CN101485722B - 一种骨碎补和丹参药物组合物及其应用 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种治疗骨质疏松症的药物组合物，具体指骨碎补和丹参的药物组合物及其医药用途。该药物组合物中骨碎补与丹参的重量比值为1∶0.2～10。该组合物的提取物中主要活性成分为骨碎补黄酮类化合物，丹参二萜醌类及丹参酚酸类化合物，且这三类活性成分即骨碎补总黄酮、丹参总酮及丹参总酚酸的含量总和不得低于提取物总重量的40％。该组合物的提取物能有效防止维甲酸所致大鼠骨密度降低，同时具有显著的活血化瘀作用，可用于制成防治骨质疏松症的药物，本发明中药组合物具有组方精简，有效成分含量高，质量可控，安全有效的优点。

Description

一种骨碎补和丹参药物组合物及其应用

技术领域：

本发明涉及一种治疗骨质疏松症的药物组合物，具体指骨碎补和丹参的药物组合物及其医药用途。

背景技术：

骨质疏松症是一种以骨量减少、骨组织显微结构异常和骨折危险性增加为特征的一类疾病，常见于老年人特别是绝经后妇女，其发病率高，危害大。随着全球人口的老龄化，骨质疏松在全世界常见病、多发病中的地位逐渐上升至第7位，患病人数超过2亿，我国已达9000万。全球用于骨质疏松及其相关并发症治疗的费用超过250亿美元。目前，对该病的治疗西药主要有雌激素、钙剂、降钙素、双磷酸盐及氟制剂等，这些药物常常价格昂贵，长期使用疗效不满意，副作用大，且不能很好的预防骨折。因此，人们已逐渐把目光转向中医药在治疗骨质疏松方面的发掘与研究上。

骨质疏松症属于祖国医学“骨痹”“骨痿”等范畴，系因年老体弱，脏腑虚衰，或精血不足，耗损正气，气血两虚，不能濡养筋骨而酿成本病。故肾虚与精血不足为本病之特点。本病的中药治疗重在整体调节，主要以补肾益精药为主，并随症辅以活血化瘀、益气养血、强筋壮骨等药，作用持久、副反应小，可长期使用。传统中成药如骨松宝片、骨松康合剂、六味壮骨颗粒、肾骨散、仙灵骨葆等，依据传统中医整体调节的理念，具有一定的疗效优势，但这些药剂中有些剂型不便携带或不便服用，有些则药味多服用剂量大，有些有效成分含量少，质量控制标准低，故有时亦难以取得满意的临床疗效。现代中药如骨碎补总黄酮等来自单一药味的有效组分，其成分明确、药效确切、质量可控，但作用单一，未能体现中医整体调节的理念，临床疗效优势不明显。因此在传统中医药理论的基础上，运用现代科学技术，开发一种有效成分明确，疗效确切，质量可控的体现中药作用整体观的骨质疏松症用药具有重要意义。

发明内容：

本发明的目的在于克服上述西药现有技术及现有中成药的不足，在传统中医药理论的基础上，运用现代科学技术，开发一种组方精简，有效成分含量高，质量可控，安全有效的中药组合物，具体指骨碎补和丹参的药物组合物。

本发明的另一目的在于该药物组合物可用于制成治疗骨质疏松症的药中的应用。

本发明的目的可以通过以下技术方案来达到：

本发明的药物组合物由骨碎补和丹参组成。骨碎补与丹参的重量比值为1∶0.2～10，其最佳重量比值为1∶0.4～5。同时该药物组合物中活性成分为骨碎补黄酮类化合物，丹参二萜醌类及丹参酚酸类化合物，且这三类活性成分即骨碎补总黄酮、丹参总酮及丹参总酚酸的含量总和不低于提取物总重量的40％。

本发明的组方依据是在传统中医治疗骨质疏松症的理论，将补肾壮骨药味骨碎补和活血药味丹参相伍，结合现代研究结果，进一步提取骨碎补和丹参的活性成分，并进行有机组合，从而可开发成一种有效成分含量高，质量可控，安全有效，且能长期服用的治疗骨质疏松症中药新药。

骨碎补为水龙骨科植物槲蕨Drynaria fortunei(Kunze)J.Sm.的干燥根茎。具补肾强骨，续伤止痛之功效。临床用于肾虚腰痛，耳鸣耳聋，牙齿松动，跌扑闪挫，筋骨折伤等症。补肾强骨是骨碎补的传统功效。现代研究表明，骨碎补总黄酮是主要活性成分，骨碎补总黄酮可提高成骨细胞的活性；能明显提高去卵巢大鼠的骨密度，对血清TNFα、IL-6水平有抑制作用，对IL-4分泌有促进作用；给去卵巢大鼠灌服骨碎补总黄酮6个月后，胫骨骨小梁体积百分比(TBV％)明显增高，胫骨骨小梁吸收表面百分比(TRS％)，胫骨骨小梁形成表面百分比(TFS％)，活性生成表面百分比(AFS％)，骨小梁矿化率(MAR)和骨小梁骨生成率(BFR)，胫骨类骨质平均宽度(OSW)和骨皮质矿化率(mAR)均明显降低，表明骨碎补总黄酮对卵巢切除所致的骨质疏松症具有明显的防治作用。

丹参为唇形科植物丹参Salvia miltiorrhiza Bge.的干燥根。具祛瘀止痛，活血通经，清心除烦之功效。古有“一味丹参，功同四物”之说，丹参可用于月经不调、经闭痛经、瘕积聚、胸腹刺痛、热痹疼痛、疮疡肿痛、心烦不眠、肝脾肿大、心绞痛等。现代大量研究表明丹参对心脑血管系统、消化系统、呼吸系统、中枢神经系统、免疫系统等均有保护作用，此外，丹参尚具促进骨折愈合，抑制骨丢失的作用。丹参二萜醌类及丹参酚酸类成分是丹参中主要活性成分，具有止痛抗炎、抗氧化、改善微循环、抗血小板聚集、血栓形成、抑菌和抑制骨丢失等药理作用。

综上，骨碎补长于补肾壮骨；丹参长于活血祛瘀止痛，又兼具促骨愈合，抑骨丢失之功效。将骨碎补与丹参进行组方，丹参既能协同骨碎补发挥强筋骨之功效，又能补充其活血化瘀之不足，通过活血作用，进一步改善骨的营养供给，促进骨生长。这与传统中医用药理念相一致。现代研究表明，骨碎补、丹参长期使用安全有效，二者有效成分的组合，优势互补，有望成为骨质疏松症长期治疗所需的理想药物。

本发明药物具有补肾壮骨，活血祛瘀之功效，可用于制成治疗骨质疏松症的药物。

具体实施方式：

在本发明中所使用的术语，除非有另外说明，一般具有本领域普通技术人员通常理解的含义。

本发明中的骨碎补和丹参提取物可用常规方法制备，例如分剪法。

下面结合具体的制备实施例，并参照数据进一步详细地描述本发明。应理解，这些实施例只是为了举例说明本发明，而非以任何方式限制本发明的范围。

在以下的实施例中，未详细描述的各种过程和方法是本领域中公知的常规方法。所用试剂的来源、商品名以及有必要列出其组成成分者，均在首次出现时标明，其后所用相同试剂如无特殊说明，均以首次标明的内容相同。

实施例1：

分煎法制备骨碎补和丹参的提取物：

骨碎补提取物的制备：取骨碎补10kg，加入25倍药材重量的70％乙醇，回流提取3次，分别提取2、2、1小时，滤过，合并提取液，回收乙醇至无醇，并浓缩成1g生药/ml的水溶液，石油醚萃取，水层经乙酸乙酯萃取3次，减压回收乙酸乙酯至近干，干燥，粉碎，过55目筛，即得棕黄色骨碎补提取物成品，重量为192.5g，骨碎补总黄酮含量为46.5％。

丹参提取物的制备：取丹参药材粉碎成粗粉10kg，加入6倍药材重量的95％乙醇，回流提取2次，每次提取1.5小时，滤过，合并提取液，减压乙醇至尽干后干燥；醇提后药渣，加入10倍药材重量的水煎煮2次，每次煎煮1.5小时，滤过，合并提取液，水溶液浓缩至1g生药/ml的浓缩液，用1N HCl调pH2，经乙酸乙酯萃取3次，合并乙酸乙酯层，回收乙酸乙酯，干燥。与乙醇提取物混合，粉碎，过55目筛，即得棕红色至棕褐色丹参提取物212.5g，含丹参总酮及丹参总酚酸之和为80.7％。

药效学研究如下：

实验1.对维甲酸(Retinoic Acid，RA)致大鼠骨质疏松的防治作用

雄性3月龄大鼠85只，随机分为空白对照组(10只)，其它阴性对照组、阳性对照组、骨碎补提取物、丹参提取物及二药提取物的组合物组各15只。各药均用0.8％CMC-Na混悬液配制成相应浓度，给予大鼠灌胃。除空白组外，其余各组动物每日给予维甲酸混悬液80mg/kg造模型，同时空白对照组灌胃相应体积0.8％CMC-Na混悬液，阳性对照组给予龙牡壮骨冲剂4g/kg，给药组给予骨碎补提取物(骨碎补总黄酮)250mg/kg、丹参提取物(丹参总酚酸+丹参总酮)250mg/kg及二药提取物的组合物(骨碎补总黄酮+丹参总酚酸+丹参总酮)250mg/kg(含骨碎补与丹参的提取物各125mg/kg)。14天后停止给予维甲酸，阴性对照组改为每日给予相应体积0.8％CMC-Na混悬液，其余操作不变，至28天末次给药后各组动物禁食，16小时后(29天)处死大鼠，取股骨，供骨密度(BMD)测定用。用药组与空白对照组的骨密度值统计比较，采用组间t检验。结果见表1。

表1.药物对骨质疏松大鼠股骨骨密度(BMD)的影响(x±s，n＝10)

^*P＜0.05，^**P＜0.01，与阴性对照组比较

维甲酸(RA)具有肝损伤作用，长期使用可引起骨钙丢失，表现为骨密度降低。骨密度是评价骨质疏松和药物疗效的重要指标，由表1可见，丹参提取物对维甲酸模型大鼠股骨的骨密度增加较弱，但骨碎补提取物及二药提取组合物则均能显著增加骨质疏松大鼠的骨密度，且复方提取组合物比单味骨碎补提取物增加更为明显。

实验2.对小鼠皮下血肿吸收的促进作用

本实验采用给小鼠颈部皮下注射定量自身血液，造成皮下血肿模型，通过称量血肿块的重量来判断血肿的消除吸收情况，从而反映药物的活血化瘀作用。取昆明种小鼠50只，雌雄各半，体重20±2g。按性别体重随机分5组，每组10只，分别为空白对照组(0.8％CMC-Na混悬液)、阳性药对照组(复方丹参滴丸3粒/kg)、给药组[骨碎补提取物300mg/kg、丹参提取物300mg/kg及二药提取物的组合物组300mg/kg(含骨碎补与丹参提取物各150mg/kg)]。实验前先造成自身血肿模型，即分别自眼眶取血，滴入事先加有0.1ml CaCl₂溶液(每ml含青霉素10万单位的0.1M CaCl₂溶液)的小试管中至0.5ml刻度，振摇均匀，迅速用注射器抽取后自皮下给予小鼠注射，形成皮下血肿。造成模型后第二天开始给药，各药均用0.8％CMC-Na混悬液配制成相应浓度，给予小鼠灌胃。给药7天，于末次给药1小时后将小鼠颈椎脱位处死，将小鼠颈背处皮下的残留血肿块分离出来，用电子称称重，根据残留血肿块重量来反映药物活血化瘀作用，用药组与空白对照组统计比较，采用组间t检验。结果见表2。

表2.对小鼠皮下血肿吸收情况的影响(x±s，n＝10)

^*P＜0.05，^**P＜0.01，与空白对照组比较

骨质疏松症的骨与关节疼痛症状与血瘀有着密切的关系。由表2可见，骨碎补提取物的祛瘀作用较弱，丹参提取物及二药提取组合物则均可显著降低小鼠实验性皮下血肿重量，特别是二药提取组合物的效果与复方丹参滴丸相当，优于丹参单味药独用。

实验1和2结果表明，骨碎补和丹参提取物的组合物能有效防止维甲酸所致大鼠股骨骨密度降低，同时具有显著的活血化瘀作用，骨碎补提取物与丹参提取物的组合具有互补优势，其壮骨作用及活血祛瘀作用均优于单味药提取物，说明本品具有显著防治骨质疏松作用及改善骨质疏松症的血瘀症状，可用于制成防治骨质疏松症的药物。

实施例2：

取骨碎补4000g，丹参4000g，按实施例1的方法分别制备骨碎补和丹参的提取物，加淀粉60g，混合均匀，制粒后填充胶囊或制成片剂。

实施例3：

取骨碎补4000g，丹参800g，按实施例1的方法分别制备骨碎补和丹参的提取物，加淀粉77.5g，混合均匀，制粒后填充胶囊或制成片剂。

实施例4：

取骨碎补4000g，丹参1200g，按实施例1的方法分别制备骨碎补和丹参的提取物，加淀粉74g，混合均匀，制粒后填充胶囊或制成片剂。

实施例5：

取骨碎补4000g，丹参1600g，按实施例1的方法分别制备骨碎补和丹参的提取物，加淀粉71.5g，混合均匀，制粒后填充胶囊或制成片剂。

实施例6：

取骨碎补4000g，丹参2000g，按实施例1的方法分别制备骨碎补和丹参的提取物，加淀粉70g，混合均匀，制粒后填充胶囊或制成片剂。

实施例7：

取骨碎补4000g，丹参3000g，按实施例1的方法分别制备骨碎补和丹参的提取物，加淀粉65g，混合均匀，制粒后填充胶囊或制成片剂。

实施例8：

取骨碎补400g，丹参4000g，按实施例1的方法分别制备骨碎补和丹参的提取物，加淀粉78g，混合均匀，制粒后填充胶囊或制成片剂。

实施例9：

取骨碎补800g，丹参4000g，按实施例1的方法分别制备骨碎补和丹参的提取物，加淀粉76g，混合均匀，制粒后填充胶囊或制成片剂。

实施例10：

取骨碎补1200g，丹参4000g，按实施例1的方法分别制备骨碎补和丹参的提取物，加淀粉74g，混合均匀，制粒后填充胶囊或制成片剂。

实施例11：

取骨碎补1600g，丹参4000g，按实施例1的方法分别制备骨碎补和丹参的提取物，加淀粉72g，混合均匀，制粒后填充胶囊或制成片剂。

实施例12：

取骨碎补2000g，丹参4000g，按实施例1的方法分别制备骨碎补和丹参的提取物，加淀粉70g，混合均匀，制粒后填充胶囊或制成片剂。

实施例13：

取骨碎补3000g，丹参4000g，按实施例1的方法分别制备骨碎补和丹参的提取物，加淀粉65g，混合均匀，制粒后填充胶囊或制成片剂。

Claims (2)

1.一种骨碎补和丹参的药物组合物，其特征是，该药物组合物骨碎补和丹参的的活性成分为骨碎补提取物中的骨碎补黄酮类化合物，以及丹参提取物中的丹参二萜醌类和丹参酚酸类化合物，上述三类活性成分含量总和大于或等于提取物总重量的40%；其中

所说的骨碎补提取物通过以下制备：取骨碎补原料10kg，加入25倍药材重量的70%乙醇，回流提取3次，分别提取2、2、1小时，滤过，合并提取液，回收乙醇至无醇，并浓缩成1g生药/ml的水溶液，石油醚萃取，水层经乙酸乙酯萃取3次，减压回收乙酸乙酯至近干，干燥，粉碎，过55目筛，即得棕黄色骨碎补提取物成品，重量为192.5g，骨碎补总黄酮含量为46.5%；

所说的丹参提取物的制备如下：取丹参药材粉碎成粗粉10kg，加入6倍药材重量的95%乙醇，回流提取2次，每次提取1.5小时，滤过，合并提取液，减压乙醇至尽干后干燥；醇提后药渣，加入10倍药材重量的水煎煮2次，每次煎煮1.5小时，滤过，合并提取液，水溶液浓缩至1g生药/ml的浓缩液，用1N HCl调pH2，经乙酸乙酯萃取3次，合并乙酸乙酯层，回收乙酸乙酯，干燥；与乙醇提取物混合，粉碎，过55目筛，即得棕红色至棕褐色丹参提取物212.5g，含丹参总酮及丹参总酚酸之和为80.7%。

2.权利要求1所说的的骨碎补和丹参的药物组合物在制备治疗骨质疏松症的药中的应用。