CN102140482A - **鱼肠制备复合氨基酸液的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供的鮟鱇鱼肠制备复合氨基酸液的方法,将鮟鱇鱼肠浆于恒温下水解,水解完成物经离心获得上清液再经脱色浓缩得复合氨基酸溶液;其中所说水解为酶水解,水解前先用NaOH水溶液调节溶液的pH值,水解所用酶为蛋白酶,水解过程中继续以NaOH水溶液维持水解体系的pH值,水解结束后,用盐酸水溶液调节体系的pH值至4.3,在调节pH值的同时加热对酶进行灭活得水解完成物。本发明提供的鮟鱇鱼肠制备复合氨基酸液的方法,采用木瓜蛋白酶或中性蛋白酶或碱性蛋白酶对鮟鱇鱼肠进行水解,与现有技术相比,本发明提出了以用蛋白酶对鮟鱇鱼肠进行水解为主要手段的方法,使作为弃物的鮟鱇鱼肠成为可以食用的氨基酸,而且过程环保无污染。
Description
技术领域
背景技术
鱼又名蛤蟆鱼、丑婆,属于目,科鱼类。近年来,随着海洋渔业资源发生改变,鱼渔获量逐年上升,成为主要出口水产品之一,其利用价值逐渐显现。鱼味鲜美,营养丰富,通常将其制作成为干鱼片、干肉条或冰鲜鱼。不过其头大、身小,内脏比重大,尤其是肠的比例超过60%,因此捕获量的大部分是下脚料。但鱼肠中含有丰富的蛋白质资源,根据分析鱼肠的基本组成以质量百分比计是:水分58.94%、灰分0.96%、粗蛋白20.23%、粗脂肪19.52%、总糖0.35%。如此丰富的蛋白质资源在目前至多被加工成饲料鱼粉,但大量的被作为废物处理。这样,不仅没有充分利用其中很有价值的成分,造成资源浪费,而且会带来环境污染。
复合氨基酸是利用包括水产加工下脚料在内的废弃蛋白质资源,经脱毒、水解、精制等工艺制成的一种液态产品。由于其游离氨基酸含量较高,味道极其鲜美,被视为高档调味品进而被广泛应用于休闲食品、调味汁、罐头食品、加工肉类等食品行业及饲料、医药、发酵及化妆品等行业。
有中国发明专利申请“水产品下脚料中牛磺酸的提取及牛磺酸螯合物的制备”(公开号CN1720822)中介绍了一种自水产品下脚料中提取牛磺酸的方法“取原料100g称重,自来水洗去泥沙,置于匀浆机内粉碎10次(每次10秒钟,4000r/min),再加一定量的纯水于匀浆机内匀浆30min,将匀浆液中加入3倍量的纯水,置于水浴锅内加热1h,离心20min(4000r/min),取上清液,残渣再加适量的水煮沸30min,离心,得上清液;将两次上清液合并。(再经盐酸或醋酸酸解效果更佳)。取上清液浓缩至原体积的1/6,加1∶1的HCl(v/v)或醋酸用PH计调至pH=3离心去酸性蛋白质。上清液用NaOH调至pH=10,离心去碱性蛋白质。离心液再用盐酸或醋酸调至pH=5左右,浓缩后上柱以去除其它氨基酸和部分色素,用纯水洗脱,接取PH值为3-5的流出液,浓缩至原体积的1/100,加三倍量的无水乙醇,自然冷却、结晶、真空抽滤、干燥、得牛磺酸产品。”但由于该方法仅指出了酸解工艺,使之所得氨基酸品质受损并产生大量污染。
发明内容
本发明提供的鱼肠制备复合氨基酸液的方法,先对鱼肠进行清洗和匀浆处理得鱼肠浆,再于恒温下水解,水解完成物再经两次离心获得上清液并将两次上清液合并为水解液,最后水解液经脱色浓缩得复合氨基酸溶液;其中所说水解为酶水解,水解前先用NaOH水溶液调节溶液的pH值,水解所用酶为蛋白酶,水解过程中继续以NaOH水溶液维持水解体系的pH值,水解结束后,用盐酸水溶液调节体系的pH值至4.3,在调节pH值的同时加热对酶进行灭活得水解完成物;其中:
本发明提供的鱼肠制备复合氨基酸液的方法,采用木瓜蛋白酶或中性蛋白酶或碱性蛋白酶对鱼肠进行水解,水解完成物经经处理后所得复合氨基酸溶液经液相色谱测定包含18种氨基酸。与现有技术相比,本发明针对从鱼肠中提取氨基酸提出了以用蛋白酶对鱼肠进行水解为主要手段的方法,使作为弃物的鱼肠成为可以食用的氨基酸,而且过程环保无污染。
从上表可见胃蛋白酶对于原料的水解效果较差,又胰蛋白酶价格昂贵且作用效果并未明显优势,而木瓜蛋白酶、中性蛋白酶和碱性蛋白酶的作用效果较好,成本也不是太高,所以优先选择中性蛋白酶、碱性蛋白酶和木瓜蛋白酶为对鱼肠蛋白质的水解用酶。
对于鱼肠蛋白质,少量的木瓜蛋白酶即可产生较为明显的降解效果,作用浓度600~1250(IU/g鱼肠浆)之间,酶解效果显著,达1250(IU/g鱼肠浆)以上时,酶作用浓度基本饱和,蛋白质降解效果变化不大;而中性蛋白酶和碱性蛋白酶受浓度变化的影响较大,用量在600~2500(IU/g鱼肠浆)之间,随着酶用量的增加酶解效果增强,但达到2500(IU/g鱼肠浆)以上时,酶解效果基本趋于平稳。
本发明提供的鱼肠制备复合氨基酸液的方法,所说水解的环境是温度为45℃,pH值为7.0,水解时首先按每克鱼肠浆加入中性蛋白酶2000(这里是不是应该是500)IU,水解3h,再按每克鱼肠浆加入木瓜蛋白酶1500IU,水解3h。使用本方案,原料中氨基酸得率可达到65.9%。
以上水解前及水解中调节水解体系pH值的NaOH水溶液浓度为5.5mol/L的,水解结束后调节水解体系pH值的盐酸水溶液浓度为6mol/L。
本发明提供的鱼肠制备复合氨基酸液的方法,所说鱼肠浆是经将鱼肠切碎、清洗后在110~120℃的温度中蒸煮20~30min,再经捣碎匀浆,最后按水与匀浆液的质量比为1∶1.5~1∶2.5的量将水和鱼肠混匀得。
本发明提供的鱼肠制备复合氨基酸液的方法,水解完成物一次离心后去除上层脂肪,取上清液,所余水解物残渣再经加水清洗并经二次离心后取上清液,合并两次离心后所得上清液为水解液。所说离心的转速是3000r/min,离心时间为10min。
具体实施方式
1、一种鱼肠制备复合氨基酸液的方法,先对鱼肠经切碎、清洗后在110~120℃的温度中蒸煮20~30min,再经捣碎匀浆,再按水与匀浆液的质量比为1∶1.5~2.0的量将水和鱼肠混匀得鱼肠浆。鱼肠浆置于容器中并在水浴槽内升温且控制35~45℃的恒温下水解,水解是加入木瓜蛋白酶进行的。水解前先用浓度为5.5mol/L的NaOH水溶液调节鱼肠浆的pH值到6.5~7.5,再按作用浓度为每克鱼肠浆加入800IU的量加入木瓜蛋白酶,水解时继续滴加浓度为5.5mol/L的NaOH水溶液使水解体系维持在6.5~7.5。水解结束后,用浓度为6mol/L盐酸水溶液调节体系的pH值至4.3,在调节pH值的同时提高水浴温度到100℃以上对酶进行灭活得水解完成物。水解完成物先在3000r/min转速下离心10min,离心后去除上层脂肪,取上清液。所余水解物残渣再加水清洗并在3000r/min转速下离心10min,离心后再取上清液。合并两次离心后所得上清液为水解液。所说离心的。水解液温度在55~65℃时,按与水解液的质量体积比为0.25~0.35%的量加入粒度为30~40目的活性炭搅拌35~45min进行脱色除腥,脱色除腥后滤去活性炭得色清,腥味淡的水解液。最后浓缩得产品复合氨基酸溶液。
2、一种鱼肠制备复合氨基酸液的方法,先对鱼肠经切碎、清洗后在110~120℃的温度中蒸煮20~30min,再经捣碎匀浆,再按水与匀浆液的质量比为l∶2.0~2.5的量将水和鱼肠混匀得鱼肠浆。鱼肠浆置于容器中并在水浴槽内升温且控制65~75℃的恒温下水解,水解是加入木瓜蛋白酶进行的。水解前先用浓度为5.5mol/L的NaOH水溶液调节鱼肠浆的pH值到6.5~7.5,再按作用浓度为每克鱼肠浆加入1250IU的量加入木瓜蛋白酶,水解时继续滴加浓度为5.5mol/L的NaOH水溶液使水解体系维持在6.5~7.5。水解结束后,用浓度为6mol/L盐酸水溶液调节体系的pH值至4.3,在调节pH值的同时提高水浴温度到100℃以上对酶进行灭活得水解完成物。水解完成物先在3000r/min转速下离心10min,离心后去除上层脂肪,取上清液。所余水解物残渣再加水清洗并在3000r/min转速下离心10min,离心后再取上清液。合并两次离心后所得上清液为水解液。所说离心的。水解液温度在55~65℃时,按与水解液的质量体积比为0.25~0.35%的量加入粒度为30~40目的活性炭搅拌35~45min进行脱色除腥,脱色除腥后滤去活性炭得色清,腥味淡的水解液。最后浓缩得产品复合氨基酸溶液。
3、一种鱼肠制备复合氨基酸液的方法,先对鱼肠经切碎、清洗后在110~120℃的温度中蒸煮20~30min,再经捣碎匀浆,再按水与匀浆液的质量比为1∶2.0~2.5的量将水和鱼肠混匀得鱼肠浆。鱼肠浆置于容器中并在水浴槽内升温且控制45~55℃的恒温下水解,水解是加入中性蛋白酶进行的。水解前先用浓度为5.5mol/L的NaOH水溶液调节鱼肠浆的pH值到6.5~7.5,再按作用浓度为每克鱼肠浆加入800IU的量加入木瓜蛋白酶,水解时继续滴加浓度为5.5mol/L的NaOH水溶液使水解体系维持在6.5~7.5。水解结束后,用浓度为6mol/L盐酸水溶液调节体系的pH值至4.3,在调节pH值的同时提高水浴温度到100℃以上对酶进行灭活得水解完成物。水解完成物先在3000r/min转速下离心10min,离心后去除上层脂肪,取上清液。所余水解物残渣再加水清洗并在3000r/min转速下离心10min,离心后再取上清液。合并两次离心后所得上清液为水解液。所说离心的。水解液温度在55~65℃时,按与水解液的质量体积比为0.25~0.35%的量加入粒度为30~40目的活性炭搅拌35~45min进行脱色除腥,脱色除腥后滤去活性炭得色清,腥味淡的水解液。最后浓缩得产品复合氨基酸溶液。
4、一种鱼肠制备复合氨基酸液的方法,先对鱼肠经切碎、清洗后在110~120℃的温度中蒸煮20~30min,再经捣碎匀浆,再按水与匀浆液的质量比为1∶1.5~2.0的量将水和鱼肠混匀得鱼肠浆。鱼肠浆置于容器中并在水浴槽内升温且控制35~55℃的恒温下水解,水解是加入中性蛋白酶进行的。水解前先用浓度为5.5mol/L的NaOH水溶液调节鱼肠浆的pH值到6.5~7.5,再按作用浓度为每克鱼肠浆加入2500IU的量加入木瓜蛋白酶,水解时继续滴加浓度为5.5mol/L的NaOH水溶液使水解体系维持在6.5~7.5。水解结束后,用浓度为6mol/L盐酸水溶液调节体系的pH值至4.3,在调节pH值的同时提高水浴温度到100℃以上对酶进行灭活得水解完成物。水解完成物先在3000r/min转速下离心10min,离心后去除上层脂肪,取上清液。所余水解物残渣再加水清洗并在3000r/min转速下离心10min,离心后再取上清液。合并两次离心后所得上清液为水解液。所说离心的。水解液温度在55~65℃时,按与水解液的质量体积比为0.25~0.35%的量加入粒度为30~40目的活性炭搅拌35~45min进行脱色除腥,脱色除腥后滤去活性炭得色清,腥味淡的水解液。最后浓缩得产品复合氨基酸溶液。
5、一种鱼肠制备复合氨基酸液的方法,先对鱼肠经切碎、清洗后在110~120℃的温度中蒸煮20~30min,再经捣碎匀浆,再按水与匀浆液的质量比为1∶1.5~2.0的量将水和鱼肠混匀得鱼肠浆。鱼肠浆置于容器中并在水浴槽内升温且控制35~55℃的恒温下水解,水解是加入碱性蛋白酶进行的。水解前先用浓度为5.5mol/L的NaOH水溶液调节鱼肠浆的pH值到7.5~8.5,再按作用浓度为每克鱼肠浆加入800IU的量加入木瓜蛋白酶,水解时继续滴加浓度为5.5mol/L的NaOH水溶液使水解体系维持在7.5~8.5。水解结束后,用浓度为6mol/L盐酸水溶液调节体系的pH值至4.3,在调节pH值的同时提高水浴温度到100℃以上对酶进行灭活得水解完成物。水解完成物先在3000r/min转速下离心10min,离心后去除上层脂肪,取上清液。所余水解物残渣再加水清洗并在3000r/min转速下离心10min,离心后再取上清液。合并两次离心后所得上清液为水解液。所说离心的。水解液温度在55~65℃时,按与水解液的质量体积比为0.25~0.35%的量加入粒度为30~40目的活性炭搅拌35~45min进行脱色除腥,脱色除腥后滤去活性炭得色清,腥味淡的水解液。最后浓缩得产品复合氨基酸溶液。
6、一种鱼肠制备复合氨基酸液的方法,先对鱼肠经切碎、清洗后在110~120℃的温度中蒸煮20~30min,再经捣碎匀浆,再按水与匀浆液的质量比为1∶2.0~2.5的量将水和鱼肠混匀得鱼肠浆。鱼肠浆置于容器中并在水浴槽内升温且控制35~55℃的恒温下水解,水解是加入木瓜蛋白酶进行的。水解前先用浓度为5.5mol/L的NaOH水溶液调节鱼肠浆的pH值到7.5~8.5,再按作用浓度为每克鱼肠浆加入2500IU的量加入碱性蛋白酶,水解时继续滴加浓度为5.5mol/L的NaOH水溶液使水解体系维持在7.5~8.5。水解结束后,用浓度为6mol/L盐酸水溶液调节体系的pH值至4.3,在调节pH值的同时提高水浴温度到100℃以上对酶进行灭活得水解完成物。水解完成物先在3000r/min转速下离心10min,离心后去除上层脂肪,取上清液。所余水解物残渣再加水清洗并在3000r/min转速下离心10min,离心后再取上清液。合并两次离心后所得上清液为水解液。所说离心的。水解液温度在55~65℃时,按与水解液的质量体积比为0.25~0.35%的量加入粒度为30~40目的活性炭搅拌35~45min进行脱色除腥,脱色除腥后滤去活性炭得色清,腥味淡的水解液。最后浓缩得产品复合氨基酸溶液。
7、一种鱼肠制备复合氨基酸液的方法,先对鱼肠经切碎、清洗后在110℃的温度中蒸煮20min,再经捣碎匀浆,再按水与匀浆液的质量比为1∶1.5的量将水和鱼肠混匀得鱼肠浆。鱼肠浆置于容器中并在水浴槽内升温且控制45℃的恒温下水解,水解是加入木瓜蛋白酶进行的。水解前先用浓度为5.5mol/L的NaOH水溶液调节鱼肠浆的pH值到7.0,再按作用浓度为每克鱼肠浆加入1000IU的量加入木瓜蛋白酶,水解时继续滴加浓度为5.5mol/L的NaOH水溶液使水解体系维持在7.0。水解6h后,用浓度为6mol/L盐酸水溶液调节体系的pH值至4.3,在调节pH值的同时提高水浴温度到100℃以上对酶进行灭活得水解完成物。水解完成物先在3000r/min转速下离心10min,离心后去除上层脂肪,取上清液。所余水解物残渣再加水清洗并在3000r/min转速下离心10min,离心后再取上清液。合并两次离心后所得上清液为水解液。所说离心的。水解液温度在55℃时,按与水解液的质量体积比为0.35%的量加入粒度为40目的活性炭搅拌35min进行脱色除腥,脱色除腥后滤去活性炭得色清,腥味淡的水解液。最后浓缩得产品复合氨基酸溶液。
8、一种鱼肠制备复合氨基酸液的方法,先对鱼肠经切碎、清洗后在120℃的温度中蒸煮25min,再经捣碎匀浆,再按水与匀浆液的质量比为1∶2.0的量将水和鱼肠混匀得鱼肠浆。鱼肠浆置于容器中并在水浴槽内升温且控制45℃的恒温下水解,水解是加入中性蛋白酶进行的。水解前先用浓度为5.5mol/L的NaOH水溶液调节鱼肠浆的pH值到7.0,再按作用浓度为每克鱼肠浆加入1250IU的量加入木瓜蛋白酶,水解时继续滴加浓度为5.5mol/L的NaOH水溶液使水解体系维持在7.0。水解7h后,用浓度为6mol/L盐酸水溶液调节体系的pH值至4.3,在调节pH值的同时提高水浴温度到100℃以上对酶进行灭活得水解完成物。水解完成物先在3000r/min转速下离心10min,离心后去除上层脂肪,取上清液。所余水解物残渣再加水清洗并在3000r/min转速下离心10min,离心后再取上清液。合并两次离心后所得上清液为水解液。所说离心的。水解液温度在65℃时,按与水解液的质量体积比为0.3%的量加入粒度为30目的活性炭搅拌45min进行脱色除腥,脱色除腥后滤去活性炭得色清,腥味淡的水解液。最后浓缩得产品复合氨基酸溶液。
9、一种鱼肠制备复合氨基酸液的方法,先对鱼肠经切碎、清洗后在115℃的温度中蒸煮30min,再经捣碎匀浆,再按水与匀浆液的质量比为1∶1.5的量将水和鱼肠混匀得鱼肠浆。鱼肠浆置于容器中并在水浴槽内升温且控制45℃的恒温下水解,水解是加入碱性蛋白酶进行的。水解前先用浓度为5.5mol/L的NaOH水溶液调节鱼肠浆的pH值到8.0,再按作用浓度为每克鱼肠浆加入1250IU的量加入木瓜蛋白酶,水解时继续滴加浓度为5.5mol/L的NaOH水溶液使水解体系维持在8.0。水解8h后,用浓度为6mol/L盐酸水溶液调节体系的pH值至4.3,在调节pH值的同时提高水浴温度到100℃以上对酶进行灭活得水解完成物。水解完成物先在3000r/min转速下离心10min,离心后去除上层脂肪,取上清液。所余水解物残渣再加水清洗并在3000r/min转速下离心10min,离心后再取上清液。合并两次离心后所得上清液为水解液。所说离心的。水解液温度在65℃时,按与水解液的质量体积比为0.25%的量加入粒度为35目的活性炭搅拌35min进行脱色除腥,脱色除腥后滤去活性炭得色清,腥味淡的水解液。最后浓缩得产品复合氨基酸溶液。
10、水解时首先加入中性蛋白酶水解,再加入木瓜蛋白酶水解,其中木瓜蛋白酶的用量以有效活性比是中性蛋白酶的3倍。一种鱼肠制备复合氨基酸液的方法,先对鱼肠经切碎、清洗后在120℃的温度中蒸煮25min,再经捣碎匀浆,再按水与匀浆液的质量比为1∶2.0的量将水和鱼肠匀浆液混匀得鱼肠浆。鱼肠浆置于容器中并在水浴槽内升温且控制45℃的恒温下水解。水解前先用浓度为5.5mol/L的NaOH水溶液调节鱼肠浆的pH值到7.0,再按作用浓度为每克鱼肠浆加入800IU的量加入中性蛋白酶水解4h,再按作用浓度为每克鱼肠浆加入2400IU的量加入中性蛋白酶水解3h,水解时继续滴加浓度为5.5mol/L的NaOH水溶液使水解体系维持在7.0。水解结束后,用浓度为6mol/L盐酸水溶液调节体系的pH值至4.3,在调节pH值的同时提高水浴温度到100℃以上对酶进行灭活得水解完成物。水解完成物先在3000r/min转速下离心10min,离心后去除上层脂肪,取上清液。所余水解物残渣再加水清洗并在3000r/min转速下离心10min,离心后再取上清液。合并两次离心后所得上清液为水解液。所说离心的。水解液温度在60℃时,按与水解液的质量体积比为0.25%的量加入粒度为30目的活性炭搅拌40min进行脱色除腥,脱色除腥后滤去活性炭得色清,腥味淡的水解液。最后浓缩得产品复合氨基酸溶液。
11、一种鱼肠制备复合氨基酸液的方法,取新鲜或冰鲜鱼肠道经切碎、清洗,放入容器中在高压灭菌器中用120℃温度蒸煮30min,取出后于高速组织捣碎机中匀浆,最后以水与鱼肠的质量比为1∶1.5的量加水与匀浆后的鱼肠混匀得鱼肠浆备用。
取鱼肠浆置于容器中并在水浴槽内升温且控制45℃的恒温下水解。水解前先用浓度为5.5mol/L的NaOH水溶液调节鱼肠浆的pH值到7.0,再按作用浓度为每克鱼肠浆加入500IU的量加入中性蛋白酶水解3h,再按作用浓度为每克鱼肠浆加入1500IU的量加入中性蛋白酶水解3h,水解时继续滴加浓度为5.5mol/L的NaOH水溶液使水解体系维持在7.0。水解结束后,用浓度为6mol/L盐酸水溶液调节体系的pH值至4.3,在调节pH值的同时提高水浴温度到100℃以上对酶进行灭活得水解完成物。水解完成物先在3000r/min转速下离心10min,离心后去除上层脂肪,取上清液。所余水解物残渣再加水清洗并在3000r/min转速下离心10min,离心后再取上清液。合并两次离心后所得上清液为水解液。所说离心的。水解液温度在65℃时,按与水解液的质量体积比为0.3%的量加入粒度为30目的活性炭搅拌40min进行脱色除腥,脱色除腥后滤去活性炭得颜色清亮,腥味基本被去除的水解液。最后浓缩得产品复合氨基酸溶液。
Claims (10)
1.一种鱼肠制备复合氨基酸液的方法,先对鱼肠进行清洗和匀浆处理得鱼肠浆,再于恒温下水解,水解完成物再经两次离心获得上清液并将两次上清液合并为水解液,最后水解液经脱色浓缩得复合氨基酸溶液;其特征是所说水解为酶水解,水解前先用NaOH水溶液调节溶液的pH值,水解所用酶为蛋白酶,水解过程中继续以NaOH水溶液维持水解体系的pH值,水解结束后,用盐酸水溶液调节体系的pH值至4.3,在调节pH值的同时加热对酶进行灭活得水解完成物;其中:
或者为中性蛋白酶,作用浓度为每克鱼肠浆加入600~2500IU;水解时的pH值为6.5~7.5;水解温度在45~55℃;
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