CN104072627A - 一种独角莲多糖提取物的制备方法 - Google Patents
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Abstract
一种独角莲多糖提取物的制备方法，涉及一种多糖提取物的制备方法，具体包括以下制备步骤：向干燥的独角莲根茎粉末中加入1-10%重量比的复合酶和3-15重量比的水超声波条件下进行酶解；超声波条件下进行提取\抽滤；再通过离心机浓缩,采用70-95％浓度的乙醇对上述浓缩液进行搅拌混合，醇沉6-18小时，在3000转/分转速下离心5-20分钟，收集离心杯底部多糖；干燥，得独角莲多糖提取物产品。本发明工艺操作简单实用，应用该工艺提取的独角莲多糖节省提取时间，提取率高，提取物具有显著的抗酪氨酸激酶、抗氧化和抗肿瘤等生物活性。
Description
技术领域
本发明涉及一种多糖提取物的制备方法，特别是涉及一种独角莲多糖提取物的制备方法。
背景技术
独角莲(Typhonium giganteum Engl.) 为天南星科(Araceae) 犁头尖属( Typhonium Schott) 植物, 是中国特有的一种植物。独角莲主要产于河南、四川、陕西等地，现全国各地亦多栽培，东北地区产量极高，且价格较低廉。《民间草药》、《中药大辞典》记载，独角莲球茎供药用，逐寒湿、祛风痰、镇痉、治中风痰壅，口眼歪斜、破伤风、治跌打损伤、淋巴结核。迄今为止，对这种植物的研究仍较少，仅限于民间偏方使用，对其有效活性成分的研究及应用也处于开发阶段。
多糖是一种广泛存在于动物细胞膜和植物、微生物细胞壁中的天然大分子物质，是一种重要的生物体能量资源和构成材料，同时还参与细胞的多种活动。研究表明，许多植物多糖具有免疫调节、抗肿瘤、降血糖、抗辐射和延缓衰老等生物活性。
根据资料查询和本专利申请人试验研究证明，从独角莲中提取的独角莲多糖具有显著提高免疫力、抗肿瘤、抗氧化等功能。独角莲多糖是纯天然物质，可以通过食品添加剂、颗粒冲剂、口服液、胶囊、滴丸、软胶囊等形式制备成保健品或药品。本专利申请人发表的论文介绍了使用水提醇沉法提取独角莲多糖，Sevag法除蛋白的纯化方法，但该提取方法存在提取时间长，耗能高、活性成分提取物收率低等问题。
发明内容
本发明的目的在于提供一种独角莲多糖提取物的制备方法，该方法包括材料预处理、超声提取或微波提取、浓缩、醇沉、收集、干燥、包装保存等，应用该工艺提取的独角莲多糖节省提取时间，提取率高，提取物具有显著的抗酪氨酸激酶、抗氧化和抗肿瘤等生物活性。
本发明的目的是通过以下技术方案实现的：
一种独角莲多糖提取物的制备方法，所述方法利用复合酶在超声条件下对药材进行酶解、再进行超声提取、浓缩、醇沉、收集、干燥制得，具体包括以下制备步骤：
1）向干燥的独角莲根茎粉末中加入1-10%重量比的复合酶和3-15重量比的水，在30-90℃下，25KHz-100KHz的超声波条件下进行酶解0.5-5h，酶解结束后加热灭活复合酶；
2）25KHz-100KHz的超声波条件下进行1-4次提取，每次1-5h，合并提取液进行抽滤；再通过离心机在2000-4000转/分的条件下离心5-20分钟，将处理物进行固液分离，弃固形物后对上清液进行浓缩；
3）上清液进行减压浓缩，浓缩至原体积的1/4-1/5即可合并提取液；
4）采用70-95％浓度的乙醇对上述浓缩液进行搅拌混合，醇沉6-18小时，在3000转/分转速下离心5-20分钟，收集离心杯底部多糖；
5）干燥，得独角莲多糖提取物产品。
所述的一种独角莲多糖提取物的制备方法，所述复合酶是木瓜蛋白酶、纤维素酶、果胶酶、酸性蛋白酶、角质酶、多酞聚糖酶和淀粉酶的任意两种或多种混合物。
本发明的优点与效果是：
本发明提供了一种安全、环保、高效的独角莲多糖提取方法, 该方法提取率高、纯度高,使用超声波复合酶法提取独角莲多糖，包括材料预处理、超声提取或微波提取、浓缩、醇沉、收集、干燥、包装保存等工艺步骤,该工艺操作简单实用，应用该工艺提取的独角莲多糖节省提取时间，提取率高，提取物具有显著的抗酪氨酸激酶、抗氧化和抗肿瘤等生物活性。
具体实施方式
下面结合实施例，对本发明作进一步详述。
下述实施例中所用试剂均为市售产品，下面结合实施例对发明进行详细说明。
实施例1：
将复合酶（0.5g木瓜蛋白酶、0.5g纤维素酶、和0.5g淀粉酶）加到50g干燥的独角莲根茎粉末中，加入水200ml，在25KHz的超声波发生器中，30℃下，超声酶解2h，酶解结束后，在100℃下灭酶1h。选用频率为100KHz的超声波条件，对上述经预处理过的提取材料进行提取2次，每次1h，合并提取液，通过离心机在3000转/分的条件下离心10分钟，将处理物进行固液分离，弃固形物后对上清液进行浓缩；在60℃对收集上清液进行减压浓缩，浓缩至原体积的1/5即可；采用95％浓度的乙醇对上述浓缩液进行搅拌混合，浓缩液醇沉12小时后，在3000转/分转速下离心10分钟，收集离心杯底部多糖；将收集的多糖置真空干燥箱内，在50℃真空干燥；收率3.1%，多糖含量38.9%。
实施例2：
将复合酶（1.0g纤维素酶、和0.5g果胶酶）加到50g干燥的独角莲根茎粉末中，加入水250ml，在25KHz的超声波发生器中，30℃下，超声酶解2h，酶解结束后，在100℃下灭酶1h。选用频率为80KHz的超声波条件，对上述经预处理过的提取材料进行提取2次，每次1h，合并提取液，通过离心机在3000转/分的条件下离心10分钟，将处理物进行固液分离，弃固形物后对上清液进行浓缩；在60℃对收集上清液进行减压浓缩，浓缩至原体积的1/4即可；采用80％浓度的乙醇对上述浓缩液进行搅拌混合，浓缩液醇沉10小时后，在3000转/分转速下离心10分钟，收集离心杯底部多糖；将收集的多糖置真空干燥箱内，在50℃真空干燥；收率3.5%，多糖含量32.4%。
实施例3：
将复合酶（1.0g纤维素酶、和0.5g淀粉酶）加到50g干燥的独角莲根茎粉末中，加入水500ml，在25KHz的超声波发生器中，30℃下，超声酶解4h，酶解结束后，在100℃下灭酶1h。选用频率为100KHz的超声波条件，对上述经预处理过的提取材料进行提取2次，每次1h，合并提取液，通过离心机在3000转/分的条件下离心10分钟，将处理物进行固液分离，弃固形物后对上清液进行浓缩；在60℃对收集上清液进行减压浓缩，浓缩至原体积的1/4即可；采用90％浓度的乙醇对上述浓缩液进行搅拌混合，浓缩液醇沉12小时后，在3000转/分转速下离心10分钟，收集离心杯底部多糖；将收集的多糖置真空干燥箱内，在50℃真空干燥；收率3.3%，多糖含量34.4%。
实施例4：
将复合酶（0.5g酸性蛋白酶和0.5g多酞聚糖酶）加到50g干燥的独角莲根茎粉末中，加入水300ml，在25KHz的超声波发生器中，30℃下，超声酶解1h-4h，酶解结束后，在100℃下灭酶0.5-1h。选用频率为100KHz的超声波条件，对上述经预处理过的提取材料进行提取2次，每次1h，合并提取液，通过离心机在3000转/分的条件下离心15分钟，将处理物进行固液分离，弃固形物后对上清液进行浓缩；在60℃对收集上清液进行减压浓缩，浓缩至原体积的1/4即可；采用,75％浓度的乙醇对上述浓缩液进行搅拌混合，浓缩液醇沉12小时后，在3000转/分转速下离心10分钟，收集离心杯底部多糖；将收集的多糖置真空干燥箱内，在50℃真空干燥；收率3.1%，多糖含量33.8%。
Claims (2)
1.一种独角莲多糖提取物的制备方法，其特征在于，所述方法利用复合酶在超声条件下对药材进行酶解、再进行超声提取、浓缩、醇沉、收集、干燥制得，具体包括以下制备步骤：
1）向干燥的独角莲根茎粉末中加入1-10%重量比的复合酶和3-15重量比的水，在30-90℃下，25KHz-100KHz的超声波条件下进行酶解0.5-5h，酶解结束后加热灭活复合酶；
2）25KHz-100KHz的超声波条件下进行1-4次提取，每次1-5h，合并提取液进行抽滤；再通过离心机在2000-4000转/分的条件下离心5-20分钟，将处理物进行固液分离，弃固形物后对上清液进行浓缩；
3）上清液进行减压浓缩，浓缩至原体积的1/4-1/5即可合并提取液；
4）采用70-95％浓度的乙醇对上述浓缩液进行搅拌混合，醇沉6-18小时，在3000转/分转速下离心5-20分钟，收集离心杯底部多糖；
5）干燥，得独角莲多糖提取物产品。
2.根据权利要求1所述的一种独角莲多糖提取物的制备方法，其特征在于，所述复合酶是木瓜蛋白酶、纤维素酶、果胶酶、酸性蛋白酶、角质酶、多酞聚糖酶和淀粉酶的任意两种或多种混合物。
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