CN101912452A - 用于增强非特异性免疫功能的兽用中药组合物及其应用 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种用于提高生长性能、增强机体非特异性免疫功能的兽用中药组合物，它是由下列原料药制成：白头翁、黄芪、白术、板蓝根、黄芩、柴胡、大黄。本发明还涉及由该兽用中药组合物制成的兽用药、该兽用药的制备方法以及该兽用中药组合物的应用。本发明所述的兽用中药组合物具有扶正祛邪、清热解毒、增强机体非特异性免疫功能的功效，能治疗机体免疫功能低下、免疫耐受、内源性毒素以及应激等所致的多种非典型性病症，生长性能下降，以及风热感冒、流感、法氏囊病、肠毒综合征等湿热性病症。

Description

用于增强非特异性免疫功能的兽用中药组合物及其应用

技术领域

本发明涉及兽药领域，具体而言，本发明涉及一种用于提高生长性能、增强机体非特异性免疫功能的兽用中药组合物，以及由该兽用中药组合物制成的兽用药、该兽用药的制备方法以及该兽用中药组合物的应用。

背景技术

禽类是重要的经济动物，而禽疫病一直制约着养禽业的发展。尽管目前有很多禽类疫苗可以供为选择，但它们大多是针对特异性免疫，起效慢，作用专一，禽类有时在疫苗提供有效保护前就已经发生了病毒感染。非特异性免疫是抵抗微生物感染的第一道防线，具有起效快，作用范围广的特点。因此，目前很多研究者都在寻找和鉴定能有效激活禽类非特异性免疫的新型免疫调节剂。

天然中药中的某些约物及其提取物，具有增强动物机体免疫力、促进生长、抑制病原体等多种作用，并且利用中药防治动物疾病符合绿色养殖之趋势，目前许多大型养殖场也越来越重视中药保健品的增强免疫作用。因而研究中药对禽类非特异性免疫功能及其生长性能的影响就显得颇为重要，具有一定的研究意义和应用价值。

发明人在查阅相关文献后发现，目前国内外尚未有能有效提高禽类生长性能，增强禽类机体非特异性免疫功能的兽用中药组合物。

发明内容

为了实现本发明的目的，本发明提供一种兽用中药组合物，其由以下原料药制成：白头翁、黄芪、白术、板蓝根、黄芩、柴胡、大黄。该兽用中药组合物能够用于提高生长性能、增强机体非特异性免疫功能。

在所述兽用中药组合物中，各原料药组分优选的重量份配比为：白头翁10～30重量份、黄芪10～30重量份、白术5～15重量份、板蓝根5～15重量份、黄芩5～15重量份、柴胡5～15重量份、大黄5～15重量份；各原料药组分更优选的重量份配比为：白头翁20～30重量份、黄芪20～30重量份、白术10～15重量份、板蓝根10～15重量份、黄芩10～15重量份、柴胡10～15重量份、大黄5～10重量份；各原料药组分最优选的重量份配比为：白头翁25重量份、黄芪25重量份、白术10重量份、板蓝根10重量份、黄芩10重量份、柴胡10重量份、大黄10重量份。

本发明还提供了一种用于提高生长性能、增强机体非特异性免疫功能的兽用药，其由所述的兽用中药组合物和药学可接受的辅料制成。所述兽用药的剂型包括但不限于口服溶液剂、颗粒剂、可溶性粉剂、预混剂。其中所用药学可接受的辅料为本领域所属技术人员熟知的常用辅料，兽用药的制备方法为本领域所属技术人员熟知的常规方法，具体可参见《兽药制剂生产应用手册》(江西科学技术出版社，1994年12月出版)、《药用辅料大全》(四川科学技术出版社，1995年1月出版)、《中国兽药典》2005年版二部(中国农业出版社，2006年4月出版)。

本发明还提供了一种制备所述兽用药的方法，该方法包括：

1)称取原料药白头翁、黄芪、白术、板蓝根、黄芩、柴胡、大黄。

2)将白头翁、黄芪、板蓝根、黄芩、大黄粉碎，加3-8倍量的水煎煮1-4.5小时，滤取煎液备用。其中粉碎步骤优选将原料药粉碎成粗粉；煎煮步骤优选分3次进行：第1次加入药材8倍量的水煎煮3小时，第2次加入药材5倍量的水煎煮2小时，第3次加入药材3倍量的水煎煮1小时。

3)将白术、柴胡粉碎，加3-8倍量的水煎煮1-3小时，收集挥发油备用，并滤取煎液备用。其中粉碎步骤优选将原料药粉碎成粗粉；煎煮步骤优选将原料药在加水后、煎煮前进行浸泡，其中浸泡时间优选为45分钟；加水量优选为药材8倍量的水，煎煮时间优选为3小时。

4)将步骤3)中滤得的药渣加3-8倍量的水煎煮1-3小时，滤取煎液，与步骤3)中所得的煎液合并备用。其中煎煮步骤优选分2次进行：第1次加入药材5倍量的水煎煮2小时，第2次加入药材3倍量的水煎煮1小时。

5)将步骤2)中所得煎液和步骤4)中所得的合并煎液合并，将合并液浓缩，使得每1ml浓缩液相当于含0.5g原料药；然后向浓缩液中加入乙醇，调节pH值为5.0～7.5，静置，取上清液。其中加入乙醇的量优选为使乙醇终浓度为60％的量；调节pH值的试剂优选为10％NaOH溶液。

6)将步骤5)中所得的上清液减压回收乙醇后与步骤3)中所得的挥发油合并，干燥制成浸膏粉，备用。

7)将步骤6)制得的浸膏粉加入药学可接受的辅料制成所述兽用药，例如口服溶液剂、颗粒剂、可溶性粉剂、预混剂，并使得每1g或每1ml兽用药相当于含有1g原料药。

本发明还提供了一种所述兽用中药组合物在制备用于提高生长性能、增强机体非特异性免疫功能的兽用药中的应用。

本发明兽用中药组合物、兽用药特别适用于禽类动物，包括但不限于鸡、鸭、鹅。

本发明兽用药可通过拌入饲料或兑入饮水的方式给药，使动物通过自由采食或自由饮水摄入本发明兽用药。拌入饲料的药物浓度为0.5％(W/W)，即每100g饲料拌入0.5g本发明兽用药；兑入饮水的药物浓度为0.3-0.5％(W/W)，即每100g饮用水兑入0.3-0.5g本发明兽用药。给药次数为一天一次，连续给药5到7天。

本发明所述兽用药采用《中国兽药典》2005年版二部附录31页的薄层色谱法进行定性测定所述兽用药中的黄芩苷、黄芩素、白头翁提取物和大黄提取物；参照《兽药质量标准》2003年版定性测定所述兽用药中的黄芪多糖；采用反相高效液相色谱法(参见王蒨，等，反相高效液相色谱法测定白头翁药材中白头翁皂苷B4的含量，《时珍国医国药》，2009年11月，第20卷第11期)，测定药品中白头翁皂苷B4的含量。

1)黄芩苷、黄芩素的定性测定：

取本发明所述兽用药1g，加乙酸乙酯-甲醇(3∶1)混合溶液30mL，加热回流30分钟，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇5mL使其溶解，取上清液作为供试品溶液。另取黄芩苷对照品、黄芩素对照品，加甲醇分别制成每1mL含1mg、0.5mg的对照品溶液。照薄层色谱法(附录31页)试验，吸取供试品溶液，上述二种对照品溶液各1μL，分别点于同一聚酰胺薄膜上，以甲苯-乙酸乙酯-甲醇-甲酸(10∶3∶1∶2)为展开剂，预饱和30分钟，展开，取出，晾干，置紫外灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显两个相同的暗色斑点。

(2)白头翁提取物的测定：

取本发明所述兽用药4g，加乙醇20mL，加热回流1小时，滤过，滤液浓缩至约6mL，放冷，加丙酮适量，则生成沉淀，滤过，速取沉淀少量(约5g)，置试管中，加醋酐1mL使溶解，沿管壁加硫酸1mL，两液接界处显红色或红紫色环。

(3)大黄提取物的测定：

取本发明所述兽用药0.1g，加甲醇20mL，浸泡1小时，滤过，取滤液5mL，蒸干，残渣加水10mL使溶解，再加盐酸1mL，加热回流30分钟，立即冷却，用乙醚分2次振摇提取，每次20mL，合并乙醚液，蒸干，残渣加三氯甲烷1mL使溶解，作为供试品溶液。另取大黄对照药材0.1g，同法制成对照药材溶液。再取大黄酸对照品，加甲醇制成每1mL含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(附录31页)试验，吸取上述三种溶液各4μL，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶H薄层板上，以石油醚(30-60℃)-甲酸乙酯-甲酸(15∶5∶1)的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应位置上，显相同的五个橙黄色荧光主斑点；在与对照品色谱相应的位置上，显相同的橙黄色荧光斑点，置氨蒸气中熏后，斑点变为红色。

(4)黄芪多糖的测定：

取本发明所述兽用药5g，加去离子水20mL，浸泡30分钟，滤过，取滤液5mL，加2％α-萘酚乙醇溶液3滴，摇匀后，沿试管壁缓缓加硫酸0.5mL，在两液面交界处显棕色环。

(5)白头翁皂苷B4的含量测量

取本发明所述兽用药1g，准确量取，置于具塞锥形瓶中，然后精密加入甲醇10ml，超声30分钟，放冷，过滤，滤液置50ml量瓶中，用少量流动相(乙腈∶0.1％磷酸(V∶V；28∶72))洗涤容器及残渣，洗液并入同一量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，过0.2μm滤膜，经反相高效液相色谱检测，计算，白头翁皂苷B4的含量(g/g)均不得低于0.4％。

在本发明兽用中药组合物中，白头翁为毛莨科白头翁Pulsatilla chinensis(Bge.)Regel的干燥根，主要含有白头翁皂苷、三萜酸、木脂素、白头翁灵、白头翁英、白头翁素、原白头翁素、胡萝卜苷以及糖蛋白等成分。其中白头翁皂苷有抗肿瘤、增强免疫功能、抗阿米巴原虫及杀菌等作用。白头翁及白头翁皂苷对鸡增重、免疫器官功能有一定的促进作用，略优于黄芪，对鸡中性粒细胞的吞噬率有极显著的增强作用，白头翁及其皂苷，作为免疫增强剂，具有很好的研究价值与应用前景。

黄芪为豆科植物蒙古黄芪Astragalus membranaceus(Fisch.)Bge.var.mongholicus  (Bge.)Hsiao或膜荚黄芪Astragalus membranaceus(Fisch.)Bge.的干燥根，是被普遍认为对动物免疫有促进作用的一味中药。黄芪能增强网状内皮系统的吞噬功能，使白细胞及多核白细胞数量显著增加，使巨噬细胞吞噬百分率及吞噬指数显著上升，对体液免疫、细胞免疫均有促进作用。黄芪具有增强病毒诱生干扰素的能力。易感冒者在感冒流行季节服用黄芪，不仅可使感冒次数明显减少，而且可使感冒症状减轻，病程缩短。同时黄芪所含的有效成分黄芪多糖有明显的抗疲劳、耐低温作用，能使正常以及虚损小鼠的抗疲劳时间明显延长。黄芪还可使细胞的生理代谢增强，能促进血清和肝脏的蛋白质更新，对蛋白质代谢有促进作用。黄芪对痢疾、肺炎双球菌、溶血性链球菌A、B、C及金黄色、柠檬色、白色葡萄球菌等均有抑制作用。

白术为菊科植物白术Atractylodes macrocephala Koidz的干燥根茎，具有健脾益气，燥湿利水，止汗，安胎的功效。用于脾虚食少，腹胀泄泻，痰饮眩悸，水肿，自汗，胎动不安等。白术水煎液对胃肠运动有兴奋作用，具有抗溃疡，抗疲劳，能显著增强白细胞吞噬金黄色葡萄球菌的能力。同时白术可促进小鼠红细胞造血作用，能有效抑制脂质过氧化，降低组织脂质过氧化物的含量，避免有害物质对组织细胞结构和功能的破坏。白术对瘤细胞有细胞毒作用，能降低瘤细胞的增殖率，减低瘤组织的侵袭性，提高机体抗肿瘤反应的能力。

板蓝根为十字花科菘蓝Isatis indigotica Fort.的干燥根，在临床上具有清热凉血、抗菌抗病毒作用，其水浸液对枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌，八联球菌、大肠杆菌、伤寒杆菌、副伤寒甲杆菌、痢疾(志贺氏、弗氏)杆菌、肠炎杆菌等都有抑制作用，同时板蓝根具有很好的解毒作用。板蓝根所有含的板蓝根多糖能显著增加正常小鼠脾重，白细胞总数及淋巴细胞数，还能明显增强抗体形成功能，增强小鼠静脉注射碳粒廓清速率。板蓝根所含成分靛玉红，能增强动物的单核巨噬细胞系统的吞噬能力，提高机体免疫功能，具有一定的抗癌作用。

黄芩为唇形科植物黄芩Scutellaria baicalensis Georgi的干燥根。其有较广的抗菌谱，在试管内对痢疾杆菌、白喉杆菌、绿脓杆菌、葡萄球菌、链球菌、肺炎双球菌以及脑膜炎球菌等均有抑制作用，煎剂作喉头喷雾，对脑膜炎带菌者亦有效，即使对青霉素等抗菌素已产生抗药性的金黄色葡萄球菌，对黄芩仍属敏感。对多种皮肤致病性真菌，体外亦有抑制效果，并能杀死钩端螺旋体。黄芩所含黄芩苷、黄芩苷元有抗炎抗变态反应作用。黄芩甙有降压、利尿、镇静作用，能抑制小白鼠的自发活动，作用强度与剂量有关，黄芩煎剂可抑制小鼠阳性条件反射，此作用可能是由于它加强了皮层抑制过程所致，可用于神经兴奋性增高及失眠的高血压患者。黄芩根茎的酊剂静脉注射，对士的宁中毒的蛙、猫、狗，可消除强直性痉挛的症状，并使动物免于死亡。

柴胡为伞形科植物柴胡Bupleurum chinense DC.或狭叶柴胡Bupleurum scorzonerifolium Willd.的干燥根。按性状不同，分别习称“北柴胡”及“南柴胡”。其所含的挥发油(丁香酚、己酸、r-十一酸内酯和对甲氧基苯二酮)，柴胡皂苷(皂苷元A)对伤寒、副伤寒疫苗、大肠杆菌液、发酵牛奶、酵母等所致发热有明显解热作用，且能使动物正常体温下降。柴胡总皂苷、皂苷还具有镇静、镇痛、镇咳作用，对多种致炎剂所致踝关节肿和结缔组织增生性炎症均有抑制作用。柴胡皂苷元a和d、柴胡醇、α-菠菜甾醇可以降血脂(在实验性高脂血症动物身上降低胆固醇、甘油三酯和磷酯)、保肝(对CCl₄、酒精、伤寒疫苗、卵黄、霉米、D-半乳糖胺等所致肝功能障碍有保护作用。表现：转氨酶降低，肝功能恢复、肝损伤减轻)。柴胡中的柴胡多糖可使吞噬细胞、自然杀伤细胞功能增强，提高病毒特异性抗体滴度，对流感病毒、肝炎病毒、牛痘病毒、Ⅰ型脊髓灰白质炎病毒、疱疹病毒有较好的抑制作用。

大黄为蓼科植物掌叶大黄Rheum palmatum L.、唐古特大黄Rheum tanguticum Maxim.ex Balf.或药用大黄Rheum officinale Baill.的干燥根及根茎。临床常用于治疗大便燥结、热结便秘，一般在用药后6-19小时可排便。各种实验证明：大黄对多种革兰氏阳性菌、某些阴性菌及真菌有不同程度的抑制作用，其抑菌的有效成分为蒽醌衍生物，其中大黄酸、大黄素、芦荟大黄素的作用最强。大黄能活血祛淤、降压及降血脂，促进胆汁分泌、胆囊收缩、疏通胆小管内胆汁淤结，增加胆管收缩功能，松弛奥狄氏括约肌，从而使胆汁排出增加，起到利胆退黄作用，因而大黄有利胆退黄，保肝除湿作用。

本发明兽用中药组合物首次将白头翁、黄芪、白术、板蓝根配伍，具有扶正祛邪、清热解毒、增强机体非特异性免疫功能的功效，能治疗机体免疫功能低下、免疫耐受、内源性毒素以及应激等所致的多种非典型性病症，生长性能下降，以及风热感冒、流感、法氏囊病、肠毒综合征等湿热性病症。在鸡群的临床试验中，本发明兽用中药组合物能够有效提高鸡群的采食量和体重，降低料重比和死亡率，增加单位容积白细胞和红细胞的数量，提高鸡群的抗体水平，说明本发明兽用中药组合物能有效提高禽类生长性能，增强禽类机体非特异性免疫功能，且疗效显著，值得在市场中推广运用。

具体实施方式

以下通过具体实施方式的描述对本发明作进一步说明，但这并非是对本发明的限制，本领域技术人员根据本发明的基本思想，可以做出各种修改或改进，但是只要不脱离本发明的基本思想，均在本发明的范围之内。

实施例1制备本发明兽用药预混剂

1)称取原料药25g白头翁、25g黄芪、10g白术、10g板蓝根、10g黄芩、10g柴胡、10g大黄；

2)将白头翁、黄芪、板蓝根、黄芩、大黄干燥后粉碎成粗粉，加水煎煮提取3次：第1次加入药材8倍量的水煎煮3小时，滤取煎液；第2次加入药材5倍量的水煎煮2小时，滤取煎液；第3次加入药材3倍量的水煎煮1小时，分别滤取煎液，合并3次煎液备用；

3)将白术、柴胡粉碎成粗粉，加8倍量蒸馏水浸泡45分钟，然后加热煎煮3小时，收集挥发油另外储存备用，并滤取煎液备用；

4)将步骤3)中过滤后的剩余药渣加水煎煮2次：第1次加入药材5倍量的水煎煮2小时，第2次加入药材3倍量的水煎煮1小时；分别滤取煎液，将这两次煎液与步骤3)中所得的煎液合并备用；

5)将步骤2)和步骤4)中所得的煎液合并，将合并液减压浓缩至200ml；然后将浓缩液中加入300ml乙醇，并以10％NaOH溶液调节pH值为7.0，静置过夜，取上清液；

6)将步骤5)中所得的上清液减压回收乙醇后与步骤3)中所得的挥发油合并，喷雾干燥得10.8g浸膏粉备用；

7)将步骤6)制得的浸膏粉，按现有兽药制备方法(参见《兽药制剂生产应用手册》(江西科学技术出版社，1994年12月出版)、《药用辅料大全》(四川科学技术出版社，1995年1月出版)、《中国兽药典》2005年版二部(中国农业出版社，2006年4月出版))，制成100g本发明兽用药预混剂。

实施例2：制备本发明兽用药口服溶液

1)称取原料药22.5g白头翁、22.5g黄芪、12.5g白术、12.5g板蓝根、12.5g黄芩、12.5g柴胡、5g大黄。

2)将白头翁、黄芪、板蓝根、黄芩、大黄干燥后粉碎成粗粉，加水煎煮提取3次：第1次加入药材8倍量的水煎煮3小时，滤取煎液；第2次加入药材5倍量的水煎煮2小时，滤取煎液；第3次加入药材3倍量的水煎煮1小时，分别滤取煎液，合并3次煎液备用；

3)将白术、柴胡粉碎成粗粉，加8倍量蒸馏水浸泡45分钟，然后加热煎煮3小时，收集挥发油另外储存备用，并滤取煎液备用；

4)将步骤3)中过滤后的剩余药渣加水煎煮2次：第1次加入药材5倍量的水煎煮2小时，第2次加入药材3倍量的水煎煮1小时；分别滤取煎液，将这两次煎液与步骤3)中所得的煎液合并备用；

5)将步骤2)和步骤4)中所得的煎液合并，将合并液减压浓缩至200ml；然后将浓缩液中加入300ml乙醇，并以10％NaOH溶液调节pH值为6.5，静置过夜，取上清液；

6)将步骤5)中所得的上清液减压回收乙醇后与步骤3)中所得的挥发油合并，喷雾干燥得10.2g浸膏粉备用；

7)将步骤6)制得的浸膏粉，按现有兽药制备方法(参见《兽药制剂生产应用手册》(江西科学技术出版社，1994年12月出版)、《药用辅料大全》(四川科学技术出版社，1995年1月出版)、《中国兽药典》2005年版二部(中国农业出版社，2006年4月出版))，制成100ml本发明兽用药口服溶液。

实施例3：制备本发明兽用药颗粒剂

1)称取原料药24.5g白头翁、22.5g黄芪、12g白术、12g板蓝根、12g黄芩、10g柴胡、7g大黄。

2)将白头翁、黄芪、板蓝根、黄芩、大黄干燥后粉碎成粗粉，加水煎煮提取3次：第1次加入药材8倍量的水煎煮3小时，滤取煎液；第2次加入药材5倍量的水煎煮2小时，滤取煎液；第3次加入药材3倍量的水煎煮1小时，分别滤取煎液，合并3次煎液备用；

3)将白术、柴胡粉碎成粗粉，加8倍量蒸馏水浸泡45分钟，然后加热煎煮3小时，收集挥发油另外储存备用，并滤取煎液备用；

4)将步骤3)中过滤后的剩余药渣加水煎煮2次：第1次加入药材5倍量的水煎煮2小时，第2次加入药材3倍量的水煎煮1小时；分别滤取煎液，将这两次煎液与步骤3)中所得的煎液合并备用；

5)将步骤2)和步骤4)中所得的煎液合并，将合并液减压浓缩至200ml；然后将浓缩液中加入300ml乙醇，并以10％NaOH溶液调节pH值为7.5，静置过夜，取上清液；

6)将步骤5)中所得的上清液减压回收乙醇后与步骤3)中所得的挥发油合并，喷雾干燥得10.5g浸膏粉备用；

7)将步骤6)制得的浸膏粉，按现有兽药制备方法(参见《兽药制剂生产应用手册》(江西科学技术出版社，1994年12月出版)、《药用辅料大全》(四川科学技术出版社，1995年1月出版)、《中国兽药典》2005年版二部(中国农业出版社，2006年4月出版))，制成100g本发明兽用药颗粒剂。

以上三个实施例的质量控制结果如表1所示：

表1 本发明实施例1-3的兽用药质量控制结果：

	实施例1	实施例2	实施例3
				黄芩苷(定性)	阳性	阳性	阳性

黄芩素(定性)	阳性	阳性	阳性
				白头翁提取物(定性)	阳性	阳性	阳性
大黄提取物(定性)	阳性	阳性	阳性
				黄芪多糖(定性)	阳性	阳性	阳性
白头翁皂苷B4含量(g/g)	0.5％	0.4％	0.45％

以下通过具体试验例对本发明有益效果作进一步说明。

试验例1本发明兽用中药组合物对鸡生长性能的影响

<试验方法>

1.试验药品：本发明实施例1-3制成的兽用药。

2.试验动物：20日龄“青脚麻”A1系肉鸡10300只，体况良好，无发病迹象，由四川邦禾农业科技有限公司下属鸡场提供。

3.动物分组与饲养管理：

将试验用鸡随机分为4组，3个平行试验组，1个对照组。采用集中拌料的方式分别在试验组鸡群的2个生长阶段(21-28日龄，51-58日龄)按每天料量5‰(W/W)的浓度饲喂本发明兽用药，让鸡群在12h内自由采食完毕，剩余12h饲喂基础日粮，对照组整个过程只饲喂基础日粮。

同时在整个试验阶段，对鸡群按照以下免疫程序接种新城疫、禽流感(H5N1亚型，Re-5株；H9亚型)疫苗：

16日龄：

禽流感H5N1亚型，Re-5株：0.5ml/只(肌肉注射)，辽宁益康生物制品有限公司，批号：20100203；

30日龄：

鸡新城疫、禽流感(H9亚型)二联灭活疫苗(La Sota株+WD株)：0.5ml/只(肌肉注射)，上海海利生物药品有限公司，批号：20100310。

4.生长性能测定：

在饲养开始与结束后，计算增重量、采食量、料重比、死亡率，其中：

增重量：分别于试验的第21d，第28d，第51d，第58d早晨，逐只空腹称重，计算鸡群在2个生长阶段(21-28日龄，51-58日龄)的体重变化；

采食量：分别于试验的第21d，第28d，第51d，第58d早晨，称量各组饲料消耗量；

料重比：料重比＝饲养期内饲料消耗总量(kg)/同一饲养期内增重量(kg)。

5.数据处理与分析：

数据用spss13.0软件进行单因素方差分析，组间差异采用Duncan多重比较，显著水平为0.05。数据结果用平均值±标准差(means±S.D)表示。

<试验结果>

本发明实施例1的兽用药预混剂的试验结果：

鸡群在2个生长阶段(21-28日龄，51-58日龄)饲养结束后的增重量、采食量、料重比、死亡率的结果见表2。

表2 本发明实施例1的兽用药预混剂对鸡增重量、采食量、料重比、死亡率的影响

注：同行肩标字母相同表示无差异显著(P＞0.05)；同行肩标字母不同表示有差异显著(P＜0.05)。

由表2可以看出，在鸡群处于21-28日龄时，试验组每只鸡平均增重0.160kg，对照组每只鸡平均增重0.168kg，2个组别的增重量差异不显著(P＞0.05)；在鸡群处于51-58日龄时，试验组每只鸡平均增重0.356kg，对照组每只鸡平均增重0.325kg，2个组别的增重量差异显著(P＜0.05)。

在21-28日龄的生长阶段中，试验组鸡群的采食量增加量比对照组大；在51-58日龄的生长阶段中，试验组的采食量大于对照组，但采食增加量不及对照组。同时由表2可见，鸡群在2个生长阶段的料重比都显著低于对照组，死亡率显著低于对照组。

本发明实施例2的兽用药口服溶液和本发明实施例3的兽用药颗粒剂具有相似试验结果：

在对本发明实施例2的兽用药口服溶液的试验中，在鸡群处于21-28日龄时，试验组每只鸡平均增重0.19kg，对照组每只鸡平均增重0.16kg，2个组别的增重量差异显著(P＜0.05)；在鸡群处于51-58日龄时，试验组每只鸡平均增重0.389kg，对照组每只鸡平均增重0.345kg，2个组别的增重量差异显著(P＜0.05)。试验组鸡群的采食增加量在21-28日龄，51-58日龄时，较对照组均有所增加，同时，鸡群在2个生长阶段的料重比都显著低于对照组，死亡率显著低于对照组；

在对本发明实施例3的兽用药颗粒剂的试验中，在鸡群处于21-28日龄时，试验组每只鸡平均增重0.175kg，对照组每只鸡平均增重0.151kg，2个组别的增重量差异显著(P＜0.05)；在鸡群处于51-58日龄时，试验组每只鸡平均增重0.376kg，对照组每只鸡平均增重0.342kg，2个组别的增重量差异显著(P＜0.05)。试验组鸡群的采食增加量在21-28日龄，51-58日龄时，较对照组均有所增加，同时，鸡群在2个生长阶段的料重比都显著低于对照组，死亡率显著低于对照组。

目前，国内外众多的研究机构转向从纯天然植物中提取有效成分来调控畜禽消化道内环境，并对其微生态进行调控，以减少抗生素作为畜禽促生长剂的使用。本试验在正常的养殖条件下对10300只20日龄“青脚麻”A1系肉鸡的生长性能的研究发现，在鸡群的2个生长阶段(21-28日龄，51-58日龄)分别使用本发明兽用药2周后，能明显提高鸡群的采食量，降低料重比和死亡率，由此说明本发明兽用中药组合物能够有效提高饲料报酬，降低死亡率，增强动物机体的免疫力。

试验例2本发明兽用中药组合物对鸡外周血白细胞、红细胞数量的影响

<试验方法>

1.试验药品：同试验例1。

2.试验动物：同试验例1。

3.动物分组与饲养管理：同试验例1。

4.鸡外周血白细胞和红细胞数的测定：

将试验组、对照组的鸡群在60日龄分别随机翼静脉采血16份。用常规方法(《动物生理学实验》(第2版)，杨秀平主编，高等教育出版社，2009年8月出版)计数白细胞和红细胞。

5.数据处理与分析：同试验例1。

<试验结果>

本发明实施例1的兽用药预混剂的试验结果：

将试验组、对照组的鸡群在60日龄分别随机翼静脉采血16份后，用常规方法(《动物生理学实验》(第2版)，杨秀平主编，高等教育出版社，2009年8月出版)计数白细胞和红细胞，具体结果见表3。

表3 饲喂本发明实施例1的兽用药预混剂后鸡白细胞、红细胞数量的变化(n＝16)

注：^*表示白细胞、红细胞数量的单位分别为：×10⁹/L；×10¹²/L。

由试验结果表3可知，试验组的平均白细胞数为2.73，对照组平均白细胞数为2.40，结果经方差分析后，差异显著(P＜0.05)；而试验组的平均红细胞数为2.93，对照组平均红细胞数为2.57，数据通过方差分析后，差异显著(P＜0.05)。即试验组的平均红细胞数和平均白细胞数均显著高于对照组。

本发明实施例2的兽用药口服溶液和本发明实施例3的兽用药颗粒剂具有相似试验结果：

在对本发明实施例2的兽用药口服溶液的试验中，试验组的平均白细胞数为2.88，对照组平均白细胞数为2.47，结果经方差分析后，差异显著(P＜0.05)；而试验组的平均红细胞数为3.10，对照组平均红细胞数为2.69，数据通过方差分析后，差异显著(P＜0.05)；

在对本发明实施例3的兽用药颗粒剂的试验中，试验组的平均白细胞数为2.89，对照组平均白细胞数为2.54，结果经方差分析后，差异显著(P＜0.05)；而试验组的平均红细胞数为2.97，对照组平均红细胞数为2.51，数据通过方差分析后，差异显著(P＜0.05)。

近年来，已有研究报道指出，中草药中含有生理活性物质，能起到刺激畜禽生长，维持动物体内环境正常平衡。从根本上保护、维持畜禽的整体健康，增强机体的免疫功能，调节体内有益微生物群落，充分发挥和提高机体本身预防疾病的潜在能力。机体免疫力的强弱与免疫细胞的数量有关，因而免疫细胞的数量在一定程度上可以反映机体的免疫水平。白细胞是机体防御系统的一个重要组成部分，能吞噬异物产生抗体，在机体损伤治愈、抗御病原入侵和对疾病的免疫方面起着重要的作用。已有研究证明红细胞参与机体许多重要的生理功能，其免疫功能是其他免疫细胞所无法替代的，它和白细胞一起在机体非特异性免疫力方面发挥着非常重要的作用，因而本试验通过计数鸡外周血白细胞、红细胞的数量，从而可以在一定程度上了解本发明兽用中药组合物对鸡非特异性免疫功能的影响。

由试验结果可知，三个试验组的平均红细胞数和平均白细胞数均分别显著高于对照组。由此说明，鸡服用本发明兽用药后能提高单位容积白细胞、红细胞的数量，从而对提高鸡群的非特异性免疫力有积极作用。

试验例3本发明兽用中药组合物对鸡血清抗体的影响

<试验方法>

1.试验药品：同试验例1。

2.试验动物：同试验例1。

3.动物分组与饲养管理：同试验例1。

4.鸡血清抗体水平检测：

于鸡群60日龄，在试验组和对照组分别随机翼静脉采血，做鸡血清抗体检测。检测指标为鸡新城疫抗体水平、鸡禽流感抗体水平，均采用间接血凝试验。

5.数据处理与分析：同试验例1。

<试验结果>

本发明实施例1的兽用药预混剂的试验结果：

采用间接血凝试验于鸡群60日龄随机翼静脉采血，检测了试验组、对照组鸡群新城疫和禽流感的抗体水平，结果见表4。

表4 鸡血清抗体检测结果

注：n表示样品数；ND表示新城疫；AI表示禽流感；AI(H5Re-5)、AI(H9)分别表示禽流感的2个亚型；

表示平均抗体滴度。

由表4可知，试验组新城疫平均抗体滴度为10.5高于对照组8.4，差异显著(P＜0.05)；而检测禽流感平均抗体滴度时，禽流感H5Re-5平均抗体滴度为6.1高于对照组5.5，差异显著(P＜0.05)；禽流感H9平均抗体滴度为7.5高于对照组6.3，差异显著(P＜0.05)。

本发明实施例2的兽用药口服溶液和本发明实施例3的兽用药颗粒剂具有相似试验结果：

在对本发明实施例2的兽用药口服溶液的试验中，试验组新城疫平均抗体滴度为11.7高于对照组9.4，差异显著(P＜0.05)，而检测禽流感平均抗体滴度时，也得到了类似的结果。试验组各禽流感亚型的平均抗体滴度均显著高于对照组；

在对本发明实施例3的兽用药颗粒剂的试验中，试验组新城疫平均抗体滴度为11.5高于对照组8.2，差异显著(P＜0.05)，而检测禽流感平均抗体滴度时，也得到了类似的结果。试验组各禽流感亚型的平均抗体滴度均显著高于对照组。

本研究通过检测鸡群血清抗体滴度，评价了本发明兽用中药组合物对增强新城疫、禽流感(H5Re-5亚型，H9亚型)疫苗免疫效果的影响。由上述结果可知，在正常免疫接种的同时采用本发明兽用药配合使用，能够起到协同作用，可有效增加免疫效果，比起单纯依靠疫苗，更能提高鸡的抗体水平。

Claims (10)

1.一种兽用中药组合物，其由以下原料药制成：白头翁、黄芪、白术、板蓝根、黄芩、柴胡、大黄。

2.根据权利要求1所述的兽用中药组合物，其中所述原料药的重量份配比为：

白头翁10～30    黄芪10～30    白术5～15

板蓝根5～15     黄芩5～15     柴胡5～15

大黄5～15。

3.根据权利要求2所述的兽用中药组合物，其中所述原料药的重量份配比为：

白头翁20～30    黄芪20～30    白术10～15

板蓝根10～15    黄芩10～15    柴胡10～15

大黄5～10。

4.根据权利要求3所述的兽用中药组合物，其中所述原料药的重量份配比为：

白头翁25    黄芪25    白术10

板蓝根10    黄芩10    柴胡10

大黄10。

5.根据权利要求1-4中任一项所述的兽用中药组合物，其通过以下步骤制备：

1)称取原料药白头翁、黄芪、白术、板蓝根、黄芩、柴胡、大黄；

2)将白头翁、黄芪、板蓝根、黄芩、大黄粉碎，加3-8倍量的水煎煮1-4.5小时，滤取煎液备用；

3)将白术、柴胡粉碎，加3-8倍量的水煎煮1-3小时，收集挥发油备用，并滤取煎液备用；

4)将步骤3)中滤得的药渣加3-8倍量的水煎煮1-3小时，滤取煎液，与步骤3)中所得的煎液合并备用；

5)将步骤2)中所得煎液和步骤4)中所得的合并煎液合并，将合并液浓缩，使得每1ml浓缩液相当于含0.5g原料药；然后向浓缩液中加入乙醇，调节pH值为5.0～7.5，静置，取上清液；

6)将步骤5)中所得的上清液减压回收乙醇后与步骤3)中所得的挥发油合并，干燥制成浸膏粉。

6.根据权利要求5所述的兽用中药组合物，其中在所述步骤2)中，所述煎煮分3次进行，第1次加入药材8倍量的水煎煮3小时，第2次加入药材5倍量的水煎煮2小时，第3次加入药材3倍量的水煎煮1小时。

7.根据权利要求5所述的兽用中药组合物，其中在所述步骤3)中，进一步包括将原料药在加水后、煎煮前进行浸泡的步骤，浸泡时间为45分钟。

8.根据权利要求5所述的兽用中药组合物，其中在所述步骤4)中，所述煎煮分2次进行，第1次加入药材5倍量的水煎煮2小时，第2次加入药材3倍量的水煎煮1小时。

9.根据权利要求5所述的兽用中药组合物，其中步骤5)中加入乙醇的量为使乙醇终浓度为60％的量；调节pH值的试剂为10％NaOH溶液。

10.权利要求1-4中任一项所述的兽用中药组合物在制备用于提高生长性能、增强机体非特异性免疫功能的兽用药中的应用。