CN104513171B

CN104513171B - 一种玛咖酰胺的合成方法及其用途

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Publication number: CN104513171B
Application number: CN201310462602.4A
Authority: CN
Inventors: 赵兵; 陈金金; 赵庆生
Original assignee: Institute of Process Engineering of CAS
Current assignee: Institute of Process Engineering of CAS
Priority date: 2013-09-30
Filing date: 2013-09-30
Publication date: 2017-09-01
Anticipated expiration: 2033-09-30
Also published as: CN104513171A

Abstract

本发明涉及一种玛咖酰胺的合成方法，所述方法为：以脂肪酸，和苄胺或间甲氧基苄胺为反应原料，在已经溶解有HOAt、EDC·HCl及DIPEA的二氯甲烷溶液中混合，搅拌进行反应，然后将反应产物水洗，将水不溶物干燥即得玛咖酰胺。本发明所述合成玛咖酰胺的方法，步骤简单，原料易得，操作条件易控，产物无需纯化纯度即可达95%以上；为工业化合成玛咖酰胺提供了基础；另外，本发明合成的玛咖酰胺具有提高男性生育能力和治疗男性性功能障碍的作用，为玛咖酰胺的应用提供了市场前景。

Description

一种玛咖酰胺的合成方法及其用途

技术领域

本发明属于生物制药领域，涉及一种玛咖酰胺的合成方法及其用途，特别涉及一种无需纯化步骤的玛咖酰胺的合成方法以及通过该方法制备得到的玛咖酰胺的用途。

背景技术

玛咖（Lepidium meyenii Walp.）为十字花科独荇菜属一年生草本植物，原产南美洲海拔3500～4500m的安第斯山脉。我国于2002年开始在云南丽江引种种植，目前已经成为全球最大的玛咖种植基地。玛咖具有丰富的营养价值与药用价值。研究表明玛咖具有提高人畜生育能力、改善性功能、抑制前列腺增大、抗疲劳、抗抑郁、改善骨质酥松、提高记忆力等作用。

玛咖酰胺（Macamides）为苄胺（或甲氧基苄胺）与脂肪酸通过酰胺键结合的，目前仅在玛咖中发现的一系列化合物，其基本结构为其中R为H基或甲氧基，R’为饱和或不饱和的直链烷烃，或者含有酮基的饱和或不饱和的直链烷烃。

玛咖生长环境要求苛刻，产量低，玛咖中玛咖酰胺的含量极低（＜0.2%），且玛咖中组分复杂，使得以玛咖为原料，生化分离制备玛咖酰胺的方法因为分离纯化困难，原料来源局限，无法大规模制备等受到限制。因此，通过化学合成方式得到玛咖酰胺，解决了其原料资源匮乏，纯化步骤溶剂浪费，玛咖原料的利用率低等问题。

现有技术中，有报道以苄胺和棕榈酰氯合成玛咖酰胺，但由于脂肪酸酰氯原料的限制，无法合成多种玛咖酰胺；有报道以苄胺或甲氧基苄胺和脂肪酸在二环己基碳二亚胺启动吡咯烷基吡啶催化作用下合成玛咖酰胺，但其产物中玛咖酰胺的纯度低。

因此，本领域亟待开发一种合成步骤少，反应条件简单，无原料限制，产物纯度高的玛咖酰胺的合成方法。

发明内容

本发明的目的之一在于提供一种合成步骤少，反应条件简单，无原料限制，产物纯度高的玛咖酰胺的合成方法。

本发明是通过如下技术方案实现的：

一种玛咖酰胺的合成方法，其特征在于，所述方法为：

以脂肪酸，和苄胺或间甲氧基苄胺为反应原料，在已经溶解有HOAt（1-羟基-7-偶氮苯并三氮唑）、EDC·HCl（1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐）及DIPEA（N,N'-二异丙基乙胺）的二氯甲烷溶液中混合，搅拌进行反应，然后将反应产物水洗，将水不溶物干燥即得玛咖酰胺。

本发明提供的反应通过一步就可以合成玛咖酰胺，反应原料易于获得，且反应之后的副产物为水溶性，因此无需复杂的纯化过程，水洗后，水不溶物干燥即可获得纯度较高的玛咖酰胺。本发明所述方法制备得到的玛咖酰胺的纯度在95%以上。

本发明所述反应液中，HOAt、EDC·HCl、DIPEA、苄胺或甲氧基苄胺，以及脂肪酸的摩尔比为（1～10）:（1～10）:（1～10）:（1～10）:1，典型但非限制性的有2:3:2:1:1、1:2:3:4:1、5:6:8:9:1、3:7:9:10:1、1:5:3:8:1等；优选（1～3）：（1～4）:（1～4）:（1～3）:1，进一步优选3:4:6:2:2。

所述反应液中，反应原料质量与二氯甲烷体积比m:v为（0.5～50）:100，例如:0.7:100、1.3:100、2.3:100、4.8:100、9:100、16:100、31:100、38:100、45:100、49:100，优选（10～20）:100，进一步地优选15:100。

本发明所述脂肪酸为直链的饱和或不饱和的脂肪酸，优选自软脂酸、硬脂酸、油酸、亚油酸、亚麻酸、5氧-6反,8反-十八碳二烯酸中的任意1种或至少2种的组合，所述组合例如软脂酸和亚麻酸的组合，5氧-6反,8反-十八碳二烯酸和硬脂酸的组合，油酸和亚麻酸的组合，油酸、亚油酸和软脂酸的组合，和的组合，硬脂酸、油酸、亚油酸和亚麻酸的组合，软脂酸、硬脂酸、油酸和5氧-6反,8反-十八碳二烯酸的组合等。

本发明所述反应的温度为10～40℃，例如13℃、18℃、24℃、26℃、30℃、33℃、36℃、39℃等，优选15～35℃，更优选20～30℃，最优选30℃。

本发明所述搅拌进行反应至反应液中的溶剂挥干，优选搅拌进行反应的时间为0.5～20h，例如0.5h、1h、7h、10h、12h、16h、19h等，进一步优选6～12h，特别优选12h。

本发明所述干燥的方式选自烘干、风干或氮吹。

在本发明的合成过程中，当脂肪酸为软脂酸时，得到的玛咖酰胺为N-苄基-十六碳酰胺（N-benzyl-hexadecanamide），具体结构为其分子式为C₂₃H₃₉NO；

当脂肪酸为硬脂酸时，得到的玛咖酰胺为N-苄基-十八碳酰胺（N-benzyl-octadecanamide），具体结构为其分子式为C₂₅H₄₃NO；

当脂肪酸为油酸时，得到的玛咖酰胺为N-苄基-9顺-油酸酰胺（N-benzyl-9Z-octadecenamide），具体结构为其分子式为C₂₅H₄₁NO；

当脂肪酸为亚油酸时，得到的玛咖酰胺为N-苄基-9顺,12顺-亚油酸酰胺（N-benzyl-9Z,12Z-octadecadienamide），具体结构为其分子式为C₂₅H₃₉NO；

当脂肪酸为亚麻酸时，得到的玛咖酰胺为N-苄基-9顺,12顺,15顺-亚麻酸酰胺（N-benzyl-9Z,12Z,15Z-octadecatrienamide），具体结构为其分子式为C₂₅H₃₇NO；

当脂肪酸为5氧-6反,8反-十八碳二烯酸时，得到的玛咖酰胺为N-苄基-5氧-6反,8反-十八碳二烯酸酰胺（N-benzyl-5-oxo-6E,8E-octadecadienamide），具体结构为其分子式为C₂₅H₃₇NO₂。

当脂肪酸为亚油酸，与间甲氧基苄胺反应时，得到的玛咖酰胺为N-间甲氧苄基-9顺，12顺-亚油酸酰胺（N-(m-methoxybenzyl)-9Z,12Z-octadecadienamide），具体结构为其分子式为C₂₆H₄₁NO₂；

当脂肪酸为亚麻酸，与间甲氧基苄胺反应时，得到的玛咖酰胺为N-间甲氧苄基-9顺,12顺,15顺-亚麻酸酰胺（N-(m-methoxybenzyl)-9Z,12Z，15Z-octadecadienamide），具体结构为其分子式为C₂₆H₃₉NO₂；

本发明的目的之二是提供一种如目的之一所述的合成方法制备得到的玛咖酰胺的用途，其特征在于，所述玛咖酰胺用于提高男性生育能力，或用于治疗男性性功能障碍。

典型但非限制性地，本发明所述的玛咖酰胺的合成方法包括如下步骤：

将0.075mol HOAt，0.1mol EDC·HCl，0.15mol DIPEA加入150mL二氯甲烷中搅拌均匀，加入0.05mol脂肪酸，再加入0.05mol的苄胺，40℃搅拌反应液进行反应，20h反应液溶剂挥杆，加水洗涤产物，过滤后将水不溶物真空干燥，即得玛咖酰胺；

或者，将0.02mol HOAt，0.02mol EDC·HCl，0.03mol DIPEA加入30mL二氯甲烷中搅拌均匀，加入0.01mol脂肪酸，再加入0.01mol间甲氧基苄胺，室温下过夜搅拌反应液进行反应，反应液溶剂挥杆，加水洗涤产物，三氯甲烷萃取水不溶物，氮吹至萃取层体积不再减少，即得玛咖酰胺。

与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：

本发明所述合成玛咖酰胺的方法，步骤简单，原料易得，操作条件易控，产物无需纯化纯度即可达95%以上；为工业化合成玛咖酰胺提供了基础；另外，本发明合成的玛咖酰胺具有提高男性生育能力和治疗男性性功能障碍的作用，为玛咖酰胺的应用提供了市场前景。

具体实施方式

为更好地说明本发明，便于理解本发明的技术方案，本发明的典型但非限制性的实施例如下：

实施例1

一种一步法合成玛咖酰胺——N-苄基-十六碳酰胺的方法：

分别称取0.01mol HOAt，0.01mol EDC·HCl和0.01mol DIPEA于7.3mL DCM（二氯甲烷）中，再加入0.01mol苄胺，0.01mol软脂酸，反应原料与DCM比为50%（w/v），于10℃条件下过夜搅拌；加入去离子水50mL，室温下搅拌30min，过滤并真空干燥得产物；

性能测试：

红外：FT/IR-660红外仪，峰值为V_max=3303(N-H)，2917，2849，1639(C=O)，1549（N-C），1454(N-C=O)，730和696（苯环）cm^-1；

质谱：Thermo的LCQ DECAXP离子肼质谱，m/z346.2；

核磁：Bruker AVANCE III600核磁仪中¹H谱(600MHz,CDCl₃)，δ=2.20(t,J=7.65Hz,2H,H=2)，δ=1.65(t,J=7.05Hz,2H,H=3)，δ=1.26(s,br,24H,H=4-15)，δ=0.88(t,J=6.75Hz,3H,H=16)，δ=4.435(d,J=7.65Hz,2H,H=1`)，δ=7.29(m,5H,H=3`-7`)，δ=5.73(s,1H,N-H)。

由此，可以确认本实施例制备得到的玛咖酰胺为N-苄基-十六碳酰胺，其结构式如下所示：

N-苄基-十六碳酰胺（N-benzyl-hexadecanamide，C₂₃H₃₉NO）。

实施例2

一种一步法化学合成玛咖酰胺——N-苄基-十八碳酰胺的方法：

分别称取0.1mol HOAt，0.1mol EDC·HCl和0.1mol DIPEA于2730mL DCM中，再加入0.1mol苄胺，0.01mol硬脂酸，反应原料与DCM比为0.5%（w/v）于40℃条件下搅拌过夜，旋蒸干溶剂；加入去离子水200mL，室温下搅拌30min，过滤并真空干燥得产物；

性能测试：

红外：FT/IR-660红外仪，峰值为V_max=3306（N-H），2918，2849，1639（C=O），1552（N-C），1455（N-C=O），1428，743，730和699（苯环）cm^-1；

质谱：Thermo的LCQ DECAXP离子肼质谱，m/z374.3；

核磁：Bruker AVANCE III600核磁仪中¹H谱(600MHz,CDCl₃)，δ=2.20(t,J=7.65Hz,2H,H=2)，δ=1.65(t,J=7.05Hz,2H,H=3)，δ=1.29(s,br,24H,H=4-17)，δ=0.88(t,J=6.75Hz,3H,H=18)，δ=4.44(d,J=7.65Hz,2H,H=1`)，δ=7.29(m,5H,H=3`-7`)，δ=5.723(s,1H,N-H)。

由此，可以确认本实施例制备得到的玛咖酰胺为N-苄基-十八碳酰胺，其结构式如下所示：

N-苄基-十八碳酰胺（N-benzyl-octadecanamide，C₂₅H₄₃NO）。

实施例3

一种一步法化学合成玛咖酰胺——N-苄基-9顺-油酸酰胺的方法：

分别称取0.015mol HOAt，0.02mol EDC·HCl和0.03mol DIPEA于30mLDCM中，再加入0.01mol苄胺，0.01mol油酸，于30℃条件下搅拌12h；加入去离子水50mL，室温下搅拌30min，过滤并真空干燥得产物；

性能测试：

红外：FT/IR-660红外仪，V_max=3299（N-H），3002（C=C-H），2919，2849，1640（C=O），1554（N-C），1463.98（N-C=O），725和696（苯环）；

质谱：Thermo的LCQ DECAXP离子肼质谱，m/z372.3；

核磁：Bruker AVANCE III600核磁仪中¹H谱(600MHz,CDCl₃)，δ=2.21(t,J=7,65Hz,2H,H=2)，δ=1.66(m,J=6,45Hz,2H,H=3)，δ=1.28(s,br,8H,H=4-7)，δ=2.047(m,J=3,90Hz,4H,H=8,11)，δ=5.34(m,J=2,00Hz,2H,H=9,10)，δ=1.30(s,br,12H,H=12-17)，δ=0.879(t,J=6,60Hz,3H,H=18)，δ=4,13(q,J=7,10Hz,2H,H=1`)，δ=7,319(m,5H,H=3`-7`)，δ=5,65(s,1H,N-H)。

由此，可以确认本实施例制备得到的玛咖酰胺为N-苄基-油酸酰胺，其结构式如下所示：

N-苄基-油酸酰胺（N-benzyl-9Z-octadecenamide，C₂₅H₄₁NO）。

实施例4

一种一步法化学合成玛咖酰胺——N-苄基-9顺,12顺-亚油酸酰胺的方法：

分别称取0.015mol HOAt，0.02mol EDC·HCl和0.03mol DIPEA于30mLDCM中，再加入0.01mol苄胺，0.01mol亚油酸，于25℃条件下过夜搅拌；加入去离子水50mL，室温下搅拌30min，过滤并真空干燥得产物；

性能测试：

红外：FT/IR-660红外仪，V_max=3302（N-H），3064，3007（C=C-H），2920，2850，1642（C=O），1552（N-C），1453（N-C=O），1417，720和696（苯环）cm^-1；

质谱：Thermo的LCQ DECAXP离子肼质谱，m/z370.3；

核磁：Bruker AVANCE III600核磁仪中1H谱(600MHz,CDCl₃)，δ=2.20(t,2H,2)，δ=1.66(s,3H,3)，δ=1.32(m,14H,4-7,15-17)，δ=2.04(m,4H,8,14)，δ=5.35(m,4H,9,10,12,13)，δ=2.77(t,J=6.8Hz,2H,11)，δ=0.89(t,J=7.0Hz,3H,18)，δ=4.44(d,J=5.7Hz,2H,1’)，δ=7.30(m,5H,H=3`-7`)，δ=5.72(s,1H,N-H)。

由此，可以确认本实施例制备得到的玛咖酰胺为N-苄基-9顺,12顺-亚油酸酰胺，其结构式如下所示：

N-苄基-9顺,12顺-亚油酸酰胺，其结构式如下所示：

N-苄基-9顺,12顺-亚油酸酰胺（N-benzyl-9Z,12Z-octadecadienamide，C₂₅H₃₉NO）。

实施例5

一种一步法化学合成玛咖酰胺——N-间甲氧苄基-9顺,12顺-亚油酸酰胺的方法：

分别称取0.02mol HOAt，0.02mol EDC·HCl和0.02mol DIPEA于30mL DCM中，再加入0.01mol苄胺，0.01mol亚油酸，于40℃条件下搅拌30min，旋蒸干溶剂；加入去离子水50mL，室温下搅拌30min，挥干DCM，加入三氯甲烷萃取，萃取层氮吹至体积不再减少得产物；

性能测试：

红外：FT/IR-660红外仪，V_max=3290（N-H），3064，3006（C=C-H），2929，2850，1632（C=O），1554（N-C），1464（N-C=O），776，696（甲氧基苯环）cm^-1；

质谱：Thermo的LCQ DECAXP离子肼质谱，m/z400.3；

核磁：Bruker AVANCE III600核磁仪中1H谱(600MHz,CDCl₃)，δ=2.20(t,2H,2)，δ=1.66(s,3H,3)，δ=1.32(m,14H,4-7,15-17)，δ=2.04(m,4H,8,14)，δ=5.35(m,4H,9,10,12,13)，δ=2.77(t,J=6.8Hz,2H,11)，δ=0.89(t,J=7.0Hz,3H,18)，δ=4.44(d,J=5.7Hz,2H,1’)，δ=7.01(m,3H,H=3’,5’,7’)，δ=7.20（s,1H,6’），δ=3.82(t,3H,OMe)，δ=5.72(s,1H,N-H)。

由此，可以确认本实施例制备得到的玛咖酰胺为N-间甲氧苄基-9顺,12顺-亚油酸酰胺，其结构式如下所示：

N-间甲氧苄基-9顺,12顺-亚油酸酰胺（N-(m-methoxybenzyl)-9Z,12Z-octadecadienamide，C₂₆H₄₁NO₂）。

实施例6

一种一步法化学合成玛咖酰胺——N-苄基-9顺,12顺,15顺-亚麻酸酰胺的方法：

分别称取0.02mol HOAt，0.02mol EDC·HCl和0.02mol DIPEA于30mL DCM中，再加入0.01mol苄胺，0.01mol亚麻酸，于15℃条件下20h搅拌；加入去离子水50mL，室温下搅拌30min，过滤产物于真空干燥得产物；

性能测试：

红外：FT/IR-660红外仪，V_max=3302（N-H），3064，3006（C=C-H），2920，2849，2850，1639（C=O），1551（N-C），1453（N-C=O），1417，720和696（苯环）cm^-1；

质谱：Thermo的LCQ DECAXP离子肼质谱，m/z368.3；

核磁：Bruker AVANCE III600核磁仪中1H谱(600MHz,CDCl₃)，δ=7.20（s,1H,6’），δ=7.01(m,3H,H=3’,5’,7’)，δ=3.82(t,3H,OMe)，δ=5.76(s,1H,N-H)，δ=5.35(m,4H,9,10,12,13,15,16)，δ=4.443(d,J=5.7Hz,2H,1’)，δ=2.778(t,J=6.8Hz,2H,11,14)，δ=2.20(t,2H,2)，δ=2.04(m,4H,8,14)，δ=1.64(m,3H,3)，δ=1.31(m,14H,4-7)，δ=0.97(t,J=7.5HZ,3H,H=18)。

由此，可以确认本实施例制备得到的玛咖酰胺为N-苄基-9顺,12顺,15顺-亚麻酸酰胺，其结构式如下所示：

N-苄基-9顺,12顺,15顺-亚麻酸酰胺（N-benzyl-9Z,12Z,15Z-octadecatrienamide，C₂₅H₃₇NO）。

实施例7

一种一步法化学合成玛咖酰胺——N-间甲氧苄基-9顺,12顺,15顺-亚麻酸酰胺的方法：

分别称取0.02mol HOAt，0.02mol EDC·HCl和0.02mol DIPEA于30mL DCM中，再加入0.01mol间甲氧基苄胺，0.01mol亚麻酸，于室温下过夜搅拌；加入去离子水50mL，室温下搅拌30min，加入三氯甲烷萃取，萃取层氮吹至体积不再减少得产物；

性能测试：

红外：FT/IR-660红外仪，V_max=3302（N-H），3064，3006（C=C-H），2920，2849，2850，1639（C=O），1551（N-C），1453（N-C=O），1417，776和696（甲氧基苯环）cm^-1；

质谱：Thermo的LCQ DECAXP离子肼质谱，m/z398.3；

核磁：Bruker AVANCE III600核磁仪中1H谱(600MHz,CDCl₃)，δ=7.21（s,1H,6’），δ=7.01(m,3H,H=3’,5’,7’)，δ=3.82(t,3H,OMe)，δ=5.76(s,1H，N-H)，δ=5.35(m,4H,9,10,12,13,15,16)，δ=4.443(d,J=5.7Hz,2H,1’)，δ=2.778(t,J=6.8Hz,2H,11,14)，δ=2.20(t,2H,2)，δ=2.04(m,4H,8,14)，δ=1.64(m,3H,3)，δ=1.31(m,14H,4-7)，δ=0.97(t,J=7.5HZ,3H,H=18)。

由此，可以确认本实施例制备得到的N-间甲氧苄基-9顺,12顺,15顺-亚麻酸酰胺，其结构式如下所示：

N-间甲氧苄基-9顺,12顺,15顺-亚麻酸酰胺（N-(m-methoxybenzyl)-9Z,12Z,15Z-octadecatrienamide，C₂₆H₃₉NO₂）。

实施例8

一种一步法化学合成玛咖酰胺——N-苄基-5氧-6反，8反-十八碳二烯酸酰胺的方法：

分别称取0.02mol HOAt，0.02mol EDC·HCl和0.02mol DIPEA于30mL DCM中，再加入0.01间甲氧基苄胺，0.01mol N-苄基-5氧-6反,8反-十八碳二烯酸，于室温下过夜搅拌；加入去离子水50mL，室温下搅拌30min，加入三氯甲烷萃取，萃取层氮吹至体积不再减少得产物；

性能测试：

红外：FT/IR-660红外仪，V_max=3311（N-H），2928，2845，1639（C=O），1545（N-C），1239（N-C=O），1000，731和697（苯环）cm^-1；

质谱：Thermo的LCQ DECAXP离子肼质谱，m/z384.3；

核磁：Bruker AVANCE III600核磁仪中1H谱(600MHz,CDCl₃)，δ=7.26(m,3H,H=3’-7’)，δ=7.09(ddd,J=3.0,9.7,15.4Hz.1H,7)，δ=6.13(m,2H,8,9)，δ=6.04(d,J=15.4Hz,1H,6)，δ=5.76(s,1H,N-H)，δ=4.41(d,J=5.6Hz,2H,1’)，δ=1.29(m,12H,11-16)，δ=1.24(m,2H,17)，δ=2.13(m,2H,10)，δ=2.17(m,2H,2)，δ=1.61(m,3H,3)，δ=2.50(t,J=7.3Hz,2H,4)，δ=0.87(t,J=7.0Hz,3H,H=18)。

由此，可以确认本实施例制备得到的N-苄基-5氧-6反，8反-十八碳二烯酸酰胺，其结构式如下所示：

N-苄基-5氧-6反，8反-十八碳二烯酸酰胺（N-benzyl-5-oxo-6E,8E-octadecadienamide，C₂₅H₃₇NO₂）。

应用实例1玛咖酰胺对昆明种小鼠抗疲劳作用的影响

选五周龄昆明种小鼠，随机分为10组，每组9只，分别为对照组（生理盐水），各实施例制备得到的玛咖酰胺组（玛咖酰胺浓度为2.0mg/10mL），和玛咖酰胺混合物组（混合物浓度为2.0mg/10mL），所述玛咖酰胺混合物为15%N-苄基-9顺,12顺-亚油酸酰胺和85%N-苄基-9顺,12顺,15顺-亚麻酸酰胺的混合物；

对每组的昆明种小鼠每日灌胃1次，灌胃体积为10mL/kg体重（即灌胃剂量为2.0mg/kg），各组连续给药7天，最后一次灌胃1h后，将小鼠置于水深40cm，水温25℃的大盆中，尾部负重自身重量的10%，记录小鼠自游泳开始至下沉10s内不再游出水面的时间（X±SEM）（n=9）；结果见表1：

表1玛咖酰胺对昆明小鼠游泳时间的影响

注：与空白对照组比较，*P<0.05，**P<0.01。

实验结果表明本发明合成的玛咖酰胺能够明显延长小鼠负重游泳时间，具有抗疲劳作用。

应用实例2玛咖酰胺对大鼠交配能力的影响

选取雄性SD大鼠进行去势手术后恢复5天，随机分为10组，每组6只，分别为空白对照组（生理盐水），各实施例制备得到的玛咖酰胺组（玛咖酰胺浓度为2.0mg/10mL），和玛咖酰胺混合物组（混合物浓度为2.0mg/10mL），所述玛咖酰胺为15%N-苄基-9顺,12顺-亚油酸酰胺和85%N-苄基-9顺,12顺,15顺-亚麻酸酰胺的混合物；

对每组的SD大鼠每日灌胃1次，灌胃体积为10mL/kg体重（即灌胃剂量为2.0mg/kg），连续灌胃21天，自由取食和饮水；第21天灌胃后30min将每1只雄性大鼠与2只处女雌性大鼠置于一笼，观察3h内交配次数（X±SEM）（n=6）。结果见表2：

表2玛咖酰胺对雄性大鼠交配能力的影响

注：与空白对照组比较，*P<0.05，**P<0.01。

实验结果表明合成玛咖酰胺能明显提高雄性大鼠交配能力。

应用实例3玛咖酰胺对SD大鼠精子发生的影响

选取三月龄SD大鼠，随机分为10组，每组6只，分别为对照组（生理盐水），各实施例制备得到的玛咖酰胺组（玛咖酰胺浓度为2.0mg/10mL），和玛咖酰胺混合物组（混合物浓度为2.0mg/10mL），所述玛咖酰胺为15%N-苄基-9顺,12顺-亚油酸酰胺和85%N-苄基-9顺,12顺,15顺-亚麻酸酰胺的混合物；

对每组的SD大鼠每日灌胃1次，灌胃体积为10mL/kg体重（即灌胃剂量为2.0mg/kg），各组连续灌胃7天，自由取食和饮水，末次灌胃后24h乙醚处死，分别测定其日精子产量、附睾精子数（X±SEM）（n=6），结果见表3：

表3：玛咖酰胺对SD大鼠精子发生的影响

注：与空白对照组比较，*P<0.05，**P<0.01。

实验结果表明合成玛咖酰胺明显增加SD大鼠日精子产量及附睾精子数，但对精子能动性无显著影响。

应用实施例4玛咖酰胺对性功能障碍患者的临床疗效观察

对36名性功能障碍并自愿受试者进行了预备临床试验以检验合成玛咖酰胺的临床效果。被试者平均年龄为40±5.9岁，发病期间为4.6个月。将志愿者随机分为两组，A组（给予玛咖酰胺精片，含玛咖酰胺10mg/粒，2粒/次，每日1次），B组（给予金匮肾气丸，20粒（4g）/次，每日2次），各口服1个月。受试者在服药前后按国际勃起功能指数评分表-5（IIEF-5）评定ED轻重程度分别填写性功能询问表，随机分为2组各18例，两组病情轻重分级程度比较无显著差异（P>0.05）。所述玛咖酰胺精片中含有15%N-苄基-9顺,12顺-亚油酸酰胺和85%N-苄基-9顺,12顺,15顺-亚麻酸酰胺。所述金匮肾气丸为北京同仁堂制药。疗效观察结果见表4：

表4：玛咖酰胺对性功能障碍患者的临床疗效观察

注：国际勃起功能指数评分表-5（IIEF-5）参照刘照旭,范医东.性功能障碍的诊断与治疗[M].济南:山东科学出版社,2002.387.

实验组总有效率为94%，对照组总有效率为77%，两组总有效率比较，差异有显著性意义（P<0.05），实验组优于对照组，玛咖酰胺对性功能障碍患者具有显著的疗效。

应用实施例5玛咖酰胺对性功能障碍患者的临床疗效观察

按照实施例1-8合成的玛咖酰胺，将其混合得到玛咖酰胺混合物，对性功能障碍患者进行临床疗效观察

对36名性功能障碍并自愿受试者进行了预备临床试验以检验合成玛咖酰胺的临床效果。被试者平均年龄为40±5.9岁，发病期间为5个月。将志愿者随机分为两组，A组（给予玛咖酰胺精片，含玛咖酰胺10mg/粒，2粒/次，1次/日），B组（给予金匮肾气丸，20粒（4g）/次，2次/日），各口服1个月。受试者在服药前后按国际勃起功能指数评分表-5（IIEF-5）评定ED轻重程度分别填写性功能询问表，随机分为2组各18例，两组病情轻重分级程度比较无显著差异（P>0.05）。所述玛咖酰胺精片中含有本发明实施例1～8制备得到的玛咖酰胺，且8种玛咖酰胺的质量比为：实施例1:实施例2:实施例3:实施例4:实施例5:实施例6:实施例7:实施例8为1:1:2:2:2:3:3:1。所述B组金匮肾气丸为北京同仁堂制药。疗效观察结果见表5：

表5：玛咖酰胺对性功能障碍患者的临床疗效观察

由应用实施了1～5可以看出，本发明合成的玛咖酰胺对于抗疲劳、改善性功能，提高雄性生育能力具有有益的效果。

应该注意到并理解，在不脱离后附的权利要求所要求的本发明的精神和范围的情况下，能够对上述详细描述的本发明做出各种修改和改进。因此，要求保护的技术方案的范围不受所给出的任何特定示范教导的限制。

申请人声明，本发明通过上述实施例来说明本发明的详细方法，但本发明并不局限于上述详细方法，即不意味着本发明必须依赖上述详细方法才能实施。所属技术领域的技术人员应该明了，对本发明的任何改进，对本发明产品各原料的等效替换及辅助成分的添加、具体方式的选择等，均落在本发明的保护范围和公开范围之内。

Claims

1.一种无需纯化纯度达95％以上的玛咖酰胺合成方法，其特征在于，所述方法为：

以脂肪酸，和苄胺或间甲氧基苄胺为反应原料，在已经溶解有HOAt、EDC·HCl及DIPEA的二氯甲烷溶液中混合，搅拌进行反应，然后将反应产物水洗，将水不溶物干燥即得玛咖酰胺；

所述反应液中，HOAt、EDC·HCl、DIPEA、苄胺或甲氧基苄胺，以及脂肪酸的摩尔比为(1～3)∶(1～4)∶(1～4)∶(1～3)∶1；

所述反应的温度为10～40℃；

反应原料质量与二氯甲烷体积比m∶v为(0.5～50)∶100；

所述脂肪酸为软脂酸、硬脂酸、油酸、亚油酸、亚麻酸、5氧-6反，8反-十八碳二烯酸中的任意1种或至少2种的组合。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述反应液中，HOAt、EDC·HCl、DIPEA、苄胺或甲氧基苄胺，以及脂肪酸的摩尔比为3∶4∶6∶2∶2。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述反应液中，反应原料质量与二氯甲烷体积比m∶v为(10～20)∶100。

4.如权利要求3所述的方法，其特征在于，所述反应液中，反应原料质量与二氯甲烷体积比m∶v为15∶100。

5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述反应的温度为15～35℃。

6.如权利要求5所述的方法，其特征在于，所述反应的温度为20～30℃。

7.如权利要求6所述的方法，其特征在于，所述反应的温度为30℃。

8.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述搅拌进行反应至反应液中的溶剂挥干。

9.如权利要求8所述的方法，其特征在于，所述搅拌进行反应的时间为0.2～20h。

10.如权利要求9所述的方法，其特征在于，所述搅拌进行反应的时间为6～12h。

11.如权利要求10所述的方法，其特征在于，所述搅拌进行反应的时间为12h。

12.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述干燥的方式选自烘干、风干或氮吹。

13.如权利要求1所述的方法，其特征在于，当脂肪酸为软脂酸时，得到的玛咖酰胺为N-苄基-十六碳酰胺；

当脂肪酸为硬脂酸时，得到的玛咖酰胺为N-苄基-十八碳酰胺；

当脂肪酸为油酸时，得到的玛咖酰胺为N-苄基-9顺-油酸酰胺；

当脂肪酸为亚油酸时，得到的玛咖酰胺为N-苄基-9顺，12顺-亚油酸酰胺；

当脂肪酸为亚麻酸时，得到的玛咖酰胺为N-苄基-9顺，12顺，15顺-亚麻酸酰胺；

当脂肪酸为5氧-6反，8反-十八碳二烯酸时，得到的玛咖酰胺为N-苄基-5氧-6反，8反-十八碳二烯酸酰胺；

当脂肪酸为亚油酸，与间甲氧基苄胺反应时，得到的玛咖酰胺为N-间甲氧苄基-9顺，12顺-亚油酸酰胺；

当脂肪酸为亚麻酸，与间甲氧基苄胺反应时，得到的玛咖酰胺为N-间甲氧苄基-9顺，12顺，15顺-亚麻酸酰胺。