CN101948507A - 一类以ngr(no2)为靶向载体的新型抗癌药物、制备及其用途 - Google Patents
一类以ngr(no2)为靶向载体的新型抗癌药物、制备及其用途 Download PDFInfo
- Publication number
- CN101948507A CN101948507A CN2010102823240A CN201010282324A CN101948507A CN 101948507 A CN101948507 A CN 101948507A CN 2010102823240 A CN2010102823240 A CN 2010102823240A CN 201010282324 A CN201010282324 A CN 201010282324A CN 101948507 A CN101948507 A CN 101948507A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- ngr
- precursor
- medicament
- fluorouracil
- compound
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 9
- 230000008685 targeting Effects 0.000 title claims abstract description 5
- 239000003814 drug Substances 0.000 title abstract description 40
- 230000001093 anti-cancer Effects 0.000 title abstract description 10
- GHASVSINZRGABV-UHFFFAOYSA-N Fluorouracil Chemical compound FC1=CNC(=O)NC1=O GHASVSINZRGABV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 18
- 229960002949 fluorouracil Drugs 0.000 claims abstract description 12
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 claims abstract description 10
- AOJJSUZBOXZQNB-VTZDEGQISA-N 4'-epidoxorubicin Chemical compound O([C@H]1C[C@@](O)(CC=2C(O)=C3C(=O)C=4C=CC=C(C=4C(=O)C3=C(O)C=21)OC)C(=O)CO)[C@H]1C[C@H](N)[C@@H](O)[C@H](C)O1 AOJJSUZBOXZQNB-VTZDEGQISA-N 0.000 claims abstract description 6
- UHDGCWIWMRVCDJ-CCXZUQQUSA-N Cytarabine Chemical compound O=C1N=C(N)C=CN1[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 UHDGCWIWMRVCDJ-CCXZUQQUSA-N 0.000 claims abstract description 6
- ZBNZXTGUTAYRHI-UHFFFAOYSA-N Dasatinib Chemical compound C=1C(N2CCN(CCO)CC2)=NC(C)=NC=1NC(S1)=NC=C1C(=O)NC1=C(C)C=CC=C1Cl ZBNZXTGUTAYRHI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 5
- 239000002067 L01XE06 - Dasatinib Substances 0.000 claims abstract description 5
- 229960002448 dasatinib Drugs 0.000 claims abstract description 5
- GOTYRUGSSMKFNF-UHFFFAOYSA-N lenalidomide Chemical compound C1C=2C(N)=CC=CC=2C(=O)N1C1CCC(=O)NC1=O GOTYRUGSSMKFNF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 5
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 24
- -1 Taxan Chemical compound 0.000 claims description 13
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical group Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 150000004702 methyl esters Chemical class 0.000 claims description 7
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 claims description 6
- 229940041181 antineoplastic drug Drugs 0.000 claims description 6
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 claims description 5
- 125000005647 linker group Chemical group 0.000 claims description 4
- 229940120975 revlimid Drugs 0.000 claims description 4
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 3
- 125000004169 (C1-C6) alkyl group Chemical group 0.000 claims description 2
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 claims description 2
- 125000005842 heteroatom Chemical group 0.000 claims description 2
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 125000003636 chemical group Chemical group 0.000 claims 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 abstract description 35
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 abstract description 16
- 230000012010 growth Effects 0.000 abstract description 11
- 238000013461 design Methods 0.000 abstract description 6
- 206010027476 Metastases Diseases 0.000 abstract description 4
- 230000009401 metastasis Effects 0.000 abstract description 4
- 238000011160 research Methods 0.000 abstract description 4
- 230000008878 coupling Effects 0.000 abstract description 2
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 abstract description 2
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 abstract description 2
- 230000009545 invasion Effects 0.000 abstract description 2
- 239000002243 precursor Substances 0.000 abstract 12
- 230000001772 anti-angiogenic effect Effects 0.000 abstract 2
- HTIJFSOGRVMCQR-UHFFFAOYSA-N Epirubicin Natural products COc1cccc2C(=O)c3c(O)c4CC(O)(CC(OC5CC(N)C(=O)C(C)O5)c4c(O)c3C(=O)c12)C(=O)CO HTIJFSOGRVMCQR-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 1
- 229960000684 cytarabine Drugs 0.000 abstract 1
- 229960001904 epirubicin Drugs 0.000 abstract 1
- 229960004942 lenalidomide Drugs 0.000 abstract 1
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 abstract 1
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 26
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 22
- 229940002612 prodrug Drugs 0.000 description 22
- 239000000651 prodrug Substances 0.000 description 22
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 13
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 13
- 102100022749 Aminopeptidase N Human genes 0.000 description 12
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 12
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 12
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 11
- 230000004224 protection Effects 0.000 description 10
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 10
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 9
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 9
- 238000000034 method Methods 0.000 description 9
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 9
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 9
- VHYFNPMBLIVWCW-UHFFFAOYSA-N 4-Dimethylaminopyridine Chemical compound CN(C)C1=CC=NC=C1 VHYFNPMBLIVWCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 8
- 238000011275 oncology therapy Methods 0.000 description 8
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 7
- NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N hydroxybenzotriazole Substances O=C1C=CC=C2NNN=C12 NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 6
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 6
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 6
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 240000002853 Nelumbo nucifera Species 0.000 description 5
- 235000006508 Nelumbo nucifera Nutrition 0.000 description 5
- 235000006510 Nelumbo pentapetala Nutrition 0.000 description 5
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 5
- 239000011737 fluorine Substances 0.000 description 5
- 229910052731 fluorine Inorganic materials 0.000 description 5
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 5
- 235000002639 sodium chloride Nutrition 0.000 description 5
- 230000004862 vasculogenesis Effects 0.000 description 5
- LMDZBCPBFSXMTL-UHFFFAOYSA-N 1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimide Chemical compound CCN=C=NCCCN(C)C LMDZBCPBFSXMTL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229960000549 4-dimethylaminophenol Drugs 0.000 description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N Palladium Chemical compound [Pd] KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 206010039491 Sarcoma Diseases 0.000 description 4
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 4
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 4
- 235000019439 ethyl acetate Nutrition 0.000 description 4
- 201000007270 liver cancer Diseases 0.000 description 4
- 208000014018 liver neoplasm Diseases 0.000 description 4
- UKVIEHSSVKSQBA-UHFFFAOYSA-N methane;palladium Chemical compound C.[Pd] UKVIEHSSVKSQBA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 4
- 230000000452 restraining effect Effects 0.000 description 4
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 4
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 4
- 229960001866 silicon dioxide Drugs 0.000 description 4
- QZDDFQLIQRYMBV-UHFFFAOYSA-N 2-[3-nitro-2-(2-nitrophenyl)-4-oxochromen-8-yl]acetic acid Chemical compound OC(=O)CC1=CC=CC(C(C=2[N+]([O-])=O)=O)=C1OC=2C1=CC=CC=C1[N+]([O-])=O QZDDFQLIQRYMBV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108010049990 CD13 Antigens Proteins 0.000 description 3
- MRAUNPAHJZDYCK-BYPYZUCNSA-N L-nitroarginine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCCNC(=N)N[N+]([O-])=O MRAUNPAHJZDYCK-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 3
- MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N Oxalic acid Chemical compound OC(=O)C(O)=O MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 102100040247 Tumor necrosis factor Human genes 0.000 description 3
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 3
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 3
- 208000035269 cancer or benign tumor Diseases 0.000 description 3
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 3
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 3
- IXCSERBJSXMMFS-UHFFFAOYSA-N hydrogen chloride Substances Cl.Cl IXCSERBJSXMMFS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229910000041 hydrogen chloride Inorganic materials 0.000 description 3
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 3
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 3
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 3
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 3
- GRVDJDISBSALJP-UHFFFAOYSA-N methyloxidanyl Chemical group [O]C GRVDJDISBSALJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 3
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 3
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 description 3
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 3
- 150000003141 primary amines Chemical group 0.000 description 3
- 239000012265 solid product Substances 0.000 description 3
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N succinic acid Chemical compound OC(=O)CCC(O)=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 3
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 3
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 description 3
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 3
- XBNGYFFABRKICK-UHFFFAOYSA-N 2,3,4,5,6-pentafluorophenol Chemical compound OC1=C(F)C(F)=C(F)C(F)=C1F XBNGYFFABRKICK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FZUBHJJEYNHYFU-DKWTVANSSA-N 2-aminoacetic acid;(2s)-2,4-diamino-4-oxobutanoic acid Chemical compound NCC(O)=O.OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O FZUBHJJEYNHYFU-DKWTVANSSA-N 0.000 description 2
- 206010003445 Ascites Diseases 0.000 description 2
- 206010013183 Dislocation of vertebra Diseases 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- YCKRFDGAMUMZLT-UHFFFAOYSA-N Fluorine atom Chemical compound [F] YCKRFDGAMUMZLT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N Fumaric acid Chemical compound OC(=O)\C=C\C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N 0.000 description 2
- 101000757160 Homo sapiens Aminopeptidase N Proteins 0.000 description 2
- CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N Hydrogen bromide Chemical compound Br CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000581650 Ivesia Species 0.000 description 2
- 238000012449 Kunming mouse Methods 0.000 description 2
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 2
- KCWZGJVSDFYRIX-YFKPBYRVSA-N N(gamma)-nitro-L-arginine methyl ester Chemical compound COC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N[N+]([O-])=O KCWZGJVSDFYRIX-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 2
- 102000008299 Nitric Oxide Synthase Human genes 0.000 description 2
- 108010021487 Nitric Oxide Synthase Proteins 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000000709 aorta Anatomy 0.000 description 2
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002585 base Substances 0.000 description 2
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 230000017531 blood circulation Effects 0.000 description 2
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 2
- 230000004709 cell invasion Effects 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 2
- XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-N dimethylselenoniopropionate Natural products CCC(O)=O XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 2
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 description 2
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 2
- 125000000449 nitro group Chemical group [O-][N+](*)=O 0.000 description 2
- 238000001543 one-way ANOVA Methods 0.000 description 2
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 2
- IZUPBVBPLAPZRR-UHFFFAOYSA-N pentachloro-phenol Natural products OC1=C(Cl)C(Cl)=C(Cl)C(Cl)=C1Cl IZUPBVBPLAPZRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 238000010992 reflux Methods 0.000 description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 2
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 2
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 2
- UIUJIQZEACWQSV-UHFFFAOYSA-N succinic semialdehyde Chemical compound OC(=O)CCC=O UIUJIQZEACWQSV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 description 2
- JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N toluene-4-sulfonic acid Chemical compound CC1=CC=C(S(O)(=O)=O)C=C1 JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000001291 vacuum drying Methods 0.000 description 2
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 2
- MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N (3s)-4-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(1s)-1-carboxy-2-hydroxyethyl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-[[2-[[(2s)-2,6-diaminohexanoyl]amino]acetyl]amino]-4-oxobutanoic acid Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCCCN MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N 0.000 description 1
- WACNXHCZHTVBJM-UHFFFAOYSA-N 1,2,3,4,5-pentafluorobenzene Chemical compound FC1=CC(F)=C(F)C(F)=C1F WACNXHCZHTVBJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 1,4-Dioxane Chemical compound C1COCCO1 RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XMPUIJJJPBJGMG-UHFFFAOYSA-N 1-o-benzyl 4-o-[(5-fluoro-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)methyl] butanedioate Chemical compound O=C1NC(=O)C(F)=CN1COC(=O)CCC(=O)OCC1=CC=CC=C1 XMPUIJJJPBJGMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZUQYICNLOGVJLT-WSTBAARBSA-N 2-aminoacetic acid (2S)-2-amino-5-(diaminomethylideneamino)pentanoic acid (2S)-2,4-diamino-4-oxobutanoic acid Chemical compound NCC(O)=O.OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O.OC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N ZUQYICNLOGVJLT-WSTBAARBSA-N 0.000 description 1
- 208000009304 Acute Kidney Injury Diseases 0.000 description 1
- 108090000915 Aminopeptidases Proteins 0.000 description 1
- 102000004400 Aminopeptidases Human genes 0.000 description 1
- 206010002383 Angina Pectoris Diseases 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- JXYACYYPACQCDM-UHFFFAOYSA-N Benzyl glycinate Chemical compound NCC(=O)OCC1=CC=CC=C1 JXYACYYPACQCDM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010065553 Bone marrow failure Diseases 0.000 description 1
- 108010069514 Cyclic Peptides Proteins 0.000 description 1
- 102000001189 Cyclic Peptides Human genes 0.000 description 1
- 208000005156 Dehydration Diseases 0.000 description 1
- 201000004624 Dermatitis Diseases 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N Dextrotartaric acid Chemical compound OC(=O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N 0.000 description 1
- 206010012735 Diarrhoea Diseases 0.000 description 1
- 208000004232 Enteritis Diseases 0.000 description 1
- 108010091443 Exopeptidases Proteins 0.000 description 1
- 102000018389 Exopeptidases Human genes 0.000 description 1
- 208000029523 Interstitial Lung disease Diseases 0.000 description 1
- 206010023126 Jaundice Diseases 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- 206010027458 Metastases to lung Diseases 0.000 description 1
- AFVFQIVMOAPDHO-UHFFFAOYSA-N Methanesulfonic acid Chemical compound CS(O)(=O)=O AFVFQIVMOAPDHO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000006833 Multifunctional Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108010047290 Multifunctional Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 241000699660 Mus musculus Species 0.000 description 1
- QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N N,N′-Dicyclohexylcarbodiimide Substances C1CCCCC1N=C=NC1CCCCC1 QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CHJJGSNFBQVOTG-UHFFFAOYSA-N N-methyl-guanidine Natural products CNC(N)=N CHJJGSNFBQVOTG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000001429 N-terminal alpha-amino-acid group Chemical group 0.000 description 1
- 208000001738 Nervous System Trauma Diseases 0.000 description 1
- 206010029350 Neurotoxicity Diseases 0.000 description 1
- 101710141454 Nucleoprotein Proteins 0.000 description 1
- 208000002193 Pain Diseases 0.000 description 1
- 108010067902 Peptide Library Proteins 0.000 description 1
- 208000033626 Renal failure acute Diseases 0.000 description 1
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 240000008104 Stachytarpheta jamaicensis Species 0.000 description 1
- 206010044221 Toxic encephalopathy Diseases 0.000 description 1
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 1
- 210000000683 abdominal cavity Anatomy 0.000 description 1
- 229960000583 acetic acid Drugs 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 1
- 210000000577 adipose tissue Anatomy 0.000 description 1
- 125000001931 aliphatic group Chemical group 0.000 description 1
- 239000003513 alkali Substances 0.000 description 1
- 125000002947 alkylene group Chemical group 0.000 description 1
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000003368 amide group Chemical group 0.000 description 1
- ZRALSGWEFCBTJO-UHFFFAOYSA-N anhydrous guanidine Natural products NC(N)=N ZRALSGWEFCBTJO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000118 anti-neoplastic effect Effects 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010073235 asparagine-glycine-arginine Proteins 0.000 description 1
- 210000000721 basilar membrane Anatomy 0.000 description 1
- KDYFGRWQOYBRFD-NUQCWPJISA-N butanedioic acid Chemical compound O[14C](=O)CC[14C](O)=O KDYFGRWQOYBRFD-NUQCWPJISA-N 0.000 description 1
- 230000009400 cancer invasion Effects 0.000 description 1
- 210000003169 central nervous system Anatomy 0.000 description 1
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 description 1
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 1
- UVJHQYIOXKWHFD-UHFFFAOYSA-N cyclohexa-1,4-diene Chemical compound C1C=CCC=C1 UVJHQYIOXKWHFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000018044 dehydration Effects 0.000 description 1
- 238000006297 dehydration reaction Methods 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- SWSQBOPZIKWTGO-UHFFFAOYSA-N dimethylaminoamidine Natural products CN(C)C(N)=N SWSQBOPZIKWTGO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000007599 discharging Methods 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 1
- 238000009510 drug design Methods 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 210000003725 endotheliocyte Anatomy 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 239000001530 fumaric acid Substances 0.000 description 1
- 239000012362 glacial acetic acid Substances 0.000 description 1
- 239000003292 glue Substances 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 229940093915 gynecological organic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 1
- 229910000042 hydrogen bromide Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 1
- 230000036737 immune function Effects 0.000 description 1
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 1
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 1
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 1
- 208000019423 liver disease Diseases 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N maleic acid Chemical compound OC(=O)\C=C/C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N 0.000 description 1
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- HZVOZRGWRWCICA-UHFFFAOYSA-N methanediyl Chemical compound [CH2] HZVOZRGWRWCICA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HNBDRPTVWVGKBR-UHFFFAOYSA-N methyl pentanoate Chemical compound CCCCC(=O)OC HNBDRPTVWVGKBR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 1
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 description 1
- 238000010172 mouse model Methods 0.000 description 1
- 208000010125 myocardial infarction Diseases 0.000 description 1
- 208000028412 nervous system injury Diseases 0.000 description 1
- 230000007135 neurotoxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000228 neurotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 238000011580 nude mouse model Methods 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 1
- 230000008520 organization Effects 0.000 description 1
- 235000006408 oxalic acid Nutrition 0.000 description 1
- CFHIDWOYWUOIHU-UHFFFAOYSA-N oxomethyl Chemical compound O=[CH] CFHIDWOYWUOIHU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N phenol group Chemical group C1(=CC=CC=C1)O ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005554 pickling Methods 0.000 description 1
- OXNIZHLAWKMVMX-UHFFFAOYSA-N picric acid Chemical class OC1=C([N+]([O-])=O)C=C([N+]([O-])=O)C=C1[N+]([O-])=O OXNIZHLAWKMVMX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 235000019260 propionic acid Nutrition 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 239000012264 purified product Substances 0.000 description 1
- IUVKMZGDUIUOCP-BTNSXGMBSA-N quinbolone Chemical compound O([C@H]1CC[C@H]2[C@H]3[C@@H]([C@]4(C=CC(=O)C=C4CC3)C)CC[C@@]21C)C1=CCCC1 IUVKMZGDUIUOCP-BTNSXGMBSA-N 0.000 description 1
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000012827 research and development Methods 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 239000001384 succinic acid Substances 0.000 description 1
- 230000007761 synergistic anti-cancer Effects 0.000 description 1
- 238000010189 synthetic method Methods 0.000 description 1
- 229940095064 tartrate Drugs 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 229950004288 tosilate Drugs 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N trans-butenedioic acid Natural products OC(=O)C=CC(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- 229940121358 tyrosine kinase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 239000005483 tyrosine kinase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 150000004917 tyrosine kinase inhibitor derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 1
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 description 1
- FBTUMDXHSRTGRV-ALTNURHMSA-N zorubicin Chemical compound O([C@H]1C[C@@](O)(CC=2C(O)=C3C(=O)C=4C=CC=C(C=4C(=O)C3=C(O)C=21)OC)C(\C)=N\NC(=O)C=1C=CC=CC=1)[C@H]1C[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O1 FBTUMDXHSRTGRV-ALTNURHMSA-N 0.000 description 1
- 229960000641 zorubicin Drugs 0.000 description 1
Images
Landscapes
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Abstract
本发明提供了新型的以NGR(NO2)为靶向载体的抗癌前体药物，包括5-氟尿嘧啶前药、来那度胺前药、阿糖胞苷前药、表阿霉素前药和达沙替尼前药的设计与合成，同时我们对其中的5-氟尿嘧啶该前药的抗肿瘤活性进行了初步研究，发现该前药不仅可有效抑制肿瘤细胞的侵袭转移，而且能够显著抑制实体瘤的生长。无论从药效或是从制剂方面，都要比母体药物5-氟尿嘧啶更加优良，适应面广。具体而言，本发明主要涉及三个方面(1)一种新型肿瘤靶向三肽NGR(NO2)的设计与抗血管生成作用；(2)肿瘤靶向三肽NGR(NO2)与5种抗癌药物共价键偶联制成抗癌前体药物；(3)一种新型5-氟尿嘧啶前药的抗癌和抗新生血管生成的医药用途。
Description
技术领域
本发明涉及一类新型的肿瘤靶向药物载体NGR(NO2)的设计、合成与具体的抗癌用途，5种以NGR(NO2)为靶向载体的新型抗癌药物的设计、合成及其抗肿瘤活性与用途。
技术背景
氨肽酶N(CD13)与NGR三肽
氨肽酶N(APN/CD13)是一种依赖于锌离子的二型金属外肽酶，隶属于M1氨肽酶大家族。其生理学功能是参与底物蛋白N端氨基酸的降解。研究证明，氨肽酶N是一种多功能酶，底物广泛，它在肿瘤发生、免疫功能调节，病毒感染以及镇痛方面都发挥重要的作用。特别是在肿瘤组织新生血管中，APN有着高水平的表达，它在肿瘤血管生成和肿瘤细胞转移过程中发挥重要的作用。因此，APN已经成为抗肿瘤药物设计与治疗的重要靶点。近年的研究报道了利用噬菌体展示肽库筛选法得到与肿瘤血管生成有关的多肽序列：CNGRC、GNGRG，也称为肿瘤示踪肽(tumor-homing peptide)。其中NGR(asparagine-glycine-arginine)是由天冬酰胺—甘氨酸—精氨酸组成的三肽，CNGRC，GNGRG分别是是含有NGR基序的环肽和链肽。NGR是一种APN特异性配体，可以被肿瘤血管细胞表面的APN特异性识别。现在以肿瘤示踪肽作为载体，将治疗药物或肿瘤细胞因子与其偶联结合研发靶向药物是一研究热点。比如将CNGRC肽与TNF-α结合，可使得TNF的疗效增加了12-15倍，与此同时，TNF严重的神经毒性却大大降低。将CNGRC和包裹有阿霉素的脂质体结合后也取得令人满意的效果。将含有NGR基序的多肽GCNGRC和INF-γ结合在一体，则在GCNGRC的配合下，微量的INF-γ就可以防止反调节、延缓肿瘤生长，剂量仅为临床常用剂量的1/500，而这种模型对单独使用INFγ无效。
在本研究工作中，我们对NGR三肽的结构进行了修饰，设计并合成了新型的天冬酰胺—甘氨酸—硝基精氨酸甲酯三肽。结构如下所示：
NGR(NO2)甲酯
大量文献证明，硝基精氨酸甲酯盐酸盐可作为一种NO合酶抑制剂，能够起到抑制肿瘤血管生成的作用，与传统抗癌药物如5-氟尿嘧啶、表阿霉素、阿糖胞苷等联合使用会起到协同作用。此外，对精氨酸的ω-位胍基进行硝基保护以及羧基进行甲酯保护后，会使天冬酰胺—甘氨酸—硝基精氨酸甲酯三肽具有更好的化学反应性，并且使化合物的极性降低，易于提取分离。因此，我们选择对NGR的精氨酸进行硝基和甲酯保护。实验表明，本三肽既有肿瘤靶向作用，也可直接起到抑制血管生成的抗肿瘤作用。本领域已知将盐酸盐替换为其他无机酸盐或有机酸盐的方法，可与其他无机酸比如硫酸、磷酸、氢溴酸等形成药学上可接受的盐，也可与其他有机酸比如乙酸、丙酸、草酸、琥珀酸、马来酸、富马酸、苹果酸、柠檬酸、酒石酸、甲磺酸、对甲苯磺酸等形成药学上可接受的盐。
从化合物的结构中可以看到，天冬酰胺—甘氨酸—硝基精氨酸甲酯三肽具有一个游离的伯胺基，我们可以通过此游离的伯胺基，将天冬酰胺—甘氨酸—硝基精氨酸甲酯三肽与抗癌药物相连结，其通式如下：
抗肿瘤药物-linker-NGR(NO2)
其中linker为C1-6烃基，优选为C1-6链烃基，任选被＝O、＝S取代，其中的碳原子任选被选自O、S或N的杂原子替换，它的作用是将抗癌药物，如传统的抗癌药物或者新型抗癌药物如酪氨酸激酶抑制剂等以化学键与NGR(NO2)相连，其中抗肿瘤药物，本领域技术人员能够理解，在此应为一取代基，即，抗肿瘤药物分子中的一个氢原子被linker取代。
如下列一些抗癌药物：
以上列出的药物的结构中均包含游离的胺基，羟基或者羧基，在本实验中，我们通过长短不同的linker来直接或间接的与天冬酰胺—甘氨酸—硝基精氨酸甲酯三肽相连。制备了上述抗癌药物的靶向性前药，起到减毒增效的协同抗癌作用。
以5-氟尿嘧啶(5Fu)前药为例该5Fu前药的结构如下图所示：
众所周知，5Fu是一种常用的传统抗癌药物，但其副作用亦甚为严重，其中包括严重脱水、骨髓抑制、肠炎、口腔溃疡、皮炎、心绞痛以及心肌梗死、急性肾功能不全、间质性肺炎、肝功能损害、黄疸、腹泻，5Fu也可导致急性的中枢神经系统损伤(白质脑病)等等。亟需一种有效手段来提高它对肿瘤细胞的选择性，从而降低其毒副作用，这也是我们设计新型肿瘤靶向的5Fu前药的目的。
另外，五氟尿嘧啶在临床上主要是以静脉注射的方式进行给药，它的代谢半衰期很短，仅为15分钟。在我们设计的5-Fu前药结构中，在体内，五氟尿嘧啶可以很容易的从一种名为酰氧亚甲基的结构中释放出来，其机理如下图所示：
因此我们所改造的具有上述结构的无氟尿嘧啶前药可提高其代谢稳定性，并能够起到药物缓释的作用。
其次，有文献报道，(世界华人消化杂志，2007，15(2)，114-117)L-硝基精氨酸(L-NAME)还具有抑制肿瘤新生血管生成的作用，我们也通过实验验证了上述结论。此外文献也报道L-NAME与5Fu联合使用还具有协同抗肿瘤作用，因此我们首先设计了5-Fu-NGR(NO2)的结构。
发明内容
第一：设计合成了一种新型的肿瘤靶向的天冬酰胺—甘氨酸—硝基精氨酸甲酯三肽NGR(NO2)，本三肽既有肿瘤靶向作用，也可直接起到抑制血管生成的抗肿瘤作用(见实验结果部分)。
第二：在上述三肽结构中具有游离的伯胺基，可以与多种抗癌药物如5氟尿嘧啶、来那度胺、阿糖胞苷、表阿霉素、达沙替尼进行直接或者间接的共价键结合，来提高这些药物对肿瘤的靶向性，从而降低他们的毒副作用，并起到抗癌协同作用。
第三：对5-Fu-NGR(NO2)的抗癌活性和可能的医药用途进行了实验研究。
在本发明中，我们以NGR(NO2)为肿瘤靶向载体，将其与来那度胺、阿糖胞苷、表阿霉素、达沙替尼以及5Fu通过一个短脂肪链相连，得到结构全新的前药，结构如下图所示，并对其中的5氟尿嘧啶前药的生物活性进行了初步评价。
附图说明
图1：血管生成抑制实验照片
图2：空白组和各给药组的肺表面结节数对比
图3：各化合物抑制肿瘤细胞转移的抑制率
图4：各给药组和空白组的瘤重对比图
图5：各给药组和空白组的肿瘤抑制率对比图
发明详述
5-FU-NGR(NO2的化学合成：
1.合成路线：
1.1NH2-Asn-Gly-Arg(NO2)COOCH3的合成：
Reagents and conditions：(a)HOBt，DCC，0℃for 2h and then 8h at r.t.；(b)NH2-Gly-OBn·TsOH，TEA.；(c)HCl-dry EtOAc.；(d)NH2-Arg(NO2)-COOCH3·HCl，TEA.
1.2.5-Fu-linker-Asn-Gly-Arg(NO2)-COOCH3的合成：
Scheme 2.(a)60℃.；(b)DCC，DMAP，dry THF.；(c)10％Pd/C，AcOH，1，4-cyclohexene.；(d)pentafluorophenol，EDAC，dry DMF.；(e)TEA，dry THF.
2合成方法
Boc保护的天冬酰胺-甘氨酸苄酯Boc-Asn-Gly-OBn的合成：8.25克(50毫摩尔)Boc保护的天冬酰胺溶于250毫升的无水四氢呋喃，然后加入6.75克(50毫摩尔)的HOBt和10.3克(50毫摩尔)的DCC，混合溶液冰浴下搅拌1小时后，撤去冰浴，继续反应6小时。将含有16.9克(50毫摩尔)的甘氨酸苄酯对甲苯磺酸盐和7毫升无水三乙胺的无水四氢呋喃溶液加入到上述混合溶液中，室温搅拌反应24小时。减压蒸除四氢呋喃，所得产物用乙酸乙酯充分溶解后，经碱洗，水洗，酸洗，水洗以，无水硫酸钠干燥及柱层析分离提出后，得到6克白色固体产物，产率为61.7％。
Boc保护的天冬酰胺-甘氨酸Boc-Asn-Gly-COOH的合成：将6克(15.8毫摩尔)的Boc保护天冬酰胺-甘氨酸苄酯溶于250毫升的四氢呋喃中，加入2毫升乙酸和0.6克的10％钯碳，密封条件下通氢气室温反应24小时，过滤钯碳，旋干溶剂，真空干燥过夜，得到4克白色固体产物，产率87.4％。
Boc保护的天冬酰胺-甘氨酸-硝基精氨酸甲酯Boc-Asn-Gly-Arg(NO2)-COOCH3的合成的合成：将2.89克(10毫摩尔)的Boc保护天冬酰胺-甘氨酸、1.46克(10.8毫摩尔)的HOBt溶于200毫升的无水四氢呋喃中，缓慢加入含有2.27克(11毫摩尔)DCC的无水四氢呋喃溶液，冰浴下搅拌1小时后，撤去冰浴，继续反应6小时。向反应溶液中加入2.97克(11毫摩尔)的硝基精氨酸甲酯盐酸盐和1.6毫升的三乙胺。混合物室温下搅拌24小时，过滤掉生成的DCU后，上硅胶柱分离提纯，得到3.07克白色固体，产率61％。
天冬酰胺-甘氨酸-硝基精氨酸甲酯盐酸盐NH2-Asn-Gly-Arg(NO2)-COOCH3hydrochloride的合成：将Boc保护的天冬酰胺-甘氨酸-硝基精氨酸甲酯溶于氯化氢的饱和乙酸乙酯溶液中，室温搅拌过夜，蒸除乙酸乙酯，的白色固体产物。
4-((5-氟基-2，4二羰基-3，4二氢嘧啶-1-基)甲氧基)-4-羰基-丁酸苄酯
4-((5-fluoro-2，4-dioxo-3，4-dihydropyrimidin-1-yl)methoxy)-4-oxo-butanoic acid benzyl ester的合成：将0.52克五氟尿嘧啶(4毫摩尔)和0.712克(8.8毫摩尔)的37％甲醛水溶液混合，60℃搅拌一个小时，减压蒸除水分，所得无色粘稠油状物溶于12毫升无水乙腈，加入1.96克(5.6毫摩尔)丁二酸单苄酯1.15克(5.6毫摩尔)DCC和3.2毫克(0.26毫摩尔)的DMAP。混合物于室温下搅拌反应24小时。滤除沉淀并减压蒸除乙腈。硅胶柱分离提纯得到白色固体，产率45.3％。
4-((5-氟基-2，4二羰基-3，4二氢嘧啶-1-基)甲氧基)-4-羰基-丁酸
4-((5-fluoro-2，4-dioxo-3，4-dihydropyrimidin-1-yl)methoxy)-4-oxo-butanoic acid的合成：将1.05克(3毫摩尔)的4-((5-氟基-2，4二羰基-3，4二氢嘧啶-1-基)甲氧基)-4-羰基-丁酸苄酯溶于17毫升的乙酸中。待完全溶解后，加入1克的10％钯碳和1.5毫升的1，4环己二烯。待反应完全后，加入25毫升的四氢呋喃，过滤除去钯碳，减压蒸除溶剂，真空干燥过夜得到白色固体，该产物无需分离提纯即可用于下一步反应。
丁二酸(5-氟基-2，4-二羰基-3，4-二氢嘧啶基)甲酯五氟苯酚酯Succinic acid(5-fluoro-2，4-dioxo-3，4-dihydro-2Hpyrimidin-1-yl)methyl ester 2，3，4，5，6-pentafluorophenylester将0.52克(2毫摩尔)上一步得到的化合物溶于5毫升DMF。随即加入0.37克五氟苯酚和0.39克EDAC。混合物于室温下搅拌过夜，上硅胶柱分离提纯产物，所得到白色固体(活性酯)立即用于下一步，以防变质。
2-(2-(4-胺基-2-(4-((5-氟基-2，4-二羰基-3，4-二氢嘧啶基)甲氧基)4-4氧-丁甲酰基)-4氧-丁甲酰基)乙酰基)-5-(3-硝基胍基)-戊酸甲酯2-(2-(4-amino-2-(4-((5-fluoro-2，4-dioxo-3，4-dihydropyrimidin-1(2H)-yl)methoxy)-4-oxobutana mido)-4-oxobutanamido)acetamido)-5-(3-nitroguanidino)pentanoate methyl ester的合成：取0.14克(0.31mmol)天冬酰胺-甘氨酸-硝基精氨酸甲酯盐酸盐，溶于6毫升的干燥DMF中，加入45微升的三乙胺，随即再加入0.23克(0.54毫摩尔)的上述活性酯。室温下搅拌反应24小时。减压蒸除DMF后上硅胶柱分离得白色固体。
3.5-Fu-NGR(NO2)的结构确证：
熔点＝100-101℃。MS-ESI：[M+1]+＝647.5；[M+Na]+＝669.3。400MHz 1H NMR(DMSO-d6)δ＝1.51(m，2H)，1.65(m，1H)，1.74(m，1H)，2.45(m，2H)，2.53-2.56(m，4H)，3.14(m，2H)，3.62(s，3H)，3.66-3.73(m，2H)，4.24(m，1H)，4.45(t，J＝4.4Hz，1H)，5.54(s，2H)，8.01(d，J＝4.8Hz，1H)。以如下方法合成了来那度胺的前药：
a.(COCl2)3；b.TEA
熔点＝204-205℃。MS-ESI：[M+1]+＝699.6；
以如下方法合成了阿糖胞苷的前药：
a.DMF；b.10％Pd/C，H2；c.DCC，HOBt，THF.
熔点＝124-126℃。MS-ESI：[M+1]+＝730.7；
以如下方法合成了表阿霉素的前药：
a.(Boc)2O，1N NaOH，pH＝8-9；b.DMAP，DMSO，reflux；c.HOBt，DCC；d.saturated HCl in EtOAc.
熔点＝120-122℃。MS-ESI：[M+1]+＝1016.9
以如下方法合成了达沙替尼的前药：
a.DMAP，dioxane，reflux；b.HOBt，DCC，DMF.
熔点＝200-202℃。MS-ESI：[M+1]+＝989.5；
生物活性评价
1.NGR(NO2)对血管生成抑制实验
实验原理：
在没有血管供应氧气和营养的条件下，肿瘤组织的体积不会超过1-2cm3。而新血管的生成便是肿瘤发生和发展的氧气和营养来源，因此，通过抑制肿瘤组织新生血管的生成，便可达到抑制肿瘤生长的目的。在上文中我们已经论述了硝基精氨酸甲酯作为一种NO合酶抑制剂，能够起到抑制肿瘤血管生成的作用。而我们所设计合成的NGR(NO2)三肽中便包含有硝基精氨酸甲酯，因此我们预测NGR(NO2)也应该具有抑制血管生成的作用。本实验采用主动脉环试验。
受试药物：NG R(NO2)、5Fu、5Fu-NGR(NO2)，DMSO溶解至10mM做储存液剂量：NG R(NO2)、5Fu、5Fu-NGR(NO2)各10uM；
步骤：取大鼠胸主动脉，剔除血管周围的脂肪组织，用PBS洗多遍，用内皮细胞专用培养基洗两遍，剪主动脉至1mm，将血管竖放于孔上，再分别铺上70μl胶(提前1640培养基1∶1稀释)，放培养箱30min后，加入70μl/孔培养基，DMSO含量1/1000，化合物浓度至工作浓度；(抑制剂DMSO含量2/1000)，每孔设两个复孔培养3天后，换新培养基，并补加药物培养6天后加入MTT，6h后拍照，结果见图1。
2.Fu-linker-NGR(NO2)抑制荷肝癌H22小鼠血道转移实验
实验原理：
转移是恶性肿瘤细胞致命性的重要原因之一。肿瘤细胞借助APN及其他酶穿透血管的基底膜进入血液循环系统，进而在酶的帮助下在远端组织定位、生长。肺部由于毛细血管比较丰富，肿瘤细胞进入血道后较易侵袭转移进入肺部在肺部形成转移灶。我们通过在小鼠尾静脉中注射一定数量的肿瘤细胞，来近似地模拟肿瘤细胞侵袭进入血液循环。
我们合成5Fu-linker-NGR(NO2)既能靶向于肿瘤细胞表面表达的APN，又能缓慢释放出五氟尿嘧啶来抑制肿瘤细胞的生长或转移，因此我们通过定量给予5Fu-linker-NGR(NO2)来观察它对肿瘤细胞转移进入肺部的抑制作用以及对实体瘤的抑制作用。从而初步定性的说明5Fu-linker-NGR(NO2)对肿瘤生长和侵袭转移的抑制作用。
实验方法：
【材料】
动物：昆明系小鼠(40只)，雌雄各半，体重20～22g：山东大学实验动物中心提供。荷肝癌H22腹水型小鼠(瘤种)：山东省医学科学院提供。
试剂：Bouin固定液(饱和苦味酸溶液∶甲醛∶冰乙酸＝15∶5∶1，使用前24小时配制)，生理盐水，0.1％Na2CO3溶液。
器材：0.5mL、1mL注射器，微量移液器，5mL离心管，秒表，定量移液管。
受试化合物溶液的配制：称取5Fu-linker-NGR(NO2)0.16克，用200毫升生理盐水溶解，使化合物浓度为0.8mg/mL。同等浓度的5Fu和天冬酰胺-甘氨酸-硝基精氨酸甲酯盐酸盐(NGR(NO2))作为对照组，生理盐水为空白组。化合物皆当天配置，当天用完。
【方法】
取生长良好的荷肝癌H22小鼠，抽取腹水，加生理盐水稀释至浓度为3×107个/mL，置于冰浴中。用四号半针头给昆明系小白鼠尾静脉注射瘤悬液0.2ml(6×106个肿瘤细胞)。24小时后称重，随机分组，每组10只左右(雌雄各半，空白组数量稍多)。按20mg/kg/d剂量的目标化合物分别对小鼠进行灌胃给药。连续给药14天，第14天给药24小时后，分别称体重并记录编号。颈椎脱臼处死小鼠，解剖取肺脏、肝脏、脾脏，分别称重并记录，称肺重后将肺组织用Bouin液固定。24小时后分别计数肺转移灶数。用Origin7.5软件的单因素方差分析(One-Way AUNOVA)功能求算出整体差异；用t检验分别对各给药组与空白组进行两两比较，并以下面的公式计算各药物组的抑制率：
实验结果：
体内抗H22肝癌细胞转移实验结果数据表
P＜0.01
实验结果同时见图2-3。
由表中提供的数据可以看出，3个给药组与空白组相比肺部结节数均有明显的减少，5Fu-linker-NGR(NO2)给药组的抑制率为89.3％，远高于五氟尿嘧啶的64.1％和NGR(NO2)的63.4％。实验结果表明，该五氟尿嘧啶前药具有比母体药更好的抗肿瘤细胞转移活性。我们还可以通过改变给药途径(如腹腔或静脉注射)、改变小鼠模型(如改为裸鼠)以及改变肿瘤类型来对其活性进行进一步的探讨。
3.Fu-linker-NGR(NO2)抑制S180肉瘤生长实验
实验方法：
【材料】
动物：昆明系小鼠(50只)，雌雄各半，体重20～25g：山东大学实验动物中心提供。荷肉瘤S180腹水型小鼠(瘤种)：山东省医学科学院提供。
试剂：生理盐水。
器材：0.5mL、1mL注射器，微量移液器，5mL离心管，秒表，定量移液管。
受试化合物溶液的配制：称取5Fu-linker-NGR(NO2)并用生理盐水溶解，使化合物浓度为0.25，0.5，1mg/mL。1mg/mL的5Fu作为阳性对照组，生理盐水为空白组。
受试化合物溶液的配制：称取5Fu-linker-NGR(NO2)并用生理盐水溶解，使化合物浓度为0.25，0.5，1mg/mL。1mg/mL的5Fu作为阳性对照组，生理盐水为空白组。
【方法】
取生长良好的荷肉瘤S180腹水型小鼠，抽取腹水，加生理盐水稀释至浓度为4×107个/mL，置于冰浴中。用四号半针头给昆明系小白鼠腋下注射瘤悬液0.2ml(8×106个肿瘤细胞)。24小时后称重，随机分组，每组10只(雌雄各半)。5Fu前药组分3个给药剂量，分别为10，20，40mg/kg/d，而阳性对照药5Fu的给药剂量为40mg/kg/d。然后分别对小鼠进行灌胃给药。连续给药10天，第10天给药24小时后，分别称体重并记录编号。颈椎脱臼处死小鼠，解剖取出肿瘤、肝脏、脾脏，分别称重并记录。最后用Origin7.5软件的单因素方差分析(One-WayAUNOVA)功能求算出整体差异；用t检验分别对各给药组与空白组进行两两比较，并以下面的公式计算各药物组对S180肉瘤生长的抑制率：
实验结果：
实验结果数据表
P＜0.01
实验结果同时参见图4-5。
由表中提供的数据可以看出，4个给药组与空白组相比，肿瘤的平均重量均有明显的降低，5Fu-linker-NGR(NO2)高浓度给药组的抑制率为73.9％，5Fu-linker-NGR(NO2)中浓度给药组的抑制率为72.3％，5Fu-linker-NGR(NO2)低浓度给药组的抑制率为30.3％，而高度浓度的五氟尿嘧啶组的抑制率为63.9％。实验结果表明，该五氟尿嘧啶前药具有比母体药更好的抗肿瘤生长作用。且瘤组织中新生血管明显减少。
实验结果讨论：
从上述两个体内实验的结果可以看到，我们所设计的5Fu前药并没有对小鼠产生明显的毒副作用，个重要脏器均未受损，说明此5Fu前药对正常器官组织的毒性较低。而对于肿瘤细胞或组织来讲，5Fu前药表现出了良好的抑制作用，无论是对肿瘤细胞侵袭转移的抑制还是对实体瘤的抑制，都表现出了很好的活性，且在同等浓度下，抑制率优于阳性对照药5Fu。
本5Fu前药之所以有良好的活性，应该与以下两个原因有关：首先，此5Fu前药在体内可以释放出5Fu母体药，间接提高的5Fu的半衰期，使其能在体内缓慢释放，从而延长期作用时间；其次，此5Fu前药除了释放出5Fu母体药之外，还能够游离出NGR(NO2)，此化合物应该具有抗肿瘤血管生成的作用，从而切断了肿瘤组织的营养来源，最终抑制其生长；最后，NGR(NO2)应该还保留有肿瘤靶向作用，使5Fu能够在肿瘤组织富集，提高其抑制作用。除此之外，本5Fu前药还具有极好的水溶性，且稳定性高，从而能将其制备成多种药物剂型供患者使用。
本发明的内容不限于说明书上述记载的范围，符合本发明精神的各种变形或替换均在本发明范围之内。
Claims (10)
1.下式化合物及其药学上可接受的盐：
NGR(NO2)甲酯。
2.根据权利要求1所述的化合物，其为盐酸盐。
3.具有下式结构的化合物：
其中L为连接基团，R为具有抗肿瘤活性的化合物。
4.根据权利要求3所述的化合物，其中L为C1-6烃基，任选被＝O、＝S取代，其中的碳原子任选被选自O、S或N的杂原子替换。
5.根据权利要求3或4所述的化合物，其中R选自5-氟尿嘧啶、来那度胺、表阿霉素、紫杉烷、达沙替尼、阿糖胞苷。
6.根据权利要求3或4所述的化合物，其中R为：
7.根据权利要求3所述的化合物，其选自下列化合物：
8.根据权利要求7的化合物，其选自下列化合物：
9.权利要求1或2的化合物作为抗肿瘤药物靶向载体的应用，其通过化学基团与抗肿瘤药物键连。
10.权利要求1或2的化合物在制备抗肿瘤药物中的用途。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201010282324A CN101948507B (zh) | 2010-09-16 | 2010-09-16 | 一类以ngr(no2)为靶向载体的新型抗癌药物、制备及其用途 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201010282324A CN101948507B (zh) | 2010-09-16 | 2010-09-16 | 一类以ngr(no2)为靶向载体的新型抗癌药物、制备及其用途 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN101948507A true CN101948507A (zh) | 2011-01-19 |
| CN101948507B CN101948507B (zh) | 2012-10-17 |
Family
ID=43452148
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201010282324A Expired - Fee Related CN101948507B (zh) | 2010-09-16 | 2010-09-16 | 一类以ngr(no2)为靶向载体的新型抗癌药物、制备及其用途 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN101948507B (zh) |
Cited By (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN107721980A (zh) * | 2017-08-25 | 2018-02-23 | 南京医科大学 | 一类氟尿嘧啶和Quisinosta的乏氧靶向前药及其应用 |
| CN109528663A (zh) * | 2018-12-20 | 2019-03-29 | 江西润泽药业有限公司 | 以ngr(no2)为靶向载体的抗癌药物冻干粉剂及其制备方法和应用 |
| CN109528664A (zh) * | 2018-12-21 | 2019-03-29 | 江西润泽药业有限公司 | 含乌苯美司-抗肿药物协同前药衍生物的冻干粉剂及其制备方法 |
| CN109646429A (zh) * | 2018-12-21 | 2019-04-19 | 江西润泽药业有限公司 | 一种含乌苯美司的前药衍生物的固体剂型及其制备方法 |
| CN109705044A (zh) * | 2018-12-18 | 2019-05-03 | 江西润泽药业有限公司 | 乌苯美司衍生物与具有抗肿瘤活性化合物的协同前药衍生物及其制备方法和应用 |
| CN109846873A (zh) * | 2018-12-18 | 2019-06-07 | 江西润泽药业有限公司 | 一种抗肿瘤药物组合物 |
| CN109846818A (zh) * | 2018-12-21 | 2019-06-07 | 江西润泽药业有限公司 | 一种具有乌苯美司结构的抗肿瘤药物的注射液及其制备方法 |
| CN109956907A (zh) * | 2017-12-23 | 2019-07-02 | 江西润泽药业有限公司 | 一类乌苯美司前药衍生物及其制备和用途 |
-
2010
- 2010-09-16 CN CN201010282324A patent/CN101948507B/zh not_active Expired - Fee Related
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| 《 J. Org. Chem.》 19971231 Fredric M. Menger et al Synthesis and Reactivity of 5-Fluorouracil/Cytarabine Mutual Prodrugs 9083-9088 第62卷, 第26期 * |
| 《Science》 19980116 Wadih Arap et al Cancer Treatment by Targeted Drug Delivery to Tumor Vasculature in a Mouse Model 377- 380 第279卷, * |
| 《世界华人消化杂志》 20070118 孙文洲等 一氧化氮合酶抑制剂对大肠癌裸鼠移植瘤的抗血管生成作用 114-117 第15卷, 第2期 * |
Cited By (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN107721980A (zh) * | 2017-08-25 | 2018-02-23 | 南京医科大学 | 一类氟尿嘧啶和Quisinosta的乏氧靶向前药及其应用 |
| CN109956907A (zh) * | 2017-12-23 | 2019-07-02 | 江西润泽药业有限公司 | 一类乌苯美司前药衍生物及其制备和用途 |
| CN109705044A (zh) * | 2018-12-18 | 2019-05-03 | 江西润泽药业有限公司 | 乌苯美司衍生物与具有抗肿瘤活性化合物的协同前药衍生物及其制备方法和应用 |
| CN109846873A (zh) * | 2018-12-18 | 2019-06-07 | 江西润泽药业有限公司 | 一种抗肿瘤药物组合物 |
| CN109528663A (zh) * | 2018-12-20 | 2019-03-29 | 江西润泽药业有限公司 | 以ngr(no2)为靶向载体的抗癌药物冻干粉剂及其制备方法和应用 |
| CN109528664A (zh) * | 2018-12-21 | 2019-03-29 | 江西润泽药业有限公司 | 含乌苯美司-抗肿药物协同前药衍生物的冻干粉剂及其制备方法 |
| CN109646429A (zh) * | 2018-12-21 | 2019-04-19 | 江西润泽药业有限公司 | 一种含乌苯美司的前药衍生物的固体剂型及其制备方法 |
| CN109846818A (zh) * | 2018-12-21 | 2019-06-07 | 江西润泽药业有限公司 | 一种具有乌苯美司结构的抗肿瘤药物的注射液及其制备方法 |
| CN109528664B (zh) * | 2018-12-21 | 2021-07-06 | 江西润泽药业有限公司 | 含乌苯美司-抗肿瘤药物协同前药衍生物的冻干粉剂及其制备方法 |
| CN109846818B (zh) * | 2018-12-21 | 2021-07-06 | 江西润泽药业有限公司 | 一种具有乌苯美司结构的抗肿瘤药物的注射液及其制备方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN101948507B (zh) | 2012-10-17 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN101948507B (zh) | 一类以ngr(no2)为靶向载体的新型抗癌药物、制备及其用途 | |
| CN101218280B (zh) | 胞苷代谢拮抗剂的聚合衍生物 | |
| EP2947070B1 (en) | Multi-targeted ubenimex prodrug derivative and preparation method and use thereof | |
| CN102786549B (zh) | 一组具有抑制hiv-1病毒复制活性的替诺福韦双酯化合物、制备方法及其药物用途 | |
| CN113563414A (zh) | 一种组织靶向的蛋白靶向降解化合物及其用途 | |
| CN106866572B (zh) | 一氧化氮供体型β‑榄香烯衍生物及其制备方法和用途 | |
| CN104163823B (zh) | 一种喜树碱与青蒿琥酯偶联物及其制备方法与应用 | |
| Greenwald et al. | Drug delivery of anticancer agents: water soluble 4-poly (ethylene glycol) derivatives of the lignan, podophyllotoxin | |
| CN102603836A (zh) | 五味子丙素简化物、类似物及其制备方法和应用 | |
| CN106631957A (zh) | 一种靶向FAP‑alpha酶的抗肿瘤化合物及其制备方法与应用 | |
| CN102627685A (zh) | 一氧化氮供体型谷胱甘肽类化合物、其制备方法及医药用途 | |
| TWI382978B (zh) | 化學化合物 | |
| CN1693309A (zh) | N4－（取代的氧羰基）－2′，2′－二氟－2′－脱氧胞苷衍生物及其应用 | |
| CN102485735B (zh) | 6-果糖氨-4-芳胺基喹唑啉衍生物及其用途 | |
| CN103214541A (zh) | 含有天然胆固醇和赖氨酸类脂质阳离子有机功能分子及其脂质体、制备方法和应用 | |
| CN102499986A (zh) | 一种大分子-顺铂复合物及其制备方法与应用 | |
| Shi et al. | Synthesis, biological and pharmacokinetic characterization of a novel leucine Ureido derivative as a multi-target anticancer agent | |
| CN101787066B (zh) | 阿糖胞苷衍生物及其在抗癌抗肿瘤中的用途 | |
| CN101787065B (zh) | 阿糖胞苷前药衍生物及其在抗癌抗肿瘤中的用途 | |
| WO2025055943A1 (en) | Inhibitors of prostate specific membrane antigen and use thereof | |
| WO2025055942A1 (en) | Inhibitors of prostate specific membrane antigen and use thereof | |
| CN115260199B (zh) | 一种苯并咪唑并吡嗪-3-甲酰胺化合物及其制备方法与应用 | |
| CN101440113A (zh) | 秋水仙碱衍生物-胆汁酸偶合物及其医药用途 | |
| CN108727245B (zh) | 一种水杨酸类化合物及其制备方法和应用 | |
| CN110669106B (zh) | 一种成骨靶向肽修饰的查尔酮衍生物及其制备方法和应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20121017 |