CN103992224B - 一种从杜仲叶中提取绿原酸的方法 - Google Patents
一种从杜仲叶中提取绿原酸的方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN103992224B CN103992224B CN201410186187.9A CN201410186187A CN103992224B CN 103992224 B CN103992224 B CN 103992224B CN 201410186187 A CN201410186187 A CN 201410186187A CN 103992224 B CN103992224 B CN 103992224B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- chlorogenic acid
- extracting
- water
- pretreatment
- temperature
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- CWVRJTMFETXNAD-FWCWNIRPSA-N 3-O-Caffeoylquinic acid Natural products O[C@H]1[C@@H](O)C[C@@](O)(C(O)=O)C[C@H]1OC(=O)\C=C\C1=CC=C(O)C(O)=C1 CWVRJTMFETXNAD-FWCWNIRPSA-N 0.000 title claims abstract description 93
- PZIRUHCJZBGLDY-UHFFFAOYSA-N Caffeoylquinic acid Natural products CC(CCC(=O)C(C)C1C(=O)CC2C3CC(O)C4CC(O)CCC4(C)C3CCC12C)C(=O)O PZIRUHCJZBGLDY-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 93
- CWVRJTMFETXNAD-JUHZACGLSA-N chlorogenic acid Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)C[C@@](O)(C(O)=O)C[C@H]1OC(=O)\C=C\C1=CC=C(O)C(O)=C1 CWVRJTMFETXNAD-JUHZACGLSA-N 0.000 title claims abstract description 93
- CWVRJTMFETXNAD-KLZCAUPSSA-N Neochlorogenin-saeure Natural products O[C@H]1C[C@@](O)(C[C@@H](OC(=O)C=Cc2ccc(O)c(O)c2)[C@@H]1O)C(=O)O CWVRJTMFETXNAD-KLZCAUPSSA-N 0.000 title claims abstract description 91
- 235000001368 chlorogenic acid Nutrition 0.000 title claims abstract description 91
- 229940074393 chlorogenic acid Drugs 0.000 title claims abstract description 91
- FFQSDFBBSXGVKF-KHSQJDLVSA-N chlorogenic acid Natural products O[C@@H]1C[C@](O)(C[C@@H](CC(=O)C=Cc2ccc(O)c(O)c2)[C@@H]1O)C(=O)O FFQSDFBBSXGVKF-KHSQJDLVSA-N 0.000 title claims abstract description 91
- BMRSEYFENKXDIS-KLZCAUPSSA-N cis-3-O-p-coumaroylquinic acid Natural products O[C@H]1C[C@@](O)(C[C@@H](OC(=O)C=Cc2ccc(O)cc2)[C@@H]1O)C(=O)O BMRSEYFENKXDIS-KLZCAUPSSA-N 0.000 title claims abstract description 91
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 41
- 241000208688 Eucommia Species 0.000 title claims abstract description 9
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 49
- 239000011347 resin Substances 0.000 claims abstract description 48
- 229920005989 resin Polymers 0.000 claims abstract description 48
- 239000012043 crude product Substances 0.000 claims abstract description 26
- 239000003463 adsorbent Substances 0.000 claims abstract description 20
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims abstract description 5
- 238000003809 water extraction Methods 0.000 claims abstract description 4
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 38
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims description 24
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims description 23
- 238000011068 loading method Methods 0.000 claims description 20
- 229920001661 Chitosan Polymers 0.000 claims description 19
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 15
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims description 14
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 claims description 11
- 239000012530 fluid Substances 0.000 claims description 11
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 10
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims description 9
- 238000010828 elution Methods 0.000 claims description 4
- 239000012528 membrane Substances 0.000 claims description 3
- 238000004062 sedimentation Methods 0.000 claims description 3
- 230000008719 thickening Effects 0.000 claims description 3
- 239000003480 eluent Substances 0.000 abstract description 19
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 abstract description 12
- 230000000274 adsorptive effect Effects 0.000 abstract description 10
- 238000001035 drying Methods 0.000 abstract description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 abstract description 3
- 239000006286 aqueous extract Substances 0.000 abstract description 2
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 abstract description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 46
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 28
- 239000000047 product Substances 0.000 description 20
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 9
- 238000005374 membrane filtration Methods 0.000 description 8
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 8
- 241000208689 Eucommia ulmoides Species 0.000 description 7
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 5
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 4
- 238000011160 research Methods 0.000 description 4
- QAIPRVGONGVQAS-DUXPYHPUSA-N trans-caffeic acid Chemical compound OC(=O)\C=C\C1=CC=C(O)C(O)=C1 QAIPRVGONGVQAS-DUXPYHPUSA-N 0.000 description 4
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 3
- 239000003292 glue Substances 0.000 description 3
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 3
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 3
- AAWZDTNXLSGCEK-LNVDRNJUSA-N (3r,5r)-1,3,4,5-tetrahydroxycyclohexane-1-carboxylic acid Chemical compound O[C@@H]1CC(O)(C(O)=O)C[C@@H](O)C1O AAWZDTNXLSGCEK-LNVDRNJUSA-N 0.000 description 2
- ACEAELOMUCBPJP-UHFFFAOYSA-N (E)-3,4,5-trihydroxycinnamic acid Natural products OC(=O)C=CC1=CC(O)=C(O)C(O)=C1 ACEAELOMUCBPJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CWVRJTMFETXNAD-GMZLATJGSA-N 5-Caffeoyl quinic acid Natural products O[C@H]1C[C@](O)(C[C@H](OC(=O)C=Cc2ccc(O)c(O)c2)[C@@H]1O)C(=O)O CWVRJTMFETXNAD-GMZLATJGSA-N 0.000 description 2
- AAWZDTNXLSGCEK-UHFFFAOYSA-N Cordycepinsaeure Natural products OC1CC(O)(C(O)=O)CC(O)C1O AAWZDTNXLSGCEK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000899 Gutta-Percha Substances 0.000 description 2
- 240000000342 Palaquium gutta Species 0.000 description 2
- AAWZDTNXLSGCEK-ZHQZDSKASA-N Quinic acid Natural products O[C@H]1CC(O)(C(O)=O)C[C@H](O)C1O AAWZDTNXLSGCEK-ZHQZDSKASA-N 0.000 description 2
- 235000004883 caffeic acid Nutrition 0.000 description 2
- 229940074360 caffeic acid Drugs 0.000 description 2
- QAIPRVGONGVQAS-UHFFFAOYSA-N cis-caffeic acid Natural products OC(=O)C=CC1=CC=C(O)C(O)=C1 QAIPRVGONGVQAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 229920000588 gutta-percha Polymers 0.000 description 2
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 2
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- CWVRJTMFETXNAD-KJOPMHRFSA-N (1r,3s,4s,5s)-3-[(e)-3-(3,4-dihydroxyphenyl)prop-2-enoyl]oxy-1,4,5-trihydroxycyclohexane-1-carboxylic acid Chemical compound O[C@H]1[C@@H](O)C[C@](O)(C(O)=O)C[C@@H]1OC(=O)\C=C\C1=CC=C(O)C(O)=C1 CWVRJTMFETXNAD-KJOPMHRFSA-N 0.000 description 1
- 230000002745 absorbent Effects 0.000 description 1
- 239000002250 absorbent Substances 0.000 description 1
- 230000004103 aerobic respiration Effects 0.000 description 1
- 239000003513 alkali Substances 0.000 description 1
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 1
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 230000036772 blood pressure Effects 0.000 description 1
- 210000002421 cell wall Anatomy 0.000 description 1
- 210000003169 central nervous system Anatomy 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 230000002279 cholagogic effect Effects 0.000 description 1
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 1
- YTJJRAWFHJBAMT-UHFFFAOYSA-N depside Natural products OC(=O)CC1=C(O)C=C(O)C=C1OC(=O)C1=CC=C(O)C(O)=C1 YTJJRAWFHJBAMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004821 distillation Methods 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- ZYBWTEQKHIADDQ-UHFFFAOYSA-N ethanol;methanol Chemical compound OC.CCO ZYBWTEQKHIADDQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002440 hepatic effect Effects 0.000 description 1
- 238000005286 illumination Methods 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 238000005342 ion exchange Methods 0.000 description 1
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 1
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 1
- 239000003208 petroleum Substances 0.000 description 1
- 229930015704 phenylpropanoid Natural products 0.000 description 1
- 125000001474 phenylpropanoid group Chemical group 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 150000003254 radicals Chemical class 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- JXOHGGNKMLTUBP-HSUXUTPPSA-N shikimic acid Chemical compound O[C@@H]1CC(C(O)=O)=C[C@@H](O)[C@H]1O JXOHGGNKMLTUBP-HSUXUTPPSA-N 0.000 description 1
- JXOHGGNKMLTUBP-JKUQZMGJSA-N shikimic acid Natural products O[C@@H]1CC(C(O)=O)=C[C@H](O)[C@@H]1O JXOHGGNKMLTUBP-JKUQZMGJSA-N 0.000 description 1
- 238000000638 solvent extraction Methods 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 1
- 238000005728 strengthening Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
- C07C67/00—Preparation of carboxylic acid esters
- C07C67/48—Separation; Purification; Stabilisation; Use of additives
- C07C67/56—Separation; Purification; Stabilisation; Use of additives by solid-liquid treatment; by chemisorption
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
- C07C69/00—Esters of carboxylic acids; Esters of carbonic or haloformic acids
- C07C69/66—Esters of carboxylic acids having esterified carboxylic groups bound to acyclic carbon atoms and having any of the groups OH, O—metal, —CHO, keto, ether, acyloxy, groups, groups, or in the acid moiety
- C07C69/73—Esters of carboxylic acids having esterified carboxylic groups bound to acyclic carbon atoms and having any of the groups OH, O—metal, —CHO, keto, ether, acyloxy, groups, groups, or in the acid moiety of unsaturated acids
- C07C69/732—Esters of carboxylic acids having esterified carboxylic groups bound to acyclic carbon atoms and having any of the groups OH, O—metal, —CHO, keto, ether, acyloxy, groups, groups, or in the acid moiety of unsaturated acids of unsaturated hydroxy carboxylic acids
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
- Tea And Coffee (AREA)
- Treatment Of Liquids With Adsorbents In General (AREA)
- Extraction Or Liquid Replacement (AREA)
- Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
Abstract
本发明提供了一种从杜仲叶中提取绿原酸的方法，它包括如下步骤：a、称取杜仲叶；b、水提取；c、预处理；d、过滤；e、上大孔吸附树脂；f、浓缩；g、干燥：喷雾干燥：进风口温度150℃‑200℃，出风口温度50℃‑90℃，即得绿原酸粗品。本发明采用水提、预处理、上大孔吸附树脂柱、浓缩干燥来制备绿原酸粗品。水提取液不经浓缩而经过预处理后直接上大孔吸附树脂进行纯化处理，解决绿原酸因浓缩在水中长时间受热不稳定导致分解的问题，同时省去浓缩工序环节缩短生产周期。此外，可通过控制不同洗脱液的浓度参数来生产20‑60％各种规格的粗品。
Description
技术领域
本发明涉及一种从杜仲叶中提取绿原酸的方法。
背景技术
绿原酸(Chlorogenic acid)是由咖啡酸(Caffeic acid)与奎尼酸(Quinic acid)组成的缩酚酸，异名咖啡单宁酸，化学名：3-O-咖啡酰奎尼酸(3-O-Caffeoylquinic acid)，分子式：C16H18O9，分子量：354.30，是植物体在有氧呼吸过程中经莽草酸途径产生的一种苯丙素类化合物。绿原酸是一种重要的生物活性物质，具有抗菌、抗病毒、增高白血球、保肝利胆、抗肿瘤、降血压、降血脂、清除自由基和兴奋中枢神经系统等作用。它是许多中药材的有效成分之一，又是某些成药的质量指标。绿原酸应用非常广泛，主要为医药、日用化工和食品等行业。绿原酸在各类植物中的存在相当普遍，但含量较高的植物并不多见。近年的研究表明，杜仲叶绿原酸含量丰富，可达1％～5％。我国杜仲林种植广泛，每年可产杜仲叶几百万吨，这为提取绿原酸提供了充足的原料基础。
目前从杜仲叶中提取绿原酸的报道较多，绿原酸的提取方法主要有有机溶剂提取法、物理强化提取法、超高压提取法、匀浆提取法等。如：钱骅，等，杜仲叶绿原酸的提取分离，中国野生植物资源，第20卷第4期，它是将杜仲叶干粉用70％乙醇(pH＝2.5)，90℃提取3次,每次提取半小时,料液比分别为1:12,1:10,1:8。提取液浓缩至一定体积，预处理后上样。同时比较了17种大孔吸附树脂对杜仲叶绿原酸的吸附、洗脱性能和吸附动力学特性；筛选试验表明NKA-9是一种性能优良的吸附剂。王茜，等，杜仲叶中绿原酸提取分离工艺条件的研究，离子交换与吸附，2008，24(1):73～80，对杜仲叶绿原酸的提取分离进行研究。探讨了水以及不同浓度乙醇﹑甲醇和丙酮水溶液作为提取溶剂对绿原酸得率的影响，采用正交实验方法对影响绿原酸提取率的主要因素进行分析，并采用大孔树脂对其分离。结果表明，50℃水提绿原酸得率比较高，其得率为1.06％，从而确定水作为绿原酸提取溶剂；水提杜仲叶绿原酸的最佳工艺条件为：温度60℃，料液比1:16,pH4，提取时间3h，所筛选的GC-I树脂是吸附分离绿原酸的最佳吸附剂，吸附最佳pH值为3，吸附流速为3BV/h；本实验条件下得到粗产品纯度为30.88％，收率为76.51％。苗磊，杜仲叶中绿原酸的提取和纯化，北京化工大学，2011年6月6日，公开了首先用水对杜仲叶粉末进行绿原酸的提取,将提取液通过NKA-9大孔树脂进行纯化，蒸去溶剂得绿原酸产品；提取残渣烘干后用碱液浸提分解细胞壁，然后烘干用石油醚热回流提取杜仲胶，提取液采用冻胶法得粗胶，丙酮清洗得乳白色精胶，即为杜仲胶产品。李光锋，杜仲叶中绿原酸的提取、纯化研究，湖南农业大学，2006年10月，2.对绿原酸的稳定性进行了研究,结果表明绿原酸在60℃以内,4-6h较稳定。在碱性条件下易分解,在pH＝3的酸性条件下最稳定,绿原酸在强光照射下不稳定，因此在绿原酸的提取分离中应尽量保持在酸性、避光条件下进行。绿原酸的提取溶剂和提取方法,结果发现提取溶剂水和加热提取较好。之后采用正交试验考察了温度、时间、固液比和颗粒度4因素,对加热提取工艺进行了优化,结果表明:温度65℃,提取时间60min,固液比1:25,颗粒度为40目时较好。绿原酸的柱层析优化条件的研究。通过对吸附剂、洗脱剂等进行比较研究，结果表明以KLFC-150,树脂为吸附剂、以乙醇为洗脱剂为最优条件，以此方法分离绿原酸，纯度和收率都较高，纯度达到56.67％，收率为78.37％。
发明内容
本发明提供了一种从杜仲叶中提取绿原酸的方法。
本发明提供了一种从杜仲叶中提取绿原酸的方法，它包括如下步骤：
a、称取杜仲叶；
b、水提取：加水提取，提取温度40℃-80℃，提取时间0.5h-4.0h，提取次数1-3次，每次水用量为药材质量比的6-14倍，pH值为2-7，浸提或动态提取；
c、预处理：加入澄清剂，添加量为药材质量的0.2％-1.0％，沉降温度40℃-80℃，沉降时间0.5h-24h；
d、过滤：c步骤的预处理液通过孔径为50μm-200μm的滤膜或滤芯过滤；
e、上大孔吸附树脂：d步骤的过滤液通过非极性或弱极大孔吸附树脂，树脂柱径高比1:4-1:10；上样流速2.0-8.0BV/H，吸附量为药材质量与柱体积比1:1-1:5；水洗用量为0.5-2.0BV，水洗流速为2.0-8.0BV/H；洗脱溶剂种类为甲醇或乙醇，其浓度为10-80％，洗脱用量为1.0-6.0BV，洗脱流速2.0-8.0BV/H；
f、浓缩：浓缩温度40℃-80℃，真空度为-0.04MP--0.09MP，相对密度为1.02-1.10；
g、干燥：喷雾干燥：进风口温度150℃-200℃，出风口温度50℃-90℃，即得绿原酸粗品。
得到绿原酸粗品经过进一步精制、纯化，即得绿原酸纯品。
进一步优选地，它包括如下步骤：
a、称取杜仲叶；
b、水提取：加水提取，提取温度60℃-80℃，提取时间0.5h-1.5h，提取次数1-3次，每次水用量为药材质量比的10-14倍，pH值为6-7，浸提或动态提取；
c、预处理：加入澄清剂，添加量为药材质量的0.4％-0.8％，沉降温度50℃-70℃，沉降时间1.0h-2.0h；
d、过滤：c步骤的预处理液通过孔径为50μm-100μm的滤膜或滤芯过滤；
e、上大孔吸附树脂：d步骤的过滤液通过非极性或弱极大孔吸附树脂，树脂柱径高比1:4-1:8；上样流速3.0-5.0BV/H，吸附量为药材质量与柱体积比1:1-1:4；水洗用量为1.0-2.0BV，水洗流速为3.0-5.0BV/H；洗脱溶剂种类为甲醇或乙醇，其浓度为10％-30％，洗脱用量为4.0BV-6.0BV，洗脱流速2.0-4.0BV/H；
f、浓缩：浓缩温度50℃-70℃，真空度为-0.07MP--0.09MP，相对密度为1.03-1.05；
g、干燥：喷雾干燥：进风口温度150℃-170℃，出风口温度60℃-80℃，即得绿原酸粗品。
其中，a步骤所述的杜仲叶中含绿原酸1.0-5.0％，水分含量≤20％。
其中，c步骤所述的澄清剂种类为壳聚糖。
其中，e步骤所述的大孔吸附树脂型号为非极性或弱极性HPD-100、HPD-450、HPD-700、NKA-Ⅱ、NKA-9或LS-46；优选地，所述的大孔吸附树脂为HPD-100、HPD-450、或LS-46。
本发明采用水提、预处理、上大孔吸附树脂柱、浓缩干燥来制备绿原酸粗品。水提取液不经浓缩而经过预处理后直接上大孔吸附树脂进行纯化处理，解决绿原酸因浓缩在水中长时间受热不稳定导致分解的问题，同时省去浓缩工序环节缩短生产周期。此外，可通过控制不同洗脱液的浓度参数来生产20-60％各种规格的粗品。
具体实施方式
实施例1本发明提取绿原酸的方法
1、提取
取杜仲叶10kg(绿原酸含量＝1.0％)，用水于,40℃条件下提取3次，每次4.0h，每次水用量为60L，pH为2.0，合并两次提取液。
2、预处理
取壳聚糖100g，用1％乙酸水液配制成2％壳聚糖水液，于40℃条件下加入提取液，搅拌均匀后放置24.0h。
3、过滤
将预处理所得的料液用50μm滤膜过滤，收集滤液。
4、上大孔吸附树脂柱
(1)上样：取大孔吸附树脂HPD-100湿法装柱成径高比＝1：4树脂柱，柱体积为50L，预处理液以2.0BV/H的流速上样；
(2)水洗：用0.5BV的水以2.0BV/H的流速进行洗涤；
(3)洗脱：用1.0BV的80％甲醇溶液以2.0BV/H的流速进行洗脱，收集洗脱液；
5、浓缩
将洗脱液于温度40℃、真空度为-0.04MP条件下进行回收甲醇，并浓缩至浓缩液相对密度为1.02(25℃)；
6、喷雾干燥
将浓缩液喷雾干燥，进风口温度200℃，出风口温度90℃，即得绿原酸粗品。
7、产品特征
所得绿原酸粗品纯度为24.3％，产品得率3.2％，绿原酸转移率77.8％。
实施例2本发明提取绿原酸的方法
1、提取
取杜仲叶10kg(绿原酸含量＝3.6％)，用水于80℃条件下提取1次，提取时间0.5h，水用量为140L，pH为7.0，合并两次提取液。
2、预处理
取壳聚糖20g，用1％乙酸水液配制成2％壳聚糖水液，于80℃条件下加入提取液，搅拌均匀后放置0.5h。
3、过滤
将预处理所得的料液用200μm滤膜过滤，收集滤液。
4、上大孔吸附树脂柱
(1)上样：取大孔吸附树脂HPD-450湿法装柱成径高比＝1：10树脂柱，柱体积为10L，预处理液以,2.0BV/H的流速上样；
(2)水洗：用2.0BV的水以2.0BV/H的流速进行洗涤；
(3)洗脱：用6.0BV的10％乙醇溶液以2.0BV/H的流速进行洗脱，收集洗脱液；
5、浓缩
将洗脱液于温度80℃、真空度为-0.09MP条件下进行回收乙醇，并浓缩至浓缩液相对密度为1.10(25℃)；
6、喷雾干燥
将浓缩液喷雾干燥，进风口温度150℃，出风口温度50℃，即得绿原酸粗品。
7、产品特征
所得绿原酸粗品纯度为58.4％，产品得率4.8％，绿原酸转移率77.9％
实施例3本发明提取绿原酸的方法
1、提取
取杜仲叶10kg(绿原酸含量＝5.0％)，用水于60℃条件下提取2次，每次1.5h，每次水用量为80L，pH值为3.0，合并两次提取液。
2、预处理
取壳聚糖40g，用1％乙酸水液配制成2％壳聚糖水液，于60℃条件下加入提取液，搅拌均匀后放置12.0h。
3、过滤
将预处理所得的料液用200μm滤膜过滤，收集滤液。
4、上大孔吸附树脂柱
(1)上样：取大孔吸附树脂HPD-700湿法装柱成径高比＝1：8树脂柱，柱体积为20L，预处理液以3.0BV/H的流速上样；
(2)水洗：用1.0BV的水以3.0BV/H的流速进行洗涤；
(3)洗脱：用5.0BV的20％乙醇溶液以3.0BV/H的流速进行洗脱，收集洗脱液；
5、浓缩
将洗脱液于温度60℃、真空度为-0.08MP条件下进行回收乙醇，并浓缩至浓缩液相对密度为1.050(25℃)；
6、喷雾干燥
将浓缩液喷雾干燥，进风口温度150℃，出风口温度70℃，即得绿原酸粗品。
7、产品特征
所得绿原酸粗品纯度为52.4％，产品得率7.1％，绿原酸转移率74.4％。
实施例4本发明提取绿原酸的方法
1、提取
取杜仲叶10kg(绿原酸含量＝3.6％)，用水于60℃条件下提取2次，每次2.0h，每次水用量为100L，pH值为4.0，合并两次提取液。
2、预处理
取壳聚糖60g，用1％乙酸水液配制成2％壳聚糖水液，于60℃条件下加入提取液，搅拌均匀后放置8.0h。
3、过滤
将预处理所得的料液用50μm滤膜过滤，收集滤液。
4、上大孔吸附树脂柱
(1)上样：取大孔吸附树脂NKA-Ⅱ湿法装柱成径高比＝1：8树脂柱，柱体积为40L，预处理液以5.0BV/H的流速上样；
(2)水洗：用2.0BV的水以5.0BV/H的流速进行洗涤；
(3)洗脱：用4.0BV的30％乙醇溶液以4.0BV/H的流速进行洗脱，收集洗脱液；
5、浓缩
将洗脱液于温度70℃、真空度为-0.08MP条件下进行回收乙醇，并浓缩至浓缩液相对密度为1.06(25℃)；
6、喷雾干燥
将浓缩液喷雾干燥，进风口温度180℃，出风口温度80℃，即得绿原酸粗品。
7、产品特征
所得绿原酸粗品纯度为47.4％，产品得率5.6％，绿原酸转移率73.7％。
实施例5本发明提取绿原酸的方法
1、提取
取杜仲叶10kg(绿原酸含量＝3.6％)，用水于40℃条件下提取3次，每次4.0h，每次水用量为80L，pH值为3.0，合并两次提取液。
2、预处理
取壳聚糖100g，用1％乙酸水液配制成2％壳聚糖水液，于40℃条件下加入提取液，搅拌均匀后放置24.0h。
3、过滤
将预处理所得的料液用100μm滤膜过滤，收集滤液。
4、上大孔吸附树脂柱
(1)上样：取大孔吸附树脂NKA-9湿法装柱成径高比＝1：10树脂柱，柱体积为50L，预处理液以8.0BV/H的流速上样；
(2)水洗：用2.0BV的水以8.0BV/H的流速进行洗涤；
(3)洗脱：用6.0BV的40％乙醇溶液以8.0BV/H的流速进行洗脱，收集洗脱液；
5、浓缩
将洗脱液于温度50℃、真空度为-0.06MP条件下进行回收乙醇，并浓缩至浓缩液相对密度为1.08(25℃)；
6、喷雾干燥
将浓缩液喷雾干燥，进风口温度160℃，出风口温度60℃，即得绿原酸粗品。
7、产品特征
所得绿原酸粗品纯度为45.8％，产品得率5.9％，绿原酸转移率75.1％。
实施例6本发明提取绿原酸的方法
1、提取
取杜仲叶10kg(绿原酸含量＝3.6％)，用水于60℃条件下提取2次，每次1.5h，每次水用量为120L，pH值为6.5，合并两次提取液。
2、预处理
取壳聚糖80g，用1％乙酸水液配制成2％壳聚糖水液，于60℃条件下加入提取液，搅拌均匀后放置2.0h。
3、过滤
将预处理所得的料液用50μm滤膜过滤，收集滤液。
4、上大孔吸附树脂柱
(1)上样：取大孔吸附树脂NKA-9湿法装柱成径高比＝1：10树脂柱，柱体积为40L，预处理液以6.0BV/H的流速上样；
(2)水洗：用1.0BV的水以6.0BV/H的流速进行洗涤；
(3)洗脱：用3.0BV的50％乙醇溶液以3.0BV/H的流速进行洗脱，收集洗脱液；
5、浓缩
将洗脱液于温度60℃、真空度为-0.08MP条件下进行回收乙醇，并浓缩至浓缩液相对密度为1.045(25℃)；
6、喷雾干燥
将浓缩液喷雾干燥，进风口温度160℃，出风口温度70℃，即得绿原酸粗品。
7、产品特征
所得绿原酸粗品纯度为41.6％，产品得率6.2％，绿原酸转移率71.6％。
实施例7本发明提取绿原酸的方法
1、提取
取杜仲叶10kg(绿原酸含量＝3.6％)，用水于70℃条件下提取2次，每次1.0h，每次水用量为100L，pH值为7.0，合并两次提取液。
2、预处理
取壳聚糖60g，用1％乙酸水液配制成2％壳聚糖水液，于70℃条件下加入提取液，搅拌均匀后放置2.0h。
3、过滤
将预处理所得的料液用100μm滤膜过滤，收集滤液。
4、上大孔吸附树脂柱
(1)上样：取大孔吸附树脂LS-46湿法装柱成径高比＝1：8树脂柱，柱体积为20L，预处理液以5.0BV/H的流速上样；
(2)水洗：用1.0BV的水以5.0BV/H的流速进行洗涤；
(3)洗脱：用5.0BV的20％乙醇溶液以3.0BV/H的流速进行洗脱，收集洗脱液；
5、浓缩
将洗脱液于温度60℃、真空度为-0.08MP条件下进行回收乙醇，并浓缩至浓缩液相对密度为1.045(25℃)；
6、喷雾干燥
将浓缩液喷雾干燥，进风口温度160℃，出风口温度70℃，即得绿原酸粗品。
7、产品特征
所得绿原酸粗品纯度为55.8％，产品得率5.5％，绿原酸转移率85.3％。
对比例1提取绿原酸的方法
1、提取
取杜仲叶10kg(绿原酸含量＝3.6％)，用水于70℃条件下提取2次，每次1.0h，每次水用量为100L，pH值为7.0，合并两次提取液。
2、浓缩
将提取液于温度60℃、真空度为-0.08MP条件下进行浓缩至原液的一半；3、预处理
取壳聚糖40g，用1％乙酸水液配制成2％壳聚糖水液，于60℃条件下加入提取液，搅拌均匀后放置2.0h。
4、过滤
将预处理所得的料液用100μm滤膜过滤，收集滤液。
5、上大孔吸附树脂柱
(1)上样：取大孔吸附树脂LS-46湿法装柱成径高比＝1：8树脂柱，柱体积为20L，预处理液以5.0BV/H的流速上样；
(2)水洗：用1.0BV的水以5.0BV/H的流速进行洗涤；
(3)洗脱：用5.0BV的20％乙醇溶液以3.0BV/H的流速进行洗脱，收集洗脱液；
6、浓缩
将洗脱液于温度60℃、真空度为-0.08MP条件下进行回收乙醇，并浓缩至浓缩液相对密度为1.03(25℃)；
7、喷雾干燥
将浓缩液喷雾干燥，进风口温度160℃，出风口温度70℃，即得绿原酸粗品。
8、产品特征
所得绿原酸粗品纯度为44.6％，产品得率4.5％，绿原酸转移率55.8％。
| 实施例 | 实施1 | 实施例2 | 实施例3 | 实施例4 | 实施例5 | 实施例6 | 实施例7 | 对比例1 |
| 纯度(％) | 24.3 | 58.4 | 52.4 | 47.4 | 45.8 | 41.6 | 55.8 | 44.6 |
| 得率(％) | 3.2 | 4.8 | 7.1 | 5.6 | 5.9 | 6.2 | 5.5 | 4.5 |
| 转移率(％) | 77.8 | 77.9 | 74.4 | 73.7 | 75.1 | 71.6 | 85.3 | 55.75 |
本发明采用水作为提取溶剂，经壳聚糖澄清处理后直接上大孔吸附树脂柱，洗脱后浓缩干燥，工艺简洁，可操作性强，省去了多数工艺在上柱前的浓缩工序，缩短生产周期。可通过控制不同洗脱液的浓度参数来生产20-60％各种规格的粗品，绿原酸转移率较高，在70-90％，其中以实施例7的条件最佳。
Claims (5)
1.一种从杜仲叶中提取绿原酸的方法，其特征在于：它包括如下步骤：
a、称取杜仲叶；
b、水提取：加水提取，提取温度60℃-80℃，提取时间0.5h-1.5h，提取次数1-3次，每次水用量为药材质量比的10-14倍，pH值为6-7，浸提或动态提取；
c、预处理：加入澄清剂，添加量为药材质量的0.4％-0.8％，沉降温度50℃-70℃，沉降时间1.0h-2.0h；
d、过滤：c步骤的预处理液通过孔径为50μm-100μm的滤膜或滤芯过滤；
e、上大孔吸附树脂：d步骤的过滤液通过非极性或弱极性大孔吸附树脂，树脂柱径高比1:4-1:8；上样流速3.0-5.0BV/H，吸附量为药材质量与柱体积比1:1-1:4；水洗用量为1.0-2.0BV，水洗流速为3.0-5.0BV/H；洗脱溶剂种类为甲醇或乙醇，其浓度为10％-30％，洗脱用量为4.0BV-6.0BV，洗脱流速2.0-4.0BV/H；
f、浓缩：浓缩温度50℃-70℃，真空度为-0.07MP--0.09MP，相对密度为1.03-1.05；
g、干燥：喷雾干燥：进风口温度150℃-170℃，出风口温度60℃-80℃，即得绿原酸粗品。
2.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于：a步骤所述的杜仲叶中含绿原酸1.0-5.0％。
3.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于：c步骤所述的澄清剂种类为壳聚糖。
4.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于：e步骤所述的大孔吸附树脂型号为HPD-100、HPD-450、HPD-700、NKA-Ⅱ、NKA-9或LS-46。
5.根据权利要求4所述的提取方法，其特征在于：e步骤所述的大孔吸附树脂为HPD-100、HPD-450、或LS-46。
Priority Applications (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201410186187.9A CN103992224B (zh) | 2014-05-05 | 2014-05-05 | 一种从杜仲叶中提取绿原酸的方法 |
| JP2017510715A JP6473803B2 (ja) | 2014-05-05 | 2014-05-16 | 杜仲葉からクロロゲン酸を抽出する方法 |
| PCT/CN2014/077651 WO2015168962A1 (zh) | 2014-05-05 | 2014-05-16 | 一种从杜仲叶中提取绿原酸的方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201410186187.9A CN103992224B (zh) | 2014-05-05 | 2014-05-05 | 一种从杜仲叶中提取绿原酸的方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN103992224A CN103992224A (zh) | 2014-08-20 |
| CN103992224B true CN103992224B (zh) | 2016-08-17 |
Family
ID=51306595
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201410186187.9A Active CN103992224B (zh) | 2014-05-05 | 2014-05-05 | 一种从杜仲叶中提取绿原酸的方法 |
Country Status (3)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP6473803B2 (zh) |
| CN (1) | CN103992224B (zh) |
| WO (1) | WO2015168962A1 (zh) |
Families Citing this family (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN104478720A (zh) * | 2014-11-24 | 2015-04-01 | 成都锦汇科技有限公司 | 一种从杜仲叶提取液中纯化绿原酸的方法 |
| CN104546992A (zh) * | 2015-01-30 | 2015-04-29 | 四川九章生物科技有限公司 | 杜仲叶提取物及其制备方法和用途 |
| CN112544764A (zh) * | 2020-11-19 | 2021-03-26 | 溜溜果园集团股份有限公司 | 一种青梅制品加工过程中的锁酸工艺 |
| CN113045418A (zh) * | 2021-03-22 | 2021-06-29 | 中国科学院广州能源研究所 | 一种采用大孔吸附树脂从杜仲原料中分离绿原酸的方法 |
| CN113045794A (zh) * | 2021-05-06 | 2021-06-29 | 陕西蓝深特种树脂有限公司 | 一种从杜仲叶中提取绿原酸用大孔吸附树脂及其合成方法 |
| CN114478247B (zh) * | 2022-03-01 | 2024-07-12 | 贵州两山康瑞食品检测科技有限公司 | 一种元宝枫叶绿原酸的提取分离及纯化方法 |
| CN116396167A (zh) * | 2023-03-24 | 2023-07-07 | 齐齐哈尔医学院 | 一种低共熔溶剂体系中探头超声强化杜仲绿原酸提取、大孔树脂吸附、解吸的方法 |
| CN116655941B (zh) * | 2023-07-14 | 2024-11-19 | 北京林业大学 | 一种高效、高得率制备杜仲胶的方法 |
| CN118511993B (zh) * | 2024-05-21 | 2025-01-10 | 广州腾麟生物科技有限公司 | 一种可促进血液循环的植物提取物组合物及其应用 |
Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1273964A (zh) * | 1999-05-18 | 2000-11-22 | 孙波 | 杜仲叶制备绿原酸工艺 |
| CN101486651A (zh) * | 2009-02-10 | 2009-07-22 | 江苏省苏微微生物研究有限公司 | 一种杜仲叶中提取绿原酸的方法及其应用 |
| CN101805261A (zh) * | 2010-03-26 | 2010-08-18 | 汉中天然谷生物科技有限公司 | 一种杜仲叶制备绿原酸精品的方法 |
| CN102040519A (zh) * | 2009-10-22 | 2011-05-04 | 湖北老龙洞杜仲开发有限公司 | 一种制取杜仲叶中绿原酸的方法 |
| CN102267906A (zh) * | 2011-06-23 | 2011-12-07 | 湖南长沙远航生物制品有限公司 | 一种绿原酸的提取方法 |
Family Cites Families (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH03278817A (ja) * | 1990-03-27 | 1991-12-10 | Snow Brand Milk Prod Co Ltd | 膜分離工程の前処理法 |
| JP4955928B2 (ja) * | 2005-03-01 | 2012-06-20 | 花王株式会社 | クロロゲン酸類組成物の製造方法 |
| CN101250106B (zh) * | 2008-03-27 | 2011-05-18 | 北京市农林科学院 | 一种提取绿原酸的方法 |
-
2014
- 2014-05-05 CN CN201410186187.9A patent/CN103992224B/zh active Active
- 2014-05-16 JP JP2017510715A patent/JP6473803B2/ja active Active
- 2014-05-16 WO PCT/CN2014/077651 patent/WO2015168962A1/zh active Application Filing
Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1273964A (zh) * | 1999-05-18 | 2000-11-22 | 孙波 | 杜仲叶制备绿原酸工艺 |
| CN101486651A (zh) * | 2009-02-10 | 2009-07-22 | 江苏省苏微微生物研究有限公司 | 一种杜仲叶中提取绿原酸的方法及其应用 |
| CN102040519A (zh) * | 2009-10-22 | 2011-05-04 | 湖北老龙洞杜仲开发有限公司 | 一种制取杜仲叶中绿原酸的方法 |
| CN101805261A (zh) * | 2010-03-26 | 2010-08-18 | 汉中天然谷生物科技有限公司 | 一种杜仲叶制备绿原酸精品的方法 |
| CN102267906A (zh) * | 2011-06-23 | 2011-12-07 | 湖南长沙远航生物制品有限公司 | 一种绿原酸的提取方法 |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| 杜仲叶绿原酸分离纯化工艺比较及其抗氧化性研究;李文娜等;《中医药导报》;20111231;第17卷(第12期);第65-67页 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN103992224A (zh) | 2014-08-20 |
| JP6473803B2 (ja) | 2019-02-20 |
| JP2017520616A (ja) | 2017-07-27 |
| WO2015168962A1 (zh) | 2015-11-12 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN103992224B (zh) | 一种从杜仲叶中提取绿原酸的方法 | |
| CN103012544B (zh) | 一种从油茶籽饼粕中提取皂素和多糖的方法 | |
| CN103848740B (zh) | 一种从植物油粕中制备迷迭香酸的方法 | |
| CN106349324B (zh) | 从油橄榄叶中提取分离山楂酸的方法 | |
| CN101671294A (zh) | 一种从桑叶中连续提取分离1-脱氧野尻霉素(dnj)、黄酮的方法 | |
| CN110304993A (zh) | 色谱生产高纯度大麻二酚的方法 | |
| CN102267906B (zh) | 一种绿原酸的提取方法 | |
| CN102228515A (zh) | 一种分离和富集莲子心总黄酮和总生物碱的方法 | |
| CN102391115B (zh) | 一种膜分离柱层析联用制备金银花提取物的方法 | |
| CN101255183A (zh) | 从葫芦巴中提取原薯蓣皂甙的方法 | |
| CN108653392A (zh) | 一种琴叶榕总黄酮的提取纯化方法 | |
| CN104945450B (zh) | 一种从首乌藤中提取二苯乙烯苷的方法 | |
| CN105440095A (zh) | 一种富含β-蜕皮甾酮的露水草提取纯化方法 | |
| CN103450000A (zh) | 一种从贯叶连翘中提取金丝桃素的方法 | |
| CN113527402B (zh) | 一种从橄榄叶中同时提取橄榄苦甙、山楂酸和齐墩果酸的方法 | |
| CN106336440B (zh) | 从油橄榄叶中提取分离齐墩果酸的方法 | |
| CN106397529B (zh) | 从油橄榄果渣中提取分离山楂酸的方法 | |
| CN101638404A (zh) | 高纯度丹酚酸b、制备方法及应用 | |
| CN105418572B (zh) | 利用微波逆流提取、大孔吸附树脂吸附纯化欧洲越橘花青素的方法 | |
| CN108250052A (zh) | 从无患子科植物龙眼或荔枝中分离提取白坚木皮醇的方法 | |
| CN108210554B (zh) | 一种从甘草中分离纯化醇溶性总黄酮的方法 | |
| CN104606264A (zh) | 一种苹婆多酚的提取方法 | |
| CN1955173B (zh) | 高纯度秦皮甲素及其制备方法 | |
| CN105330707B (zh) | 一种同时分离土大黄苷和去氧土大黄苷的工业化生产技术 | |
| CN104860917A (zh) | 一种使用吸附树脂获得葡萄籽提取物的方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| CP01 | Change in the name or title of a patent holder |
Address after: 610000 No. two, No. 10 South Road, Chengdu hi tech Zone, Sichuan, China Patentee after: SICHUAN JIUZHANG BIOTECHNOLOGY CO., LTD. Address before: 610000 No. two, No. 10 South Road, Chengdu hi tech Zone, Sichuan, China Patentee before: Jiuzhang Bio-Chemical Engineering Tech. & Science Development Co., Ltd., Sichuan |
|
| CP01 | Change in the name or title of a patent holder |