CN102558278A - 三萜类化合物及其在制备抗补体药物中的用途 - Google Patents
三萜类化合物及其在制备抗补体药物中的用途 Download PDFInfo
- Publication number
- CN102558278A CN102558278A CN2010106095168A CN201010609516A CN102558278A CN 102558278 A CN102558278 A CN 102558278A CN 2010106095168 A CN2010106095168 A CN 2010106095168A CN 201010609516 A CN201010609516 A CN 201010609516A CN 102558278 A CN102558278 A CN 102558278A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- dihydroxy
- complement
- acid
- hydrogen
- olean
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 239000003814 drug Substances 0.000 title claims abstract description 18
- -1 Triterpene compound Chemical class 0.000 title claims abstract description 14
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 8
- 230000003171 anti-complementary effect Effects 0.000 title description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims abstract description 30
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 claims abstract description 21
- 230000002391 anti-complement effect Effects 0.000 claims abstract description 15
- 108010008730 anticomplement Proteins 0.000 claims abstract description 15
- 150000003648 triterpenes Chemical class 0.000 claims abstract description 15
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims abstract description 13
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims abstract description 13
- 244000179560 Prunella vulgaris Species 0.000 claims abstract description 12
- 235000010674 Prunella vulgaris Nutrition 0.000 claims abstract description 12
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims abstract description 11
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims abstract description 11
- 238000003810 ethyl acetate extraction Methods 0.000 claims abstract description 6
- 210000005069 ears Anatomy 0.000 claims abstract description 5
- 235000011869 dried fruits Nutrition 0.000 claims abstract description 4
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 22
- 239000003208 petroleum Substances 0.000 claims description 18
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 11
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 11
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 11
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims description 8
- 239000002024 ethyl acetate extract Substances 0.000 claims description 6
- 238000010898 silica gel chromatography Methods 0.000 claims description 6
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 5
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 claims description 4
- HFGSQOYIOKBQOW-ZSDYHTTISA-N corosolic acid Chemical compound C1[C@@H](O)[C@H](O)C(C)(C)[C@@H]2CC[C@@]3(C)[C@]4(C)CC[C@@]5(C(O)=O)CC[C@@H](C)[C@H](C)[C@H]5C4=CC[C@@H]3[C@]21C HFGSQOYIOKBQOW-ZSDYHTTISA-N 0.000 claims description 4
- MDZKJHQSJHYOHJ-UHFFFAOYSA-N crataegolic acid Natural products C1C(O)C(O)C(C)(C)C2CCC3(C)C4(C)CCC5(C(O)=O)CCC(C)(C)CC5C4=CCC3C21C MDZKJHQSJHYOHJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- HFGSQOYIOKBQOW-KWUBVUSBSA-N 2alpha,3beta-dihydroxyurs-12-en-28-oic acid Natural products C[C@H]1CC[C@@]2(CC[C@]3(C)C(=CC[C@@H]4[C@@]5(C)C[C@@H](O)[C@H](O)C(C)(C)[C@@H]5CC[C@@]34C)[C@@H]2[C@H]1C)C(=O)O HFGSQOYIOKBQOW-KWUBVUSBSA-N 0.000 claims description 3
- 206010001052 Acute respiratory distress syndrome Diseases 0.000 claims description 3
- 208000013616 Respiratory Distress Syndrome Diseases 0.000 claims description 3
- 201000000028 adult respiratory distress syndrome Diseases 0.000 claims description 3
- 239000003480 eluent Substances 0.000 claims description 3
- 206010039073 rheumatoid arthritis Diseases 0.000 claims description 3
- 201000000596 systemic lupus erythematosus Diseases 0.000 claims description 3
- MDZKJHQSJHYOHJ-HFYZCPLSSA-N epi-maslinic acid Chemical compound C1[C@@H](O)[C@@H](O)C(C)(C)[C@@H]2CC[C@@]3(C)[C@]4(C)CC[C@@]5(C(O)=O)CCC(C)(C)C[C@H]5C4=CC[C@@H]3[C@]21C MDZKJHQSJHYOHJ-HFYZCPLSSA-N 0.000 claims description 2
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims 8
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims 8
- 125000004435 hydrogen atom Chemical class [H]* 0.000 claims 8
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 claims 4
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 claims 4
- HWJHWSBFPPPIPD-UHFFFAOYSA-N ethoxyethane;propan-2-one Chemical compound CC(C)=O.CCOCC HWJHWSBFPPPIPD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- XBZYWSMVVKYHQN-MYPRUECHSA-N (4as,6as,6br,8ar,9r,10s,12ar,12br,14bs)-10-hydroxy-2,2,6a,6b,9,12a-hexamethyl-9-[(sulfooxy)methyl]-1,2,3,4,4a,5,6,6a,6b,7,8,8a,9,10,11,12,12a,12b,13,14b-icosahydropicene-4a-carboxylic acid Chemical compound C1C[C@H](O)[C@@](C)(COS(O)(=O)=O)[C@@H]2CC[C@@]3(C)[C@]4(C)CC[C@@]5(C(O)=O)CCC(C)(C)C[C@H]5C4=CC[C@@H]3[C@]21C XBZYWSMVVKYHQN-MYPRUECHSA-N 0.000 claims 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 claims 1
- 230000037361 pathway Effects 0.000 abstract description 14
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 abstract description 7
- 230000004154 complement system Effects 0.000 abstract description 6
- 241000207923 Lamiaceae Species 0.000 abstract description 3
- 239000000469 ethanolic extract Substances 0.000 abstract description 2
- 206010018910 Haemolysis Diseases 0.000 description 22
- 230000008588 hemolysis Effects 0.000 description 22
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 17
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 10
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 9
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 5
- 238000005160 1H NMR spectroscopy Methods 0.000 description 4
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 4
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 4
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 4
- SRCZQMGIVIYBBJ-UHFFFAOYSA-N ethoxyethane;ethyl acetate Chemical compound CCOCC.CCOC(C)=O SRCZQMGIVIYBBJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 4
- 239000000047 product Substances 0.000 description 4
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 4
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 3
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 3
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 3
- 238000011160 research Methods 0.000 description 3
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 3
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 2
- 108010006464 Hemolysin Proteins Proteins 0.000 description 2
- 208000002193 Pain Diseases 0.000 description 2
- 238000003287 bathing Methods 0.000 description 2
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 2
- 239000004074 complement inhibitor Substances 0.000 description 2
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 2
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 2
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 2
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 2
- 239000003228 hemolysin Substances 0.000 description 2
- 231100000053 low toxicity Toxicity 0.000 description 2
- 229930014626 natural product Natural products 0.000 description 2
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 2
- 201000008827 tuberculosis Diseases 0.000 description 2
- NEEWCTFFDQIISO-UHFFFAOYSA-N (1alpha,2alpha,3beta)-1,2,3-Trihydroxy-12-ursen-28-oic acid Natural products OC1C(O)C(O)C(C)(C)C2CCC3(C)C4(C)CCC5(C(O)=O)CCC(C)C(C)C5C4=CCC3C21C NEEWCTFFDQIISO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000001644 13C nuclear magnetic resonance spectroscopy Methods 0.000 description 1
- MDZKJHQSJHYOHJ-RMUAHEEJSA-N 2alpha,3beta-Dihydroxyolean-12-en-28-oic acid Natural products C1[C@@H](O)[C@H](O)C(C)(C)[C@@H]2CC[C@@]3(C)[C@]4(C)CC[C@@]5(C(O)=O)CCC(C)(C)C[C@@H]5C4=CC[C@@H]3[C@]21C MDZKJHQSJHYOHJ-RMUAHEEJSA-N 0.000 description 1
- QNMKGMUGYVWVFQ-UHFFFAOYSA-N 2alpha-Hydroxyursolic acid Natural products CC12CC(O)C(O)C(C)(C)C1CCC1(C)C2CC=C2C3C(C)C(C)(C)CCC3(C(O)=O)CCC21C QNMKGMUGYVWVFQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100031315 AP-2 complex subunit mu Human genes 0.000 description 1
- 206010006256 Breast hyperplasia Diseases 0.000 description 1
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000700199 Cavia porcellus Species 0.000 description 1
- 208000005189 Embolism Diseases 0.000 description 1
- 206010018498 Goitre Diseases 0.000 description 1
- 206010019233 Headaches Diseases 0.000 description 1
- HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N Heparin Chemical compound OC1C(NC(=O)C)C(O)OC(COS(O)(=O)=O)C1OC1C(OS(O)(=O)=O)C(O)C(OC2C(C(OS(O)(=O)=O)C(OC3C(C(O)C(O)C(O3)C(O)=O)OS(O)(=O)=O)C(CO)O2)NS(O)(=O)=O)C(C(O)=O)O1 HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000037319 Hepatitis infectious Diseases 0.000 description 1
- 101000796047 Homo sapiens AP-2 complex subunit mu Proteins 0.000 description 1
- 206010020772 Hypertension Diseases 0.000 description 1
- 206010023126 Jaundice Diseases 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 1
- 229940125717 barbiturate Drugs 0.000 description 1
- HNYOPLTXPVRDBG-UHFFFAOYSA-N barbituric acid Chemical compound O=C1CC(=O)NC(=O)N1 HNYOPLTXPVRDBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 229940125904 compound 1 Drugs 0.000 description 1
- 229940125782 compound 2 Drugs 0.000 description 1
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 208000002173 dizziness Diseases 0.000 description 1
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 description 1
- 230000004438 eyesight Effects 0.000 description 1
- 201000003872 goiter Diseases 0.000 description 1
- 231100000869 headache Toxicity 0.000 description 1
- 229960002897 heparin Drugs 0.000 description 1
- 229920000669 heparin Polymers 0.000 description 1
- 208000005252 hepatitis A Diseases 0.000 description 1
- 238000002114 high-resolution electrospray ionisation mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 201000007227 lymph node tuberculosis Diseases 0.000 description 1
- 230000001926 lymphatic effect Effects 0.000 description 1
- MDZKJHQSJHYOHJ-LLICELPBSA-N maslinic acid Chemical compound C1[C@@H](O)[C@H](O)C(C)(C)[C@@H]2CC[C@@]3(C)[C@]4(C)CC[C@@]5(C(O)=O)CCC(C)(C)C[C@H]5C4=CC[C@@H]3[C@]21C MDZKJHQSJHYOHJ-LLICELPBSA-N 0.000 description 1
- 208000004396 mastitis Diseases 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 1
- 238000012827 research and development Methods 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 238000004611 spectroscopical analysis Methods 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 1
- 229940126585 therapeutic drug Drugs 0.000 description 1
Images
Landscapes
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
- Steroid Compounds (AREA)
Abstract
本发明属中药制药领域，涉及式I的三萜类化合物及其在制备抗补体药物中的新用途。特别涉及新化合物3β,13β-二羟基-齐墩-11-烯-28-酸在制备抗补体药物中的用途及其制备方法。本发明从唇形科植物夏枯草干燥果穗乙醇提取物的乙酸乙酯萃取部位分离得到4个三萜类化合物并证实其对补体系统经典途径和旁路途径均有抑制作用。所述化合物对补体系统经典途径的抑制作用CH50为198-449μg/ml，对旁路途径的抑制作用AP50为357-602μg/ml。本发明的三萜类化合物可制备抗补体药物并进一步制备治疗与补体相关疾病的药物。
Description
技术领域
本发明属中药制药领域，涉及夏枯草中三萜类化合物及其在制备抗补体药物中的新用途。
背景技术
研究报道，补体系统的过度激活会引发系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎、急性呼吸窘迫综合征等多种重大疾病。然而目前对此类疾病尚缺乏较为理想的治疗药物，因此临床上急需高效、低毒、专一的新型补体抑制剂，故抗补体药物研究多年来一直是世界药学研究的热点和重点。从天然产物中研究开发补体抑制剂是近年来一个受到越来越多关注的重要研究领域，其具有成本低、毒性低等特点。据报道，国内外学者已从包括海洋生物在内的多种天然产物中分离得到大量的具有补体系统抑制作用的单体化合物，为抗补体药物的研制提供了广阔的前景。
夏枯草是唇形科植物夏枯草(Prunella vulgaris L.)的干燥果穗，时有以全草入药；具有清肝、明目、散结、消肿、止痛等功效；通常用于目赤肿痛、羞明流泪、头痛眩晕、瘰疬、瘿瘤、乳痈肿痛等症。现代医学临床上多用于治疗甲状腺肿大、淋巴结核、乳腺增生、高血压、肺结核、急性黄疸型传染性肝炎等疾病。近年来对夏枯草的化学成分和生物活性研究较多，但迄今为止尚未见有关夏枯草作为补体抑制作用化合物的报道。
发明内容
本发明的目的是提供新的具有抗补体活性的物质，具体涉及夏枯草中三萜类化合物及其在制备抗补体药物中的用途。
本发明中特别涉及三萜类化合物2α,3α-二羟基-齐墩-12-烯-28-酸(1)、2α,3β-二羟基-齐墩-12-烯-28-酸(2)、2α,3β-二羟基-乌苏-12-烯-28-酸(3)或3β,13β-二羟基-齐墩-11-烯-28-酸(4)在制备抗补体药物中的用途。
本发明还提供了上述化合物3β,13β-二羟基-齐墩-11-烯-28-酸(4)的制备方法。
本发明应用现代药理筛选方法，从唇形科植物夏枯草(Prunella vulgaris L.)干燥果穗乙醇提取物的乙酸乙酯萃取部位得到三萜类化合物，对其中抗补体的活性物质进行研究，结果证实其具有抗补体活性。
本发明的活性三萜类化合物具有式Ι的化学结构：
式I
本发明所述的三萜类化合物优选2α,3α-二羟基-齐墩-12-烯-28-酸(1)、2α,3β-二羟基-齐墩-12-烯-28-酸(2)、2α,3β-二羟基-乌苏-12-烯-28-酸(3)或3β,13β-二羟基-齐墩-11-烯-28-酸(4)。其中，各取代基及化合物如表1所示，
表1
| 化合物 | R1 | R2 | R3 | R4 | R5 | 双键位置 |
| 1 | OH | α-OH | H | Me | H | ∆12,13 |
| 2 | OH | β-OH | H | Me | H | ∆12,13 |
| 3 | OH | β-OH | Me | H | H | ∆12,13 |
| 4 | H | β-OH | H | Me | OH | ∆11,12 |
本发明所述的三萜类化合物通过下述方法制备：
取干燥的夏枯草果穗，用95%乙醇室温冷浸，合并提取液并浓缩至无醇味，浸膏加水稀释，依次用石油醚(60-90 °C)和乙酸乙酯萃取(各2 L × 3次)，合并乙酸乙酯萃取液并浓缩至干，即得乙酸乙酯萃取物。乙酸乙酯萃取部位经硅胶柱色谱分离，以石油醚(60-90 °C)、石油醚(60-90°C)-丙酮、丙酮梯度洗脱，所得石油醚(60-90°C)-丙酮(10:1)流份再以石油醚(60-90°C)-乙酸乙酯为洗脱剂进行反复硅胶柱色谱纯化，分离得到4个化合物，分别为2α,3α-二羟基-齐墩-12-烯-28-酸 (1)、2α,3β-二羟基-齐墩-12-烯-28-酸 (2)、2α,3β-二羟基-乌苏-12-烯-28-酸 (3)和3β,13β-二羟基-齐墩-11-烯-28-酸 (4)。
表2是化合物1-4的碳谱(13C-NMR)数据(δ in ppm)。
表2
| No.C | 1 | 2 | 3 | 4 | No.C | 1 | 2 | 3 | 4 |
| 1 | 42.8 | 48.5 | 43.9 | 38.2 | 16 | 23.7 | 24.9 | 25.8 | 25.5 |
| 2 | 66.1 | 69.6 | 67.0 | 27.0 | 17 | 46.6 | 47.5 | 48.9 | 45.0 |
| 3 | 79.3 | 84.5 | 80.2 | 78.8 | 18 | 42.0 | 43.0 | 54.5 | 60.5 |
| 4 | 38.8 | 40.7 | 40.4 | 38.9 | 19 | 46.4 | 47.3 | 40.3 | 41.6 |
| 5 | 48.8 | 56.8 | 49.6 | 54.7 | 20 | 30.9 | 31.7 | 39.7 | 30.8 |
| 6 | 18.5 | 19.7 | 19.6 | 18.9 | 21 | 34.2 | 35.1 | 32.0 | 31.3 |
| 7 | 33.4 | 33.7 | 34.4 | 31.2 | 22 | 33.2 | 33.9 | 38.4 | 31.4 |
| 8 | 40.0 | 40.6 | 41.1 | 40.2 | 23 | 29.5 | 29.4 | 30.4 | 29.7 |
| 9 | 48.0 | 48.4 | 48.8 | 53.0 | 24 | 22.3 | 17.8 | 23.2 | 16.0 |
| 10 | 38.7 | 39.4 | 39.5 | 36.3 | 25 | 16.6 | 17.2 | 17.4 | 17.8 |
| 11 | 23.9 | 24.1 | 24.6 | 133.4 | 26 | 17.5 | 17.9 | 18.4 | 19.2 |
| 12 | 122.5 | 123.5 | 126.5 | 128.8 | 27 | 26.1 | 26.5 | 24.5 | 17.9 |
| 13 | 144.8 | 145.4 | 140.2 | 89.6 | 28 | 180.2 | 181.9 | 180.0 | 179.3 |
| 14 | 42.2 | 42.8 | 43.5 | 41.9 | 29 | 33.2 | 34.0 | 18.4 | 30.9 |
| 15 | 28.3 | 28.9 | 29.5 | 27.7 | 30 | 23.7 | 24.2 | 22.3 | 22.8 |
本发明的三萜类化合物通过经典途径和旁路途径体外抗补体活性试验测定，结果表明，所述三萜类化合物对补体系统的经典途径和旁路途径均有抑制作用(如表3所示)。本发明的三萜类化合物可制备抗补体药物。本发明的三萜类化合物可进一步制备治疗与补体相关疾病的药物。所述的与补体相关疾病包括系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎、急性呼吸窘迫综合征等疾病。
附图说明
图1是夏枯草乙酸乙酯萃取部位三萜化合物1-4的提取分离流程图。
具体实施方式
实施例1. 三萜类化合物的制备
取夏枯草果穗15 kg，用95%乙醇室温冷浸(50 L × 5次)，合并提取液并浓缩至无醇味，浸膏(700 g)加水稀释至2 L；依次用石油醚(60-90 °C)和乙酸乙酯萃取(各2 L × 3次)，合并乙酸乙酯萃取液并浓缩至干，即得乙酸乙酯萃取物160 g。乙酸乙酯萃取部位经硅胶柱色谱分离，以石油醚(60-90 °C)、石油醚(60-90 °C)-丙酮、丙酮梯度洗脱，所得石油醚(60-90 °C)-丙酮(10:1)流份再以石油醚(60-90 °C)-乙酸乙酯为洗脱剂进行反复硅胶柱色谱纯化，分别得到化合物1(16 mg)、化合物2(17 mg)、3(9 mg)和4(8 mg)。采用波谱学方法对其结构进行解析，分别鉴定为2α,3α-二羟基-齐墩-12-烯-28-酸(1)、2α,3β-二羟基-齐墩-12-烯-28-酸(2)、2α,3β-二羟基-乌苏-12-烯-28-酸(3)、3β,13β-二羟基-齐墩-11-烯-28-酸(4)。
其中，2α,3α-二羟基-齐墩-12-烯-28-酸(2α,3α-dihydroxyolic-12-ene-28-oic
acid, 1)为白色粉末(石油醚-乙酸乙酯)，C30H48O4，分子量为472；1H-NMR (CDCl3, 400 MHz)：δ 5.49 (1H, br.s, H-12),
4.34 (1H, m, H-2β), 3.80 (1H, d, J=2.2 Hz, H-3α), 3.31 (1H, dd, J=13.8, 4.0 Hz,
H-18), 0.93, 0.95, 1.00, 1.02, 1.05, 1.21, 1.30 (3H × 7, s)。
其中，2α,3β-二羟基-齐墩-12-烯-28-酸(2α-hydroxy oleanolic acid, 2)为白色粉末(石油醚-乙酸乙酯)，C30H48O4，分子量为472；1H-NMR (CDCl3,
400 MHz)：δ 5.46 (1H, t, J=3.5 Hz,
H-12), 4.08 (1H, td, J=10.0, 4.5 Hz, H-2β), 3.38 (1H, d, J=9.5 Hz, H-3β), 3.29 (1H, dd, J=13.5,
4.5 Hz, H-18), 0.93, 0.98, 0.99, 1.01, 1.06, 1.25, 1.26 (3H×7, s)。
其中，2α,3β-二羟基-乌苏-12-烯-28-酸(2α-hydroxy ursolic acid, 3)为白色粉末(石油醚-乙酸乙酯)，C30H48O4，分子量为472；1H-NMR (CDCl3,
400 MHz)：δ 5.48 (1H, t, J=3.5 Hz,
H-12), 4.08 (1H, td, J=11.0, 4.5 Hz, H-2β), 3.38 (1H, d, J=9.5 Hz, H-3β), 2.61 (1H, d, J=11.0 Hz,
H-18), 0.97 (3H, d, J=6.5 Hz), 1.01 (3H, d, J=6.5 Hz), 0.94, 1.03, 1.06, 1.20,
1.25 (3H×5, s)。
其中，3β,13β-二羟基-齐墩-11-烯-28-酸(3β,13β-dihydroxyolic-11-ene-28-oic
acid, 4)为白色粉末(石油醚-乙酸乙酯)，C30H48O4，分子量为472；IR (KBr) υmax (cm-1)：3520, 3500, 1740；1H-NMR (CDCl3,
400 MHz)：δ 6.03 (1H, br.d, J=10.7
Hz, H-12), 5.53 (1H, dd, J=10.7, 3.5 Hz, H-11), 3.24 (1H, dd, J=11.5,
5.2 Hz, H-3β), 0.79, 0.84, 0.97, 1.01,
1.19, 1.22, 1.24 (3H×7, s)；HR-ESI-MS m/z：477.3363 ([M-H2O+Na]+, C30H46O3Na+;
calc. 477.3345)。
实施例2. 体外抗补体经典途径试验
取补体(豚鼠血清) 0.1 ml，加入巴比妥缓冲液(BBS)配制成1:5的溶液，用BBS对倍稀释成1:10、1:20、1:40、1:80、1:160、1:320和1:640的溶液。取1:1000溶血素、各浓度补体及2%羊红细胞(SRBC)各0.1 ml溶于0.3 ml BBS中，混匀，37 ºC水浴30 min后放入低温高速离心机，在5000 rpm、4 ºC条件下离心10 min。分别取每管上清0.2 ml于96孔板，在405 nm测定其吸光度。实验同时设置全溶血组(0.1 ml 2% SRBC溶于0.5 ml三蒸水)。以三蒸水溶血管的吸光度作为全溶血标准，计算溶血率。以补体稀释度为X轴，各稀释浓度补体造成的溶血百分率为Y轴作图。选择达到相似高溶血率的最低补体浓度作为确保体系能正常溶血所需的临界补体浓度。取临界浓度的补体与供试品混匀，于37 ºC预水浴10 min后，加入适量BBS、溶血素和2% SRBC。将每管37 ºC水浴30 min后放入低温高速离心机，5000 rpm、4 ºC条件下离心10 min后分别取每管上清0.2 ml于96孔板，405 nm下测定吸光度。实验同时设置供试品对照组、补体组和全溶血组。将供试品吸光度值扣除相应供试品对照组吸光度值后计算溶血率。以供试品浓度作为X轴，溶血抑制率作为Y轴作图，计算50%抑制溶血所需供试品的浓度(CH50)。
实施例3. 体外抗补体旁路途径试验
取补体(人血清) 0.2 ml，加入AP稀释液配制成1:5的溶液，并对倍稀释成1:10、1:20、1:40、1:80、1:160、1:320和1:640的溶液。取各浓度补体0.15 ml、AP稀释液0.15 ml及0.5%兔红细胞(RE) 0.20 ml，混匀，37 ºC水浴30 min后置于低温高速离心机，在5000 rpm、4 ºC条件下离心10 min。分别取每管上清0.2 ml于96孔板，在405 nm测定吸光度。实验同时设置全溶血组(0.20 ml 0.5% RE溶于0.3 ml三蒸水)。以三蒸水溶血管的吸光度作为全溶血标准，计算溶血率。以补体稀释度为X轴，各稀释浓度补体造成的溶血百分率为Y轴作图。选择达到相似高溶血率的最低补体浓度作为确保体系能正常溶血所需的临界补体浓度。取确定的临界浓度的补体与供试品混匀，于37 ºC预水浴10 min后，加入0.2 ml 0.5% RE。将每管37 ºC水浴30 min后置于低温高速离心机，5000 rpm、4 ºC条件下离心10 min后，分别取每管上清0.2 ml于96孔板，405 nm下测定其吸光度。实验同时设置供试品对照组、补体组和全溶血组。将供试品吸光度值扣除相应供试品对照组吸光度值后计算溶血率。以供试品浓度作为X轴，溶血抑制率作为Y轴作图，计算50%抑制溶血所需供试品的浓度(AP50)。
本发明中实验采用的试剂均为本领域公知技术，可市购。
表3. 化合物1-4对补体系统经典途径和旁路途径的抑制作用(Mean ± SD, n=3)
| 化合物编号 | 化合物名称 | CH50 (μg/ml) | AP50 (μg/ml) |
| 1 | 2α,3α-二羟基-齐墩-12-烯-28-酸 | 198 ± 36 | 384 ± 36 |
| 2 | 2α,3β-二羟基-齐墩-12-烯-28-酸 | 203 ± 48 | 366 ± 22 |
| 3 | 2α,3β-二羟基-乌苏-12-烯-28-酸 | 208 ± 42 | 357 ± 33 |
| 4 | 3β,13β-二羟基-齐墩-11-烯-28-酸 | 449 ± 44 | 602 ± 38 |
| 阳性对照 | 肝素 | 40 ± 14 | 97 ± 19 |
其中，CH50是对经典途径50%抑制溶血所需供试品的浓度；AP50是对旁路途径50%抑制溶血所需供试品的浓度。
Claims (11)
1.式Ι的三萜类化合物，
式Ι
其中，R1
为OH 、H；R2 为 α-OH、β-OH；R3
为H、Me；R4 为Me、H；R5
为H、OH。
2.根据权利要求1所述三萜类化合物，其特征在于，其中R1为羟基，R2为α-OH，R3为氢，R4为甲基，R5为氢，双键为∆12,13 ，所述三萜化合物为2α,3α-二羟基-齐墩-12-烯-28-酸。
3.根据权利要求1所述三萜类化合物，其特征在于，其中R1为羟基，R2为β-OH，R3为氢，R4为甲基，R5为氢，双键为∆12,13，所述的三萜化合物为2α,3β-二羟基-齐墩-12-烯-28-酸。
4.根据权利要求1所述三萜类化合物，其特征在于，其中R1为羟基，R2为β-OH，R3为甲基，R4为氢，R5为氢，双键为∆12,13，所述的三萜化合物为2α,3β-二羟基-乌苏-12-烯-28-酸。
5.根据权利要求1所述三萜类化合物，其特征在于，其中R1为氢，R2为β-OH，R3为氢，R4为甲基，R5为羟基，双键为∆11,12，所述的三萜化合物为3β,13β-二羟基-齐墩-11-烯-28-酸。
6.式Ι的三萜类化合物在制备抗补体药物中的用途。
7.式Ι的三萜类化合物在制备与补体相关疾病药物中的用途。
8.根据权利要求7所述的用途，其特征在于所述相关疾病为系统性红斑狼疮。
9.根据权利要求7所述的用途，其特征在于所述相关疾病为类风湿性关节炎。
10.根据权利要求7所述的用途，其特征在于所述相关疾病为为急性呼吸窘迫综合征。
11.根据权利要求1所述三萜化合物，其特征在于通过下述方法制备：
取干燥的夏枯草果穗，用95%乙醇室温冷浸，合并提取液并浓缩至无醇味，浸膏加水稀释，依次用石油醚和乙酸乙酯萃取，合并乙酸乙酯萃取液并浓缩至干，即得乙酸乙酯萃取物；乙酸乙酯萃取部位经硅胶柱色谱分离，以石油醚、石油醚 -丙酮、丙酮梯度洗脱，所得石油醚-丙酮 10:1流份再以石油醚-乙酸乙酯为洗脱剂进行反复硅胶柱色谱纯化，分离得到4个化合物，分别为2α,3α-二羟基-齐墩-12-烯-28-酸 (1)、2α,3β-二羟基-齐墩-12-烯-28-酸 (2)、2α,3β-二羟基-乌苏-12-烯-28-酸 (3)或3β,13β-二羟基-齐墩-11-烯-28-酸 (4)。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201010609516.8A CN102558278B (zh) | 2010-12-28 | 2010-12-28 | 三萜类化合物及其在制备抗补体药物中的用途 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201010609516.8A CN102558278B (zh) | 2010-12-28 | 2010-12-28 | 三萜类化合物及其在制备抗补体药物中的用途 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN102558278A true CN102558278A (zh) | 2012-07-11 |
| CN102558278B CN102558278B (zh) | 2014-07-09 |
Family
ID=46405012
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201010609516.8A Expired - Fee Related CN102558278B (zh) | 2010-12-28 | 2010-12-28 | 三萜类化合物及其在制备抗补体药物中的用途 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN102558278B (zh) |
Cited By (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN105078965A (zh) * | 2014-05-13 | 2015-11-25 | 复旦大学 | 吉马烷内酯倍半萜类化合物在制备抗补体药物中的用途 |
| CN105078938A (zh) * | 2014-05-13 | 2015-11-25 | 复旦大学 | 大环吉马烷型倍半萜类化合物在制备抗补体药物中的用途 |
| CN105078937A (zh) * | 2014-05-13 | 2015-11-25 | 复旦大学 | 双环吉马烷型倍半萜类化合物在制备抗补体药物中的用途 |
| CN105985402A (zh) * | 2015-02-01 | 2016-10-05 | 复旦大学 | 一种甾醇内酰胺化合物马勃内酰胺及其在制备抗补体药物中的用途 |
| CN106420772A (zh) * | 2016-09-13 | 2017-02-22 | 王芳 | 一种治疗急性胰腺炎的药物组合物 |
| CN106589043A (zh) * | 2015-10-16 | 2017-04-26 | 复旦大学 | 芳基取代丙烯酰基三萜类化合物在制备抗补体药物中的用途 |
| CN107964032A (zh) * | 2016-10-19 | 2018-04-27 | 天津科技大学 | 马尾松中一种三萜皂苷及其制备工艺和用途 |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1682740A (zh) * | 2005-03-11 | 2005-10-19 | 中国药科大学 | 五环三萜类化合物在制备糖原磷酸化酶抑制剂中的应用 |
| CN1853637A (zh) * | 2005-03-11 | 2006-11-01 | 中国药科大学 | 五环三萜类化合物作为糖原磷酸化酶抑制剂的用途 |
| CN101240008A (zh) * | 2008-03-14 | 2008-08-13 | 安徽省分析测试中心 | 一种天然高纯科罗索酸和山楂酸及其制备方法 |
| WO2009121992A2 (es) * | 2008-04-03 | 2009-10-08 | Biomaslinic S.L. | Uso del ácido maslínico para el tratamiento de patologías y sus síntomas mediante la inhibición de cox-2 |
-
2010
- 2010-12-28 CN CN201010609516.8A patent/CN102558278B/zh not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1682740A (zh) * | 2005-03-11 | 2005-10-19 | 中国药科大学 | 五环三萜类化合物在制备糖原磷酸化酶抑制剂中的应用 |
| CN1853637A (zh) * | 2005-03-11 | 2006-11-01 | 中国药科大学 | 五环三萜类化合物作为糖原磷酸化酶抑制剂的用途 |
| CN101240008A (zh) * | 2008-03-14 | 2008-08-13 | 安徽省分析测试中心 | 一种天然高纯科罗索酸和山楂酸及其制备方法 |
| WO2009121992A2 (es) * | 2008-04-03 | 2009-10-08 | Biomaslinic S.L. | Uso del ácido maslínico para el tratamiento de patologías y sus síntomas mediante la inhibición de cox-2 |
Cited By (13)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN105078965B (zh) * | 2014-05-13 | 2018-05-25 | 复旦大学 | 吉马烷内酯倍半萜类化合物在制备抗补体药物中的用途 |
| CN105078938A (zh) * | 2014-05-13 | 2015-11-25 | 复旦大学 | 大环吉马烷型倍半萜类化合物在制备抗补体药物中的用途 |
| CN105078937A (zh) * | 2014-05-13 | 2015-11-25 | 复旦大学 | 双环吉马烷型倍半萜类化合物在制备抗补体药物中的用途 |
| CN105078965A (zh) * | 2014-05-13 | 2015-11-25 | 复旦大学 | 吉马烷内酯倍半萜类化合物在制备抗补体药物中的用途 |
| CN105078937B (zh) * | 2014-05-13 | 2018-05-25 | 复旦大学 | 双环吉马烷型倍半萜类化合物在制备抗补体药物中的用途 |
| CN105078938B (zh) * | 2014-05-13 | 2018-05-25 | 复旦大学 | 大环吉马烷型倍半萜类化合物在制备抗补体药物中的用途 |
| CN105985402A (zh) * | 2015-02-01 | 2016-10-05 | 复旦大学 | 一种甾醇内酰胺化合物马勃内酰胺及其在制备抗补体药物中的用途 |
| CN105985402B (zh) * | 2015-02-01 | 2017-12-01 | 复旦大学 | 一种甾醇内酰胺化合物马勃内酰胺及其在制备抗补体药物中的用途 |
| CN106589043A (zh) * | 2015-10-16 | 2017-04-26 | 复旦大学 | 芳基取代丙烯酰基三萜类化合物在制备抗补体药物中的用途 |
| CN106589043B (zh) * | 2015-10-16 | 2019-02-26 | 复旦大学 | 芳基取代丙烯酰基三萜类化合物在制备抗补体药物中的用途 |
| CN106420772A (zh) * | 2016-09-13 | 2017-02-22 | 王芳 | 一种治疗急性胰腺炎的药物组合物 |
| CN107964032A (zh) * | 2016-10-19 | 2018-04-27 | 天津科技大学 | 马尾松中一种三萜皂苷及其制备工艺和用途 |
| CN107964032B (zh) * | 2016-10-19 | 2020-05-26 | 天津科技大学 | 马尾松中一种三萜皂苷及其制备工艺和用途 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN102558278B (zh) | 2014-07-09 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN102558278B (zh) | 三萜类化合物及其在制备抗补体药物中的用途 | |
| CN103508922B (zh) | 二肽类化合物及其在制备抗补体药物中的用途 | |
| CN103012537B (zh) | 达玛烷型三萜类化合物及其制备方法和应用 | |
| CN103304618B (zh) | 具有抗炎活性的三萜皂苷类化合物、制备方法及其应用 | |
| CN107417697A (zh) | 一种间苯三酚衍生物及其在制备抗菌药物中的应用 | |
| CN107936069B (zh) | 一种促凝血苹果花有效成分及其提取分离方法、应用 | |
| CN106606506A (zh) | 对映半日花烷型二萜在制备抗补体药物中的用途 | |
| CN107056868A (zh) | 思茅藤孕甾烷糖苷类化合物及其应用 | |
| CN106496245A (zh) | 赖诺普利的药物组合物及其在生物医药中的应用 | |
| CN105541932B (zh) | 从小蓟中提取的苯乙醇苷类化合物及其制备方法和用途 | |
| CN105985403B (zh) | 一种甾醇内酯及其在制备抗补体药物中的用途 | |
| CN114702467B (zh) | 金凤花芳香化cassane二萜类化合物、提取方法及应用 | |
| CN105777854A (zh) | 硫酸依替米星的药物组合物及其在生物医药中的应用 | |
| CN105078938B (zh) | 大环吉马烷型倍半萜类化合物在制备抗补体药物中的用途 | |
| CN108403706A (zh) | 一种孕甾烷糖苷类化合物的新用途 | |
| CN109620824A (zh) | 苦木素类化合物在制备抗补体药物中的用途 | |
| CN104231019B (zh) | 单萜苷类化合物在制备抗补体药物中的用途 | |
| CN103087020B (zh) | 紫草酚类化合物及其在制备抗补体药物中的用途 | |
| CN108558978B (zh) | 孕甾烷糖苷类化合物及其应用 | |
| CN105985402B (zh) | 一种甾醇内酰胺化合物马勃内酰胺及其在制备抗补体药物中的用途 | |
| CN106589043B (zh) | 芳基取代丙烯酰基三萜类化合物在制备抗补体药物中的用途 | |
| CN108017683B (zh) | 一种多聚羟基孕甾烷化合物及其制备方法和在制备抗补体药物中的用途 | |
| CN112047989B (zh) | 鸡矢藤苷酸甲酯单体化合物、其制备方法和用途 | |
| CN103083292B (zh) | 紫草素类化合物在制备抗补体药物中的用途 | |
| CN104045542B (zh) | 萘醌二聚体及其在制备抗补体药物中的用途 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20140709 Termination date: 20181228 |
|
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |