CN101637291A - 两株乳酸菌为基础的益生菌软饮料及其制作工艺 - Google Patents
两株乳酸菌为基础的益生菌软饮料及其制作工艺 Download PDFInfo
- Publication number
- CN101637291A CN101637291A CN200910041863A CN200910041863A CN101637291A CN 101637291 A CN101637291 A CN 101637291A CN 200910041863 A CN200910041863 A CN 200910041863A CN 200910041863 A CN200910041863 A CN 200910041863A CN 101637291 A CN101637291 A CN 101637291A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- fermentation
- culture medium
- lactic acid
- acid bacteria
- hours
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 80
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 title claims abstract description 67
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 title claims abstract description 40
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 title claims abstract description 40
- 239000006041 probiotic Substances 0.000 title claims abstract description 19
- 235000018291 probiotics Nutrition 0.000 title claims abstract description 19
- 230000000529 probiotic effect Effects 0.000 title claims abstract description 18
- 235000014214 soft drink Nutrition 0.000 title claims abstract description 17
- 238000012545 processing Methods 0.000 title claims abstract description 14
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 claims abstract description 99
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 claims abstract description 99
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims abstract description 50
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 claims abstract description 29
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 claims abstract description 29
- 230000003068 static effect Effects 0.000 claims abstract description 26
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 claims abstract description 25
- 239000008267 milk Substances 0.000 claims abstract description 25
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 claims abstract description 25
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 claims abstract description 23
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims abstract description 20
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 claims abstract description 17
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 claims abstract description 17
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 claims abstract description 17
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 claims abstract description 16
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims abstract description 15
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims abstract description 14
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims abstract description 11
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 claims abstract description 9
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 claims abstract description 9
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 claims abstract description 9
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 claims abstract description 9
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims abstract description 8
- YWYZEGXAUVWDED-UHFFFAOYSA-N triammonium citrate Chemical compound [NH4+].[NH4+].[NH4+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O YWYZEGXAUVWDED-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract 2
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 claims description 33
- 238000003756 stirring Methods 0.000 claims description 22
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 22
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 claims description 20
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 claims description 20
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 20
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims description 19
- 239000000047 product Substances 0.000 claims description 16
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 14
- 235000013361 beverage Nutrition 0.000 claims description 12
- 238000001816 cooling Methods 0.000 claims description 12
- 241000186840 Lactobacillus fermentum Species 0.000 claims description 11
- 239000012530 fluid Substances 0.000 claims description 10
- 239000012452 mother liquor Substances 0.000 claims description 10
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 claims description 10
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 claims description 10
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 claims description 10
- 240000006024 Lactobacillus plantarum Species 0.000 claims description 9
- 235000013965 Lactobacillus plantarum Nutrition 0.000 claims description 9
- 229940072205 lactobacillus plantarum Drugs 0.000 claims description 9
- 238000004321 preservation Methods 0.000 claims description 9
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims description 8
- 210000004243 sweat Anatomy 0.000 claims description 8
- BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L disodium hydrogen phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].OP([O-])([O-])=O BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 6
- 229910000397 disodium phosphate Inorganic materials 0.000 claims description 6
- 235000019800 disodium phosphate Nutrition 0.000 claims description 6
- 238000011534 incubation Methods 0.000 claims description 6
- 235000011497 sour milk drink Nutrition 0.000 claims description 6
- 239000013078 crystal Substances 0.000 claims description 5
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 5
- 239000002609 medium Substances 0.000 claims description 5
- 230000004913 activation Effects 0.000 claims description 4
- 238000009835 boiling Methods 0.000 claims description 4
- 239000002893 slag Substances 0.000 claims description 4
- 108010073771 Soybean Proteins Proteins 0.000 claims description 3
- 235000019710 soybean protein Nutrition 0.000 claims description 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 14
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 10
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 6
- 235000019634 flavors Nutrition 0.000 description 6
- BWKOZPVPARTQIV-UHFFFAOYSA-N azanium;hydron;2-hydroxypropane-1,2,3-tricarboxylate Chemical compound [NH4+].OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC([O-])=O BWKOZPVPARTQIV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 241000193830 Bacillus <bacterium> Species 0.000 description 4
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 4
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 4
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 4
- 230000008569 process Effects 0.000 description 4
- 235000021262 sour milk Nutrition 0.000 description 4
- 241000186146 Brevibacterium Species 0.000 description 3
- 239000003513 alkali Substances 0.000 description 3
- 238000003113 dilution method Methods 0.000 description 3
- 230000036541 health Effects 0.000 description 3
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 3
- 238000000386 microscopy Methods 0.000 description 3
- 238000011160 research Methods 0.000 description 3
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 3
- 230000001502 supplementing effect Effects 0.000 description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- 238000012356 Product development Methods 0.000 description 2
- 229960004543 anhydrous citric acid Drugs 0.000 description 2
- 229940040526 anhydrous sodium acetate Drugs 0.000 description 2
- 229960004106 citric acid Drugs 0.000 description 2
- 239000002131 composite material Substances 0.000 description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 2
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 2
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000013067 intermediate product Substances 0.000 description 2
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 description 2
- 238000009630 liquid culture Methods 0.000 description 2
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 2
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 description 2
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 2
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 description 2
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 2
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 description 2
- 239000002699 waste material Substances 0.000 description 2
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 2
- 235000020138 yakult Nutrition 0.000 description 2
- 241000186000 Bifidobacterium Species 0.000 description 1
- 241000195649 Chlorella <Chlorellales> Species 0.000 description 1
- 206010059866 Drug resistance Diseases 0.000 description 1
- 206010041925 Staphylococcal infections Diseases 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 230000008485 antagonism Effects 0.000 description 1
- 238000013196 antibiotherapy Methods 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 230000019771 cognition Effects 0.000 description 1
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 1
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 1
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 235000015203 fruit juice Nutrition 0.000 description 1
- 238000003306 harvesting Methods 0.000 description 1
- 235000001497 healthy food Nutrition 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 1
- 230000005923 long-lasting effect Effects 0.000 description 1
- 208000015688 methicillin-resistant staphylococcus aureus infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 244000000010 microbial pathogen Species 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 description 1
- 235000020245 plant milk Nutrition 0.000 description 1
- 235000013406 prebiotics Nutrition 0.000 description 1
- 238000012827 research and development Methods 0.000 description 1
- 238000004062 sedimentation Methods 0.000 description 1
- 238000011218 seed culture Methods 0.000 description 1
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 1
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Non-Alcoholic Beverages (AREA)
Abstract
本发明公开了一种两株乳酸菌为基础的益生菌软饮料配方及其制作工艺，其特征在于，它以三级静态深层液体发酵、每级发酵时间48小时，发酵温度40±2℃，最后一级发酵所得菌液经沉淀过滤即可包装成产品；发酵试用种子培养基为普通的MSR培养基，扩大发酵和生产液体发酵培养基为：大豆豆浆2％、1.2％蔗糖、Rumfor乳酸菌培养基增效剂3‰(含有乙酸钠、柠檬酸鞍、硫酸镁等)。该加工工艺操作简便，生产的产品为无色、清亮透明液体、略有发酵气味、pH为2.5－4.5，保质期不低于两个月，保质期内的两菌种活菌总数cfu不低于3×107个/ml。
Description
技术领域
本发明涉及生物技术中的微生物学科领域，其产品开发属于益生菌健康食品、饮料专业。
背景技术
半个世纪以来，抗生素和疫苗作为对抗各种病原微生物的主要手段，但MRSA、VRE等各种较强耐药性菌的出现，人类已经已经意识到抗生素疗法的局限性和不良后果。Fuller1989年提出益生菌，2002年FAO和WHO确定益生菌的概念和效果。之后短短10年世界人类卫生健康领域发生了巨大变化，益生素、益生元的研究和产品开发成为了潮流。益生菌的使用表现在医药治疗用药、液态口服使用、冲剂、胶囊，以及添加到其它食品和药品中共同使用等多种形式。该领域的研发、生产目前在乳酸菌、双歧杆菌的研究和应用方面尤其突出。这方面的产品有传统的酸奶、以及新开发的各种酸奶，乳酸饮料、各种单和复合菌保健品、食品，还有用于治疗肠道疾病的益生菌制剂。1930年，日本京都帝国大学微生物教研室的代田稔博士，成功地分离出来自人体肠道的乳酸杆菌，并倡导和实践健肠长寿开始乳酸菌市场七十多年历久不衰，消费者对乳酸菌有着充分的认知。资料显示，近十年来，日本的乳酸菌饮料市场每年的销售量都在60亿美元以上。例如使用到中国的Fancl、Yakult产品。
目前液态益生菌饮料在市场上有酸奶、发酵植物奶(如酸豆奶、乳酸菌果汁)、灭活菌饮料、以及部分相关的乳酸饮料。但活菌饮料都是同时含有大量培养基或辅料的不透明液态，另外保质期一般不到一个月，要求低温保存，如酸奶、养乐多等。为此，如何制作一种含活菌、比较耐保存的液体乳酸菌软饮料，以改善人体消化、提高免疫力已成为人们急需解决的问题。
发明内容
本发明的目的就是为了解决现有技术之不足而提供的一种菌种的培养条件要求不苛刻，发酵性能稳定，发酵过程设备投资小，而且培养基简单、便宜、容易获得，用量很少，没有几乎不产生废料的两株乳酸菌为基础的益生菌软饮料配方。
本发明的另一目的是提供一种两株乳酸菌为基础的益生菌软饮料的制作工艺。
本发明是采用如下技术解决方案来实现上述目的：一种两株乳酸菌为基础的益生菌软饮料，其特征在于：它含有植物乳杆菌、发酵乳杆菌的两个菌株Lactobaccillus plantrums SMB-2 CGMCC No 2566、Lactobacillusfermenti CMS-H002，其保藏号为CCTCC No.M206110；其饮料的成分配方按重量百分比算包括水98.5％～99％，乳酸0.8％～1.5％，乙酸钠0.3‰～0.6‰，柠檬酸铵0.6‰～0.9‰，磷酸氢二钠0.6‰～0.9‰，硫酸镁0.5‰～0.6‰和余量的蔗糖和大豆蛋白。
作为上述方案的进一步说明，所述植物乳杆菌、发酵乳杆菌的含量为cfu≥3×107个/ml。
一种两株乳酸菌为基础的益生菌软饮料的制作工艺，其特征在于，它包括如下步骤：
a、准备培养基材料以及制备Runfor乳酸菌培养基增效剂，以每100克大豆，洗净，浸泡7～9小时，取出放入豆浆机中，制作成去渣豆浆1000ml，放在干净的容器中，加热至沸腾，冷却备用；
b、菌种活化培养：将两菌种分别接种到两个斜面MRS培养基，在培养箱40±2℃，培养48小时，得到扩大培养所需菌种；
c、扩大培养、生产发酵，以发酵槽内三级静态深层液体发酵为基础，每级发酵时间40～50小时，发酵温度40±2℃，最后一级发酵所得菌液经沉淀、过滤、检验后包装成产品。
在所述工艺步骤c的扩大培养过程中，在一升的三角瓶中，加入冷却的豆浆，占液体培养基1～3％(v/v)、0.4～0.6％蔗糖(w/v)、Runfor乳酸菌培养基增效剂2～4‰(w/v)，制作1000ml培养基，在无菌的条件下等量接种两个菌种，摇匀后放置于培养箱中40±2℃温度条件下，静止发酵45～50小时；生产发酵过程中，按所述扩大培养同样的方法，在200升的培养槽中，配制生产培养液，将扩大培养母液，按体积以2％的接种量，接种，搅拌均匀，控制发酵温度40±2℃，静止发酵45～50小时，PH降到3-3.5之间，即可终止发酵。
在所述工艺步骤c的扩大培养过程中，在一升的三角瓶中加入蔗糖1～3(w/v)、Runfor乳酸菌培养基增效剂5～7‰(w/v)，以冷却的豆浆加满至1000ml培养基，在无菌的条件下等量接种两个菌种，摇匀后放置于培养箱中40±2℃温度条件下，静止发酵48小时；生产发酵过程中，在200升的培养槽中，以纯净水和所述扩大培养过程得到的完全接种液配制生产培养液，将扩大培养母液，按体积以4％的接种量，接种，搅拌均匀，控制发酵温度40±2℃，静止发酵45～50小时，PH降到3-3.5之间，即终止发酵。
在所述工艺步骤c的扩大培养后，以豆浆结晶粉加入蔗糖2～4％(w/w)，Runfor培养基增效剂0.5‰(w/w)，搅拌菌匀，在110～120℃灭菌箱中，灭菌65～80分钟，取出冷却，倒入培养基重量的18～22％的母液和干培养基重量的18～22％的水，搅拌均匀，倒入消毒灭菌好的发酵桶中，密闭保温发酵，40±2℃温度条件下，静止发酵45～50小时，然后取出在40～50℃的真空干燥机中干燥到水分10％以下，粉碎、包装得到生产发酵用接种剂干粉；在发酵过程，以所述扩大培养同样的方法，在200升的培养槽中，配制生产培养液，将接种剂干粉，按重量比以1％的接种量，接种，搅拌均匀，控制发酵温度40±2℃，静止发酵45～50小时，PH降到3-3.5之间，即终止发酵。
在所述工艺步骤c的扩大培养后，以豆浆结晶粉加入蔗糖2～4％(w/w)，Runfor培养基增效剂0.5‰(w/w)，搅拌菌匀，在110～120℃灭菌箱中，灭菌65～80分钟，取出冷却，倒入培养基重量的18～22％的母液和干培养基重量的18～22％的水，搅拌均匀，倒入消毒灭菌好的发酵桶中，密闭保温发酵，40±2℃温度条件下，静止发酵45～50小时，然后取出在40～50℃的真空干燥机中干燥到水分10％以下，粉碎、包装得到生产发酵用接种剂干粉；生产发酵以固体培养接种剂作为完全培养物，发酵生产活菌饮料，其方法为在200升的培养槽中，以纯净水和固体培养完全接种剂配制生产培养液，将上步所得的接种剂干粉，按重量比以2～4％的接种量，接种，搅拌均匀，控制发酵温度40±2℃，静止发酵45～50小时，PH降到3-3.5之间，即终止发酵。
在所述工艺步骤c的沉淀、过滤、检验过程中，将经过发酵的发酵液，在静止沉淀的状态下，吸取上清液，弃置沉淀渣子，上清液用550目的过滤器，过滤，检验，得到乳酸菌饮料，装瓶保存。
本发明采用上述技术解决方案所能达到的有益效果是：
1、本发明设计了一个含植物乳杆菌、发酵乳杆菌两个菌株的保健饮料配方，并设计了一套制作工艺，四个实用不同条件的工艺方案，以三级静态深层液体发酵、每级发酵时间48小时，发酵温度40±2℃，最后一级发酵所得菌液经沉淀过滤即可包装成产品，该加工工艺操作简便。生产的产品为无色、清亮透明液体、略有发酵气味、PH为2.5-4.5，保质期不低于两个月，保质期内的两菌种活菌总数cfu不低于3×107个/ml。
2、本发明选择的两个菌种，培养条件要求不苛刻，从温度10-45℃都能有效繁殖；发酵性能稳定，扩大培养液，连续8个月产酸、发酵，性能都没有明显衰减；
3、扩大和生产用培养基一样，简单、便宜、容易获得，用量很少，没有几乎不产生废料。
4、发酵过程采用发酵槽、深层、静止发酵，不需要搅拌，由于工艺过程的特点，过程设备投资小；其产品在常温下就能保存2个月以上，而同类产品却要求低温条件保质期仅为一周。
具体实施方式
如图1、图2所示，本发明的两株乳酸菌为基础的益生菌软饮料，使用的益生菌是植物乳杆菌、发酵乳杆菌的两个菌株Lactobaccillusplantrums SMB-2 CGMCC No 2566、Lactobacillus fermenti CMS-H002，其保藏号为CCTCC No.M206110，含量cfu≥3×107个/ml，其饮料的成分配方按重量百分比算包括水98.5％～99％，乳酸0.8％～1.5％，乙酸钠0.3‰～0.6‰，柠檬酸铵0.6‰～0.9‰，磷酸氢二钠0.6‰～0.9‰，硫酸镁0.5‰～0.6‰和微量的蔗糖和大豆蛋白。种子培养基为普通的MRS培养基，扩大发酵和生产培养基为：大豆豆浆2％、0.5％蔗糖、Runfor乳酸菌培养基增效剂3‰(含有乙酸钠、柠檬酸鞍、硫酸镁等)。其中，Runfor乳酸菌培养基增效剂配方为：乙酸钠20％、柠檬酸铵30％，磷酸氢二钠30％，硫酸镁20％，以上成份均以无结晶水的纯品为基础。
本发明的工艺为发酵槽三级静态深层发酵为基础；40±2℃，48小时。发酵工艺以三步静态发酵为基础，依据不同的生产条件，提出了四个实施工艺方案：
实施例1
三步液体发酵：
1培养基材料准备：
大豆豆浆准备：以100克大豆，洗净，浸泡8小时，取出放入豆浆机中，制作去渣豆浆1000ml，放在干净的容器中，加热至沸腾，冷却备用。
Runfor乳酸菌培养基增效剂制备：
准备食品级、80目粉末状的无水乙酸钠、无水柠檬酸铵、无水磷酸氢二钠、无水硫酸镁。
称取乙酸钠200克、柠檬酸铵300克，磷酸氢二钠300克，硫酸镁200克混合即成为复合矿物盐，装瓶备用。
液体培养的用水：以自来水经直饮机超滤过滤，将水中的杂质、细菌过滤，经检验，过滤后的水已检测不到细菌微生物。
2菌种活化培养：将两菌种分别接种到两个斜面MRS培养基，在培养箱40±2℃，培养48小时，得到扩大培养所需菌种。
3扩大培养：在一升的三角瓶中，加入冷却的豆浆，占液体培养基2％(v/v)、0.5％蔗糖(w/v)、Runfor乳酸菌培养基增效剂3‰(w/v)，制作1000ml培养基。在无菌的条件下等量接种两个菌种，摇匀后放置于培养箱中40±2℃温度条件下，静止发酵48小时。
所得培养液经检测，两个菌都发酵生长良好，所得总菌浓度cfu为6×108个/ml，PH为3-3.5之间；刚开始发酵培养液为混浊均匀的黄色，PH为6左右，3小时后，逐渐产生沉淀，上面变清；18个小时，PH降到4-5之间，表明目标菌正在繁殖、代谢产酸。
4生产发酵：按扩大培养同样的方法，在200升的培养槽中，配制生产培养液，将扩大培养母液，按体积以2％的接种量，接种，搅拌均匀，控制发酵温度40℃，48小时，PH降到3-3.5之间，即可终止发酵。
5沉淀、过滤：上一步所得的发酵液，在静止沉淀的状态下，吸取上清液，弃置沉淀渣子，上清液用550目的过滤器，过滤，得到透明、澄清的最后乳酸菌饮料。味酸、略有发酵味，PH2.5-4.5之间，装瓶保存。
6检验：在产品中取样，稀释处理，经革兰氏染色，镜检可以看到大量的两个目标菌，一个是植物乳杆菌为短杆菌，发酵乳杆菌为长线状杆菌。
取样培养测得cfu＞5×108个/ml，即可认为合格，如未达到要求则要补充培养基，以碱液中和酸，到5.5以上，继续培养到合格含量。该产品在室温条件下保存2个月，不变质，没有明显异味，保存两个月时测得活菌数cfu＞5×107个/ml。
实施例2
生产发酵以浓缩液接种剂，作为完全培养物，生产活菌饮料：
第1步、第2步与方案1相同；
第3步扩大培养：在一升的三角瓶中加入2％(w/v)蔗糖、Runfor乳酸菌培养基增效剂6‰(w/v)(含有乙酸钠、柠檬酸鞍、硫酸镁等)，以冷却的豆浆加满至1000ml培养基。在无菌的条件下等量接种两个菌种，摇匀后放置于培养箱中40±2℃温度条件下、静止发酵48小时；
所得培养液经检测，两个菌都发酵生长良好，所得总菌浓度cfu＞108个/ml，PH为3-3.5之间；刚开始发酵培养液为混浊均匀的黄色，PH为6左右，略有沉淀产生；18个小时，PH降到4-5之间，表明目标菌正在繁殖、代谢产酸。摇匀，这样就得到生产发酵以浓缩液接种剂。
实施例3
第三步为固体发酵的四步发酵法：
1培养基材料准备：
大豆豆浆准备：以100克大豆，洗净，浸泡8小时，取出放入豆浆机中，制作去渣豆浆1000ml，放在干净的容器中，加热至沸腾，冷却备用；
Runfor乳酸菌培养基增效剂制备：
准备食品级、80目粉末状的无水乙酸钠、无水柠檬酸铵、无水磷酸氢二钠、无水硫酸镁。称取乙酸钠200克、柠檬酸铵300克，磷酸氢二钠300克，硫酸镁200克混合即成为复合矿物盐，装瓶备用。
液体培养的用水：以自来水经直饮机超滤过滤，将水中的杂质、细菌过滤，经检验，过滤后的水已检测不到细菌微生物。
2菌种活化培养：将两菌种分别接种到两个斜面MRS培养基，在培养箱40±2℃，培养48小时，得到扩大培养所需菌种；
3扩大培养：一升的三角瓶，按照：加入冷却的豆浆，占液体培养基2％(v/v)、0.5％(w/v)蔗糖、Runfor乳酸菌培养基增效剂3‰(w/v)，制作1000ml液体培养基。在无菌的条件下等量接种两个菌种，摇匀后放置于培养箱中40±2℃温度条件下、静止发酵48小时。
所得培养液经检测，两个菌都发酵生长良好，所得总菌浓度cfu为6×108个/ml，PH为3-3.5之间；刚开始发酵培养液为混浊均匀的黄色，PH为6左右，3小时后，逐渐产生沉淀，上面变清；18个小时，PH降到4-5之间，表明目标菌正在繁殖、代谢产酸。
4以豆浆结晶粉加入3％(w/w)蔗糖，0.5‰(w/w)的Runfor培养基增效剂，搅拌菌匀，在115℃灭菌箱中，灭菌70分钟，取出冷却，倒入培养基重量的20％的母液和干培养基重量的20％的水，搅拌均匀，倒入消毒灭菌好的发酵桶中，密闭保温发酵，40±2℃温度条件下，48小时，然后取出在45℃的真空干燥机中干燥到水分10％以下，粉碎、包装得到生产发酵用接种剂干粉，颜色为黄色、有酸味的粉末；经检验，复合菌含量cfu大于3×109个/克。
5生产发酵：按本方案中扩大培养同样的方法，在200升的培养槽中，配制生产培养液，将上步所得的接种剂干粉，按重量比以1％的接种量，接种，搅拌均匀，控制发酵温度40℃，48小时，PH降到3-3.5之间，即可终止发酵。
6沉淀、过滤：上一步所得的发酵液，在静止沉淀的状态下，吸取上清液，弃置沉淀渣子，上清液用550目的过滤器，过滤，得到透明、澄清的最后乳酸菌饮料。味酸、略有发酵味，PH2.5-4.5之间。装瓶保存。
7检验：在产品中取样，稀释处理，经革兰氏染色，镜检可以看到大量的两个目标菌，一个是植物乳杆菌为短杆菌，发酵乳杆菌为长线状杆菌。
取样培养测得cfu＞5×108个/ml，即可认为合格，如未达到要求则要补充培养基，以碱液中和酸，到5.5以上，继续培养到合格含量。该产品在室温条件下保存2个月，不变质，没有明显异味，保存两个月时测得活菌数cfu＞5×107个/ml。
此实例，由于中间产物是接种剂干粉，耐保存，便于运输、保存，有利于扩大培养和生产发酵不在一个地方或不在一个机构的生产方式。
实施例4
生产发酵以固体培养接种剂作为完全培养物，发酵生产活菌饮料：
此方案的第一、第二、第三、第四与方案3相同；
5生产发酵：在200升的培养槽中，以洁净水和固体培养完全接种剂配制生产培养液，将上步所得的接种剂干粉，按重量比以3％的接种量，接种，搅拌均匀，控制发酵温度40℃，48小时，PH降到3-3.5之间，即可终止发酵。
6沉淀、过滤：上一步所得的发酵液，在静止沉淀的状态下，吸取上清液，弃置沉淀渣子，上清液用550目的过滤器，过滤，得到透明、澄清的最后乳酸菌饮料。味酸、略有发酵味，PH3-4之间，装瓶保存。
7检验：在产品中取样，稀释处理，经革兰氏染色，镜检可以看到大量的两个目标菌，一个是植物乳杆菌为短杆菌，发酵乳杆菌为长线状杆菌。取样培养测得cfu＞5×108个/ml，即可作为合格，如未达到要求则要补充培养基，以碱液总和酸，到5.5以上，继续培养到合格含量。该产品在室温条件下保存2个月，不变质，没有明显异味，保存两个月时测得活菌数cfu＞5×107个/ml。
此实例，由于中间产物是接种剂干粉，耐保存，便于运输、保存，有利于扩大培养和生产发酵不在一个地方或不在一个机构的生产方式，这种固体高浓度完全营养接种剂的使用，大大简化了生产发酵企业的工艺，以及减少了设备的投入。
以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非对其限制；尽管参照较佳实施例对本发明进行了详细的说明，所属领域的普通技术人员应当理解。依然可以对发明的具体实施方式进行修改或者对部分技术特征进行等同替换；而不脱离本发明技术方案的精神，其均应涵盖在本发明请求保护的技术方案范围当中。
Claims (8)
1、一种两株乳酸菌为基础的益生菌软饮料，其特征在于：它含有植物乳杆菌、发酵乳杆菌的两个活菌株，其饮料的成分配方按重量百分比算包括水98.5％～99％，乳酸0.8％～1.5％，乙酸钠0.3‰～0.6‰，柠檬酸铵0.6‰～0.9‰，磷酸氢二钠0.6‰～0.9‰，硫酸镁0.5‰～0.6‰和余量的蔗糖和大豆蛋白。
2、根据权利要求1所述的两株乳酸菌为基础的益生菌软饮料，其特征在于：所述植物乳杆菌、发酵乳杆菌的含量为cfu≥9×107个/ml。
3、一种权利要求1或2所述的两株乳酸菌为基础的益生菌软饮料的制作工艺，其特征在于，它包括如下步骤：
a、准备培养基材料以及制备Runfor乳酸菌培养基增效剂，以每100克大豆，洗净，浸泡7～9小时，取出放入豆浆机中，制作成去渣豆浆1000ml，放在干净的容器中，加热至沸腾，冷却备用；
b、菌种活化培养：将两菌种分别接种到两个斜面MRS培养基，在培养箱40±2℃，培养48小时，得到扩大培养所需菌种；
c、扩大培养、生产发酵，以发酵槽内三级静态深层液体发酵为基础，每级发酵时间40～50小时，发酵温度40±2℃，最后一级发酵所得菌液经沉淀、过滤、检验后包装成产品。
4、根据权利要求3所述的两株乳酸菌为基础的益生菌软饮料的制作工艺，其特征在于：在所述工艺步骤c的扩大培养过程中，在一升的三角瓶中，加入冷却的豆浆，占液体培养基1～3％(v/v)、0.4～0.6％蔗糖(w/v)、Runfor乳酸菌培养基增效剂2～4‰(w/v)，制作1000ml培养基，在无菌的条件下等量接种两个菌种，摇匀后放置于培养箱中40±2℃温度条件下，静止发酵45～50小时；生产发酵过程中，按所述扩大培养同样的方法，在200升的培养槽中，配制生产培养液，将扩大培养母液，按体积以2％的接种量，接种，搅拌均匀，控制发酵温度40±2℃，静止发酵45～50小时，PH降到3-3.5之间，即可终止发酵。
5、根据权利要求3所述的两株乳酸菌为基础的益生菌软饮料的制作工艺，其特征在于：在所述工艺步骤c的扩大培养过程中，在一升的三角瓶中加入蔗糖1～3(w/v)、Runfor乳酸菌培养基增效剂5～7‰(w/v)，以冷却的豆浆加满至1000ml培养基，在无菌的条件下等量接种两个菌种，摇匀后放置于培养箱中40±2℃温度条件下，静止发酵48小时；生产发酵过程中，在200升的培养槽中，以纯净水和所述扩大培养过程得到的完全接种液配制生产培养液，将扩大培养母液，按体积以4％的接种量，接种，搅拌均匀，控制发酵温度40±2℃，静止发酵45～50小时，PH降到3-3.5之间，即终止发酵。
6、根据权利要求3所述的两株乳酸菌为基础的益生菌软饮料的制作工艺，其特征在于：在所述工艺步骤c的扩大培养后，以豆浆结晶粉加入蔗糖2～4％(w/w)，Runfor培养基增效剂0.5‰(w/w)，搅拌菌匀，在110～120℃灭菌箱中，灭菌65～80分钟，取出冷却，倒入培养基重量的18～22％的母液和干培养基重量的18～22％的水，搅拌均匀，倒入消毒灭菌好的发酵桶中，密闭保温发酵，40±2℃温度条件下，静止发酵45～50小时，然后取出在40～50℃的真空干燥机中干燥到水分10％以下，粉碎、包装得到生产发酵用接种剂干粉；在发酵过程，以所述扩大培养同样的方法，在200升的培养槽中，配制生产培养液，将接种剂干粉，按重量比以1％的接种量，接种，搅拌均匀，控制发酵温度40±2℃，静止发酵45～50小时，PH降到3-3.5之间，即终止发酵。
7、根据权利要求3所述的两株乳酸菌为基础的益生菌软饮料的制作工艺，其特征在于：在所述工艺步骤c的扩大培养后，以豆浆结晶粉加入蔗糖2～4％(w/w)，Runfor培养基增效剂0.5‰(w/w)，搅拌菌匀，在110～120℃灭菌箱中，灭菌65～80分钟，取出冷却，倒入培养基重量的18～22％的母液和干培养基重量的18～22％的水，搅拌均匀，倒入消毒灭菌好的发酵桶中，密闭保温发酵，40±2℃温度条件下，静止发酵45～50小时，然后取出在40～50℃的真空干燥机中干燥到水分10％以下，粉碎、包装得到生产发酵用接种剂干粉；生产发酵以固体培养接种剂作为完全培养物，发酵生产活菌饮料，其方法为在200升的培养槽中，以纯净水和固体培养完全接种剂配制生产培养液，将上步所得的接种剂干粉，按重量比以2～4％的接种量，接种，搅拌均匀，控制发酵温度40±2℃，静止发酵45～50小时，PH降到3-3.5之间，即终止发酵。
8、根据权利要求3所述的两株乳酸菌为基础的益生菌软饮料的制作工艺，其特征在于：在所述工艺步骤c的沉淀、过滤、检验过程中，将经过发酵的发酵液，在静止沉淀的状态下，吸取上清液，弃置沉淀渣子，上清液用550目的过滤器，过滤，检验，得到乳酸菌饮料，装瓶保存。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN200910041863A CN101637291A (zh) | 2009-08-14 | 2009-08-14 | 两株乳酸菌为基础的益生菌软饮料及其制作工艺 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN200910041863A CN101637291A (zh) | 2009-08-14 | 2009-08-14 | 两株乳酸菌为基础的益生菌软饮料及其制作工艺 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN101637291A true CN101637291A (zh) | 2010-02-03 |
Family
ID=41612614
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN200910041863A Pending CN101637291A (zh) | 2009-08-14 | 2009-08-14 | 两株乳酸菌为基础的益生菌软饮料及其制作工艺 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN101637291A (zh) |
Cited By (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102971413A (zh) * | 2010-03-19 | 2013-03-13 | 株式会社益力多本社 | 属于植物乳杆菌的新型乳酸菌及其应用 |
| CN103857297A (zh) * | 2011-01-21 | 2014-06-11 | 科.汉森有限公司 | 水果饮料中的益生菌 |
| CN105520019A (zh) * | 2015-11-25 | 2016-04-27 | 广西巴马活益生生物科技有限公司 | 一种多菌种微生物复合功能型饮料制剂及其制备方法 |
| CN107043715A (zh) * | 2016-12-26 | 2017-08-15 | 山东奥博森医药科技有限公司 | 一种活性益生菌冻干粉及其制备方法 |
| CN112535700A (zh) * | 2020-12-09 | 2021-03-23 | 杭州娃哈哈科技有限公司 | 一种基于乳杆菌的减肥粉剂及其制备方法 |
| CN113367286A (zh) * | 2021-05-26 | 2021-09-10 | 西安国际医学生物技术有限公司 | 植物基原料复合发酵益生菌源液 |
-
2009
- 2009-08-14 CN CN200910041863A patent/CN101637291A/zh active Pending
Cited By (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102971413A (zh) * | 2010-03-19 | 2013-03-13 | 株式会社益力多本社 | 属于植物乳杆菌的新型乳酸菌及其应用 |
| US9788557B2 (en) | 2010-03-19 | 2017-10-17 | Kabushiki Kaisha Yakult Honsha | Lactobacillus classified as Lactobacillus plantarum, and use thereof |
| CN103857297A (zh) * | 2011-01-21 | 2014-06-11 | 科.汉森有限公司 | 水果饮料中的益生菌 |
| US9693578B2 (en) | 2011-01-21 | 2017-07-04 | Chr. Hansen A/S | Probiotics in fruit beverages |
| CN105520019A (zh) * | 2015-11-25 | 2016-04-27 | 广西巴马活益生生物科技有限公司 | 一种多菌种微生物复合功能型饮料制剂及其制备方法 |
| CN107043715A (zh) * | 2016-12-26 | 2017-08-15 | 山东奥博森医药科技有限公司 | 一种活性益生菌冻干粉及其制备方法 |
| CN112535700A (zh) * | 2020-12-09 | 2021-03-23 | 杭州娃哈哈科技有限公司 | 一种基于乳杆菌的减肥粉剂及其制备方法 |
| CN112535700B (zh) * | 2020-12-09 | 2022-07-22 | 杭州娃哈哈科技有限公司 | 一种基于乳杆菌的减肥粉剂及其制备方法 |
| CN113367286A (zh) * | 2021-05-26 | 2021-09-10 | 西安国际医学生物技术有限公司 | 植物基原料复合发酵益生菌源液 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN100548130C (zh) | 富含硒氨基酸的益生菌酸奶的生产方法及其产品 | |
| CN102191202B (zh) | 一种乳酸菌的高密度培养方法 | |
| CN100448978C (zh) | 采用纯菌组合工业化强制通气快速生产红茶菌的工艺方法 | |
| CN108504621B (zh) | 用于蝙蝠蛾拟青霉Cs-4的培养基及其制备方法 | |
| CN101491362A (zh) | 利用纯菌混合发酵生产红茶菌饮料 | |
| CN107897368A (zh) | 一种益生菌发酵乳及其制备方法 | |
| CN103250568A (zh) | 一种制备富硒猴头菌的方法 | |
| CN102599302A (zh) | 一种红茶菌饮料的生产方法 | |
| CN101637291A (zh) | 两株乳酸菌为基础的益生菌软饮料及其制作工艺 | |
| CN104928208A (zh) | 一种植物乳杆菌Lp90及其筛选方法和应用 | |
| CN102813039A (zh) | 一种苦荞麦红曲茶的制备方法 | |
| CN104431090A (zh) | 一种红茶菌的生产方法及其产品 | |
| CN109593683A (zh) | 副干酪乳杆菌及其应用 | |
| CN101869139B (zh) | 一种乳酸菌细胞高通透性微胶囊的制备方法及应用 | |
| CN107699528A (zh) | 副干酪乳杆菌及其菌种驯化方法以及培养方法 | |
| CN101250493B (zh) | 固、液二步发酵工艺生产饲用嗜酸乳杆菌的方法 | |
| CN101524146A (zh) | 一种提高益生菌活菌数的方法 | |
| CN105410179B (zh) | 一种白首乌乳酸菌发酵活性乳饮料的制备方法及其饮料 | |
| CN103931983A (zh) | 一种蜂蜜酵素产品及其制备方法 | |
| CN109456919A (zh) | 一种副干酪乳杆菌及其应用 | |
| CN107466860A (zh) | 一种红豆杉低聚果糖乳酸菌活性饮料及其制备方法 | |
| CN110367429A (zh) | 一种陈皮酵素饮品的制备方法 | |
| CN103382467B (zh) | 嗜酸乳杆菌与地衣芽孢杆菌融合子的制备方法 | |
| CN101843309B (zh) | 制取乳酸蜜的加工方法 | |
| CN104643094B (zh) | 一种富含益生菌的膳食补充剂及其制备方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C02 | Deemed withdrawal of patent application after publication (patent law 2001) | ||
| WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |
Application publication date: 20100203 |