CN103695495B - 一种制备(1R,4s)-(-)-2-氮杂双环[2,2,1]庚-5-烯-3-酮的方法 - Google Patents
一种制备(1R,4s)-(-)-2-氮杂双环[2,2,1]庚-5-烯-3-酮的方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN103695495B CN103695495B CN201410014076.XA CN201410014076A CN103695495B CN 103695495 B CN103695495 B CN 103695495B CN 201410014076 A CN201410014076 A CN 201410014076A CN 103695495 B CN103695495 B CN 103695495B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- azabicyclo
- hept
- biological enzyme
- ketone
- add
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 11
- DDUFYKNOXPZZIW-UHNVWZDZSA-N (1s,4r)-3-azabicyclo[2.2.1]hept-5-en-2-one Chemical compound C1[C@@H]2C(=O)N[C@H]1C=C2 DDUFYKNOXPZZIW-UHNVWZDZSA-N 0.000 title abstract description 13
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims abstract description 22
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims abstract description 7
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims abstract description 7
- 239000008055 phosphate buffer solution Substances 0.000 claims abstract description 6
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 claims abstract description 4
- IMNFDUFMRHMDMM-UHFFFAOYSA-N N-Heptane Chemical compound CCCCCCC IMNFDUFMRHMDMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 31
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 19
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 18
- 239000012065 filter cake Substances 0.000 claims description 11
- 238000003756 stirring Methods 0.000 claims description 11
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 claims description 5
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims description 5
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims description 2
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 claims 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims 1
- 239000006210 lotion Substances 0.000 claims 1
- 239000000463 material Substances 0.000 claims 1
- 238000001953 recrystallisation Methods 0.000 claims 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 abstract description 10
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 abstract description 10
- 150000003951 lactams Chemical class 0.000 abstract description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 abstract description 3
- 238000010364 biochemical engineering Methods 0.000 abstract description 2
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 abstract description 2
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 abstract description 2
- DDUFYKNOXPZZIW-UHFFFAOYSA-N 3-azabicyclo[2.2.1]hept-5-en-2-one Chemical compound C1C2C(=O)NC1C=C2 DDUFYKNOXPZZIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 244000063299 Bacillus subtilis Species 0.000 description 5
- 229960004748 abacavir Drugs 0.000 description 5
- 239000000047 product Substances 0.000 description 5
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 4
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 4
- 208000030507 AIDS Diseases 0.000 description 3
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- MCGSCOLBFJQGHM-SCZZXKLOSA-N abacavir Chemical compound C=12N=CN([C@H]3C=C[C@@H](CO)C3)C2=NC(N)=NC=1NC1CC1 MCGSCOLBFJQGHM-SCZZXKLOSA-N 0.000 description 3
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 3
- 238000004296 chiral HPLC Methods 0.000 description 2
- TVQGDYNRXLTQAP-UHFFFAOYSA-N ethyl heptanoate Chemical compound CCCCCCC(=O)OCC TVQGDYNRXLTQAP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 2
- IHLRGGLJGGTPCY-HWKANZROSA-N (e)-hept-5-en-3-one Chemical compound CCC(=O)C\C=C\C IHLRGGLJGGTPCY-HWKANZROSA-N 0.000 description 1
- 241000193830 Bacillus <bacterium> Species 0.000 description 1
- 235000014469 Bacillus subtilis Nutrition 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 238000012805 post-processing Methods 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
一种制备(1R,4S)-(-)-2-氮杂双环[2，2，1]庚-5-烯-3-酮的方法，涉及一种生物酶催化水解外消旋内酰胺制备(1R，4S)-(-)-2-氮杂双环[2，2，1]庚-5-烯-3-酮的方法，属于生物化学工程领域。具体涉及采用一种廉价的生物酶将外消旋内酰胺进行生物拆分的应的方法，由此得到手性的(1R,4S)-(-)-2-氮杂双环[2，2，1]庚-5-烯-3-酮。该反应体系为，在260g(40mmol，PH=7.0～7.5)磷酸缓冲溶液中，分别加入10～100g(±)-2-氮杂双环[2，2，1]庚-5-烯-3-酮和0.2～20g生物酶---枯草芽孢杆菌菌粉，在5～35℃反应10～48小时，转化率≥90％，产品ee值≥99.5％。由于本专利使用的生物酶成本仅为产品售价的1～3％，因此本专利具有极好的经济性和技术可行性。解决了现目前制备方法存在的生产成本高，成品价格昂贵的问题。
Description
技术领域
本发明涉及一种生物酶催化水解外消旋内酰胺制备(1R，4S)-(-)-2-氮杂双环[2，2，1]庚-5-烯-3-酮的方法，属于生物化学工程领域。
技术背景
(1R，4S)-(-)-2-氮杂双环[2，2，1]庚-5-烯-3-酮是合成抗艾滋病药物-阿巴卡韦(abacavir)最重要的原料或中间体之一，因此通过酶催化水解(或拆分)外消旋体来生产(1R，4S)-(-)-2-氮杂双环[2，2，1]庚-5-烯-3-酮在经济上具有巨大吸引力和广阔的前景。据联合国艾滋病规划署报告知，到2015年，全世界用于艾滋病防治的资金将达225亿美元；预计此后的将来用于该领域的资金仍会继续增长，因此市场前景十分光明。虽然有多种工艺能合成抗艾滋病药物-阿巴卡韦(abacavir)，但是以(1R，4S)-(-)-2-氮杂双环[2，2，1]庚-5-烯-3-酮做为重要的原料或中间体来合成阿巴卡韦一直都是最主要的生产工艺之一。正是由于这一原因，近些年来国内有过很多关于制备这种手性原料或中间体的报道，仅仅相关的专利就有好几个，例如(中国专利200710118064.1)、(中国专利200810056829.8)、(中国专利200910084258.3)等。上述各专利中基本上均采用将某种生物酶(或菌)先进行固定化，然后再去拆分外消旋体，得到所需的手性产品。但上述各专利中所采用的生物酶菌生产工艺复杂，产品价格昂贵，以至于导致成品药的价格昂贵。给消费者带来很大的经济负担。
发明内容
针对上述情况，本发明的目的是提供一种得率高且成本低的(1R，4S)-(-)-2-氮杂双环[2，2，1]庚-5-烯-3-酮的制备方法。解决现有技术存在的问题。
本发明技术方案如下：
技术配方
成分 规格 重量份比
磷酸缓冲液 PH值7.0-7.5 6-10
(±)-2-氮杂双环
[2，2，1]庚-5-烯-3-酮 1
枯草芽孢杆菌菌粉 工业级 0.02-0.2
乙酸乙酯 工业级 15-20
正庚烷 工业级 3-4
上述配方中乙酸乙酯为萃取剂，正庚烷为提纯溶剂。
制备方法
按上述技术配方所给出的比例，在磷酸缓冲溶液中，加入(±)-2-氮杂双环[2，2，1]庚-5-烯-3-酮和生物酶---枯草芽孢杆菌菌粉，在5～35℃反应10～48小时；反应结束后，用18％盐酸调反应液的PH值到7.01～7.02.，将反应液过滤，用水淋洗滤饼；合并洗液和滤液；用乙酸乙酯分三次萃取合并后的溶液；浓缩油层；使用正庚烷重结晶，将正庚烷加入釜内，加热釜内物料在80～85℃搅拌30分钟；自然冷却至室温，过滤得到ee值≥99.5％的(1R，4S)-(-)-2-氮杂双环[2，2，1]庚-5-烯-3-酮。再对反应液中的产物浓度和光学纯度的测定采用手性HPLC法分析。
手性HPLC法测定浓度和光学纯度
采用的色谱柱为Daicel OD-RH4.6*150mm5um；流动相：乙腈∶水=5∶95；流速：0.4mL／min；检测波长：225.0nm。
本发明方法简单，易于实施。采用一种用最廉价的生物酶酶一枯草芽孢杆菌，将其应用于催化水解(±)-2-氮杂双环[2，2，1]庚-5-烯-3-酮的拆分反应，以获得制备阿巴卡韦(abacavir)的关键手性中间体(1R，4S)-(-)-2-氮杂双环[2，2，1]庚-5-烯-3-酮。本工艺路线的优势在于所使用的生物酶所占的原料成本极低，仅为产品售价的1～3％；且反应及后处理步骤简单；产物(1R，4S)-(-)-2-氮杂双环[2，2，1]庚-5-烯-3-酮的对应体过量值≥99.5％。
本发明无附图
具体实施方式
实施例
1.将30g(±)-2-氮杂双环[2，2，1]庚-5-烯-3-酮加入到260g(40mmol，PH=7.5)磷酸缓冲溶液中，室温下搅拌至全溶；然后加入0.20g生物酶---枯草芽孢杆菌菌粉；在20℃搅拌反应33小时，期间取样测定，反应最终转化率≥95％，ee值≥99.5％。用18％盐酸调反应液的PH值到7.01～7.02；将反应液过滤，用水淋洗滤饼；合并洗液和滤液；用600g乙酸乙酯分三次萃取合并后的溶液；浓缩油层；将120g正庚烷加入釜内，加热釜内物料，在80～85℃条件下搅拌30分钟；自然冷却至室温；过滤釜内物料用10g正庚烷淋洗滤饼；在35～40℃下真空干燥滤饼，得到ee值≥99.5％的(1R，4S)-(-)-2-氮杂双环[2，2，1]庚-5-烯-3-酮10.6g，收率70.6％。
2。将30g(±)-2-氮杂双环[2，2，1]庚-5-烯-3-酮加入到260g(40mmol，PH=7.5)磷酸缓冲溶液中，室温下搅拌至全溶；然后加入1.00g生物酶---枯草芽孢杆菌菌粉；在20℃搅拌反应12小时，期间取样测定，反应最终转化率≥95％，ee值≥99.5％。用18％盐酸调反应液的PH值7.01～7.02；将反应液过滤，用水淋洗滤饼；合并洗液和滤液；用600g7酸乙酯分三次萃取 合并后的溶液；浓缩油层；将120g正庚烷加入釜内，加热釜内物料，在80～85℃条件下搅拌30分钟；自然冷却至室温；过滤釜内物料，用10g正庚烷淋洗滤饼；在35～40℃下真空干燥滤饼，得到ee值≥99.5％的(1R，4S)-(-)-2-氮杂双环[2，2，1]庚-5-烯-3-酮11.2g，收率74.6％。
3。将30g(±)-2-氮杂双环[2，2，1]庚-5-烯-3-酮加入到260g(40mmo1，PH=7.5)磷酸缓冲溶液中，室温下搅拌至全溶；然后加入2.00g生物酶---枯草芽孢杆菌菌粉；在30℃搅拌反应10小时，期间取样测定，反应最终转化率≥95％，ee值≥99.5％。用18％盐酸中和反应液至PH=7.01～7.02；将反应液过滤，用水淋洗滤饼；合并洗液和滤液；用600g乙酸乙酯分三次萃取合并后的溶液；浓缩油层；将120g正庚烷加入釜内，加热釜内物料在80～85℃条件下搅拌30分钟；自然冷却至室温；过滤釜内物料，用10g正庚烷淋洗滤饼；在35～40℃下真空干燥滤饼，得到ee值≥99.5％的(1R，4S)-(-)-2-氮杂双环[2，2，1]庚-5-烯-3-酮11.45g，收率76.3％。
Claims (1)
1.一种制备(1R，4s)-(-)-2-氮杂双环[2，2，1]庚-5-烯-3-酮的方法，其特征是：
技术配方
制备方法
按上述技术配方所给出的比例，在磷酸缓冲溶液中，加入(±)-2-氮杂双环[2，2，1]庚-5-烯-3-酮和枯草芽孢杆菌菌粉，在5～35℃反应10～48小时；反应结束后，用18％盐酸调反应液的PH值到7.01～7.02.，将反应液过滤，用水淋洗滤饼；合并洗液和滤液；用乙酸乙酯分三次萃取合并后的溶液；浓缩油层；使用正庚烷重结晶，就是将正庚烷加入釜内，加热釜内物料在80～85℃搅拌30分钟；自然冷却至室温，过滤得到(1R，4S)-(-)-2-氮杂双环[2，2，1]庚-5-烯-3-酮。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201410014076.XA CN103695495B (zh) | 2014-01-14 | 2014-01-14 | 一种制备(1R,4s)-(-)-2-氮杂双环[2,2,1]庚-5-烯-3-酮的方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201410014076.XA CN103695495B (zh) | 2014-01-14 | 2014-01-14 | 一种制备(1R,4s)-(-)-2-氮杂双环[2,2,1]庚-5-烯-3-酮的方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN103695495A CN103695495A (zh) | 2014-04-02 |
| CN103695495B true CN103695495B (zh) | 2014-08-27 |
Family
ID=50357158
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201410014076.XA Expired - Fee Related CN103695495B (zh) | 2014-01-14 | 2014-01-14 | 一种制备(1R,4s)-(-)-2-氮杂双环[2,2,1]庚-5-烯-3-酮的方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN103695495B (zh) |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101284811B (zh) * | 2008-06-11 | 2010-06-16 | 常州恩滋生物科技有限公司 | 阿巴卡韦的手性碳环中间体的合成方法 |
Family Cites Families (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| GB9717928D0 (en) * | 1997-08-22 | 1997-10-29 | Glaxo Group Ltd | Process for the enatioselective hydrolysis of n-derivatised lactams |
-
2014
- 2014-01-14 CN CN201410014076.XA patent/CN103695495B/zh not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101284811B (zh) * | 2008-06-11 | 2010-06-16 | 常州恩滋生物科技有限公司 | 阿巴卡韦的手性碳环中间体的合成方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN103695495A (zh) | 2014-04-02 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN103333942A (zh) | 左旋吡喹酮的合成方法 | |
| WO2014131247A1 (zh) | 合成左旋吡喹酮的方法 | |
| CN104263796A (zh) | 一种r-1-四氢萘胺的制备方法 | |
| CN104031010B (zh) | 光学活性四氢呋喃－2－甲酸的制造方法 | |
| CN104263797A (zh) | R-1-四氢萘胺的制备 | |
| CN103420881A (zh) | 一种新的药用消旋羟蛋氨酸钙的制备方法 | |
| CN103695495B (zh) | 一种制备(1R,4s)-(-)-2-氮杂双环[2,2,1]庚-5-烯-3-酮的方法 | |
| CN108395440A (zh) | 一种利用没食子酸衍生物合成鞣花酸的方法 | |
| TW200909406A (en) | Process for enantioselectively preparing optically active 4-hydroxy-2,6,6-trimethylcyclohex-2-enone derivatives | |
| CN106831639A (zh) | 头孢卡品侧链酸的制备方法 | |
| CN106749235B (zh) | 多取代喹啉并吡咯衍生物的制备方法 | |
| CN104152526B (zh) | 一种拆分制备光学纯r-1-苯乙胺的方法 | |
| CN115611858A (zh) | 一种全新的尼古丁及其衍生物的制备方法 | |
| CN108276402A (zh) | 一种盐酸莫西沙星的制备方法 | |
| CN109265385B (zh) | 一种手性催化剂的合成工艺 | |
| CN106966912B (zh) | (r)-3-氨基丁醇的制备方法 | |
| CN108203396B (zh) | 一种脑啡肽酶抑制剂的合成 | |
| CN106119307B (zh) | 一种α-酮戊二酸的制备方法 | |
| CN116514693B (zh) | 卡托普利中间体d-3-乙酰巯基-2-甲基丙酸的制备方法 | |
| CN103664729A (zh) | 一种制备l-焦谷氨酸的方法 | |
| CN104164470B (zh) | 一种拆分制备光学纯r-1-萘乙胺的方法 | |
| CN104178545B (zh) | 一种拆分制备光学纯s-2-萘乙胺的方法 | |
| JP5397706B2 (ja) | 高純度１−ベンジル−３−アミノピロリジンの製造方法 | |
| CN103193663A (zh) | Dl-对羟基苯甘氨酸的合成新工艺 | |
| CN102491919B (zh) | 去甲维拉帕米的合成方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20140827 |