CN102273705B

CN102273705B - 酶促转化桑叶黄酮制备桑叶饮料的方法

Info

Publication number: CN102273705B
Application number: CN201110167768A
Authority: CN
Inventors: 王俊; 吴福安; 王蒙; 孙国霞; 卫哲
Original assignee: Jiangsu University of Science and Technology
Current assignee: Anhui Xinyuan Tianzhu Cocoon Silk Co ltd
Priority date: 2011-06-21
Filing date: 2011-06-21
Publication date: 2012-10-24
Anticipated expiration: 2031-06-21
Also published as: CN102273705A

Abstract

酶法转化桑叶黄酮制备桑叶饮料的方法，桑叶浸提液的提取及酶促转化：按质量体积比将新鲜桑叶kg∶纯净水L＝1∶5～1∶50混合后60～100℃浸提1～12h得到桑叶浸提液，将桑叶浸提液与糖苷酶混合进行酶促水解反应，反应温度20～70℃，反应时间10～72h，反应结束，获得桑叶浸提物的酶解液；桑叶饮料的基本组成与配方：以100kg产品计，桑叶浸提物的酶解液10kg～15kg，蔗糖4kg～7kg，柠檬酸0.10kg～0.50kg，维生素C 0.125kg，香精0.01kg，蜂蜜0.5kg～1.5kg，其余为纯净水。本发明桑叶饮料中桑叶黄酮苷降解率高，香气清新，澄澈透明，颜色鲜亮，入口甘酸润爽，回味醇厚悠长，口感上佳。

Description

酶促转化桑叶黄酮制备桑叶饮料的方法

技术领域

本发明属农副产品加工领域，特别涉及一种酶法转化桑叶黄酮制备桑叶饮料的方法。

背景技术

随着生活水平的提高，人们越来越注重食品的营养性和功能性的互补。桑叶自古就是一种药食两用的天然食品，安全性高。现代药理研究发现，桑叶提取物含有黄酮、多糖和生物碱等有效成分，在治疗糖尿病、高血压、高血脂等症及抗衰老、抗病毒、抗炎等方面都具有良好的疗效，其中桑叶黄酮的降血压和桑叶生物碱的降血糖活性最为显著。长期饮用桑叶，具有清凉止渴，开胃生津，滋阴明目、降低胆固醇、增强免疫等功效。因此，近年来人们开始越来越多地关注桑叶新型饮品的设计与开发。

传统的桑叶饮料是以新鲜桑叶为原料，经热水提取获得桑叶浸提汁，进而添加食品添加剂配方，即制成饮品，如公开专利CN1813596报道了应用上述工艺步骤的桑叶汁饮料及其制备方法。另一种常见制备方法是以新鲜桑叶为原料，经过煸炒、揉捻及干燥等工序制成桑绿茶，进而制备桑叶饮品，如公开专利CN1951205A报道了桑茶叶及其粉末饮料的制备方法。此外，就是以桑叶和其他原料复方制备饮品，如公开专利CN101803782A报道了桑叶和陈皮为主的复方桑叶饮料及其制备方法，CN1729874A报道了桑叶、桑葚和菊花为主的复方颗粒饮料及其制备方法，CN101234142A报道了以桑叶、桑枝及桑白皮的提取物为主的桑系列保健功能饮料，授权专利ZL98114494.2报道了以桑叶、桑枝、桑根、桑葚、蜂蜜、薄荷、大枣、山楂以及苹果制备的保健饮料，CN1899056A报道了桑叶有效成分与纯牛奶配伍而成的桑叶奶及其制备方法。以上方法都是基于桑叶提取物或与其他原料配伍技术制备的桑叶饮品，均未见以桑叶有效成分酶法转化产物为主要成分开发桑叶保健饮品的报道。

药理研究表明，天然糖苷类化合物在体内的生物利用度和生理活性往往不如其次生苷或其苷元。授权专利ZL200910028166.3报道了一株点青霉菌株及其在生物转化桑叶黄酮苷中的应用，在体外利用糖苷酶或产糖苷酶微生物将桑叶提取物中的糖苷型黄酮生物转化成其次生苷或苷元产物，就可以增强桑叶提取物的生物活性。因此，经过酶促转化桑叶提取物，进而合理配方制备新型桑叶饮料富含高活性黄酮成分，其生物利用度大大提高，在心脑血管疾病预防及辅助治疗方面具有良好效果。此外，新型桑叶饮料中还含有生物碱（如1-DNJ）和多糖类成分，特别适用于广大亚健康人群，包括高血压、糖尿病等患者的辅助治疗药物和日常保健饮品。

发明内容

解决的技术问题：发明一种以桑叶提取物的酶转化液为主要原料，经过糖苷酶生物转化桑叶黄酮，进而添加其它辅料，经过混料、除杂、脱气、灌装、杀菌后的新型桑叶饮料。

技术方案：

酶法转化桑叶黄酮制备桑叶饮料的方法，桑叶浸提液的提取及酶促转化：按质量体积比将新鲜桑叶kg：纯净水L＝ 1:5~1:50混合后60~100℃浸提1~12h得到桑叶浸提液，将桑叶浸提液与糖苷酶混合进行酶促水解反应，反应温度20~70℃，反应时间 10~72h，反应结束，获得桑叶浸提物的酶解液；桑叶饮料的基本组成与配方：以100 kg产品计，桑叶浸提物的酶解液10 kg～15 kg，蔗糖4 kg～7 kg，柠檬酸0.10 kg～0.50 kg，维生素C 0.125 kg，香精0.01 kg，蜂蜜0.5 kg～1.5 kg，其余为纯净水。

纯净水和新鲜桑叶的质量体积比kg/L范围为1:30。

纯净水浸提新鲜桑叶的温度范围为80℃。

纯净水浸提新鲜桑叶的时间范围为6h。

糖苷酶是葡萄糖苷酶、鼠李糖苷酶或蜗牛酶。

桑叶饮料的基本组成与配方：以100 kg产品计，桑叶浸提物的酶解液12 kg，蔗糖5.5 kg，柠檬酸0.18 kg，维生素C 0.125 kg，香精0.01 kg，蜂蜜1.5 kg，其余为纯净水。

食用香精为红茶香精。

具体操作包括以下步骤：

1、浸提。取新鲜桑叶，按体积比加入纯净水后加热浸提，得到的桑叶浸提液。

2、酶转化。用泵输送桑叶浸提液经过填充有固定化糖苷酶的柱状反应器，进行酶促水解反应，反应结束后获得桑叶浸提物的酶解液。

3、混料。将蔗糖和柠檬酸投入到桑叶浸提物的酶解液中，搅拌，使蔗糖和柠檬酸充分溶解。

4、加入蜂蜜、食用香精和维生素C。

5、杀菌。料液升温至95 ℃ ± 2℃，杀菌3～6 min。

6、灌装。将杀菌过的料液连续地灌装到销售用的容器中。灌装量为200～500 mL比较合适。

有益效果：本发明功能性桑叶饮品制作工艺切实可行，具有较高的科技含量，符合现代人“营养保健”的消费观念和“返璞归真”的养生理念，易于被广大消费人群接受。经过酶促转化桑叶提取物，进而合理配方制备新型桑叶饮料富含高活性黄酮成分，其生物利用度大大提高，在心脑血管疾病预防及辅助治疗方面具有良好效果。此外，新型桑叶饮料中还含有生物碱（如1-DNJ）和多糖类成分，特别适用于广大亚健康人群，包括高血压、糖尿病等患者的辅助治疗药物和日常保健饮品。

本发明的产品澄澈透明颜色鲜亮，茶香清新，回味醇厚悠长，入口甘酸润爽，口感上佳。市场调查表明新型功能性桑叶饮料具有很大的市场开发潜力，将会带来较高的经济效益和社会效益。

附图说明

图1为本发明的工艺流程图。

具体实施方式

下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。此外应理解，在阅读了本发明讲授的内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。

本发明实施例中桑叶黄酮苷以芦丁为代表，检测芦丁及其次生苷和苷元采用高效液相色谱法。

（1）芦丁和异槲皮苷的色谱条件：Alltima C₁₈ (250 mm×4.6 mm，5μm)，流动相：0.02%磷酸-乙腈（80:20，v/v）；检测波长：360 nm；流速：1.0 mL/min；进样量：20μL。

（2）槲皮素的色谱条件：色谱柱：Alltima C₁₈ (4.6 mm×250 mm，5μm)，流动相：乙腈-0.5 mol/L pH4.0 醋酸缓冲液 (27:73，V/V)；检测波长：360 nm；流速：1.0 mL/min；进样量：20μL。

其中，桑叶黄酮的降解率计算方法为：

本发明实施例中固定化糖苷酶采用海藻酸钠-壳聚糖包埋法：配制2% wt海藻酸钠胶体溶液50 mL，加入0.1 g 糖苷酶粉，混合均匀后用注射器滴到由100 mL4℃预冷的0.2 mol/L CaCl₂溶液和100mL 0.1 % wt壳聚糖溶液（由pH 5.0的乙酸钠-乙酸缓冲液配制）组成的硬化液中，在4℃冰箱中固定化3h，得到直径3 mm的球状固定化酶颗粒，经乙酸钠-乙酸缓冲液（pH5.0）冲洗三次后置于4℃冰箱里保存备用。

实施例1

本实施例的配方为：以100 kg产品计，桑叶浸提物的酶解液10 kg，蔗糖7 kg，柠檬酸0.10 kg，维生素C 0.125 kg，红茶香精0.01 kg，蜂蜜1.5 kg，其余为纯净水。

本实施例的制备工艺为：取新鲜桑叶，按体积比1:5 kg/L加入纯净水后100 ℃浸提1 h得到桑叶浸提液，用泵输送桑叶浸提液经过填充有固定化糖苷酶的柱状反应器，进行酶促水解反应，反应温度20 ℃，反应时间 72 h，反应结束获得桑叶浸提物的酶解液。依配方投入蔗糖和柠檬酸，搅拌、溶解，再加入蜂蜜、红茶香精和维生素C，搅拌均匀。超滤膜除杂，随即脱气灌装。然后升温至95℃ ± 2℃，杀菌3～6min。冷却后得到新型桑叶饮料产品。

本实施例产品桑叶黄酮苷降解率达17 %，香气清新，入口甘酸润爽，略带桑叶味。

实施例2

本实施例的配方为：以100 kg产品计，桑叶浸提物的酶解液15 kg，蔗糖4 kg，柠檬酸0.50 kg，维生素C 0.125 kg，红茶香精0.01 kg，蜂蜜0.5 kg，其余为纯净水。

本实施例的制备工艺为：取新鲜桑叶，按体积比1:50 (kg/L) 加入纯净水后60 ℃浸提12h得到桑叶浸提液，用泵输送桑叶浸提液经过填充有固定化糖苷酶的柱状反应器，进行酶促水解反应，反应温度70 ℃，反应时间 10 h，反应结束获得桑叶浸提物的酶解液。依配方投入蔗糖和柠檬酸，搅拌、溶解，再加入蜂蜜、红茶香精和维生素C，搅拌均匀。超滤膜除杂，随即脱气灌装。然后升温至95℃ ± 2℃，杀菌3～6min。冷却后得到新型桑叶饮料产品。

本实施例产品中桑叶黄酮苷降解率达48%，营养丰富，香气清新，入口甘酸润爽。

实施例3

本实施例的配方为：以100 kg产品计，桑叶浸提物的酶解液12 kg，蔗糖5.5 kg，柠檬酸0.18 kg，红茶香精0.01 kg，蜂蜜1.5 kg，维生素C 0.125 kg，其余为纯净水。

本实施例的制备工艺为：取新鲜桑叶，按体积比1:30 (kg/L) 加入纯净水后80 ℃浸提6 h得到桑叶浸提液，用泵输送桑叶浸提液经过填充有固定化糖苷酶的柱状反应器，进行酶促水解反应，反应温度40 ℃，反应时间 24 h，反应结束获得桑叶浸提物的酶解液。依配方投入蔗糖和柠檬酸，搅拌、溶解，再加入蜂蜜、红茶香精和维生素C，搅拌均匀。超滤膜除杂，随即脱气灌装。然后升温至95℃ ± 2℃，杀菌3～6min。冷却后得到新型桑叶饮料产品。

本实施例产品中桑叶黄酮苷降解率达87 %，澄澈透明，颜色鲜亮，回味醇厚悠长，口感上佳。

Claims

1.酶法转化桑叶黄酮制备桑叶饮料的方法，其特征在于：

（1）桑叶浸提液的提取及酶促转化：按质量体积比将新鲜桑叶kg：纯净水L＝1∶5～1∶50混合后60～100℃浸提1～12h得到桑叶浸提液，将桑叶浸提液与糖苷酶混合进行酶促水解反应，反应温度20～70℃，反应时间10～72h，反应结束，获得桑叶浸提物的酶解液；所述糖苷酶为固定化糖苷酶，固定化糖苷酶采用海藻酸钠-壳聚糖包埋法制得：配制2％wt海藻酸钠胶体溶液50mL，加入0.1g糖苷酶粉，混合均匀后用注射器滴到由100mL4℃预冷的0.2mol/L CaCl₂溶液和100mL0.1％wt壳聚糖溶液，由pH 5.0的乙酸钠-乙酸缓冲液配制组成的硬化液中，在4℃冰箱中固定化3h，得到直径3mm的球状固定化酶颗粒，经pH5.0乙酸钠-乙酸缓冲液冲洗三次后置于4℃冰箱里保存备用；

（2）桑叶饮料的基本组成与配方：以100kg产品计，桑叶浸提物的酶解液10kg～15kg，蔗糖4kg～7kg，柠檬酸0.10kg～0.50kg，维生素C 0.125kg，香精0.01kg，蜂蜜0.5kg～1.5kg，其余为纯净水。

2.根据权利要求1所述的酶法转化桑叶黄酮制备桑叶饮料的方法，其特征在于纯净水和新鲜桑叶的质量体积比kg/L范围为1∶30。

3.根据权利要求1所述的酶法转化桑叶黄酮制备桑叶饮料的方法，其特征在于纯净水浸提新鲜桑叶的温度范围为80℃。

4.根据权利要求1所述的酶法转化桑叶黄酮制备桑叶饮料的方法，其特征在于纯净水浸提新鲜桑叶的时间范围为6h。

5.根据权利要求1所述的酶法转化桑叶黄酮制备桑叶饮料的方法，其特征在于所述糖苷酶是葡萄糖苷酶或鼠李糖苷酶。

6.根据权利要求1所述的酶法转化桑叶黄酮制备桑叶饮料的方法，其特征在于桑叶饮料的基本组成与配方：以100kg产品计，桑叶浸提物的酶解液12kg，蔗糖5.5kg，柠檬酸0.18kg，维生素C 0.125kg，香精0.01kg，蜂蜜1.5kg，其余为纯净水。

7.根据权利要求1所述的酶法转化桑叶黄酮制备桑叶饮料的方法，其特征在于香精为红茶香精。