的加入量为1~7ml/1g(植物干燥后重量)。

具体的，上述粗产品在极性溶剂中溶解的溶剂为甲醇、正己烷或乙醇与水的混合。优选的溶解溶剂为甲醇、乙醇和水的体积比为：甲醇︰正己烷︰乙醇︰水=0~0.5︰0~0.4︰0.5~2︰2~4。其中极性溶剂的添加量为粗产品重量的0.9~2.5倍。

具体的，上述大孔树脂类型为AB-8、X-5、HP-20、HPD-400、HPD-400A或HPD-450。优选的，上述大孔树脂为HPD-400、HPD-400A或HPD-450。

具体的，上述大孔树脂提纯时用10%~50%(v/v)乙醇进行洗脱，洗脱液的加入量为结晶物的20~30倍。

超声波是一种弹性机械波，利用超声振动能量，可以改变物质组织结构、状态、功能及加速这些改变的过程。若将其运用在固液萃取过程中，则可使细胞周围和细胞内产生环流，从而提高细胞壁和细胞膜的通透性，起到强化萃取过程、有利于细胞内有效成分浸出的作用。超声法在植物有效成分提取中，已经被较广泛的应用。

本发明的优点在于先采取超声波粉碎，然后加入至极性溶剂中进行提取，最后采用大孔树脂进行进一步纯化，最后得到的成品中熊果苷纯度高、收率好，提取过程安全、无毒，适合大规模化提取。

具体实施方式

实施例1

梨树树叶清洗后、干燥后经超声波粉碎4分钟得粉末300g，粉末加入至有机溶剂和水的混合溶液(甲醇30ml、水400ml)，在50℃温度下回流提取两次，第一次提取时间为1.5小时，第二次提取时间为0.5小时，合并两次提取液，回收提取剂，干燥使其中溶剂含量为2%得粗产品。将粗产品加入至水和甲醇的极性溶剂进行溶解，其中水150ml、甲醇20ml在55℃下经膜过滤分离，收集滤过液，冷却，放置12小时，得到结晶析出。上述结晶物加入至5%的乙醇溶液中进行溶解，然后用HPD-400A大孔树脂进行进一步纯化，用10%、300ml的乙醇洗脱，收集解吸液，旋转蒸发、浓缩、最后经真空冷冻干燥，得成品，得到的粉末状熊果苷的纯度为99.5%。

实施例2

蓝莓果清洗后、干燥使得果实表面水分0.5%，经榨汁、超声波粉碎处理30秒，果汁浆液100g加入溶液(含有甲醇10ml、水150ml)，在50~70℃温度下回流提取三次，第一次提取时间为1.5小时，第二次提取时间为0.5小时，第三次提取时间为1.0小时，合并三次提取液，回收提取剂，干燥使其其中溶液含量为1%得粗产品。将粗产品加入至20%(v/v)的乙醇溶剂300ml进行溶解，在50℃下经膜过滤分离，收集滤过液，冷却，放置15小时，得到结晶析出。上述结晶物加入至10ml乙醇、20ml甲醇和250ml的蒸馏水中进行溶解，然后用HPD-400大孔树脂进行进一步纯化，用10%、500ml的乙醇洗脱，收集解吸液，旋转蒸发、浓缩、最后经真空冷冻干燥，得成品，得到的粉末状熊果苷的纯度为99.7%。

实施例3

女贞子叶清洗后、干燥后经超声波粉碎2分钟得粉末200g，粉末加入至有机溶剂和水的混合溶液(甲醇10ml、乙醇50ml和水300ml)，在50℃温度下回流提取三次，第一次提取时间为1小时，第二次提取时间为0.5小时，第三次提取时间为0.5小时，合并三次提取液，回收提取剂，干燥使其中溶剂含量1.5%得粗产品。将粗产品加入至水、正己烷和乙醇的极性溶剂进行溶解，其中水150ml、正己烷20ml和乙醇30ml在45℃下经膜过滤分离，收集滤过液，冷却，放置15小时，得到结晶析出。上述结晶物加入至5%的乙醇溶液中进行溶解，然后用HPD-400大孔树脂进行进一步纯化，用20%、400ml的乙醇洗脱，收集解吸液，旋转蒸发、浓缩、最后经真空冷冻干燥，得成品，得到的粉末状熊果苷的纯度为99.7%。

上述实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对本发明的构思和保护范围进行限定，本领域的普通技术人员对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离技术方案的宗旨和范围，其均应涵盖在本发明的权利要求范围中。

Claims

1.一种熊果苷提取方法，其特征在于：其包括以下步骤，植物清洗后、干燥后经超声波粉碎后加入至极性溶液中，在30~100℃温度下回流提取，合并提取液，回收提取剂，得粗产品；

粗产品在极性溶剂溶解，在50~70℃下经膜过滤分离，收集滤过液，冷却，放置5~24小时，得到结晶物；

结晶物加入至极性溶剂中溶解，然后用大孔树脂进行纯化，收集解吸液，然后旋转蒸发、浓缩、真空冷冻干燥，得成品。

2.根据权利要求1所述的一种熊果苷提取方法，其特征在于：所述植物为蓝莓果实、梨树叶或女贞子。

3.根据权利要求1所述的一种熊果苷提取方法，其特征在于：所述超声波粉碎后加入至极性溶液为甲醇、乙醇或水中一种或几种混合。

4.根据权利要求1所述的一种熊果苷提取方法，其特征在于：所述粗产品在极性溶剂中溶解的溶剂为甲醇、正己烷或乙醇与水的混合。

5.根据权利要求1所述的一种熊果苷提取方法，其特征在于：所述大孔树脂为AB-8、X-5、 HP-20 、HPD-400、HPD-400A或HPD-450。

6.根据权利要求1所述的一种熊果苷提取方法，其特征在于：所述大孔树脂为HPD-400、HPD-400A或HPD-450。