CN102250195A - 一种文冠果壳苷的生产方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及文冠果开发利用领域，是一种从文冠果果壳、果柄和/或花中提取的文冠果壳苷的方法，首先选取干燥、无霉变的文冠果果壳、果柄和/或花；粉碎成20-40目；采用体积百分比浓度为50-95%的醇类或水提取，得到提取液；经醇类提取的提取液过大孔树脂或者经水提取的提取液浓缩过大孔树脂、除去糖、果胶，富集有效成分，用体积百分比浓度为20-95%的乙醇梯度洗脱树脂柱，洗脱液脱色；分别选择分子量为400~800和3000~10000的陶瓷膜两次过滤无效成分，截留含有文冠果壳苷的部分，然后用高速逆流色谱分离和纯化，即得单一成分的文冠果壳苷，具有纯度高，收率高，时间短，节约原料成本，实现大规模生产等优点。
Description
技术领域
本发明涉及文冠果开发利用领域，具体的说是一种从文冠果果壳、果柄和/或花中提取的活性物质-文冠果壳苷化合物，实现规模化生产的方法。
背景技术
文冠果(Xanthoceras sorbifolia Bunge)是我国特有的油用和民间药用经济树种，只一属一种，主要分布在辽宁、内蒙古及河西走廊一带，文冠果为落叶灌木或乔木，具有耐旱、耐寒、耐瘠簿等优良特征，是保护环境和绿化环境的理想树种，幼苗生长2-3年后开花结果，盛果期长，树寿命也长，百年以上的老树仍可开花结果。
文冠果种仁含油55-60％，可用于食品、药品、化妆品，也可作工业用油，是上乘的油用资源。茎叶可入药。种仁已开发为治疗小儿遗尿的临床用药。国家已将文冠果列为北方重要的能源质植物，要大量栽种，以满足社会需求。
文冠果壳苷具有防治脑老化和脑血管病、增强智力、治疗老年痴呆、帕金森症、尿频尿急及智力低下等脑功能不健全或障碍引起的脑病都有显著效果。可制备为脑疾病的药物和保健品；文冠果壳苷还可制备为防治肿瘤的药物和保健品。
发明内容
针对现有技术中存在的上述不足之处，本发明的目的在于提供一种文冠果壳苷的生产方法。
本发明采用如下的技术方案：
一种文冠果壳苷的生产方法，按以下的工艺和步骤：
1)选取干燥、无霉变的文冠果果壳、果柄和/或花；
2)将步骤1)选定的果壳、果柄和/或花粉碎成20-40目；
3)将步骤2)中粉碎的果壳、果柄和/或花采用体积百分比浓度为50-95％的醇类或水提取，得到提取液；
4)将步骤3)的经醇类提取的提取液过大孔树脂或者经水提取的提取液浓缩过大孔树脂、除去糖、果胶，富集有效成分，用体积百分比浓度为20-95％的乙醇梯度洗脱树脂柱，洗脱液脱色；
5)脱色后的溶液，分别选择分子量为400～800和3000～10000的陶瓷膜两次过滤无效成分，截留含有文冠果壳苷的部分，然后用高速逆流色谱分离和纯化，即得单一成分的文冠果壳苷。
其中高速逆流色谱的溶液体系按体积比甲醇∶水∶磷酸为60～80∶20～50∶0.01～0.04；流速为2～40ml/min，检测波长为225nm。
步骤3)中采用的醇类为甲醇、乙醇、丁醇或正丁醇中的一种或两种以上的组合。
步骤3)中料液比为1∶5-15倍(W∶V)，温度为20-100℃，时间为1-3小时，并搅拌，浸提2-3次，合并提取液，回收醇类，水液备用。
步骤3)中采用超声波强化提取和/或微波强化提取，超声波或微波功率为400-800W。
步骤4)中脱色采用氧化镁、活性炭和/或活性白土中的一种或者两种以上的混合。
步骤5)中脱色后过陶瓷膜之前的液体，用正丁醇萃取，回收正丁醇。
本发明还可采取下述的方法和步骤：
一种文冠果壳苷的生产方法，按以下的工艺和步骤：
1)选取干燥、无霉变的文冠果果壳、果柄和/或花；
2)将步骤1)选定的果壳、果柄和/或花粉碎成20-40目；
3)将步骤2)中粉碎的果壳、果柄和/或花采用体积百分比浓度为50-95％的醇类或水提取，得到提取物；
4)将步骤3)的经醇类提取的提取物或者经水提取的提取液浓缩的水液用絮凝剂壳聚糖、101果汁沉淀，除去糖、果胶，富集含有效成分的滤液；
5)经过步骤4)的滤液用水饱和的正丁醇萃取，回收正丁醇，总皂苷溶解，选择分子量为500～10000的陶瓷膜过滤无效成分，截留含有文冠果壳苷的部分，然后用高速逆流色谱分离，即得单一成分的文冠果壳苷。
其中高速逆流色谱的溶液体系按体积比甲醇∶水∶磷酸为60～80∶20～50∶0.01～0.04；流速为2～40ml/min，检测波长为225nm。
本方法步骤3)中采用的醇类为甲醇、乙醇、丁醇或正丁醇中的一种或两种以上的组合。
步骤3)中料液比为1∶5-15倍(W∶V)，温度为20-100℃，时间为1-3小时，并搅拌，浸提2-3次，合并提取液，回收醇类，水液备用。
步骤3)中采用超声波强化提取和/或微波强化提取，超声波或微波功率为400-800W。
步骤5)中过陶瓷膜之前采用脱色大孔树脂吸附色素。
采用本发明方法用于制备的文冠果壳苷的结构如下式所示，3-O-(α-L-arabinofuranosyl(1→3)-β-D-galactopyranosyl(1→2))-β-D-glucuronopyranosyl-21，22-diangeloyl-R1-barrigenol，
本发明具有如下的技术效果和优点：
1.本发明方法制备文冠果壳苷纯度达到99％以上，收率达到5‰，制备所用的时间短不超过1个小时，可用于大规模的生产；
2.采用超声或者微波辅助提取，能破坏植物的细胞，使溶剂能快速渗透到细胞内，加速有效成分的浸出，极大地加大了收率，具有时间短，提取率高，不破坏植物的有效成分等优点；
3.采用分别选择分子量为400～800和3000～10000的陶瓷膜过滤，去除不需要的成分，节约了分离步骤和时间；
4.采用高速逆流色谱的工艺分离和纯化得到最终的产物具有选择性高，无污染，无死吸附，工艺重复性高等优点；
5.利用本发明方法可实现高纯度文冠果壳苷的提取，节约原料成本，实现大规模生产，使文冠果果壳、果柄和花中的活性物质能够充分开发利用，提升它的经济价值。
具体实施方式
实施例1
取粉碎20目文冠果果壳50斤，用7倍体积的体积百分比浓度70％乙醇浸提，温度100℃，时间2小时，提取3次，不停的搅拌，合并提取液，回收乙醇，水液过大孔树脂，分别用体积百分比浓度为20％、50％、和95％的乙醇梯度洗脱树脂柱，回收乙醇；水液用氧化镁脱色，采用分子量为800和10000的陶瓷膜两次过滤，用高速逆流色谱分离，溶液体系按体积比甲醇∶水∶磷酸为60∶20∶0.01；流速为2ml/min，检测波长为225nm，得到文冠果壳苷，纯度为99％以上，收率为3.5‰。
实施例2
取粉碎30目的文冠果果柄40斤，用8倍体积的体积百分比浓度60％正丁醇，温度50℃，辅助超声提取，功率500W，时间1小时，提取2次，回收正丁醇，水液过大孔树脂，分别用体积百分比浓度为40％、60％、和90％的乙醇梯度洗脱树脂柱，回收乙醇，水液用采用活性碳脱色。选择分子量为500和5000的陶瓷膜过滤，将含有文冠果壳苷部分，用高速逆流色谱分离，溶液体系按体积比甲醇∶水∶磷酸为70∶30∶0.02；流速为10ml/min，检测波长为225nm，制备得到文冠果壳苷，纯度为99％以上，收率为4‰。
实施例3
取粉碎20目的文冠果花20斤，用6倍体积的体积百分比浓度65％甲醇，温度60℃，微波辅助提取，功率400W，时间50分钟，提取2次，回收甲醇，水液用絮凝剂壳聚糖除去糖、果胶，富集含有效成分的滤液；滤液用水饱和的正丁醇萃取，回收正丁醇，总皂苷溶解，用D941脱色大孔树脂吸附色素，选择分子量为500和3000的陶瓷膜膜过滤，截留需要部分，用高速逆流色谱分离，溶液体系按体积比甲醇∶水∶磷酸为80∶50∶0.04；流速为30ml/min，检测波长为225nm，制备得到文冠果壳苷，纯度为99％以上，收率为3‰。
实施例4
取粉碎40目的文冠果花20斤，用10倍体积的体积百分比浓度65％甲醇，温度60℃，微波辅助提取，功率400W，时间50分钟，提取2次，回收甲醇，水液用101果汁沉淀除去糖、果胶，富集含有效成分的滤液；滤液用水饱和的正丁醇萃取，回收正丁醇，总皂苷溶解，用ADS-7脱色大孔树脂吸附色素，选择分子量为800和3500的陶瓷膜膜过滤，截留需要部分，用高速逆流色谱分离，溶液体系按体积比甲醇∶水∶磷酸为75∶25∶0.03；流速为30ml/min，检测波长为225nm，制备得到文冠果壳苷，纯度为99％以上，收率为3‰。
实施例5
取粉碎25目的文冠果壳50斤，用10倍体积的水，并同时采用超声和微波辅助，超声和微波都为功率500W，温度50℃，时间1.5小时，提取2次，合并提取液并浓缩，过大孔树脂，分别用体积百分比浓度为50％、70％、和95％的乙醇梯度洗脱树脂柱，活性碳加活性白土脱色，其滤液选择分子量为700和4000的陶瓷膜过滤，截留需要部分，用高速逆流色谱分离，溶液体系按体积比甲醇∶水∶磷酸为60∶200∶0.01；流速为40ml/min，检测波长为225nm，制备得到文冠果壳苷，纯度为99％以上，收率为5‰。
实施例6
取粉碎40目的文冠果壳60斤，用15倍体积的水，并同时采用微波辅助，微波功率600W，温度70℃，时间3小时，提取2次，合并提取液并浓缩，过大孔树脂，分别用体积百分比浓度为20％、60％、和85％的乙醇梯度洗脱树脂柱，活性白土脱色，其滤液选择分子量为800和6000的陶瓷膜过滤，截留需要部分，用高速逆流色谱分离，溶液体系按体积比甲醇∶水∶磷酸为80∶50∶0.01；流速为35ml/min，检测波长为225nm，制备得到文冠果壳苷，纯度为99％以上，收率为5‰。
实施例7
取粉碎30目的文冠果壳70斤，用15倍体积的水，并同时采用超声辅助，功率600W，温度70℃，时间1小时，提取2次，合并提取液并浓缩，过大孔树脂，分别用体积百分比浓度为20％、50％、和90％的乙醇梯度洗脱树脂柱，氧化镁脱色，其滤液选择分子量为400和7000的陶瓷膜过滤，截留需要部分，用高速逆流色谱分离，溶液体系按体积比甲醇∶水∶磷酸为70∶20～50∶0.04；流速为40ml/min，检测波长为225nm，制备得到文冠果壳苷，纯度为99％以上，收率为4‰。
实施例8
取粉碎30目的文冠果果柄40斤，用8倍体积的体积百分比浓度60％正丁醇，温度50℃，辅助超声提取，功率500W，时间1小时，提取2次，回收正丁醇，水液采用絮凝剂壳聚糖除去糖、果胶，富集有效成分，滤液用水饱和的正丁醇萃取，回收正丁醇，总皂苷溶解。选择分子量为700和3000的陶瓷膜过滤，将含有文冠果壳苷部分，用高速逆流色谱分离，溶液体系按体积比甲醇∶水∶磷酸为70∶30∶0.01；流速为30ml/min，检测波长为225nm，制备得到文冠果壳苷，纯度为99％以上，收率为4‰。
实施例9
取粉碎40目的文冠果壳60斤，用15倍体积的水，并同时采用微波辅助，微波功率600W，温度70℃，时间3小时，提取2次，合并提取液并浓缩，水液采用101果汁沉淀除去糖、果胶，富集有效成分，滤液用水饱和的正丁醇萃取，回收正丁醇，总皂苷溶解。选择分子量为800和3000的陶瓷膜过滤，将含有文冠果壳苷部分，用高速逆流色谱分离，高速逆流色谱的溶液体系按体积比甲醇∶水∶磷酸为80∶30∶0.02；流速为25ml/min，检测波长为225nm，制备得到文冠果壳苷，纯度为99％以上，收率为3.5‰。
Claims (10)
1.一种文冠果壳苷的生产方法，其特征在于，按以下的工艺和步骤：
1)选取干燥、无霉变的文冠果果壳、果柄和/或花；
2)将步骤1)选定的果壳、果柄和/或花粉碎成20-40目；
3)将步骤2)中粉碎的果壳、果柄和/或花采用体积百分比浓度为50-95％的醇类或水提取，得到提取液；
4)将步骤3)的经醇类提取的提取液过大孔树脂或者经水提取的提取液浓缩过大孔树脂、除去糖、果胶，富集有效成分，用体积百分比浓度为20-95％的乙醇梯度洗脱树脂柱，洗脱液脱色；
5)脱色后的溶液，分别选择分子量为400～800和3000～10000的陶瓷膜两次过滤无效成分，截留含有文冠果壳苷的部分，然后用高速逆流色谱分离和纯化，即得单一成分的文冠果壳苷。
2.一种文冠果壳苷的生产方法，其特征在于，按以下的工艺和步骤：
1)选取干燥、无霉变的文冠果果壳、果柄和/或花；
2)将步骤1)选定的果壳、果柄和/或花粉碎成20-40目；
3)将步骤2)中粉碎的果壳、果柄和/或花采用体积百分比浓度为50-95％的醇类或水提取，得到提取物；
4)将步骤3)的经醇类提取的提取物或者经水提取的提取液浓缩的水液用絮凝剂壳聚糖、101果汁沉淀，除去糖、果胶，富集含有效成分的滤液；
5)经过步骤4)的滤液用水饱和的正丁醇萃取，回收正丁醇，总皂苷溶解，选择分子量为500～10000的陶瓷膜过滤无效成分，截留含有文冠果壳苷的部分，然后用高速逆流色谱分离，即得单一成分的文冠果壳苷。
3.根据权利要求1或2所述的文冠果壳苷的生产方法，其特征在于：高速逆流色谱的溶液体系按体积比甲醇∶水∶磷酸为60～80∶20～50∶0.01～0.04；流速为2～40ml/min，检测波长为225nm。
4.根据权利要求1或2所述的文冠果壳苷的生产方法，其特征在于：步骤3)中采用的醇类为甲醇、乙醇、丁醇或正丁醇中的一种或两种以上的组合。
5.根据权利要求1或2所述的文冠果壳苷的生产方法，其特征在于：步骤3)中料液比为1∶5-15倍(W∶V)，温度为20-100℃，时间为1-3小时，并搅拌，浸提2-3次，合并提取液，回收醇类，水液备用。
6.根据权利要求5所述的文冠果壳苷的生产方法，其特征在于：步骤3)中采用超声波强化提取和/或微波强化提取，超声波或微波功率为400-800W。
7.根据权利要求1所述的文冠果壳苷的生产方法，其特征在于：步骤4)中脱色采用氧化镁、活性炭和/或活性白土中的一种或者两种以上的混合。
8.根据权利要求1所述的文冠果壳苷的生产方法，其特征在于：步骤5)中脱色后过陶瓷膜之前的液体，用正丁醇萃取，回收正丁醇。
9.根据权利要求2所述的文冠果壳苷的生产方法，其特征在于：步骤5)中过陶瓷膜之前采用脱色大孔树脂吸附色素。
10.根据权利要求1所述的文冠果壳苷的生产方法，其特征在于：所述文冠果壳苷的结构如下式所示，3-O-(α-L-arabinofuranosyl(1→3)-β-D-galactopyranosyl(1→2))-β-D-glucuronopyranosyl-21，22-diangeloyl-R1-barrigenol，
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